PL176934B1

PL176934B1 - Sposób wytwarzania kompozycji kosmetycznej zawierającej torfopochodny produkt bioaktywny oraz kompozycja kosmetyczna zawierająca torfopochodny produkt bioaktywny

Info

Publication number: PL176934B1
Application number: PL92298132A
Authority: PL
Inventors: Stanisław Tołpa; Tadeusz Gersz; Stanisława Ritter; Ryszard Kukla; Małgorzata Skrzyszewska; Stanisław Tomków
Original assignee: Torf Ets
Priority date: 1991-03-16
Filing date: 1992-03-04
Publication date: 1999-08-31
Also published as: EP0533865A1; HK1002930A1; ATE162077T1; DE533865T1; ES2041616T3; LV12284A; GR3026215T3; US5747050A; WO1992016216A1; KR100212946B1; GR930300103T1; HU9203583D0; DE69224024T2; PL298132A1; DE69224024D1; HU217370B; DK0533865T3; JP3759162B2; LV12284B; EP0533865B1

Abstract

1. Sposób wytwarzania kompozycji kosmetycznej zawierajacej torfopochodny produkt bioaktywny obejmujacy etap wytwa- rzania produktu oraz laczenia tego produktu z kosmetycznie akceptowalnym nosnikiem i ewentualnie dalszymi dodatkami, znamien- ny tym, ze a) bardzo stezony wodny roztwór soli nieorganicznych, zwlaszcza chlorku sodu zawierajacy torfopochodne skladniki aktywne rozciencza sie zdemineralizowana woda i poddaje odwróconej osmozie (nanofiltracji) w celu odsolenia roztworu przez usuniecie soli nieorganicznych, b) otrzymany odsolony roztwór zateza sie, klaruje i ewentualnie, w co najmniej jednym dodatkowym etapie, sterylizuje sie i/lub poddaje suszeniu rozpylowemu, c) uzyskany w etapie b) torfopochodny produkt bioaktywny w ilosci 0,01-10% wagowych, korzystnie 0,05-1% wagowych a najkorzystniej 0,05-0,1% wagowych laczy sie z kosmetycznie dopuszczalnym nosnikiem i ewentualnie z co najmniej jednym dalszym srodkiem, korzystnie wybranym z grupy obejmujacej alkohole, kwasy organiczne, antybiotyki, srodki konserwujace, stabilizatory, emulsyfikatory, srodki zageszczajace, sole nieorganiczne, oleje naturalne i syntetyczne, olejki eteryczne, detergenty i barwniki oraz d) wskazane skladniki miesza sie i dalej przetwarza do pozadanej postaci nadajacej sie do zastosowan kosmetycznych, wybranej z grupy obejmujacej proszki, sole, papki, szampony, zele, pasty i kompozycje ciekle. 5. Kompozycja kosmetyczna zawierajaca torfopochodny produkt bioaktywny, kosmetycznie dopuszczalny nosnik i ewentu- alnie dalsze dodatki, znamienna tym, ze zawiera 0,01-10% wagowych, korzystnie 0,05-1% wagowych a najkorzystniej 0,05-0,1% wagowych wskazanego wyzej torfopochodnego produktu bioaktywnego w postaci zatezonego roztworu wodnego lub proszku otrzymanego przez wysuszenie takiego roztworu, przy czym wskazany roztwór jest zatezonym ekstraktem z torfu, o nastepujacej charakterystyce: a) zawiera nie wiecej niz 70%, korzystnie nie wiecej niz 60% wagowych soli nieorganicznej, zwlaszcza chlorku sodu, w suchej masie b) ma postac ciemno-brazowej cieczy o gestosci 1,02-1,09 g/ml c) ma zawartosc suchej masy nie wieksza niz 5% wagowych i d) pH 1% wodnego roztworu wynosi okolo 5,0-6,5, korzystnie okolo 6.0 PL

Description

Przedmiotem wynalazku jest nowy sposób wytwarzania kompozycji kosmetycznej zawierającej torfopochodny produkt bioaktywny oraz kompozycja kosmetyczna zawierająca torfopochodny produkt bioaklywny.

Znane jest poddawanie torfu ekstrakcji różnymi sposobami, z zastosowaniem różnych środków ekstrahujących oraz praktyczne wykorzystanie takich ekstraktów, zawierających torfopochodne składniki aktywne.

Jeden ze znanych sposobów opisany jest w polskim opisie patentowym nr 124 110 (Chemical Abstracts 101(10), 78854e). Zgodnie z tym znanym sposobem, torfopochodne produkty bioaktywne otrzymuje się na drodze dwukrotnej hydrolizy alkalicznej surowca torfowego, powietrznie suchego, po której następuje zakwaszenie otrzymanego hydrolizatu, oddzielenie wytrąconych osadów, kolejna alkalizacja, zakwaszenie klarownej fazy ciekłej i usunięcie substancji balastowych na drodze ekstrakcji alkoholowej i eterowej. Zgodnie z tym sposobem faza wodna oddzielona po ekstrakcji rozpuszczalnikami organicznymi stanowi ciekły torfopochodny produkt bioaktywny.

Znany ciekły produkt stanowiący roztwór torfopochodnych składników aktywnych w stężonym, niemal nasyconym, roztworze wodnym chlorku sodowego, otrzymywany zgodnie z cytowanym wyżej polskim opisem patentowym, jest niestabilny przy długotrwałym przechowywaniu, a ponadto zawierał - biorąc pod uwagę aktywność biologiczną mieszaniny - duży nadmiar obojętnych substancji nieorganicznych. Jako produkt objętościowy jest trudny do wprowadzenia do kompozycji kosmetycznych.

Celem obecnego wynalazku jest zapewnienie kompozycji kosmetycznych zawierających torfopochodne produkty bioaktywne, w nowej postaci stałej lub w postaci dowolnego odpowiedniego roztworu.

Z uwagi na wcześniejsze doświadczenia, polegające na zatężaniu znanych roztworów wodnych ciał czynnych z torfu i ich odsalaniu tą drogą, zakończone niepowodzeniem na skutek okluzji składników aktywnych w krystalizującej fazie stałej, powodującej spadek aktywności biologicznej produktu, znaczną trudność stanowiło znalezienie właściwego sposobu przekształcenia ciekłego produktu w postać stałą.

Nieoczekiwanie stwierdzono, że pozytywny wynik osiągnąć można jeśli przed zatężeniem, ciekła kompozycja zostanie najpierw wielokrotnie rozcieńczona wodą, to znaczy zostanie zadana wielokrotnie większą objętością wody w stosunku do objętości rozcieńczanej kompozycji.

Sposób wytwarzania kompozycji kosmetycznej obejmujący etap wytwarzania torfopochodnego produktu bioaktywnego oraz łączena tego produktu z kosmetycznie akceptowalnym nośnikiem i ewentualnie dalszymi dodatkami, według wynalazku polega na tym, że

a) bardzo stężony wodny roztwór soli nieorganicznych, zwłaszcza chlorku sodu zawierający torfopochodne składniki aktywne rozcieńcza się zdemineralizowaną wodą i poddaje odwróconej osmozie (nanofiltracji) w celu odsolenia roztworu przez usunięcie soli nieorganicznych,

b) otrzymany odsolony roztwór zatęża się, klaruje i ewentualnie, w co najmniej jednym dodatkowym etapie, sterylizuje się i/lub poddaje suszeniu rozpyłowemu,

17(5934

c) uzyskany w etapie b) torfopochodny produkt bioaktywny w ilości 0,01-10% wagowych, korzystnie 0,05-1% wagowych a najkorzystniej 0,05-0,1% wagowych łączy się z kosmetycznie dopuszczalnym nośnikiem i ewentualnie z co najmniej jednym dalszym środkiem, korzystnie wybranym z grupy obejmującej alkohole, kwasy organiczne, antybiotyki, środki konserwujące, stabilizatory, emulsyfikatory, środki zagęszczające, sole nieorganiczne, oleje naturalne i syntetyczne, olejki eteryczne, detergenty i barwniki oraz

d) wskazane składniki miesza się i dalej przetwarza do pożądanej postaci nadającej się do zastosowań kosmetycznych, wybranej z grupy obejmującej proszki, sole, papki, szampony, żele, pasty i kompozycje ciekłe.

Zgodnie z wynalazkiem torfopochodny produkt bioaktywny odsala się w etapie a) tak by zawierał nie więcej niż 70%, korzystnie nie więcej niż 60% wagowych soli nieorganicznej, zwłaszcza chlorku sodu w suchej masie.

Według wynalazku jako bardzo stężony wodny roztwór soli nieorganicznych w etapie

a) stosuje się klarowny, przesączony roztworem, który otrzymuje się w wyniku wstępnej i wtórnej hydrolizy alkalicznej powietrznie suchego surowca torfowego, zakwaszenia otrzymanego hydrolizatu, oddzielenia substancji nierozpuszczalnych i uwolnienia otrzymanego roztworu od substancji balastowych na drodze ekstrakcji rozpuszczalnikami organicznymi i usunięcia pozostałości rozpuszczalników organicznych z poekstrakcyjnej fazy wodnej i filtracji tej fazy wodnej pod obniżonym ciśnieniem przez spieki ceramiczne.

W sposobie według wynalazku, korzystnie, w etapie c) wprowadza się co najmniej jeden dalszy składnik, wybrany z grupy obejmującej wyciągi roślinne, zwłaszcza wyciągi ziołowe oraz środki i kompozycje zapachowe.

Kompozyqa kosmetyczna zawierająca torfopochodny produkt bioaktywny, kosmetycznie dopuszczalny nośnik i ewentualnie dalsze dodatki, według wynalazku zawiera 0,01-10% wagowych, korzystnie 0,05-1% wagowych a najkorzystniej 0,05-0,1% wagowych wskazanego wyżej torfopochodnego produktu bioaktywnego w postaci zatężonego roztworu wodnego lub proszku otrzymanego przez wysuszenie takiego roztworu, przy czym wskazany roztwór jest zatężonym ekstraktem z torfu, o następującej charakterystyce:

a) zawiera nie więcej niż 70%, korzystnie nie więcej niż 60% wagowych soli nieorganicznej, zwłaszcza chlorku sodu, w suchej masie

b) ma postać ciemno-brązowej cieczy o gęstości 1,02-1,09 g/ml

c) ma zawartość suchej masy nie większą niż 5% wagowych i

d) pH 1% wodnego roztworu wynosi około 5,0-6,5, korzystnie około 6.0.

Kompozycja kosmetyczna według wynalazku, korzystnie, dodatkowo zawiera co najmniej jeden dalszy składnik wybrany z grupy obejmującej wyciągi roślinne, zwłaszcza wyciągi ziołowe oraz środki i kompozycje zapachowe.

Korzystnie kompozycja kosmetyczna według wynalazku dodatkowo zawiera co najmniej jeden dalszy środek, wybrany z grupy obejmującej alkohole, kwasy organiczne, antybiotyki, środki konserwujące, stabilizatory, emulsyfikatory, środki zagęszczające, sole nieorganiczne, oleje naturalne i syntetyczne, olejki eteryczne, detergenty i barwniki.

Postępując zgodnie ze sposobem według wynalazku w etapie b) odsolony roztwór zatęża się, klaruje przez odwirowanie i sterylizuje na drodze filtracji przez filtr membranowy, przykładowo filtr MILIPORE®' Otrzymany czysty pod względem mikrobiologicznym roztwór ewentualnie poddaje się suszeniu rozpyłowemu. Sterylny produkt (ciekły lub stały) formułuje się we wskazane wyżej kompozycje kosmetyczne. Ewentualnie, zatężony sklarowany roztwór może być wykorzystany z pominięciem etapu sterylizacji i suszenia rozpyłowego, w stosownym rozcieńczeniu jako składnik niektórych kompozycji kosmetycznych, jak przykładowo szampony.

Suszenie rozpyłowe korzystnie prowadzi się przy temperaturze wlotowej na poziome około 180°C i temperaturze wylotowej - na poziomie około 90°C.

Jako bardzo stężony wodny roztwór soli nieorganicznych w etapie a) sposobu według wynalazku jak to opisano wyżej, jest znany z polskiego patentu nr 124 110.

176 934

Ponieważ w szeregu kompozycjach kosmetycznych według wynalazku istotne jest maksymalne obniżenie zawartości soli, zwłaszcza w takich kompozycjach kosmetycznych, w których pożądane jest wysokie stężenie składników bioaktywnych, jak preparaty do twarzy, korzystnie w sposobie według wynalazku obniża się zawartość soli do poziomu 55% lub nawet poniżej 55%, co jest możliwe na drodze rozcieńczenia i odwróconej osmozy (nanofiltracji).

Jeżeli w sposobie według wynalazku przetwarzanie roztworu ciał czynnych z torfu prowadzi się jedynie do etapu zatężenia i klarowania, otrzymany produkt określany jest jako zatężony (lub zagęszczony) roztwór. Zatężony ekstrakt torfowy, i którym mowa jest w dalszej części opisu ciemnobrązowym roztworem o gęstości 1,02-1,09 g/ml i ma zawartość suchej masy nie niższą niż 5% wagowo. Stężenie jonów chlorkowych w suchej masie, w przeliczeniu na NaCl, jest nie wyższe niż 70%, korzystnie nie wyższe niż 60%, a wartości pH 1% wodnego roztworu wynosi 5,0-6,5, generalnie - około 6.0.

Pominięcie etapu sterylizacji nie powoduje niekorzystnych skutków w niektórych przypadkach preparatów kosmetycznych według wynalazku.

Z drugiej strony, wielokrotnie etap sterylizacji jest pożądany. Jeśli następuje po nim suszenie rozpyłowe produkt otrzymywany w wyniku suszenia rozpyłowego ma postać proszku i postać ta może być wykorzystana także w kompozycjach farmaceutycznych, takich jak Preparat Torfowy Tołpy®; TOŁPA® stanowi znak towarowy Torf Corporation Fabryka Leków Sp. z o.o, Wrocław. W dalszej części opisu na oznaczenie wysuszonego rozpyłowo produktu stosowany będzie skrót PTT.

Kompozycje kosmetyczne zawierające ewentualnie ekstrakt ziołowy, inne składniki pomocnicze i wzbogacające, kompozycje zapachowe i nośnik dopuszczony do użytku kosmetycznego, zgodnie z wynalazkiem zawierają obok omówionego wyżej torfopochodnego produktu bioaktywnego we wskazanej ilości: jako nośnik - wodne roztwory alkoholi, wszelkiego typu emulsje, żele, kompozycje pianotwórcze i nośniki tłuszczowe.

Dobór określonego nośnika spośród wyżej wymienionych pozwala na sporządzenie rozlicznych preparatów kosmetycznych według wynalazku, takich jak tonik, kremy 'balsamy, mleczka kosmetyczne do codziennej pielęgnacji ciała, jak również szampony, balsamy do włosów płyny piankowe do kąpieli.

Torfopochodne produkty bioaktywne (ekstrakty torfowe - w skrócie) otrzymywane z surowca torfowego takiego jak (między innymi) naturalna borowina, zawierają korzystnie zbalansowane ilości związków mineralnych i organicznych, takich jak sole mineralne następujących pierwiastków: Si, Al, Mg, Mn, Cu, Sn, Ni, Ca, Ag i Na, związki organiczne takie jak aminokwasy w postaci wolnej i w postaci soli, polisacharydy częściowo zdegradowane/przereagowane w wyniku hydrolizy do dezoksysacharydów i/lub aminocukrów. Torf, a zwłaszcza jego szczególna postać - borowina, jest znany jako materiał biologiczny pochodzenia roślinnego i mikroorganizmowego i z uwagi na obecność w jego składzie substancji odżywczych i stymulujących ma dobroczynny wpływ na organizm człowieka i ssaków. Torfopochodne produkty bioaktywne z uwagi na swe pochodzenie zawierają wskazane substancje w proporcjach charakterystycznych dla organizmów żywych. W tym należy upatrywać przyczyny dobroczynnego wpływu kompozycji kosmetycznych zawierających torfopochodne produkty bioaktywne i ich mieszaniny.

Szczególnie korzystny wpływ nowych kompozycji kosmetycznych według wynalazku obserwuje się gdy ich dodatkowymi składnikami są ekstrakty ziołowe. Dobór ekstraktów ziołowych opiera się na znanych, typowych zastosowaniach tych ekstraktów w kosmetyce.

Modyfikując własności preparatu kosmetycznego według wynalazku dodatkiem odpowiedniego wyciągu ziołowego można stworzyć całą gamę kosmetyków odpowiadających wymaganiom poszczególnych użytkowników, lub wychodzących naprzeciw ich potrzebom.

Wynalazek bliżej ilustrują poniższe przykłady realizacji.

Przykład I. Z wyjściowej szarży 1000 kg powietrznie suchego torfu, postępując przykładowo według sposobu znanego z polskiego opisu patentowego nr 124 110, otrzymano roztwór torfopochodnych produktów bioaktywnych w nasyconym wodnym roztwo6

176 934 rze chlorku sodu, o objętości 10 litrów. Roztwór przesączono przez spiek ceramiczny pod obniżonym ciśnieniem w celu sklarowania roztworu przed jego odsoleniem. Klarowny roztwór otrzymany w ten sposób zawierał 95% NaCl w suchej masie. Sucha masa stanowiła około 32% wagowych tego roztworu. Objętość klarownego roztworu wynosiła 7 litrów.

Powyższy klarowny roztwór rozcieńczono 5-8 krotnie wodą destylowaną i w rozcieńczonej postaci poddano odsalaniu metodą odwróconej osmozy (nanofiltracji) w urządzeniu DDS. Odsalanie prowadzono około 3 do 4 godzin oddzielając nadmiar soli mineralnych - głównie NaCl - w postaci przesączu. Preparat odsolony zawierał około 65-70% chlorku sodu w suchej masie. Otrzymany roztwór, o objętości 6-7 litrów, poddano 4-5 krotnemu zatężaniu w wyparce obrotowej Buchi do zawartości około 20% składników stałych w roztworze. Otrzymany zatężony roztwór sklarowano w wirówce przepływowej Biofuga-Hereus, a następnie poddano sterylizacji na drodze filtracji na filtrze membranowym MILIPORE®. Czysty mikrobiologicznie zatężony i sklarowany roztwór suszono rozpyłowo w suszarce Anhydro przy temperaturze wlotowej powietrza suszącego 180^OC i temperaturze wylotowej - 90°C. Wydajność wysuszonego produktu wynosiła około 200 g.

Dalsze przykłady dotyczą szeregu rozmaitych kompozycji kosmetycznych do różnych zastosowań, zawierających dodatek dobroczynnych składników bioaktywnych otrzymanych z torfu. Między innymi opisano preparaty takie jak toniki, balsamy, mleczka, szampony, pianki do kąpieli i tym podobne.

Przykład II. Do reaktora z mieszadłem wprowadzono 150 g wyciągu z rumianka, otrzymanego przez ekstrakcję koszyczków rumianka roztworem 1:1 etanolu w wodzie i 1 g PTT, opisanego wyżej. Do otrzymanej mieszaniny dodano 50 g gliceryny. Te trzy substancje mieszano aż do uzyskania jednorodnego roztworu. Następnie do tego reaktora dodano wcześniej przygotowaną drugą mieszaninę. Zawierała ona 340 g roztworu 95:5 etanolu w wodzie, 1 g kwasu salicylowego i 0,5 g mentolu. Całość połączono przez mieszanie na jednorodny roztwór. Następnie dodano 3 g kompozycji zapachowej TILIANA H4308. TILIANA H4308 jest wyrobem Fabryki Syntetyków Zapachowych POLLENA-AROMA. Następnie całość dopełniono wodą (454,5 g) destylowaną do łącznej objętości 1000 ml i kontynuowano mieszanie aż do uzyskania homogenicznej mieszaniny.

Zastosowano glicerynę 86%, mentol i wodę destylowaną odpowiadające wymogom Farmakopei Polskiej FP IV. Alkohol etylowy 95% odpowiadał wymogom Polskiej normy branżowej BN-75/6193-01.

Zagęszczony ekstrakt borowinowy miał postać ciemno brunatnej cieczy o gęstości 1,020-1,090 g/ml i zawartości suchej masy nie mniej niż 5%. Wartość pH jego 1% roztworu wynosiła 5,0-6,5. Wyciąg z rumianku miał postać czerwono-brunatnej cieczy o gęstości 0,9160-0,9503 g/ml i zawartości etanolu 52-56% objętościowych.

Otrzymany tonik do twarzy przeznaczony jest dla wszystkich rodzajów cery. Ma postać jednorodnej przejrzystej cieczy bez zmętnień koloru żółtego. Wartość pH 4,28 a zawartość etanolu 45,92% objętościowych. Całkowita kwasowość w przeliczeniu na kwas salicylowy wynosi nie mniej niż 0,1% wagowo, a mianowicie 0,23% wagowo. Kompozycja przechowywana przez 12 miesięcy nie traci swych wyżej określonych cech.

Przykład III. Postępowano jak w przykładzie II, z tą różnicą, że zamiast wyciągu z rumianka i kompozycji zapachowej TILIANA H4308 użyto w tych samych proporcjach wyciągu z kwiatu nagietka i kompozycję zapachową FINUS H4625 (także produkcji Fabryki Syntetyków Zapachowych POLLENA-AROMA). Otrzymany tonik był właściwy dla cery suchej i wrażliwej. Miał postać klarownej cieczy bez zmętnień\2n\l. Wartość pH wynosiła 4,30, całkowita zawartość etanolu - 45,82% objętościowo, a całkowita kwasowość 0,27% wagowo. Podobnie jak w przypadku kompozycji z przykładu IV, po 12 miesiącach przechowywania właściwości jej nie uległy zmianie.

Przykład IV. Postępowano jak w przykładzie III z tą jedynie różnicą, że zamiast wyciągu z rumianku i kompozycji zapachowej TILIANA H4308, użyto w tych samych proporcjach wyciągu z liści szałwii i kompozycji zapachowej LELIA 90368 (POLLENA176 934

AROMA). Wyciąg z liści szałwii otrzymano na drodze ekstrakcji suchych liści etanolem w temperaturze 50°C. Miał barwę brązowawą, charakterystyczny zapach szałwii i gęstość 0,9160-0,9503 g/ml. Zawierał 52-56% etanolu. Otrzymany środek do pielęgnacji twarzy przeznaczony był w szczególności dla cery tłustej. Miał postać klarownego, homogenicznego płynu o ciemno żółtym kolorze. Wartość pH, zawartość etanolu i kwasowość kompozycji były porównywalne do tych samych parametrów toniku z przykładu III.

Przykład V. Do reaktora o pojemności 2000 ml wyaosażonego w mieszadło mechaniczne wprowadzono starannie odmierzone ilości następujących składników:

270 g wyciągu z rumianka otrzymanego na drodze ekstrakcji koszyczków rumianka 50% etanolem; ekstrakt był cieczą o czerwono-brunatnej barwie, gęstości 0,9160-9503 g/ml i zawartości etanolu około 55% objętościowo, g gliceryny; 86% według wymogów Farmakopei Polskiej, FPIV, g wyciągu z mydlnicy lekarskiej otrzymanego na drodze ekstrakcji korzenia mydlnicy lekarskiej 70% etanolem; ekstrakt był cieczą o barwie czerwono-brunatnej, gęstości 0,9630-0,9910 g/ml i zawartości etanolu 75% objętościowo,

1,0 g zatężonego ekstraktu torfowego, stanowiącego ciecz o barwie ciemnobrunatnej, gęstości 1,02-1,09 g/ml, zawartości nie więcej niż 2% jonów chlorkowych w przeliczeniu na chlorek sodu, zawartości części stałych nie mniejszej niż 5% i pH roztworu wodnego, 1% około 6,0.

Wymienione składniki starannie wymieszano. Następnie dodano wcześniej przygotowany roztwór 1 g kwasu salicylowego w 260 g etanolu 95%. Do połączonego roztworu dodano 383 g wody destylowanej i 5 g kompozycji zapachowej TILIANA H4308. Całość mieszano aż do otrzymania jednorodnego roztworu. Otrzymano środek do pielęgnacji włosów, w postaci łagodnie opalizującej przejrzystej cieczy, zawierającej około 45% objętościowych etanolu; pH środka było 4,5; ogólna kwasowość w przeliczeniu na kwas salicylowy była nie niższa niż 0,1% wagowo. Środek przeznaczony był do włosów blond.

Otrzymaną kompozycję rozkonfekcjonowano, po uprzedniej analizie, do handlowych opakowań jednostkowych o pojemności 200 ml. W ciągu 12 miesięcy przechowywania, środek nie stracił swych wyżej określonych właściwości.

Przykład VI. Postępowano jak w przykładzie V z tą jedynie różnicą, że zamiast wyciągu rumiankowego i kompozycji zapachowej TILIANA H4308 zastosowano w tych samych proporcjach i z tą samą kolejnością dodawania wyciąg z ziela skrzypu i kompozycję zapachową FINUS H4625. Wyciąg z ziela skrzypu był cieczą o barwie zielono-brunatnej, gęstości 0,9160-0,9503 g/ml i zawartości etanolu - 55% objętościowo. Otrzymano środek do pielęgnacji włosów przeznaczonych do wszystkich rodzajów włosów. Miał on postać przejrzystej Warownej cieczy bez cząstek stałych, o żółto-brunatnym zabarwieniu, wartości pH, zawartości etanolu i ogólnej kwasowości, a także stabilności w okresie 12 miesięcy przechowywania takich samych jak w przypadku preparatu z przykładu V.

Przykład VII. Postępowano jak w przykładzie V, z tą jedynie różnicą, że zamiast wyciągu z koszyczków rumianku i kompozycji zapachowej TILIANA H4308 zastosowano w tych samych proporcjach i zachowując tę samą kolejność dodawania wyciąg z liści pokrzywy i kompozycję zapachową LELIA 90368 (produkt Fabryki Syntetyków Zapachowych POLLENA-ArOmA). Użyty wyciąg ziołowy miał postać roztworu o barwie oliwkowo-zielonej, gęstości 0,9160-0,9503 g/ml i zawartości etanolu około 55% objętościowo. I ten środek przeznaczony był do włosów wszystkich rodzajów.

Przykład VIII. Generalnie mleczka kosmetyczne stanowią zawiesiny substancji tłuszczowych działające mechanicznie i chemicznie na cerę. Ze względu na dogodność w nanoszeniu na skórę i lepsze oddziaływanie płynów na cerę płynne kremy (mleczka) stanowią dogodną formę kosmetyku. Tak zwane kremy emulsyjne mogą łatwiej penetrować do głębszych warstw skóry przeciwdziałając zmianom skóry wraz z wiekiem. Mleczka kosmetyczne stosuje się głównie do oczyszczania skóry suchej i wrażliwej. W związku z tym nie mogą zawierać jakichkolwiek drażniących lotnych olejków zapachowych, często zawierają dodatek wyciągów roślinnych przykładowo ekstrakt rumiankowy, taki jak azulan, lub

176 934 wyciąg z kiełków pszenicy. Wprowadzenie torfopochodnych produktów bioaktywnych do receptury mleczka kosmetycznego oraz różnorodnych wyciągów roślinnych powoduje ich uszlachetnienie i podnosi ich wartość kosmetyczną. Nowa receptura mleczka kosmetycznego jest następująca:

PTT 0,05 g wyciąg aloesowy 20,000 g gliceryna 3,00 g euceryna 2,00 g olej parafinowy 1,00 g trójetyloamina 1^,00 g

AEROSIL® (krzemionka koloidalna) 4,00 g

Przykład IX. Zwiększone działanie regeneracyjne zaobserwowano gdy do klasycznych kremów odżywczych i regenerujących wprowadzono dodatek PTT i starannie dobranych składników tłuszczowych. W nowych kremach zastosowano PTT w ilości 0,01-1,00% wagowych w połączeniu z wyciągiem ziołowym (dobranym pod kątem własności cery dla jaldej krem jest przeznaczony) w ilości co najmniej 0,05-1,00% wagowych, środkiem bakteriobójczym w ilości 0,05-1,00% wagowych, syntetyczną kompozycją zapachową w ilości 0,01-0,05% wagowych i nośnika tłuszczowego w postaci wodnej emulsji stanowiącego 97-99,50% wagowych całej kompozycji. Kompozycja tłuszczowa winna stanowić dobry nośnik dla składników aktywnych i dobrze wchłaniać się w skórę. Korzystnie stanowi ją emulsja (wszystkie ilości wyrażono w % wagowych) euceryny 35-45, wazeliny 8-14, oliwy z oliwek 2,5-4, gliceryny 6-10, i wody 35-40. Korzystnymi wyciągami roślinnymi są wyciąg nagietkowy, rumiankowy, tymiankowy i tym podobne. Korzystne receptury są następujące:

1. Euceryna wazelina oliwa z oliwek gliceryna woda

NIPAGINA A (środek bakteriobójczy)

PTT wyciąg nagietkowy syntetyczna kompozycja zapachowa

39,00 cz. wagowych 11,50 cz. wagowych 3,13 cz. wagowych 7,80 cz. wagowych 38,00 cz. wagowych 0,40 cz. wagowych 0,05 cz. wagowych 0,10 cz. wagowych 0,02 cz. wagowych

RAZEM

100,00 cz. wagowych

2. Euceryna wazelina oliwa z oliwek gliceryna woda

NIPAGINA A (środek bakteriobójczy) PTT wyciąg rumiankowy syntetyczna kompozycja zapachowa

42,00 cz. wagowych 8,50 cz. wagowych 3,08 cz. wagowych 7,90 cz. wagowych

38,00 cz. wagowych 0,40 cz. wagowych 0,05 cz. wagowych 0,02 cz. wagowych 0,05 cz. wagowych

RAZEM

100,00 cz. wagowych

Przykład X. Środek po goleniu zawiera PTT jak wyciąg torfowy w ilości 0,01-1% wagowych, wyciąg roślinny w ilości 1-30% wagowych, glicerynę w ilości 1-8% wagowych, kwas salicylowy i mentol w środowisku alkoholowo-wodnym. Korzystnie jako wy<^i:^|g roślinny środek zawiera wyciąg rumiankowy, nagietkowy, tymiankowy, aloesowy i inne tym podobne dobroczynne wyciągi ziołowe. Dodatek gliceryny korzystnie wpływa na właściwo176 934 ści nawilżające środka, powodujące zwiększenie elastyczności skóry. Przyspiesza rozprowadzanie środka po twarzy oraz penetrację składników aktywnych w głębsze warstwy skóry zw^^ikis^^jąc tym samym dobroczynne skutki działania torfopochodnego produktu bioaktywnego i wyciągu ziołowego.

Korzystnie receptura środka po goleniu jest następująca:

PTT 0,10 cz. wagowych wyciąg rumiankowy 11,00 cc. wago\ay± gliceryna 5,C)0 cc. wagovayZl mentol 0,W cc. wago'wchl kwas salicylowy O/Hl cc. wago\tych etanol (stężenia 95%) 1^,00 cc. wagoowch kompozycja zapachowa 0,00 cz. wagovach woda destylowana - do 1.(^0,00 cc.

Przykład XI. Sporządzono kompozycję szamponową według następującej receptury;

wyciąg z mydlnicy lekarskiej	15,00 g	7,70% wagowwcy
wyciąg pokrzywowy	20,00 g	10,00%
GAMALSBS-11 (detergent)	00,00 g	15,00% %^^<^ό7ο1ι
GAMAL NO-0 (detergent)	20,00 g	10,00% wagowach
Aseptina	0,40 g	0,22% wwagotydi
etanol	1,60 g	0,880% wwagowyh
BRONOPOL (konserwant)	0,04 g	0,002% wwagowyc
Chlorek sodu	6,00 g	30,00% wwagowyc
woda	106,96 g	53,48% wagowych
RAZEM	200010 g	100,00% wagowych

Do 92 części wagowych otrzymanej kompozycji szamponowej dodano 8 części wagowych PTT otrzymując 100 cz. wagowych szamponu według wynalazku. Przygotowano inne szampony w wyżej podanym składzie zastępując wyciąg pokrzywowy innymi ekstraktami ziołowymi.

Przykład XII. Sporządzono następującą kompozycję szamponową:
wyciąg z kasztanowca	11,00 g
wyciąg nagietkowy	22,,)0 g
GAMALSBS-11	30,00 g
GAMAL NO-0	20,()0 g
Aseptina	0,40 c
etanol	136 c
BRONOPOL	0,00 g
Chlorek sodu	6,00 g
woda	W0,06 g
RAZEM	220,00 c

Do 95 części wagowych powyższej kompozycji szamponowej dodano 5 części wagowych PTT otrzymując 100 części wagowych szamponu według wynalazku.

Przykład XIII. Pasta do zębów zawiera PTT jako stężony ekstrakt torfowy w ilości 0,01-0,10% wagowych, olejki eteryczne lub ich kompozycje lub też esencje owocowe w ilości 1-10% wagowych, glicerynę w ilości 5-10% wagowych, wyciągi ziołowe w ilości 0,10-10% wagowych, substancje czyszczące w ilości 20-05% wagowych, zawieszone w wodzie w ilości 45-60% wagowych i barwniki lub środek wybielający w ilości 1-2% wagowych.

176 934

Dwutlenek tytanu wykorzystano jak środek wybielający, PTT wykorzystywany jest równocześnie jako środek bakteriobójczy, jako dobroczynne ekstrakty ziołowe stosuje się wyciąg rumiankowy, szałwiowy lub nagietkowy. Korzystna receptura pasty do zębów jest następująca:

węglan wapnia strącony	150,00 g
węglan magnezu	60,00 g
gliceryna	70,00 g
wyciąg ziołowy	5,00 g
PTT	0,50 g
dwutlenek tytanu	10,00 g
olejki eteryczne	5,00 g
(miętowy, cytrynowy itp)
lub ich kompozycja lub esencja owocowa
woda	400,00 g
barwnik do koloru	ślad
Przykład XIV. Nowy balsam do włosów zawiera PTT w ilości 0,01-1% wago-

wych, wyciągi roślinne w ilości 0,01-10% wagowych, środki antyelektrostatyczne w ilości 3-4% wagowych, środki zapobiegające nadmiernemu przesuszaniu włosów i skóry w ilości do 2% wagowych, glicerynę w ilości 1-5% wagowych środki konserwujące i stabilizujące w ilości 0,05-0,50% wagowych i wodę do 100% wagowych. Jako środek antyelektrostatyczny balsam według wynalazku zawiera alkoholowy roztwór chlorków trójmetyloamoniowych otrzymanych z amin tłuszczowych pochodzenia zwierzęcego, jako środek zagęszczający a także stabilizujący - alkohol kosmetyczny, jako środek zapobiegający nadmiernemu przesuszaniu włosów i skóry - oleje roślinne działające jednocześnie jako współemulgatory oraz glicerynę jako czynnik ułatwiający rozprowadzenie preparatu i przyspieszający jego penetrację, zwłaszcza składników aktywnych: PTT i wyciągów roślinnych. Ponieważ środowisko kwaśne zapobiega rozwojowi bakterii balsam według wynalazku zawiera kwas cytrynowy lub fumarowy w ilości 0,1% a także środek konserwujący znany pod nazwą BRONOPOL oraz kompozycje zapachowe. Korzystna receptura balsamu do włosów jest następu^ją^ca:

3-4% wagowych

3-4% wagowych 0,01-1% wagowych 0,01-10% wagowych 1,5% wagowych do 2% wagowych 0,1% wagowych 0,1% wagowych 0,3% wagowych do 100% wagowych.

alkoholowy roztwór chlorków trójmetyloamoniowych alkohole kosmetyczne

PTT

Zagęszczone wyciągi roślinne gliceryna oleje roślinne kwas cytrynowy lub fumarowy BRONOPOL kompozycja zapachowa woda destylowana

Poniższe wyjaśnienia i informacje dotyczą biologicznych właściwości produktów torfopochodnych otrzymywanych w etapach a) i b) sposobu według wynalazku, zilustrowanych badaniami przedstawionymi w tabelach 1-24.

W dalszym tekście i w tabelach używane będą następujące skróty:

PTT = Preparat Torfowy TOŁPA® produkt Torf Corporation Sp.z o.o., Wrocław, Polska

IFN = Interferon istnieje jako wszechobecna cytokina (hormon tkankowy). Geny interferonu zawarte są we wszystkich komórkach. IFN indukują głównie proteiny i glikoproteiny. Substancje stymulujące geny INF do produkcji IFN nazywane są induktorami. Proces indukcji IFN jest ściśle kontrolowanym złożonym procesem biochemicznym; stwierdzono istnienie genów kontrolujących produkcję IFN w sposób pozytywny i negatywny. Niewielkie ilości IFN mogą być produkowane spontanicznie bez wykrywalnych

176 934 induktorów. Tak wytworzone interferony określa się często mianem interferony fizjologiczne. W przyrodzie IFN występuje w trzech różnych postaciach cząsteczkowych: IFN-α (IFN leukocytowy), IFN-β (IfN fibroblastowy) i IFN- (IFN immunologiczny). IFN-α i IFN-β stanowią interferony typu I (I-IFN), IfN- jest interferonem typu II (II-IFN). Podstawowe działanie biologiczne interferonów jest działaniem przeciwwirusowym, antyproliferacyjnym (przeciwnowotworowym) i immunomodulacyjnym. Na rynku osiągalne są liczne postaci IFN wytwarzanych przemysłowo jako preparaty naturalne i rekombinacyjne (otrzymywane techniką inżynierii genetycznej) do stosowania terapeutycznego w leczeniu chorób nowotworowych, wirusowych i wielu innych.

CTL = cytotoksyczny limfocyt T

Komórki NK = komórki naturalne kilery (zabijające)

IL-1, IL-2 = doskonale znane interleukiny stymulujące proliferację komórek T i innych komórek limfoidalnych, w tym komórek B,

RPMI1640 = medium do hodowli tkankowej przykładowo ludzkich i innych leukocytów (skrót od nazwy producenta: Roswell Park Memoriał Institute, Buffalo),

FCS = surowica płodowa cielęcia (przy użyciu w oznaczeniach z leukocytami konieczne jest wstępne przebadanie tej surowicy, ponieważ może zawierać substancje mitogeniczne naśladujące działanie interleukin),

EMCV = wirus wywołujący encephalomyocarditis, mysi wirus picorna niepatogeniczny w stosunku do ludzi, często stosowany w biotestach jako wirus wyzwalający IFN,

A-549 = linia komórkowa ludzkiego nowotworu adenocarcinoma stosowany w biotestach na IFN z uwagi na jej wysoką wrażliwość na działanie interferonów α, β i. Linia ta jest rekomendowana do takich zastosowań przez ekspertów Światowej Organizacji Zdrowia przy standardyzacji interferonów.

MTT = bromek 3-[4,5-(^'Wljl^tit;ylcrti^lzol-2-iilo]^;2,.5^<J^^I.j^?f^^^lo1^<^'trazoliowy; reagent stosowany do oznaczania zabitych komórek lub wzrostu komórek w pewnych biotestach, wykorzystujących skanery ELISA (Hansen et al., J.Immunol. Meth. 1989,119, 203-210).

L929 = linia komórek mysich powszechnie wykorzystywanych w oznaczeniach mysich interferonów oraz ludzkich lub mysich czynników nekrozy nowotworów.

TNF = czynnik nekrozy nowotworów; cytokina (stosunkowo małe białko bardzo wrażliwe na enzymy proteolityczne) wytwarzana przez monocyty i makrofagi (TNF-α znany także jako kahektyna, czynnik wywołujący kaheksję u ludzi i u zwierząt), wytwarzany po stymulacji LPS (lipopolisacharydami), wirusami bakteriami i wielu innymi czynnikami; bardzo toksyczny dla komórek zainfekowanych wirusami i dla komórek nowotworowych; może też działać jako czynnik wzrostu dla fibroblastów; związany z reakcjami zapalnymi; forma pokrewna TNF-β (limfotoksyna) jest wytwarzana głównie przez komórki T i niektóre inne komórki.

PBL = leukocyty krwi obwodowej, normalne ludzkie leukocyty od zdrowych dawców, wyizolowane z tak zwanych kożuszków - stanowiących interfazę pomiędzy czerwonymi krwinkami a plazmą. Reakcja PBL pochodzących od różnych dawców na działanie różnych induktorów cytokin zależy od ich indywidualnych uwarunkowań genetycznych. Można wyróżnić osoby o silnej reakcji (odpowiedzi immunologicznej) i o słabej reakcji oraz takie, które zupełnie nie reagują. Uwaga ta odnosi się także do reakcji PBL na PTT. Różnorodne reakcje na działanie induktorów IFN lub TNF łatwiej można zaobserwować w doświadczeniach z łagodnymi induktorami niż wówczas, gdy stosuje się bardzo silne induktory, takie jak wirusy. Wynika to stąd, że słabe induktory powodują reakcję typu wszystko lub nic, podczas gdy wirusy zawsze indukują wykrywalne ilości cytokin.

Tolerancja na działanie induktora - zwana także stanem hyporeaktywności. Występuje po podaniu pojedynczej dawki induktora, przykładowo po 20 godzinach oddziaływania induktora (np. wirusa) na PBL; komórka przestaje dalszej produkcji IFN. Stan hyporeaktywności trwa zazwyczaj około 7 dni. Może być całkowita lub częściowa. Taka reaktywność powoduje, że terapeutyczne wykorzystanie silnych induktorów jest trudne i/lub

176 934 nieskuteczne. Łagodne induktory albo wcale nie wywołują stanu hyporeaktywności albo tolerancja jest mała.

Kilka naturalnych ekstraktów z roślin leczniczych posiada właściwości immunomodulacyjne. Badania wykazują, że PTT okazuje się być jednym z nich. PTT wpływa na wiele różnych funkcji immunologicznych zarówno in vivo jak i in vitro. Inicjuje zrównoważoną immunostymulację, przejawiając zdolność do niespecyficznego aktywowania wszystkich ścieżek efektorowych (CD4m helpery, łagodna supresja CD8, CTL, komórki NK i aktywowane makrofagi) bez cytotoksyczności względem normalnych tkanek.

W odniesieniu do obecnego wynalazku istotne znaczenie ma fakt, że PTT ma odtwórcze działanie na tkanki, co leczniczo wykorzystuje się przy gojeniu ran. Małe dawki PTT łagodnie stymulują produkcję IL-1 i EL-2. Wysokie dawki mogą hamować syntezę cytokin. Odpowiednie próby na aktywność PTT prowadzone są w następujący sposób: PBL od zdrowych dawców oczyszczono stosując chlorek amonu. Prowadzono hodowlę tkankową w środowisku RPMI1640 z dodatkiem 10% FCS. Kultury zawierające około 8 x 10⁶ komórek/ml inkubowano przez 20 godzin w 37°C w atmosferze powietrza z dodatkiem 5% CO2. Przeciwwirusową aktywność wytworzonego IFN mierzono oznaczając zahamowanie cytopatycznego wpływu EMCV na ludzkie komórki linii A549. Zabite komórki oznaczano metodą MTT.

Aktywność TNF mierzono z zastosowaniem komórek linii L929. W celu zidentyfikowania typu IFN poszczególne próbki IFN zadawano surowicami anty-IFN przez 1 godzinę. Ich aktywność przeciwwirusową porównywano z aktywnością próbek nie poddanych działaniu surowic.

Badania wskazują, że PTT stymuluje produkcję endogennych interferonów (IFNs) i czynnika nekrozy nowotworów (TNF). Reakcja jest zależna od dawki. Siedem przebadanych szarż produkcyjnych PTT miało porównywalną aktywność biologiczną jako immunostymulanty i induktory cytokin.

W badaniach stosowano silne poliklonalne antysurowice, takie jak anyt-IFN-α (Cantell), anty-IFN-α Ly (Namalwa) od K. Fantes i anty-IFN- (Cantell) w celu zneutralizowania aktywności przeciwwirusowej obserwowanej w supernatantach kultur PBL traktowanych przez 20 godzin PTT.

Rezultaty prób neutralizacyjnych okazały się być cechą indywidualną dawców krwi, z której wyodrębniono leukocyty do badań, porównywalną z indywidualnymi odciskami palców. Innymi słowy proporcje poszczególnych typów interferonów indukowanych w hodowlach leukocytów zmieniają się w sposób istotny w zależności od dawcy. Rozdział PBL na frakcje adhezyjną i nieadhezyjną może spotęgować syntezę cytokin.

Hyporeaktywność (tolerancja) na indukcję TNF przez NDV (wirus choroby z Newcastle) obserwowana 20 godzin po wstępnej stymulacji PBL dawką PTT obserwowana była bądź na poziomie minimalnym bądź nie obserwowano jej w ogóle.

Badania siedmiu szarż produkcyjnych PTT z zastosowaniem ludzkich PBL., mające na celu stwierdzenie własności indukowania IFN i TNF wykazały, że posiadały one zdolność indukowania IFN i/lub TNF.

Optymalne stężenie PTT ze względu na indukcję IFN wynosiło 30-100 μ g/ml a na indukcję TNF 100-200 μ g/ml. Dawka 200 μ g/ml może mieć charakter dawki subtoksycznej dla hodowli PBL ale synteza TNF zachodzi szybciej niż synteza IFN i szybciej niż rozwinięcie umiarkowanej toksyczności.

Na podstawie wyników wyżej omówionych badań zaobserwowano, że aktywną stroną PTT jest immunoaktywna frakcja ekstraktu torfowego, zawierająca przede wszystkim związane cukry, aminokwasy, kwasy uronowe, substancje z grupy kwasów huminowych i sole mineralne zawierające mikroelementy. Dawka LD50 dla zwierząt wynosi >2400 mg/kg przy podawaniu doustnym.

Nie stwierdzono mutagenicznego, genotoksycznego, teratogennego ani rakotwórczego działania PTT. PTT nie wykazuje aktywności alergogennej i nie działa drażniąco przy

176 934 stosowaniu zewnętrznym co jest szczególnie istotne ze względu na zgodne z wynalazkiem przeznaczenie PTT do kompozycji kosmetycznych.

Istotnym stwierdzeniem o dużej wadze dla bezpieczeństwa zastosowań kosmetycznych może być ustalenie, że kultury PBL traktowane PTT przez 20 godzin w temperaturze 37° C nie rozwiiają stanu hyporeaktywności, bowiem zachowują zdolność produkowania IFN pod wpływem NDV, silnego induktora INF.

Załączone tabele 1 - 24 odnoszą się do wyników różnych badań biologicznych, przykładowo toksykologicznych, hematologicznych i immunologicznych. Zawartość tabel mówi sama za siebie i stanowi kompletną informację istotną dla specjalistów-biologów, odnoszącą się do kompatybilności i biologicznej aktywności PTT.

Warto zaznaczyć, że stężenie składników aktywnych w preparatach kosmetycznych jest znacznie niższe niż stężenie przewidywane w odniesieniu do PTT dla preparatów farmaceutycznych, nie objętych obecnym wynalazkiem.

Kompozycje kosmetyczne - przeciwnie niż preparaty farmaceutyczne - stosowane są w raczej niekontrolowany sposób, nakładane są miejscowo z różną szybkością penetracji do różnych komórek.

Niektóre kompozycje kosmetyczne jak przykładowo szampony, które zmywa się prawie natychmiast po nałożeniu, mają bardzo krótkotrwały kontakt z ciałem lub włosami, mogą więc zawierać stosunkowo więcej dobroczynnego składnika. Inne kosmetyki stosowane są kilka razy dziennie i dlatego powinny mieć niższą zawartość składnika czynnego.

W końcu zaś, w przypadku pasty do zębów wchodzącej w kontakt z błoną śluzową w jamie ustnej, składnik aktywny penetruje znacznie łatwiej przez tę błonę niż w przypadku innych kosmetyków przez skórę i dlatego stężenie składnika aktywnego w paście może być niższe.

Poniższe tabele 1 - 24 ilustrują wybrane właściwości biologiczne produktu torfopochodnego określanego jako PTT.

Tabela 1

TOKSYCZNOŚĆ OSTRA WPŁYW PODANIA DOŻOŁĄDKOWEGO PTT NA PARAMETRY BIOTECHNICZNE KRWI KRÓLIKÓW

Płeć	Dawka PTT g/kg	Termin badania (dzień)	Badane parametry
Kreatynina (mg%)	Białko całkowite (g/l)	y-globuliny (g%)
	0.0	0	1.09±0.03	65.0±33.49	0.53±0.00
Z		7	1.03±0.02	62.0±0.33	0.56+0.01
2.0	0	1.06±0.01	58.0±1.46	0.50±0.02
		7	1.14±0.38	57.08±1.54	0.54±0.01
	5.0	0	0.96±0.12	70.3±3.52	0.55±0.00
		7	0.94±0.13	60.0±2.34	0.57±0.00
	0.0	0	0.80±0.11	73.8±3.23	0.72±0.06
		7	0.82±0.13	75.3±1.02	0.79±0.03
M	2.0	0	0.88±0.05	64.6±2.86	0.62±0.10
		7	1.24±0.34	64.6±2.03	0.67±0.07
	5.0	0	0.85±0.03	58.5±3.19	0.57±0.02
		7	1.04±0.12	57.6±4.68	0.56±0.01

176 934

Tabela 2

TOKSYCZNOŚĆ OSTRA WPŁYW PODANIA DOŻOŁĄDKOWEGO PTT NA AKTYWNOŚĆ AMINOTRANSFERAZ (ALAT i AspAT).

W SUROWICY KRWI KRÓLIKÓW

Płeć	Dawka PTT g/kg	Termin badania (dzień)	Badane parametry
ALAT (j.m.)	AspAT (j.m.)
	0.0	0	8.67±1.20	22.33±2.60
Ż		7	9.67±0.33	28.67±3.75
2.0	0	10.33±1.76	18.33±4.09
		7	12.33±3.52	20.00±5.03
	5.0	0	11.33±1.66	22.33±3.52
		7	11.00 ±3.05	20.67±4.66
	0.0	0	10.33±1.76	23.00±3.05
		7	12.00±2.64	25.67 ±4.17
M	2.0	0	9.00±1.00	18.CX)±1.52
		7	9.00±0.57	20.66±3.52
	5.0	0	8.00±1.00	18.00±1.00
		7	11.33±1.66	23.00±1.99

Tabela 3

TOKSYCZNOŚĆ OSTRA. WPŁYW PODANIA DOŻOŁĄDKOWEGO PTT NA PARAMFETRY HEMATOLOGICZNE KRÓLIKÓW

Płeć	Dawka PTT g/kg	Termin badania (dzień)	Badane parametry
Hb (mg%)	Ht (%)	Leukocyty (^ty^s.)	Erytrocyty (min)
	0.0	0	12.4±0.44	38.3±1.85	7.32±0,43	5.21±0.20
Z		7	11.8±0.63	37.7±1.20	6.30±0.66	5.11±0.11
2.0	0	11.5*0.31	36.7±0.88	5.69±0.58	5.86±0.55
		7	12.3±0.48	38.3±0.66	5.74±0.76	5.69±0.11
	5.0	0	12.3+0.14	40.7±2.6	7.35±0.99	5.42±0.20
		7	11.6±0.23	37.3±0.33	8.55±1.79	5.08±0.19
	0.0	0	12.0±0.85	37.3±1.20	11.10±0.63	4.53±0.26
		7	11.9±0.61	35.7±1.85	10.80±0.94	4.54±0.19
M	2.0	0	12.8±0.26	43.7 ±4.80	9.94±2.00	4.46±0.65
		7	11.8±0.39	34.7±2.02	11.06±1.08	5.37±0.56
	5.0	0	12.7±0.63	38.7±2.40	9.52±1.36	4.59±0.16
		7	10.6±1.04	34.0±2.08	8.87±1.73	5.72±0.66

176 934

Tabela 4

TOKSYCZNOŚĆ PRZEWLEKŁA. WPŁYW DOZOŁĄDKOWEGO PODAWANIA PTT NA MASĘ NARZAZÓW KRÓLIKÓW

Sex	Dawka preparatu (mg/kg)
0,0	50	150	0,0	50	150
Ż	M
Narząd	Masa narządów w % masy ciał
Płuca	0.72±0.08	0.61±0.17	0.67±0.02	0.56±0.05	0.54±0.09	0.71±0.14
Serce	0.23±0.01	0.22±0.02	0.25±0.03	0.24±0.02	0.23±0.01	0.23±0.02
Śledziona	0.057±0.01	0.051±0.00	0.079±0.02	0.05±0.01	0.06±0.01	0.04±0.01
Wątroba	2.85±0.15	3.02+0.08	3.22± 0.37	2.82±0.09	2.77±0.28	3.12±0.06
Nerki	0.59±0.03	0.52±0.02	0.50±0.01	0.48±0.03	0.55±0.01	0.49±0.03
Nadnercza	0.016±0.01	0.015±0.01	0.020±0.01	0.013±0.01	0.013±0.02	0.12 ± 0.0
Jajniki z macicą	0.58±0.04	0.39±0.02	0.60±0.04	-	-	-
Jądra	-	-	-	0.30±0.01	0.32±0.03	0.36±0.02

Tabela 5

TOKSYCZNOŚĆ PRZEWLEKŁA WPŁYW PODANIA DOZOŁĄDKOWEGO PTT NA PARAMETRY HEMATOLOGICZNE KRÓLIKÓW

Płeć	Dawka PTT mg/kg	Termin badania (tyg·)	Badane parametry
Hb (mg%)	HT (%)	Leukocyty (tys.)	Erytrocyty (min)
1	2	3	4	5	6	7
M	0.0	0	12.2±0.05	38.2±1.71	9.33±0.79	5.10±0.56
		7	12.3±0.15	40.7 ±0.33	9.39±1.18	6.34±0.23
		6	3.0±0.35	41.7 ±1.30	9.58±1.12	7.32±0.70
		12	13.5±0.19	40.7±0.67	11.23+1.20	6.30±0.46
M	50	0	12.9±0.55	35.7±1.82	7.52±0.78	5.14±0.47
		3 6	13.3 ±0.35	41.0±2.10	8.08±1.17	6.38±0.11
		12	13.7±0.11	39.3±0.94	9.36±1.01	6.19±0.19
M	150	0	14.20±0.21	36.7±1.81	8.19±0.16	5.34±0.16
		3	11.05±0.26	38.5±1.53	8.83±0.78	5.68±0.40
		6	12.40±0.63	37.3±1.45	8.18±0.06	6.84±0.10
		12	13.70±0.32	39.0±0.68	8.24±0.04	6.54±0.54
Z	0.0	0	12.6±0.27	40.2±0.83	7.07±1.16	5.63±0.17
		3	12.1±0.23	39.8±0.72	8.16±1.01	5.74±0.12
		6	12.4+0.86	42.3±1.20	9.78±1.69	5.86±0.24
		12	12.5±0.87	37.7±2.18	10..90+2.16	4.60±0.29
Z	50	0 O	13.2+1.20	35.0±1.70	7.44±0.98	5.47±0.50
		3 6	13.0±0.55	39.3±1.20	7.25±0.96	7.08±0.94
		12	12.8±0.21	37.7±4.33	9.31±0.35	6.02±0.32

176 934 cd. tabeli 5

1	2	3	4	5	6	7
Ż	150	0	15.2±1.15	38.3±1.40	8.50±0.54	6.09±0.08
		3	13.1+1.10	47.0+2.80	8.10±0.76	5.85±0.57
		6	12.5±0.82	41.0±1.15	6.85 ±0.31	5.61±0.30
		12	13.:1+0.70	41.0+1.00	8.15 ±1.68	5.92±0.13

Tabela 6

WPŁYW PTT NA AKTYWNOŚĆ FAGOCYTARNĄI ZDOLNOŚĆ BÓJCZĄ NEUTROFILÓW KRWI OBWODOWEJ KRÓLIKA

Grupa	n	Liczba neutrofilów a tys/1mm	% neutrofilów NBI +	Aktywność fagocytama
L.H	L.W
		0	3	6	0	3	6	0	3	6	0	3	6
Kontr. 1 ml	6	1.9	2.3	2.4	14.3	15.1	17.6	54.5	60.6	59.8	7.53	7.53	7.61
PBS i.v.		±0.9	±1.1	±0.4	±4.6	±4.6	±3.0	±9.4	±4.8	±6.8	±0.77	±0.86	±0.4
PTT (d.1)			*o			*o	*o		*	*		*
5 mg/kg i.v.	15	2.0	1.2	1.7	18.4	26.8	27.2	59.2	69.3	74.9	8.75	10.3	9.88
		±0.9	±0.7	±7.1	±7.1	±6.7	±7.0	±6.7	±7.0	±7.8	±1.18	±1.25	±1.0
PTT(d.2)			*o	*o		*o	*o			*o
5 mg/kg i.v	8	2.8	1.6	1.6	15.5	22.1	26.5	63.0	69.5	76.5	7.76	8.52	8.56
		±0.8	±0.6	±1.0	±4.9	±7.0	±9.1	±7.0	±7.1	±8.9	±0.83	±1.04	±1.0

- przed podaniem PTT

- po 3 dniach podawania PTT

- po 6 dniach podawania PTT

d. 1 - doświadczenie pierwsze

d. 2 - doświadczenie drugie * - zmiana statystycznie istotna p < 0,05 w stosunku do wartości przed podaniem badanego preparatu o - zmiana statystycznie istotna przy p < 0,05 w stosunku do grupy kontrolnej

Tabela 7

WPŁYW PTT NA CAŁKOWITĄ LICZBĘ LIMFOCYTÓW ORAZ ODSETEK LIMFOCYTÓW T(rozety E) I LIMFOCYTÓW B (rozety EAC) W KRWI OBWODOWEJ KRÓLIKA

Grupa	o Liczba limfocytów tys/1 mm‘	% rozet E	% rozet EAC
n	0	6	0	6	0	6
Kontrola i.v. i.v. 1 ml PBS #	6	6.6±2.0	6.0±1.9	19.0±5.7	20.1±5.5	42.1±6.3	42.3±2.05
PTT i.v. 5 mg/kg #(Dośw. 1)	15	6.6±1.5	5.4±1.4	19.2±4.1	*o 27.1±3.2	43.7±2.6	47.7±4.9
PTT i.v. 5 mg/kg # (Dośw. 2)	8	6.0±1.0	6.8±0.6	17.0±1.9	*o 24.8±2.9	41.6±1.3	41.0±2.1

n - liczba testowanych zwierząt

PBS - roztwór buforu fosforanowego

- przed podaniem badanego preparatu

- po 6 dawkach PTT # - dzień podania =, +1, +2, +3, +4, +5 * - zmiana statystycznie istotna przy p 0,05 w stos. do wartości przed podaniem PTT o - zm. statystycznie istotna przy p 0,05 w stos. do wartości kontrolnej

176 934

Tabela 8

LICZBA PRZECIWCIAŁ PO PRZEWLEKŁYM PODAWANIU PTT

Czas podawania PTT wtyg.	Kontrola	PTT 10 mg/kg n = 10	PTT 50 mg/kg n = 10
PFC/106 splenocytów
4 dzień	7 dzień	4 dzień	7 dzień	4 dzień	7 dzień
3	367:t 157	156 + 41	1110 ± 328*	336 ± 240*	777 ± 236*	151 ± 57
5	572± 1.34	138 ±47	1552 ± 346*	222 ± 62*	11ć^^± 280*	260 ±00
7	518± 55	133 ± 40	669± 136*	159 ± 44	772 ± 258*	141 ± 63
9	466± 185	175 ± 75	335 ± 94	112 ± :36	4H ± 138	167 ± 22
12	287±18	153 ±30	228 ± 131	m ± :39	376 ± 130	167 ± 69

* - zmiana statystycznie istotna przy p < 0,05 w stosunku do wartości kontrolnej

Tabela 9

STĘŻENIE PRZECIWCIAŁ ANTY-SRBC (19S + 7S) PO PRZEWLEKŁYM PODAWANIU PTT

Czas podawania PTT wtyg.	Kontrola	PTT 10 mg/kg n = 10	PTT 50 mg/kg n = 10
HEMAGLUTYNINY, log. odwrotności miana
4 dzień	7 dzień	4 dzień	7 dzień	4 dzień	7 dzień
3	6.45±1.47	7.12±1.36	7.8ϋ±0.97*	^±1.46*	7.OO±0.14*	6.9ϋ±L67
5	1.70±1.14	6.50± 1.00	7.70 ±0.84*	9.1O±O.0O*	4.4O±0.61*	9.33±2.90*
7	6.60±O.48	1.2O±0.71	4.40+1.11*	4.10±4.76*	6.1O±0.76*	λ^Ι^
9	6.00±1.14	4.66± 1.24	6.10±1.07	4.00±0.71	2.90±1.20	6.63±1.12
12	1.70±0.71	4.40± 1.01	1.1l±1.09			6.10±1.41

* Zmiana statystycznie istotna przy p < 0,05 w stosunku do wartości kontrolnej

Tabela 10

STĘŻENIE PRZECIWCIAŁ ANTY-SRBC (7S) PO PRZEWLEKŁYM PODAWANIU PTT

Czas podawania PTT wtyg.	Kontrola	PTT 10 mg/kg n = 10	PTT 50 mg/kg n = 10
HEMAGLUTYNINY, log. odwrotności miana
4 dzień	7 dzień	4 dzień	7 dzień	4 dzień	7 dzień
3	1.75±4.64	6.67±0.71	6.2O±0.87*	5.90 ±1.70	3.80+0^	4.9O±0.71*
5		6.12±1.16	0.20±0.97	1.70±1.14	0.60±l.11	1.63±4.41*
7	1.OO±0.89	6.70±1.49	0.6O±O.74	2.^^±1.11*	0.55 ^^.83	2.55 ±0.68*
9		3.66±1.01	0.30±O.64	6.21±0.96	0.00	4.63±1.21
12	0.7O±0.94	6.74±0.46	1.11±0.99	A^telU	1.55+1.49	^Oi!^

zmiana statystycznie istotna przy p < 0,05 w stosunku do wartości kontrolnej

176 904

Tabela 11

IMMUNOMODELUJĄCY WPŁYW PTT (M±SD)

Dawka PTT mg/kg	n	n PFC/10⁶splenocytów 4 dzień	% rozet E 4 dzień	Hemaglultyniny* typu 19S+7S 4 dzień	Hemaglutyniny typu 7S 7 dzień
Kontrola	00	469±010	^^.(5^0.2	0.0±1.0	8.2±L8
0.5	10	997^x±109	^^.(^^1.4	6.^1.0	8.4±1.1
2.5	10	809^ 177	203^4.1	6.9^1.0	9.7x±1.4
5.0	10	746^x±109	20.0^x±4.7	7.2^χ±0.6	9.8X±1.4
10.0	10	790^x±109	18.4^4.0	83^x±1.8	O0.4X±1.1
25.0	10	560±145	16.0^25	6.1±1.1	9.0X±1.1
50.0	10	4(KI±57	14.7 ±4.0	53±0.K	6.7±L9
100.0	10	075x±67	11.0^X±2.0	5.1±0.8	0.7X±0.6
250.0	10	3K0^x±67	9.5^X±2.0	^±1.1	5.0X±1.7

x różnica statystycznie istotna przy α = 0,05 (test t) * log2 miana

Tabela 12

ROZDZIELENIE DAWKI DZIENNE.! PTT NA TRZY DAWKI JEDNORAZOWE

Dawka PTT	n	4 dzień po immunizazji SRBC	10 dzień po immunizazji SRBC
% rozet E	PFC/10⁶ splen^cytów	Hemag logi/	lutyniny miano	Hemaglutyniny log2/miano
19S+7S	7S	19S+7S	7S
Kontrola 11 x 03 ml.	15	13.7 ±0.0	469±100	5.7±13	,^±1.0	9.8±0.3	8.4±1.6
Kontrola 10 x 0.1 ml	15	15.3±4.0	079±143	6.1±1.1	0.6 ±0.9	9.0±1.7	8.6±1.8
2.5 mg/kg 1 x 0.0 ml	15	19.4*±3.8	864*±190	7.4’^IT	1.1±1.1	10.4* ±1.6	9.6* ±1.2
2.5 mg/kg 3x0.0 ml	15	19.0^.0	769* ± 030	7.1*±0.8	0.5 ±0.8	9.5 ±1.0	9.0±2.0
10 mg/kg 101 x 0.0 ml	15	19.3*±4.1	795*^102	7^*±Q.7	,^±1.0	10.4 *±1.6	9.4*±1.0
10 mg/kg 0 x 0.1 ml	15	07.5±3.7	656±128	73* ±1.4	0.3±1.0	8.9±1.8	8.8±1.5

* - zmiana statystycznie istotna przy p = 0,05 w stosunku do wartości kontrolnej

Tabela 10

WPŁYW PTT STOSOWANEGO DOUSTNIE PRZEZ 12 TYGODNI NA ODPOWIEDŹ IMMUNOLOGICZNĄ MYSZY IMMUNIZOWANYCH KRWINKAMI OWCY

Tydzień	4 dzień	10 dzień
PFC/10⁶ hemaglutyniny	PFC/10⁶ hemaglutyniny
% rozet E	spleno- cytów	log 2/miano	% rozet E	spleno cytów	log2/miano
19S + 7S	7S	19S+7S	7S
1	2	3	4	5	6	7	8	9
0	15^0.8	565±56	6.O±0.9	1^13	14.7±0.4	256±67	8.7±1.0	7.9±1.0
	20.7* ±7.8	1035 *±17	7.5*±05	2.9* ±0.2	23.5* ±0.7	406*±88	10.4*±0.0	9.7*±1.0

176 934 cd. tabeli 13

1	2	3	4	5	6	7	8	9
5	13.8+2.4	422+63	5.1+0.9	0	1.7 ±2.1	209+41	7.1+1.4	6.7+1.6
	23.0*+6.1	933*+248	7.6*+1.5	0 2.7*+1.5	20.5*+2.7	430*+86	11.0*+1.2	11.0*+1.0
7	12.8+2.9	495 +85	4.6+1.1	0.5+0.9	14.0+5.1	245 +48	8.8+1.6	7.9+1.6
	20.5*+5.3	1120*+214	7.9*+0.6	2.1*+1.5	26.9*+7.7	437*+117	11.3*+1.0	10.3*+0.4
9	15.0+2.1	531+67	62+0.8	0.5+0.9	14.1+2.8	294+58	8.7+1.5	8.4+1.5
	18.6*+2.8	1049*+184	7.7*+0.7	1.9+1.2	18.2*+3.4	515*+530	11.9*+0.8	10.5*+1.0
12	15.0+2.6	573+143	7.2+1.0	1.4+1.2	16.5+2.6	266+ 58	7.5+1.1	7.1+0.8
	14.1+2.7	770*+132	72+1.4	1.7+1.7	19.0+4.1	294+ 65	11.8*+0.4	10.6* + 1.0

* - zmiana statystycznie istotna przy p = 0,05 w stosunku do wartości kontrolnej. W każdej grupie doświadczalnej było 40 sztuk zwierząt.

Tabela 14

WPŁYW WARUNKÓW PRZECHOWYWANIA NA AKTYWNOŚĆ PTT W ZAKRESIE ZDOLNOŚCI TWORZENIA ROZET E

Dawka	n	% rozet E
Aktywność wyjściowa	po 2-miesięcznym przechowywaniu
w temp. +4°C	w temp. pokojowej z dostępem światła	w temp. pokojowej w ciemności
Kontrola	8	13,15+2,4	12,8+2,3	12,8+2,3	12,,8+2,3
0.1 mg/kg	8	15,8+1,7	16,1+3,04	15,1+2,9	16,0+5,5
1 mg/kg	8	18,0+0.8*	19,8+4,1	15,3+2,8	19,8+2,7*
10 mg/kg	8	20,4+4,2	18,0+4,5*	16,8+2,4*	16,9+3,5*

* - zmiana statystycznie istotna przy α = 0,05 w stos. do wartości kontrolnej

Tabela 15

WPŁYW WARUNKÓW PRZECHOWYWANIA NA AKTYWNOŚĆ PTT W OCENIE LICZBY KOMÓREK PRODUKUJĄCYCH PRZECIWCIAŁA TYPU 19S

Dawka	n	PFC/106 splenocytów
Aktywność wyjściowa	po 2-miesięcznym przechowywaniu
w temp. +4°C	w temp. pokojowej z dostępem światła	w temp. pokojowej w ciemności
Kontrola	8	571+69	514+128	514+128	514+128
0,1 mg/kg	8	747+144	1039+326*	718+135	1002+210*
1 mg/kg	8	1204+155*	1026±314*	793+186*	10-45+331*
10 mg/kg	8	1075 ±232*	1070+249	869+160*	840+137*

- zmiana statystycznie istotna przy α = 0,05 w stosunku do wartości kontrolnej

176 934

Tabela 16

WPŁYW WARUNKÓW PRZECHOWYWANIA NA AKTYWNOŚĆ PTT W OCENIE WPŁYWU NA WYTWARZANIE PRZECIWCIAŁ ANTY - SRBC TYPU 19S + 7S

Dawka	n Dzień	Aktywność wyjściowa	Po 2-miesięcznym przechowywaniu
Temp.+4^OC	Temp. pokojowa światło	Temp. pokojowa ciemność
4 dz.	10 dz.	4dz.	10 dz.	4dz.	10 dz.	4 dz.	10 dz.
Kontrola	8	5.6±0.9	9.8±0.6	5.0±1.1	9.5±2.1	5.0±1.1	9.5 ±2.1	5.0±1.1	9.6±2.1
0.1 mg/kg	8	7.4±0.4*	11.4+1.3*	7.8±1.0*	10.5+1.7*	5.4±0.8	10.8+0.7*	65+0.7*	12.6+2.2*
1 mg/kg	8	6.8±6.3*	12.2+1.1*	6.7±0.4*	13.8+2.1*	6.2±0.3*	13.2+0.4*	6.5±Ł3*	13.1+1.3*
10 mg/kg	8	6.4±1.2	11.0+1.4*	6.2±0.6	12.0+2.3*	4.8±1.3	10.6+2.4*	6.0±0.5	13.6+1.3*

* - zmiana statystycznie istotna przy a = 0,05 w stosunku do wartości kontrolnej

Tabela 17

WPŁYW WARUNKÓW PRZECHOWYWANIA NA AKTYWNOŚĆ PTT W OCENIE WPŁYWU NA WYTWARZANIE PRZECIWCIAŁ ANTY-SRBC TYPU 7S

Dawka	n Dzień	Aktywność wyjściowa	Po 2-miesięcznym przechowywaniu
Temp.+4°C	Temp. pokojowa światło	Temp. pokojowa ciemność
4 dzień	10 dz.	4 dz.	10 dz.	4dz.	10 dz.	4dz.	10 dz.
Kontrola	8	0.4±0.8	9.2±0.7	0.3±0.7	8.1±1.4	0.3±0.7	8.1±1.4	0.3±0.7	8.1±1.4
0.1 mg/kg	8	0	10.8+1.0*	0.7±0.9	9.8±0.9*	0.8±0.9	10.0+0.6*	0.7±0.9	11.3+1.4*
1 mg/kg	8	0.8±0.9	10.6+0.4*	0.3 ±0.7	11.5+1.8*	0.7±0.9	1.3±0.7*	0.7±0.9	11.0+1.0*
10 mg/kg	8	0	10.2+1.3*	0.3 ±0.7	9.8±1.0	0.3±0.7	10.7 ±2.0*	0.7±0.9	10.3+0.9*

* - zmiana statystycznie istotna przy α - 0,05 w stosunku do wartości kontrolnej

Tabela 18

WARTOŚCI PARAMETRÓW HEMATOLOGICZNYCH U OSÓB ZDROWYCH PRZED I PO 14 DNIACH PODAWANIA PTT W DAWCE 1 mg/dziennie

Parametr	Placebo n=5	PTT n=5
0	14 doba	0	14 doba
Erytrocyty x 10⁶/wl	4.44 ±0.46	4.32 ±0.45	4.32 ±0.32	4.18 ±0.32
Hemoglobina g/dl	12.4 ±2.5	11.9±2.8	12.8 ±0.8	11.8 ±0.6
Hematokryt %	38.1 ±6.7	38 ±6.9	38..7 ±2.1	38.1 ±1.6
Leukocyty x 103/wl	5.25 ±0.59	52Ί ±0.8	5.23 ±0.6	4.86 ±0.6
Neutrofile %	52.6 ±12	57.6±11	54.2 ±2.5	55 ±3.6
Limfocyty %	26 ±7.5	30.4 ±8.3	34 ±4.1	32.4 ±5.3
Płytki krwi x 103/ul	22Q ±<0.4	214 ±35.8	221 ±38	214 ±39.6
OB mm/1h	7.6 ±9	5.6 ±1.9	7.8 ±2.7	6.8 ±3.1

176 934

Tabela 19

BIOCHEMICZNE PARAMETRY KRWI U OSÓB ZDROWYCH PRZED i PO 14 DNIACH PODAWANIA PTT W DAWCE 1 mg/dziennie

Parametr	Placebo n-5	PTT n=5
0	14 doba	0	14 doba
Białko ogółem g/l	72.8 ±1.76	68.42 ±3.2	73.8±1.92	70 ±5.5
Albuminy %	63.2 ±2.5	63.8 ±2.3	63.6±1.8	64.4 ±2.1
Globuliny al, %	3.1 ±0.4	3 ±0.5	2.8 ±0.5	2.8
Globuliny a2, %	5.95 ±1.9	6.i8 ±1.5	6.93 ±0.9	06.9 ±0.9
Globuliny beta, %	14.4 ±2.2	14.2 ±1.5	13.3 ±1.9	13.2±1.3
Globuliny gamma, %	12.2±i.5	12.1 ±1.3	13.7 ±0.9	12.3 ±1
IgGg/l	10.3 ±1.1	10.2 ±1	11..7 ±1.6	11.1 ±1.4
IgAg/l	1.8 ±0.6	1.9 :^0.5	1.8 ±0.5	1.^ ±0.5
IgMg/l	1.4 ±0.3	1.4 ±0.2	1.:1 ±0.2	14 ±0.4
Dopełniacz C3, g/l	1.1 ±0.1	1.1 ±0.1	1.1 ±0.2	0.2 ±0.2
Dopełniacz C4, g/l	0.2 ±0.5	9.:3 ±0.04	0.2 ±0.0	0.2 ±0.03
AlatU/1	34.2 ±0.05	0.3 ±0.04	30..2 ±8.2	31.2 ±3.2
Aspat U/l	32.8 ±4.4	40.2 ±6.6	30.4 ±7.1	39..5 ±6.6

Tabela 20

PORÓWNANIE CZĘSTOŚCI OSTRYCH INFEKCJI DRÓG ODDECHOWYCH W OSTATNIM KWARTALE 198911990 r. W DWÓCH GRUPACH OSÓB, KTÓRE OTRZYMAŁY W PAŹDZIERNIKU 1990 r. PREPARAT TORFOWY TOŁPY BĄDŹ PLACEBO

	PTT stosowanyw IV kwartale 1990 r.
n	IV kw. 89 r. średnia liczba infekcji jednego chorego (bez PTT)	IV kw. 90 r. średnia liczba infekcji na jednego chorego (po PTT)	Statystyczna ocena różnicy p
Katar	20	4.0 ±1.3	1.0 *0.5	< 0.01
Ból gardła	20	3..3 ±1.3	0.8 ±0.6	< 0.01
Opryszczki	20	2.1 ±2.2	0.3 ±0.4	< 0.01
Kaszel	20	1.4 ±1.1	0.3 ±0.6	< 0.01
Zap. oskrzeli ostre	20	0.3 ±0.5	0
Zap. płuc	20	0.2 ±0.9	0

176 934 cd tabeli 20

	Placebo stosowane w IV kwartale 1990 r.
n	IV kw. 89 r. (bez PTT) średnia liczba infekcji na jednego chorego	IV kw. 90 r. (po PTT) średnia liczba infekcji na jednego chorego	Statystyczna ocena różnicy p
Katar	20	3.^9 ±1.4	3.1 ±1.5	> 0.05
Ból gardła	20	2.3 ±2.0	23 ±1.7	>0.05
Opryszczki	20	2.3 ±1.8	1.7 ±2L1	>0.05
Kaszel	20	1.5 ±1.5	1.9 ±2.0	> 0.05
Zap. oskrzeli ostre	20	0.1 ±0.3	0.1 ± 0.3
Zap. płuc	20	0.1 ±0.3	0.1 ±0.3

Tabela 21

WYNIKI PRÓB ŚRÓDKSÓRNYCH Z ANTYGENAMI BAKTERYJNYMI i PHA U CHORYCH, U KTÓRYCH STOSOWANO PREPARAT A (PTT)

Lp.	Pacjent (inicjały	Tuberkulina RT 23	Streptolizyna 0	Anatoksyna gronkowcowa	PHA	NaCl 0.9%
przed	3	przed	3	przed	3	przed	3	przed	3
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12
1.	B.T.	+	+	+	+	-	±	-	-	-	-
2.	P.E.	-	+	+	+	±	-	-	-	-	-
3.	M.H.	+ +	+ +	+ +	+ +	±	±	-	-	-	-
4.	W.H.	-	-	-	+	-	-	-	-	-	-
5.	W.H.	-	+	-	-	+	-	-	-	-	-
l	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12
6.	Z.N.	+ +	+ +	-	-	-	+ +	-	-		-
7.	P.J.	-	+	+ +	+ +	+	+	-	-	-	-
8.	S.M.	+ +	+ +	+	+	±	+	-	-	-	-

przed - przed leczeniem 3 - po 3 tyg. leczenia

Tabela 22

WYNIKI PRÓB ŚRÓDSKÓRNYCH Z ANTYGENAMI BAKTERYJNYMI I PHA U CHORYCH, U KTÓRYCH STOSOWANO PREPARAT B (PLACEBO)

Lp.	Pacjent (inicjały	Tuberkulina RT i 23	Streptolizyna 0	Anatoksyna gronkowcowa	PHA	NaCl 0.9%
przed	3	przed	3	przed	3	przed	3	przed	3
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12
1.	M.M	-	-	+	+ +	£	-	-	-	-	-
2.	O.T.	+	+	-	-		±	-	-	-	-

176 934 cd.tabeli 22

1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12
3.	O.H.	+ +	+ + +	+ +	+ +	+	-	-	-	-	-
4.	W.J.	-	-	-		-	-	-	-	-	-
5.	K.C.	-	-	+	+		+	-	-	-	-
6.	M.J.	+ +	+ +	+ +	+	-	+	-	-	-	-
7.	B.W.	-	-	+	+ +	-	+	-	-	-	-
8.	K.T.	-	-	+	+	+	+	-	-	-	-

przed - przed leczeniem 3 - po 3 tyg. leczenia

Tabela 23

STĘŻENIE IMMUNOGLOBULIN W SUROWICY KRWI U CHORYCH LECZONYCH NA OWRZODZENIE GOLENI PREPARATEM PTT

n	Badane grapy	Immunoglobuliny w mg%
Bad. I(przed Leczeniem)	Bad. II(po leczeniu)
8		1	IgG	±207.52	7	IgG	1732.87 ±207.52
A	2	IgA	304.25 ±47.50	8	IgA	283.87 ±44.10
	3	IgM	202.87 ±71.12	9	IgM	189.75 ±775.15
8		4	IgG	1924.37 ±246.25	10	IgG	1972.00 ±239.33
B	5	IgA	296.50 ±59.84	11	IgA	285.50 ±56.76
	6	IgM	242.12 ±56.95	12	IgM	232.87 ±65.45
Ocena statystyczna ró	żnic	1vs 7 p > 0.05 2 vs 8 p > 0.05 3 vs 9 p > 0.05	4 vs 10 p > 0.05 5 vs 11 p > 0.05 6 vs 12 p > 0.05
	1vs4 p > 0.05 2 vs 5 p > 0.05 3 vs 6 p > 0.05	7 vs 10 p > 0.05 8vs 11 p > 0.05 9 vs 12 p > 0.05

176 934

Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 70 egz. Cena 4,00 zł.

Claims

Zastrzeżenia patentowe

1. Sposób wytwarzania kompozycji kosmetycznej zawierającej torfopochodny produkt bioaktywny obejmujący etap wytwarzania produktu oraz łączenia tego produktu z kosmetycznie akceptowalnym nośnikiem i ewentualnie dalszymi dodatkami, znamienny tym, że

a) bardzo stężony wodny roztwór soli nieorganicznych, zwłaszcza chlorku sodu zawierający torfopochodne składniki aktywne rozcieńcza się zdemineralizowaną wodą i poddaje odwróconej osmozie (nanofiltracji) w celu odsolenia roztworu przez usunięcie soli nieorganicznych,

b) otrzymany odsolony roztwór zatęża się, klaruje i ewentualnie, w co najmniej jednym dodatkowym etapie, sterylizuje się i/lub poddaje suszeniu rozpyłowemu,

c) uzyskany w etapie b) torfopochodny produkt bioaktywny w ilości 0,01-10% wagowych, korzystnie 0,05-1% wagowych a najkorzystniej 0,05-0,1% wagowych łączy się z kosmetycznie dopuszczalnym nośnikiem i ewentualnie z co najmniej jednym dalszym środkiem, korzystnie wybranym z grupy obejmującej alkohole, kwasy organiczne, antybiotyki, środki konserwujące, stabilizatory, emulsyfikatory, środki zagęszczające, sole nieorganiczne, oleje naturalne i syntetyczne, olejki eteryczne, detergenty i barwniki oraz

d) wskazane składniki miesza się i dalej przetwarza do pożądanej postaci nadającej się do zastosowań kosmetycznych, wybranej z grupy obejmującej proszki, sole, papki, szampony, żele, pasty i kompozycje ciekłe.
2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że torfopochodny produkt bioaktywny odsala się w etapie a) tak by zawierał nie więcej niż 70%, korzystnie nie więcej niż 60% wagowych soli nieorganicznej, zwłaszcza chlorku sodu w suchej masie.
3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że bardzo stężony wodny roztwór soli nieorganicznych w etapie a) jest klarownym, przesączonym roztworem, który otrzymuje się w wyniku wstępnej i wtórnej hydrolizy alkalicznej powietrznie suchego surowca torfowego, zakwaszenia otrzymanego hydrolizatu, oddzielenia substancji nierozpuszczalnych i uwolnienia otrzymanego roztworu od substancji balastowych na drodze ekstrakcji rozpuszczalnikami organicznymi i usunięcia pozostałości rozpuszczalników organicznych z poekstrakcyjnej fazy wodnej i filtracji tej fazy wodnej pod obniżonym ciśnieniem przez spieki ceramiczne.
4. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że co najmniej jeden dalszy składnik wprowadza się w etapie c), wybrany z grupy obejmującej wyciągi roślinne, zwłaszcza wyciągi ziołowe oraz środki i kompozycje zapachowe.
5. Kompozycja kosmetyczna zawierająca torfopochodny produkt bioaktywny, kosmetycznie dopuszczalny nośnik i ewentualnie dalsze dodatki, znamienna tym, że zawiera 0,01-10% wagowych, korzystnie 0,05-1% wagowych a najkorzystniej 0,05-0,1% wagowych wskazanego wyżej torfopochodnego produktu bioaktywnego w postaci zatężonego roztworu wodnego lub proszku otrzymanego przez wysuszenie takiego roztworu, przy czym wskazany roztwór jest zatężonym ekstraktem z torfu, o następującej charakterystyce:

a) zawiera nie więcej niż 70%, korzystnie nie więcej niż 60% wagowych soli nieorganicznej, zwłaszcza chlorku sodu, w suchej masie

b) ma postać ciemno-brązowej cieczy o gęstości 1,02-1,09 g/ml

c) ma zawartość suchej masy nie większą niż 5% wagowych i

d) pH 1% wodnego roztworu wynosi około 5,0-6,5, korzystnie około 6.0.

176 934
6. Kompozycja kosmetyczna według zastrz. 5, znamienna tym, że dodatkowo zawiera co najmniej jeden dalszy składnik wybrany z grupy obejmującej wyciągi roślinne, zwłaszcza wyciągi ziołowe oraz środki ziołowe i kompozycje zapachowe.
7. Kompozycja kosmetyczna według zastrz. 5 albo 6, znamienna tym, że dodatkowo zawiera co najmniej jeden dalszy środek, wybrany z grupy obejmującej alkohole, kwasy organiczne, antybiotyki, środki konserwujące, stabilizatory, emulsyfikatory, środki zagęszczające, sole nieorganiczne, oleje naturalne i syntetyczne, olejki eteryczne, detergenty i barwniki.