NO316731B1 - Fremgangsmate for fremstilling av emulsjonsformulering, emulsjon, samt anvendelse derav og fiskefôrpreparat - Google Patents

Fremgangsmate for fremstilling av emulsjonsformulering, emulsjon, samt anvendelse derav og fiskefôrpreparat Download PDF

Info

Publication number
NO316731B1
NO316731B1 NO19995802A NO995802A NO316731B1 NO 316731 B1 NO316731 B1 NO 316731B1 NO 19995802 A NO19995802 A NO 19995802A NO 995802 A NO995802 A NO 995802A NO 316731 B1 NO316731 B1 NO 316731B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
emulsion
oil
product
oil body
preparation
Prior art date
Application number
NO19995802A
Other languages
English (en)
Other versions
NO995802L (no
NO995802D0 (no
Inventor
Maurice M Moloney
Harm M Deckers
Gijs Van Rooijen
Joseph Boothe
Janis Goll
Soheil Sayed Mahmoud
Original Assignee
Sembiosys Genetics Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27489174&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=NO316731(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Sembiosys Genetics Inc filed Critical Sembiosys Genetics Inc
Publication of NO995802D0 publication Critical patent/NO995802D0/no
Publication of NO995802L publication Critical patent/NO995802L/no
Publication of NO316731B1 publication Critical patent/NO316731B1/no

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23GCOCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G3/00Sweetmeats; Confectionery; Marzipan; Coated or filled products
    • A23G3/34Sweetmeats, confectionery or marzipan; Processes for the preparation thereof
    • A23G3/36Sweetmeats, confectionery or marzipan; Processes for the preparation thereof characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
    • A23G3/48Sweetmeats, confectionery or marzipan; Processes for the preparation thereof characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing plants or parts thereof, e.g. fruits, seeds, extracts
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23DEDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS, COOKING OILS
    • A23D7/00Edible oil or fat compositions containing an aqueous phase, e.g. margarines
    • A23D7/001Spread compositions
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23DEDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS, COOKING OILS
    • A23D7/00Edible oil or fat compositions containing an aqueous phase, e.g. margarines
    • A23D7/003Compositions other than spreads
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23GCOCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G3/00Sweetmeats; Confectionery; Marzipan; Coated or filled products
    • A23G3/34Sweetmeats, confectionery or marzipan; Processes for the preparation thereof
    • A23G3/343Products for covering, coating, finishing, decorating
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23GCOCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G3/00Sweetmeats; Confectionery; Marzipan; Coated or filled products
    • A23G3/34Sweetmeats, confectionery or marzipan; Processes for the preparation thereof
    • A23G3/346Finished or semi-finished products in the form of powders, paste or liquids
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23GCOCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G3/00Sweetmeats; Confectionery; Marzipan; Coated or filled products
    • A23G3/34Sweetmeats, confectionery or marzipan; Processes for the preparation thereof
    • A23G3/36Sweetmeats, confectionery or marzipan; Processes for the preparation thereof characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
    • A23G3/40Sweetmeats, confectionery or marzipan; Processes for the preparation thereof characterised by the composition containing organic or inorganic compounds characterised by the fats used
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23GCOCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G4/00Chewing gum
    • A23G4/06Chewing gum characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
    • A23G4/066Chewing gum characterised by the composition containing organic or inorganic compounds characterised by the fat used
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23GCOCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G4/00Chewing gum
    • A23G4/06Chewing gum characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
    • A23G4/068Chewing gum characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing plants or parts thereof, e.g. fruits, seeds, extracts
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23GCOCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G9/00Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor
    • A23G9/32Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
    • A23G9/327Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds characterised by the fatty product used, e.g. fat, fatty acid, fatty alcohol, their esters, lecithin, glycerides
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23GCOCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G9/00Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor
    • A23G9/32Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
    • A23G9/42Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing plants or parts thereof, e.g. fruits, seeds, extracts
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K20/00Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10Organic substances
    • A23K20/168Steroids
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K20/00Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10Organic substances
    • A23K20/184Hormones
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K50/00Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/80Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for aquatic animals, e.g. fish, crustaceans or molluscs
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L23/00Soups; Sauces; Preparation or treatment thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L27/00Spices; Flavouring agents or condiments; Artificial sweetening agents; Table salts; Dietetic salt substitutes; Preparation or treatment thereof
    • A23L27/10Natural spices, flavouring agents or condiments; Extracts thereof
    • A23L27/18Mustard
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L27/00Spices; Flavouring agents or condiments; Artificial sweetening agents; Table salts; Dietetic salt substitutes; Preparation or treatment thereof
    • A23L27/60Salad dressings; Mayonnaise; Ketchup
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L9/00Puddings; Cream substitutes; Preparation or treatment thereof
    • A23L9/10Puddings; Dry powder puddings
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23PSHAPING OR WORKING OF FOODSTUFFS, NOT FULLY COVERED BY A SINGLE OTHER SUBCLASS
    • A23P20/00Coating of foodstuffs; Coatings therefor; Making laminated, multi-layered, stuffed or hollow foodstuffs
    • A23P20/10Coating with edible coatings, e.g. with oils or fats
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/23Apiaceae or Umbelliferae (Carrot family), e.g. dill, chervil, coriander or cumin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/28Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/28Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
    • A61K36/286Carthamus (distaff thistle)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/31Brassicaceae or Cruciferae (Mustard family), e.g. broccoli, cabbage or kohlrabi
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/42Cucurbitaceae (Cucumber family)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/47Euphorbiaceae (Spurge family), e.g. Ricinus (castorbean)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/889Arecaceae, Palmae or Palmaceae (Palm family), e.g. date or coconut palm or palmetto
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/899Poaceae or Gramineae (Grass family), e.g. bamboo, corn or sugar cane
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/44Oils, fats or waxes according to two or more groups of A61K47/02-A61K47/42; Natural or modified natural oils, fats or waxes, e.g. castor oil, polyethoxylated castor oil, montan wax, lignite, shellac, rosin, beeswax or lanolin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/02Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by special physical form
    • A61K8/04Dispersions; Emulsions
    • A61K8/06Emulsions
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/92Oils, fats or waxes; Derivatives thereof, e.g. hydrogenation products thereof
    • A61K8/922Oils, fats or waxes; Derivatives thereof, e.g. hydrogenation products thereof of vegetable origin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0014Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10Dispersions; Emulsions
    • A61K9/107Emulsions ; Emulsion preconcentrates; Micelles
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q1/00Make-up preparations; Body powders; Preparations for removing make-up
    • A61Q1/02Preparations containing skin colorants, e.g. pigments
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q1/00Make-up preparations; Body powders; Preparations for removing make-up
    • A61Q1/02Preparations containing skin colorants, e.g. pigments
    • A61Q1/04Preparations containing skin colorants, e.g. pigments for lips
    • A61Q1/06Lipsticks
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q1/00Make-up preparations; Body powders; Preparations for removing make-up
    • A61Q1/02Preparations containing skin colorants, e.g. pigments
    • A61Q1/08Preparations containing skin colorants, e.g. pigments for cheeks, e.g. rouge
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q1/00Make-up preparations; Body powders; Preparations for removing make-up
    • A61Q1/02Preparations containing skin colorants, e.g. pigments
    • A61Q1/10Preparations containing skin colorants, e.g. pigments for eyes, e.g. eyeliner, mascara
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q11/00Preparations for care of the teeth, of the oral cavity or of dentures; Dentifrices, e.g. toothpastes; Mouth rinses
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q13/00Formulations or additives for perfume preparations
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q17/00Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
    • A61Q17/04Topical preparations for affording protection against sunlight or other radiation; Topical sun tanning preparations
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00Preparations for care of the skin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00Preparations for care of the skin
    • A61Q19/10Washing or bathing preparations
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q5/00Preparations for care of the hair
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C09DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09DCOATING COMPOSITIONS, e.g. PAINTS, VARNISHES OR LACQUERS; FILLING PASTES; CHEMICAL PAINT OR INK REMOVERS; INKS; CORRECTING FLUIDS; WOODSTAINS; PASTES OR SOLIDS FOR COLOURING OR PRINTING; USE OF MATERIALS THEREFOR
    • C09D5/00Coating compositions, e.g. paints, varnishes or lacquers, characterised by their physical nature or the effects produced; Filling pastes
    • C09D5/02Emulsion paints including aerosols
    • C09D5/022Emulsions, e.g. oil in water
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C11ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11BPRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
    • C11B1/00Production of fats or fatty oils from raw materials
    • C11B1/10Production of fats or fatty oils from raw materials by extracting
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23GCOCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G2200/00COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF containing organic compounds, e.g. synthetic flavouring agents
    • A23G2200/08COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF containing organic compounds, e.g. synthetic flavouring agents containing cocoa fat if specifically mentioned or containing products of cocoa fat or containing other fats, e.g. fatty acid, fatty alcohol, their esters, lecithin, paraffins
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23GCOCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G2200/00COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF containing organic compounds, e.g. synthetic flavouring agents
    • A23G2200/14COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF containing organic compounds, e.g. synthetic flavouring agents containing fruits, nuts, e.g. almonds, seeds, plants, plant extracts, essential oils
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/80Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
    • Y02A40/81Aquaculture, e.g. of fish
    • Y02A40/818Alternative feeds for fish, e.g. in aquacultures
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S426/00Food or edible material: processes, compositions, and products
    • Y10S426/805Pet food for dog, cat, bird, or fish

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Marine Sciences & Fisheries (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Colloid Chemistry (AREA)
  • Fats And Perfumes (AREA)

Description

Oppfinnelsesområde
Foreliggende opprinnelse vedrører fremgangsmåte for fremstilling av emulsjonsformulering, emulsjon, samt anvendelse derav og fiskeforpreparat. Emulsjonene kan anvendes i diverse husholdningsblandinger og industriblandinger.
Bakgrunn for oppfinnelsen
Emulsjoner er blandinger som fremstilles fra to gjensidig uløselige komponenter. Det er mulig å frembringe blandinger av homogent makroskopisk utseende fra disse komponentene gjennom riktig valg og håndtering av blandingsbetingelsene. Den vanligste type av emulsjoner er de hvor det benyttes en vandig komponent og en lipofil komponent og som på dette felt omtales som olje-i-vann- og vann-i-olje-emulsjoner. I olje-i-vann-emulsjoner er den lipofile fase dispergert i den vandige fase, mens i vann-i-olje-emulsjoner er den vandige fase dispergert i den lipofile fase. Vanlig kjente eksempler på emulsjonsbaserte formuleringer for husholdningsformål er majones, margarin, iskrem, kosmetika og maling. Emulsjonssystemer har også utstrakt anvendelse innen industrien, som f.eks. i den farma-søytiske og agrokjemiske industri, hvor det ofte er ønskelig å formulere virkestoffer i emulsjoner.
Generelt fremstilles emulsjoner i nærvær av en rekke andre substanser for å oppnå en ønskelig balanse mellom emulgering, viskositet, stabilitet og utseende. For eksempel fordrer formuleringen av emulsjoner vanligvis minst ett, og ofte en kombinasjon av flere, emulgeringsmidler. Disse midlene letter dispergeringen av en ikke-blandbar fase inn i en annen og bidrar til å stabilisere emulsjonen. Emulgeringsmidler omfatter et stort utvalg syntetiske og naturlige komponenter. For eksempel benyttes monoglycerider og kjemiske derivater derav, i stor utstrekning som emulgeringsmidler for næringsmidler, som f.eks. margariner og bake/stékeprodukter. Et eksempel på et naturlig emulgeringsmiddel er lecitin, et fosfolipid som forekommer i eggeplomme, som er vanlig anvendt ved fremstillingen av majones. Det er også mulig å inneslutte virksomme ingredienser i emulsjoner. Dette er spesielt ønskelig for blandinger som omfatter virkemidler som er vanskelige å løse i vandige løsningsmidler, som f.eks. visse vitaminer og nukleotider. Aktive ingredienser formuleres også som emulsjoner for å øke deres stabilitet. Ett eksempel på et emulsjonssystem som omfatter et farmasøytisk middel, er dokumentert i US-patent 5.602.183, som beskriver en sårtilhelingsblanding som omfatter et antiinflammatorisk middel. De nevnte eksempler utgjør bare noen få av de myriader av komponenter som inngår i formuleringer av kjente emulsjoner. En omfattende oversikt over emulgeringsmidler og deres anvendelser finnes hos Becher, P. Encyclopedia of Emulsion Technology, Dekker Ed. 1983.
I frøene til oljevekster, som innbefatter økonomisk viktige nyttevekster som soyabønne, raps, solsikke og palme, lagres den vann-uløselige oljefraksjon i diskrete subcellulære strukturer som går under forskjellige navn som oljelegemer, oleosomer, lipidlegemer eller sfærosomer (Huang 1992, Ann. Rev. Plant Mol. Biol. 43:177-200). Foruten blandinger av oljer (triacylglycerider) som kjemisk er definert som glycerolestere av fettsyrer, omfatter oljelegemer fosfolipider og en rekke assosierte proteiner, betegnet oljelegemeproteiner. Ut fra strukturen ansees oljelegemer å være en triacylglyceridmatriks innkapslet av et monolag av fosfolipider som det er innleiret oljelegemeproteiner i (Huang, 1992, Ann. Rev. Plant Mol. Biol. 43:177-200). Frøoljen som forekommer i oljelegemefraksjonen av plantearter, er en blanding av forskjellige triacylglycerider, hvor den nøyaktige sammensetning avhenger av den planteart som oljen skriver seg fra. Det er gjennom en kombinasjon av klassisk formering og genetisk manipulering blitt mulig å manipulere oljeprofilen av frø og utvide det naturlig tilgjengelige repertoar av planteolje-blandinger. Angående en oversikt over pågående arbeid på dette området, se Designer Oil Crops/Breeding, Processing and Biotechnology, D.J. Murphy, red. 1994, VCH Verlagsgesellschaft, Weinheim, Tyskland.
Plantefrøoljer inngår i en rekke industrielle anvendelser, særlig innen næringsmiddel-, detergent- og kosmetikkindustrien. For å oppnå de planteoljene som benyttes på disse felt, knuses eller presses frø og raffineres deretter ved å benytte prosesser som ekstraksjon med organiske løsningsmidler, degummiering, nøytralisering, bleking og filtrering. Vandig ekstraksjon av oljevekstfrø er også beskrevet (for eksempel Embong & Jelen, 1977, Can. Inst. Food Sei. Technol. J. 10:239-243). Siden formålet med de tidligere kjente prosesser er å oppnå ren olje, mister oljelegemene i løpet av disse produksjonsprosesser deres strukturelle integritet. Tidligere kjente emulsjoner formulert fra planteoljer, omfatter i alminnelighet ikke intakte oljelegemer.
Selv om mineraloljebaserte produkter for mange anvendelser dominerer markedet, er olje avledet fra plantekilder, og fossile kilder i direkte konkurranse på andre anvendelsesområder. Laurinoljer for eksempel, som har utstrakt anvendelse innen fremstillingen av detergenter, oppnås fra mineralolje så vel som fra kokosolje og i det senere fra genetisk manipulert rapsfrø (Knauf, V.C., 1994, Fat. Sei. Tech. 96:408). Det er imidlertid for tiden økende etterspørsel etter bionedbrytbare råmaterialkilder. Emulsjoner basert på planteoljelegemer i henhold til foreliggende oppfinnelse, byr på en fordel fremfor lignende mineraloljebaserte formuleringer, ved at oljefraksjonen skriver seg fra en fornybar og miljømessig vennlig kilde.
US-patent 5.683.710 og 5.613.583 omtaler emulsjoner som omfatter lipidvesikler fra oljeholdige planter. Emulsjonene omtalt i disse patentene fremstilles fra relativt rå frøekstrakter og omfatter mange frøkomponenter, inklusivt glykosylerte og ikke-glykosylerte proteiner. Det er en ulempe ved de emulsjoner som disse patenter vedrører, at de omfatter kontaminerende frøkomponenter som gir emulsjonene en rekke uønskede egenskaper som kan innbefatte allergenitet og uønsket lukt, smak, farve og organoleptiske karakteristika. Som følge av nærværet av frø-kontaminanter, har fremstillingene av lipidvesikler omtalt i disse patentene, begrensede anvendelser.
SAMMENFATNING AV OPPFINNELSEN
Foreliggende oppfinnelse vedrører følgelig fremgangsmåte for fremstilling av en emulsjonsformulering, kjennetegnet ved at den omfatter: 1) oppnåelse av oljelegemer fra en celle; 2) vasking av oljelegemene for å oppnå et vasket oljelegemepreparat som omfatter intakte oljelegemer av tilnærmet ensartet størrelse, form og tetthet; og
3) formulering av det vaskede oljelegemepreparat til en emulsjon.
Foreliggende oppfinnelse vedrører også nye emulsjonsformuleringer som inneholder oljelegemer. Det er også beskrevet emulsjon, kjennetegnet ved at den omfatter et vasket oljelegeme-preparat omfattende intakte oljelegemer av tilnærmet ensartet størrelse, form og tetthet. Emulsjonsformuleringene ifølge oppfinnelsen kan oppnås i ugiftige former og næringsmiddelkvaliteter. I tillegg kan emulsjonsformuleringene med fordel fremstilles fra et oljelegemepreparat som har kremaktig tekstur og således lett kan benyttes innen en rekke husholdnings- og industrianvendelser. Oppfinnerne av foreliggende oppfinnelse har funnet at oljelegemefraksjonen av levende celler er egnet for formuleringen av en rekke nye emulsjonsbaserte næringsmidler, kosmetiske, farmasøytiske og industrielle produkter. Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer således en emulsjonsformulering som omfatter vaskede oljelegemer utvunnet fra en celle.
Oppfinnelsen tilveiebringer også anvendelsen av en emulsjon fremstilt ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 19 for å fremstille et kroppspleieprodukt, et næringsmiddel- eller forprodukt, et industrielt produkt eller et farmasøytisk produkt. Det er videre beskrevet et fiskeforpreparat kjennetegnet ved at det er belagt med en emulsjon ifølge et hvilket som helst av kravene 20 til 25.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer følgelig en fremgangsmåte for fremstilling av emulsjonsformuleringer som omfatter: 1) oppnåelse av oljelegemer fra en celle; 2) vasking av oljelegemene; og 3) formulering av de vaskede oljelegemer til en emulsjon.
I henhold til en foretrukket utførelsesform av oppfinnelsen oppnås den vaskede oljelegeme-tilberedning fra plantefrø, inklusivt frø som kan oppnås fra rapsfrø, soyabønne, mais og solsikke. Oppfinnelsen tilveiebringer således en fremgangsmåte for fremstilling av emulsjonsformuleringene fra plantefrø, som omfatter: (1) oppnåelse av oljelegemer fra plantefrø ved hjelp av en fremgangsmåte som
omfatter:
(a) oppmaling av plantefrø;
(b) fjerning av faststoff fra de oppmalte frø; og
(c) separering av oljelegemefasen fra den vandige fase; (2) vasking av oljelegemefasen for å oppnå et vasket oljelegemepreparat omfattende intakte oljelegemer av tilnærmet jevn størrelse, form og tetthet; og
(3) formulering av det vaskede oljelegemepreparat til en emulsjon.
I henhold til en foretrukket utførelsesform av oppfinnelsen tilsettes en flytende fase til frøene før eller etter oppmaling av frøene.
I henhold til en ytterligere foretrukket utførelsesform av oppfinnelsen omfatter formulering av emulsjonene (e) tilsetning av en flytende fase til det vaskede oljelegeme-preparat.
Emulsjonene ifølge foreliggende oppfinnelse kan inngå i et stort utvalg av anvendelser, herunder ved fremstillingen av næringsmiddel- og forprodukter, farmasøytiske produkter, produkter for personlig pleie og industriprodukter. Emulsjonsformuleringene ifølge foreliggende oppfinnelse er spesielt egnet for fremstilling av produkter av næringsmiddelkvalitet, ved at det er ugiftig, kremaktig av tekstur og bionedbrytbart.
Andre formål, fordeler og trekk ved foreliggende oppfinnelse vil fremgå gjennom vurdering av de ledsagende tegninger og den etterfølgende detaljerte beskrivelse av . oppfinnelsen.
KORT BESKRIVELSE AV TEGNINGENE
Figur 1 er en coomassieblått-farvet gel av et vasket oljelegemepreparat fra hvit sennep, raps ( Brassica napus), soyabønne, jordnøtt, squash, lin, solsikke, safflor og mais. Figur 2A-C er coomassieblått-farvede gel som viser proteinprofilene av forskjellige frøfraksjoner oppnådd fra Brassica napus (Canola) (A), solsikke (B) og mais (C). Gelene viser følgende fraksjoner (1) totalt frøprotein (TSP), (2) dekantert væskefase (DL), (3) uvaskede oljelegemer (LP1), (4) tre vaskinger med vann (LP4), (5) fire vaskinger med vann og én vask med 100 mM Na2C03 (vasket).
DETALJERT BESKRIVELSE AV OPPFINNELSEN
Som nevnt ovenfor vedrører foreliggende oppfinnelse emulsjonsformuleringer som omfatter oljelegemer fra en celle. I henhold til én utførelsesform tilveiebringer foreliggende oppfinnelse en emulsjonsformulering som omfatter vaskede oljelegemer.
I henhold til en annen utførelsesform tilveiebringer foreliggende oppfinnelse en fremgangsmåte for fremstilling av en emulsjonsformulering som omfatter: 1) oppnåelse av oljelegemer fra en celle; 2) vasking av oljelegemene; og 3) formulering av de vaskede oljelegemer til en emulsjon.
Cellen kan være en hvilken som helst celle som inneholder oljelegemer (eller strukturer som ligner oljelegemer) inklusivt planteceller, dyreceller, soppceller og bakterieceller. I henhold til en foretrukket utførelsesform av oppfinnelsen oppnås oljelegemene fra en plantecelle. Oljelegemene kan oppnås fra en plantecelle ved å ødelegge plantecellemembranen og celleveggen ved å benytte en hvilken som helst metode som frigjør cellebestanddeler uten i vesentlig grad å ødelegge oljelegemenes strukturelle integritet. Mer foretrukket oppnås oljelegemene fra plantefrø.
I henhold til en foretrukket utførelsesform av oppfinnelsen tilsettes en væskefase til frøene før eller etter oppmaling av frøene.
I henhold til en ytterligere foretrukket utførelsesform av oppfinnelsen omfatter formuleringen av emulsjonene (e) tilsetning av en flytende fase til det vaskede olj elegemepreparat.
Betegnelsen «oppmaling» betyr i denne sammenheng maling, knusing, kverning eller granulering av frøene, og disse betegnelsene kan benyttes om hverandre i denne beskrivelse. Ved denne prosess brytes frøcellene opp.
Betegnelsen «faststoffer» betyr her et hvilket som helst materiale som ikke er løselig i den vandige fase eller i oljefasen, som f.eks. frøskall.
Uttrykket «vasking av oljelegemene» betyr her en hvilken som helst prosess som fjerner cellulære kontaminanter fra oljefasen, særlig eventuelle kontaminanter som gir emulsjonsformuleringen uønskede egenskaper, så som allergene egenskaper, uønsket farve, lukt, smak eller organoleptiske karakteristika eller en eventuell annen uønsket egenskap. Eksempler på vaskemetoder er tyngdekratfbaserte separasjonsmetoder, som f.eks. sentrifugering og størrelseseksklusjons-baserte separasjonsteknikker, så som membran-ultrafiltrering og kryss-strøms mikrofiltrering. Vaskemetoder og betingelser velges i henhold til ønsket renhet av oljelegeme-preparatet.
Uttrykket «vasket oljelegemepreparat» betyr her en tilberedning av oljelegemer hvorfra en betydelig mengde cellemateriale er blitt fjernet, herunder kontaminanter som gir emulsjonsformuleringen uønskede egenskaper, så som allergene egenskaper, uønsket farve, lukt, smak eller organoleptiske karakteristika eller en eventuell annen uønsket egenskap. Fortrinnsvis inneholder det vaskede oljelegemepreparat mindre enn 10% av de andre frøproteiner.
Med «formulering av oljelegemene til en emulsjon», menes at det vaskede oljelegemepreparat om nødvendig blandes eller homogeniseres inntil det dannes en emulsjon. I henhold til en foretrukket utførelsesform tilsettes en ytterligere komponent, så som en vaskefase, og det vaskede oljelegemepreparat og væskefasen blandes inntil det oppnås en homogen blanding.
De vaskede oljelegemepreparatene er særlig egnet for formulering av emulsjoner som følge av de nedenfor skisserte fordelaktige egenskapene.
OLJELEGEMENES EGENSKAPER
Emulsjonsformuleringen ifølge foreliggende oppfinnelse omfatter intakte vaskede oljelegemer av tilnærmet jevn størrelse, fasong og tetthet. Betraktet under elektronmikroskopet viser oljelegemer seg å være mer eller mindre kuleformede strukturer (se for eksempel Murphy, D.J. & Cummins, I., 1989, Phytochemistry, 28:2063-2069; Jacks, T.J. et al., 1990, JAOCS, 67:353-361). Typiske størrelser av oljelegemer varierer fra 0,4 nm til 1,5 um (Murphy, D.J. & Cummins, I., 1989, Phytochemistry, 28:2063-2069). Ved analyse under bruk av en Malvern Size Analyzer, ble det funnet at oljelegemer i et vasket oljelegemepreparat isolert fra rapsfrø, var symmetrisk og ensartet fordelt omkring 1 nm. Ved å benytte en Malvem Size Analyzer kunne et vasket oljelegemepreparat klart skjelnes fra kommersielt tilgjengelige olje-i-vann-emulsjoner, inkusivt soyamelk, majones (Kraft Real Mayonnaise) og to kokos-melkepreparater (Tosca, Aroy-D). Den eksakte størrelse og tetthet av oljelegemene avhenger i det minste delvis av den nøyaktige proteir^fosfolipidVtriacylglycerid-sammensetning som er tilstede. Fremstilling av vaskede oljelegemer i henhold til foreliggende oppfinnelse resulterer ikke i vesentlig endring i oljelegemenes fasong når de i elektronmikroskop sammenlignes med de som forekommer i hele frø.
Etter oppbrytning av en celle som inneholder oljelegemer, kan oljelegeme-fraksjonen hurtig og enkelt separeres fra vandige løsninger, siden oljelegemerfaksjonen i vandige løsninger vil flyte opp etter at de er utsatt for sentrifugalkraft. I løsninger hvor tettheten av oljelegemerfaksjonen er større enn løsningsmidlets, så som i 95% etanol, vil oljelegemene sedimentere under de samme betingelsene. Oljelegemefraksjonen kan også separeres fra den vandige fraksjon gjennom størrelseseksklusjons-baserte separasjonsteknikker, så som membranfiltrering, noe som kan være fordelaktig ved at det oppnås oljelegemer med en mer jevn størrelse.
Oljelegemene som forekommer i de vaskede oljelegemepreparatene ifølge foreliggende oppfinnelse, er resistente mot eksponering for sterke syrer og baser, inklusivt langvarig eksponering for sure betingelser i det minste så lave som pH 2 og alkaliske betingelser i det minste så høye som pH 10. Ved eksponering for pH 12, ble det observert et svakt tap av olje, hvilket tydet på et tap av integriteten av oljelegemets struktur. Ekstraksjon med forskjellige organiske løsningsmidler, inklusivt metanol, etanol, heksan, isopropylalkohol og etylacetat, ødelegger dessuten ikke, eller bare svakt, oljelegemene i det vaskede oljelegemepreparat. Oljelegemene i det vaskede oljelegemepreparat viste seg også å motstå blanding med det anioniske overflateaktive middel, natriumdodecylsulfat (SDS), det kationiske overflateaktive middel heksadecyltrimetylbromid, samt Tween-80, et ikke-ionisk overflateaktivt middel. Koking av det vaskede oljelegemepreparat i nærvær av SDS viste seg å resultere i det minste delvis, i disintegrasjon av oljelegemets struktur. Oljelegemer i det vaskede oljelegemepreparat er stabilt ved 2 timers opphold ved opptil minst 100°C. En langsom frysing og tining av vaskede oljelegemepreparater resulterte i en endring i deres fysikalske utseende karakterisert ved dannelse av klumper i stedet for en homogen emulsjon. Klumping av oljelegemer etter en frysing-opptining kunne også i stor grad forhindres ved enten a) bråfrysing i flytende nitrogen i stedet for langsom frysing ved -20°C eller b) glyceroltilsetning på mer enn 5 vol% til oljelegemepreparatet før frysing. Motstandsdyktigheten mot relativt sterke kjemiske og fysikalske betingelser er et enestående karakteristikum ved oljelegemer i det vaskede oljelegemepreparat ifølge oppfinnelsen.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer emulsjonsformuleringer som omfatter oljelegemer, hvorfra en betydelig mengde av frøkontaminanter er blitt fjernet. Disse kontaminantene innbefatter proteiner, flyktige forbindelser og andre forbindelser som kan gi uønsket farve, lukt, smak, organoleptiske karakteristiska eller andre uønskede karakteristika. En rekke frøproteiner har vært rapportert å forårsake allergene reaksjoner. For eksempel rapporterer Ogawa et al., (1993, Biosci. Biotechnol. Biochem., 57:1030-1033) om allergenitet av soyaglykoproteinet P34 (alternativt omtalt som Gly m Bd 30K). Allergene reaksjoner mot raps-, hvete- og bygg-proteiner har også vært rapportert (Armentia et ai, 1993, Clin. Exp. Allergy 23:410-415; Monsalve et al., 1993, Clin. Exp. Allergy, 27:833-841). Fjerning av kontaminerende frøproteiner er således fordelaktig. Vaskebetingelsene kan velges slik at det oppnås et i det vesentlige rent oljelegemepreparat. I så fall forekommer i det vesentlige bare oljelegemets proteiner i preparatet.
For mange anvendelser ansees det også ønskelig at det oppnås et renere, bedre definert oljelegemepreparat, idet dette muliggjør mer kontroll med formuleringsprosessen av den endelige emulsjon. For at det vaskede oljelegemepreparat skal inkluderes i diverse sett av emulsjoner, er det ønskelig at flyktige forbindelser holdes på et minimum og at farven fortrinnsvis er lys eller hvit. Vasking av oljelegemepreparatet resulterer i lysere farvede preparater. Dessuten fjernes en vesentlig mengde flyktige forbindelser. Ved vaskingen fjernes også forbindelser som fremmer veksten av mikroorganismer, idet det ble registrert at et vasket oljelegemepreparat hadde lengre lagringsbestandighet enn et uvasket preparat. Andre forbindelser som fjernes ved vaskingen er glukosinilater uten næringsverdi og/eller nedbrytningsprodukter derav, samt fibrøst materiale. Ved varmebehandling til 60°C eller 80°C, ble det observert at store mengder vann forble absorbert av det vaskede oljelegemepreparat sammenlignet med et uvasket preparat. Etter avkjøling ned til romtemperatur og sentrifugering, ble det observert at det vaskede oljelegemepreparat forble stabilt, mens det i det uvaskede preparat inntrådte faseseparasjon. Med vaskede oljelegemers forbedrede stabilitet er disse å foretrekke når formuleringsprosessen innebærer varmetilførsel. Ved oppvarming til 40°C, var det vaskede oljelegemepreparat i stand til å absorbere en større mengde eksogent tilsatt vann uten at dette resulterte i faseseparasjon. Ved formulering av vandige emulsjoner er således vaskede oljelegemer å foretrekke. Evnen til å absorbere eksogent tilsatte oljer, ble også sammenlignet mellom et preparat av vaskede oljelegemer og et uvasket preparat. Større mengder eksogen olje kunne tilsettes til det vaskede oljelegemepreparat før det ble dannet en ustabil emulsjon. Dette er fordelaktig i formuleringer hvor eksogene oljer eller voks tilsettes under formuleringsprosessen, som f.eks. når det fremstilles smøremidler eller kosmetika. Ved sammenligning av viskositeten av et vasket oljelegemepreparat med et uvasket preparat, viste det seg at det vaskede preparat var mer viskøst. Et mer viskøst preparat av oljelegemer er ønskelig ved at dette eliminerer behovet for tilsetning av fortykningsmidler under formuleringsprosessen.
Det her frembragte vaskede oljelegemepreparat er således i mange henseender et uvasket preparat overlegent. Det vaskede oljelegemepreparat ifølge foreliggende oppfinnelse er et bedre definert preparat med en lengre holdbarhet og mer foretrukne farve-, lukt- og viskositetskarakteristika. Det vaskede oljelegemepreparat har også overlegne vann- og oljeabsorpsjonskarakteristika. Som følge av fjerningen av en betydelig andel frøproteiner er det dessuten mindre sannsynlig at allergene reaksjoner skal forekomme. Disse karakteirstikaene tillater anvendelse av det vaskede oljelegemepreparat ved formulering av en rekke emulsjoner benyttet i husholdningen og industrien.
De ovennevnte observasjoner ble gjort ved bruk av vaskede og uvaskede oljelegemepreparater oppnådd fra raps, og er fremstillet som mer detaljert beskrevet senere i Eksempel 2. Det antas at motstandsdyktigheten mot relativt strenge kjemiske og fysikalske betingelser vil være et kjennetegn ved oljelegemer i de vaskede oljelegemepreparatene ifølge oppfinnelsen uansett opphavskilden til oljelegemene. Det er imidlertid sannsynlig at én eller flere av de foran dokumenterte egenskaper ved rapsoljelegemer vil variere noe, avhengig av de celler hvorfra det vaskede oljelegemepreparat er oppnådd. Ikke desto mindre er det klart at foreliggende oppfinnelse er rettet mot et oljelegemepreparat som kan oppnås fira en hvilken som helst celle som omfatter oljelegemer.
I henhold til én utførelsesform av foreliggende oppfinnelse oppnås oljelegemene fra plantefrø. Forekomsten av intakte oljelegemer i emulsjonen og de beskrevne karakteristika for disse oljelegemene skiller klart emulsjonsformuleringen ifølge foreliggende oppfinnelse fra andre materialer som kan fremstilles fra plantefrø.
KILDER OG FREMSTILLING AV OLJELEGEMENE
Det vaskede oljelegemepreparat ifølge oppfinnelsen kan oppnås fra en hvilken som helst celle som inneholder oljelegemer eller oljelegeme-lignende organeller. Dette omfatter dyreceller, planteceller, soppceller, gjærceller (Leber, R, et al., 1994, Yeast 10:1421-1428), bakterieceller (Pieper-Fiirst et al., 1994, J. Bacterol. 176:4328-4337) og algeceller (Rossler, P.G., 1988, J. Physiol. (London) 24:394-400). I foretrukne utførelsesformer av oppfinnelsen oppnås oljelegemene fira en plantecelle, inklusivt celler fra pollen, sporer, frø og vegetative planteorganer, hvor oljelegemer eller oljelegeme-lignende organeller forekommer (Huang, 1992, Ann. Rev. Plant Physiol. 43:177-200). Mer foretrukket ér det at det vaskede oljelegemepreparat ifølge foreliggende oppfinnelse oppnås fra plantefrø og mest foretrukket fra gruppen av plantearter som omfatter: rapsfrø ( Brassica spp.), soya ( Glycine max), solsikke ( Helianthus annuus), oljepalme ( Elaeis guineeis), bomullsfrø ( Gossypium spp.), jordnøtt
( Arachis hypogaea), kokos ( Cocus nucifera), ricinus ( Ricinus communis), safflor ( Carthamus tinctorius), sennep ( Brassica spp. og Sinapis alba), koriander ( Coriandrum sativum), squash ( Cucurbita maxima), linfrø/lin ( Linum usitatissimum), paranøtt ( Bertholletia excelsa), jojoba ( Simmondsia chinensis) og mais ( Zea mays). Planter dyrkes og far sette frø ved anvendelse av velkjent landbruksmessig dyrkningspraksis. Etter høsting av frøene og eventuelt fjerning av materiale som stener eller frøskall (avskalling) for eksempel ved sikting eller rensing, og eventuelt tørking av frøene, behandles frøene deretter ved mekanisk pressing, oppmaling eller knusing. I henhold til en foretrukket utførelsesform tilsettes en flytende fase før oppmaling av frøene. Dette er kjent som våtmaling. Fortrinnsvis er væsken vann, men andre organiske
løsningsmidler, så som etanol, kan også benyttes. Våtmaling i oljeekstraksjonsprosesser har vært.rapportert for frø fra en rekke plantearter, inklusivt: sennep (Aguilar et ai, 1990, Journal of Texture studies 22:59-84), soya (US-patent 3.971.856; Carter et al., 1974, J. Am. Oil Chem. Soc. 51:137-141), jordnøtt (US-patent 4.025.658; US-patent 4.362.759), bomullsfrø
(Lawhon et al, 1977, J. Am. Oil Chem. Soc. 63:533-534) og kokosnøtt (Kumar et al., 1995, INFORM 6 (11); 1217-1240). Det kan også være fordelaktig å bløte frøene i et tidsrom på fra ca. 15 minutter til ca. 2 dager i en flytende fase før oppmaling. Bløting kan mykne celleveggene og lette oppmalingsprosessen. Bløtlegging over lengre tidsrom kan etterligne spiringsprosessene og resultere i visse fordelaktige endringer i sammensetningen av frøets bestanddeler. I henhold til en annen utførelsesform tilsettes den flytende fase etter at frøene er oppmalt. Dette er kjent som tørrmaling. Fortrinnsvis er den tilsatte væskefase vann.
Frøene males fortrinnsvis ved å benytte en kolloidmølle, så som MZ130 (Fryma Inc.). Ved siden av kolloidmøller kan det i henhold til den her beskrevne oppfinnelse også benyttes annet mølle- og oppmalingsutstyr som er i stand til å håndtere frømengder i industriell skala, inklusivt: avskallingsvalser, platemøller, kolloidmøller, stiftemøller, orbitalmøller, HCA-møller og homogenisatorer av industriell skala. Valget av møllen kan avhenge av kravene til frøgjennomstrømming så vel som av den anvendte frøkilde. Det er av avgjørende betydning at frøenes oljelegemer forblir intakte under oppmalingsprosessen. Driftsbetingelser som vanligvis benyttes ved oljefrøbehandling, som har tendens til å rive opp oljelegemer, er derfor uegnet forbruk forprosessen ifølge foreliggende oppfinnelse. Oppmalihgstemperaturene er fortrinnsvis mellom 10°C og 90°C, mer foretrukket mellom 26°C og 30°C, mens pH fortrinnsvis holdes mellom 2,0 og 10.
Hårde kontaminanter, så som frøskall, fibermateriale, uløste karbohydrater, samt proteiner og andre uløselige kontaminanter, fjernes fra den knuste frøfraksjonen. Separasjonen av faste kontaminanter kan oppnås ved å benytte en dekanteringssentrifuge, så som en HASCO 200 2-fase dekanteringssentrifuge eller en NX310B (Alfa Laval). Avhengig av kravene til frøgjennomstrømming, kan kapasiteten av dekanteringssentrifugen varieres ved å benytte andre modeller av dekanteringssentrifuger, så som 3-fase dekanteringsinnretninger. Driftsbetingelsene varierer med den bestemte sentrifuge som benyttes og må innrettes slik at uløselige kontaminerende materialer sedimenterer og forblir sedimentert etter dekantering. Det kan under disse betingelsene iakttas en delvis separering av oljelegemefasen og væskefasen.
Etter fjerning av uløselige kontaminanter separeres oljelegemefasen fra den vandige fase. Ifølge en foretrukket utførelsesform av oppfinnelsen benyttes en «tubular bowl» sentrifuge. I henhold til andre utførelsesformer kan det benyttes hydrocykloner, tallerkensentrifuger eller utfelling av faser under naturlig tyngdekraft eller en hvilken som helst annen tyngdekraft-basert separasjonsmetode. Det er også mulig å skille oljelegemefraksjonen fra den vandige fase ved å benytte størrelseseksklusjonsmetoder, som f.eks. membran-ultrafiltrering og kryss-strøms mikrofiltrering. I henhold til foretrukne utførelsesformer er «tubular bowl» sentrifugen en Sharples modell AS-16 (Alfa Laval) eller en AS-46 Sharples (Alfa Laval). En avgjørende parameter er størrelsen av ringdemningen som benyttes til sentrifugedriften. Ringdemninger er avtagbare ringer med en sentral sirkulær åpning som varierer, når det gjelder AS-16, fra 28 til 36 mm, og regulerer separasjonen av den vandige fase fra oljelegemefasen og således styrer renheten av den oljelegemefraksjon som oppnås. I foretrukne utførelsesformer benyttes en ringdemningstørrelse på 29 eller 30 mm når AS-16 anvendes. Den nøyaktige ringdemningstørrelse som benyttes avhenger av typen av oljefrø som benyttes, så vel som av den ønskede endelige konsistens av oljelegemepreparatet. Separasjonseffektiviteten påvirkes dessuten av strømningshastigheten. Når AS-16 benyttes, er strømningshastigheten typisk mellom 750-1000 mL/min. (ringdemningstørrelse 29) eller mellom 400-600 mL/min. (ringdemningstørrelse 30) og temperaturene holdes fortrinnsvis mellom 26°C og 30°C. Avhengig av hvilken sentrifugemodell som benyttes tilpasses strømningshastigheter og ringdemningstørrelser stik at det oppnås en optimal separasjon av oljelegemefraksjonen fra den vandige fase. Disse justeringene vil fagmannen lett innse.
Separasjonen av hårdt materiale og separasjon av den vandige fase fra oljelegemefaksjonen kan også foretas samtidig ved å benytte en tyngdekraft-basert separasjonsmetode, så som en 3-fase «tubular bowl» sentrifuge eller en dekanteringsbeholder eller en hydrocyklon eller en størrelsesekskulsjons-basert separasjonsmetode.
Blandingene oppnådd på dette prosesstrinn er i alminnelighet relativt rå og omfatter tallrike frøproteiner, som innbefatter glykosylerte og ikke-glykosylerte proteiner og andre kontaminanter, så som stivelse eller glukosinolater eller nedbrytningsprodukter av disse. Foreliggende oppfinnelse omfatter fjerningen av en betydelig andel frøkontaminanter. For å fjerne kontaminerende frømateriale vaskes det oljelegemepreparat som er oppnådd etter separasjon fra den vandige fase, minst én gang ved resuspendering av oljelegemefraksjonen og sentrifugering av den resuspenderte fraksjon. Denne prosess fører til hva som i denne sammenheng omtales som et vasket oljelegemepreparat. Antall vaskinger vil i alminnelighet avhenge av den ønskede renhet av oljelegemefraksjonen. Avhengig av de anvendte vaskebetingelser, kan det oppnås et tilnærmet rent oljelegemepreparat. I et slikt preparat vil de eneste proteiner som forekommer være oljelegemets proteiner. For å vaske oljelegemefraksjonen kan det benyttes «tubular bowl» sentrifuger eller andre sentrifuger, som f.eks. hydrocykloner eller tallerkensentrifuger. Vasking av oljelegemene kan foretas ved å benytte vann, buffersystemer, for eksempel natriumklorid i konsentrasjoner på mellom 0,01M og minst 2M, 0,1M natriumkarbonat ved høy pH (11-12), lav saltbuffer, så som 50 mM Tris HCI, pH 7,5, organiske løsningsmidler, detergenter eller annen væskefase. I foretrukne utførelsesformer foretas vaskingene ved høy pH (11-12). Væskefasen benyttet for vasking, så vel som vaskebetingelsene, så som pH og temperatur, kan varieres ut fra den type frø som benyttes. Vasking med en rekke forskjellige pH på mellom pH 2 og pH 11-12, kan være fordelaktig, idet dette vil muliggjøre trinnsvis fjerning av kontaminanter, særlig proteiner. Vaskebetingelsene velges slik at vasketrinnet resulterer i fjerning av en betydelige del av kontaminantene uten at det går på bekostning av oljelegemenes strukturelle integritet. I utførelsesformer hvor det foretas mer enn ett vasketrinn, kan vaskebetingelsene varieres for de ulike vasketrinn. SDS-gelelektroforese eller andre analytiske teknikker kan hensiktsmessig benyttes for å overvåke fjerningen av frøproteiner og andre kontaminanter etter vasking av oljelegemene. Det er ikke nødvendig å fjerne hele den vandige fase mellom vasketrinnene, og det endelige vaskede oljelegemepreparat kan suspenderes i vann, et buffersystem, for eksempel 50 mM TrisHCl, pH 7,5, eller en hvilken som helst annen væskefase, og pH kan eventuelt justeres til en hvilken som helst pH mellom pH 2 og pH 10.
Prosessen for å fremstille det vaskede oljelegemepreparat kan foretas i satsvise operasjoner eller i en kontinuerlig prosess. Særlig når det benyttes «tubular bowl» sentrifuger, opprettes et system av pumper som opererer mellom trinnene (a) og (b), (b) og (c) og (c) og (d) som gir en kontinuerlig strøm gjennom prosesseringssystemet. I en foretrukket utførelsesform er pumpene 1" M2 Wilden trykkluftdrevne doble membranpumper. I andre utførelsesformer kan det benyttes hydrauliske eller peristaltiske pumper. For å opprettholde en tilførsel av homogen konsistens til dekanteringssentrifugen og til «tubular bowl» sentrifugen, kan det tilkobles homogenisatorer, så som en IKA-homogenisator mellom separasjonstrinnene. Rørmonterte homogenisatorer kan også tilføyes mellom forskjellige sentrifuger, eller kan det benyttes størrelseseksklusjons-basert separasjonsutstyr for å vaske oljelegemepreparatene. Ringdemningstørrelser, buffersammensetninger, temperatur og pH kan variere i hvert vasketrinn fra ringdemningstørrelsen benyttet i det første separasjonstrinn.
I utførelsesformer ifølge oppfinnelsen hvor oljelegemene isoleres fra mykere vev, for eksempel mesocarp-vevet i oliven, kan teknikker som benyttes for å bryte opp cellene variere noe i forhold til de som benyttes for å bryte hårdere frø. For eksempel kan pressbaserte teknikker være å foretrekke fremfor knuseteknikker. Metodikken for å isolere oljelegemer i liten skala har vært rapportert for isolering av oljelegemer fra mesocarp-vev i oliven ( Olea europaea) og avokado ( Persea americand) (Ross et al., Plant Science, 1993, 93:203-210) og fra mikrospore-avledede embryoer av raps ( Brassica napus) (Holbrook et al., Plant Physiol., 1991,97:1051-1058).
I utførelsesformer ifølge oppfinnelsen hvor oljelegemer oppnås fra ikke-planteceller, isoleres det vaskede oljelegemepreparat etter lignende fremgangsmåter som skissert ovenfor. Metodikken for å isolere oljelegemer fra gjær er dokumentert (Ting et al., 1997, Journal Biol. Chem. 272:3699-3706).
De kjemiske og fysikalske egenskapene av oljefraksjonen kan varieres på minst to måter. For det første kan ulike plantearter inneholde oljelegemer med forskjellig oljesammensetning. For eksempel er kokosnøtt rik på laurinoljer (C12), mens erukasyreoljer (C22) er rikelige forekommende enkelte i Brassica arter. For det andre kan de relative oljemengder modifiseres i en bestemt planteart ved å anvende kjente formerings- og genetiske manipuleringsteknikker. Begge disse teknikker tar sikte på å endre den relative aktivitet av enzymer som kontrollerer de metabolismeveier som er involvert i oljesyntese. Gjennom anvendelsen av disse teknikker kan det oppnås frø med et sofistikert sett av ulike oljer. For eksempel har foredlingsforsøk resultert i utvikling av et rapsfrø med lavt erukasyreinnhold (Canola) (Bestor, T.H., 1994, Dev. Genet. 15:458) og plantelinjer med oljer med endringer i posisjoneringen og antallet dobbeltbindinger, variasjon i fettsyrekjedelengde og innføring i ønskede funksjonelle grupper som er frembragt gjennom genetisk manipulering (Topfer et ai, 1995, Science, 268:681-685). Ved å benytte lignende tilnærminger vil fagmannen være i stand til ytterligere å utvide de kilder av oljelegemer som for tiden står til disposisjon. Varierende oljeblandinger vil resultere i varierende fysikalske og kjemiske egenskaper i oljelegemene. Ved å velge oljefrø eller blandinger derav fra ulike arter eller plantelinjer som kilde for oljelegemer, kan det således oppnås et bredt repertoar av emulsjoner med forskjellige teksturer og viskositeten
FORMULERING AV EMULSJONEN
Det vaskede oljelegemepreparat kan formuleres til en emulsjon ved å benytte kjente teknikker. Fortrinnsvis tilsettes minst en ytterligere ingrediens til det vaskede
oljelegemepreparat. Den ytterligere ingrediens kan tilsettes som en løsning, suspensjon, en gel eller faststoff, og mengdene av den ytterligere ingrediens vil avhenge av formuleringen. Den ytterligere ingrediens kan etter formulering bli forbundet med oljelegemene, forbli suspendert i løsning eller danne en suspensjon som oljelegemene er dispergert i. Ingrediensene kan også penetrere fosfolipid-monolaget som omgir oljelegemet eller triacylglyceirdmatriksen. Ingredienser som kan penetrere oljelegemet omfatter oljer, voks og farvestoffet Nile Red. I en foretrukket utførelsesform er den ytterligere ingrediens en væskefase. I en ytterligere foretrukket utførelsesform er væskefasen vann. Vann kan tilsettes enten direkte eller gjennom fuktighet forbundet med en annen ingrediens. Den endelige vannmengde er ikke avgjørende bare det etter blanding dannes en stabil emulsjon. Generelt vil blandingen inneholde minst 1% vann og opp til 99% vann. I alminnelighet vil det fordres blanding for å oppnå en passende emulsjon, og det kan være nødvendig å anvende varme eller trykk.
I henhold til en annen foretrukket utførelsesform er den ytterligere ingrediens en olje eller en voks. Oljer eller voks kan fordele seg til oljelegemenes triacylglyceridmatriks og på denne måte kan lipidløselige ingredienser, så som lipidløselige vitaminer, avgis til oljelegemematriksen. Når oljer eller voks utgjør den tilsatte ingrediens, kan oljelegemene forbli suspendert i den lipofile fase eller det kan dannes dobbeltemulsjoner.
Den endelige sammensetning kan være i fast eller flytende form eller av en hvilken som helst annen ønsket viskositet. Emulsjonen kan fortykkes ved å benytte gelerende midler, så som cellulose og derivater, Carbopol og derivater, carob, karragenaner og derivater, xantangummi, sklerangummi, langkjedede alkanolamider og benton og derivater, som i alminnelighet forekommer i konsentrasjoner på mindre enn 2 vekt%.
Emulsjonen kan ytterligere omfatte overflateaktive midler for å fukte, skumme, penetrere, emulgere, solubilisere og/eller dispergere et valgt materiale. For eksempel kan det etter behov tilsettes anioniske overflateaktive midler, så som natrium-kokosmonoglyceridsulfonat, kationiske overflateaktive midler, så som lauryltrimetylammoniumklorid, cetylpyridiniurnklorid og trimetylammoniumbromid, ikke-ioniske overflateaktive midler, inklusivt pluronics og polyetylenoksyd-kondensater av alkylfenoler, samt zwitterioniske overflateaktive midler, så som derivater av alifatiske kvatemære ammonium-, fosmonium- og sulfoniumforbindelser.
Chelaterende midler som er i stand til å binde metallioner, så som vinsyre, EDTA, sitronsyre, alkalimetallcitrater, pyrofosfatsalter eller anioniske polymere polykarboksylater kan om ønskes også inkluderes i emulsjonsformuleringen.
I alminnelighet vil emulsjonsformuleringene bli behandlet slik at kontaminering med bakterier, sopp, mykoplasma, virus og lignende, eller uønskede kjemiske reaksjoner, så som oksydasjonsreaksjoner, forhindres. I foretrukne utførelsesformer oppnås dette ved tilsetning av konserveringsmidler, for eksempel natrium-métabisulfitt eller andre kjemiske tilsetninger eller ved bestråling, for eksempel ved
ioniserende bestråling, som f.eks. kobolt-60 eller cesium-137-bestråling eller ved ultrafiolett bestråling.
I tillegg kan virkestoffer tilsettes til det vaskede oljelegemepreparat. For eksempel kan kosmetiske blandinger formuleres som stabile suspensjoner ved å benytte foreliggende emulsjonsformulering, og vitaminer og fuktemidler kan inkluderes i hudkremer. En særlig fordelaktige måte som et virkestoff kan inkluderes i
emulsjoner ifølge oppfinnelsen på, er gjennom konstruksjon av oleosin-genfusjoner som utførlig beskrevet i WO 96/21029.1 korthet beskriver WO 96/21029 en fremgangsmåte for fremstilling av proteiner og peptider som fusjonsproteiner av oleosiner. Disse fusjonsproteinene dannes ved genetisk å sammenkoble genet som koder for oleosin til et gen som koder for et peptid eller protein av interesse. Ekspresjon av fusjonsgenet, for eksempel i en oljefrøplante, resulterer i syntese av et fusjonsprotein som så rettes mot oljelegemet.
Isolering av oljelegemefraksjonen resulterer i gjenvinning av fusjonsproteinet. Prinsipielt kan et hvilket som helst ønsket protein eller peptid produseres ved å benytte denne teknologi. For eksempel kan man se for seg at polar fisks frosthindrende peptider (Davies, P.L., et al., 1990, FASEB J. 4:2460-2468) produseres som oleosinfusjonsproteiner. Det vaskede oljelegemepreparat kan deretter benyttes for å fremstille iskrem, milkshake eller andre frosne materialer av næringsmiddelkvalitet med forbedrede fryseegenskaper ved å inhibere eller forhindre iskrystalldannelse. I et annet eksempel kan et terapeutisk protein produseres som en oleosinfusjon. Oljelegemene kan deretter benyttes til å formulere en ønsket suspensjon som kan være for peroralt inntak eller for lokal påføring på huden. Denne utførelsesform av foreliggende oppfinnelse er ytterligere eksemplifisert i Eksempel lii foreliggende beskrivelse, hvor det fremstilles et fiskefor (fish food) som omfatter oljelegemer omfattende en oleosin-carpe veksthormon-fusjon.
Det kan også formuleres en emulsjon med filmdannende egenskaper. En slik emulsjon danner et overtrekk når den påføres en overflate og tørkes. Et eksempel på en emulsjon hvor det påføres en oljelegemefilm, er i fiskefor, hvor oljelegemene kan påføres fiskeforet for å øke næringsverdien. En filmdannende emulsjon er særlig anvendelig i utførelsesformer av foreliggende oppfinnelse, hvor kontrollert frigjøring av et virkestoff ønskes, som f.eks. ved avlevering av farmasøytika eller flyktige forbindelser som velluktende dufter. Frigjøringstiden for virkestoffet fra en
emulsjonsfilm, som skjer under tørking, avhenger blant andre faktorer, av filmtykkelsen. Når det påføres et tykkere overtrekk, vil en lengre tørketid resultere i en langsommere frigjøring av virkestoffet. I tenkelig variantformuleringer skjer frigjøring av midlet bare når filmen er tørr. Andre faktorer, som f.eks. sammensetningen av emulsjonen og typen og konsentrasjonen av virkestoffet, bestemmer også frigjøringskarakteristikaene. For eksempel kan med-løsningsmidler som etanol, inkluderes i formuleringen og påvirke frigjøringstiden. Frigjøring av et virkestoffer også ønskelig ved anvendelse i næringsmiddelsammenheng, hvor et aromastoff innleiret i en emulsjon, frigjøres under konsumeringen. Frigjøringen av aromastoffet kan, avhengig av den eksakte formulering av emulsjonen, utløse en plutselig intens fornemmelse eller en lettere blanding av aromaer og essenser.
Emulsjonsformuleringen kan også benyttes i spray og aerosoler. For dette formål benyttes fortrinnsvis små oljelegemer, for eksempel med diameter på 1 um eller mindre, som f.eks. de som finnes i B. napus. Flyktige forbindelser som alkoholer og aromastoffer, kan inkluderes i slike spray. Emulsjoner av denne type kan også dusjes på overflater av tørkede næringsmiddelpreparater, så som potetchips og suppepulver. Emulsjonen kan innbefatte et aromastoff og ha konserverende betydning eller bidra til å opprettholde det riktige fuktighetsnivå i næringsmidlet.
ANVENDELSER AV EMULSJONSFORMULERINGEN
Oppfinnelsen er rettet mot fremstillingen av emulsjoner som er egnet i industri- og husholdningsblandinger. Det skal bemerkes at emulsjonene kan benyttes for blandinger som varierer betydelig med hensyn til fysikalske egenskaper og anvendelse. Bestemte utførelsesformer inkluderer således slike anvendelser som næringsmiddel- og forprodukter, farmasøytiske produkter, kroppspleieprodukter og industrielle produkter.
Næringsmiddel- og foranvendelser er bl.a. erstatninger for melkeprodukter, så som ost eller yoghurt, margariner, majoneser, vinaigretter, glasurer, iskrem, salatdressinger, syntetisk sennep, sukkertøy, tyggegummi, pudding, bakeprodukter, kryddere, saft-sløringsmidler, barnemat, aromabærere, teksturgivende midler (bakefett), kjæledyrfSr, fiskefor og husdyrfor. Produkter for kroppspleie innbefatter såper, kosmetika, hudkremer, ansiktskremer, tannpasta, leppestift, parfymer, makeup, «foundation», rouge, maskara, øyenskygge, solfaktorlotions, hårspray og hårfarvemidler. Farmasøytiske produkter som kan formuleres ved bruk av det vaskede oljelegemepreparat ifølge oppfinnelsen, er bl.a. terapeutiske midler, diagnostiske midler og avleveringsmidler. Som et terapeutisk eller diagnostisk middel vil emulsjonen dessuten inneholde et virkestoff. Virkestoffet kan være hva som helst som man ønsker å avgi til en vert. I en utførelsesform kan virkestoffet være et protein eller peptid som har terapeutisk eller diagnostisk betydning. Slike peptider innbefatter antigener (for vaksineformuleringer), antistoffer, cytokiner, blodkoaguleirngsfaktorer og veksthormoner. Industrielle anvendelser for emulsjonene ifølge foreliggende oppfinnelse inkluderer malinger, overtrekk, smøremidler, filmer, gel, boreoljer, papirlim, lateks, bygnings- og veikonstruksjonsmaterialer, blekk, farvestoffer, voks, poleringsmidler og landbrukskjemikalieformuleringer. I henhold til en foretrukket utførelsesform er oppfinnelsen rettet mot blandinger som kan inntas av dyr og mennesker. Siden blandingene skal kunne tas inn må de være av næringsmiddelkvalitet. Det spesielle produkt og den bestemte form som emulsjonen benyttes i er imidlertid ikke av avgjørende betydning. Det skal her betones at emulsjonen formulert med det vaskede oljelegemepreparat kan anvendes i et hvilket som helst husholdnings- eller industriprodukt.
Stabiliteten av foreliggende emulsjonsformulering ved lav pH kan undersøkes i formuleringer av sure emulsjoner. For eksempel kan emulsjonsformuleringen benyttes ved fremstilling av majoneslignende næringsmidler, som foruten det vaskede oljelegemepreparat, eventuelt omfatter en vegetabilsk olje, sennep, eddik og eggeplomme. Hellbare emulsjoner, som f.eks. salatdressinger, kan tilberedes ved å øke den relative mengde eddik og/eller ved tilsetning av vann.
Et eksempel på en anvendelse hvor det kan tilføres varme uten tilsynelatende ugunstige virkninger, er ved fremstillingen av en savory sauce, som f.eks. hvit grunnsaus (bechamel sauce) eller i søte sauser, som f.eks. sjokoladesauser. For disse anvendelsene benyttes det vaskede oljelegemepreparat som stekefetterstatning. For å fremstille en bechamelsaus tilsettes til 1 del av det oppvarmede vaskede oljelegemepreparat, 1 vektdel mel som omrøres til det dannes en tykk suspensjon. Ved moderat varme tilsettes gradvis melk inntil det oppnås en saus med ønsket viskositet.
Emulsjonsformuleringen i kan også benyttes som en erstatning for smør. I så fall tilsettes små mengder vann til det vaskede oljelegemepreparat, for eksempel mindre enn 10%, inntil ønsket viskositet oppnås. Naturlige smøraromaer og fortykningsmidler kan eventuelt tilsettes. Smørerstatningen kan benyttes på mais, brød, i kakeblandinger eller ved brødbaking. Salt som bidrar til smak og virker som et konserveringsmiddel, kan tilsettes, typisk til ca. 2,5% (vekt/vol). FarvestofFer, for eksempel ekstrakter av orelanfrø eller karoten kan tilsettes for eventuelt å gjøre farven mørkere. En fordel ved denne anvendelse er at det oljelegemebaserte smør ikke inneholder hydrogenerte fettsyrer, som benyttes i formuleringer for margariner og lignende for å oppnå en ønsket konsistens, men som også er assosiert med kardiovaskulære sykdommer.
Bakefett kan fremstilles til forskjellige stivhetsgrader, fra et skum til et hellbart fett. Ved slik anvendelse piskes luft inn i emulsjonsformuleringen, og emulsjonsformuleringen kan betraktes som dispergert i den kontinuerlige fase, luft. Slike fett kan benyttes til blandinger hvor kreming og hevelse ønskes. Disse blandingene innbefatter glasurer, syntetiske kremer, iskrem og kakedeig.
En fruktsafterstatning kan fremstilles fra kunstige eller naturlige aromastoffer og næringsmidler. Slike safterstatninger har ikke det riktige utseende og synes som følge av gjennomsiktigheten å være svake eller fortynnede. Ved å tilsette en liten mengde, for eksempel 0,1 til 1 vol% av det vaskede oljelegemepreparat eller en emulsjon derav, kan det inntre sløring som gir saften et fyldigere utseende. Foreliggende oljelegemepreparat kan således benyttes som et sløringsmiddel.
For en annen anvendelse hvor det inngår safter, kan det vaskede oljelegemepreparat eller en emulsjon derav, tilsettes til safter med sedimenterbare faststoffer, som f.eks. tomatjuice. Tilsetning av en liten mengde av det vaskede oljelegemepreparat, for eksempel 0,1 til 1 vol%, kan minske sedimenteringshastigheten av faststoffene i saften og bidra til å opprettholde det fyldige utseende.
Lokale anvendelser av det vaskede oljelegemepreparat ifølge foreliggende oppfinnelse kan også være aktuelle. I denne utførelsesform formuleres emulsjonen som en dermatologisk akseptabel emulsjon, som for eksempel kan benyttes for å bløtgjøre ansikts- og/eller kroppshud, inklusivt negler-og lepper, eller ha egenskaper som motvirker aldring av huden, akne, pigmentering, hårtap eller bidrar til fjerning av hår eller letter sårtilheling og/eller restmkturering av hudvevet. Det vaskede oljelegemepreparat utgjør fortrinnsvis 1-99 vekt% av den endelige blanding.
De kosmetiske blandingene kan omfatte ytterligere hydrokarbonforbindelser, så som plante-, dyre-, mineral- eller syntetiske oljer eller voks eller blandinger derav. De omfatter parafin, vaselin, perhydroskvalen, «arara» olje, mandelolje, «calphyllum» olje, avokadoolje, sesamolje, ricinusolje, «jojoba» olje, olivenolje eller hvetekimolje. Det kan også inngå estere, som f.eks. lanolinsyre, oljesyre, laurinsyre, stearinsyre, myristinsyre. Det er også mulig å inkludere alkoholer, som for eksempel oleoylalkohol, linoleylalkohol eller linolenylalkohol, isostearylalkohol eller oktyldodecanol, alkohol eller polyalkohol. Ytterligere hydrokarboner som kan inkluderes er oktanoater, dekanoater, ricinoleater, kapryl/kaprin-triglycerider som Cio til C22 fettsyretriglycerider. Tilsetning av disse midlene kan resultere i dannelse av dobbeltemulsjoner.
Hydrogenerte oljer, som er faste ved 25°C, så som hydrogenert ricinusolje, palmeolje eller kokosolje, eller hydrogenert talg; mono-, di-, tri- eller sukroglycerider; lanoliner og fettsyrer som er faste ved 25°C, kan også inngå i de kosmetiske formuleringene. Vokstyper som kan inngå er animalsk voks, så som bivoks; plantevoks som karnaubaboks, «candelilla» voks, «ouricurry» voks, japanvoks eller voks fra korkfibre eller sukkerrør; mineralvoks, for eksempel parafinvoks, lignittvoks, mikrokrystallinske voks eller ozokeriter og syntetiske voks.
Pigmenter kan inkluderes og kan være hvite eller farvede, uorganiske eller organiske og/eller «paerlescent». Disse pigmentene omfatter titandioksyd, sinkoksyd, zirkonium-dioksyd, sorte, gule, røde og brune jernoksyder, ceriumdioksyd, kromoksyd, jemblått, kjønrøk, barium-, strontium-, kalsium- og aluminiumlakk og glimmer dekket med titanoksyd eller med vismutoksyd.
Virkestoffer som vanligvis benyttes i hudkremer, så som vitaminer, for eksempel vitamin A eller C og alfa-hydroksysyrer, som sitronsyre, glykolsyre, melkesyre og vinsyre, kan inkluderes i kosmetiske og/eller dermatologiske blandinger. For eksempel fremgår det av US-patent 5.602.183 at vitamin C eller askorbinsyre, fremmer veksten av bindevev, særlig i hud, ved å styrke huden mot eksterne aggresjoner, som f.eks. fra røk og UV-bestråling. Mykgjøringsmidler som kan inngå i hudkremer og kosmetika er for eksempel mineralolje og urea. Antioksydanter som f.eks. de naturlig forekommende tokoferoler og polyfenoler eller butylert hydroksytoluen og hydroksyanisol, kan også tilsettes. Solfiltere så som oktylmetoksycinnamat (Parsol MCX), 3-benzofenon (Uvinul M40) og butylmetoksy-dibenzoylmetan (Parsol 1789) kan benyttes for å fremstille en solbadlotion. Farmasøytiske virkestoffer som kan benyttes for å formulere kosmetiske blandinger innbefatter for eksempel antibiotika, fungicider og antiinflammatoriske midler.
Det endelige kosmetiske produkt kan være i form av et fritt, hellbart eller sammenpresset pulver («foundation», rouge eller øyenskygge), et relativt fettaktig produkt som leppestift, maskara eller en olje eller lotion for kroppen eller ansiktet.
Det vaskede oljelegemepreparat kan også benyttes for å tjene som en oralt aksepterbar bærer i tannpasta som ytterligere kan omfatte silika, overflateaktive midler, chelateringsmidler, et fluorid, fortykningsmidler, søtningsmidler, aromastoffer, for eksempel som peppermynteolje, enzymer og biocider.
Et eksempel på et industrielt produkt som kan formuleres som maling, hvor hovedharpiksen, som f.eks. de som er basert på silikontype forbindelser, akryl forbindelser, polyester, alkyd, fluor, epoksy, polyuretan, kan være delvis eller helt erstattet med det vaskede oljelegemepreparat ifølge foreliggende oppfinnelse. Ytterligere tilsetningsstoffer som pigmenter, farvestoffer, glassflak og aluminiumflak, pigmentdispergeringsstoffer, fortykningsmidler, utjevningsmidler, herdekatalysatorer, herdemidler, så som diisocyanater, herdekatalysatorer, geleringsinhibitorer, ultrafiolett absorberende midler, midler mot frie radikaler, etc, kan etter behov formuleres i malingsblandinger.
Det vaskede oljelegemepreparat kan også benyttes til å formulere smøremidler. For eksempel kan det vaskede oljelegemepreparat benyttes til delvis eller fullstendig å erstatte smøreoljer som animalske oljer, vegetabilske oljer, petroleum-smøreoljer, syntetiske smøreoljer eller smørefett, så som litium-basert fett, ureafett og kalsiumfett. Andre komponenter som benyttes i en smøremiddelformulering er antioksydanter, detergent-dispergeringsmidler, smøringsforbedrende midler, friksjonsdempere, viskositetsindeks-forbedrende midler, stivnepunkts-nedsettende midler, faste smøremidler, rusthindrende midler og antiskum.
Vokstyper kan også fremstilles ved å benytte det vaskede oljelegemepreparat ifølge foreliggende oppfinnelse. Disse omfatter rensevokstyper, som f.eks. de som gir en stabil hydrofob filmfinish på biler, samt andre beskyttende belegg. Andre blandinger som benyttes ved fremstillingen av voks, er overflateaktive midler, mineraloljer, så som blandede parafiniske og aromatiske/nafteniske oljer, parfymer, biocider og farvestoffer som eventuelt kan tilsettes i forlikelige mengder.
Når industrielle produkter som malinger eller smøremidler formuleres, kan renheten av oljelegemefasen eventuelt være mindre avgjørende, og det behøver ikke være nødvendig å vaske oljelegemene. En industriell emulsjon kan fremstilles ved (i) oppnå oljelegemer fra en celle og (ii) formulere oljelegemene til en industriell emulsjon. Oljelegemene kan oppnås ved (a) oppmaling av plantefrø; (b) fjerning av hårdt materiale fra de oppmalte frø og (c) separering av oljelegemefasen fra den vandige fase.
EKSEMPLER
Eksempel 1
Oppnåelse av et vasket oljelegemepreparat fra raps, soyabønne, solsikke, hvit sennep, jordnøtt, squash, lin, safflor og mais - laboratorieskala.
Tørre modne frø av Brassica napus cv Westar, soyabønne, solsikke, hvit sennep, jordnøtt, squash, lin, safflor og mais ble homogenisert i 5 volumer kald oppmalingsbuffer (50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 0.4M sukrose og 0,5M NaCl) ved å benytte en polytron-homogenisator med høyt turtall. Homogenatet ble sentrifugert ved 10 x g i 30 minutter for å fjerne partikkelmateriale og for å separere oljelegemene fra den vandige fase som inneholdt størstedelen av det løselige frøprotein. Oljelegemefraksjonen ble skummet av fra supematantoverflaten med en metallspatel og tilsatt til 1 volum oppmalingsbuffer. For å oppnå effektiv vasking i etterfølgende trinn, ble det funnet nødvendig å redispergere oljelegemene grundig i oppmalingsbufferen. Dette ble gjort ved forsiktig å homogenisere oljelegemene i oppmalingsbuffer under bruk av en polytron-homogenisator med lavt turtall. Ved bruk av en sprøyte ble de redispergerte oljelegemene forsiktig anbragt som et lag under 5 volumer kald 50 mM Tris-HCl, pH 7,5, og sentrifugert som ovenfor. Etter sentrifugering ble oljelegemene fjernet og vaskeprosessen gjentatt to ganger. Det endelige vaskede oljelegemepreparat ble resuspendert i 1 volum kald Tris-HCl, pH 7,5, redispergert med polytron-mikseren.
Oljelegemeprøvene ble løst i SDS-prøvebuffer og deretter analysert ved SDS-gelelektroforese. Resultatene er vist i Figur 1. Det således oppnådde materialet var dermed klårt til anvendelse i diverse formuleringer.
Eksempel 2
Oppnåelse av et vasket oljelegemepreparat fra raps, solsikke og mais i stor skala.
Dette eksempel beskriver gjenvinningen av oljelegemefraksjonen fra canola-, solsikke-og maisfrø i stor skala. Det resulterende preparat inneholder intakte oljelegemer og er med hensyn til renhet sammenlignbart med et preparat oppnådd ved å benytte prosesser i laboratorieskala.
Oppmaling av frø. Totalt 10-15 kg tørre canolafrø ( Brassica napus cv, Westar), solsikke ( Helianthus annuus) eller mais ( Zea mays) ble helt gjennom trakten på en
kolloidmølle (Colloid Mill, MZ-130 (Fryma); kapasitet: 500 kg/time) som var forsynt med et MZ-120 tverrtannet rotor/stator-oppmalingssett og en trakt for påfylling ovenfra. Ca. 50-75 L vann ble tilført gjennom en utvendig tilsluttet slange før oppmaling. Oppmalingen ble foretatt med en spalteinnstilling på IR, valgt for å oppnå en partikkelstørrelse på mindre enn 100 mikron, ved 18°C og 30°C. Etter oppmaling av frøene, ble det tilsatt springvann til frøoppslemmingen til et endelig volum på 90 L.
Fjerning av faststoffer. Den resulterende oppslemmingen ble pumpet inn i en dekanteringssentrifuge (Hasco 200 2-fase dekanteringssentrifuge med maksimal arbeidshastighet 6000 rpm) etter at sentrifugen var bragt opp på en arbeidshastighet på 3500 rpm. Overføring fra møllen til dekanteringssentrifugen skjedde ved bruk av en 1" M2 Wilden trykkluftdrevet dobbelt membranpumpe under en strømningshastighet på 360 L/time. I løpet av 15-20 minutter ble det avdekantert ca. 15 kg frø.
Oljelegeme-separasjon. Separasjon av oljelegemefraksjonen ble oppnådd ved å benytte en Sharples Tubular Bowl Centrifuge Model AS-16 (Alfa Laval) forsynt med en tre-fase separeringsbeholder og uttagbare ringdemningsrekker; kapasitet: 150 L/time; ringdemning: 30 mm. Arbeidshastigheten var 15.000 rpm. (13.200 x g). En Watson-Marlow (Model 704) peristaltisk pumpe ble benyttet for å pumpe den avdekanterte væskefase (DL) over i «tubular bowl» sentrifugen etter at sentrifugen var bragt opp til arbeidshastighet. Dette resulterte i separasjon av den avdekanterte væskefase inn i en tung fase (HP) omfattende vann og løselige frøproteiner og en lett fase (LP) omfattende oljelegemer. Den oljelegemefraksjon som ble oppnådd etter denne første sentrifugering omtales her som et uvasket oljelegemepreparat. Oljelegemerfaksjonen ble deretter sendt gjennom sentrifugen treganger til. Mellom hver passasje gjennom sentrifugen, ble konsentrerte oljelegemer blandet med ca. 5 volumer nytt vann. Hele prosessen ble foretatt ved romtemperatur. Preparatene oppnådd etter den andre separeringen er alle omtalt som det vaskede oljelegemepreparat. Etter tre vaskinger ble meget av det kontaminerende løselige protein fjernet, og de oppnådde oljelegemeproteinprofiler etter SDS-gelelektroforese, var av lignende utseende som de oppnådd ved bruk av prosesser i laboratorieskala.
Eksempel 3
Fjerning av frøproteiner ved vasking av oljelegemefasen
Dette eksempel beskriver gjenvinningen av en vasket oljelegemefraksjon fra canola, mais og solsikkefrø. Ved å benytte forskjellige vaskebetingelser vises det at vaskingene resulterer i fjerning av betydelige mengder frøproteiner fra oljelegemepreparatet. Disse proteinene inkluderer proteiner som kan være allergene.
Totalt 10-15 kg tørre canolafrø ( Brassica napus cv, Westar), mais ( Zea mays) eller solsikke ( Helianthus annuus) ble helt gjennom trakten på en kolloidmølle (Colloid Mill, MZ-130 (Fryma)), som var forsynt med et MZ-120 tverrtannet rotor/stator-oppmalingssett og en trakt for påfylling ovenfra. Ca. 50-75 L vann ble tilført gjennom en utvendig tilsluttet slange før oppmaling. Oppmalingen ble foretatt med en spalteinnstilling på IR, valgt for å oppnå en partikkelstørrelse på mindre enn 100 mikron, ved 18<*>0 og 30°C. Etter oppmaling av frøene, ble det tilsatt springvann til frøoppslemmingen til et endelig volum på 60-90 L, og en prøve av frøoppslemmingen ble uttatt for SDS-gelelektroforese. Oppslemmingen ble deretter pumpet inn i en dekanteringssentrifuge (Hasco 200 2-fase dekanteringssentrifuge med maksimal arbeidshastighet 6000 rpm) etter at sentrifugen var bragt opp på en arbeidshastighet på 3500 rpm. Overføring fra møllen til dekanteringssentrifugen skjedde ved bruk av en 1" M2 Wilden trykkluftdrevet dobbelt membranpumpe. I løpet av 15-20 minutter ble det avdekantert ca. 15 kg frø.
En prøve av den avdekanterte væskefase ble uttatt for SDS-gelelektroforese. Separasjon av oljelegemefraksjonen ble oppnådd ved å benytte en Sharples Tubular Bowl Centrifuge Model AS-16 (Alfa Laval) forsynt med en tre-fase separeringsbeholder og uttagbare ringdemningsrekker; kapasitet: 150 L/time; ringdemning: 29 mm. Arbeidshastigheten var 15.000 rpm. (13.200 x g). En Watson-Marlowe (Model 704) peristaltisk pumpe ble benyttet for å pumpe den avdekanterte væskefase over i «tubular bowl» sentrifugen etter at sentrifugen var bragt opp til arbeidshastighet. Den uvaskede oljelegemefasen som ble oppnådd, ble blandet med ca. 5 volumer vann. Denne prosess ble gjentatt i alt tre ganger til. Den oljelegemefase som ble oppnådd etter denne første sentrifugering omtales her som et uvasket oljelegemepreparat. Alle andre preparater er vaskede oljelegemepreparater. Prøver for analyse ved SDS-gelelektroforese, ble uttatt etter den første og den fjerde separasjon.
Etter at den fjerde vask var fullført, ble en 0,9 mL prøve av oljelegemepreparatet homogenisert i 0,1 mL IM Na2C03 og satt tilside ved romtemperatur i 30 minutter under agitasjon. Den vaskede oljelegemefraksjon ble gjenvunnet etter sentrifugering, vasket én gang med vann og preparert for SDS-gelelektroforese.
Alle prøvene ble løst i SDS-prøvebuffer, og prøvene ble analysert ved SDS-gelelektroforese. Resultatene er vist i Figur 2.
Eksempel 4
Effekten av vasking av oljelegemefasen på vannretensjons-karakteristika
Et vasket oljelegemepreparat og en uvasket oljelegemefase ble fremstillet fra rapsfrø som i Eksempel 2. For å bestemme forskjellen i vannretensjonskapasitet mellom den uvaskede oljelegemefasen og det vaskede oljelegemepreparat, ble 30 mL oljelegemepreparat grundig blandet ved omvirvling (vortex). Preparatene ble deretter inkubert i 2 timer i et vannbad ved 40,60 eller 80°C, hvorpå prøvene ble sentrifugert ved 1500 x g i 20 minutter (ufortynnede prøver). Et annet prøvesett ble fremstillet ved å blande 15 g vasket eller uvasket oljelegemepreparat med 15 mL vann. Prøvene ble vortex-blandet og deretter inkubert ved 40, 60 eller 80°C i 2 timer, hvorpå vanninnholdet i prøvene ble bestemt etter sentrifugering ved 1500 x g i 20 minutter (fortynnede prøver). Massetapet som kunne tilskrives fordampningen, ble målt ved 80°C og 60°C.
Ved 80°C mistet de ufortynnede preparatene som inneholdt oljelegemene, betydelige mengder vann gjennom fordampning. Preparatet av uvaskede oljelegemer tapte 26% av deres masse, mens det vaskede preparat tapte 16%. Etter sentrifugering frigjorde det uvaskede preparat ca. 2,5 mL vandig fase, mens de vaskede oljelegemene forble i samme fase. Begge fortynnede preparater absorberte vann. Volumet av oljelegemene øket i begge tilfeller til 18,5 ± 1 mL.
Ved 60°C tapte de ufortynnede preparatene ca. 10% vann gjennom fordampning. Etter sentrifugering frigjorde det vaskede preparat ca. 0,5 mL vandig fase, mens det vaskede oljelegemepreparat forble i samme fase. Begge fortynnede preparater absorberte vann. Ved 60°C øket volumet av oljelegemene i begge tilfellene ti 118 + 1 mL.
Ved 40°C frigjorde de ufortynnede prøvene begge ca. 2 mL vandig fase. Når de fortynnede prøvene ble sammenlignet, absorberte det uvaskede preparat ca. 3 mL vann slik som ved 60 eller 80°C. Det vaskede preparat absorberte imidlertid 8 mL vann ved 40°C.
Disse forsøkene viser at vannet i et vasket oljelegemepreparat oppvarmet til 60°C eller 80°C, forblir sterkere assosiert med oljelegemepreparatet enn i et uvasket preparat. Ved nedkjøling syntes det vaskede oljelegemepreparat å være mer stabilt enn den uvaskede emulsjon. Ved oppvarming til 40°C var det vaskede oljelegemepreparat i stand til å absorbere et større volum eksogent tilsatt vann uten at det resulterte i faseseparasjon.
Eksempel 5
Effekten av vasking av oljelegemer på oljeabsorpsjonskarakteristika
Et vasket oljelegemepreparat og en uvasket oljelegemefase ble fremstillet fra rapsfrø som i Eksempel 2. For å bestemme forskjellen i oljeabsorpsjonskapasitet mellom den uvaskede oljelegemefase og det vaskede oljelegemepreparat, ble 2 g av oljelegemepreparatet dispergert i 12 mL raffinert, bleket, deodorisert canolaolje i et 50 mL rør. Innholdet ble omrørt i 30 sekunder hvert 5. minutt i løpet av 30 minutter. Rørene ble deretter sentrifugert ved 4400 rpm. i 25 minutter. Den frie oljen ble avdekantert, og prosentandelen absorbert olje ble bestemt ved vektdifferanse. Tre preparater av vaskede oljelegemer ble testet, og tre preparater av uvaskede oljelegemer ble testet.
Oljeabsorpsjonskapasiteten av uvaskede oljelegemer ble funnet å variere signifikant mellom de tre satsene og varierte fra 18,7% til 28%. Vaskede oljelegemer hadde en reproduserbar oljeabsorpsjon på 32 ± 1%. Det vaskede oljelegemepreparat ble dermed funnet å være bedre siden (1) en større mengde olje ble funnet å bli absorbert og (2) absorpsjonen foregikk på en mer reproduserbar måte.
Eksempel 6
Fremstilling av en majones-lignende emulsjon som omfatter et vasket oljelegemepreparat
Et vasket oljelegemepreparat ble fremstillet fra rapsfrø som i Eksempel 2, og en majones-lignende emulsjon ble dannet ved å blande følgende komponenter med en elektrisk kjøkkenmikser.
Det ble oppnådd et produkt med en majones-lignende tekstur. Det majones-lignende produkt var stabilt i minst 1 dag ved 4°C.
Eksempel 7
Fremstilling av en kolesterol-fri majones-lignende emulsjon
Et vasket oljelegemepreparat ble fremstillet fra rapsfrø som i Eksempel 2, og en majones-lignende emulsjon ble dannet ved å blande følgende komponenter:
Det ble oppnådd et produkt med majones-lignende tekstur. Siden majonesen er fremstillet uten eggeplomme, en ingrediens som vanligvis benyttes i kommersielt tilgjengelige majoneser, er produktet fremstillet ved å benytte vaskede oljelegemer, fritt for kolesterol. Majonesen ble funnet å være like stabil som en kommersiell majones når stabiliteten ble bestemt ved bruk av sentrifugering.
Eksempel 8
Fremstilling av en vinaigrette-lignende emulsjon omfattende et vasket oljelegemepreparat
Et vasket oljelegemepreparat ble fremstillet fra rapsfrø som i Eksempel 2, og en vinaigrette-lignende emulsjon ble fremstillet ved manuell blanding av følgende komponenter:
Det ble oppnådd et produkt med en vinaigrette-lignende tekstur. Det vinaigrette-lignende produkt var stabilt i minst flere dager ved 4°C.
Eksempel 9
Fremstilling av et smørbart senneps-lignende produkt
Et vasket oljelegemepreparat ble oppnådd fra rapsfrø som angitt i Eksempel 2. Følgende ingredienser ble blandet for å oppnå et senneps-lignende produkt:
Den resulterende emulsjonsformulering er et senneps-lignende produkt som lett kan smøres ut, og som har en mer kremaktig, mindre sandet smakskarakteristikk enn sennep.
Eksempel 10
Fremstilling av en bechamel-lignende saus
Et vasket oljelegemepreparat ble oppnådd fra rapsfrø som angitt i Eksempel 2. Det vaskede oljelegemepreparat ble oppvarmet under moderat oppvarming, og en tilsvarende del mel ble tilsatt og blandet med det oppvarmede, vaskede oljelegemepreparat. Under manuell omrøring ble det gradvis tilsatt melk til denne blandingen.
Det ble oppnådd en bechamel-Iignende saus. Konsistensen av sausen kan tilpasses ved hjelp av den tilsatte melkemengde. Ytterligere aromastoffer kan også tilsettes etter behov. Fraværet av hydrogenerte fettsyrer gir dette produkt en fordel fremfor en saus fremstillet fra vanlig husholdningsmargarin.
Eksempel 11
Fremstilling av en farmasøytisk emulsjon for belegging av fiskefor
Et vasket oljelegemepreparat fra en transgen B. napus plante som uttrykker carpe-veksthormon (cGH) fusjonert til oleosin, hvor fusjonsproteinet ble rettet mot oljelegemene, ble oppnådd som følger. Et DNA-fragment inneholdende den cGH-kodende region som manglet dens 22 aminosyrers signalsekvens, ble amplifisert fra et plasmid som i et innskudd inneholdt vanlig carpe ( Cyprinus carpio) veksthormon cDNA (Koren et al., 1989, Gene, 67:309-315) ved å benytte polymerasekjedereaksjonen i kombinasjon med to cGH-spesifikke primere. Det amplifiserte cGH-fragment ble fusjonert i riktig leseramme og 3' for Arabidopsis thaliana oleosinet ved å benytte pOThromb (vån Rooijen, 1993, PhD Thesis, University of Calgary) som parentalt plasmid og ved å benytte kjente kloningsstrategier. I pOThromb ble et trombin-spaltningssetetinnsatt 3' forden oleosin-kodende sekvens. Oleosin-cGH-fusjonsgenet ble innført i den binære vektoren pCGN1559 (McBride & Summerfelt, 1990, Plant Mol. Biol. 14:269-276), og den resulterende konstruksjon ble benyttet til å transformere A. tumefaciens. Agrobakteirum-stammen ble benyttet for å transformere B. napus cv Westar-frøplanter. Frø fra transgene planter ble oppnådd, og oljelegemer ble isolert fra transgene frø som skissert i Eksempel 1.
Oljelegemene ble deretter tatt opp i en sprøyte og sprøytet over på fiskefor, ved å benytte ca. 2,5 ug oljelegemeprotein per 1 mg fiskefor. Fiskeforet dekket med oljelegemene ble deretter satt tilside for tørking over natten. I alt 50 mg fiskefor ble deretter blandet med 10 mL vann og inkubert i 0, 30,45 eller 60 minutter. Foret ble deretter samlet opp og resuspendert i 0,2 mL 50 mM Tris-HCl (pH 7,5) og preparert for analyse ved SDS-gelelektroforese etter koking i 2,5% SDS. Forekomsten av oljelegemene på fiskeforet ble fastslått ved å benytte western-blotting og monoklonale antistoffer mot cGH.
På bakgrunn av intensiteten av signalet og av det enkeltband som ble observert i hver bane på western-blottet, forble oljelegemene som omfattet cGH, nært assosiert med fiskeforet etter inkubering av oljelegemene i vann. Fiskefor som var inkubert i 30,45 eller 60 minutter i vann, viste seg å inneholde omtrent den samme mengde cGH som kontroll fiskefor som ikke var inkubert i vann.
Dette eksempel viser at det kan fremstilles en transgen plantevarietet som gir en emulsjon spesifikt ønskede egenskaper. Eksemplet viser videre at det kan fremstilles en emulsjon fra et vasket oljelegemepreparat som kan benyttes som et overtrekk eller film. Endelig viser dette eksempel at det vaskede oljelegemepreparat kan benyttes til å formulere en farmasøytisk blanding.

Claims (42)

1. Fremgangsmåte for fremstilling av en emulsjonsformulering, karakterisert ved a t den omfatter:
1) oppnåelse av oljelegemer fra en celle;
2) vasking av oljelegemene for å oppnå et vasket oljelegemepreparat som omfatter intakte oljelegemer av tilnærmet ensartet størrelse, form og tetthet; og
3) formulering av det vaskede oljelegemepreparat til en emulsjon.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at nevnte celle er en plantecelle.
3. Fremgangsmåte ifølge krav 2, karakterisert ved at nevnte plantecelle oppnås fra sporer, pollen, frø eller vegetative planteorganer.
4. Fremgangsmåte ifølge krav 2, karakterisert ved at oljelegemene oppnås fra plantefrø.
5. Fremgangsmåte for fremstilling av en emulsjonsformulering ifølge krav 4, karakterisert ved at den omfatter: (1) oppnåelse av oljelegemer fra plantefrø ved hjelp av en fremgangsmåte som omfatter: (a) oppmaling av plantefrø; (b) fjerning av faststoff fra de oppmalte frø; og (c) separering av oljelegemefasen fra den vandige fase; (2) vasking av oljelegemefasen for å oppnå et vasket oljelegemepreparat omfattende intakte oljelegemer av tilnærmet jevn størrelse, form og tetthet; og (3) formulering av det vaskede oljelegemepreparat til en emulsjon.
6. Fremgangsmåte ifølge krav 5, karakterisert ved at en flytende fase tilsettes før eller etter oppmalingstrinnet.
7. Fremgangsmåte ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 6, karakterisert ved at nevnte formulering omfatter blanding av de vaskede oljelegemer inntil det dannes en emulsjon.
8. Fremgangsmåte ifølge krav 7, karakterisert ved at den flytende fase tilsettes de vaskede oljelegemer og den flytende fase og vaskede oljelegemer blandes inntil det dannes en emulsjon.
9. Fremgangsmåte ifølge krav 6 eller 8, karakterisert ved at den flytende fase er vann.
10. Fremgangsmåte ifølge krav 9, karakterisert ved at den flytende fase forekommer i en emulsjon i en mengde varierende fra ca. 1% til ca. 99% volumdeler.
11. Fremgangsmåte ifølge krav 4 eller 5, karakterisert ved at nevnte plante er en oljefrøplante.
12. Fremgangsmåte ifølge krav 4 eller 5, karakterisert ved at nevnte plante er . valgt fra gruppen bestående av rapsfrø ( Brassica spp.), soya ( Glycine max.), solsikke ( Helianthus annuus), oljepalme ( Elaeis guineeis), bomullsfrø ( Gossypium spp.), jordnøtt ( Arachis hypogaea), kokos ( Cocus nucifera), ricinus ( Ricinus communis), safflor ( Carthamus tinctorius), sennep ( Brassica spp. og Sinapis alba), koriander ( Coriandrum sativum), squash ( Cucurbita maxima), linfrø/lin ( Linum usitatissimum), paranøtt ( Bertholletia excelsa), jojoba ( Simmondsia chinensis) og mais ( Zea mays).
13. Fremgangsmåte ifølge krav 5, karakterisert ved at nevnte faststoff fjernes ved sentrifugering eller filtrering av det oppmalte frø.
14. Fremgangsmåte ifølge krav 5, karakterisert ved at nevnte oljelegeme-fase separeres fra den vandige fase ved en tyngdekraft-basert metode eller en størrelses-eksklusjonsbasert metode.
15. Fremgangsmåte ifølge krav 5, karakterisert ved at det vaskede oljelegemepreparat er tilnærmet fritt for frøproteiner som ikke skriver seg fra oljelegemer, og tilnærmet fritt for forbindelser uten næringsverdi, stivelse, glukosinilater eller nedbrytningsprodukter derav og fibrer.
16. Fremgangsmåte ifølge krav 15, karakterisert ved at nevnte frøproteiner er glykosylerte.
17. Fremgangsmåte ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 16, karakterisert ved at nevnte formulering omfatter tilsetning av et konserveringsmiddel.
18. Fremgangsmåte ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 16, karakterisert ved at nevnte emulsjon er et næringsmiddel- eller forprodukt, et kroppspleieprodukt, et farmasøytisk produkt eller et industrielt produkt.
19. Fremgangsmåte ifølge krav 5, karakterisert ved at frøene nedsenkes i en flytende fase før oppmaling i ca. 15 minutter til ca. 2 dager.
20. Emulsjon, karakterisert ved at den omfatter et vasket oljelegeme-preparat omfattende intakte oljelegemer av tilnærmet ensartet størrelse, form og tetthet.
21. Emulsjon ifølge krav 20, karakterisert ved at den omfatter en flytende fase.
22. Emulsjon ifølge krav 21, karakterisert ved at den flytende fase er vann.
23. Emulsjon ifølge krav 20, karakterisert ved at den ytterligere omfatter et konserveringsmi ddel.
24. Emulsjon ifølge krav 20, karakterisert ved at oljelegemene er oppnådd fra en plante.
25. Emulsjon ifølge krav 24, karakterisert ved at oljelegemene er oppnådd fra en plante valgt fra gruppen bestående av rapsfrø ( Brassica spp.), soya ( Glycine max.), solsikke ( Helianthus annuus), oljepalme ( Elaeis guineeis), bomullsfrø ( Gossypium spp.), jordnøtt ( Arachis hypogaea), kokos ( Cocus nucifera), ricinus ( Ricinus communis), safflor ( Carthamus tinctorius), sennep ( Brassica spp. og Sinapis alba), koriander ( Coriandrum sativum), squash ( Cucurbita maximd), linfrø/lin ( Linum usitatissimum), paranøtt ( Bertholletia excelsd), jojoba ( Simmondsia chinensis) og mais ( Zea mays).
26. Emulsjon ifølge et hvilket som helst av kravene 20 til 25, karakterisert ved at nevnte emulsjon er et næringsmiddelprodukt, et forprodukt, et kroppspleieprodukt, et farmasøytisk produkt eller et industrielt produkt.
27. Emulsjon ifølge krav 26, karakterisert ved at nevnte næringsmiddel-eller forprodukt er valgt fra gruppen bestående av meierisurrogater, surrogat-ost eller surrogat-yoghurt, margarin, majones, vinaigrette, glasur, iskrem, salatdressing, syntetisk sennep, sukkertøy, tyggegummi, pudding, bakeprodukter, kryddere, saft, barnemat, aromabærere, teksturgivende midler, kjæledyrfor og husdyrfor.
28. Emulsjon ifølge krav 26, karakterisert ved at nevnte næringsmiddel- eller forprodukt er en majones, en kolesterol-fri majones, en bechamel-saus, en vinaigrette, en sennep eller et fiskefor.
29. Emulsjon ifølge krav 26, karakterisert ved at nevnte kroppspleie-produkt er valgt fra gruppen bestående av såpe, kosmetisk produkt, hudkrem, ansiktskrem, tannpasta, leppestift, parfyme, makeup, «foundation», rouge, maskara, øyenskygge, solfilterlotion og et hårpleieprodukt.
30. Emulsjon ifølge krav 26, karakterisert ved at nevnte farmasøytiske produkt er valgt fra gruppen bestående av et terapeutisk middel, et diagnostisk middel og et avleveringsmiddel.
31. Emulsjon ifølge krav 30, karakterisert ved at nevnte terapeutiske middel innbefatter et veksthormon.
32. Emulsjon ifølge krav 26, karakterisert ved at nevnte industrielle produkt er valgt fra gruppen bestående av maling, belegg, smøremiddel, film, gel, boreolje, papirlim, lateks, bygnings- og veikonstruksjonsmateriale, blekk, farvestoff, voks, poleringsmiddel og landbrukskjemikalieformuleringer.
33. Anvendelse av en emulsjon fremstilt ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 19 for å fremstille et kroppspleieprodukt, et næringsmiddel- eller forprodukt, et industrielt produkt eller et farmasøytisk produkt.
34. Anvendelse av en emulsjon ifølge krav 33, hvor nevnte næringsmiddel- eller forprodukt omfatter meierisurrogater, ostesurrogat, yoghurtsurrogat, margarin, majones, vinaigrette, glasur, iskrem, salatdressing, syntetisk sennep, sukkertøy, tyggegummi, pudding, bakeprodukt, krydder, juice, barnemat, aromabærer, teksturgivende middel, kjæledyrfor og husdyrfor.
35. Anvendelse av en emulsjon ifølge krav 33, hvor nevnte næringsmiddel- eller forprodukt er en majones, en kolesterol-fri majones, en bechamel-saus, en vinaigrette, en sennep eller et fiskefor.
36. Anvendelse av en emulsjon ifølge krav 33, hvor kroppspleieproduktet omfatter såpe, kosmetisk produkt, hudkrem, ansiktskrem, tannpasta, leppestift, parfyme, make-up, «foundation», rouge, maskara, øyenskygge, solfilterlotion, hårpleieprodukt.
37. Anvendelse av en emulsjon ifølge krav 33, hvor nevnte industrielle produkt omfatter maling, belegg, smøremiddel, film, gel, boreolje, papirlim, lateks, bygnings- og veikonstruksjonsmateriale, blekk, farvestoff, voks, poleringsmiddel og landbruks-kjemikalie-formuleringer.
38. Anvendelse av en emulsjon ifølge krav 33, hvor nevnte farmasøytiske produkt er et terapeutisk middel, et diagnostisk middel eller et avleveringsmiddel.
39. Anvendelse av en emulsjon ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 19, som et belegg, en film eller en aerosol.
40. Fiskeforpreparat, karakterisert ved at det er belagt med en emulsjon ifølge et hvilket som helst av kravene 20 til 25.
41. Fiskeforpreparat ifølge krav 40, hvor nevnte emulsjon i tillegg inneholder et terapeutisk peptid.
42. Fiskeforpreparat ifølge krav 41, hvor nevnte terapeutiske peptid er et hormon.
NO19995802A 1997-05-27 1999-11-26 Fremgangsmate for fremstilling av emulsjonsformulering, emulsjon, samt anvendelse derav og fiskefôrpreparat NO316731B1 (no)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US4775397P 1997-05-27 1997-05-27
US4777997P 1997-05-27 1997-05-27
US7586398P 1998-02-25 1998-02-25
US7586498P 1998-02-25 1998-02-25
PCT/CA1998/000523 WO1998053698A1 (en) 1997-05-27 1998-05-27 Uses of oil bodies

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO995802D0 NO995802D0 (no) 1999-11-26
NO995802L NO995802L (no) 2000-01-26
NO316731B1 true NO316731B1 (no) 2004-04-19

Family

ID=27489174

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO19995802A NO316731B1 (no) 1997-05-27 1999-11-26 Fremgangsmate for fremstilling av emulsjonsformulering, emulsjon, samt anvendelse derav og fiskefôrpreparat

Country Status (21)

Country Link
US (2) US6146645A (no)
EP (1) EP0986309B1 (no)
JP (1) JP3869861B2 (no)
KR (2) KR20010013047A (no)
CN (1) CN1084595C (no)
AR (1) AR012877A1 (no)
AT (1) ATE386439T1 (no)
AU (1) AU737896B2 (no)
BR (1) BR9809691A (no)
CA (1) CA2291274C (no)
CY (1) CY1107375T1 (no)
DE (1) DE69839148T2 (no)
DK (1) DK0986309T3 (no)
ES (1) ES2301197T3 (no)
HK (1) HK1027487A1 (no)
IL (1) IL132908A (no)
NO (1) NO316731B1 (no)
NZ (1) NZ501404A (no)
PT (1) PT986309E (no)
TW (1) TW505508B (no)
WO (1) WO1998053698A1 (no)

Families Citing this family (117)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6599513B2 (en) 1997-05-27 2003-07-29 Sembiosys Genetics Inc. Products for topical applications comprising oil bodies
US6761914B2 (en) 1997-05-27 2004-07-13 Sembiosys Genetics Inc. Immunogenic formulations comprising oil bodies
US6372234B1 (en) 1997-05-27 2002-04-16 Sembiosys Genetics Inc. Products for topical applications comprising oil bodies
US7585645B2 (en) * 1997-05-27 2009-09-08 Sembiosys Genetics Inc. Thioredoxin and thioredoxin reductase containing oil body based products
US6022896A (en) * 1998-09-10 2000-02-08 Chesebrough-Pond's Usa Co. Petroselinic acid as an anti-irritant in compositions containing alpha-hydroxy acids
US6042841A (en) * 1998-03-16 2000-03-28 Unilever Home & Personal Care Usa Division Of Conopco, Inc. Cosmetic method of treating skin
US8106094B2 (en) * 1998-07-06 2012-01-31 Johnson & Johnson Consumer Companies, Inc. Compositions and methods for treating skin conditions
EP1131047A1 (en) * 1998-11-25 2001-09-12 SemBioSys Genetics, Inc. Oil bodies as topical delivery vehicles for active agents
KR20010077904A (ko) * 2000-02-01 2001-08-20 이양희 항산화물질이 함유된 포도씨기름과 그 제조방법
AU2001267218C1 (en) * 2000-06-16 2006-07-27 Sembiosys Genetics Inc. The use of plant oil-bodies in vaccine delivery systems
US8512718B2 (en) 2000-07-03 2013-08-20 Foamix Ltd. Pharmaceutical composition for topical application
ATE357273T1 (de) * 2000-08-10 2007-04-15 Henkel Kgaa Kosmetische mittel enthaltend malvaceae- samenextrakte
JP2004504863A (ja) * 2000-08-11 2004-02-19 ナチュラ・ホールディングス・プロプライエタリー・リミテッド 脂肪種子の加工
KR100408805B1 (ko) * 2000-10-11 2003-12-06 (주)인산가 죽염 및 홍화씨를 함유하는 캔디
CN100385005C (zh) * 2000-12-19 2008-04-30 塞姆柏奥希斯遗传学公司 制备多聚体蛋白质的方法和相关的组合物
US20030167524A1 (en) * 2000-12-19 2003-09-04 Rooijen Gijs Van Methods for the production of multimeric protein complexes, and related compositions
US7098383B2 (en) * 2000-12-19 2006-08-29 Sembiosys Genetics Inc. Methods for the production of multimeric immunoglobulins, and related compositions
TWI233361B (en) * 2001-04-13 2005-06-01 Gen Hospital Corp Methods of preventing UVB-induced skin damage
US20060179514A1 (en) * 2001-07-05 2006-08-10 Sembiosys Genetics, Inc. Methods for the production of multimeric protein complexes, and related compositions
US6998372B2 (en) 2001-08-16 2006-02-14 J&J Consumer Companies, Inc. Moisturizing detergent compositions
US20030158103A1 (en) * 2002-02-19 2003-08-21 Aqua Bounty Farms, Inc. Prevention of viral and bacterial disease in shrimp
FR2844454B1 (fr) * 2002-09-12 2006-05-19 Marc Schwaller Composition comprenant en association au moins une huile de courge et au moins une huile de bourrache,son utilisation comme medicament, comme agent dermatologique ou dermato-cosmetique
IL152486A0 (en) 2002-10-25 2003-05-29 Meir Eini Alcohol-free cosmetic and pharmaceutical foam carrier
US8486376B2 (en) 2002-10-25 2013-07-16 Foamix Ltd. Moisturizing foam containing lanolin
US8900554B2 (en) 2002-10-25 2014-12-02 Foamix Pharmaceuticals Ltd. Foamable composition and uses thereof
US9265725B2 (en) 2002-10-25 2016-02-23 Foamix Pharmaceuticals Ltd. Dicarboxylic acid foamable vehicle and pharmaceutical compositions thereof
US8119109B2 (en) 2002-10-25 2012-02-21 Foamix Ltd. Foamable compositions, kits and methods for hyperhidrosis
US20080138296A1 (en) 2002-10-25 2008-06-12 Foamix Ltd. Foam prepared from nanoemulsions and uses
US7700076B2 (en) 2002-10-25 2010-04-20 Foamix, Ltd. Penetrating pharmaceutical foam
US7820145B2 (en) 2003-08-04 2010-10-26 Foamix Ltd. Oleaginous pharmaceutical and cosmetic foam
US9211259B2 (en) 2002-11-29 2015-12-15 Foamix Pharmaceuticals Ltd. Antibiotic kit and composition and uses thereof
US7704518B2 (en) 2003-08-04 2010-04-27 Foamix, Ltd. Foamable vehicle and pharmaceutical compositions thereof
US10117812B2 (en) 2002-10-25 2018-11-06 Foamix Pharmaceuticals Ltd. Foamable composition combining a polar solvent and a hydrophobic carrier
CA2502986C (en) 2002-10-25 2011-08-23 Foamix Ltd. Cosmetic and pharmaceutical foam
US20060233721A1 (en) * 2002-10-25 2006-10-19 Foamix Ltd. Foam containing unique oil globules
US8119150B2 (en) 2002-10-25 2012-02-21 Foamix Ltd. Non-flammable insecticide composition and uses thereof
US20070292461A1 (en) * 2003-08-04 2007-12-20 Foamix Ltd. Oleaginous pharmaceutical and cosmetic foam
US9668972B2 (en) 2002-10-25 2017-06-06 Foamix Pharmaceuticals Ltd. Nonsteroidal immunomodulating kit and composition and uses thereof
US9034905B2 (en) 2003-02-05 2015-05-19 Rohm And Haas Company Synergistic microbicidal combinations
US7575739B2 (en) 2003-04-28 2009-08-18 Foamix Ltd. Foamable iodine composition
CA2430541A1 (en) * 2003-05-30 2004-11-30 Isomers Laboratories Cosmetic
US8486374B2 (en) 2003-08-04 2013-07-16 Foamix Ltd. Hydrophilic, non-aqueous pharmaceutical carriers and compositions and uses
US8795693B2 (en) 2003-08-04 2014-08-05 Foamix Ltd. Compositions with modulating agents
WO2005013713A1 (en) * 2003-08-12 2005-02-17 Unilever Plc Ice confection and its manufacturing process
WO2005030169A1 (en) * 2003-10-02 2005-04-07 Sembiosys Genetics Inc. Methods for preparing oil bodies comprising active ingredients
KR100679676B1 (ko) * 2003-12-30 2007-02-07 김명조 잣기름 및/또는 잣박을 포함하는 잣김
US20080241082A1 (en) * 2004-04-05 2008-10-02 Lonza Inc. Method for the Preparation of Cosmetic Emulsion
FI20040813A (fi) * 2004-06-14 2005-12-15 Timo Kalevi Korpela Hydrofobisia molekyylejä stabiloivat proteiinit
US7601858B2 (en) * 2004-08-17 2009-10-13 Gs Cleantech Corporation Method of processing ethanol byproducts and related subsystems
WO2006042608A1 (en) * 2004-10-18 2006-04-27 Unilever Plc Ice confection
US9108140B2 (en) 2005-03-16 2015-08-18 Gs Cleantech Corporation Method and systems for washing ethanol production byproducts to improve oil recovery
AU2006298442A1 (en) 2005-05-09 2007-04-12 Foamix Ltd. Saccharide foamable compositions
WO2007005928A2 (en) 2005-07-01 2007-01-11 Cornell Research Foundation Oleosin genes and promoters from coffee
US7541317B2 (en) * 2005-07-15 2009-06-02 Engineered Drilling Solutions Inc. Downhole drilling compositions and methods of preparation
WO2007068143A1 (fr) * 2005-12-13 2007-06-21 Lanqin Yang Preparation d'huile vegetale, de proteine brute et de fibre par extraction d'eau
CN101379168A (zh) 2006-01-12 2009-03-04 阿肯色大学评议会 纳米颗粒组合物、其制备方法及用途
US10100266B2 (en) 2006-01-12 2018-10-16 The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Dielectric nanolubricant compositions
AU2007217109A1 (en) * 2006-02-16 2007-08-30 Gs Industrial Design, Inc. Method of freeing the bound oil present in whole stillage and thin stillage
WO2007101049A2 (en) * 2006-02-22 2007-09-07 Gs Industrial Design, Inc. Method of converting a fermentation byproduct into oxygen and biomass and related systems
EA200870314A1 (ru) * 2006-03-03 2009-02-27 Спешиалти Протеин Продьюсерз, Инк. Способы отделения жира от соевого материала и композиции, полученные этим способом
WO2007122421A2 (en) * 2006-04-13 2007-11-01 The Boots Company Plc Composition and uses thereof
WO2007122422A2 (en) * 2006-04-13 2007-11-01 The Boots Company Plc Composition and uses thereof
US20080260655A1 (en) 2006-11-14 2008-10-23 Dov Tamarkin Substantially non-aqueous foamable petrolatum based pharmaceutical and cosmetic compositions and their uses
EP1952695A1 (en) * 2007-01-31 2008-08-06 Unilever N.V. Oil bodies and method of producing such oil bodies
DE102007034214A1 (de) 2007-07-06 2009-01-15 Nutrist Kg Geliertes Tierfuttermittel und Verfahren zur Herstellung eines gelierten Tierfuttermittels als Futtermittel-Lösung
US8636982B2 (en) 2007-08-07 2014-01-28 Foamix Ltd. Wax foamable vehicle and pharmaceutical compositions thereof
US9439857B2 (en) 2007-11-30 2016-09-13 Foamix Pharmaceuticals Ltd. Foam containing benzoyl peroxide
US8518376B2 (en) 2007-12-07 2013-08-27 Foamix Ltd. Oil-based foamable carriers and formulations
WO2009090495A2 (en) 2007-12-07 2009-07-23 Foamix Ltd. Oil and liquid silicone foamable carriers and formulations
BRPI0721326B1 (pt) * 2007-12-28 2015-09-08 Inst Nac De Pesquisas Da Amazônia Inpa composição cosmética compreendendo extratos de plantas e processo de preparo da mesma.
WO2009089117A1 (en) * 2008-01-04 2009-07-16 Hormel Foods Corporation Encapsulation of oxidatively unstable compounds
US20110020519A1 (en) * 2008-01-04 2011-01-27 Aveka, Inc. Encapsulation of oxidatively unstable compounds
WO2009090558A2 (en) 2008-01-14 2009-07-23 Foamix Ltd. Poloxamer foamable pharmaceutical compositions with active agents and/or therapeutic cells and uses
AU2009234385B2 (en) * 2008-04-11 2015-04-02 Botaneco Inc. Stabilized olesome preparations and methods of making them
AU2009234384A1 (en) * 2008-04-11 2009-10-15 Sembiosys Genetics, Inc. Controlled release of active agents from oleosomes
US7902134B1 (en) * 2008-11-24 2011-03-08 The Clorox Company Natural personal cleanser compositions
EP2228052A1 (en) 2009-03-09 2010-09-15 Coty Deutschland GmbH Cosmetic basic composition and use thereof
CA2760186C (en) 2009-04-28 2019-10-29 Foamix Ltd. Foamable vehicle and pharmaceutical compositions comprising aprotic polar solvents and uses thereof
WO2011013009A2 (en) 2009-07-29 2011-02-03 Foamix Ltd. Non surfactant hydro-alcoholic foamable compositions, breakable foams and their uses
CA2769677A1 (en) 2009-07-29 2011-02-03 Foamix Ltd. Non surface active agent non polymeric agent hydro-alcoholic foamable compositions, breakable foams and their uses
US9849142B2 (en) 2009-10-02 2017-12-26 Foamix Pharmaceuticals Ltd. Methods for accelerated return of skin integrity and for the treatment of impetigo
MX359879B (es) 2009-10-02 2018-10-12 Foamix Pharmaceuticals Ltd Composiciones tópicas de tetraciclina.
WO2011116220A2 (en) * 2010-03-17 2011-09-22 Arbonne International Llc Oral supplement
JP5737778B2 (ja) * 2010-03-25 2015-06-17 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構 リン脂質及び/又はリゾリン脂質の抽出方法
KR101249034B1 (ko) * 2010-11-10 2013-03-29 경희대학교 산학협력단 고수 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선 및 미백용 조성물
US20140057030A1 (en) 2010-12-21 2014-02-27 Gea Mechanical Equipment Gmbh Method for obtaining a fuel from jatropha seeds that are fich in fat
JP5778567B2 (ja) * 2011-01-24 2015-09-16 富士フイルム株式会社 経口用組成物
RU2653751C2 (ru) 2011-07-12 2018-05-14 Импоссибл Фудз Инк Способы и композиции для предметов потребления
US20140220217A1 (en) 2011-07-12 2014-08-07 Maraxi, Inc. Method and compositions for consumables
CN103796530A (zh) 2011-07-12 2014-05-14 马拉克西公司 用于消费品的方法和组合物
AU2012302146A1 (en) 2011-09-02 2014-04-03 Burt's Farm, LLC Personal care compositions comprising squash or pumpkin extract
WO2014110539A1 (en) 2013-01-11 2014-07-17 Maraxi, Inc. Methods and compositions for consumables
US10039306B2 (en) 2012-03-16 2018-08-07 Impossible Foods Inc. Methods and compositions for consumables
US8486870B1 (en) 2012-07-02 2013-07-16 Ajay P. Malshe Textured surfaces to enhance nano-lubrication
US8476206B1 (en) 2012-07-02 2013-07-02 Ajay P. Malshe Nanoparticle macro-compositions
EP2943077B1 (en) 2013-01-11 2018-10-31 Impossible Foods Inc. Non-dairy ricotta cheese replica
EP2978320B1 (en) * 2013-03-28 2018-05-02 Nestec S.A. Liquid creamer composition comprising oleosomes as replacement for oil and method of making the same
PL234907B1 (pl) * 2013-05-30 2020-05-18 Instytut Che Mii Przemysłowej Preparat do utrzymania higieny jamy ustnej i zapobiegający osadzaniu się płytki nazębnej
KR101508559B1 (ko) * 2013-06-14 2015-04-06 전남대학교산학협력단 목화다래 및 목화씨앗 추출물을 함유하는 세정제 조성물 및 제조방법
CN103520041B (zh) * 2013-10-12 2016-09-07 上海艳紫化工科技有限公司 巴西果保湿霜
AU2015240911B2 (en) 2014-03-31 2018-11-08 Impossible Foods Inc. Ground meat replicas
FR3029738B1 (fr) * 2014-12-10 2016-12-30 Agronutrition Procede de preparation d'une composition de traitement de plante, composition obtenue et ses utilisations
MX2017012103A (es) 2015-03-24 2018-11-12 Terravia Holdings Inc Composiciones de microalgas y sus usos.
EP3362151B1 (en) 2015-10-15 2020-08-05 Cargill, Incorporated Composition containing oleosomes of different size distribution
WO2017177334A1 (en) 2016-04-15 2017-10-19 Botaneco Inc. Sunscreen formulations comprising an oleosome suspension and an acidic buffering system
SG11201811351WA (en) * 2016-07-05 2019-01-30 Timilon Tech Acquisitions Llc Compositions and methods for forming stable, liquid metal oxide/hydroxide formulations
MX2020012139A (es) 2016-09-08 2021-01-29 Vyne Pharmaceuticals Inc Composiciones y metodos para tratar rosacea y acne.
CN107312619A (zh) * 2017-07-25 2017-11-03 江苏省农业科学院 一种提高核桃仁油体提取完整度的方法
CN109393054B (zh) * 2018-11-28 2021-08-24 江南大学 一种咖啡和奶茶专用大豆稀奶油制备方法及其产品和应用
AU2020242584B2 (en) 2019-03-19 2022-12-15 Unilever Ip Holdings B.V. Frozen confection
WO2021105333A1 (en) 2019-11-27 2021-06-03 Société des Produits Nestlé S.A. Composition for coating frozen confectionery and a process for manufacturing same
CN111264634B (zh) * 2020-01-14 2023-03-28 吉林农业大学 一种植物油体乳液及应用
CN111616985B (zh) * 2020-01-14 2023-06-02 吉林农业大学 油体洗护产品及其制备方法
WO2021163012A1 (en) * 2020-02-13 2021-08-19 Cargill, Incorporated Spread composition
IT202000021130A1 (it) * 2020-09-07 2022-03-07 I T P S R L Innovation & Tech Provider Processo per ottenere un estratto comprendente oleosomi da pasta di olive
CN112956680B (zh) * 2021-02-10 2022-07-15 青岛农业大学 一种仿植物油体核-壳型脂质体及其制备方法
WO2024047086A1 (en) * 2022-08-31 2024-03-07 Société des Produits Nestlé S.A. Co-extraction method for preparing a stable oil body solution from seed material and cereal bran

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3925560A (en) * 1973-05-14 1975-12-09 Commw Scient Ind Res Org Feed supplements for ruminants comprising lipid encapsulated with protein-aldehyde reaction product
US3971856A (en) * 1975-03-03 1976-07-27 Archer Daniels Midland Company Process for preparing soy protein concentrate
US4025658A (en) * 1975-10-30 1977-05-24 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Milk-like products from peanuts
US4088795A (en) * 1976-11-19 1978-05-09 Mead Johnson & Company Low carbohydrate oilseed lipid-protein comestible
US4362759A (en) * 1979-10-01 1982-12-07 Peanut Research & Testing Labs., Inc. Method of producing a slurry from peanuts and crop foods
BE880643A (fr) * 1979-12-14 1980-04-01 Cargill Inc Procede d'extraction et de raffinage d'huile au depart de graines oleagineuses
US5308372A (en) * 1984-01-18 1994-05-03 Daniels Ralph S Vegetable oil processing to obtain nutrient by-products
US5650554A (en) * 1991-02-22 1997-07-22 Sembiosys Genetics Inc. Oil-body proteins as carriers of high-value peptides in plants
US5602183A (en) * 1991-03-01 1997-02-11 Warner-Lambert Company Dermatological wound healing compositions and methods for preparing and using same
FR2719219B1 (fr) * 1994-05-02 1996-06-21 Rocher Yves Biolog Vegetale Composition cosmétique ou pharmaceutique à usage topique comprenant des vésicules lipidiques.
FR2719222B1 (fr) * 1994-05-02 1996-06-21 Rocher Yves Biolog Vegetale Vésicules lipidiques, leur procédé de fabrication et leurs applications.
JP3604177B2 (ja) * 1994-09-14 2004-12-22 日東電工株式会社 経皮吸収製剤
US5789001A (en) * 1995-06-09 1998-08-04 University Of Nebraska Ruminant feed and method for making
US5856452A (en) * 1996-12-16 1999-01-05 Sembiosys Genetics Inc. Oil bodies and associated proteins as affinity matrices

Also Published As

Publication number Publication date
NO995802L (no) 2000-01-26
ES2301197T3 (es) 2008-06-16
ATE386439T1 (de) 2008-03-15
NO995802D0 (no) 1999-11-26
IL132908A (en) 2002-07-25
CN1258198A (zh) 2000-06-28
BR9809691A (pt) 2000-10-03
IL132908A0 (en) 2001-03-19
DK0986309T3 (da) 2008-06-09
US6146645A (en) 2000-11-14
TW505508B (en) 2002-10-11
CA2291274C (en) 2006-05-16
EP0986309A1 (en) 2000-03-22
NZ501404A (en) 2001-09-28
AR012877A1 (es) 2000-11-22
DE69839148T2 (de) 2009-02-12
CY1107375T1 (el) 2012-12-19
EP0986309B1 (en) 2008-02-20
JP2002503268A (ja) 2002-01-29
DE69839148D1 (de) 2008-04-03
CN1084595C (zh) 2002-05-15
KR20010013047A (ko) 2001-02-26
JP3869861B2 (ja) 2007-01-17
AU737896B2 (en) 2001-09-06
CA2291274A1 (en) 1998-12-03
KR20040101211A (ko) 2004-12-02
WO1998053698A1 (en) 1998-12-03
US6210742B1 (en) 2001-04-03
AU7517898A (en) 1998-12-30
HK1027487A1 (en) 2001-01-19
PT986309E (pt) 2008-04-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0986309B1 (en) Uses of oil bodies
US6183762B1 (en) Oil body based personal care products
US7585645B2 (en) Thioredoxin and thioredoxin reductase containing oil body based products
US6372234B1 (en) Products for topical applications comprising oil bodies
US11096884B2 (en) Composition containing oleosomes of different size distribution
US20170000149A1 (en) Artificial oil bodies
US20020106337A1 (en) Products for topical applications comprising oil bodies
EP1905309A1 (en) Uses of oil bodies
WO2016195142A1 (ko) 모링가 추출물을 포함하는 나노에멀젼 천연 미용 조성물의 제조방법
CA2290278C (en) Oil body based personal care products
AU772919B2 (en) Uses of oil bodies
RU2200420C2 (ru) Способ получения масляной эмульсии (варианты), эмульсия, препарат для кормления рыб, способ получения масляной эмульсии для местного применения и масляная эмульсия для местного применения
MXPA99010958A (es) Usos de cuerpos de aceite
UA66360C2 (en) Use of oil emulsions

Legal Events

Date Code Title Description
MM1K Lapsed by not paying the annual fees