PL247824B1 - Nowa pochodna ksantohumolu oraz sposób jej otrzymywania - Google Patents
Nowa pochodna ksantohumolu oraz sposób jej otrzymywaniaInfo
- Publication number
- PL247824B1 PL247824B1 PL443572A PL44357223A PL247824B1 PL 247824 B1 PL247824 B1 PL 247824B1 PL 443572 A PL443572 A PL 443572A PL 44357223 A PL44357223 A PL 44357223A PL 247824 B1 PL247824 B1 PL 247824B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- medium
- dihydroxanthohumol
- acetyl
- xanthohumol
- obtaining
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
- C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
- C07D311/06—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 2
- C07D311/20—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 2 hydrogenated in the hetero ring
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Zgłoszenie dotyczy nowego chalkonu, jakim jest 4-O-acetylo-1",2"-dihydroksantohumol C, o wzorze 1 oraz sposobu jego otrzymywania na drodze acylacji z 1",2"-dihydroksantohumolu C z udziałem bezwodnika octowego w środowisku pirydyny. Wynalazek ten może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym, spożywczym lub chemicznym.
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest 4-O-acetylo-1”,2”-dihydroksantohumol C. Przedmiotem wynalazku jest także sposób otrzymywania 4-O-acetylo-1”,2”-dihydroksantohumolu C, o wzorze 1 przedstawionym na rysunku.
Związek ten może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym, spożywczym i chemicznym do wytwarzania pochodnych związków flawonoidowych, wykazujących działanie przeciwnowotworowe.
Z publikacji, której autorkami są Paulina Iwaniuk i Paulina Terlecka, zatytułowanej „Ksantohumol przeciwnowotworowy prenyloflawonoid zawarty w chmielu zwyczajnym (Humulus lupulus L.)” w książce: Współczesne badania nad stanem środowiska i leczniczym wykorzystaniem roślin [online], 2019, Lublin, Uniwersytet Przyrodniczy w Lublinie, 147 s., ISBN 978-83-7259-310-8. DOI:10.24326/mon.2019.2D2:, znane są m.in. przeciwnowotworowe właściwości ksantohumolu.
W stanie techniki znane są również inne korzystne właściwości biologiczne ksantohumolu (patrz w szczególności: Monika Agacka, Urszula Skomra „Chmiel jako źródło bioaktywnych metabolitów wtórnych dla przemysłu piwowarskiego i farmaceutycznego” doi: 10.26114/sir.iung.2012.31.03 oraz Mirosław Anioł, „Pozostałość po ekstrakcji chmielu nadkrytycznym dwutlenkiem węgla jako źródło technologicznie użytecznych substancji” praca habilitacyjna, Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu, Wrocław 2009).
Możliwość wykorzystania ksantohumolu w preparatach farmaceutycznych jest jednak ograniczona ze względu na jego słabą rozpuszczalność w roztworach wodnych, ograniczającą jego biodostępność, a także trudności z uzyskaniem tej aktywnej substancji pochodzenia naturalnego w łatwy i powtarzalny sposób zapewniający jej odpowiednią jakość.
Celem wynalazku jest dostarczenie pochodnej ksantohumolu, która będzie posiadała poprawioną aktywność biologiczną oraz lepszą rozpuszczalność niż ksantohumol. Kolejnym celem wynalazku jest dostarczenie sposobu syntezy takiej pochodnej.
Nieoczekiwanie określony powyżej problem został rozwiązany w niniejszym wynalazku.
Przedmiotem wynalazku jest 4-O-acetylo-1”,2”-dihydroksantohumol C, o strukturze przedstawionej na wzorze I przedstawionym poniżej:
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania związku o wzorze 1, charakteryzujący się tym, że 1”,2”-dihydroksantohumol C, który jest substancją znaną i komercyjnie dostępną, poddaje się znanej reakcji z bezwodnikiem octowym, w rozpuszczalniku organicznym, następnie mieszaninę reakcyjną zabezpiecza się przed dostępem światła i pozostawia w temperaturze od 16 do 80°C, po czym miesza się przez co najmniej 4 godziny, a następnie wydziela powstały produkt 4-O-acetylo-1”,2”-dihydroksantohumol C, o wzorze 1, za pomocą chromatografii cieczowej.
Korzystnie jest, gdy rozpuszczalnikiem organicznym w reakcji jest pirydyna.
Korzystnie również jest, gdy reakcję prowadzi się przy ciągłym mieszaniu.
Korzystnie także jest, gdy reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej.
Dodatkowo korzystnie jest, gdy reakcję prowadzi się przez 24 godziny.
Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie 4-O-acetylo-1”,2”-dihydroksantohumol C, z maksymalną wydajnością 98%, z użyciem tanich i łatwych w przygotowaniu odczynników.
Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania bezwodnika octowego, w powszechnie stosowanym rozpuszczalniku, np. pirydynie, następuje estryfikacja grupy hydroksylowej i przyłączenie do niej reszty acetylowej. Uzyskany w ten sposób produkt, o wzorze 1, wydziela się z mieszaniny poreakcyjnej znanym sposobem, za pomocą chromatografii cieczowej.
Wynalazek jest bliżej objaśniony na przykładzie wykonania.
PL 247824 BI
Przykład 1. Otrzymywanie 4-O-acetylo-1”,2”-dihydroksantohumolu C.
Do kolby zawierającej 100 mg (0.28 mmol) 1”,2”-dihydroksantohumolu C (komercyjnie dostępny odczynnik) rozpuszczonego w 10 ml bezwodnej pirydyny dodaje się 0,052 mL (0.56 mmola) bezwodnika octowego. Zawiesinę miesza się intensywnie w temperaturze pokojowej przez 24 h. Po tym czasie produkt wydziela się za pomocą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym stosując jako eluent mieszaninę rozpuszczalników heksan : aceton, w stosunku objętościowym 5 :1. Na tej drodze otrzymuje się 109 mg 4-O-acetylo-1”,2”-dihydroksantohumolu C, w postaci jasnożółtego proszku, z 98% wydajnością i o czystości powyżej 97% (wg HPLC).
Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:
1H NMR (500 MHz, aceton_d6) δ (ppm): 14.71 (1H, s), 8.01 (2H, d, J = 15.6 Hz), 7.78-7.74 (3H, m), 7.21 (2H, m, J = 8.6 Hz), 5.95 (1H, s), 3.96 (3H, s), 2.58 (2H, t, J = 6.8 Hz), 2.28 (3H, s), 1.82 (2H, t, J = 6.8 Hz), 1.35 (6H, s) UV Xmax (nm) = 236.8, 351.2
Przykład 2. Właściwości 4-O-acetylo-1”,2”-dihydroksantohumolu C.
Właściwości przeciwnowotworowe związku według wynalazku
Zbadana aktywność związku o wzorze I wobec różnych linii komórek nowotworowych. W badaniach wykorzystano linie komórkowe przedstawione w Tabeli 1.
Tabela 1
Linie komórkowe wykorzystane w teście
| Lp. | Nazwa linii komórkowej | Źródło pochodzenia linii komórkowej | Stężenie komórek w teście/ml |
| 1 | 5637 | Riken BRC Celi Bank | 4x104 |
| 2 | A-431 | ATCC | 4*104 |
| 3 | UM-SCC-17A | Merck | 5x103 |
| 4 | SK-MEL-3 | ATCC | 4x104 |
| 5 | MCC13 | CellBank Australia | 5x104 |
| 6 | BJ | ATCC | 4x104 |
| 7 | A172 | ATCC | 4x104 |
| 8 | BALB/3T2 clone A31 | ATCC | 4x104 |
Linie komórkowe wykorzystanie w teście były hodowane na odpowiednich dla nich pożywkach (patrz Tabela 2).
Tabela 2
Media hodowlane
| Nr identyfikacyjny | Nazwa | Skład |
| Medium LTP/ME/0312 | medium hodowlane dla komórek 5637 | Medium RPMI +G.MAX FBS10% penicylina 100 jedn./ml streptomycyna 100 pg/ml |
| Medium LTP/ME/0388 | medium hodowlane dla komórek A-431 | Medium Dulbecco FBS10% L-glutamina 2 mM penicylina 100 jedn./ml streptomycyna 100 pg/ml |
PL 247824 BI
| Medium LTP/ME/0391 | medium hodowlane dla komórek UM-SCC-17A | Medium Dulbecco FBS 10% L-glutamina 2 mM EGF 20 ng/ml penicylina 100 jedn./ml streptomycyna 100 pg/ml |
| Medium LTP/ME/0394 | medium hodowlane dla komórek SK-MEL-3 | Medium McCoy 5A z Lglutaminą FBS 15% penicylina 100 jedn./ml streptomycyna 100 pg/ml |
| Medium LTP/ME/0618 | medium hodowlane dla komórek MCC13 | Medium RPMI + G.MAX FBS 15% HEPES 25 mM penicylina 100 jedn./ml streptomycyna 100 pg/ml |
| Medium LTP/ME/0505 | medium hodowlane dla komórek BJ | Medium Eagle’a FBS 10% L-glutamina 2 mM penicylina 100 jedn./ml streptomycyna 100 pg/ml |
| Medium LTP/ME/0527 | medium hodowlane dla komórek A172 | Medium Dulbecco FBS 10% L-glutamina 2 mM penicylina 100 jedn./ml streptomycyna 100 pg/ml |
| Medium LTP/ME/0527 | medium hodowlane dla komórek BALB/3T3 clone 31 | Medium Dulbecco FBS 10% Glutamina 2 mM penicylina 100 jedn./ml streptomycyna 100 pg/ml |
| Medium LTP/ME/0434 | medium do rozcieńczeń materiałów badanych | Medium RPMI 1640+OptiMEM FBS 5% L-GIn 2mM penicylina 100 jedn./ml streptomycyna 100 pg/ml |
Jako substancję porównawczą zastosowana została Cisplatyna (roztwór bazowy 1 mg/ml), która jest komercyjne dostępnym lekiem przeciwnowotworowym (Accord).
Metodyka badania.
Roztwory wyjściowe (stock Solutions) testowanych związków o stężeniu 10 mM przygotowywano do każdego doświadczenia ex tempore, rozpuszczając naważkę badanego związku w odpowiedniej objętości DMSO. Rozpuszczalnikiem dla dalszych rozcieńczeń było medium hodowlane. Związki przetestowano w przedziałach stężeń od 1000 do 0,0316 μΜ. Naważki preparatów do sporządzenia roztworów wyjściowych przygotowywano na wadze analitycznej firmy Mettler Toledo ΧΡ26 o dokładności 0,001 mg.
Oznaczenie działania cytotoksycznego badanych związków wykonywano w 96-godzinnych hodowlach in vitro. Dla oznaczenia aktywności antyproliferacyjnej związków wobec wybranych linii komórkowych zastosowano test kolorymetryczny SRB, mierzący zahamowanie proliferacji docelowych komórek na podstawie pomiaru ilości białka komórkowego. W każdym doświadczeniu próbki zawierające określone stężenia preparatu nanoszono na płytki 384-dołkowe w trzech powtórzeniach. Doświadczenia powtarzano od trzech do siedmiu razy.
1. Komórki (pochodzące z hodowli in vitro) nanoszono do dołków płytki 384-dołkowej w 50 pl medium hodowlanego w liczbie zależnej od rodzaju komórek (jak w pkt. 3), a następnie inkubowano w 37°C, w wilgotnej atmosferze nasyconej 5% CO2.
2. Po 24 godzinach inkubacji do dołków dodawano 20 pl medium (kontrola wzrostu komórek) lub medium zawierającego badane związki w badanych stężeniach.
PL 247824 BI
3. Płytki inkubowano przez kolejne 72 godziny w inkubatorze.
4. Po upływie 72 godzin inkubacji komórek ze związkami wykonywano test SRB.
5. W każdym doświadczeniu próbki zawierające określone stężenia preparatu nanoszono w trzech technicznych powtórzeniach. Doświadczenia powtarzano 3-9 razy.
Odczyt SRB:
Po upływie czasu inkubacji testu z każdego dołka odciągano po 50 pi medium i dodawano po 30 pi zimnego 25% kwasu trójchlorooctowego (TCA). Po 60 minutach inkubacji w temperaturze pokojowej płytki 4-krotnie przepłukiwano wodą, a następnie osuszano. Do każdego dołka dodawano po 20 μΙ 0,1% roztworu sulforodaminy B (SRB) w 1% kwasie octowym, w celu wybarwienia strąconego w dołku białka komórkowego. Po 30-minutowej inkubacji z SRB w temperaturze pokojowej płytki 4-krotnie płukano 1% kwasem octowym, i ponownie osuszano. W kolejnym etapie do każdego dołka dodawano po 70 μΙ 10 mM buforu TRIS w celu rozpuszczenia związanego z białkiem komórek barwnika. Gęstość optyczną poszczególnych próbek odczytywano przy długości fali 540 nm przy użyciu czytnika płytkowego (uniwersalnego) Synergy H4 (BioTek Instruments USA).
Uzyskane wyniki przedstawiono w Tabeli 3.
Tabela 3
Wyniki testów biologicznych
| Związek | ΙΟ50[μΜ] | ||||||
| 5637 | A-431 | UM-SCC- 17A | SK- MEL-3 | MCC-13 | BALB/3T3 clone A31 | A172 | |
| 1 | 30,0 ±7,7 | 15,5 ±1,3 | 51,9 ±3,5 | 47,6 ± 0,4 | 52,3 ± 0,2 | 18,4 ±3,4 | 36,8 ±14,6 |
| Cisplatynac | 0,5 ±0,2 | 1,2 ± 0,4 | 5,2 ±1,3 | 4,2 ±1,4 | 2,2 ±1,0 | 0,5 ±0,2 | 7,1 ±2,3 |
1: 4-O-acetylo-1 ”,2”-dihydroksantohumol C (związek o wzorze 1) c - ICsow pg/ml
Podsumowanie i wnioski:
W porównaniu z produktem naturalnym, tj. ksantohumolem, związek według wynalazku posiada lepszą rozpuszczalność oraz korzystne właściwości biologiczne.
W szczególności, wykonane badania potwierdzają wysoką aktywność przeciwnowotworową związku według wynalazku, porównywalną ze znanym lekiem przeciwnowotworowym, którym jest cisplatyna. W oparciu o wykonane przez twórców wstępne badania biologiczne przewiduje się również, że związek ten posiada również inne pożądane właściwości biologiczne (w szczególności właściwości: proapoptotyczne, antymetastatyczne, przeciwutleniające i przeciwzapalne).
Claims (6)
- Zastrzeżenia patentowe1. 4-O-acetylo-1 ”,2”-dihydroksantohumol C, o wzorze 1:Wzór 1.
- 2. Sposób otrzymywania 4-O-acetylo-1”,2”-dihydroksantohumolu C, znamienny tym, że substrat jakim jest 1”,2”-dihydroksantohumol C oraz bezwodnik octowy rozpuszcza się w rozpuszczalniku organicznym, następnie mieszaninę reakcyjną zabezpiecza się przed dostępem światła i pozostawia w temperaturze od 16 do 80°C przez okres co najmniej 4 godzin, po czym produkt wydziela się za pomocą chromatografii cieczowej.
- 3. Sposób, według zastrz. 2, znamienny tym, że rozpuszczalnikiem organicznym w reakcji jest pirydyna.
- 4. Sposób, według zastrz. 2, znamienny tym, że reakcję prowadzi się przy ciągłym mieszaniu.
- 5. Sposób, według zastrz. 2, znamienny tym, że reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej.
- 6. Sposób, według zastrz. 2, znamienny tym, że mieszaninę reakcyjną pozostawia się w temperaturze pokojowej na 24 godziny.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL443572A PL247824B1 (pl) | 2023-01-25 | 2023-01-25 | Nowa pochodna ksantohumolu oraz sposób jej otrzymywania |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL443572A PL247824B1 (pl) | 2023-01-25 | 2023-01-25 | Nowa pochodna ksantohumolu oraz sposób jej otrzymywania |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL443572A1 PL443572A1 (pl) | 2024-07-29 |
| PL247824B1 true PL247824B1 (pl) | 2025-09-08 |
Family
ID=91971265
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL443572A PL247824B1 (pl) | 2023-01-25 | 2023-01-25 | Nowa pochodna ksantohumolu oraz sposób jej otrzymywania |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL247824B1 (pl) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PL405460A1 (pl) * | 2013-09-27 | 2014-06-09 | Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu | 4'-O-β-D-glukopiranozyloksantohumol C i sposób jego wytwarzania |
| PL405458A1 (pl) * | 2013-09-27 | 2014-06-09 | Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu | Sposób wytwarzania 1",2", α,β-tetrahydroksantohumolu C |
| PL425327A1 (pl) * | 2018-04-24 | 2019-11-04 | Wrocław University Of Environmental And Life Sciences | Zastosowanie α,β,2',3'-tetrahydroksantohumolu |
-
2023
- 2023-01-25 PL PL443572A patent/PL247824B1/pl unknown
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PL405460A1 (pl) * | 2013-09-27 | 2014-06-09 | Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu | 4'-O-β-D-glukopiranozyloksantohumol C i sposób jego wytwarzania |
| PL405458A1 (pl) * | 2013-09-27 | 2014-06-09 | Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu | Sposób wytwarzania 1",2", α,β-tetrahydroksantohumolu C |
| PL425327A1 (pl) * | 2018-04-24 | 2019-11-04 | Wrocław University Of Environmental And Life Sciences | Zastosowanie α,β,2',3'-tetrahydroksantohumolu |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL443572A1 (pl) | 2024-07-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Abu-Aisheh et al. | Synthesis and biological activity assays of some new N1-(flavon-7-yl) amidrazone derivatives and related congeners | |
| Mbaba et al. | Novobiocin–ferrocene conjugates possessing anticancer and antiplasmodial activity independent of HSP90 inhibition | |
| Zalaru et al. | Synthesis, spectroscopic characterization, DFT study and antimicrobial activity of novel alkylaminopyrazole derivatives | |
| Singh et al. | Synthesis, antimicrobial, cytotoxic and E. coli DNA gyrase inhibitory activities of coumarinyl amino alcohols | |
| Mahapatra et al. | Design, synthesis, and in-silico study of chromen-sulfonamide congeners as potent anticancer and antimicrobial agents | |
| Qin et al. | Design, synthesis and biological evaluation of 2, 3-dihydro-[1, 4] dioxino [2, 3-f] quinazoline derivatives as EGFR inhibitors | |
| CN109456312A (zh) | 1,2,3-三氮唑类微管蛋白聚合抑制剂其合成方法和应用 | |
| Efeoglu et al. | Novel urea-thiourea hybrids bearing 1, 4-naphthoquinone moiety: Anti-inflammatory activity on mammalian macrophages by regulating intracellular PI3K pathway, and molecular docking study | |
| CN109232477A (zh) | 查尔酮-氨基二硫代甲酸酯类过氧化氢酶抑制剂及其合成方法和应用 | |
| CN106674182B (zh) | 含氨基二硫代甲酸酯的刺芒柄花素衍生物、制备方法及其在抗肿瘤药物中的应用 | |
| JP6917448B2 (ja) | チロシンキナーゼ阻害剤の結晶形、塩形態及び製造方法 | |
| Vani et al. | Microwave assisted synthesis and antimicrobial and antioxidant activities of dimers of 1, 2, 3-triazole-benzofuran bearing alkyl spacer derivatives | |
| CN118480054A (zh) | 一种磺酰胺衍生物的可药用盐、其结晶形式及用途 | |
| PL247824B1 (pl) | Nowa pochodna ksantohumolu oraz sposób jej otrzymywania | |
| EP3275864B1 (en) | Compound of 3-hydroxyl pyridine, preparation method thereof and pharmaceutical use thereof | |
| CN109206399B (zh) | 三级酰胺微管蛋白聚合抑制剂及其制备方法和应用 | |
| WO2023134692A1 (zh) | 多环类化合物及其用途 | |
| El-Gamal et al. | Antiproliferative activity of cycloalkanecarboxamide derivatives possessing sulfonate or sulfamate moiety | |
| PL246030B1 (pl) | 8-Bromo-6-chloro-3’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawanon i sposób wytwarzania 8-bromo-6-chloro-3’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawanonu | |
| CN112209888B (zh) | 一种4-芳巯基喹唑啉类化合物、制备方法和医药用途 | |
| Barlak et al. | Synthesis and evaluation of sulfonamide-chalcone hybrid compounds as inhibitors of VEGFR1/VEGFR2-mediated angiogenesis | |
| US9388209B2 (en) | 2′, 3′-dideoxy-5-fluorouridine derivatives, a process for the manufacture thereof and application thereof | |
| CN103804303B (zh) | Egfr小分子抑制剂嘧啶衍生物及其制备方法与用途 | |
| Buchkevych et al. | Synthesis of New 6, 7 (N, O)-Heterocyclic 1, 4-Naphthoquinones | |
| Emirdağ et al. | Design, synthesis and biological evaluation of novel gypsogenin derivatives as potential anticancer and antimicrobial agents |