NO340030B1 - Substituerte urinstoff-derivater, farmasøytiske preparater omfattende samme samt anvendelse av forbindelsene og preparatene for behandling av sykdom - Google Patents

Substituerte urinstoff-derivater, farmasøytiske preparater omfattende samme samt anvendelse av forbindelsene og preparatene for behandling av sykdom Download PDF

Info

Publication number
NO340030B1
NO340030B1 NO20070257A NO20070257A NO340030B1 NO 340030 B1 NO340030 B1 NO 340030B1 NO 20070257 A NO20070257 A NO 20070257A NO 20070257 A NO20070257 A NO 20070257A NO 340030 B1 NO340030 B1 NO 340030B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
methyl
compound
pharmaceutically acceptable
c4alkyl
acceptable salt
Prior art date
Application number
NO20070257A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20070257L (no
Inventor
Bradley P Morgan
Alex Muci
Pu-Ping Lu
Erica Kraynack
Todd Tochimoto
Jr David J Morgans
Original Assignee
Cytokinetics Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=35785669&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=NO340030(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Cytokinetics Inc filed Critical Cytokinetics Inc
Publication of NO20070257L publication Critical patent/NO20070257L/no
Publication of NO340030B1 publication Critical patent/NO340030B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/75—Amino or imino radicals, acylated by carboxylic or carbonic acids, or by sulfur or nitrogen analogues thereof, e.g. carbamates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/17—Amides, e.g. hydroxamic acids having the group >N—C(O)—N< or >N—C(S)—N<, e.g. urea, thiourea, carmustine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/42—Oxazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C275/00—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C275/28—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C275/32—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton being further substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/56—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/32—One oxygen, sulfur or nitrogen atom
    • C07D239/42—One nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D261/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings
    • C07D261/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings not condensed with other rings
    • C07D261/06—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings not condensed with other rings having two or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D261/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings not condensed with other rings having two or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D261/14—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D263/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings
    • C07D263/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings
    • C07D263/30—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D263/34—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D263/48—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D271/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D271/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D271/10—1,3,4-Oxadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-oxadiazoles
    • C07D271/113—1,3,4-Oxadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-oxadiazoles with oxygen, sulfur or nitrogen atoms, directly attached to ring carbon atoms, the nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/22—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with hetero atoms directly attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/26—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D513/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Nitrogen- Or Sulfur-Containing Heterocyclic Ring Compounds With Rings Of Six Or More Members (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)

Description

[0001] Oppfinnelsen angår substituerte urinstoff-derivater, spesielt kjemiske enheter som selektivt modulerer hjerte-sarkomere og spesifikt kjemiske enheter, farmasøytiske preparater samt forbindelser og preparater for anvendelse ved behandling av hjertesykdom.
[0002] "Sarkomere" er en elegant organisert cellulær struktur funnet i hjerte- og skjelettmuskel bestående av interdigiterende tynne og tykke filamenter; den omfatter nesten 60% av hjertecellevolum. De tykke filamenter er sammensatt av "myosin," proteinet ansvarlig for omforming av kjemisk energi (ATP-hydrolyse) til kraft og styrt bevegelse. Myosin og dens funksjonelt relaterte slektninger er betegnet motor-proteiner. De tynne filamenter er sammensatt av et kompleks av proteiner. Ett av disse proteiner, "aktin" (en filamentøs polymer) er substratet på hvilket myosin trekker under kraftdannelse. Bundet til aktin er et sett av regulatoriske proteiner, "troponin-kompleks" og "tropomyosin," som gjør aktin-myosin interaksjon avhengig av endringer i intracellulære Ca<2+->nivåer. Ved hvert hjerteslag stiger og faller Ca<2+->nivåer, hvilket initierer hjertemuskel-kontraksjon og deretter hjertemuskel-relaksasjon. Hver av komponentene av sarkomere bidrar til dens kontraktile respons.
[0003] Myosin er det mest omfattende studerte av alle motor-proteiner. Av de tretten distinkte klasser av myosin i humane celler, er myosin-II-klassen ansvarlig for kontraksjon av skjelett-, hjerte- og glattmuskel. Denne klassen av myosin er betydelig forskjellig i aminosyre-sammensetning og i total struktur fra myosin i de andre tolv distinkte klasser. Myosin-II består av to globulære hode-domener bundet sammen av en lang alfa-helisk "coiled-coiled" hale som sammenføyes med andre myosin-II for å danne kjernen av sarkomeres tykke filament. De globulære hoder har et katalytisk domene hvor aktin-binding og ATP-funksjoner av myosin finner sted. Når bundet til et aktin-filament, fører frigjøring av fosfat (kfr. ATP til ADP) til en forandring i strukturell konformasjon av det katalytiske domenet som så endrer orienteringen av lett-kjede-binding arm-domenet som strekker seg fra det globulære hode; denne bevegelse er betegnet "powerstroke". Denne forandring i orientering av myosinhodet i relasjon til aktin forårsaker at det tykke filament som det er en del av beveger seg med hensyn til det tynne aktin-filament som det er bundet til. Løsning av det globulære hode fra aktin-filamentet (også Ca<2+>modulert) koblet med retur av det katalytiske domenet og lettkjeden til deres start-konformasjon/orientering fullfører kontraksjons- og relaksasjons-cyklusen.
[0004] Pattedyr-hjertemuskel består av to former av hjerte-myosin, alfa og beta og de er godtkarakterisert. Betaformen er den dominerende form (> 90 prosent) i voksen human hjertemuskel. Begge er observert å være regulert ved humane hjertesvikt-tilstander på både transkripsjonelle og translasjonelle nivåer, idet alfa-formen er ned-regulert ved hjertesvikt.
[0005] Sekvensene av alle de humane skjelett-, hjerte- og glattmuskel-myosiner er bestemt. Mens hjerte alfa- og beta-myosiner er meget lignende (93% identitet), er de begge betraktelig forskjellige fra human glattmuskel (42% identitet) og mer nær relatert til skjelett-myosiner (80% identitet). Hensiktsmessig er hjertemuskel-myosiner utrolig konservert på tvers av pattedyr-arter. For eksempel er både alfa og beta hjertemyosiner > 96% konservert mellom mennesker og rotter og den tilgjengelige 250-rest sekvens av svinehjerte-beta-myosin er 100% konservert med den tilsvarende humane hjerte-beta-myosin-sekvens. Slik sekvens-konservering bidrar til forutsigbarheten ved undersøkelse av myosin-baserte terapeutiske midler i dyrebaserte modeller av hjertesvikt.
[0006] Komponentene av hjerte-sarkomeren presenterer mål for behandling av hjertesvikt, for eksempel ved å øke kontraktilitet eller lette fullstendig relaksasjon for å modulere henholdsvis systolisk og diastolisk funksjon.
[0007] Kongestiv hjertesvikt ("CHF") er ikke en spesifikk sykdom, men heller en konstellasjon av tegn og symptomer, som alle er forårsaket av en manglende evne til hjertet til tilstrekkelig å respondere på anstrengelse ved å øke minuttvolumet. Den dominerende patofysiologi forbundet med CHF er systolisk dysfunksjon, en svekkelse av hjerte-kontraktilitet (med påfølgende reduksjon av mengde blod utstøtt ved hvert hjerteslag). Systolisk dysfunksjon med kompenserende dilatasjon av de ventrikulære hulrom resulterer i den mest vanlige form av hjertesvikt, "dilatert kardiomyopati," som ofte er betraktet å være samme som CHF. Motpunktet til systolisk dysfunksjon er diastolisk dysfunksjon, en svekkelse av evnen til å fylle ventriklene med blod, som også kan resultere i hjertesvikt selv med bevart venstre ventrikulære funksjon. Kongestiv hjertesvikt er endelig assosiert med feilaktig funksjon av kardiomyocytt selv, som involverer en reduksjon i dens evne til sammentrekning og relaksasjon.
[0008] Mange av samme underliggende tilstander kan gi opphav til systolisk og/eller diastolisk dysfunksjon, så som aterosklerose, hypertensjon, viral infeksjon, valvulær dysfunksjon og genetiske lidelser. Pasienter med disse lidelser presenterer typisk samme klassiske symptomer: kortpustethet, ødem og overveldende tretthet. Hos omtrent halvparten av pasientene med dilatert kardiomyopati, er årsaken til deres hjerte-dysfunksjon ischemisk hjertesykdom på grunn av koronar aterosklerose. Disse pasienter har enten hatt et enkelt myokardialt infarkt eller multiple myokardiale infarkter; her resulterer den påfølgende arrdannelse og remodellering i utvikling av et dilatert og hypokontraktilt hjerte. Noen ganger kan det forårsakende agens ikke identifiseres, så sykdommen er referert til som "idiopatisk dilatert kardiomyopati". Uavhengig av ischemisk eller annen opprinnelse, har pasienter med dilatert kardiomyopati en elendig prognose, meget sykdom og høy dødelighet.
[0009] Utbredelsen av CHF har vokst til epidemiske proporsjoner ettersom populasjonen eldes og ettersom kardiologer har blitt flinkere til å redusere dødelighet fra ischemisk hjertesykdom, den mest vanlige opptakt til CHF. Grovt 4,6 millioner mennesker i USA er diagnostisert med CHF; forekomsten av slik diagnose nærmer seg 10 pr. 1000 etter 65 års alder. Hospitalisering for CHF er vanligvis resultat av utilstrekkelig utepasient-terapi. Hospital-utskriving for CHF steg fra 377.000 (i 1979) til 970.000 (i 2002) hvilket gjør CHF til den mest vanlige utskrivings-diagnose for mennesker med alder 65 og over. Fem-år dødelighet fra CHF nærmer seg 50%. Således, mens terapier for hjertesykdom er sterkt forbedret og levetid er forlenget over de siste år, er nye og bedre terapier fortsatt søkt, spesielt for CHF.
[0010] "Akutt" kongestiv hjertesvikt (også kjent som akutt "dekompensert" hjertesvikt) involverer et brått fall i hjertefunksjon som er et resultat av en rekke årsaker. For eksempel hos en pasient som allerede har kongestiv hjertesvikt kan et nytt myokardialt infarkt, avbrudd av medisinering og diettære feiltrinn alle føre til akkumulering av ødem-væske og metabolsk insuffisiens selv i hviletilstand. Et terapeutisk middel som øker hjertefunksjon under en slik akutt episode kan assistere i å lindre denne metabolske insuffisiens og påskynde fjerning av ødem, hvilket letter returnering til den mer stabile "kompenserte" kongestiv hjertesvikt-tilstand. Pasienter med meget fremskreden kongestiv hjertesvikt spesielt de på sluttstadiet av sykdommen kan også ha fordel av et terapeutisk middel som øker hjertefunksjon, for eksempel for stabilisering mens de venter på et hjertetransplantat. Andre potensielle fordeler kan gis til pasienter som kobles fra bypass-pumpe, for eksempel ved administrering av et middel som hjelper det stansede eller sinkede hjerte til å gjenoppta normal funksjon. Pasienter som har diastolisk dysfunksjon (utilstrekkelig relaksasjon av hjertemuskelen) kan ha fordel av et terapeutisk middel som modulerer relaksasjon.
[0011] Inotroper er medikamenter som øker den kontraktile evne til hjertet. Som en gruppe, har alle nåværende inotroper mislykkes i å møte gullstandarden for hj ertesvikt-terapi, dvs. forlenge pasientoverlevelse. I tillegg er nåværende midler lite selektive for hjerte-vev, som til dels fører til kjente ugunstige effekter som begrenser anvendelse av dem. Til tross for dette faktum, er intravenøse inotroper fortsatt utstrakt anvendt ved akutt hjertesvikt (f.eks. for å tillate gjenopptagelse av oral medisinering eller hjelpe pasienter frem til hjerte- transplantasjon) mens ved kronisk hjertesvikt, oralt gitt digoxin blir anvendt som en inotrop for å lindre pasientens symptomer, forbedre livskvaliteten og redusere sykehus-innleggelse.
[0012] Nåværende inotrop-terapier forbedrer kontraktilitet ved å øke kalsium transient via adenylyl-cyklase-banen eller ved å forsinke cAMP-nedbrytning gjennom hemning av fosfodiesterase (PDE), som kan være skadelig for pasienter med hjertesvikt.
[0013] Gitt begrensningene ved nåværende midler, er nye metoder nødvendige for å forbedre hjertefunksjon ved kongestiv hjertesvikt. Det nyeste godkjente korttid intravenøse middel, milrinon, er mer enn femten år gammelt. Eneste tilgjengelige orale medikament, digoxin, er over 200 år gammelt. Det er fortsatt et stort behov for midler som utnytter nye virkningsmekanismer og kan gi bedre resultater når det gjelder lindring av symptomer, sikkerhet og pasient-dødelighet, både kortvarige og langvarige. Nye midler med en forbedret terapeutisk indeks fremfor nåværende midler vil gi metoder for å oppnå disse kliniske resultater.
[0014] Selektiviteten av midler rettet mot hjerte-sarkomere (for eksempel ved målsøking av hjerte-betamyosin) er identifisert som en viktig metode for å oppnå denne forbedrede terapeutiske indeks. Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer slike midler (spesielt sarkomere-aktiverende midler) og metoder for deres identifikasjon og anvendelse.
[0015] En annen metode kan være direkte å aktivere hjerte-myosin uten å endre kalsium transient for å forbedre hjerte-kontraktilitet. Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer slike midler (spesielt myosin-aktiverende midler) og metoder for deres identifikasjon og anvendelse.
[0016] Foreliggende oppfinnelse angår forbindelse valgt fra: i) metyl 4-[(3-fluor-5-{[(6-metyl(3-pyridyl))amino]karbonylamino}-fenyl)metyl]piperazinekarboksylat
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav; ii) etyl 4-[(4-fluor-3- {[(6-metyl(3-pyridyl))amino]karbonylamino} fenyl)-metyl]piperazinekarboksylat
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav; iii) metyl 4-[(2-fluor-3- {[(6-metyl(3-pyridyl))amino]karbonylamino} - fenyl)metyl]piperazinekarboksylat
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav; iv) metyl 4-[(3-{[(6-metyl-3-pyridyl)amino]karbonylamino}fenyl)-metyl]piperazinekarboksylat
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav; v) metyl 4-[(lS)-l-(5-fluor-3-{[(6-metyl(3-pyridyl))amino]karbonylamino}-fenyl)etyl]piperazinekarboksylat
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav; og
vi) N- {3 - [(1S)-1 -(4-acetylpiperazinyl)etyl] -2-fluorfenyl} [(6-metyl(3 - pyridyl))amino]karboksamid
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
Foretrukket er forbindelsen over, som er metyl 4-[(2-fluor-3-{[(6-metyl(3-pyridyl))amino] karbonylamino } -fenyl)mety 1] piperazinekarboksylat
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
Oppfinnelsen angår også farmasøytisk preparat omfattende et farmasøytisk akseptabelt tilsetningsmiddel, bærer eller adjuvans og forbindelsene over
Også omfattet av oppfinnelsen er forbindelse eller farmasøytiske preparat som definert over for anvendelse ved en metode for behandling av hjertesykdom hos et pattedyr hvilken metode omfatter administrering til et pattedyr med behov for dette en terapeutisk effektiv mengde av forbindelsen eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav som definert over eller et farmasøytisk preparat som definert over.
Oppfinnelsen angår også forbindelse eller farmasøytiske preparat for anvendelse som nevnt over, hvor hjertesykdommen er akutt eller dekompensert kongestiv hjertesvikt eller kronisk
kongestiv hjertesvikt.
Oppfinnelsen angår også forbindelse eller farmasøytiske preparat for anvendelse som nevnt over, hvor hjertesykdommen er systolisk hjertesvikt.
Oppfinnelsen angår også forbindelse som nevnt over for anvendelse ved en metode for å forbedre hjerte- kontraktilitet i hjertevev uten å endre kalsiumtransienten, hvor forbindelsen er: eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som nevnt over for anvendelse ved en metode for å stabilisere hjertefunksjonen hos en pasient i påvente av et hjerte transplantat, hvor forbindelsen er:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
Oppfinnelsen angår også forbindelse som nevnt over for anvendelse ved en metode for behandling av hjertesvikt gjennom økende kontraktilitet for å modulere systolisk funksjon eller gjennom å bevirke total relaksasjon av moderat diastolisk funksjon, hvor forbindelsen er:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
Oppfinnelsen angår også farmasøytisk preparat omfattende forbindelse som nevnt over og et farmasøytisk akseptabelt tilsetningsmiddel, bærer eller adjuvans, for anvendelse som tidligere definert.
Oppfinnelsen angår også preparatet for anvendelse som nevnt over, formulert i en form valgt fra gruppen bestående av et injiserbar fluid, en aerosol, en tablett, en pille, en kapsel, en sirup, en krem, en gel og et transdermalt plaster.
[0017] Også beskrevet er en metode for fremstilling av en forbindelse med formel I.
hvor R<1>, R<2>, R<3>, R<4>, R<5>og R<13>er som definert under.
W, X, Y og Z uavhengig er -C= eller -N=, forutsatt at ikke mer enn to av W, X, Y og
Zer-N=;
n er én, to eller tre;
Ri er eventuelt substituert amino eller eventuelt substituert heterocykloalkyl;
R2er eventuelt substituert aryl, eventuelt substituert aralkyl; eventuelt substituert cykloalkyl, eventuelt substituert heteroaryl, eventuelt substituert heteroaralkyl eller eventuelt substituert heterocykloalkyl,
R3er hydrogen, halogen, cyano, eventuelt substituert alkyl, eventuelt substituert heterocykloalkyl eller eventuelt substituert heteroaryl når W er -C= og R3er fraværende når W er -N=;
R4er hydrogen, halogen, cyano, eventuelt substituert alkyl, eventuelt substituert heterocykloalkyl eller eventuelt substituert heteroaryl når Y er -C= og R4er fraværende når Y er -N=; og
R5er hydrogen, halogen, cyano, eventuelt substituert alkyl, eventuelt substituert heterocykloalkyl eller eventuelt substituert heteroaryl når X er -C= og R5er fraværende når X er -N=;
R13er hydrogen, halogen, cyano, hydroksyl, eventuelt substituert alkyl, eventuelt substituert heterocykloalkyl eller eventuelt substituert heteroaryl når Z er -C= og R13er fraværende når Z er -N=; og;
Re og R7er uavhengig hydrogen, aminokarbonyl, alkoksykarbonyl, eventuelt substituert alkyl eller eventuelt substituert alkoksy eller R; og R7, sammen
med karbonet som de er bundet til, danner en eventuelt substituert 3- til 7-leddet ring som eventuelt omfatter ett eller to ytterligere heteroatomer, valgt fra N, O og S i ringen,
omfattende omdannelse av en forbindelse med formel 400
til en forbindelse med formelen 401; hydrolysering av forbindelsen med formel 401 til en forbindelse med formel 402 hvor R er valgt fra O og NH; kontakting av en forbindelse med formel 402 med en forbindelse med formelen Ri-H hvor Ri er eventuelt substituert amino eller eventuelt substituert heterocykloalkyl for å danne en forbindelse med formel 403; og
kontakting av en forbindelse med formel 403 med en forbindelse med formelen R2-NCO, hvilket gir en forbindelse med formel I.
[0018] Andre aspekter og utførelsesformer vil bli klare for fagfolk på området fra den følgende detaljerte beskrivelse.
[0019] Som anvendt i foreliggende spesifikasjon er de følgende ord og fraser generelt ment å ha betydningene angitt nedenfor, bortsett fra i den grad sammenhengen hvor de blir anvendt indikerer noe annet. De følgende forkortelser og betegnelser har de angitte betydninger gjennom hele beskrivelsen:
[0020] Som anvendt i foreliggende beskrivelse er de følgende ord og fraser generelt ment å ha betydningene angitt nedenfor, bortsett fra i den grad sammenhengen hvor når de blir anvendt eller definert i kravene indikerer noe annet.
[0021] Som anvendt her, når hvilken som helst variabel forekommer mer enn én gang i en kjemisk formel, er dens definisjon ved hver forekomst uavhengig av dens definisjon ved hver annen forekomst.
[0022] En strek ("-") som ikke er mellom to bokstaver eller symboler blir anvendt for å angi bindingspunktet for en substituent. For eksempel er -CONH2tilknyttet gjennom karbonatomet.
[0023] Ved "eventuell" eller "eventuelt" menes at den deretter beskrevne hendelse eller omstendighet kan forekomme eller ikke, og at beskrivelsen omfatter tilfeller hvor hendelsen eller omstendigheten forekommer og tilfeller hvor den ikke forekommer. For eksempel omfatter "eventuelt substituert alkyl" både "alkyl" og "substituert alkyl" som definert nedenfor. Det vil forstås av fagfolk på området, med hensyn til hvilken som helst gruppe inneholdende én eller flere substituenter, at slike grupper ikke er ment å innføre noen som helst substitusjon eller substitusjonsmønstere som er sterisk upraktiske, syntetisk ikke-gjennomførbare og/eller iboende ustabile.
[0024] "Alkyl" omfatter en lineær eller forgrenet kjede som har det angitte antall karbonatomer. Alkylgrupper er generelt de med C20eller under, så som C13eller under, for eksempel C6eller under. For eksempel omfatter Ci-C6alkyl både lineær og forgrenet alkyl med fra 1 til 6 karbonatomer. Eksempler på alkylgrupper omfatter metyl, etyl, propyl, isopropyl, n-butyl, sek-butyl, tert-butyl, pentyl, 2-pentyl, isopentyl, neopentyl, heksyl, 2-heksyl, 3-heksyl, 3-metylpentyl og lignende. Alkylen er en annen underklasse av alkyl, med henvisning til samme rester som alkyl, men har to bindingspunkter. For eksempel angir Co alkylen en kovalent binding og Ci alkylen er en metylengruppe. Når en alkylrest som har et spesifikt antall karbonatomer er angitt, skal alle geometriske isomerer som har det antall karbonatomer være omfattet; således skal for eksempel "butyl" omfatte n-butyl, sek-butyl, isobutyl og t-butyl; "propyl" omfatter n-propyl og isopropyl. "Lavere alkyl" angir alkylgrupper som har ett til fire karbonatomer.
[0025] "Cykloalkyl" angir en mettet hydrokarbon-ring eller kondensert bicyklisk ring som har det spesifiserte antall karbonatomer, vanligvis fra 3 til 12 ring-karbonatomer, mer vanlig 3 til 10 eller 3 til 7. Eksempler på cykloalkylgrupper omfatter cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl og cykloheksyl så vel som brodannede og innelukkede mettede ringgrupper så som norbornan. Eksempler på kondenserte bicykliske ringer omfatter oktahydro-lH-inden, oktahydropentalen, l,2,3,3a,4,5-heksahydropentalen, 1,2,4,5,6,7,7a-heptahydro-2H-inden, 4,5,6,7-tetrahydro-2H-inden.
[0026] Med "alkoksy" menes en alkylgruppe tilknyttet gjennom en oksygen-bro så som for eksempel metoksy, etoksy, propoksy, isopropoksy, n-butoksy, sek-butoksy, tert-butoksy, pentoksy, 2-pentyloksy, isopentoksy, neopentoksy, heksoksy, 2-heksoksy, 3-heksoksy, 3-metylpentoksy. Alkylgruppen i en alkoksygruppe er generelt C20eller mindre, så som C13eller mindre, for eksempel C6eller mindre. "Lavere alkoksy" angir alkoksygrupper som har ett til fire karbonatomer.
[0027] Med "cykloalkoksy" menes en cykloalkylgruppe tilknyttet gjennom en oksygen-bro så som for eksempel cyklopropoksy, cyklobutoksy, cyklopentoksy, cykloheksoksy, cykloheptoksy. Cykloalkylgruppen i en cykloalkoksygruppe er generelt C20eller mindre, så som C13eller mindre, for eksempel C6eller mindre.
[0028] "Acyl" angir gruppene (alkyl)-C(O)-; (cykloalkyl)-C(O)-; (aryl)-C(O)-; (heteroaryl)-C(O)-; og (heterocykloalkyl)-C(O)-, hvor gruppen er bundet til moder-strukturen gjennom karbonylfunksjonaliteten og hvor alkyl, cykloalkyl, aryl, heteroaryl og heterocykloalkyl er som beskrevet her. Acylgrupper har det angitte antall karbonatomer, med karbonet i ketogruppen omfattet i antallet karbonatomer. For eksempel er en C2acylgruppe en acetylgruppe som har formelen CH3(C=0)-.
[0029] Med "alkoksykarbonyl" menes en estergruppe med formelen (alkoksy)(C=0)-tilknyttet gjennom karbonyl-karbonet hvor alkoksy-gruppen har det angitte antall karbonatomer. Således er en Ci-C6alkoksykarbonylgruppe en alkoksygruppe som har fra 1 til 6 karbonatomer tilknyttet gjennom dens oksygen til en karbonyl-linker.
[0030] Med "amino" menes gruppen -NH2.
[0031] Betegnelsen "aminokarbonyl" angir gruppen -CONR<b>R<c>, hvor
R<b>er valgt fra hydrogen, eventuelt substituert C1-C6alkyl, eventuelt substituert aryl og eventuelt substituert heteroaryl; og
R<c>er valgt fra hydrogen og eventuelt substituert C1-C4alkyl; eller
R<b>ogR<c>sammen med nitrogenet som de er bundet til, danner en eventuelt substituert 5- til 7-leddet nitrogen-inneholdende heterocykloalkyl som eventuelt omfatter 1 eller 2 ytterligere heteroatomer valgt fra O, N og S i heterocykloalkylringen;
hvor hver substituerte gruppe uavhengig er substituert med én eller flere substituenter uavhengig valgt fra C1-C4alkyl, aryl, heteroaryl, aryl-Ci-C4alkyl-, heteroaryl-Ci-C4alkyl-, C1-C4halogenalkyl, -OC1-C4alkyl, -OC1-C4alkylfenyl, -C1-C4alkyl-OH,
-OC1-C4halogenalkyl, halogen, -OH, -NH2, -C1-C4alkyl-NH2, -N(Ci-C4alkyl)(Ci-C4alkyl), -NH(Ci-C4alkyl), -N(Ci-C4alkyl)(Ci-C4alkylfenyl), -NH(Ci-C4alkylfenyl), cyano, nitro, okso (som en substituent for cykloalkyl, heterocykloalkyl eller heteroaryl), -CO2H, -C(0)OCi-C4alkyl, -CON(Ci-C4alkyl)(Ci-C4alkyl), -CONH(Ci-C4alkyl), -CONH2,
-NHC(0)(Ci-C4alkyl), -NHC(0)(fenyl), -N(Ci-C4alkyl)C(0)(Ci-C4alkyl),
-N(Ci-C4alkyl)C(0)(fenyl), -C(0)Ci-C4alkyl, -C(0)Ci-C4fenyl, -C(0)Ci-C4halogenalkyl, -OC(0)Ci-C4alkyl, -S02(Ci-C4alkyl), -S02(fenyl), -S02(Ci-C4halogenalkyl), -SO2NH2, -S02NH(Ci-C4alkyl), -S02NH(fenyl), -NHS02(Ci-C4alkyl), -NHS02(fenyl) og
-NHS02(Ci-C4halogenalkyl).
[0032] "Aryl" omfatter: 5- og 6-leddede karbocykliske aromatiske ringer, for eksempel benzen; bicykliske ringsystemer hvor minst én ring er karbocyklisk og aromatisk, for eksempel naftalen, indan og tetralin; og tricykliske ringsystemer hvor minst én ring er karbocyklisk og aromatisk, for eksempel fluoren.
[0033] For eksempel omfatter aryl 5- og 6-leddede karbocykliske aromatiske ringer kondensert til en 5- til 7-leddet heterocykloalkylring inneholdende 1 eller flere heteroatomer valgt fra N, O og S. For slike kondenserte, bicykliske ringsystemer hvor bare én av ringene er en karbocyklisk aromatisk ring, kan bindingspunktet være ved den karbocykliske aromatiske ring eller heterocykloalkylringen. Bivalente rester dannet fra substituerte benzenderivater og som har fri valenser ved ringatomer er betegnet som substituerte fenylen-rester. Bivalente rester avledet fra univalente polycykliske hydrokarbonrester hvis navn ender på "-yl" ved fjerning av ett hydrogenatom fra karbonatomet med den frie valens er betegnet ved tilsetning av "-iden" til navnet til den tilsvarende univalente rest, f.eks. en naftylgruppe med to bindingspunkter er betegnet naftyliden. Aryl omfatter imidlertid ikke eller overlapper på noen som helst måte heteroaryl, separat definert nedenfor. Således, hvis én eller flere karbocykliske aromatiske ringer er kondensert med en heterocykloalkyl aromatisk ring, er det resulterende ringsystem heteroaryl, ikke aryl, som definert her.
[0034] Betegnelsen "aryloksy" angir gruppen -O-aryl.
[0035] I betegnelsen "arylalkyl" eller "aralkyl", er aryl og alkyl som definert her og bindingspunktet er på alkylgruppen. Denne betegnelsen omfatter, men er ikke begrenset til, benzyl, fenetyl, fenylvinyl, fenylallyl.
[0036] Betegnelsen "halo" omfatter fluor, klor, brom og jod og betegnelsen "halogen" omfatter fluor, klor, brom og jod.
[0037] "Halogenalkyl" indikerer alkyl som definert ovenfor som har det spesifiserte antall karbonatomer, substituert med 1 eller flere halogenatomer, generelt opptil maksimalt tillatt antall halogenatomer. Eksempler på halogenalkyl omfatter trifluormetyl, difluormetyl, 2-fluoretyl og penta-fluoretyl.
[0038] "Heteroaryl" omfatter: 5- til 7-leddede aromatiske, monocykliske ringer inneholdende ett eller flere, for eksempel fra 1 til 4 eller i visse utførelsesformer, fra 1 til 3, heteroatomer valgt fra N, O og S, mens de resterende ringatomer er karbon; og bicykliske heterocykloalkylringer inneholdende ett eller flere, for eksempel fra 1 til 4 eller i visse utførelsesformer, fra 1 til 3, heteroatomer valgt fra N, O og S, mens de resterende ringatomer er karbon og hvor minst ett heteroatom er til stede i en aromatisk ring.
[0039] For eksempel omfatter heteroaryl en 5- til 7-leddet heterocykloalkyl, aromatisk ring kondensert til en 5- til 7-leddet cykloalkylring. For slike kondenserte, bicykliske heteroarylringsystemer hvor bare én av ringene inneholder ett eller flere heteroatomer, kan bindingspunktet være ved den heteroaromatiske ring eller cykloalkylringen. Når det totale antall av S- og O-atomer i heteroarylgruppen overstiger 1, er de heteroatomene ikke i nabostilling til hverandre. I visse utførelsesformer er det totale antall av S- og O-atomer i heteroarylgruppen ikke mer enn 2. I visse utførelsesformer er det totale antall av S- og O-atomer i den aromatiske heterocykliske gruppe ikke mer enn 1. Også omfattet innen definisjonen av heteroaryl er oksid-derivater, for eksempel N-oksider av nitrogen-inneholdende arylgrupper, så som pyridin-1-oksid eller >S(0)- og >S(0)2-derivater av svovel-inneholdende grupper. Eksempler på heteroarylgrupper omfatter systemer (som nummerert fra bindings-stillingen gitt prioritet 1), så som 2-pyridyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl, 2,3-pyrazinyl, 3,4-pyrazinyl, 2,4-pyrimidinyl, 3,5-pyrimidinyl, 2,3-pyrazolinyl, 2,4-imidazolinyl, isoksazolinyl, oksazolinyl, tiazolinyl, tiadiazolinyl, tetrazolyl, tienyl, benzotiofenyl, furanyl, benzofuranyl, benzoimidazolinyl, indolinyl, pyridizinyl, triazolyl, kinolinyl, pyrazolyl og 5,6,7,8-tetrahydroisokinolin. Bivalente rester avledet fra univalente heteroarylrester hvis navn ender på "-yl" ved fjerning av ett hydrogenatom fra atom med den frie valens er betegnet ved tilføying av "-iden" til navnet av den tilsvarende univalente rest, f.eks. er en pyridylgruppe med to bindingspunkter pyridyliden. Heteroaryl omfatter ikke eller overlapper aryl som definert ovenfor.
[0040] I betegnelsen "heteroarylalkyl" eller "heteroaralkyl", er heteroaryl og alkyl som definert her og bindingspunktet er på alkylgruppen. Denne betegnelsen omfatter pyridylmetyl, tiofenylmetyl og (pyrrolyl)-l-etyl.
[0041] Med "heterocykloalkyl" menes en cykloalkylrest hvor ett til fire av karbonatomene er erstattet med et heteroatom så som oksygen, nitrogen eller svovel. Egnede heterocykloalkylgrupper omfatter for eksempel (som nummerert fra bindingsstillingen gitt prioritet 1), 2-pyrrolinyl, 2,4-imidazolidinyl, 2,3-pyrazolidinyl, 2-piperidyl, 3-piperidyl, 4-piperidyl og 2,5-piperzinyl. Morfolinylgrupper er også omfattet, omfattende 2-morfolinyl og 3-morfolinyl (nummerert hvor oksygenet er gitt prioritet 1).
[0042] Som anvendt her angir "modulering" en forandring i myosin eller sarkomere aktivitet som en direkte eller indirekte respons på tilstedeværelse av minst én kjemisk enhet beskrevet her, i forhold til aktiviteten til myosinet eller sarkomeren i fravær av forbindelsen. Forandringen kan være en økning i aktivitet eller en reduksjon i aktivitet og kan være på grunn av direkte interaksjon av forbindelsen med myosin eller sarkomeren eller på grunn av interaksjonen av forbindelsen med én eller flere andre faktorer som i sin tur påvirker myosin-eller sarkomere-aktivitet.
[0043] Betegnelsen "sulfanyl" omfatter gruppene: -S-(eventuelt substituert alkyl), -S-(eventuelt substituert aryl), -S-(eventuelt substituert heteroaryl) og -S-(eventuelt substituert heterocykloalkyl). Således omfatter sulfanyl-gruppen C1-C6alkylsulfanyl.
[0044] Betegnelsen "sulfinyl" omfatter gruppene: -S(0)-H, -S(0)-(eventuelt substituert alkyl), -S(0)-eventuelt substituert aryl), -S(0)-eventuelt substituert heteroaryl), -S(0)-(eventuelt substituert heterocykloalkyl); og -S(0)-(eventuelt substituert amino).
[0045] Betegnelsen "sulfonyl" omfatter gruppene: -S(02)-H, -S(02)-(eventuelt substituert alkyl), -S(02)-eventuelt substituert aryl), -S(02)-eventuelt substituert heteroaryl), -S(02)-(eventuelt substituert heterocykloalkyl) ,-S(02)-(eventuelt substituert alkoksy), -S(02)-eventuelt substituert aryloksy), -S(02)-eventuelt substituert heteroaryloksy), -S(02)-(eventuelt substituert heterocykloalkyloksy); og -S(02)-(eventuelt substituert amino).
[0046] Betegnelsen "substituert" som anvendt her, betyr at hvilket som helst av ett eller flere hydrogener på det angitte atom eller gruppe er erstattet med et utvalg fra den angitte gruppe, forutsatt at det angitte atomets normale valens ikke blir oversteget. Når en substituent er okso (dvs. =0) da er 2 hydrogener på atomet erstattet. Kombinasjoner av substituenter og/eller variabler er tillatt bare hvis slike kombinasjoner resulterer i stabile forbindelser eller anvendelige syntetiske mellomprodukter. En stabil forbindelse eller stabil struktur menes å angi en forbindelse som er tilstrekkelig robust til å overleve isolering fra en reaksjonsblanding og påfølgende formulering som et middel som minst har praktisk nytte. Hvis ikke på annen måte spesifisert er substituenter betegnet i kjernestrukturen. For eksempel skal det forstås at når (cykloalkyl)alkyl er listet opp som en mulig substituent, er bindingspunktet av denne substituenten til kjernestrukturen i alkyldelen.
[0047] Betegnelsene "substituert" alkyl, cykloalkyl, aryl, heterocykloalkyl og heteroaryl, hvis ikke på annen måte uttrykkelig definert, angir henholdsvis alkyl, cykloalkyl, aryl, heterocykloalkyl og heteroaryl hvor én eller flere (opptil 5, så som opptil 3) hydrogenatomer er erstattet med en substituent uavhengig valgt fra: -Ra, -ORb, -0(Ci-C2alkyl)0- (f.eks. metylendioksy-), -SR<b>, guanidin, guanidin hvor én eller flere av guanidin-hydrogenene er erstattet med en lavere alkylgruppe, -NR<b>R<c>, halogen, cyano, nitro, -COR<b>, -C02R<b>, -CONR<b>Rc, -OCOR<b>, -OC02R<a>, -OCONR<b>R<c>,
-NR<c>COR<b>, -NR<c>C02R<a>, -NR<c>CONR<b>R<c>, -SORa, -S02R<a>, -S02NRbRc og -NR<c>S02R<a>,
hvor Ra er valgt fra eventuelt substituert C1-C6alkyl, eventuelt substituert aryl og eventuelt substituert heteroaryl;
R<b>er valgt fra hydrogen, eventuelt substituert C1-C6alkyl, eventuelt substituert aryl og eventuelt substituert heteroaryl; og
R<c>er valgt fra hydrogen og eventuelt substituert C1-C4alkyl; eller
R<b>og R<c>sammen med nitrogenet som de er bundet til, danner eventuelt substituert 5-til 7-leddet nitrogen-inneholdende heterocykloalkyl som eventuelt omfatter 1 eller 2 ytterligere heteroatomer valgt fra O, N og S i heterocykloalkylringen;
hvor hver eventuelt substituerte gruppe er usubstituert eller uavhengig substituert med
én eller flere, så som én, to eller tre, substituenter uavhengig valgt fra C1-C4alkyl, aryl, heteroaryl, aryl-Ci-C4alkyl-, heteroaryl-Ci-C4alkyl-, C1-C4halogenalkyl-, -OC1-C4alkyl,
-OC1-C4alkylfenyl, -C1-C4alkyl-OH, -OC1-C4halogenalkyl, halogen, -OH, -NH2,
-C1-C4alkyl-NH2, -N(Ci-C4alkyl)(Ci-C4alkyl), -NH(Ci-C4alkyl),
-N(Ci-C4alkyl)(Ci-C4alkylfenyl), -NH(Ci-C4alkylfenyl), cyano, nitro, okso (som en substitutent for cykloalkyl, heterocykloalkyl eller heteroaryl), -C02H, -C(0)OCi-C4alkyl, -CON(Ci-C4alkyl)(Ci-C4alkyl), -CONH(Ci-C4alkyl), -CONH2, -NHC(0)(Ci-C4alkyl), -NHC(0)(fenyl), -N(Ci-C4alkyl)C(0)(Ci-C4alkyl), -N(Ci-C4alkyl)C(0)(fenyl), -C(0)Ci-C4alkyl, -C(0)Ci-C4fenyl, -C(0)Ci-C4halogenalkyl, -OC(0)Ci-C4alkyl, -S02(Ci-C4alkyl), -S02(fenyl), -S02(Ci-C4halogenalkyl), -S02NH2, -S02NH(Ci-C4alkyl), -S02NH(fenyl), -NHS02(Ci-C4alkyl), -NHS02(fenyl) og -NHS02(Ci-C4halogenalkyl).
[0048] Betegnelsene "substituert" cykloalkyl, aryl, heterocykloalkyl og heteroaryl omfatter også okso (=0) og oksid (-0") substituenter, for eksempel N-oksider av nitrogen-inneholdende arylgrupper, så som pyridin-1-oksid eller >S(0)- og >S(0)2-derivater av svovel-inneholdende grupper.
[0049] Betegnelsen "substituert acyl" angir gruppene (substituert alkyl)-C(O)-; (substituert cykloalkyl)-C(O)-; (substituert aryl)-C(O)-; (substituert heteroaryl)-C(O)-; og (substituert heterocykloalkyl)-C(O)-, hvor gruppen er bundet til moder-strukturen gjennom karbonylfunksjonaliteten og hvor substituert alkyl, cykloalkyl, aryl, heteroaryl og heterocykloalkyl, refererer til henholdsvis alkyl, cykloalkyl, aryl, heteroaryl og heterocykloalkyl hvor ett eller flere (opptil 5, så som opptil 3) hydrogenatomer er erstattet med en substituent uavhengig valgt fra: -Ra, -ORb, -0(Ci-C2alkyl)0- (f.eks. metylendioksy-), -SR<b>, guanidin, guanidin hvor ett eller flere av guanidin-hydrogenene er erstattet med en lavere-alkylgruppe, -NR<b>R<c>, halogen, cyano, nitro, -COR<b>, -C02R<b>, -CONR<b>Rc, -OCOR<b>, -OC02R<a>, -OCONR<b>R<c>, -NR<c>COR<b>, -NR<c>C02R<a>, -NR<c>CONR<b>R<c>, -C02R<b>, -CONR<b>R<c>, -NR<c>COR<b>, -SORa, -SO^,
-S02NRbReog -NR^O^,
hvor Ra er valgt fra eventuelt substituert C1-C6alkyl, eventuelt substituert aryl og eventuelt substituert heteroaryl;
R<b>er valgt fra H, eventuelt substituert C1-C6alkyl, eventuelt substituert aryl og eventuelt substituert heteroaryl; og
R<c>er valgt fra hydrogen og eventuelt substituert C1-C4alkyl; eller
R<b>ogR<c>sammen med nitrogenet som de er bundet til, danner eventuelt substituert 5- til 7-leddet nitrogen-inneholdende heterocykloalkyl som eventuelt omfatter 1 eller 2 ytterligere heteroatomer valgt fra O, N og S i heterocykloalkylringen;
hvor hver eventuelt substituerte gruppe er usubstituert eller uavhengig substituert med én eller flere, så som én, to eller tre, substituenter uavhengig valgt fra C1-C4alkyl, aryl, heteroaryl, aryl-Ci-C4alkyl-, heteroaryl-Ci-C4alkyl-, C1-C4halogenalkyl-, -OC1-C4alkyl,
-OC1-C4alkylfenyl, -C1-C4alkyl-OH, -OC1-C4halogenalkyl, halogen, -OH, -NH2,
-C1-C4alkyl-NH2, -N(Ci-C4alkyl)(Ci-C4alkyl), -NH(Ci-C4alkyl),
-N(Ci-C4alkyl)(Ci-C4alkylfenyl), -NH(Ci-C4alkylfenyl), cyano, nitro, okso (som substituent for cykloalkyl, heterocykloalkyl eller heteroaryl), -C02H, -C(0)OCi-C4alkyl, -CON(Ci-C4alkyl)(Ci-C4alkyl), -CONH(Ci-C4alkyl), -CONH2, -NHC(0)(Ci-C4alkyl), -NHC(0)(fenyl), -N(Ci-C4alkyl)C(0)(Ci-C4alkyl), -N(Ci-C4alkyl)C(0)(fenyl), -C(0)Ci-C4alkyl, -C(0)Ci-C4fenyl, -C(0)Ci-C4halogenalkyl, -OC(0)Ci-C4alkyl, -S02(Ci-C4alkyl), -S02(fenyl), -S02(Ci-C4halogenalkyl), -S02NH2, -S02NH(Ci-C4alkyl), -S02NH(fenyl), -NHS02(Ci-C4alkyl), -NHS02(fenyl) og -NHS02(Ci-C4halogenalkyl). Ett eller flere karbonatomer i den substituerte acyl-resten kan være erstattet av nitrogen, oksygen eller svovel så lenge bindingspunktet til den parentale gruppen er ved karbonyl.
[0050] Betegnelsen "substituert alkoksy" angir alkoksy hvor alkyl-bestanddelen er substituert (dvs. -0-(substituert alkyl)) hvor "substituert alkyl" angir alkyl hvor ett eller flere (opptil 5, så som opptil 3) hydrogenatomer er erstattet med en substituent uavhengig valgt fra: -Ra, -ORb, -0(Ci-C2alkyl)0- (f.eks. metylendioksy-), -SR<b>, guanidin, guanidin hvor ett eller flere av guanidin-hydrogenene er erstattet med en lavere alkylgruppe, -NR<b>R<c>, halogen, cyano, nitro, -COR<b>, -C02R<b>, -CONR<b>Rc, -OCOR<b>, -OC02R<a>, -OCONR<b>R<c>,
-NR<c>COR<b>, -NR<c>C02R<a>, -NR<c>CONR<b>R<c>, -SORa, -S02R<a>, -S02NRbRc og -NR<c>S02R<a>,
hvor Ra er valgt fra eventuelt substituert C1-C6alkyl, eventuelt substituert aryl og eventuelt substituert heteroaryl;
R<b>er valgt fra H, eventuelt substituert C1-C6alkyl, eventuelt substituert aryl og eventuelt substituert heteroaryl; og R<c>er valgt fra hydrogen og eventuelt substituert C1-C4alkyl; hvor hver eventuelt substituerte gruppe er usubstituert eller uavhengig substituert med én eller flere, så som én, to eller tre, substituenter uavhengig valgt fra C1-C4alkyl, aryl, heteroaryl, aryl-Ci-C4alkyl-, heteroaryl-Ci-C4alkyl-, C1-C4halogenalkyl-, -OC1-C4alkyl, -OC1-C4alkylfenyl, -C1-C4alkyl-OH, -OC1-C4halogenalkyl, halogen, -OH,
-NH2, -C1-C4alkyl-NH2, -N(Ci-C4alkyl)(Ci-C4alkyl), -NH(Ci-C4alkyl),
-N(Ci-C4 alkyl)(Ci-C4 alkylfenyl), -NH(Ci-C4alkylfenyl), cyano, nitro, okso (som substituent for cykloalkyl, heterocykloalkyl eller heteroaryl), -CO2H, -C(0)OCi-C4alkyl, -CON(Ci-C4alkyl)(Ci-C4alkyl), -CONH(Ci-C4alkyl), -CONH2, -NHC(0)(Ci-C4alkyl), -NHC(0)(fenyl), -N(Ci-C4alkyl)C(0)(Ci-C4alkyl), -N(Ci-C4alkyl)C(0)(fenyl), -C(0)Ci-C4alkyl, -C(0)Ci-C4fenyl, -C(0)Ci-C4halogenalkyl, -OC(0)Ci-C4alkyl, -S02(Ci-C4alkyl), -S02(fenyl), -S02(Ci-C4halogenalkyl), -S02NH2, -S02NH(Ci-C4alkyl), -S02NH(fenyl), -NHS02(Ci-C4alkyl), -NHS02(fenyl) og -NHS02(Ci-C4halogenalkyl). I noen utførelsesformer er en substituert alkoksygruppe "polyalkoksy" eller -0-(eventuelt substituert alkylen)-(eventuelt substituert alkoksy) og omfatter grupper så som -OCH2CH2OCH3og rester av glykoletere så som polyetylenglykol og -0(CH2CH20)xCH3, hvor x er et helt tall på 2-20, så som 2-10 og for eksempel 2-5. En annen substituert alkoksygruppe er hydroksyalkoksy eller -OCH2(CH2)yOH, hvor y er et helt tall på 1-10, så som 1-4.
[0051] Betegnelsen "substituert alkoksykarbonyl" angir gruppen (substituert alkyl)-O-C(O)- hvor gruppen er bundet til moder-strukturen gjennom karbonylfunksjonaliteten og hvor substituert angir alkyl hvor ett eller flere (opptil 5, så som opptil 3) hydrogenatomer er erstattet med en substituent uavhengig valgt fra: -Ra, -ORb, -0(Ci-C2alkyl)0- (f.eks. metylendioksy-), -SR<b>, guanidin, guanidin hvor ett eller flere av guanidin-hydrogenene er erstattet med en lavere alkylgruppe, -NR<b>R<c>, halogen, cyano, nitro, -COR<b>, -C02R<b>, -CONR<b>Re, -OCOR<b>, -OC02R<a>, -OCONR<b>R<e>, -NR<c>COR<b>, -NR<c>C02R<a>, -NR<c>CONR<b>R<c>, -C02R<b>, -CONR<b>R<c>, -NR<c>COR<b>, -SORa, -SO^,
-S02NR<b>R<c>og -NR^O^,
hvor Ra er valgt fra eventuelt substituert C1-C6alkyl, eventuelt substituert aryl og eventuelt substituert heteroaryl;
R<b>er valgt fra H, eventuelt substituert C1-C6alkyl, eventuelt substituert aryl og eventuelt substituert heteroaryl; og
R<c>er valgt fra hydrogen og eventuelt substituert C1-C4alkyl; eller
R<b>ogR<e>sammen med nitrogenet som de er bundet til, danner eventuelt substituert 5-til 7-leddet nitrogen-inneholdende heterocykloalkyl som eventuelt omfatter 1 eller 2 ytterligere heteroatomer valgt fra O, N og S i heterocykloalkylringen;
hvor hver eventuelt substituerte gruppe er usubstituert eller uavhengig substituert med én eller flere, så som én, to eller tre, substituenter uavhengig valgt fra C1-C4alkyl, aryl, heteroaryl, aryl-Ci-C4alkyl-, heteroaryl-Ci-C4alkyl-, C1-C4halogenalkyl-, -OC1-C4alkyl,
-OC1-C4alkylfenyl, -C1-C4alkyl-OH, -OC1-C4halogenalkyl, halogen, -OH, -NH2,
-C1-C4alkyl-NH2, -N(Ci-C4alkyl)(Ci-C4alkyl), -NH(Ci-C4alkyl),
-N(Ci-C4alkyl)(Ci-C4alkylfenyl), -NH(Ci-C4alkylfenyl), cyano, nitro, okso (som substituent for cykloalkyl, heterocykloalkyl eller heteroaryl), -C02H, -C(0)OCi-C4alkyl, -CON(Ci-C4alkyl)(Ci-C4alkyl), -CONH(Ci-C4alkyl), -CONH2, -NHC(0)(Ci-C4alkyl), -NHC(0)(fenyl), -N(Ci-C4alkyl)C(0)(Ci-C4alkyl), -N(Ci-C4alkyl)C(0)(fenyl), -C(0)Ci-C4alkyl, -C(0)Ci-C4fenyl, -C(0)Ci-C4halogenalkyl, -OC(0)Ci-C4alkyl, -S02(Ci-C4alkyl), -S02(fenyl), -S02(Ci-C4halogenalkyl), -S02NH2, -S02NH(Ci-C4alkyl), -S02NH(fenyl), -NHS02(Ci-C4alkyl), -NHS02(fenyl) og -NHS02(Ci-C4halogenalkyl).
[0052] Betegnelsen "substituert amino" angir gruppen -NHR<d>eller -NR<d>R<d>hvor hver Rd uavhengig er valgt fra: eventuelt substituert alkyl, eventuelt substituert cykloalkyl, eventuelt substituert acyl, eventuelt substituert aryl, eventuelt substituert heteroaryl, eventuelt substituert heterocykloalkyl, alkoksykarbonyl, sulfinyl og sulfonyl, hvor substituert alkyl, cykloalkyl, aryl, heterocykloalkyl og heteroaryl refererer til henholdsvis alkyl, cykloalkyl, aryl, heterocykloalkyl og heteroaryl hvor ett eller flere (opptil 5, så som opptil 3) hydrogenatomer er erstattet med en substituent uavhengig valgt fra: -Ra, -ORb, -0(Ci-C2alkyl)0- (f.eks. metylendioksy-), -SR<b>, guanidin, guanidin hvor ett eller flere av guanidin-hydrogenene er erstattet med en lavere-alkylgruppe, -NR<b>R<c>, halogen, cyano, nitro, -COR<b>, -C02R<b>, -CONR<b>Rc, -OCOR<b>, -OC02R<a>, -OCONR<b>R<c>, -NR<e>COR<b>, -NR<e>C02R<a>, -NR<e>CONR<b>R<e>, -C02R<b>, -CONR<b>R<e>, -NR<e>COR<b>, -SORa, -SO^<*>,
-S02NR<b>R<c>og -NR^O^,
hvor Ra er valgt fra eventuelt substituert C1-C6alkyl, eventuelt substituert aryl og eventuelt substituert heteroaryl;
R<b>er valgt fra H, eventuelt substituert C1-C6alkyl, eventuelt substituert aryl og eventuelt substituert heteroaryl; og
R<c>er valgt fra hydrogen og eventuelt substituert Ci-C4alkyl; eller
R<b>ogR<c>sammen med nitrogenet som de er bundet til, danner eventuelt substituert 5-til 7-leddet nitrogen-inneholdende heterocykloalkyl som eventuelt omfatter 1 eller 2 ytterligere heteroatomer valgt fra O, N og S i heterocykloalkylringen;
hvor hver eventuelt substituerte gruppe er usubstituert eller uavhengig substituert med én eller flere, så som én, to eller tre, substituenter uavhengig valgt fra Ci-C4alkyl, aryl, heteroaryl, aryl-Ci-C4alkyl-, heteroaryl-Ci-C4alkyl-, Ci-C4halogenalkyl-, -OCi-C4alkyl,
-OCi-C4alkylfenyl, -Ci-C4alkyl-OH, -OCi-C4halogenalkyl, halogen, -OH, -NH2,
-Ci-C4alkyl-NH2, -N(Ci-C4alkyl)(Ci-C4alkyl), -NH(Ci-C4alkyl),
-N(Ci-C4alkyl)(Ci-C4alkylfenyl), -NH(Ci-C4alkylfenyl), cyano, nitro, okso (som substituent for cykloalkyl, heterocykloalkyl eller heteroaryl), -CO2H, -C(0)OCi-C4alkyl, -CON(Ci-C4alkyl)(Ci-C4alkyl), -CONH(Ci-C4alkyl), -CONH2, -NHC(0)(Ci-C4alkyl), -NHC(0)(fenyl), -N(Ci-C4alkyl)C(0)(Ci-C4alkyl), -N(Ci-C4alkyl)C(0)(fenyl), -C(0)Ci-C4alkyl, -C(0)Ci-C4fenyl, -C(0)Ci-C4halogenalkyl, -OC(0)Ci-C4alkyl, -S02(Ci-C4alkyl), -S02(fenyl), -S02(Ci-C4halogenalkyl), -SO2NH2, -S02NH(Ci-C4alkyl), -S02NH(fenyl), -NHS02(Ci-C4alkyl), -NHS02(fenyl) og -NHS02(Ci-C4halogenalkyl) og hvor eventuelt substituert acyl, alkoksykarbonyl, sulfinyl og sulfonyl er som definert her.
[0053] Forbindelser ifølge oppfinnelsen omfatter optiske isomerer av forbindelser med formel I, racemater og andre blandinger derav. I tillegg omfatter forbindelser med formel IZ- og E-former (eller cis- og £rø«s-former) av forbindelser med karbon-karbon-dobbeltbindinger. I de situasjoner kan de enkle enantiomerer eller diastereomerer, dvs. optisk aktive former, oppnås ved asymmetrisk syntese eller ved spaltning av racematene. Spaltning av racematene kan gjennomføres, for eksempel ved konvensjonelle metoder så som krystallisering i nærvær av et oppløsningsmiddel eller kromatografi, ved anvendelse av for eksempel chiral høytrykk væskekromatografi- (HPLC) kolonne. Når forbindelser med formel I eksisterer i forskjellige tautomere former, omfatter kjemiske enheter ifølge foreliggende oppfinnelse alle tautomere former av forbindelsen.
[0054] Forbindelser ifølge oppfinnelsen omfatter også krystallinske og amorfe former av forbindelsene, omfattende for eksempel polymorfer, pseudopolymorfer, solvater, hydrater, usolvaterte polymorfer (omfattende anhydrater), konformasjonelle polymorfer og amorfe former av forbindelsene, så vel som blandinger derav. "Krystallinsk form," "polymorf," og "ny form" kan anvendes om hverandre her og skal omfatte alle krystallinske og amorfe former av forbindelsen, omfattende for eksempel polymorfer, pseudopolymorfer, solvater, hydrater, usolvaterte polymorfer (omfattende anhydrater), konformasjonelle polymorfer og amorfe former, så vel som blandinger derav, hvis ikke en spesiell krystallinsk eller amorf form er referert til.
[0055] Kjemiske enheter ifølge foreliggende oppfinnelse omfatter forbindelser og alle farmasøytisk akseptable former derav. Farmasøytisk akseptable former av forbindelsene angitt her omfatter farmasøytisk akseptable salter, chelater, ikke-kovalente komplekser, prodrug og blandinger derav. I visse utførelsesformer er forbindelsene beskrevet her i form av farmasøytisk akseptable salter. Således omfatter betegnelsene "kjemisk enhet" og "kjemiske enheter" også farmasøytisk akseptable salter, chelater, ikke-kovalente komplekser, prodrug og blandinger.
[0056] "Farmasøytisk akseptable salter" omfatter salter med uorganiske syrer, så som hydroklorat, fosfat, difosfat, hydrobromat, sulfat, sulfinat, nitrat og lignende salter; så vel som salter med en organisk syre, så som malat, maleat, fumarat, tartrat, succinat, citrat, acetat, laktat, metansulfonat, p-toluensulfonat, 2-hydroksyetylsulfonat, benzoat, salicylat, stearat og alkanoat så som acetat, HOOC-(CH2)n-COOH hvor n er 0-4 og lignende salter. Tilsvarende omfatter farmasøytisk akseptable kationer, natrium, kalium, kalsium, aluminium, litium og ammonium.
[0057] I tillegg, hvis en forbindelse blir oppnådd som et syreaddisjonssalt, kan den frie basen oppnås ved alkalisering av en løsning av syresaltet. Omvendt, hvis produktet er en fri base, kan et addisjonssalt, spesielt et farmasøytisk akseptabelt addisjonssalt, produseres ved oppløsning av den frie basen i et egnet organisk løsningsmiddel og behandling av løsningen med en syre, i henhold til konvensjonelle metoder for fremstilling av syreaddisjonssalter fra basiske forbindelser. Fagfolk på området vil kjenne forskjellige syntesemetoder som kan anvendes for å fremstille ikke-toksiske farmasøytisk akseptable addisjonssalter.
[0058] Betegnelsen "solvat" angir den kjemiske enhet dannet ved interaksjon av et løsningsmiddel og en forbindelse. Egnede solvater er farmasøytisk akseptable solvater, så som hydrater, omfattende for eksempel hemi-hydrater, monohydrater, dihydrater, trihydrater,.
[0059] Betegnelsen "aktivt middel" blir anvendt for å angi en kjemisk enhet som har biologisk aktivitet. I visse utførelsesformer er et "aktivt middel" en forbindelse som er farmasøytisk nyttig.
[0060] Betegnelsen "terapeutisk effektiv mengde" av en kjemisk enhet ifølge foreliggende oppfinnelse betyr en mengde effektiv, når administrert til et menneske eller en ikke-human pasient, til å behandle en sykdom, f. eks. kan en terapeutisk effektiv mengde være en mengde tilstrekkelig til å behandle en sykdom eller lidelse mottagelig for myosin-aktivering. Den terapeutisk effektive mengden kan bestemmes eksperimentelt, for eksempel ved å undersøke blodkonsentrasjonen av den kjemiske enhet eller teoretisk, ved å beregne biotilgj engelighet.
[0061] Med "betydelig" menes hvilken som helst detekterbar forandring som er statistisk signifikant i en standard parametrisk test av statistisk signifikans så som Student's T-test, hvor p < 0,05.
[0062] "Pasient" angir et dyr, så som et pattedyr, for eksempel et menneske, som er eller vil bli gjenstand for behandling, observasjon eller forsøk. Metodene ifølge oppfinnelsen kan være anvendelige i både human terapi og veterinær-anvendelser. I noen utførelsesformer er pasienten et pattedyr og i noen utførelsesformer er pasienten et menneske.
[0063] "Behandling" eller "behandling av" betyr hvilken som helst behandling av en sykdom hos en pasient, omfattende: a) forhindring av sykdommen, dvs. forårsake at de kliniske symptomene på sykdommen ikke utvikles; b) hemning av sykdommen;
c) sinking eller stansing av utvikling av kliniske symptomer; og/eller
d) lindring av sykdommen, dvs. forårsake regresjonen av kliniske symptomer. [0064] Forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan betegnes og nummereres (feks. ved anvendelse av NamExpert™ tilgjengelig fra Cheminnovation eller det automatiske navnings-system i ChemDraw Ultra versjon 9.0 fra Cambridge Soft Corporation) som beskrevet nedenfor. For eksempel kan forbindelsen:
betegnes metyl-4-[(3- {[(6-metyl-3-pyridyl)amino] karbony lamino} fenyl)metyl] piperazinkarboksylat.
Likeledes kan forbindelsen:
betegnes N- {3 - [(1S)-1 -(4-acetylpiperazinyl)etyl] -2-fluorfenyl} [(6-metyl(3 - pyridyl))amino]karboksamid.
[0065] Likeledes kan forbindelsen betegnes [3-fluor-5-(3-pyridin-3-yl-iu-eido)-benzyl]-metyl-karbaminsyre-metylester eller metyl-4-[(2-fluor-3-{[(6-metyl(3-pyridyl))amino] karbonylamino } fenyl)mety 1] piperazinkarboksy lat.
[0066] De kjemiske enheter beskrevet her kan syntetiseres ved anvendelse av teknikker velkjent på området, f.eks. som illustrert nedenfor med referanse til reaksj onsskj emaene.
[0067] Hvis ikke spesifisert på annen måte finner reaksjonene beskrevet her sted ved atmosfærisk trykk, generelt innen et temperaturområde fra -10°C til 110°C. Videre, bortsett fra som anvendt i eksemplene eller som på annen måte spesifisert, skal reaksjonstider og -betingelser være omtrentlige, f.eks. finne sted ved ca. atmosfærisk trykk innen et temperaturområde på ca. -10°C til ca. 110°C over en periode på ca. 1 til ca. 24 timer; reaksjoner som blir kjørt natten over har gjennomsnittlig en periode på ca. 16 timer.
[0068] Betegnelsene "løsningsmiddel", "organisk løsningsmiddel" eller "inert løsningsmiddel" betyr hver et løsningsmiddel inert under reaksj onsbetingelsene beskrevet i forbindelse dermed [omfattende for eksempel benzen, toluen, acetonitril, tetrahydrofuran ("THF"), dimetylformamid ("DMF"), kloroform, metylenklorid (eller diklormetan), dietyleter, metanol, pyridin]. Hvis ikke spesifisert på annen måte er løsningsmidlene anvendt i reaksjonene ifølge foreliggende oppfinnelse inerte organiske løsningsmidler.
[0069] Isolering og rensning av de kjemiske forbindelser og mellomprodukter beskrevet her kan utføres, om ønsket, ved hvilken som helst egnet separerings- eller rensnings-prosedyre så som for eksempel filtrering, ekstraksjon, krystallisering, kolonnekromatografi, tynnskiktskromatografi eller tykkskiktskromatografi eller en kombinasjon av disse prosedyrer. Spesifikke illustrasjoner av egnede separerings- og isoleringsprosedyrer kan finnes med referanse til eksemplene nedenfor. Imidlertid kan andre ekvivalente separerings- eller isoleringsprosedyrer også anvendes.
[0070] Når ønsket kan (R)- og (S)-isomerer spaltes ved metoder kjent for fagfolk på området, for eksempel ved dannelse av diastereoisomere salter eller komplekser som kan separeres, for eksempel ved krystallisering; via dannelse av diastereoisomere derivater som kan separeres, for eksempel ved krystallisasjon, gass-væske- eller væskekromatografi; selektiv omsetning av én enantiomer med et enantiomer-spesifikt reagens, for eksempel enzymatisk oksidasjon eller reduksjon, fulgt av separering av de modifiserte og umodifiserte enantiomerer; eller gass-væske- eller væskekromatografi i en chiral omgivelse for eksempel på en chiral bærer, så som silika med en bundet chiral ligand eller i nærvær av et chiralt løsningsmiddel. Alternativt kan en spesifikk enantiomer syntetiseres ved asymmetrisk syntese ved anvendelse av optisk aktive reagenser, substrater, katalysatorer eller løsningsmidler eller ved omdannelse av én enantiomer til den andre ved asymmetrisk transformasjon.
[0071] Mange av de eventuelt substituerte utgangsforbindelser 101, 103, 201, 301 og andre reaktanter er kommersielt tilgjengelige, f.eks. fra Aldrich Chemical Company (Milwaukee, WT) eller kan lett fremstilles av fagfolk på området ved anvendelse av vanlig anvendt syntesemetodikk.
[0072] Fremstilling av Forbindelser med formel I
Med henvisning til Reaksj onsskj erna 1 blir en kolbe utstyrt med en magnetisk rører, tilbakeløpskjøler og termometerlomme, under nitrogen, fylt med fosgen eller en fosgen-ekvivalent (typisk trifosgen) og et ikke-polart, aprotisk løsningsmiddel så som diklormetan eller tetrahydrofuran. En løsning av en forbindelse med formel 101 i et ikke-polart, aprotisk løsningsmiddel så som diklormetan eller tetrahydrofuran blir tilsatt dråpevis over ca. 10-60 minutter og løsningen får omrøres mellom 1 til 15 timer. En forbindelse med formel 103 blir tilsatt porsjonsvis og løsningen blir omrørt i ca. 10-60 min. En base, så som DIEA, blir tilsatt dråpevis i ca. én time og løsningen får omrøres i ca. 1-15 timer. Produktet, en forbindelse med formel 105, blir isolert og renset.
[0073] Fremstilling av Forbindelser med formel I
Reaksj onsskj erna 2 illustrerer en alternativ syntese av forbindelser med formel I. Isocyanatet med formel 201 kan dannes og isoleres uavhengig av enten tilsvarende amin (dvs. R2-NH2) ved anvendelse av fosgen eller en fosgen-ekvivalent eller av den tilsvarende karboksylsyre (dvs. R2-COOH) ved anvendelse av en Curtius eller Hoffman omleiring. En blanding av forbindelser med formel 101 og 201 i et aprotisk løsningsmiddel så som diklormetan eller tetrahydrofuran fra -40°C til 110°C får omrøres i mellom 1 til 15 timer. Produktet, en forbindelse med formel I, blir isolert og renset.
[0074] Fremstilling av Forbindelser med formel II
Med henvisning til Reaksjonsskjerna 3 blir benzyl-alkoholen med formel 301 omdannet til en utgående gruppe ("Lv" så som halogen, mesylat eller triflat), 302 ved anvendelse av vanlig anvendt syntesemetodikk (se for eksempel: "Comprehensive Organic Transformation" LaRock, Richard C, 1989, VCH publishers, Inc. s. 353-365).
[0075] En blanding av en forbindelse med formel 302 og amin med formel HNR8R9i et aprotisk løsningsmiddel så som diklormetan eller DMF fra -40°C til 110°C får omrøres i mellom 1 til 15 timer. Produktet, en forbindelse med formel II, blir isolert og renset.
[0076] Alternativt blir benzyl-alkoholen med formel 301 oksidert til aldehydet med formel 303 ved anvendelse av vanlig anvendt syntesemetodikk (se for eksempel: "Comprehensive Organic Transformation" LaRock, Richard C, 1989, VCH publishers, Inc. s. 604-615.).
[0077] En blanding av en forbindelse med formel 303 og amin med formel HNR8R9i et løsningsmiddel så som diklormetan med et reduksjonsmiddel så som triacetoksyborhydrid med eller uten en syre så som eddiksyre fra -40°C til 110°C får omrøres i mellom 1 til 36 timer. Produktet, en forbindelse med formel II, blir isolert og renset.
[0078] Alternativt blir karboksylsyren med formel 304 koblet til et amin ved anvendelse av vanlig anvendt syntesemetodikk (se for eksempel: "Comprehensive Organic Transformation" LaRock, Richard C, 1989, VCH publishers, Inc. s. 972-976) for å danne amid 305. Amid 305 blir redusert til en forbindelse med formel II ved anvendelse av vanlig anvendt syntesemetodikk så som behandling av 305 med boran-dimetylsulfid i THF fra -40°C til tilbakeløp i 1 til 96 timer.
[0079] En forbindelse med formel II hvor Q er brom, klor, nitro, amino eller beskyttet amino kan omdannes til en forbindelse med formel 101 ved anvendelse av vanlig anvendt syntesemetodikk. Når for eksempel Q er nitro, kan den reduseres til det tilsvarende amin ved anvendelse av hydrogen med en Pd/C katalysator.
Reaksjonsskjema 4
[0080] Med henvisning til Reaksj onsskj erna 4, Trinn 1, blir til en løsning av en forbindelse med formel 400 i NMP tilsatt et overskudd (så som ca. minst 2 ekvivalenter) av natriumcyanid og et overskudd (så som minst 1 ekvivalent, for eksempel 1,35 ekvivalenter) av nikkel(II)bromid. Ytterligere NMP blir tilsatt og løsningen blir forsiktig oppvarmet til ca. 200°C og omrørt i ca. 4 dager. Produktet, en forbindelse med formel 401, blir isolert og eventuelt renset.
[0081] Til en~0°C løsning av en forbindelse med formel 401 i et inert løsningsmiddel så som diklormetan blir satt et overskudd (så som to eller flere ekvivalenter) av et reduksjonsmiddel, så som DIBAL-H (så som en 1 M løsning av DIBAL-H) dråpevis over -3,5 timer, mens en indre reaksjonstemperatur < 0°C opprettholdes. Produktet, en blanding av forbindelser med formel 402A og 402B, blir isolert og eventuelt renset.
[0082] Med henvisning til Reaksj onsskj erna 4, Trinn 3, blir til en løsning av en blanding av forbindelser med formel 402A og 402B i et inert løsningsmiddel så som THF
tilsatt et overskudd (så som ca. 1,05 ekvivalenter) av en forbindelse med formelen Ri-H hvor Ri er eventuelt substituert amino eller eventuelt substituert heterocykloalkyl og et overskudd (så som ca. 1,5 ekvivalenter) av et reduksjonsmiddel så som triacetoksyborhydrid porsjonsvis
over -40 min, mens en indre reaksjonstemperatur under ca. 45°C opprettholdes. Produktet, en forbindelse med formel 403, blir isolert og eventuelt renset.
[0083] Med henvisning til Reaksj onsskj erna 4, Trinn 4, blir til en løsning av en forbindelse med formel 403 i et løsningsmiddel så som aceton, tilsatt dråpevis ca. en ekvivalent av en forbindelse med formelen R2-NCO. Reaksj onsblandingen blir omrørt i ca. én time og eventuelt oppvarmet til tilbakeløp. Produktet, en forbindelse med formel 405, blir isolert og eventuelt renset.
[0084] En racemisk blanding blir eventuelt plassert på en kromatografikolonne og separert i (R)- og (S)-enantiomerer.
[0085] En forbindelse med formel I blir eventuelt bragt i kontakt med en farmasøytisk akseptabel syre for å danne det tilsvarende syreaddisjonssalt.
[0086] Et farmasøytisk akseptabelt syreaddisjonssalt av Formel I blir eventuelt bragt i kontakt med en base for å danne den tilsvarende frie base med formel I.
[0087] Visse utførelsesformer av oppfinnelsen omfatter eller anvender forbindelsene med formel I som har de følgende kombinasjoner og permutasjoner av substituent-grupper. Disse er presentert for å støtte andre kombinasjoner og permutasjoner av substituent-grupper, som for korthets skyld ikke spesifikt er beskrevet her, men skal forstås å være omfattet av foreliggende beskrivelse.
[0088] I visse utførelsesformer er forbindelsen: metyl-4-[(2-fluor-3-{[(6-metyl(3-pyridyl))amino]karbonylamino}fenyl)metyl]- piperazinkarboksylat;
metyl-4-[(3-fluor-5- {[(6-metyl(3-pyridyl))amino]karbonylamino}fenyl)metyl]piperazinkarboksylat; metyl-4-[(3-{[(6-metyl-3-pyridyl)amino]karbonylamino}fenyl)metyl]piperazinkarboksylat; etyl-4- [ (4-fluor-3 - {[(6-metyl(3 -pyridy l))amino] karbonylamino } feny l)metyl] -
piperazinkarboksylat;
metyl-4-[(lS)-l-(5-fluor-3-{[(6-metyl(3-pyridyl))amino]karbonylamino}fenyl)etyl]-piperazinkarboksylat;
N-{3-[(lS)-l-(4-acetylpiperazinyl)etyl]-2-fluorfenyl}[(6-metyl(3-pyridyl))amino]karboksamid;
[0089] De kjemiske enheter beskrevet her er selektive for og modulerer hjerte-sarkomere og er anvendelige for å binde til og/eller forsterke aktiviteten til hjerte-myosin, idet de øker graden i hvilken myosin hydrolyserer ATP. Som anvendt i denne sammenheng betyr "modulere" enten øke eller redusere myosin-aktivitet, mens "forsterke" betyr å øke aktiviteten. Det har også vært funnet ved testing av representative forbindelser ifølge oppfinnelsen, at deres administrering også kan øke den kontraktile kraft i hjertemuskel-fiber.
[0090] De kjemiske enheter, farmasøytiske preparater og kjemiske enheter og farmasøytiske preparater for anvendelse i metoder ifølge oppfinnelsen blir anvendt for å behandle hjertesykdom, omfattende: akutt (eller dekompensert) kongestiv hjertesvikt og kronisk kongestiv hjertesvikt; spesielt sykdommer forbundet med systolisk hjerte-dysfunksjon. Ytterligere terapeutiske anvendelser omfatter administrering for å stabilisere hjertefunksjon hos pasienter som venter på hjertetransplantat og hjelpe et stanset eller langsomtslående hjerte til å gjenoppta normal funksjon etter anvendelse av en bypass-pumpe.
[0091] ATP-hydrolyse blir anvendt av myosin i sarkomeren for å produsere kraft. Derfor vil en økning i ATP-hydrolyse svare til en økning i kraften eller hastigheten av muskel-kontraksjon. I nærvær av aktin blir myosin ATPase-aktivitet stimulert >100 ganger. Således måler ATP-hydrolyse ikke bare myosin enzymatisk aktivitet men også dens interaksjon med aktin-filament. En forbindelse som modulerer hjerte-sarkomeren kan identifiseres ved en økning eller reduksjon i graden av ATP-hydrolyse av myosin, som i visse utførelsesformer, har en 1,4 ganger økning i konsentrasjon mindre enn 10 uM (så som mindre enn 1 uM). Forsøk for slik aktivitet kan anvende myosin fra en human kilde, selv om myosin fra andre organismer vanligvis blir anvendt. Systemer som modellerer den regulatoriske rolle til kalsium i myosin-binding til det dekorerte tynne filament blir også anvendt.
[0092] Alternativt kan biokjemisk funksjonell sarkomere-preparering anvendes for å bestemme in vitro ATPase-aktivitet, for eksempel som beskrevet i U.S. søknad 09/539,164, innlevert 29. mars 2000. Den funksjonelle biokjemisk adferd av sarkomeren, omfattende kalsium-sensitivitet ved ATPase-hydrolyse, kan rekonstitueres ved å kombinere dens rensede individuelle komponenter (spesielt omfattende dens regulatoriske komponenter og myosin). En annen funksjonell preparering er in vitro motilitetsforsøk. Det kan utføres ved tilsetning av testforbindelse til et myosin-bundet objektglass og observere hastigheten av aktin-filamenter som glir over den myosin-dekkede glassoverflate (Kron SJ. (1991) Methods Enzymol. 196:399-416).
[0093] In vitro hastigheten av ATP-hydrolyse korrelerer med den myosin-forsterkende aktivitet, som kan bestemmes ved overvåkning av produksjon av enten ADP eller fosfat, for eksempel som beskrevet i søknad nr. 09/314,464, innlevert 18. mai, 1999. ADP produksjon kan også overvåkes ved kobling av ADP-produksjon til NADH-oksidasjon (ved anvendelse av enzymene pyruvat-kinase og laktat-dehydrogenase) og overvåkning av NADH-nivået enten ved absorbans eller fluorescens (Greengard, P., Nature 178 (Part 4534): 632-634 (1956); MolPharmacol 1970 Jan;6(l):31-40). Fosfat-produksjon kan overvåkes ved anvendelse av purin-nukleosid-fosforylase for å koble fosfat-produksjon til spaltning av en purin-analog, som resulterer i enten en forandring i absorbans { Proe NatiAcadSei USA 1992 Jun l;89(ll):4884-7) eller fluorescens ( BiochemJ 1990 Mar l;266(2):611-4). Mens en enkel måling kan anvendes vil generelt multiple målinger av samme prøve på forskjellige tider bli tatt for å bestemme den absolutte grad av protein-aktivitet; slike målinger har høyere spesifisitet spesielt i nærvær av testforbindelser som har lignende absorbans- eller fluorescens-egenskaper som de til den enzymatiske utlesning.
[0094] Testforbindelser kan undersøkes på en meget parallell måte ved anvendelse av multibrønn plater ved å plassere forbindelsene enten individuelt i brønner eller testing av dem i blandinger. Forsøkskomponenter omfattende mål-protein-kompleks, koblingsenzymer og substrater og ATP kan deretter settes til brønnene og absorbansen eller fluorescensen i hver brønn av platen kan måles med en plateleser.
[0095] En metode anvender et 384 brønn plateformat og et 25 uL reaksjonsvolum. Et pyruvat-kinase/laktat-dehydrogenase-koblet enzymsystem (Huang TG og Hackney DD.
(1994) J Biol Chem 269(23): 16493-16501) blir anvendt for å måle graden av ATP-hydrolyse i hver brønn. Som det vil forstås av fagfolk på området blir forsøkskomponenter tilsatt i buffere og reagenser. Siden metodene beskrevet her tillater kinetiske målinger, blir inkuberingsperioder optimalisert for å gi tilstrekkelige deteksjonssignaler over bakgrunnen. Forsøket blir utført i sanntid hvilket gir kinetikken av ATP-hydrolyse, som øker signalet til støyforhold av forsøket.
[0096] Modulering av hjertemuskel-fiber ATPase og/eller kontraktil kraft kan også måles ved anvendelse av detergent-permeabiliserte hjertefibere (også referert til som skrubbede "skinned" hjertefibere) eller myofibriller (subcellulære muskel-fragmenter), for eksempel som beskrevet av Haikala H, et al (1995) J Cardiovasc Pharmacol 25(5): 794-801. Skrubbede hjertefibere beholder deres iboende sarkomere organisering, men beholder ikke alle aspekter av cellulær kalsium-cyklisering; denne modell gir to fordeler: for det første blir den cellulære membran ikke en barriere for forbindelse-penetrering og for det andre blir kalsium-konsentrasjonen kontrollert. Derfor er hvilken som helst økning i ATPase eller kontraktil kraft et direkte mål for testforbindelsens effekt på sarkomere proteiner. ATPase-målinger blir utført ved anvendelse av metoder som beskrevet ovenfor. Spenningsmålinger blir utført ved å feste én ende av muskelfiberen til et stasjonært punkt og den andre enden til en transducer som kan måle kraft. Etter strekking av fiberen for å fjerne slark, registrerer kraft-transduceren øket spenning ettersom fiberen begynner å trekke seg sammen. Denne måling er betegnet isometrisk spenning, siden fiberen ikke blir tillatt å forkortes. Aktivering av den permeabiliserte muskelfiber blir fullført ved å plassere den i en bufret kalsiumløsning, fulgt av tilsetning av testforbindelse eller kontroll. Når testet på denne måten, forårsaket de kjemiske enheter beskrevet her en økning i kraft i kalsiumkonsentrasjoner forbundet med fysiologisk kontraktil aktivitet, men meget liten økning av kraft i relakserings-buffer ved lave kalsiumkonsentrasjoner eller i fravær av kalsium (EGTA datapunkt).
[0097] Selektivitet for hjerte-sarkomere og hjerte-myosin kan bestemmes ved å anvende ikke-hjerte-sarkomere komponenter og myosin i én eller flere av de ovenfor beskrevne forsøk og sammenligne resultatene oppnådd med de oppnådd ved anvendelse av hj erte-ekvivalentene.
[0098] En kjemisk enhets evne til å øke observert ATPase-grad i et in vitro rekonstituert sarkomere-forsøk eller myofibrill kan være resultat av øket omløpsgrad av Sl-myosin eller, alternativt, øket sensitivitet av dekorert aktin-filament for Ca<++->aktivering. For å skille mellom disse to mulige virkningsmåter, blir effekten av den kjemiske enhet på ATPase-aktivitet til Sl med udekorerte aktin-filamenter initielt målt. Hvis en økning av aktivitet er observert, kan den kjemiske enhets effekt på det Ca-mottagelige regulatoriske apparat være motbevist. Et annet, mer sensitivt forsøk, kan anvendes for å identifisere kjemiske enheter hvis aktiverende effekt på Sl-myosin blir forbedret i nærvær av dekorert aktin (sammenlignet med rene aktin-filamenter). I dette andre forsøk blir aktiviteter av hjerte-Sl og skjelett-Sl på hjerte- og skjelett-regulerte aktin-filamenter (i alle 4 permutasjoner) sammenlignet.
[0099] Innledende evaluering av in vivo aktivitet kan bestemmes i cellulære modeller av myocytt-kontraktilitet, f.eks. som beskrevet av Popping S, et al ((1996) Am. J. Physiol. 271: H357-H364) og Wolska BM, et al ((1996) Am. J. Physiol. 39:H24-H32). Én fordel ved myocytt-modellen er at komponent-systemene som resulterer i endringer i kontraktilitet kan isoleres og hoved-sted(er) for virkning bestemmes. Kjemiske enheter med cellulær aktivitet (for eksempel seleksjon av kjemiske enheter som har den følgende profil: > 120% økning i fraksjonert forkorting over basal med 2 uM eller resulterer i endringer i diastolisk lengde (<5% forandring)) kan deretter bedømmes i hele organ-modeller, så som isolert hjerte-(Langendorff) modell av hjertefunksjon, in vivo ved anvendelse av ekkokardiografi eller ved invasive hemodynamiske metoder og i dyrebaserte hj ertes vikt-modeller, så som rotte venstre koronararterie okklusjons-modell. Endelig blir aktivitet for behandling av hjertesykdom demonstrert i blindede, placebo-kontrollerte, humane kliniske forsøk.
[00100] De kjemiske enheter beskrevet her blir administrert i en terapeutisk effektiv dose, f.eks. en dose tilstrekkelig til å gi behandling for sykdomstilstandene beskrevet tidligere. Mens humane dosenivåer ennu må optimalisertes for de kjemiske enheter beskrevet her, er generelt en daglig dose fra ca. 0,05 til 100 mg/kg kroppsvekt; i visse utførelsesformer ca. 0,10 til 10,0 mg/kg kroppsvekt og i visse utførelsesformer ca. 0,15 til 1,0 mg/kg kroppsvekt. Således vil for administrering til en person på 70 kg, i visse utførelsesformer, doseområdet være ca. 3,5 til 7000 mg pr. dag; i visse utførelsesformer ca. 7,0 til 700,0 mg pr. dag og i visse utførelsesformer ca. 10,0 til 100,0 mg pr. dag. Mengden av kjemisk enhet administrert vil selvfølgelig være avhengig av individet og sykdomstilstanden som behandles, alvorlighetsgraden av lidelsen, metode og regime for administrering og bedømmelsen til foreskrivende lege; for eksempel vil et sannsynlig doseområde for oral administrering være ca. 70 til 700 mg pr. dag, mens for intravenøs administrering et sannsynlig doseområde vil være ca. 70 til 700 mg pr. dag avhengig av forbindelse-farmakokinetikk.
[00101] Administrering av de kjemiske enheter beskrevet her kan være via hvilken som helst av de aksepterte administreringsmetoder for midler som har lignende anvendelser omfattende, men ikke begrenset til, oralt, sublingvalt, subkutant, intravenøst, intranasalt, topisk, transdermalt, intraperitonealt, intramuskulært, intrapulmonært, vaginalt, rektalt eller intraokulært. Oral og parenteral administrering er vanlig for behandling av indikasjonene som er gjenstand for foreliggende oppfinnelse.
[00102] Farmasøytisk akseptable preparater omfatter faste, halvfaste, flytende og aerosol-doseformer, så som f.eks. tabletter, kapsler, pulvere, væsker, suspensjoner, suppositorier, aerosol-preparater. De kjemiske enhetene kan også administreres i doseformer med forlenget eller kontrollert frigjøring, omfattende depot- injeksjoner, osmotiske pumper, piller, transdermale (omfattende elektrotransport) plastere for forlenget og/eller regulert, pulset administrering med en forutbestemt hastighet. I visse utførelsesformer er preparatene gitt i enhetsdoseformer egnet for enkel administrering av en nøyaktig dose.
[00103] De kjemiske enheter beskrevet her kan administreres enten alene eller mer typisk i kombinasjon med en konvensjonell farmasøytiske bærer, (f.eks. mannitol, laktose, stivelse, magnesiumstearat, natrium sakkarin, talk, cellulose, natrium crosscarmellose, glukose, gelatin, sukrose, magnesiumkarbonat). Om ønsket kan det farmasøytiske preparatet også inneholde mindre mengder av ikke toksiske hjelpe-substanser så som fuktemidler, emulgeringsmidler, solubiliseringsmidler, pH buffermidler (f.eks. natriumacetat, natriumcitrat, cyklodekstrin-derivater, sorbitan-monolaurat, trietanolamin-acetat, trietanolamin-oleat). Avhengig av den tilsiktede administreringsmetode, vil det farmasøytiske preparatet generelt inneholde ca. 0,005% til 95%; i visse utførelsesformer, ca. 0,5% til 50 vekt% av en kjemisk enhet. Aktuelle metoder for fremstilling av slike doseformer er kjente eller vil være klare for fagfolk på dette området; se for eksempélRemington' s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania.
[00104] I tillegg kan de kjemiske enheter beskrevet her samadministreres med, og de farmasøytiske preparater kan omfatte, andre medisinske midler, farmasøytiske midler, adjuvantia. Egnede ytterligere aktive midler omfatter for eksempel: terapier som sinker progresjonen av hjertesvikt ved nedregulereing av neurohormonell stimulering av hjertet og forsøk på å forhindre hjerte-remodellering (f.eks. ACE-inhibitorer eller Ø-blokkere); terapier som forbedrer hjertefunksjon ved å stimulere hjerte-kontraktilitet (f.eks. positive inotrope midler, så som Ø-adrenerg agonist dobutamin eller fosfodiesterase-inhibitoren milrinon); og terapier som reduserer hjerte-forhåndsbelastning ("preload") (f.eks. diuretika, så som furosemid). Andre ytterligere egnede aktive midler omfatter vasodilatorer, digitoxin, antikoaguleringsmidler, mineralokortikoid-antagonister, angiotensin-reseptor-blokkere, nitroglycerin, andre inotroper og hvilken som helst annen terapi anvendt ved behandling av hjertesvikt.
[00105] I visse utførelsesformer er preparatene i form av en pille eller tablett og preparatet vil således inneholde, sammen med den aktive bestanddel, et fortynningsmiddel så som laktose, sukrose, dikalsiumfosfat eller lignende; et glattemiddel så som magnesiumstearat eller lignende; og et bindemiddel så som stivelse, gummi akasie, polyvinylpyrrolidin, gelatin, cellulose, cellulosederivater. I en annen fast doseform er et pulver, "marume", løsning eller suspensjon (f.eks. i propylenkarbonat, vegetabilske oljer eller triglycerider) innkapslet i en gelatinkapsel.
[00106] Flytende farmasøytisk administrerbare preparater kan for eksempel fremstilles ved oppløsning, dispergering, etc. av minst én kjemisk enhet og eventuelle farmasøytiske adjuvantia i en bærer (f.eks. vann, saltløsning, vandig dekstrose, glycerol, glykoler, etanol eller lignende) for å danne en løsning eller suspensjon. Injiserbare preparater kan fremstilles i konvensjonelle former, enten som flytende løsninger eller suspensjoner, som emulsjoner eller i faste former egnet for oppløsning eller suspensjon i væske før injeksjon. Prosentdelen av kjemiske enheter inneholdt i slike parenterale preparater er meget avhengig av den spesifikke natur derav, så vel som aktiviteten til de kjemiske enheter og behovene til individet. Imidlertid er prosentdeler av aktiv bestanddel på 0,01% til 10% i løsning anvendbare og vil være høyere hvis preparatet er et fast stoff som deretter skal fortynnes til prosentdelene ovenfor. I visse utførelsesformer vil preparatet omfatte 0,2-2% av det aktive midlet i løsning.
[00107] Farmasøytiske preparater av de kjemiske enheter beskrevet her kan også administreres til luftveiene som en aerosol eller løsning for en forstøver eller som et mikrofint pulver for insufflasjon, alene eller i kombinasjon med en inert bærer så som laktose. I et slikt tilfelle har partiklene av det farmasøytiske preparatet diametere på mindre enn 50 mikron, i visse utførelsesformer mindre enn 10 mikron.
[00108] Generelt, for å anvende de kjemiske enheter beskrevet her ved en metode for screening for myosin-binding, blir myosin bundet til en bærer og en forbindelse ifølge oppfinnelsen satt til forsøket. Alternativt kan de kjemiske enheter beskrevet her være bundet til bæreren og myosin tilsatt. Klasser av forbindelser blant hvilke nye bindemidler kan søkes omfatter spesifikke antistoffer, ikke-naturlige bindemidler identifisert ved screening av kjemiske biblioteker, peptidanaloger, etc. Av spesiell interesse er screeningsforsøk for kandidat-midler som har lav toksisitet for humane celler. En rekke forsøk kan anvendes for dette formål, omfattende merket in vitro protein-protein bindingsforsøk, elektroforetisk mobilitet skift-forsøk, immunoanalyser for protein-binding, funksjonelle forsøk (fosforyleringsforsøk, etc). Se f.eks. U.S. Patent nr. 6,495,337.
[00109] De følgende eksempler tjener til mer fullstendig å beskrive metoden for anvendelse av den ovenfor beskrevne oppfinnelse. Det vil forstås at disse eksempler på ingen måte tjener til å begrense omfanget av foreliggende oppfinnelse.
[00110]
Eksempel 1 Trinn 1
[00111] Til en løsning av 1,0 ekv IA i tørr DMF (0,37 M) ble satt Zn(CN)2(0,92 ekv) og Pd(PPli3)4 (0,058 ekv). Reaksjonsblandingen ble spylt med nitrogen og oppvarmet til 80°C natten over. Ytterligere 0,023 ekv av Pd(PPli3)4ble deretter tilsatt og reaksj onsblandingen ble oppvarmet i ytterligere 6 timer. Reaksj onsblandingen ble deretter avkjølt til romtemperatur, fortynnet med 15 volumer EtOAc (basert på IA) og det organiske laget ble vasket 3 ganger med vann og én gang med saltvann. Det organiske laget ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert. Rensning ved kromatografi over silikagel ved anvendelse av 10% Et20/heksan som elueringsmiddel ga IB som et fast stoff (90%).
Eksempel 1 Trinn 2
[00112] Til en løsning av 1,0 ekv IB i tørr Et20 (0,06 M) ved 0°C ble satt dråpevis en løsning av diisobutyllitiumaluminium-hydrid (1,1 ekv, 1,0 M i heksaner) med sprøyte. Den resulterende løsningen ble holdt ved 0°C natten over. Reaksj onsblandingen ble satt til en blanding av is og iseddik. Reaksj onsblandingen ble deretter fortynnet med etylacetat og det vandige laget ble ekstrahert med etylacetat to ytterligere ganger. De samlede organiske lag ble vasket to ganger med mettet natriumbikarbonat og én gang med saltvann. De organiske lag ble deretter tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert i vakuum. Rensning over silikagel ved anvendelse av 10% EtOAc/heksaner som elueringsmiddel ga et gult, fast stoff (100%) som en 80:20 blanding av 1C:1B.
Eksempel 1 Trinn 3
[00113] Til en avkjølt (0°C) oppslemning av en 80:20 blanding av 1C:1B (1,0 ekv) og boc-piperazin (ca. 2 ekv) i en blanding av HO Ac og DCM (4,8 M boc-piperazin i 1:1,4 volum/volum HO Ac/DCM) ble satt natrium-triacetoksyborhydrid som fast stoff over ca. 5 minutter. Reaksj onsblandingen fikk oppvarmes til romtemperatur og ble omrørt i to timer. Reaksj onsblandingen ble behandlet med mettet natriumbikarbonat og fortynnet med etylacetat. Lagene ble separert og det vandige laget ble vasket tre ganger med etylacetat. De organiske lag ble samlet og vasket med saltvann, tørket over natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Rensning ved kromatografi over silikagel ved anvendelse av 50% etylacetat/heksaner som elueringsmiddel ga ID (67,7%) som en gul olje.
Eksempel 1 Trinn 4
[00114] En blanding av 1,0 ekv av ID og en katalytisk mengde av 10% Pd/C (omtrent 10 veki/vekt %) i MeOH (ca. 0,6 M ID i MeOH) ble omrørt over en atmosfære av 3,5 kg/cm<2>Ek i 45 min. Etter erstatning av Eb-atmosfære med N2, ble reaksj onsblandingen filtrert gjennom diatoméjord og diatoméjorden vasket med MeOH. Konsentrasjon av MeOH resulterte i isolering av 1E.
Eksempel 1 Trinn 5
[00115] Til en løsning av anilin 1E (1,0 ekv) i tørr DCM (ca. 0,1 M 1E i DCM) ved romtemperatur under N2-atmosfære ble satt 2-metyl-5-isocyanatopyridin (lite overskudd, ca. 1,2 ekv) med sprøyte. Blandingen ble omrørt i 1 time. Til reaksj onsblandingen ble satt sekvensielt mettet vandig natriumbikarbonat og etylacetat. Lagene ble separert og det organiske laget ble vasket to ganger med mettet NaHC03og én gang med saltvann. Det organiske laget ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert i vakuum. Rensning ved kromatografi over silikagel ved anvendelse av 5% metanol/DCM som elueringsmiddel ga 1F.
Eksempel 1 Trinn 6 og 7
[00116] Til en løsning av 1,0 ekv av 1F i CH2CI2(ca. 0,14 M 1F i DCM) ble satt omtrent 200 ekv av trifluoreddiksyre (TF A). Reaksj onsblandingen ble omrørt i 30 min og konsentrert. Det resulterende residuet ble oppløst i EtOAc (ca. 1,6 ganger volumet av reaksj onsblandingen) og vasket sekvensielt med 3N NaOH (2 ganger) og saltvann. Det organiske laget ble tørket (NaS04) og konsentrert for å gi den ønskede frie base som ble anvendt uten ytterligere rensning.
[00117] Til en løsning av den frie basen ovenfor (1,0 ekv) og DIPEA (1,2 ekv) i tørr THF (ca. 0,2 M fri base i THF) ble satt metylklorformiat (1,1 ekv) med sprøyte og den resulterende blandingen ble omrørt i 1 time. Til blandingen ble satt vandig natriumbikarbonat fulgt av etylacetat. Det organiske laget ble separert og vasket to ganger med vandig natriumbikarbonat og én gang med saltvann. De samlede vandige lag ble ekstrahert én gang med etylacetat. De samlede organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert i vakuum. Rensning ved kromatografi over silikagel ved anvendelse av 5% MeOH/DCM som elueringsmiddel ga metyl-4-(3-fluor-5-(3-(6-metylpyridin-3-yl)ureido)benzyl)-piperazin-l-karboksyla! MS 402 (M+H).
[00118] Til en løsning av den frie basen ovenfor (1,0 ekv) og DIPEA (1,2 ekv) i tørr THF (ca. 0,2 M fri base i THF) ble satt dimetylsulfamoylklorid (1,1 ekv) med sprøyte. Etter noen få timer var reaksjonen fullstendig. Blandingen ble behandlet med vandig natriumbikarbonat, fortynnet med etylacetat og vasket to ganger med bikarb og én gang med saltvann. De samlede vandige lag ble ekstrahert én gang med etylacetat og de samlede organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert i vakuum. Rensning ved kromatografi over silikagel ved anvendelse av 5% MeOH/DCM som elueringsmiddel ga 4-(3-fluor-5-(3-(6-metylpyridin-3-yl)ureido)benzyl)-N,N-dimetylpiperazin-l-sulfonamid. MS 451 (M+H).
Eksempel 2 Trinn 1
[00119] Til 1,0 ekv av (4-fluor-3-nitro-fenyl)-metanol (2A) i THF (ca. 1 M 2A i THF) og (ca. 1,1 ekv) av pyridin ble satt omtrent 1,1 ekv av metansulfonylklorid. Blandingen ble omrørt natten over ved romtemperatur og deretter konsentrert. Residuet ble renset ved anvendelse av "flash" kromatografi over silika med 10%-50% EtOAc/heksaner som elueringsmiddel, hvilket ga metansulfonsyre-4-fluor-3-nitro-benzylester (2B) (57%).
Eksempel 2 Trinn 2
[00120] Til 1,0 ekv av metansulfonsyre-4-fluor-3-nitro-benzylester (2B) i DMF (ca. 0,6 M 2B i DMF) ble satt ca. 1,05 ekv av TEA og ca. 1,0 ekv av f-butyl-piperazin-1-karboksylat. Blandingen ble omrørt i 30 min ved romtemperatur, fortynnet med EtOAc, vasket med NHtCl-løsning, tørket (Na2SC>4) og inndampet. Rensning ved "flash" kromatografi over silika med 50% EtOAc/heksaner som elueringsmiddel ga 4-(4-fluor-3-nitro-benzyl)-piperazin-1 -karboksylsyre-tert-butylester (2C).
Eksempel 2 Trinn 3
[00121] 4-(4-fluor-3-nitro-benzyl)-piperazin-l-karboksylsyre-fert-butylester (2C, 1,0 ekv) i metanol (ca. 0,2 M 2C i MeOH) ble behandlet med katalytisk Pd(OH)2/C under hydrogen ved 4,2 kg/cm2 natten over. Blandingen ble filtrert gjennom diatoméjord og konsentrert til en olje. Denne oljen ble oppløst i THF og behandlet med omtrent 1,05 ekv av 6-metylpyridin-3-isocyanat. Etter omrøring ved 50°C i 30 min ble blandingen konsentrert. Residuet ble renset ved reversert fase HPLC, hvilket ga 4-{4-fluor-3-[3-(6-metyl-pyridin-3-yl)-ureido]-benzyl}-piperazin-l-karboksylsyre-tert-butylester (2D).
Eksempel 2, Trinn 4 og 5
[00122] Til 1,0 ekv av 4-{4-fluor-3-[3-(6-metyl-pyridin-3-yl)-ureido]-benzyl}-piperazin-l-karboksylsyre-fert-butylester (2D) i MeOH (ca. 0,1 M 2D i MeOH) ble satt 2 volumer av HC1 i dioksan (4 N) og reaksj onsblandingen ble omrørt ved 50°C i 15 min og inndampet til et fast stoff. Det faste stoffet ble kombinert med DCM og behandlet med omtrent 5 ekv av TEA og delt i 3 like porsjoner av reaksjonsblanding A. En porsjon av reaksj onsblanding A ble behandlet med 1,2 ekv av metyl-karbonylklorid og omrørt natten over. Den resulterende blandingen ble konsentrert og renset ved reversert fase HPLC, hvilket ga 4- {4-fluor-3 -[3 -(6-metyl-pyridin-3 -yl)-ureido] -benzyl} -piperazin-1 -karboksylsyre-metylester. MS 402 (M+H). En andre porsjon av reaksj onsblanding A ble behandlet med 1,2 ekv av dimetylsulfamoylklorid og omrørt natten over. Den resulterende blandingen ble konsentrert og renset ved reversert fase HPLC, hvilket ga 4-{4-fluor-3-[3-(6-metyl-pyridin-3-yl)-ureido]-benzyl}-piperazin-l-sulfonsyre-dimetylamid. MS 451 (M+H).
Eksempel 3 Trinn 1
[00123] En rundbunnet kolbe ble fylt med 1 ekv av 3-klor-2-fluoranilin (3A), 1-metyl-2-pyrrolidinon (ca. 1,5 M 3A i NMP), 2,2 ekv av natriumcyanid og 1,35 ekv av nikkel(II)-bromid ved romtemperatur under N2. Konsentrasjonen ble halvert ved innføring av ytterligere NMP under N2og løsningen ble forsiktig oppvarmet til 200± 5°C og omrørt i 4 dager under N2. Reaksj onsblandingen fikk avkjøles til romtemperatur. Reaksj onsblandingen ble fortynnet med 30 volumer av ferf-butyl-metyleter (MTBE) og filtrert gjennom celite. Celite-sjiktet ble deretter skyllet med 10 volumer av MTBE. De organiske faser ble vasket med 40 volumer av saltvann, 2 x 40 volumer av vann og 40 volumer av saltvann. De samlede organiske lag ble tørket over natriumsulfat og konsentrert, hvilket ga et brunt, fast stoff som ble tørket under vakuum (-30 i Hg) ved 40°C i 8 timer, hvilket ga forbindelsen med formel 3B (71% utbytte).
Eksempel 3 Trinn 2
[00124] En løsning av 3B i diklormetan (ca. 1,5 M 3B i DCM) ved romtemperatur under nitrogen-blanding ble avkjølt til~0°C og 2,0 ekv av IM diisobutyl-litiumaluminium-hydrid (DIBA1H) i DCM ble tilsatt dråpevis over -3,5 timer, mens en indre reaksj onstemperatur < 0°C ble opprettholdt. Etter fullføring av DiBAlH-tilsetningen ble reaksj onsblandingen satt dråpevis med kraftig omrøring til en avkjølt løsning (~0°C) av 40 volumer av 15% Rochelle-salt og 10 volumer av DCM, mens en indre reaksj onstemperatur under 10°C ble opprettholdt. Kolben ble skyllet med 10 volumer av DCM og blandingen fikk oppvarmes til romtemperatur og ble omrørt i 4 timer. Lagene ble separert og det vandige laget ble tilbakeekstrahert med 20 volumer av DCM. De samlede organiske lag ble vasket med 20 volumer vann. Det organiske laget ble tørket over natriumsulfat og konsentrert, hvilket ga et brunt skum, som ble tørket under vakuum (-30 i Hg) ved romtemperatur, hvilket ga 3C (92% utbytte).
Eksempel 3 Trinn 3
Trinn 3A/ B:
[00125] En løsning av 1 ekv av 3C, tetrahydrofuran (ca. 1,4 M 3C i THF) og 1,05 ekv av metyl piperazin-l-karboksylat ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 3 timer. Til reaksj onsblandingen ble satt 1,5 ekv av natrium-triacetoksyborhydrid porsjonsvis over -40 min, mens en indre reaksj onstemperatur under 45°C ble opprettholdt. Reaksj onsblandingen ble omrørt natten over ved romtemperatur. Til reaksj onsblandingen ble satt 5 volumer vann dråpevis over 1 time, mens en indre reaksj onstemperatur under 30°C ble opprettholdt. Etylacetat (EtOAc, 5 volumer) ble deretter tilsatt og lagene ble separert. Det vandige laget ble tilbakeekstrahert med 5 volumer EtOAc. De samlede organiske lag ble vasket med mettet natriumbikarbonat og fast natriumbikarbonat ble tilsatt etter behov for å bringe pH til 8 (pHydrion papir). Lagene ble separert og det organiske laget ble vasket med 5 volumer saltvann. Det organiske laget ble tørket over natriumsulfat og aktivert karbon ble tilsatt i tørketrinnet. De organiske faser ble filtrert gjennom celite og celite-sjiktet ble skyllet 4 ganger med EtOAc. De organiske faser ble konsentrert og tørket natten over på rotavap (-30 i Hg ved romtemperatur), hvilket ga en ravgul-brun olje.
Trinn 3C:
[00126] Alle beregninger er basert på mengden av 3C (R= O).
[00127] Til 3 volumer av metanol (basert på 3C, R=0) under N2over et is/saltvann/aceton-bad ble satt 3 ekv av acetylklorid dråpevis over 3 timer, mens en indre
reaksj onstemperatur under 0°C ble opprettholdt. Løsningen ble deretter omrørt i ytterligere 1 time under 0°C. En løsning av 1,0 ekv av urenset 3D (fra Trinn 3A/3B ovenfor) i MeOH (ca. 3,6 M basert på 3C, R=0) ble tilsatt dråpevis over 30 min, mens en indre reaksjonstemperatur under 15°C ble opprettholdt. Reaksjonen fikk oppvarmes til romtemperatur natten over. De
faste stoffene ble filtrert neste dag og skyllet med 2x 0,5 volum av MeOH, 5 volumer av 1:1 fert-butyl-metyleter (MTBE):MeOH og 5 volumer av MTBE.
[00128] De faste stoffene ble deretter tatt opp i 5 volumer av EtOAc og mettet natriumbikarbonat og fast natriumbikarbonat ble tilsatt etter behov for å bringe pH i det vandige laget til 8 (pHydrion-papir). Lagene ble separert og det vandige laget ble ekstrahert med 5 volumer av EtOAc. De samlede organiske lag ble vasket med 5 volumer saltvann, tørket over natriumsulfat og konsentrert, hvilket ga et blekt oransje fast stoff som ble tørket under vakuum (-30 i Hg) ved~40°C, hvilket ga 3D (50% utbytte).
Eksempel 3 Trinn 4
[00129] Til en løsning av 3D i aceton (ca. 2,7 M 3D i aceton) ble satt 1,0 ekv av 5-isocyanato-2-metyl-pyridin dråpevis over 9 min. Et voluminøst presipitat ble dannet under tilsetningen og reaksj onsblandingen ble omrørt i én time. Reaksj onsblandingen ble oppvarmet til tilbakeløp i 2 timer og avkjølt til romtemperatur i 2,5 timer. Reaksjonen ble deretter oppvarmet til tilbakeløp i 1 time og avkjølt til romtemperatur natten over. Reaksj onsblandingen ble filtrert og skyllet med 1 volum aceton, deretter tre ganger med 2 volumer etylacetat. De faste stoffene ble tørket under vakuum (-30 i Hg) ved 60°C natten over, hvilket ga et hvitt pulver (86% utbytte) av metyl-4-(2-fluor-3-(3-(6-metylpyridin-3-yl)ureido)benzyl)piperazin-l-karboksylat. Materialet ble gjenopparbeidet som følger:
[00130] Metyl-4-(2-fluor-3 -(3 -(6-metylpyridin-3 -yl)ureido)benzyl)piperazin-1 - karboksylatet ovenfor ble oppløst i aceton (ca. 0,2 M) under N2. Reaksjonen ble deretter oppvarmet til tilbakeløp i 2,5 timer og avkjølt til romtemperatur natten over. Reaksj onsblandingen ble filtrert og skyllet med 1 volum aceton, deretter tre ganger med 2 volumer etylacetat. De faste stoffene ble tørket under vakuum (-30 i Hg) ved 60°C natten over, hvilket ga metyl-4-(2-fluor-3-(3-(6-metylpyridin-3-yl)ureido)benzyl)piperazin-l-karboksylat som et hvitt pulver (79% utbytte). Materialet ble gjenopparbeidet som følger:
[00131] Metyl-4-(2-fluor-3 -(3 -(6-metylpyridin-3 -yl)ureido)benzyl)piperazin-1 - karboksylatet ovenfor ble oppløst i aceton (ca. 0,2 M) under N2. Reaksjonen ble deretter oppvarmet til tilbakeløp og avkjølt til romtemperatur natten over. Reaksjonsblandingen ble filtrert og skyllet med 1 volum aceton, deretter tre ganger til med 2 volumer etylacetat. De faste stoffene ble tørket under vakuum (-30 i Hg) ved 60° C natten over, hvilket ga metyl-4-(2-fluor-3-(3-(6-metylpyridin-3-yl)ureido)benzyl)piperazin-l-karboksylat som et hvitt pulver (73% utbytte). MS 402 (M+H).
Eksempel 4 Trinn 1
[00132] En 3-halset rundbunnet kolbe ble spylt med nitrogen i minst ti minutter. Kolben ble fylt med 1,0 ekv av 4A, CH2CI2(ca. 1,2 M 4A i DCM) og ca. 1,1 ekv av DIPEA. Kolben ble deretter avkjølt til 10±5°C. Mens kolben ble avkjølt, ble 1,2 ekv av metyl-piperazin-l-karboksylat tatt opp i CH2CI2(ca. 5,3 M). Materialet ble ikke oppløst, så ytterligere 0,05 ekv av DIPEA i DCM (ca. 0,3 M) ble tilsatt. Materialet ble ikke oppløst og suspensjonen ble deretter tilsatt dråpevis over 50 min, mens en indre reaksj onstemperatur
<30°C ble opprettholdt. Kjølebadet ble fjernet og reaksjonsblandingen ble oppvarmet til tilbakeløp. Reaksjonsblandingen ble holdt ved tilbakeløp i 19 timer. Ytterligere 0,05 ekv av metyl-piperazin-l-karboksylat ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble tilbakeløpskokt i ytterligere 2,5 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur og vasket med 5 volumer vann. Vannlaget ble tilbake-ekstrahert med 5 volumer CH2G2. De samlede organiske lag ble vasket med 5 volumer av 10% AcOH/vann. Det organiske laget ble deretter vasket med 5 volumer mettet natriumbikarbonat og 5 volumer saltvann. Det organiske laget ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert via rotavap ved 30±5°C til et residuum. MTBE ble satt til rotavap-kolben ved 20±5°C og kolben ble rotert inntil en løsning var oppnådd. Heksan ble satt til kolben og løsningen ble omrørt i 2,5 timer ved 20±5°C. De faste stoffene ble filtrert og skyllet med heksaner. De faste stoffene ble tørket ved <40°C under maksimum vakuum inntil konstant masse ble oppnådd (-22 timer), hvilket ga 4B som et blekgult, fast stoff (66% utbytte).
Eksempel 4 Trinn 2
[00133] En høytrykk-reaktor ble fylt med en oppslemning av 25 vekt % av Pt/C i forhold til 4B i 8 volumer av THF (i forhold til Pt/C) fulgt av en oppslemning av 1,5 ekv K2CO3, i THF (ca. 0,67 M), deretter en løsning av 1,0 ekv av 4B i THF (ca. 0,47 M). Reaktormantelen ble satt til 10°C og reaktoren ble fylt med 3,5 kg/cm2 H2 mens en indre reaksj onstemperatur <30°C ble opprettholdt. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 9 timer, 45 min deretter omrørt i ytterligere 3,5 timer. Reaksjonsblandingen ble filtrert. Reaksj onskolben og og filtere ble skyllet med 9 volumer MeOH (i forhold til 4B) og konsentrert via rotavap ved <50°C. Residuet ble oppløst i 4 volumer EtOAc og vasket med 4 volumer vann. Vannlaget ble tilbake-ekstrahert med 4 volumer EtOAc. De samlede organiske lag ble vasket med 4 volumer saltvann, tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert via rotavap ved <50°C, hvilket ga et residuum. Da løsningsmidlet hadde sluttet å komme fra rotasjonsinndampeen, ble residuet fylt med 2 volumer MTBE og løsningen ble konsentrert via rotavap ved <50°C, hvilket ga et residuum. Da løsningsmidlet hadde sluttet å komme fra rotasjonsinndamperen ble materialet holdt på rotasjonsinndamperen under maksimum vakuum i 15 timer. MTBE (2 volumer) ble deretter tilsatt for å utgni materialet og kolben rotert i 2 timer. De faste stoffene ble filtrert og skyllet med 0,5 volum av MTBE. De faste stoffene ble tørket ved <50°C under maksimum vakuum inntil konstant masse ble oppnådd (-22 timer), hvilket ga 4C som et blekgult, fast stoff (87% utbytte).
Eksempel 4 Trinn 3
[00134] En 3-halset rundbunnet kolbe ble spylt med nitrogen i minst ti minutter. Kolben ble deretter fylt med 1,0 ekv 4C i aceton (ca. 0,56 M). Kolben ble oppvarmet ved 27°C for å danne en løsning. Ca. 1 ekv 5-isocyanato-2-pyridin ble tilsatt dråpevis over 68 min, med kontroll av tilsetningshastigheten for å holde den indre temperatur < 45°C. Etter tilsetningen ble reaksjonsblandingen holdt < 45°C i omtrent 5 timer. Reaksjonen ble deretter oppvarmet til svakt tilbakeløp i 35 min og deretter avkjølt tilbake til romtemperatur natten over (15 timer). De faste stoffene ble filtrert og skyllet med 0,45 volum av aceton og 1,7 volumer av EtOAc. De faste stoffene ble tørket i en vakuumovn < 50°C, hvilket ga 4D, metyl-4-(3-(3-(6-metylpyridin-3-yl)ureido)benzyl)piperazin-l-karboksylat (89% utbytte). MS 384 (M+H).
Eksempel 5 Trinn 1
[00135] Til en blanding av 1,0 ekv 2-fluor-3-brom-nitrobenzen (5A), 1,0 ekv tetrabutylammoniumklorid, 1,5 ekv NaHC03og 2,0 ekv allylalkohol i DMF (ca. IM allylalkohol i DMF) under N2-atmosfære ble satt 0,4 ekv PdCb. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 60°C og omrørt under N2i 16 timer. Temperaturen ble hevet til 70°C og reaksjonsblandingen ble omrørt ytterligere 4 timer. Ytterligere aliquoter av 1 ekv allylalkohol og 0,1 ekv PdCb ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt under N2i 6 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur og fortynnet med EtOAc. Blandingen ble vasket sekvensielt med vann, IN HC1 og saltvann. Det organiske laget ble tørket og konsentrert til et residuum. Rensning over silikagel ved anvendelse av 10%EtOAc/heksan til 60% EtOAc/heksan som gradient elueringsmiddel ga 5B.
Eksempel 5 Trinn 2
[00136] Til en løsning av 1,0 ekv 5B i CH2CI2(ca. 0,04 M) under N2-atmosfære ble satt 1,3 ekv metyl-piperazin-l-karboksylat-HCl-salt fulgt av 1,2 ekv natrium-triacetoksyborhydrid. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Ytterligere 0,5 ekv av metyl-piperazin-l-karboksylat-HCl-salt fulgt av 2 ekv av natrium-triacetoksyborhydrid ble satt til reaksjonsblandingen og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 4 timer. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med CH2CI2og vasket sekvensielt med vann og saltvann. Det organiske laget ble tørket og konsentrert til et residuum. Rensning over silikagel ved anvendelse av 2:1 EtOAc/heksan som elueringsmiddel ga 5C.
Eksempel 5 Trinn 3
[00137] En blanding av 1 ekv 5C og 50 vekt ekv av 10% Pd/C i MeOH (0,06 M 5C i MeOH) ble omrørt over en atmosfære av 2,1 kg/cm<2>H2i 2 timer. Etter erstatning av H2-atmosfæren med N2ble reaksjonsblandingen filtrert gjennom diatoméjord og diatoméjorden vasket med MeOH. Konsentrasjon av MeOH resulterte i isolering av 5D i nesten kvantitativt utbytte.
Eksempel 5 Trinn 4
[00138] Til en løsning av 1 ekv 5D i CH2CI2(ca. 0,1 M) under N2-atmosfære ved romtemperatur ble satt 1 ekv 5-isocyanato-2-pyridin og den resulterende blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 12 timer. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med CH2CI2og vasket sekvensielt med vann og saltvann. Det organiske laget ble tørket og konsentrert til et residuum. Rensning ved preparativ revers fase HLPC (C-18 kolonne) ved anvendelse av 10% CH3CN/vann til 100% CH3CN som gradient elueringsmiddel ga metyl-4-(3-(2-fluor-3-(3-(6-metylpyridin-3-yl)ureido)fenyl)propyl)piperazin-l-karboksylat. MS 430 (M+H).
Eksempel 6 Trinn 1 og 2
[00139] PdCl2(PPh3)2(0,05 ekv) ble satt til en blanding av 1,0 ekv av 6A, 1,0 ekv av tributyl(l-etoksyvinyl)-tinn i dioksan (ca. 0,4 M) under N2. Blandingen ble oppvarmet ved 95°C i 4 timer under N2. En blanding av 1:1 volum/volum EtOAc/ (IM KF) løsning ble satt til reaksjonsblandingen og blandingen ble omrørt i 1 time. Fellingen ble filtrert fra. Det organiske laget ble tørket og konsentrert, hvilket ga 6B som ble anvendt uten ytterligere rensning.
[00140] Til en blanding av 6B i THF (0,8 M i forhold til 6A) ble satt ca. 2,3 volumer av 2N HC1 og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1 time. Mettet NaHC03ble satt til reaksjonsblandingen. Reaksjonsblandingen ble konsentrert for å fjerne THF og til den resulterende blandingen ble satt et volum av eter ca. 3 ganger det til volumet av reaksjonsblandingen. Det organiske laget ble tørket og konsentrert til et residuum. Residuet ble renset over silikagel for å oppnå 6C (87% i 2 trinn).
Eksempel 6 Trinn 3
[00141] Til en blanding av 0,1 til 0,15 ekv av (S)-l-metyl-3,3-difenyl-heksahydropyrrolo[l,2-c][l,3,2]oksazaborol i toluen (1 -1,5 M) og toluen (et volum ca. 10 ganger det til oksazaborol i toluen) under N2ved 20°C ble satt 1,05 ekv av Et2NPh-BH3. Til denne reaksjonsblandingen ble dråpevis satt 1,0 ekv 6C i toluen (ca. 0,4 M) over 1,5 timer. Reaksjonsblandingen ble deretter omrørt i ytterligere 1 time ved romtemperatur. Til reaksjonsblandingen ble satt ca. 1,9 volumer av MeOH, fulgt av ca. 3,4 volumer av IN HC1. Blandingen ble omrørt i 20 min. Til reaksjonsblandingen ble satt ca. 7,8 volumer av eter og ca. 7,8 volumer avsaltvann. Det organiske laget ble separert, tørket og konsentrert til et residuum. Residuet ble renset ved kromatografi over silikagel, hvilket ga 6D (79%).
Eksempel 6 Trinn 4
[00142] Til 1,0 ekv 6D i eter (ca. 0,55 M) og 1,2 ekv Et3N ble satt ca. 1,1 ekv
metansulfonylklorid dråpevis ved 0°C. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 30 min. Reaksjonsblandingen ble filtrert og konsentrert til et residuum. Residuet ble oppløst i ca. 5,9 volumer av DMF og 1,2 ekv metyl-piperazin-l-karboksylat-HCl-salt og 4 ekv av K2CO3ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 50°C i 16 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur og ca. 29 volumer av EtOAc og 29 volumer mettet NH4CI ble tilsatt. Det organiske laget ble separert, tørket og konsentrert. Det resulterende residuet ble renset ved kromatografi over silikagel, hvilket ga 6E.
Eksempel 6 Trinn 5
[00143] En blanding av 1 ekv 6E og 10 vekt ekv av 10% Pd/C i MeOH ble omrørt over en atmosfære av 3,15 kg/cm<2>H2i 0,5 time. Etter erstatning av H2-atmosfæren med N2ble reaksjonsblandingen filtrert gjennom diatoméjord og diatoméjorden vasket med MeOH. Konsentrasjon av MeOH resulterte i isolering av 6F.
Eksempel 6 Trinn 6
[00144] Til en løsning av 1,0 ekv 6F i CH2CI2(ved ca. 0,3 M) under N2-atmosfære ved romtemperatur ble satt 1,0 ekv av 5-isocyanato-2-metylpyridin og den resulterende blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 0,5 time. Reaksjonsblandingen ble konsentrert til et residuum. Rensning ved revers fase HLPC (C-18 kolonne) ga (S)-metyl-4-(l-(2-fluor-3-(3-(6-metylpyridin-3-yl)ureido)fenyl)etyl)-piperazinl-karboksylat som et hvitt, fast stoff. MS 416 (M+H).
Eksempel 7 Trinn 1
[00145] En ovnstørket, rundbunnet kolbe ble fylt med ferf-butyl-piperazin-l-karboksylat ( 1,1 ekv), 3-nitrofenyleddiksyre (7A, 1,0 ekv), EDC (1,2 ekv) og HOBT (1,2 ekv). Kolben ble spylt med nitrogen og iV,iV-dimetylformamid (ca. 0,5 M 7A i DMF) og trietylamin (2,0 ekv) ble tilsatt med sprøyte. Den resulterende reaksj onsblanding ble omrørt natten over ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble deretter fortynnet med EtOAc og vasket 4 ganger med H2O, to ganger med IN vandig KHSO4, én gang med mettet NaHC03og én gang med saltvann. Det organiske laget ble tørket over Na2S04, filtrert og konsentrert i vakuum. re/*^-butyl-4-(2-(3-nitrofenyl)acetyl)piperazin-l-karboksylat (7B) ble isolert som et fast stoff (80%) og anvendt uten ytterligere rensning.
Eksempel 7 Trinn 2
[00146] Til en løsning av ferNbutyl-4-(2-(3-nitrofenyl)acetyl)piperazin-l-karboksylat (7B, 1,0 ekv) i THF (ca. 0,5 M 7B i THF)) ble satt boran-THF (2,0 ekv) med sprøyte. Den resulterende reaksj onsblanding ble oppvarmet til tilbakeløp i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt i et is/vannbad og 10% vandig HOAc ble langsomt tilsatt. Blandingen ble konsentrert i vakuum og residuet ble oppløst i EtOAc. Det organiske laget ble fordelt med vann og det vandige laget ble gjort basisk (pH~9) ved tilsetning av 50% NaOH. Det organiske laget ble deretter vasket to ganger med mettet vandig NaHC03og én gang med saltvann. Det organiske laget ble tørket over Na2S04, filtrert og konsentrert i vakuum. Det resulterende ter^-butyl-4-(3-nitrofenetyl)piperazin-l-karboksylat (7C, kvant.) ble anvendt uten ytterligere rensning.
Eksempel 7 Trinn 3
[00147] En Parr glasskolbe ble fylt med te/*Nbutyl-4-(3-nitrofenetyl)piperazin-l - karboksylat (7C, 1,0 ekv) og metanol (ca. 0,2 M 7C i MeOH). Til denne løsningen ble satt en oppslemning av 12,5 vekt ekv av 10% Pd/C i metanol. Reaksjonsblandingen ble lukket i et Parr hydrogeneringskar og underkastet 3 trykk/ventilerings-cykler med H2. Reaksjonen fikk løpe ved romtemperatur og 3,15 kg/cm2 H2 i 2,5 timer. Reaksjonsblandingen ble deretter tilsatt 12,5 vekt ekv av Pd(OH)2/C og karet ble igjen satt under trykk med hydrogen (3,15 kg/cm2 ). Etter 1 time ble reaksjonsblandingen filtrert gjennom et sjikt av diatoméjord, diatoméj orden vasket med MeOH og de kombinerte organiske lag konsentrert i vakuum for å gi det ønskede te/*Nbutyl-4-(3-aminofenetyl)piperazin-l-karboksylat (7D, 63%), som ble anvendt uten ytterligere rensning.
Eksempel 7 Trinn 4
[00148] Til en løsning av fe/*f-butyl-4-(3-aminofenetyl)piperazin-l -karboksylat (7D, 1,0 ekv) i THF (ca. 0,3 M 7D i THF) ble dråpevis satt 5-isocyanato-2-metylpyridin (1,0 ekv). Den resulterende reaksj onsblanding ble omrørt i 2 timer. Til reaksjonsblandingen ble satt mettet vandig NaHCCb. Blandingen ble fortynnet med EtOAc og lagene ble separert. Det organiske laget ble vasket to ganger med mettet vandig NaHC03og én gang med saltvann. Det organiske laget ble tørket over Na2S04, filtrert og konsentrert i vakuum. Rensning over silikagel ved anvendelse av 5 - 12% MeOH/ CH2CI2som gradient elueringsmiddel ga tert-butyl-4-(3-(3-(6-metylpyridin-3-yl)ureido)fenetyl)piperazin-1 -karboksylat (7E, 63%).
Eksempel 7 Trinn 5
[00149] Til en løsning av fe/*f-butyl-4-(3-(3-(6-metylpyridin-3-yl)ureido)fenetyl)piperazin-l-karboksylat (7E, 1,0 ekv) i MeOH (ca. 0,2 M 7E i MeOH)) ble satt en løsning av 2 M HC1 i dioksan (ca. 12 ekv). Etter 70 min ble reaksjonsblandingen konsentrert i vakuum og anvendt uten rensning for påfølgende acyleringer. MS 398 (M+H).
[00150] Det resulterende HCl-salt (1,0 ekv) fra det foregående trinn ble suspendert i THF (ca. 0,15 M salt i THF) og trietylamin (4,0 ekv) ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til 0°C og metylklorformiat (1,05 ekv) ble tilsatt dråpevis og den resulterende blandingen omrørt i 5 min ved romtemperatur. Til reaksjonsblandingen ble satt mettet vandig NaHC03fulgt av EtOAc. Lagene ble separert og det organiske laget ble vasket én gang med mettet vandig NaHC03, én gang med saltvann, tørket over Na2S04, filtrert og konsentrert i vakuum. Rensning over silikagel ved anvendelse av 2 - 10% MeOH/CÆhCh som gradient elueringsmiddel ga metyl-4-(3-(3-(6-metylpyridin-3-yl)ureido)fenetyl)piperazin-1 -karboksylat.
Eksempel 8
[00151] Til en løsning av 1,0 ekv 8A i MeOH (ca. 0,07 M) ble satt en løsning av 2 M HC1 i dioksan (ca. 30 ekv)). Etter 70 min ble reaksjonsblandingen konsentrert i vakuum og anvendt uten rensning for påfølgende acyleringer.
[00152] Det resulterende HCl-salt fra det foregående trinn ble suspendert i THF (ca. 0,05 M) og ca. 18 ekv diisopropyletylamin ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til 0°C og ca. 1 ekv etansulfonylklorid ble tilsatt dråpevis. Den resulterende blandingen ble omrørt i 5 min ved romtemperatur. Til reaksjonsblandingen ble satt mettet vandig NaHC03fulgt av EtOAc. Lagene ble separert og det organiske laget ble vasket én gang med mettet vandig NaHC03, én gang med saltvann, tørket over Na2S04, filtrert og konsentrert i vakuum. Rensning over silikagel ved anvendelse av 1 - 10% MeOH/CføCh som gradient elueringsmiddel fulgt av utgnidning i 1:1 acton/eter ga metyl-1-(3-((4-(etylsulfonyl)piperazin-1 -yl)metyl)-2-fluorfenyl)-3 -(6-metylpyridin-3 -yl)urinstoff. MS 43 6
(M+H).
Eksempel 9
[00153] Til en løsning av ca. 4 ekv trifosgen i THF (ca. 0,04 M) ved romtemperatur under N2-atmosfære ble satt 1 ekv 5-metylisoksazol-3-amin og 2 ekv diisopropyletylamin i THF (ca. 0,2 M amin i THF). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 15 min. Til denne blandingen ble satt 1,0 ekv 9A i THF (ca. 0,2 mM 9A i THF). Den resulterende blandingen ble omrørt i 10 min. Til reaksjonsblandingen ble satt mettet vandig NaHC03fulgt av EtOAc. Lagene ble separert og det organiske laget ble vasket én gang med mettet vandig NaHC03, én gang med saltvann, tørket over Na2S04, filtrert og konsentrert i vakuum. Rensning over silikagel ved anvendelse av 1 - 10% MeOH/CTfeCh som gradient elueringsmiddel ga metyl- 4-(4-fluor-3-(3-(5-metylisoksazol-3-yl)ureido)benzyl)piperazin-l-karboksylat. MS 392
(M+H).
[00154] De følgende forbindelser ble syntetisert på en måte lignende de representative forbindelser ovenfor:
Eksempel 10
Målidentifikasj ons-forsøk
[00155] Spesifisitetsforsøk: Spesifisitet mot hjerte-myosin blir evaluert ved å sammenligne effekten av den kjemiske enheten på aktin-stimulert ATPase for et panel av myosin-isoformer: hjerte, skjelett og glattmuskel, med en enkel 50uM konsentrasjon eller multiple konsentrasjoner av den kjemiske enhet.
Eksempel 11
In vitro modeller av doseavhengig hjerte-myosin ATPase modulering
[00156] Rekonstituert hjerte-sarkomere forsøk: Dose-responser blir målt ved anvendelse av et kalsium-bufret, pyruvat-kinase og laktat-dehydrogenase-koblet ATPase forsøk inneholdende de følgende reagenser (konsentrasjoner uttrykt er endelige forsøks-konsentrasjoner): Kalium PIPES (12 mM), MgCh (2 mM), ATP (1 mM), DTT (1 mM), BSA (0,1 mg/ml), NADH (0,5 mM), PEP (1,5 mM), pyruvat-kinase (4 U/ml), laktat- dehydrogenase (8 U/ml) og antifoam (90 ppm). pH blir regulert til 6,80 ved 22°C ved tilsetning av kaliumhydroksid. Kalsiumnivåer blir kontrollert med et buffersystem inneholdende 0,6 mM EGTA og varierende konsentrasjoner av kalsium, for å oppnå en fri kalsium konsentrasjon på lxl0"<4>M til lxl0"8 M.
[00157] Proteinkomponentene spesifikke for dette forsøket er bovint hjerte-myosin subfragment-1 (typisk 0,5 uM), bovin hjerte-aktin (14 uM), bovin hjerte-tropomyosin (typisk 3 uM) og bovin hjerte-troponin (typisk 3-8 uM). De nøyaktige konsentrasjoner av tropomyosin og troponin blir bestemt empirisk, ved titrering for å oppnå maksimal forskjell i ATPase-aktivitet når målt i nærvær av 2 mM EGTA mot den målt i nærvær av 0,1 mM CaCb. Den nøyaktige konsentrasjonen av myosin i forsøket blir også bestemt empirisk, ved titrering for å oppnå ønsket grad av ATP-hydrolyse. Denne varierer mellom protein-preparater, på grunn av variasjoner i fraksjonen av aktive molekyler i hvert preparat.
[00158] Dose-responser blir typisk målt ved kalsiumkonsentrasjon svarende til 25% eller 50% av maksimal ATPase-aktivitet (pCa25eller pCaso), så et preliminært forsøk blir utført for å teste responsen av ATPase-aktivitet på fri kalsium-konsentrasjoner i området lxl0"4 M til lxl0"8 M. Deretter blir forsøksblandingen regulert til pCaso (typisk 3x10"<7>M). Forsøk blir utført ved først å fremstille en fortynningsserie av testforbindelse, hver med en forsøksblanding inneholdende kalium Pipes, MgCb, BSA, DTT, pyruvat-kinase, laktat-dehydrogenase, myosin-subfragment-1, Antifoam, EGTA, CaCb og vann. Forsøket blir startet ved tilsetning av et likt volum av løsning inneholdende kalium Pipes, MgCb, BSA, DTT, ATP, NADH, PEP, aktin, tropomyosin, troponin, Antifoam og vann. ATP-hydrolyse blir overvåket ved absorbans ved 340 nm. Den resulterende doserespons-kurve blir tilpasset 4 parameter ligning y = Bunn + ((Topp-Bunn)/(l+((EC50/X)<A>Hill))). AC1.4 er definert som konsentrasjonen ved hvilken ATPase aktivitet er 1,4-ganger høyere enn bunnen av dosekurven.
[00159] Hjerte-myofibrill-forsøk: For å bedømme effekten av kjemiske enheter på ATPase-aktivitet til full-lengde hjerte-myosin i sammenheng med native sarkomere, blir skurt myofibrill-forsøk utført. Hjerte-myofibriller blir oppnådd ved homogenisering av hjertevev i nærvær av ikke-ionisk detergent. Slik behandling fjerner membraner og mesteparten av oppløselige cytoplasmatiske proteiner men lar intakt hjerte-sarkomere akto-myosin-apparatet. Myofibrillpreparater beholder evnen til å hydrolysere ATP på en Ca<++>kontrollert måte. ATPase-aktiviteter av slike myofibrillpreparater i nærvær og fravær av kjemiske enheter er undersøkt ved Ca<++->konsentrasjoner over hele kalsium responsområdet men med foretrukne kalsium-konsentrasjoner som gir 25%, 50% og 100% av maksimal grad.
[00160] Myofibriller kan fremstilles fra enten friskt eller "flash"-frosset vev som er raskt tint. Vev blir finskaret og resuspendert i en relakseringsbuffer inneholdende de følgende reagenser (konsentrasjoner angitt er endelige løsningskonsentrasjoner): Tris-HCl (10 mM), MgCb (2 mM), KC1 (75 mM), EGTA (2 mM), NaN3 (1 mM), ATP (1 mM), fosfokreatin (4 mM), BDM (50 mM), DTT (1 mM), benzamidin (1 mM), PMSF (0,1 mM), leupeptin (1 ug/ml), pepstatin (1 ug/ml) og triton X-100 (1%). pH blir regulert til 7,2 ved 4°C ved tilsetning av HC1. Etter tilsetning av EDTA til 10 mM blir vevet håndskåret ved 4°C, i et kaldt rom og homogenisert ved anvendelse av en stor rotor-stator homogenisator (Omni Mixer). Etter blanding i 10s blir materialet pelletert ved sentrifugering (5 minutter, 2000x g maks, 4°C). Myofibrillene blir deretter resuspendert i en Standard Buffer inneholdende de følgende reagenser (konsentrasjoner angitt er endelige løsnings-konsentrasjoner): Tris-HCl (10 mM) pH 7,2 ved 4°C, MgCb (2 mM), KC1 (75 mM), EGTA (2 mM), NaN3 (1 mM), Triton X-100 (1%), ved anvendelse av en glass-glass vev-maler (Kontes) inntil glatt, vanligvis 4-5 stryk. Myofibrillpelleten blir vasket mange ganger med kort homogenisering, ved anvendelse av rotor-stator homogenisator i 10 volumer av standard buffer, fulgt av sentrifugering. For å fjerne detergent blir myofibrillene vasket mange flere ganger med standard buffer som mangler Triton X-l 00. Myofibrillene blir deretter underkastet tre runder med gravitasjonsfiltrering ved anvendelse av 600, 300 og til slutt 100 um nylon mesh (Spectrum Lab Products) for å danne homogene blandinger og pelletert ned. Til slutt blir myofibrillene resuspendert i en lagringsbuffer inneholdende de følgende reagenser (konsentrasjoner angitt er endelige løsningskonsentrasjoner): Kalium PIPES (12 mM), MgCb (2 mM) og DTT (1 mM). Fast sukrose blir tilsatt under omrøring til 10%
(vekt/volum) før frysing ("drop-freezing") i flytende nitrogen og lagring ved -80°C.
[00161] Doseresponser blir målt ved anvendelse av et kalsium-bufret, pyruvat-kinase og laktat-dehydrogenase-koblet ATPase-forsøk inneholdende de følgende reagenser (konsentrasjoner angitt er endelige forsøkskonsentrasjoner): Kalium PIPES (12 mM), MgCb (2 mM), ATP (0,05 mM), DTT (1 mM), BSA (0,1 mg/ml), NADH (0,5 mM), PEP (1,5 mM), pyruvat-kinase (4 U/ml), laktat-dehydrogenase (8 U/ml) og Antifoam (90 ppm). pH blir regulert til 6,80 ved 22°C ved tilsetning av kaliumhydroksid. Kalsiumnivåer blir kontrollert med et buffersystem inneholdende 0,6 mM EGTA og varierende konsentrasjoner av kalsium, for å oppnå fri kalsium-konsentrasjon på lxl0"<4>M til lxl0"8 M. Myofibrill-konsentrasjon i det endelige forsøk er typisk 0,2 til 1 mg/ml.
[00162] Doseresponser blir typisk målt ved kalsiumkonsentrasjonen svarende til 25%, 50% eller 100% av maksimal ATPase-aktivitet (pCa25, pCaso, pCaioo), så et preliminært forsøk blir utført for å teste responsen av ATPase-aktivitet på fri kalsium-konsentrasjoner i området lxlO"<4>M til lxlO"8 M. Deretter blir forsøksblandingen regulert til pCaso (typisk 3x10"<7>M). Forsøk blir utført ved først å fremstille en fortynningsserie av testforbindelse, hver med en forsøksblanding inneholdende kalium Pipes, MgCb, BSA, DTT, pyruvat-kinase, laktat-dehydrogenase, hjerte-myofibriller, Antifoam, EGTA, CaCb og vann. Forsøket blir startet ved tilsetning av et likt volum av løsning inneholdende kalium Pipes, MgCb, BSA, DTT, ATP, NADH, PEP, Antifoam og vann. ATP-hydrolyse blir overvåket ved absorbans ved 340 nm. Den resulterende dose responskurve blir tilpasset med 4 parameter ligning y = Bunn + ((Topp-Bunn)/(l+((EC50/X)<A>Hill))). AC1.4 er definert som konsentrasjonen ved hvilken ATPase-aktivitet er 1,4-ganger høyere enn bunnen av dosekurven.
Eksempel 12
Myocyttforsøk
[00163] Preparering avhjerte-ventrikulære myocytter fra voksne rotter. Voksne Sprague-Dawley hannrotter blir anestesert med en blanding av isofluran-gass og oksygen. Hjerter blir raskt tatt ut, skyllet og oppgående aorta kanylert. Kontinuerlig retrograd perfusjon blir initiert på hjertene ved et perfusjonstrykk på 60 cm H2O. Hjerter blir først perfusert med en nominelt Ca<2+>fri modifisert Krebs-løsning med følgende sammensetning: 110 mM NaCl, 2,6 mM KCL, 1,2 mM KH2PO4 7 H20, 1,2 mM MgS04, 2,1 mM NaHCCh, 11 mM glukose og 4 mM Hepes (alle Sigma). Dette medium blir ikke resirkulert og blir kontinuerlig gasset med O2. Etter omtrent 3 minutter blir hjertet perfusert med modifisert Krebs-buffer supplert med 3,3% kollagenase (169 u/mg aktivitet, Klasse JJ, Worthington Biochemical Corp., Freehold, NJ) og 25 uM endelig kalsium-konsentrasjon inntil hjertet er tilstrekkelig blekt og mykt. Hjertet blir fjernet fra kanylen, atria og kar kastet og ventriklene blir kuttet i små stykker. Myocyttene blir dispergert ved forsiktig agitering av det ventrikulære vev i frisk kollagenase inneholdende Krebs før de blir forsiktig tvunget gjennom en 200 um nylon mesh i et 50 cm3 rør. De resulterende myocytter blir resuspendert i modifisert Krebs-løsning inneholdende 25 um kalsium. Myocytter blir gjort kalsium-tolerante ved tilsetning av en kalsium-løsning (100 mM lager) med 10 minutters intervaller inntil 100 uM kalsium er oppnådd. Etter 30 minutter blir supernatanten kastet og 30 - 50 ml Tyrode-buffer (137 mM NaCL, 3,7 mM KCL, 0,5 mM MgCL, 11 mM glukose, 4 mM Hepes og 1,2 mM CaCb, pH 7,4) blir satt til cellene. Celler blir holdt i 60 min ved 37°C før initiering av forsøk og anvendt innen 5 timer etter isolering. Preparater av celler blir anvendt bare hvis celler først har passert QC-kriterier ved å respondere på en standard (>150% av basal) og isoproterenol (ISO; > 250% av basal). I tillegg blir bare celler hvis basale kontraktilitet er mellom 3 og 8 % anvendt i de følgende forsøk.
[00164] Voksen ventrikulær-myocytt kontraktilitetsforsøk. Aliquoter av Tyrode-buffer inneholdende myocytter blir plassert i perfusjonskammere (serie 20 RC-27NE; Warner Instruments) komplette med oppvarmningsplattformer. Myocytter får feste seg, kammeret blir oppvarmet til 37°C og cellene blir deretter perfusert med 37°C Tyrode-buffer. Myocytter blir felt-stimulert ved 1 Hz med platina-elektroder (20% over terskel). Bare celler som har klare striper og er uvirksomme før pacing blir anvendt for kontraktilitetsforsøk. For å bestemme basal kontraktilitet blir myocytter avbildet gjennom et 40x objektiv og ved anvendelse av et variabel bildefrekvens (60-240 Hz) ladnings-koblet kamera, blir bildene digitalisert og vist på en datamaskin-skjerm med avlesningsfrekvens på 240 Hz. [Frame grabber, myopacer, akvisisjon- og analyse-programvare for cellekontraktilitet er tilgjengelig fra IonOptix (Milton, MA).] Etter en minimum 5 minutters basal kontraktilitetsperiode, blir testforbindelser (0,01 - 15 uM) perfusert på myocyttene i 5 minutter. Etter denne tid blir frisk Tyrode-buffer perfusert for å bestemme forbindelse-utvaskings-karakteristika. Ved anvendelse av kantdeteksjon-strategi blir kontraktilitet til myocyttene og kontraksjons- og relaksasjons-hastighet kontinuerlig registrert.
[00165] KONTRAKTILITETSANALYSE: Tre eller flere individuelle myocytter blir testet pr. kjemisk enhet ved anvendelse av to eller flere forskjellige myocytt-preparater. For hver celle blir tjue eller flere kontraktilitetstransienter basalt (definert som 1 min før infusjon av den kjemiske enhet) og etter tilsetning av den kjemiske enhet, gjennomsnittsberegnet og sammenlignet. Disse gjennomsnittlige transienter blir analysert for å bestemme endringer i diastolisk lengde og ved anvendelse av Ionwizard analyseprogram (IonOptix), blir fraksjonert forkorting (% reduksjon i diastolisk lengde) og maksimum kontraksjons- og relaksasjons-hastigheter (um/sek) bestemt. Analyse av individuelle celler blir samlet. Økning i fraksjonert forkorting over basal indikerer forsterkning av myocytt-kontraktilitet.
[00166] Kalsium transient analyse: Fura lading: Cellepermeabel Fura-2 (Molecular Probes) blir oppløst i like mengder av pluronic (Mol Probes) og FBS i 10 min ved romtemperatur. En 1 uM Fura stamløsning blir fremstilt i Tyrode-buffer inneholdende 500 mM probenecid (Sigma). For å lade celler blir denne løsningen satt til myocytter ved romtemperatur. Etter 10 min. blir bufferen fjernet, cellene vasket med Tyrode inneholdende probenecid og inkubert ved romtemperatur i 10 min. Denne vask og inkubering blir gjentatt. Samtidige kontraktilitet- og kalsium-målinger blir bestemt innen 40 min. fra lading.
[00167] Avbilding: en testforbindelse blir perfusert på celler. Samtidige kontraktilitet og kalsium transient-forhold blir bestemt ved baselinje og etter tilsetning av forbindelsen. Celler blir digitalt avbildet og kontraktilitet bestemt som beskrevet ovenfor, ved anvendelse av et rødt filter i lysbanen for å unngå interferens med fluorescerende kalsium-målinger. Akvisisjon, analyse-programvare og maskinvare for kalsium transient analyse blir oppnådd fra IonOptix. Instrumentering for fluorescens-måling omfatter en xenonlyslampe og en Hyperswitch dual eksitasjonslyskilde som alternerer mellom 340 og 380 bølgelengder ved 100 Hz av et galvo-drevet speil. En væskefylt lysguide leverer det duale eksitasjonslys til mikroskopet og emisjons-fluorescens blir bestemt ved anvendelse av et fotomultiplikator-rør (PMT). Fluorescenssystem-grenseflaten ruter PMT-signalet og forholdene blir registrert ved anvendelse av IonWizard akvisisjonsprogram.
[00168] Analyse: For hver celle ble ti eller flere kontraktilitet og kalsium-forhold transienter basalt og etter forbindelsetilsetning, gjennomsnittsberegnet og sammenlignet. Kontraktilitet gjennomsnittlige transienter blir analysert ved anvendelse av Ionwizard analyse-program for å bestemme endringer i diastolisk lengde og fraksjonert forkorting (% reduksjon i diastolisk lengde). De gjennomsnittlige kalsium forhold transienter blir analysert ved anvendelse av Ionwizard analyseprogram for å bestemme endringer i diastolisk og systolisk forhold og 75% tid til baselinje (T75).
[00169] Vari<g>het: For å bestemme varighet av respons blir myocytter utfordret med en testforbindelse i 25 minutter fulgt av en 2 min. utvaskingsperiode. Kontraktilitet-respons blir sammenlignet 5 og 25 min. etter forbindelse infusjon.
[00170] Terskel-potensiale: Myocytter blir felt-stimulert ved en spenning omtrent 20% over terskel. I disse forsøk er terskelspenningen (minimum spenning for å pace cellen) empirisk bestemt, cellen pacet ved den terskel og deretter blir testforbindelsen infusert. Etter at aktiviteten er stabil blir spenningen redusert i 20 sekunder og deretter startet igjen. Endring av ionekanaler svarer til økning eller nedsettelse av terskel virkningspotensiale.
[00171] Hz FREKVENS: Kontraktilitet av myocytter blir bestemt ved 3 Hz som følger: et 1 min. basalt tidspunkt fulgt av perfusjon av testforbindelsen i 5 min. fulgt av en 2 min. utvasking. Etter at cellekontraktilitet har returnert fullstendig til baselinje blir Hz-frekvensen redusert til 1. Etter en innledende akklimatiseringsperiode blir cellen utfordret med samme forbindelse. Ettersom denne art, rotte, oppviser en negativ kraft frekvens ved 1 Hz, skal ved 3 Hz FS av cellen være lavere, men cellen skal fortsatt respondere ved å øke dens fraksjonerte forkorting i nærvær av forbindelsen.
[00172] Additiv med iso<p>roterenol: For å demonstrere at en forbindelse virker via en forskjellig mekanisme enn den adrenerge stimulant isoproterenol, blir celler ladet med fura-2 og samtidig måling av kontraktilitet og kalsiumforhold blir bestemt. Myocyttene blir sekvensielt utfordret med 5 um eller mindre av en testforbindelse, buffer, 2 nM isoproterenol, buffer og en kombinasjon av en testforbindelse og isoproterenol.
Eksempel 13
In vitro modell av doseavhengig hjerte-myosin ATPase modulering
[00173] Kveg- og rotte-hjertemyosiner blir renset fra de respektive hjertevev. Skjelett og glattmuskel myosiner anvendt for spesifisitetsundersøkelser blir renset fra henholdsvis kanin-skjelettmuskel og kylling-krås. Alle myosiner anvendt i forsøkene blir omdannet til en enkel-hodet oppløselig form (Sl) ved begrenset proteolyse med chymotrypsin. Andre sarkomere komponenter: troponin-kompleks, tropomyosin og aktin blir renset fra bovine hjerter (hjerte-sarkomere) eller kyllingbrystmuskel (skjelett-sarkomere).
[00174] Aktivitet til myosiner blir overvåket ved å måle graden av hydrolyse av ATP. Myosin ATPase blir meget betydelig aktivert av aktin-filamenter. ATP-produksjon blir detektert i et koblet enzymatisk forsøk ved anvendelse av pyruvat-kinase (PK) og laktat-dehydrogenase (LDH). I dette forsøket blir hver ADP produsert som et resultat av ATP-hydrolyse resirkulert til ATP av PK med samtidig oksidasjon av NADH molekyl av LDH. NADH-oksidasjon kan hensiktsmessig overvåkes ved reduksjon i absorbans ved 340 nm bølgelengde.
[00175] Doseresponser blir målt ved anvendelse av et kalsium-bufret, pyruvat-kinase og laktat-dehydrogenase-koblet ATPase-forsøk inneholdende de følgende reagenser (konsentrasjoner angitt er endelige forsøkskonsentrasjoner): Kalium PIPES (12 mM), MgCb (2 mM), ATP (1 mM), DTT (1 mM), BSA (0,1 mg/ml), NADH (0,5 mM), PEP (1,5 mM), pyruvat-kinase (4 U/ml), laktat-dehydrogenase (8 U/ml) og Antifoam (90 ppm). pH blir regulert til 6,80 ved 22°C ved tilsetning av kaliumhydroksid. Kalsiumnivåer blir kontrollert av et buffersystem inneholdende 0,6 mM EGTA og varierende konsentrasjoner av kalsium, for å oppnå fri kalsium konsentrasjon på lxl0"<4>M til lxl 0"<8>M.
[00176] Proteinkomponenter spesifikke for dette forsøket er bovint hjerte-myosin subfragment-1 (typisk 0,5 uM), bovin hjerte-aktin (14 uM), bovin hjerte-tropomyosin (typisk 3 uM) og bovin hjerte-troponin (typisk 3-8 uM). De nøyaktige konsentrasjoner av tropomyosin og troponin blir bestemt empirisk, ved titrering for å oppnå maksimal forskjell i ATPase-aktivitet når målt i nærvær av 1 mM EGTA mot den målt i nærvær av 0,2 mM CaCb. Den nøyaktige konsentrasjonen av myosin i forsøket blir også bestemt empirisk, ved titrering for å oppnå ønsket grad av ATP-hydrolyse. Denne varierer mellom protein-preparater, på grunn av variasjoner i fraksjonen av aktive molekyler i hvert preparat.
[00177] Forbindelse doseresponser blir typisk målt i kalsiumkonsentrasjonen svarende til 50% av maksimal ATPase-aktivitet (pCaso), så et preliminært forsøk blir utført for å teste responsen av ATPase-aktivitet på fri kalsium konsentrasjoner i området lxlO"<4>M til lxlO"8 M. Deretter blir forsøksblandingen regulert til pCaso (typisk 3xl0"<7>M). Forsøk blir utført ved først å fremstille en fortynningsserie av testforbindelse, hver med en forsøksblanding inneholdende kalium Pipes, MgCb, BSA, DTT, pyruvat-kinase, laktat-dehydrogenase, myosin subfragment-1, antifoam, EGTA, CaCb og vann. Forsøket blir startet ved tilsetning av et likt volum av løsning inneholdende kalium Pipes, MgCb, BSA, DTT, ATP, NADH, PEP, aktin, tropomyosin, troponin, antifoam og vann. ATP-hydrolyse blir overvåket ved absorbans ved 340 nm. Den resulterende doserespons-kurve blir tilpasset 4 parameter ligning y = Bunn + ((Topp-Bunn)/(l+((EC50/X)<A>Hill))). AC1.4 er definert som konsentrasjonen ved hvilken ATPase-aktivitet er 1,4-ganger høyere enn bunnen av dosekurven.
[00178] Evnen til en forbindelse til å aktivere hjerte-myosin blir evaluert ved effekten av forbindelsen på aktin-stimulert ATPase av Sl subfragment. Aktin-filamenter i forsøket blir dekorert med troponin og tropomyosin og Ca<++>konsentrasjon blir regulert til en verdi som ville resultere i 50% av maksimal aktivering. Sl ATPase blir målt i nærvær av en fortynningsserie av forbindelsen. Forbindelsekonsentrasjon nødvendig for 40% aktivering over ATPase-grad målt i nærvær av kontroll (ekvivalent volum av DMSO) er angitt som AC4o.
Eksempel 14
In vivo fraksjonert forkortings-forsøk
[00179] Dyr Sprague Dawley hannrotter fra Charles River Laboratories (275
- 350 g) blir anvendt for bolus-effektivitet og infusjonsundersøkelser. Dyr med hjertesvikt er
beskrevet nedenfor. De blir holdt to pr. bur og har tilgang til mat og vann ad libitum. Det er en minimum tre-dagers akklimatiseringsperiode før forsøk.
[00180] Ekkokardiografi Dyr blir anestesert med isofluran og holdt på kirurgisk plan gjennom hele prosedyren. Kjerne kroppstemperatur blir holdt ved 37°C ved anvendelse av en varmepute. Når anestesert blir dyrene barbert og hårfjerner blir påført for å fjerne alle spor av pels fra brystområdet. Brystområdet blir videre preparert med 70% ETOH og ultralydgel blir påført. Ved anvendelse av et GE System Vingmed ultralyd-system (General Electric Medical Systems), blir 10 MHz probe plassert på brystveggen og bilder blir tatt i kortakse-oversikt på nivået av papill-muskler. 2-D M-modus bilder av venstre hjertekammer blir tatt før og etter forbindelse bolus-injeksjon eller infusjon. In vivo fraksjonert forkorting ((ende diastolisk diameter - ende systolisk diameter)/ ende diastolisk diameter x 100) blir bestemt ved analyse av M-modus bilder ved anvendelse av GE EchoPak programvare.
[00181] BOLUS- OG INFUSJONSEFFEKTIVITET For bolus- og infusjonsprotokoller blir fraksjonert forkorting bestemt ved anvendelse av ekkokardiografi som beskrevet ovenfor. For bolus- og infusjons-protokoller blir fem pre-dose M-Modus bilder tatt med 30 sekunders intervaller før bolusinjeksjon eller infusjon av forbindelser. Etter injeksjon blir M-modus bilder tatt ved 1 min og deretter med fem minutter intervaller opptil 30 min. Bolus-injeksjon (0,5-5 mg/kg) eller infusjon skjer via et halevene-kateter. Infusjonsparametere blir bestemt fra farmakokinetiske profiler av forbindelsene. For infusjon mottok dyrene en 1 minutt innledningsdose umiddelbart fulgt av en 29 minutters infusjonsdose via et halevene-kateter. Innledningsdosen blir beregnet ved å bestemme målkonsentrasjon x stabilt volum av distribusjon. Opprettholdelse-dosekonsentrasjon blir bestemt ved å ta målkonsentrasjon x utskillingen. Forbindelser blir formulert i 25% cavitron-konstituent for bolus- og infusjons-protokoller. Blodprøver blir tatt for å bestemme plasmakonsentrasjon av forbindelsene.
Eksempel 15
Hemodynamikk i normale dyr og dyr med hjertesvikt
[00182] Dyr blir anestesert med isofluran, holdt på kirurgisk plan og deretter barbert for preparering for kateterisering. Et innsnitt blir gjort i halsregionen og høyre karotid-arterie blottlagt og isolert. Et 2 French Millar Micro-tip trykk-kateter (Millar Instruments, Houston, TX) blir kanylert inn i høyre karotid-arterie og trædd forbi aorta og inn i venstre hjertekammer. Ende diastoliske trykkavlesninger, maks + / - dp/dt, systolisk trykk og hjertetakt blir bestemt kontinuerlig mens forbindelse eller konstituent blir infusert. Målinger blir registrert og analysert ved anvendelse av PowerLab og Chart 4 programvare (ADInstruments, Mountain View, CA). Hemodynamiske målinger blir utført ved valgt infusjons-konsentrasjon. Blodprøver blir tatt for å bestemme plasmakonsentrasjon av forbindelsene.
Eksempel 16
Venstre koronararterie okklusjonsmodell av kongestiv hjertesvikt
[00183] Dyr Sprague-Dawley CD (220-225 g; Charles River) hannrotter blir anvendt i dette forsøket. Dyr blir gitt fri tilgang til vann og kommersiell gnagerdiett under standard laboratorie-betingelser. Romtemperatur blir holdt ved 20-23°C og rom-belysning er i en 12/12-timer lys/mørke cyklus. Dyr blir akklimatisert til laboratorieomgivelsen 5 til 7 dager før undersøkelsen. Dyrene blir fastet natten over før kirurgi.
[00184] Okklusjons<p>rosed<y>re Dyr blir anestert med ketamin/xylazin (95 mg/kg og 5 mg/kg) og intubert med 14-16-gauge modifisert intravenøst kateter. Anestesi-nivå blir kontrollert ved tåklemming. Kjerne kroppstemperatur blir holdt ved 37°C ved anvendelse av et varmeteppe. Det kirurgiske området blir klemt og skrubbet. Dyret blir plassert i høyre lateral-stilling og initielt plassert på en ventilator med et topp innåndingstrykk på 10-15 cm H2O og respiratorisk hastighet 60-110 pust/min. 100% O2 blir levert til dyrene av ventilatoren. Det kirurgiske sted blir vasket med kirurgisk vask og alkohol. Et innsnitt blir gjort over brystkassen i det 4.-5. interkostale rom. De underliggende muskler blir dissekert med forsiktighet for å unngå den laterale torakale vene, for å eksponere de interkostale muskler. Brysthulen blir inntrengt gjennom 4.-5. interkostale rom og innsnittet utvidet for å tillate visualisering av hjertet. Perikardet blir åpnet for å eksponere hjertet. En 6-0 silkesutur med taper-nål blir ført rundt venstre koronararterie nær dens startpunkt, som ligger i kontakt med venstre kant av den pulmonale konus, ved ca. 1 mm fra insersjonen av venstre atrie-vedheng. Venstre koronararterie blir ligert ved å binde suturen rundt arterien ("LCL"). Sham dyr blir behandlet på samme måte, bortsett fra at suturen ikke blir bundet. Innsnittet blir lukket i tre lag. Rotten blir ventilert inntil den er i stand til å puste av seg selv. Rottene blir ekstubert og får komme seg på en varmepute. Dyr mottar buprenorphin (0,01-0,05 mg/kg SQ) for postoperativ analgesi. Når de våkner blir de returnert til deres bur. Dyr blir overvåket daglig for tegn på infeksjon eller smerte. Infiserte eller døende dyr blir avlivet. Dyrene blir veiet én gang pr. uke.
[00185] Effektivitetsanal<y>se Omtrent åtte uker etter infarkt-kirurgi, blir rottene scannet for tegn på myokardialt infarkt ved anvendelse av ekkokardiografi. Bare dyr med redusert fraksjonert forkorting sammenlignet med sham-rotter blir anvendt videre i effektivitetsforsøk. I alle forsøk er det fire grupper, sham + konstituent, sham + forbindelse, LCL + konstituent og LCL + forbindelse. 10-12 uker etter LCL blir rotter infusert med en valgt infusjonskonsentrasjon. Som før blir fem pre-dose M-Modus bilder tatt med 30 sekunders intervaller før infusjon av forbindelser og M-modus bilder blir tatt med 30 sekunders intervaller opptil 10 minutter og hvert minutt eller med fem minutters intervaller deretter. Fraksjonert forkorting blir bestemt fra M-modus bilder. Sammenligninger mellom pre-dose fraksjonert forkorting og forbindelse-behandling blir utført ved ANOVA og post-hoc Student - Newman - Keuls. Dyrene får komme seg og innen 7-10 dager blir dyrene igjen infusert med forbindelser ved anvendelse av den hemodynamiske protokoll for å bestemme hemodynamiske endringer av forbindelsene i dyr med hjertesvikt. Ved slutten av infusjonen blir rottene avlivet og hjertevektene bestemt.
[00186] Når testet som beskrevet i Eksempler 10-16 er kjemiske enheter beskrevet her vist å ha den ønskede aktivitet.
Eksempel 17
Hjerte-kontraktilitet in vitro og in vivo i en rottemodell av hjertesvikt
[00187] Et myofibrill-forsøk blir anvendt for å identifisere forbindelser (myosin-aktivatorer) som direkte aktiverer hjerte-myosin ATPase. Den cellulære virkningsmekanisme, in vivo hjertefunksjon i Sprague Dawley (SD) rotter og effektivitet i SD rotter med definert hjertesvikt til aktive forbindelser blir deretter bestemt. Cellulær kontraktilitet ble kvantifisert ved anvendelse av en kantdeteksjons-strategi og kalsium transient målt ved anvendelse av fura-2 ladede voksen rottehjerte-myocytter. Cellulær kontraktilitet øket over baselinje innen 5 minutter av eksponering for en aktiv forbindelse (0,2 □M) uten endring av kalsium transient. Kombinasjon av aktiv forbindelse med isoproterenol (□-adrenerg agonist) vil resultere bare i en additiv økning i kontraktilitet med ingen ytterligere forandring i kalsium transient, hvilket demonstrerer at den aktive forbindelse ikke hemmet PDE-banen. In vivo kontraktil funksjon i anesteserte SD rotter blir kvantifisert ved anvendelse av ekkokardiografi (M-modus) og samtidige trykkmålinger. SD-rotter blir infusert med konstituent eller aktiv forbindelse med 0,25 - 2,5 mg/kg/time. Den aktive forbindelse vil øke fraksjonert forkorting (FS) og ejeksjonsfraksjon (EF) på en dose-avhengig måte med ingen betydelig forandring i perifert blodtrykk eller hjertetakt bortsett fra ved den høyeste dose. Rotter med definert hjertesvikt fremkalt ved venstre koronar ligering eller sham-behandlede rotter kan ha lignende og betydelig økninger i FS og EF når behandlet med 0,7 - 1,2 mg/kg/time aktiv forbindelse. Som oppsummering øket den aktive forbindelse hjerte-kontraktilitet uten å øke kalsium transient og var effektiv i en rottemodell med hjertesvikt, hvilket indikerer at den aktive forbindelse kan være et anvendelig terapeutisk middel ved behandling av human hjertesvikt.
Eksempel 18
Farmakologi
[00188] Farmakologien av minst én kjemisk enhet beskrevet her er undersøkt i isolerte voksen rotte hjerte-myocytter, anesteserte rotter og i en kronisk instrumentert hundemodell av hjertesvikt fremkalt ved myokardialt infarkt kombinert med rask ventrikulær pacing. Den aktive forbindelse øker hjerte-myocytt-kontraktilitet (EC20 = 0,2 vM) men øker ikke størrelsen eller forandrer kinetikken av kalsium transient i konsentrasjoner opptil 10 i Fura-2 ladede myocytter. Den aktive forbindelse (30 mM) hemmer ikke fosfodiesterase type 3.
[00189] I anesteserte rotter øker den aktive forbindelse ekkokardiografisk fraksjonert forkorting fra 45±5,1% til 56±4,6% etter en 30 minutters infusjon ved 1,5 mg/kg/time (n=6, p
<0,01).
[00190] I bevisste hunder med hjertesvikt øker den aktive forbindelse (0,5 mg/kg bolus, deretter 0,5 mg/kg/time i.v. i 6-8 timer) fraksjonert forkorting med 74±7%, minuttvolum med 45±9% og slagvolum med 101±19%. Hjertetakt reduseres med 27±4% og venstre atriale trykk faller fra 22±2 mmHg til 10±2 mmHg (p < 0,05 for alle). I tillegg endres hverken gjennomsnittlig arterielt trykk eller koronar blodstrøm betydelig. Diastolisk funksjon blir ikke svekket ved denne dosen. Det er ingen betydelige endringer i en konstituent-behandlet gruppe. Den aktive forbindelse forbedret hjertefunksjon på en måte som indikerer at forbindelser av denne klassen kan være fordelaktige for pasienter med hjertesvikt.
Eksempel 19
Farmasøytisk preparat
[00191] Et farmasøytisk preparat for intravenøs administrering blir fremstilt på følgende måte.
[00192] 1 mg/ml (som fri base) IV-løsning med konstituent som er 50 mM sitronsyre, pH regulert til 5,0 med NaOH:
* Alle komponenter forskjellige fra den aktive forbindelse er USP / Ph. Eur. tilpasset
[00193] Et egnet formuleringskar blir fylt med WFI til omtrent 5% av bulk løsningsvolum. Sitronsyren (10,51 g) blir veiet, satt til formuleringskaret og omrørt for å produsere IM sitronsyre. Det aktive midlet (1,00 g) blir veiet og oppløst i 1 M av sitronsyreløsningen. Den resulterende løsningen blir overført til et større egnet formulerings kar og WFT blir tilsatt til omtrent 85% av bulk løsningsvolum. pH i bulk-løsningen blir målt og regulert til 5,0 med IN NaOH. Løsningen blir bragt til dens endelige volum (1 liter) med
WFI.

Claims (11)

1. Forbindelse valgt fra: i) metyl 4-[(3-fluor-5-{[(6-metyl(3-pyridyl))amino]karbonylamino}-fenyl)metyl]piperazinekarboksylat
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav; ii) etyl 4-[(4-fluor-3- {[(6-metyl(3-pyridyl))amino]karbonylamino}fenyl)-metyl]piperazinekarboksylat
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav; iii) metyl 4-[(2-fluor-3- {[(6-metyl(3-pyridyl))amino]karbonylamino} - fenyl)metyl]piperazinekarboksylat
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav; iv) metyl 4-[(3-{[(6-metyl-3-pyridyl)amino]karbonylamino}fenyl)-metyl]piperazinekarboksylat
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav; v) metyl 4-[(lS)-l-(5-fluor-3-{[(6-metyl(3-pyridyl))amino]karbonylamino}-fenyl)etyl] piperazinekarboksylat
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav; og vi) N- {3-[(l S)-l -(4-acetylpiperazinyl)etyl] -2-fluorfenyl} [(6-metyl(3-pyridyl))amino]karboksamid
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
2. Forbindelse ifølge krav 1, som er metyl 4-[(2-fluor-3-{[(6-metyl(3-pyridyl))amino]karbonylamino}-fenyl)metyl]piperazinekarboksylat eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
3. Farmasøytisk preparat omfattende et farmasøytisk akseptabelt tilsetningsmiddel, bærer eller adjuvans og forbindelse ifølge krav 1 eller krav 2 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
4. Forbindelse eller farmasøytiske preparat ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 3 for anvendelse ved en metode for behandling av hjertesykdom hos et pattedyr hvilken metode omfatter administrering til et pattedyr med behov for dette en terapeutisk effektiv mengde av forbindelse ifølge krav 1 eller krav 2 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav eller et farmasøytisk preparat ifølge krav 3.
5. Forbindelse eller farmasøytiske preparat for anvendelse ifølge krav 4, hvor hjertesykdommen er akutt eller dekompensert kongestiv hjertesvikt eller kronisk kongestiv hjertesvikt.
6. Forbindelse eller farmasøytiske preparat for anvendelse ifølge krav 4, hvor hjertesykdommen er systolisk hjertesvikt.
7. Forbindelse ifølge krav 2 for anvendelse ved en metode for å forbedre hjerte- kontraktilitet i hjertevev uten å endre kalsiumtransienten, hvor forbindelsen er:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
8. Forbindelse ifølge krav 2 for anvendelse ved en metode for å stabilisere hjertefunksjonen hos en pasient i påvente av et hjerte transplantat, hvor forbindelsen er:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
9. Forbindelse ifølge krav 2 for anvendelse ved en metode for behandling av hjertesvikt gjennom økende kontraktilitet for å modulere systolisk funksjon eller gjennom å bevirke total relaksasjon av moderat diastolisk funksjon, hvor forbindelsen er:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
10. Farmasøytisk preparat omfattende forbindelse ifølge krav 2 og et farmasøytisk akseptabelt tilsetningsmiddel, bærer eller adjuvans, for anvendelse i henhold til kravene 7 til 9.
11. Preparatet for anvendelse ifølge krav 10, formulert i en form valgt fra gruppen bestående av et injiserbar fluid, en aerosol, en tablett, en pille, en kapsel, en sirup, en krem, en gel og et transdermalt plaster.
NO20070257A 2004-06-17 2007-01-15 Substituerte urinstoff-derivater, farmasøytiske preparater omfattende samme samt anvendelse av forbindelsene og preparatene for behandling av sykdom NO340030B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US58119704P 2004-06-17 2004-06-17
PCT/US2005/021100 WO2006009726A2 (en) 2004-06-17 2005-06-16 Substituted urea derivatives for treating cardiac diseases

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO20070257L NO20070257L (no) 2007-01-16
NO340030B1 true NO340030B1 (no) 2017-02-27

Family

ID=35785669

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20070257A NO340030B1 (no) 2004-06-17 2007-01-15 Substituerte urinstoff-derivater, farmasøytiske preparater omfattende samme samt anvendelse av forbindelsene og preparatene for behandling av sykdom

Country Status (33)

Country Link
US (12) US7507735B2 (no)
EP (2) EP2862859B1 (no)
JP (2) JP5080970B2 (no)
KR (1) KR101276136B1 (no)
CN (1) CN101035525A (no)
AR (1) AR053405A1 (no)
AU (1) AU2005264988B2 (no)
BR (1) BRPI0512193B8 (no)
CA (1) CA2570999C (no)
CY (1) CY1115716T1 (no)
DK (2) DK1765327T3 (no)
EA (1) EA016138B1 (no)
EC (1) ECSP077180A (no)
ES (2) ES2686357T3 (no)
HK (2) HK1101060A1 (no)
HR (1) HRP20141048T1 (no)
IL (1) IL180026A (no)
MA (1) MA28738B1 (no)
ME (1) ME01942B (no)
MX (1) MXPA06014495A (no)
MY (1) MY144470A (no)
NO (1) NO340030B1 (no)
NZ (1) NZ552404A (no)
PE (1) PE20060438A1 (no)
PL (2) PL1765327T3 (no)
PT (1) PT1765327E (no)
RS (1) RS53600B1 (no)
RU (1) RU2410384C2 (no)
SG (1) SG149027A1 (no)
SI (1) SI1765327T1 (no)
TW (1) TWI359812B (no)
WO (1) WO2006009726A2 (no)
ZA (1) ZA200700351B (no)

Families Citing this family (55)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6495337B1 (en) * 2000-03-29 2002-12-17 Cytokinetics, Inc. High throughput sarcomeric assay
KR20050100615A (ko) * 2003-01-14 2005-10-19 싸이토키네틱스, 인코포레이티드 화합물, 조성물 및 방법
MXPA06014495A (es) 2004-06-17 2007-03-01 Cytokinetics Inc Compuestos, composiciones y metodos.
TW200630337A (en) * 2004-10-14 2006-09-01 Euro Celtique Sa Piperidinyl compounds and the use thereof
EP1824843A2 (en) * 2004-12-07 2007-08-29 Locus Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of protein kinases
US7741479B2 (en) * 2004-12-07 2010-06-22 Locus Pharmaceuticals, Inc. Urea inhibitors of MAP kinases
US7538223B2 (en) * 2005-08-04 2009-05-26 Cytokinetics, Inc. Compounds, compositions and methods
US20070161617A1 (en) * 2005-12-15 2007-07-12 Morgan Bradley P Certain chemical entities, compositions and methods
US20070197505A1 (en) * 2005-12-15 2007-08-23 Morgan Bradley P Certain chemical entities, compositions and methods
US7825120B2 (en) * 2005-12-15 2010-11-02 Cytokinetics, Inc. Certain substituted ((piperazin-1-ylmethyl)benzyl)ureas
US20070208000A1 (en) * 2005-12-15 2007-09-06 Morgan Bradley P Certain chemical entities, compositions and methods
WO2007078815A2 (en) 2005-12-16 2007-07-12 Cytokinetics, Inc. Certain chemical entities, compositions, and methods
WO2007078839A2 (en) * 2005-12-19 2007-07-12 Cytokinetics, Inc. Compounds, compositions and methods
JP2009522363A (ja) * 2006-01-04 2009-06-11 ローカス ファーマシューティカルズ、インク． プロテインキナーゼの阻害剤
WO2007110449A1 (en) * 2006-03-29 2007-10-04 Euro-Celtique S.A. Benzenesulfonamide compounds and their use
WO2007118854A1 (en) * 2006-04-13 2007-10-25 Euro-Celtique S.A. Benzenesulfonamide compounds and the use thereof
WO2007118853A1 (en) 2006-04-13 2007-10-25 Euro-Celtique S.A. Benzenesulfonamide compounds and their use as blockers of calcium channels
WO2008124118A1 (en) * 2007-04-09 2008-10-16 Purdue Pharma L.P. Benzenesulfonyl compounds and the use therof
US8765736B2 (en) * 2007-09-28 2014-07-01 Purdue Pharma L.P. Benzenesulfonamide compounds and the use thereof
US20090192168A1 (en) * 2008-01-04 2009-07-30 Alex Muci Compounds, Compositions and Methods
WO2012145677A2 (en) 2011-04-20 2012-10-26 The Regents Of The University Of Michigan Spectrum filtering for visual displays and imaging having minimal angle dependence
CN102288601B (zh) * 2011-05-16 2012-12-12 中国药科大学 一种肌球蛋白atp酶活性微量测定方法及其应用
AR091516A1 (es) * 2012-06-22 2015-02-11 Actelion Pharmaceuticals Ltd Derivados de 1-[m-carboxamido(hetero)aril-metil]-heterociclil-carboxamida
US9709649B2 (en) * 2013-02-08 2017-07-18 Regents Of The University Of Minnesota System and method for assessing adenosine triphosphate hydrolysis rate using double saturation transfer magnetic resonance imaging and spectroscopy
UY35449A (es) * 2013-03-14 2014-09-30 Amgen Inc Compuestos heterocíclicos y sus usos
EP2968180B1 (en) 2013-03-14 2019-04-24 Amgen Inc. Heterocyclic compounds and their uses
US9547107B2 (en) 2013-03-15 2017-01-17 The Regents Of The University Of Michigan Dye and pigment-free structural colors and angle-insensitive spectrum filters
WO2015142001A2 (ko) * 2014-03-21 2015-09-24 충남대학교산학협력단 강심 활성을 갖는 화합물 및 이를 함유하는 심부전 예방 또는 치료용 약학적 조성물
US10758525B2 (en) 2015-01-22 2020-09-01 MyoKardia, Inc. 4-methylsulfonyl-substituted piperidine urea compounds
UA119905C2 (uk) * 2015-01-22 2019-08-27 Міокардіа, Інк. Сполуки 4-метилсульфонілзаміщеної піперидинсечовини для лікування дилатаційної кардіоміопатії (dcm)
KR101766731B1 (ko) 2015-06-23 2017-08-10 충남대학교산학협력단 강심 활성을 갖는 크로메논 유도체 및 이를 포함하는 심부전의 예방 또는 치료용 약학 조성물
EP3313444B1 (en) * 2015-06-26 2020-10-21 Amgen Inc. Combination therapy of cardiac myosin activator and sinus node if current inhibitor
TWI773657B (zh) 2015-12-18 2022-08-11 美商亞德利克斯公司 作爲非全身ｔｇｒ５促效劑之經取代之4-苯基吡啶化合物
US12084472B2 (en) 2015-12-18 2024-09-10 Ardelyx, Inc. Substituted 4-phenyl pyridine compounds as non-systemic TGR5 agonists
KR20160108281A (ko) 2016-09-06 2016-09-19 충남대학교산학협력단 강심 활성을 갖는 화합물 및 이를 함유하는 심부전 예방 또는 치료용 약학적 조성물
HUE053603T2 (hu) * 2016-10-10 2021-07-28 Basf Se Katalizátor módosítása alkálifém, alkáliföldfém vagy ritkaföldfém ionokkal nitrovegyületek folytonos folyadék fázisú hidrogénezése során
US10256925B2 (en) * 2017-01-19 2019-04-09 Samsung Electronics Co., Ltd. Methods and wireless communication systems for wireless re-calibration of RF components of communication devices
BR112019028046A2 (pt) 2017-06-30 2020-07-07 Amgen Inc. métodos de tratamento da insuficiência cardíaca com ativadores de sarcômeros cardíacos
SI3645518T1 (sl) * 2017-06-30 2021-11-30 Amgen Inc. Sinteza omekamtiv mekarbila
EP3681882A1 (en) 2017-09-13 2020-07-22 Amgen Inc. Bisamide sarcomere activating compounds and uses thereof
BR112020014428A2 (pt) 2018-01-19 2020-12-01 Cytokinetics, Inc. composto, composição farmacêutica, e, métodos para o tratamento de uma doença cardíaca em um indivíduo, para o tratamento de uma doença ou condição que está associada com cavidade ventricular esquerda pequena e obliteração da cavidade, contração hiperdinâmica do ventrículo esquerdo, isquemia do miocárdio ou fibrose cardíaca, para o tratamento de uma doença ou condição selecionada dentre distrofias musculares e doenças de armazenamento do glicogênio e para inibição do sarcômero cardíaco
EA039850B1 (ru) * 2018-04-30 2022-03-21 Эмджен Инк. Синтез омекамтива мекарбила
US11964967B2 (en) 2018-06-26 2024-04-23 Cytokinetics, Inc. Cardiac sarcomere inhibitors
WO2020014406A1 (en) 2018-07-12 2020-01-16 Assia Chemical Industries Ltd. Solid state forms of omecamtiv mecarbil & omecamtiv mecarbil dihcl
MX2021001792A (es) 2018-08-17 2021-05-27 Amgen Inc Sales y formas cristalinas de omecamtiv mecarbil.
KR20210068422A (ko) 2018-08-31 2021-06-09 싸이토키네틱스, 인코포레이티드 심장 근절 억제제
WO2021053175A1 (en) 2019-09-19 2021-03-25 Synthon B.V. Salts of omecamtiv mecarbil and solid forms thereof
WO2021053189A1 (en) 2019-09-19 2021-03-25 Synthon B.V. Salts of omecamtiv mecarbil and solid forms thereof
EP4041710A1 (en) * 2019-10-09 2022-08-17 Dr. Reddy's Laboratories Limited Alternate processes for the preparation of omecamtiv mecarbil
CA3200673A1 (en) 2020-11-12 2022-05-19 Amgen Inc. Methods of treating heart failure by administering omecamtiv mecarbil
WO2022177927A1 (en) 2021-02-16 2022-08-25 Assia Chemical Industries Ltd Unhydrous crystalline form of omecamtiv mecarbil dihydrobromide salt
JP2024508526A (ja) 2021-03-04 2024-02-27 サイトキネティックス， インコーポレイテッド 心筋サルコメア阻害剤
MX2023010558A (es) 2021-03-10 2023-11-24 Amgen Inc Sintesis de omecamtiv mecarbil.
WO2024081611A1 (en) 2022-10-11 2024-04-18 Cytokinetics, Incorporated Methods for treating heart failure by administering cardiac sarcomere activators
US11986474B1 (en) 2023-06-27 2024-05-21 Cytokinetics, Incorporated Methods for treating heart failure by administering cardiac sarcomere activators

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5547966A (en) * 1993-10-07 1996-08-20 Bristol-Myers Squibb Company Aryl urea and related compounds
US5962455A (en) * 1996-07-23 1999-10-05 Neurogen Corporation Certain substituted benzylamine derivatives a new class of neuropeptide Y1 specific ligands

Family Cites Families (130)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US397782A (en) * 1889-02-12 Plunger water-closet
NL254871A (no) 1959-08-14
GB1339764A (en) 1971-03-29 1973-12-05 Ici Ltd Pyridine derivatives
US3939169A (en) 1971-03-29 1976-02-17 Imperial Chemical Industries Limited Alkylene bis(pyridiniumareylene quaternary salts)
DE2942930A1 (de) 1979-10-24 1981-05-27 Basf Ag, 6700 Ludwigshafen Substituierte harnstoffe, deren herstellung und verwendung als herbizide
EP0081142B1 (de) 1981-12-03 1986-06-25 BASF Aktiengesellschaft 1,3,5-Triazinone, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung zur Bekämpfung unerwünschten Pflanzenwuchses
DE3147879A1 (de) 1981-12-03 1983-06-16 Basf Ag, 6700 Ludwigshafen 1,3,5-triazinone, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung zur bekaempfung unerwuenschten pflanzenwuchses
DE3478110D1 (en) 1983-03-29 1989-06-15 Fmc Corp N-phenyl-n'-(pyridinyl-n-oxide)urea plant regulators
US4787931A (en) 1984-03-06 1988-11-29 Fmc Corporation N-phenyl-N'-(pyridinyl-N-oxide)urea plant regulators
US4672066A (en) 1985-04-22 1987-06-09 Hoffmann-La Roche Inc. Derivatives of 4-acetyl-3-hydroxy-2-alkyl-phenoxycarboxylic acids
GB9027023D0 (en) 1990-12-12 1991-01-30 Wellcome Found Anti-atherosclerotic aryl compounds
US5162360A (en) 1991-06-24 1992-11-10 Warner-Lambert Company 2-heteroatom containing urea and thiourea ACAT inhibitors
GEP20001968B (en) 1992-01-21 2000-03-05 Glaxo Spa Arilthio Compounds as Antibacterial and Antiviral Agents
WO1993024458A1 (en) 1992-05-28 1993-12-09 Pfizer Inc. New n-aryl and n-heteroarylurea derivatives as inhibitors of acyl coenzyme a:cholesterol acyl transferase (acat)
GB9304920D0 (en) 1993-03-10 1993-04-28 Celltech Ltd Chemical compounds
EP0634402A1 (en) * 1993-07-14 1995-01-18 Takeda Chemical Industries, Ltd. Isochinolinone derivatives, their production and use
AU3577995A (en) 1994-10-04 1996-04-26 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Urea derivatives and their use as acat-inhibitors
ES2218554T3 (es) 1994-10-27 2004-11-16 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Piridopirimidonas, quinolinas y n-heterociclos condensados que son antagonistas de bradiquinina.
US6010026A (en) 1994-11-22 2000-01-04 Aluminum Company Of America Assembly of aluminum can and threaded sleeve
US5556969A (en) 1994-12-07 1996-09-17 Merck Sharp & Dohme Ltd. Benzodiazepine derivatives
US5624937A (en) 1995-03-02 1997-04-29 Eli Lilly And Company Chemical compounds as inhibitors of amyloid beta protein production
GB9504361D0 (en) 1995-03-04 1995-04-26 Glaxo Spa Heterocyclic compounds
GB9511355D0 (en) 1995-06-06 1995-08-02 Fujisawa Pharmaceutical Co Urea derivatives
US5972975A (en) 1995-12-08 1999-10-26 Merck & Co., Inc. Substituted 2-aminopyridines as inhibitors of nitric oxide synthase
US6005008A (en) 1996-02-16 1999-12-21 Smithkline Beecham Corporation IL-8 receptor antagonists
IT1284198B1 (it) 1996-07-30 1998-05-08 Beniamino Anzalone Carne vegetale
US6174905B1 (en) 1996-09-30 2001-01-16 Mitsui Chemicals, Inc. Cell differentiation inducer
AUPO390996A0 (en) 1996-11-29 1996-12-19 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Urea derivatives
JP2002241368A (ja) 1997-02-18 2002-08-28 Shionogi & Co Ltd 新規ベンゾラクタム誘導体およびそれを含有する医薬組成物
WO1998041510A1 (fr) 1997-03-14 1998-09-24 Shionogi & Co., Ltd. Nouveaux derives du benzolactame et compositions medicamenteuses les contenant
WO1998050346A2 (en) 1997-04-18 1998-11-12 Smithkline Beecham Plc Acetamide and urea derivatives, process for their preparation and their use in the treatment of cns disorders
WO1998052558A1 (en) 1997-05-23 1998-11-26 Bayer Corporation INHIBITION OF p38 KINASE ACTIVITY BY ARYL UREAS
CA2291065C (en) 1997-05-23 2010-02-09 Bayer Corporation Raf kinase inhibitors
EP1045841B1 (en) 1997-11-05 2002-12-04 Choongwae Pharma Corporation Novel genipin derivative having liver protection activity
EP1616865A1 (en) 1997-12-22 2006-01-18 Bayer Pharmaceuticals Corporation Inhibition of p38 kinase using symmetrical and unsymmetrical diphenyl ureas
CZ299156B6 (cs) 1997-12-22 2008-05-07 Bayer Corporation Substituované heterocyklické mocoviny, farmaceutické prípravky je obsahující a jejich použití
TR200002616T2 (tr) 1997-12-22 2000-11-21 Bayer Corporation Simetrik ve simetrik olmayan sübstitüe edilmiş difenil üreler kullanılarak raf kinazın inhibe edilmesi
US7517880B2 (en) * 1997-12-22 2009-04-14 Bayer Pharmaceuticals Corporation Inhibition of p38 kinase using symmetrical and unsymmetrical diphenyl ureas
ES2154253T3 (es) 1997-12-22 2012-01-27 Bayer Healthcare Llc Inhibición de la actividad de p38 cinasa usando ureas heterocíclicas sustituidas.
JP4405602B2 (ja) 1998-04-16 2010-01-27 バイエル・シエーリング・ファーマ アクチエンゲゼルシャフト ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤
EP1086078B1 (en) 1998-06-08 2003-02-05 Schering Corporation Neuropeptide y5 receptor antagonists
US6329395B1 (en) 1998-06-08 2001-12-11 Schering Corporation Neuropeptide Y5 receptor antagonists
US6407124B1 (en) 1998-06-18 2002-06-18 Bristol-Myers Squibb Company Carbon substituted aminothiazole inhibitors of cyclin dependent kinases
US6420381B1 (en) 1998-08-11 2002-07-16 Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited Naphthyridine derivatives
JP2000256194A (ja) 1999-01-06 2000-09-19 Mitsui Chemicals Inc 核内レセプタ作動薬およびその効果増強剤
US7928239B2 (en) 1999-01-13 2011-04-19 Bayer Healthcare Llc Inhibition of RAF kinase using quinolyl, isoquinolyl or pyridyl ureas
CA2359244C (en) 1999-01-13 2013-10-08 Bayer Corporation .omega.-carboxy aryl substituted diphenyl ureas as p38 kinase inhibitors
US6402960B1 (en) 1999-03-01 2002-06-11 The Regents Of The University Of California Thiacrown polymers for removal of mercury from waste streams
DE19921498A1 (de) 1999-05-08 2000-11-16 Clariant Gmbh Verfahren zur Herstellung von wäßrigen Diazoniumsalzlösungen
ATE312823T1 (de) 1999-07-09 2005-12-15 Boehringer Ingelheim Pharma Verfahren zur herstellung heteroarylsubstituierter ureaverbindungen
US6958333B1 (en) 1999-07-26 2005-10-25 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Biarylurea derivatives
AU7446600A (en) 1999-10-01 2001-05-10 Japan Energy Corporation Novel diarylamide derivatives and use thereof as medicines
US6492393B1 (en) 1999-11-16 2002-12-10 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Compounds useful as anti-inflammatory agents
HN2001000008A (es) 2000-01-21 2003-12-11 Inc Agouron Pharmaceuticals Compuesto de amida y composiciones farmaceuticas para inhibir proteinquinasas, y su modo de empleo
JP2001278886A (ja) * 2000-03-28 2001-10-10 Dai Ichi Seiyaku Co Ltd ベンゾオキサジン誘導体及びこれを含有する医薬
US6495337B1 (en) 2000-03-29 2002-12-17 Cytokinetics, Inc. High throughput sarcomeric assay
AU2001271357A1 (en) 2000-06-21 2002-01-02 Dupont Pharmaceuticals Company N-ureidoalkyl-piperidines as modulators of chemokine receptor activity
GB0015601D0 (en) 2000-06-26 2000-08-16 Ferring Bv Novel antidiuretic agents
GB0015904D0 (en) 2000-06-28 2000-08-23 Hoffmann La Roche Inhibitors of HPV E1 helicase enzyme
US6573267B2 (en) * 2000-06-30 2003-06-03 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Useful aroyl aminoacyl pyrrole compounds
ES2291329T3 (es) 2000-07-18 2008-03-01 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. Inhibidores de la recaptacion de serotonina.
GB0017676D0 (en) 2000-07-19 2000-09-06 Angeletti P Ist Richerche Bio Inhibitors of viral polymerase
US20020173507A1 (en) 2000-08-15 2002-11-21 Vincent Santora Urea compounds and methods of uses
US6645990B2 (en) 2000-08-15 2003-11-11 Amgen Inc. Thiazolyl urea compounds and methods of uses
US6573264B1 (en) 2000-10-23 2003-06-03 Cv Therapeutics, Inc. Heteroaryl alkyl piperazine derivatives
US20030045552A1 (en) 2000-12-27 2003-03-06 Robarge Michael J. Isoindole-imide compounds, compositions, and uses thereof
US7091353B2 (en) 2000-12-27 2006-08-15 Celgene Corporation Isoindole-imide compounds, compositions, and uses thereof
US6656971B2 (en) 2001-01-25 2003-12-02 Guilford Pharmaceuticals Inc. Trisubstituted carbocyclic cyclophilin binding compounds and their use
JP2002220338A (ja) 2001-01-26 2002-08-09 Banyu Pharmaceut Co Ltd ビアリールウレア化合物又はその塩を有効成分として含有するＣｄｋ４及び／又はＣｄｋ６阻害剤
GB0117950D0 (en) 2001-02-16 2001-09-19 Aventis Pharma Inc Novel heterocyclic urea derivatives andd their use as dopamine D3 receptor ligands
DE10110749A1 (de) 2001-03-07 2002-09-12 Bayer Ag Substituierte Aminodicarbonsäurederivate
JP4366936B2 (ja) 2001-04-20 2009-11-18 バイエル コーポレイション キノリル、イソキノリルまたはピリジル尿素を使用するｒａｆキナーゼの阻害
WO2002092576A1 (en) 2001-05-16 2002-11-21 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Diarylurea derivatives useful as anti-inflammatory agents
CA2448626A1 (en) 2001-05-25 2002-12-05 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Carbamate and oxamide compounds as inhibitors of cytokine production
WO2002099388A2 (en) 2001-06-07 2002-12-12 Merck & Co., Inc. Benzodiazepine bradykinin antagonists
DE60219793T2 (de) 2001-07-11 2008-01-24 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc., Ridgefield Verfahren zur Behandlung von Cytokin-Vermittelten Erkrankungen
DE10134482A1 (de) 2001-07-16 2003-01-30 Bayer Ag Substituierte Isoindole und ihre Verwendung
AUPR688101A0 (en) 2001-08-08 2001-08-30 Luminis Pty Limited Protein domains and their ligands
WO2003022820A1 (en) 2001-09-06 2003-03-20 Bristol-Myers Squibb Pharma Company. Heteroaromatic substituted cyclopropane as corticotropin releasing hormone
CA2460149A1 (en) 2001-09-12 2003-03-27 Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. 2-phenyl-3-heteroarylpropionic acid derivative or salt thereof and medicine containing the same
US7320126B2 (en) * 2001-11-06 2008-01-15 Sandisk Corporation Implementation of in system programming to update firmware on memory cards
TWI249515B (en) 2001-11-13 2006-02-21 Theravance Inc Aryl aniline beta2 adrenergic receptor agonists
WO2003059258A2 (en) 2001-12-21 2003-07-24 Cytokinetics, Inc. Compositions and methods for treating heart failure
US20030207872A1 (en) 2002-01-11 2003-11-06 Bayer Corporation Omega-carboxyaryl substituted diphenyl ureas as raf kinase inhibitors
US7148236B2 (en) 2002-01-17 2006-12-12 Merck & Co., Inc. Modulators of acetylcholine receptors
US7408067B2 (en) 2002-01-17 2008-08-05 Merck + Co., Inc. Aza-cyclic compounds as modulators of acetylcholine receptors
DK1478358T3 (da) 2002-02-11 2013-10-07 Bayer Healthcare Llc Sorafenibtosylat til behandling af sygdomme kendetegnet ved unormal angiogenese
DE10208986A1 (de) 2002-02-28 2003-09-11 Aventis Pharma Gmbh Verwendung substituierter 3-Phenyl-5-alkoxi-1,3,4-oxdiazol-2-one zur Herstellung von Arzneimitteln mit hemmender Wirkung an der pankreatischen Lipase
US20050171358A1 (en) 2002-03-07 2005-08-04 Noriko Shimozono Substituted isoxazole alkylamine derivative and agri-and horticultural fungicide
EA007328B1 (ru) 2002-03-28 2006-08-25 Апплайд Резеч Системз Арс Холдинг Н. В. Тиазолидинкарбоксамидные производные как модуляторы рецептора простагландина f
TW200400035A (en) 2002-03-28 2004-01-01 Glaxo Group Ltd Novel compounds
US20050182040A1 (en) 2002-04-03 2005-08-18 Naonori Imazaki Benzamide derivatives
US7105505B2 (en) 2002-04-18 2006-09-12 Schering Corporation Benzimidazole derivatives useful as histamine H3 antagonists
PL373889A1 (en) 2002-04-18 2005-09-19 Schering Corporation (1-4-piperidinyl)benzimidazole derivatives useful as histamine h3 antagonists
EP1503996B1 (en) 2002-04-23 2008-12-24 Bristol-Myers Squibb Company Aryl ketone pyrrolo-triazine compounds useful as kinase inhibitors
US20030236287A1 (en) 2002-05-03 2003-12-25 Piotrowski David W. Positive allosteric modulators of the nicotinic acetylcholine receptor
WO2003097576A2 (en) 2002-05-17 2003-11-27 Lica Pharmaceuticals A/S Diamino-functional chalcones
AR037647A1 (es) 2002-05-29 2004-12-01 Novartis Ag Derivados de diarilurea utiles para el tratamiento de enfermedades dependientes de la cinasa de proteina
AU2003243709B2 (en) 2002-06-24 2007-01-18 Schering Corporation Indole derivatives useful as histamine H3 antagonists
MXPA05000130A (es) 2002-06-27 2005-02-17 Novo Nordisk As Derivados de aril-carbonilo como agentes terapeuticos.
BR0313122A (pt) 2002-07-31 2005-07-05 Schering Ag Antranilamidopiridinas inibidoras de vegfr-2 e vegfr-3
GB0218147D0 (en) 2002-08-05 2002-09-11 Oxford Glycosciences Uk Ltd Novel compounds
JP4606876B2 (ja) 2002-08-27 2011-01-05 キッセイ薬品工業株式会社 ピラゾール誘導体、それを含有する医薬組成物及びその医薬用途
US6915814B2 (en) * 2002-09-04 2005-07-12 Dara Cheng Transparent pipe trap with means of enhancing the biodegradation of sink effluents
EP1537116B1 (en) 2002-09-04 2010-06-02 Schering Corporation Pyrazolopyrimidines suitable for the treatment of cancer diseases
EP1551843A1 (en) 2002-09-10 2005-07-13 Pfizer Products Inc. Diazabicyclic compounds useful in the treatment of cns and other disorders
WO2004039306A2 (fr) 2002-10-29 2004-05-13 L'oreal Composition capillaire contenant un compose styryl-pyrazole
KR20050100615A (ko) 2003-01-14 2005-10-19 싸이토키네틱스, 인코포레이티드 화합물, 조성물 및 방법
UY28213A1 (es) 2003-02-28 2004-09-30 Bayer Pharmaceuticals Corp Nuevos derivados de cianopiridina útiles en el tratamiento de cáncer y otros trastornos.
US7531553B2 (en) * 2003-03-21 2009-05-12 Amgen Inc. Heterocyclic compounds and methods of use
AU2003902073A0 (en) 2003-05-01 2003-05-15 Kevin Raymond Deguara A lighting substrate
JP4806628B2 (ja) 2003-05-05 2011-11-02 プロビオドルグ エージー グルタミニルシクラーゼ阻害剤
WO2004101529A1 (ja) 2003-05-19 2004-11-25 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. 含窒素複素環化合物およびその医薬用途
PT1626714E (pt) 2003-05-20 2007-08-24 Bayer Pharmaceuticals Corp Diarilureias para doenças mediadas por pdgfr
GB0316915D0 (en) * 2003-07-18 2003-08-20 Glaxo Group Ltd Compounds
EP1689376A2 (en) 2003-11-28 2006-08-16 Novartis AG Diaryl urea derivatives in the treatment of protein kinase dependent diseases
TW200530236A (en) 2004-02-23 2005-09-16 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Heteroaryl phenylurea
WO2005113494A2 (en) 2004-05-07 2005-12-01 Amgen Inc. Nitrogenated heterocyclic derivatives as protein kinase modulators and use for the treatment of angiogenesis and cancer
MXPA06014495A (es) 2004-06-17 2007-03-01 Cytokinetics Inc Compuestos, composiciones y metodos.
WO2006009729A2 (en) 2004-06-18 2006-01-26 Medtronic, Inc. Methods and devices for occlusion of an atrial appendage
US7176222B2 (en) 2004-07-27 2007-02-13 Cytokinetics, Inc. Syntheses of ureas
WO2006089871A2 (en) 2005-02-23 2006-08-31 Neurosearch A/S Diphenylurea derivatives useful as erg channel openers for the treatment of cardiac arrhythmias
US7538223B2 (en) 2005-08-04 2009-05-26 Cytokinetics, Inc. Compounds, compositions and methods
US7825120B2 (en) 2005-12-15 2010-11-02 Cytokinetics, Inc. Certain substituted ((piperazin-1-ylmethyl)benzyl)ureas
US20070208000A1 (en) 2005-12-15 2007-09-06 Morgan Bradley P Certain chemical entities, compositions and methods
US20070161617A1 (en) 2005-12-15 2007-07-12 Morgan Bradley P Certain chemical entities, compositions and methods
US20070197505A1 (en) 2005-12-15 2007-08-23 Morgan Bradley P Certain chemical entities, compositions and methods
WO2007078815A2 (en) 2005-12-16 2007-07-12 Cytokinetics, Inc. Certain chemical entities, compositions, and methods
WO2007078839A2 (en) 2005-12-19 2007-07-12 Cytokinetics, Inc. Compounds, compositions and methods
US7672247B2 (en) * 2006-02-23 2010-03-02 International Business Machines Corporation Evaluating data processing system health using an I/O device

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5547966A (en) * 1993-10-07 1996-08-20 Bristol-Myers Squibb Company Aryl urea and related compounds
US5962455A (en) * 1996-07-23 1999-10-05 Neurogen Corporation Certain substituted benzylamine derivatives a new class of neuropeptide Y1 specific ligands

Also Published As

Publication number Publication date
HK1209729A1 (en) 2016-04-08
CN101035525A (zh) 2007-09-12
JP5080970B2 (ja) 2012-11-21
ZA200700351B (en) 2008-05-28
JP2008503467A (ja) 2008-02-07
US8871769B2 (en) 2014-10-28
HRP20141048T1 (hr) 2015-01-02
EA016138B1 (ru) 2012-02-28
PE20060438A1 (es) 2006-07-01
US20060014761A1 (en) 2006-01-19
RS53600B1 (en) 2015-02-27
US20220185779A1 (en) 2022-06-16
MY144470A (en) 2011-09-30
AU2005264988A1 (en) 2006-01-26
ME01942B (me) 2015-05-20
US8101617B2 (en) 2012-01-24
MXPA06014495A (es) 2007-03-01
TWI359812B (en) 2012-03-11
US20090099198A1 (en) 2009-04-16
IL180026A0 (en) 2007-05-15
ECSP077180A (es) 2007-04-26
ES2522579T3 (es) 2014-11-17
US9643925B2 (en) 2017-05-09
US20120172372A1 (en) 2012-07-05
DK1765327T3 (da) 2014-11-03
BRPI0512193B8 (pt) 2021-05-25
RU2410384C2 (ru) 2011-01-27
US9150564B2 (en) 2015-10-06
CA2570999A1 (en) 2006-01-26
US10385023B2 (en) 2019-08-20
PL216049B1 (pl) 2014-02-28
DK2862859T3 (en) 2018-08-13
US20140038983A1 (en) 2014-02-06
US7507735B2 (en) 2009-03-24
AR053405A1 (es) 2007-05-09
SI1765327T1 (sl) 2014-12-31
CA2570999C (en) 2014-01-07
US20180305316A1 (en) 2018-10-25
AU2005264988B2 (en) 2011-09-22
US20170267638A1 (en) 2017-09-21
US8513257B2 (en) 2013-08-20
SG149027A1 (en) 2009-01-29
IL180026A (en) 2011-11-30
US20160115133A1 (en) 2016-04-28
MA28738B1 (fr) 2007-07-02
ES2686357T3 (es) 2018-10-17
US20190352267A1 (en) 2019-11-21
JP2012097093A (ja) 2012-05-24
US20150005296A1 (en) 2015-01-01
EP1765327A4 (en) 2009-06-17
PT1765327E (pt) 2014-11-24
EP2862859B1 (en) 2018-07-25
US10975034B2 (en) 2021-04-13
US10035770B2 (en) 2018-07-31
NZ552404A (en) 2010-04-30
TW200616996A (en) 2006-06-01
WO2006009726A3 (en) 2006-11-30
EP1765327A2 (en) 2007-03-28
KR20070046070A (ko) 2007-05-02
KR101276136B1 (ko) 2013-06-18
EP1765327B1 (en) 2014-08-13
HK1101060A1 (en) 2007-10-05
RU2007101619A (ru) 2008-08-10
NO20070257L (no) 2007-01-16
PL381801A1 (pl) 2007-07-09
EA200700058A1 (ru) 2007-08-31
BRPI0512193B1 (pt) 2018-11-21
BRPI0512193A (pt) 2008-02-19
EP2862859A3 (en) 2015-05-06
EP2862859A2 (en) 2015-04-22
US20210198203A1 (en) 2021-07-01
PL1765327T3 (pl) 2015-01-30
WO2006009726A2 (en) 2006-01-26
US20090036447A1 (en) 2009-02-05
US8110595B2 (en) 2012-02-07
CY1115716T1 (el) 2017-01-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO340030B1 (no) Substituerte urinstoff-derivater, farmasøytiske preparater omfattende samme samt anvendelse av forbindelsene og preparatene for behandling av sykdom
EP1962852B1 (en) Compounds, compositions and methods
US7825120B2 (en) Certain substituted ((piperazin-1-ylmethyl)benzyl)ureas
EP1959960B1 (en) Certain chemical entities, compositions and methods
US20090192168A1 (en) Compounds, Compositions and Methods
US20070208000A1 (en) Certain chemical entities, compositions and methods
AU2011253934C1 (en) Substituted urea derivatives for treating cardiac diseases