NL8701349A

NL8701349A - Nieuwe anthracyclinen.

Info

Publication number: NL8701349A
Application number: NL8701349A
Authority: NL
Original assignee: Erba Farmitalia
Priority date: 1986-06-12
Filing date: 1987-06-10
Publication date: 1988-01-04
Also published as: PT85056B; GB2195998A; DK169076B1; FI84075C; DE3719377A1; BE1000158A4; FI872571A; DK298787D0; JP2516769B2; GB8713443D0; AU7410887A; IT1215552B; IT8720834A0; AT392793B; SU1590045A3; SE8702409D0; HUT43866A; FR2600066B1; NZ220604A; ATA144987A

Description

* s VO 9119

Nieuwe anthracyciinen.

De onderhavige uitvinding heeft betrekking op nieuwe anthra-cyclineglycosidederivaten/ op de bereiding ervan en op farmaceutische samenstellingen/ die deze bevatten, evenals op tussenprodukten, die bruikbaar zijn in de bereiding van de glycosiden.

5 De onderhavige uitvinding verschaft anthracyclineglycoside met de algemene formules 1 en 2 van het formuleblad, waarin: R^ een waterstofatoom of een hydroxyIgroep voorstelt, evenals de farmaceutisch aanvaardbare zuuradditiezouten ervan.

10 De uitvinding verschaft verder een werkwijze voor de bereiding van een glycoside met de formule 1, waarin: een waterstofatoom voorstelt, dat wil zeggen verbinding la, welke werkwijze omvat het reageren van 31-epi-daunorubicine met salicyl-15 aldehyde, teneinde het overeenkomstige 31-epi-N-salicylideen-derivaat te verkrijgen; omzetten van de 4'-hydroxygroep van het genoemde 3'-epi-N-salicylideenderivaat in een trifluoromethaansulfonaatgroep; en het verwijderen van de salicylideengroep van de 31-spi-N-20 salicylideen-41-0-trifluoromethaansulfonaat dat aldus verkregen is door zure hydrolyse, teneinde de gewenste glycoside met de formule 1 te verkrijgen via verwijdering van de 4,-0-trifluoromethaansulfonaatgroep.

De verbinding la kan derhalve bereid worden door reactie van de 3'-aminogroep van 31-epidaunorubicine (3) (F. Acamony A. Bargiotti, 25 G. cassinelli: Duitse octrooipublicatie 2.752.115 (1 juni 1978)) met salicylaldehyde, in een mengsel van water in aceton bij kamertemperatuur, teneinde het corresponderende 3'-epi-N-salicylideenderivaat (4c) te verkrijgen, welke door behandeling met trifluoromethaansulfonzuuranhydride in watervrij methyleendichloride en in aanwezigheid van pyridine de 30 overeenkomstige 3‘-epi-N-salicylideen-4'-O-trifluoromethaansulfonaat (4d) levert. Deze verbinding, opgelost in methanol, kan vervolgens onderworpen worden aan zure hydrolyse van de salicylideen-beschermende groep door middel van paratolueensulfonzuur bij kamertemperatuur teneinde via verwijdering van de trifluorcmethaansulfonaat-vertrekkende groep, de ge-35 wenste verbinding met de formule la te leveren.

- —· r ** Λ * -2-

De uitvinding verschaft ook een werkwijze voor de bereiding van een glycosideverbinding met de formule 1, waarin: een hydroxylgroep voorstelt, dat wil zeggen verbinding lb, 5 welke werkwijze omvat het reageren van 3'-epi-doxorubicine met salicyl-aldehyde, teneinde het overeenkomstige 3 *-epi-N-salicylideenderivaat te verkrijgen; het beschermen van de 14-hydroxygroep van genoemd 3'-epi-N-salicylideenderivaat met een tertiair butyldifenylsilylgroep; 10·. omzetten van de 41-hydroxygroep van het 3'-epi-N-salicylideen- 14-0-(tert.butyl-difenyl-silyl)-doxorubicine, dat aldus verkregen is, in een trifluoromethaansulfonaatgroep; en het verwijderen van de aldus verkregen 14-0-(tert.butyl-difenyl-silyl) -31-epi-N-salicylideen-4'-0-trifluoromethaansulfonaat van de 15 salicylideengroep door zure hydrolyse en van de 14-0-(tert.butyl-difenyl-silyl) groep, teneinde het gewenste glycoside met de formule 1 te verkrijgen via verwijdering van de 4'-0-trifluoromethaansulfonaatgroep.

Verbinding lb kan derhalve bereid worden door de omzetting van de 31-aminogroep van 3r-epi-doxorubicine (5) (zie F. Arcamone et al, 20 Duits octrooi 2.752.155) in 3'-epi-N-salicylideen-doxorubicine (6e) door reactie met salicylaldehyde, bescherming van de 14-hydroxygroep met een tert.butyl-difenyl-silylgroep, onder vorming van 31-epi-N-salicylideen-14-0-(tert.bptyl-difenyl-silyl)-doxorubicine (6f); omzetting van de 4'-hydroxygroep in een trifluoromethaansulfonaat 25 (6g) ; hydrolyse door middel van paratolueensulfonzuur onder vorming van verbinding lh en reactie met tetra-n-butylammoniumfluoride voor het verwijderen van de 14-0-(tert.butyl-difenyl-silyl)-beschermende groep onder vorming van verbinding met de formule lb.

30 3'-epi-doxorubicine wordt, opgelost in een mengsel van water en aceton, bij kamertemperatuur gereageerd met salicylaldehyde voor het verkrijgen van het overeenkomstige 3'-epi-N-salicylideenderivaat, welke vervolgens behandeld wordt in watervrij dimethylformamide, bij kamertemperatuur met tert.butyl-difenylchlorosilaan in aanwezigheid van imida-35 zool onder vorming van de 3'-epi-N-salicylideen-14-0-(tert.butyl-difenyl-silyl) ether, welke opgelost in watervrij methyleendichloride wordt omge- -3- ·»· * zet, door behandeling met trifluoromethaansulfonzuuranhydride, in de aanwezigheid van droge pyridine, in de 3'-epi-N-salicylideen-4'-O-trifluoro-. methaansulfonaat-l4-0-(tert.butyl-difenyl-silyl)ether ervan, waarvan de salicylideen-beschermende groep onderworpen wordt aan zure hydrolyse bij 5 kamertemperatuur en in een methanolische oplossing onder toepassing van een katalytische hoeveelheid van paratolueensulfonzuur en waarvan vervolgens de 14-0-{tert.butyl-difenylsilyl)-beschermende groep verwijderd wordt door behandeling met tetra-n-butylammoniumfluoride in tetrahydro-furan, bij kamertemperatuur onder vorming van de gewenste glycoside met 10 de formule 1.

De uitvinding verschaft ook een werkwijze voor de bereiding van een glycoside met de formule 2, waarini een waterstofatoom voorstelt, dat wil zeggen verbinding 2a, 15 of een hydroxygroep, dat wil zeggen verbinding 2b, of een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout daarvan, welke werkwijze omvat het omzetten van 3f-deamino-4'-deoxy-3’-epi-4'-epi-31,4'-epiminodaunorubizine in het overeenkomstige N-trifluoroacetylderivaat? omzetten van genoemd N-trifluoroacetylderivaat in 4,-deoxy-4‘-20 epi-N-trifluoroacetyl-3'-deamino-31-hydroxydaunorubicine? verwijderen van de N-trifluoroacetylgroep van de 4'-deoxy-4'-epi-N-trifluoroacetyl-31-deamino-3 *-hydroxydaunorubicine onder vorming van het glycoside met de formule 2, waarin: 25 een waterstofatoom is,

Indien gewenst kan men genoemd glycoside met de formule 2 in een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout daarvan omzetten? indien gewenst kan men genoemd glycoside met de formule 2 of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan bromeren en de aldus verkregen 30 14-broomderivaat hydrolyseren onder vorming van het glycoside met de formule 2, waarin: R^ een hydroxygroep is? en indien gewenst, kan men de glycoside met formule 2 omzetten, 35 waarin: R^ een hydroxygroep is in een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout ervan.

·* *· -4-

Behandeling van het 3', 4' -epiminodaunorubicinederivaat la met trifluoroazijnzuuranhydride geeft het overeenkomstige N-trifluoroacetyl-derivaat 7i. Reactie van deze verbinding met een katalytische hoeveelheid zwavelzuur in aceton geeft 41-deoxy-41-epi-N-trifluoroacetyl-3'-5 hydroxy-daunorubicine (8), welke door behandeling met waterig natrium-hydroxyde verbinding 2a geeft. De N-trifluoroacetylgroep kan typerend verwijderd worden door milde alkalische hydrolyse, bij een temperatuur van 0°C onder toepassing van 0,1N natriumhydroxyde. Glycoside 2a kan geïsoleerd worden als het hydrochloridezout door behandeling met water- 10. stofchloride in methanol.

Verbinding 2b kan bereid worden door bromering van 2a, gevolgd door behandeling van het resulterende 14-broomderivaat met waterig natrium-formiaat bij kamertemperatuur volgens de werkwijze, beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3.803.124. Het kan geïsoleerd worden als 15 hydrochloridezout op dezelfde wijze als glycoside 2a.

De werkwijze volgens de uitvinding zijn samengevat in het bijgevoegde reactieschema.

De onderhavige uitvinding verschaft ook een farmaceutische samenstelling omvattende als actieve ingrediënt een anthracyclineglyco-20 side volgens de uitvinding of een farmaceutisch aanvaardbaar zuuraddi-tiezout daarvan, samen met een farmaceutisch aanvaardbare drager of verdunner. Een therapeutisch effectieve hoeveelheid van de verbinding met de formule 1 wordt gecombineerd met een inerte drager. Conventionele dragers kunnen toegepast worden en de samenstelling kan op bekende wijze 25; geformuleerd worden.

De verbindingen volgens de uitvinding zijn. geschikt voor methoden voor de behandeling van het menselijk of dierlijk lichaam door therapie. In het bijzonder zijn de verbindingen volgens de uitvinding nuttig als antitumormiddelen.

30 De navolgende voorbeelden illustreren de uitvinding.

VOORBEELD I

3'-Epi-N-salicylideen-daunorubicine (6c) ......

Een oplossing van 2 g 3'-epi-daunorubicine (3) en een mengsel van 80 ml water en 20 ml aceton werd bij kamertemperatuur behandeld met 35 0,5 ml salicylaldehyde bij een pH van 8. Na 10 minuten werd ethylacetaat toegevoegd en de organische fase afgescheiden, 2 maal gewassen met water, “r r'·: 7 1 }·1

W «' 0 V

-5- gedroogd over watervrij natriumsulfaat, gefiltreerd en drooggedampt onder vacuüm. Het residu werd eerst getriteerd met hexaan, teneinde de sporen salicylaldehyde te verwijderen, vervolgens verzameld en onder vacuüm gedroogd bij 30°C, waarbij men 4c in bijna kwantitatief 5 verkreeg. R^ 0,21 op TLC kiezelgel F-254 (Merck) onder toepassing als eluent van een mengsel van CK^Cl^-aceton (8/2 v/v).

VOORBEELD II

31-Deamino-4'-deoxy-3'-epi-4'-epi-3',4'-epimino-daunorubicine (la)

Aan een oplossing van 2 g 3'-epi-N-salicylideen-daunorubicine 10 (4c) in 20 ml watervrij dichlóromethaan en 2 ml droog pyridine met een temperatuur van -10°C, werd een oplossing van 0,8 ml trifluoromethaan-sulfonzuuranhydride in 10 ml dichloormethaan toegevoegd. Na 1 uur bij -10°C werd het mengsel verdund met dichloormethaan en gewassen met water, koude 0,1N zoutzuur, koude waterige 5%'s natriumwaterstofcarbo-15 naat en water. De organische fase, gedroogd over watervrij natrium-sulfaat, werd afgefiltreerd en het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd, waarbij men produkt 4d verkreeg.

0,50 op TLC kiezelgel· F-254 (Merck), met als eluent het oplos-middelmengsêl CH Cl -aceton (95/5 v/v).

A A

20 Het ruwe produkt werd opgelost in 50 ml methanol en daaraan werd 0,2 g paratolueensulfonzuurmonohydraat toegevoegd. De oplossing werd op kamertemperatuur gehouden gedurende 1 uur, vervolgens werd 100 ml water toegevoegd en geëxtraheerd met weinig dichloormethaan. De waterfase werd op pH 8 gebracht met 0,1N natriumhydroxyde en dichloormethaan werd toe-25 gevoegd. De organische fase werd afgescheiden, gewassen met water, gedroogd over watervrij natriumsulfaat en het oplosmiddel werd verdampt tot een gering volume. Het mengsel werd gezuiverd door chromatografie op een kolom van silicagel, die gebufferd was op pH 7 onder toepassing van dichloormethaan-ethanol als eluent. Het eluaat dat produkt la be-30 vatte, werd gewassen met water, onder vacuüm verdampt, opgenomen met weinig dichloormethaan en gekristalliseerd.

FD MS 509 (M+) smeltpunt 135-137°C.

R^ 0,38 op TLC kiezelgel F-254 (Merck) onder toepassing van een mengsel van CH2C12-CH30H-CH3C00H-H20 (30/4/1/0,5 v/v) als eluent. 1 35

J

1 « -6- 1H - NMR (200 MHz, CDC13): 8,02 (dd; J=l,l; 7,7Hz; 1H; H-l) 7,76 (dd; J=7,7; 7,7Hz; 1H; H-2) 7,37 (dd; J-1,1; 7,7Hz; 1H; H-3) 5 5,31 (dd; J=3,0; 4,8Hz; 1H; H-l') 5.17 (dd; J=2,0; 3,6Hz; 1H, H-7) 4,32 (qd; J=<1; 6,7Hz; 1H, H-5') 4,07 (s; 3H; 00^-4) 3.17 (dd; J=19,2Hz; 1H; H-lOe) 10 2,95 (d; J=19,2Hz; 1H; H-10ax) 2,46 (ddd; J=2,0; 2,0; 15,0Hz; 1H; H-8e) 2.43 (s; 3H; COCB^) 2,30 (ddd; J=1,5; 4,3; 6,4Hz; 1H; H-3’) 1,9-2,0 (m; 2H; H-8ax; H-2'ax) 15 1,87 (ddd; J=l,5; 3,0; 14,6Hz; 1H; H2'e) 1.44 (d; J=6,7Hz; 3H; CH -5')

VOORBEELD III

'31-Epi-N-salicylydeendoxorubicine (6e)

De titelverbinding werd bereid uit het corresponderende 3'-epi-20 doxorubicine (5), zoals beschreven in voorbeeld I.

0,15 op TLC, kiezelgel F-254 (Merck) onder toepassing als eluent het oplosmiddelmengsel CH2Cl2-aceton (4/1 v/v).

VOORBEELD IV

3'-Epi-N-salicylideen-14-O-(tert.butyl-difenyl-silyl)-doxorubicine (5f) 25 Een oplossing van 1 g 3'-epi-N-salicylideendoxorubicine (6e) in 20 ml watervrij dimethylfontlandde werd behandeld met 0,5 ml tert.butyl-difenyl-chlorosilaan en 0,3 g imidazool. Men liet het reactiemengsel gedurende een nacht bij kamertemperatuur staan, waarna 200 ml water werd toegevoegd en de oplossing geëxtraheerd werd met methyleendichloride.

30 De organische laag werd afgescheiden, gedroogd over watervrij natrium-sulfaat, gefiltreerd en drooggedampt onder vacuüm. Het residu werd ge-tritureerd met hexaan en verzameld op een gesinterd glas, gewassen met hexaan-diëthylether en in vacuüm gedroogd, waarbij men verbinding 6f verkreeg.

35 Rf 0,25 op TLC, kiezelgel F-254 (Merck) onder toepassing als eluent het oplosmiddel CH2Cl2-aceton (4/1 v/v).

* ' -· f -cj Λ r —7«

VOORBEELD V

3'-Epi-3*-deaminc-41-deoxy-41-epi-31,4'-epiminodoxorubicine (lb)

Ds titelverbinding werd bereid, uitgaande van verbinding 6f via het 3'-epi-41-O-trifluoromethaansulfonaat (6g) ervan bereid als be-5 schreven in voorbeeld II.

Zure hydrolyse van 6a in methanol met een katalytische hoeveelheid paratolueensulfonzuurmonohydraat gaf na opwerken verbinding lh.

Het ruwe produkt werd getritureerd met hexaan en verzameld op gesinterd glas, gewassen met hexaan-diëthylether en opgelost in 100 ml tetrahydro-10 furan. De oplossing werd behandeld met 0,5 g tetra-n-butyl-monofluoride.

Na 2 uur was de hydrolyse van de tert.butyl-difenyl-silylgroep volledig.

Het residu, verkregen door verdampen van het oplosmiddel onder vacuüm werd door chromatografie gezuiverd op een kolom van silicagel, die gebufferd was op pH 7, onder toepassing van dichloormethaan-ethanol als elueer-15 systeem, waarbij men zuiver lb verkreeg. Het precipitaat werd verzameld op gesinterd glas, gewassen met hexaan-diëthylether en gedroogd in * vacuüm.

0,20 op TLC, kiezelgel F-254 (Merck) onder toepassing als eluent van het oplosmiddelmengsel C^Cl^-CH^OH-CH^COOH-H^O 20 (30/4/1/0,5 v/v).

VOORBEELD VI

3‘-deamino-41-deoxy-3r-hydroxy-4'-epi-4'-amino-daunorubicine (2a)

De titelverbinding werd bereid, uitgaande van het aziridine la.

1 g Van 2a werd omgezet in het N-trifiuoroacetylderivaat (6i) door be-25 handeling met 1,2 ml trifluoroazijnzuur in watervrij methyleenchloride.

Na opwerking werd. het ruwe materiaal (Rf 0,7 op TLC, kiezelgel F-254 (Merck) eluent: CH^Cl^-aceton (4/1 v/v) werd opgelost in 20 ml aceton en behandeld met een katalytische hoeveelheid van zwavelzuur bij 10°C.

Het mengsel werd verdund met 200 ml methyleendichloride, gewassen met 30 water, waterige 5%'s natriumwaterstofcarbonaat en water. Het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd en het residu werd gezuiverd op een kolom van silicagel onder toepassing van methyleendichloride als het elueer-systeem, waarbij men 0,7 g van de zuivere verbinding 2a verkreeg.

R_ 0,21 op TLC, kiezelgel F-254 (Merck) onder toepassing als 35 eluent van het oplosmiddelmengsel CH^Cl^-aceton (4/1 v/v).

♦ k· -8-

Het produkt (2a) werd langzaam opgelost in waterig 1,1N natrium-hydroxyde bij 0°C, teneinde de hydrolyse van de N-trifluoroacetyl-beschermende groep te verkrijgen. Na 1 uur op 0°C werd de oplossing op pH 8,6 gebracht met 0,1N zoutzuur en geëxtraheerd met methyleendichlo-5 ride. Het oplosmiddel werd verdampt, waarbij men 0,5 g van een residu verkreeg, dat werd omgezet door behandeling met methanolisch zoutzuur in het hydroxhloride van 4,-deoxy-4,-amino-4,-epi-3'-deamino-S'-hydroxy-daunorubicine.

MS FD 527 (M+) smeltpunt 153°C (ontl.).

10. Rf 0,18 op TLC, kiezelgel F-254 (Merck): CH2C12-CH3“0H- CH3C00H-H20 (30/4/1/0,5 v/v).

1H - NMR (200 MHz, CDCl^ : 8,02 (dd; J=0,9, 8,5Hz; 1H, H-l) 7,77 (dd? J=8,5; 8,5Hz; 1H, H-2) 15 7,38 (dd; J=0,9; 8,5Hz; 1H, H-3) 5,52 (dd, J= <1? 4/OHz; 1H, H-l') 5,28 (dd, J=l,8; 4,0Hz; 1H, H-7) 4,07 (s; 3H, 00^-4) 3.69 (dq; J=6,3; 9,5Hz; 1H, H-51) 20 3,51 (ddd; J=4,8; 9,5; 11,6Hz; 1H; H-3') 3,22 (dd; J=l,9; 18,9Hz; 1H; H-lOe) 2,94 (d; J=18,9Hz; 1H; H-10ax) 2,40 (s, 3H, COCH3) 2,2-2,4 (m; 1H? H-8ax) 25- 2,30 (dd; J=9,5; 9,5Hz; 1H; H-4') 2,0-2,2 (m; 2H; H-8e; H-2'e) 1.70 (ddd; J=4,0; 4,6; 13,2Hz; 1H? H-20ax) 1,31 (d; J=6,3Hz; 3H; CH3-5')

VOORBEELD VII

30 31-deamino-3'-hydroxy-41-deoxy-41-epi-4'-amino-doxorubucine (2b) 0,5 g 2a werd opgelost in een mengsel van methanol en dioxaan.

De oplossing werd behandeld, zoals beschreven in het Amerikaanse octrooi-schrift 3.803.124 met broom in eerste intantie, teneinde het 14-broom-derivaat te verkrijgen en vervolgens met waterig natriumformiaat onder 35 vorming van de titelverbinding. Deze werd omgezet in het hydrochloride ervan door behandeling met methanolisch zoutzuur.

0 / V i g ·') $ 'r -r -9- FD-MS (M+), TLC op kiezelgel F-254 (Merck); CH2CX2-CH30H-CH3C00H-H20 (30/4/1/0,5 v/v) Rf 0,10.

BIOLOGISCHE ACTIVITEIT

De cytotoxische activiteit van de nieuwe anthracyclineglycosiden 5 volgens de uitvinding (FCE 24782/XOQ - 0333) werd in vitro beproefd tegen HeLa-cellen, P3S8, P388/DX, LoVo en LoVo/DX.

Tijd van blootstelling aan de verbinding; 24 uur/in vergelijking met daunorubicine.

De resultaten zijn opgenomen in tabel A.

10 De verbinding, bij testen "in vivo" tegen P-388 ascitisch leukemie en Gross leukemie, vertoonde goede antitumoractiviteit, in vergelijking met daunorubicine, in het bijzonder bij orale toediening.

De resultaten zijn opgenomen in tabellen B en C.

«i · : J > -10- TABEL A -

In vitro-activiteit van 31-deamino-41-deoxy-31-hydroxy-41-amino-daunorubicine (FCE 24782/XOO-Q333) in vergelijking met DNR

lD5{J(ng/ml) a)

Verbinding -

Helab) P388C) P388/DXd) LoVoe) LoVo/DXf) DNR 19 10,5 730 43 820 FCE 24782/XOO-0333 11 24,5 235 37 230 a) Dosis, die 50% reductie in celaantal geeft in vergelijking met onbehandelde controle.

b) Menselijke cervix-epithelioide careinomacelien, c) P 388 leukemiecellen, gevoelig voor doxorubicine.

d) P 388 leukemiecellen, resistent tegen doxorubicine.

e) Menselijke colon-adenocarcinomacellen, gevoelig voor doxorubicine.

f) Menselijke colon-adenocarcinomacellen, resistent tegen doxorubicine.

-- ~.-r .Λ b / v --) i v? £· Λ; . ' -11" TABEL Β

Effect tegen P 388 ascitisch leukemie3-

Verbinding dosisb T/C%c Toxisch^ _____doden DNR 2,9 155 0/10 4.4 170 8/10 FCE 24782/X00-0333 1/96 155 0/10 2,9 150 0/10 4.4 140 9/10 6,6 100 10/10 a ,

Experimenten werden uitgevoerd aan CDF -muizen, geënt met 6 10 -leukemiecellen i.p. fc

Behandeling i.p. op dag 1 na tumor-enting, c

Mediane overlegingstijd van behandelde muizen gedeeld door mediane overlevingstijd van controlegroep x 100.

Geëvalueerd op basis van autopsische bevindingen.

-12-

TABEL C

. a.

Effect tegen Gross leukemie 3d c cd

Verbinding dosis T/C% Toxisch mg/kg doden DNR 10 165 0/20 15 192 2/20 FCE 24782/XOO-0333 8,2 175 0/20 11.5 230 0/10 16,1 240 0/10 22.5 130 0/10

Experimenten werden uitgevoerd aan C3H-muizen, geënt β ' met 2 x 10 leukemiecellen i.v. b

Behandeling i.v. op dag 1 na tumor-enting. c

Mediane overlevingstijd van behandelde muizen/mediane overlevingtijd van controlegroep x 100; d

Geëvalueerd op basis van autopsische bevindingen.

···, λ ·? % i \A 5 j y , v “ί ί·;

Claims

1. Anthracyclineglycoside met de algemene formule 1 of 2 van het formuleblad, waarin: een waterstofatoom of een hydroxylgroep voorstelt en farma-5 ceutisch aanvaardbare zuuradditiezouten daarvan.

2. Verbinding volgens conclusie 1, welke 3,-deamino-4,-deoxy-3I-epi-4'-epi-3',4'-epiminodaunorubicine is.

3. Verbinding volgens conclusie 1, welke 31-deamino-4'-deoxy-3'-epi-4'-epi-31,4'-epiminodoxorubicine is.

4. Verbinding volgens conclusie 1, welke 31-deamino-41-deoxy-3'- hydroxy-4'-epi-4'-aminodaunorubicine is, of het hydrochloride ervan.

5. Verbinding volgens conclusie 1, welke 3'-deamino-4'-deoxy-31-hydroxy-4'-epi-4'-amino-doxorubicine is, of het hydrochloride ervan.

6. Werkwijze voor de bereiding van een glycoside met de formule 1, 15 zoals gedefinieerd in conclusie 1, waarin R^ een waterstofatoom voorstelt, omvattende het reageren van 3'-epi-daunorubicine met salicyl-aldehyde onder vorming van het overeenkomstige 3'-epi-N-salicylideen-derivaat; omzetten van de 41-hydroxygroep van genoemde 3'-epi-N-salicyli-20 deenderivaat in een trifluormethaansuifonaatgroep; verwijderen van de 31-epi-N-salicylideen-41-0-trifluoromethaan-sulfonaat, die aldus verkregen is van de salicylideengroep door zure hydrolyse, teneinde de gewenste glycoside met de formule l.te verkrijgen via verwijdering van de 4'-0-trifluoromethaansulfonaatgroep.

7. Werkwijze volgens conclusie 6, waarin 3 *-epi-daunorubicine, welke opgelost is in een mengsel van water en aceton, bij kamertemperatuur gereageerd wordt met salicylaldehyde onder vorming van het overeenkomstige 3'-epi-N - salicylideenderivaat, welke vervolgens in watervrij methyleendichloride en in de aanwezigheid van droge pyridine, behandeld 30 wordt met trifluoromethaansulfonzuuranhydride onder vorming van het overeenkomstige N-salicylideen-3'-epi-4'-0-trifluoromethaansulfonaat, waarvan de beschermende salicylideengroep onderworpen wordt aan zure hydrolyse onder toepassing van p-tolueensulfonzuur bij kamertemperatuur, waarbij de genoemde trifluoromethaansulfonaat. opgelost is in methanol, '· i -14- teneinde via verwijdering van de vertrekkende trifluoromethaansulfonaat-groep de gewenste glycoside met formule 1 te verkrijgen.

8. Werkwijze voor de bereiding van een glycoside met formule 1, zoals gedefinieerd in conclusie 1, waarin een hydroxygroep voorstelt, 5 welke werkwijze omvat het reageren van 31-epi-doxorubicine met salicyl-aldehyde, onder vorming van het overeenkomstige 3'-epi-N-salicylideen-derivaat; beschermen van de 14-hydroxygroep van het 3'-epi-N-salicylideen-derivaat met een tertiair butyldifenylsilylgroep; 10 omzetten van de 4'-hydroxygroep van het aldus verkregen 3'-epi- N-salicylideen-14-0-(tert.butyl-difenyl-silyl)-doxorubicine in een tri-fluoromethaansulfonaatgroep; en verwijderen van de 14-0-(tert.butyl-difenyl-silyl)-3'-epi-N-salicylideen-4'-O-trifluoromethaansulfonaat, dat aldus verkregen is, 15 van de salicylideengroep door zure hydrolyse en van de 14-0-(tert.butyl-difenyl-silyl) groep, zodat men de gewenste glycoside met formule 1 verkrijgt via vertrek van de 4'-0-trifluoromethaansulfonaatgroep.

9. Werkwijze volgens conclusie 8, waarin 3'-epi-doxorubicine, opgelost in een mengsel vein water en aceton, gereageerd wordt bij kamer- 20 temperatuur met salicylaldehyde onder vorming van het overeenkomstige 3'-epi-N-salicylideenderivaat, welke vervolgens behandeld wordt in water-vrij dimethylformamide bij kamertemperatuur met tert.butyl-difenyl-chlorosilaan in aanwezigheid van imidazool onder vorming van de 3'-epi-N-salicylideen-14-0-(tert.butyl-difenyl-silyl)ether ervan, welke in op-25 lossing in watervrij methyleendichloride omgezet wordt door behandeling met trifluoromethaansulfonzuuranhydride, in aanwezigheid van droog pyridine, in de 3'-epi-N - salicylideen-4'-0-trifluoromethaansulfonaat-14-0-(tert.butyl-difenyl-silyl)ether ervan, waarvan de beschermende salicylideengroep onderworpen wordt aan zure hydrolyse bij kamertempera-30 tuur en in een methanolische oplossing door middel van een katalytische hoeveelheid p-tolueensulfonzuur, en waarvan vervolgens de 14-0-(tert. butyl-difenyl-silyl)-beschermende groep verwijderd wordt door behandeling met tetra-n-butylammoniumfluoride in tetrahydrofuran bij kamertemperatuur, onder vorming van de gewenste glycoside met formule 1.

10. Werkwijze voor de bereiding van een glycoside met formule 2, zoals gedefinieerd in conclusie 1 of een farmaceutisch aanvaardbaar zout ft 7 n ' 7 rt $ •V * * 3 w ί V -15- daarvan, welke werkwijze omvat het ontzetten van 3'-deamino-4'-deoxy-3'-epi-4*-epi-3',4'-epimino-daunorubicine in het overeenkomstige N-tri-fluoroacetylderivaat; ontzetten van dit derivaat in 41-deoxy-4'-epi-N-trifluoroacetyl-5 31 -deamino-3' -hydroxydaunorubicine; verwijderen van de N-triflucroacetylgroep van het 4'-deoxy-41-epi-N-trifluoroacetyl-3'-deamino-3 *-hydroxydaunorubicine onder vorming van het glycoside met formule 2, waarin R^ een waterstofatoom is; indien gewenst het omzetten van dit glycoside met formule 2 10 in een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout daarvan; indien gewenst het bromeren van dit glycoside met formule 2 of het farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan en het hydrolyseren van de aldus verkregen 14-broomderivaat onder vorming van het glycoside met formule 2, waarin een hydroxygroep is en indien gewenst het omzetten 15 van dit glycoside met de formule 2, waarin R^ een hydroxygroep is in een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout daarvan-

11. Werkwijze volgens conclusie 2, waarin 3'-deamino-4'-deoxy-31- epi-41-epi-3*, 4'-epimino-daunorubicine gereageerd wordt met trifluoro-azijnzuuranhydride onder vorming van het overeenkomstige N-trifluoro-20 acetylderivaat, welke door behandeling met een katalytische hoeveelheid zwavelzuur en aceton 4'-deoxy-4'-epi-N-trifluoroacetyl-3*-deamino-3'-hydroxy-daunorubicine geeft; verwijderen van de N-trifluoroacetyl-beschermende groep daarvan door milde alkalische hydrolyse bij een temperatuur van 0°C onder 25 toepassing van 0,1N waterig natriumhydroxyde; eventueel het isoleren van het glycoside met de formule 2, waarin R^ een waterstofatoom is in de vorm van het hydrochloride door behandeling met hydrochloride in methanol; eventueel omzetten van dit glycoside met de formule 2 of het 30 hydrochloride ervan in het glycoside met de formule 2, waarin R^ een hydroxygroep is door bromering gevolgd door behandeling van het resulterende 14-broomderivaat met waterig natriumformiaat bij kamertemperatuur; en eventueel het isoleren van dit glycoside met de formule 2, 35 waarin R^ een hydroxygroep is als het hydrochloride ervan door behandeling met een methanolische oplossing van waterstofchloride. f* 9’ K '7 -16- 12» Een farmaceutische samenstelling, omvattende een anthracy- clineglycoside met de formule 1 of 2, zoals gedefinieerd in conclusie 1 of een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout daarvan, samen met een farmaceutisch aanvaardbare drager of verdunner.

13. Anthracyclineglycoside met de formule 1 of 2, zoals gedefi nieerd in conclusie 1, of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan, voor toepassing in een methode voor therapeutische behandeling van het menselijk of dierlijk lichaam.

14. Anthracyclineglycoside of zouten daarvan volgens conclusie 13, 10' voor toepassing als een anti-tumormiddel.

15. Werkwijze voor de bereiding van een anthracyclineglycoside met formule 1 zoals gedefinieerd in conclusie 1, welke werkwijze in hoofdzaak is zoals hiervoor beschreven in de voorbeelden I en II tezamen of voorbeelden ÏII-V tezamen.

16. Werkwijze voor de bereiding van een anthracyclineglycoside met de formule 2, zoals gedefinieerd in conclusie 1, of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan, welke werkwijze in hoofdzaak is zoals hiervoor beschreven in voorbeeld VI of de voorbeelden VI en VII tezamen. 20 t :· . i . 1 i O OH /V /k /COChLR, 9 (οΓμΎ^ c oh CH’° 0 0H ; ^ΛΎοΓ¥' ÓH Farmitalia Carlo Erba S.p.A. *»f- Λ~» REACTIE SCHEMA O OH n «u C0CHg ? ©Η vCvC^" ©öécy-"3 CM O O OH , ' 3 *„ O — __ CMO O OH I ' * - “

3 R3 k C-d O OH ^vvC^H CHO O OM I 2 o —* C^° ° OH j ;py^ ~ ^ 5 *2 e be-g ch3o O j O ® 1 b-h ^sli^roc^ O OH focpoo^ ^000^°°^3 Ch3® O ÓH , CH^O O OH I Iq o — — 3 o — ïïa-IIb SiÊ/ cF.coHs^E^y^ 7 1 8 j ; , , ·.. ·:' ^ Farmitalia Carlo Erba S.p.A.