KR20190017873A - 홀수의 탄소 원자를 갖는 지질 및 제약 조성물 또는 영양 보충제로서의 그의 용도 - Google Patents

홀수의 탄소 원자를 갖는 지질 및 제약 조성물 또는 영양 보충제로서의 그의 용도 Download PDF

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Abstract

제약 또는 영양 보충제로서의 용도가 홀수의 탄소 원자를 갖는 지방산을 보유하는 지질의 제공된다. 특히, 이러한 지질은 신경변성 질환, 시신경 및 망막 변성 질환, 탈수초성 질환, 신경근육 장애 및 근육 이영양증, 뇌 또는 척수 신경 손상, 아밀로이드 관련 질환, 및 신장 질환, 당뇨병 또는 천식으로부터 선택된 다른 만성 질환의 치료 및/또는 예방에서, 뿐만 아니라, 인간 및/또는 동물용 항노화, 수명 연장 및 뇌 기능 개선을 위한 기능성 식품 또는 식품 보충제로서 사용된다. 게다가, 상기 질환의 치료 및/또는 예방을 위해 사용될 수 있는 허브 나도고사리삼속이 제공된다.

Description

홀수의 탄소 원자를 갖는 지질 및 제약 조성물 또는 영양 보충제로서의 그의 용도
관련 출원
본 출원은 2016년 6월 8일에 출원된 미국 가출원 일련 번호 62/347,103을 우선권 주장하며, 이 가출원의 전체 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
발명의 분야
본 발명은 지질 및 제약 조성물 또는 영양 보충제로서의 그의 용도에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 신경변성 질환, 시신경 및 망막 변성 질환, 탈수초성 질환, 신경근육 장애 및 근육 이영양증, 뇌 또는 척수 신경 손상, 아밀로이드 관련 질환, 및 신장 질환, 당뇨병, 천식 및 호흡곤란으로부터 선택된 다른 만성 질환 또는 병태의 치료 및/또는 예방을 위한 제약 또는 영양 보충제, 뿐만 아니라 인간의 항노화 또는 수명 연장 및 뇌 기능 개선을 위한 기능성 식품 또는 식품 보충제로서 유용한, 강력한 신경보호, 항아폽토시스, 신경-구출, 및 축삭-생장 효과를 나타내는, 홀수의 탄소 원자를 갖는 지방산을 보유하는 지질, 특히 트리펜타데카노인의 신규한 용도를 제공한다. 게다가, 본 발명은 상기 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방에서의 나도고사리삼속(Ophioglossum) 및 그의 추출물의 신규한 용도에 관한 것이다.
전세계적으로 수억명의 사람들이 신경계 장애에 침범된다. 신경계 장애는 중추 및 말초 신경계의 질환을 포함한다. 다시 말해서, 뇌, 척수, 뇌 신경, 말초 신경, 신경근, 자율 신경계, 신경근육 접합부, 및 근육.
본 발명은 아래와 같이 상세히 설명된 바와 같이 상이한 신경계 질환 및 연관 만성 질환의 치료와 관련이 있다:
A. 신경변성 질환
신경변성 질환은 뉴런의 사멸을 포함하여, 뉴런의 구조 또는 기능의 진행성 소실에 대한 포괄적인 질환 용어이다. 뉴런의 손상 또는 사멸은 신경계의 침범된 부위에 의해 제어되는 기능의 점진적인 저하를 야기한다. 신경변성 장애의 선택된 군은 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD), 헌팅톤병 (HD), 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 치매, 루이 소체 치매 (DB), 전두측두엽 치매 (FTD), 크로이츠펠트-야콥병 (CJD), 및 뇌 위축을 포함한다.
대부분의 신경변성 질환은 노화 과정 동안에 미스폴딩된 단백질의 응집과 연관되어 있기 때문에 단백질병증으로서 또한 분류된다. 단백질의 잘못된 폴딩 및 응집은 신경변성 질환의 주요 조직병리학적 특징이다. 모든 신경변성 질환의 주요 조직병리학적 병소는 이제 올리고머라고 불리는 작은 단백질 응집체 상에 있다. 이들 응집체는 β-아밀로이드, α-시뉴클레인, 프리온 등의 독성 종일 수 있다. β-아밀로이드의 침착은 알츠하이머병의 노인성 플라크의 주요 구성요소이며 AD의 발병기전에 강하게 연루되어 있으며; 타우 단백질은 AD의 발병기전에 연루된 신경원섬유 엉킴의 주요 구성요소이며; α-시뉴클레인은 응집되어 루이 소체로 특징지어지는 병리학적 병태, 예컨대 파킨슨병, 루이 소체 치매, 및 다계통 위축에서 불용성 피브릴을 형성할 수 있으며, PD 및 DLB의 발병기전에 강하게 연루되어 있으며; 프리온은 프리온 질환과 전파성 해면모양 뇌병증의 주요 구성요소이며 해면모양 뇌병증 (크로이츠펠트-야콥병)과 강하게 연관되어 있다.
아폽토시스, 또는 프로그램된 세포 사멸은 생리학적 및 병리학적 조건 둘 다에서 중요한 역할을 한다. 신경변성 질환을 포함한 여러 가지의 급성 및 만성 신경계 질환에서 아폽토시스성 세포 사멸 속도의 증가에 대한 증가하는 증거가 있다. 아폽토시스는 뉴런 수축, 염색질 응축, 및 DNA 단편화를 특징으로 하며, 한편 괴사성 세포 사멸은 세포질 및 미토콘드리아 팽창에 뒤이어 세포막의 용해와 연관되어 있다. DNA 단편화의 증거는 AD, HD 및 ALS를 포함한, 여러 퇴행성 신경 장애에서 밝혀졌다.
신경변성 질환의 원래 원인을 표적으로 하는 어떠한 효과적인 치료법도 없다.
치매는 가장 흔한 증상으로서 기억 상실을 가진 인지 능력의 후천적 저하로 정의된다. 치매를 가진 사람들이 전세계적으로 3560만명이 있으며, AD가 치매의 가장 흔한 원인으로, 모든 환자의 60-70%를 차지하는 것으로 추정된다 (WHO Online Q&A, February 2014). 치매의 가장 강한 위험 인자는 연령 증가이다. AD는 대뇌 피질과 특정 피질 하부 영역에서 뉴런과 시냅스의 소실을 특징으로 한다. 이 소실은 전두 피질 및 대상회의 부분, 및 측두엽 및 두정엽의 변성을 포함한, 침범된 부위의 총체적인 위축을 유발한다. 증가하는 증거는 올리고머라고 불리는 가용성 아밀로이드 종이 세포 기능장애를 야기하며 AD에서 초기 독성 분자를 나타낼 수 있음을 시사한다. β-아밀로이드 (Aβ)를 함유하는 신경염성 플라크가 있다. Aβ는 39-42개 아미노산의 단백질로, APP가 세크레타제에 의해 절단될 때, 더 큰 막관통 단백질인 아밀로이드 전구체 단백질 (APP)로부터 단백질분해되어 유래된다. 게다가, 현재 이용가능한 분자 중 어느 것도 질환의 근본적인 원인이 되는 병리생리학적 과정을 효율적으로 표적화하지 않는다.
파킨슨병은 중추 신경계의 퇴행성 장애이다. 그것은 중뇌의 한 영역인 흑색질에서 도파민-생성 세포의 사멸로부터 생기며; 세포-사멸의 원인은 알려져 있지 않다. 파킨슨병은 두 번째로 가장 흔한 신경변성 장애이며 운동완만, 강직, 안정시 진전 및 자세 불안정으로서 나타난다. PD는 전세계적으로 대략 7백만명의 사람들과 미국에서 1백만명의 사람들에게 침범한다. PD의 연간 신규 사례의 수는 연간 100,000명당 8 내지 18건이다. 레보도파는 30년 초과 동안 가장 널리 사용되어 온 치료법이나 효능은 매우 제한적이었다. 신경보호에 대한 조사가 PD 연구의 선두에 있다.
헌팅톤병 (HD)은 성상교세포증 및 중형 돌기 뉴런의 소실을 야기한다. 뇌의 영역은 그의 구조 및 그들이 함유하는 뉴런의 유형에 침범되며, 그들이 누적적으로 세포를 소실함에 따라 크기가 감소한다. 침범된 부위는 주로 선조체 뿐만 아니라, 전두엽 및 측두엽 피질에도 영향을 미친다. 선조체의 시상하부 핵은 제어 신호를 담창구에 보내고, 이는 운동을 시작하고 조정한다. 따라서 시상하부 핵으로부터의 더 약한 신호는 움직임의 개시 및 조정을 감소시켜, 장애의 특징적인 움직임을 유발한다. HD에 대한 어떠한 치료법도 없다.
때때로 루게릭병이라 불리는 근위축성 측삭 경화증 (ALS)은 자발적인 근육 제어를 담당하는 신경 세포 (뉴런)를 공격하는 급속하게 진행성인, 변함없이 치명적인 신경계 질환이다. 상기 질환은 운동 뉴런 질환으로 공지된 장애의 군에 속하며, 이는 운동 뉴런의 점진적 퇴화 및 사멸을 특징으로 한다. ALS의 관리는 증상 완화 및 기대 수명 연장을 시도한다. 릴루졸은 수개월까지 적당히 생존을 개선시키는 것으로 나타났다. ALS의 주요 병리학적 특징은 TDP-43, FUS 또는 SOD1 단백질을 함유하는 단백질 함유물의 비정상적인 축적이다. 시험관내 및 세포주 실험 증거는 SOD1, TDP-43 및 FUS가 불용성 원섬유 응집체를 형성함을 시사한다. 특히, 이들 단백질 응집체는 자연 대조물의 응집을 촉발시키는 시드로서 작용할 수 있다. 많은 증거들이 주요 ALS-연관 단백질의 프리온-유사 특성을 뒷받침하며 프리온-유사 메카니즘을 기반으로 하는 ALS에 대한 가능한 치료 전략이 논의되었다. (Grad, Leslie I.; et al. Neurobiology of Disease. 2015;77: 257-265.)
B. 망막 및 시신경 변성 질환
B-1. 시신경 변성 질환
시신경 위축은 눈에서 뇌로 임펄스 전달하는 시신경에 침범하는 병태이다. 시신경 위축은 많은 종류의 병리로부터 시신경이 손상되어 발생한다. 상기 병태는 실명, 녹내장, 전방 허혈성 시신경병증으로 공지된 시신경의 발작; 시신경을 압박하고 있는 종양; 시신경염, 다발성 경화증에 의한 시신경의 염증; 레베르 유전성 시신경병증 (LHON)으로 공지된 유전성 병태를 포함한, 시력에 문제를 야기할 수 있다.
시신경염 (ON)은 부분적 또는 완전한 시력 상실을 야기할 수 있는 시신경의 염증이다. 시신경은 눈의 망막으로부터 나오는 축삭을 포함하며 시각 정보를 주요 시각 핵에 전달하며, 이의 대부분이 뇌의 후두 피질에 중계하여 전달되어 시각으로 처리된다. 시신경의 염증은, 대개 시신경을 덮고 있는 미엘린초의 팽대 및 파괴 때문에, 시력 상실을 야기한다. 직접적인 축삭 손상은 신경 파괴에서 또한 역할을 할 수 있다.
우성 시신경 위축 (DOA)은 시신경의 양측성 변성을 특징으로 하는 신경-안과적 질환이며, 인생의 첫 10년 동안에 전형적으로 시작되는, 잠행성 시각 상실을 야기한다. 상기 질환은 1차 망막 신경절 세포 (RGC) 및 시신경을 형성하는 그의 축삭에 영향을 미치며, 이는 광수용체로부터의 시각 정보를 뇌 안의 외측 슬상으로 전달한다. 질환의 유병률은 나머지 세계에서 1/10000에서 1/30000까지 다양하다.
B-2. 망막 변성 질환
연령-관련 황반 변성 (AMD 또는 ARMD)으로도 공지된 황반 변성은, 시야의 중심에서 흐려지거나 시력 소실을 유발할 수 있는 의학적 병태이다. 전세계적으로 거의 5천만명에 침범하는 돌이킬 수 없는 실명의 가장 흔한 원인 중 하나이다. 노화되는 망막 및 뇌의 퇴행 과정은 현저한 유사성을 보여 주며, 새로운 표적 뿐만 아니라 병원성 메카니즘을 확인할 수 있는 여지를 제공한다. 알츠하이머병의 뇌에 축적되는 아밀로이드 베타는 AMD에 축적되는 단백질 중 하나이며, 이는 AMD가 때때로 "눈의 알츠하이머" 또는 "망막의 알츠하이머"라고 불리는 이유 중 하나이다. 현재, AMD 환자의 대다수는 어떠한 효과적인 치료법도 갖고 있지 않다.
전세계적으로 실명의 주요 원인인 녹내장은 흔히 안압 (IOP) 상승과 관련되어 있다. IOP가 망막 신경절 세포 (RGC)의 돌이킬 수 없는 파괴를 야기할 수 있는 정밀한 수단은 결코 분명하지 않다. 녹내장에서 돌이킬 수 없는 시력 상실을 야기하는 주요 단계는 RGC 아폽토시스이다. Aβ는 녹내장에서 RGC 아폽토시스의 진행과 연류되어 있는 것으로 보고되어 있으며, 녹내장 환자에서 유리체 Aβ 수준이 감소하고 (망막 Aβ 침착과 일치) 실험 녹내장에서 RGC의 Aβ 발현이 증가한다는 증거가 있다. RGC의 녹내장-유발 아폽토시스에서 Aβ의 관련을 뒷받침하는 녹내장의 동물 모델로부터 강한 증거는 Aβ 경로의 여러 단계를 목표로 하는 작용제의 사용이 녹내장 치료에 대한 신경보호적 접근의 가능성을 높인다는 것을 보여준다. (Guo L, et al. Targeting amyloid-β in glaucoma treatment. Proc Natl Acad Sci U S A. 2007;104 (33): 13444-13449.)
색소성 망막염 (RP)은 망막에서 간상 광수용체 세포의 진행성 퇴행으로 인해 심각한 시력 손상을 야기하는 유전의, 퇴행성 안 질환이다. 진행성 간상세포 퇴행은 나중에 인접한 망막 색소 상피 (RPE)의 이상 및 원추 광수용체 세포의 저하로 이어진다. RP의 초기 단계 환자는 먼저 유전된 간상 광수용체의 쇠퇴로 인한 주변부 및 희미한 광 시력의 손상, 및 최종적으로 실명을 알게 된다. 현재 전세계에 1/4,000인 150만명의 사람들이 침범되는 것으로 추정된다. 색소성 망막염의 어떠한 치유법도 없다.
C. 탈수초성 신경계 장애
탈수초성 신경계 장애의 군은 부신백질이영양증, 다발성 경화증 (MS), 시신경염, 급성 염증성 탈수초성 다발신경병증 (AIDP), 만성 염증성 탈수초성 다발신경병증 (CIDP), 길랑-바레 증후군 (GBS), 지카 바이러스에 의한 또는 지카 바이러스와 관련된 뇌염, 시신경 척수염 (NMO), 급성 파종성 뇌척수염, 급성 괴사성 출혈성 뇌염, 동심성 경화증, 미만성 경화증, 이염성 백질이영양증, 구상 세포 백질이영양증, 중추 신경계의 해면 변성, 페리-플럼병, 알렉산더병, 방사선 손상 백질뇌병증, 저산소성 백질뇌병증, 뇌실주위 백질연화증 질환, 동맥경화성 피질하 뇌병증, 진행성 다초점성 백질뇌병증, 및 중심 뇌교 수초용해 증후군을 포함한다.
C-1. 부신백질이영양증
부신백질이영양증 (X-연관 부신백질이영양증, ALD, X-ALD, 시에머링-크로이츠펠트병 또는 브론즈 쉴더병으로도 공지됨)은 X 염색체에 연관된 질환이다. 이는 관련 효소가 제대로 기능하지 않음으로 인한 지방산 축적의 결과로, 이는 그 다음에 신경의 미엘린초에 대한 손상을 야기하여, 발작 및 과다활동을 유발한다. 다른 증상은 말하기, 듣기 및 구두 지시 이해하기에 문제를 포함한다. ALD는 대사의 가장 흔한 퍼옥시좀 선천적 이상이며, 발생률은 1:18,000 내지 1:50,000으로 추정된다.
ALD에서 식이 요법의 초기 시도는 매우 긴 쇄 지방산 (VLCFA)의 섭취를 제한하는 것을 수반하였으나, 이는 혈장 및 다른 신체 조직에서 VLCFA의 수준에 영향을 미치지 않았다. ALD를 가진 로렌조 오돈의 부모는 상기 질환의 진행을 둔화시키기 위한 식이 치료 개발 노력에 앞장섰다. 그들은 체내에서 포화 지방산의 연신을 억제하는 로렌조 오일로 공지된, 불포화 지방산의 혼합물 (4:1 비의 글리세롤 트리올레이트 및 글리세릴 트리에루케이트)을 개발하였다. 로렌조 오일의 보충은 체내 VLCFA 농도를 정상화시키는 것으로 밝혀졌긴 하지만, 상기 질환의 대뇌 징후 치료시 그 유효성은 여전히 논란이 되고 입증되지 않았다. 로렌조 오일을 사용한 시험은 증상이 있는 환자의 신경학적 저하를 정지시키지도 않으며, 또한 부신 기능을 개선시키지도 않는다는 점을 보여주었다.
C-2. 다발성 경화증
다발성 경화증 (MS)으로 진단된 사람들의 추정된 총 수는 전세계적으로 대략 130만명이다. MS는 중추 신경계에서 미엘린의 다초점성 파괴를 특징으로 하는 쇠약성, 및 장애를 초래할 신경계 질환이다. 중추 신경계의 백질에서 축삭의 미엘린초의 탈수초화로 인해, 미엘린은 손상되거나 파괴되고, 신경 임펄스가 둔화되거나 전혀 전달되지 않아, 뇌와 신체의 다른 부위의 의사 소통의 지장을 야기한다. 축삭 손상은 모든 새로 형성된 MS 병변에서 발생하며, 축적된 축삭 소실은 MS에서 진행성 및 돌이킬 수 없는 신경학적 장애의 주요 원인이다. MS로부터 진행성 하반신 불완전 마비 환자에서 축삭의 무려 70%가 외측 피질척수로 (예를 들어, 운동로)로부터 소실되며, 종단적 MRI 연구는 확립된, 불활성 병변 내에 시간이 지남에 따라 진행성 축삭 소실이 있음을 시사한다.
C-3. 다른 탈수초성 질환
다른 탈수초성 질환은 급성 염증성 탈수초성 다발신경병증 (AIDP), 만성 염증성 탈수초성 다발신경병증 (CIDP), 길랑-바레 증후군 (GBS), 지카 바이러스에 의한 또는 지카 바이러스와 관련된 뇌염, 시신경 척수염 (NMO), 급성 파종성 뇌척수염, 급성 괴사성 출혈성 뇌염, 동심성 경화증, 미만성 경화증, 이염성 백질이영양증, 구상 세포 백질이영양증, 중추 신경계의 해면 변성, 페리-플럼병, 알렉산더병, 방사선 손상 백질뇌병증, 저산소성 백질뇌병증, 뇌실주위 백질연화증 질환, 동맥경화성 피질하 뇌병증, 진행성 다초점성 백질뇌병증, 및 중심 뇌교 수초용해 증후군을 포함한다.
D. 신경근육 장애 및 근육 이영양증
신경근육 질환은 근육의 기능을 손상시키는 많은 질환, 장애 또는 병태를 직접적으로 또는 간접적으로 포괄하며, 이는 신경, 근육 또는 신경근육 접합부의 병리이다. 척수성 근육 위축은 하부 운동 뉴련의 장애이며, 한편 근위축성 측삭 경화증은 상부 및 하부 뉴런의 혼합 병태이다. 중증 근무력증 및 램버트-이튼 증후군은 신경근육 접합부 장애의 예이다. 이들 신경근육 장애의 치료를 위한 어떠한 치유법도 없다. 현재 치료법은 대부분 증상 치료이며 보통의 효능이 있다.
근육 이영양증 (MD)은 시간이 지남에 따라 골격근의 약화 및 파괴를 유발하는 근육 질환의 군이다. 상기 장애는 일차적으로 침범되는 근육, 위약감의 정도, 그들이 얼마나 빨리 악화되는지, 및 증상이 언제 시작되는지에 따라 상이하다. 가장 흔한 유형은 뒤시엔느 근육 이영양증 (DMD)이며 이는 남성에게 전형적으로 침범하며 대략 4세부터 시작된다. 다른 유형은 베커 근육 이영양증, 안면견갑상완 근육 이영양증, 및 근긴장성 이영양증을 포함한다. 결국 많은 사람들이 걷지 못하게 된다. 일부 유형은 다른 장기의 문제와 또한 연관이 있다. 처음으로 그것을 확인한 세명의 의사의 이름을 따서 명명된 샤르코-마리-투스병 (CMT)은, 가장 흔한 유전 신경 장애 중 하나이다. CMT는 전세계적으로 260만명 그리고 미국에서 2,500명 중 1명으로 추정되어 침범하나, 전문가들은 상기 수치가 훨씬 더 높을 수 있다고 여긴다.
현재, 근육 이영양증에 대한 어떠한 치유법도 없다.
E. 뇌 손상 또는 척수 신경 손상, 뇌 신경 장애, 또는 발작
뇌 손상은 뇌에서 일어나는 임의의 손상이다. 뇌 손상은 여러 차원으로 분류할 수 있다. 원발성 및 속발성 뇌 손상은 뇌 손상에서 발생하는 손상 과정을 분류하는 방법이며, 초점성 및 미만성 뇌 손상은 뇌 손상 범위 또는 위치를 분류하는 방법이다. 뇌 손상은 신체 제어의 주요 원천으로서 뇌의 성질로 인해 광범위하고 다양한 영향을 미친다. 환자는 흔히 기억 문제를 경험한다. 이것은 손상의 위치 및 중증도에 따라 장기 또는 단기 기억에 문제가 될 수 있다. 재활을 통해 기억을 개선시킬 수는 있으나 일부 경우에는 손상이 영구적일 수 있다.
척수 손상 (SCI)은 일시적 또는 영구적으로 그 기능의 변화를 야기하는 척수에 대한 손상이다. 이들 변화는 병변 수준 미만의 척수에 의해 제공되는 신체 부위의 근육 기능, 감각, 또는 자율 기능의 소실로 번역된다.
뇌 신경 질환은 후각 신경 (I), 시신경 (II), 동안 신경 (III), 활차 신경 (IV), 삼차 신경 (V), 외전 신경 (VI), 안면 신경 (VII), 전정와우 신경 (VIII), 혀인두 신경 (IX), 미주 신경 (X), 더부 신경 (XI), 및 설하 신경 (XII)을 포함한, 뇌 (뇌간 포함)로부터 직접 나오는 12개의 뇌 신경 중 어느 하나의 손상된 기능이다.
이들 뇌 신경 장애의 치료에 대한 어떠한 치유법도 없다. 현재 치료법은 대부분 증상 치료이며 보통의 효능이 있다.
간질은 간질 발작을 특징으로 하는 신경계 질환의 군이다. 전세계적으로 인구의 약 1% (6천5백만명)가 간질을 앓고 있으며, 개발 도상국에서 거의 80%의 사례가 발생한다. 발작에서, 뉴런의 군은 비정상적이고 과도하며 동시통합화된 방식으로 발화하기 시작한다. 이는 발작적 탈분극 이동으로 공지된 탈분극의 급증을 유발한다. 뉴런 주변의 인자는 시냅스 가소성을 포함하며 이온 농도는 잠재적인 병리학적 메카니즘이다. 현재 치료법은 대부분 증상 치료이다.
F. 아밀로이드 침착물 관련 질환
아밀로이드 침착물 관련 질환은 당뇨병, 심장 아밀로이드증, 원발성 아밀로이드증, 가족성 아밀로이드증, 노인성 전신 아밀로이드증 (SSA), 속발성 아밀로이드증, 및 혈액 투석-연관 아밀로이드증으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
아밀로이드증은 하나 이상의 장기 - 전형적으로 신장, 심장, 중추 신경계 (CNS), 및/또는 간에서 아밀로이드라고 불리는 단백질이 축적되어 장기 기능을 방해하여, 결국 장기 부전을 야기하는 관련 질환 군이다. 원발성 아밀로이드증 (AL, 아밀로이드 경쇄)은 비정상적인 혈장 세포에 의해 생성된 클론 혈장 세포 질환 및 면역글로불린 경쇄와 연관되어 있다. AL은 다발성 골수종과 연관된 아밀로이드증에서 또한 발생한다.
가족성 아밀로이드증 (AF)은 유전될 수 있는 유전적 이상과 연관이 있다. AF는 간이 트랜스티레틴이라고 불리는 비정상적인 형태의 단백질을 만들도록 한다.
속발성 아밀로이드증 (AA)은 염증 및 염증에 의한 혈청 아밀로이드 A의 상승된 수준과 연관이 있다.
G. 다른 만성 질환
본 발명에서 다른 만성 질환 또는 병태는 만성 신장 질환, 당뇨병 천식 및 호흡곤란으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
만성 신질환으로도 공지된 만성 신장 질환 (CKD)은 수개월 또는 수년에 걸쳐 신장 기능의 진행성 상실이다. 5기 CKD에서 투석 또는 이식의 형태로 신 대체 요법이 대개 필요하다. 만성 신장 질환은 2013년에 전세계적으로 956,000명의 사망 원인이었다. 신장은 아밀로이드증 관련 질환에서 아밀로이드 침착의 가장 빈번한 부위 중 하나이다. 신장 질환은 전신 아밀로이드증의 빈번한 징후이며, 종종 이들 장애를 가진 개인에 대한 이환율의 주요 원천이다. 치료 없이는, 아밀로이드증-연관 신장 질환은 대개 말기 신장 질환 (ESRD)으로 진행된다. (Dember LM. J Am Soc Nephrol. 2006;17(12):3458-71.)
흔히 당뇨병으로 지칭되는 진성 당뇨병 (DM)은 장기간에 걸쳐 높은 혈당 수준이 있는 대사성 질환의 군이다. 아밀린과 제2형 당뇨병과의 연관성은 이미 공지되어 있다. 섬 아밀로이드 폴리펩티드 (IAPP 또는 아밀린)로부터 유래된 아밀로이드 침착물은 제2형 진성 당뇨병을 앓고 있거나 인슐린종 암을 함유한 환자의 췌도에서 흔히 발견된다. 최근 연구 결과는 알츠하이머병과 연관된 관련 베타-아밀로이드 (Aβ)와 마찬가지로 아밀린이, 당뇨병의 발병을 야기하는 효과인, 인슐린-생산 베타 세포에서 아폽토시스성 세포-사멸을 유도할 수 있음을 시사한다. (Lorenzo A, et al. Nature. 368 (6473): 756-60.)
천식은 폐의 기도의 흔한 장기간의 염증성 질환이다. 그것은 가변성 및 재발성 증상, 가역성 기류 폐쇄, 및 기관지 연축을 특징으로 한다. 증상은 쌕쌕거림, 기침, 흉부 압박, 숨가쁨의 에피소드를 포함한다. 환자는 야간이나 운동시에 악화될 수 있다. 천식에 대한 어떠한 치유법도 없다. 증상은 촉발자, 예컨대 알레르기 유발 항원 및 자극물, 및 흡입된 코르티코스테로이드를 피함으로써 예방할 수 있다.
H. 항노화 또는 수명 연장
인간에 대한 최대 수명, (또는 보고된 최고령 사망 연령 또는 MRAD)은 한명 초과의 인구가 출생과 사망 사이에 생존한 것으로 관찰된 최대량의 시간의 측정이다. 현재는 인간의 수명을 연장할 어떠한 효과적인 방법도 없다.
I. 뇌 기능
기본적인 뇌 기능은 시력, 기억, 학습, 심상화, 판단, 독서, 지각, 사고 및 창조 등을 포함한다. 상이한 사람들은 상이한 수준의 지능 지수 (IQ)를 가질 수 있다. 뇌가 어떻게 작용하는지에 대해서는 여전히 많은 발견되지 않은 영역이 있으며 인간의 뇌 기능이 완전히 발달된 것은 아니다. 인간의 뇌 기능을 어떻게 추가로 발달시키는지는 신경 과학에서 발달이 불충분한 영역이다.
본 발명의 목적은 인간에서 뿐만 아니라 동물에서의 신경계 질환의 치료 및 예방을 위한 의약을 제공하는 것이다. 이들 질환은 신경변성 질환, 시신경 또는 망막 변성 질환, 탈수초성 질환, 신경근육 장애 및 근육 이영양증, 뇌 또는 척수 신경 손상, 뇌 신경 장애, 또는 발작, 아밀로이드 침착물 관련 질환, 및 신장 질환, 당뇨병, 천식 및 호흡곤란으로 이루어진 군으로부터 선택된 만성 질환 또는 병태를 포함한다. 본 발명의 추가의 목적은, 예를 들어 항노화, 수명 연장 또는 뇌 기능 개선을 위한, 인간 및 동물용 기능성 식품 또는 영양 보충제를 제공하는 것이다. 게다가, 본 발명은 신경변성 질환, 시신경 또는 망막 변성 질환, 탈수초성 질환, 신경근육 장애 및 근육 이영양증, 뇌 또는 척수 신경 손상, 아밀로이드 관련 질환, 및 신장 질환, 당뇨병, 천식 및 호흡곤란으로부터 선택된 다른 만성 질환 또는 병태의 치료 및/또는 예방에서, 뿐만 아니라, 예를 들어 인간용 항노화, 수명 연장 및 뇌 기능 개선을 위한 기능성 식품으로서의 나도고사리삼속 및 그의 추출물의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 홀수의 탄소 원자를 갖는 지방산을 보유하는 지질 및 나도고사리삼속 및 그의 추출물의 용도가 중추 신경계의 질환 및 장애의 치료 및/또는 예방에서 사용될 수 있다는 놀라운 연구결과들을 기반으로 하고 있다.
도 1은 실시예 I-1에 관한 것이며, MTT로 평가된 세포 생존력에 기초한 화합물 C (AβO 처리 전 48시간에 또는 단독 첨가)의 신경보호 효과를 나타내며;
도 2는 실시예 I-1에 관한 것이며, 화합물 C의 신경보호 효과- 뉴런의 현미경 영상을 나타내며;
도 3은 실시예 I-2에 관한 것이며, 화합물 C의 축삭 성장 효과를 나타내며;
도 4는 실시예 I-3에 관한 것이며, 공동으로 또는 AβO 처리 후 3, 6시간에 첨가시 마우스 1차 뉴런 모델에서 화합물 C의 신경보호, 항아폽토시스 및 신경-구출 효과를 나타내며;
도 5a 내지 도 5c는 실시예 I-4에 관한 것이며, 공동으로 또는 AβO 처리 후 3, 6시간에 첨가시 인간 유도된 다능성 줄기 세포 (iPSC)에서 화합물 C의 신경보호, 항아폽토시스 및 신경-구출 효과를 나타내며;
도 6a 내지 도 6i는 실시예 I-5에 관한 것이며, 독소 처리 후 3시간에 첨가시 다중 독소 처리된 마우스 1차 뉴런 모델에서 화합물 C의 신경보호, 항아폽토시스 및 신경-구출 효과를 나타내며;
도 7은 실시예 I-6에 관한 것이며, AβO 처리된 마우스 1차 뉴런 모델에서 - AβO 처리 전 48시간에 첨가시 - 홀수의 탄소를 갖는 상이한 지방산의 신경보호 효과를 나타내며;
도 8은 실시예 I-7에 관한 것이며, 캄토테신 처리된 마우스 1차 뉴런에서 - 캄토테신 처리 전 48시간에 첨가시 - 화합물 C의 신경보호 효과를 나타내며;
도 9a 내지 9d는 실시예 I-8에 관한 것이며, 사카로마이세스 세레비시아에 (Saccharomyces cerevisiae)에서 연령-유도 단백질 응집체에서 화합물 C 및 허브 B 추출물의 효과를 나타내며;
도 10은 실시예 IV-1에 관한 것이며, AβO 처리된 마우스 1차 뉴런에서 - AβO 처리 전 48시간에 첨가시 - 허브 B 추출물의 신경보호 효과를 나타내며;
도 11은 실시예 IV-1에 관한 것이며, 허브 B 추출물의 신경보호 효과- 뉴런의 현미경 영상을 나타내며;
도 12는 실시예 IV-2에 관한 것이며, 공동으로, 또는 AβO 처리 후 3 또는 6시간에 첨가시 마우스 1차 뉴런에서 허브 B 추출물의 신경보호, 항아폽토시스 및 신경-구출 효과를 나타내며;
도 13a 내지 도 13c는 실시예 IV-3에 관한 것이며, 공동으로 또는 AβO 처리 후 3 또는 6시간에 첨가시 AβO 처리된 인간 유도된 다능성 줄기 세포 (iPSC)에서 허브 B 추출물의 신경보호, 항아폽토시스 및 신경-구출 효과를 나타내며;
도 14a 내지 도 14f는 실시예 IV-4에 관한 것이며, 다중 뉴런 독소 처리된 마우스 1차 뉴런 모델에서 - 독소 처리 후 3시간에 첨가시 - 허브 B 추출물의 신경보호, 항아폽토시스 및 신경-구출 효과를 나타내며;
도 15a 및 도 15b는 실시예 IV-5에 관한 것이며, H2O2 처리된 마우스 1차 뉴런 모델에서 - 독소 처리 전 48시간 또는 독소 처리 후 3시간에 첨가시 - 허브 B 추출물의 신경보호, 항아폽토시스 및 신경-구출 효과를 나타내며;
도 16은 실시예 IV-6에 관한 것이며, 캄토테신 처리된 마우스 1차 뉴런 모델에서 - 캄토테신 처리 전 48시간에 첨가시 - 허브 B 추출물의 신경보호, 항아폽토시스 및 신경-구출 효과를 나타낸다.
I. 일반 정의
"치료하다" 또는 "치료하는"은 질환, 장애 또는 병태의 증상을 완화시키는 것, 일시적 또는 영구적 이유로 질환, 장애 또는 병태의 원인을 제거하는 것; 또는 무증상 개체에서 진행 중인 병리학적 과정을 둔화시키거나, 감소시키거나, 억제하는 것을 포함하나, 이에 제한되지는 않는 임의의 치료를 의미한다.
"예방하는" 및/또는 "예방"은 병리학적 과정의 초기 발병을 억제함으로써, 결국 증상의 발달을 야기할 수 있는 병리학적 과정이 결코 발달하지 않도록 하는 것 (즉, 질환, 장애, 또는 병태의 발달을 예방적 방식으로 예방하는 것)을 지칭한다.
"치료 유효량"은 특정한 장애 또는 병태를 치료 및/또는 예방하는데 효과적인 화합물의 양을 의미한다.
"제약상 허용되는 담체"는 무독성 용매, 분산제, 부형제, 또는 제약 조성물의 형성에서 사용되는 다른 물질, 즉 대상체 또는 환자에게 투여할 수 있는 투여 형태이다.
"기능성 식품"은 새로운 성분을 첨가하거나 기존 성분을 강화함으로써 추가 기능 (종종 건강-촉진 또는 질환 예방과 관련된 기능)이 제공된 식품을 지칭한다. 상기 용어는 기존의 식용 식물, 예컨대 각각 강화된 안토시아닌 또는 카로티노이드 함량을 갖는 퍼플 또는 골드 포테이토로 의도적으로 재배된 소질에 또한 적용될 수 있다. 기능성 식품은 "생리적 이익을 갖고/거나 기본 영양 기능을 넘어서서 만성 질환의 위험을 감소시키기 위해 고안될 수 있으며, 통상적인 식품과 외관이 유사할 수 있으며 일상적인 식단의 일부로 소비될 수 있다" (US Department of Agriculture, Agricultural Research Service, AgResearch Magazine. November 2014; Department of Agriculture, Agricultural Research Service. July 2010)
용어 "제약상 허용되는 염"은 대상 화합물의 원하는 생물학적 활성을 유지하고 최소한의 원하지 않는 독물학상 효과를 나타내는 염을 지칭한다. 이러한 염은 대상 화합물에서 염기성 및/또는 산성 기의 존재에 따라 무기 또는 유기 산 및/또는 염기 부가 염을 포함한다. 참조용으로 예를 들어 문헌 ["Handbook of Pharmaceutical Salts. Properties, Selection and Use.", P. Heinrich Stahl, Camille G. Wermuth (Eds.), Wiley-VCH, 2008]; 및 ["Pharmaceutical Salts and Co-crystals", Johan Wouters and Luc Quere (Eds.), RSC Publishing, 2012] 참조.
본원에 사용된 바와 같이, "구출"은 인체의 현재 병리학적 구조, 상태, 병태 또는 기능을 이전의 더 젊거나 더 나은 구조, 상태, 병태 또는 기능 지위로 되돌리거나 다시 젊어지게 하는 것을 의미한다.
본원에 사용된 바와 같이, "재생성"은 소실되거나 손상된 조직 또는 인체의 기능을 대체하기 위해 새로운 조직을 재성장시키는 것을 의미한다.
(1) 제1 실시양태에서, 본 발명은, 인간 및/또는 동물용 의약으로서 사용하기 위한, 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다
Figure pct00001
여기서 R1, R2 및 R3은 독립적으로 H 또는 -C(O)R4로부터 선택되며, 여기서 R4는
- OH, NH2, NHCH3, N(CH3)2, F 또는 Cl로 임의로 일-, 이- 또는 삼치환된 (C5-C20)알킬; 또는
- 1, 2 또는 3개의 이중 결합을 보유하는 (C5-C20)알케닐이고;
이때 R1, R2 및 R3 중 적어도 1개는 -C(O)R4이며, 여기서 R4는 짝수의 탄소 원자를 갖는 (C6-C20) 알킬이다.
(2) 추가 실시양태에서, 본 발명은, R1, R2 및 R3이 독립적으로 H 또는 -C(O)R4로부터 선택되며, 여기서 R4는
- OH, F 또는 Cl로 임의로 일-, 이- 또는 삼치환된 (C5-C20)알킬; 또는
- 1, 2 또는 3개의 이중 결합을 보유하는 (C5-C20)알케닐이고;
이때 R1, R2 및 R3 중 적어도 1개는 -C(O)R4이며, 여기서 R4는 짝수의 탄소 원자를 갖는 (C6-C20) 알킬인,
실시양태 (1)에 관한 것이다.
(3) 추가 실시양태에서, 본 발명은, R1, R2 및 R3이 독립적으로 H 또는 -C(O)R4로부터 선택되며, 여기서 R4는
- OH, F 또는 Cl로 임의로 일-, 이- 또는 삼치환된 (C5-C20)알킬이고;
이때 R1, R2 및 R3 중 적어도 1개는 -C(O)R4이며, 여기서 R4는 짝수의 탄소 원자를 갖는 (C6-C20) 알킬인,
실시양태 (1) 또는 (2)에 관한 것이다.
(4) 추가 실시양태에서, 본 발명은, R1, R2 및 R3이 독립적으로 H 또는 -C(O)R4로부터 선택되며, 여기서 R4는
- OH 또는 F로 임의로 일-, 이- 또는 삼치환된 (C5-C20)알킬; 또는
- 1, 2 또는 3개의 이중 결합을 보유하는 (C5-C20)알케닐이고;
이때 R1, R2 및 R3 중 적어도 1개는 -C(O)R4이며, 여기서 R4는 짝수의 탄소 원자를 갖는 (C6-C20) 알킬인,
실시양태 (1) 내지 (3) 중 어느 한 실시양태에 관한 것이다
(5) 추가 실시양태에서, 본 발명은, R1, R2 및 R3이 독립적으로 H 또는 -C(O)R4로부터 선택되며, 여기서 R4는
- OH 또는 F로 임의로 일-, 이- 또는 삼치환된 (C5-C20)알킬이고;
이때 R1, R2 및 R3 중 적어도 1개는 -C(O)R4이며, 여기서 R4는 짝수의 탄소 원자를 갖는 (C6-C20) 알킬인,
실시양태 (1) 내지 (4) 중 어느 한 실시양태에 관한 것이다.
(6) 추가 실시양태에서, 본 발명은, R1, R2 및 R3이 독립적으로 H 또는 -C(O)R4로부터 선택되며, 여기서 R4는
- F로 임의로 일-, 이- 또는 삼치환된 (C5-C20)알킬; 또는
- 1, 2 또는 3개의 이중 결합을 보유하는 (C5-C20)알케닐이고;
이때 R1, R2 및 R3 중 적어도 1게는 -C(O)R4이며, 여기서 R4는 짝수의 탄소 원자를 갖는 (C6-C20) 알킬인,
실시양태 (1) 내지 (5) 중 어느 한 실시양태에 관한 것이다
(7) 추가 실시양태에서, 본 발명은, R1, R2 및 R3이 독립적으로 H 또는 -C(O)R4로부터 선택되며, 여기서 R4는
- F로 임의로 일-, 이- 또는 삼치환된 (C5-C20)알킬이고;
이때 R1, R2 및 R3 중 적어도 1개는 -C(O)R4이며, 여기서 R4는 짝수의 탄소 원자를 갖는 (C6-C20) 알킬인,
실시양태 (1) 내지 (6) 중 어느 한 실시양태에 관한 것이다.
(8) 추가 실시양태에서, 본 발명은
R1, R2 및 R3이 독립적으로 H 또는 -C(O)R4로부터 선택되며, 여기서 R1, R2 및 R3 중 적어도 1개는 -C(O)R4이며, 여기서 R4는 짝수의 탄소 원자를 갖는 (C6-C20) 알킬인,
실시양태 (1) 내지 (7) 중 어느 한 실시양태에 관한 것이다.
(9) 추가 실시양태에서, 본 발명은, R1, R2 및 R3이 독립적으로 -C(O)R4로부터 선택되며, 여기서 R4는 짝수의 탄소 원자를 갖는 (C6-C20) 알킬인, 실시양태 (1) 내지 (8) 중 어느 한 실시양태에 관한 것이다.
(10) 추가 실시양태에서, 본 발명은 R4가 H 또는 -C(O)R4이며, 여기서 R4는 C12-알킬, C14-알킬, C16-알킬, C18-알킬, 또는 C20-알킬이고, 이때 모든 R1, R2 및 R3가 동시에 H는 아닌 것인, 실시양태 (1) 내지 (9) 중 어느 한 실시양태에 관한 것이다.
(11) (10)의 한 실시양태에서, R1, R2 및 R3 중 1개는 H이고, 나머지는 -C(O)R4이며, 여기서 R4는 C12-알킬, C14-알킬, C16-알킬, C18-알킬 또는 C20-알킬이다.
(12) (10)의 한 실시양태에서, R1, R2 및 R3 중 2개는 H이고, 나머지는 -C(O)R4이며, 여기서 R4는 C12-알킬, C14-알킬, C16-알킬, C18-알킬 또는 C20-알킬이다.
(13) (10)의 한 실시양태에서, R1, R2 및 R3이 서로 독립적으로 -C(O)R4이며, 여기서 R4는 C12-알킬, C14-알킬, C16-알킬, C18-알킬 또는 C20-알킬이다. R4의 알킬 각각이 알킬 서로와 조합될 수 있음을 이해하여야 한다. 특히, 모든 R1, R2 및 R3이 동일한 종류의 -C(O)R4일 수 있다. 바람직하게는, R1, R2 및 R3은 서로 독립적으로 또는 모두 함께 -C(O)R4이며 R4는 C14-알킬 또는 C16-알킬이다.
(14) 특히 바람직한 실시양태에서, 본 발명은 R4가 -C(O)C14-알킬인 화학식 (I)의 화합물, 즉 R1, R2 및 R3이 모두 -C(O)C14-알킬인 화학식 (I)의 화합물에 관한 것이다. 이 실시양태의 화합물은 하기 기재된 화합물 C와 동일하다. 화합물 C의 화학명은, 1,2,3-프로판트리일 트리펜타데카노에이트, 1,2,3-프로판트리일 트리펜타데카노에이트, 또는 1,2,3-트리펜타데카노일글리세롤로도 공지된 트리펜타데카노인이다.
(15) 또 다른 실시양태에서, 본 발명은 R1, R2 및 R3 중 1개가 H이고, 나머지가 -C(O)C14-알킬인 화학식 (I)의 화합물에 관한 것이다.
(16) 또 다른 실시양태에서, 본 발명은 R1, R2 및 R3 중 2개가 H이고, 나머지 하나가 -C(O)C14-알킬인 화학식 (I)의 화합물에 관한 것이다.
(17) 추가 실시양태에서, 본 발명은 실시양태 (10) 내지 (16)에 따른 화합물의 대사산물 또는 전구약물, 즉 카르복실산 HOC(O)C12-알킬, HOC(O)C14-알킬, HOC(O)C16-알킬, HOC(O)C18-알킬 및 HOC(O)C20-알킬에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 실시양태 (14)에 따른 화합물의 대사산물 또는 전구약물, 즉 HOC(O)C14-알킬에 관한 것이다.
(18) 모든 실시양태 (1) 내지 (17)은 인간 및/또는 동물용 의약으로서 사용하기 위한, 기재된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염에 관한 것임을 이해하여야 한다.
(19) 본 발명의 추가 실시양태는 신경변성 질환, 망막 또는 시신경 변성 질환, 탈수초성 질환, 신경근육 장애 및 근육 이영양증, 뇌 또는 척수 신경 손상, 뇌 신경 장애, 또는 발작, 아밀로이드 침착물 관련 질환, 신장 질환, 당뇨병, 천식 및 호흡곤란으로 이루어진 군으로부터 선택된 만성 질환 또는 병태의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한; 및 항노화 또는 수명 연장 및 뇌 기능 개선의 용도를 위한, 실시양태 (1) 내지 (17)에 기재된 화합물 중 어느 한 화합물에 관한 것이다.
(20) 본 발명의 추가 실시양태는 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD), 헌팅톤병 (HD), 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 치매, 루이 소체 치매 (DLB), 전두측두엽 치매 (FTD), 크로이츠펠트-야콥병, 및 뇌 위축으로 이루어진 군으로부터 선택된 신경변성 질환의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한, 실시양태 (1) 내지 (17)에 기재된 화합물 중 어느 한 화합물에 관한 것이다.
(21) 본 발명의 추가 실시양태는 시신경 위축, 레베르 유전성 시신경병증 (LHON), 우성 시신경 위축 (DOA), 연령-관련 황반 변성, 녹내장 및 색소성 망막염으로 이루어진 군으로부터 선택된 시신경 및 망막 변성 질환의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한, 실시양태 (1) 내지 (17)에 기재된 화합물 중 어느 한 화합물에 관한 것이다.
(22) 본 발명의 추가 실시양태는 부신백질이영양증, 다발성 경화증, 시신경염, 급성 염증성 탈수초성 다발신경병증 (AIDP), 만성 염증성 탈수초성 다발신경병증 (CIDP), 길랑-바레 증후군, 지카 바이러스에 의한 또는 지카 바이러스와 관련된 뇌염, 뇌 신경 마비, 시신경 척수염 (NMO), 급성 파종성 뇌척수염, 급성 괴사성 출혈성 뇌염, 동심성 경화증, 미만성 경화증, 이염성 백질이영양증, 구상 세포 백질이영양증, 중추 신경계의 해면 변성, 페리-플럼병, 알렉산더병, 방사선 손상 백질뇌병증, 저산소성 백질뇌병증, 뇌실주위 백질연화증 질환, 동맥경화성 피질하 뇌병증, 진행성 다초점성 백질뇌병증, 및 중심 뇌교 수초용해 증후군으로 이루어진 군으로부터 선택된 탈수초성 질환의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한, 특히, 다발성 경화증, 시신경염, 급성 염증성 탈수초성 다발신경병증 (AIDP), 만성 염증성 탈수초성 다발신경병증 (CIDP), 길랑-바레 증후군, 지카 바이러스에 의한 또는 지카 바이러스와 관련된 뇌염, 뇌 신경 마비, 및 시신경 척수염 (NMO)의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한, 실시양태 (1) 내지 (17)에 기재된 화합물 중 어느 한 화합물에 관한 것이다.
(23) 본 발명의 추가 실시양태는 중증 근무력증, 램버트-이튼 증후군, 뒤시엔느 근육 이영양증, 베커 근육 이영양증, 안면견갑상완 근육 이영양증, 근긴장성 이영양증, 샤르코-마리-투스병 (CMT)으로 이루어진 군으로부터 선택된 신경근육 장애 및 근육 이영양증 질환의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한, 실시양태 (1) 내지 (17)에 기재된 화합물 중 어느 한 화합물에 관한 것이다.
(24) 본 발명의 추가 실시양태는 급성 또는 만성 뇌 손상 또는 척수 또는 신경 손상, 뇌 신경 장애 및 발작으로 이루어진 군으로부터 선택된 신경계 손상 관련 질환 또는 혼합 신경계 질환의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한, 실시양태 (1) 내지 (17)에 기재된 화합물 중 어느 한 화합물에 관한 것이다.
(25) 본 발명의 추가 실시양태는 당뇨병, 심장 아밀로이드증, 원발성 아밀로이드증, 가족성 아밀로이드증, 노인성 전신 아밀로이드증 (SSA), 속발성 아밀로이드증, 및 혈액 투석-연관 아밀로이드증으로 이루어진 군으로부터 선택된 아밀로이드 침착물 관련 질환의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한, 실시양태 (1) 내지 (17)에 기재된 화합물 중 어느 한 화합물에 관한 것이다.
(26) 본 발명의 추가 실시양태는 신장 질환, 당뇨병, 천식 및 호흡곤란으로 이루어진 군으로부터 선택된 만성 질환 또는 병태의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한, 실시양태 (1) 내지 (17)에 기재된 화합물 중 어느 한 화합물에 관한 것이다.
(27) 본 발명의 추가 실시양태는 중추 신경계의 질환 또는 장애의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한, 실시양태 (1) 내지 (17)에 기재된 화합물 중 어느 한 화합물에 관한 것이다.
(28) 본 발명의 추가 실시양태는 실시양태 (19) 내지 (27)의 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한, 실시양태 (8) 내지 (17)에 기재된 화합물 중 어느 한 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특히 바람직한 실시양태는 실시양태 (19) 내지 (27)의 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한, 실시양태 (14)에 기재된 화합물 중 어느 한 화합물에 관한 것이다.
(29) 본 발명의 추가 실시양태는 실시양태 (19) 내지 (27)의 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한 실시양태 (1) 내지 (17) 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물에 관한 것이며, 여기서 치료 투여량은 1 mg/일 내지 1000 mg/일이다. 추가 실시양태에서, 치료 투여량은 1 mg/일 내지 1000 mg/일이다. 하한치는 예를 들어 1 mg/일, 5 mg/일, 10 mg/일, 20 mg/일, 25 mg/일 또는 50 mg/일이다. 상한치는 예를 들어 1000 mg/일, 900 mg/일, 800 mg/일, 750 mg/일, 700 mg/일, 600 mg/일, 500 mg/일, 250 mg/일, 200 mg/일이다. 각각의 상한치는 각각의 하한치와 조합될 수 있음을 이해하여야 한다. 바람직한 실시양태에서, 투여량은 10 mg/일 내지 200 mg/일이다.
한 실시양태에서, 주어진 용량은 실시양태 (8) 내지 (17) 중 어느 한 실시양태, 특히 실시양태 (14)에 따른 화합물에 특히 적용된다.
(30) 본 발명의 추가 실시양태는 그 자체로 제약 조성물, 특히 실시양태 (19) 내지 (27) 중 어느 한 실시양태의 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한 제약 조성물에 관한 것이며, 여기서 조성물은 실시양태 (1) 내지 (17) 중 어느 한 실시양태의 화합물 및 제약상 허용되는 담체를 함유한다. 바람직하게는, 조성물은 실시양태 (8) 내지 (17) 중 어느 한 실시양태, 특히 실시양태 (14)의 화합물을 함유한다.
(31) 추가 실시양태에서, 실시양태 (30)에 따른 제약 조성물은 실시양태 (1) 내지 (17) 중 어느 한 실시양태의 화합물을 1 mg/일 내지 1000 mg/일의 양으로 함유한다. 하한치는 예를 들어 1 mg/일, 5 mg/일, 10 mg/일, 20 mg/일, 25 mg/일 또는 50 mg/일이다. 상한치는 예를 들어 1000 mg/일, 900 mg/일, 800 mg/일, 750 mg/일, 700 mg/일, 600 mg/일, 500 mg/일, 250 mg/일, 200 mg/일이다. 각각의 상한치는 각각의 하한치와 조합될 수 있음을 이해하여야 한다. 바람직한 실시양태에서, 투여량은 10 mg/일 내지 200 mg/일이다.
한 실시양태에서, 주어진 용량은 실시양태 (8) 내지 (17) 중 어느 한 실시양태, 특히 실시양태 (14)에 따른 화합물에 특히 적용된다.
(32) 한 실시양태에서, 실시양태 (30)의 제약 조성물은 활성 성분을 바람직하게는 실시양태 (29) 또는 (31)에 명시된 바와 같은 양으로 함유하는 제제에 관한 것이며, 임의의 형태, 예컨대 경구 투여 형태 (분말, 정제, 캡슐, 연질 캡슐, 수성 의약, 시럽, 엘릭시르 환제, 분말, 사세, 과립), 또는 국소 제제 (크림, 연고, 로션, 겔, 밤, 패치, 페이스트, 스프레이 용액, 에어로졸 등), 또는 주사용 제제 (용액, 현탁액, 에멀젼)로 제조될 수 있다.
한 실시양태에서, 제제는 실시양태 (8) 내지 (17) 중 어느 한 실시양태, 특히 실시양태 (14)에 따른 화합물에 특히 적용된다.
(33) 본 발명의 추가 실시양태는 실시양태 (19) 내지 (27) 중 어느 한 실시양태의 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방을 위한 의약의 제조를 위한 실시양태 (1) 내지 (17) 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물의 용도에 관한 것이다. 그 자체 의약 또는 실시양태 (19) 내지 (27)에 주어진 질환의 치료 및/또는 예방용 의약으로서 사용하기 위한 실시양태 (1) 내지 (17)의 화합물과 관련된 모든 실시양태가 개시되어 있으며 개시된 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방을 위한 의약의 제조를 위한 화합물(들)의 용도로서 재공식화될 수 있음을 이해하여야 한다.
바람직하게는, 실시양태 (1) 내지 (17), 특히 실시양태 (8) 내지 (17), 바람직하게는 실시양태 (14) 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물은 실시양태 (29) 및 (31)에 기재된 바와 같은 양으로 의약 중에 포함된다. 게다가, 의약은 실시양태 (32)에 기재된 바와 같이 제제화될 수 있다.
(34) 본 발명의 추가 실시양태는 환자에게 유효량의 실시양태 (1) 내지 (17) 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 실시양태 (19) 내지 (27) 중 어느 한 실시양태의 질환 및 병태를 치료 및/또는 예방하는 방법에 관한 것이다. 그것에 의하여, "유효량"은 상기 기재된 바와 같다. 특히, 유효량은 실시양태 (29) 및 (31)에 기재된 바와 같다. 그 자체 의약 또는 실시양태 (19) 내지 (27)에 주어진 질환의 치료 및/또는 예방용 의약으로서 사용하기 위한 실시양태 (1) 내지 (17)의 화합물과 관련된 모든 실시양태가 개시되어 있으며 각각의 치료 및/또는 예방 방법 방식으로 재공식화될 수 있음을 이해하여야 한다. 용량은 예를 들어 실시양태 (29) 또는 (31)에서 개시된 바와 동일하다. 게다가, 치료 및/또는 예방은 실시양태 (32)에 기재된 바와 같이 제제화된 의약으로 수행할 수 있다.
바람직하게는, 실시양태 (1) 내지 (17), 특히 실시양태 (8) 내지 (17), 바람직하게는 실시양태 (14) 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물은 실시양태 (29) 및 (31)에 기재된 바와 같은 양으로 포함된다. 게다가, 화합물은 실시양태 (32)에 기재된 바와 같이 제제화될 수 있다.
(35) 본 발명의 추가 실시양태는 인간 및/또는 동물용 기능성 식품 또는 식품 보충제로서의 실시양태 (1) 내지 (17) 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물의 용도에 관한 것이다. 이 의미의 기능성 식품 또는 식품 보충제는 생리적 이익을 갖고/거나 실시양태 (18) 내지 (27)의 질환 및 장애의 위험을 감소시키는 식품 또는 식품 보충제이다. 기능성 식품 또는 식품 보충제가 일상적인 식단의 일부로 소비될 수 있다.
(36) 본 발명의 추가 실시양태는 인간 및 동물용 항노화, 수명 연장 또는 뇌 기능 개선을 위한, 실시양태 (1) 내지 (17)에 기재된 화합물 중 어느 한 화합물의 용도에 관한 것이다.
(37) 본 발명의 추가 실시양태는, 기능성 식품 또는 식품 보충제가 인간 및 동물용 항노화, 수명 연장 또는 뇌 기능 개선을 위한 것인, 실시양태 (35)에 따른 용도에 관한 것이다.
(38) 본 발명의 추가 실시양태는, 기능성 식품 또는 식품 보충제가 시력, 기억, 학습, 심상화, 판단, 독서, 지각, 사고, 창조, 지능 지수 (IQ) 상승을 포함한 뇌 기능 개선을 위한 것인, 인간 및/또는 동물용 기능성 식품 또는 식품 보충제로서의 실시양태 (1) 내지 (17) 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물의 용도에 관한 것이다.
(39) 본 발명의 추가 실시양태는, 기능성 식품이 신경변성 질환, 망막 또는 시신경 변성 질환, 탈수초병, 신경근육 장애 및 근육 이영양증, 뇌 또는 척수 신경 손상, 아밀로이드 침착물 관련 질환, 및 신장 질환, 당뇨병, 천식 및 호흡곤란으로 이루어진 군으로부터 선택된 만성 질환 또는 병태를 위한 것인, 인간 및/또는 동물용 기능성 식품 또는 식품 보충제로서의 실시양태 (1) 내지 (17) 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물의 용도에 관한 것이다.
(40) 본 발명의 추가 실시양태는, 질환 및 병태가 실시양태 (19) 내지 (27)에 인용된 질환 및 병태인 것인, 특정 질환 및 병태를 위한 인간 및/또는 동물용 기능성 식품 또는 식품 보충제로서의 실시양태 (1) 내지 (17) 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물의 용도에 관한 것이다.
(41) 본 발명의 추가 실시양태는 실시양태 (35) 내지 (40)에 따른 인간 및/또는 동물용 기능성 식품 또는 식품 보충제로서의, 실시양태 (8) 내지 (17)에 기재된 화합물 중 어느 한 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특히 바람직한 실시양태는 실시양태 (35) 내지 (40)에 따른 인간 및/또는 동물용 기능성 식품 또는 식품 보충제로서의, 실시양태 (14)에 기재된 화합물에 관한 것이다.
한 실시양태에서, 화합물은 실시양태 (8) 내지 (17), 특히 실시양태 (14)에 기재된 화합물 중 어느 한 화합물에 관한 것이다.
(42) 본 발명의 추가 실시양태는 인간 및/또는 동물용 기능성 식품 또는 식품 보충제로서의 실시양태 (1) 내지 (17) 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물의 용도에 관한 것이며, 여기서 투여량은 1 μg (마이크로그램)/일 내지 50 mg/일이다. 추가 실시양태에서, 투여량은 1 μg (마이크로그램)/일 내지 20 mg/일이다. 하한치는 예를 들어 1 μg (마이크로그램)/일, 2 μg (마이크로그램)/일, 3 μg (마이크로그램)/일, 4 μg (마이크로그램)/일, 5 μg (마이크로그램)/일, 7 μg (마이크로그램)/일, 10 μg (마이크로그램)/일, 20 μg (마이크로그램)/일, 25 μg (마이크로그램)/일, 50 μg (마이크로그램)/일, 100 μg (마이크로그램)/일, 200 μg (마이크로그램)/일, 300 μg (마이크로그램)/일, 400 μg (마이크로그램)/일 또는 500 μg (마이크로그램)/일이다. 상한치는 예를 들어 50 mg/일, 40 mg/일, 30 mg/일, 20 mg/일, 10 mg/일, 5 mg/일, 3 mg/일, 2 mg/일, 1 mg/일, 900 μg (마이크로그램)/일이다. 각각의 상한치는 각각의 하한치와 조합될 수 있음을 이해하여야 한다. 한 실시양태에서, 투여량은 1 μg (마이크로그램)/일 내지 20 mg/일이다. 또 다른 실시양태에서, 투여량은 1 μg (마이크로그램)/일 내지 900 μg (마이크로그램)/일이다.
한 실시양태에서, 주어진 용량은 실시양태 (8) 내지 (17) 중 어느 한 실시양태, 특히 실시양태 (14)에 따른 화합물에 특히 적용된다
(43) 본 발명의 추가 실시양태는 글리세롤을 화학식 (II) HOC(O)R4의 지방산으로 에스테르화시킴으로써 실시양태 (1) 내지 (17) 중 어느 한 실시양태에 따른 화학식 (I)의 화합물의 제조에 관한 것이며, 여기서 R4는 서로 독립적으로
- OH, NH2, NHCH3, N(CH3)2, F 또는 Cl로 임의로 일-, 이- 또는 삼치환된 (C5-C20)알킬; 또는
- 1, 2 또는 3개의 이중 결합을 보유하는 (C5-C20) 알케닐이고;
이때 HOC(O)R4 중 적어도 1개는 짝수의 탄소 원자를 갖는 (C6-C20) 알킬인 R4를 보유한다.
글리세롤의 에스테르화는 통상의 기술자에게 공지되어 있다. 예를 들어, 에스테르화는 루이스산 및 다른 산성 촉매의 예로서, 예를 들어 메탄올성 HCl, 메탄올성 H2SO4, 삼플루오르화붕소로 산-촉매될 수 있다. 게다가, 에스테르는 활성화된 지방산, 예컨대 산 할라이드, 지방산 무수물, 이미다졸리드를 통해 그리고 다른 널리 공지된 커플링 시약 예컨대 DCC (N,N'-디시클로헥실카르보디이미드) 또는 EDC (1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드)를 사용하여 수득될 수 있다.
게다가, 원하는 위치를 원하는 지방산으로 구체적으로 에스테르화시키기 위해 보호기 전략을 사용할 수 있다. 적절한 보호기는 5- 또는 6-원 1,2-디올을 형성할 수 있으며, 예컨대 글리세롤을 벤즈알데히드와 반응시켜, 1,3-벤질리덴 유도체를 야기하거나, 아세톤을 사용하여 1,2-아세토니드를 형성시킬 수 있다. 1,2-디올은 그의 시클릭 카르보네이트로서 또한 보호될 수 있으며, 이는 포스겐 (COCl2), 또는 트리포스겐 (CCl3OC(O)OCCl3)으로 제조될 수 있다. 보호기 전략은, 예를 들어 문헌 ["Protective Groups in Organic Synthesis", T.W. Greene, P.G.M. Wuts, Wiley-Interscience, 1999]으로부터 통상의 기술자에게 공지되어 있다.
(44) 본 발명의 추가 실시양태는 글리세롤을 펜타데칸산으로 에스테르화시킴으로써 실시양태 (14)에 따른 화합물의 제조에 관한 것이다.
(45) 본 발명의 추가 실시양태에서, 실시양태 (14)의 화합물은 허브로부터 또는 인간/동물의 밀크로부터 수득될 수 있다.
(46) 실시양태 (14)의 화합물이 식물속 나도고사리삼속에 함유되어 있다고 말할 수 있다.
(47) 본 발명에서, 나도고사리삼속은 나도고사리삼속의 모든 종을 포함함을 이해하여야 한다. 특히, 이는 오피오글로숨 종(Ophioglossum sp.), 오피오글로숨 엘.(Ophioglossum L.), 오피오글로숨 써말 콤.(Ophioglossum thermale Kom.), 오피오글로숨 써말 코마로스(Ophioglossum thermale Komarov), 오피오글로숨 아우스트로-아시아티쿰 니시다(Ophioglossum austro-asiaticum Nishida), 오피오글로숨 아우스트로아시아티쿰 니시.(Ophioglossum austroasiaticum Nish.), 오피오글로숨 페티올라툼 엘.(Ophioglossum petiolatum L.), 오피오글로숨 펜둘룸 엘.(Ophioglossum pendulum L.), 오피오데르마 펜둘라 (엘.) 프레슬.(Ophioderma pendula (L.) Presl.), 오피오글로숨 레티쿨라툼 엘.(Ophioglossum reticulatum L.), 오피오글로숨 불가툼 엘.(Ophioglossum vulgatum L.), 오피오글로숨 펜던쿨로섬 데스브.(Ophioglossum pedunculosum Desv.), 오피오글로숨 파르비폴륨 그레브. 에트 에치케이(Ophioglossum parvifolium Grev. et HK.), 오피오글로숨 페티올라툼 후크.(Ophioglossum petiolatum Hook.), 오피오글로숨 페티올라툼 후커(Ophioglossum petiolatum Hooker), 오피오글로숨 테네룸(Ophioglossum tenerum), 오피오글로숨 피크노스티쿰(Ophioglossum pycnostichum), 오피오글로숨 피크노스티쿰 (페른.) 에이.&디. 로브(Ophioglossum pycnostichum (Fern.) A.&D. Love), 오피오글로숨 피크노스티쿰 (페르날드) 에이.뢰브 & 디.뢰브(Ophioglossum pycnostichum (Fernald) A.Loeve & D.Loeve); 오. 불가툼 변종 피크노스티쿰 페르날드(O. vulgatum var. pycnostichum Fernald), 오피오글로숨 크로탈로포로이데스 월트.(Ophioglossum crotalophoroides Walt.), 오피오글로숨 크로탈로포로이데스 월터 변종 크로탈로포로이데스(Ophioglossum crotalophoroides Walter var. crotalophoroides), 오피오글로숨 크로탈로포로이데스 월터 변종 나눔 오스텐 엑스 제이.에스. 리츠트.(Ophioglossum crotalophoroides Walter var. nanum Osten ex J.S. Licht.), 오피오글로숨 아조리쿰(Ophioglossum azoricum), 오피오글로숨 아조리쿰 씨. 프레슬(Ophioglossum azoricum C. Presl), 오피오글로숨 불가툼 리나에우스 변종 슈도포듐 (에스.에프. 블레이크) 파르웰(Ophioglossum vulgatum Linnaeus var. pseudopodum (S.F. Blake) Farwell), 오피오글로숨 덴드로뉴런 이.피. 세인트존(Ophioglossum dendroneuron E.P. St.John); 오. 엘립티쿰 후커 & 그레빌(O. ellipticum Hooker & Greville); 오. 모노뉴런 이.피. 세인트존(O. mononeuron E.P. St.John), 오피오글로숨 덴드로뉴런 이.피. 세인트 존(Ophioglossum dendroneuron E.P. St. John), 오피오글로숨 리나에우스(Ophioglossum Linnaeus), 오피오글로숨 팔마툼 엘.(Ophioglossum palmatum L.), 오피오글로숨 모노뉴런 이.피. 세인트 존(Ophioglossum mononeuron E.P. St. John), 오피오글로숨 아우스트로아시아티쿰(Ophioglossum austroasiaticum), 오피오글로숨 베르기아눔(Ophioglossum bergianum), 오피오글로숨 부차리쿰(Ophioglossum bucharicum), 오피오글로숨 칼리포르니쿰(Ophioglossum californicum), 오피오글로숨 카로티카울(Ophioglossum caroticaule), 오피오글로숨 콘벡숨(Ophioglossum convexum), 오피오글로숨 칼리포르니쿰 프란틀(Ophioglossum californicum Prantl), 오피오글로숨 콘시눔(Ophioglossum concinnum), 오피오글로숨 콘시눔 브래크.(Ophioglossum concinnum Brack.), 오피오글로숨 코스타툼(Ophioglossum costatum), 오피오글로숨 코스타툼 알.비알.(Ophioglossum costatum R.Br.), 오피오글로숨 코리아세움(Ophioglossum coriaceum), 오피오글로숨 데시피엔스(Ophioglossum decipiens), 오피오글로숨 디에트리치애(Ophioglossum dietrichiae), 오피오글로숨 두다대(Ophioglossum dudadae), 오피오글로숨 엔겔만니이(Ophioglossum engelmannii), 오피오글로숨 엔겔만니이 프란틀(Ophioglossum engelmannii Prantl), 오피오글로숨 엘립티쿰 후크. & 그레브.(Ophioglossum ellipticum Hook. & Grev.), 오피오글로숨 페르난데지아눔(Ophioglossum fernandezianum), 오피오글로숨 고메지아눔(Ophioglossum gomezianum), 오피오글로숨 그라실(Ophioglossum gracile), 오피오글로숨 그라미네움 윌드.(Ophioglossum gramineum Willd.), 오피오글로숨 그라미네움(Ophioglossum gramineum), 오피오글로숨 하리시이(Ophioglossum harrisii), 오피오글로숨 인터메디움(Ophioglossum intermedium), 오피오글로숨 카와무래(Ophioglossum kawamurae), 오피오글로숨 란시폴륨(Ophioglossum lancifolium), 오피오글로숨 라티폴륨(Ophioglossum latifolium), 오피오글로숨 리토랄(Ophioglossum litorale), 오피오글로숨 로우레이리아눔(Ophioglossum loureirianum), 오피오글로숨 루시타니쿰 엘.(Ophioglossum lusitanicum L.), 오피오글로숨 루시타니쿰 엘. 종 칼리코르니쿰 (프란틀) 알.티. 클라우센(Ophioglossum lusitanicum L. ssp. californicum (Prantl) R.T. Clausen), 오피오글로숨 루시타니쿰 엘. 변종 칼리코르니쿰 (프란틀) 브로운(Ophioglossum lusitanicum L. var. californicum (Prantl) Broun), 오피오글로숨 모울토니(Ophioglossum moultoni), 오피오글로숨 나메가태(Ophioglossum namegatae), 오피오글로숨 누디카울(Ophioglossum nudicaule), 오피오글로숨 누디카울 엘. 에프.(Ophioglossum nudicaule L. f.), 오피오글로숨 누디카울 엘. 에프. 변종 마이너스 알.티. 클라우센(Ophioglossum nudicaule L. f. var. minus R.T. Clausen), 오피오글로숨 누디카울 엘. 에프. 변종 테네룸 (메트. 엑스 프란틀) 알.티. 클라우센(Ophioglossum nudicaule L. f. var. tenerum (Mett. ex Prantl) R.T. Clausen), 오피오글로숨 오블롱굼(Ophioglossum oblongum), 오피오글로숨 오보바툼(Ophioglossum obovatum), 오피오글로숨 오파쿰(Ophioglossum opacum), 오피오글로숨 오바툼(Ophioglossum ovatum), 오피오글로숨 파르비폴륨(Ophioglossum parvifolium), 오피오글로숨 파르붐(Ophioglossum parvum), 오피오글로숨 펜둘룸(Ophioglossum pendulum), 오피오글로숨 펜둘룸 엘. 종 팔카툼 (씨. 프레슬) 알.티. 클라우센(Ophioglossum pendulum L. ssp. falcatum (C. Presl) R.T. Clausen), 오피오글로숨 펜둘룸 엘. 종 펜둘룸(Ophioglossum pendulum L. ssp. Pendulum), 오피오글로숨 페티올라툼(Ophioglossum petiolatum), 오피오글로숨 폴리필룸(Ophioglossum polyphyllum), 오피오글로숨 폴리필룸 에이. 브라운(Ophioglossum polyphyllum A. Braun), 오피오글로숨 폴리필룸 에이. 브라운 엑스 스쿠브.(Ophioglossum polyphyllum A. Braun ex Schub.), 오피오글로숨 푸밀리오(Ophioglossum pumilio), 오피오글로숨 푸실룸(Ophioglossum pusillum), 오피오글로숨 푸실룸 라프.(Ophioglossum pusillum Raf.), 오피오글로숨 라시보르스키이(Ophioglossum raciborskii), 오피오글로숨 라모시이(Ophioglossum ramosii), 오피오글로숨 레티쿨라툼(Ophioglossum reticulatum), 오피오글로숨 루벨룸(Ophioglossum rubellum), 오피오글로숨 사바티에리(Ophioglossum savatieri), 오피오글로숨 스카리오숨(Ophioglossum scariosum), 오피오글로숨 슈미디이(Ophioglossum schmidii), 오피오글로숨 심플렉스(Ophioglossum simplex), 오피오글로숨 써말(Ophioglossum thermal), 오피오글로숨 토마시이(Ophioglossum thomasii), 오피오글로숨 티모렌스(Ophioglossum timorense), 오피오글로숨 테레눔 메트. 엑스 프란틀(Ophioglossum tenerum Mett. ex Prantl), 오피오글로숨 우스테리아눔(Ophioglossum usterianum), 오피오글로숨 불가툼(Ophioglossum vulgatum), 오피오글로숨 불가툼 아우크트. 논 엘.(Ophioglossum vulgatum auct. non L.), 오피오글로숨 불가툼 엘. 변종 알라스카눔 (이.지. 브리톤) 씨. 크르.(Ophioglossum vulgatum L. var. alaskanum (E.G. Britton) C. Chr.), 오피오글로숨 불가툼 엘. 변종 슈도포둠 (에스.에프. 블레이크) 파르더블유.(Ophioglossum vulgatum L. var. pseudopodum (S.F. Blake) Farw.), 오피오글로숨 불가툼 엘. 변종 피크노스티쿰 페르날드(Ophioglossum vulgatum L. var. pycnostichum Fernald), 오피오글로싸세애 마르티노브(Ophioglossaceae Martinov), 체이로글로싸 팔마타 (엘.) 씨. 프레슬(Cheiroglossa palmata (L.) C. Presl), 오피오글로숨 엘리미나툼 칸드. & 고스와미(Ophioglossum eliminatum Khand. & Goswami), 오피오글로숨 나메가태 니시. & 쿠리타(Ophioglossum namegatae Nish. & Kurita), 오피오글로숨 니포니쿰 미야베 & 쿠도(Ophioglossum nipponicum Miyabe & Kudo), 및/또는 오피오글로숨 올레오숨 칸드(Ophioglossum oleosum Khand)로부터 선택된 군으로 이루어진다.
바람직한 나도고사리삼속은 오피오글로숨 써말, 오피오글로숨 페티올라툼, 오피오글로숨 레티쿨라툼, 오피오글로숨 파르비폴륨, 오피오글로숨 불가툼, 오피오글로숨 아우스트로아시아티쿰, 오피오글로숨 아조리쿰, 오피오글로숨 칼리포르니쿰, 오피오글로숨 코스타툼, 오피오글로숨 크로탈로포로이데스, 오피오글로숨 엔겔만니이, 오피오글로숨 루시타니쿰, 오피오글로숨 누디카울, 오피오글로숨 폴리필룸, 오피오글로숨 푸실룸, 및/또는 오피오글로숨 피크로스티쿰이다.
특히 바람직한 나도고사리삼속은 오피오글로숨 써말, 오피오글로숨 페티올라툼, 오피오글로숨 레티쿨라툼, 오피오글로숨 불가툼, 및/또는 오피오글로숨 아우스트로-아시아티쿰이다.
본 발명에서, 허브 B는 나도고사리삼속이다.
(48) 이런 이유로, 본 발명의 실시양태는 실시양태 (19) 내지 (27)에 기재된 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 나도고사리삼속, 즉 실시양태 (19) 내지 (27) 중 어느 한 실시양태의 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방을 위한 나도고사리삼속의 용도에 관한 것이다.
(49) 본 발명의 한 실시양태는 1 mg/일 내지 1000 mg/일의 실시양태 (14)의 화합물, 즉 트리펜타데카노인 또는 화합물 C를 함유하는 양의 나도고사리삼속의 용도에 관한 것이다.
추가 실시양태는 실시양태 (14)의 화합물, 즉 트리펜타데카노인 또는 화합물 C를 1 mg/일 내지 1000 mg/일로 함유하는 양의 나도고사리삼속의 용도에 관한 것이다. 하한치는 예를 들어 1 mg/일, 5 mg/일, 10 mg/일, 20 mg/일, 25 mg/일 또는 50 mg/일의 나도고사리삼속에 함유된 화합물 C이다. 상한치는 예를 들어 1000 mg/일, 900 mg/일, 800 mg/일, 750 mg/일, 700 mg/일, 600 mg/일, 500 mg/일, 250 mg/일, 200 mg/일의 나도고사리삼속에 함유된 화합물 C이다. 각각의 상한치는 각각의 하한치와 조합될 수 있음을 이해하여야 한다. 바람직한 실시양태에서, 투여량은 10 mg/일 내지 200 mg/일이다.
대안적으로, 본 발명은 10 mg 내지 10000 mg/일의 건조 나도고사리삼속 분말의 양의 나도고사리삼속의 용도에 관한 것이다. 하한치는 예를 들어 10 mg/일, 20 mg/일, 30 mg/일, 40 mg/일, 50 mg/일, 100 mg/일, 150 mg/일, 200 mg/일, 300 mg/일, 500 mg/일, 700 mg/일이다. 상한치는 예를 들어 10000 mg/일, 8000 mg/일, 6000 mg/일, 5000 mg/일, 2500 mg/일, 1000 mg/일이다. 각각의 상한치는 각각의 하한치와 조합될 수 있음을 이해하여야 한다.
(50) 본 발명의 추가 실시양태는 나도고사리삼속을 함유하는, 실시양태 (19) 내지 (27) 중 어느 한 실시양태의 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한 제약 조성물에 관한 것이다.
(51) 본 발명의 추가 실시양태는 나도고사리삼속을 1 mg/일 내지 1000 mg/일의 실시양태 (14)의 화합물, 즉 트리펜타데카노인 또는 화합물 C를 함유하는 양으로 함유하는, 실시양태 (19) 내지 (27) 중 어느 한 실시양태의 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한 제약 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 추가 실시양태는 실시양태 (14)의 화합물, 즉 트리펜타데카노인 또는 화합물 C가 1 mg/일 내지 1000 mg/일로 함유되는, 상기 제약 조성물에 관한 것이다. 하한치는 예를 들어 1 mg/일, 5 mg/일, 10 mg/일, 20 mg/일, 25 mg/일 또는 50 mg/일의 나도고사리삼속에 함유된 화합물 C이다. 상한치는 예를 들어 1000 mg/일, 900 mg/일, 800 mg/일, 750 mg/일, 700 mg/일, 600 mg/일, 500 mg/일, 250 mg/일, 200 mg/일의 나도고사리삼속에 함유된 화합물 C이다. 각각의 상한치는 각각의 하한치와 조합될 수 있음을 이해하여야 한다. 바람직한 실시양태에서, 투여량은 10 mg/일 내지 200 mg/일이다.
대안적으로, 본 발명은 나도고사리삼속이 10 mg 내지 10000 mg/일의 건조 나도고사리삼속 분말로서 함유되는, 인간 및/또는 동물을 위한 제약 조성물에 관한 것이다. 하한치는 예를 들어 10 mg/일, 20 mg/일, 30 mg/일, 40 mg/일, 50 mg/일, 100 mg/일, 150 mg/일, 200 mg/일, 300 mg/일, 500 mg/일, 700 mg/일이다. 상한치는 예를 들어 10000 mg/일, 8000 mg/일, 6000 mg/일, 5000 mg/일, 2500 mg/일, 1000 mg/일이다. 각각의 상한치는 각각의 하한치와 조합될 수 있음을 이해하여야 한다.
(52) 본 발명의 추가 실시양태는 나도고사리삼속을 바람직하게는 실시양태 (49) 또는 (51)에 명시된 바와 같은 양으로 함유하는 제제에 관한 것이며, 임의의 형태, 예컨대 경구 투여 형태 (분말, 정제, 캡슐, 연질 캡슐, 수성 의약, 시럽, 엘릭시르 환제, 분말, 사세, 과립), 또는 국소 제제 (크림, 연고, 로션, 겔, 밤, 패치, 페이스트, 스프레이 용액, 에어로졸 등), 또는 주사용 제제 (용액, 현탁액, 에멀젼)로 제조될 수 있다.
(53) 본 발명의 추가 실시양태는 실시양태 (19) 내지 (27) 중 어느 한 실시양태의 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방을 위한 의약의 제조를 위한 나도고사리삼속의 용도에 관한 것이다. 실시양태 (19) 내지 (27)에 주어진 질환의 치료 및/또는 예방용 나도고사리삼속과 관련된 모든 실시양태가 개시되어 있으며 개시된 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방을 위한 의약의 제조를 위한 나도고사리삼속의 용도로서 재공식화될 수 있음을 이해하여야 한다.
바람직하게는, 나도고사리삼속은 실시양태 (14)의 화합물, 즉 트리펜타데카노인 또는 화합물 C를 실시양태 (49) 및 (51)에 기재된 바와 같은 양으로 함유한다. 게다가, 의약은 실시양태 (52)에 기재된 바와 같이 제제화될 수 있다.
(54) 본 발명의 추가 실시양태는 환자에게 유효량의 나도고사리삼속을 투여하는 것을 포함하는, 실시양태 (19) 내지 (27) 중 어느 한 실시양태의 질환 및 병태를 치료 및/또는 예방하는 방법에 관한 것이다. 그것에 의하여, "유효량"은 상기 기재된 바와 같다. 특히, 유효량은 실시양태 (49) 및 (51)에 기재된 바와 같다. 실시양태 (19) 내지 (27)에 주어진 질환의 치료 및/또는 예방용 나도고사리삼속과 관련된 모든 실시양태가 개시되어 있으며 각각의 치료 및/또는 예방 방법 방식으로 재공식화될 수 있음을 이해하여야 한다. 용량은 예를 들어 실시양태 (49) 또는 (51)에서 개시된 바와 동일하다. 게다가, 치료 및/또는 예방은 실시양태 (52)에 기재된 바와 같이 제제화된 의약으로 수행할 수 있다.
바람직하게는, 나도고사리삼속은 실시양태 (14)의 화합물, 즉 트리펜타데카노인 또는 화합물 C를 실시양태 (49) 및 (51)에 기재된 바와 같은 양으로 함유한다. 게다가, 의약은 실시양태 (52)에 기재된 바와 같이 제제화될 수 있다.
(55) 게다가, 본 발명의 추가 실시양태는 인간 및/또는 동물용 기능성 식품 또는 식품 보충제로서의 나도고사리삼속의 용도에 관한 것이다.
(56) 본 발명의 추가 실시양태는 인간 및 동물용 항노화, 수명 연장 또는 뇌 기능 개선을 위한 나도고사리삼속의 용도에 관한 것이다.
(57) 본 발명의 추가 실시양태는, 기능성 식품 또는 식품 보충제가 인간 및 동물용 항노화, 수명 연장 또는 뇌 기능 개선을 위한 것인, 실시양태 (55)에 따른 용도에 관한 것이다.
(58) 본 발명의 추가 실시양태는, 기능성 식품 또는 식품 보충제가 시력, 기억, 학습, 심상화, 판단, 독서, 지각, 사고, 창조, 지능 지수 (IQ) 상승을 포함한 뇌 기능 개선을 위한 것인, 인간 및/또는 동물용 기능성 식품 또는 식품 보충제로서의 나도고사리삼속의 용도에 관한 것이다.
(59) 본 발명의 추가 실시양태는, 기능성 식품이 신경변성 질환, 망막 또는 시신경 변성 질환, 탈수초병, 신경근육 질환 및 근육 이영양증, 뇌 또는 척수 신경 손상, 아밀로이드 침착물 관련 질환, 및 신장 질환, 당뇨병, 천식 및 호흡곤란으로 이루어진 군으로부터 선택된 만성 질환 또는 병태를 위한 것인, 인간 및/또는 동물용 기능성 식품 또는 식품 보충제로서의 나도고사리삼속의 용도에 관한 것이다.
(60) 본 발명의 추가 실시양태는, 질환 및 병태가 실시양태 (19) 내지 (27)에 인용된 질환 및 병태인 것인, 특정 질환 및 병태를 위한 인간 및/또는 동물용 기능성 식품 또는 식품 보충제로서의 나도고사리삼속의 용도에 관한 것이다.
(61) 본 발명의 추가 실시양태는 인간 및/또는 동물용 기능성 식품 또는 식품 보충제로서의 나도고사리삼속의 용도에 관한 것이며, 여기서 나도고사리삼속의 투여량은 그것이 실시양태 (14)의 화합물, 즉 트리펜타데카노인 또는 화합물 C를 1 μg (마이크로그램)/일 내지 50 mg/일의 양으로 함유하도록 하는 것이다. 추가 실시양태에서, 투여량은 1 μg (마이크로그램)/일 내지 20 mg/일이다. 하한치는 예를 들어 1 μg (마이크로그램)/일, 2 μg (마이크로그램)/일, 3 μg (마이크로그램)/일, 4 μg (마이크로그램)/일, 5 μg (마이크로그램)/일, 7 μg (마이크로그램)/일, 10 μg (마이크로그램)/일, 20 μg (마이크로그램)/일, 25 μg (마이크로그램)/일, 50 μg (마이크로그램)/일, 100 μg (마이크로그램)/일, 200 μg (마이크로그램)/일, 300 μg (마이크로그램)/일, 400 μg (마이크로그램)/일 또는 500 μg (마이크로그램)/일이다. 상한치는 예를 들어 50 mg/일, 40 mg/일, 30 mg/일, 20 mg/일, 10 mg/일, 5 mg/일, 3 mg/일, 2 mg/일, 1 mg/일, 900 μg (마이크로그램)/일이다. 각각의 상한치는 각각의 하한치와 조합될 수 있음을 이해하여야 한다. 한 실시양태에서, 투여량은 1 μg (마이크로그램)/일 내지 20 mg/일이다. 또 다른 실시양태에서, 투여량은 1 μg (마이크로그램)/일 내지 900 μg (마이크로그램)/일이다.
대안적으로, 본 발명은 인간 및/또는 동물용 기능성 식품 또는 식품 보충제로서의 나도고사리삼속의 용도에 관한 것이며, 여기서 나도고사리삼속이 10 mg/일 내지 2000 mg/일의 건조 나도고사리삼속 분말로서 함유된다. 하한치는 예를 들어 10 mg/일, 20 mg/일, 30 mg/일, 40 mg/일, 50 mg/일, 100 mg/일, 150 mg/일, 200 mg/일, 300 mg/일이다. 상한치는 예를 들어 2000 mg/일, 1800 mg/일, 1600 mg/일, 1500 mg/일, 1250 mg/일, 1000 mg/일이다. 각각의 상한치는 각각의 하한치와 조합될 수 있음을 이해하여야 한다.
허브 의약에 허브를 사용하는 방법은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 따라서, 통상의 기술자는 실시양태 (48) 내지 (61)에 따라 나도고사리삼속을 사용하기 위해 나도고사리삼속을 처리하는 것을 안다.
나도고사리삼속은 건조 식물 또는 식물 부분, 특히 뿌리, 줄기, 잎, 꽃, 꽃가루, 포자, 표피 또는 씨앗의 분말의 형태로 사용할 수 있다. 게다가, 추출물은 유기 용매, 특히 친유성 유기 용매로 제조될 수 있다. EtOH, DMSO, 클로로포름, 디클로로메탄, 메탄올, 2-프로판올, 지방족 탄화수소, 아세톤, 메틸 아세테이트 등이 유용하다. 추출물은 또한 건조될 수 있거나, 오일의 형태로 이루어질 수 있다. 추출물과 팅크를 생산하는 일반적인 방법은 예를 들어 문헌 [R. Voigt, "Pharmazeutische Technologie", Deutscher Apotheker Verlag Stuttgart, ISBN 978-3-7692-6194-3, 2015]에 개시되어 있다.
요약하면, 본 발명은 다음과 같이 또한 공식화될 수 있다:
(i). 인간 및/또는 동물용 의약으로서 사용하기 위한, 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
Figure pct00002
여기서 R1, R2 및 R3은 독립적으로 H 또는 -C(O)R4로부터 선택되며, 여기서 R4는
- OH, NH2, NHCH3, N(CH3)2, F 또는 Cl로 임의로 일-, 이- 또는 삼치환된 (C5-C20)알킬; 또는
- 1, 2 또는 3개의 이중 결합을 보유하는 (C5-C20) 알케닐이고;
이때 R1, R2 및 R3 중 적어도 1개는 -C(O)R4 이며, 여기서 R4는 짝수의 탄소 원자를 갖는 (C6-C20) 알킬이다.
(ii). (i)에 있어서, R1, R2 및 R3이 독립적으로 H 또는 -C(O)R4로부터 선택되며, 여기서 R1, R2 및 R3 중 적어도 1개는 -C(O)R4이며, 여기서 R4는 짝수의 탄소 원자를 갖는 (C6-C20) 알킬인, 인간 및/또는 동물용 의약으로서 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물.
(iii). (i) 또는 (ii)에 있어서, R1, R2 및 R3이 독립적으로 -C(O)R4로부터 선택되며, 여기서 R4는 짝수의 탄소 원자를 갖는 (C6-C20) 알킬인, 인간 및/또는 동물용 의약으로서 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물.
(iv). (i) 또는 (ii)에 있어서, R1, R2 및 R3 중 1개 또는 2개가 H이고, 나머지(들)가 -C(O)R4이며, 여기서 R4는 C12-알킬, C14-알킬, C16-알킬, C18-알킬, 또는 C20-알킬인, 인간 및/또는 동물용 의약으로서 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물.
(v). (i) 내지 (iii) 중 어느 하나에 있어서, R1, R2, 및 R3이 -C(O)R4이며, 여기서 R4는 C14-알킬인, 인간 및/또는 동물용 의약으로서 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물.
(vi). 인간 및/또는 동물용 의약으로서 사용하기 위한, HOC(O)C12-알킬, HOC(O)C14-알킬, HOC(O)C16-알킬, HOC(O)C18-알킬 또는 HOC(O)C20-알킬인, (iv)에 따른 화학식 (I)의 화합물의 대사산물 또는 전구약물.
(vii). (i) 내지 (vi) 중 어느 하나에 있어서, 신경변성 질환, 망막 또는 시신경 변성 질환, 탈수초성 질환, 신경근육 장애 및 근육 이영양증, 뇌 또는 척수 신경 손상, 뇌 신경 장애, 또는 발작, 아밀로이드 침착물 관련 질환, 및 신장 질환, 당뇨병, 천식 및 호흡곤란으로 이루어진 군으로부터 선택된 만성 질환 또는 병태의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한, 및 항노화 또는 수명 연장 및 뇌 기능 개선의 용도를 위한 화학식 (I)의 화합물.
(viii). (i) 내지 (vi) 중 어느 하나에 있어서, 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD), 헌팅톤병 (HD), 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 치매, 루이 소체 치매 (DLB), 전두측두엽 치매 (FTD), 크로이츠펠트-야콥병, 및 뇌 위축으로 이루어진 군으로부터 선택된 신경변성 질환의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물.
(ix). (i) 내지 (vi) 중 어느 하나에 있어서, 시신경 위축, 레베르 유전성 시신경병증 (LHON), 우성 시신경 위축 (DOA), 연령-관련 황반 변성, 녹내장 및 색소성 망막염으로 이루어진 군으로부터 선택된 시신경 및 망막 변성 질환의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물.
(x). (i) 내지 (vi) 중 어느 하나에 있어서, 부신백질이영양증, 다발성 경화증, 시신경염, 급성 염증성 탈수초성 다발신경병증 (AIDP), 만성 염증성 탈수초성 다발신경병증 (CIDP), 길랑-바레 증후군, 지카 바이러스에 의한 또는 지카 바이러스와 관련된 뇌염, 뇌 신경 마비, 시신경 척수염 (NMO), 급성 파종성 뇌척수염, 급성 괴사성 출혈성 뇌염, 동심성 경화증, 미만성 경화증, 이염성 백질이영양증, 구상 세포 백질이영양증, 중추 신경계의 해면 변성, 부신 백질이영양증, 페리-플럼병, 알렉산더병, 방사선 손상 백질뇌병증, 저산소성 백질뇌병증, 뇌실주위 백질연화증 질환, 동맥경화성 피질하 뇌병증, 진행성 다초점성 백질뇌병증, 및 중심 뇌교 수초용해 증후군으로 이루어진 군으로부터 선택된 탈수초성 질환의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물.
(xi). (i) 내지 (vi) 중 어느 하나에 있어서, 중증 근무력증, 램버트-이튼 증후군, 뒤시엔느 근육 이영양증, 베커 근육 이영양증, 안면견갑상완 근육 이영양증, 근긴장성 이영양증, 샤르코-마리-투스병 (CMT)으로 이루어진 군으로부터 선택된 신경근육 장애 및 근육 이영양증의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물.
(xii). (i) 내지 (vi) 중 어느 하나에 있어서, 급성 또는 만성 뇌 손상 또는 척수 또는 신경 손상, 뇌 신경 장애 및 발작으로 이루어진 군으로부터 선택된 신경계 손상 관련 질환 또는 혼합 신경계 질환의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물.
(xiii). (i) 내지 (vi) 중 어느 하나에 있어서, 당뇨병, 심장 아밀로이드증, 원발성 아밀로이드증, 가족성 아밀로이드증, 노인성 전신 아밀로이드증 (SSA), 속발성 아밀로이드증, 및 혈액 투석-연관 아밀로이드증으로 이루어진 군으로부터 선택된 아밀로이드 침착물 관련 질환의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물.
(xiv). (i) 내지 (vi) 중 어느 하나에 있어서, 신장 질환, 당뇨병, 및 천식으로 이루어진 군으로부터 선택된 만성 질환의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물.
(xv). (i) 내지 (vi) 중 어느 하나에 있어서, 치료 투여량이 1 mg/일 내지 1000 mg/일인, 청구항 7 내지 청구항 14의 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물.
(xvi). (i) 내지 (vi)의 화학식 (I)의 화합물 및 제약상 허용되는 담체를 함유하는, 청구항 7 내지 청구항 14의 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한 제약 조성물.
(xvii). (vii) 내지 (xiv)의 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방을 위한 의약의 제조를 위한 (i) 내지 (vi) 중 어느 하나에 따른 화학식 (I)의 화합물의 용도.
(xviii). 환자에게 유효량의 (i) 내지 (vi) 중 어느 하나에 따른 화학식 (I)의 화합물을 투여하는 것을 포함하는, (vii) 내지 (xiv)의 질환 및 병태를 치료 및/또는 예방하는 방법.
(xix). 인간 및/또는 동물용 기능성 식품 또는 식품 보충제로서의 (i) 내지 (vi) 중 어느 하나에 따른 화학식 (I)의 화합물의 용도.
(xx). 투여량이 1 μg (마이크로그램)/일 내지 50 mg/일인, 인간 및/또는 동물용 기능성 식품 또는 식품 보충제로서의 (i) 내지 (vi) 중 어느 하나에 따른 화학식 (I)의 화합물의 용도.
(xxi). (vii) 내지 (xiv) 중 어느 하나의 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방을 위한 나도고사리삼속.
(xxii). (v)의 화합물이 1 mg/일 내지 1000 mg/일의 양으로 함유되는 것인, (vii) 내지 (xiv) 중 어느 하나의 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방을 위한 나도고사리삼속.
(xxiii). 나도고사리삼속을 함유하는, (vii) 내지 (xiv)의 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한 제약 조성물.
(xxiv). 인간 및/또는 동물용 기능성 식품 또는 식품 보충제로서의 나도고사리삼속의 용도.
(xxv). (v)의 화합물이 1 μg (마이크로그램)/일 내지 50 mg/일의 양으로 함유되는 것인, 인간 및/또는 동물용 기능성 식품 또는 식품 보충제로서의 나도고사리삼속의 용도.
결론
놀랍게도, 본 발명자들은 홀수의 탄소 원자를 갖는 지방산을 보유하는 지질의 투여가 신경보호 효과를 나타냈음을 밝혀냈다. 특히, 나도고사리삼속이라 불리는 허브 또는 인간/동물의 밀크에서 비롯되는 화합물 C (SBC003, 트리펜타데카노인)가 뉴런 모델에서 특히 효험이 있어, 매우 강력한 신경보호, 항아폽토시스, 신경-구출, 축삭 성장 및 잠재적인 신경-재생 효과를 나타냈다. 화합물 C는 정상 효모 노화 동안에 연령-유도 단백질 응집을 예방 및/또는 청소하는데 강한 효과를 나타냈다. 캄토테신 모델로부터의 결과는 화합물 C가 유전자 수준에서 중요한 보호 역할을 할 수 있음을 시사한다. 화합물 C (SBC003, 트리펜타데카노인)를 함유하는 기능성 식품은 불치병 환자의 지원자에서 특히 효험이 있어, 매우 강력한 중증 신경보호, 항아폽토시스, 신경-구출, 및 신경-재생 효과를 나타냈으며, 따라서 이는 신경변성 질환 및 다른 만성 질환의 치료 및/또는 예방용 의약 및/또는 기능성 식품으로서 사용될 가능성을 갖는다.
놀랍게도 본 발명자들은 나도고사리삼속 (허브 B, SBC002)이라 불리는 허브가 뉴런 모델 및 환자에서 특히 효험이 있어, 매우 강력한 신경보호, 항아폽토시스, 신경-구출, 항산화 및 신경-재생 효과를 나타냄을 또한 확인하였다. 나도고사리삼속 추출물은 정상 효모 노화 동안에 연령-유도 단백질 응집을 예방 및/또는 청소하는데 강한 효과를 나타냈다. 캄토테신 모델로부터의 결과는 나도고사리삼속 추출물이 유전자 수준에서 중요한 보호 역할을 할 수 있음을 시사한다. 이는 신경변성 질환 및 다른 만성 질환의 치료 및/또는 예방용 의약 및/또는 기능성 식품으로서 사용될 가능성을 갖는다.
도 1은 실시예 I-1 - MTT로 평가된 세포 생존력에 기초한 화합물 C (AβO 처리 전 48시간에 또는 단독 첨가)의 신경보호 효과에 관한 것이다
마우스 1차 피질 뉴런을 비히클, 0.05 μM DHA (양성 대조군으로서 사용) 또는 상이한 농도의 화합물 C와 48시간 동안 사전-인큐베이션하였다. 그 다음에, 피질 뉴런을 비히클 (도 1 좌측) 또는 1 μM AβO (도 2 우측)로 24시간 동안 처리하고 MTT 검정을 사용하여 세포 생존력을 결정하였다 (조건당 n=3 결정, 1회 독립적 실험). 비히클 대조군의 % (평균±SD)로서 데이터를 나타냈다.
도 2는 실시예 I-1 - 화합물 C의 신경보호 효과- 뉴런의 현미경 영상에 관한 것이다
좌측: 비히클 대조군이 48시간 동안 첨가된 다음에, AβO 대조군 24시간 동안 첨가; 우측: 320 nM의 화합물 C가 48시간 동안 첨가된 다음에, AβO 24시간 동안 첨가
도 3은 실시예 I-2 - 화합물 C의 축삭 성장 효과에 관한 것이다
마우스 1차 피질 뉴런을 비히클, 60 nM sAPPα (양성 대조군으로서 사용) 또는 상이한 농도의 화합물 C와 48시간 동안 사전-인큐베이션하였다. 그 다음에, 피질 뉴런을 비히클로 24시간 동안 처리하였다. 비히클 대조군의 % (평균±SD)로서 데이터를 나타냈다.
도 4는 실시예 I-3 - 공동으로 또는 AβO 처리 후 3, 6시간에 첨가시 마우스 1차 뉴런 모델에서 화합물 C의 신경보호, 항아폽토시스 및 신경-구출 효과에 관한 것이다
마우스 1차 피질 뉴런을 0 h (T0)에 비히클 또는 1 μM AβO로 처리하였다. 상이한 농도의 화합물 C 또는 HNG (0.1 μM, 양성 대조군으로서 사용)를 AβO와 공동으로 AβO 후 0 h (T0), 3 h (T3) 또는 6 h (T6)에 첨가하였다. 그 다음에, 피질 뉴런을 24시간 동안 인큐베이션하고 MTT 검정을 사용하여 세포 생존력을 결정하였다 (조건당 n=3 결정, 1회 독립적 실험). 비히클 대조군의 % (평균±SD)로서 데이터를 나타냈다.
도 5 (도 5a, 도 5b 및 도 5c)는 실시예 I-4 - 공동으로 또는 AβO 처리 후 3, 6시간에 첨가시 인간 유도된 다능성 줄기 세포 (iPSC)에서 화합물 C의 신경보호, 항아폽토시스 및 신경-구출 효과에 관한 것이다
iPSC를 0 h (T0)에 비히클 또는 1 μM AβO로 처리하였다. 상이한 농도의 화합물 C 또는 0.1 μM HNG (양성 대조군으로서 사용)를 AβO와 공동으로 AβO 후 0 h (T0), 3 h (T3) 또는 6 h (T6)에 첨가하였다. 그 다음에, 을 24시간 동안 인큐베이션하고 NSE ELISA 검정을 사용하여 세포 생존력을 결정하였다 (조건당 n=6 결정, 1회 독립적 실험). 비히클 대조군의 % (평균±SD)로서 데이터를 나타냈다.
도 6 (도 6a, 도 6b, 도 6c, 도 6d, 도 6e, 도 6f, 도 6g, 도 6h, 도 6i)은 실시예 I-5 - 독소 처리 후 3시간에 첨가시 다중 독소 처리된 마우스 1차 뉴런 모델에서 화합물 C의 신경보호, 항아폽토시스 및 신경-구출 효과에 관한 것이다
피질 뉴런을 0 h (T0)에 비히클 또는 다중 뉴런 독소로 처리하였다. 상이한 농도의 화합물 C 또는 0.1 μM HNG (0.1 μM, 양성 대조군으로서 사용)를 독소 처리 후 3 h (T3)에 첨가하였다. 그 다음에, 피질 뉴런을 24시간 동안 인큐베이션하고 MTT 검정을 사용하여 세포 생존력을 결정하였다 (조건당 n=3 결정, 1회 독립적 실험). 비히클 대조군의 % (평균±SD)로서 데이터를 나타냈다.
도 7은 실시예 I-6 - AβO 처리된 마우스 1차 뉴런 모델에서 - AβO 처리 전 48시간에 첨가시 - 홀수의 탄소를 갖는 상이한 지방산의 신경보호 효과에 관한 것이다
마우스 1차 피질 뉴런을 비히클 또는 1 μM AβO와 1 μM의 홀수의 탄소를 갖는 상이한 지방산의 부재 또는 존재 하에) 48시간 동안 인큐베이션하였다. 그 다음에 AβO (1 μM Aβ1-42 올리고머) 또는 비히클을 24시간 동안 첨가하였다. MTT 검정을 사용하여 AβO-유도 신경독성을 평가하였다. 비히클 대조군의 % (평균±SD)로서 데이터를 나타냈다.
도 8은 실시예 I-7 - 캄토테신 처리된 마우스 1차 뉴런에서 - 캄토테신 처리 전 48시간에 첨가시 - 화합물 C의 신경보호 효과에 관한 것이다
마우스 1차 뉴런을 독소의 시험감염 전 48시간에 첨가된 상이한 농도의 화합물 C의 부재 또는 존재 하에 비히클 또는 독소와 인큐베이션하였다. 독소의 첨가 후, 세포를 24시간 동안 추가로 인큐베이션하였다.
도 9 (도 9a, 도 9b, 도 9c, 및 도 9d)는 실시예 I-8 - 사카로마이세스 세레비시아에에서 연령-유도 단백질 응집체에서 화합물 C 및 허브 B 추출물의 효과에 관한 것이다
도 9a: 비처리되거나 허브 B (10 μg/ml) 또는 화합물 C (30 μM)로 처리된 어린 세포, 또는 노화 세포의 대표적 영상. 상부 패널은 형광 증백제 28로 염색되고 DAPI 채널에 영상화되어 출아흔을 드러내는 세포의 z-시리즈 스택의 최대 투영이다. 하부 패널은 Hsp104-GFP를 발현하고 GFP 채널에 영상화된 동일한 세포의 단일 병소 평면 영상이다. 화살표는 Hsp104-GFP 병소를 가리킨다.
도 9b: 시험된 모든 조건에서 수득된 노화 세포의 연령의 정량화. 기하급수적으로 성장하는 배양액을 통해 수득된 어린 세포는 0.383 ±0.5952의 평균 연령을 가졌다. 분석된 세포의 수는 73에서 342까지 다양하였다.
도 9c: Hsp104-GFP 병소를 가진 세포의 백분율. 세포는 동일한 조명 조건으로 영상화되었다. 영상화된 모든 노화 세포가 포함되었다 (75 내지 94개의 세포). 모든 병소 평면을 검사하였다. 평균±SD. p 값은 비히클 단독과 비교하여 ANOVA로부터 수득된 조정된 p 값이다.
도 9d: Hsp104-GFP 농도의 프록시로서 세포에서 Hsp104-GFP의 평균 형광 강도. 평균±SD. p 값은 비히클 단독과 비교하여 ANOVA로부터 수득된 조정된 p 값이다.
도 10은 실시예 IV-1 - AβO 처리된 마우스 1차 뉴런에서 - AβO 처리 전 48시간에 첨가시 - 허브 B 추출물의 신경보호 효과에 관한 것이다
마우스 1차 피질 뉴런을 비히클, 0.05 μM DHA (양성 대조군으로서 사용) 또는 상이한 농도의 허브 B 추출물과 48시간 동안 사전-인큐베이션하였다. 그 다음에, 피질 뉴런을 비히클 (도 10 좌측) 또는 1 μM AβO (도 11 우측)로 24시간 동안 처리하고 MTT 검정을 사용하여 세포 생존력을 결정하였다 (조건당 n=3 결정, 1회 독립적 실험). 비히클 대조군의 % (평균±SD)로서 데이터를 나타냈다.
도 11은 실시예 IV-1 - 허브 B 추출물의 신경보호 효과- 뉴런의 현미경 영상에 관한 것이다
좌측: 비히클 대조군이 48시간 동안 첨가된 다음에, AβO 대조군 24시간 동안 첨가; 우측: 32 ng/mL의 허브 B 추출물이 48시간 동안 첨가된 다음에, AβO 24시간 동안 첨가
도 12는 실시예 IV-2 - 공동으로, 또는 AβO 처리 후 3 또는 6시간에 첨가시 마우스 1차 뉴런에서 허브 B 추출물의 신경보호, 항아폽토시스 및 신경-구출 효과에 관한 것이다
마우스 1차 피질 뉴런을 0 h (T0)에 비히클 또는 1 μM AβO로 처리하였다. 상이한 농도의 허브 B 추출물 또는 0.1 μM HNG (0.1 μM, 양성 대조군으로서 사용)를 AβO와 공동으로 AβO 후 0 h (T0), 3 h (T3) 또는 6 h (T6)에 첨가하였다. 그 다음에, 피질 뉴런을 24시간 동안 인큐베이션하고 MTT 검정을 사용하여 세포 생존력을 결정하였다 (조건당 n=3 결정, 1회 독립적 실험). 비히클 대조군의 % (평균±SD)로서 데이터를 나타냈다.
도 13a, 13b, 13c는 IV-3 - 공동으로 또는 AβO 처리 후 3 또는 6시간에 첨가시 AβO 처리된 인간 유도된 다능성 줄기 세포 (iPSC)에서 허브 B 추출물의 신경보호, 항아폽토시스 및 신경-구출 효과에 관한 것이다
iPSC를 0 h (T0)에 비히클 또는 1 μM AβO로 처리하였다. 상이한 농도의 허브 B 또는 0.1 μM HNG (양성 대조군으로서 사용)를 AβO와 공동으로 AβO 후 0 h (T0), 3 h (T3) 또는 6 h (T6)에 첨가하였다. 그 다음에, 을 24시간 동안 인큐베이션하고 NSE ELISA 검정을 사용하여 세포 생존력을 결정하였다. 비히클 대조군의 % (평균±SD)로서 데이터를 나타냈다.
도 14a, 도 14b, 도 14c, 도 14d, 도 14e, 도 14f, 도 14f는 실시예 IV-4 - 다중 뉴런 독소 처리된 마우스 1차 뉴런 모델에서 - 독소 처리 후 3시간에 첨가시 - 허브 B 추출물의 신경보호, 항아폽토시스 및 신경-구출 효과에 관한 것이다
피질 뉴런을 0 h (T0)에 비히클 또는 다중 뉴런 독소로 처리하였다. 상이한 농도의 허브 B 또는 0.1 μM HNG (0.1 μM, 양성 대조군으로서 사용)를 독소 처리 후 3 h (T3)에 첨가하였다. 그 다음에, 피질 뉴런을 24시간 동안 인큐베이션하고 MTT 검정을 사용하여 세포 생존력을 결정하였다 (조건당 n=3 결정, 1회 독립적 실험). 비히클 대조군의 % (평균±SD)로서 데이터를 나타냈다.
도 15a 및 도 15b는 실시예 IV-5 - H 2 O 2 처리된 마우스 1차 뉴런 모델에서 - 독소 처리 전 48시간 또는 독소 처리 후 3시간에 첨가시 - 허브 B 추출물의 신경보호, 항아폽토시스 및 신경-구출 효과에 관한 것이다
도 15a: 마우스 1차 피질 뉴런을 비히클 또는 0.25 mM H2O2 처리로 처리하였다. H2O2 처리 후 3시간에, 상이한 농도의 허브 B 또는 트롤록스(Trolox) (1 mM, 양성 대조군으로서 사용)를 피질 뉴런에 첨가하여 24시간까지 인큐베이션하였다. MTT 검정을 사용하여 세포 생존력을 결정하였다 (조건당 n=3 결정, 1회 독립적 실험). 비히클 대조군의 % (평균±SD)로서 데이터를 나타냈다.
도 15b: 마우스 1차 피질 뉴런을 비히클 또는 상이한 농도의 허브 B 또는 트롤록스 (1 mM, 양성 대조군으로서 사용)로 48시간 동안 처리하였다. 그 다음에, 피질 뉴런을 0.25 mM H2O2 처리로 총 24시간 동안 인큐베이션하고 MTT 검정을 사용하여 세포 생존력을 결정하였다 (조건당 n=3 결정, 1회 독립적 실험). 비히클 대조군의 % (평균±SD)로서 데이터를 나타냈다.
도 16은 실시예 IV-6 - 캄토테신 처리된 마우스 1차 뉴런 모델에서 - 캄토테신 처리 전 48시간에 첨가시 - 허브 B 추출물의 신경보호, 항아폽토시스 및 신경-구출 효과에 관한 것이다
마우스 1차 뉴런을 캄토테신의 시험감염 전 48시간에 첨가된 상이한 농도의 허브 B의 부재 또는 존재 하에 비히클 또는 독소와 인큐베이션하였다. 캄토테신의 첨가 후, 세포를 24시간 동안 추가로 인큐베이션하였다. 비히클 대조군의 % (평균±SD)로서 데이터를 나타냈다.
실험 파트
약어 및 정의
AβO 아밀로이드-β 올리고머
DHA 도코사헥사엔산
HNG 휴마닌
iPSC(들) 유도된 다능성 줄기 세포(들)
MTT 3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐테트라졸륨 브로마이드
NSE 뉴런 특이적 에놀라제
ELISA 효소-연결 면역흡착제 검정
sAPPα 분비된 아밀로이드 전구체 단백질-α
SD 표준 편차
SBC003 화합물 C, 트리펜타데카노인 (CAS 번호: 7370-46-9)
SBC002 허브 B
SBC001 SBC002 (즉 허브 B) 및 SBC003 (즉 화합물 C)을 함유하는 허브 혼합물
화합물 C (SBC003)의 역사
본 발명의 한 실시양태는 본원에서 "SBC003"이라 또한 불리는 실시양태 (14)의 화합물에 관한 것이다. 이 화합물은 원래, 나도고사리삼속인 허브 B, 즉 SBC002로부터 발견되었다. 나도고사리삼속은 적절한 열대 및 아열대 서식지에 세계 도처에 분포되어 있다.
SBC003 추출 공정의 예:
SBC003을 다음과 같이 SBC002로부터 단리하였다:
1.1 SBC002의 건조 물질 50 g을 취하고, 실온에서 3회 추출한 산업용 에탄올 침연(maceration)의 95%의 4배 부피를 사용하고, 감압 하에 추가로 농축하고, 에탄올 추출물 A (추정치 10 g)로 수득하였다.
1.2 에탄올 추출물 A를 취하고, 에틸 아세테이트 (2L)를 사용하여 4회 추출하고, 감압 하에 추가로 농축하고, 에틸 아세테이트 추출물 B (추정치 10 g)를 수득하였다.
1.3 에틸 아세테이트 추출물 B를 취하고, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르: 아세톤 20: 1 내지 1: 1 구배 용리)를 사용하고, 밴드 C1 (추정치 0.1 g)을 수득하였다.
1.4 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (클로로포름: 메탄올 30: 1 내지 10: 1 구배 용리)에 의해 C1 스트립을 취하여, C1I 스트립을 수득하였다.
1.5 박층 크로마토그래피 (클로로포름: 메탄올 9:1)에 의해 C1I 스트립을 취하여, 하기 화학적 구조를 갖는 SBC003 (추정치 0.02 - 0.1 g)을 수득하였다:
Figure pct00003
화학식은 C48H92O6이며, 본원에서 화합물 C, SBC003, 트리펜타데카노인로서 칭해지며, 1,2,3-프로판트리일 트리펜타데카노에이트, 1,2,3-프로판트리일 트리펜타데카노에이트, 또는 1,2,3-트리펜타데카노일글리세롤로도 공지되어 있다. 분자량은 765.24 g/mol이다 (실시양태 (14) 참조).
화합물 C (SBC003)에 대한 세포 실험의 실시예 (I)
화합물 C의 실시예 I-1
AβO 처리 이전 48시간 첨가시 마우스 1차 뉴런 모델에서 화합물 C (트리펜타데카노인, SBC003)의 효과
이 연구의 목적은 화합물 C가 시험관내 뉴런 모델에서 뉴런 사멸을 구출할 수 있는지를 결정하는 것이다. 그 목적으로, Aβ1-42 올리고머 (AβO)로 시험감염된 마우스 1차 피질 뉴런을 사용하여 6 가지 농도에서 화합물 C의 신경-보호 효과를 조사하였다. β-아밀로이드 펩티드는 여러 가지의 병리학적 변화를 촉발하여 최종적으로 AD를 포함한 다중 신경계 질환에서 뉴런 기능장애 및 변성을 야기한다 (Deshpande et al. The Journal of Neuroscience, 2006; 26(22):6011- 6018).
배아 일 16-17로부터의 피질 뉴런을 C57BL6/J 마우스 태아로부터 준비하였다. 간단히 말하면, 해리된 피질 세포를 1.5 μg/mL 폴리오르니틴 (시그마(Sigma))으로 미리-코팅된 48-웰 플레이트에 플레이팅하였다 (50.000개 세포/웰). 세포를 혈청이 없고 호르몬, 단백질 및 염으로 보충된 화학적으로 정의된 둘베코 변형 이글/F12 배지에서 배양하였다. 배양물을 가습된 6% CO2 분위기에서 35℃에서 유지하였다. 마우스 피질 뉴런을 비히클 또는 상이한 농도의 화합물 C를 사용한 48시간 사전-인큐베이션 후 24시간 동안 1.0 μM AβO에 노출시켰다. MTT 검정을 사용하여 AβO-유도 신경독성을 평가하였다.
예상한 바와 같이, 1.0 μM AβO와 피질 뉴런의 24시간 동안의 인큐베이션은 48.6±1.4% 만큼의 세포 생존력의 감소를 유발하였다. DHA (0.05 μM, 양성 대조군)는 AβO-유도 뉴런 사멸을 감소시켰고 나머지 세포 생존력이 대조군의 82.0±2.6%였다. 이들 대조군 데이터는 i) 예상한 바와 같이, DHA는 뉴런을 보호하였으며, ii) AβO로 시험감염된 세포는 DHA 사전-처리에 의해 성공적으로 예방되어, 시험 시스템을 확인할 수 있었음을 입증한다.
뉴런을 48시간 동안 상이한 농도의 화합물 C와 사전-인큐베이션한 후에 1 μM AβO로 24시간 동안 처리하였다. 결과는 상이한 농도의 화합물 C의 존재 하에 용량-의존적 신경보호 효과를 유발하였다는 점이었다 (도 1 우측 및 도 2). 최대 신경보호 효과는 320 nM에 상응하는 현탁액의 희석에서 100%였다 (세포 생존력 111.9±1.5%). EC50 효과는 약 66 nM이 될 것으로 예상된다.
뉴런이 상이한 농도의 화합물 C 단독으로 48시간 동안 사전-인큐베이션된 경우, 1 nM의 화합물 C에서 최대 116.6±3.7%의 더 높은 세포 생존력의 경향을 나타냈다 (도 1 좌측). 화합물 C가 스톡 용액에 완전히 가용성은 아니었음을 주목한다.
결론적으로, 데이터는 화합물 C가 AβO-유도 신경독성에 대해 강한 보호를 제공함을 시사한다. 화합물 C의 뉴런-성장-자극 효과가 관찰된다.
화합물 C의 실시예 I-2
마우스 1차 뉴런 모델에서 축삭 성장의 화합물 C (트리펜타데카노인)의 효과
이 연구의 목적은 마우스 1차 피질 뉴런에서 상이한 농도의 화합물 C의 신경영양적 효과를 시험하는 것이다.
배아 일 16-17로부터의 피질 뉴런을 실시예 I-1에 기재된 바와 같이, C57Bl6/J 마우스 태아로부터 준비하였다. 96시간 인큐베이션 후, 축삭 길이를 기록하였다. 간단히 말하면, 세포를 빙냉 PBS로 세척하고 냉 메탄올로 고정시켰다. 고정 후, 세포를 전체 MAP2 단백질을 검출하는 특이적 항체를 사용하여 면역표지하였다. MAP2에 대한 항체는 신경 세포, 그의 축삭 및 뉴런 수상돌기에 대한 우수한 마커이다. 축삭 길이의 정량화를 위해, 표지된 세포의 6개의 독립적인 영상을 도립 현미경을 사용하여 포획하였다. 뉴런-J 소프트웨어를 사용하여 세포 사진을 분석하고 수동으로 축삭 길이를 분석하였다. 최소 100개의 독립적인 뉴런을 처리하였다. 데이터는 평균 축삭 길이 (μm로 표시) (평균±SD)로 표시하였다. 비히클-처리 세포와 화합물 처리 세포 사이의 통계적 차이는 t-검정을 사용하여 결정하였다.
예상한 바와 같이, sAPPα (양성 대조군)는 뉴런 축삭 성장을 비히클 대조군 165.96±90.18 μm에 비해 264.63±157.51 μm로 강하게 자극하였으며 (p<0.0001); 한편 화합물 C는 뉴런 축삭 성장을 농도 10000 nM에서 비히클 대조군에 비해 304.27±149.60 μm로 강하게 자극하였고 (비히클 대조군에 비해 p<0.0001); 농도 1000 nM에서 비히클 대조군에 비해 199.93±101.17 μm로 강하게 자극하였다 (비히클 대조군에 비해 p<0.05). (도 3)
요약하면, 화합물 C (트리펜타데카노인)는 마우스 1차 뉴런 모델에서 상당한 축삭 성장 효과 및 신경영양적 효과를 입증하였다.
화합물 C의 실시예 I-3
AβO와 공동으로 또는 AβO 처리 후 3, 및 6시간에 첨가시 마우스 1차 뉴런 모델에서 화합물 C (트리펜타데카노인)의 효과
이 연구의 목적은 화합물 C가 시험관내 AβO 유도된 뉴런 사멸 모델에서 신경보호, 항아폽토시스 및 신경-구출 효과를 나타낼 수 있는지를 결정하는 것이다. 그 목적으로, Aβ1-42 올리고머 (AβO)로 시험감염된 마우스 1차 피질 뉴런을 사용하여 6 가지 농도에서 화합물 C의 신경-보호 효과를 조사하였다. 화합물을 구출 효과 또는 항아폽토시스 효과를 확인하기 위한 목적으로 상이한 시점 (T0 AβO와 공동으로 그리고 AβO 후 T3, 또는 T6)에서 첨가하였다.
배아 일 16-17로부터의 피질 뉴런을 실시예 I-1에 기재된 바와 같이, C57Bl6/J 마우스 태아로부터 준비하였다.
마우스 피질 뉴런을 24시간 동안 1.0 μM AβO에 노출시켰다. MTT 검정을 사용하여 AβO-유도 신경독성을 평가하였다. 예상한 바와 같이, 1.0 μM AβO와 피질 뉴런의 24시간 동안의 인큐베이션은 플레이트 1, 2 및 3 각각에 대해 50.9±2.0%, 51.3±2.0% 및 51.7±4.2% 만큼의 세포 생존력의 감소를 유발하였다. (도 4)
예상한 바와 같이, T0에서 첨가된 휴마닌 펩티드 (HNG, 휴마닌 펩티드의 S14G 변이체, 양성 대조군)는 AβO-유도 뉴런 사멸을 강하게 감소시켰고 나머지 세포 생존력이 대조군의 91.6 ± 2.1%였다 (도 4). AβO 후 3 또는 6시간에 첨가시, HNG가 과거 데이터와 일치하여 세포 사멸을 예방하지 못하였다. 이들 대조군 데이터는, 예상한 바와 같이, HNG는 AβO와 공동으로 첨가되는 경우만 신경 세포를 보호하여, 시험 시스템을 확인함을 입증한다.
뉴런을 AβO와 공동으로 (T0), AβO 후 3 h (T3), 또는 AβO 후 6 h (T6)에 첨가된 상이한 농도의 화합물 C로 처리하였다. 결과는 다음과 같았다: 모든 실험 조건 (즉 T0, T3 및 T6)에서, 화합물 C가 용량-의존적 신경보호 효과를 나타냈다. 1000 nM의 농도의 경우, 화합물 C는 AβO와 공동으로 첨가시 AβO-유도 세포 사멸을 예방하였다 (생존력 94.5±4.6%). 게다가, 화합물 C는 320 및 1000 nM의 농도에서 AβO 후 3 h에 첨가시 (생존력 각각 65.3±2.6% 및 76.6±2.9%) 및 1000 nM의 농도에서 AβO 후 6 h에 첨가시 (생존력 62.4±3.5%) AβO-유도 세포 사멸로부터 보호하였다. (도 4)
신경보호 및 항아폽토시스 효과의 백분율은 다음으로서 정의되었다: (화합물 C군의 뉴런 생존력 - 독소 처리군의 뉴런 생존력) / (100 - 독소 처리군의 뉴런 생존력) × 100%. 1000 nM에서 화합물 C의 신경보호 및 항아폽토시스 효과의 %는 T0, T3, 또는 T6 각각에서 88.7%, 52.0%, 22.3%였다. (도 4)
요약하면, 데이터는 화합물 C가 AβO-유도 신경독성에 대해 강한 신경보호, 항아폽토시스 및 신경-구출 효과를 제공함을 시사한다. 화합물 C는 AβO-유도 뉴런 사멸을 구출하는데 휴마닌보다 더 강력하였기 때문에 휴마닌과 구별된다.
화합물 C의 실시예 I-4
공동으로 또는 AβO 처리 후 3 및 6시간에 첨가시 AβO 처리된 인간 유도된 다능성 줄기 세포 (iPSC)에서 화합물 C (트리펜타데카노인)의 효과
화합물 C가 Aβ1-42 올리고머 (AβO)로 시험감염된 인간 iPSC-유래 뉴런에서 뉴런 사멸을 구출할 수 있는지를 결정하기 위한 것. 이 세포 모델에서, AβO는 특이적 ELISA 검정을 사용하여 뉴런 특이적 에놀라제 (NSE)의 수준에 의해 모니터링될 수 있는 극적인 뉴런 사멸을 유도하였다. 구출 효과를 확인하기 위한 목적으로 화합물 C를 상이한 시점 (공동으로 및 AβO 후)에 첨가할 것이다.
세포 (HIP-신경 전구세포, 글로벌스템(GlobalStem), Cat#GSC-4312, Lot#20010260)를 웰당 60.000개 세포의 밀도로 96-웰 플레이트에 플레이팅하고 배양하였다. 실험 전에, 세포를 5주 동안 성숙시키고 가습된 5% CO2 분위기에서 37℃에서 유지하였다.
세포를 AβO와 공동으로 (T0), AβO 후 3 h (T3), 또는 AβO 후 6 h (T6)에 첨가된 상이한 농도 (즉 10, 100, 1000 및 10000 nM)의 화합물 C의 부재 또는 존재 하에 비히클 또는 1 μM AβO와 인큐베이션하였다. 세포를 웰당 100 μL의 최종 부피로 24시간 동안 인큐베이션하였다. 양성 대조군의 경우, 세포를 0.1 μM HNG (즉 휴마닌 펩티드의 S14G 변이체)의 존재 하에 유사하게 처리하였다. 게다가, 공급자의 권고 (클론클라우드(CloneCloud), Cat#SEA537Hu)에 따라 ELISA 검정에 의해 뉴런 특이적 에놀라제 (NSE)의 검출을 사용하여 뉴런 소실을 모니터링하였다. 실험 조건당 총 3개의 데이터 포인트가 여기서 생성된다.
인간 iPSC를 24시간 동안 1.0 μM AβO에 노출시켰다. NSE 검정을 사용하여 AβO-유도 신경독성을 평가하였다. 예상한 바와 같이, 1.0 μM AβO와 뉴런의 24시간 동안의 인큐베이션은 플레이트 1, 2 및 3 각각에 대해 49.7±5.5%, 37.5±3.0% 및 46.9±1.9% 만큼의 세포 생존력의 감소를 유발하였다.
예상한 바와 같이, T0에서 첨가된 휴마닌 펩티드 (HNG, 양성 대조군)는 AβO-유도 뉴런 사멸을 강하게 감소시켰고 뉴런 생존력이 대조군의 85.3±5.6%였다. AβO 후 3 또는 6시간에 첨가시, HNG는 세포 사멸을 예방하지 못하였다. 이들 대조군 데이터는 i) 예상한 바와 같이, HNG는 AβO와 공동으로 첨가되는 경우만 신경 세포를 보호하고, ii) AβO로 시험감염된 세포는 성공적으로 구출되어, 시험 시스템을 확인할 수 있음을 입증한다. (도 5)
IPSC를 AβO와 공동으로 (T0), AβO 후 3 h (T3), 또는 AβO 후 6 h (T6)에 첨가된 상이한 농도의 화합물 C로 처리하였다. 결과는 다음과 같았다: 모든 실험 조건 (즉 T0, T3 및 T6)에서 화합물 C는, 용량-의존적 신경보호, 신경-구출 및 항아폽토시스 효과를 나타냈다. 10000 nM의 농도의 경우, 화합물 C는 AβO와 공동으로 첨가시 AβO-유도 세포 사멸을 예방하였다 (세포 생존력 76.7±2.7%). 화합물 C는 10000 nM의 농도에서 AβO 후 3 h에 첨가시 (세포 생존력 94.2±7.1%) 및 10000 nM의 농도에서 AβO 후 6 h에 첨가시 (세포 생존력 88.8±1.3%) AβO-유도 세포 사멸로부터 보호하였다. 10000 nM에서 화합물 C의 신경보호 및 항아폽토시스 효과의 %는 T0, T3, 또는 T6 각각에서 53.7%, 90.8%, 78.9%였다. (도 5)
결론적으로, 데이터는 화합물 C가 iPSC로부터 유래된 인간 뉴런에서 AβO-유도 신경독성에 대해 강한 보호, 신경-구출 및 항아폽토시스 효과를 제공함을 시사한다. 화합물 C는 이 세포 모델에서 AβO-유도 독성을 억제하는데 휴마닌보다 더 강력하였기 때문에 휴마닌과 구별된다.
화합물 C의 실시예 I-5
다중 뉴런 독소 처리된 마우스 1차 뉴런 모델에서 - 독소 처리 후 3시간에 첨가시 - 화합물 C (트리펜타데카노인)의 효과
화합물 C가 다중 독소 부하된 시험관내 모델에서 뉴런 사멸을 구출할 수 있는지를 결정하기 위한 것. 상이한 유형의 독소로 시험감염된 마우스 1차 피질 뉴런을 사용하여 상이한 농도의 화합물 C의 신경-보호 효과를 조사하였다. 구출 효과를 확인하기 위한 목적으로 화합물 C를 독소 후 3시간 (T3)에 첨가하였다. 독소와 세포의 24시간 인큐베이션 후 MTT 검정을 사용하여 세포 생존력을 조사하였다.
배아 일 16-17로부터의 피질 뉴런을 실시예 I-1에 기재된 바와 같이, C57Bl6/J 마우스 태아로부터 준비하였다.
안정한 올리고머성 또는 원섬유성 제제는 과거 프로토콜에 따라 제조하였다. 상이한 독소의 출처는 다음과 같다:
Figure pct00004
바켐(Bachem)으로부터 Aβ1-42 및 Aβ25-35 (각각 ref H1368 및 H1192).
Figure pct00005
에보텍(Evotec)로부터 인간 타우 (2N4R) 단백질.
Figure pct00006
r-펩티드로부터 인간 α-시뉴클레인 (ref 0101008603).
Figure pct00007
바켐으로부터 아밀린 (ref H-7905.1000)
Figure pct00008
바켐으로부터 프리온 단백질 118-135 (각각 ref H-4206).
모든 처리를 DIV 6/7에서 48-웰 플레이트에서 삼중으로 행하였다. 세포를 독소 후 3시간 (T3)에 첨가된 상이한 농도의 화합물 C (100, 1000, 10000 nM)의 부재 또는 존재 하에 비히클 또는 독소 (명시된 최종 농도에서)와 인큐베이션하였다. 세포를 웰당 140 μL의 최종 부피로 24시간 동안 인큐베이션하였다.
사용된 양성 대조군 (T3에서 첨가된)은 널리 공지된 항아폽토시스성 펩티드로서 0.1 μM HNG (휴마닌 펩티드의 S14G 변이체)였다.
MTT 검정을 사용하여 세포 생존력을 모니터링하기 전에 24시간 동안 세포를 인큐베이션하였다. 간단히 말하면, 세포를 MTT (시그마, Cat #M2128-10G, Lot # MKBH7489V)로 1시간 동안 35℃에서 인큐베이션하였다. 그 목적으로, 14 μL의 5 mg/mL MTT (PBS 중에 가용화된)를 각각의 웰에 첨가하였다. 인큐베이션 후, 배지를 제거하고 세포를 150 μL DMSO로 10분 동안 용해시키고 빛으로부터 보호하였다. 포르마잔의 완전 가용화 후, 570 nm에서의 흡광도를 분광 광도계 비엠지 랩테크 플루오스타 오메가(BMG Labtech Fluostar Omega)를 사용하여 기록하였다.
신경보호 및 항아폽토시스 효과의 백분율은 다음으로서 정의되었다: (화합물 C군의 뉴런 생존력 - 독소 처리군의 뉴런 생존력) / (100 - 독소 처리군의 뉴런 생존력) × 100%.
Figure pct00009
화합물 C는 Aβ1-42 피브릴 (10000 nM에서 22.3%) (도 6a) 및 Aβ25-35 피브릴 (10000 nM에서 32.1%) (도 6b)에 대항하여 항아폽토시스 및 신경보호 효과를 나타냈다.
Figure pct00010
화합물 C는 인간 타우 올리고머-유도 독성 (10000 nM에서 46.8%) (도 6c) 및 타우 피브릴-유도 독성 (10000 nM에서 23.1%) (도 6d)에 대항하여 항아폽토시스 및 신경보호 효과를 나타냈다.
Figure pct00011
화합물 C는 인간 알파-시뉴클레인 올리고머-유도 독성 (도 6e) (10000 nM에서 45.8%) 및 알파-시뉴클레인 피브릴 (도 6f) (10000 nM에서 34.0%)에 대항하여 항아폽토시스 및 신경보호 효과를 나타냈다.
Figure pct00012
화합물 C는 올리고머 (1000, 10000 nM 각각에서 30.8%, 37.3%) (도 6g) 및 피브릴 검정 (1000, 10000 nM 각각에서 45.3%, 52.6%) (도 6h) 둘 다에서 인간 아밀린에 대항하여 항아폽토시스 및 신경보호 효과를 나타냈다.
Figure pct00013
화합물 C는 프리온 올리고머-유도 독성에 대항하여 항아폽토시스 및 신경보호 효과를 나타냈다 (1000, 10000 nM 각각에서 23.5%, 53.8%) (도 6i).
결론적으로, 데이터는 화합물 C가 마우스 1차 피질 뉴런에서 Aβ1-42 피브릴-, Aβ25-35 피브릴-, 인간 타우 올리고머-, 인간 타우 피브릴-, 인간 알파-시뉴클레인 올리고머-, 알파-시뉴클레인 피브릴-, 인간 아밀린 올리고머-, 인간 아밀린 피브릴- 및 프리온 올리고머-유도 신경독성에 대해 강한 보호, 신경-구출 및 항아폽토시스 효과를 제공함을 시사한다. 화합물 C는 이들 세포 모델에서 다중 독소-유도 뉴런 사멸을 억제하는데 휴마닌보다 더 강력하기 때문에 휴마닌과 구별된다.
홀수의 탄소를 갖는 지방산의 실시예 I-6
AβO 처리된 마우스 1차 뉴런 모델에서 - AβO 처리 전 48시간에 첨가시 - 홀수의 탄소를 갖는 상이한 지방산의 효과
이 연구의 목적은 AβO로 시험감염된 마우스 1차 피질 뉴런을 사용하여 홀수의 탄소를 함유하는 지방산의 신경-보호 효과에 임의의 차이가 있는지를 시험하는 것이었다. 예방 효과를 확인할 목적으로, 화합물을 1 μM AβO 처리 전 48시간에 첨가하였다. AβO와 세포의 24시간 인큐베이션 후 MTT 검정을 사용하여 세포 생존력을 조사하였다.
배아 일 16-17로부터의 피질 뉴런을 실시예 I-1에 기재된 바와 같이, C57Bl6/J 마우스 태아로부터 준비하였다.
모든 처리를 48-웰 플레이트에서 삼중으로 행하였다. 세포를 비히클 또는 1 μM AβO와 AβO 전 48시간에 첨가된 명시된 최종 농도의 상이한 지질의 존재 또는 부재 하에) 인큐베이션하였다. 세포를 웰당 140 μL의 최종 부피로 AβO와 24시간 동안 인큐베이션하였다.
양성 대조군의 경우, 세포를 0.05 μM DHA의 존재 하에 유사하게 (AβO 전 48시간) 처리하였다.
AβO-처리 후에, MTT 검정을 사용하여 세포 생존력을 측정하였다. 간단히 말하면, 세포를 MTT (시그마, Cat #M2128-10G, Lot # MKBH7489V)로 1시간 동안 35℃에서 인큐베이션하였다. 그 목적으로, 14 μL의 5 mg/mL MTT (PBS 중에 가용화된)를 각각의 웰에 첨가하였다. 인큐베이션 후, 배지를 제거하고 세포를 150 μL DMSO로 10분 동안 용해시키고 빛으로부터 보호하였다. 포르마잔의 완전 가용화 후, 570 nm에서의 흡광도를 기록하였다.
마우스 1차 피질 뉴런을 24시간 동안 비히클 또는 1 μM Aβ1-42 올리고머에 노출시켰다. MTT 검정을 사용하여 AβO-유도 신경독성을 평가하였다. 예상한 바와 같이, AβO와 세포의 24시간 동안의 인큐베이션은 대조군의 59.9±1.7%의 생존력의 감소를 유발하였다. (도 7)
예상한 바와 같이, 50 nM DHA와 세포의 사전인큐베이션은 AβO-유도 세포 사멸을 예방하였다. 실제로, 50 nM DHA와 48시간 동안 사전인큐베이션되고 1 μM AβO으로 시험감염된 1차 뉴런은 대조군의 90.9±3.1%의 나머지 세포 생존력을 나타냈다.
요약하면, 홀수의 탄소를 갖는 지질 GG05, GG07 또는 GG09와 세포의 48시간 사전인큐베이션은 0.01 및 0.1 μM에서 용량 독립적 신경보호 효과를 유발하였으나, 1 μM에서 신경보호 효과를 상실하였다 (도 7).
선택된 지방산의 명칭 및 코드는 다음과 같이 열거되었다:
Figure pct00014
화합물 C의 실시예 I-7
캄토테신 처리된 마우스 1차 뉴런 모델에서 - 캄토테신 처리 전 48시간에 첨가시 - 화합물 C의 효과
DNA 효소 토포이소포마제 I (토포 I)을 억제하는 세포독성 퀴놀린 알칼로이드인 캄토테신으로 시험감염된 마우스 1차 피질 뉴런을 사용하여 상이한 농도의 화합물 C의 신경-보호 효과를 조사하였다.
배아 일 16-17로부터의 피질 뉴런을 실시예 I-1에 기재된 바와 같이, C57Bl6/J 마우스 태아로부터 준비하였다.
캄토테신을 시그마 (ref C9911 - (S)-(+)-캄토테신)로부터 입수하였다.
마우스 1차 뉴런을 독소의 시험감염 전 48시간에 첨가된 상이한 농도의 화합물 C의 부재 또는 존재 하에 비히클 또는 독소와 인큐베이션하였다. 1 μM 캄토테신의 첨가 후, 세포를 웰당 140 μL의 최종 부피로 24시간 동안 추가로 인큐베이션하였다.
예상한 바와 같이, 1 μM 캄토테신과 세포의 24시간 동안의 인큐베이션은 대조군의 57.7±1.6%의 세포 생존력의 감소를 유발하였다. 캄토테신-처리 전 48시간 동안 사전인큐베이션시, 화합물 C는 용량-의존적 신경보호 (종-형상의 곡선)를 유도하였고, 10 및 100 nM의 용량에서, 각각 대조군의 73.5±1.5% 및 73.4±5.9%의 세포 생존력으로 최대 효과를 가졌다. 10 nM, 100 nM에서 화합물 C의 신경보호 및 항아폽토시스 효과는 각각 37.3%, 37.2%였다. (도 8)
결론적으로, 데이터는 화합물 C가 캄토테신에 의해 유도된 뉴런 사멸에 대하여 보호를 제공함을 시사한다.
화합물 C (SBC003) 및 허브 B (SBC002)의 실시예 I-8
사카로마이세스 세레비시아에에서 연령-유도 단백질 응집체에 대한 화합물 C (SBC003) 및 허브 B (SBC002)의 효과
배경: 대부분의 생물체에서 노화는 손상되고 미스폴딩된 단백질의 축적과 연관이 있다. 토마스 니스트룀(Thomas Nystroem)의 군으로부터의 선구 연구는 이것이 출아 효모에서도 마찬가지라는 것을 확인하였다 (Aguilaniu, et al. 2003 14;299(5613):1751-3). 카르보닐화된 단백질은 복제적 노화 모체 효모 세포에 축적된다. 흥미롭게도, 이들 카르보닐화된 단백질은 단백질 디스어그레가제 Hsp104를 모집한다. Hsp104는 다양한 세포 활성과 연관된 육량체성 ATPase (AAA+) 단백질 및 트랜스로카제이다 (Sweeny EA, Shorter J. J Mol Biol. 2016;428(9 PtB):1870-85). Hsp104는 ATP 가수분해를 가용성 프리아밀로이드 올리고머에 포획된 단백질의 분해 및 재활성화, 무질서한 단백질 응집체, 및 안정한 아밀로이드 또는 프리온 이형태체에 커플링시킨다. HSP104는 노화 세포에서 미스폴딩된 단백질의 응집으로 인해 내생적으로 생성된다.
목적: 화합물 C (SBC003) 및 허브 B (SBC002) 추출물의 작용 방식을 이해하기 위해, 화합물 C (SBC003) 및 허브 B (SBC002) 추출물이 출아 효모 시스템에서 연령-유도 단백질 응집체의 형성 및 유지에 미치는 영향을 시험하였다.
방법: 노화 효모 세포에서, 연령 유도 단백질 응집체는 샤페론과 코샤페론의 특이적 세트를 모집하므로 현미경으로 쉽게 가시화될 수 있다. Hsp104는 녹색 형광 단백질 태그 (Hsp104-GFP)와의 융합으로서 내생적으로 발현되어 이들 세포에 병소를 형성한다. (도 9a)
연령-유도 Hsp104-GFP 병소의 형성에 미치는 영향을 시험하기 위해, 노화 세포를 얻고 화합물 C (1 μM, 10 μM 및 30 μM), 허브 B (10 μg/ml), 에탄올 (0.3%, 비히클 단독) 또는 임의의 처리의 부재 하에 배양하였다. 비처리 어린 세포는 단순한 기하급수적인 성장을 통해 얻었다.
형광 증백제 28로 출아흔을 염색함으로써 연령을 결정하였다. 모든 조건에서, 노화 세포는 평균 연령 10 세대 (n>73개 세포)와 유사한 연령 분포를 가졌다. (도 9b)
비처리되거나 비히클 단독으로 처리된 대부분의 노화 세포는 하나의 Hsp104-GFP 병소 (각각 세포의 68.2±3.7% 및 58.7±10.6%)를 함유하였다. 10 μM 또는 30 μM에서 화합물 C (SBC003)로 세포의 처리는 Hsp104-GFP 병소를 가진 세포의 비율을 유의하게 감소시켰다 (각각 37.5±6.0% 및 34.3±13.7%, P<0.001). 1 μM에서 화합물 C를 사용한 처리는 Hsp104-GFP 병소 함유 세포의 비율을 감소시켰으나, 이 감소는 통계적으로 유의하지 않았다 (46.2±4.8%, P>0.05). 허브 B 추출물 (SBC002)로의 세포의 처리는 Hsp104-GFP 병소 함유 세포의 유의하게 감소된 비율을 나타냈다 (29.7±5.5%, P<0.01). (도 9c).
Hsp104는 단백질 응집체에 대항하고 이를 단일 단백질 침착물로 운반하는 단백질의 부류에 속하기 때문에, 모든 조건에서 노화 세포 중의 Hsp104-GFP의 농도를 측정하였다. Hsp104-GFP의 강도는 어린 세포에서보다 노화 세포에서 훨씬 더 높았다. 그러나, 화합물 C 및 허브 B는 이 증가의 정도를 감소시켰는데 이는 Hsp104-GFP가 이들 화합물에 노출된 세포에 덜 농축되었음을 시사한다. Hsp104-GFP 강도는 시험된 최고 농도 (30 μM) 및 허브 B 처리와 비교하여 더 낮은 화합물 C 농도 (1 및 10 μM)에서 더 높은데, 이는 Hsp104-GFP 병소를 가진 세포의 백분율에 이들 처리가 미치는 영향과 상관관계가 있다. (도 9d)
결론적으로, 화합물 C 및 허브 B 추출물은 정상 효모 노화 동안에 연령-유도 단백질 응집을 예방 및/또는 청소하는데 강한 효과를 나타냈다.
기능성 식품 (SBC003)의 실시예 (II)
화합물 C (트리펜타데카노인)는 특정 허브에서 발견될 수 있는 천연 지질이나 인간/동물의 밀크에서 또한 찾을 수 있다. 어떠한 효율적인 치료 없이 불치병을 앓은 실시예 II에 기재된 환자들은 SBC003을 함유하는 기능성 식품을 자발적으로 요청하였다.
기능성 식품의 실시예 II-1
이 사례는 시신경 위축으로 8년 동안 진단받았고 시력을 잃은 49세의 대만 여성에 관한 것이다. SBC003을 함유하는 기능성 식품의 형태를 받은 1일째, 그녀는 시야가 더 밝고 더 선명하다고 느꼈고, 뚜렷한 흑백 대비로 대상을 더 잘 구분할 수 있었다. 그녀는 기분이 좋아졌다고 느꼈다. 그녀는 손바닥과 발에서 열 흐름을 느꼈다. 그 다음에 그녀는 7일 동안 약 7 mg/일의 SBC003을 함유하는 기능성 식품의 형태를 먹었다. 그녀는 식사시 그녀의 눈 앞에서 젓가락을 볼 수 있었으며; 그릇을 씻을 때 그녀의 손을 볼 수 있었다. 그녀는 어둠 속에서 빛에 더 민감하게 느꼈다. 그녀는 그녀의 손바닥과 발에서 온기를 느꼈다. 약 1개월 후, 그녀는 더 밝고 더 나은 시력을 가졌다.
기능성 식품의 실시예 II-2
이 사례는 49세의 대만 남성에 관한 것이다. 그는 9년 동안 근위축성 측삭 경화증 (ALS)으로 진단받았다. 그는 인공호흡기 보조 호흡을 하고 한 손가락을 움직일 수 없는 상태로 침대에 누워 있었다. 그는 하루에 많아야 30분/일 스스로 호흡할 수 있었다. 그는 SBC003을 함유하는 기능성 식품의 형태를 약 10 mg/일 먹었다. 약 1개월 그는 약 55분/일 스스로 호흡할 수 있었다. 그는 그의 등에서 따뜻한 에너지를 느꼈다.
기능성 식품의 실시예 II-3
이 사례는 48세의 중국 남성에 관한 것이다. 그는 떨림, 강직, 움직임의 둔화, 및 걷기 곤란이 있는 원발성 파킨슨병으로 9년 동안 진단받았다. 그는 초기 효과로 레보도파 및 트리헥실페니딜로 8년 동안 치료받았으나 점차 효과를 잃었다. 3년 전, 그는 약물이 효과가 없으므로 운동 증상을 감소시키기 위해 깊은 뇌 자극을 위한 미세전극을 배치받았다. 그는 여전히 발의 비정상적인 떨림의 증상, 강직, 움직임의 둔화, 걷기 곤란의 증상을 나타냈다. 그는 SBC003을 함유하는 기능성 식품의 형태를 약 10 mg/일을 먹었다. 약 1주일 후, 발의 비정상적인 떨림이 약 2주 동안 개선되었다. 그 다음에 몇 가지 이유로 그가 중단한 후, 그 후에, 그는 추가 보름 동안 다시-시작하고 그의 증상은 다시 개선되었다.
기능성 식품의 실시예 II-4
이 사례는 49세의 대만 남성에 관한 것이다. 그는 사지 경련으로 소뇌 위축으로 진단받았고 24시간 간호 원조를 필요로 하며 마비되어 침상에 있었다. 그는 미소지거나 말할 수 없었고, 다른 사람들과 의사 소통할 수 없었다. 사람들이 그와 이야기할 때, 그는 얼굴 표정이 없었다. 그는 SBC003을 함유하는 기능성 식품의 형태를 약 10 mg/일로 먹었다. 약 1개월 후, 그는 미소짓기 시작했고, 얼굴에 얼굴 표정을 짓고 심지어 사람들이 그와 이야기할 때 말하는 경향이 있었다.
기능성 식품의 실시예 II-5
이 사례는 생년월일이 1959년 9월 22일인 중국 남성에 관한 것이다. 2015년 12월에, 그는 10미터 높이의 건물에서 우발적 추락으로 인해 흉추 및 요추에 심한 척추 골절을 가졌다. 그 때에, 그는 걸을 수 없었고, 앉을 수 없었으며, 마비되어 침상에 있었고, 그의 하퇴에 감각을 잃었으며 요추 부위에 심한 통증을 가졌다. 약 6개월 후, 그는 약간 개선되었고 약 1시간/회 동안 앉을 수 있었으나, 다른 증상은 지속되었다. 그의 CT는 "특히 T10-T11 디스크 수준에서 척추관 협착증으로 골 물질의 후방돌진으로 높이가 대략 40-50% 감소된, 전방 피질의 견열 골절 뿐만 아니라 후방 피질로 연장되는 골절 선을 가진 T11 척추체의 상위 종판의 복합 버스트형 압박 골절"의 진단을 나타냈다.
그는 SBC003을 함유하는 기능성 식품의 형태를 약 20 mg/일 먹었다. 1일째, 그는 SBC003을 복용한 후 그의 전체 척추 부위 (특히 요추 부위)에서 열의 흐름을 느꼈다. 약 10일 동안, 그는 하기 증상이 크게 개선되었다: 1) 남아있는 요통이 SBC003을 복용하기 전 통증의 40%로 감소되었고; 2) 그는 SBC003을 복용하기 전에 단지 1시간/회와 비교하여 최대 2시간/회 동안 앉아 있을 수 있었다. 게다가, 그는 그의 척추 부위에서 따뜻한 흐름을 종종 느꼈고 그의 하퇴는 이전보다 경련이 덜 하였다.
기능성 식품의 실시예 II-6
이 사례는 10년 동안 만성 신부전을 갖고 있으며 2-3 년간 혈액 투석 (매주 3회)으로 치료받고 있는 대만 여성에 관한 것이다. 그녀는 어떠한 소변도 받지 않았다. 그녀의 혈청 크레아티닌은 9.21 mg/dl의 평균값으로, 매우 높은 수준으로 유지되었다. 그녀는 SBC003을 함유하는 기능성 식품의 형태를 약 1개월 동안 약 10 mg/일 내지 25 mg/일 먹었다. 약 2개월 후, 그녀는 하루에 1회 10 ml의 소변을 받았으며; 약 2-3개월 동안 50-100 mg/일로 증가한 후, 그녀는 하루에 총 약 50 ml의 부피로 약 2-3 회 소변을 받았다. 그녀의 혈청 크레아티닌은 8.88, 8.97, 8.55, 9.12 mg/dl로, 평균 8.88 mg/dl로 감소되었다. 그녀의 혈당 수준은 130~180 mg/dl (치료 전)와 비교하여 70-105 mg/dl로 감소되었다.
기능성 식품의 실시예 II-7
이 사례는 약 29년 동안 천식으로 진단받은 생년월일이 1974년 9월 12일인 대만 남성에 관한 것이다. 천식은 추위를 느끼거나 이른 아침에 또는 찬물을 마시거나 계단을 오를 때마다 심하게 발생하였다. 지난 29년 동안, 그는 천식 발작이 있는 경우, 코르티코스테로이드 또는 기관지확장제로 치료받았다. SBC003을 함유하는 기능성 식품의 형태 약 5 mg을 1 또는 2회 동안 먹은 후, 그는 그의 증상이 크게 개선됨을 느꼈다. 찬물을 많이 마시거나 추위를 느끼더라도, 천식 증상은 심지어 촉발 시점에도 발생하지 않았다.
기능성 식품의 실시예 II-8
이 사례는 약 20년 동안 천식으로 진단받은 생년월일이 1977년 7월 4일인 대만 남성에 관한 것이다. 천식은 빈번히 발생하였다. 그는 천식 발작이 있는 경우, 2주에 1회의 빈도로, 기관지확장제로 치료받았다. SBC003을 함유하는 기능성 식품의 형태를 약 5 mg/회 수회 동안 복용 후, 천식의 증상은 심지어 촉발시에도 크게 개선되었다.
허브 B (SBC002)의 실시예 (III)
실시예 III에 기재된 환자의 치료에 사용된 SBC002는 오피오글로숨 써말, 오피오글로숨 페티올라툼 또는 오피오글로숨 레티쿨라툼의 선택된 부분의 건조 분말의 형태로 제조되었다.
SBC002로 치료된 환자의 사례 연구
실시예 III-1 사례 SBC002-001
1. 2002년에 진단: 시신경염 (좌측)
사례 SBC002-001은 생년월일이 1966년 9월 22일인 여성 환자에 관한 것이다. 그녀는 2002년에 그녀의 왼쪽 눈에서 흐린 시력의 첫 발병을 가졌고 발병 7일 후 스테로이드 펄스 요법을 받았다. 그러나 시력은 개선되지 않았고 그녀의 잔류 시력은 20 cm에서 손 동작을 보였다. 어떠한 사지 위약감도 없었다.
2. 2007년에 진단: 시신경염 (우측); 시신경 위축 (좌측)
2007년 3월 2일에, 그녀는 2일 동안 그녀의 오른쪽 눈이 흐린 시력의 급성 발병 때문에 중국 의과 대학 병원(China Medical University Hospital) (CMUH)에 입원하였다. 상대 구심신경 동공 결손 (RAPD) 징후는 양성이었다. 시신경염이 의심되었다. 그녀는 스테로이드 펄스 요법을 받았다.
3. 2008년 5월에 진단: 시신경 위축 (좌측); 시신경염 (우측), 추정 다발성 경화증; 흉부 척수병증
2008년 3월 26일에, RNFL 두께 평균 분석은 43.51 μm (OS), 77.60 μm (OD)를 나타냈고; 2008년 5월 19일에 RNFL 두께 평균 분석은 검출 불가능 (< 10 μm) (OS), 72.33 μm (OD)를 나타냈다.
2008년 5월 24일에, 그녀는 5일 동안 눈 운동에 의해 유도된 눈 통증으로 인해 오른쪽 눈에 흐린 시력을 가졌다. 시신경염 (OD)의 추적진단 하에, 그녀는 스테로이드 펄스 요법을 위해 입원하였다. 자기 운동 유발 전위(Magnetic Motor Evoked Potential) (MEP) 연구는 왼쪽 C5 척추의 수준 초과의 병변; 오른쪽 C5 및 L2 척추의 수준 사이의 병변, 및 양측 L2 척추의 수준 미만의 병변을 시사하였다.
2008년 5월 27일에, 패턴 및 고글 시각 유발 전위 (VEP) 연구 둘 다는 우측 자극으로 P100 파의 진폭 감소와 함께 장기간 잠복기 및 P100 파 좌측 자극의 어떠한 픽업도 나타내지 않았다. VEP는 양측의 전-교차성 병변을 시사하며, 좌측에서 더 두드러졌다. 체성감각 유발 전위 (SSEP) 연구는 상지 둘 다에서의 말초 신경 병변; 양측 C5 및 L2 척추의 수준 사이의 병변(들); 좌측 L2 척추의 수준 미만의 병변을 나타냈다.
뇌 MRI는 우측 시신경염의 진단과 양립할 수 있었으며 약간의 높은 신호 소견을 보여주었다. 펄스 요법 후, 다발성 경화증이 의심되었다. 2008년 5월 31일에, 그녀는 시신경 위축 (OS); 시신경염 (OD), 추정 다발성 경화증; 흉부 척수병증의 진단하에 퇴원하였다. 퇴원 후, 그녀는 프레드니솔론 5 mg bid; 메코발란민 250 mg Qd; 비타민 B12 QID를 포함한 의약을 권고받았다.
4. 2008년 8월에 진단: 다발성 경화증; 재발성 우측 시신경염; 시신경 위축의 후유증이 있는 오래된 좌측 시신경염; 다발성 경화증 연관 척수병증
2008년 8월 1일에, 그녀는 1개월 동안 오른쪽 시력이 악화되었다. 패턴 시프트 방법에 의해 수행된 VEP 연구: 왼쪽 눈 또는 오른쪽 눈 자극 각각에서 VEP 파의 어떠한 픽업도 보이지 않았다. MS의 추적진단 하에, 그녀는 스테로이드 펄스 요법 및 IFN-1b 요법을 위해 입원하였다. 그녀는 스테로이드 펄스 요법 및 IFN 요법을 제공받았고 증상이 개선되었다.
5. 2009년 1월에 진단: 다발성 경화증 (급성 재발); 경추 척수병증; 불면증; 신경인성 방광.
2009년 1월 10일에, 그녀는 의심되는 재발성 경추 척수염으로 3일 동안 우측 위약감을 가진 목 통증의 급성 발병을 가졌다. 다음날 그녀는 오른쪽 다리가 쉽게 경련을 일으키고 저린감 수반 오른손 압통을 느낀 다음에, 우측 위약감이 나타났다. 오른손은 펜과 젓가락을 잡는 데 어려움을 겪었고, 오른 다리는 걸을 때 올리는데 어려움과, 계단 오르내리기에 어려움을 겪었다. 그녀는 스테로이드 펄스 요법을 받았다. 그녀는 목 통증이 가라 앉았다는 것을 느꼈으나, 우측 위약감을 느꼈다.
6. 2013년 6월에 피질 위축으로 진단받음
2013년 6월에, 그녀의 뇌 MRI는 뇌실 및 열구가 확장되었다는 것을 보여주었다. 피질 위축이 진단되었다.
7. 2014년 1월부터 쇼그렌 증후군으로 진단받음
2014년 1월에, 그녀는 양측의 시력 상실, 흐린 시력, 피로도, 사지에서 감각 감퇴 및 감각 이상 및 왼쪽 팔뚝 가려움의 진행성 저하로 인해 보건복지부 타이충 병원(Taichung Hospital, Ministry of Health and Welfare)에서 신경학적 OPD가 추적검사되었다. 그녀는 쇼그렌 증후군, 습진으로 진단받았고 게니퀸 (히드록시클로로퀸 술페이트) 200 mg BID의 치료를 주로 받았다.
8. 2015년 12월 21일부터 SBC002 (허브 B) 치료
2015년 12월 21일 이전에, 그녀의 두 눈은 심하게 흐린 시력을 가졌다. 2015년 12월 21일에, 그녀는 0.01 - 0.02 g/일의 투여량으로 SBC002의 첫 번째 투여를 시작하였다. 그녀는 두 눈의 뒤쪽에 강한 에너지 장을 보고하였다.
첫 번째 투여 후 5일째, 그녀는 그녀의 눈 앞에서 손가락을 볼 수 있었다.
17일째, 그녀는 식사시 젓가락이 움직이는 것을 볼 수 있었으며 한편 그녀는 전에는 그것들을 볼 수 없었다. 같은 날, 그녀는 보건복지부 타이충 병원을 방문하였고, VEP 연구 (고글 방법에 의한)는 장기간 잠복기 및 왼쪽 또는 오른쪽 눈 자극 각각에서 P100 반응의 꺽인 파형을 나타냈다 (측정된 잠복기: 왼쪽=190.3ms; 오른쪽=190.8ms). 안저 촬영은 어떠한 명백한 망막병증도 나타내지 않았다.
27일째, 그녀는 30 cm 거리 이내에 흰 종이를 볼 수 있었고, 낮과 밤, 거리에서 얼룩말 횡단 보도, 및 건물의 윤곽을 확인할 수 있었다. 그녀는 적색, 백색, 흑색 및 오렌지색의 색상을 볼 수 있었고; 그녀는 저녁에 가로등을 볼 수 있었다.
32일째, RNFL 두께 평균 분석 결과는 32 μm (OS); 38 μm (OD)를 나타냈다.
120일째, 그녀의 뇌 MRI는 실비우스 틈새를 나타냈고 대뇌 열구가 넓혀지지 않았다. 뇌실은 확장되지 않았다. 그녀의 뇌 MRI는 "피질 위축"의 진단을 내리지 않았다.
약 SBC002 치료 후 약 14개월, RNFL 두께 평균 분석은 71 μm (OS); 49 μm (OD)를 나타냈다.
9. 논평
2002년부터 2015년까지, SBC002를 복용하기 전에, 50세 여성 환자는 다발성 경화증 및 관련 합병증을 13년 동안 앓아왔다. 그녀는 왼쪽 시신경 위축을 7년 동안, 오른쪽 시신경염을 8년 동안; 피질 위축을 2.5년 동안 가졌다. 2008년 8월에, 그녀의 VEP 연구는 왼쪽 또는 오른쪽 눈 자극에서 VEP 파의 어떠한 픽업도 나타내지 않았다. 왼쪽 눈의 RNFL는 검출 불가능이었다 (<10 μm). 그녀가 5년 동안 스테로이드, 인터페론, 면역억제요법으로 치료받았긴 하였지만, 다발성 경화증의 과정은 신경변성 성질로 진행되었다.
SBC002 복용 약 5일 그녀의 시력이 부분적으로 회복되었고; 17일 후, VEP 연구는 왼쪽 또는 오른쪽 눈에서 P100 파가 돌아왔음을 나타냈고, 이는 양쪽에서의 시신경의 기능 회복을 나타내는 것이고; 32일 후, 왼쪽 눈에서 그녀의 RNFL는 < 10 μm에서 32 μm로 증가하였고; 14개월 후, 그녀의 RNFL 두께는 71 μm로 증가되었다. 그녀의 뇌 피질 위축은 허브 B 처리의 4개월 후 사라졌다. 주요 공동 의약, 히드록시클로로퀸 술페이트는 돌이킬 수 없는 망막 손상, 색소침착의 변화를 가진 망막병증 및 시야 결손의 경고를 갖는다. 13년의 진행성 질환 및 시신경 위축의 상황에서 그녀의 시력 회복 이전에 중요한 사건을 신중하게 조사한 결과, 그녀의 시력 및 피질에서의 회복은 자연적인 질환 과정에 의해 설명될 수는 없었다. 이 사례에서 예상치 못한 시력 회복 및 명확한 시간적 관계에 근거하여, 시신경 위축 및 피질 위축의 회복에 있어서 SBC002의 직접적인 인과관계의 역할이 결론 지어졌다.
실시예 III-2 사례 SBC002-002
이 사례는 생년월일이 1966년 6월 22일인 여성 환자에 관한 것이다. 2016년 2월에, 그녀는 뇌졸중 (뇌출혈)에 걸렸다. 뇌졸중 후, 그녀는 곧 회복되었으나 반맹의 증상이 남아 있었다. 그녀는 저녁에 잘 잘 수 없었고 간헐적으로 2-3시간 동안만 잘 수 있었다. 그녀는 SBC002 10 mg을 복용하였다. 이 허브를 복용하는 저녁에, 그녀는 모닝 콜에 의해 깨어날 때까지 8시간 동안 밤새도록 잤다.
실시예 III-3 SBC002를 함유하는 허브 혼합물 (SBC001)의 효과 및 안전성에 대한 관찰 사례 연구
다발성 경화증 (MS), 시신경염 (ON), 급성 염증성 탈수초성 다발신경병증 (AIDP), 및 뇌 신경 질환을 포함한 신경계 질환의 치료에 있어 아직 충족되지 않은 의학적 필요성이 존재한다. SBC001 (약 5-10%의 SBC002 함유)로 명명된 허브 혼합물의 임상 효능 및 안전성을 관찰하기 위해 후향적 및 전향적 사례 차트 검토 연구가 수행되었으며, 이는 신경계 질환 치료의 핵심 성분으로서 사용되었다.
병원 기록으로 충분히 입증된 9명의 환자를 후향적으로 (n=8), 또는 전향적으로 (n=1) 수집하였다. 질병 발병 날짜, 병원 진단 및 치료, 증상, 효능 및 안전에 관한 정보를 수집하고 기록하였다. 전향적으로 뒤따르는 한 환자에 대해, 매일 증상을 기록하는 일기를 사용하여 환자가 보고한 결과를 수집하였다. 기재적 분석은 모든 파라미터에 대해 수행되었다.
질환의 발병 연령은 14-71세였다. 남성: 여성 비는 4:5이었다. 5명의 환자는 MS에 걸렸고, 2명의 환자는 AIDP에 걸렸고, 2명의 환자는 뇌 신경 마비에 걸렸다. 8명의 환자가 시각 증상을 가졌으며; 6명의 환자가 사지 위약감 또는 저린감을 가졌다. 치료 전 질환의 지속기간은 4일에서 5년으로 다양하였으며, 대다수 (6/9) < 6개월이었다. 모든 환자는 임상 경과, 증상, 신경학적 검사, 및 MRI 소견에 의해 뒷받침되는 병원에 의해 진단받았다.
그들 중, 6/9명의 환자가 병원 표준 요법 (스테로이드, 면역억제제, 비스테로이드 항염증성 약물)에 의해 심하게 치료를 받아 왔었으며; 3/9명의 환자에게 영양 또는 지지 요법 (예를 들어 비타민)이 제공되었다. 그들 중, 6/9명 환자의 증상이 병원 치료 후 일시적으로 개선되었으나 재발했기 때문에, 이들이 대안적인 의약을 찾았으며; 3/9명의 환자는 병원 치료에 반응하지 않았다.
SBC001에 함유된 SBC002의 동등한 투여량은 0.05-0.2 g/회, 3-5 회/일이었다. 6명의 환자가 이 허브 혼합물만으로 치료를 받았으며; 3명의 환자가 약 2주 동안 스테로이드와 공동으로 사용되었고, 그 다음에 허브 혼합물을 복용하였다. 그들 중, 7명의 환자는 치료 요법을 준수할 수 있었으며; 2명은 치료 요법을 따를 수 없었다.
총 7/9명의 환자가 이 허브 치료 후 그들의 증상이 완전히 회복하였으며; 1/9명의 환자가 개선되었으며; 1/9가 응답하지 않았다. 효과까지의 시간은 1일 내지 2개월이었다. 완료까지의 시간은 25일 내지 6개월이었다.
시각 증상 (n=8): 시각 증상을 가진 6/8명의 환자가 25일 내지 6개월 이내에 완전히 회복되었고; 효과까지의 시간은 1일 내지 2개월이었다. 1명의 환자가 개선되지 않았으며; 1명의 환자가 개선되었다.
사지 증상 (n=6): 사지 위약감 또는 저린감을 가진 3/6명의 환자가 3-6개월 이내에 완전히 회복되었다. 효과까지의 시간은 1일 내지 1.5개월이었다.
의료 영상 (n=3): 치료 전후에 대응 뇌 MRI 결과를 가진 3명의 환자 중, 그들 중 2명은 MRI 개선으로 나타났다.
4명의 환자는 1-2개월 후 기억 개선을 또한 보고하였다.
치료 이탈 지속가능성: 마지막 추적 검사까지, 6명의 환자가 완전히 회복되고 치료를 중단하였다. 6명의 환자 중, 이들은 1.5년, 1.5년, 3.8년, 4.5년, 4.5년, 22년 동안 각각 무증상 생존을 보고하여 왔다.
5명의 환자에서, 이들은 치료를 스스로 중단하였고 증상은 신속히 재발하였으며; 치료를 재개한 후, 증상이 다시 개선되었다. 양성 탈시험감염 및 양성재시험감염은 이 치료를 사용한 증상 개선 사이의 인과 관계가 배제될 수 없음을 나타냈다.
일반적으로, SBC002를 함유하는 허브 혼합물 (SBC001)은 안전하고 내약성이 양호하다. 한 환자는 치료 시작시 구토를 보고하였으며 3일 동안 치료 중단 후 해결되었다. 어떠한 다른 유해 사건 또는 독성도 관찰되지 않았다.
관찰 사례 검토를 기반으로, SBC002를 함유하는 이 허브 혼합물 (SBC001)은 MS, ON, AIDP, 뇌 신경 질환 및 다른 신경계 질환 환자에게 임상적 이점을, 유리한 안전성 프로파일과 함께 나타냈다.
SBC002로 치료된 건강한 지원자의 사례 연구
실시예 III-4 사례 SBC002-003
본 사례는 생년월일이 1974년 9월 12일인 건강한 남성 대상체에 관한 것이다. 처음으로, SBC002 0.005 g을 복용한 10-30분 후, 그는 자신의 시야가 더 밝고 선명해지는 것을 느꼈다. 그의 기억 및 반응 속도가 또한 증가하였다.
실시예 III-5 사례 SBC002-004
본 사례는 생년월일이 1983년 5월 16일인 건강한 여성 대상체에 관한 것이다. SBC002 0.002 g를 복용한 후 처음으로, 그녀는 그녀의 마음 상태가 더 선명했고 그녀의 생각이 더 빨랐다고 느꼈다.
실시예 III-6 사례 SBC002-005
본 사례는 생년월일이 1977년 7월 4일인 건강한 남성 대상체에 관한 것이다. SBC002 0.005 g을 복용한 후 처음으로, 그는 자신의 시야가 더 밝고 선명해지는 것을 느꼈다. 그의 기억은 더 좋아졌고, 그의 반응이 더 빨랐다.
실시예 III-7 사례 SBC002-006
본 사례는 생년월일이 1970년 7월 30일인 건강한 남성 대상체에 관한 것이다. SBC002 0.01 g을 처음 투여한 후 첫 날 (2016년 1월 15일), 그는 자신의 시야가 더 밝고, 시력이 높아졌다는 것을 느꼈으며; 컴퓨터를 오랜 시간 동안 본 후 그의 눈의 피로가 감소되었다는 것을 느꼈으며; 그의 눈 내부의 압력이 감소되었다는 것을 느꼈다. 그는 5일 동안 지속된 더 빠르고 더 명확한 사고를 느꼈다.
실시예 III-8 사례 SBC002-007
이 사례는 생년월일이 1974년 7월 29일인 두 눈 모두에서 900-950 도의 근시를 가진 여성 대상체에 관한 것이다. 0.01 g을 처음 투여한 후 첫날, 20분 내에, 그녀는 그녀의 왼쪽 눈이 고온 에너지에 의해 둘러싸여 있음을 느꼈고, 30분 내에 그녀의 오른쪽 눈이 또한 고온 에너지에 둘러싸여 있었고, 40분 내에 전체 뇌가 고온 에너지로 강화되었음을 느꼈으며 그녀는 매우 조용한 마음 상태를 느끼기 시작했다. 그 후, 그녀는 0.01 g/일을 복용하였으며, 그녀는 7시간의 업무 후 눈 피로를 느끼지 않았다고 보고하였다 (전에는 그녀는 4-5시간의 컴퓨터 응시 후에 눈 피로를 종종 느꼈다). 그녀는 SBC002 치료 1개월 후 보다 선명한 시력 및 덜한 눈 피로를 느꼈다. SBC002 중단 후, 그녀의 시력이 감소하였으며 그녀의 눈 피로는 SBC002 복용 전과 유사하였다.
세포 모델에서 허브 B 추출물 (SBC002)의 실시예 (IV)
허브 B 추출물의 실시예 IV-1
AβO 처리 이전 48시간 첨가시 또는 AβO 처리 없이 마우스 1차 뉴런 모델에서 허브 B (SBC002) 추출물의 효과
이 연구의 목적은 허브 B의 추출물이 시험관내 뉴런 모델에서 뉴런 사멸을 구출할 수 있는지를 결정하는 것이다. 그 목적으로, Aβ1-42 올리고머 (AβO)로 시험감염된 마우스 1차 피질 뉴런을 사용하여 6 가지 농도에서 허브 B 추출물의 신경-보호 효과를 조사하였다. β-아밀로이드 펩티드는 여러 가지의 병리학적 변화를 촉발하여 최종적으로 AD를 포함한 다중 신경계 질환에서 뉴런 기능장애 및 변성을 야기한다.
배아 일 16-17로부터의 피질 뉴런을 C57BL6/J 마우스 태아로부터 준비하였다. 간단히 말하면, 해리된 피질 세포를 1.5 μg/mL 폴리오르니틴 (시그마)으로 미리-코팅된 48-웰 플레이트에 플레이팅하였다 (50.000개 세포/웰). 세포를 혈청이 없고 호르몬, 단백질 및 염으로 보충된 화학적으로 정의된 둘베코 변형 이글/F12 배지에서 배양하였다. 배양물을 가습된 6% CO2 분위기에서 35℃에서 유지하였다. 마우스 피질 뉴런을 비히클 또는 상이한 농도의 허브 B 추출물을 사용한 48시간 사전-인큐베이션 후 24시간 동안 1.0 μM AβO에 노출시켰다. MTT 검정을 사용하여 AβO-유도 신경독성을 평가하였다.
허브 B 추출물의 제조:
I. 스톡 용액 (10 mg/ml)을 준비하고, 1 ml DMSO를 1.5 ml 에펜도르프 튜브 중 허브 B (10 mg)에 첨가한 다음에, 에펜도르프 튜브를 30 - 37℃의 온도에서 밤새 회전시킨다.
II. 상청액 (스톡 용액)을 취한 다음에, 용액을 세포 배양 배지에 의해 1000배로 희석하고; 최고 용량 용액을 수득한다 (10 μg/ml).
III. 최고 용량 용액을 세포 배양 배지를 사용하여 3배 연속 희석에 의해 희석하여 다른 5 가지 투여량의 3.2 μg/ml, 1 μg/ml, 320 ng/ml, 100 ng/ml, 32 ng/ml를 달성한다.
예상한 바와 같이, 1.0 μM AβO와 피질 뉴런의 24시간 동안의 인큐베이션은 세포 생존력의 48.6±1.4% 만큼의 감소를 유발하였다. DHA (0.05 μM, 양성 대조군으로서 사용됨)는 AβO-유도 뉴런 사멸을 감소시켰고 나머지 세포 생존력이 대조군의 82.0±2.6%였다. 이들 대조군 데이터는 i) 예상한 바와 같이, DHA는 신경 세포를 보호하였으며, ii) AβO로 시험감염된 세포는 성공적으로 구출되어, 시험 시스템을 확인할 수 있었음을 입증한다.
뉴런을 48시간 동안 상이한 농도의 허브 B 추출물과 사전-인큐베이션한 후에 1 μM AβO로 24시간 동안 처리하였다. 결과는 상이한 농도의 허브 B 추출물의 존재 하에 용량-의존적 신경보호 효과를 유발하였다는 점이었다 (도 10 우측 및 도 11). 신경보호 효과는 모든 농도에서 100%였다 (세포 생존력 119.5±6.4%).
뉴런이 상이한 농도의 허브 B 추출물 단독으로 48시간 동안 사전-인큐베이션된 경우, 32 또는 10000 ng/mL의 허브 B 추출물 각각에서 111.4±3.2% 또는 112.9±4.1%의 더 높은 세포 생존력을 나타냈다 (도 10 좌측).
결론적으로, 데이터는 허브 B 추출물이 AβO-유도 신경독성에 대해 강한 보호를 제공함을 시사한다. 허브 B 추출물의 뉴런-성장-자극 효과가 관찰된다.
허브 B 추출물의 실시예 IV-2
공동으로, 또는 AβO 처리 후 3 및 6시간에 첨가시 마우스 1차 뉴런에서 허브 B 추출물의 효과
이 연구의 목적은 허브 B 추출물이 시험관내 뉴런 모델에서 뉴런 사멸을 구출할 수 있는지를 결정하는 것이다. 그 목적으로, Aβ1-42 올리고머 (AβO)로 시험감염된 마우스 1차 피질 뉴런을 사용하여 6 가지 농도에서 허브 B 추출물의 신경-보호 효과를 조사하였다. 구출 효과 또는 항아폽토시스 효과를 확인하기 위한 목적으로 상이한 시점 (공동으로 T0 그리고 AβO 후 T3, 또는 T6)에서 처리를 첨가하였다.
배아 일 16-17로부터의 피질 뉴런을 실시예 IV-1에 기재된 바와 같이, C57Bl6/J 마우스 태아로부터 준비하였다. 허브 B 추출물을 실시예 IV-1에 상기 기재된 바와 같이 유사하게 제조하였다.
허브 B 추출물을 마우스 1차 피질 뉴런에 상이한 시점 (공동으로 T0, AβO 후 T3, 또는 T6)에서 첨가하였다. 마우스 피질 뉴런을 24시간 동안 1.0 μM AβO에 노출시켰다. MTT 검정을 사용하여 AβO-유도 신경독성을 평가하였다. 예상한 바와 같이, 1.0 μM AβO와 피질 뉴런의 24시간 동안의 인큐베이션은 세포 생존력의 감소를 유발하였다 (플레이트 1, 2 및 3 각각에 대해 50.9±2.0%, 51.3±2.0% 및 51.7±4.2%). (도 12).
예상한 바와 같이, T0에서 첨가된 휴마닌 펩티드 (HNG, 양성 대조군)는 AβO-유도 뉴런 사멸을 강하게 감소시켰고 나머지 세포 생존력이 대조군의 91.6 ± 2.1%였다 (도 12). AβO 후 3 또는 6시간에 첨가시, HNG가 과거 데이터와 일치하여 세포 사멸을 예방하지 못하였다. 이들 대조군 데이터는 i) 예상한 바와 같이, HNG는 AβO와 공동으로 첨가되는 경우만 신경 세포를 보호하고, ii) AβO로 시험감염된 세포는 성공적으로 구출되어, 시험 시스템을 확인할 수 있음을 입증한다.
뉴런을 AβO와 공동으로 (T0), AβO 후 3 h (T3), 또는 AβO 후 6 h (T6)에 첨가된 상이한 농도의 허브 B 추출물로 처리하였다. 결과는, 허브 B 추출물의 경우: 모든 실험 조건 (즉 T0, T3 및 T6)에서, 허브 B 추출물은 용량-의존적 신경보호 효과를 나타냈다. 허브 B 추출물은 AβO와 공동으로 첨가시 AβO-유도 세포 사멸을 완전히 예방하였다 (각각 100 또는 1000 ng/mL의 농도에서, 세포 생존력 93.3±2.5% 및 102.2±6.3%). 게다가, 허브 B 추출물은 AβO 후 3 h에 첨가시 (각각 100 또는 1000 ng/ml의 농도에서, 세포 생존력 77.5±1.5% 및 91.6±4.9%) 및 AβO 후 6 h에 첨가시 (각각 100 또는 1000 ng/ml의 농도에서, 세포 생존력 59.9±2.2% 및 72.1±2.0%) AβO-유도 뉴런 사멸을 보호하였다. (도 12)
신경보호 및 항아폽토시스 효과의 백분율은 다음으로서 정의되었다: (허브 B 추출물 군의 뉴런 생존력 - 독소 처리군의 뉴런 생존력) / (100 - 독소 처리군의 뉴런 생존력) × 100%. 1000 ng/ml에서 허브 B 추출물의 신경보호 및 항아폽토시스 효과의 %는 T0, T3, 또는 T6 각각에서 100%, 82.7%, 42.2%였다. (도 12)
결론적으로, 데이터는 허브 B 추출물이 AβO-유도 신경독성에 대해 강한 신경보호, 항아폽토시스 및 신경-구출 효과를 제공함을 시사한다. 허브 B 추출물은 AβO-유도 뉴런 사멸을 예방하고 구출하는데 휴마닌보다 더 강력하였기 때문에 휴마닌과 구별된다.
허브 B 추출물의 실시예 IV-3
공동으로 또는 AβO 처리 후 3 및 6시간에 첨가시 AβO 처리된 인간 유도된 다능성 줄기 세포 (iPSC)에서 허브 B 추출물의 효과
허브 B 추출물이 Aβ1-42 올리고머 (AβO)로 시험감염된 인간 iPSC-유래 뉴런에서 뉴런 사멸을 구출할 수 있는지를 결정하기 위한 것. 이 세포 모델에서, AβO는 특이적 ELISA 검정을 사용하여 뉴런 특이적 에놀라제 (NSE)의 수준에 의해 모니터링될 수 있는 극적인 뉴런 사멸을 유도하였다. 구출 효과를 확인하기 위한 목적으로 허브 B 추출물을 상이한 시점 (공동으로 및 AβO 후)에 첨가할 것이다.
세포 (HIP-신경 전구세포, 글로벌스템, Cat#GSC-4312, Lot#20010260)를 웰당 60.000개 세포의 밀도로 96-웰 플레이트에 플레이팅하고 배양하였다. 실험 전에, 세포를 5주 동안 성숙시키고 가습된 5% CO2 분위기에서 37℃에서 유지하였다.
허브 B 추출물을 실시예 IV-1에 상기 기재된 바와 같이 유사하게 제조하였다.
세포를 AβO와 공동으로 (T0), AβO 후 3 h (T3), 또는 AβO 후 6 h (T6)에 첨가된 상이한 농도 (즉 10, 100, 1000 및 10000 ng/ml)의 허브 B 추출물의 부재 또는 존재 하에 비히클 또는 1 μM AβO와 인큐베이션하였다. 세포를 웰당 100 μL의 최종 부피로 24시간 동안 인큐베이션하였다. 양성 대조군의 경우, 세포를 0.1 μM HNG (즉 휴마닌 펩티드의 S14G 변이체)의 존재 하에 유사하게 처리하였다. 게다가, 공급자의 권고 (클론클라우드, Cat#SEA537Hu)에 따라 ELISA에 의해 뉴런 특이적 에놀라제 (NSE)의 검출을 사용하여 뉴런 소실을 모니터링하였다. 실험 조건당 총 6개의 데이터 포인트가 여기서 생성되었다.
인간 iPSC를 24시간 동안 1.0 μM AβO에 노출시켰다. NSE 검정을 사용하여 AβO-유도 신경독성을 평가하였다. 예상한 바와 같이, 1.0 μM AβO와 뉴런의 24시간 동안의 인큐베이션은 플레이트 1, 2 및 3 각각에 대해 49.7±5.5%, 37.5±3.0% 및 46.9±1.9% 만큼의 세포 생존력의 감소를 유발하였다.
예상한 바와 같이, T0에서 첨가된 휴마닌 펩티드 (HNG, 양성 대조군)는 AβO-유도 뉴런 사멸을 강하게 감소시켰고 뉴런 생존력이 대조군의 85.3±5.6%였다. AβO 후 3 또는 6시간에 첨가시, HNG는 과거 데이터와 일치하여 세포 사멸을 예방하지 못하였다. 이들 대조군 데이터는 i) 예상한 바와 같이, HNG는 AβO와 공동으로 첨가되는 경우만 신경 세포를 보호하고, ii) AβO로 시험감염된 세포는 성공적으로 구출되어, 시험 시스템을 확인할 수 있음을 입증한다. (도 13)
IPSC를 AβO와 공동으로 (T0), AβO 후 3 h (T3), 또는 AβO 후 6 h (T6)에 첨가된 상이한 농도의 허브 B 추출물로 처리하였다. 결과는 다음과 같았다: 모든 실험 조건 (즉 T0, T3 및 T6)에서 허브 B 추출물은 용량-의존적 신경보호 효과를 나타냈다.
100, 1000, 10000 ng/mL의 농도의 경우, 허브 B 추출물은 AβO와 공동으로 첨가시 (각각 세포 생존력 69.0±6.3%, 72.7±2.4% 또는 78.6±5.4%); AβO 후 3 h에 첨가시 (각각 세포 생존력 70.6±7.7%, 71.1±3.4%, 86.0±6.1%) 및 AβO 후 6 h에 첨가시 (각각 세포 생존력 56.6±5.0%, 53.9±14.9%, 74.9±6.7%) AβO-유도 세포 사멸을 예방하였다. 1000 ng/ml에서 허브 B 추출물의 신경보호 및 항아폽토시스 효과의 %는 T0, T3, 또는 T6 각각에서 57.4%, 77.6%, 52.8%였다. (도 13a, 13b, 13c). 결론적으로, 데이터는 허브 B 추출물이 iPSC로부터 유래된 인간 뉴런에서 AβO-유도 신경독성에 대해 강한 보호, 항아폽토시스 및 신경-구출 효과를 제공함을 시사한다. 허브 B 추출물은 이 세포 모델에서 AβO-유도 독성을 억제하는데 휴마닌보다 더 강력하였기 때문에 휴마닌과 구별된다.
허브 B 추출물의 실시예 IV-4
다중 뉴런 독소 처리된 마우스 1차 뉴런 모델에서 - 독소 처리 후 3시간에 첨가시 - 허브 B 추출물의 효과
허브 B 추출물이 다중 독소 부하된 시험관내 모델에서 뉴런 사멸을 구출할 수 있는지를 결정하기 위한 것. 상이한 유형의 독소로 시험감염된 마우스 1차 피질 뉴런을 사용하여 상이한 농도의 허브 B 추출물의 신경-보호 효과를 조사하였다. 구출 효과를 확인하기 위한 목적으로 허브 B 추출물을 독소 후 3시간 (T3)에 첨가하였다. 독소와 세포의 24시간 인큐베이션 후 MTT 검정을 사용하여 세포 생존력을 조사하였다.
배아 일 16-17로부터의 피질 뉴런을 실시예 IV-1에 기재된 바와 같이, C57Bl6/J 마우스 태아로부터 준비하였다. 허브 B 추출물을 실시예 IV-1에 상기 기재된 바와 같이 유사하게 제조하였다.
안정한 올리고머성 또는 원섬유성 제제는 과거 프로토콜에 따라 제조하였다. 상이한 독소의 출처는 다음과 같다:
Figure pct00015
바켐으로부터 Aβ25-35 피브릴 (H1192).
Figure pct00016
에보텍으로부터 인간 타우 (2N4R) 단백질.
Figure pct00017
r-펩티드로부터 인간 α-시뉴클레인 (ref 0101008603).
Figure pct00018
바켐으로부터 아밀린 (ref H-7905.1000)
Figure pct00019
바켐으로부터 프리온 단백질 118-135 (ref H-4206).
모든 처리를 DIV 6/7에서 48-웰 플레이트에서 삼중으로 행하였다. 세포를 독소 후 3시간 (T3)에 첨가된 상이한 농도의 허브 B 추출물 (1000, 10000 ng/ml)의 부재 또는 존재 하에 비히클 또는 독소 (명시된 최종 농도에서)와 인큐베이션하였다. 세포를 웰당 140 μL의 최종 부피로 24시간 동안 인큐베이션하였다.
사용된 양성 대조군 (T3에서 첨가된)은 널리 공지된 항아폽토시스성 펩티드로서 0.1 μM HNG (휴마닌 펩티드의 S14G 변이체)였다.
MTT 검정을 사용하여 세포 생존력을 모니터링하기 전에 24시간 동안 세포를 인큐베이션하였다. 간단히 말하면, 세포를 MTT (시그마, Cat #M2128-10G, Lot # MKBH7489V)로 1시간 동안 35℃에서 인큐베이션하였다. 그 목적으로, 14 μL의 5 mg/mL MTT (PBS 중에 가용화된)를 각각의 웰에 첨가하였다. 인큐베이션 후, 배지를 제거하고 세포를 150 μL DMSO로 10분 동안 용해시키고 빛으로부터 보호하였다. 포르마잔의 완전 가용화 후, 570 nm에서의 흡광도를 분광 광도계 비엠지 랩테크 플루오스타 오메가를 사용하여 기록하였다.
허브 B 추출물의 신경보호 및 항아폽토시스 효과의 백분율은 (허브 B 추출물 군의 뉴런 생존력 - 독소 처리군의 뉴런 생존력) / (100-독소 처리군의 뉴런 생존력) × 100%로서 정의되었다.
Figure pct00020
허브 B 추출물은 10000 ng/ml의 농도에서 82.9±2.2%의 세포 생존력으로, 39.9% 보호를 유발함으로써, 10 μM Aβ25-35 피브릴에 대항하여 항아폽토시스 및 신경보호 효과를 나타냈다 (도 14a).
Figure pct00021
허브 B 추출물은 10.000 ng/mL의 농도에서 59.4±2.1%의 세포 생존력으로, 34.0% 보호를 유발하는 최대 효과로, 1 μM 인간 타우 올리고머에 대항하여 용량-의존적 항아폽토시스 및 신경보호 효과를 나타냈다. (도 14b).
Figure pct00022
허브 B 추출물은 10.000 ng/mL의 농도에서 82.5±2.6% 및 82.2±2.2%의 세포 생존력으로, 각각 46.6% 및 62.5% 보호를 유발하는 최대 효과로, α-시뉴클레인 피브릴 및 α-시뉴클레인 올리고머에 대항하여 용량-의존적 항아폽토시스 및 신경보호 효과를 나타냈다 (도 14c 및 14d).
Figure pct00023
허브 B 추출물은 10.000 ng/mL의 농도에서 81.1± 2.5%의 세포 생존력으로, 27.9% 보호를 유발하는 최대 효과로, 5 μM 아밀린 피브릴에 대항하여 항아폽토시스 및 신경보호 효과를 나타냈다 (도 14e).
Figure pct00024
허브 B 추출물은 10.000 ng/mL의 농도에서 66.2± 3.3%의 세포 생존력으로, 23.5% 보호를 유발하는 최대 효과로, 2 μM 프리온 118-135 올리고머에 대항하여 항아폽토시스 및 신경보호 효과를 나타냈다 (도 14f).
결론적으로, 연구는 허브 B 추출물이 마우스 1차 피질 뉴런에서 Aβ25-35 피브릴-, 인간 타우 올리고머-, 인간 타우 피브릴-, 인간 알파-시뉴클레인 올리고머-, 알파-시뉴클레인 피브릴-, 인간 아밀린 피브릴- 및 프리온 올리고머-유도 신경독성에 대해 강한 보호, 신경-구출 및 항아폽토시스 효과를 제공함을 입증하였다. 허브 B 추출물은 이들 세포 모델에서 다중 독소-유도 뉴런 사멸을 억제하는데 휴마닌보다 더 강력하기 때문에 휴마닌과 구별된다.
허브 B 추출물의 실시예 IV-5
H2O2 처리된 마우스 1차 뉴런 모델에서 - 독소 처리 전 48시간 또는 독소 처리 후 3시간에 첨가시 - 허브 B 추출물의 효과
허브 B 추출물이 H2O2 부하된 시험관내 모델에서 뉴런 사멸을 구출할 수 있는지를 결정하기 위한 것. 구출 효과를 확인하기 위한 목적으로 허브 B 추출물을 독소 전 48시간 또는 독소 후 3시간 (T3)에 첨가하였다. 독소와 세포의 24시간 인큐베이션 후 MTT 검정을 사용하여 세포 생존력을 조사하였다.
배아 일 16-17로부터의 피질 뉴런을 실시예 IV-1에 기재된 바와 같이, C57Bl6/J 마우스 태아로부터 준비하였다. 허브 B 추출물을 실시예 IV-1에 상기 기재된 바와 같이 유사하게 제조하였다. 1 mM 트롤록스 (시그마, ref 238813)를 널리 공지된 항산화제로서 사용하였다.
마우스 1차 피질 뉴런을 0.25 mM H2O2로 24시간 동안 처리하였다. 허브 B 추출물 또는 트롤록스를 H2O2 처리 후 3시간에 첨가하였다. MTT 검정을 사용하여 독소의 신경독성을 평가하였다. 예상한 바와 같이, 독소와 세포의 24시간 동안의 인큐베이션은 각각 H2O2에 대한 36.2±3.0%의 세포 생존력의 감소를 유발하였다. T3에서 첨가되고 양성 대조군으로서 사용된 트롤록스는, H2O2에 의해 유도된 세포 사멸을 부분적으로 억제하였다. H2O2 후 3시간에 첨가될 경우, 허브 B 추출물은 10.000 ng/mL의 용량에서 56.8±2.4%의 세포 생존력으로 최대 효과로 용량-의존적 신경보호를 유도하였다. 10000 ng/ml에서 허브 B 추출물의 신경보호 및 항아폽토시스 효과의 %는 32.2%였다. (도 15a)
마우스 1차 피질 뉴런을 첨가된 비히클 또는 상이한 농도의 허브 B 추출물 또는 1 mM 트롤록스와 48시간 인큐베이션한 다음에, 뉴런을 0.25 mM H2O2로 24시간 동안 처리하였다. MTT 검정을 사용하여 H2O2의 신경독성을 평가하였다. 예상한 바와 같이, H2O2와 세포의 24시간 동안의 인큐베이션은 61.7±2.5%의 세포 생존력의 감소를 유발하였다. H2O2 전 48시간에 첨가된 트롤록스 (1 mM)는 H2O2에 의해 유도된 세포 사멸을 부분적으로 억제하였다. H2O2 전 48시간 동안 사전인큐베이션된 경우, 허브 B 추출물은 10.000 ng/mL의 용량에서 76.7±2.4%의 세포 생존력으로 H2O2-유도 세포 사멸을 예방하였다. 10000 ng/ml에서 허브 B 추출물의 신경보호 및 항아폽토시스 효과의 %는 39.2%였다. (도 15b)
결론적으로, 데이터는 허브 B 추출물이 H2O2 처리 전 48시간에 첨가시 또는 H2O2 첨가 후 3시간에 첨가시 H2O2-유도 신경독성에 대해 보호, 및 항산화적 효과를 제공함을 시사한다.
허브 B 추출물의 실시예 IV-6
캄토테신 처리된 마우스 1차 뉴런 모델에서 - 캄토테신 처리 전 48시간에 첨가시 - 허브 B 추출물의 효과
DNA 효소 토포이소포마제 I (토포 I)을 억제하는 세포독성 퀴놀린 알칼로이드인 캄토테신으로 시험감염된 마우스 1차 피질 뉴런을 사용하여 상이한 농도의 허브 B 추출물의 신경-보호 효과를 조사하였다.
배아 일 16-17로부터의 피질 뉴런을 실시예 IV-1에 기재된 바와 같이, C57Bl6/J 마우스 태아로부터 준비하였다. 캄토테신을 시그마 (ref C9911 - (S)-(+)-캄토테신)로부터 입수하였다. 허브 B 추출물을 실시예 IV-1에 상기 기재된 바와 같이 유사하게 제조하였다.
세포를 독소의 시험감염 전 48시간에 첨가된 상이한 농도의 화합물 C의 부재 또는 존재 하에 비히클 또는 독소 (하기 플레이트-레이아웃에 기재된 명시된 최종 농도에서)와 인큐베이션하였다. 1 μM 캄토테신의 첨가 후, 세포를 웰당 140 μL의 최종 부피로 24시간 동안 추가로 인큐베이션하였다.
예상한 바와 같이, 1 μM 캄토테신과 세포의 24시간 동안의 인큐베이션은 대조군의 57.7±1.6%의 세포 생존력의 감소를 유발하였다. 캄토테신-처리 전 48시간 동안 사전인큐베이션시, 허브 B 추출물은 용량-의존적 신경보호를 유도하였고, 10.000 ng/mL의 용량에서 최대 효과를 가졌다. 세포 생존력은 대조군의 84.0±6.4%였다. 10000 ng/ml에서 허브 B 추출물의 신경보호 및 항아폽토시스 효과의 %는 62.1%였다. 흥미롭게도, 허브 B 추출물의 신경보호 효과는 이중-위상으로 보였다. 실제로, 10 ng/mL의 용량에서 허브 B 추출물의 신경보호 효과는 1 및 100 ng/mL의 용량에서 허브 B 추출물의 효과 미만이었다. (도 16)
결론적으로, 데이터는 허브 B 추출물이 캄토테신에 의해 유도된 뉴런 사멸에 대해 강한 보호, 신경-구출 및 항아폽토시스 효과를 제공함을 시사한다.

Claims (26)

  1. 인간 및/또는 동물용 의약의 제조를 위한, 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도.
    Figure pct00025

    여기서 R1, R2 및 R3은 독립적으로 H 또는 -C(O)R4로부터 선택되며, 여기서 R4는
    - OH, NH2, NHCH3, N(CH3)2, F 또는 Cl로 임의로 일-, 이- 또는 삼치환된 (C5-C20)알킬; 또는
    - 1, 2 또는 3개의 이중 결합을 보유하는 (C5-C20) 알케닐이고;
    이때 R1, R2 및 R3 중 적어도 1개는 -C(O)R4이며, 여기서 R4는 짝수의 탄소 원자를 갖는 (C6-C20) 알킬이다.
  2. 제1항에 있어서, R1, R2 및 R3이 독립적으로 H 또는 -C(O)R4로부터 선택되며, 여기서 R1, R2 및 R3 중 적어도 1개는 -C(O)R4이며, 여기서 R4는 짝수의 탄소 원자를 갖는 (C6-C20) 알킬인 화학식 (I)의 화합물의 용도.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, R1, R2 및 R3이 독립적으로 -C(O)R4로부터 선택되며, 여기서 R4는 짝수의 탄소 원자를 갖는 (C6-C20) 알킬인 화학식 (I)의 화합물의 용도.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, R1, R2 및 R3 중 1개 또는 2개가 H이고, 나머지(들)가 -C(O)R4이며, 여기서 R4는 C12-알킬, C14-알킬, C16-알킬, C18-알킬 또는 C20-알킬인 화학식 (I)의 화합물의 용도.
  5. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, R1, R2, 및 R3이 -C(O)R4이며, 여기서 R4는 C14-알킬인 화학식 (I)의 화합물의 용도.
  6. 인간 및/또는 동물용 의약의 제조를 위한 제4항에 따른 화학식 (I)의 화합물의 대사산물 또는 전구약물로서, HOC(O)C12-알킬, HOC(O)C14-알킬, HOC(O)C16-알킬, HOC(O)C18-알킬 또는 HOC(O)C20-알킬인 대사산물 또는 전구약물.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 신경변성 질환, 망막 또는 시신경 변성 질환, 탈수초성 질환, 신경근육 장애 및 근육 이영양증, 뇌 또는 척수 신경 손상, 뇌 신경 장애, 또는 발작, 아밀로이드 침착물 관련 질환, 및 신장 질환, 당뇨병 및 천식으로 이루어진 군으로부터 선택된 만성 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 의약의 제조를 위한, 및 항노화 또는 수명 연장 및 뇌 기능 개선의 용도를 위한 화학식 (I)의 화합물의 용도.
  8. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD), 헌팅톤병 (HD), 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 치매, 루이 소체 치매 (DLB), 전두측두엽 치매 (FTD), 크로이츠펠트-야콥병, 및 뇌 위축으로 이루어진 군으로부터 선택된 신경변성 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 의약의 제조를 위한 화학식 (I)의 화합물의 용도.
  9. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 시신경 위축, 레베르 유전성 시신경병증 (LHON), 우성 시신경 위축 (DOA) 및 연령-관련 황반 변성, 녹내장 및 색소성 망막염으로 이루어진 군으로부터 선택된 망막 및 시신경 변성 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 의약의 제조를 위한 화학식 (I)의 화합물의 용도.
  10. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 부신백질이영양증, 다발성 경화증, 시신경염, 급성 염증성 탈수초성 다발신경병증 (AIDP), 만성 염증성 탈수초성 다발신경병증 (CIDP), 길랑-바레 증후군, 지카 바이러스에 의한 또는 지카 바이러스와 관련된 뇌염, 뇌 신경 마비, 시신경 척수염 (NMO), 급성 파종성 뇌척수염, 급성 괴사성 출혈성 뇌염, 동심성 경화증, 미만성 경화증, 이염성 백질이영양증, 구상 세포 백질이영양증, 중추 신경계의 해면 변성, 페리-플럼병, 알렉산더병, 방사선 손상 백질뇌병증, 저산소성 백질뇌병증, 뇌실주위 백질연화증 질환, 동맥경화성 피질하 뇌병증, 진행성 다초점성 백질뇌병증, 및 중심 뇌교 수초용해 증후군으로 이루어진 군으로부터 선택된 탈수초성 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 의약의 제조를 위한 화학식 (I)의 화합물의 용도.
  11. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 중증 근무력증, 램버트-이튼 증후군, 뒤시엔느 근육 이영양증, 베커 근육 이영양증, 안면견갑상완 근육 이영양증, 근긴장성 이영양증, 샤르코-마리-투스병 (CMT)으로 이루어진 군으로부터 선택된 신경근육 장애 및 근육 이영양증 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 의약의 제조를 위한 화학식 (I)의 화합물의 용도.
  12. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 급성 또는 만성 뇌 손상 또는 척수 신경 손상, 뇌 신경 장애 및 발작으로 이루어진 군으로부터 선택된 신경계 손상 관련 질환 또는 혼합 신경계 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 의약의 제조를 위한 화학식 (I)의 화합물의 용도.
  13. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 당뇨병, 심장 아밀로이드증, 원발성 아밀로이드증, 가족성 아밀로이드증, 노인성 전신 아밀로이드증 (SSA), 속발성 아밀로이드증, 및 혈액 투석-연관 아밀로이드증으로 이루어진 군으로부터 선택된 아밀로이드 침착물 관련 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 의약의 제조를 위한 화학식 (I)의 화합물의 용도.
  14. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 신장 질환, 당뇨병, 및 천식으로 이루어진 군으로부터 선택된 만성 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 의약의 제조를 위한 화학식 (I)의 화합물의 용도.
  15. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물이 1 mg/일 내지 1000 mg/일의 투여량으로 함유되는 것인 제7항 내지 제14항 중 어느 한 항의 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방을 위한 의약의 제조를 위한 화학식 (I)의 화합물의 용도.
  16. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 화합물 및 제약상 허용되는 담체를 함유하는, 제7항 내지 제14항 중 어느 한 항의 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한 제약 조성물.
  17. 인간 및/또는 동물용 의약으로서 사용하기 위한, 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  18. 제17항에 있어서, 제7항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방용 의약으로서 사용하기 위한 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  19. 환자에게 유효량의 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 제7항 내지 제14항 중 어느 한 항의 질환 및 병태를 치료 및/또는 예방하는 방법.
  20. 인간 및/또는 동물용 기능성 식품 또는 식품 보충제로서의 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 용도.
  21. 제20항에 있어서, 화합물의 투여량이 1 μg (마이크로그램)/일 내지 50 mg/일인 용도.
  22. 제7항 내지 제14항 중 어느 한 항의 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방을 위한 의약의 제조를 위한 나도고사리삼속(ophioglossum)의 용도.
  23. 제22항에 있어서, 트리펜타데카노인이 1 mg/일 내지 1000 mg/일의 양으로 나도고사리삼속에 함유되는 것인 용도.
  24. 나도고사리삼속을 함유하는, 제7항 내지 제14항 중 어느 한 항의 질환 및 병태의 치료 및/또는 예방에서 사용하기 위한 제약 조성물.
  25. 인간 및/또는 동물용 기능성 식품 또는 식품 보충제로서의 나도고사리삼속의 용도.
  26. 제25항에 있어서, 트리펜타데카노인이 1 μg (마이크로그램)/일 내지 50 mg/일의 양으로 나도고사리삼속에 함유되는 것인 용도.
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