PL223442B1

PL223442B1 - 4'-O-β-D-glukopiranozylo-1", 2"-dihydroksantohumol K oraz sposób jego wytwarzania

Info

Publication number: PL223442B1
Application number: PL405456A
Authority: PL
Inventors: Jarosław Popłoński; Anna Madej; Tomasz Tronina; Ewa Huszcza
Original assignee: Univ Przyrodniczy We Wrocławiu
Priority date: 2013-09-27
Filing date: 2013-09-27
Publication date: 2016-10-31
Also published as: PL405456A1

Description

Opis wynalazku

Przedmiotem wynalazku jest 4'-O^-D-glukopiranozylo-1”,2”-dihydroksantohumol K, (Nazwa wg IUPAC to (E)-1-(5-O-3-D-glukopiranozylo-7-metoksy-2,2-dimetylochroman-8-yl)-3-(4-hydroksyfenylo)-prop-2-en-1-on), o wzorze 2, przedstawionym na rysunku oraz sposób jego wytwarzania.

Związek ten jest biologicznie czynny i może mieć zastosowanie w przemyśle spożywczym i farmaceutycznym.

Dotychczas, w literaturze nie jest znany 4’-O-3-D-glukopiranozylo-1”,2”-dihydroksantohumol K ani sposób jego wytwarzania.

Istotą wynalazku jest 4’-O-3-D-glukopiranozylo-1”,2”-dihydroksantohumol K.

Natomiast istotą sposobu wytwarzania tego związku jest to, że otrzymuje się go na drodze reakcji mikrobiologicznej transformacji substratu, którym jest 1”,2”-dihydroksantohumol K. Grzyby z gatunku Absidia coerulea, namnaża się w płynnym podłożu mikrobiologicznym, charakterystycznym dla grzybów, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 12-40°C. Następnie do narośniętej hodowli dodaje się substrat i dalej prowadzi się proces, aż do całkowitego zużycia substratu. Po zakończeniu transformacji roztwór transformacyjny ekstrahuje się rozpuszczalnikami organicznymi niemieszającymi się z wodą, oddziela frakcję organiczną, osusza bezwodnym siarczanem magnezu, odparowuje rozpuszczalnik i tak otrzymany surowy produkt oczyszcza się za pomocą technik chromatograficznych.

Korzystnie jest, gdy proces namnażania drobnoustroju prowadzi się w temperaturze 30°C.

Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w żywych komórkach kultury Absidia coerulea, następuje reakcja glikozylacji substratu.

Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie, w łagodnych warunkach, 4’-O-3-D-glukopiranozylo-1”,2”-dihydroksantohumolu K, o wzorze 2, jako głównego produktu reakcji w kulturze Absidia coerulea z wydajnością 38,88%.

Wynalazek jest bliżej objaśniony w przykładzie wykonania.

P r z y k ł a d 1. Do kolby o pojemności 300 cm , w której znajduje się 100 cm sterylnej pożyw₃ ki zawierającej 3 g glukozy i 1 g aminobaku na 1 dm wody destylowanej, wprowadza się grzyby Absidia coerulea. Po 4 dniach wzrostu drobnoustrojów w temperaturze 30°C i przy ciągłym wstrząsaniu, ₃ dodaje się 15 mg 1”,2”-dihydroksantohumol K, o wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm metanolu. Transformację prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez 8 dób. Następnie, uzyskany roztwór transformacyjny ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odpar owuje rozpuszczalnik. Otrzymuje się 29 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaninę chloroform:metanol w stosunku objętościowym 9:1.

Po oczyszczeniu otrzymuje się 8,5 mg 4’-O-3-D-glukopiranozylo-1”,2”-dihydroksantohumolu K, o wzorze 2, z wydajnością 38,88%.

Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:

¹H NMR (600 MHz, aceton-da) δ: 1,20 (3H, s, H-5”), 1,21 (3H, s, H-4”), 1,74 (2H, m, H-1”), 2,62 (1H, m, H-2”b), 2,79 (1H, m, H-2”a), 3,42 (1H, m, H-4'”), 3,55 (1H, m, H-2'”), 3,55 ( 1H, m, H-5'”), 3,58 (1H, m, H-3'”), 3,68 (1H, m, C6'”b), 3,70 (3H, s, C6'-OCH3), 3,94 (1H, m, C6'”a), 5,03 (1H, m, H-1'”), 6,55 (1H, s, H-5'), 6,73 (1H, d, J = 16,1 Hz, H-a), 6,88 (2H, pd, J = 8,6 Hz, H-3, H-5), 7,18 (1H, d, J = 16,1 Hz, H-β), 7,49 (2H, pd, J = 8,6 Hz, H-2, H-6).

¹³C NMR (150 MHz, aceton-ds) δ: 17,46 (C-2”), 26,31 (C-5”), 27,26 (C-4”), 32,57 (C-r), 56,06 (C6'-OCH3), 62,77 (C-6”'), 71,54 (C-4'”), 74,62 (C-2'”), 75,21 (C-3”), 78,06 (C-3'”), 78,17 (C-5'”), 92,51 (C-5'), 101,95 (C-1'”), 104,39 (C-3'), 113,59 (C-1'), 116,73 (C-5), 127,48 (C-a), 127,52 (C-1), 130,90 (C-6), 144,71 (C-β), 152,96 (C-2'), 157,19 (C-6'), 157,63 (C-4'), 160,45 (C-4), 197,21 (C=O).

Claims

Zastrzeżenia patentowe

1.4'-O^-D-glukopiranozylo-1”,2”-dihydroksantohumol K, o wzorze 2.
2. Sposób wytwarzania 4'-O^-D-glukopiranozylo-1”,2”-dihydroksantohumolu K, o wzorze 2, znamienny tym, że związek ten otrzymuje się na drodze reakcji mikrobiologicznej transformacji substratu, którym jest 1”,2”-dihydroksantohumol K o wzorze 1, polegającej na tym, że grzyby z gatunku Absidia coerulea, namnaża się w płynnym podłożu mikrobiologicznym, charakterystycznym dla grzybów, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 12-40°C, po czym do narośniętej hodowli

PL 223 442 B1 dodaje się substrat i dalej prowadzi się proces, aż do całkowitego zużycia substratu, po czym po zakończeniu transformacji roztwór transformacyjny ekstrahuje się rozpuszczalnikami organicznymi niemieszającymi się z wodą, oddziela frakcję organiczną, osusza bezwodnym siarczanem magnezu, odparowuje rozpuszczalnik i tak otrzymany surowy produkt oczyszcza się za pomocą technik chromatograficznych.
3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że proces prowadzi się w temperaturze 30°C.