NO318374B1 - Fremgangsmate for isolering av klavulansyre fra et vandig fermenteringsmedium - Google Patents
Fremgangsmate for isolering av klavulansyre fra et vandig fermenteringsmedium Download PDFInfo
- Publication number
- NO318374B1 NO318374B1 NO19963628A NO963628A NO318374B1 NO 318374 B1 NO318374 B1 NO 318374B1 NO 19963628 A NO19963628 A NO 19963628A NO 963628 A NO963628 A NO 963628A NO 318374 B1 NO318374 B1 NO 318374B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- clavulanic acid
- microfiltration
- water
- fermentation medium
- ethyl acetate
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 64
- HZZVJAQRINQKSD-UHFFFAOYSA-N Clavulanic acid Natural products OC(=O)C1C(=CCO)OC2CC(=O)N21 HZZVJAQRINQKSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 61
- HZZVJAQRINQKSD-PBFISZAISA-N clavulanic acid Chemical compound OC(=O)[C@H]1C(=C/CO)/O[C@@H]2CC(=O)N21 HZZVJAQRINQKSD-PBFISZAISA-N 0.000 title claims abstract description 59
- 229960003324 clavulanic acid Drugs 0.000 title claims abstract description 59
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims abstract description 35
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims abstract description 35
- 230000008569 process Effects 0.000 title abstract description 22
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 claims abstract description 18
- ABVRVIZBZKUTMK-JSYANWSFSA-M potassium clavulanate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)[C@H]1C(=C/CO)/O[C@@H]2CC(=O)N21 ABVRVIZBZKUTMK-JSYANWSFSA-M 0.000 claims abstract description 11
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 16
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 16
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 claims description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 11
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 9
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 9
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 8
- 238000001223 reverse osmosis Methods 0.000 claims description 7
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims description 7
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- ZUFQCVZBBNZMKD-UHFFFAOYSA-M potassium 2-ethylhexanoate Chemical compound [K+].CCCCC(CC)C([O-])=O ZUFQCVZBBNZMKD-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 3
- NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Chemical compound CC(C)CC(C)=O NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Natural products CCC(C)C(C)=O UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N acetic acid trimethyl ester Natural products COC(C)=O KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 abstract description 15
- 238000002955 isolation Methods 0.000 abstract description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 35
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 15
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 9
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 8
- 238000005189 flocculation Methods 0.000 description 8
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 8
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 8
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 8
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 8
- -1 Alkali metal salts Chemical class 0.000 description 7
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 7
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 7
- MFIGJRRHGZYPDD-UHFFFAOYSA-N n,n'-di(propan-2-yl)ethane-1,2-diamine Chemical compound CC(C)NCCNC(C)C MFIGJRRHGZYPDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 230000016615 flocculation Effects 0.000 description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 6
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000187433 Streptomyces clavuligerus Species 0.000 description 3
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 3
- JMRXTGCDVQLAFM-JSYANWSFSA-M lithium;(2r,3z,5r)-3-(2-hydroxyethylidene)-7-oxo-4-oxa-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylate Chemical compound [Li+].[O-]C(=O)[C@H]1C(=C/CO)/O[C@@H]2CC(=O)N21 JMRXTGCDVQLAFM-JSYANWSFSA-M 0.000 description 3
- 239000012465 retentate Substances 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004256 Beta-lactamase Proteins 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 2
- 241000424942 Streptomyces clavuligerus ATCC 27064 Species 0.000 description 2
- 241000187180 Streptomyces sp. Species 0.000 description 2
- 239000003782 beta lactam antibiotic agent Substances 0.000 description 2
- 102000006635 beta-lactamase Human genes 0.000 description 2
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 description 2
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 2
- 239000000701 coagulant Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000010924 continuous production Methods 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M lithium chloride Chemical compound [Li+].[Cl-] KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229910003002 lithium salt Inorganic materials 0.000 description 2
- 159000000002 lithium salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 2
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- 238000005096 rolling process Methods 0.000 description 2
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 239000002132 β-lactam antibiotic Substances 0.000 description 2
- 229940124586 β-lactam antibiotics Drugs 0.000 description 2
- HZZVJAQRINQKSD-RNFRBKRXSA-N (2R,5R)-3-(2-hydroxyethylidene)-7-oxo-4-oxa-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@H]1C(=CCO)O[C@@H]2CC(=O)N21 HZZVJAQRINQKSD-RNFRBKRXSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930186147 Cephalosporin Natural products 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000004931 aggregating effect Effects 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N amoxicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 229960004920 amoxicillin trihydrate Drugs 0.000 description 1
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229940124587 cephalosporin Drugs 0.000 description 1
- 150000001780 cephalosporins Chemical class 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 229940090805 clavulanate Drugs 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 230000009852 coagulant defect Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 230000003544 deproteinization Effects 0.000 description 1
- 150000004985 diamines Chemical class 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 244000144992 flock Species 0.000 description 1
- 238000004508 fractional distillation Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000005486 organic electrolyte Substances 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 229920000867 polyelectrolyte Polymers 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
- C12P17/188—Heterocyclic compound containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen atoms and oxygen atoms as the only ring heteroatoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D503/00—Heterocyclic compounds containing 4-oxa-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. oxapenicillins, clavulanic acid derivatives; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/02—Separating microorganisms from their culture media
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/886—Streptomyces
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Seasonings (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse omhandler området farmasøytisk industri og vedrører en ny og forbedret fremgangsmåte for isolering av klavulansyre fra et vandig fermenteringsmedium.
Det eksisterer et konstant behov for en ny og forbedret fremgangsmåte for fremstilling av ren klavulansyre og farmasøytisk akseptable salter derav slik som kaliumklavulanat ved isolering fira fermenteringsmediet oppnådd ved hjelp av en klavulansyreproduserende mikroorganisme, hvorved sofistikerte konvensjonelle isoleringsmetoder og kromatografisk rensing av det ønskede produkt unngås.
Klavulansyre er det vanlige navnet for (2R,5R,Z)-3-(2-hydroksyetyliden)-7-okso-4-oksa-l-azabicyklo[3.2.0]heptan-2-karboksylsyre av følgende formel
Alkalimetallsalter og estere derav er aktive som inhibitorer av beta-laktamaser produsert av noen Gram-positive samt noen Gram-negative mikroorganismer.
I tillegg til virkningen av å inhibere beta-laktamaser har klavulansyre og alkalimetallsalter derav også en synergistisk virkning i kombinasjon med beta-Iaktam antibiotika i penicillin- og cephalosporinserien. Klavulansyre og salter derav benyttes derfor i galeniske preparater for å hindre deaktiveringen av beta-laktam antibiotika. Kommersielle preparater inneholder et mer stabilt kaliumsalt av klavulansyre (syren alene er temmelig ustabil) i kombinasjon med amoksicillintrihydrat.
v Klavulansyre fremstilles ved fermentering av en klavulansyreproduserende mikroorganisme slik som forskjellige mikroorganismer tilhørende forskjellige Streptomyces-stammer slik som S. clavuligerus NRRL 3585, S. jumoninensis NRRL 5741, S. katsurahamanus IFO 13716 og Streptomyces sp. P 6621 FERM P 2804.
Det vandige kulturmediet som oppnås etter fermentering kan renses og konsentreres i overensstemmelse med konvensjonelle prosesser som omfatter f. eks. filtrering og kromatografisk rensing som illustrert i GB 1.508.977 før ekstraksjon av den vandige oppløsningen med det organiske oppløsningsmidlet til oppnåelse av en oppløsning av uren klavulansyre i et organisk oppløsningsmiddel.
GB 1.508.977 beskriver blant annet at salter av klavulansyre kan oppnås ved adsorpsjon av klavulanatanionet i det filtrerte mediet på en anionisk utvekslerharpiks og elueres derfra med en elektrolytt, idet den dannede oppløsningen avsaltes og deretter fjernes oppløsningsmidlet. Denne prosessen kan benyttes for oppnåelse av akseptable utbytter av den ønskede substansen, likevel krever den sofistikerte rensinger ved hjelp av kromatografiske metoder og anvendelse av harpikskolonner nødvendiggjør viktige investeringer, hvilket begrenser produksjonsoperasjoner i stor målestokk.
GB 1.543.563 beskriver en modifisert fermenteringsprosess som benytter stammen S. clavuligerus NRRL 3585, hvor pH-verdien til mediet holdes i området mellom 6,3 og 6,7 og dermed øker utbyttet av den ønskede forbindelsen. Salter av klavulansyre slik som kaliumklavulanat fremstilles ved omsaltdannelse fra litiuirtklavulanat, hvorved den ønskede forbindelsen også renses.
EP- A-0 026 044 illustrerer bruken av tert-butylarninsalt av klavulansyre som et nyttig mellomprodukt i fremstillingen av klavulansyre. Saltet er kjent fra BE 862 211, men bare som en bestanddel i farmasøytiske preparater.
EP-B-0 182 522 beskriver en fremgangsmåte for fremstilling av klavulansyre ved fermentering av mikroorganismen S. clavuligerus. En viktig forbedring av prosessen ble oppnådd ved tilsetning av en karbonkilde slik som glycerol til fermenteringsmediet i løpet av prosessen enten kontinuerlig eller intermitterende, hvorved det er meget viktig at karbonnivået opprettholdes i en tilstrekkelig lav konsentrasjon, nemlig under 0,5%
(vekt/vol) og ikke på noen måte over 2%. Eksemplene illustrerer at den vesentlige forbedringen med det forøkede utbyttet av klavulansyre ble observert da karbonkilden ble tilsatt under fermentering. Det angis at konsentrasjonen av klavulansyre i fermenteringsmediet etter 160 timer var ca. 1400 ug/ml, og dette er en bemerkelsesverdig forbedring i forhold til tidligere prosesser.
En ytterligere forbedring var også en ny fremgangsmåte for rensing av klavulansyre fra oppløsning som dens litiumsalt. For å oppnå litiumklavulanat med høyere renhet ble det tilsatt en konsentrert oppløsning av et annet litiumsalt slik som litiumklorid. Det oppnådde omkrystalliserte litiumklavulanatet kunne renses ytterligere og deretter eventuelt omdannes til andre salter slik som kaliumklavulanat, på en måte som er kjent fira den ovenfor omtalte litteratur.
Myceliet, proteiner og andre faste stoffer fjernes ved hjelp av kjente metoder slik som sentrifugering eller filtrering med en mulig forutgående behandling av fermenteringsmediet med et utvalgt aggregeringsmiddel for å aggregere myceliet og således muliggjøre en lettere filtrering. Det filtrerte fermenteringsmediet behandles ytterligere med ionevekslingsharpikser eller ved utfelling med et oppløsningsmiddel slik som aceton for å fjerne proteiner og bunnfallet separeres ved gjentatt sentrifugering og filtrering. Denne separeringen av myceliet, proteiner og andre ledsagende partikler i suspensjon som opprinnelig er til stede i fermenteringsmediet er tidskrevende og nødvendiggjør ytterligere arbeidstrinn.
Disse tidskrevende fremgangsmåter for fjerning av myceliet, proteiner og andre suspenderte partikler og etterfølgende isolering fra det oppnådde, transparente fermenteirngsmediet samt fremstilling av ren klavulansyre og salter derav ble unngått på en måte som er beskrevet i publikasjonene EP-A-0 385 552 og EP-A-0 387 178.
Hele prosessen omfatter tre trinn, dvs. rensing av fermenteirngsmediet for myceliet, proteinene og de andre faste partiklene, rensing av klavulansyren som er til stede i en uren form i mediet av et renset filtrat av Streptomyces clauvuligerus ved bruk av et av de primære, sekundære eller tertiære aminene som danner stabile, intermediære salter av klavulansyre, hvorved størstedelen av de medfølgende urenhetene i klavulansyre separeres, og som siste trinn, omdannelse av intermediære aminsalter av klavulansyre (av 85% renhet) til det ønskede alkalimetallsaltet slik som kaliumklavulanat.
Det første trinnet er beskrevet mer detaljert i EP-A-0 385 552, hvor myceliet, proteinene og de andre faste partiklene fjernes fra det vandige kulturmediet oppnådd ved fermentering av mikroorganismen Streptomyces clavuligerus, ved hjelp av en fysikalsk-kjemisk prosess med koagulering-flokkulering. Flokkene oppnådd ved denne prosessen er tilstrekkelig store og kompakte slik at en lett sedimentering og separering er mulig, hvilket best oppnås ved bruk av rullende sikter. Det oppnås derved et transparent medium som eventuelt kan konsentreres ved omvendt osmose.
På denne måten oppnås et renset fermenteirngsmedium hvorved de konvensjonelle rensemetodene slik som sentrifugering, adsorpsjon på aktivt karbon, filtrering med ko-hjelpemidler osv. har blitt unngått.
I alle kjente prosesser er det også nødvendig (hvilket er forskjellig fra den beskrevne flokkuleringsmetoden) at det rensede kulturmediet behandles ved hjelp av forskjellige prosesser med deproteinisering og ioneveksling, hvilket forårsaker betydelige totale tap i det sluttelige utbyttet av den ønskede substansen. I motsetning til velkjente metoder er de totale utbyttene i flokkuleringsmetoden opptil fra 85 til 90%.
Den beskrevne fremgangsmåten med koagulering-fiokkulering fra fermenteringsmediet av Streptomyces clavuligerus er basert på tilsetning av en uorganisk elektrolytt til kulturmediet for å øke den koagulerende virkningen, anvendelse av det uorganiske koaguleringsmidlet som initiator for koaguleringsprosessen under omrøring og ved en pH-verdi i mediet mellom 6 og 8, tilsetning av en organisk elektrolytt når fiokkulering begynner, og deretter separering av de oppnådde flokkene fra fermenteringsmediet ved bruk av rullende sikter eller filtrering og, eventuelt, når fiokkulering finner sted i nærvær av et vannublandbart oppløsningsmiddel, dekantering av fasene, separering av flokkene og, eventuelt, konsentrering av væsken ved omvendt osmose eller inndampning.
EP-A-0 562 583 beskriver bruk av salter av klavulansyre med organiske diaminer slik som N,N'-diisopropyletylendiammoniumdiklavulanat som nyttige mellomprodukter for isoleringen og fremstillingen av ren klavulansyre eller alkalimetallsalter derav slik som kaliumklavulanat fra etylacetatekstrakt oppnådd etter oppløsningsmiddelekstraksjonen av det oppnådde vandige kulturmediet dannet etter fermentering, hvori klavulansyre er til stede.
Foreliggende oppfinnelse angår således en fremgangsmåte for isolering av klavulansyre fra et vandig fermenteringsmedium, kjennetegnet ved at myceliet, en større andel av proteinet og andre suspenderte faste partikler fjernes ved mikrofiltrering.
Egnede salter ifølge foreliggende oppfinnelse er farmasøytisk akseptable alkalim*etall-og jordalkalimetallsalter slik som natrium-, kalium-, kalsium- og magnesiumsalter. Blant disse saltene er natrium- og kaliumsalt, spesielt kaliumsalt, mest egnet.
Foreliggende oppfinnelse er generelt nyttig for rensing av fermenteirngsmedier oppnådd ved hjelp av en klavulansyreproduserende mikroorganisme.
Det fremgår klart fra den ovenfor omtalte tidligere teknikk at kjente prosesser har
omfattet tidskrevende isoleringsmetoder og bare EP-A-0 385 552 beskriver en forbedret fremgangsmåte hvorved det oppnås et fullstendig transparent medium. Det er imidlertid en ulempe med denne fremgangsmåten at for oppnåelse av det ønskede formål så må det benyttes flere reagenser slik som uorganiske elektrolytter, koaguleringsmidler, organiske polyelektrolytter og at fiokkulering, sedimenteirng eller filtrering av fermenteirngsmediet krever en relativt lang produksjonstid, hvilket påvirker renheten av det ønskede produktet.
På side 2, spalte 2, linjene 22-35, angis noen muligheter for rensing av fermenteringsmediet, men likevel vil nevnte metoder lede til en betydelig minsking av utbyttet av klavulansyre. Det angis videre at bruken av flere sofistikerte teknikker i prosessen for isolering og rensing slik som ultrafiltrering og omvendt osmose ikke ville forenkle prosessen fordi anvendelsen av disse metodene vil nødvendiggjøre forutgående filtreringer på aktivt karbon eller ioniske harpikser.
I motsetning til disse angivelsene har det overraskende blitt funnet at det kan være mulig å unngå anvendelsen av flere reagenser som er benyttet i fremgangsmåten beskrevet i EP-A-0 385 552, samt andre tidskrevende måter for rensing av det vandige fermenteringsmediet, hvilke måter er beskrevet i litteraturen, når det ifølge foreliggende oppfinnelse anvendes en mikrofiltreringsmetode hvorved myceliet, en større del av proteiner (minst 80% av de som er til stede i mediet) og andre suspenderte partikler fjernes.
For dette formålet anvendes en flertrinns anordning for kontinuerlig rnikrofiltrering, som gjør det mulig å utføre fremgangsmåten med separering av myceliet og vandig filtrat i en oppholdstid som er mindre enn en halv time, hvor anordningen består av flere (fem) seriekoblede uavhengige segmenter (filtreringssløyfer). Hvert segment har sin egen sirkulasjonspumpe som sørger for den ønskede hastighet for fermenteringsmediet (5-8 m/s) gjennom kanaler av keramiske fUtreringselementer som har en porestørrrelse på 0,05 (im. I mikrofiltreirngsprosessen som finner sted ved en temperatur mellom ca, 20°C og 40°C (temperaturen bør ikke overstige 40°C), reguleres tangentielle hastigheter på en slik måte at molekylene av en molekylvekt over 30.000 bibeholdes i en fast fraksjon. På en slik måte lyktes det å fjerne fra ca. 80 til 90% av de tilstedeværende proteinene. Myceliet som ble separert i mikrofiltreringsprosessen ble også vasket med vann for å øke utbyttet av klavulansyre i det kombinerte filtratet. Ved den beskrevne fremgangsmåten for rensing av det vandige fermenteirngsmediet ved rnikrofiltrering bibeholdes over 95% av klavulansyre i den rensede vandige fasen, hvilket til og med overskrider resultatene fra flokkuleringsmetoden i EP-A-0 385 552 og representerer en ytterligere forbedring ved foreliggende fremgangsmåte.
Etter rnikrofiltrering kan filtratet eventuelt renses ved en ultrafiltreirngsprosess. Formålet med denne rensingen er å separere en større del av de gjenværende proteinurenheter og andre medfølgende urenheter som har en høyere molekylvekt enn klavulansyre. På denne måten blir uønskede urenheter fjernet på vellykket måte, og kan utfelles ved ekstraksjon med et vannublandbart organisk oppløsningsmiddel, hvorved fargingen av det vandige filtratet oppnådd etter rensing med rnikrofiltrering i det vesentlige reduseres og renheten av det ønskede produktet blir ytterligere forbedret.
I ultrafiltreringsanordningen anvendes det en polymer membran med en høy oppløsningsgrad på ca. 20.000 dalton (mellom 10.000 og 30.000 dalton). Fremgangsmåten utføres kontinuerlig slik at oppholdstidene er så korte som mulig, og over to seriekoblede ultrafiltreringsanordninger (hvilket øker separeringsselektiviteten for urenheter og klavulansyre); ved tilsetning av rent vaskevann samt ved transport i motstrøm av retentatet (vandig fase) oppnådd i ultrafiltreirngsprosessen blir tapene av klavulansyre i den vandige fasen redusert til mindre enn 5%.
Det kombinerte vandige filtratet blir deretter konsentrert i en anordning med omvendt osmose ved en temperatur på omkring romtemperatur til 1/5 av det opprinnelige volumet til oppnåelse av en konsentrert vandig fase av uren klavulansyre og deretter bin-det oppnådde konsentratet (retentat) direkte ekstrahert ved temperaturer mellom 15°C og 25°C (ekstraksjon kan også finne sted ved en temperatur under 15°C) med et vannublandbart organisk oppløsningsmiddel slik som etylacetat, i et surt medium i pH-området for mediet mellom 1 og 3, hvilket justeres ved tilsetning av organisk syre slik som svovelsyre. Foruten etylacetat kan andre vannublandbare organiske oppløsningsmidler også anvendes slik som etylacetat, metylisobutylketon eller n-butylalkohol.
Siden man ved mikrofiltreringsprosessen har lykkes i å fjerne myceliet og en større del av de tilstedeværende proteiner, er en direkte ekstraksjon av det rensede og konsentrerte vandige fermenteringsmediet med et passende vannublandbart organisk oppløsningsmiddel slik som metylacetat mulig uten bruk av tidskrevende rensemetoder som benyttet i kjente metoder som er beskrevet i den ovenfor omtalte litteratur og bruken av ytterligere reagenser slik som benyttet i koagulering-flokkuleringsmetoden for rensing av fermenteringsmediet unngås. Således, i tillegg til den ovenfor omtalte forbedring, gir foreliggende fremgangsmåte også en reduksjon i omkostningene i forbindelse med medierensemetoden. For å unngå denaturering av de gjenværende proteinene i konsentratet av vandig fase på grunn av et samvirke med det organiske oppløsningsmidlet eller svovelsyre i løpet av ekstraksjonen av den urene klavulansyren fra den vandige fasen i den organiske fasen, er det best å utføre ekstraksjonen i en serie sentrifugalekstraktorer, hvor i en av dem, nemlig en selvtømmende sentrifugalseparator, de separerte proteinene fjernes samtidig og kontinuerlig.
I det oppnådde ekstraktet av den urene klavulansyren i et vannublandbart organisk oppløsningsmiddel kan det også finnes vannoppløselige urenheter slik som forskjellige dekomponeringsprodukter av klavulansyre som er mer polare enn klavulansyre alene, og således fjernes vannoppløselige urenheter ved vasking av den kombinerte organiske fasen med vann. På denne måten oppnås et renset ekstrakt av klavulansyre i organisk fase slik som etylacetatekstrakt.
Klavulansyre kan isoleres fra den organiske fasen og renses som beskrevet i fremgangsmåten i EP-A-0 562 583. Den beste måten for isolering av klavulansyre som beskrevet i denne patentsøknaden utføres ved en reaksjon av etylacetatekstraktet av klavulansyren med N,N'-diisopropyletylendiamin ved en temperatur på omkring romtemperatur og ved en etterfølgende omdannelse av det oppnådde intermediære NjN<1->diisopropyletylendiammoniumdiklavulanat med kalium-2-etylheksanoat i en vandig isopropanoloppløsning og ved romtemperatur for oppnåelse av kaliumklavulanat, som isoleres med en høy renhet.
Det har nå blitt funnet at fremstillingen av det intermediære N,N'-diisopropyletylendiammoniumdiklavulanatet best utføres på en slik måte at det i reaksjonen mellom en vannublandbar organisk fase slik som etylacetatekstrakt av klavulansyren og N^N-diisopropyletylendiamin anvendes en organisk fase hvorfra vann fullstendig har blitt fjernet siden allerede små vannmengder kan forstyrre fremstillingen av det intermediære saltet siden det separerte saltet oppløses i vannet som er til stede i den organiske fasen og "pitched" biprodukter kan oppnås, hvilket gjør tørkingen vanskeligere.
Dersom vannfjernes fullstendig fra den organiske fasen, øker den organiske fasens eller ekstraktets stabilitet fordi det er velkjent at stabiliteten til klavulansyre i vandige oppløsninger og i et medium med sur pH-verdi i ekstraksjonsprosessen er meget dårlig. For tørking av den organiske fasen slik som etylacetatekstrakt av klavulansyre ble det derfor benyttet tørking i en rektifiseringskolonne (prinsippet med fraksjonert destillasjon) i vakuum på grunn av den dårlige stabiliteten til det intermediære saltet ved høyere temperaturer. Det er et vesentlig trekk ved forreliggende fremgangsmåte at den organiske fasen slik som etylacetat og vann danner en azeotrop som har et minimum kokepunkt og således blir den organiske fasen slik som etylacetatekstrakt fullstendig tørket på den beskrevne måten. Den organiske fasen slik som etylacetatekstrakt har således alltid et vanninnhold mindre enn 0,lvol.%, gjennomsnittlig fra 0,03 til 0,05 vol.%. Den fullstendige vannfrie organiske fasen slik som etylacetatekstrakt av klavulansyre blir så, innenfor en meget kort oppholdstid, konsentrert ved inndampning til en 1/20 av det opprinnelige volumet for etterfølgende omsetning med N,N'-diisopropyletylendiamin.
Den etterfølgende reaksjon av N,N'-diisopropyletylendiammomumdiklavulanat med kalium-2-etylheksanoat til kaliumklavulanat av høy renhet kan utføres som beskrevet i EP-A-0 562 583 og best på en slik måte som er beskrevet i eksemplene og illustrert ved de ovenfor omtalte forbedringer.
Oppfinnelsen illustreres, men begrenses ikke på noen måte, av følgende eksempler.
Eksempel 1
Kontinuerlig fremstilling av et konsentrat av etylacetatekstrakt inneholdende uren klavulansyre
Et vandig fermenteirngsmedium (10.0001) oppnådd ved fermentering av mikroorganismen Streptomyces sp. P 6621 FERM P2804 (konsentrasjon av
klavulansyre var 3580 mg/l) ble tilsatt til en 33% vandig oppløsning (5 1) av svovelsyre i en beholder (kapasitet 50 m<3>) under omrøring og avkjøling slik at mediets pH-yerdi ble holdt mellom 5,8 og 6,2. Deretter ble mediet kontinuerlig tilsatt til en mikrofiltrerings-anordning med en strømningshastighet på 1200 l/time, hvilken anordning besto av fem seriekoblede segmenter. Hvert segment hadde sin egen sirkulasjonspumpe for å sørge for at fermenteringsmediets hastighet gjennom kanalene i keramiske filterelementer med en porestørrelse på 0,05 um ble 8 m/s. Ved mikrofiltreringsprosessen, hvorved det ble passet på at temperaturen ikke overskred 40°C, ble myceliet og en større del proteiner og andre suspenderte faste partikler fjernet.
De separerte faste stoffene ble vasket med vann som hadde en strømningshastighet på 300 l/time og deretter ble det kombinerte filtratet (permeat) etter rnikrofiltrering tilsatt kontinuerlig med en strømningshastighet på 1500 l/time til en anordning med omvendt osmose, hvor permeatet ble konsentrert til 1/5 av det opprinnelige volumet.
Til konsentratet (rententat) oppnådd etter den omvendte osmosen med en strømningshastighet på 300 l/time, ble det tilsatt en 33% vandig oppløsning (4 l/time) av svovelsyre slik at mediets pH-verdi ble holdt mellom 1,5 og 2,0, deretter ble etylacetat tilsatt ved en strømningshastighet på 900 l/time for å ekstrahere et surt retentat ved romtemperatur i motstrøm i en serie av fem sentrifugalekstraktorer, idet de fremdeles gjenværende separerte proteinene samtidig ble fjernet i den andre selvtømmende sentrifugalseparatoren.
Det kombinerte etylacetatekstraktet fra serien av sentrifugalekstraktorene ble vasket i den første sentrifugalekstraktoren med demineralisert vann som hadde en strømningshastighet på 30 l/time og således ble de fremdeles gjenværende vannoppløselige urenhetene fjernet.
Etylacetatekstraktet med en strømningshastighet på 900 l/time ble tørket i vakuum ved en temperatur på 30°C i rektifiseringskolonnen slik at det ble oppnådd et vanninnhold på 0,03 vol.%, og deretter ble ekstraktet inndampet i en tynnsjiktsevaporator i vakuum ved en temperatur på 30°C til en 1/20 av det opprinnelige volumet. Det oppnådde konsentrerte etylacetatekstraktet (konsentrasjon av den urene klavulansyren var 50 g/l) med strømningshastighet på 45 l/time, ble avfarget ved kontinuerlig tilsetning av aktivt karbon (0,45 kg), blandingen ble omrørt i 30 minutter og deretter ble karbonet frafHtrert fra suspensjonen av konsentratet av etylacetatekstraktet på et trykkfUter under et nitrogentrykk på 1 bar for oppnåelse av et tørt konsentrat (451) av etylacetatekstraktet inneholdende uren klavulansyre.
Eksempel 2
Fremstilling av N,N'-dlisoporpyletylendUammcmiumdiklavulanat
Til et tørt konsentrat (45 1) av etylacetatekstrakt oppnådd i den kontinuerlige prosessen i Eksempel 1 (klavulansyreinnholdet var 50 g/l), ble N,N'-diisopropyletylendiamin (1,41) tilsatt i 5 minutter under sterk omrøring ved en temperatur på 25°C. Den oppnådde suspensjonen ble frafHtrert, de oppnådde krystallene ble resuspendert i aceton (45 1) og, ved omrøring og avkjøling av suspensjonen ved en temperatur under 10°C, ble krystaller av den ønskede substansen separert, og disse krystallene ble frafiltrert, vasket med aceton og tørket i vakuum ved en temperatur på 30°C. Krystaller av HN1-diisopropyletylendiammoniumdiklavulanat (3,3 kg; klavulansyreinnholdet var 60%) ble oppnådd.
Eksempel 3
Fremstilling av kaliumklavulanat
N,N'-diisopropyletylendiarnmoniumdiklavulanat (3,3 kg) fra Eksempel 2 ble oppløst i en isopropanol/vann-blanding (82,5 1; andelen av vann var 1,5%) og til den oppnådde
oppløsning ble det tilsatt aktivt karbon (1,5 kg) og kalium 2-etyl-heksanoat (0,5 1; 2 M) i 30 minutter under omrøring ved romtemperatur. Deretter ble karbonet og det oppnådde bunnfallet frafiltrert. Til det oppnådde filtratet (801) ble det tilsatt en oppløsning (61) av kalium-2-etylheksanoat (2 M) i isopropanol i 20 minutter under omrøring ved romtemperatur. Den oppnådde suspensjonen ble deretter omrørt under avkjøling ved en temperatur mellom 0°C og 5°C i ytterligere 2 timer, og deretter ble de separerte krystallene frafiltrert, vasket med isopropanol og aceton og tørket i vakuum ved en temperatur på 30°C. Kaliumklavulanat (2 kg; USP kvalitet, klavulansyreinnhold 80,6%, bestemt ved HPLC-metoden) ble oppnådd.
Claims (14)
1.
Fremgangsmåte for isolering av klavulansyre fra et vandig ferrnenteringsmedium, karakterisert ved at myceliet, en større andel av proteinet og andre suspenderte faste partikler fjernes ved rnikrofiltrering.
2.
Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at nevnte faste partikler fjernes ved kontinuerlig rnikrofiltrering gjennom filterelementer som har en porestørrelse på 0,05 fim.
3.
Femgangsmåte ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at det filtrerte mediet ekstraheres ved en pH-verdi mellom 1 og 3 med et vannublandbart oppløsningsmiddel ved anvendelse av en motstrøms-sentrifugalekstraktor.
4.
Fremgangsmåte ifølge krav 3, karakterisert ved at oppløsningsmidlet velges fra: etylacetat, metylacetat, metylisobutylketon og n-butanol.
5.
Fremgangsmåte ifølge krav 4, karakterisert ved at oppløsningsmidlet er etylacetat.
6.
Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at mikrofiltreringen utføres ved en pH-verdi,mellom 5,8 og 6,2.
7.
Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at mikrofiltreringen utføres ved en temperatur i området 20-40°C.
8.
Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av de foregående krav 3-7, karakterisert ved at det filtrerte mediet ekstraheres suksessivt i en serie sentrifugalekstraktorer.
9.
Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at filtreringen av det vandige fermenteringsmediet innbefatter trinnene med rnikrofiltrering fulgt av ultrafiltrering.
10.
Fremgangsmåte ifølge krav 9, karakterisert ved at ultrafiltreringen utføres kontinuerlig ved bruk av en semipermeabel membran som har en oppløsningsgrad mellom 10.000 og 30.000 dalton.
11.
Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 3-10, karakterisert ved at den innbefatter trinnet med fjerning av vann ved omvendt osmose før ekstraksjon med det vannublandbare oppløsningsmidlet.
12.
Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 3-11, karakterisert ved at den organiske fasen tørkes i vakuum ved bruk av en rektifiseringskolonne.
13.
Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 3-12, karakterisert ved at klavulansyre oppløst i det vannublandbare oppløsningsmidlet omsettes med N,N-diisopropyletylentf amin.
14.
Fremgangsmåte ifølge krav 13, karakterisert ved at Njh<T->diisopropyletylendiammoniumdiklavulanatet omsettes med kalium-2-etylheksanoat for dannelse av kaliumklavulanat.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SI9400107A SI9400107A (en) | 1994-03-02 | 1994-03-02 | New process of the isolation of clavulanic acid and its pharmaceutical salts from fermented broth of streptomyces sp.p 6621 ferm p 2804. |
PCT/SI1995/000002 WO1995023870A1 (en) | 1994-03-02 | 1995-02-23 | Novel process for the isolation of clavulanic acid and of pharmaceutically acceptable salts thereof from the fermentation broth of streptomyces sp. p 6621 ferm p 2804 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
NO963628D0 NO963628D0 (no) | 1996-08-30 |
NO963628L NO963628L (no) | 1996-10-17 |
NO318374B1 true NO318374B1 (no) | 2005-03-14 |
Family
ID=20431337
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
NO19963628A NO318374B1 (no) | 1994-03-02 | 1996-08-30 | Fremgangsmate for isolering av klavulansyre fra et vandig fermenteringsmedium |
Country Status (25)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US5780274A (no) |
EP (1) | EP0748387B1 (no) |
JP (1) | JP2948661B2 (no) |
KR (1) | KR100293172B1 (no) |
CN (1) | CN1055694C (no) |
AT (1) | ATE159549T1 (no) |
AU (1) | AU694176B2 (no) |
BG (1) | BG62213B1 (no) |
CA (1) | CA2184619A1 (no) |
CZ (1) | CZ284117B6 (no) |
DE (1) | DE69500925T2 (no) |
DK (1) | DK0748387T3 (no) |
ES (1) | ES2108572T3 (no) |
FI (1) | FI963408A (no) |
GR (1) | GR3025942T3 (no) |
HU (1) | HUT74944A (no) |
NO (1) | NO318374B1 (no) |
NZ (1) | NZ279958A (no) |
PL (1) | PL180520B1 (no) |
RO (1) | RO118760B1 (no) |
RU (1) | RU2206613C2 (no) |
SI (1) | SI9400107A (no) |
SK (1) | SK279780B6 (no) |
WO (1) | WO1995023870A1 (no) |
ZA (1) | ZA951689B (no) |
Families Citing this family (21)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AT400033B (de) | 1992-03-10 | 1995-09-25 | Biochemie Gmbh | Neues verfahren zur isolierung und reinigung von clavulansäure und zur herstellung von pharmakologisch verträglichen salzen derselben |
SI9400107A (en) * | 1994-03-02 | 1995-10-31 | Lek Tovarna Farmacevtskih | New process of the isolation of clavulanic acid and its pharmaceutical salts from fermented broth of streptomyces sp.p 6621 ferm p 2804. |
GB9500977D0 (en) | 1995-01-19 | 1995-03-08 | Smithkline Beecham Plc | Novel process |
SI9500074A (en) † | 1995-03-10 | 1996-10-31 | Lek Tovarna Farmacevtskih | Process for preparation of alkani salts of clavulanic acid. |
SI9500134B (sl) * | 1995-04-20 | 2004-04-30 | Lek, | Postopek za pripravo čistih alkalijskih soli klavulanske kisline |
GB9515809D0 (en) * | 1995-08-02 | 1995-10-04 | Smithkline Beecham Plc | Process |
SI9500265A1 (en) | 1995-08-28 | 1997-02-28 | Lek Tovarna Farmacevtskih | Process for purification of the aqueous fermented broth filtrate of streptomyces sp. p 6621 ferm p 2804 by ultrafiltration |
AT403375B (de) * | 1995-11-15 | 1998-01-26 | Biochemie Gmbh | Verfahren zur fällung von alkalisalzen der clavulansäure |
US6414142B1 (en) * | 1996-06-13 | 2002-07-02 | Smithkline Beecham Corporation | Process for preparing potassium clavulanate |
AU5551698A (en) * | 1996-11-11 | 1998-06-03 | Gist-Brocades B.V. | Process for the preparation of salts and esters of clavulanic acid |
AT404728B (de) * | 1996-11-27 | 1999-02-25 | Biochemie Gmbh | Verfahren zur herstellung von clavulansäure-aminsalzen |
WO1998042858A1 (en) * | 1997-03-24 | 1998-10-01 | Cipan-Companhia Industrial Produtora De Antibióticos, S.A. | Process for the isolation of a pharmaceutically acceptable alkali metal salt of clavulanic acid |
DE69700903T2 (de) | 1997-03-24 | 2000-07-06 | Cipan Comp Ind Prod | Verfahren zur Isolierung eines pharmazeutisch verträglichen Alkalimetallsalzes der Clavulansäure |
DZ2456A1 (fr) * | 1997-04-04 | 2003-01-18 | Smithkline Beecham Plc | Procédé de préparation de sels de l'acide clavulanique. |
US6979735B1 (en) * | 1999-04-01 | 2005-12-27 | Dsm N.V. | Agglomerates by crystallization |
KR100827898B1 (ko) | 2000-05-13 | 2008-05-07 | 스미스클라인비이참피이엘시이 | 클라불란산의 염의 정제 방법 |
GB0022841D0 (en) * | 2000-09-18 | 2000-11-01 | Smithkline Beecham Plc | Process |
KR100443082B1 (ko) * | 2002-10-18 | 2004-08-04 | 삼성전자주식회사 | 반도체 장치의 트랜지스터 제조 방법 |
KR100768476B1 (ko) | 2005-11-24 | 2007-10-18 | 한국해양연구원 | 항암물질을 생산하는 방선균 스트렙토마이세스 속 균주,이의 분리방법, 이로부터 반고형 추출물을 제조하는 방법,이로부터 유래한 반고형 추출물 및 이를 이용한 항암제조성물 |
CN102838624B (zh) * | 2012-09-07 | 2014-10-29 | 安徽普朗膜技术有限公司 | 一种从发酵液中纯化克拉维酸的方法 |
CN104910194A (zh) * | 2015-05-28 | 2015-09-16 | 高希章 | 一种克拉维酸钾的制备方法及其复方制剂 |
Family Cites Families (58)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3873425A (en) * | 1971-11-19 | 1975-03-25 | Tatsuyoshi Kobayashi | Process for producing itaconic acid |
GB1508977A (en) * | 1974-04-20 | 1978-04-26 | Beecham Group Ltd | Beta-lactam antibiotic from streptomyces clavuligerus |
US4110165A (en) | 1974-04-20 | 1978-08-29 | Beecham Group Limited | Process for the production of clavulanic acid |
NZ177159A (en) * | 1974-04-20 | 1978-03-06 | Beecham Group Ltd | Clavulanic acid, salts, esters and preparation thereof from streptomyces clavuligerus: pharmaceutical compositions |
US4140764A (en) * | 1974-12-18 | 1979-02-20 | Beecham Group Limited | β-Lactamase inhibitors and process for their preparation |
US4144242A (en) | 1975-02-07 | 1979-03-13 | Glaxo Laboratories Limited | Process for the purification of clavulanic acid |
US4148880A (en) * | 1975-08-13 | 1979-04-10 | Pfizer Inc. | Mixture of antibiotics produced by a species of actinoplanes |
GB1563103A (en) | 1975-10-13 | 1980-03-19 | Beecham Group Ltd | Process for the preparation of clavulanic acid |
GB1578739A (en) * | 1976-07-23 | 1980-11-05 | Beecham Group Ltd | Amine salts of clavulanic acid methods for their preparation and compositions containing them |
JPS55162993A (en) * | 1979-06-07 | 1980-12-18 | Sanraku Inc | Preparation of culavulanic acid |
US4454069A (en) | 1979-08-24 | 1984-06-12 | Beecham Group Limited | Clavulanic acid salts and their preparation from the tertiary butyl amine salt |
DE2948607A1 (de) | 1979-12-03 | 1981-06-11 | Chemische Fabrik Dr. Meyer-Castens & Co Nfg., 2000 Hamburg | Verfahren zur herstellung eines emulgators auf lecithinbasis |
JPS5791196A (en) | 1980-11-27 | 1982-06-07 | Takeda Chem Ind Ltd | Separation of inosine, guanosine or their mixture from cell bodies and high polymeric substances |
DE3146190A1 (de) | 1981-11-21 | 1983-06-16 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Isolierung von chemisch instabilen antibiotika aus fermentationsloesungen |
JPS6070092A (ja) * | 1983-09-26 | 1985-04-20 | Ajinomoto Co Inc | グルタミン酸発酵液からのグルタミン酸結晶の取得法 |
US4911847A (en) | 1983-12-20 | 1990-03-27 | Membrex, Inc. | Process for controlling the permeate composition in a rotary filtration device |
NZ213963A (en) | 1984-10-27 | 1989-01-06 | Antibioticos Sa | Production of clavulanic acid |
GB8521516D0 (en) | 1985-08-29 | 1985-10-02 | Beecham Group Plc | Compounds |
IT1221982B (it) * | 1987-07-08 | 1990-08-31 | Mini Ricerca Scient Tecnolog | Antibiotici ab 006 e processo per la loro produzione |
DE3730868A1 (de) * | 1987-09-15 | 1989-03-23 | Henkel Kgaa | Verfahren zur abtrennung von biotechnisch hergestellten wertstoffen aus einer fermenterbruehe durch querstrom-mikro- und/oder ultrafiltration |
GB8823706D0 (en) * | 1988-10-10 | 1988-11-16 | Alcan Int Ltd | Microfilter device |
ES2010144A6 (es) * | 1989-03-01 | 1989-10-16 | Pharma Mar S A Pharmar | Un procedimiento de floculacion-coagulacion de caldos de fermentacion de streptomyces sp. que permite la obtencion directa de liquidos completamente transparentes. |
ES2010143A6 (es) * | 1989-03-01 | 1989-10-16 | Pharma Mar S A Pharmar | Un nuevo procedimiento de obtencion del acido z(2r,5r)-3-(2-hiadroxietiliden)-7- oxo-4-oxa-1-azabiciclo(3,2,0) -heptano-2-carboxilico y de sales estares farmaceutiacamente aceptables del mismo,a partir de caldos de fermentacion de streptomyces, sp. |
US5024937A (en) | 1989-04-06 | 1991-06-18 | Dow Corning Corporation | Method for processing aqueous fermentation broths |
EP0431679B1 (en) * | 1989-12-05 | 1994-10-19 | Merck & Co. Inc. | Method of stabilizing recombinant hepatitis B virus surface proteins from yeast |
DE4005132A1 (de) | 1990-02-17 | 1991-08-22 | Akzo Gmbh | Verfahren zum herstellen von hohlfadenstapeln |
US5240600A (en) | 1990-07-03 | 1993-08-31 | International Environmental Systems, Inc., Usa | Water and wastewater treatment system |
JP3021562B2 (ja) * | 1990-07-16 | 2000-03-15 | ダイセル化学工業株式会社 | ナイシンの製造方法 |
US5073263A (en) | 1990-09-21 | 1991-12-17 | Fagundes Carlos A | Method and article for restraining extrusion of feed spacers and circumferential expansion in spiral filtration modules |
US5268283A (en) * | 1990-10-05 | 1993-12-07 | Miles Inc. | Method for the production of detergent builder formulations utilizing spray granulated citric acid and salts thereof |
DE4031854A1 (de) * | 1990-10-08 | 1992-04-09 | Basf Ag | Mikroorganismus und verfahren zur gewinnung von anthranilsaeure |
JP2615272B2 (ja) * | 1991-03-22 | 1997-05-28 | 日本碍子株式会社 | 蛋白質溶液中の蛋白有価物の回収方法 |
US5470356A (en) | 1991-10-11 | 1995-11-28 | Meszaros; Laszlo A. | Sulfur dye compositions and their production |
AT399155B (de) * | 1992-03-26 | 1995-03-27 | Lek Tovarna Farmacevtskih | Neue alkylendiammonium-diclavulanat-derivate, verfahren zu deren herstellung sowie deren verwendung |
SI9300296B (sl) * | 1992-06-11 | 1998-06-30 | Smithkline Beecham P.L.C. | Postopek in intermedianti za pripravo klavulanske kisline |
GB9222841D0 (en) | 1992-10-31 | 1992-12-16 | Smithkline Beecham Plc | Novel process |
SI9200139A (en) * | 1992-07-08 | 1994-03-31 | Lek Tovarna Farmacevtskih | New inclusion complex of clavulanic acid with hydrophylyc and hydropholyc beta-cyclodextrin derivates for production of them |
KR100200239B1 (ko) * | 1992-10-21 | 1999-06-15 | 김충환 | 클라불란산 칼륨염의 제조방법 |
EP1262564A3 (en) | 1993-01-07 | 2004-03-31 | Sequenom, Inc. | Dna sequencing by mass spectrometry |
GB9305565D0 (en) | 1993-03-18 | 1993-05-05 | Smithkline Beecham Plc | Novel compounds and processes |
US5741903A (en) | 1993-03-26 | 1998-04-21 | Gist-Brocades N.V. | Diamine salts for purification of clavulanic acid |
CA2135671A1 (en) * | 1993-03-26 | 1994-10-13 | Pieter G. Weber | Diamine salts of clavulanic acid |
US5760218A (en) | 1993-03-26 | 1998-06-02 | Gist-Brocades N.V. | Diamine salts of clavulanic acid |
US5470481A (en) | 1993-10-13 | 1995-11-28 | Modell Environmental Corporation | Method and apparatus for recovering wash water from pulp and paper mill effluent |
WO1995011295A1 (en) | 1993-10-22 | 1995-04-27 | Gist-Brocades N.V. | An improved process to recover an aqueous fermentation broth |
GB9401969D0 (en) | 1994-02-02 | 1994-03-30 | Smithkline Beecham Plc | Process |
AT400846B (de) | 1994-02-25 | 1996-03-25 | Fermic S A De C V | Verfahren zur gewinnung und reinigung von alkalimetallsalzen der clavulansäure |
SI9400107A (en) * | 1994-03-02 | 1995-10-31 | Lek Tovarna Farmacevtskih | New process of the isolation of clavulanic acid and its pharmaceutical salts from fermented broth of streptomyces sp.p 6621 ferm p 2804. |
JPH0873227A (ja) | 1994-06-30 | 1996-03-19 | Olympus Optical Co Ltd | ガラス体の製造方法及びゲルの浸漬装置 |
US5650101A (en) | 1994-07-25 | 1997-07-22 | University Of South Florida | Lock and key micelles |
JP3617091B2 (ja) | 1994-11-30 | 2005-02-02 | 味の素株式会社 | 塩基性アミノ酸の精製方法 |
GB9426261D0 (en) | 1994-12-24 | 1995-02-22 | Spurcourt Ltd | Clavulanic acid salts |
ATE211143T1 (de) | 1995-02-25 | 2002-01-15 | Spurcourt Ltd | Clavulansäure salz |
KR100200242B1 (ko) | 1995-05-16 | 1999-06-15 | 김충환 | 클라불란산염의 제조 방법 |
GB9515809D0 (en) | 1995-08-02 | 1995-10-04 | Smithkline Beecham Plc | Process |
AT403375B (de) * | 1995-11-15 | 1998-01-26 | Biochemie Gmbh | Verfahren zur fällung von alkalisalzen der clavulansäure |
ES2101658B1 (es) | 1995-11-23 | 1998-03-01 | Antibioticos Sa | Nuevo procedimiento de produccion de acido clavulanico y sus sales. |
US5837365A (en) | 1996-04-08 | 1998-11-17 | The Penn State Research Foundation | Hydrophilic polypropylene membranes |
-
1994
- 1994-03-02 SI SI9400107A patent/SI9400107A/sl not_active IP Right Cessation
-
1995
- 1995-02-23 EP EP95909194A patent/EP0748387B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-02-23 HU HU9602351A patent/HUT74944A/hu unknown
- 1995-02-23 US US08/632,402 patent/US5780274A/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-02-23 KR KR1019960704806A patent/KR100293172B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1995-02-23 RU RU96121357/13A patent/RU2206613C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1995-02-23 RO RO96-01735A patent/RO118760B1/ro unknown
- 1995-02-23 SK SK1120-96A patent/SK279780B6/sk unknown
- 1995-02-23 CZ CZ962557A patent/CZ284117B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1995-02-23 JP JP7522554A patent/JP2948661B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1995-02-23 PL PL95316085A patent/PL180520B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1995-02-23 CA CA002184619A patent/CA2184619A1/en not_active Abandoned
- 1995-02-23 NZ NZ279958A patent/NZ279958A/en unknown
- 1995-02-23 WO PCT/SI1995/000002 patent/WO1995023870A1/en active IP Right Grant
- 1995-02-23 DE DE69500925T patent/DE69500925T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1995-02-23 CN CN95191927A patent/CN1055694C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1995-02-23 ES ES95909194T patent/ES2108572T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1995-02-23 AT AT95909194T patent/ATE159549T1/de not_active IP Right Cessation
- 1995-02-23 AU AU17241/95A patent/AU694176B2/en not_active Ceased
- 1995-02-23 DK DK95909194.3T patent/DK0748387T3/da active
- 1995-03-01 ZA ZA951689A patent/ZA951689B/xx unknown
-
1996
- 1996-08-30 NO NO19963628A patent/NO318374B1/no unknown
- 1996-09-02 FI FI963408A patent/FI963408A/fi not_active IP Right Cessation
- 1996-09-02 BG BG100816A patent/BG62213B1/bg unknown
-
1998
- 1998-01-16 GR GR980400112T patent/GR3025942T3/el unknown
- 1998-07-10 US US09/113,790 patent/US5985625A/en not_active Expired - Fee Related
-
1999
- 1999-10-08 US US09/415,483 patent/US6207428B1/en not_active Expired - Fee Related
-
2001
- 2001-01-03 US US09/754,231 patent/US6566106B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
NO318374B1 (no) | Fremgangsmate for isolering av klavulansyre fra et vandig fermenteringsmedium | |
US5994534A (en) | Process for the preparation of pharmaceutically acceptable salts of clavulanic acid | |
EP0821687B1 (en) | Preparation of clavulanate salts | |
US6127358A (en) | Isolation of clavulanic acid from fermentation broth by ultrafiltration | |
ES2224392T5 (es) | Proceso mejorado para la produccion fermentativa de penicilina. | |
EP0941229B1 (en) | Purification of fermented clavulanic acid | |
US20010029038A1 (en) | Purification of fermented clavulanic acid |