NO317305B1 - Krystall av diuridintetrafosfat eller salter derav, og fremgangsmate for fremstilling av samme og fremgangsmate for fremstilling av nevnte forbindelse - Google Patents
Krystall av diuridintetrafosfat eller salter derav, og fremgangsmate for fremstilling av samme og fremgangsmate for fremstilling av nevnte forbindelse Download PDFInfo
- Publication number
- NO317305B1 NO317305B1 NO20011634A NO20011634A NO317305B1 NO 317305 B1 NO317305 B1 NO 317305B1 NO 20011634 A NO20011634 A NO 20011634A NO 20011634 A NO20011634 A NO 20011634A NO 317305 B1 NO317305 B1 NO 317305B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- uridine
- salt
- crystals
- ump
- tetraphosphate
- Prior art date
Links
- 239000013078 crystal Substances 0.000 title claims abstract description 78
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 title claims abstract description 49
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 16
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title description 5
- VBGNEGYAPSWNQQ-VWDXAFRGSA-N 1-[(2R,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]pyrimidine-2,4-dione [hydroxy(phosphonooxy)phosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound OC[C@H]1O[C@H]([C@H](O)[C@@H]1O)n1ccc(=O)[nH]c1=O.OC[C@H]1O[C@H]([C@H](O)[C@@H]1O)n1ccc(=O)[nH]c1=O.OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O VBGNEGYAPSWNQQ-VWDXAFRGSA-N 0.000 title 1
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 23
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 19
- 239000002585 base Substances 0.000 claims abstract description 17
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims abstract description 14
- 150000001447 alkali salts Chemical class 0.000 claims abstract description 13
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims abstract description 5
- YDHWWBZFRZWVHO-UHFFFAOYSA-H [oxido-[oxido(phosphonatooxy)phosphoryl]oxyphosphoryl] phosphate Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O YDHWWBZFRZWVHO-UHFFFAOYSA-H 0.000 claims abstract 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 31
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- DJJCXFVJDGTHFX-UHFFFAOYSA-N Uridinemonophosphate Natural products OC1C(O)C(COP(O)(O)=O)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- BHIIGRBMZRSDRI-UHFFFAOYSA-N [chloro(phenoxy)phosphoryl]oxybenzene Chemical compound C=1C=CC=CC=1OP(=O)(Cl)OC1=CC=CC=C1 BHIIGRBMZRSDRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- DJJCXFVJDGTHFX-ZAKLUEHWSA-N uridine-5'-monophosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](COP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-ZAKLUEHWSA-N 0.000 claims description 15
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 claims description 14
- PGAVKCOVUIYSFO-XVFCMESISA-N UTP Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 PGAVKCOVUIYSFO-XVFCMESISA-N 0.000 claims description 10
- PGAVKCOVUIYSFO-UHFFFAOYSA-N uridine-triphosphate Natural products OC1C(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 PGAVKCOVUIYSFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- XCCTYIAWTASOJW-UHFFFAOYSA-N UDP-Glc Natural products OC1C(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(O)=O)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 XCCTYIAWTASOJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- XCCTYIAWTASOJW-XVFCMESISA-N Uridine-5'-Diphosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 XCCTYIAWTASOJW-XVFCMESISA-N 0.000 claims description 9
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 9
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 claims description 8
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 8
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 6
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 claims description 5
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 abstract description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 5
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 abstract description 3
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 abstract description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 2
- ASMQGLCHMVWBQR-UHFFFAOYSA-M diphenyl phosphate Chemical compound C=1C=CC=CC=1OP(=O)([O-])OC1=CC=CC=C1 ASMQGLCHMVWBQR-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 37
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 30
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 21
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 20
- 239000000047 product Substances 0.000 description 18
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 12
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N tributylamine Chemical compound CCCCN(CCCC)CCCC IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 150000004689 octahydrates Chemical class 0.000 description 9
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 8
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical class CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-N diphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(O)=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 6
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 5
- -1 alkali metal salts Chemical class 0.000 description 5
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 5
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 4
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- OISVCGZHLKNMSJ-UHFFFAOYSA-N 2,6-dimethylpyridine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=N1 OISVCGZHLKNMSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910002483 Cu Ka Inorganic materials 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- SBVYRQFJZOKNGO-XVFCMESISA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(2,4-dioxopyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [hydroxy(phosphonooxy)phosphoryl] hydrogen phosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 SBVYRQFJZOKNGO-XVFCMESISA-N 0.000 description 3
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 3
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 3
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 3
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 229940048084 pyrophosphate Drugs 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 3
- CYSGHNMQYZDMIA-UHFFFAOYSA-N 1,3-Dimethyl-2-imidazolidinon Chemical compound CN1CCN(C)C1=O CYSGHNMQYZDMIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JYYNAJVZFGKDEQ-UHFFFAOYSA-N 2,4-Dimethylpyridine Chemical compound CC1=CC=NC(C)=C1 JYYNAJVZFGKDEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 2
- 229920000388 Polyphosphate Polymers 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- 150000004292 cyclic ethers Chemical class 0.000 description 2
- 239000003172 expectorant agent Substances 0.000 description 2
- 230000003419 expectorant effect Effects 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- GNOIPBMMFNIUFM-UHFFFAOYSA-N hexamethylphosphoric triamide Chemical compound CN(C)P(=O)(N(C)C)N(C)C GNOIPBMMFNIUFM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 2
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 230000000865 phosphorylative effect Effects 0.000 description 2
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 2
- 239000001205 polyphosphate Substances 0.000 description 2
- 235000011176 polyphosphates Nutrition 0.000 description 2
- 239000012048 reactive intermediate Substances 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 150000004685 tetrahydrates Chemical class 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- BMVXCPBXGZKUPN-UHFFFAOYSA-N 1-hexanamine Chemical class CCCCCCN BMVXCPBXGZKUPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XWKFPIODWVPXLX-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-5-methylpyridine Natural products CC1=CC=C(C)N=C1 XWKFPIODWVPXLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TXXYYOUBDOAQDT-UHFFFAOYSA-N 4-nitro-1-(phenylmethoxymethyl)imidazole Chemical compound C1=NC([N+](=O)[O-])=CN1COCC1=CC=CC=C1 TXXYYOUBDOAQDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004925 Acrylic resin Substances 0.000 description 1
- 229920000178 Acrylic resin Polymers 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 238000011210 chromatographic step Methods 0.000 description 1
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- JQVDAXLFBXTEQA-UHFFFAOYSA-N dibutylamine Chemical class CCCCNCCCC JQVDAXLFBXTEQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001177 diphosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 1
- WJFREWBMJPXLBS-UHFFFAOYSA-N n,n-dibutylbutan-1-amine;phosphono dihydrogen phosphate Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(O)=O.CCCCN(CCCC)CCCC WJFREWBMJPXLBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 125000005270 trialkylamine group Chemical group 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/06—Pyrimidine radicals
- C07H19/10—Pyrimidine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/10—Expectorants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
- C07H1/06—Separation; Purification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
- C07H21/02—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with ribosyl as saccharide radical
Description
Foreliggende oppfinnelse vedrører stabile krystaller av P\ P<4->di(uridin-5'-)-tetrafosfat (U2P4) eller et salt derav som er egnet som virkestoff i en ekspektorant eller et terapeutisk middel ved lungebetennelse; en fremgangsmåte for fremstilling av krystallene og en fremgangsmåte for effektiv fremstilling av U2P4 eller et salt derav.
Et tetranatriumsalt av P<1>, F^-difuridin-S^Hetrafosfat (U2P4-4Na) representert ved følgende formel (I):
har en ekspektorat-induserende virkning og er en forbindelse som forventes utviklet som ekspektorant eller et terapeutisk middel for lungebetennelse (for eksempel US-patent 5.789.391, 5.763.447 og 5.635.160).
Hittil har ikke U2P4 kunnet oppnås i krystallform og har bare vært fremstillet i form av et lyofilisert produkt (se Eksempel 1 i WO 99/05155). U2P4 produsert etter konvensjonelle metoder har i alminnelighet en så lav renhet som 90% og inneholder biprodukter. Eksempler på biprodukter er nukleosid-5'-(poly)fosfater som uridin-5'-tetrafosfat (UP4), uridin-5'-trifosfat (UTP), uridin-5'-difosfat (UDP) og uridin-5'-monofosfat (UMP); og dinukleosid-polyfosfater, så som P<1>, P<4->di(uridin-5'-)-trifosfat (U2P3) og P<1>,P<4->di(uridin-5'-)-difosfat (U2P2)- Særlig er det vanskelig å separere nukleosid-5'-(poly)-fosfater som UTP fra U2P4, og høyrenset U2P4 har bare vært produsert med store vanskeligheter gjennom en konvensjonell rensemetode; dvs. ionebytterkromatografi (WO 99/05155, Biochimica & Biophysica Acta, 438, (1976) 304-309).
Ovennevnte rensede og lyofiliserte produkt har ulemper, som for eksempel høy hygroskopisitet. Fremstilling av et legemiddel fra U2P4 må derfor foretas i et spesialapparat, hvor fuktighet omhyggelig kontrolleres. Selv etter fremstilling av legemidlet må produktet omsluttes tett. Siden legemidlet har en meget kort lagringstid som følge av dårlig stabilitet av det lyofiliserte preparat, har det vært ønskelig å komme frem til høyrensede og stabile U2P4-krystaller.
U2P4 syntetiseres fra uridin-5'-monofosfat (UMP) ved å benytte et aktiveringsmiddel, så som difenylfosforokloridat (DPC) og et fosforyleringsmiddel, så som et pyrofosfat (PPi). En konvensjonell fremgangsmåte gir imidlertid et lavt synteseutbytte; dvs. så lavt som ca. 10 vekt% (Eksempel 4B i WO 99/05155), og kan aldri tjene som noen praktisk fremgangsmåte. Utvikling av en fremgangsmåte for fremstilling av U2P4 i høyt utbytte og i stor skala, har således også vært et ønske.
I betraktning av ovennevnte er det et formål med foreliggende oppfinnelse å tilveiebringe stabile krystaller av U2P4 eller et salt derav. Et annet formål med oppfinnelsen er å tilveiebringe en fremgangsmåte for fremstilling av krystallene. Enda et annet formål med oppfinnelsen er å tilveiebringe en fremgangsmåte for effektiv fremstilling av U2P4 i stor skala.
Beskrivelse av oppfinnelsen
Oppfinnerne har foretatt omfattende studier over en fremgangsmåte for rensing av U2P4 og en fremgangsmåte for syntetisering av U2P4 fra UMP. Oppfinnerne har funnet at U2P4 som er renset ved anionbytterkromatografi og kromatografi ved bruk av aktivkull (aktivkull-kromatografi) lett kan krystalliseres, og at anvendelsen av bestemte reaksjonsbetingelser har den effekt at den drastisk øker utbyttet av U2P4 ved syntesen av U2P4 eller et salt derav, fra UMP som tjener som utgangsmateriale og under bruk av DPC og PPi. Oppfinnelsen er oppnådd på grunnlag av disse funn.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer således krystaller av P<1>, P<4->di(uridin-5'-)-tetrafosfat eller et salt derav.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også krystaller av P<1>, P<4->di(uridin-5'-)-tetrafosfat-tetranatriumsalt som har en krystallstruktur som ved røntgendiffraksjon under bruk av Cu-Ka-bestråling oppviser karakteristiske topper i nærheten av diffraksjonsvinklene (29) på 5,9,11,5,12,4,15,4,17,2,18,0,19,8 og 20,5 (°).
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også krystaller av P<1>, P<4->di(uridin-5'-)-tetrafosfat-tetranatriumsalt som har en krystallstruktur som i et IR-absorpsjonsspektrum oppviser karakteristiske topper ved bølgelengden nær 1690,1277, 1233, 1146, 1116 og 890 (cm'<1>).
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også en fremgangsmåte for fremstilling av krystaller av P<1>, P<4->di(uridin-5'-)-tetrafosfat eller et salt derav, som omfatter rensing av et rått P<1>, P<4->di(uridin-5'-)-tetrafosfat eller et salt derav, gjennom anionbytter-kromatografi og aktivkull-kromatografi og tilsetning av et hydrofilt organisk løsningsmiddel til en løsning av renset P<1>, P<4->di(uridin-5'-)-tetrafosfat eller et salt derav, for derved å utfelle krystaller.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også en fremgangsmåte for fremstilling av P<1>, P<4->di(uridin-5'-)-tetrafosfat eller et salt derav, fra uridin-5-monofosfat (UMP) som tjener som et utgangsmateriale, og ved å benytte difenylfosforokloridat (DPC) og et pyrofosfat (PPi) som omfatter minst ett av følgende behandlingstrinn: (a) tilsetning av UMP-difenylfosfat (UMP-DPP) i avdelte porsjoner under
et reaksjonstrinn mellom UMP-DPP og et PPi-organisk alkalisalt;
(b) et reaksjonstrinn mellom UMP-DPP og et PPi-organisk alkalisalt i
nærvær av en base; og
(c) ytterligere behandling av det syntetiserte U2P4 med et alkali.
Kort beskrivelse av tegningene
Fig. 1 viser et røntgendiffraksjonsspektrum av krystallinsk U2P4-4Na-tetrahydrat krystallisert fra etanolløsning. Fig. 2 viser et røntgendiffraksjonsspektrum av krystallinsk U2<p>4-4Na-oktahydrat krystallisert fra etanolløsning. Fig. 3 viser et røntgendiffraksjonsspektrum av U2P4 oppnådd ved lyofilisering. Fig. 4 er et fotografi som viser krystallformen av krystallinsk U2P4-4Na-oktahydrat krystallisert fra etanolløsning. Fotografiet ble tatt under et polarisasjonsmikroskop (forstørrelse: 440, hvor 1 cm i bildet tilsvarer 23 ^m. Fig. 5 viser et IR-absorpsjonsspektrum av krystallinsk U2P4-4Na-oktahydrat krystallisert fra etanolløsning. Fig. 6 viser et IR-absorpsjonsspektrum av U2P4 oppnådd ved lyofilisering. Fig. 7 viser et røntgendiffraksjonsspektrum av krystallinsk U2<p>4-4Na-oktahydrat krystallisert fra metanolløsning.
Krystallene av U2P4 eller et salt derav i henhold til foreliggende oppfinnelse oppnås gjennom rensing av rått U2P4 eller et salt derav, ved bruk av spesifikke anordninger og tilsetning av et hydrofilt organisk løsningsmiddel til en løsning av renset U2P4 eller et salt derav for derved å bunnfelle det oppløste stoff som krystaller. Foreliggende oppfinnelse vil i det følgende bli beskrevet med henblikk på (1) rensing av U2P4 eller et salt derav og (2) krystallisasjon av U2P4 eller et salt derav.
(1) Rensing av U2P4 eller et salt derav
U2P4 eller et salt derav kan renses ved anionbytterkromatografi og aktivkull-kromatografi foretatt i kombinasjon. Selv om de to kromatografiteknikkene kan foretas i vilkårlig rekkefølge, går anionbytterkromatografi fortrinnsvis forut for aktivkull-kromatografi med det siktemål å forbedre renheten av U2P4.
En styren- eller akryl-harpiks kan benyttes som en anionbytterharpiks for ovennevnte kromatografiteknikker. Eksempler på harpikser som kan benyttes er sterkt basiske anionbytterharpikser, som for eksempel AMBERLITE IRA 402 (Rohm & Haas Co.), DIAION PA-3 og DIAION SA-11A (Mitsubishi Chemical Co. Ltd.), og svakt basiske anionbytterharpikser, som for eksempel AMBERLITE IRA 67 (Rohm & Haas Co.) og DIAION WA-30 (Mitsubishi Chemical Co.)
Aktivkullet kan være i form av aktivkuil av'kromatografikvalitet, som er knust eller formet til partikler og kan innbefatte kommersielt tilgjengelige produkter (for eksempel fra Wako Pure Chemical Industries, Ltd. og Futamura Kagaku Kogyo).
Kromatografi kan foretas satsvis eller ved å benytte en kolonne. Når det foretas kolonnekromatografi kan det benyttes en vandig sur løsning eller en blanding av denne med et salt som har høyere ionestyrke, så som natriumklorid, som eluent for anionbytterkromatografi; og vann eller en vandig løsning av alkali som for eksempel natriumhydroksyd kan benyttes som eluent ved aktivkull-kolonnekromatografi. Det kan foretas en forutgående test i liten skala for nøyaktig å bestemme konsentrasjonen av hver eluent innen området fra 0,001 M til 10M.
(2) Krystallisasjon av U2P4 eller et salt derav
U2P4 eller et salt derav krystalliseres ved tilsetning av et hydrofilt organisk løsningsmiddel til en løsning som inneholder det således rensede U2P4 eller et salt derav.
Eksempler på hydrofile organiske løsningsmidler som kan benyttes er alkoholer som har seks eller færre karbonatomer, så som metanol og etanol; ketoner så som aceton; etere så som dioksan; nitriler så som acetonitril; og amider så som dimetylformamid. Av disse er alkoholer, spesielt etanol, særlig foretrukket.
Nærmere bestemt behandles eventuelt en løsning av det derved rensede U2P4 eller et salt derav, eller en oppslemming oppnådd gjennom konsentrering av løsningen slik at pH justeres til 6-9, hvorpå et hydrofilt organisk løsningsmiddel tilsettes til løsningen eller oppslemmingen ved 60°C eller mindre for derved å bunnfelle det oppløste stoff som stabile L^-krystaller.
De derved oppnådde U2P4-krystallene ifølge foreliggende oppfinnelse inneholder (1) U2P4 i en mengde på 95% eller mer og (2) andre homologe forbindelser i en mengde på 5% eller mindre.
I henhold til foreliggende oppfinnelse innbefatter andre homologe forbindelser nukleosid-5'-(poly)fosfater, så som UP4, UTP, UDP og UMP; og dinukleosid-polyfosfater, så som U2P3 og U2P2.
Mer foretrukket inneholder U2<p>4-krystaller (1) U2P4 i en mengde på 97% eller mer, (2) UDP i en mengde på 1% eller mindre og (3) UTP i en mengde på 1% eller mindre. Særlig foretrukket inneholder U2<p>4-krystaller (1) U2P4 i en mengde på 98% eller mer, (2) UDP i en mengde på 0,5% eller mindre og (3) UTP i en mengde på 0,5% eller mindre.
Slike høyrensede U2P4~krystaller kan ha form av et salt, hydrat eller hydratsalt. Eksempler på saltene er farmasøytisk akseptable salter, så som alkalimetall-salter, som for eksempel natriumsalter og kaliumsalter; jordalkalimetallsalter, så som kalsiumsalter og magnesiumsalter; samt ammoniumsalter. U2P4 kan være substituert med 1-4 metallatomer for å danne et salt.
Ovennevnte hydrat kan omfatte 3-8 vannmolekyler som er bundet til eller adhererer til ett U2P4-molekyl, og ovennevnte hydratsalt kan omfatte 3-8 vannmolekyler som er bundet til eller adhererer til ett molekyl av et alkalimetallsalt av U2P4.
Eksempler på foretrukne U2P4-krystaller er U2P4-4Na-krystaller og hydrater derav. U2P4-4Na-krystallene viser karakteristiske topper ved røntgendiffraksjon ved bruk av Cu-Ka-bestråling i nærheten av diffraksjonsvinklene (20) på 5,9,11,5, 12,4, 15,4,17,2,18,0,19,8 og 20,5(°) (feilområde ± 0,1°) og oppviser karakteristiske topper i et IR-absorpsjonsspektrum ved bølgelengder nær 1690, 1277,1233,1146,1116 og 890 (cm-<1>) (feilområde ± 2 cm"<1>). U2P4-4Na-krystallene er dessuten lette å håndtere og bemerkelsesverdig anvendelige sammenlignet med konvensjonelle lyofiliserte produkter, siden krystallene er stabile under høy temperatur og høye fuktighetsbetingelser, og krystallenes vanninnhold stabiliseres ved 5-15 vekt% for derved å undertrykke ytterligere hygroskopisitet.
Som beskrevet ovenfor inneholder de derved oppnådde U2P4-4Na-krystallene ifølge foreliggende oppfinnelse (1) U2P4 i en mengde på 95% eller mer og (2) andre homologe forbindelser i en mengde på 5% eller mindre. Dessuten er, som beskrevet ovenfor, eksempler på de foretrukne U2P4-krystaller slike krystaller som inneholder (1) U2P4 i en mengde på 97% eller mer, (2) UDP i en mengde på 1% eller mindre og (3) UTP i en mengde på 1% eller mindre. Særlig foretrukket inneholder U2P4-krystaller (1) U2P4 i en mengde på 98% eller mer, (2) UDP i en mengde på 0,5% eller mindre og (3) UTP i en mengde på 0,5% eller mindre.
Krystallene av U2P4 eller et salt derav ifølge foreliggende oppfinnelse inkluderer dessuten tautomerer av disse.
Krystallene av U2P4 eller et salt derav ifølge foreliggende oppfinnelse tørkes eventuelt ved hjelp av en konvensjonell metode, så som tørking under redusert
trykk, tørking under luftstrøm eller tørking ved oppvarming, og anbringes deretter i en beholder (f. eks. flaske, pose, boks, ampulle). Pakking i beholderen kan foretas slik at beholderen er åpen, lukket, lufttett eller forseglet. Den åpne tilstand er ikke å foretrekke med henblikk på bibehold av lagringsstabilitet av krystallene.
I det følgende vil det bli beskrevet en effektiv fremgangsmåte for syntetisering av U2P4.
Konvensjonelt har U2P4 eller et salt derav hovedsakelig vært syntetisert ved å benytte uridin-5'-monofosfat (UMP) som utgangsmateriale og ved å benytte et aktiveringsmiddel som difenylfosforokloridat (DPC) og et fosforyleringsmiddel så som et pyrofosfat (PPi). Nærmere bestemt tilsettes DPC og tributylamin til et tributylaminsalt av UMP, for derved å frembringe UMP-difenylfosfat (UMP-DPP) som tjener som et reaktivt mellomprodukt som omsettes med tributylamin-pyrofosfat (TBA-PPi), for derved å oppnå U2P4 eller et salt derav, i et utbytte på ca. 9,6% (Eksempel 4B i WO 99/05155).
Fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse kjennetegnes ved at minst ett av følgende behandlingstrinn foretas: (a) tilsetning av UMP-DPP i avdelte porsjoner under et konvensjonelt reaksjonstrinn av UMP-DPP med et PPi-organisk alkalisalt; (b) omsetning av UMP-DPP med et PPi-organisk alkalisalt i nærvær av en base; og (c) ytterligere behandling av det syntetiserte U2P4 med et alkali. To eller flere av ovennevnte behandlingstrinn kan kombineres.
Trinnet "(a) tilsetning av UMP-DDP i avdelte porsjoner" refererer seg til tilsetning av UMP-DPP, som må benyttes i en molmengde på minst den dobbelte av den for et PPi-organisk alkalisalt, i flere porsjoner og ikke som en enkelt porsjon. For eksempel omsettes et PPi-organisk alkalisalt med en ekvimolar mengde UMP-DPP, hvorpå trinnet gjentas. Selv om det ikke legges noen bestemt begrensning på antall porsjoner av UMP-DPP, er 2-3 porsjoner å foretrekke med henblikk på økning av utbyttet.
Eksempler på de PPi-organiske alkalisaltene er et heksylaminsalt, et dibutylaminsalt, et trietylaminsalt og et tributylaminsalt. Ved omsetning med UMP-DPP kan det PPi-organiske alkalisalt løses i et løsningsmiddel. Eksempler på løsningsmidlene er amider, så som DMF, DMAC og formamid; cykliske etere så som dioksan og tetrahydrofuran; ketoner så som aceton; og dimetylimidazolidinon, heksametylfosforsyretriamid, dimetylsulfoksyd, acetonitril eller en blanding av to eller flere av disse. Deretter tilsettes UMP-DPP til løsningen, hvorpå blandingen får reagere ved romtemperatur i fra ca. 30 minutter til 5 timer.
Trinnet "(b) omsetning av UMP-DPP med et PPi-organisk alkalisalt i nærvær av en base" refererer seg til en reaksjon foretatt i nærvær av en base. Eksempler på basene er pyridinbaser så som pyridin, 2,6-lutidin, 2,4-lutidin, y,(3,y-pikolin, 2,4-drmetylaminopyridin og y.B.y -kollidin, hvorav pyridin er særlig foretrukket. Et basisk løsningsmiddel for reaksjonen inkluderes også i de basene som benyttes ifølge foreliggende oppfinnelse. Konsentrasjonen av basen er ikke spesielt begrenset. Basen tilsettes fortrinnsvis i en mengde på 6 ekv., mer foretrukket 18 ekv. eller mer, beregnet på UMP.
Videre refererer trinnet" (c) ytterligere behandling av det syntetiserte U2P4 med et alkali" seg til kjøling av en væske inneholdende syntetisert U2P4, med vann og behandling av blandingen med en løsning av et organisk eller uorganisk alkali, så som natriumhydroksyd, ammoniakk, kaliumhydroksyd, pyridin, trietylamin eller natriumkarbonat. Konvensjonelt renses den avkjølte væske som sådan, direkte. Behandlingen med et alkali muliggjør imidlertid forbedring av utbyttet av U2P4 sammenlignet med den konvensjonelle metode.
Ved behandling med et alkali avkjøles en væske som inneholder syntetisert U2P4, med vann, hvorpå blandingen tilsettes et alkali til pH ca. 8-13, fortrinnsvis 10-12. Blandingen får deretter reagere ved romtemperatur i fra ca. 10 minutter til 5 timer.
UMP-DPP kan syntetiseres fra UMP ved en konvensjonell metode. For eksempel kan det løses et UMP-trialkylaminsalt, så som et UMP-tributylaminsalt, fremstillet etter en konvensjonell metode, i et løsningsmiddel. Eksempler på løsningsmidlene er amider som DMF og dimetylacetamid (DMAC); cykliske etere som dioksan og tetrahydrofuran; ketoner så som aceton; og dimetylimidazolidinon, heksametylfosforsyretriamid eller en blanding derav. Deretter tilsettes DPC og om nødvendig, et trialkylamin, til løsningen, hvorpå blandingen får reagere ved romtemperatur i fra ca. 30 minutter til 5 timer, for derved å syntetisere UMP-DPP som tjener som et reaktivt mellomprodukt.
Eksempler
Foreliggende oppfinnelse vil i det følgende bli beskrevet mer detaljert ved hjelp av eksempler.
Eksempel 1 Syntese av U2P4 eller et salt derav
(1) Effekt av en base
DMAC (8 mL) ble tilsatt til et dehydratisert uridin-5'-monofosfat-tributylaminsalt (UMP-TBA) (6,2 mmol), og DMP (1,7 mL) ble under omrøring dråpevis tilsatt til blandingen. Den derved oppnådde blanding ble omsatt ved romtemperatur i 1 time for å danne UMP-DPP, hvoretter TBA (7,6 mL) ble tilsatt til reaksjonsblandingen som ble omrørt i ytterligere 10 minutter. I mellomtiden ble dehydratisert TEA-PPi (3,0 mmol) løst i pyridin (1,7 mL), og den derved fremstilte løsning tilsatt til UMP-DPP-reaksjonsblandingen. Deretter ble blandingen omrørt ved romtemperatur i 3 timer, hvorpå vann ble tilsatt til blandingen for å stanse reaksjonen. Den oppnådde reaksjonsblanding ble analysert ved HPLC (ved 262 nm) som viste at det ønskede U2P4 ble oppnådd i et utbytte på 18,3%.
Som det fremgår av resultatet kan U2P4, når UMP-DPP omsettes med TEA-PPi i nærvær av en base (pyridin), syntetiseres i ca. det dobbelte utbytte av det som oppnås gjennom en konvensjonell metode. v
(2) Effekt av en kombinert anvendelse av base og alkalibehandling
DMAC (8 mL) ble tilsatt til et dehydratisert uridin-5'-monofosfat-tributylaminsalt (UMP-TBA) (6,2 mmol), hvorpå DPC (1,7 mL) dråpevis ble tilsatt til blandingen under omrøring. Den derved oppnådde blanding ble omsatt ved romtemperatur i 1 time for å danne UMP-DPP, hvoretter TBA (7,6 mL) ble tilsatt til reaksjonsblandingen og blandingen omrørt i ytterligere 10 minutter. I mellomtiden ble dehydratisert TEA-PPi (3,0 mmol) løst i pyridin (1,7 mL) og den derved fremstilte løsning tilsatt til UMP-DPP-reaksjonsblandingen. Blandingen ble deretter omrørt ved romtemperatur i 3 timer, og vann ble tilsatt til blandingen for å stanse reaksjonen. Ovennevnte reaksjonsblanding ble tilsatt en 30% natriumhydroksyd-oppløsning for å justere pH til 11,0, hvorpå blandingen fikk stå over natten. Den oppnådde reaksjonsblanding ble analysert ved HPLC (ved 262 nm) som viste at det ønskede U2P4 ble oppnådd i et utbytte på 29,7%.
Som det fremgår av resultatet kan U2P4, når UMP-DPP omsettes med TEA-PPi i nærvær av en base (pyridin) og det ytterligere foretas en alkalibehandling, syntetiseres i ca. tre ganger det utbytte som oppnås gjennom en konvensjonell metode.
(3) Effekt av en base og tilsetning av UMP-DPP i flere porsjoner
Formamid (1,5 mL) og pyridin (1,5 mL) ble tilsatt til et trietylaminsalt av dehydratisert pyrofosforsyre (TEA-PPi) (6 mmol), og blandingen ble omrørt i en beholder. I en annen beholder ble DMAC (4,3 mL), dioksan (4,8 mL) og tributylamin (TBA) (5,8 mL) tilsatt til et dehydratisert uridin-5'-monofosfat-tributylaminsalt (UMP-TBA) (12 mmol) og blandingen omrørt. Deretter ble DPC (2,5 mL) dråpevis tilsatt til blandingen, og den derved oppnådde blanding ble omrørt videre ved romtemperatur i 1 time for derved å danne UMP-DPP. Halvparten av UMP-DPP-reaksjonsblandingen ble dråpevis tilsatt beholderen inneholdende TEA-PPi, og reaksjonen fikk fortsette ved romtemperatur i 1 time. Deretter ble pyridin (1,5 mL) tilsatt til blandingen, hvorpå resten av UMP-DPP-reaksjonsblandingen dråpevis ble tilsatt til beholderen. Den derved oppnådde reaksjonsblanding ble videre omsatt ved romtemperatur i 1 time, og vann tilsatt til blandingen for å stanse reaksjonen. Den oppnådde reaksjonsblanding ble analysert ved HPLC (ved 262 nm) som viste at det ønskede U2P4 ble oppnådd i et utbytte på 29,5%.
Som det fremgår av resultatet kan U2P4, når UMP-DPP tilsettes i to porsjoner og UMP-DPP omsettes med TEA-PPi i nærvær av en base (pyridin), fremstilles i ca. tre ganger det utbytte som oppnås gjennom en konvensjonell metode. Som det også fremgår av resultatet fører tilsetning av UMP-DPP i to porsjoner til et utbytte på 29,5%, som er ca. 1,6 ganger det utbyttet som ble oppnådd under (1) ovenfor (18,3%).
(4) Effekt av alkalibehandling
Formamid (1,5 mL) og pyridin (1,5 mL) ble tilsatt til et trietylaminsait av dehydratisert pyrofosforsyre (TEA-PPi) (6 mmol), og blandingen ble omrørt i en beholder. I en annen beholder ble DMAC (4,3 mL), dioksan (4,8 mL) og tributylamin (TBA) (5,8 mL) tilsatt til et dehydratisert uridin-5'-monofosfat-tributylaminsalt (UMP-TBA) (12 mmol) og blandingen omrørt. Deretter ble DPC (2,5 mL) dråpevis tilsatt til blandingen, og den derved oppnådde blanding ble omrørt videre ved romtemperatur i 1 time for derved å danne UMP-DPP. Halvparten av UMP-DPP-reaksjonsblandingen ble dråpevis tilsatt beholderen inneholdende TEA-PPi, og reaksjonen fikk fortsette ved romtemperatur i 1 time. Deretter ble pyridin (1,5 mL) tilsatt til blandingen, hvorpå resten av UMP-DPP-reaksjonsblandingen dråpevis ble tilsatt til beholderen. Den derved oppnådde reaksjonsblanding ble videre omsatt ved romtemperatur i 1 time, og vann tilsatt til blandingen for å stanse reaksjonen. En 30% natriumhydroksydløsning ble tilsatt til den ovenfor oppnådde reaksjonsblanding for å justere pH til 11,0, og blandingen fikk stå over natten. Den oppnådde reaksjonsblanding ble analysert ved HPLC (ved 262 nm) som viste at det ønskede U2P4 ble oppnådd i et utbytte på 32,2%.
Som det fremgår av resultatet økes utbyttet med ca. 10%; dvs, fra 29,5% til 32,2%, når det i tillegg til ovenfor beskrevne (3) foretas alkalibehandling.
Eksempel 2 Fremstilling av U2<p>4-4Na-krystaller
Formamid (10 mL) og pyridin (15 mL) ble tilsatt til et trietylaminsalt av
dehydratisert pyrofosforsyre (TEA-PPi) (40,5 mmol), og blandingen ble omrørt i en beholder. I en annen beholder ble DMAC (50 mL), dioksan (34 mL) og tributylamin (TBA) (30 mL) tilsatt til et dehydratisert uridin-5'-monofosfat-tributylaminsalt (UMP-TBA) (80 mmol) og blandingen omrørt. Deretter ble DPC (17,8 mL) dråpevis tilsatt til blandingen, og den derved oppnådde blanding ble omrørt videre ved romtemperatur i 1 time for derved å danne UMP-DPP. Halvparten av UMP-DPP-reaksjonsblandingen ble dråpevis tilsatt beholderen inneholdende TEA-PPi, og reaksjonen fikk fortsette ved romtemperatur i 1 time. Deretter ble 4-dimetylamino-pyridin (DMAP) (50 mg) og pyridin (15 mL) tilsatt til blandingen, hvorpå resten av UMP-DPP-reaksjonsblandingen dråpevis ble tilsatt til beholderen. Den derved oppnådde reaksjonsblanding ble videre omsatt ved romtemperatur i 2 timer, og vann tilsatt til blandingen for å stanse reaksjonen. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med vann til et totalvolum på 700 mL, og en natriumhydroksydløsning ble tilsatt til løsningen for å justere pH til 10. Løsningen ble konsentrert til 200 mL, og etanol (250 mL) ble under omrøring tilsatt til den konsentrerte løsningen. Løsningen fikk stå ved 4°C over natten, og supernatanten ble fjernet ved dekantering. Den derved oppnådde løsning ble fortynnet med vann til et totalvolum på 250 mL og analysert ved HPLC (ved 262 nm) som viste at det ønskede U2P4 ble oppnådd i et utbytte på 30,0%.
Den ovenfor oppnådde løsning (110 mL) ble fortynnet med vann til et totalvolum på 2000 mL, og den fortynnede løsning ble avsatt på en svak anionbytter-kolonne (AMBERLITE IRA-67) (Cl-type) (200 mL). Deretter ble kolonnen vasket med vann, og biprodukter ble eluert med 0,18M saltsyre, hvorpå det ønskede U2P4 ble eluert med en 0.005M saltsyreløsning inneholdende 0.35M NaCI (gjenvin ningsprosent: 82,7%).
En natriumhydroksydløsning ble tilsatt til det derved oppnådde eluat for å justere pH til 2,5. Deretter ble eluatet avsatt på en aktivkullkolonne (Taiko SGP), og kolonnen ble vasket med vann og eluert med en 0.05M natriumhydroksyd-løsning (gjenvinningsprosent: 84,9%).
pH av det derved oppnådde eluat ble justert til 7,6, og eluatet ble konsentrert til 38 mL. Deretter ble etanol (57 mL) tilsatt til den konsentrerte løsning
for derved å oppnå 3,1 g U2P4-4Na-krystaller (vanninnhold: 7,8%) (isolert utbytte: 18,4%).
(Fysikalske egenskaper av U2P4-4Na-krystaller).
U2P4-4Na-krystallene fremstillet i Eksempel 2, ble tørket ved 60°C ved bruk av en omtuft-tørker og underkastet instrumentell analyse. I tillegg ble et lyofilisert produkt av U2P4-4Na fremstillet på samme måte som i fremgangsmåten beskrevet i Eksempel 1 i WO 99/05155, og det derved fremstilte produkt ble sammenlignet med krystallene med hensyn til fysikalske egenskaper.
(1) Instrumentell analyse
(2) Analyse av renhet
U2P4-4Na-krystallene oppnådd i Eksempel 2 og fraksjoner inneholdende U2P4 etter rensing gjennom hvert kromatografitrinn, ble underkastet analyse av renhet ved hjelp av HPLC (high performance liquid chromatography). Resultatene er vist i Tabell 1. HPLC-betingelsene er beskrevet nedenfor.
Kolonne: HITACHIGEL #3013-N (produkt fra Hitachi Keisokuki Service) Eluent: 10% CH3CN, 0,18 M NH4CI, 0,03 M KH2P04 og 0,03 M K2HP04. Påvisningsmetode: UV-deteksjon ved 262 nm
2) Vanninnhold
U2P4-4Na-krystaller ble underkastet måling av vanninnhold ved hjelp av Karl Fischer-metoden, som viste et vanninnhold på 5-15 vekt%, som varierte i overens-stemmelse med graden av tørking. Resultatene viser at tilsynelatende tre til åtte vannmolekyler binder eller adhererer til ett U2P4-molekyl.
3) Smeltepunkt
U2P4-4Na-krystallene ble underkastet måling av smeltepunkt ved hjelp av en konvensjonell metode, som viste et dekomponeringspunkt på ca. 223°C. Dekomponeringspunktet av det lyofiliserte produkt var ca. 220°C.
4) Røntgendiffraksjon
U2P4-4Na-krystallene ble underkastet måling av røntgendiffraksjon ved bruk av et røntgendiffraksjonsapparat (modell: RINT2500V, produkt fra Rigaku Denki) under de etterfølgende betingelser. De oppnådde røntgendiffraksjonsspektra er vist i Fig. 1 og 2, og data for toppene er vist i Tabell 2 og 3.
(Målebetingelser)
Røntgenrør: Cu-Ka
Røntgenstråling: 50 kV-300 mA
Skanninghastighet: 4,0°/minutt
Skanning intervall: 0,02°
Vinkel-måleområde: 2-40°
Åpning: DS-05<0>, RS-0,15 mm, SS-0,5°
Forbehandling: oppmaling i en agatmorter
Fig. 1 og Tabell 2 viser dataene for krystaller av U2P4-4Na-tetrahydrat, og Fig. 2 og Tabell 3 viser dataene for krystaller av U2P4-4Na-oktahydrat. I tillegg er røntgendiffraksjonsspekteret av det lyofiliserte produkt vist i Fig. 3 som referanse.
5) Hygroskopisitet
U2P4-4Na-krystalier (oktahydrat) med et vanninnhold på ca. 14% fikk stå i 9 dager under følgende betingelser: a) 25°C og en relativ fuktighet på 57%; b) 25°C og en relativ fuktighet på 75%; og c) 40°C og en relativ fuktighet på 75%. Det ble ikke observert noen dekomponering eller vektendring i de tre tilfellene. Krystallene har vist seg å være stabile og ikke hygroskopiske. U2P4-4Na-krystaller (tetrahydrat) med et vanninnhold på ca. 8%, fikk stå i 9 dager under betingelsene 40°C og en relativ fuktighet på 75%. I dette tilfellet økte vanninnholdet til 14-15%. Vanninnholdet økte imidlertid ikke ytterligere, og krystallene var stabilisert.
Når derimot et lyofilisert produkt (initialt vanninnhold: ca. 1%) fikk stå i 9 dager under betingelsene 40°C og en relativ fuktighet på 75%, økte vanninnholdet gradvis, og på den 7. lagringsdag antok produktet en sørpelignende tilstand som følge av oppløsning.
6) Stabilitet
U2P4-4Na-krystaller (oktahydrat) og et lyofilisert produkt ble anbragt i respektive flasker som så ble forseglet og satt tilside i 13 dager ved 60°C (aksellerert test). Det ble ikke observert noen dekomponering av krystallene, mens en partiell dekomponering av det lyofiliserte produkt ble fastslått gjennom observasjon av en renhets-minskning av U2P4-4Na på ca. 1,4%.
7) Krystallform
Fig. 4 viser et fotografi av en typisk krystallform av U2P44Na-(oktahydrat)-krystaller.
8) IR-absorpsjonsspektra
IR-spektra av U2<p>4-4Na-krystaller (oktahydrat) og en lyofilisert produkt ble målt på vanlig måte ved bruk av et JASCO 5000 spektrofotometer. Resultatene er vist i Fig. 5 og 6. Det lyofiliserte produkt av U2P4-4Na oppviste topper ved 3416, 1702,1266, 1116,1079 og 906 (cm<1>) (Fig. 6), mens U2P44Na-krystallene oppviste topper ved 3386,1690,1277, 1233, 1146, 1116og 890 (cm-<1>)(Fig. 5).
Eksempel 3 Fremstilling av U2P4 4Na-oktahydratkrystaller
Fraksjonen inneholdende U2P4 oppnådd ved behandling med en kolonne i Eksempel 2, ble konsentrert til en oppslemming, og pH for denne justert til 7,0. Oppslemmingen ble under omrøring gradvis tilsatt metanol, og oppslemmingen ble omrørt ytterligere under avkjøling til 10°C for å bunnfelle U2P4-4Na-krystaller.
Vanninnholdet av de således oppnådde og tørkede U2P4-4Na-krystallene ble målt etter Karl Fischer-metoden for derved å bestemme at krystallene var oktahydratet. Røntgendiffraksjonsspekteret av krystallene er vist i Fig. 7 og toppdata av disse er vist i Tabell 4.
Som beskrevet ovenfor har krystallene av U2P4 eller et salt derav, oppnådd gjennom fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse, høy renhet og stabilitet og mindre hygroskopisitet enn et lyofilisert produkt, og kan således tjene som et egnet råmateriale for fremstilling av et legemiddel.
Fremgangsmåten for fremstilling av U2P4 eller et salt derav i henhold til foreliggende oppfinnelse, fører til høyt utbytte og muliggjør storskalasyntese.
Claims (14)
1. Krystaller av P1 ,P4-di(uridin-5'-)tetrafosfat eller et salt derav.
2. Krystaller ifølge krav 1, karakterisert ved at de har en renhet på minst 95%.
3. Krystaller ifølge i krav 1, karakterisert ved at de har en renhet på minst 97% og inneholder uridin-5'-trifosfat og uridin-5'-difosfat, hver i en mengde på 1 % eller mindre.
4. Fremgangsmåte for fremstilling av krystaller av P<1>,P<4->di(uridin-5'-)tetrafosfat eller et salt derav, karakterisert ved at den omfatter rensing av rått P<1>,P<4->di(uridin-5'-)tetrafosfat eller et salt derav, ved anionbytterkromatografi og aktivkull-kromatografi og tilsetning av et hydrofilt organisk løsningsmiddel til en løsning av renset P<1>,P<4->di(uridin-5'-)tetrafosfat eller et salt derav, for derved å utfelle det løste stoff som krystaller.
5. Fremgangsmåte for fremstilling av P<1>,P<4->di(uridin-5'-)tetrafosfat eller et salt derav ifølge krav 4, karakterisert ved at rensingen omfatter anionbytterkromatografi etterfulgt av aktivkull-kromatografi.
6. Fremgangsmåte for fremstilling av P1 ,P4-di(uridin-5'-)tetrafosfat eller et salt derav, fra uridin-5'-monofosfat (UMP) som tjener som utgangsmateriale, og ved anvendelse av difenylfosforokloridat (DPC) og et pyrofosfat (PPi), karakterisert ved at den omfatter minst ett av de følgende behandlingstrinn (a) til (c): (a) tilsetning av UMP-difenylfosfat (UMP-DPP) i avdelte porsjoner under et reaksjonstrinn mellom UMP-DPP og et PPi-organisk alkalisalt; (b) utførelse av et reaksjonstrinn mellom UMP-DPP og et PPi-organisk alkalisalt i nærvær av en base; og (c) ytterligere behandling av det syntetiserte U2P4 med et alkali.
7. Fremgangsmåte for fremstilling av P<1>,P<4->di(uridin-5'-)tetrafosfat eller et salt derav ifølge krav 6, karakterisert ved at den omfatter trinnene (a) til (c) som angitt i krav 6.
8. Krystaller av P<1>,P<4->di(uridin-5'-)tetrafosfat 4 Na.
9. Krystaller av P<1>,P<4->di{uridin-5'-)tetrafosfat 4 Na hydrat.
10. Krystaller ifølge krav 9, karakterisert ved at de omfatter 3-8 vannmolekyler som er bundet til eller adhererer til ett molekyl P<1>,P<4->di(uridin-5'-)tetrafosfat 4 Na.
11. Krystaller ifølge krav 9, karakterisert ved at de omfatter 4 vannmolekyler som er bundet til eller adhererer til ett molekyl P<1>,P<4->di(uridin-5'-)tetrafosfat 4 Na.
12. Krystaller ifølge krav 9, karakterisert ved at de omfatter 8 vannmolekyler som er bundet til eller adhererer til ett molekyl P<1>,P<4->di(uridin-5'-)tetrafosfat 4 Na.
13. Krystaller ifølge krav 8-12, karakterisert ved at de har en renhet på minst 95%.
14. Krystaller ifølge krav 8-12, karakterisert ved at har en renhet på minst 97% og inneholder uridin-5'-trifosfat og uridin-5'-difosfat, hver i en mengde på 1% eller mindre.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP28166398 | 1998-10-02 | ||
| JP17068199 | 1999-06-17 | ||
| PCT/JP1999/005415 WO2000020430A1 (fr) | 1998-10-02 | 1999-10-01 | Cristal de diuridine tetraphosphate ou sel correspondant et procede de fabrication |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO20011634D0 NO20011634D0 (no) | 2001-03-30 |
| NO20011634L NO20011634L (no) | 2001-05-30 |
| NO317305B1 true NO317305B1 (no) | 2004-10-04 |
Family
ID=26493605
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO20011634A NO317305B1 (no) | 1998-10-02 | 2001-03-30 | Krystall av diuridintetrafosfat eller salter derav, og fremgangsmate for fremstilling av samme og fremgangsmate for fremstilling av nevnte forbindelse |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6458946B1 (no) |
| EP (1) | EP1043329B1 (no) |
| JP (2) | JP3247685B2 (no) |
| KR (1) | KR100475008B1 (no) |
| CN (2) | CN100396692C (no) |
| AT (1) | ATE222920T1 (no) |
| AU (1) | AU747096C (no) |
| BR (2) | BRPI9917911B1 (no) |
| CA (1) | CA2345624C (no) |
| CZ (1) | CZ300402B6 (no) |
| DE (1) | DE69902624T2 (no) |
| EA (2) | EA004513B1 (no) |
| ES (1) | ES2183650T3 (no) |
| HU (1) | HU228681B1 (no) |
| IL (1) | IL142181A (no) |
| MX (1) | MXPA01003377A (no) |
| NO (1) | NO317305B1 (no) |
| NZ (1) | NZ510748A (no) |
| PL (1) | PL199434B1 (no) |
| SK (1) | SK283729B6 (no) |
| WO (1) | WO2000020430A1 (no) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7078391B2 (en) * | 1997-02-10 | 2006-07-18 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Method of treating edematous retinal disorders |
| US7223744B2 (en) * | 1997-02-10 | 2007-05-29 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical formulation comprising dinucleoside polyphosphates and salts thereof |
| US6818629B2 (en) | 1997-02-10 | 2004-11-16 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical formulation comprising P1-(2'-deoxycytidine 5'-)P4-(uridine 5'-) tetraphosphate |
| US6872710B2 (en) | 1997-07-25 | 2005-03-29 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Di(uridine 5′)-tetraphosphate and salts thereof |
| CZ303172B6 (cs) * | 1999-06-30 | 2012-05-09 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Krystalická forma P1-(2'-deoxycytidin-5'-)P4-(uridin-5'-)tetrafosfátu |
| US6867199B2 (en) | 2000-08-21 | 2005-03-15 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Dinucleoside polyphosphate compositions and their therapeutic use |
| CN100363376C (zh) * | 2006-06-12 | 2008-01-23 | 南京工业大学 | 一种5’-核苷三磷酸钠盐的结晶方法 |
| WO2017002827A1 (ja) * | 2015-06-29 | 2017-01-05 | ヤマサ醤油株式会社 | Ｐ１，ｐ４－ビス（５'－ウリジル）テトラホスフェート結晶の保管方法 |
| EP3546472B1 (en) | 2016-10-25 | 2021-06-16 | Yamasa Corporation | Method for purifying p1,p4-di(uridine 5'-)tetraphosphate |
| KR20180091689A (ko) * | 2017-11-06 | 2018-08-16 | 주식회사 종근당 | 무정형 디뉴클레오사이드 폴리포스페이트 화합물의 제조방법 |
| CN109021049B (zh) * | 2018-06-14 | 2020-12-08 | 扬子江药业集团北京海燕药业有限公司 | 一种尿苷5′-二磷酸-苯并咪唑二钠的合成方法 |
| KR20210110055A (ko) * | 2020-02-28 | 2021-09-07 | 주식회사 종근당바이오 | P1, p4-디(우리딘 5'-)테트라포스페이트 나트륨염 4 수화물 결정형 a의 제조방법 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6423694B1 (en) * | 1996-02-21 | 2002-07-23 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Method of treating otitis media with uridine triphosphates and related compounds |
| CN1229114C (zh) * | 1996-03-27 | 2005-11-30 | 印斯拜尔药品股份有限公司 | 用三磷酸尿苷和相关化合物治疗纤毛运动障碍的方法 |
| US6319908B1 (en) * | 1996-07-03 | 2001-11-20 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Method for large-scale production of di(uridine 5′-tetraphosphate) and salts thereof |
| US5763447C1 (en) * | 1996-07-23 | 2002-05-07 | Inspire Pharmaceuticals | Method of preventing or treating pneumonia in immobilized patients with uridine triphosphates and related compounds |
| JP3723227B2 (ja) * | 1997-07-25 | 2005-12-07 | インスパイアー ファーマシューティカルズ，インコーポレイティド | ジ（ウリジン５’）−テトラホスフェート及びその塩の大規模生産のための方法 |
-
1999
- 1999-10-01 US US09/582,642 patent/US6458946B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-01 HU HU0103754A patent/HU228681B1/hu unknown
- 1999-10-01 ES ES99970090T patent/ES2183650T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-01 CA CA002345624A patent/CA2345624C/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-01 CN CNB2003101209181A patent/CN100396692C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-01 CZ CZ20011028A patent/CZ300402B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1999-10-01 IL IL14218199A patent/IL142181A/xx not_active IP Right Cessation
- 1999-10-01 WO PCT/JP1999/005415 patent/WO2000020430A1/ja active IP Right Grant
- 1999-10-01 AU AU60008/99A patent/AU747096C/en not_active Expired
- 1999-10-01 CN CNB998117137A patent/CN1151166C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-01 EA EA200200695A patent/EA004513B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-10-01 EP EP99970090A patent/EP1043329B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-01 PL PL347070A patent/PL199434B1/pl unknown
- 1999-10-01 KR KR10-2001-7004083A patent/KR100475008B1/ko active IP Right Grant
- 1999-10-01 AT AT99970090T patent/ATE222920T1/de not_active IP Right Cessation
- 1999-10-01 EA EA200100407A patent/EA003167B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-10-01 NZ NZ510748A patent/NZ510748A/xx not_active IP Right Cessation
- 1999-10-01 DE DE69902624T patent/DE69902624T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-01 SK SK440-2001A patent/SK283729B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1999-10-01 BR BRPI9917911A patent/BRPI9917911B1/pt active IP Right Grant
- 1999-10-01 BR BR9914453-0A patent/BR9914453A/pt not_active Application Discontinuation
- 1999-10-01 JP JP2000574541A patent/JP3247685B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-01 MX MXPA01003377A patent/MXPA01003377A/es active IP Right Grant
-
2001
- 2001-03-30 NO NO20011634A patent/NO317305B1/no not_active IP Right Cessation
- 2001-08-06 JP JP2001237293A patent/JP3824894B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2002
- 2002-04-12 US US10/120,367 patent/US6780988B2/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO317305B1 (no) | Krystall av diuridintetrafosfat eller salter derav, og fremgangsmate for fremstilling av samme og fremgangsmate for fremstilling av nevnte forbindelse | |
| CA2376860C (en) | Dinucleotide crystals | |
| ZA200102683B (en) | Crystal of diuridine tetraphosphate or salt thereof and method for preparing the same, and method for producing said compound. | |
| JP3964809B2 (ja) | ジヌクレオチドの製造法 | |
| PL206867B1 (pl) | Sposób wytwarzania P1,P4-di(urydyno-5'-)czterofosforanu |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MK1K | Patent expired |