PL214279B1 - Pochodna sulfonyloaminowa, sposób jej wytwarzania i zastosowanie oraz kompozycja farmaceutyczna i sposób jej wytwarzania - Google Patents

Pochodna sulfonyloaminowa, sposób jej wytwarzania i zastosowanie oraz kompozycja farmaceutyczna i sposób jej wytwarzania

Info

Publication number
PL214279B1
PL214279B1 PL371100A PL37110003A PL214279B1 PL 214279 B1 PL214279 B1 PL 214279B1 PL 371100 A PL371100 A PL 371100A PL 37110003 A PL37110003 A PL 37110003A PL 214279 B1 PL214279 B1 PL 214279B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
compound
hydrogen
mol
dcm
alkyl
Prior art date
Application number
PL371100A
Other languages
English (en)
Other versions
PL371100A1 (pl
Inventor
Emelen Kristof Van
Leo Jacobus Jozef Backx
Brandt Sven Franciscus Anna Van
Patrick René Angibaud
Isabelle Noëlle Constance Pilatte
Marc Gustaaf Celine Verdonck
Winter Hans Louis Jos De
Heusden Jimmy Arnold Viviane Van
Original Assignee
Janssen Pharmaceutica Nv
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Janssen Pharmaceutica Nv filed Critical Janssen Pharmaceutica Nv
Publication of PL371100A1 publication Critical patent/PL371100A1/pl
Publication of PL214279B1 publication Critical patent/PL214279B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/402—1-aryl substituted, e.g. piretanide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/10—Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/10—Anti-acne agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/14—Drugs for dermatological disorders for baldness or alopecia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/16—Emollients or protectives, e.g. against radiation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/06—Antigout agents, e.g. antihyperuricemic or uricosuric agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/02—Non-specific cardiovascular stimulants, e.g. drugs for syncope, antihypotensives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon radicals, substituted by hetero atoms, attached to ring carbon atoms
    • C07D207/09—Radicals substituted by nitrogen atoms, not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/14—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/10—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with radicals containing only carbon and hydrogen atoms attached to ring carbon atoms
    • C07D211/14—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with radicals containing only carbon and hydrogen atoms attached to ring carbon atoms with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals attached to the ring nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/56—Nitrogen atoms
    • C07D211/58—Nitrogen atoms attached in position 4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/02—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with only hydrogen atoms or radicals containing only carbon and hydrogen atoms, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring; Alkylene-bis-isoquinolines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/02—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with only hydrogen atoms or radicals containing only carbon and hydrogen atoms, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring; Alkylene-bis-isoquinolines
    • C07D217/04—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with only hydrogen atoms or radicals containing only carbon and hydrogen atoms, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring; Alkylene-bis-isoquinolines with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals attached to the ring nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/12—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with radicals, substituted by hetero atoms, attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring
    • C07D217/14—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with radicals, substituted by hetero atoms, attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring other than aralkyl radicals
    • C07D217/16—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with radicals, substituted by hetero atoms, attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring other than aralkyl radicals substituted by oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/32—One oxygen, sulfur or nitrogen atom
    • C07D239/42—One nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/14—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D295/155—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with the ring nitrogen atoms and the carbon atoms with three bonds to hetero atoms separated by carbocyclic rings or by carbon chains interrupted by carbocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/22—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with hetero atoms directly attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/26—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D307/56—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D307/68—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/06—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D513/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/48—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving transferase

Description

(12) OPIS PATENTOWY (21) Numer zgłoszenia: 371100 (19) PL (11) 214279 (13) B1 (22) Data zgłoszenia: 11.03.2003 (86) Data i numer zgłoszenia międzynarodowego:
11.03.2003, PCT/EP03/002517 (87) Data i numer publikacji zgłoszenia międzynarodowego:
18.09.2003, WO03/076401 (51) Int.Cl.
C07D 211/58 (2006.01) C07D 401/04 (2006.01) C07D 207/14 (2006.01) C07D 403/04 (2006.01) A61K 31/4545 (2006.01) A61P 35/00 (2006.01)
Pochodna sulfonyloaminowa, sposób jej wytwarzania i zastosowanie oraz kompozycja farmaceutyczna i sposób jej wytwarzania (73) Uprawniony z patentu:
JANSSEN PHARMACEUTICA N.V., Beerse, BE (30) Pierwszeństwo:
13.03.2002, US, 60/363,799 18.12.2002, WO, PCT/EP02/14481 (43) Zgłoszenie ogłoszono:
13.06.2005 BUP 12/05 (45) O udzieleniu patentu ogłoszono:
31.07.2013 WUP 07/13 (72) Twórca(y) wynalazku:
KRISTOF VAN EMELEN, Beerse, BE LEO JACOBUS JOZEF BACKX, Beerse, BE SVEN FRANCISCUS ANNA VAN BRANDT, Beerse, BE
PATRICK RENE ANGIBAUD,
Issy-les-Moulineaux, FR
ISABELLE NOELLE CONSTANCE PILATTE,
Issy-les-Moulineaux, FR
MARC GUSTAAF CELINE VERDONCK,
Beerse, BE
HANS LOUIS JOS DE WINTER, Beerse, BE JIMMY ARNOLD VIVIANE VAN HEUSDEN, Oelegem, BE (74) Pełnomocnik:
rzecz. pat. Elżbieta Ostrowska
PL 214 279 B1
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest pochodna sulfonyloaminowa, sposób jej wytwarzania i zastosowanie oraz kompozycja farmaceutyczna i sposób jej wytwarzania. Nowe związki wykazują aktywność enzymatyczną hamującą deacetylazę histonową (HDAC). Tak więc, związki według wynalazku znajdują zastosowanie, zarówno in vitro jak i in vivo, do hamowania HDAC oraz jako lek, np. jako lek do hamowania stanów proliferacyjnych, takich jak rak i łuszczyca.
We wszystkich komórkach eukariotycznych, genomowe DNA w chromatynie wiąże się z histonami z wytworzeniem nukleosomów. Każdy nukleosom składa się z białkowego oktameru zbudowanego w dwóch kopiach z każdego spośród histonów H2A, H2B, H3 i H4. DNA okręca się wokół tego rdzenia białkowego, przy czym aminokwasy zasadowe histonów oddziaływują z naładowanymi ujemnie grupami fosforanowymi DNA. Najpowszechniejszą modyfikacją potranslacyjną tych histonów rdzeniowych jest odwracalna acetylowanie grup ε-aminowych konserwowanych, silnie zasadowych N-końcowych reszt lizynowych. Stan równowagi dynamicznej w acetylowaniu histonu ustala równowaga dynamiczna pomiędzy współzawodniczącymi acetylotransferazą (acetylotransferazami) histonową a deacetylazą histonową (deacetylazami) nazywaną tutaj „HDAC. Acetylowanie i deacetylowanie histonów od dawna wiązano z kontrolą transkrypcji. Ostatnie wyniki klonowania genów kodujących różne acetylotransferazy i deacetylazy histonowe dostarczyły możliwe wyjaśnienie relacji pomiędzy acetylowaniem histonów a kontrolą transkrypcji. Odwracalna acetylowanie histonów może prowadzić do przebudowy chromatyny i jako taka wywoływać mechanizm kontrolny transkrypcji genów. Na ogół, hiperacetylowanie histonów ułatwia ekspresję genów, podczas gdy deacetylowanie histonów skorelowane jest z represją transkrypcji. Wykazano, że acetylotransferazy histonowe funkcjonują, jako koaktywatory transkrypcji, podczas gdy stwierdzono, że deacetylazy histonowe należą do szlaków represji transkrypcji.
Równowaga dynamiczna pomiędzy acetylowaniem histonów a deacetylowaniem ma zasadnicze znaczenie dla proliferacji komórkowej. Hamowanie deacetylazy histonowej prowadzi do zahamowania cyklu komórkowego, różnicowania komórkowego, apoptozy i zmiany transformowanego fenotypu. Z tego względu inhibitory HDAC mogą posiadać duży potencjał terapeutyczny w leczeniu chorób lub stanów związanych z proliferacją komórkową (Marks i in., Własności Reviews: Cancer 1: 194-202, 2001). Badania nad inhibitorami deacetylaz histonowych (HDAC) wskazują, że rzeczywiście enzymy te odgrywają ważną rolę w proliferacji i różnicowaniu komórek. Inhibitor trichostatyna A (TSA) powoduje zahamowanie cyklu komórkowego zarówno w fazie G1 jak i G2, zmienia transformowany fenotyp różnych linii komórkowych i indukuje różnicowanie komórek białaczki Friend'a i inne. Opisano, że TSA (i anilid kwasu suberoilohydroksamowego SAHA) hamuje proliferację komórkową, indukuje końcowe różnicowanie i zapobiega powstawaniu guzów u myszy (Finnin i in., Nature, 401: 188-193, 1999).
Opisano również, że trichostatyna A jest również przydatna w leczeniu zwłóknienia, np. zwłóknienia wątroby i marskości wątroby. (Geerts i in., Europejskie zgłoszenie patentowe EP 0827742, opublikowane 11 marca 1998).
W zgłoszeniu patentowym WO 01/38322 opublikowanym 31 maja 2001 ujawniono między in11 nymi inhibitory deacetylazy histonowej o wzorze ogólnym Cy-L1-Ar-Y1-CXCO-NH-Z, oraz kompozycje i sposoby leczenia chorób i stanów związanych z proliferacją komórkową.
W zgłoszeniu patentowym WO 01/70675 opublikowanym 27 września 2001 ujawniono inhibitory 3 deacetylazy histonowej o wzorze Cy-S(O)2-NH-Y3-W oraz kompozycje i sposoby leczenia chorób i stanów związanych z proliferacją komórkową.
Problemem do rozwiązania jest wytworzenie inhibitorów deacetylazy histonowej o wysokiej aktywności enzymatycznej i wykazujących również korzystne właściwości, takie jak aktywność komórkowa i zwiększona dostępność biologiczna, korzystnie dostępność biologiczna po podaniu doustnym i o niewielkich lub żadnych działaniach niepożądanych.
Rozwiązaniem dla opisanego powyżej problemu są nowe związki według wynalazku. Związki różnią się budową od związków znanych w dziedzinie.
Związki według wynalazku wykazują in vitro doskonałą aktywność enzymatyczną hamującą deacetylazę histonową. Związki te wykazują korzystne właściwości w odniesieniu do aktywności komórkowej i specyficzne właściwości w odniesieniu do hamowania cyklu komórkowego zarówno w fazie G1 jak i G2 (zdolność do indukcji p21). Związki według wynalazku wykazują dobrą trwałość metaboliczną i dużą dostępność biologiczną, a bardziej szczegółowo wykazują dostępność biologiczną po podaniu doustnym. Ponadto, związki według wynalazku wykazują małe powinoPL 214 279 B1 wactwo względem enzymów P450, co zmniejsza ryzyko szkodliwego oddziaływania lek-lek dając także większy margines bezpieczeństwa.
Pochodnej sulfonyloaminowej, związku o wzorze (I)
jej farmaceutycznie dopuszczalnych soli addycyjne i stereochemicznych form izomerycznych, w którym to wzorze n oznacza 0, 1 lub 2 i gdy n=0, to w ugrupowaniu tym istnieje wiązanie bezpośrednie; t oznacza 0, 1, 2 lub 3 i gdy t = 0, to między Z i N istnieje wiązanie bezpośrednie;
każdy Q oznacza grupę o wzorze każdy X oznacza atom azotu lub grupę o wzorze każdy Y oznacza atom azotu lub grupę o wzorze
każdy Z oznacza atom azotu lub grupę o wzorze ;
R1 oznacza -C(O)NR8R9 lub -NR11C(O)C=N(OH)R10;
przy czym R8 i R9 niezależnie od siebie są wybrane z grupy obejmującej atom wodoru lub hydroksyl;
R10 oznacza aryloC1-6alkil;
R11 jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej atom wodoru lub C1-6alkil;
2
R2 oznacza atom wodoru, C1-6alkil lub naftalenylosulfonylopirazynyl;
3
R3 oznacza atom wodoru;
R4 oznacza atom wodoru, hydroksyl, hydroksyC1-6alkil lub C1-6alkoksyl;
5
R oznacza atom wodoru, C1-6alkil, hydroksyC1-6alkil lub C1-6alkoksyC1-6alkil;
oznacza rodnik wybrany z grupy obejmującej
(a-l) (a-7) (a-20) lub (a-21) przy czym s oznacza 0 lub 1;
R6 i R7 są niezależnie od siebie wybrane z grupy obejmującej atom wodoru, uranyl, benzofuranyl, fenyl, fenyl podstawiony przez jeden, dwa lub trzy podstawniki niezależnie wybrane z grupy obejmującej C1-6alkil, C1-6alkoksyl, hydroksyC1-4alkil, C1-4alkilosulfonyl lub grupę di(C1-4alkilo)aminową;
przy czym zdefiniowany powyżej aryl oznacza fenyl.
Korzystny jest związek według wynalazku, w którym n oznacza 0, 1 lub 2; t oznacza 0, 1,2 lub 3;
każdy Q oznacza ;
R1 oznacza -C(O)NH(OH) lub -NR11C(O)C=N(OH)R10, przy czym R10 oznacza aryloC1-6alkil i R11 oznacza atom wodoru;
2
R2 oznacza atom wodoru, C1-6alkil lub naftalenylosulfonylopirazynyl;
3 każdy R3 niezależnie oznacza atom wodoru;
R4 oznacza atom wodoru, hydroksyl, hydroksyC1-6alkil lub C1-6alkoksyl;
PL 214 279 B1 5
R oznacza atom wodoru, C1-6alkil, hydroksyC1-6alkil lub C1-6alkoksyC1-6alkil;
—® oznacza rodnik wybrany z grupy obejmującej (a-1), (a-7) lub (a-20); każdy s oznacza niezależnie 0 lub 1;
każdy R6 jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej atom wodoru; furanyl; benzofuranyl; fenyl; lub fenyl podstawiony przez jeden podstawnik niezależnie wybrany spośród takich jak C1-6alkil, C1-6alkoksyl, hydroksyC1-4alkil, C1-4alkilosulfonyl lub grupę di(C1-4alkilo)aminową i każdy R7 niezależnie oznacza atom wodoru.
Korzystny jest związek według wynalazku, w którym n oznacza 1 lub 2; t oznacza 0, 1,2 lub 3;
każdy Q oznacza ;
R1 oznacza -C(O)NH(OH);
2
R2 oznacza atom wodoru lub C1-6alkil;
3 każdy R3 niezależnie oznacza atom wodoru;
R4 oznacza atom wodoru;
5
R oznacza atom wodoru lub C1-6alkoksyC1-6alkil;
—© oznacza rodnik wybrany spośród takich jak (a-1) lub (a-20); każdy s oznacza niezależnie 0 lub 1; i każdy R6 jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej atom wodoru;
furanyl; benzofuranyl; fenyl; lub fenyl podstawiony przez jeden podstawnik niezależnie wybrany spośród takich jak C1-6alkil, C1-6alkoksyl, hydroksyC1-6alkil lub grupę di(C1-4alkilo)-aminową.
Szczególnie korzystny jest związek według wynalazku, wybrany ze związków nr 13, nr 15, nr 2, nr 5, nr 21, nr 4, nr 24, nr 32, nr 26, nr 36, nr 38, nr 39, nr 40, nr 41, nr 42, nr 43, nr 44 i nr 35:
0 OH 0 0 OH A 0-0
Związek nr 13 Związek nr 15
γΥ H0 rVp;Xo ...χ
Związek nr 2 Związek nr 5
Q Π0ΥΥ P A0CO ΡγΜ
.0,7 CHąOH; Związek nr 21 Związek nr 4
0 IKr JL λ h Li ΐϊ-Ρ-ΆΥ o PhAt
.0,23 CgH14C5; Związek nr 24 .0,82 C2KF3O2 H20? Związek nr 32
PL 214 279 B1
¢0^ Ογ% 8\/γ\Η wy HO-tj/ \asŁii \^J 'oh
,0,85 C2HF3O2 .1,11 H2G; Związek nr 36
Związek nr 26
y/pY O ,—N /- \\.........# Ύ/
BO-A «·/ \-/ V 0 HO—Ni/ Mstnf V- Ο\χ
(A) W0 Λ
Związek nr 38 Związek nr 39
0_tZ HO—WH X=h X / ti r> 0—( tZ HO—Ni/ \ ,Λ
V/y Λ
Związek nr 40 Związek nr 41
HYCe O-, HO—NK W—
oX5 v o\X %. A
Związek nr 42 Związek nr 43
pV“Y HO—Ni/ S ' S ó HZ V to fYYsA 0 «•γΛ» L J H ^ofi
ΙΑΧ X
w
Związek nr 44 Związek nr 35
Dalszym aspektem wynalazku jest kompozycja farmaceutyczna zawierająca farmaceutycznie dopuszczalny nośnik oraz składnik aktywny terapeutycznie, która według wynalazku zawiera, jako składnik aktywny terapeutycznie, skuteczną ilość wyżej określonego związku o wzorze (I).
Innym aspektem wynalazku jest sposób wytwarzania wyżej określonej kompozycji farmaceutycznej drogą mieszania składników, który według wynalazku polega na tym, że starannie miesza się farmaceutycznie dopuszczalne nośniki i wyżej określony związek o wzorze (I).
Dalszym aspektem wynalazku jest wyżej określony związek o wzorze (I) do stosowania jako lek.
Innym aspektem wynalazku jest zastosowanie wyżej określonego związku o wzorze (I) do wytwarzania leku do leczenia chorób proliferacyjnych.
Kolejnym aspektem wynalazku jest sposób wytwarzania wyżej określonego związku o wzorze (I), który polega na tym, że związek pośredni o wzorze (II), w którym n, t, Q, X, Z, R2, R3, R4, R5 i —® mają wyżej zdefiniowane znaczenia, poddaje się reakcji z odpowiednim kwasem, takim jak np. kwas trifluorooctowy z wytworzeniem kwasu hydroksamowego o wzorze (I-a), w którym R1 oznacza -C(O)NH(OH)
PL 214 279 B1
Termin „inhibitor deacetylazy histonowej” lub „inhibitor histonowej deacetylazy” stosuje się do identyfikacji związku, który jest zdolny do współdziałania z deacetylazą histonową i hamowania jej aktywności, a dokładniej aktywności enzymatycznej. Hamowanie enzymatycznej aktywności deacetylazy histonowej oznacza zmniejszenie zdolności deacetylazy histonowej do usuwania grupy acetylowej z histonu. Korzystnie, takie hamowanie jest specyficzne, tzn. inhibitor deacetylazy histonowej zmniejsza zdolność deacetylazy histonowej do usuwania grupy acetylowej z histonu, przy stężeniu mniejszym niż stężenie inhibitora, które jest niezbędne do uzyskania pewnego innego, niepokrewnego efektu biologicznego.
Stosowany w powyższych definicjach oraz poniżej termin atom fluorowca odnosi się do atomu fluoru, chloru, bromu i jodu;
C1-4alkil określa prostołańcuchowe i rozgałęzione, nasycone rodniki węglowodorowe mające od 1 do 4 atomów węgla, takie jak np. metyl, etyl, propyl, butyl, 1-metyloetyl, 2-metylopropyl itp.;
C1-6alkil obejmuje C1-4alkil i jego wyższe homologi, mające 5 do 6 atomów węgla, takie jak np. pentyl, 2-metylobutyl, heksyl, 2-metylopentyl itp.
Farmaceutycznie dopuszczalne sole addycyjne obejmują farmaceutycznie dopuszczalne sole addycyjne z kwasami i z zasadami. Wymienione powyżej farmaceutycznie dopuszczalne sole addycyjne z kwasami obejmują terapeutycznie aktywne, nietoksyczne formy soli addycyjnych z kwasem, które mogą powstawać ze związkami o wzorze (I). Związki o wzorze (I), które mają właściwości zasadowe można przekształcić w ich farmaceutycznie dopuszczalne sole addycyjne z kwasami, traktując powyższy związek w formie zasadowej odpowiednim kwasem. Odpowiednie kwasy obejmują np. kwasy nieorganiczne, takie jak kwasy fluorowcowodorowe, np. kwas chlorowodorowy lub bromowodorowy; kwas siarkowy; azotowy; fosforowy itp. kwasy; lub kwasy organiczne, takie jak np. octowy, trifluorooctowy, propanowy, hydroksyoctowy, mlekowy, pirogronowy, szczawiowy, malonowy, bursztynowy (np. kwas butanodiowy), maleinowy, fumarowy, jabłkowy, winowy, cytrynowy, metanosulfonowy, etanosulfonowy, benzenosulfonowy, p-toluenosulfonowy, cykloheksyloaminosulfonowy, salicylowy, p-amino-salicylowy, pamowy, tzn. 4,4'-metylenobis(3-hydroksy-2-naftalenokarboksylowy) itp. kwasy.
Związki o wzorze (I), które mają właściwości kwasowe można przekształcić w ich farmaceutycznie dopuszczalne sole addycyjne z zasadami, traktując powyższe związki w formie kwasowej odpowiednią organiczną lub nieorganiczną zasadą. Odpowiednie sole zasadowe obejmują np. sole amoniowe, sole matali alkalicznych i ziem alkalicznych, np. sole litu, sodu, potasu, magnezu, wapnia itp., sole z organicznymi zasadami jak np. benzatyna, N-metylo-D-glukamina, sole hydrabaminowe, i sole z aminokwasami, takimi jak np. arginina, lizyna itp.
Związki według wynalazku o wzorze (I) mogą tworzyć także hydraty i solwaty. Przykładami takich form są np. hydraty i solwaty z alkoholami, itp.
Stosowany tu termin „stereochemiczne formy izomeryczne związków o wzorze (I)”, określa wszystkie możliwe związki powstające przy takich samych atomach poprzez taką samą sekwencję wiązań, lecz różniące się trójwymiarowymi strukturami, które są niezmienne, a które mogą występować dla związków o wzorze (I). O ile nie wymieniono tego lub wskazano tego inaczej, chemiczne oznaczenie związku obejmuje mieszaninę wszystkich możliwych stereochemicznych form izomerycznych, które związek może posiadać. Powyższa mieszanina może zawierać wszystkie diastereomery i/lub enancjomery o podstawowej budowie cząsteczki wymienionego związku. Wszystkie stereochemiczne formy izomeryczne związków o wzorze (I), zarówno w formie czystej lub w ich mieszaninie, są zgodne z zamiarem objętym zakresem wynalazku.
Związki według wynalazku mogą tworzyć formy N-tlenkowe, w których jeden lub kilka atomów azotu jest utlenionych do tak zwanego N-tlenku, szczególnie te N-tlenki, w których jeden lub więcej atomów azotu piperydyny, piperazyny lub grupy pirydazynylowej występuje w stanie N-utlenienia.
Niektóre ze związków o wzorze (I) mogą także występować w ich formach tautomerycznych.
W przypadku każdego zastosowania, termin „związki o wzorze (I)” obejmuje także farmaceutycznie dopuszczalne sole addycyjne i wszystkie formy stereoizomeryczne.
Stosowane tu terminy „deacetylaza histonowa” i „HDAC” odnoszą się do dowolnego enzymu z rodziny, usuwającego grupy acetylowe z grup ε-aminowych reszt lizynowych przy N-końcu histonu. Jeśli z kontekstu nie wynika inaczej, termin „histon odnosi się do dowolnego białka histonowego, w tym H1, H2A, H2B, H3, H4, i H5, pochodzącego z dowolnego gatunku. Ludzkie białka HDAC lub produkty genowe, obejmują między innymi HDAC-1, HDAC-2, HDAC-3, HDAC-4, HDAC-5, HDAC-6, HDAC-7, HDAC-8, HDAC-9 i HDAC-10. Deacetylaza histonowa może także pochodzić ze źródła pierwotniakowego lub grzybicznego.
PL 214 279 B1
Związki o wzorze (I) i ich farmaceutycznie dopuszczalne sole oraz ich stereochemiczne formy izomeryczne można wytworzyć typowymi metodami. Dwie ogólne metody syntezy wskazano jako przykłady:
1
1a) Kwasy hydroksamowe o wzorze (I), w którym R1 oznacza -C(O)NH(OH), w odniesieniu do powyższych związków określonych wzorem (I-a), można wytworzyć poddając związek pośredni o wzorze (II) reakcji z odpowiednim kwasem takim jak np. kwas trifluorooctowy. Powyższą reakcję prowadzi się w odpowiednim rozpuszczalniku, takim jak np. metanol.
1b) związki pośrednie o wzorze (II) można wytworzyć poddając związek pośredni o wzorze (III) reakcji ze związkiem pośrednim o wzorze (IV) w obecności odpowiedniego odczynnika takiego jak monochlorowodorek N'-(etylokarboimidoilo)-N,N-dimetylo-1,3-propanodiaminy (EDC) i 1-hydroksy-1H-benzotriazol (HOBT). Reakcję można prowadzić w odpowiednim rozpuszczalniku takim jak mieszanina DCM i THF.
1c) związki pośrednie o wzorze (III) można wytworzyć poddając związek pośredni o wzorze (V) reakcji z odpowiednią zasadą taką jak NaOH w obecności odpowiedniego rozpuszczalnika takiego jak etanol.
PL 214 279 B1
10 10 2) Związki o wzorze (I), w którym R1 oznacza -NHC(O)C=N (OH)R10, przy czym R10 oznacza aryloC1-6alkil w odniesieniu do powyższych związków określonych wzorem (1-b), można wytworzyć poddając związek pośredni o wzorze (VI) reakcji z odpowiednim kwasem takim jak np. kwas metanosulfonowy. Powyższą reakcję prowadzi się w odpowiednim rozpuszczalniku takim jak np. metanol.
Związki o wzorze (I) można także dogodnie wytworzyć, stosując techniki syntezy w fazie stałej. Na ogół, synteza w fazie stałej wymaga przeprowadzenia syntezy z zastosowaniem związku pośredniego na nośniku polimerowym. Ten związek pośredni na nośniku polimerowym można następnie wykorzystywać w wielu etapach syntezy. Po każdym etapie, w celu usunięcia zanieczyszczeń, żywicę przesącza się i wielokrotnie przemywa różnymi rozpuszczalnikami. W każdym etapie żywicę można rozdzielić, aby w następnym etapie reagowała z różnymi związkami pośrednimi, umożliwiając syntezę wielu związków. Po ostatnim etapie żywicę traktuje się reagentem lub przeprowadza się oderwanie żywicy od próbki związku. Bardziej szczegółowe wyjaśnienie technik stosowanych w chemii fazy stałej opisano np. w „The Combinatorial Index” (B. Bunin, Academic Press) i Novabiochem 1999 Catalogue & Peptide Synthesis Handbook (Novabiochem AG, Switzerland), obie publikacje wprowadzono tu na zasadzie odsyłacza.
Związki o wzorze (I) i pewne związki pośrednie mogą mieć, co najmniej jedno centrum stereogeniczne i może ono występować w konfiguracji R lub S.
Wytworzone powyżej opisanymi sposobami związki o wzorze (I) są na ogół racemicznymi mieszaninami enancjomerów, które można rozdzielać następującymi metodami znanymi w dziedzinie. Racemiczne związki o wzorze (I) na drodze reakcji z odpowiednim kwasem chiralnym przekształca się w odpowiednią stałą formę diastereomeryczną. Powyższe stałe formy diastereomeryczne rozdziela się później, np. metodą krystalizacji selektywnej lub frakcjonowanej i enancjomery uwalnia się potem działając ługiem. Alternatywny sposób rozdzielania enancjomerycznych form związków o wzorze (I) wykorzystuje metodę chromatografii cieczowej z zastosowaniem chiralnej fazy stacjonarnej. Takie czyste stereochemiczne formy izomeryczne mogą także pochodzić z czystych stereochemicznych form izomerycznych odpowiednich substancji wyjściowych, pod warunkiem, że reakcja przebiega stereospecyficznie. Korzystnie jeśli pożądany jest specyficzny stereoizomer, to związek syntetyzuje się metodami stereospecyficznymi. W tych metodach korzystnie wykorzystuje się enancjomerycznie czyste substancje wyjściowe.
Związki o wzorze (I), farmaceutycznie dopuszczalne sole addycyjne z kwasami i ich formy stereoizomeryczne wykazują cenne właściwości farmakologiczne w tym względzie, że hamują deacetylazę histonową (HDAC).
Związki według wynalazku znajdują zastosowanie do hamowania nieprawidłowej proliferacji komórkowej, w tym komórek transformowanych, przez podawanie w skutecznej ilości związku według wynalazku. Nieprawidłowa proliferacja komórek oznacza proliferację niezależną od normalnych mechanizmów regulacyjnych (np. utrata hamowania kontaktowego).
PL 214 279 B1
Mechanizmy te obejmują hamowanie rozrostu guza zarówno bezpośrednie na drodze wywołania zahamowania rozrostu, końcowego różnicowania i/lub apoptozy komórek nowotworu i pośrednie na drodze hamowania neowaskularyzacji guzów.
Tak więc, związki według wynalazku znajdują także zastosowanie do hamowania rozrostu guza przez podawanie pacjentowi w skutecznej ilości związku według wynalazku, np. ssakowi (a dokładniej człowiekowi) wymagającemu takiego leczenia. Przykłady guzów, których rozrost można hamować obejmują między innymi takie jak, rak płuca (np. gruczolakorak a w tym niedrobnokomórkowy rak płuca), nowotwory trzustki (np. rak trzustki taki jak np. rak części wydzielniczej trzustki), nowotwory okrężnicy (np. nowotwory jelita grubego, takie jak np. gruczolakorak okrężnicy i gruczolak okrężnicy), rak prostaty włącznie z zaawansowanym stadium choroby, nowotwory układu krwiotwórczego pochodzenia limfoidalnego (np. ostra białaczka limfocytarna, chłoniak z komórek B, chłoniak Burkitt'a, białaczki szpikowe (np. ostra białaczka szpikowa (AML)), rak pęcherzykowy tarczycy, zespół mielodysplastyczny (MDS)), guzy pochodzenia mezenchymalnego (np. włókniakomięsaki i mięśniakomięsaki prążkowane), czerniaki, potworniaki złośliwe, nerwiaki niedojrzałe, glejaki, łagodny nowotwór skóry (np. rogowiaki kolczystokomórkowe), nowotwory sutka (np. zaawansowane stadia nowotworów sutka), rak nerki, rak jajnika, rak pęcherza i rak naskórka.
Związek według wynalazku można stosować do innych celów terapeutycznych, np.:
a) uwrażliwienia guzów na radioterapię przez podawanie związku według wynalazku przed, podczas lub po napromienianiu guza w celu zwalczenia raka;
b) leczenia zwyrodnień stawów i patologii układu kostnego, takich jak reumatoidalne zapalenie stawów, zapalenie kości i stawów, młodzieńcze zapalenie stawów, dna, zapalenie wielu stawów, łuszczycowe zapalenie stawów, zesztywniające zapalenie kręgosłupa i rumieniowaty toczeń układowy;
c) hamowania proliferacji komórek mięśni gładkich obejmującej naczyniowe zaburzenia proliferacyjne, miażdżycę naczyń i restenozę;
d) leczenia stanów zapalnych i schorzeń skórnych, takich jak wrzodziejące zapalenie okrężnicy, choroba Crohna, alergiczny nieżyt nosa, reakcja przeszczep przeciwko biorcy, zapalenie spojówek, astma, ARDS, choroba Behcet'a, odrzucenie przeszczepu, pokrzywka, alergiczne zapalenie skóry, łysienie plackowate, twardzina, wysypka, egzema, zapalenie skórno-mięśniowe, trądzik, cukrzyca, rumieniowaty toczeń układowy, choroba Kawasaki, stwardnienie rozsiane, rozedma, zwłóknienie torbielowate i przewlekłe zapalenie oskrzeli;
e) leczenia endometriozy, włókniakomięśniaków gładkich macicy, krwawienia z macicy z powodu zaburzeń czynnościowych i hiperplazji śluzówki macicy;
f) leczenia waskularyzacji gałkowej w tym waskulopatii z wpływem na naczynia siatkówki i naczyniówki;
g) leczenia zaburzenia czynności serca;
h) hamowania stanów z występującym upośledzeniem układu immunologicznego jak np. zwalczanie infekcji HIV;
i) leczenia zaburzenia czynności nerek;
j) hamowania zaburzeń wydzielania wewnętrznego;
k) hamowania zaburzenia w procesie glukoneogenezy;
l) leczenia neuropatologii np. choroby Parkinsona lub neuropatologii prowadzącej do zaburzenia poznawczego, np. choroby Alzheimera lub chorób neuronalnych związanych z poliglutaminą;
m) hamowania patologii nerwowo-mięśniowej, np. stwardnienia zanikowego bocznego;
n) leczenia zaniku mięśni kręgosłupa;
o) leczenia innych stanów patologicznych dających się leczyć poprzez nasilenie ekspresji genu;
p) wspomożenia terapii genowej.
Zatem, przedmiotem wynalazku są związki o wzorze (I) do zastosowania jako lek, jak również zastosowanie tych związków o wzorze (I) do wytwarzania leku do leczenia jednego lub więcej spośród wymienionych powyżej stanów.
Związki o wzorze (I), farmaceutycznie dopuszczalne sole addycyjne z kwasami i ich formy stereoizomeryczne mogą posiadać cenne właściwości diagnostyczne takie, że można je stosować do wykrywania lub identyfikacji HDAC w próbce biologicznej, w tym określenia powstawania kompleksu znakowanego związku i HDAC.
Sposoby wykrywania lub identyfikacji mogą opierać się na zastosowaniu związków znakowanych z zastosowaniem środków znakujących takich jak radioizotopy, enzymy, substancje fluorescen-i óc ΙΟΊ o ή λ cyjne, substancje świecące itp. Przykłady radioizotopów obejmują 125I, 131I, 3H i 14C. Enzymy można
PL 214 279 B1 zazwyczaj wykryć sprzęgając je z odpowiednim substratem, który z kolei katalizuje wykrywalną reakcję. Przykłady takich obejmują, np. beta- galaktozydazę, beta-glukozydazę, alkaliczną fosfatazę, peroksydazę i dehydrogenazę jabłczanową, korzystnie peroksydazę chrzanową. Substancje świecące obejmują, np. luminol, pochodne luminolu, lucyferynę, ekworynę i lucyferazę.
Próbki biologiczne można zdefiniować jako tkankę ciała lub płyny fizjologiczne. Przykłady płynów fizjologicznych obejmują płyn mózgowo-rdzeniowy, krew, osocze, surowicę, mocz, plwocinę, ślinę itp.
Z uwagi na swoje przydatne właściwości farmakologiczne, związki według wynalazku można komponować w różne postacie farmaceutyczne do podawania.
W celu przygotowania kompozycji farmaceutycznych według wynalazku, konkretny związek w skutecznej ilości, w formie soli addycyjnej z zasadą lub kwasem - substancję czynną łączy się w jednorodnej mieszaninie z farmaceutycznie dopuszczalnym nośnikiem, który to nośnik może mieć wiele postaci zależnie od pożądanej postaci preparatu do podawania. Pożądane jest, aby te kompozycje farmaceutyczne występowały w jednostkowej postaci dawkowania odpowiedniej, korzystnie, do podawania doustnego, doodbytniczego, przezskórnego, lub poprzez zastrzyk parenteralny. Przykładowo przy przygotowywaniu kompozycji w doustnej postaci dawkowania, można stosować dowolne spośród typowych mediów farmaceutycznych, takich jak np. woda, glikole, oleje, alkohole itp. W przypadku preparatów płynnych do podawania doustnego, takich jak zawiesiny, syropy, eliksiry i roztwory; lub nośniki stałe takie jak skrobie, cukry, kaolin, lubrikanty, spoiwa, środki rozdrabniające itp. w przypadku proszków, pigułek, kapsułek i tabletek.
Ze względu na łatwość podawania, tabletki i kapsułki są najkorzystniejszą doustną jednostkową postacią dawkowania, w przypadku której oczywiście stosuje się stałe nośniki farmaceutyczne. W przypadku kompozycji pozajelitowych, nośnikiem będzie zazwyczaj jałowa woda, co najmniej w dużej części, chociaż mogą występować inne składniki, np. wspomagające rozpuszczalność. Można wytworzyć np. roztwory do wstrzykiwania, w których nośnik zawiera roztwór solanki, roztwór glukozy lub mieszaninę solanki i roztwór glukozy. Można wytwarzać także zawiesiny do wstrzykiwania, w którym to przypadku można stosować odpowiednie ciekłe nośniki, emulgatory itp. W kompozycjach odpowiednich do podawania przezskórnego, nośnik zawiera ewentualnie środek zwiększający przenikanie i/lub odpowiedni środek zwilżający, ewentualnie połączony z odpowiednimi dodatkami o dowolnej własności w mniejszych proporcjach, które to dodatki nie wykazują znaczącego niepożądanego działania na skórę. Dodatki te mogą ułatwiać podawanie doskórne i/lub mogą być pomocne w przygotowywaniu pożądanych kompozycji. Kompozycje te można podawać różnymi sposobami, np. w postaci opatrunku przezskórnego, w postaci preparatu do nakraplania lub w postaci maści.
Szczególnie korzystne jest przygotowanie wcześniej wymienionych kompozycji farmaceutycznych w jednostkowej postaci dawkowania ze względu na łatwość podawania i jednolitość dawki. Stosowany w opisie i zastrzeżeniach patentowych termin jednostkowa postać dawkowania odnosi się do fizycznie oddzielnych jednostek odpowiednich jako dawki jednostkowe, przy czym każda jednostka zawiera wstępnie określoną ilość substancji czynnej, obliczonej w celu uzyskania pożądanego efektu terapeutycznego, w połączeniu z wymaganym nośnikiem farmaceutycznym. Przykładami takich jednostkowych postaci dawkowania są tabletki (w tym tabletki rowkowane lub powlekane), kapsułki, pigułki, saszetki z proszkiem, opłatki, roztwory lub zawiesiny do wstrzykiwania, porcje preparatu wielkości łyżeczki do herbaty, porcje preparatu wielkości łyżki stołowej itp. i ich oddzielone wielokrotności.
Fachowcy w dziedzinie z łatwością określą skuteczną ilość opierając się na wynikach testu przedstawionego poniżej. Na ogół uznaje się, że terapeutycznie skuteczna ilość wynosiłaby od 0,005 mg/kg do 100 mg/kg masy ciała i w szczególności od 0,005 mg/kg do 10 mg/kg masy ciała. Odpowiednie może być zastosowanie wymaganej dawki leku w dwóch, trzech, czterech lub więcej poddawkach w odpowiednich przedziałach czasu w ciągu dnia. Takie poddawki można komponować jako jednostkowe postacie dawkowania, np. zawierające 0,5 do 500 mg a w szczególności 10 mg do 500 mg substancji czynnej na jednostkową postać dawkowania.
Związki według wynalazku można sporządzać w postaci kombinacji inhibitora HDAC z innym środkiem przeciwnowotworowym, szczególnie do zastosowania jako lek, dokładniej w leczeniu raka lub chorób pokrewnych.
W celu leczenia powyższych stanów, korzystne może być stosowanie związków według wynalazku w połączeniu z jednym lub więcej innymi środkami leczniczymi, dokładniej, innymi środkami przeciwnowotworowymi.
PL 214 279 B1
Przykłady środków przeciwnowotworowych obejmują takie jak:
- koordynacyjne związki platyny np. cisplatyna, karboplatyna lub oksaliplatyna;
- taksany np. paklitaksel lub docetaksel;
- inhibitory topoizomerazy I takie jak kamptotecyny np. irinotekan lub topotekan;
- inhibitory topoizomerazy II takie jak przeciwnowotworowe pochodne podofilotoksyny np. etopozyd lub tenipozyd;
- przeciwnowotworowe alkaloidy vinca np. winblastyna, winkrystyna lub winorelbina;
- przeciwnowotworowe pochodne nukleozydów np. 5-fluorouracyl, gemcytabina lub kapecytabina;
- środki alkilujące, takie jak iperyt azotowy lub nitrozomocznik np. cyklofosfamid, chlorambucil, karmustyna lub lomustyna;
- przeciwnowotworowe pochodne antracykliny np. daunorubicyna, doksorubicyna, idarubicyna lub mitoksantron;
- przeciwciała HER2 np. trastuzumab;
- antagoniści receptora estrogenowego lub selektywne modulatory receptora estrogenowego np. tamoksyfen, toremifen, droloksyfen, Faslodex lub raloksyfen;
- inhibitory aromatazy, takie jak eksemestan, anastrozol, letrozol i worozol;
- środki różnicujące, takie jak retinoidy, witamina D i środki blokujące metabolizm kwasu retynowego (RAMBA) np. Accutane;
- inhibitory metylotransferazy DNA np. azacytydyna;
- inhibitory kinazy np. flawoperydol, mezylan imatynibu lub gefitinib; inhibitory farnezylotransferazy; lub
- inne inhibitory HDAC.
Stosowany tu termin „związek koordynacyjny platyny” oznacza dowolny hamujący proliferację komórek guza związek koordynacyjny platyny z platyną w formie jonu.
Termin „taksany” oznacza klasę związków posiadającą układ pierścieniowy taksanu i pokrewne lub pochodzące z ekstraktów z pewnych gatunków cisa (Taxus).
Stosowany tu termin „inhibitory topizomerazy” oznacza enzymy zdolne zmienić topologię DNA w komórkach eukariotycznych. Mają one podstawowe znaczenie dla istotnych funkcji komórkowych i proliferacji komórki. W komórkach eukariotycznych występują dwie klasy topoizomeraz, mianowicie typ I i typ II. Topoizomeraza I jest enzymem monomerycznym o masie cząsteczkowej w przybliżeniu 100000. Enzym wiąże się z DNA i powoduje przejściowe zerwanie jednej nici, rozplata podwójną helisę (lub umożliwia jej rozplecenie) po czym, przed odłączeniem się od nici DNA, łączy ponownie zerwane fragmenty. Topoizomeraza II ma podobny mechanizm działania pociągający za sobą powstawanie pęknięć w nici DNA lub wytwarzanie wolnych rodników.
Stosowany tu termin „kamptotecyny” oznacza związki pokrewne lub pochodzące od macierzystej kamptotecyny, która jest nierozpuszczalnym w wodzie alkaloidem pochodzącym z chińskiego drzewa Camptothecin acuminata i indyjskiego drzewa Nothapodytes foetida.
Stosowany tu termin „podofilotoksyny” oznacza związki pokrewne lub pochodzące od macierzystej podofilotoksyny, którą ekstrahuje się z mandragory.
Stosowany tu termin „przeciwnowotworowe alkaloidy vinca” oznacza związki pokrewne lub pochodzące z ekstraktów z barwinka (Vinca rosea).
Termin „środki alkilujące” obejmuje zróżnicowaną grupę środków chemicznych o wspólnej właściwości takiej, że wydajnie dołączają, w warunkach fizjologicznych, grupy alkilowe do makrocząsteczek o podstawowej funkcji biologicznej takich jak DNA. Tak jak większość ważniejszych środków takich jak iperyty azotowe i nitrozomoczniki, aktywne grupy alkilujące wytwarzane są in vivo w wyniku złożonych reakcji rozkładu, z których niektóre są reakcjami enzymatycznymi. Najważniejszą funkcją farmakologiczną środków alkilujących jest zakłócanie fundamentalnych mechanizmów związanych z proliferacją komórkową w szczególności syntezy DNA i podziału komórki. Zdolność środków alkilujących do upośledzania funkcji i spójności DNA w szybko proliferujących tkankach stanowi podstawę ich zastosowania terapeutycznego i wielu właściwości toksycznych.
Termin „przeciwnowotworowe pochodne antracykliny” obejmuje antybiotyki otrzymane z grzyba Strep. peuticus var. caesius i ich pochodnych, charakteryzujące się tym, że posiadają pierścień tetracyklinowy z nietypowym cukrem, daunozaminą, przyłączonym poprzez wiązanie glikozydowe.
Wykazano, że amplifikacja ludzkiego białka receptora 2 naskórkowego czynnika wzrostu (HER 2) w komórkach pierwotnego raka sutka jest skorelowana ze złym rokowaniem klinicznym dla pewnych pacjentów. Trastuzumab jest silnie oczyszczonym pochodzącym ze zrekombinowanego DNA humani12
PL 214 279 B1 zowanym monoklonalnym przeciwciałem IgG1 kappa, które łączy się z wysokim powinowactwem i specyficznością z domeną pozakomórkową receptora HER2.
Wiele nowotworów sutka posiada receptory estrogenowe i estrogen może stymulować rozrost tych guzów. Stosowane tu terminy „antagoniści receptora estrogenowego” i „selektywne modulatory receptora estrogenowego” oznaczają konkurencyjne inhibitory wiązania estradiolu z receptorem estrogenowym (ER). Selektywne modulatory receptora estrogenowego, wiążąc się z ER indukują zmianę trójwymiarowej struktury receptora, hamując jego wiązanie z fragmentem DNA wrażliwym na estrogen (ERE).
U kobiet po menopauzie, głównym źródłem krążącego estrogenu jest estrogen powstający w wyniku konwersji przez aromatazę w tkankach obwodowych androgenów nadnerczowych i jajnikowych (androstenodion i testosteron) do estrogenów (estron i estradiol). Pozbawienie organizmu estrogenu na skutek hamowania lub inaktywacji aromatazy jest skutecznym i selektywnym sposobem leczenia niektórych pacjentek po menopauzie z nowotworami sutka zależnymi od hormonów.
Stosowany tu termin „środek przeciwestrogenowy” obejmuje nie tylko antagonistów receptora estrogenowego i selektywnych modulatorów receptora estrogenowego lecz także inhibitory aromatazy jak to omówiono powyżej.
Termin „środki różnicujące” obejmuje związki, które mogą w różny sposób hamować proliferację komórkową i indukować różnicowanie. Wiadomo, że witamina D i retinoidy ogrywają główną rolę w regulacji proliferacji i różnicowania wielu prawidłowych i złośliwych typów komórek. Środki blokujące metabolizm kwasu retynowego (RAMBA) zwiększają poziom endogennych kwasów retynowych hamując katabolizm kwasów retynowych, w którym pośredniczy cytochrom P450.
Pośród najpowszechniejszych nieprawidłowości powodujących u człowieka powstawanie nowotworu są zmiany w metylacji DNA. Nadmierna metylacja promotorów wybranych genów wiąże się zazwyczaj z inaktywacją tych genów.
Stosowany tu termin „inhibitory metylotransferazy” DNA oznacza związki działające na drodze hamowania farmakologicznego metylotransferazy DNA i ponownej aktywacji ekspresji genów supresorowych guza.
Termin „inhibitory kinazy obejmuje silne inhibitory kinaz zaangażowane w cykl komórkowy i programowaną śmierć komórki (apoptoza).
Stosowany tu termin „inhibitory farnezylotransferazy” obejmuje związki zaprojektowane tak, aby zapobiegały dołączeniu grupy farnezylowej do Ras i innych białek wewnątrzkomórkowych. Wykazano, że mają one wpływ na proliferację i przeżywalność złośliwych komórek.
Termin „inne inhibitory HDAC” obejmuje między innymi: krótkołańcuchowe kwasy tłuszczowe np. maślan, 4-fenylomaślan lub kwas walproinowy; kwasy hydroksamowe np. anilid kwasu suberoilohydroksamowego (SAHA), biarylohydroksamian A-161906, bicykliczne arylo-N-hydroksykarboksyamidy, piroksamid, CG-1521, PXD-101, kwas sulfonoamidohydroksamowy, LAQ-824, trichostatyna A (TSA), oxamflatin, scriptaid, kwas m-karboksycynamonowy, kwas bishydroksamowy, lub trapoxin analog kwasu hydroksamowego; cykliczne tetrapeptydy np. trapoxin, apidycyna lub depsipeptide; benzamidy np. MS-275 lub Cl-994, lub depudecin.
W celu leczenia raka można pacjentowi podawać związki według wynalazku, jak to opisano powyżej, w połączeniu z napromienianiem. Napromienianie oznacza stosowanie promieniowania jonizującego, a w szczególności promieniowania gamma, zwłaszcza emitowanego przez akceleratory liniowe lub przez radionuklidy, które znajdują dziś powszechne zastosowanie. Napromienianie guza przy zastosowaniu radionuklidów może być zewnętrzne lub wewnętrzne.
Związki według wynalazku będące inhibitorami HDAC można podawać w postaci kombinacji ze środkiem przeciwrakowym w celu hamowania proliferacji komórek guza.
Tak więc, przez podanie pacjentowi skutecznej ilości wyżej opisanej kombinacji można uzyskać hamowanie nieprawidłowej proliferacji komórek, włącznie z komórkami transformowanymi.
Inny środek leczniczy i inhibitor HDAC można podawać jednocześnie (np. w kompozycjach oddzielnych lub jednostkowych) lub kolejno w dowolnej kolejności. W drugim przypadku, dwa związki będą podawane przez okres czasu, w ilości i sposobem wystarczającym do zapewnienia osiągnięcia efektu korzystnego lub synergistycznego. Należy rozumieć, że korzystny sposób, kolejność podawania, odpowiednie ilości dawek i reżimy dla każdego składnika kombinacji będą zależały od konkretnego, podawanego innego środka leczniczego i inhibitora HDAC, sposobu ich podawania, konkretnego typu leczonego guza i konkretnego leczonego pacjenta. Fachowcy w dziedzinie, stosując typowe
PL 214 279 B1 metody mogą, wykorzystując zamieszczone tu informacje, łatwo określić optymalny sposób, kolejność podawania, ilości dawek oraz reżim.
Związek koordynacyjny platyny korzystnie podaje się w dawce 1 do 500 mg na metr kwadrato22 wy (mg/m2) powierzchni ciała, np. 50 do 400 mg/m2, konkretnie dla cisplatyny w dawce około 22 mg/m2 i dla karboplatyny w dawce około 300 mg/m2 na przebieg leczenia.
2
Taksan korzystnie podaje się w dawce 50 do 400 mg na metr kwadratowy (mg/m2) powierzchni 2 ciała, np. 75 do 250 mg/m2, konkretnie dla paklitakselu w dawce około 175 do 250 mg/m i dla doce2 takselu w dawce około 75 do 150 mg/m2 na przebieg leczenia.
2
Kamptotecynę korzystnie podaje się w dawce 0,1 do 400 mg na metr kwadratowy (mg/m2) po22 wierzchni ciała, np. 1 do 300 mg/m2, konkretnie dla irinotekanu w dawce około 100 do 350 mg/m2 i dla 2 topotekanu w dawce około 1 do 2 mg/m2 na przebieg leczenia.
Przeciwnowotworową pochodną podofilotoksyny korzystnie podaje się w dawce 30 do 300 mg 22 na metr kwadratowy (mg/m2) powierzchni ciała, np. 50 do 250 mg/m2, konkretnie dla etopozydu 22 w dawce około 35 do 100 mg/m2 i dla tenipozydu w dawce około 50 do 250 mg/m2 na przebieg leczenia.
Przeciwnowotworowy alkaloid vinca korzystnie podaje się w dawce 2 do 30 mg na metr kwadra22 towy (mg/m2) powierzchni ciała, konkretnie dla winblastyny w dawce około 3 do 12 mg/m2, dla winkry22 styny w dawce około 1 do 2 mg/m2 i dla winorelbiny w dawce około 10 do 30 mg/m2 na przebieg leczenia.
Przeciwnowotworową pochodną nukleozydu korzystnie podaje się w dawce 200 do 2500 mg na 22 metr kwadratowy (mg/m2) powierzchni ciała, np. 700 do 1500 mg/m2, konkretnie dla 5-FU w dawce 22
200 do 500 mg/m2, dla gemcytabiny w dawce około 800 do 1200 mg/m2 i dla kapecytabiny w dawce 2 około 1000 do 2500 mg/m2 na przebieg leczenia.
Środki alkilujące, takie jak iperyt azotowy lub nitrozomocznik korzystnie podaje się w dawce 100 22 do 500 mg na metr kwadratowy (mg/m2) powierzchni ciała, np. 120 do 200 mg/m2, konkretnie dla cy2 klofosfamidu w dawce około 100 do 500 mg/m2, dla chlorambucilu w dawce około 0,1 do 0,2 mg/kg, 22 dla karmustyny w dawce około 150 do 200 mg/m2 i dla lomustyny w dawce około 100 do 150 mg/m2 na przebieg leczenia.
Przeciwnowotworową pochodną antracykliny korzystnie podaje się w dawce 10 do 75 mg na 22 metr kwadratowy (mg/m2) powierzchni ciała, np. 15 do 60 mg/m2, konkretnie dla doksorubicyny 22 w dawce około 40 do 75 mg/m2, dla daunorubicyny w dawce około 25 do 45 mg/m2 i dla idarubicyny 2 w dawce około 10 do 15 mg/m2 na przebieg leczenia.
2
Trastuzumab korzystnie podaje się w dawce 1 do 5 mg na metr kwadratowy (mg/m2) po2 wierzchni ciała, szczególnie 2 do 4 mg/m2 na przebieg leczenia.
Środek przeciwestrogenowy korzystnie podaje się w dawce około 1 do 100 mg na dzień zależnie od konkretnego środka i leczonego stanu. Tamoksyfen korzystnie podaje się doustnie w dawce 5 do 50 mg, korzystnie 10 do 20 mg dwa razy dziennie, kontynuując leczenie do chwili uzyskania efektu terapeutycznego i jego utrzymania. Toremifen korzystnie podaje się doustnie w dawce około 60 mg raz dziennie, kontynuując leczenie do chwili uzyskania efektu terapeutycznego i jego utrzymania. Anastrozol korzystnie podaje się doustnie w dawce około 1 mg raz dziennie.
Droloksyfen korzystnie podaje się doustnie w dawce około 20-100 mg raz dziennie. Raloksyfen korzystnie podaje się doustnie w dawce około 60 mg raz dziennie. Eksemestan korzystnie podaje się doustnie w dawce około 25 mg raz dziennie.
Dawki te można podawać np. jednokrotnie, dwukrotnie lub więcej razy w trakcie leczenia, które może być powtarzane np. co 7, 14, 21 lub 28 dni.
Z uwagi na swoje przydatne właściwości farmakologiczne, składniki kombinacji, tj. inny środek leczniczy i inhibitor HDAC można komponować w różne postacie farmaceutyczne. Składniki można komponować oddzielnie w osobnych kompozycjach farmaceutycznych lub w jednostkowej kompozycji farmaceutycznej zawierającej oba składniki.
Tak więc, produkt obejmujący jako pierwszą substancję czynną inhibitor HDAC według wynalazku i jako drugą substancję czynną środek przeciwnowotworowy, można sporządzać w postaci preparatu łączonego do jednoczesnego, oddzielnego lub kolejnego zastosowania w leczeniu pacjentów cierpiących na raka.
Część doświadczalna
Następujące przykłady podano dla ilustracji.
Użyty poniżej skrót „BINAP oznacza 2,2'-bis(difenylofosfino)-1,1'-binaftyl, „BSA” oznacza surowicę albuminy bydlęcej, „DCM” oznacza dichlorometan, „DIG” oznacza diizopropylokarbodiimid,
PL 214 279 B1 „DIEA” oznacza diizopropyloetyloaminę, „DIPE” oznacza eter diizopropylowy, „DMAP” oznacza dimetyloaminopirydynę, „DMF” oznacza dimetyloformamid, „EDC” oznacza monochlorowodorek N'-(etylokarboimidoilo)-N,N-dimetylo-1,3-propanodiaminy, „DMSO” oznacza dimetylosulfotlenek, „EtOAc” oznacza octan etylu, „Hepes” oznacza kwas 4-(-2-hydroksyetylo)-1-piperazynoetanosulfonowy, „iPrOH oznacza izopropyl, „HOST” oznacza 1-hydroksy-1H-benzotriazol, „MeOH” oznacza metanol, „EtOH” oznacza etanol, „NMP oznacza N-metylopirolidynon, „TEA” oznacza trietyloaminę, „TFA oznacza kwas trifluorooctowy, „TIS” oznacza triizopropylosilan, „THF” oznacza tetrahydrofuran i „THP” oznacza tetrahydropiranyl.
A. Otrzymywanie związków pośrednich
P r z y k ł a d A1
a) Do roztworu estru etylowego kwasu 4-amino-1-piperydynokarboksylowego (0,044 mola, 7,6 g) w DCM (110 ml), w temperaturze 10°C, utrzymując przepływ azotu, dodano TEA (0,088 mola, 12,4 ml). Następnie kroplami dodano roztwór chlorku 2-naftalenosulfonylu (0,044 mola) w DCM (50 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 10°C przez 1 godzinę i 30 minut, wylano do wody z lodem i ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość rozpuszczono w eterze dietylowym, osad odsączono i osuszono, uzyskując 13,8 g estru etylowego kwasu 4-[(2-naftalenylosulfonylo)amino]-1-piperydynokarboksylowego, temperatura topnienia 128°C, związek pośredni 1.
b) Mieszaninę związku pośredniego 1 (0,072 mola) w 12N HCl (290 ml) mieszano i ogrzewano w temperaturze wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 48 godzin, następnie ochłodzono do temperatury pokojowej, wylano do wody z lodem i zalkalizowano stosując NH4OH. Osad odsączono, przemyto wodą, a następnie eterem dietylowym i osuszono, uzyskując 15,78 g (76%) N-4-piperydynylo-2-naftalenesulfonoamidu, temperatura topnienia 172°C, związek pośredni 2.
c) Do roztworu związku pośredniego 2 (0,0033 mola) w THF 20 (10 ml), w temperaturze pokojowej, utrzymując przepływ azotu, porcjami dodano NaH 60% (0,0066 mola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę, następnie ochłodzono do temperatury 0°C i kroplami szybko dodano roztwór estru etylowego kwasu 2-(metylosulfonylo)-5-pirymidynokarboksylowego (0,0043 mola) w THF (8 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 2 godziny, wylano do wody z lodem i ekstrahowano EtOAc. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4, przesączono i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość (1,64 g) krystalizowano z Cl3OH/eter dietylowy. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 0,925 g (63%) estru etylowego kwasu 2-[4-[(2-naftalenylosulfonylo)amino]-1-piperydynylo]-5-pirymidynokarboksylowego, związek pośredni 3.
d) Mieszaninę związku pośredniego 3 (0,0021 mola) i wodorotlenku potasu (0,0084 mola) w etanolu (20 ml) mieszano i ogrzewano w temperaturze wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez noc, następnie ochłodzono do temperatury pokojowej, wylano do wody z lodem i zakwaszono 3N HCl. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 0,66 g (76%) kwasu 2-[4-[(2-naftalenylosulfonylo)amino]-1-piperydynylo]-5-pirymidynokarboksylowego, temperatura topnienia powyżej 260°C, związek pośredni 4.
e) Do roztworu związku pośredniego 4 (0,0014 mola) w DCM/THF 50/50 (20 ml), w temperaturze pokojowej, utrzymując przepływ azotu, dodano TEA (0,0019 mola), chlorowodorek 1-(3-dimetyloaminopropylo)-3-etylokarbodimidu (0,0019 mola), 1-hydroksybenzotriazol (0,0019 mola) i O-(tetrahydro-2H-piran-2-ylo)-hydroksyloaminę (0,0019 mola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 24 godziny, wylano do wody z lodem i dodano DCM. Osad odsączono, przemyto wodą i osuszono, uzyskując 0,261 g (34%) 2-[4-[(2-naftalenylosulfonylo)amino]-1-piperydynylo]-N-[(tetrahydro-2H-piran-2-ylo)oksy]-5-pirymidynakarboksyamidu, temperatura topnienia 226°C, związek pośredni 5.
P r z y k ł a d A2
a) Wytwarzanie o
ΌΗ związek pośredni 6
PL 214 279 B1
Do mieszaniny kwasu α-oksobenzenpropanowego (0,0078 mola) w pirydynie (12 ml) i EtOH (23 ml), w temperaturze pokojowej, dodano (O-(tetrahydro-2H-piran-2-ylo)hydroksyloaminę (0,0085 mola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Rozpuszczalnik odparowano do sucha. Pozostałość (2,6 g) oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (15-40 μm) (eluent: CH2Cl2/CH3OH/NH4OH 85/15/1 70/30/3). Czyste frakcje zebrano i rozpuszczalnik odparowano, uzyskując 1,7 g (83%) związku pośredniego 6.
b) Wytwarzanie
związek pośredni 7
Do mieszaniny 1-(4-nitrofenylo)-4-piperydynaminy (0,0071 mola) i TEA (0,0085 mola) w DCM (15 ml), w temperaturze 5°C, utrzymując przepływ azotu, dodano chlorek [1 ,1'-bifenylo]-4-sulfonylu (0,0085 mola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 18 godzin, po czym dodano 10% K2CO3. Mieszaninę ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano do sucha, uzyskując 4,1 g (powyżej 100%) związku pośredniego 7.
c) Wytwarzanie
związek pośredni 8
Do mieszaniny związku pośredniego 7 (0,0071 mola) w THF (140 ml), w temperaturze pokojowej, dodano chlorek tytanu (0,0568 mola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 18 godzin, wylano na lód, zalkalizowano stosując 3N NaOH, ekstrahowano DCM i przesączono przez celit. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano do sucha. Pozostałość rozpuszczono w eterze dietylowym. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 0,9 g (31%) związku pośredniego 8, temperatura topnienia 200°C.
d) Wytwarzanie
Do mieszaniny związku pośredniego 8 (0,0009 mola), związku pośredniego 6 (0,0012 mola) i HOBT (0,0012 mola), utrzymując przepływ azotu, dodano EDC (0,0012 mola). Mieszaninę reakcyjną
PL 214 279 B1 mieszano w temperaturze pokojowej przez 18 godzin, po czym dodano 10% K2CO3. Mieszaninę ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano do sucha. Pozostałość (0,94 g) oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (15-40 μm) (eluent: CH2CI2/CH3OH/NH4OH 98,5/1,5/0,1). Czyste frakcje zebrano i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość (0,5 g, 78%) krystalizowano z CH4CN/eter dietylowy. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 0,426 g (66%) związku pośredniego 9, temperatura topnienia 190°C.
P r z y k ł a d A3
a) Wytwarzanie
Do roztworu estru 1,1-dimetyloetylowego kwasu 4-(aminometylo)-1-piperydynokarboksylowego (0,014 mola) i TEA (0,022 mola) w DCM (30 ml), w temperaturze 0°C, utrzymując przepływ azotu dodano roztwór chlorku 2-naftalenosulfonylu (0,015 mola) w DCM (30 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc, wylano do wody z lodem i ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną przemyto 10% K2CO3, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość (6 g) krystalizowano z eteru dietylowego. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 4,8 g (84%) związku pośredniego 10, temperatura topnienia 148°C.
b) Wytwarzanie
Mieszaninę związku pośredniego (0,0114 mola) w 3N HCl (50 ml) i THF (10 ml) mieszano w temperaturze 80°C przez 12 godzin, wylano do wody z lodem, zalkalizowano stosując NH4OH i ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano, uzyskując 2,6 g (74%) związku pośredniego 11, temperatura topnienia 160°C.
c) Wytwarzanie
Do mieszaniny związku pośredniego 11 (0,0049 mola) w DMF (20 ml), w temperaturze 0°C, utrzymując przepływ azotu, porcjami dodano 60% wodorek sodu (0,0098 mola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę, po czym dodano roztwór estru etylowego kwasu 6-chloro-3-pirydynokarboksylowego (0,0064 mola) w DMF (10 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 80°C przez 12 godzin, następnie ochłodzono, wylano do wody z lodem i mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Osad odsączono, przemyto wodą, a następnie eterem dietylowym i osuszono, uzyskując 1,2 g (54%) związku pośredniego 12, temperatura topnienia 172°C.
PL 214 279 B1
P r z y k ł a d A4 Wytwarzanie
Do mieszaniny 1-(2-naftalenylosulfonylo)piperazyny (0,0075 mola) w THF (35 ml), w temperaturze pokojowej, porcjami dodano 60% wodorek sodu (0,015 mola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę i 30 minut, utrzymując przepływ azotu, po czym kroplami dodano roztwór ester etylowy kwasu 4-chloro-2-(metylosulfonylo)-5-pirymidynokarboksylowego (0,0098 mola) w THF (35 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 3 godziny i 30 minut, wylano do wody z lodem i ekstrahowano EtOAc. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość (4,6 g) oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (15-40 μm) (eluent: cykloheksan/EtOAc 80/20 do 20/80). Czyste frakcje zebrano i rozpuszczalnik odparowano, uzyskując 0,9 g (24%) związku pośredniego 13, temperatura topnienia 80°C.
P r z y k ł a d A5
a) Wytwarzanie
związek pośredni 14
Mieszaninę estru 1-(1,1-dimetyloetylo)-3-etylowego kwasu 4-okso-1,3-piperydynodikarboksylowego (0,02 mola), benzenometanoaminy (0, 022 mola) i Pd/C (1 g) w EtOH (100 ml) uwodorniano w temperaturze 50°C przez 48 godzin pod ciśnieniem 3 barów, a następnie przesączono przez celit. Przesącz odparowano do sucha. Pozostałość (5,9 g) oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (15-40 μm) (eluent: CH2CI2/CH3OH/NH4OH 93/7/0,5). Czyste frakcje zebrano i rozpuszczalnik odparowano, uzyskując 2,6 g (48%) związku pośredniego 14 (CIS).
b) Wytwarzanie
PL 214 279 B1
Do mieszaniny związku pośredniego 14 (0,0095 mola) i TEA (0,0134 mola) w DCM (30 ml), w temperaturze 5°C, dodano roztwór chlorku 2-naftalenosulfonylu (0,0105 mola) w DCM (10 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc, wylano do 10% K2CO3 i ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano do sucha, uzyskując 5,1 g (powyżej 100%) związku pośredniego 15 (CIS). Ten produkt użyto bezpośrednio w następnym etapie reakcji.
c) Wytwarzanie
Do mieszaniny tetrahydroglinianu litu (I) (0,0098 mola) w THF (40 ml), w temperaturze 5°C, utrzymując przepływ azotu, dodano kroplami roztwór związku pośredniego 15 (0,0089 mola) w THF (40 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 2 godziny, po czym dodano EtOAc i zimną wodę. Mieszaninę ekstrahowano EtOAc i przesączono przez celit. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano do sucha. Pozostałość (3,6 g) krystalizowano z DEPE. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 2,6 g (71%) związku pośredniego 16 (CIS), temperatura topnienia 190°C.
d) Wytwarzanie
związek pośredni 17
Mieszaninę związku pośredniego 16 (0,0061 mola) w HCl/iPrOH (50 ml) mieszano w temperaturze 50°C przez 8 godzin. Osad odsączono, przemyto eterem dietylowym i osuszono, uzyskując 1,6 g (13%) związku pośredniego 17 (CIS), temperatura topnienia 206°C.
P r z y k ł a d A6
a) Wytwarzanie
Do mieszaniny estru 1,1-dimetyloetylowego kwasu (3S-trans)-4-(aminometylo)-3-hydroksy-1-piperydynokarboksylowego i α-hydroksybenzenooctowego (1:1) (0,013 mola) i TEA (0,04 mola) w DCM (100 ml), w temperaturze 0°C, utrzymując przepływ azotu, kroplami dodano roztwór chlorku 2-naftalenosulfonylu (0,016 mola) w DCM (40 ml). Mieszaninę utrzymywano w temperaturze pokojowej, mieszano przez noc, wylano do wody z lodem i ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną
PL 214 279 B1 przemyto 10% K2CO3, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość (5,5 g) krystalizowano z układu CH3CN/DIPE. Osad odsączono i osuszono. Część (1 g) pozostałości (4,4 g, 80%) krystalizowano w gorącym CH3CN. Osad odsączono, przemyto eterem dietylowym i osuszono, uzyskując 0,3 g związku pośredniego 18 (3S-TRANS), temperatura topnienia 160°C.
b) Wytwarzanie
Do mieszaniny związku pośredniego 18 (0,0036 mola) w iPrOH (20 ml), w temperaturze 0°C, dodano HCl/iPrOH (15 ml). Mieszaninę utrzymywano w temperaturze pokojowej, mieszano i rozpuszczalnik odparowano. Dodano lód i wodę. Warstwę organiczną zalkalizowano, stosując NH4OH. Osad odsączono, przemyto eterem dietylowym i osuszono, uzyskując 0,9 g (78%) związku pośredniego 19 (3S-TRANS), temperatura topnienia 200°C.
P r z y k ł a d A7
a) Wytwarzanie
Do mieszaniny estru etylowego kwasu 4-(aminometylo)-4-hydroksy-1-piperydynokarboksylowego (0,0198 mola) i TEA (0,036 mola) w DCM (100 ml), w temperaturze 0°C, dodano kroplami roztwór chlorku 2-naftalenosulfonylu (0,0238 mola) w DCM (40 ml). Mieszaninę utrzymywano w temperaturze pokojowej przez noc, wylano do wody z lodem i ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną przemyto 10% K2CO3, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość (7,6 g) krystalizowano z układu CH3CN/DIPE. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 6,2 g (80%) związku pośredniego 20, temperatura topnienia 145°C.
b) Wytwarzanie
Mieszaninę związku pośredniego (0,0076 mola) w 6N HCl (50 ml) mieszano i ogrzewano w temperaturze wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 72 godziny, następnie ochłodzono do temperatury pokojowej i rozpuszczalnik odparowano. Mieszaninę zalkalizowano stosując 3N NaOH, dodano EtOAc i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 2,5 g (100%) związku pośredniego 21.
P r z y k ł a d A8
a) Wytwarzanie
związek pośredni 22
PL 214 279 B1
Do mieszaniny 1,4-dioksa-8-azaspiro[4,6]undekanu (0,02 mola) w DMF (30 ml), w temperaturze 5°C, utrzymując przepływ azotu, dodano porcjami 60% wodorek sodu w oleju (0,024 mola). Mieszaninę utrzymywano w temperaturze pokojowej i mieszano przez 30 minut, po czym dodano ester etylowy kwasu 6-chloro-3-pirydynokarboksylowy (0,024 mola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 90°C przez 2 godziny, dodano wodę i mieszaninę ekstrahowano kilka razy EtOAc. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano do sucha, uzyskując 4,7 g (77%) związku pośredniego 22.
b) Wytwarzanie
Mieszaninę związku pośredniego 22 (0,0153 mola) w 3N HCl 5 (45 ml) i MeOH (20 ml) mieszano i ogrzewano w temperaturze wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 18 godzin, wylano na lód, zalkalizowano stosując NH4OH i ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano do sucha. Pozostałość (2,3 g, 57%)) oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (15-35 μm) (eluent: cykloheksan/EtOAc 60/40).
Czyste frakcje zebrano i rozpuszczalnik odparowano, uzyskując 1,1 g (27%) związku pośredniego 23.
c) Wytwarzanie
Do mieszaniny związku pośredniego 23 (0,0041 mola) w MeOH (10 ml), w temperaturze 5°C, utrzymując przepływ azotu, dodano borowodorek sodu (0,0046 mola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 18 godzin. Dodano wodę. Mieszaninę ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano do sucha, uzyskując 1,2 g (100%) związku pośredniego 24.
d) Wytwarzanie
związek pośredni 25
Mieszaninę związku pośredniego 24 (0,041 mola), 1H- izoindolo-1,3(2H)-dionu (0,0054 mola) i trifenylofosfiny (0,0054 mola) w THF (10 ml) mieszano w temperaturze pokojowej, utrzymując przepływ azotu. Następnie kroplami dodano ester bis(1-metyloetylowy) kwasu diazenodikarboksylowego (0,0054 mola). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 18 godzin, po czym dodano 10% K2CO3. Mieszaninę ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano do sucha. Pozostałość (4,6 g) oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (eluent: cykloheksan/EtOAc 70/30; 15-40 μm). Dwie frakcje zebrano i rozpuszczalnik odparowano, uzyskując 0,55 g (33%) związku pośredniego 25.
e) Wytwarzanie
związek pośredni 26
PL 214 279 B1
Do mieszaniny związku pośredniego 25 (0,0014 mola) w EtOH (6 ml) dodano monohydrat hydrazyny (0,54 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano i ogrzewano w temperaturze wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 2 godziny, dodano nasycony roztwór NaCl. Mieszaninę ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano do sucha, uzyskując 0,4 g (powyżej 100% pośredniego 26.
P r z y k ł a d A9
Wytwarzanie
związek pośredni 37
Do mieszaniny N-[1-(fenylometylo)-4-piperydynylo]-4-morfolinosulfonoamidu (0,0055 mola) w 1,2-dichloroetanie (20 ml) dodano chloromrówczan 1-chloroetylu, (0,0088 mola). Mieszaninę reakcyjną mieszano i ogrzewano w temperaturze wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 18 godzin. Rozpuszczalnik odparowano do sucha. Pozostałość rozpuszczono w MeOH. Mieszaninę reakcyjną mieszano i ogrzewano w temperaturze wrzenia pod chłodnicą zwrotną w czasie weekendu. Rozpuszczalnik odparowano do sucha. Pozostałość krystalizowano z EtOH/eter dietylowy. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 0,95 g (60%) związku pośredniego 37, temperatura topnienia 240°C.
P r z y k ł a d A10
a) Wytwarzanie
związek pośredni 38
Do roztworu bromowodorku 3-bromo-1-propanoaminy (0,01 mola) w DCM (25 ml), w temperaturze 5°C, utrzymując przepływ azotu, dodano TEA (0,03 mola), a następnie roztwór chlorku 2-naftalenosulfonylu (0,01 mola) w DCM (20 ml).
Mieszaninę utrzymywano w temperaturze pokojowej, następnie mieszano przez 2 godziny i rozpuszczalnik odparowano w temperaturze 40°C do sucha, uzyskując 3,28 g (powyżej 100%) związku pośredniego 38.
b) Wytwarzanie
związek pośredni 39
Mieszaninę związku pośredniego 38 (0,01 mola), estru 1,1-dimetyloetylowego kwasu 1-piperazynokarboksylowego (0,011 mola) i węglanu potasu (0,03 mola) w acetonitrylu (40 ml) mieszano w temperaturze pokojowej przez 18 godzin. Dodano wodę. Mieszaninę ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano do sucha. Pozostałość (5,1 g) oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (15-40 μm) (eluent: DCM/MeOH 98/2). Czyste frakcje zebrano i rozpuszczalnik odparowano, uzyskując 3,7 g (85%) związku pośredniego 39.
PL 214 279 B1
c) Wytwarzanie
związek pośredni 40
Do mieszaniny związku pośredniego 39 (0,0083 mola) w THF (10 ml) dodano 3N HCl (35 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 18 godzin. Rozpuszczalnik odparowano do sucha. Pozostałość rozpuszczono w EtOH. Rozpuszczalnik odparowano do sucha. Pozostałość rozpuszczono w eterze dietylowym. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 2,8 g (91%) związku pośredniego 40. HCl, temperatura topnienia: 190°C.
P r z y k ł a d A11
a) Wytwarzanie
związek pośredni 41
Do roztworu estru 1,1-dimetyloetylowego kwasu 3-amino-1-pirolidynokarboksylowego (0,041 mola) i TEA (0,0615 mola) w DCM (200 ml), w temperaturze 10°C, utrzymując przepływ azotu, dodano roztwór chlorku 2-naftalenosulfonylu (0,043 mola) w DCM (50 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 4 godziny, następnie wylano do wody z lodem i ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość (46 g) oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (20-45 μm) (eluent: DCM/EtOAc 90/10 do DCM/MeOH 95/5). Czyste frakcje zebrano i rozpuszczalnik odparowano, uzyskując 18 g (powyżej 100%) związku pośredniego 41.
b) Wytwarzanie
związek pośredni 42
Mieszaninę związku pośredniego 41 (0,046 mola) w 3N HCl (180 ml) i THF (45 ml) mieszano w temperaturze 80°C przez noc, następnie ochłodzono do temperatury pokojowej, wylano do wody z lodem, zalkalizowano stosując NH4OH i ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość (17 g) krystalizowano z DIPE. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 9,33 g (73%) związku pośredniego 42, temperatura topnienia 158°C.
c) Wytwarzanie
związek pośredni 43
PL 214 279 B1
Do roztworu związku pośredniego 42 (0,015 mola) i węglanu potasu (0,03 mola) w acetonitrylu (100 ml), w temperaturze 10°C, kroplami dodano roztwór estru etylowego kwasu 2-(metylosulfonylo)-5-pirymidynokarboksylowego (0,0195 mola) w acetonitrylu (40 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę i 30 minut, wylano do wody z lodem i ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość (7,64 g) krystalizowano z układu CH3CN/eter dietylowy. Osad odsączono, przemyto eterem dietylowym i osuszono, uzyskując 2,21 g (35%) związku pośredniego 43, temperatura topnienia: 180°C.
P r z y k ł a d A12
Wytwarzanie
związek pośredni 44
Do roztworu 4-piperydynemetanoaminy (0,0868 mola) i węglanu potasu (0,0434 mola) w acetonitrylu (200 ml), w temperaturze 10OC, utrzymując przepływ azotu, kroplami dodano roztwór estru etylowego kwasu 2-(metylosulfonylo)-5-pirymidynokarboksylowego (0,0434 mola) w acetonitrylu (100 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 2 godziny, wylano do wody z lodem i ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość (14,18 g) oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (20-45 pm) (eluent: DCM/MeOH/NH4OH 90/10/1 do 80/20/2). Czyste frakcje zebrano i rozpuszczalnik odparowano, uzyskując 3,7 g (32%) związku pośredniego 44.
P r z y k ł a d A13
a) Wytwarzanie
związek pośredni 45
Mieszaninę estru 1,1-dimetyloetylowego kwasu 4-amino-1-piperydynokarboksylowego (0,025 mola) i TEA (0,035 mola) w DCM (30 ml) mieszano w temperaturze 5°C, utrzymując przepływ azotu. Następnie dodano roztwór chlorku 2-naftalenosulfonylu (0,0275 mola) w DCM (20 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 18 godzin. Dodano wodę. Mieszaninę ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano do sucha. Pozostałość (11,6 g) oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (20-45 pm) (eluent: DCM/MeOH 98/2). Czyste frakcje zebrano i rozpuszczalnik odparowano, uzyskując 7,5 g (77%) związku pośredniego 45.
b) Wytwarzanie
Związek pośredni 46
PL 214 279 B1
Do mieszaniny związku pośredniego 45 (0,0028 mola) w DMF (15 ml), w temperaturze pokojowej, utrzymując przepływ azotu, porcjami dodano 60% wodorek sodu w oleju (0,0033 mola). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 1 godzinę, po czym dodano jodometan (0,0033 mola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 80°C przez 3 godziny. Dodano wodę. Mieszaninę ekstrahowano EtOAc. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano do sucha.
Pozostałość (1,24 g) rozpuszczono w acetonitrylu. Mieszaninę krystalizowano z DIPE. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 0,64 g (56%) związku pośredniego 46, temperatura topnienia 130°C.
c) Wytwarzanie
związek pośredni 47
Do mieszaniny związku pośredniego 46 (0,0015 mola) w DCM (15 ml) dodano kwas trifluorooctowy (1,5 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 48 godzin, wylano do lodu i NH4CH, po czym ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano do sucha, uzyskując 0,474 g (100%) związku pośredniego 47.
P r z y k ł a d A14 a) Wytwarzanie
2-(3,5-dimetoksy-4-formylfenoksy)etoksymetylopolistyren (1 mmol, 0,66 mmola/g, 1,515 g, NovaBiochem, nr katalogowy 01-64-0261), związek pośredni 44 (1 mmol) i izopropanolan titatiu(IV) (5 mmoli) rozpuszczono w DCM (25 ml) i zawiesinę wytrząsano przez 1 godzinę. Następnie dodano acetoksyborowodorek sodu (5 mmoli) i uzyskaną mieszaninę reakcyjną wytrząsano przez noc w temperaturze otoczenia. Żywicę odsączono i przemyto dwukrotnie DCM (10 ml) i dwukrotnie MeOH (10 ml), następnie jednokrotnie DCM z 2% (objętościowo) diizopropyloetyloaminy (10 ml) i na koniec dwukrotnie DCM (10 ml). Żywicę osuszano pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze 50°C przez 2 godziny, uzyskując 1,825 g (ilościowo) związku pośredniego 48.
PL 214 279 B1
b) Wytwarzanie
związek pośredni 49
Do ochłodzonej (0°C, łaźnia lodowa) i wymieszanej zawiesiny związku pośredniego 48 (1 mmol) i TEA (1,5 mmola) w DCM (25 ml) powoli dodano roztwór chlorku 2-jodobenzenosulfonylu (1,5 mmola, 454 mg) w DCM (10 ml). Zawiesinę pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej i mieszano przez jeszcze 2 godziny. Następnie żywicę odsączono, przemyto dwukrotnie DCM (10 ml), dwukrotnie MeOH (10 ml), a następnie jeszcze raz DCM (10 ml). Żywicę osuszano pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze 50°C przez 2 godziny, uzyskując 2,0675 g (ilościowo) związku pośredniego 49.
c) Wytwarzanie
Związek pośredni 49 podzielono na 0,1 mmolowe porcje, każdą umieszczono w oddzielnej rurce Miniblock™ (firmy Bohdan, dostawca: Mettler Toledo Autochem) i dodano kwas [4-(metylosulfonylo)fenylo]boronowy (0,8 mmola) rozpuszczony w 1,4-dioksanie (2 ml) oraz wodny roztwór NaOH, 2M (1,6 mmola). Mieszaniny wytrząsano w atmosferze azotu przez 30 minut. Następnie dodano rozpuszczony w NMP (0,5 ml) PdCl2(PPh3)2 (0,02 mmola,) i mieszaninę wytrząsano przez noc w temperaturze 80°C. Układ pozostawiono do ochłodzenia do temperatury pokojowej i żywicę odsączono, przemyto DMF (3x2 ml), wodą (3x2 ml), DMF (3x2 ml), MeOH (3x2 ml) i DCM (3x2 ml). Następnie do każdego naczynia dodano mieszaninę kwas trifluorooctowy/dichlorometan/triizopropylosilan 49/49/2 (6 ml) i MiniblockTM (Bohdan) wytrząsano przez 2 godziny w temperaturze pokojowej. Mieszaniny odsączono, żywicę przemyto DCM (2 ml) i przesącz zatężono. Produkt następnie traktowano mieszaniną THF (1 ml) i wodnego roztworu NaOH (1 ml, 1N) przez 48 godzin w temperaturze pokojowej. Na koniec, mieszaninę zobojętniono wodnym roztworem HCl (1 ml, 1N), i osuszono w temperaturze 70°C, utrzymując przepływ azotu z uzyskaniem związku pośredniego 50.
PL 214 279 B1
d) Wytwarzanie
związek pośredni 51
Do związku pośredniego 50 (0,1 mmola) dodano HOBT (0,13 mmola) rozpuszczony w suchym THF (1 ml), EDCl (0,13 mmola), rozpuszczony w suchym THF (1 ml) i TEA (0,15 mmola). Mieszaninę wytrząsano w temperaturze pokojowej przez 10 minut. Następnie dodano tetrahydropirano-O-zabezpieczoną hydroksyloaminę (0,13 mmola) rozpuszczoną w suchym THF (1 ml) i mieszaninę reakcyjną wytrząsano w temperaturze pokojowej przez noc. Rozpuszczalniki odparowano i produkt oczyszczono metodą HPLC w układzie faz normalnych, uzyskując związek pośredni 51.
B Wytwarzanie związków końcowych
P r z y k ł a d B1 a) Wytwarzanie żywicy (1):
Mieszaninę dostępnej na rynku żywicy Novabiochem 01-64-0261 (200 mg, obsadzenie: 0,94 mmola/g), mono-N-Boc-4-aminopiperydyny (188 mg) i izopropanolanu tytanu (IV) (Ti (OiOr) 4) (277 μm) w DCM (4 ml) wytrząsano łagodnie przez 90 minut w temperaturze pokojowej.
Dodano triacetoksyborowodorek sodu (199 mg) i mieszaninę reakcyjną wytrząsano łagodnie przez noc w temperaturze pokojowej, następnie żywicę przesączono, przemyto jednokrotnie DCM, jednokrotnie MeOH, następnie dwa razy 10% DCM/DIEA, przemyto trzy razy DCM, następnie trzy razy metanolem, 3x DCM, 3x MeOH, 3x DCM, 3x MeOH, 3x DCM, 3x MeOH, 3x DCM, 3x MeOH. Uzyskano żywicę, którą zidentyfikowano jako żywicę (1). Żywicę (1) bez dalszego oczyszczania użyto w następnym etapie reakcji.
b) Wytwarzanie żywicy (2):
Żywicę (1) przemyto trzy razy DCM. Do żywicy (1) dodano chlorek 2-naftalenosulfonylu (215 mg) w 4 ml DCM i DIEA (307 μl), żywicę wytrząsano łagodnie przez noc, przesączono, przemyto 3x DCM, 3x MeOH, 3x DCM, 3x MeOH, 3x DCM, 3x MeOH, 3x DCM, 3x MeOH, 3x DCM, 3x MeOH, 3x DCM, 3x MeOH. Uzyskano żywicę (2), którą bez dalszego oczyszczania użyto w następnym etapie reakcji.
c) Wytwarzanie żywicy (3):
Żywicę (2) przemyto trzy razy DCM. Do żywicy (2) dodano 4 ml układu TMSOTf-2,6-lutydyna (1M/1,5M) w DCM, żywicę wytrząsano łagodnie przez 3 godziny w temperaturze pokojowej, przesąPL 214 279 B1 czono, przemyto 3x DCM, 3x MeOH, 3x DCM, 3x MeOH, 3x DCM, 3x MeOH, 3x DCM, 3x MeOH, 3x DCM, 3x MeOH, 3x DCM, 3x MeOH. Uzyskano żywicę (3), którą bez dalszego oczyszczania użyto w następnym etapie reakcji.
d) Wytwarzanie żywicy (4):
Żywicę (3) przemyto trzy razy toluenem. Do żywicy (3) dodano 4-bromometylobenzoesan (606 mg) w 3 ml toluenu, BINAP (117 mg) i CS2CO3 (326 mg), żywicę wytrząsano łagodnie przez 45 minut w temperaturze pokojowej w atmosferze azotu. Do mieszaniny reakcyjnej dodano Pd (OAc)2 w 1 ml toluenu. Żywicę wytrząsano łagodnie przez 18 godzin, w temperaturze 110°C, w atmosferze azotu. Żywicę przesączono na gorąco, przemyto 3x DMF w temperaturze 80°C, 3x H2O w temperaturze 80°C, 3x DMF w temperaturze 80°C, przemyto 3x DMF w temperaturze pokojowej, 3x H2O, 3x DMF, 3x MeOH, 3x DCM, 3x MeOH, 3x DCM. Uzyskano żywicę (4), którą bez dalszego oczyszczania użyto w następnym etapie reakcji.
e) Wytwarzanie żywicy (5):
Żywicę (4) przemyto trzy razy NMP. Do żywicy (4) dodano trimetylosilanolan potasu (KOSiMe3) (240 mg) w 4 ml NMP, żywicę wytrząsano łagodnie przez 24 godziny w temperaturze 50°C, przesączono, przemyto 3x DCM, 3x MeOH, 3x DCM, 3x MeOH, 3x DCM, 3x MeOH, 3x DCM, 3x MeOH, 3x DCM, 3x MeOH, 3x DCM, 3x MeOH. Uzyskano żywicę (5), którą bez dalszego oczyszczania użyto w następnym etapie reakcji.
f) Wytwarzanie związku pośredniego 27:
Żywicę (5) przemyto trzy razy DCM. Do żywicy (5) dodano 5 ml TFA/TIS/DCM (5:2:93), po czym żywicę wytrząsano łagodnie przez 2 godziny w temperaturze pokojowej, przesączono i przemyto DCM. Przesącz przedmuchano w atmosferze suchego azotu w temperaturze 50°C, dodano DCM (2 ml) i ponownie przedmuchano w atmosferze suchego azotu w temperaturze 50°C, dodano DCM (2 ml) i przedmuchano w atmosferze suchego azotu w temperaturze 50°C. Uzyskano wolny kwas karboksylowy (związek pośredni 27) w postaci soli TFA, wydajność 66 mg.
PL 214 279 B1
związek pośredni 27
g) Wytwarzanie żywicy (6), metoda A:
Związek pośredni 27 zatężono w temperaturze 50°C w atmosferze azotu z chlorkiem tionylu (SOCI2) (1 ml), dodano DCM (2 ml) i przedmuchano w atmosferze suchego azotu w temperaturze 50°C, dodano DCM (2 ml) i ponownie przedmuchano w atmosferze suchego azotu w temperaturze 50°C. Dodano DCM (3 ml) i roztwór dodano do dostępnej na rynku żywicy Novabiochem 01-64-0425 (300 mg, obsadzenie: 1,3 mmola/g), do mieszaniny dodano 1 ml 2,6-lutydyny i 1 ml DCM. Żywicę wytrząsano łagodnie przez 1 godzinę, przesączono, przemyto 3x DMF, 3x DCM, 3x DMF. Uzyskano żywicę (7), którą bez dalszego oczyszczania użyto w następnym etapie reakcji.
h) Wytwarzanie żywicy (6), metoda B:
Związek pośredni 27 potraktowano DCM, NEt3 i H2O oraz kilkoma kroplami MeOH, a następnie osuszono nad extrelut'em 3N i przedmuchano w atmosferze suchego azotu w temperaturze 50°C. Trzykrotnie dodano DCM (3 ml) i przedmuchano w atmosferze suchego azotu w temperaturze 50°C. Wolną zasadę rozpuszczono w DCM/DMF 4 ml/l ml i roztwór dodano do dostępnej na rynku żywicy Novabiochem 01-64-0425 (300 mg, obsadzenie: 1,3 mmola/g), po czym do mieszaniny dodano DMAP (10 mg). Żywicę wytrząsano łagodnie przez 15 minut w temperaturze pokojowej, a następnie dodano DIPCDI (70 μθ. Żywicę wytrząsano łagodnie przez 4 godziny w temperaturze pokojowej, przesączono, przemyto 3x DMF, 3x DCM, 3x DMF. Uzyskano żywicę (7), którą bez dalszego oczyszczania użyto w następnym etapie reakcji.
i) Wytwarzanie związku pośredniego 28:
Do żywicy (6) dodano O-(tetrahydr-2H-piranylo)-hydroksyloaminę (60 mg) w 4 ml DCM, żywicę wytrząsano łagodnie w temperaturze pokojowej przez 18 godzin, żywicę przesączono, przemyto DCM (2 ml), przesączono i przedmuchano w atmosferze suchego azotu w temperaturze 50°C, uzyskując 32 mg związku pośredniego 28.
PL 214 279 B1
produkt pośredni 28
j) Wytwarzanie związku 1:
Związek pośredni 28 mieszano przez noc w 5% TFA w MeOH (5 ml), mieszaninę reakcyjną wylano do 4 ml H2O i NaHCO3 (300 mg), produkt dwa razy ekstrahowano DCM (5 ml), warstwę DCM osuszono nad MgSO4, przesączono i przedmuchano w atmosferze suchego azotu w temperaturze 50°C, uzyskując 10 mg końcowego związku 1.
Należy zwrócić uwagę, że THP-zabezpieczony kwas pirydynohydroksamowy odbezpieczono dwukrotnie. Czasem w celu usunięcia THP-ONH2 związek 1 zawieszano w DIPE
P r z y k ł a d B2 Wytwarzanie
Związek 2
PL 214 279 B1
Do roztworu związku pośredniego 5 (0,0004 mola) w MeOH (20 ml) i DCM (20 ml), w temperaturze 0°C, dodano TFA (4 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 48 godzin. Rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość krystalizowano z eteru dietylowego. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 0,137 g (72%) związku 2, temperatura topnienia 200°C.
P r z y k ł a d B3
Wytwarzanie
Związek 3
Do mieszaniny związku pośredniego 9 (0,0003 mola) w MeOH (3 ml), w temperaturze pokojowej, dodano kwas metanosulfonowy (0,25 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 18 godzin, po czym ponownie dodano kwas metanosulfonowy (0,25 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 18 godzin, dodano lód, mieszaninę zalkalizowano stosując 10% K2CO3 i ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano do sucha. Pozostałość (0,21 g, 100%) krystalizowano z DCM/MeOH. Osad odsączono i osuszono, uzyskując: 0,155 g (71%) związku 3, temperatura topnienia 262°C.
P r z y k ł a d B4
Wytwarzanie
związek pośredni 29
a) Mieszaninę związku pośredniego 12 (0,0024 mola) i NaOH (0,0048 mola) w EtOH (60 ml) mieszano i ogrzewano w temperaturze wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 48 godzin, następnie ochłodzono. Osad odsączono, przemyto EtOH, następnie eterem dietylowym i osuszono, uzyskując 0,95 g (89%) związku pośredniego 29.
Wytwarzanie
związek pośredni 30
PL 214 279 B1
b) Do mieszaniny związku pośredniego 29 (0,0021 mola) w DCM (10 ml) i THF (10 ml), w temperaturze pokojowej, dodano O-(tetrahydro-2H-piran-2-ylo)hyroksyoaminę (0,0028 mola), następnie roztwór EDC (0,0028 mola) w DCM (20 ml) i roztwór HOBT (0,0028 mola) w THF (20 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 12 godzin, wylano do wody i ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość (1,2 g) oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (15-40 μm) (eluent: CH2CI2/CH3OH/NH4OH 96/4/0,1). Czyste frakcje zebrano i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość (0,38 g) krystalizowano z eteru dietylowego. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 0,2 g związku pośredniego 30, temperatura topnienia 138°C.
Wytwarzanie
c) Do mieszaniny związku pośredniego 30 (0,0009 mola) w MeOH (15 ml), w temperaturze 0°C, dodano kwas trifluorooctowy (1 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 72 godziny. Rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość rozpuszczono w CH3CN/eter dietylowy. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 0,29 g (69%) związku 4, temperatura topnienia 173°C.
P r z y k ł a d B5
Wytwarzanie
Do roztworu związku pośredniego 11 (0,0033 mola) w THF (20 ml), w temperaturze 0°C, utrzymując przepływ azotu, dodano NaH (0,005 mola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 0°C przez 1 godzinę, po czym dodano roztwór estru etylowego kwasu 2-(metylosulfonylo)-5-pirymidynokarboksylowego (0,0043 mola) w THF (10 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 0°C przez 2 godziny, wylano do wody z lodem i ekstrahowano EtOAc. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4, przesączono i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość (1,4 g) oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (15-35 μm) (eluent: cykloheksan/EtOAc 70/30). Czyste frakcje zebrano i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość (0,94 g, 63%) krystalizowano z eteru dietylowego. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 0,65 g związku pośredniego 31, temperatura topnienia 186°C. Związek pośredni 31 przetworzono według przykładu [B4], uzyskując 0,246 (77% w ostatnim etapie) związku 5, temperatura topnienia 262°C.
PL 214 279 B1
związek 5
P r z y k ł a d B6 Wytwarzanie
związek pośredni 32
Do roztworu monochlorowodorku N-4-piperydynylobenzenosulfonoamidu (0,0004 mola) w THF (4 ml), w temperaturze pokojowej, utrzymując przepływ azotu, porcjami dodano 60% wodorek sodu (0, 0006 mola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę i 30 minut, po czym kroplami dodano roztwór związku pośredniego 13 (0, 0004 mola) w THF (4 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 2 godziny, wylano do wody z lodem i ekstrahowano EtOAc. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość (0,68 g) oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (10 μm) (eluent: DCM 100). Czyste frakcje zebrano i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość (0,376 g) oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (10 μm) (eluent: cykloheksan/EtOAc 70/30). Dwie frakcje zebrano i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość osuszono kilka razy eterem dietylowym, uzyskując 0,208 g (36%) związku pośredniego 32. Związek pośredni 32 przetworzono według przykładu [Β4], uzyskując 0,03 g (50%) związku 6, temperatura topnienia 80°C.
trifluorooctan (1:1) związek 6
PL 214 279 B1
P r z y k ł a d B7 Wytwarzanie
związek pośredni 33
Mieszaninę związku pośredniego 17 (0,0024 mola), estru etylowego kwasu 2-(metylosulfonylo)-5-pirymidynokarboksylowego (0,0032 mola) i K2CO3 (0,0074 mola) w acetonitrylu (15 ml) mieszano w temperaturze 90°C przez 8 godzin, następnie wylano do wody i ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano do sucha. Pozostałość (0,63 g) oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (15-40 pm) (eluent: CH2CI2/CH3OH/NH4OH 98/2/0,1). Czyste frakcje zebrano i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość (0,75 g, 64%) krystalizowano z układu CH3CN/eter dietylowy/DIPE. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 0,5 g (43%) związku pośredniego 33 (CIS), temperatura topnienia 155°C.
Związek pośredni 33 przetworzono według przykładu [B4], uzyskując 0,16 g (75%) związku 7 (CIS), temperatura topnienia 203OC.
P r z y k ł a d B8 Wytwarzanie
(3S-TRANS) związek pośredni 34
Mieszaninę związku pośredniego 19 (0,0028 mola), estru etylowego kwasu 2-(metylosulfonylo)-5-pirymidynokarboksylowego (0,0034 mola) i K2CO3 (0,0056 mola) w acetonitrylu (40 ml) mieszano w temperaturze pokojowej przez 12 godzin, wylano do wody i ekstrahowano EtOAc. Warstwę organiczną przemyto wodą, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość
PL 214 279 B1 (1,3 g) oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (15-40 μm) (eluent: CH2CI2/CH3OH/NH4OH 98/2/0,1). Czyste frakcje zebrano i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość (0,91 g, 68%) krystalizowano z acetonitrylu. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 0,45 g związku pośredniego 34 (3S-TRANS), temperatura topnienia 130°C.
Związek pośredni 34 przetworzono według przykładu [B4], uzyskując 0,09 g (53%) związku 8 (3S-TRANS), temperatura topnienia 224°C.
P r z y k ł a d B9 Wytwarzanie
związek pośredni 35
Mieszaninę związku pośredniego 21 (0,0056 mola), estru etylowego kwasu 2-(metylosulfonylo)-5-pirymidynokarboksylowego (0,0073 mola) i K2CO3 (0,0112 mola) w acetonitrylu (80 ml) mieszano w temperaturze pokojowej przez noc, po czym wylano do wody z lodem i ekstrahowano EtOAc. Warstwę organiczną przemyto wodą, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość (2 g) oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (15-40 μm) (eluent: CH2CI2/CH3OH/NH4OH 96/4/0,1). Czyste frakcje zebrano i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość (0,4 g, 15%) krystalizowano z eteru dietylowego. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 0,28 g związku pośredniego 35, temperatura topnienia 208°C.
Związek pośredni 35 przetworzono według przykładu [B4], uzyskując 0,125 g związku 9, temperatura topnienia 228°C.
związek 9
PL 214 279 B1
P r z y k ł a d B10 Wytwarzanie
związek pośredni 36
Do mieszaniny związku pośredniego 26 (0,0036 mola) i TEA (0,005 mola) w DCM (10 ml), w temperaturze pokojowej, utrzymując przepływ azotu, dodano roztwór chlorku 2-naftalenosulfonylu (0,0043 mola) w DCM (10 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 18 godzin. Dodano wodę. Mieszaninę ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano do sucha. Pozostałość (1,69 g) oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (15-40 μm) (eluent: CH2CI2/CH3OH/NH4OH 98/2/0,1). Czyste frakcje zebrano i rozpuszczalnik odparowano, uzyskując 1 g (61%) związku pośredniego 36. Związek pośredni 36 przetworzono według przykładu [B4], uzyskując 0,7 g (93%) związku 10, temperatura topnienia 142°C.
trifluorooctan (1:1) związek 10
P r z y k ł a d B11
Wytwarzanie
związek pośredni 52
Mieszaninę związku pośredniego 37 (0,0017 mola), estru etylowego kwasu 2-(metylosulfonylo)-5-pirymidynokarboksylowego (0,0022 mola) i węglanu potasu (0,0052 mola) w acetonitrylu (10 ml) mieszano w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Dodano wodę. Mieszaninę ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano do sucha. Pozostałość (0,78 g) krystalizowano z eteru dietylowego. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 0,426 g (61%) związku pośredniego 52, temperatura topnienia 135°C. Związek pośredni 52 przetworzono według przykładu [B4], uzyskując 0,064 g (78%) związku 25, temperatura topnienia 217°C.
związek 25
PL 214 279 B1
P r z y k ł a d B12
związek pośredni 53
Mieszaninę związku pośredniego 40 (0,0027 mola), estru etylowego kwasu 2-(metylosulfonylo)-5-pirymidynokarboksylowego (0,0035 mola) i węglanu potasu (0,0081 mol) w acetonitrylu (10 ml) mieszano w temperaturze pokojowej przez 18 godzin. Dodano wodę. Osad odsączono, przemyto wodą, a następnie eterem dietylowym i osuszono, uzyskując 0,96 g (74%) związku pośredniego 53, temperatura topnienia 132°C.
Związek pośredni 53 przetworzono według przykładu [B4], uzyskując 0,106 g (59%) związku 26, temperatura topnienia 115OC.
związek 26
P r z y k ł a d B13
Wytwarzanie
związek pośredni 54
Do roztworu związku pośredniego 43 (0,0008 mola) w DMF (5 ml), w temperaturze pokojowej, utrzymując przepływ azotu, dodano wodorek sodu (0,0017 mola). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 30 minut. Dodano jodometan (0,0013 mola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę, wylano do wody z lodem i ekstrahowano EtOAc. Warstwę organiczną przemyto wodą, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano, uzyskując 0,38 g (100%) związku pośredniego 54.
PL 214 279 B1
Związek pośredni 54 przetworzono według przykładu [B4], uzyskując 0,155 g (73%) związku 27,
P r z y k ł a d B14 Wytwarzanie
związek pośredni 55
Do roztworu związku pośredniego 44 (0,0061 mola) i TEA (0,0122 mola) w 1,2-dichloroetanie (7 ml), w temperaturze pokojowej, dodano kroplami roztwór chlorku 4-morfolinosulfonylu (0,0061 mola) w 1,2-dichloroetanie (3 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 24 godziny, wylano do wody z lodem i ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość krystalizowano z MeOH/eter dietylowy. Osad odsączono, przemyto eterem dietylowym i osuszono, uzyskując 1,245 g (49%) związku pośredniego 55, temperatura topnienia 189°C.
Związek pośredni 55 przetworzono według przykładu [B4], uzyskując 0,449 g (83%) związku 28, temperatura topnienia 217°C.
związek 28
P r z y k ł a d B15 Wytwarzanie
związek pośredni 56
PL 214 279 B1
Mieszaninę związku pośredniego 47 (0,0015 mola), estru etylowego kwasu 2-(metylosulfonylo)-5-pirymidynokarboksylowego (0,0018 mola) i węglanu potasu (0,0045 mola) w acetonitrylu (10 ml) mieszano w temperaturze pokojowej przez 18 godzin. Dodano wodę. Mieszaninę ekstrahowano DCM. Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (MgSO4), przesączono i rozpuszczalnik odparowano do sucha. Pozostałość (0,78 g) krystalizowano z układu DIPE/eter dietylowy. Osad odsączono i osuszono, uzyskując 0,42 g (61%) związku pośredniego 56, temperatura topnienia: 143°C.
Związek pośredni 56 przetworzono według przykładu [B4], uzyskując 0,2 g (75%) związku 29, temperatura topnienia powyżej 260°C.
P r z y k ł a d B16 Wytwarzanie
związek 30
Związek pośredni 51 traktowano 5% roztworem kwasu trifluorooctowego w mieszaninie DCM/MeOH (1/1, 2 ml) przez 7 dni. Rozpuszczaln iki odparowano w temperaturze pokojowej, utrzymując przepływ azotu i uzyskane oleje potraktowano drugi raz roztworem 5% kwasu trifluorooctowego w mieszaninie DCM/MeOH (1/1, 2 ml). Uzyskaną mieszaninę reakcyjną wytrząsano przez inny 7 dni. Rozpuszczalniki następnie odparowano w temperaturze pokojowej, utrzymując przepływ azotu, po czym dodano 1,4-dioksan i ponownie zatężono. Następnie próbki osuszano, utrzymując przepływ azotu przez noc w temperaturze 40°C aż do całkowitego odbezpieczenia, uzyskując 7 mg związku 30.
Tablica F-1 przedstawia związki wytworzone według powyższych przykładów. W tablicy użyto następujących skrótów: C2HF3O2 oznacza trifluorooctan, Związek nr dotyczy numeru związku, przykład [Bn] dotyczy takiej samej metody jaką opisano w przykładach oznaczonych Bn. Pewne związki scharakteryzowano poprzez temperaturę topnienia (t.t.).
PL 214 279 B1
Tablica F-l
HO—NH , oX_ Γ ΟΧχ 0 YiAy χ0Η A H
Związek nr 1; Przykład [BI] Związek nr 11; Przykład [BI]
0 0 w OH —i4i
η [Γ Ύ ap AyV
| P
Związek nr 12; Przykład [BI] Związek nr 13; Przykład [BI]
0 OH P- i/h 0 OH —0H
yj o
GXXj CACH P
Związek nr 14; Przykład [BI] Związek nr 15; Przykład [BI]
PL 214 279 B1 cd. Tablicy F-1
0 o 1
V0H γγ YYH
fil H H
- 0-.,0 /y 0
/Yz y γ-'-ϊ'Τ 1
— o YJ _ 0
pp-i _ff \_y_ -ώ
CY“
Związek nr 16; Przykład [BI] Związek nr 17; Przykład [BI]
Yy V
X J H
P'PV
O-Qf
Związek nr 18; Przykład [BI]
7™
H
^iYYj Y A.X^N γγγ Υχγ 0 yjY'“ rY' U
HG^ γ 07
U
Związek nr 2; Przykład [B2] , Związek nr 3; Przykład [B3],
temperatura topnienia. 200°C temperatura topnienia. 2 62 °C
,οκ 0
H Ν' h
y-y Jk Yv -- /y Y*X 0/0
Άγ
ρρχΥχγγ 0) ΗΟ-γθ
UJ 1 H 0
Związek nr 19; Przykład [Β3], Związek nr 4; Przykład [B4],
temperatura topnienia. 255 °C temperatura topnienia. 173°C
0 ij M i J H J y γγχγ 0/0
H r γ ϋ K J-Y Ύ < 000·
PL 214 279 B1 cd. Tablicy F-1
C2HF3O2, Związek nr 20; Związek nr 5; Przykad [B5] ; t.t. 262°C
Przykad [B4]; t.t. 220°C
ΥΎ 0 - X Yq AA Jl .OH Χ0Α
<KAA Μ i I Αχ 0 y/yS/s υρι, XiXX)
ΑγΧΧ AA ί I b P
0,7 CH3OH; Związek nr 21; C2HF3O2, Związek nr 6; Przykad
Przykad [B5] t.t. 2 3 4 0 C [B6]; t.t. 80°C
0 X 0 n
η\Λα OH JAyS
H U X γ- Ar X h γκγκΑ H Abx jp X 7
A 0T χ·'γΧι HY Y
AaX
(CIS), Związek nr 7; Przykad (3S-TRANS); Związek nr 8;
[B7]; t.t. 203 DC Przykad [B8]; t.t. 224°C )
( » XxM pp XX V HY Υ 0 ίη y A W 0 HO Ayy P P-PP H P A /Y. PH N N γ o Aa
! 0 β o II l
ΧΑΧ
Związek nr 9; Przykad [B9]; CIS, Związek nr 22; Przykad
t.t. 228°C [B9]; t.t. 245°C
0 *Ά, H il I 0ΑΧΧ
γ 0 bi γρ./χ
Χ.υΧ.,χ
(B-CIS); Związek nr 23; C2HF3O2; Związek nr 10;
Przykad [B9] t.t. 210°C Przykad [B10]; t.t. 142°C
PL 214 279 B1 cd. Tablicy F-1
0 Η 0 HA |YV j
0,23 C5H14O; Związek nr 24; Przykad [B10J; t.t. I10°C
» AAłrn hĄXk VV 0 X .OH ic γ n Ϊ J H 0 p/V θΆ
Związek nr 31; Przykad [B5] ; t.t. 190°C Związek nr 25; Przykad [Bil]; t.t. 217°C
0 Ογ%Η c - JL AK 0 <Y
0,82 C2HF3O2, 1,11 H2O; Związek nr 26; Przykad [B12]; t.t. 115°C 0,82 C2HF3O2, 0,82 H20; Związek nr 32; Przykad [B12]; t.t. 145°C
- fOAAp B(/yV 1 OU 0 ik> A ^s. 0 γΥ N H |! «0 pj vvmP ϋ
C2HF3O2; Związek nr 27; Przykad [B13]; t.t. 158°C Związek nr 28; Przykad [B14]; t.t. 217°C
PL 214 279 B1 cd. Tablicy F-1
jYfPf 0 /ZK'Nz<'ir·· o HO Y XX N <co
H rt II ;N -
Związek nr 29; Przykad [B15]; Związek nr 33; Przykad [BI5];
t.t. powyżej 260DC t.t. 230°C
0 0
AU χ *' ΪΓ N u Γ yvV zX Jrt; J H x Yr ir
rtYrt •ły Y
δΥΥ A YY S
U i X
Związek nr 34; Przykad [B15]; Związek nr 35; Przykad [B15];
t.t. 202aC t t 211°C
γγχ HO—Nil A=rt \-> a Z X X IG O I X x< Xi „ y<
UYYYg ίΥΥΥχ
Związek nr 30; Przykad [B16] Związek nr 36 ; Przykad [B16]
Y v/ Y HC-—NH \=t/ \--------/ \r X HO—NH rtrt Grt o Z Y
Grtł (7.....rt
H0Z
Związek nr 37; Przykad [B16] Związek nr 38 ; Przykad [B16]
wyrp HO—NH \=K δ-t \ n A Y z V HO—NH Cł Yx o «ζ Ύ
cm5 Yrt
PL 214 279 B1 cd. Tablicy F-1
Związek nr 39; Przykad [B16] Związek nr 40; Przykad [B16]
HO—NH \=t/ \„ yMy/A HO—KH \=.fi \-/ N o
Związek nr 41; Przykad [B16] Związek nr 42; Przykad [B16]
—0 7;—X \— HO—NH 3-' N 0 H Xo yrLfy ]40™-ΝΗ \.T77..frj λ Y \ °/ y
Związek nr 43; Przykad [B16] Związek nr 44; Przykad [B16]
IrŁ/M HO—KH \=-r/ \-/ V 0 A
Związek nr 45; Przykad [B16]
C. Przykład farmakologiczny:
Test hamowania deacetylazy histonowej in vitro (patrz przykład C.1) służy do określenia hamowania aktywności enzymatycznej HDAC uzyskanej przy zastosowaniu związków o wzorze (I). ·
Aktywność komórkową związków o wzorze (I) określono na komórkach guza A2780, stosując test kolorymetryczny dla oceny toksyczności komórkowej lub przeżywalności (Mosmann Tim, Journal of Immunological Methods 65: 55-63, 1983) (patrz przykład C.2).
Kinetyka rozpuszczalności w środowisku wodnym określa zdolność związku do pozostawania w roztworze wodnym po rozcieńczeniu (patrz przykład C.3).
Roztwory podstawowe DMSO rozcieńczono jednym buforem wodnym w 3 następujących po sobie etapach. Dla każdego rozcieńczenia mętność zmierzono stosując nefelometr.
Przenikalność leku określa jego zdolność do przechodzenia z jednego medium do lub poprzez inne. Specyficznie jego zdolność do przenikania poprzez błonę jelitową do strumienia krwi i/lub ze strumienia krwi do miejsca docelowego. Przenikalność (patrz przykład C.4) można zmierzyć wytwarzając unieruchomioną na filtrze sztuczną błonę złożoną z dwuwarstwy fosfolipidowej. W teście z wykorzystaniem unieruchomionej na filtrze sztucznej błony, przygotowuje się „sandwicz” zbudowaną z 96-studzienkowej płytki do mikromiareczkowania i 96-studzienkowej płytki z filtrem, tak, aby każda złożona studzienka składała się z dwóch komór z roztworem donora na dnie i roztworem akceptora na górze, oddzielonych 125 μm krążkiem mikrofiltra (pory wielkości 0,45 μm), nasączonym 2% (wagowo/objętościowo) roztworem dioleoilfosfatydylocholiny w dodekanie, w warunkach takich, że z chwilą gdy układ kontaktuje się z wodnym roztworem buforu wewnątrz kanałów filtra powstają wielowarstwowe warstwy dwucząsteczkowe. Przenikalność związków poprzez tę sztuczną błonę zmierzono w cm/sekundę. Celem było określenie przenikania leków poprzez równoległą sztuczną błonę przy 2 różnych wartościach pH: 4,0 i 7,4. Wykrywanie związku przeprowadzono metodą spektrometrii UV przy optymalnej długości fal pomiędzy 250 a 500 nm.
PL 214 279 B1
Metabolizacja leków oznacza, że rozpuszczalny w tłuszczach związek ksenobiotyczny lub endobiotyczny ulega transformacji enzymatycznej do polarnego, rozpuszczalnego w wodzie i usuwalnego metabolitu (metabolitów). Głównym organem metabolizującym lek jest wątroba. Produkty metabolizacji są często mniej aktywne niż lek macierzysty lub nieaktywne. Jednakże, pewne metabolity mogą wykazywać zwiększoną aktywność lub działanie toksyczne. Zatem, metabolizacja leku może obejmować zarówno procesy „detoksyfikacji” i „toksyfikacji”. Jednym spośród głównych układów enzymatycznych determinujących zdolność organizmu do radzenia sobie z lekami i środkami chemicznymi są monooksygenazy cytochromu P450, które są enzymami zależnymi od NADPH. Trwałość metaboliczną związków można określić in vitro posługując się ludzką tkanką w postaci subkomórkowej (patrz przykład C.5). Trwałość metaboliczną związków wyrażono tu jako % leku zmetabolizowanego po 15 minutach inkubacji tych związków z mikrosomami. Oznaczenie ilościowe związków wykonano metodą analizy LC-MS.
Białko p53 - supresor nowotworu, w odpowiedzi na uszkodzenie DNA aktywuje transkrypcyjnie wiele genów obejmujących gen WAF1 /CIP1 . Produkt genu WAF1 o wielkości 21 kDa znaleziono w kompleksie składającym się z cyklin, kinaz cyklinozależnych (CDK) i antygenu jądrowego proliferujących komórek (PCNA) w komórkach prawidłowych lecz nie w komórkach transformowanych i wydaje się, że jest on uniwersalnym inhibitorem aktywności CDK. Jedną konsekwencją wiązania z p21WAF1 i hamowania CDK jest zapobiegnięcie fosforylacji zależnej od CDK i późniejszej inaktywacji białka Rb, co ma zasadnicze znaczenie dla kontynuacji cyklu komórkowego. Indukcja p21WAF1 w odpowiedzi na kontakt komórek z inhibitorem HDAC jest zatem silnym i specyficznym wskaźnikiem hamowania cyklu komórkowego zarówno w fazie G1 jak i G2.
Zdolność związków do indukowania p21WAF1 zmierzono posługując się testem immunoenzymatycznym z zastosowaniem p21WAF1 (WAF1 ELISA firmy Oncogene). Test p21WAF1 jest „sandwiczowym” enzymatycznym testem immunologicznym w którym stosuje się zarówno mysie przeciwciała monoklonalne jak i królicze przeciwciała poliklonalne. Królicze przeciwciało poliklonalne, specyficzne względem ludzkiego białka WAF1, unieruchomiono na powierzchni plastikowych studzienek dostarczonych w zestawie. Dowolne p21WAF występujące w próbce do testu zwiąże się z przeciwciałem wychwytującym. Detektorowe przeciwciało monoklonalne z dołączoną grupą biotynową również rozpoznaje ludzkie białko p21WAF1 i zwiąże się z dowolnym p21WAF1 utrzymywanym przez przeciwciało wychwytujące. Przeciwciało detektorowe, z kolei, wiązane jest przez sprzężoną z peroksydazą chrzanową streptawidynę. Peroksydaza chrzanowa katalizuje konwersję dającego barwny produkt substratu - tetrametylobenzydyny z bezbarwnego roztworu do niebieskiego roztworu (lub żółtego po dodaniu odczynnika przerywającego reakcję), intensywność którego jest proporcjonalna do ilości białka p2IWAF1 związanego z płytką. Barwny produkt reakcji ocenia się ilościowo stosując spektrofotometr. Oznaczenie ilościowe uzyskuje się wykreślając krzywą wzorcową stosując znane stężenia p21WAF1 (dostarczone liofilizowane)(patrz przykład C.6).
Specyficzne inhibitory HDAC nie powinny hamować innych enzymów takich jak występujące licznie białka CYP P450. Białka CYP P450 (ulegające ekspresji w E. coli) 3A4, 2D6 i 2C9 przekształcają swoje specyficzne substraty w cząsteczkę fluorescencyjną. Białko CYP3A4 konwertuje 7-benzyloksytrifluorometylokumarynę (BFC) do 7-hydroksytrifluorometylokumaryny. Białko CYP2D6 konwertuje 3-[2-(N,N-dietylo-N-metyloamino)etylo]-7-metoksy-4-metylokumarynę (AMMC) do chlorowodorku 3-[2-(N,N-dietyloamino)etylo]-7-hydroksy-4-metylokumaryny i białko CYP2C9 konwertuje 7-metoksy-4-5 trifluorometylokumarynę (MFC) do 7-hydroksytrifluorometylokumaryny. Związki hamujące reakcję enzymatyczną spowodują zmniejszenie sygnału fluorescencyjnego (patrz przykład C.7).
P r z y k ł a d C.1
Test hamowania deacetylazy histonowej in vitro:
Ekstrakty jądrowe HeLa (dostawca: Biomol) inkubowano w 60 μg/ml z 2x10-8 M znakowanego radioaktywnie peptydu substratu. Jako substrat do pomiaru aktywności HDAC zastosowano syntetyczny peptyd, tj. sekwencję aminokwasów 14-21 histonu H4. Substrat ma dołączoną grupę biotynową na części NH2-końcowej oraz grupę dystansującą z kwasu 6-aminoheksanowego i zabezpieczony jest 3 na części COOH-końcowej grupą amidową i specyficznie do lizyny 16 dołączona jest grupa [3H] acety3 lowa. Substrat, biotyna- (kwas 6-aminoheksanowy)Gly-Ala-([3H]-acetylo-Lys-Arg-His-Arg-Lys-ValNH2), dodano w buforze zawierającym 25 mM Hepes, 1 M sacharozę, 0,1 mg/ml BSA i 0,01% Triton
X-100 przy pH 7,4. Po upływie 30 minut reakcję deacetylowania zakończono dodając HCl i kwas octowy, 3 (stężenie końcowe odpowiednio 0,035 mM i 3,8 mM). Po przerwaniu reakcji, niezwiązany 3H-octan ekstrahowano octanem etylu. Po wymieszaniu i odwirowaniu, zmierzono radioaktywność w próbce
PL 214 279 B1 z fazy górnej (organicznej) w liczniku promieniowania β. W każdym doświadczeniu równolegle badano kontrole (ekstrakt jądrowy HeLa i DMSO bez związku), ślepą próbę (DMSO lecz bez ekstraktu jądrowego HeLa lub związku) i próbki (związek rozpuszczony w DMSO i ekstrakt jądrowy HeLa). Na począ-5 -5 tek, związki badane w stężeniu 10-5 M. Gdy związki wykazały aktywność przy 10-5 m, wykreślano krzywą odpowiedzi w zależności od stężenia, w którym badano związki dla stężeń pomiędzy 10-5 M i 10-12 M, w każdym teście wartość uzyskaną dla ślepej próby odejmowano zarówno od wartości uzyskanej dla kontroli jak i dla próbki. Próbka kontrolna reprezentowała 100% deacetylacji substratu. Dla każdej próbki radioaktywność wyrażono jako procent średniej wartości próbek kontrolnych. Gdy to odpowiednie obliczono wartości IC50 (stężenie leku, potrzebne do zmniejszenia ilości metabolitów do 50% kontroli) stosując analizę probitów dla stopniowanych danych. Działanie związków testowych przedstawiono jako pIC50 (wartość log ujemnego wartości IC50). Wszystkie badane związki wykazały aktywność enzymatyczną w stężeniu testowym 10- M i 42 związków miało pIC50 > 5 (patrz tablica F-2).
P r z y k ł a d C.2
Określanie aktywności związku hamującej proliferację komórek A2780
Wszystkie badane związki rozpuszczono w DMSO, a dalsze rozcieńczenia wykonano w m edium hodowlanym. W testach proliferacji komórkowej końcowe stężenia DMSO nigdy nie przekraczały 0,1% (objętościowo). Próbki kontrolne zawierały komórki A2780 i DMSO bez związku i próby ślepe zawierały DMSO bez komórek. MTT rozpuszczono w ilości 5 mg/ml w PBS. Przygotowano bufor glicynowy składający się z 0,1 M glicyny i 0,1 M NaCl buforowany do pH 10,5 z zastosowaniem NaOH (1 N) (wszystkie odczynniki otrzymano z firmy Merck).
Komórki ludzkiego raka jajnika A2780 (dar Dr. T.C. Hamilton'a [Fox Chase Cancer Centre, Pennsylvania, USA]) hodowano w podłożu RPMI 1640 uzupełnionym 2 mM L-glutaminą, 50 μg/ml gentamycyną i 10% płodową surowicą bydlęcą. Komórki rutynowo utrzymywano jako hodowle jednowarstwowe w temperaturze 37°C w nawilżanym powietrzu zawierającym 5% CO2. Komórki pasażowano raz tydzień stosując roztwór trypsyna/EDTA w stosunku 1:40. Wszystkie media i dodatki otrzymano od firmy Life Technologies. Komórki nie były zanieczyszczone mykoplazmą co określono stosując zestaw Gen-Probe Mycoplasma Tissue Culture (dostawca: BioMerieux).
Komórki wysiano w 96-studzienkowych płytkach hodowlanych NUNC™ (Dostawca: Life Technologies) i pozostawiono przez noc aby przylgnęły do plastiku. Gęstości stosowane w posiewach wynosiły 1500 komórek na studzienkę w objętości całkowitej medium 200 pl. Po przylgnięciu komórek do płytek, zmieniono medium i dodano leki i/lub rozpuszczalniki do objętości końcowej 200 pl. Po czterech dniach inkubacji, medium zastąpiono 200 pl świeżego medium i oszacowano gęstość i żywotność komórek stosując test wykorzystujący MTT. Do każdej studzienki dodano 25 pl roztworu MTT i komórki inkubowano dalej przez 2 godziny w temperaturze 37°C. Medium następnie ostrożnie odessano i rozpuszczono niebieski produkt MTT-formazan dodając 25 pl buforu glicynowego a następnie 100 pl DMSO. Płytki testowe wytrząsano przez 10 minut na wytrząsarce płytkowej i zmierzono absorbancję przy 540 nm stosując 96-studzienkowy spektrofotometr Emax (Dostawca: Sopachem). W doświadczeniu tym, wyniki dla każdego wariantu eksperymentalnego są średnią z 3 studzienek. W celu wstępnej klasyfikacji, związki badano w jednym ustalonym stężeniu 10-6 M. Dla czynnych związków, doświadczenia powtórzono w celu ustalenia krzywych odpowiedzi w pełnym zakresie stężeń. W każdym doświadczeniu, kontrole (bez leku) i ślepą próbę (bez komórek lub leków) testowano jednocześnie. Wartość uzyskaną dla ślepej próby odjęto od wartości wszystkich prób kontrolnych i wartości próbki. Dla każdej próbki, średnią wartość proliferacji komórkowej (w jednostkach absorbancji) wyrażono jako procent średniej wartości proliferacji komórkowej kontroli. Gdy to odpowiednie obliczono wartości IC50 (stężenie leku, potrzebne do zmniejszenia proliferacji komórkowej do 50% kontroli) stosując analizę probitów dla stopniowanych danych (Finney, D.J., Probit Analyses, wydanie 2 Rozdział 10, Graded Responses, Cambridge University Press, Cambridge 1962). Działanie związków testowych przedstawiono jako pIC50 (wartość log ujemnego wartości IC50). Większość badanych związków wykazała aktywność komórkową w stężeniu testowym 10-6 M i 41 związków miało pIC50 > 5 (patrz tablica F-2)
P r z y k ł a d C.3
Kinetyka rozpuszczalności środowisku w wodnym
W pierwszym etapie rozcieńczania, 10 pl zatężonego roztworu podstawowego aktywnego związku rozpuszczono w DMSO (5 mM), dodano do 100 pl buforu fosforanowocytrynianowego pH 7,4 i mieszano. W drugim etapie rozcieńczania, próbkę (20 pl) z pierwszego etapu rozcieńczania rozpuszczono dalej w 100 pl buforu fosforanowocytrynianowego pH 7,4 i mieszano. Na koniec, w trzecim etaPL 214 279 B1 pie rozcieńczania, próbkę (20 μθ z drugiego etapu rozcieńczania rozcieńczono dalej w 100 μl buforu fosforanowocytrynianowego pH 7,4 i mieszano. Wszystkie rozcieńczenia przeprowadzono w 96-studzienkowych płytkach. Bezpośrednio po ostatnim etapie rozcieńczania zmierzono mętność próbkach z trzech kolejnych etapów rozcieńczania stosując nefelometr. Rozcieńczenie dla każdego związku wykonano w trzech powtórzeniach aby wykluczyć sporadyczne błędy. Opierając się na pomiarach mętności związki podzielono na 3 klasy. Związki o wysokiej rozpuszczalności otrzymały 3 punkty i w przypadku tych związków pierwsze rozcieńczenie jest klarowne. Związki o średniej rozpuszczalności otrzymały 2 punkty. W przypadku tych związków pierwsze rozcieńczenie nie jest klarowne, a drugie rozcieńczenie jest klarowne. Związki o niskiej rozpuszczalności otrzymały 1 punkt i w przypadku tych związków zarówno pierwsze jak i drugie rozcieńczenie nie jest klarowne. Zmierzono rozpuszczalność 9 związków. Spośród tych związków 4 uzyskało 3 punkty, jeden uzyskał 2 punkty i 4 uzyskało 1 punkt (patrz tablica F-2).
P r z y k ł a d C.4
Równoległa analiza przenikalności przez sztuczną błonę
Próbki roztworu podstawowego (próbki 10 μl roztworu podstawowego 5 mM w 100% DMSO) rozcieńczono w głębokiej studzience lub płytce Pre-mix zawierającej 2 ml wodnego układu buforowego pH 4 lub pH 7,4 (PSR4 System Solution Concentrate (pION)). Przed dodaniem próbek do płytki odniesienia, do studzienek dodano 150 μl buforu i przeprowadzono pomiar UV - ślepa próba. Następnie bufor odrzucono i płytkę użyto jako płytkę odniesienia. Wszystkie pomiary przeprowadzono w płytkach odpornych na działanie UV (dostawca: Costar lub Greiner).
Po wykonaniu pomiaru ślepej próby płytki odniesienia, do płytki odniesienia dodano po 150 μ l rozcieńczonych próbek i 200 μl rozcieńczonych próbek dodano do płytki zawierającej donor 1. Płytkę 1 z filtrem zawierającą akceptor (dostawca: Milipore, typ:MAIP N45) pokryto 4 μl roztworu tworzącego sztuczną błonę (1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfocholina w dodekanie zawierającym 0,1% 2,6-di-tertbutylo-4-metylofenol) i umieszczono na górze płytki 1 zawierającej donor uzyskując „sandwicz”. Na górę studzienek zawierających akceptor wlano porcję buforu (200 μ^. Sandwicz przykryto nakrywką i przechowywano przez 18 godzin w temperaturze pokojowej w ciemności.
Pomiar ślepej próby w płytce 2 zawierającej akceptor przeprowadzono poprzez dodanie 150 μl buforu do studzienek, przeprowadzając następnie pomiar UV. Po przeprowadzeniu pomiaru ślepej próby płytki 2 zawierającej akceptor bufor odrzucono i 150 μl roztworu akceptora przeniesiono z płytki z filtrem zawierającej akceptor do zawierającej akceptor płytki 2. Następnie z sandwicza usunięto zawierającą akceptor płytkę 1 z filtrem. Po przeprowadzeniu ślepej próby na zawierającej donor płytce (patrz powyżej), 150 μl roztworu donora przeniesiono z płytki 1 zawierającej donor do zawierającej donor płytki 2. Widma UV studzienek zawierającej donor płytki 2, zawierającej akceptor płytki 2 i płytki odniesienia zeskanowano (z zastosowaniem urządzenia SpectraMAX 190). Wszystkie widma poddano obróbce w celu obliczenia przenikalności z zastosowaniem oprogramowania PSR4p Command Software. Pomiary dla wszystkich związków wykonano w trzech powtórzeniach. W każdym doświadczeniu jako wzorce zastosowano karbamazepinę, gryzeofulwinę, acykloguanizynę, atenolol, furosemid chlorotiazyd. Związki podzielono na 3 kategorie: związki o małej przenikalności (średni efekt < 0,5 x 10-6 cm/s; 1 punkt), związki o średniej przenikalności (1 x 10-6 cm/s > średni efekt > 0,5 x 10-6 cm/s;
punkty) lub związki o dużej przenikalności (> 0,5 x 10-6 cm/s; 3 punkty). Dwa spośród tych 7 badanych związków uzyskały co najmniej 2 punkty przy jednej ze zmierzonych wartości pH i 5 związków uzyskało tylko 1 punkt przy jednej ze zmierzonych wartości pH.
P r z y k ł a d C.5
Trwałość metaboliczna
Subkomórkowe preparaty tkankowe przygotowano według opisu Gorrod'a i in. (Xenobiotica 5: 453-462, 1975) metodą rozdzielania przez wirowanie po wcześniejszym mechanicznym shomogenizowaniu tkanki.
Tkankę wątroby przepłukano oziębionym lodem buforem 0,1 M Tris-HCl (pH 7,4) w celu wypłukania nadmiaru krwi. Tkankę następnie osuszono na bibule, zważono i pocięto na duże fragmenty stosując nożyce chirurgiczne. Kawałki tkanki shomogenizowano w 3 objętościach oziębionego lodem 0,1 M buforu fosforanowego (pH 7,4) stosując homogenizator Potter-S (Braun, Italy) zaopatrzony w teflonowy tłuczek lub homogenizator Sorvall OmniMix, przez 7x10 sekund. W obu przypadkach, w trakcie procesu homogenizacji, naczynie utrzymywano w/na lodzie.
PL 214 279 B1
Homogenaty tkankowe wirowano przy 9000 x g przez 20 minut w temperaturze 4°C stosując wirówkę Sorvall lub Beckman Ultracentrifuge. Uzyskany supernatant przechowywano w temperaturze -80°C i oznaczono jako „S9”.
Frakcję S9 można następnie dalej wirować przy 100000 x g przez 60 minut (4°C) stosując wirówkę Beckman Ultracentrifuge. Uzyskany supernatant zassano ostrożnie, rozdzielono na próbki i opisano jako „cytozol”. Osad zawieszono ponownie w 0,1 M buforze fosforanowym (pH 7,4) w końcowej objętości 1 ml na 0,5 g wyjściowej masy tkanki i opisano jako „mikrosomy”.
Wszystkie frakcje subkomórkowe podzielono na próbki, zamrożono natychmiast w ciekłym azocie i przechowywano w temperaturze -80°C aż do zastosowania.
Dla badanych próbek, mieszanina inkubacyjna zawierała PBS (0,1 M), związek (5 mM), mikrosomy (1 mg/ml) i układ wytwarzający NADPH (0,8 mM glukozo-6-fosforan, 0,8 mM chlorek magnezu i 0,8 jednostki dehydrogenazy glukozo-6-fosforanowej). Próbki kontrolne zawierały taki sam materiał lecz mikrosomy zastąpiono inaktywowanymi mikrosomami (10 minut w temperaturze 95 stopni Celsjusza). Odzysk związków z próbek kontrolnych wynosił zawsze 100%.
Mieszaniny inkubowano wstępnie przez 5 minut w temperaturze 37 stopni Celsjusza. Reakcję rozpoczęto w punkcie czasowym zero (t = 0) dodając 0,8 mM NADP i próbki inkubowano przez 15 minut (t = 15). Reakcję zakończono dodając 2 objętości DMSO. Następnie próbki wirowano przez 10 minut przy 900 x g i supernatanty przechowywano w temperaturze pokojowej przez nie dłużej niż 24 godziny przed analizą. Wszystkie inkubacje przeprowadzono w dwóch powtórzeniach. Analizę supernatantów przeprowadzono posługując się analizą LC-MS. Elucję próbek przeprowadzono na Xterra MS CIS (50 x 4,6 mm, 5 Jim, Waters, US). Zastosowano system Alliance 2790 (Dostawca: Waters, US) HPLC. Eluowano buforem A (25 mM octan amonowy (pH 5,2) w mieszaninie H20/acetonitrył (95/5)), rozpuszczalnikiem B był acetonitryl i rozpuszczalnikiem C metanol, przy szybkości przepływu 2,4 ml/minutę. Stosowany gradient zwiększył stężenie fazy organicznej od 0% przez 50% B i 50% C w ciągu 5 minut aż do 100% B w ciągu 1 minuty w sposób liniowy a stężenie fazy organicznej utrzymywano stałe jeszcze przez 1,5 minuty. Całkowita objętość wstrzykniętej próbki wynosiła 25 pi.
Jako detektor zastosowano trójkwadrupolowy spektrometr masowy Quattro (dostawca: Micromass, Manchester, UK) zaopatrzony w źródło ESI. Ustawienia źródła i temperatury desolwatacji wynosiły odpowiednio 120 i 350°C i jako gaz rozpraszający i suszący zastosowano azot. Dane zbierano w trybie dodatniego skanowania (reakcja pojedynczego jonu). Napięcie stożkowe ustalono na 10 V i czas opóźnienia wynosił 1 sekundę. Trwałość metaboliczną wyrażono jako % zmetabolizowania związku po 15 minutach inkubacji z aktywnymi mikrosomami (E(act)) (% zmetaboliz owania =100% całkowity prąd jonowy (TIC) E(act) w t=15
TIC E(act) w t=0
Związki wykazujące TIC E(act) procent zmetabolizowania poniżej 20% określono jako bardzo trwałe metabolicznie. Związek wykazujący zmetabolizowanie pomiędzy 20 i 70% określono jako związek średnio trwały, a związki wykazujące procent metabolizacji większy niż 70 określono jako mało trwałe metabolicznie. W każdym przypadku gdy oceniano trwałość metaboliczną stosowano trzy związki odniesienia. Jako związek o małej trwałości metabolicznej zastosowano werapamil (% zmetabolizowania = 73%). Jako związek o średniej trwałości metabolicznej zastosowano cyzapryd (% zmetabolizowania 45%) i jako związek o średniej do dużej trwałości metabolicznej zastosowano propanoi (25% zmetabolizowania). Te związki odniesienia użyto w celu potwierdzenia ważności testu trwałości metaboiicznej.
Badano jedenaście związków. Osiem związki wykazało procent zmetabolizowania poniżej 20%, dwa związki wykazywały procent zmetabolizowania pomiędzy 20 i 70% i jeden związek wykazał procent zmetabolizowania większy niż 70%.
P r z y k ł a d C.6
Zdolność do indukcji p21
Poniższy protokół zastosowano w celu określenia poziomu ekspresji białka p21 ludzkich komórkach raka jajnika A2780.
Komórki A2780 (20000 komórek/180 pi) wysiano w 96-studzienkowych płytkach w medium RPMI 1640 uzupełnionym 2 mM L-glutaminą, 50 pg/ml gentamycyną i 10% płodową surowicą bydlęcą.
PL 214 279 B1
Związki dodano na 24 godziny przed lizą komórek, w stężeniach końcowych 10-5, 10-6, 10-7 i 10-8 M. Wszystkie badane związki rozpuszczono w DMSO, a dalsze rozcieńczenia wykonano w medium hodowlanym. Supernatanty usunięto znad komórek 24 godziny po dodaniu związku. Komórki przemyto 200 μl oziębionego lodem PBS. Zawartość studzienek zassano i dodano 30 μl buforu do lizy (50 mM Tris.HCl (pH 7,6), 150 mM NaCl, 1% Nonidet p40 i 10% glicerol). Inkubację płytek prowadzono przez noc w temperaturze -70°C.
Odpowiednią liczbę studzienek do mikromiareczkowania wyjęto z plastikowego woreczka i umieszczono na pustym stojaku. Wytworzono roztwór roboczy (1 x) buforu do przemywania (20 x stężony roztwór do przemywania płytek: 100 ml 20-krotnie zatężonego roztworu PBS i surfaktanta, zawierający 2% chloroacetamid). Liofilizowany wzorzec p21WAF odtworzono z zastosowaniem destylowanej H2O po czym rozcieńczono rozcieńczalnikiem do próbek (dostarczonym w zestawie).
Próbki wytworzono rozcieńczając je 1:4 w rozcieńczalniku do próbek. Próbki (100 μθ i wzorce p21WAF1 (100 μθ pipetowano do odpowiednich studzienek i inkubowano w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Studzienki przemyto 3 razy 1x buforem do przemywania po czym do każdej studzienki pipetowano 100 μl odczynnika zawierającego przeciwciało detektorowe (roztwór przeciwciała monoklonalnego p21WAF1 z dołączoną grupą biotynową). Inkubacje prowadzono w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę po czym studzienki przemyto trzy razy 1x buforem do przemywania.
Koniugat 400x (koniugat peroksydaza-streptawidyna: 400-krotnie zatężony roztwór) rozcieńczono i do studzienek dodano 100 μl roztworu 1x. Inkubacje prowadzono w temperaturze pokojowej przez 30 minut po czym przemyto 3 razy 1x buforem do przemywania i 1 raz destylowaną H2O. Do studzienek dodano roztwór substratu (substratu tworzącego barwnik) (100 μθ i przez 30 minut prowadzono inkubację w ciemności w temperaturze pokojowej. Roztwór przerywający reakcję dodano do każdej studzienki w takiej samej kolejności jak uprzednio dodano roztwór substratu. Absorbancję w każdej studzience zmierzono stosując spektrofotometryczny czytnik płytkowy przy dwóch długościach fali 450/595 nm.
W każdym doświadczeniu, kontrole (bez leku) i ślepą próbę (bez komórek lub leków) testowano jednocześnie. Wartość uzyskaną dla ślepej próby odjęto od wartości wszystkich prób kontrolnych wartości próbek. Dla każdej próbki, wartość indukcji p21WAF1 (w jednostkach absorbancji) wyrażono jako procent wartości p21WAF1 w kontroli. Jako istotną indukcję zdefiniowano procent indukcji większy niż 130%. W teście tym badano trzynaście związków. Jedenaście związków wykazało znaczącą indukcję.
P r z y k ł a d C.7
Wydajność hamowania P450
Wszystkie badane związki rozpuszczono w DMSO (5 mM) a następnie rozcieńczono do 5 10-4 M w acetonitrylu. Kolejne rozcieńczenia wykonano w buforze testowym (0,1 M NaK bufor fosforanowy pH 7,4) a końcowe stężenie rozpuszczalnika nigdy nie przekraczało 2%.
W teście białka CYP3A4 studzienka zawiera 15 pmoli P450/mg białka (w 0,01 M NaK buforze fosforanowym + 1,15% KCl), układ wytwarzający NADPH (3,3 mM glukozo-6-fosforan, 0,4 U/ml dehydrogenazy glukozo-6-fosforanowej, 1,3 mM NADP i 3,3 mM MgCl2 · 6H2O w buforze testowym) i związek w całkowitej objętości testowej 100 pi. Po 5 minutach inkubacji wstępnej w temperaturze 37°C rozpoczęto reakcję enzymatyczną dodając 150 μΜ substratu sondy fluorescencyjnej BFC w buforze testowym. Po trwającej 30 minut inkubacji w temperaturze pokojowej reakcję przerwano dodając objętości acetonitrylu. Ocenę fluorescencji prowadzono stosując wzbudzenie przy długości fali 405 nm i emisję przy długości fali 535 nm. Jako związek odniesienia w tym doświadczeniu wykorzystano ketokonazol (wartość IC50 = 3x10-8 M). W teście białka CYP2D6 studzienka zawiera 6 pmoli P450/mg białka (w 0,01 M NaK buforze fosforanowym + 1,15% KCl), układ wytwarzający NADPH (0,41 mM glukozo-6-fosforan, 0,4 U/ml dehydrogenazy glukozo-6-fosforanowej, 0,0082 mM NADP i 0,41 mM MgCi2OH2O w buforze testowym) i związek w całkowitej objętości testowej 100 pi. Po 5 minutach inkubacji wstępnej w temperaturze 37°C rozpoczęto reakcję enzymatyczną dodając 3 μΜ substratu sondy fluorescencyjnej AMMC w buforze testowym. Po trwającej 45 minut inkubacji w temperaturze pokojowej reakcję przerwano dodając 2 objętości acetonitrylu. Ocenę fluorescencji prowadzono stosując wzbudzenie przy długości fali 405 nm i emisję przy długości fali 460 nm. Jako związek odniesienia w tym doświadczeniu wykorzystano chinidynę (wartość IC50 < 5x10-8 M).
W teście białka CYP2C9 studzienka zawiera 15 pmoli P450/mg białka (w O,01M NaK buforze fosforanowym + 1,15% KCl), układ wytwarzający NADPH (3,3 mM glukozo-6-fosforan, 0,4 U/ml dehydrogenazy glukozo-6-fosforanowej, 1,3 mM NADP i 3,3 mM MgCl2, 6Η2Ο w buforze testowym)
PL 214 279 B1 i związek w całkowitej objętości testowej 100 pl. Po 5 minutach inkubacji wstępnej w temperaturze 37°C rozpoczęto reakcję enzymatyczną dodając 200 μΜ substratu sondy fluorescencyjnej MFC w buforze testowym. Po trwającej 30 minut inkubacji w temperaturze pokojowej reakcję przerwano dodając 2 objętości acetonitrylu. Ocenę fluorescencji prowadzono stosując wzbudzenie przy długości fali 405 nm i emisję przy długości fali 535 nm. Jako związek odniesienia w tym doświadczeniu wykorzystano sulfafenazol (wartość IC50 = 6,8 x 10-7 M).
W celu wstępnej klasyfikacji, związki badano w jednym ustalonym stężeniu 1 x 10-6 M. Dla czynnych związków, doświadczenia powtórzono w celu ustalenia krzywych odpowiedzi w pełnym zakresie stężeń. W każdym doświadczeniu, kontrole (bez leku) i ślepą próbę (bez komórek lub leków) testowano jednocześnie. Wszystkie związki testowano w czterech powtórzeniach. Wartość uzyskaną dla ślepej próby odjęto od wartości wszystkich prób kontrolnych i wartości próbki. Dla każdej próbki, średnią wartość aktywności P450 próbki (w jednostkach fluorescencji względnej) wyrażono, jako procent średniej wartości aktywności P450 w próbie kontrolnej. Procent hamowania wyrażono jako 100% minus średnia wartość aktywności P450 próbki. Gdy to odpowiednie obliczono wartości IC50 (stężenie leku, potrzebne do zmniejszenia aktywności P450 do 50% kontroli). W teście tym badano jeden związek. Nie wykryto hamowania przez ten związek różnych enzymów P450.
T a b l i c a F-2
Tablica F-2 przedstawia wyniki uzyskane dla związków badanych według przykładów C1, C2 i C3
Numer związku Aktywność enzymu PIC50 Aktywność komórkowa pICs0 Punktacja rozpuszczalności
1 2 3 4
1 6,523 5,277
2 6,104 7,567 3
3 < 5 5,744
4 7,574 5,866 1
5 8,123 6,433 1
6 < 5 5,68
7 7,533 5,017 3
8 7,355 5,517 3
9 7,579 < 5 2
10 6,893 5,673
11 5,829 5,784
12 7,438 5,536
13 5,428 6,156
14 6,116 5,68
15 7,413 5,907 1
16 6,293 < 5
17 6,95 < 5
18 5,321 7,303
19 < 5 5,367
20 7,294 5,556 1
21 8,199 6,441
22 7,212 5,536 3
23 6,662 5,472
24 7,903 5,97
PL 214 279 B1 cd. Tablicy F-2
1 2 3 4
31 7,857 5,225
25 6,449 < 5
32 7,526 6,255
26 7,85 6,263
27 7,49 5,781
30 7,614 5,669
36 7,265 5,977
37 7,341 5,661
38 7,154 5,937
39 7,126 6,053
40 7,273 6,164
41 7,403 6,327
42 7,584 6,342
43 7,469 6,132
44 7,432 6,192
45 7,371 6,29
28 7,074 5,109
29 7,04 5,429
33 6,837 5,653
34 7,337 5,62
35 7,046 5,935
D. Przykład kompozycji: Tabletki powlekane błoną
Wytwarzanie rdzenia tabletki
Mieszaninę 100 g związku o wzorze (I), 570 g laktozy i 200 g skrobi starannie wymieszano i nawilżono z zastosowaniem roztworu 5 g dodecylosiarczanu sodu i 10 g poliwinylopirolidonu w około 200 ml wody. Wilgotną mieszaninę proszku przesiano, osuszono i przesiano ponownie. Następnie dodano 100 g celulozy mikrokrystalicznej i 15 g uwodornionego oleju roślinnego. Całość dokładnie zmieszano i sprasowano na tabletki, uzyskując 10000 tabletek, przy czym każda zawierała 10 mg związku o wzorze (I).
Otoczka
Do roztworu 10 g metylocelulozy 75 ml denaturowanego etanolu dodano roztwór 5 g etylocelulozy w 150 ml dichlorometanu. Następnie dodano 75 ml dichlorometanu i 2,5 ml 1,2,3-propanotriolu. 10 g poliglikolu etylenowego rozpuszczono w 75 ml dichlorometanu. Drugi roztwór dodano do poprzedniego po czym dodano 2,5 g oktadekanonianu magnezu, 5 g poliwinylopirolidonu i 30 ml zatężonej barwnej zawiesiny i całość homogenizowano. Rdzenie tabletek powleczono tak otrzymaną mieszaniną w urządzeniu do powlekania.

Claims (9)

  1. PL 214 279 B1
    Zastrzeżenia patentowe
    1. Pochodna sulfonyloaminowa, związek o wzorze (I), jej farmaceutycznie dopuszczalne sole addycyjne i stereochemiczne formy izomeryczne, w którym to wzorze n oznacza 0, 1 lub 2 i gdy n = 0 to, w ugrupowaniu tym istnieje wiązanie bezpośrednie; t oznacza 0, 1,2 lub 3 i gdy t = 0 to między Z i N istnieje wiązanie bezpośrednie;
    — każdy Q oznacza grupę o wzorze x .· —c\ każdy X oznacza atom azotu lub grupę o wzorze x .
    każdy Y oznacza atom azotu lub grupę o wzorze każdy Z oznacza atom azotu lub grupę o wzorze ;
    R1 oznacza -C(O)NR8R9 lub -NR11C(O)C=N(OH)R10;
    przy czym R8 i R9 niezależnie od siebie są wybrane z grupy obejmującej atom wodoru lub hydroksyl;
    R10 oznacza aryloC1-6alkil;
    R11 jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej a nom wodoru lub C1-6alkil;
    2
    R2 oznacza atom wodoru, C1-6alkil lub naftalenyIosuIfonylopirazynyl;
    3
    R3 oznacza atom wodoru;
    R4 oznacza atom wodoru, hydroksyl, hydroksyC1-6alkil lub C1-6alkoksyl;
    5
    R oznacza atom wodoru, C1-6alkil, hydroksyC1-6alkil lub C1-6alkoksyC1-6alkil ©oznacza rodnik wybrany z grupy obejmującej (a-l) (a-7) (a-20) lub (a-21) przy czym s oznacza 0 lub 1;
    R6 i R7 są niezależnie od siebie wybrane z grupy obejmującej atom wodoru, uranyl, benzofuranyl, fenyl, feny podstawiony przez jeden, dwa lub trzy podstawniki niezależnie wybrane z grupy obejmującej C1-6alkil, C1-6alkoksyI, hydroksyC1-4alkil, C1-4alkilosulfonyl lub grupę di(C1-4alkilo)aminową;
    przy czym zdefiniowany powyżej aryl oznacza fenyl.
  2. 2. Związek według zastrz. 1, w którym n oznacza 0, 1 lub 2: t oznacza 0, 1, 2 lub 3; każdy Q
    R1 oznacza -C(O)NH(OH) lub -NR11C(O)C=N(OH)R10, przy czym R10 oznacza arylo C1-6alkil
    11 2 i R11 oznacza atom wodoru; R2 oznacza atom wodoru, C1-6alkil lub naftalenylosulfonylopirazynyl;
    3 każdy R3 niezależnie oznacza atom wodoru;
    PL 214 279 B1
    R4 oznacza atom wodoru, hydroksyl, hydroksyC1-6alkil lub C1-6alkoksyl;
    5
    R oznacza atom wodoru, C1-6alkil, hydroksyC1-6alkil lub C1-6alkoksy C1-6alkil:
    ©oznacza rodnik wybrany z grupy obejmującej (a-1), (a-7) lub (a-20);
    każdy s oznacza niezależnie 0 lub 1;
    każdy R6 jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej atom wodoru; furanyl; benzofuranyl; fenyl; Iub fenyl podstawiony przez jeden podstawnik niezależnie wybrany spośród takich jak C1-6alkil, C1-6alkoksyl, hydroksyC1-4alkil, C1-4alkilosulfonyl lub grupę di(C1-4alkilo)aminową i każdy R7 niezależnie oznacza atom wodoru.
  3. 3. Związek według zastrz. 1 albo 2, w którym n oznacza 1 lub 2; t oznacza 0, 1,2 lub 3;
    każdy Q oznacza x ;
    R1 oznacza -C(O)NH(OH);
    2
    R2 oznacza atom wodoru lub C1-6alkil;
    3 każdy R3 niezależnie oznacza atom wodoru;
    R4 oznacza atom wodoru;
    5
    R oznacza atom wodoru lub C1-6alkoksyC1-6alkil;
    ©oznacza rodnik wybrany spośród takich jak (a-1) lub (a-20);
    każdy s oznacza niezależnie 0 lub 1; i każdy R6 jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej atom wodoru; furanyl; benzofuranyl; fenyl; lub fenyl podstawiony przez jeden podstawnik niezależnie wybrany spośród takich jak C1-6alkil, C1-6alkoksyl, hydroksyC1-6alkil lub grupę di(C1-4aikilo)aminową.
  4. 4. Związek według zastrz. 1 albo 2, wybrany ze związków nr 13, nr 15, nr 2, nr 5, nr 21, nr 4, nr 24, nr 32, nr 26, nr 36, nr 38, nr 39, nr 40, nr 41, nr 42, nr 43, nr 44 i nr 35:
    PL 214 279 B1 o --N ,-V pX mmy HO —NH \=Y 7--' \ „ Ύ HO—NH \_ M,, |H Me / o Mo MMM MY Y Związek nr 3 8 Związek nr 39 0 /N i „-„MM -λ\ 0 MK HO—NH 0=-N 0- N o u M -H 7 Mc i\G Ύ MY Y MYM M/ Związek nr 4 0 Związek nr 41 o —N — xCxC HO —NH Υί x— MM ·/ y° 0^=0 0 ,s=o mMmM /=\ /°' yY MMMM My Yy Związek nr 42 Związek nr 43 „MY,. 0 J . ΜΗ h' M __ i M i J Η My / \ 1 VM Związek nr 4 4 Związek nr 35
  5. 5. Kompozycja farmaceutyczna zawierająca farmaceutyczne dopuszczalny nośnik oraz składnik aktywny terapeutycznie, znamienna tym, że zawiera, jako składnik aktywny terapeutycznie, skuteczną ilość związku określonego w zastrz. 1.
  6. 6. Sposób wytwarzania kompozycji farmaceutycznej określonej w zastrz. 5 drogą mieszania składników, znamienny tym, że starannie miesza się farmaceutycznie dopuszczalne nośniki i związek określony w zastrz. 1.
  7. 7. Związek określony w zastrz. 1 do stosowania jako iek.
  8. 8. Zastosowanie związku określonego w zastrz. 1 do wytwarzania leku do leczenia chorób proliferacyjnych.
  9. 9. Sposób wytwarzania związku określonego w zastrz. 1, znamienny tym, że związek pośredni o wzorze (II), w którym n, t, Q, X, Z, R2, R3, R4, R5 i ® mają znaczenia zdefiniowane w zastrz. 1, poddaje się reakcji z odpowiednim kwasem, takim jak np. kwas trifluorooctowy z wytworzeniem kwasu hydroksamowego o wzorze (1-a), w którym R1 oznacza C(O)NH(OH).
PL371100A 2002-03-13 2003-03-11 Pochodna sulfonyloaminowa, sposób jej wytwarzania i zastosowanie oraz kompozycja farmaceutyczna i sposób jej wytwarzania PL214279B1 (pl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US36379902P 2002-03-13 2002-03-13
EP0214481 2002-12-18

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL371100A1 PL371100A1 (pl) 2005-06-13
PL214279B1 true PL214279B1 (pl) 2013-07-31

Family

ID=27806440

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL371100A PL214279B1 (pl) 2002-03-13 2003-03-11 Pochodna sulfonyloaminowa, sposób jej wytwarzania i zastosowanie oraz kompozycja farmaceutyczna i sposób jej wytwarzania

Country Status (24)

Country Link
US (3) US7767679B2 (pl)
EP (1) EP1485354B1 (pl)
JP (1) JP4725945B2 (pl)
KR (1) KR20040094672A (pl)
CN (1) CN1305850C (pl)
AR (1) AR039567A1 (pl)
AT (1) ATE396971T1 (pl)
AU (1) AU2003209727B2 (pl)
BR (1) BR0307599A (pl)
CA (1) CA2476186C (pl)
DE (1) DE60321324D1 (pl)
DK (1) DK1485354T3 (pl)
EA (1) EA007099B1 (pl)
ES (1) ES2306880T3 (pl)
HK (1) HK1080465A1 (pl)
HR (1) HRP20040801A2 (pl)
IL (1) IL164003A (pl)
MX (1) MXPA04007776A (pl)
MY (1) MY140390A (pl)
NZ (1) NZ534771A (pl)
OA (1) OA12793A (pl)
PL (1) PL214279B1 (pl)
TW (1) TWI280958B (pl)
WO (1) WO2003076401A1 (pl)

Families Citing this family (82)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7868204B2 (en) 2001-09-14 2011-01-11 Methylgene Inc. Inhibitors of histone deacetylase
CN1578663B (zh) 2001-09-14 2011-05-25 梅特希尔基因公司 组蛋白脱乙酰化酶抑制剂
US6897220B2 (en) 2001-09-14 2005-05-24 Methylgene, Inc. Inhibitors of histone deacetylase
US7390813B1 (en) 2001-12-21 2008-06-24 Xenon Pharmaceuticals Inc. Pyridylpiperazines and aminonicotinamides and their use as therapeutic agents
DE60321667D1 (en) 2002-03-13 2008-07-31 Janssen Pharmaceutica Nv Piperazinyl-, piperidinyl- und morpholinylderivate als neue inhibitoren von histon-deacetylase
PL220783B1 (pl) * 2002-03-13 2016-01-29 Janssen Pharmaceutica Nv Pochodna sulfonylowa, jej zastosowanie i sposób wytwarzania oraz kompozycja farmaceutyczna
NZ534831A (en) * 2002-03-13 2007-01-26 Janssen Pharmaceutica Nv Carbonylamino-derivatives having histone deacetylase (HDAC) inhibiting enzymatic activity
JP4725944B2 (ja) 2002-03-13 2011-07-13 ジヤンセン・フアーマシユーチカ・ナームローゼ・フエンノートシヤツプ ヒストンデアセチラーゼの阻害剤
NZ534771A (en) 2002-03-13 2006-04-28 Janssen Pharmaceutica Nv Sulfonylamino-derivatives as novel inhibitors of histone deacetylase
TWI319387B (en) 2002-04-05 2010-01-11 Astrazeneca Ab Benzamide derivatives
US7153858B2 (en) * 2003-01-31 2006-12-26 Epix Delaware, Inc. Arylpiperazinyl compounds
MXPA06001202A (es) 2003-07-29 2006-08-31 Xenon Pharmaceuticals Inc Derivados piridilo y su uso como agentes terapeuticos.
CN1829701A (zh) 2003-07-30 2006-09-06 泽农医药公司 哌嗪衍生物和它们作为治疗剂的用途
NZ545265A (en) 2003-07-30 2009-11-27 Xenon Pharmaceuticals Inc Pyridazine derivatives and their use for treating diseases mediated by stearoyl-CoA desaturase (SCD) enzymes
US7754711B2 (en) 2003-07-30 2010-07-13 Xenon Pharmaceuticals Inc. Pyridazine derivatives and their use as therapeutic agents
ES2386353T3 (es) 2003-07-30 2012-08-17 Xenon Pharmaceuticals Inc. Derivados de piridazina y su uso como agentes terapéuticos
AU2004261267B9 (en) 2003-07-30 2009-04-09 Xenon Pharmaceuticals Inc. Pyridyl derivatives and their use as therapeutic agents
AU2004276337B2 (en) 2003-09-24 2009-11-12 Methylgene Inc. Inhibitors of histone deacetylase
US7253204B2 (en) 2004-03-26 2007-08-07 Methylgene Inc. Inhibitors of histone deacetylase
RS51189B (sr) 2004-07-28 2010-10-31 Janssen Pharmaceutica N.V. Supstituisani derivati propenil piperazina kao novi inhibitori histonske deacetilaze
MX2007001120A (es) * 2004-07-28 2007-03-15 Janssen Pharmaceutica Nv Derivados de indolil alquil sustituidos como nuevos inhibidores de la histona desacetilasa.
US7829712B2 (en) 2004-09-20 2010-11-09 Xenon Pharmaceuticals Inc. Pyridazine derivatives for inhibiting human stearoyl-CoA-desaturase
JP4958786B2 (ja) 2004-09-20 2012-06-20 ゼノン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 複素環誘導体および治療薬としてのそれらの使用
AR051026A1 (es) 2004-09-20 2006-12-13 Xenon Pharmaceuticals Inc Derivados heterociclicos y su uso como inhibidores de la estearoil-coa desaturasa
JP4958785B2 (ja) 2004-09-20 2012-06-20 ゼノン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 複素環誘導体およびステアロイル−ＣｏＡデサチュラーゼインヒビターとしてのそれらの使用
EP1799664A1 (en) 2004-09-20 2007-06-27 Xenon Pharmaceuticals Inc. Heterocyclic derivatives and their use as stearoyl-coa desaturase inhibitors
CA2580844A1 (en) 2004-09-20 2006-03-30 Xenon Pharmaceuticals Inc. Heterocyclic derivatives and their use as mediators of stearoyl-coa desaturase
AR051090A1 (es) 2004-09-20 2006-12-20 Xenon Pharmaceuticals Inc Derivados heterociclicos y su uso como inhibidores de la estearoil-coa desaturasa
GB0509225D0 (en) 2005-05-05 2005-06-15 Chroma Therapeutics Ltd Inhibitors of enzymatic activity
GB0509223D0 (en) 2005-05-05 2005-06-15 Chroma Therapeutics Ltd Enzyme inhibitors
US8138198B2 (en) 2005-05-18 2012-03-20 Angibaud Patrick Rene Substituted aminopropenyl piperidine or morpholine derivatives as novel inhibitors of histone deacetylase
GB0510204D0 (en) 2005-05-19 2005-06-22 Chroma Therapeutics Ltd Enzyme inhibitors
US8541457B2 (en) 2005-06-03 2013-09-24 Xenon Pharmaceuticals Inc. Aminothiazole derivatives as human stearoyl-CoA desaturase inhibitors
EP1904452A2 (en) 2005-07-14 2008-04-02 Takeda San Diego, Inc. Histone deacetylase inhibitors
WO2007009236A1 (en) * 2005-07-20 2007-01-25 Merck Frosst Canada Ltd. Heteroaromatic compounds as inhibitors of stearoyl-coenzyme a delta-9 desaturase
EP1928437A2 (en) 2005-08-26 2008-06-11 Braincells, Inc. Neurogenesis by muscarinic receptor modulation
EP2258359A3 (en) 2005-08-26 2011-04-06 Braincells, Inc. Neurogenesis by muscarinic receptor modulation with sabcomelin
EP1940389A2 (en) 2005-10-21 2008-07-09 Braincells, Inc. Modulation of neurogenesis by pde inhibition
WO2007048767A1 (en) * 2005-10-27 2007-05-03 Janssen Pharmaceutica N.V. Squaric acid derivatives as inhibitors of histone deacetylase
EP2314289A1 (en) 2005-10-31 2011-04-27 Braincells, Inc. Gaba receptor mediated modulation of neurogenesis
EP1979326B1 (en) 2006-01-19 2012-10-03 Janssen Pharmaceutica N.V. Pyridine and pyrimidine derivatives as inhibitors of histone deacetylase
AU2007206950B2 (en) 2006-01-19 2012-02-02 Janssen Pharmaceutica N.V. Substituted indolyl-alkyl-amino-derivatives as inhibitors of histone deacetylase
JP5225104B2 (ja) * 2006-01-19 2013-07-03 ジヤンセン・フアーマシユーチカ・ナームローゼ・フエンノートシヤツプ 新しい、ヒストンデアセチラーゼのインヒビターとしてのアミノフェニル誘導体
DK1979328T3 (da) * 2006-01-19 2013-03-25 Janssen Pharmaceutica Nv Pyridin- og pyrimidinderivater i deres egenskab af histondeacetylasehæmmere
CN101374828B (zh) 2006-01-19 2012-09-19 詹森药业有限公司 作为组蛋白脱乙酰酶抑制剂的杂环烷基衍生物
JP5137848B2 (ja) * 2006-01-19 2013-02-06 ジヤンセン・フアーマシユーチカ・ナームローゼ・フエンノートシヤツプ ヒストンデアセチラーゼのインヒビターとしてのピリジン及びピリミジン誘導体
US20100216734A1 (en) 2006-03-08 2010-08-26 Braincells, Inc. Modulation of neurogenesis by nootropic agents
GB0605573D0 (en) * 2006-03-21 2006-04-26 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic Compounds
WO2007114763A1 (en) * 2006-03-31 2007-10-11 Astrazeneca Ab Sulphonamide derivates as modulators of the glucocorticoid receptor
US8598168B2 (en) 2006-04-07 2013-12-03 Methylgene Inc. Inhibitors of histone deacetylase
EP2026813A2 (en) 2006-05-09 2009-02-25 Braincells, Inc. 5 ht receptor mediated neurogenesis
EP2377531A2 (en) 2006-05-09 2011-10-19 Braincells, Inc. Neurogenesis by modulating angiotensin
US20080085874A1 (en) * 2006-08-28 2008-04-10 The Regents Of The University Of California Small molecule potentiator of hormonal therapy for breast cancer
WO2008030651A1 (en) 2006-09-08 2008-03-13 Braincells, Inc. Combinations containing a 4-acylaminopyridine derivative
US20100184806A1 (en) 2006-09-19 2010-07-22 Braincells, Inc. Modulation of neurogenesis by ppar agents
GB0619753D0 (en) 2006-10-06 2006-11-15 Chroma Therapeutics Ltd Enzyme inhibitors
AU2013205135B2 (en) * 2006-10-28 2015-11-05 Forum Pharmaceuticals Inc. Inhibitors of histone deacetylase
AU2007313818B2 (en) * 2006-10-28 2013-02-14 Forum Pharmaceuticals Inc. Inhibitors of histone deacetylase
CN101553475B (zh) 2006-10-30 2013-04-24 色品疗法有限公司 作为组蛋白脱乙酰基酶抑制剂的异羟肟酸
TW200829578A (en) 2006-11-23 2008-07-16 Astrazeneca Ab Chemical compounds 537
JO2754B1 (en) 2006-12-21 2014-03-15 استرازينكا ايه بي Amylendazoleil derivatives for the treatment of glucocorticoid-mediated disorders
US8030344B2 (en) 2007-03-13 2011-10-04 Methylgene Inc. Inhibitors of histone deacetylase
WO2009118370A1 (en) 2008-03-27 2009-10-01 Janssen Pharmaceutica Nv Aza-bicyclohexyl substituted indolyl alkyl amino derivatives as novel inhibitors of histone deacetylase
SA109300309B1 (ar) 2008-05-20 2013-01-22 باير شيرنج فارما ايه جي مشتقات فينيل وبنزو داي أوكسينيل إندازول بها استبدال
TWI558710B (zh) 2009-01-08 2016-11-21 古利斯股份有限公司 具有鋅連接部位的磷酸肌醇３－激酶抑制劑
WO2010099217A1 (en) 2009-02-25 2010-09-02 Braincells, Inc. Modulation of neurogenesis using d-cycloserine combinations
GB0903480D0 (en) 2009-02-27 2009-04-08 Chroma Therapeutics Ltd Enzyme Inhibitors
CN101851199B (zh) * 2010-05-05 2012-07-04 浙江大学 取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物及制备和用途
PL2640709T3 (pl) * 2010-11-16 2016-10-31 Związki pirymidynohydroksyamidowe jako inhibitory deacetylazy białkowej oraz sposoby ich stosowania”
DK2694075T3 (en) 2011-04-01 2016-08-01 Curis Inc Phosphoinositide 3-kinase inhibitor with zinc-binding moiety
AU2013234955A1 (en) 2012-03-23 2014-11-13 Dennis Brown Compositions and methods to improve the therapeutic benefit of indirubin and analogs thereof, including meisoindigo
JP6626437B2 (ja) 2013-10-08 2019-12-25 アセチロン ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＡｃｅｔｙｌｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ． ヒストンデアセチラーゼ阻害剤とＨｅｒ２阻害剤またはＰＩ３Ｋ阻害剤のいずれかの組み合わせ
US9278963B2 (en) 2013-10-10 2016-03-08 Acetylon Pharmaceuticals, Inc. Pyrimidine hydroxy amide compounds as histone deacetylase inhibitors
ES2918673T3 (es) 2013-10-24 2022-07-19 Mayo Found Medical Education & Res Tratamiento de enfermedades poliquísticas con un inhibidor de HDAC6
AU2014360544A1 (en) 2013-12-03 2016-07-21 Acetylon Pharmaceuticals, Inc. Combinations of histone deacetylase inhibitors and immunomodulatory drugs
US9464073B2 (en) 2014-02-26 2016-10-11 Acetylon Pharmaceuticals, Inc. Pyrimidine hydroxy amide compounds as HDAC6 selective inhibitors
AU2015288060A1 (en) 2014-07-07 2017-02-09 Acetylon Pharmaceuticals, Inc. Treatment of leukemia with histone deacetylase inhibitors
CN107438436A (zh) 2014-12-05 2017-12-05 摩德纳和雷焦艾米利亚大学 用于治疗淋巴瘤的组蛋白脱乙酰酶抑制剂和苯达莫司汀的组合
CN106279044B (zh) * 2015-05-28 2021-02-19 厦门市博瑞来医药科技有限公司 嘧啶异羟肟酸衍生物及其制备方法和应用
US10272084B2 (en) 2015-06-01 2019-04-30 Regenacy Pharmaceuticals, Llc Histone deacetylase 6 selective inhibitors for the treatment of cisplatin-induced peripheral neuropathy
JP2019515909A (ja) 2016-04-19 2019-06-13 アセチロン ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＡｃｅｔｙｌｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ． 慢性リンパ性白血病の治療を目的とするｈｄａｃ阻害剤単独またはｂｔｋ阻害剤との配合物
AU2019340376A1 (en) 2018-09-11 2021-04-08 Curis Inc. Combination therapy with a phosphoinositide 3-kinase inhibitor with a zinc binding moiety

Family Cites Families (82)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB901749A (en) 1957-12-06 1962-07-25 Ciba Ltd New 2-substituted pyrimidines
NL297170A (pl) 1963-04-04 1900-01-01
US3459731A (en) 1966-12-16 1969-08-05 Corn Products Co Cyclodextrin polyethers and their production
US3966743A (en) 1968-07-23 1976-06-29 Boehringer Mannheim G.M.B.H. Ortho fused cycloalkano-4-quinolone-3-carboxylic acid derivatives
US4049811A (en) 1968-07-23 1977-09-20 Boehringer Mannheim G.M.B.H. Compositions using cycloalkano-quinolone derivatives and their method of use
GB1345872A (en) 1970-09-03 1974-02-06 Wyeth John & Brother Ltd Amino-and acylamino-pyridine and hydropyridine derivatives
DE2939292A1 (de) 1979-09-28 1981-04-09 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim N-phenoxyalkylpiperidin-derivate, verfahrenn zu deren herstellung sowie diese verbindungen enthaltende arzneimittel
PH17194A (en) 1980-03-06 1984-06-19 Otsuka Pharma Co Ltd Novel carbostyril derivatives,and pharmaceutical composition containing the same
CA1183847A (en) 1981-10-01 1985-03-12 Georges Van Daele N-(3-hydroxy-4-piperidinyl)benzamide derivatives
US4734418A (en) 1984-12-14 1988-03-29 Mitsui Petrochemical Industries, Ltd. Quinazoline compounds and antihypertensives
HU206337B (en) 1988-12-29 1992-10-28 Mitsui Petrochemical Ind Process for producing pyrimidine derivatives and pharmaceutical compositions
JP2664238B2 (ja) 1989-03-01 1997-10-15 日清製粉株式会社 ニコチン酸またはそのエステル誘導体
US5342846A (en) 1990-12-05 1994-08-30 Synphar Laboratories, Inc. 7-substituted-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-quinoline-3-carboxylic acid compounds and 7-(substituted triazolyl pyrrolidin-1-yl) 4-oxoquinoline-3-carboxylic acid derivatives useful as antibacterial agents
DE4228792A1 (de) 1992-08-29 1994-03-03 Hoechst Ag Pyridylaminopiperidine, Verfahren zu ihrer Herstellung, sie enthaltende Mittel und deren Verwendung als Fungizide
US5338738A (en) 1993-04-19 1994-08-16 Bristol-Myers Squibb Company Cerebral function enhancers: acyclic amide derivatives of pyrimidinylpiperidines
US5459151A (en) 1993-04-30 1995-10-17 American Home Products Corporation N-acyl substituted phenyl piperidines as bronchodilators and antiinflammatory agents
FR2722788B1 (fr) 1994-07-20 1996-10-04 Pf Medicament Nouvelles piperazides derivees d'aryl piperazine, leurs procedes de preparation, leur utilisation a titre de medicament et les compositions pharmaceutiques les comprenant
US6083903A (en) 1994-10-28 2000-07-04 Leukosite, Inc. Boronic ester and acid compounds, synthesis and uses
ES2104509B1 (es) 1995-06-13 1998-07-01 Ferrer Int Nuevos compuestos derivados de 2-(3,4-disustituido-1-piperazinil)-5-fluoropirimidina.
HUP9900730A3 (en) 1995-11-23 2001-04-28 Janssen Pharmaceutica Nv Solid mixtures of cyclodextrins prepared via melt-extrusion
ZA9610745B (en) 1995-12-22 1997-06-24 Warner Lambert Co 4-Subsituted piperidine analogs and their use as subtype selective nmda receptor antagonists
US5952349A (en) 1996-07-10 1999-09-14 Schering Corporation Muscarinic antagonists for treating memory loss
US5866702A (en) 1996-08-02 1999-02-02 Cv Therapeutics, Incorporation Purine inhibitors of cyclin dependent kinase 2
EP0827742A1 (en) 1996-09-04 1998-03-11 Vrije Universiteit Brussel Use of histone deacetylase inhibitors for treating fribosis or cirrhosis
AUPO721997A0 (en) 1997-06-06 1997-07-03 Queensland Institute Of Medical Research, The Anticancer compounds
TR200002760T2 (tr) 1998-03-27 2000-12-21 Janssen Pharmaceutica N.V. HIV engelleyici pirimidin türevleri
GB9823873D0 (en) 1998-10-30 1998-12-30 Pharmacia & Upjohn Spa 2-ureido-thiazole derivatives,process for their preparation,and their use as antitumour agents
CN1214013C (zh) 1998-11-10 2005-08-10 詹森药业有限公司 抑制hiv复制的嘧啶类
ATE264311T1 (de) 1999-04-01 2004-04-15 Pfizer Prod Inc Verbindungen zur behandlung und vorsorge bei diabetes
US6518283B1 (en) 1999-05-28 2003-02-11 Celltech R&D Limited Squaric acid derivatives
GB9918035D0 (en) 1999-07-30 1999-09-29 Novartis Ag Organic compounds
EP1233958B1 (en) * 1999-11-23 2011-06-29 MethylGene Inc. Inhibitors of histone deacetylase
US6608052B2 (en) 2000-02-16 2003-08-19 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Compounds useful as anti-inflammatory agents
ATE489360T1 (de) 2000-03-24 2010-12-15 Methylgene Inc Inhibitoren der histon-deacetylase
DE10130374A1 (de) 2001-06-23 2003-01-02 Boehringer Ingelheim Pharma Substituierte N-Acyl-anilinderivate, deren Herstellung und deren Verwendung als Arzneimittel
US6897220B2 (en) 2001-09-14 2005-05-24 Methylgene, Inc. Inhibitors of histone deacetylase
GB0127929D0 (en) 2001-11-21 2002-01-16 Celltech R&D Ltd Chemical compounds
GB0229931D0 (en) 2002-12-21 2003-01-29 Astrazeneca Ab Therapeutic agents
DE60321667D1 (en) 2002-03-13 2008-07-31 Janssen Pharmaceutica Nv Piperazinyl-, piperidinyl- und morpholinylderivate als neue inhibitoren von histon-deacetylase
PL220783B1 (pl) 2002-03-13 2016-01-29 Janssen Pharmaceutica Nv Pochodna sulfonylowa, jej zastosowanie i sposób wytwarzania oraz kompozycja farmaceutyczna
JP4725944B2 (ja) 2002-03-13 2011-07-13 ジヤンセン・フアーマシユーチカ・ナームローゼ・フエンノートシヤツプ ヒストンデアセチラーゼの阻害剤
NZ534771A (en) 2002-03-13 2006-04-28 Janssen Pharmaceutica Nv Sulfonylamino-derivatives as novel inhibitors of histone deacetylase
NZ534831A (en) 2002-03-13 2007-01-26 Janssen Pharmaceutica Nv Carbonylamino-derivatives having histone deacetylase (HDAC) inhibiting enzymatic activity
EP1485378B1 (en) 2002-03-13 2008-06-18 Janssen Pharmaceutica N.V. Piperazinyl-, piperidinyl- and morpholinyl-derivatives as novel inhibitors of histone deacetylase
US6897307B2 (en) 2002-03-28 2005-05-24 Novartis Ag Process for preparing 2,6-diaminopurine derivatives
EP1492534B1 (en) 2002-04-03 2008-06-25 TopoTarget UK Limited Carbamic acid compounds comprising a piperazine linkage as hdac inhibitors
GB0209715D0 (en) 2002-04-27 2002-06-05 Astrazeneca Ab Chemical compounds
DE10233412A1 (de) 2002-07-23 2004-02-12 4Sc Ag Neue Verbindungen als Histondeacetylase-Inhibitoren
EP1525199A1 (en) 2002-08-02 2005-04-27 Argenta Discovery Limited Substituted thienyl-hydroxamic acids as histone deacetylase inhibitors
ITMI20030025A1 (it) 2003-01-10 2004-07-11 Italfarmaco Spa Derivati dell'acido idrossammico ad attivita' antinfiammatoria.
TW200418806A (en) 2003-01-13 2004-10-01 Fujisawa Pharmaceutical Co HDAC inhibitor
WO2004065354A1 (en) 2003-01-17 2004-08-05 Topotarget Uk Limited Carbamic acid compounds comprising an ester or ketone linkage as hdac inhibitors
TW200424174A (en) 2003-02-06 2004-11-16 Hoffmann La Roche New TP diamide
AU2003900608A0 (en) 2003-02-11 2003-02-27 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Hdac inhibitor
US7244751B2 (en) 2003-02-14 2007-07-17 Shenzhen Chipscreen Biosciences Ltd. Histone deacetylase inhibitors of novel benzamide derivatives with potent differentiation and anti-proliferation activity
US7169801B2 (en) 2003-03-17 2007-01-30 Takeda San Diego, Inc. Histone deacetylase inhibitors
TW200424187A (en) 2003-04-04 2004-11-16 Hoffmann La Roche New oxime derivatives and their use as pharmaceutically active agents
EP1611088B1 (en) 2003-04-07 2009-06-17 Pharmacyclics, Inc. Hydroxamates as therapeutic agents
ES2384568T3 (es) 2003-07-30 2012-07-09 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Derivados de indazol
PL1673349T3 (pl) 2003-09-22 2010-11-30 Mei Pharma Inc Pochodne benzimidazolu: wytwarzanie i zastosowania farmaceutyczne
DK1673349T3 (da) 2003-09-22 2010-10-25 S Bio Pte Ltd Benzimidazolderivater: fremstilling og farmaceutiske anvendelser
AU2004276337B2 (en) 2003-09-24 2009-11-12 Methylgene Inc. Inhibitors of histone deacetylase
WO2005040161A1 (en) 2003-10-27 2005-05-06 S*Bio Pte Ltd Biaryl linked hydroxamates: preparation and pharmaceutical applications
EP1685094A4 (en) 2003-10-27 2007-08-22 S Bio Pte Ltd HYDROXAMATES CONNECTED TO ACYLUREE AND SULFONYLUREE
GB0402496D0 (en) 2004-02-04 2004-03-10 Argenta Discovery Ltd Novel compounds
US20050197336A1 (en) 2004-03-08 2005-09-08 Miikana Therapeutics Corporation Inhibitors of histone deacetylase
AU2005225471B2 (en) 2004-03-26 2011-05-12 Methylgene Inc. Inhibitors of histone deacetylase
DE602005014646D1 (de) 2004-07-28 2009-07-09 Janssen Pharmaceutica Nv Substituierte propenylpiperazinderivate als neue inhibitoren von histondeacetylase
MX2007001120A (es) 2004-07-28 2007-03-15 Janssen Pharmaceutica Nv Derivados de indolil alquil sustituidos como nuevos inhibidores de la histona desacetilasa.
RS51189B (sr) 2004-07-28 2010-10-31 Janssen Pharmaceutica N.V. Supstituisani derivati propenil piperazina kao novi inhibitori histonske deacetilaze
US8138198B2 (en) 2005-05-18 2012-03-20 Angibaud Patrick Rene Substituted aminopropenyl piperidine or morpholine derivatives as novel inhibitors of histone deacetylase
EP1899325B1 (en) 2005-06-23 2011-11-16 Janssen Pharmaceutica NV Imidazolinone and hydantoine derivatives as novel inhibitors of histone deacetylase
WO2007016532A2 (en) 2005-08-02 2007-02-08 Novartis Ag Mutations and polymorphisms of hdac4
WO2007048767A1 (en) 2005-10-27 2007-05-03 Janssen Pharmaceutica N.V. Squaric acid derivatives as inhibitors of histone deacetylase
JP5137848B2 (ja) 2006-01-19 2013-02-06 ジヤンセン・フアーマシユーチカ・ナームローゼ・フエンノートシヤツプ ヒストンデアセチラーゼのインヒビターとしてのピリジン及びピリミジン誘導体
AU2007206950B2 (en) 2006-01-19 2012-02-02 Janssen Pharmaceutica N.V. Substituted indolyl-alkyl-amino-derivatives as inhibitors of histone deacetylase
DK1979328T3 (da) 2006-01-19 2013-03-25 Janssen Pharmaceutica Nv Pyridin- og pyrimidinderivater i deres egenskab af histondeacetylasehæmmere
EP1979326B1 (en) 2006-01-19 2012-10-03 Janssen Pharmaceutica N.V. Pyridine and pyrimidine derivatives as inhibitors of histone deacetylase
JP5225104B2 (ja) 2006-01-19 2013-07-03 ジヤンセン・フアーマシユーチカ・ナームローゼ・フエンノートシヤツプ 新しい、ヒストンデアセチラーゼのインヒビターとしてのアミノフェニル誘導体
CN101374828B (zh) 2006-01-19 2012-09-19 詹森药业有限公司 作为组蛋白脱乙酰酶抑制剂的杂环烷基衍生物
MX2009002926A (es) 2006-09-15 2009-03-31 Janssen Pharmaceutica Nv Combinaciones de inhibidores de histona desacetilasa especificos de clase-i con inhibidores del proteasoma.
GB0901749D0 (en) 2009-02-03 2009-03-11 Oxford Nanopore Tech Ltd Adaptor method

Also Published As

Publication number Publication date
US7767679B2 (en) 2010-08-03
OA12793A (en) 2006-07-10
KR20040094672A (ko) 2004-11-10
BR0307599A (pt) 2005-02-01
US8513237B2 (en) 2013-08-20
TW200406382A (en) 2004-05-01
PL371100A1 (pl) 2005-06-13
IL164003A (en) 2011-12-29
US20050171347A1 (en) 2005-08-04
US8163733B2 (en) 2012-04-24
CN1305850C (zh) 2007-03-21
TWI280958B (en) 2007-05-11
EP1485354B1 (en) 2008-05-28
US20100234353A1 (en) 2010-09-16
EA200401204A1 (ru) 2005-02-24
US20120178741A1 (en) 2012-07-12
AU2003209727B2 (en) 2008-10-16
ES2306880T3 (es) 2008-11-16
EA007099B1 (ru) 2006-06-30
DK1485354T3 (da) 2008-09-01
JP4725945B2 (ja) 2011-07-13
DE60321324D1 (de) 2008-07-10
HK1080465A1 (zh) 2006-04-28
CA2476186C (en) 2011-07-19
CN1642912A (zh) 2005-07-20
CA2476186A1 (en) 2003-09-18
JP2005526763A (ja) 2005-09-08
MY140390A (en) 2009-12-31
HRP20040801A2 (en) 2005-04-30
EP1485354A1 (en) 2004-12-15
MXPA04007776A (es) 2004-10-15
NZ534771A (en) 2006-04-28
WO2003076401A1 (en) 2003-09-18
ATE396971T1 (de) 2008-06-15
AR039567A1 (es) 2005-02-23
AU2003209727A1 (en) 2003-09-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL214279B1 (pl) Pochodna sulfonyloaminowa, sposób jej wytwarzania i zastosowanie oraz kompozycja farmaceutyczna i sposób jej wytwarzania
PL205531B1 (pl) Pochodna karbonyloaminowa, jej zastosowanie i sposób wytwarzania oraz kompozycja farmaceutyczna
JP4674045B2 (ja) ヒストンデアセチラーゼの新規な阻害剤としてのピペラジニル−、ピペリジニル−およびモルホリニル−誘導体
CA2572833C (en) Substituted indolyl alkyl amino derivatives as novel inhibitors of histone deacetylase
JP4472353B2 (ja) ヒストンデアセチラーゼの新規な阻害剤としてのアミノ誘導体
CA2633100C (en) Pyridine and pyrimidine derivatives as inhibitors of histone deacetylase
PL220783B1 (pl) Pochodna sulfonylowa, jej zastosowanie i sposób wytwarzania oraz kompozycja farmaceutyczna
KR101282833B1 (ko) 신규한 히스톤 디아세틸라제 저해제로서의 치환된프로페닐피페라진 유도체
PT1781639E (pt) Derivados de indolil alquil amina substituídos como novos inibidores de histona-desacetilase