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NOUVEAUX ANTHRACYCLINE GLYCOSIDES, LEUR PROCEDE DE PREPARATION ET LEUR APPLICATION COMME AGENTS ANTITUMORAUX
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La La d'anthracycline glyeosides, paration des des interjc6diaires 81ycosles. glyo051des .
La des anthracycline glycosides qui sont représentés par les formules générales (I) et (II)
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1 a b OH präsente invention se rapporte & de nouveauxoù R. représente un atome d'hydrogène ou un groupe hydroxyle et leurs sels d'addition avec un acide, qui sont pharmaceutiquement acceptables.
L'invention propose en outre un procédé de prépartaion d'un glycoside de formule (I) dans laquelle R1 représenteunatomed'hydrogèe, c'est-à-direlecomposé (la > , ce procédé consistant à :
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faire aldehyde, de façon lid'ene
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r6agir la 3'-épi-daunqrubicine avec le salicyl-convertir le groupe hydroxy en position 4' dudit déricé
3'-epi-N-salicylidène en un groupe trifluorométhane- sulfonate, et, éliminer du 3'-epi-N-salicylidène -4'-o-trifluoro- methanesulfonate ainsi obtenu, le groupe salicylidène, par hydrolyse acide, de façon ä obtenir le glycoside désiré de formule (I) en passant par le déplacement du groupe 4'-o-trifiluorométhanesulfonate.
Par consequent, le composa (la) peut être préparé par réaction du groupe amino en position 3'de la 3'-6pi-daunorubicine (ici) [F. Arcamone, A. Bargiotti, G. Cassinelli : Brevet Allemand n.2 752 115 {1er juin 1978}]
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avec le sa1icylaldéhyde, dans un mélange d'eau et d'acétone, à la température ambiante, pour obtenir le dérivé 3'-épiN-salicylidène par traitement avec l'anhydride trifluorométhanesulfonique dans du dichlorure de méthylène anhydre et en presence de pyridine, donnele3'-epi-Nsalicylidene-4'-O-trifluoro- méthanesulfonate (IVd) correspondant.
Ce compose. dissous dans du méthanol, peut ensuite être soumis à une hydrolyse acide du groupe protecteur salicyliden, au moyen d'acide p-toluenesulfonique, à la température ambiante, pour donner, en passant par le déplacement du groupe partant trifluorométhanesulfonate, le composé désire de formule < la).
La presente invention propose également un procédé de preparation d'un composé glycosidqieu de formule ( dans laquelle Ri représente un groupe hydroxyle, c'est-àdire le composé (Ib), ce procédé consistant a : faire réagir la 3'-épi-doxorubicine avec le salicyl- aldéthyde, de façon à obtenir le dérivé 3'-épi-
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N-salicylidène - hydroxy en position 14 dudit derive 3'-6pi-. avec un groupe tert. diphenyl-silyl ; - la 3'-épi-N-salicylidene-14-0-
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silyll-doxoru'bicine ainsi obtenue en un groupe trifluoromethanesulfonate eliminer du 14-0-Ctert.
N-salicylidene-4'-O-trifluoromethanesulfonate ainsi correspondant ;obtenu, le groupe salicyliden, par hydrolyse acide, et le groupe 14-O(tert. butyl-diphényl-silyel], de façon ä obtenir le glycoside désiré de formule (I) en passant par le déplacement du groupe 4'-O-trifluoro- méthanesulfonate.
Par conséquent, le composé (Ib) peut être préparé par la réaction du groupe amino en position 3'de la
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3'-épl-doxorubicine < V) avec le salieylaldéhyde Lon se reportera ä F. Arcamone et al., Brevet allemand ni 2 752 1151 pour obtenir la 3'-épi-N-salicylidene-doxorubicine (VIe) ; protection du groupe hydroxy en position 14 avec un groupe tert. butyl-diphényl-silyle, donnant la 3'-épi-N-salicylidène-14-O [tert.butyl-diphényl-silyl]-doxorubicine(VIf); conversion du groupe hydroxy en position 4'en un trifluorométhjanesulfonate (VIg) ; hydrolyse au moyen de l'acide p-toluenesulfonique avec formation du compose < rh) ;
et reaction avec le fluorure de tétr & -n-butyl-ammonium, pour eliminer le groupe protecteur 14-D-Itert. butyl-dtphenyl- silyl) et obtenir le compose de formule (Ib).
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D'une saniere typique, on fait réagir la 3'-epi- doxorubicine, dissoute dans un mélange d'eau et d'acetones la température ambiante, avec le salicyla1déhyde, pour obtenir le dérivé S'-epi-N-salicylidene correspondant, qui est, par la suite, traité dans le diméthylformamide anhydre, ä la température ambiante, par le t-butyl-diphenylchlorosilane, en presence d'imidazole, pour donner son 3'-épi-N-salicylidène-14-O- [t-butyl-diphényl-silyl]éther, lequel, dissous dans le dichlorure de methylene anhydre, est converti, par traitement par l'anhydride trifluorométhane- sulfonique, en presence de pyridine sèche, en son 3'-Api- N-salicylidène-4'-D-trifluorométhanesulfonate-14-D-[t-butyl- diphenyl-silylJether,
dont le groupe protecteur salicyliden
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est soumis à une hydrolyse acide, a la temperature ambiante et dans une solution méthanolique, au moyen d'une quantite catalytique d'acide p-toluene-sulfonique, et à partir duquel, par la suite, le groupe protecteur 14-0-tt-butyl- diphény1-sily1e] est éliminé par traitement par le fluorure de tetra-n-butyl ammonium dans le tétrahydrofuranne, a la température ambiante, pour obtenir le glycoside désiré de formule (I).
L'invention propose également un procédé de preparation d'un glycoside de formule (II), dans laquelle R1 représente un atome d'hydrogène, c'est-à-dir le compos < IIa > , ou un groupe hydroxy, c'est-à-dire le composé (IIb), ou d'un. sel d'addition avec un acide, pharmaceutiquement acceptable, de ces composés, ce procédé consistant ä :
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convertlr pl-4'-6pi- 3', 4'-épimino-daunorubicine en le derive N-trifluoroacétylé correspondant ; - rtve 4'--desoxy-4'-epi-N-trifluoroactyl-3'-désaminoS'-hydroxy-daunorubicine - de la 4'-désoxy- 4'-ép1-N-trlfluoroacétyl-3. daunorubicine, de façon A obtenir le glycoside de formule < II) dans laquelle R1 est un atome d'hydrogene ;
si on le souhaite, convertir ledit glycoside de formule (II) en l'un de ses sels d'addition avec un acide, pharmaceutiquement acceptables ; si on le souhaite, bramer ledit glycoside de formule (11) ou un sel pharmaceutiquement acceptable de celui- ci et hydrolyser le derive brome en position 14 ainsi obtenu, de façon ä former le glycoside de formule (II) dans laquelle R est un groupe hydroxy ; et, - si on le souhaite, convertir ledit glycoside de formule (11), dans laquelle R représente un groupe hydroxy, en l'un. de ses sels d'addition avec un acide, pharmaceu- tiquement acceptables.
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Le traitement du dérivé de 3',4'-épimino daunorubicine de formule (la) par l'anhydride trifluoroacetique donne le dérlvé N-trifluoroacétylé (VIIi) correspondant. La réaction de ce composé avec une quantité catalytique d'acide sulfurique dans l'acetone donne la 4'-désoxy-4'-ép1N-tri- fluoroacétyl-3'-désamino-3'-hydroxy-daunorubicine (VIII), laquelle, par trattement par l'hydroxyde de sodium aqueux, donne le compose (Ila). D'une manière typique, le groupe N-trifluoroacetyle peut étre éllrnlné par une hydrolyse alcaline douce, à une température de O'C, au moyen d'hydroxyde de sodium aqueux 0, 1 N.
Le glycoside (Ila) peut etre isolé sous la forme de san chlorhydrate, par traitement par du chlorure d'hydrogen dans le méthanol,
Le composé (lib) peut être préparé par bromation du composé (Ila), en faisant suivre par le traitement du dérivé bromé en position 14 resultant par le formiate de sodium aqueux, à la température ambiante, conformément au
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mode opératoire decrit dans le Mémoire du Brevet des EtatsUnis d'Am6rique 803 124. 11 peut etre isole sous la forme de son chlorhydrate de la meme manlere que le n'3glycoside (IIa).
Les procédés de l'invention sont resumés par le schémaréactionneici-dessous.
La presente invention propose également une composition pharmaceutique comprenant, comme ingredient actif, un anthracycline glycoside de l'invention ou un sel d'addition avec un acide, pharmaceutiquement acceptable, de ce glycoside, conjointement avec un support ou diluant pharmaceutiquement acceptable. Une quantité thérapeutiquement efficace d'un composa de formule (I) est combinee avec un support inerte. Des supports classiques peuvent etre utilisés et la composition peut être formulae d'und manière classique.
Les composès de l'invention sont utiles dans des
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méthodes de du corps humain ou animal, thérapeutique. En particulier, les composes de l'invention sont
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SCHEMA
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c R2 : H. d R H. CF, e R, R, f Rf g R, :-0-Si h i R.
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traitementLes Exemples suivants illustrent l'invention.
EXENPLE 1
3'-épi-N-salicylidène-daunorubicine (IVc)
Une solution de 2 g de 3'-épi-daunorubicine (III) dans un mélange de 80 ml d'eau et de 20 ml d'acétone a été traitée, à la température ambiante, par 0,5 ml de salicylaldéhyde, ä pH 8. Au bout de 10 minutes, de l'acetate d'éthyle a été ajouté et la phase organique a été séparée et recueillie) lavée à l'eau deux fois, séchée sur sulfate de sodium anhydre, filtrée, et on l'a fait évaporer ä siccité sous vide.
Le résidu a été d'abord trituré avec de l'hexane, pour éliminer les traces de salicylaldehyde, puis recueilli et séché sous vide, ä 30*C, pour donner le composé (IVc), avec un rendement presque quantitatif.
Rf de 0,21 en CCM sur Kieselgel F 254 (Merck), avec, comme éluant, le mélange de solvants CH2-Cl2-Acétone (8/2 v/v).
EXEMPLE 2
3'-désamino-4'-désoxy-3'-épi-4'-épi-3', 4'-épimino- daunorubicine (la)
A une solution de 2 g de 3'-épi-N-salicylidènedaunorubicine (IVc) dans 20 ml de dlchlorométhane anhydre et 2 ml de pyridine sèche, maintenue à -10 C, on a ajouté une solution de 0,8 ml d'anhydride d'acide trifluorométhane sulfonique dans 10 ml de dichlorométhane. Au bout d'l heure à -10 C, le mélange a été dilue avec du dichlorométhane et lavé avec de l'eau, de l'acide chlorhydrique 0, 1 K, froid, de l'hydrogénocarbonate de sodium aqueux à 5%, froid, et de l'eau. La phase organique, sechee sur sulfate de magnesium anhydre, a été recueillie par filtration, et le solvant, éliminé sous vide pour danner le composé (IVd).
Rf de 0,50 en CCX sur Kieselgel F 254)) (merk), avec, comme lutant, le melange de solvants CH2Cl2-Acétone (95/5 v/v).
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Le produit brut a été dissous dans 50 ml de méthanol et additionné de 0, 2 g d'acide p-toluènesulfonique monohydraté. La solution a été maintenue ä la température ambiante pendant 1 heure, puis elle a été additionnée de 100 ml d'eau et extraite par une petite quantité de dichloromethane. La phase aqueuse a été ajustée à pH 8 par de l'hydroxyde de sodium 0,1 M, et du dichlorométhane a été ajouté. La phase organique a été séparée et recueillie, lavée avec de l'eau. séchée sur sulfate de sodium anhydre et an a falt évaporer le solvant jusqu'à faible volume.
Le mélange a été purifie par chromatographie sur une colonne de gel de silice, tamponnée à pH 7, avec, comme éluant, un mélange dichlorométhane-éthanol.
L'éluat contenant le produit (la) a élé lavé avec
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de l'eau, on l'a fait evaporer sous vide, extrait par une petite quantité de dichlorométhane, et cristallise.
FD SM 509 [M+] ; p. f. : 135-137'C Rf de 0,38 en CCK sur Kieselgel F 254 (Kerck), avec, comme
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eluant.lenlangedesolvantsCHCl-CHOH-CHCOOH-HgO (30/4/1/0, RE H < 200 MHz, CDC13 > 8,02 (dd, J = 1,1, 7, 7 Hz, 1H. H-1) 7, 76 (dd, J = 7, 7, 7, 7 Hz, 1H, H-2 7. 37 < dd, J = 1,1, 7, 7 Hz, 1H, H-3)
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5, (dd, J = 3, 5, 17 (dd, J = 2.
4, J Hz, 1H, R-5') 4, 3H, OCH-4) 3, 2 Hz, 1H, -loue) 2, 2, 46 < ddd, J = 2, 0, 2, 0, 15, 0 Hz, 1H, Huez 2, 43 < s, 3R, )
312, 30 (ddd, J = 1,5, 4,3, 6,4 Hz, 1H, H-3') 1,9-2,0 (m,2H,H-8ax,H2'ax) 1, 87 (ddd, J = 1, 5, 3, 0, 14, 6 Hz, 1H, H2'e) 1,44 < d, J = 6,7 Hz, 3H, CH3-5')
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Les Exemples suivants illustrent l'invention.
EXEMPLE 1
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3'-epi-N-salicylidene-daunorubicine
Une solution de 2 g de S'-epi-daunorubicine (III) dans un melange de 80 ml d'eau et de 20 ml d'acetone a ete traitée, à la température ambiante, par 0, 5 ml de salicyl- aldéhyde, ä pH 8. Au bout de 10 minutes, de l'acetate d'éthyle a été ajoute et la phase organique a et séparée et recueillie, lavee ä l'eau deux fois, séchée sur sulfate de sodium anhydre, filtrée, et on l'a fait evaporer ä siccité sous vide.
Le residu a été d'abord triture avec de l'hexane, pour éliminer les traces de salicylaldéhyd, puls recueilli et séché sous vide, ä 30*C, pour donner le compose (IVc), avec un rendement presque quantitattf.
Rf de 0. 21 en CCM sur Kieselgel F 254)) (Merck), avec, comme éluant, le melange de solvants CH2C12-Acétone < 8/2 v/v > .
EXEMPLE 2
3'-désamino-4'-désoxy-3'-épi-4'-épi-3', 4'-épimino- daunorubicine (la)
A une solution de 2 g de 3'-épi-N-salicylidènedaunorubicine (IVc) dans 20 ml de dichloromethan anhydre et 2 ml de pyridine sèche, maintenue à -10 C, on a ajouté une solution de 0, 8 ml d'anhydride d'acide trifluoromethane
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sulfonique dans 10 ml de dichloromethane. Au bout d'l heure à a été dilué avec du dichlorométhane et 1avé avec de 1'eau, de l'acide chlorhydrique 0, }1, de l'hydrogénocarbonate de sodium aqueux à 5%, froid, et de l'eau. La phase organique, séchée sur sulfate de magnesium anhydre, a été recueillie par filtration, et le solvant, éliminésousvidepourdonerlecomposé (IVd).
Rf de 0 ; 50 en CCM sur Kieselgei F 254 (Merok), avec, comme éluant, le melange de solvants CH2Cl2-Acétone (95/5 v/v).
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L'hydrolyse acide du compose VIg dans du methanol avec une quantite catalytique d'acide p-toluènesulfonique monohydratè, a donne, après le traitement, le composé Ih.
Le produit brut a été triture avec de l'hexane et recueilli sur un verre fritté, lavé avec un mélange hexane- éther diéthylique et dissous dans 100 ml de tetrahydro- furanne. La solution a été traitee par 0, 5 g de fluorure de tetra-n-butyl-ammonium.
Au bout de 2 heures, l'hydrolyse du groupe tert. butyl-diphényl-silyle était complète Le residu obtenu par Elimination du solvant par évaporation sous vide a été purifié par chromatographie sur une colonne de gel de silice, tamponnée à pH 7, avec un mélange dichiorométhane-
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ethanol comme système d'elution, pour fournir le composa Ib pur Le précipité a été recueilli sur un verre fritté, lave avec un mélange hexane - éther diéthyique et séché sous video Rf de 0, 20 en CCM sur Kieselgel F 254 (Merck), avec, comme
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fluant. le mélange de solvants CHCl-CHOH-CHCOOH-HO (30/4/1/0, 5 v/v).
EXEMPLE 6 31-dA-samino-41-desoxy-3'-hydroxy-4'-A-pi-4'-aminodau Le composé de l'intituliez a été préparé à partir de l'aziridine g du compose la a été transformé en le ! Yorubicine < Ha)derive N-trifluoroacêtylé VIIi par traitement par 1,2 ml d'ahydride trifluoroacétique dans le dichlorure de méthylène anhydre. Après le traitement, la matière. brute (Ri de 0, 7 en CCM sur Kieselgel F 254)) (Merck), avec, comme éluant, le mélange de solvants CH2Cl2-Acétone (4/1 v/v)] a été dissoute dans 20 ml d'acétone et traitée par une quantité catalytique d'acide sulfurique, à 10 C.
Le melange a été dilué dans 200 ml de dichlorure de méthylène, lavé avec de l'eau, de l'hydrogénocarbonate de sodium aqueux à 5%, et de l'eau. Le solvant a pete élimine sous vide, et le résidu a et purifie sur une colonne de gel
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de silice, avec le dichlorure de méthylène comme système d'elution, pour g du composé 11a pur.
Rf de 0, 21 en CCK sur F 254)) (Merck), avec, comme fluant, le melange de solvants CHCl-Acetoiie Le produit 11a a été lentement dissous dans de l'hydroxyde de sodium 0, 1 N, ä. 0*C, l'hydrolyse du groupe protecteur N-trifluoroacetyle.
Au bout d*l heure ä O'C, la solution a été ajustée A 8, 6 avec de l'acide chlorhydrique 0, 1 N et extralte par le dichlorure de methylene. Le solvant a été éliminé par distillation, en laissant 0, g d'un residu qui a été converti, par traitement avec du chlorure d'hydrogene méthanolique, en le chlorhydrate de 4'-désoxy-4'-amino- 4'-äpi-31-de53amino-31-hydroxy-daunorubicine.
SMFD527 Rf de 0, 18 en CCK sur blutant, le Systeme de solvants CH-Cl-CH-OH-CH.. O (30/4/l/0. 5 v/v).
RMN H < 200 8, 02. (dd, J = 0.
7, 77 (dd, J = 8, 5, 8, 5 Hz, 1H, H-2) 7, 38 (dd, J = 0, 9. 8, 5 Hz, 1H, H-3) 5. 52 (dd, J 4, 0 Hz, 1H, H.-1') 5. J = Hz, 1H, fiv 4, 07 < s, 4) 3, (dq, J Hz, 1H, H-5') 3, (ddd, J 4, Hz, 1H, H-3') 3, 2, 94 (d, J = 9 Hz, 1H, H.-lOax) 2, 3H, COG) 2. (m, 1H, R-8ax) 2, 30 < dd, J = 9, 2, 0-2, 2H, H-8e, H-2'e) 1, J = 4, 1, J = 6, Hz, 3H, CR-5')
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fournir 0, 7EXEMPLE 7
3'-désamino-3'-hydroxy-4'-désoxy-4'-épi-4'-amino- doxorubicine < IIb)
0, 5 g du composé Ila a été dissous dans un mélange de methanol et de dioxanne. La solution a été traitee, comme décrit dans le Mémoire du Brevet des Etats-Unis d'Amérique nif 3 803 124, d'abord avec du brome, pour donner le dérivé bromé en position 14, et, ensuite, avec du formiate de sodium aqueux, pour donner le composé de l'intitulé.
Celui-ci a été converti en son chlorhydrate par traitement avec du chlorure d'hydrogène méthanolique.
FD-SM543 [M+],CCMsur KieselgelF254 (Merck), avec, comme éluant le Systeme de solvants
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CH2C12- de 0, L'activité nouvel anthracycline glycoside de la présente invention (FCE 24782/XOO-0333) a été test "in vitro"ä cellules HeLa, P388, P388/DX, LoVo et LoVo/DX.
Temps d'exposition au composé : 24 heures/en
CH30H - CH3COOH - H20 (30/4/1/0, 5 v/v) : Rfcomparaison avec la daunorubicine.
Les resultats sont présentés dans le Tableau 1.
Le composé, lorsqu'il a été teste"in vivo"a l'encontre de la leucémie ascitique P-388 et de la leucémie de Gross, a présenté une bonne activité antitumorale, par comparaison avec la daunorubicine, en particulier, lorsqu'11 a été administré par voie orale.
Les resultats sont donnés dans les Tableaux 2 et 3.
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Tbleaju Activité 4'-épi-4'-amino-daunorubicine par l.comparaison avec la daunorubicine (DNR)
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<tb>
<tb> DI50 <SEP> (ng/ml) <SEP> a)
<tb> Composé
<tb> HeLab) <SEP> P388c) <SEP> P388/DXd) <SEP> LoVoe) <SEP> LoVo/DXf)
<tb> DNR <SEP> 19 <SEP> 10,5 <SEP> 730 <SEP> 43 <SEP> 820
<tb> FCE <SEP> 24782/XOO-0333 <SEP> 11 <SEP> 24,5 <SEP> 235 <SEP> 37 <SEP> 230
<tb>
a) Dose donnant une reduction de 50% du nombre de cellules par comparaison avec les témoins non traité5. b) Cellules de carcinome épithelioide du col utérin humain. c) Cellules de leucémle P 388, sensibles à la
Doxorubioine. d) Cellules de leucémie P 388, résistantes ä la
Doxorubicine. e) Cellules d'adénocarcinome du côlon humain, sensibles ä la Doxorubicine. f) Cellules d'adénocarcinome du côlon humain, résistantesàlaDoxorubicine.
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T, de la leucémie ascitique P
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<tb>
<tb> 2ble-au <SEP> 2 <SEP> Effet-ä <SEP> l'encontreb <SEP> c <SEP>
<tb> Composé <SEP> dose <SEP> T/C5 <SEP> Morts <SEP> par
<tb> mg/kg <SEP> toxicited
<tb> DNR <SEP> 2,9 <SEP> 155 <SEP> 0/10
<tb> 4,4 <SEP> 170 <SEP> 8/10
<tb> FCE <SEP> 24782/XOO-0333 <SEP> 1, <SEP> 96 <SEP> 155 <SEP> 0/10
<tb> 2, <SEP> 9 <SEP> 150 <SEP> 0/10
<tb> 4,4 <SEP> 140 <SEP> 9/10
<tb> 6, <SEP> 6 <SEP> 100 <SEP> 10/10 <SEP>
<tb>
Les expériences ont été effectuées chez des souris CDF1, inoculées par 106 cellules leucémiques, par voie intra- péritonéale.
Traitement par voie intrapéritonéale. au jour 1 après l'inoculation de la tumeur.
Temps de survie moyen des sour1s traltées/temps de survie moyen des témoins x 100.
Evaluées sur la base des résultats de l'autopsie.
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leuc. m, e d...... a Tableau 3 Effet à l'encontre de
EMI15.2
<tb>
<tb> de <SEP> la <SEP> leucémieComposé <SEP> dose <SEP> T/C%o <SEP> Morts <SEP> pag
<tb> mg/kg <SEP> toxicité
<tb> DNR <SEP> 10 <SEP> 165 <SEP> 0/20 <SEP>
<tb> 15 <SEP> 192 <SEP> 2/20
<tb> FCE <SEP> 24782/XOO-0333 <SEP> 8, <SEP> 2 <SEP> 175 <SEP> 0/20
<tb> 11,5 <SEP> 230 <SEP> 0/10
<tb> 16. <SEP> 1 <SEP> 240 <SEP> 0/10
<tb> 22, <SEP> 5 <SEP> 130 <SEP> 0/10 <SEP>
<tb>
a Les expériences ont été effectuées chez des souris C3H, inoculées par 2 x 106 cellules leucémiques, par voie intraveineuse.
Traitement par voie intraveineuse au jour 1 après l'inoculation de la tumeur.
Temps de survie moyen des souris traitées/temps de survie moyen des témoins x 100.
Evaluées sur la base des résultats de l'autopsie.