NO176839B

NO176839B - Ligander og fremgangsmåte for deres fremstilling, metallkomplekser dannet med disse ligander samt diagnostisk preparat og röntgenkontrastmiddel omfattende ovennevnte metallkomplekser

Info

Publication number: NO176839B
Application number: NO881567A
Authority: NO
Inventors: Michel Schaefer; Didier Doucet; Bruno Bonnemain; Dominique Meyer
Original assignee: Guerbet Sa
Priority date: 1987-04-14
Filing date: 1988-04-12
Publication date: 1995-02-27
Also published as: HUT47075A; SI8810742A; NO881567L; DK202788A; EP0287465A1; DK202788D0; FI881708A; JPH01211573A; FI881708A0; FI93830C; PT87216A; YU74288A; FR2614020A1; HU198501B; IL86059A0; ES2053779T3; DE3877799D1; NO176839C; AU1461188A; DE3877799T2

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører nye nitrogenholdige cykliske ligander og metallkomplekser dannet ved hjelp av disse ligander, diagnostisk preparat omfattende minst ett av de ovennevnte komplekser for anvendelse i forbindelse med magnetisk resonanspåvisning, samt røntgenkontrastmiddel også omfattende ett eller flere av de ovennevnte komplekser.

Oppfinnelsen vedrører også en fremgangsmåte for fremstilling

av ligandene.

Disse og andre trekk ved oppfinnelsen fremgår av patent-

kravene.

Således, vedrører oppfinnelsen en ligand som er kjennetegnet

ved at den har formel I:

hvori

Rx representerer et radikal med formel:

hvori

R6 velges fra gruppen bestående av C1-C14 alkyl, C1-C4 hydroksyalkyl og en gruppe med formel:

hvori

Rn representerer C1- Ca alkylen,

R7 velges fra gruppen bestående av hydrogen, C^-C^ alkyl og CX-C4 hydroksyalkyl,

R2, R3 og R4 representerer et radikal med formel:

n = 1 eller 2, og

Z representerer en gruppe med formel:

hvori

R10 velges fra gruppen bestående av hydrogen og -CH2-COOH, såvel som saltene derav.

Ligandene med formel I fremstilles ved at et polyamin med formel IV: hvori R' 1 representerer et radikal med formel:

hvori

R'6 er valgt fra gruppen bestående av Cx- C14 alkyl, Cx-C4 hydroksylalkyl og en gruppe med formel:

hvori

R2, R3, R4, R7, Rn og n er som angitt i krav 1, og Z' representerer en gruppe med formel:

R' representerer en tosyl-, mesyl- eller benzensulfonylgruppe og

R4 er som angitt over,

reageres med en forbindelse med formel V:

hvori

R2, R3 og R' er som angitt over og

X representerer en labil gruppe,

for oppnåelse av en forbindelse med formel III:

hvori

R2, R3, R4, R'i, Z' og n er som angitt over,

hvorpå en forbindelse med formel II:

hvori R5 er hydrogen og X representerer en labil gruppe eller et aldehyd med formel:

hvori R5 er som angitt over, reageres i nærvær av hydrogen-cyanid eller cyanidioner med det ovennevnte sykliske amin med formel III for oppnåelse av den ovennevnte forbindelse med formel I.

Forbindelsen med formel III hvori Z' har den ovennevnte betydning fremstilles ved å reagere et polyamin med formel IV:

hvori n, R', R'x og R4 har betydningen som angitt over,

med en "forbindelse med formel V:

hvori R2, R3 og R' har betydningen som angitt over og X representerer en labil gruppe som en tosyloksy- eller mesyl-oksygruppe eller et kloratom, bromatom eller jodatom.

Forbindelsen med formel III kan også fremstilles ved å reagere et diamin med formel X: hvori R' 1 og R' har den ovennevnte betydning, med en forbindelse med formel XI:

hvori R', R2, R3, R4, X og n er som angitt i det foregående.

Denne cykliseringsreaksjonen gjennomføres fordelaktig i nærvær av en faseoverføringskatalysator.

Polyaminene med formel IV kan oppnås fra dihydroksylaminer i overensstemmelse med følgende reaksjonsskjema:

Alternativt omsettes ftalimid med forbindelsen med formel VII og hydrazinolyse gjennomføres for å omdanne forbindelsen med formel VII til forbindelsene med formel IX.

Forbindelsene med formel III inneholdende to nitrogenholdige ringer kan fremstilles i henhold til fremgangsmåtene som er angitt i det foregående.

Det er således mulig å reagere et polyamin med formel XII:

hvori A er C1- Cs alkylen og R' har betydningen som angitt over, med en forbindelse med formel XI for å oppnå forbindelsen med formel III hvori Rn er en gruppe A.

Polyaminet med formel XII kan fremstilles fra et tetrahalo-genert derivat ved nukleofil substitusjon i nærvær av natriumazid etterfulgt av en reduksjon i nærvær av hydrogen og palladium på karbon.

Den foreliggende oppfinnelse vedrører også komplekser dannet med ligander med formel I og metallioner valgt blant lanthanidionene med atomnummer 57 til 71, såvel som saltene av disse komplekser med fysiologisk tålbare uorganiske eller organiske baser eller med basiske aminosyrer.

I slike komplekser er metallionene særlig gadolinium, europium og dysprosium.

Som eksempler på salter kan man nevne dem som er dannet med natriumhydroksyd, N-metylglukamin, dietanolamin, lysin og arginin.

Kompleksene kan fremstilles ved å reagere ligandene med et metallsalt eller metalloksyd i et vandig løsningsmiddel og med eventuell nøytralisering for å danne et salt.

Oppfinnelsen omfatter ikke bare ligander med formel I og kompleksene som er definert over i form av racemiske blandinger, men også stereoisomerene av disse ligander og komplekser.

Kompleksene ifølge oppfinnelsen kan være innkapslet og særlig i liposomer.

Kompleksene ifølge oppfinnelsen som er dannet med ligander med formel I og paramagnetiske ioner, og saltene derav, med fysiologisk tålbare baser kan anvendes som midler for å indusere magnetisk resonans og som reagens for kjemisk skift in vivo.

Kompleksene ifølge oppfinnelsen som er dannet med ligander med formel I og med lanthanidioner med atomnummer 57 til 71, og deres salter med fysiologisk tålbare baser, kan anvendes som røntgenkontrastmidler. For dette formål er kompleksene dannet med følgende metallioner særlig foretrukne: Gd, Er, Dy, Tb, Ce og La.

Følgelig vedrører den foreliggende oppfinnelse også diagnostiske preparater som kan tilføres til mennesker, omfattende minst ett kompleks dannet med en ligand med formel I og med metallioner valgt fra lanthanidionene med atomnummer 57 til 71, såvel som saltene av disse komplekser med fysiologisk tålbare uorganiske eller organiske baser, eller med basiske aminosyrer.

Disse preparater kan særlig omfatte løsninger av et kompleks i henhold til oppfinnelsen i et fysiologisk tålbart vandig løsningsmiddel.

De diagnostiske preparater i henhold til oppfinnelsen kan tilføres: parenteralt omfattende intravenøst, intraarterielt,

intralymfatisk, subkutant,

oralt,

subaraknoidalt,

intrabronkialt i form av en aerosol,

intraartikulært,

lokalt for å synliggjøre hulrom (f.eks. uterus),

for påvisning ved magnetisk resonans, idet dosene varierer avhengig av tilførselsmåten.

For intravenøs og intraarteriell tilførsel er dosene fra 0,01 til 2 mM/kg.

For oral tilførsel kan dosene være opptil 10 mM/kg.

For andre tilførselsmåter er dosene som anvendes vanligvis mindre enn 1 mM/kg og ved subaraknoidal tilførsel er dosene vanligvis under 0,05 mM/kg.

Dosene er de samme ved anvendelse som reagenser for kjemisk skift in vivo og som røntgenkontrastmidler unntatt ved intra-venøs eller intraarteriell tilførsel hvor dosene kan være større enn eller lik 5 mM/kg.

De etterfølgende eksempler illustrerer fremstillingen av ligandene i henhold til den foreliggende oppfinnelse.

I disse eksemplene ble:

NMR spektra gjennomført på en Varian EM 3 60 maskin ved 60 Mz med TMs som intern referanse. Dersom ikke

annet er angitt, er løsningsmiddelet CDC13.

IR spektra ble gjennomført i et Perkins-Elmer 1320 apparat. Spektra for de faste stoffer ble målt i form av KBr skiver. Når det gjelder væsker (oljer) ble de målt i

fravær av løsningsmiddel.

Uttrykket "buffer" anvendt i tynnsjiktkromatografi angir

en blanding av 1,5 M NH4OH og 1,5 M (NH4)2C03. Smeltepunktene ble målt på en Kofler-blokk.

Uttrykkene som anvendes i forbindelse med analyser under kompleksdannelse: "fravær av fri Gd<3+> og av frie ligander" skal forståes innenfor påvisningsgrensene for de metoder som anvendes, dvs < 4 ppm og < 5 ppm for henholdsvis Gd<3+> og ligand.

EKSEMPEL 1 Fremstilling av 2,6-dimetyl-l,4,7,10-tetraaza-cyklododekan-N,N',N'',N'''-tetraeddiksyre.

a) Fremstilling av N-tosyl-bis (2-tosyloksypropyl)amin.

En løsning av 53,2 g (0,4 mol) diisopropanolamin i 50 cm<3>

pyridin tilsettes dråpevis under avkjøling til en løsning av 248 g (1,3 mol) tosylklorid i 200 cm<3> pyridin ved 0°C slik at temperaturen holdes mellom 1 og 5°C. Blandingen får stå ved denne temperatur i 72 timer. Den helles deretter inn i 2 1 isvann og 250 cm<3> konsentrert saltsyre.

Det tosylerte derivat ekstraheres med 2 1 metylenklorid. Den organiske fase tørkes over natriumsulfat, filtreres og avfarges med 3 SA trekull og refiltreres gjennom et lag av silika. Etter avdamping av saltet ble det tilbake 193,8 g av en gul olje (utbytte 81 %, Rf=0,7, silika/CH2Cl2/aceton/98/2) som anvendes i neste trinn uten ytterligere rensing.

<1>HMNR spektrum: 6H CH3 (dublett 1,1 og 1,3 ppm), 9H CH3 tosyl (singlett 2,5 ppm), 4H CH2 (multiplett med senter i 3,3 ppm), 2H CH (kvadruplett mellom 4,7 og 5,1 ppm), 12H aromatiske forbindelser (multiplett 7,3 og 8 ppm).

b) Fremstilling av N-tosyl-bis(2-azidopropyl)amin.

Til 193,8 g (0,32 mol) av forbindelsen oppnådd ia) i 1,2 1

acetonitril og 300 cm<3> vann tilsettes 65,1 g natriumazid

(1 mol). Blandingen omrøres og oppvarmes ved 75°C i 48 timer. Etter avkjøling avdampes acetonitril i vakuum.

Resten tas opp ill metylenklorid. Den organiske fase vaskes med vann, tørkes og filtreres gjennom et silikalag (200 g). Etter avdamping oppnås 82 g av en klar gul olje (utbytte 75 %, Rf=0,85, silika/CH2Cl2/aceton/92/2) som er tilstrekkelig ren til å bli anvendt direkte.

IR spektrum N3=2100 cm"<1>, kraftig.

c) Fremstilling av N-tosyl-bis(2-aminopropyl)amin.

82,2 g (0,244 mol) av forbindelsen oppnådd i b) oppløses i

500 cm<3> etanol inneholdende 8 g 5 % palladium på karbon ved 50 % fuktighet.

Blandingen omrøres kraftig mens en forsiktig hydrogenstrøm føres gjennom (fjerning av nitrogen som frigjøres). Etter åtte timer ved omgivelsestemperatur, viser TLC fravær av azid-funksjonen. Blandingen filtreres deretter og avdampes. Det oppnås 68,4 g av en klar gul olje (utbytte 98,5 %; Rf=0,6, silika/MeOH/NH4OH/95/5) som anvendes videre uten rensing.

NMR spektrum: 6H CH3 (dublett 0,9 og 1 ppm); 3H CH3 tosyl (singlett 2,4 ppm), 6H CH2 og CH (kompleks multiplett mellom 2,7 og 3,2 ppm), 4H aromatiske forbindelser (multiplett mellom 7,1 og 7,7 ppm).

d) Fremstilling av N-tosyl-bis[(tosylamino)propyl]amin.

93 g (0,5 mol) tosylklorid tilsettes i porsjoner til 68,4 g

(0,24 mol) av aminet oppnådd i c), i 500 cm<3> metylenklorid og

70 cm<3> (0,5 mol) trietylamin ved 0°C. Etter endt tilsetning omrøres blandingen i seks timer ved omgivelsestemperatur. Reaksjonsblandingen vaskes deretter med 600 cm<3> vann, den organiske fase tørkes, avdampes til tørrhet og resten kromatograferes på en silikagelkolonne med ren metylenklorid, deretter med en metylenklorid/metanol/92/2 blanding. Fraksjonene av interesse avdampes og den faste rest rekrystalliseres fra etanol. Etter filtrering og tørking er den oppnådde masse 99,1 g (utbytte 70 %).

NMR spektrum: 6H CH3 (dublett 0,9, 1 ppm), 9H CH3 p-tosyl (singlett 2,4 ppm), 4H CH2 (triplett med senter i 2,9 ppm),

2H CH (dublett 3,3 og 3,5 ppm), 12H aromatiske forbindelser (multiplett med senter i 7,4 ppm).

e) Fremstilling av N-tosyl-bis(2-tosyloksyetyl)amin.

En løsning av 32,5 g (0,31 mol) dietanolamin i 60 cm<3> pyridin

tilsettes sakte til en løsning av 185 g (0,97 mol) tosylklorid i 22 0 cm<3> pyridin ved 0°C slik at temperaturen ikke over-skrider 5°C. Etter endt tilsetning holdes blandingen ved denne temperatur i en time, deretter helles den over i 220 cm<3 >isavkjølt vann under kraftig omrøring. Etter filtrering, vasking og tørking oppnås 148,4 g presipitat (utbytte 85 %, Rf=0,6, silika/CH2Cl2/aceton/98/2).

NMR spektrum: 9H CH3 tosyl (singlett 2,4 ppm), 4H CH2N (triplett ved 3,4 ppm), 4H CH2 (triplett ved 4,1 ppm), 12H aromatiske forbindelser (multiplett mellom 7,1 og 7,7 ppm). f) Fremstilling av N,N',N'',N' "-tetratosyl-2,6-dimetyl-1,4,7,10-tetraazacyklododekan.

65 g (0,11 mol) av forbindelsen oppnådd i d) oppløst i 500 cm<3 >tørr DMF tilsettes dråpevis til 8,8. g (0,22 mol) av en 60 % suspensjon av NaH i olje i 50 cm<3> DMF. Tilsetningen gjennom-føres ved omgivelsestemperatur og på en slik måte at man har en stabil frigjøring av hydrogen. Etter endt tilsetning oppvarmes blandingen til 100°C og en løsning av 68,1 g

(0,12 mol) av forbindelsen oppnådd i e) oppløst i 500 cm<3> tørr DMF tilsettes dråpevis. Reaksjonsblandingen holdes deretter ved denne temperatur i 24 timer med kraftig omrøring.

Løsningsmiddelet avdampes deretter i vakuum og resten tas opp i en CH2C12/H20 blanding. Den organiske fase vaskes med vann, tørkes og avdampes til tørrhet. Resten (100 g) rekrystalliseres fra isopropanol, deretter fra toluen til å gi, etter filtrering, vasking med isopropyleter og tørking, 36 g av et hvitt faststoff (utbytte 40 %, Rf=0,5-0,6, silika/CH2Cl2/- aceton/98/2).

NMR spektrum: 6H CH3 (dublett ved 1 og 1,2 ppm), 12H CH3 tosyl (singlett 2,4 ppm), 14H CH2 og CH (multiplett mellom 3 og 4,5 ppm), 16H aromatiske forbindelser (multiplett mellom 7,1 og 7,7 ppm). g) Fremstilling av N,N',N'',N'''-tetratosyl-2,6-dimetyl-1,4,7,10-tetraazacyklododekan (variant).

En nylaget løsning av natriumetylat (60 mmol) i 200 cm<3> tørr DMF tilsettes hurtig til en løsning av 17 g (28,7 mmol) av forbindelsen oppnådd i d) i 100 cm<3> etanol ved tilbakeløp. Den oppnådde blanding blir klar og behandles med tilbakeløp i en til to timer. Løsningsmidlene avdampes til tørrhet, resten oppløses i 200 cm<3> DMF og oppvarmes til 100°C. En løsning av 17 g (30 mmol) av forbindelsen oppnådd i e) i 100 cm<3> DMF tilsettes til denne løsning i løpet av en halv time. Reaksjonsblandingen holdes ved 100°C over natten. DMF avdampes deretter og resten tas opp i en H20/CH2C12 blanding. Produktet fra den organiske fase kromatograferes på en silikagelkolonne med blandingen CH2Cl2/etylacetat/98/2 som elueringsmiddel. Produktet rekrystalliseres fra isopropyleter og veier 13,5 g etter tørking (utbytte 58 %, Rf=0,5-0,6, silika/CH2Cl2/- aceton/98/2).

Spekter som er identisk med det oppnådd i f).

h) Fremstilling av 2,6-dimetyl-l,4,7,10-tetraazacyklo-dodekan. 33 g av forbindelsen oppnådd i f) eller g) oppløses i 80 cm<3 >98 % svovelsyre og oppvarmes ved 100°C i en argonatmosfære i 72 timer. Etter avkjøling, tilsettes reaksjonsblandingen dråpevis til 1 1 etyleter ved 0°C. Det oppnådde 2,6-dimetyl-1,4,7,10-tetraazacyklododekansulfat filtreres fra, tas opp i vann, nøytraliseres med natriumhydroksyd og ekstraheres med CH2C12. De organiske faser kombineres og avdampes til tørr-het, og oppnådd faststoff i en mengde på 6 g anvendes

uten ytterligere rensing (utbytte 75 %, Rf=0,65, aluminium-oksyd/bu tano 1/vann/eddiksyre/50/25/11).

NMR spektrum ( (D20) : 6H CH3 (dublett 0,9 til 1 ppm), 14H CH2 og CH (multiplett med senter i 2,5 ppm).

i) Fremstilling av 2,6-dimetyl-l,4,7,10-tetraazacyklo-dodekan-N,N',N'',N'''-tetraeddiksyre.

En blanding av 5,7 g (60 mmol) monokloreddiksyre og 3,4 g

(60 mmol) kaliumhydroksyd i 25 cm<3> vann tilsettes til en løsning av 3 g (15 mmol) av forbindelsen oppnådd i h) i 25 cm<3 >vann. Den oppnådde blanding oppvarmes til 60°C og en løsning av natriumhydroksyd (3,4 g, 60 mol) i 25 cm<3> vann tilsettes slik av pH holdes mellom 9 og 10. Tilsetningen krever åtte timer. Etter at tilsetningen av kaliumhydroksyd er fullstendig, opprettholdes oppvarmingen i 24 timer. Etter avkjøling, bringes pH til 2,5 med konsentrert HCl. Det dannede presipitat filtreres fra, vaskes med iskaldt vann og veier 3 g etter tørking (utbytte:35 %, Rf=0,33, silika/etylacetat/isopropanol/ammoniakk/12/35/30). Denne forbindelsen tilsvarer komplekset av 2,6-dimetyl-l,4,7,10-tetraazacyklododekan-N,N',N'',N'''-tetraeddiksyre med 2 KC1.

9,5 g av dette kompleks elueres med 200 cm<3> 10% eddiksyre fra en ionebytterharpiks IRA 958 (OH) som var regenerert på forhånd med IN NaOH og vasket med vann inntil nøytralitet.

De oppnådde fraksjoner avdampes til tørrhet og opptas tre ganger i 50 cm<3> vann for å eliminere spor av eddiksyre. Den oppnådde rest gnis ut med etyleter (100 cm<3>) til å gi, etter filtrering og tørking, 6,3 g av et hvitt faststoff.

Utbytte: 89 %.

NMR spektrum: (D20) 6H CH3 (dublett 1,4 og 1,5 ppm); 14H CH2 og CH (kompleks multiplett med senter i 3,6 ppm), 8H CH2C00H (dublett ved 3,8 ppm).

EKSEMPEL 2 Fremstilling av gadoliniumkomplekset av 2,6-dimetyl-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-N,N',N'',

N'''-tetraeddiksyre (metylglukaminsalt).

En suspensjon av 5,425 g (12,54 mmol) 2,6-dimetyl-l,4,7,10-tetraazacyklododekan-N, N',N'',N'''-tetraeddiksyre oppnådd i eksempel li) og 2,27 g Gd203 (6,27 mmol) i 125 cm<3> vann, oppvarmes ved 65°C i 24 timer. pH innstilles deretter til 7,4 ved tilsetning av metylglukamin. Etter bestemmelse av fri Gd<3+> ved xy1enolorange/EDTA metoden, tilsettes 650 g 2,6-dimetyl-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-N,N',N'',N'''-tetra-eddiksyre (1,5 mmol) for å kompleksdanne det gjenværende gadolinium. Fullføring av kompleksdanneIse bekreftes ved fravær av fri Gd<3+> (bestemmes ved xylenolorange) og av frie ligander (kompleksometrisk bestemmelse med Cu<2+>). Bestemmelsen av totalt gadolinium i løsningen gjennomføres ved atomemisjonsspektroskopi i DCP på et Epectrospan 4 Beckmann-apparat. Kvantitativt utbytte: Rf=0,49, silika/etylacetat/- isopropanol/ammoniakk/12/35/30.

EKSEMPEL 3 Fremstilling av 2-heksyl-l,4,7,10-tetraaza-cyklododekan-N, N',N'',N' "-tetraeddiksyre. a) Fremstilling av N-(2-hydroksyetyl)-N-(2-heksyl-2-hydroksyetyl)amin. 50 g (0,39 mmol) 1,2-epoksyoktan tilsettes dråpevis til 250 cm<3> (4 mol) etanolamin ved 100°C. Oppvarmingen opprettholdes i en time etter endt tilsetning og overskudd etanolamin destilleres i vakuum. Resten rekrystalliseres fra 600 cm<3 >heksan, etter filtrering og tørking. Den faste rest hadde en vekt på 69 g (smeltepunkt 45°C, utbytte: 93 %, Rf=0,62, silika/butanol/H20/eddiksyre/50/25/11.

NMR spektrum: 3H CH3 (triplett 0,9 ppm), 10H CH2 kjede (stor singlett ved 2,2 ppm), 7H CH2 og CH (to dårlig oppløste masser . ved 2,8 og 3,8 ppm). b) Fremstilling av N-tosyl-N-(2-tosyloksyetyl)-N-(2-heksyl-2-tosyloksyetylamin.

47,3 g (0,25 mol) av forbindelsen oppnådd i a) tilsettes i små mengder til en løsning av 156 g (0,82 mol) tosylklorid i 300 cm<3> pyridin ved 0°C i løpet av en time. Blandingen holdes ved 0°C i to døgn, deretter helles den over i en blanding av is og HC1 (2/1) . Produktet ekstraheres med CH2C12, og kromatograferes deretter på en silikagelkolonne med CH2C12 som elueringsmiddel. Oppnådd masse er 118 g (utbytte: 72%, Rf=0,6, silika/CH2Cl2/aceton/98/2).

NMR spektrum: 3H CH3 kjede (triplett ved 0,9 ppm), 10H CH2 kjede (stor singlett ved 1,3 ppm), 9H CH3 tosyl (singlett ved 2,4 ppm), 4H CH2N (dårlig oppløst triplett ved 3,4 ppm), 3H CH20 og CH (multiplett ved 4,2 ppm), 12 H aromatiske forbindelser (multiplett mellom 7 og 7,7 ppm). c) Fremstilling av N-tosyl-N- (2-azidoetyl) -N- (2-heksyl-2-azidoetyl)amin.

87 g (0,133 mol) av forbindelsen oppnådd i b) og 29,25 g

(0,5 mol) natriumazid blandes med 350 cm<3> acetonitril og

80 cm<3> vann. Blandingen oppvarmes ved 65°C i tre døgn. Acetonitril avdampes deretter i vakuum og resten tas opp i CH2C12. Den organiske fase vaskes med vann, tørkes og avdampes. Det oppnås 50 % av en gul olje som anvendes uten rensing (utbytte: 95 %, Rf=0,75, silika/CH2Cl2/aceton/98/2).

NMR spektrum: 3H CH3 kjede (triplett ved 0,9 ppm), 10H CH2 kjede (multiplett ved 1,4 ppm), 3H CH3 tosyl (singlett ved 2,4 ppm), 5H CH2 og CH (kompleks multiplett ved 3,4 ppm), 4H aromatiske forbindelser (multiplett mellom 7,1 og 7,7 ppm).

IR spektrum N3 = 2100 cm"<1>, sterk.

d) Fremstilling av N-tosyl-N-(2-aminoetyl)-N-(2-heksyl-2-aminietyl) amin. 71 g (0,18 mol) av diazidet oppnådd i c) oppløses i 500 cm<3 >etanol hvortil 5 g palladium på karbon med 50 % fuktighet er blitt tilsatt. Suspensjonen omrøres meget kraftig under en strøm av hydrogen ved omgivelsetemperatur i 24 timer. Kataly-satoren fjernes ved filtrering. Etter avdamping av etanol oppnås 61,5 g diamin som anvendes uten rensing (utbytte: kvantitativt, Rf=0,51, silika/MeOH/NH4OH/95/5) . e) Fremstilling av N-tosyl-N-(tosylaminoetyl)-N-(2-heksyl-2-tosylaminoetyl) amin.

68,6 g (0,36 mol) tosylklorid tilsettes i porsjoner til en løsning av 61,5 g (0,18 mol) av forbindelsen oppnådd i d) i 500 cm<3> CH2C12 og 52,5 cm<3> (0,38 mol) trietylamin ved 0°C. Etter omrøring i to timer ved omgivelsetemperatur, behandles reaksjonsblandingen med 500 cm<3> vann. Den organiske fase vaskes med vann, tørkes og avdampes. Den oljeaktige rest kromatograferes på en silikagelkolonne med CH2C12 som elueringsmiddel. Oljen som er oppnådd etter avdamping av løs-ningsmiddelet og som er tatt opp i isopropyleter gir 60 g av et hvitt faststoff (smeltepunkt 120°C, utbytte: 51 %, Rf=0,6, silika/CH2Cl2/MeOH/98/2) .

NMR spektrum: 13H heksylkjede (dårlig oppløst multiplett med senter i 1 ppm), 9H CH3 tosyl (singlett ved 2,4 ppm), 7H CH2 og CH (multiplett med senter i 3,1 ppm). f) Fremstilling av N,N',N" ,N'"-tetratosyl-2-heksyl-1,4,7,10-tetraazacyklododekan.

En blanding av 46,5 g (71,5 mmol) av forbindelsen oppnådd i

d) i det foregående, 41,5 g (73 mmol) av forbindelsen oppnådd i eksempel le) og 24 g (70 mmol) tetrabutylammoniumhydrogen-sulfat oppløses i 400 cm<3> toluen og 200 cm<3> 20 % natriumhydroksyd. Blandingen omrøres kraftig ved 70°C i 24 timer. Etter avkjøling, vaskes den organiske fase med vann, tørkes og avdampes. Resten krystalliseres i etanol, og kromatograferes deretter på en silikagelkolonne med CH2C12 som emuleringsmid-del. 35 g faststoff oppnås (smeltepunkt 154/161°C) .

Utbytte: 56 %, Rf=0,55, silika/CH2Cl2/aceton/98/2.

NMR spektrum: 3H CH3 kjede (triplett ved 0,9 ppm), 10H CH2 kjede (multiplett ved 1,3 ppm), 12H CH3 tosyl (singlett ved 2,4 ppm), 15H CH2 og CH ring (multiplett ved 3,3 ppm), 16H aromatiske forbindelser (multiplett mellom 7,1 og 7,7 ppm). g) Fremstilling av 2-heksyl-l,4,7,10-tetraazacyklododekan.

12 g (13 mmol) av forbindelsen oppnådd i f) oppvarmes ved

100°C i 40 cm<3> 98 % svovelsyre under argon i 24 timer. Etter avkjøling tilsettes blandingen dråpesvis til 500 ml etyleter ved 0°C. Det oppnådde sulfat filtreres, nøytraliseres deretter ved hjelp av en 10 % løsning av natriumhydroksyd og ekstraheres med CH2C12. Den organiske fase tørkes over natriumsulfat, avdampes til tørrhet til å gi 2 g av et krem-farget faststoff (utbytte: 57 %, Rf=0,75, aluminiumoksyd/- butanol/vann/eddiksyre/50/25/11) .

Forbindelsen lagres i form av oksalatet ved å omsette en etanolløsning av oksalsyre med 2-heksyl-l,4,7,10-tetraaza-cyklododekan over natten ved omgivelsestemperatur. Oksalatet presipiterer i form av et hvitt faststoff. h) Fremstilling av 2-heksyl-l,4,7,10-tetraazacyklododekan-N,N',N<#>',N<#>''-tetraeddiksyre.

En løsning av 1,09 g (2,8 mmol) av oksalatet. oppnådd i g) i 13 cm<3> vann og 20 ml etanol nøytraliseres med 470 mg

(8,4 mmol) kaliumhydroksyd. Til denne løsning tilsettes kaliummonokloracetat fremstilt fra 1,063 g (11,25 mmol) monokloreddiksyre og 630 mg (11,25 mmol) kaliumhydroksyd i 20 cm<3> vann. Reaksjonsblandingen oppvarmes til 60°C og pH holdes mellom 8 og 10 ved tilsetning av kaliumhydroksyd. Tilsetningen foregår i løpet av tre timer hvorunder 10 cm<3 >vann inneholdende 630 mg kaliumhydroksyd tilsettes. Etter en reaksjonstid på tre timer tilsettes 141 mg (1,5 mmol) kloreddiksyre og 84 mg (1,5 mmol) kaliumhydroksyd.

Blandingen holdes deretter ved 60°C i to døgn. Etter av-kjøling og surgjøring til pH 2,6 (6N HC1) føres løsningen gjennom en kolonne med en sterk basisk harpiks IRA 958. Eluering med 100 cm<3> 10 % maur syre gir 7 00 mg av produktet. De gjennomstrømmede fraksjoner (produkt ikke tilbakeholdt) konsentreres og behandles på nytt på en identisk kolonne. Etter samme behandling oppnås 2,5 g av produktet (utbytte: 38,4%, Rf=0,65, silika/etanol/buffer/2/1) .

NMR spektrum: 3H CH3 kjede (triplett 0,9 ppm), 10H CH2 kjede (multiplett ved 1,4 ppm), 15H CH2 og CH ring (multiplett ved 2,3 ppm), 8H CH2 COOH (singlett ved 3,9 ppm). NMR analyse ble gjennomført i D20.

EKSEMPEL 4 Fremstilling av gadoliniumkomplekset av 2-heksyl-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-N,N', N'',

N'''-tetraeddiksyre.

488,6 mg (1 mmol) av forbindelsen oppnådd i eksempel 3 og 181,3 mg (1 mekv. metall) gadoliniumoksyd ble suspendert i 40 cm<3> vann og oppvarmet ved 65°C i to døgn. Etter to timer er løsningen klar. Kompleksutviklingen måles under reaksjonen ved bestemmelse av fri gadolinium. Etter endt reaksjon filtreres løsningen gjennom et Millipore-filterpapir, avdampes deretter til tørrhet og krystalliseres fra etyleter. 550 mg av et hvitt faststoff oppnås (utbytte: 85,5 %, Rf=0,65, EtOH/buffer/2/1).

EKSEMPEL 5 Fremstilling av gadoliniumkomplekset av 2-heksyl-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-N, N' ,N'',

N'''-tetraeddiksyre (metylglukaminsalt). 488,6 mg (1 mmol) av forbindelsen oppnådd i eksempel 3 og 181,3 mg (1 mekv. metall) gadoliniumoksyd ble suspendert i 40 cm<3> vann og oppvarmet til 65°C i tolv timer. Metylglukamin tilsettes til den klare løsning for å bringe pH til 7,4. Det tilsettes ligander avhengig av resultatene av analysene. Endt kompleksdanneIse bekreftes ved fravær av Gd<3+> (bestemmelse ved xylenolorange) og av frie ligander (kompleksometrisk bestemmelse med kobber). Bestemmelse av totalt gadolinium i løs-ningen gjennomføres ved hjelp av atomemisjonsspektroskopi på et Spectrospan 4 Beckmann apparat. Rf=0,65, EtOH/buffer/2/1.

EKSEMPEL 6 Fremstilling av 2-metyl-l,4,7,10-tetraazade-dokan-N,N',N'',N'''-tetraeddiksyre.

a) Fremstilling av N,N'-ditosyl-1,2-diaminpropan.

I en 1 1 trehalskolbe utstyrt med en magnetisk rører, et

termometer og et kontrollrør, oppløses 14,8 g 1,2-diaminpropan i 500 ml CH2C12 og 58 cm<3> Et3N. 80 g tosylklorid innføres i porsjoner i løpet av en time. Avkjøling på isbad er nødvendig for å opprettholde en temperatur på 2 0°C.

Reaksjonsblandingen omrøres deretter over natten ved romtemperatur .

Reaksjonsblandingen overføres til 1 1 skilletrakt og vaskes deretter med 2 x 260 cm<3> vann.

Den organiske fase tørkes over Na2S04, avdampes til tørrhet og krystalliseres deretter fra isopropyleter.

Oppnådd vekt = 66 g

Utbytte = 86 %

Smp. = 98/100°C

NMR

1 ppm dublett (3H) 3,1 ppm multiplett (1H)

2,4 ppm singlett (6H) 5,5 ppm utskiftbar singlett (2H)

2,9 ppm dublett (2H) 7,1 til 7,8 ppm aromatiske forbindelser (8H)

TLC

Si02 elueringsmiddel CH2C12 90

MeOH 10 Rf=0,75.

b) Fremstilling av N,N'-ditosyl-bis(2-tosyloksyetyl)-etyl endi amin.

I en 500 cm<3> trehalskolbe utstyrt med et termometer, et kontrollrør og en magnetisk rører avkjøles en løsning av 162 g tosylklorid i 300 ml pyridin til 0°C ved hjelp av et is-saltbad.

29,6 g -av dette (2-hydroksyetyl)etylendiaminet tilsettes i porsjoner i løpet av to timer ved denne temperatur. Temperaturen må aldri overskride 5°C. Reaksjonsblandingen omrøres i fire timer ved denne temperatur, den får stå i 48 timer ved 6/8°C i kjøleskap og deretter i fire timer ved romtemperatur.

Reaksjonsblandingen helles over ill isvann og 300 ml konsentrert HCl. Produktet ekstraheres med 500 ml CH2C12. Den organiske fase tørkes over Na2S04 og avdampes deretter til tørrhet.

Resten tas opp i 250 cm<3> etanol ved oppvarming. Produktet krystalliseres. Det avfUtreres på en glassfritte og tørkes ved 60°C i 48 timer.

Oppnådd vekt = 107,5 g

Utbytte =70%

Smp. = 137/140°C

NMR

2,4 ppm singlett (12H)

3,3 ppm singlett + triplett (8H)

4,2 ppm triplett (4H)

7,2 til 7,8 ppm multiplett (16H)

TLC

Si02 plate elueringsmiddel toluen 80 Rf=0,6

aceton 20

c) Fremstilling av N,N' ,N'' ,N'''-tetratosyl-2-metyl-1,4,7,10-tetraazacyklododekan.

I en 1 1 trehalskolbe omrøres en løsning av 17,5 g N,N'-ditosyldiamin-1,2-propan i 500 ml tørr DMF i et kvarter ved omgivelsestemperatur. 33 g Cs2C03 knuses og tilsettes i suspensjon til denne løsningen. Denne suspensjon oppvarmes til 55°C ved hjelp av et oljebad i en inert atmosfære.

En løsning av 35'g N,N'-ditosyl-bis(2-tosyloksyetyl)etylen-diamin i 200 cm<3> DMF tilsettes dråpevis ved denne temperatur i løpet av to timer. Etter end tilsetning fortsettes oppvarmingen i 48 timer. DMF fjernes deretter ved destillasjon i vakuum. Resten tas opp i en vann/CH2Cl2-blanding.

Den organiske fase tørkes over Na2S04. Løsningsmiddelet fjernes ved destillasjon i en roterende evaporator.

Resten oppvarmes og omrøres i 200 ml etylacetat. Det for-ventede produkt krystalliseres, avfiltreres og tørkes deretter ved 60°C i vakuum i 24 timer.

Oppnådd vekt = 22,5 g

Utbytte =61%

Smp. = 274/275°C

NMR

1 ppm dubplett (2H)

2,2 ppm singlett (12H)

3 til 3,8 ppm multiplett (15H)

7,2 til 7,9 ppm multiplett (16H) aromatiske forbindelser

TLC

Si02 elueringsmiddel toluen = 80

aceton = 20 Rf=0,56

d) Fremstilling av 2-metyl-l,4,7,10-tetraazacyklododekan.

I en 1 1 trehalskolbe utstyrt med et termometer, en argon-ballong og en mekanisk rører, oppvarmes en løsning av 72,5 g av forbindelsen oppnådd i c) i 300 ml 98 % H2S04 ved 100°C i 48 timer ved hjelp av et oljebad i en inert atmosfære.

Reaksjonsblandingen avkjøles til omgivelsestemperatur og

800 ml Et20, avkjølt til 0°C ved hjelp av et bad av etylen-glykol og tørris, tilsettes i løpet av en time.

Det svært hygroskopiske sulfat presipiteres. Dette avfiltreres forsiktig på en glassfritte under nitrogen og oppløses deretter raskt i 200 ml vann. Denne løsning gjøres alkalisk (pelletter av NaOH) og ekstraheres deretter med 5 x 100 ml CH2C12.

De kombinerte organiske faser tørkes over Na2S04, avdampes deretter til tørrhet til å gi 15 g av et svært viskøst råprodukt som krystalliserer ved henstand.

NMR

CDClj 1,1 ppm dublett (2H)

Spektrum i + D20 2,7 ppm 2 singletter som en multiplett

(19H, 4 som er ombyttbare)

TLC

A1203 plate elueringsmiddel BuOH 50 Rf=0,8

H20 25

AcOH 11

e) Fremstilling av komplekset av 2-metyl-l,4,7,10-tetraaza-cyklododekan-N, N' ,N'',N#''-tetraeddsykrye med 2 KC1.

I en 250 ml trehalskolbe avkjøles en løsning av 34 g kloreddiksyre i 150 cm<3> vann til 10°C i et isbad. 20 g kaliumhydroksyd tilsettes ved denne temperatur for å nøytralisere syren.

Forbindelsen oppnådd i d) oppløses deretter i denne løsning. Reaksjonsblandingen oppvarmes deretter til 65°C ved hjelp av et oljebad.

En løsning av 20 g KOH i 50 cm<3> vann tilsettes forsiktig i løpet av seks timer ved denne temperatur mens pH holdes mellom 8 og 10.

Oppvarmingen fortsettes deretter i 72 timer, deretter sur-gjøres reaksjonsblandingen til pH 2,5 med konsentrert HCl.

Komplekset presipiterer. Det avfiltreres på en glassfritte, renses med 50 cm<3> vann, og tørkes deretter ved 60°C i 18 timer i en ovn.

Oppnådd vekt = 30 g

Utbytte = 66 %

Smp. > 300°C

f) Rensing av 2-metyl-l,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7,10-tetraeddiksyre. 30 g av komplekset oppnådd i e) oppløses i nærvær av 150 cm<3 >IRA 958 harpiks, som var nylaget på forhånd.

Etter oppløsning av komplekset påføres denne suspensjon øverst i en kolonne inneholdende 150 cm<3> IRA 958 harpiks.

Elueringen gjennomføres med en 5 % eddiksyreløsning i vann.

Fraksjonene som inneholdt det forvendtede rene produkt avdampes til tørrhet for å fjerne eddiksyren fullstendig.

Oppnådd vekt = 18,4 g

Utbytte = 89 %

Surhet = 100,3 % (4 ekvivalenter) tritrert med 0,1 M

NAOH

TLC

Si02 elueringsmiddel AcOEt 12 Rf=0,36

Isopropanol 35

NH3, H2 30

FAB massespektrum : massetopp ved M + 1 = 419.

EKSEMPEL 7 Fremstilling av en løsning av gadoliniumkomplekset av 2-metyl-l,4,7,10-tetraazacyklodode-kan-N, N' ,N' ',N'''-tetraeddiksyre (metylglukaminsalt).

21 g (50 mmol) av forbindelsen oppnådd i eksempel 6 og 9,05 g (25 mmol) gadoliniumoksyd oppløses i 50 ml vann som er destillert to ganger og avluftet ved 70°C. Etter en time er oppløsningen fullstendig og pH er nær 3. Etter avkjøling justeres pH til 7,3 med metylglukamin. Løsningen innstilles til 100 ml og filtreres gjennom en 0,22 Jj.m Millipore-membran. En løsning med et gadoliniuminnhold på 0,5 mol/l oppnås. Denne løsning har en viskositet ved 20°C på mindre enn 4 mPa.s.

(Fri Gd ikke påvist).

EKSEMPEL 8 2-hydroksymetyl-1,4,7,10-tetraazacykododekan-4,7,10-trieddiksyre.

a) Fremstilling av N,N</->ditosyl-2,3-diaminpropionsyre.

Til en løsning av 46 g na tr iumhydr oksyd i 500 cm<3> vann tilsettes 40 g av monohydrokloridet av 2,3-diaminpropionsyre med kraftig omrøring. 200 cm<3> etyleter tilsettes etterfulgt av 110,5 g tosylklorid i porsjoner i løpet av en time. Om-røringen fortsetter i tolv timer, og det dannede presipitat avfUtreres, vaskes med vann og etyleter. Faststoffet som oppnås suspenderes ill vann og surgjøres med 6N HC1. Etter filtrering og vasking med vann og etyleter tørkes faststoffet i 24 timer ved 60°C i vakuum.

Oppnådd vekt = 76 g

Utbytte = 65%

Smp. = 200-201°C

TLC: Si02 CH2C12 80/MeOH 20

Rf= 0,5

NMR

- 2,4 ppm singlett 6H (CH3 i tosylgruppen)

- 2,8 ppm multiplett 3H (CH2, CH i diaminkjeden)

- 3,5 til 5 ppm utstrakt multiplett 3H ombyttbar med D20

- 7,2 til 7,8 ppm multiplett 8H aromatiske forbindelser.

b) Fremstilling av N,N' -ditosyl-2,3-diaminpropanol.

I en 2 1 trehalskolbe omrøres en suspensjon av 40 g av

forbindelsen oppnådd i b) i 600 cm<3> THF ved 20°C i en inert og vannfri atmosfære (argon).

En løsning av 500 ml IM BH3:THF tilsettes i en inert atmosfære i løpet av en halv time. Temperaturen i reaksjonsblandingen økes til 3 0°C. Omrøringen fortsetter i 48 timer. Hydrolyse gjennomføres forsiktig med 20 ml vann. THF fjernes ved destillasjon i vakuum. Resten ekstraheres med en vann/eter-blanding. Den organiske fase vaskes med vann, tørkes over Na2S04 og avdampes deretter til tørrhet. Resten males med isopropyleter inntil krystallisasjon. Etter filtrering og tørking oppnås 35 g produkt.

Utbytte: 90 %

Smp.: 126-127°C

TLC: Si02 CH2C12 90/MeOH 10

Rf: 0,6

NMR

- 2,7 ppm singlett "CH3" av tosyl (6H)

- 3 til 3,7 ppm multiplett (7H, hvorav 2 er ombyttbare)

- 6,9 ppm triplett, ombyttbar alkoholisk OH (1H)

- 7,3 til 7,9 ppm multiplett aromatiske forbindelser (8H)

c) Fremstilling av N,N' ,N'' #N'''-tetratosyl-2-hydroksymetyl-1,4,7,10-tetraazacyklododekan.

I en 2 1 trehalskolbe under argon oppløses 35 g av forbindelsen oppnådd ib) ill vannfri DMF. Deretter tilsettes 58,6 g vannfri Cs2C03.

Denne suspensjon omrøres i en time ved omgivelsestemperatur, og oppvarmes deretter til 65°C ved hjelp av et oljebad. En løsning inneholdende 69 g N,N'-ditosyl-bis(2-tosyloksyetyl)-etylendiamin i 600 cm<3> vannfri DMF tilsettes dråpevis ved denne temperatur i løpet av seks timer. Oppvarming ved 65°C opprettholdes over natten. DMF fjernes ved destillasjon i vakuum. Resten tas opp i en blanding av 400 ml vann og 400 cm<3> diklormetan. Den organiske fase dekanteres, vaskes med 200 cm<3> vann, tørkes over Na2S04 og avdampes deretter til tørrhet. Restoljen oppløses ved 80°C i 200 cm<3> toluen, og oppbevares deretter i kjøleskap i 48 timer for krystallisasjon. 24 g produkt oppnås.

Utbytte: 32 %

Smp.: 143-145°C

TLC: Si02 CH2C12 90/AcOEt 10

Rf=0,5

NMR

2,4 ppm singlett 12H CH3 tosyl

3,2 til 4,1 ppm multiplett 17H CH2 ring + CH2-OH

7,2 til 8,1 ppm multiplett 16H aromatiske forbindelser

d) Fremstilling av 2-hydroksymetyl-l/4,7,10-tetraazacyklo-dodekan. 20 g av forbindelsen oppnådd i c) oppløses i 100 cm<3> 98 % H2S04. Denne løsning oppvarmes til 100°C i 48 timer i en inert atmosfære. Reaksjonsblandingen avkjøles og tilsettes deretter dråpevis til 1 1 etyleter avkjølt ved hjelp av et tørris/ace-tonbad. Presipitatet av sulfatet av aminet frafiltreres på en glassfritte og vaskes deretter med etyleter. Faststoffet oppløses umiddelbart i 2 00 cm<3> vann og løsningen justeres til pH 12 med NaOH og avdampes til tørrhet. Etter tørking av den faste rest i vakuum i nærvær av P205, ekstraheres produktet med 2 x 100 cm<3> THF med tilbakeløp. Avdamping av de oppnådde fraksjoner etter ekstråksjon ga en fargeløs olje.

Oppnådd vekt: 4,5 g base

Utbytte: 90 %

TLF: A1203 BuOH 50/vann 2 5/AcOH 11

Rf: 0,8

NMR (CDCL3 spektrum)

2,8 ppm singlett (17H) + triplett

3,8 ppm ombyttbar singlett (5H)

e) Fremstilling av 2-hydroksymetyl-l,4,7,10-tetraazacyklo-dodekan-4,7,10-trieddiksyre.

I en 250 cm<3> trehalskolbe utstyrt med en varmeelement/magnetisk rører, en temperaturføler og en pH elektrode som er for-bundet med et analogt pH meter og et system for tilsetning av reagens i korrelasjon med pH i mediumet, nøytraliseres en løsning av 8,5 g av forbindelsen oppnådd id), 15,8 g 2-kloreddiksyre og 100 ml vann til pH lik 9,5 ved hjelp av en løsning av 15,8 g kaliumhydroksyd i 50 cm<3> vann. Reaksjonsblandingen oppvarmes deretter ved 50°C ved hjelp av et oljebad i 72 timer. pH justeres kontinuerlig til 9,5 ved tilsetning av en løsning av kaliumhydroksyd. Blandingen avkjøles, surgjøres til pH lik 5, fortynnes til 500 cm<3> og påføres på en kolonne av 500 cm<3> av den sterkt basiske anionbytterharpiksen IRA 958, som er regenerert på forhånd. Alkyleringsproduktene binder seg til harpiksen. Denne renses med vann og elueres deretter med fraksjoner av 5 % eddiksyre. Fraksjonene avdampes til tørrhet. Resten er et urent pulver som renses på en preparativ HPLC kolonne med diameter 40 fylt med RP.18-podet silika.

Oppnådd vekt: 3,5 g rent produkt

Utbytte: 22 %

Smp.: 142-144°C

TLC: Si02 AcOEt 12/Isopropanol 35/NH4OH 30

Rf: 0,35

Surhet: 198,7 % (2 bølger)

Titrering med 0,1 M NaOH - korrigert for H20

FAB massespektrum: topp ved M + 1 = 377

EKSEMPEL 9 Fremstilling av en løsning av gadoliniumkomplekset av 2-hydroksymetyl-l,4,7,10-tetraaza-cyklododekan-4,7,10-trieddiksyre.

En suspensjon av 11,05 g 2-hydroksymetyl-l,4,7,10-tetraaza-cyklododekan-4,7,10-trieddiksyre og 5,07 g gadoliniumoksyd i vann destillert to ganger, oppvarmes ved 80°C i en time. Etter avkjøling justeres pH til 7,3 ved tilsetning av natriumhydroksyd og volumet innstilles til 100 ml. Bestemmelsen av totalt gadolinium gjennomføres ved atomemisjonsspektroskopi (0,2 M"1) .

EKSEMPEL 10 Fremstilling av 2-hydroksymetyl-l,4,7,10-t etraaz acyklododekan-1,4,7,10-tetraeddiksyre.

I en reaktor på 50 cm<3> utstyrt med en magnetisk rører oppvarmes en løsning av 0,7 g 2-hydroksymetyl-l,4,7,10-tetraaza-cyklododekan-4,7,10-trieddiksyre og 0,2 g kloreddiksyre i 15 cm<3> vann ved 70°C.

pH bringes til 10,5 ved hjelp av en løsning av kaliumhydroksyd og holdes ved denne verdi i 48 timer ved 70°C.

Etter endt reaksjon bringes pH til 5. Deretter påføres løs-ningen på en IRA 958 harpiks.

Liganden kromatograferes på harpiksen ved eluering med 5 % eddiksyre.

Etter avdamping til tørrhet, renses produktet ved preparativ HPLC (RP18-podet silika).

0,15 g ligand oppnås således i et utbytte på 18%.

TLC (silika) elueringsmiddel etylacetat 12

Isopropanol 35 Rf=0,25

NH3, H20 30

FAB massespektrum: topp ved M + 1 = 435.

EKSEMPEL 11 Fremstilling av 2-(2-hydroksymetyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-N, N',N'',N'''-tetraeddik-syre.

Denne liganden fremstilles i henhold til prosedyren som beskrevet i eksempel 8 og 10 for syntese av 2-hydroksymetyl-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-N,N',N'',N'''-tetraeddiksyre med utgangspunkt i 3,4-diaminbutansyre (S. Kasina et al., J. Med. Chem., 29, 1933, 1986).

EKSEMPEL 12 Fremstilling av 2-metyl-l/4,7,10#13-pentaaza-cyklopentadekan-4,7,10,13-tetraeddiksyre (produkt 12a) og 2-metyl-l,4,7,10,13-pentaazacyklo-pentadekan-1,4,7,10,13-pentaeddiksyre (produkt 12b). a) Fremstilling av 1,4,7,10,13-pentatosyl-2-metyl-1,4,7,10,13-pentaazacyklopentadekan.

35,7 g (0,093 mol) N,N'-ditosyl-1,2-diaminpropan, 75,7 g cesiumkarbonat (0,23 mol) og 800 ml DMF innføres i en 2 1 trehalskolbe utstyrt med en kjøler og en mekanisk rører. Blandingen plasseres under argon og oppvarmes ved 75°C.

En løsning av 83 g (0,012 mol) 1,ll-mesyloksy-3,6,9-tritosyl-3, 6, 9-triazaundekan, syntetisert i henhold til Richman og Atkins, Organic Synthesis 58, s. 86, i 700 ml DMF tilsettes i. løpet av 4 timer ved 75°C.

Reaksjonsblandingen holdes ved 75°C i 48 timer, filtreres deretter og filtratet avdampes til tørrhet.

Resten tas opp i 700 ml etanol, faststoffet frafiltreres og tas deretter opp i 800 ml toluen med oppvarming.

Faststoffet frafiltreres ved romtemperatur og tørkes deretter ved 60°C.

Oppnådd vekt: 45,4 g

Utbytte: 49 %

Analyse: TLC: Si02 60 F 254 Merck

Elueringsmiddel CH2Cl2/aceton 98,2 Rf: 0,45

Massespektrum

DCI metode (NH3)

Massetopp ved 999.

b) Fremstilling av 2-metyl-l,4,7,10,13-pentaazacyklo-pentadekan .

44 g (0,044 mol) av forbindelsen oppnådd i a) holdes i

72 timer ved 100°C i 130 ml konsentrert svovelsyre.

Etter avkjøling, helles reaksjonsblandingen inn i en blanding av 250 ml etyleter og 2 50 ml etanol ved 0°C.

Faststoffet frafiltreres, oppløses deretter i 250 ml vann og behandles med karbonblack. Løsningen gjøres alkalisk med cesiumhydroksyd og ekstraheres deretter med CH2C12. Den organiske løsning tørkes over Na2S04 og avdampes til tørrhet. Aminet som således oppnås kan anvendes som sådan eller i form av dets hydroklorid.

Oppnådd vekt: M = 8,4 g som fri base

M = 13,2 g som 5 HC1

Utbytte: 72,8 %

Analyse av hydrokloridet:

TLC: Al203 F 254 Merck

Elueringsmiddel: etanol/isopropylamin 80/20

Fremkaller: jod Rf: 0,85

NMR: 1,7 ppm 3H CH3

3,7 ppm 19H CH2 og CH.

c) Fremstilling av 2-metyl-l,4,7,10,13-pentaazacyklopenta-dekan-4,7,10,13-tetraeddiksyre (produkt 12a) og 2-metyl-1,4,7,10,13-pentaazacyklopentadekan-l,4,7,10,13-penta-eddiksyre (produkt 12b).

I en 500 ml trehalskolbe nøytraliseres en løsning av 25,7 g (0,27 mol) kloreddiksyre 50 ml vann til pH 5 ved en temperatur

< 10°C ved hjelp av 5 M kaliumhydroksyd.

10 g av forbindelsen oppnådd i b) (10,043 mmol) oppløst i

20 ml vann tilsettes til løsningen. Blandingen oppvarmes ved 55°C og 50 ml 5 M kaliumhydroksyd tilsettes i løpet av 48 timer for å holde en pH på 8,5-9,5. Etter endt tilsetning fortsetter oppvarmingen over natten. Reaksjonsblandingen avkjøles og surgjøres til pH 3. Løsningen påføres deretter på 200 ml DOWEX 50 W harpiks. Eluering av harpiksen med 1 1 av en 1 M ammoniakkløsning gir 20 g urent produkt. Det urene produkt oppløses i 150 ml vann og påføres på 250 ml IRA 958 harpiks. Harpiksen vaskes med vann/ og elueres deretter med 2 1 0,1 M eddiksyre, etterfulgt av 2 1 0,8 M eddiksyre. 9 g av urent produkt 12a oppnås ved avdamping av 0,1 M eddiksyre. 2,5 g av urent produkt 12b oppnås ved avdamping av 0,8 M eddiksyre.

Produktene 12a og 12b renses deretter ved preparativ HPLC på RP18-silika.

Oppnådd produkt: produkt 12a: M = 5 g

produkt 12b: M = 1,1 g

Utbytte: 30%

Analyser:

TLC: Si02 60 F 254 Merck

Elueringsmiddel: etylacetat/isopropanol/NH3 (30 %)/12/35/30 Fremkaller: jod

Produkt 12a Rf: 0,4

Produkt 12b Rf: 0,27

Vannanalyser:

Produkt 12a: KF: 1,8%

Produkt 12b: KF: 2,8%

Surhetsanalyser ved hjelp av 0,1 M NaOH

Produkt 12a: To surhetsanalyser 98,6% og 100,6% titrervæske: 99,6%

Produkt 12b: Tre surhetsanalyser 199,2 % og 92,4 %

titrervæske: 97,3%

FAB massespektrum:

12a topp ved M + 1 = 462

12b topp ved M + 1 = 52 0

Claims

1. Ligand, karakterisert ved at den har formel I: hvori Rx representerer et radikal med formel: hvori R6 velges fra gruppen bestående av C^-C^ alkyl, Cx-C4 hydroksyalkyl og en gruppe med formel: Rn representerer C^-Cg alkylen, R7 velges fra gruppen bestående av hydrogen, Cl- Cltl alkyl og C1-C4 hydroksyalkyl, R2, R3 og R4 representerer et radikal med formel: n = 1 eller 2, og Z representerer en gruppe med formel: hvori R10 velges fra gruppen bestående av hydrogen og -CH2-COOH, såvel som saltene derav.

2. Fremgangsmåte for fremstilling av en ligand med formel I som angitt i krav 1, karakterisert ved at et polyamin med formel IV: hvori R'x representerer et radikal med formel: hvori

R'6 er valgt fra gruppen bestående av Cx-C14 alkyl, C^-C,! hydroksylalkyl og en gruppe med formel: hvori R2, R3, R4, R7, Ru og n er som angitt i krav 1, og Z' representerer en gruppe med formel: R' representerer en tosyl-, mesyl- eller benzensulfonylgruppe og R4 er som angitt over, reageres med en forbindelse med formel V: hvori R2, R3 og R' er som angitt over og X representerer en labil gruppe, for oppnåelse av en forbindelse med formel III: hvori R2, R3, R4, R'lf Z' og n er som angitt over, hvorpå en forbindelse med formel II: hvori R5 er hydrogen og X representerer en labil gruppe eller et aldehyd med formel: hvori R5 er som angitt over, reageres i nærvær av hydrogen-cyanid eller cyanidioner med det ovennevnte sykliske amin med formel III for oppnåelse av den ovennevnte forbindelse med formel I.

3. Kompleks dannet med ligander med formel I som angitt i krav 1 og metallioner, karakterisert ved at metallionene er valgt fra gruppen bestående av lanthanidioner med atomnummer 57 til 71, såvel som saltene av disse komplekser med fysiologisk tålbare uorganiske eller organiske baser eller med basiske aminosyrer.

4. Kompleks som angitt i krav 3, karakterisert ved at metallionet er valgt fra gruppen bestående av gadolinium, europium og dysprosium.

5. Kompleks som angitt i krav 4, karakterisert ved at komplekset er metylgluka-mins.altet av gadoliniumkomplekset av 2 , 6-dimetyl-l, 4 , 7 , 10-tetraazacyklododekan-N, N' ,N'',N'''-tetraeddiksyre.

6. Kompleks som angitt i krav 4, karakterisert ved at komplekset er metylgluka-minsaltet av gadoliniumkomplekset av 2-heksyl-l,4,7,10-tetra-azacyklododekan-N, N',N'',N'''-tetraeddiksyre.

7. Kompleks som angitt i krav 4, karakterisert ved at komplekset er metylgluka-minsaltet av gadoliniumkomplekset av 2-metyl-l,4,7,10-tetra-azacyklododekan-N, N' ,N'',N'''-tetraeddiksyre.

8. Kompleks som angitt i krav 4, karakterisert ved at komplekset er gadoliniumkomplekset av 2-hydroksymetyl-l,4,7,10-tetraazacyklododekan-4,7,10-trieddiksyre.

9. Diagnostisk preparat, karakterisert ved at det omfatter minst ett kompleks som angitt i kravene 3 til 8.

10. Preparat som angitt i krav 9, karakterisert ved at det består av en løsning av komplekset i et vandig løsningsmiddel.

11. Preparat for anvendelse i forbindelse med magnetisk resonanspåvi sning, karakterisert ved at det omfatter minst ett kompleks dannet med en ligand som angitt i krav 1 og med paramagnetiske lanthanidioner med atomnummer 57 til 71 og salter derav med fysiologisk tålbare baser.

12. Røntgenkontrastmiddel, karakterisert ved at det omfatter minst ett kompleks dannet med en ligand som angitt i krav 1 og med lanthanidioner med atomnummer 57 til 71 og salter derav med fysiologisk tålbare baser.