KR20180066241A - “인터페론 유전자의 자극제”-의존성 신호전달을 활성화시키기 위한 조성물 및 방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 STING (인터페론 유전자의 자극제)로서 공지된 최근에 발견된 세포질 수용체를 통해 DC를 활성화시키는 고도로 활성인 시클릭-디-뉴클레오티드 (CDN) 면역 자극제를 제공한다. 특히, 본 발명의 CDN은 인간 STING-의존성 제I형 인터페론 생산을 유도하는 1종 이상의 시클릭 퓨린 디뉴클레오티드를 포함하는 조성물의 형태로 제공되며, 여기서 조성물에 존재하는 시클릭 퓨린 디뉴클레오티드는 2'- 또는 3'-모노-플루오로 치환되거나 또는 2'3'-디-플루오로 치환된 혼합된 연결 2',5' - 3',5' CDN이다.
Description
본 출원은 2015년 10월 28일에 출원된 미국 특허 가출원 62/247,658 및 2016년 8월 25일에 출원된 미국 특허 가출원 62/379,611을 우선권 주장하며, 각각의 상기 가출원은 표, 도면 및 청구범위 모두를 포함한 그의 전문이 본원에 참조로 포함된다.
본 발명의 배경기술에 대한 하기 논의는 단지 독자들이 본 발명을 이해하는 것을 돕기 위해 제공되는 것일 뿐 본 발명에 대한 선행 기술을 기재하거나 그를 구성하는 것으로 인정되는 것은 아니다.
면역-회피의 기저를 이루는 메카니즘에 대한 새로운 통찰은, 면역 체크포인트 억제제 또는 다른 요법과의 조합을 통해 직접적으로 또는 간접적으로 치료 백신접종의 효력을 강화하는 조합 치료 요법과 함께, 효과적인 적응 면역 반응을 프라이밍 또는 부스팅할 수 있는 백신 또는 면역 조정제의 개발을 위한 토대로서의 역할을 하였다. 이들 조정제는 표적화된 악성종양에 대해 특이적인 종양-특이적 CD4+ 및 CD8+ T 세포로 이루어져 있어, 항종양 반응 및 임상 이익을 가져온다. 선천성 면역계가 표적화된 리간드에 의해 어떻게 관여되는지는 적응 반응의 발생을 구체화하고, 백신 및 면역조정제의 설계에 도움이 된다 (Reed et al., Trends Immunol., 30: 23-32, 2009; Dubensky and Reed, Semin. Immunol., 22: 155-61, 2010; Kastenmuller et al., J. Clin. Invest., 121: 1782-1796, 2011; Coffman et al., Immunity, 33: 492-503, 2010).
시클릭-디-뉴클레오티드 (CDN)인 시클릭-디-AMP (리스테리아 모노시토게네스(Listeria monocytogenes) 및 다른 박테리아에 의해 생산됨) 및 그의 유사체인 시클릭-디-GMP 및 시클릭-GMP-AMP는 병원체 연관된 분자 패턴 (PAMP)으로서 숙주 세포에 의해 인식되며, 인터페론 유전자의 자극제 (STING)로서 공지된 병원체 인식 수용체 (PRR)에 결합한다. STING은 숙주 포유동물 세포의 세포질 내의 어댑터 단백질이며, 이는 TANK 결합 키나제 (TBK1)-IRF3 및 NF-κB 신호전달 축을 활성화시켜, IFN-β 및 선천성 면역을 강하게 활성화시키는 다른 유전자 산물의 유도를 가져온다. 본 발명에 이르러 STING이 숙주 시토졸 감시 경로의 성분인 것으로 인식되며 (Vance et al., 2009), 이는 세포내 병원체에 의한 감염을 감지하고 이에 반응하여 IFN-β의 생산을 유도하여, 항원-특이적 CD4+ 및 CD8+ T 세포 둘 다 뿐만 아니라 병원체-특이적 항체로 이루어진 적응 보호성 병원체-특이적 면역 반응의 발생을 유발한다. 시클릭 퓨린 디뉴클레오티드의 예는, 예를 들어 다음에 일부 상세히 기재되어 있다: 미국 특허 7,709458 및 7,592,326; 특허 출원 WO2007/054279, WO2014/093936 및 WO2014/189805; 및 문헌 [Yan et al., Bioorg. Med. Chem Lett. 18: 5631 (2008)].
인간 올리고아데닐레이트 신타제인 시클릭 GMP-AMP 신타제의 촉매 도메인에 대한 유의한 구조적 상동성을 갖는 비특징화 마우스 유전자는 포유동물 세포에서 STING-결합 CDN의 생산을 담당하는 효소인 것으로 보고되었다 (Sun et al., Science 339(6121):786-91, 2013). 시클릭 GMP-AMP 신타제 (cGAS)로 칭해지는 이 효소는 DNA의 존재 하에 ATP 및 GTP로부터의 시클릭 GMP-AMP (cGAMP)의 합성을 촉매한다. 이어서, 이 cGAMP는 STING에 결합하고 이를 활성화시키는 제2 메신저로서 기능한다. 이들 cGAS-생산된 CDN은 이들이 비통상적 포스포디에스테르 연결을 소유한다는 점에서 박테리아에 의해 생산된 CDN과 구조적으로 상이하였다. 따라서, 박테리아에 의해 생산된 CDN이 2개의 뉴클레오티드 사이에 비스-3',5' 연결을 함유하는 반면에, 포유동물 CDN은 1개의 2',5' 연결 및 1개의 3',5' 연결, 또는 소위 "혼합된 연결 (ML) 또는 비-정규 CDN을 함유하였다. 이들 2',5'-3',5' 분자는 nM 친화도로 STING에 결합하며, 일부는 박테리아 c-디-GMP보다 300배 더 우수하다.
인간 STING (hSTING)은 또한 비스-3',5' (정규) CDN에 불응성이지만 2',5'-3',5' (비-정규, 혼합된 연결) CDN에는 불응성이 아닌 위치 232에서의 히스티딘을 코딩하는 대립유전자를 포함한 공지된 다형성을 갖는다 (Diner et al., Cell Reports 3, 1355-61, 2013; Jin et al., Genes and Immunity, 12: 263-9, 2011). hSTING 유전자에서의 단일 뉴클레오티드 다형성은 박테리아-유래된 정규 CDN에 대한 반응성에 영향을 미치는 것으로 보고되었다 (Diner et al., 2013; Gao et al., Cell 154, 748-762, 2013; Conlon et al., J. Immunol. 190: 5216-5225, 2013). hSTING의 5종의 반수체형이 보고되었으며 (WT, REF, HAQ, AQ 및 Q 대립유전자), 이는 아미노산 위치 71, 230, 232 및 293에서 다르다 (Jin et al., 2011; Yi et al., PLOS One 8: e77846, 2013). hSTING를 발현하는 세포는 보고된 바로는 비스-(3', 5') 연결을 갖는 박테리아 CDN인 cGAMP, c-디-AMP 및 c-디-GMP에 의한 자극에 약하게 반응하지만, 내인성으로 생산된 cGAS 산물인 ML cGAMP에는 반응성이다 (Diner et al., 2013). 따라서, 2',5'-3',5' 분자는 hSTING 표적화의 관점에서 훨씬 더 강력한 생리학적 리간드가 되는 것으로 시사되었다 (Zhang et al., Mol. Cell. 51:226-35, 2013; Xiao and Fitzgerald, Mol. Cell 51: 135-39, 2013).
본 발명의 목적은 질환에 대한 면역 반응을 조정하는 조성물 및 방법을 제공하는 것이다. 본 발명의 추가의 목적은 포유동물 및 바람직하게는 인간 STING의 활성화를 위해 사용될 경우 개선된 특징을 나타내는 시클릭 퓨린 디뉴클레오티드 유사체를 제공하는 조성물 및 방법을 제공하는 것이다. 본 발명의 추가의 목적은 암의 치료를 위한 조성물 및 방법을 제공하는 것이다.
제1 측면에서, 본 발명은 화학식 I의 모노- 또는 디-플루오로 치환된 혼합된 연결 (ML) 2',5'-3',5' 시클릭 퓨린 디뉴클레오티드 ("모노- 또는 디-F-ML-CDN") 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물을 제공한다:
여기서
R1 및 R2는 독립적으로 N9 위치를 통해 구조에 결합된 구아닌 또는 아데닌이며, 단 R1 및 R2는 둘 다 구아닌이 아니고;
R3 및 R4는 독립적으로 -H, -OH, -O-C(=O)-C1-14 알킬 또는 -F이며, 단 R3 및 R4 중 적어도 하나는 -F이고;
X1 및 X2는 독립적으로 -OH 또는 -SH이다.
하기에 기재된 바와 같이, 특정 실시양태에서, X1 및 X2는 각각 -SH이고, R3 및 R4 중 하나 또는 둘 다는 -F이고; 이들 중 특정 실시양태에서, R3 및 R4 중 단지 하나가 F인 경우에, R3 및 R4 중 다른 것은 -O-C(=O)-C1-14 알킬, 바람직하게는 -O-C(=O)-C6-12 알킬이다. 이들 중 특정 실시양태에서, R3은 F이고, R4는 -O-C(=O)-C1-14 알킬, 바람직하게는 -O-C(=O)-C6-12이다. 추가적으로, X1 또는 X2가 -SH인 경우에, 키랄 중심은 분자 내 티오포스페이트에 도입된다. 이들 중 특정 실시양태에서, 화합물은 R,R 부분입체이성질체이다.
제1 측면의 제1 실시양태에서, 화학식 I의 화합물은 화학식 I-a의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1, R2, R3, R4, X1 및 X2는 화학식 I의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제1 측면의 제2 실시양태에서, 화학식 I의 화합물은 화학식 I-b의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1, R2, R3, R4, X1 및 X2는 화학식 I의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제1 측면 및 그의 제1 또는 제2 실시양태의 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3 및 R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3 및 R4는 F이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3 및 R4는 -F이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -SH이고, R3 및 R4는 -F이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다.
제1 측면 및 그의 제1 또는 제2 실시양태의 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3 및 R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3 및 R4는 -F이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3 및 R4는 -F이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -OH이고, X2는 -SH이고, R3 및 R4는 -F이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다.
제1 측면 및 그의 제1 또는 제2 실시양태의 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3 및 R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3 및 R4는 -F이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3 및 R4는 -F이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1은 -SH이고, X2는 -OH이고, R3 및 R4는 -F이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다.
제1 측면 및 그의 제1 또는 제2 실시양태의 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3 및 R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3 및 R4는 -F이고, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3 및 R4는 -F이고, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1 및 X2는 -OH이고, R3 및 R4는 -F이고, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다.
제1 측면 및 그의 제1 또는 제2 실시양태의 일부 실시양태에서, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R1 및 R2는 아데닌이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1 및 R2는 아데닌이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1 및 R2는 아데닌이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1 및 R2는 아데닌이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1 및 R2는 아데닌이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1 및 R2는 아데닌이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1 및 R2는 아데닌이고, R3 및 R4는 -F이다.
제1 측면 및 그의 제1 또는 제2 실시양태의 일부 실시양태에서, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이고, R3 및 R4는 -F이다.
제1 측면 및 그의 제1 또는 제2 실시양태의 일부 실시양태에서, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이고, R3 및 R4는 -F이다.
제1 측면 및 그의 제1 또는 제2 실시양태의 일부 실시양태에서, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3은 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3은 -F이고, R4는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3 및 R4는 -F이다.
제1 측면의 일부 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제1 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제1 측면 및 그의 제2 실시양태의 일부 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제1 측면의 제3 실시양태에서, 화학식 I의 화합물은 화학식 I-c의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 화학식 I의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제1 측면의 제4 실시양태에서, 화학식 I의 화합물은 화학식 I-d의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 화학식 I의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제1 측면의 제5 실시양태에서, 화학식 I의 화합물은 화학식 I-e의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 화학식 I의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제1 측면 및 그의 제3, 제4 또는 제5 실시양태의 일부 실시양태에서, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3은 -F이고, R4는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3은 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3 및 R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1 및 R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R1 및 R2는 아데닌이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1 및 R2는 아데닌이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1 및 R2는 아데닌이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1 및 R2는 아데닌이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1 및 R2는 아데닌이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1 및 R2는 아데닌이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1 및 R2는 아데닌이고, R3 및 R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1은 아데닌이고, R2는 구아닌이고, R3 및 R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이고, R3은 -F이고, R4는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이고, R3은 -F이고, R4는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이고, R3은 -F이고, R4는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이고, R3은 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이고, R3은 -H 또는 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이고, R3은 -OH이고, R4는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1은 구아닌이고, R2는 아데닌이고, R3 및 R4는 -F이다.
제1 측면 및 그의 임의의 상기 실시양태의 일부 실시양태에서, R3 또는 R4가 -O-C(=O)-C1-14 알킬인 경우에, -O-C(=O)-C1-14 알킬은 -O-C(=O)-C3-14 알킬, -O-C(=O)-C5-13 알킬, -O-C(=O)-C5-11 알킬, 또는 -O-C(=O)-C9 알킬이고, 바람직하게는 여기서 알킬 쇄는 선형이다. 바람직한 실시양태에서, -O-C(=O)-C1-14 알킬은 -O-C(=O)-(CH2)8-CH3이다.
제1 측면 및 그의 제3 실시양태의 일부 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제1 측면 및 그의 제1 또는 제4 실시양태의 일부 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제1 측면 및 그의 제5 실시양태의 일부 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제2 측면에서, 본 발명은 화학식 IA의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물을 제공한다:
여기서
R3a 및 R4a는 독립적으로 -H, -OH, -O-C(=O)-C1-14 알킬 또는 -F이며, 단 R3a 및 R4a 중 적어도 하나는 -F이고;
X1a 및 X2a는 독립적으로 -OH 또는 -SH이다.
하기에 기재된 바와 같이, 특정 실시양태에서, X1a 및 X2a는 각각 -SH이고, R3a 및 R4a 중 하나 또는 둘 다는 -F이고; 이들 중 특정 실시양태에서, R3a 및 R4a 중 단지 하나가 F인 경우에, R3a 및 R4a 중 다른 것은 -O-C(=O)-C1-14 알킬, 바람직하게는 -O-C(=O)-C6-12 알킬이다. 이들 중 특정 실시양태에서, R3a는 F이고, R4a는 -O-C(=O)-C1-14 알킬, 바람직하게는 -O-C(=O)-C6-12이다. 추가적으로, X1a 또는 X2a가 -SH인 경우에, 키랄 중심은 분자 내 티오포스페이트에 도입된다. 이들 중 특정 실시양태에서, 화합물은 R,R 부분입체이성질체이다.
제2 측면의 제1 실시양태에서, 화학식 IA의 화합물은 화학식 IA-a의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R3a, R4a, X1a 및 X2a는 화학식 IA의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제2 측면의 제2 실시양태에서, 화학식 IA의 화합물은 화학식 IA-b의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R3a, R4a, X1a 및 X2a는 화학식 IA의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제2 측면 및 그의 제1 또는 제2 실시양태의 일부 실시양태에서, X1a 및 X2a는 -SH이다. 일부 실시양태에서, X1a 및 X2a는 -SH이고, R3a는 -F이고, R4a는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1a 및 X2a는 -SH이고, R3a는 -F이고, R4a는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1a 및 X2a는 -SH이고, R3a는 -F이고, R4a는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1a 및 X2a는 -SH이고, R3a는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1a 및 X2a는 -SH이고, R3a는 -H 또는 -OH이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1a 및 X2a는 -SH이고, R3a는 -OH이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1a 및 X2a는 -SH이고, R3a 및 R4a는 -F이다.
제2 측면 및 그의 제1 또는 제2 실시양태의 일부 실시양태에서, X1a는 -OH이고, X2a는 -SH이다. 일부 실시양태에서, X1a는 -OH이고, X2a는 -SH이고, R3a는 -F이고, R4a는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1a는 -OH이고, X2a는 -SH이고, R3a는 -F이고, R4a는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1a는 -OH이고, X2a는 -SH이고, R3a는 -F이고, R4a는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1a는 -OH이고, X2a는 -SH이고, R3a는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1a는 -OH이고, X2a는 -SH이고, R3a는 -H 또는 -OH이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1a는 -OH이고, X2a는 -SH이고, R3a는 -OH이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1a는 -OH이고, X2a는 -SH이고, R3a 및 R4a는 -F이다.
제2 측면 및 그의 제1 또는 제2 실시양태의 일부 실시양태에서, X1a는 -SH이고, X2a는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1a는 -SH이고, X2a는 -OH이고, R3a는 -F이고, R4a는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1a는 -SH이고, X2a는 -OH이고, R3a는 -F이고, R4a는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1a는 -SH이고, X2a는 -OH이고, R3a는 -F이고, R4a는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1a는 -SH이고, X2a는 -OH이고, R3a는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1a는 -SH이고, X2a는 -OH이고, R3a는 -H 또는 -OH이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1a는 -SH이고, X2a는 -OH이고, R3a는 -OH이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1a는 -SH이고, X2a는 -OH이고, R3a 및 R4a는 -F이다.
제2 측면 및 그의 제1 또는 제2 실시양태의 일부 실시양태에서, X1a 및 X2a는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1a 및 X2a는 -OH이고, R3a는 -F이고, R4a는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1a 및 X2a는 -OH이고, R3a는 -F이고, R4a는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1a 및 X2a는 -OH이고, R3a는 -F이고, R4a는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1a 및 X2a는 -OH이고, R3a는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1a 및 X2a는 -OH이고, R3a는 -H 또는 -OH이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1a 및 X2a는 -OH이고, R3a는 -OH이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1a 및 X2a는 -OH이고, R3a 및 R4a는 -F이다.
제2 측면 및 그의 제1 또는 제2 실시양태의 일부 실시양태에서, R3a는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -H 또는 -OH이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -OH이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -F이고, R4a는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -F이고, R4a는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -F이고, R4a는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3a 및 R4a는 -F이다.
제2 측면 및 그의 임의의 상기 실시양태의 일부 실시양태에서, R3a 또는 R4a가 -O-C(=O)-C1-14 알킬인 경우에, -O-C(=O)-C1-14 알킬은 -O-C(=O)-C3-14 알킬, -O-C(=O)-C5-13 알킬, -O-C(=O)-C5-11 알킬, 또는 -O-C(=O)-C9 알킬이고, 바람직하게는 여기서 알킬 쇄는 선형이다. 바람직한 실시양태에서, -O-C(=O)-C1-14 알킬은 -O-C(=O)-(CH2)8-CH3이다.
제2 측면의 제3 실시양태에서, 화학식 IA의 화합물은 화학식 IA-c의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R3a 및 R4a는 독립적으로 -H, -OH, -O-C(=O)-C1-14 알킬 또는 -F이며, 단 R3a 및 R4a 중 적어도 하나는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -H 또는 -OH이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -OH이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -F이고, R4a는 -H, -OH, -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -F이고, R4a는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -F이고, R4a는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3a 및 R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3a 또는 R4a가 -O-C(=O)-C1-14 알킬인 경우에, -O-C(=O)-C1-14 알킬은 -O-C(=O)-C3-14 알킬, -O-C(=O)-C5-13 알킬, -O-C(=O)-C5-11 알킬, 또는 -O-C(=O)-C9 알킬이고, 바람직하게는 여기서 알킬 쇄는 선형이다. 바람직한 실시양태에서, -O-C(=O)-C1-14 알킬은 -O-C(=O)-(CH2)8-CH3이다.
제2 측면의 제4 실시양태에서, 화학식 IA의 화합물은 화학식 IA-d의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R3a 및 R4a는 독립적으로 -H, -OH, -O-C(=O)-C1-14 알킬 또는 -F이며, 단 R3a 및 R4a 중 적어도 하나는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -H 또는 -OH이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -OH이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -F이고, R4a는 -H, -OH, -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -F이고, R4a는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -F이고, R4a는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3a 및 R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3a 또는 R4a가 -O-C(=O)-C1-14 알킬인 경우에, -O-C(=O)-C1-14 알킬은 -O-C(=O)-C3-14 알킬, -O-C(=O)-C5-13 알킬, -O-C(=O)-C5-11 알킬, 또는 -O-C(=O)-C9 알킬이고, 바람직하게는 여기서 알킬 쇄는 선형이다. 바람직한 실시양태에서, -O-C(=O)-C1-14 알킬은 -O-C(=O)-(CH2)8-CH3이다.
제2 측면의 제5 실시양태에서, 화학식 IA의 화합물은 화학식 IA-e의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R3a 및 R4a는 독립적으로 -H, -OH, -O-C(=O)-C1-14 알킬 또는 -F이며, 단 R3a 및 R4a 중 적어도 하나는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -H 또는 -OH이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -OH이고, R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -F이고, R4a는 -H, -OH, -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -F이고, R4a는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3a는 -F이고, R4a는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3a 및 R4a는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3a 또는 R4a가 -O-C(=O)-C1-14 알킬인 경우에, -O-C(=O)-C1-14 알킬은 -O-C(=O)-C3-14 알킬, -O-C(=O)-C5-13 알킬, -O-C(=O)-C5-11 알킬, 또는 -O-C(=O)-C9 알킬이고, 바람직하게는 여기서 알킬 쇄는 선형이다. 바람직한 실시양태에서, -O-C(=O)-C1-14 알킬은 -O-C(=O)-(CH2)8-CH3이다.
제2 측면 및 그의 제3 실시양태의 일부 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제2 측면 및 그의 제1 또는 제4 실시양태의 일부 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제2 측면 및 그의 제2 또는 제5 실시양태의 일부 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제3 측면에서, 본 발명은 화학식 IB의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물을 제공한다:
여기서
R1b 및 R2b 중 하나는 N9 위치를 통해 구조에 결합된 구아닌이고, R1b 및 R2b 중 다른 것은 N9 위치를 통해 구조에 결합된 아데닌이고;
R3b 및 R4b는 독립적으로 -H, -OH, -O-C(=O)-C1-14 알킬 또는 -F이며, 단 R3b 및 R4b 중 적어도 하나는 -F이고;
X1b 및 X2b는 독립적으로 -OH 또는 -SH이다.
하기에 기재된 바와 같이, 특정 실시양태에서, X1b 및 X2b는 각각 -SH이고, R3b 및 R4b 중 하나 또는 둘 다는 -F이고; 이들 중 특정 실시양태에서, R3b 및 R4b 중 단지 하나가 F인 경우에, R3b 및 R4b 중 다른 것은 -O-C(=O)-C1-14 알킬, 바람직하게는 -O-C(=O)-C6-12 알킬이다. 이들 중 특정 실시양태에서, R3b는 F이고, R4b는 -O-C(=O)-C1-14 알킬, 바람직하게는 -O-C(=O)-C6-12이다. 추가적으로, X1b 또는 X2b가 -SH인 경우에, 키랄 중심은 분자 내 티오포스페이트에 도입된다. 이들 중 특정 실시양태에서, 화합물은 R,R 부분입체이성질체이다.
제3 측면의 제1 실시양태에서, 화학식 IB의 화합물은 화학식 IB-a의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1b, R2b, R3b, R4b, X1b 및 X2b는 화학식 IB의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제3 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b 및 R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b 및 R4b는 -F이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b 및 R4b는 -F이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다.
제3 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b 및 R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b 및 R4b는 -F이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b 및 R4b는 -F이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다.
제3 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b 및 R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b 및 R4b는 -F이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b 및 R4b는 -F이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다.
제3 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b 및 R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b 및 R4b는 -F이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b 및 R4b는 -F이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다.
제3 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이고, R3b 및 R4b는 -F이다.
제3 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이고, R3b 및 R4b는 -F이다.
제3 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3b 및 R4b는 -F이다.
제3 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제3 측면의 제2 실시양태에서, 화학식 IB의 화합물은 화학식 IB-b의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1b, R2b, R3b 및 R4b는 화학식 IB의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제3 측면의 제3 실시양태에서, 화학식 IB의 화합물은 화학식 IB-c의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1b, R2b, R3b 및 R4b는 화학식 IB의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제3 측면 및 그의 제2 또는 제3 실시양태의 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b 및 R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R3b 및 R4b는 -F이고, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R3b 및 R4b는 -F이고, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다.
제3 측면 및 그의 제2 또는 제3 실시양태의 일부 실시양태에서, R1b는 아데닌이고, R2b는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R1b는 구아닌이고, R2b는 아데닌이다.
제3 측면 및 그의 제1 또는 제2 실시양태의 일부 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제3 측면 및 그의 제1 또는 제3 실시양태의 일부 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제3 측면의 제4 실시양태에서, 화학식 IB의 화합물은 화학식 IB-d의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R3b, R4b, X1b 및 X2b는 화학식 IB의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제3 측면의 제5 실시양태에서, 화학식 IB의 화합물은 화학식 IB-e의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R3b, R4b, X1b 및 X2b는 화학식 IB의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제3 측면 및 그의 제4 또는 제5 실시양태의 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b 및 R4b는 -F이다.
제3 측면 및 그의 제4 또는 제5 실시양태의 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b 및 R4b는 -F이다.
제3 측면 및 그의 제4 또는 제5 실시양태의 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b 및 R4b는 -F이다.
제3 측면 및 그의 제4 또는 제5 실시양태의 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b 및 R4b는 -F이다.
제3 측면 및 그의 제4 또는 제5 실시양태의 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b 및 R4b는 -F이다.
제3 측면 및 그의 제1, 제4 또는 제5 실시양태의 일부 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제3 측면의 제6 실시양태에서, 화학식 IB의 화합물은 화학식 IB-f의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R3b 및 R4b는 독립적으로 -H, -OH, -O-C(=O)-C1-14 알킬 또는 -F이며, 단 R3b 및 R4b 중 적어도 하나는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3b 및 R4b는 -F이다.
제3 측면의 제7 실시양태에서, 화학식 IB의 화합물은 화학식 IB-g의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R3b 및 R4b는 독립적으로 -H, -OH, -O-C(=O)-C1-14 알킬 또는 -F이며, 단 R3b 및 R4b 중 적어도 하나는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3b 및 R4b는 -F이다.
제3 측면 및 그의 제1, 제2, 제4, 제5, 제6 또는 제7 실시양태의 일부 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제3 측면의 제8 실시양태에서, 화학식 IB의 화합물은 화학식 IB-h의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물 이다:
여기서 R3b 및 R4b는 독립적으로 -H, -OH, -O-C(=O)-C1-14 알킬 또는 -F이며, 단 R3b 및 R4b 중 적어도 하나는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3b 및 R4b는 -F이다.
제3 측면의 제9 실시양태에서, 화학식 IB의 화합물은 화학식 IB-i의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R3b 및 R4b는 독립적으로 -H, -OH, -O-C(=O)-C1-14 알킬 또는 -F이며, 단 R3b 및 R4b 중 적어도 하나는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3b 및 R4b는 -F이다.
제3 측면 및 그의 제1, 제2, 제4, 제5, 제8 또는 제9 실시양태의 일부 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제3 측면의 제10 실시양태에서, 화학식 IB의 화합물은 화학식 IB-j의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R3b, R4b, X1b 및 X2b는 화학식 IB의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제3 측면의 제11 실시양태에서, 화학식 IB의 화합물은 화학식 IB-k의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R3b, R4b, X1b 및 X2b는 화학식 IB의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제3 측면 및 그의 제10 또는 제11 실시양태의 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -SH이고, R3b 및 R4b는 -F이다.
제3 측면 및 그의 제10 또는 제11 실시양태의 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -SH이고, X2b는 -OH이고, R3b 및 R4b는 -F이다.
제3 측면 및 그의 제10 또는 제11 실시양태의 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b는 -OH이고, X2b는 -SH이고, R3b 및 R4b는 -F이다.
제3 측면 및 그의 제10 또는 제11 실시양태의 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, X1b 및 X2b는 -OH이고, R3b 및 R4b는 -F이다.
제3 측면 및 그의 제10 또는 제11 실시양태의 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b 및 R4b는 -F이다.
제3 측면의 제12 실시양태에서, 화학식 IB의 화합물은 화학식 IB-m의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R3b 및 R4b는 독립적으로 -H, -OH, -O-C(=O)-C1-14 알킬 또는 -F이며, 단 R3b 및 R4b 중 적어도 하나는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3b 및 R4b는 -F이다.
제3 측면의 제13 실시양태에서, 화학식 IB의 화합물은 화학식 IB-n의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R3b 및 R4b는 독립적으로 -H, -OH, -O-C(=O)-C1-14 알킬 또는 -F이며, 단 R3b 및 R4b 중 적어도 하나는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -H 또는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -OH이고, R4b는 -F이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3b는 -F이고, R4b는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R3b 및 R4b는 -F이다.
제3 측면 및 그의 임의의 상기 실시양태의 일부 실시양태에서, R3b 또는 R4b가 -O-C(=O)-C1-14 알킬인 경우에, -O-C(=O)-C1-14 알킬은 -O-C(=O)-C3-14 알킬, -O-C(=O)-C5-13 알킬, -O-C(=O)-C5-11 알킬, 또는 -O-C(=O)-C9 알킬이고, 바람직하게는 여기서 알킬 쇄는 선형이다. 바람직한 실시양태에서, -O-C(=O)-C1-14 알킬은 -O-C(=O)-(CH2)8-CH3이다.
제3 측면 및 그의 제1, 제2, 제10, 제11, 제12 또는 제13 실시양태의 한 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제4 측면에서, 본 발명은 화학식 IC의 모노-F-ML-CDN 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물을 제공한다:
여기서
R1c 및 R2c는 독립적으로 N9 위치를 통해 구조에 결합된 구아닌 또는 아데닌이며, 단 R1c 및 R2c는 둘 다 구아닌이 아니고;
R4c는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고;
X1c 및 X2c는 독립적으로 -OH 또는 -SH이다.
하기에 기재된 바와 같이, 특정 실시양태에서, X1c 및 X2c는 각각 -SH이고, R3c 및 R4c 중 하나 또는 둘 다는 -F이고; 이들 중 특정 실시양태에서, R3c 및 R4c 중 단지 하나가 F인 경우에, R3c 및 R4c 중 다른 것은 -O-C(=O)-C1-14 알킬, 바람직하게는 -O-C(=O)-C6-12 알킬이다. 이들 중 특정 실시양태에서, R3c는 F이고, R4c는 -O-C(=O)-C1-14 알킬, 바람직하게는 -O-C(=O)-C6-12이다. 추가적으로, X1c 또는 X2c가 -SH인 경우에, 키랄 중심은 분자 내 티오포스페이트에 도입된다. 이들 중 특정 실시양태에서, 화합물은 R,R 부분입체이성질체이다.
제4 측면의 제1 실시양태에서, 화학식 IC의 화합물은 화학식 IC-a의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1c, R2c, R4c, X1c 및 X2c는 화학식 IC의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제4 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -SH이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -SH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -SH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -SH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -SH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -SH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -SH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -SH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -SH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -SH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -SH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -SH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -SH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -SH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -SH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -SH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -SH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -SH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -SH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다.
제4 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, X1c는 -SH이고, X2c는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -SH이고, X2c는 -OH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -SH이고, X2c는 -OH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -SH이고, X2c는 -OH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -SH이고, X2c는 -OH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -SH이고, X2c는 -OH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -SH이고, X2c는 -OH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -SH이고, X2c는 -OH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -SH이고, X2c는 -OH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -SH이고, X2c는 -OH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -SH이고, X2c는 -OH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -SH이고, X2c는 -OH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -SH이고, X2c는 -OH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -SH이고, X2c는 -OH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -SH이고, X2c는 -OH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -SH이고, X2c는 -OH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -SH이고, X2c는 -OH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -SH이고, X2c는 -OH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -SH이고, X2c는 -OH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다.
제4 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, X1c는 -OH이고, X2c는 -SH이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -OH이고, X2c는 -SH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -OH이고, X2c는 -SH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -OH이고, X2c는 -SH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -OH이고, X2c는 -SH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -OH이고, X2c는 -SH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -OH이고, X2c는 -SH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -OH이고, X2c는 -SH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -OH이고, X2c는 -SH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -OH이고, X2c는 -SH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -OH이고, X2c는 -SH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -OH이고, X2c는 -SH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -OH이고, X2c는 -SH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -OH이고, X2c는 -SH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -OH이고, X2c는 -SH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -OH이고, X2c는 -SH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -OH이고, X2c는 -SH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -OH이고, X2c는 -SH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1c는 -OH이고, X2c는 -SH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다.
제4 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -OH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -OH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -OH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -OH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -OH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -OH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -OH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -OH이고, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -OH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -OH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -OH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -OH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -OH이고, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -OH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -OH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -OH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -OH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1c 및 X2c는 -OH이고, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다.
제4 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R1c 및 R2c는 아데닌이다.
제4 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제4 측면의 제2 실시양태에서, 화학식 IC의 화합물은 화학식 IC-b의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1c, R2c 및 R4c는 화학식 IC의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제4 측면의 제3 실시양태에서, 화학식 IC의 화합물은 화학식 IC-c의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1c, R2c 및 R4c는 화학식 IC의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제4 측면 및 그의 제2 또는 제3 실시양태의 일부 실시양태에서, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R1c 및 R2c는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -H이다. 일부 실시양태에서, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -H이다. 일부 실시양태에서, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -H이다. 일부 실시양태에서, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다.
제4 측면 및 그의 제1, 제2 또는 제3 실시양태의 일부 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제4 측면의 제4 실시양태에서, 화학식 IC의 화합물은 화학식 IC-d의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1c, R2c 및 R4c는 화학식 IC의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제4 측면의 제5 실시양태에서, 화학식 IC의 화합물은 화학식 IC-e의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1c, R2c 및 R4c는 화학식 IC의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제4 측면 및 그의 제4 또는 제5 실시양태의 일부 실시양태에서, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R1c 및 R2c는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -H이다. 일부 실시양태에서, R1c는 아데닌이고, R2c는 구아닌이고, R4c는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -H이다. 일부 실시양태에서, R1c는 구아닌이고, R2c는 아데닌이고, R4c는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -H이다. 일부 실시양태에서, R1c 및 R2c는 아데닌이고, R4c는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다.
제4 측면 및 그의 임의의 상기 실시양태의 일부 실시양태에서, R3c 또는 R4c가 -O-C(=O)-C1-14 알킬인 경우에, -O-C(=O)-C1-14 알킬은 -O-C(=O)-C3-14 알킬, -O-C(=O)-C5-13 알킬, -O-C(=O)-C5-11 알킬, 또는 -O-C(=O)-C9 알킬이고, 바람직하게는 여기서 알킬 쇄는 선형이다. 바람직한 실시양태에서, -O-C(=O)-C1-14 알킬은 -O-C(=O)-(CH2)8-CH3이다.
제4 측면 및 그의 제1, 제4 및 제5 실시양태의 일부 실시양태에서, 화합물은 
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다.
제5 측면에서, 본 발명은 화학식 ID의 모노-F-ML-CDN 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물을 제공한다:
여기서
R1d 및 R2d는 독립적으로 N9 위치를 통해 구조에 결합된 구아닌 또는 아데닌이며, 단 R1d 및 R2d는 둘 다 구아닌이 아니고;
R3d는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고;
X1d 및 X2d는 독립적으로 -OH 또는 -SH이다.
하기에 기재된 바와 같이, 특정 실시양태에서, X1d 및 X2d는 각각 -SH이고, R3d 및 R4d 중 하나 또는 둘 다는 -F이고; 이들 중 특정 실시양태에서, R3d 및 R4d 중 단지 하나가 F인 경우에, R3d 및 R4d 중 다른 것은 -O-C(=O)-C1-14 알킬, 바람직하게는 -O-C(=O)-C6-12 알킬이다. 이들 중 특정 실시양태에서, R3d는 F이고, R4d는 -O-C(=O)-C1-14 알킬, 바람직하게는 -O-C(=O)-C6-12이다. 추가적으로, X1d 또는 X2d가 -SH인 경우에, 키랄 중심은 분자 내 티오포스페이트에 도입된다. 이들 중 특정 실시양태에서, 화합물은 R,R 부분입체이성질체이다.
제5 측면의 제1 실시양태에서, 화학식 ID의 화합물은 화학식 ID-a의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1d, R2d, R3d, X1d 및 X2d는 화학식 ID의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제5 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -SH이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -SH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -SH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -SH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -SH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -SH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -SH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -SH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -SH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -SH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -SH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -SH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -SH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -SH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -SH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -SH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -SH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -SH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -SH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다.
제5 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, X1d는 -SH이고, X2d는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -SH이고, X2d는 -OH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -SH이고, X2d는 -OH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -SH이고, X2d는 -OH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -SH이고, X2d는 -OH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -SH이고, X2d는 -OH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -SH이고, X2d는 -OH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -SH이고, X2d는 -OH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -SH이고, X2d는 -OH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -SH이고, X2d는 -OH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -SH이고, X2d는 -OH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -SH이고, X2d는 -OH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -SH이고, X2d는 -OH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -SH이고, X2d는 -OH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -SH이고, X2d는 -OH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -SH이고, X2d는 -OH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -SH이고, X2d는 -OH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -SH이고, X2d는 -OH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -SH이고, X2d는 -OH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다.
제5 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, X1d는 -OH이고, X2d는 -SH이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -OH이고, X2d는 -SH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -OH이고, X2d는 -SH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -OH이고, X2d는 -SH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -OH이고, X2d는 -SH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -OH이고, X2d는 -SH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -OH이고, X2d는 -SH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -OH이고, X2d는 -SH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -OH이고, X2d는 -SH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -OH이고, X2d는 -SH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -OH이고, X2d는 -SH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -OH이고, X2d는 -SH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -OH이고, X2d는 -SH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -OH이고, X2d는 -SH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -OH이고, X2d는 -SH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -OH이고, X2d는 -SH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -OH이고, X2d는 -SH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -OH이고, X2d는 -SH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1d는 -OH이고, X2d는 -SH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다.
제5 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -OH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -OH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -OH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -OH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -OH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -OH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -OH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -OH이고, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -OH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -OH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -OH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -OH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -OH이고, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -OH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -OH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -OH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -OH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -H이다. 일부 실시양태에서, X1d 및 X2d는 -OH이고, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다.
제5 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R1d 및 R2d는 아데닌이다.
제5 측면의 제2 실시양태에서, 화학식 ID의 화합물은 화학식 ID-b의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1d, R2d 및 R3d는 화학식 ID의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제5 측면의 제3 실시양태에서, 화학식 ID의 화합물은 화학식 ID-c의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1d, R2d 및 R3d는 화학식 ID의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제5 측면 및 그의 제2 또는 제3 실시양태의 일부 실시양태에서, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R1d 및 R2d는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -H이다. 일부 실시양태에서, R1d는 아데닌이고, R2d는 구아닌이고, R3d는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -H이다. 일부 실시양태에서, R1d는 구아닌이고, R2d는 아데닌이고, R3d는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -H 또는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다. 일부 실시양태에서, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -OH이다. 일부 실시양태에서, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -H이다. 일부 실시양태에서, R1d 및 R2d는 아데닌이고, R3d는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이다.
제3 측면 및 그의 임의의 상기 실시양태의 일부 실시양태에서, R3d 또는 R4d가 -O-C(=O)-C1-14 알킬인 경우에, -O-C(=O)-C1-14 알킬은 -O-C(=O)-C3-14 알킬, -O-C(=O)-C5-13 알킬, -O-C(=O)-C5-11 알킬, 또는 -O-C(=O)-C9 알킬이고, 바람직하게는 여기서 알킬 쇄는 선형이다. 바람직한 실시양태에서, -O-C(=O)-C1-14 알킬은 -O-C(=O)-(CH2)8-CH3이다.
제5 측면 및 그의 제2 실시양태의 한 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제5 측면 및 그의 제1, 제2 또는 제3 실시양태의 한 실시양태에서, 화합물은
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다.
제6 측면에서, 본 발명은 화학식 IE의 디-F-ML-CDN 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물을 제공한다:
여기서
R1e 및 R2e는 독립적으로 N9 위치를 통해 구조에 결합된 구아닌 또는 아데닌이며, 단 R1e 및 R2e는 둘 다 구아닌이 아니고;
X1e 및 X2e는 독립적으로 -OH 또는 -SH이다.
하기에 기재된 바와 같이, 특정 실시양태에서, X1e 및 X2e는 각각 -SH이고, R3e 및 R4e 중 하나 또는 둘 다는 -F이고; 이들 중 특정 실시양태에서, R3e 및 R4e 중 단지 하나가 F인 경우에, R3e 및 R4e 중 다른 것은 -O-C(=O)-C1-14 알킬, 바람직하게는 -O-C(=O)-C6-12 알킬이다. 이들 중 특정 실시양태에서, R3e는 F이고, R4e는 -O-C(=O)-C1-14 알킬, 바람직하게는 -O-C(=O)-C6-12이다. 추가적으로, X1e 또는 X2e가 -SH인 경우에, 키랄 중심은 분자 내 티오포스페이트에 도입된다. 이들 중 특정 실시양태에서, 화합물은 R,R 부분입체이성질체이다.
제6 측면의 제1 실시양태에서, 화학식 IE의 화합물은 화학식 IE-a의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1e, R2e, X1e 및 X2e는 화학식 IE의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제6 측면의 제2 실시양태에서, 화학식 IE의 화합물은 화학식 IE-b의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1e, R2e, X1e 및 X2e는 화학식 IE의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.
제6 측면 및 그의 제1 또는 제2 실시양태의 일부 실시양태에서, X1e 및 X2e는 -SH이다. 일부 실시양태에서, X1e 및 X2e는 -SH이고, R1e는 아데닌이고, R2e는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1e 및 X2e는 -SH이고, R1e는 구아닌이고, R2e는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1e 및 X2e는 -SH이고, R1e 및 R2e는 아데닌이다.
제6 측면의 일부 실시양태에서, X1e는 -SH이고, X2e는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1e는 -SH이고, X2e는 -OH이고, R1e는 아데닌이고, R2e는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1e는 -SH이고, X2e는 -OH이고, R1e는 구아닌이고, R2e는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1e는 -SH이고, X2e는 -OH이고, R1e 및 R2e는 아데닌이다.
제6 측면의 일부 실시양태에서, X1e는 -OH이고, X2e는 -SH이다. 일부 실시양태에서, X1e는 -OH이고, X2e는 -SH이고, R1e는 아데닌이고, R2e는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1e는 -OH이고, X2e는 -SH이고, R1e는 구아닌이고, R2e는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1e는 -OH이고, X2e는 -SH이고, R1e 및 R2e는 아데닌이다.
제6 측면의 일부 실시양태에서, X1e 및 X2e는 -OH이다. 일부 실시양태에서, X1e 및 X2e는 -OH이고, R1e는 아데닌이고, R2e는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, X1e 및 X2e는 -OH이고, R1e는 구아닌이고, R2e는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, X1e 및 X2e는 -OH이고, R1e 및 R2e는 아데닌이다.
제6 측면 및 그의 제1 또는 제2 실시양태의 일부 실시양태에서, R1e는 아데닌이고, R2e는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R1e는 구아닌이고, R2e는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R1e 및 R2e는 아데닌이다.
제6 측면 및 그의 실시양태의 일부 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제6 측면의 제3 실시양태에서, 화학식 IE의 화합물은 화학식 IE-c의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1e 및 R2e는 독립적으로 N9 위치를 통해 구조에 결합된 구아닌 또는 아데닌이며, 단 R1e 및 R2e는 둘 다 구아닌이 아니다. 일부 실시양태에서, R1e는 아데닌이고, R2e는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R1e는 구아닌이고, R2e는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R1e 및 R2e는 아데닌이다.
제6 측면의 제4 실시양태에서, 화학식 IE의 화합물은 화학식 IE-d의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1e 및 R2e는 독립적으로 N9 위치를 통해 구조에 결합된 구아닌 또는 아데닌이며, 단 R1e 및 R2e는 둘 다 구아닌이 아니다. 일부 실시양태에서, R1e는 아데닌이고, R2e는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R1e는 구아닌이고, R2e는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R1e 및 R2e는 아데닌이다.
제6 측면의 제5 실시양태에서, 화학식 IE의 화합물은 화학식 IE-e의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1f 및 R2f는 독립적으로 N9 위치를 통해 구조에 결합된 구아닌 또는 아데닌이며, 단 R1f 및 R2f는 둘 다 구아닌이 아니다. 일부 실시양태에서, R1f는 아데닌이고, R2f는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R1f는 구아닌이고, R2f는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R1f 및 R2f는 아데닌이다.
제6 측면 및 그의 제3 실시양태의 한 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제6 측면 및 그의 제1, 제3 또는 제4 실시양태의 한 실시양태에서, 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
제6 측면 및 그의 제2 또는 제5 실시양태의 한 실시양태에서, 화합물은
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다.
제6 측면의 제6 실시양태에서, 화학식 IE의 화합물은 화학식 IE-f의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1e 및 R2e는 독립적으로 N9 위치를 통해 구조에 결합된 구아닌 또는 아데닌이며, 단 R1e 및 R2e는 둘 다 구아닌이 아니다. 일부 실시양태에서, R1e는 아데닌이고, R2e는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R1e는 구아닌이고, R2e는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R1e 및 R2e는 아데닌이다.
제6 측면의 제7 실시양태에서, 화학식 IE의 화합물은 화학식 IE-g의 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다:
여기서 R1e 및 R2e는 독립적으로 N9 위치를 통해 구조에 결합된 구아닌 또는 아데닌이며, 단 R1e 및 R2e는 둘 다 구아닌이 아니다. 일부 실시양태에서, R1e는 아데닌이고, R2e는 구아닌이다. 일부 실시양태에서, R1e는 구아닌이고, R2e는 아데닌이다. 일부 실시양태에서, R1e 및 R2e는 아데닌이다.
제6 측면 및 그의 제1, 제6 또는 제7 실시양태의 한 실시양태에서, 화합물은
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다.
제7 측면에서, 하기 구조를 갖는 화합물 2'3'-RR-(3'F-A)(2'F-A):
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이 제공된다.
제8 측면에서, 하기 구조를 갖는 화합물 2'3'-RR-(3'βF-A)(2'F-A):
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이 제공된다.
제9 측면에서, 하기 구조를 갖는 화합물 2'3'-RR-(A)(2'F-A):
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이 제공된다.
제10 측면에서, 하기 구조를 갖는 화합물 2'3'-RR-(3'F-A)(A):
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이 제공된다.
제11 측면에서, 하기 구조를 갖는 화합물 2'3'-RR-(3'H-A)(2'F-A):
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이 제공된다.
제12 측면에서, 하기 구조를 갖는 화합물 2'3'-RR-(G)(2'F-A):
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이 제공된다.
제13 측면에서, 하기 구조를 갖는 화합물 2'3'-RR-(3'데카노일-O-G)(2'F-A):
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이 제공된다.
제14 측면에서, 하기 구조를 갖는 화합물 2'3'-RR-(3'F-G)(2'F-A):
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이 제공된다.
제15 측면에서, 하기 구조를 갖는 화합물 3'2'-RR-(2'F-G)(3'F-A):
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이 제공된다.
제16 측면에서, 하기 구조를 갖는 화합물 3'2'-RR-(2'F-G)(A):
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이 제공된다.
제17 측면에서, 하기 구조를 갖는 화합물 2'3'-(G)(2'F-A):
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이 제공된다.
제18 측면에서, 하기 구조를 갖는 화합물 2'3'-(3'F-G)(2'F-A):
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이 제공된다.
제19 측면에서, 하기 구조를 갖는 화합물 2'3'-RR-(3'βF-A)(A):
또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이 제공된다.
임의의 상기 측면 및 그의 실시양태의 임의의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물에서, X1 및 X2 (X1a, X2a, X1b, X2b 등 포함)가 구조 내에 있고, X1 및 X2가 -SH이거나, 또는 X1이 -SH이고 X2가 -OH이거나, 또는 X1이 -SH이고 X2가 -OH인 경우에, 각각의 티오 치환된 인에서의 입체화학은 R이다. 일부 실시양태에서, 티오포스페이트 입체화학이 구조 내에 정의된 경우에 (예를 들어 제1 측면의 제3 실시양태), 또는 X1 및 X2가 구조 내에 있고, X1 및 X2가 -SH이거나, 또는 X1이 -SH이고 X2가 -OH이거나, 또는 X1이 -SH이고 X2가 -OH인 경우에, 각각의 티오 치환된 인에서의 입체화학은 R이고, 화합물은 실질적으로 순수하다. 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물이, 구조 내 티오포스페이트 입체화학이 R로서 정의된 구조이거나 (예를 들어 제1 측면의 제3 실시양태), 또는 X1 및 X2가 구조 내에 있고, X1 및 X2가 둘 다 -SH인 바람직한 실시양태에서, 각각의 인에서의 입체화학은 R이고, 화합물은 실질적으로 순수하다.
임의의 상기 측면 및 그의 실시양태의 일부 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 그의 임의의 전구약물의 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물, 및 그의 임의의 제약상 허용되는 염의 임의의 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물을 포함한, 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물을 포함한다. 일부 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 그의 제약상 허용되는 용매화물, 제약상 허용되는 수화물 또는 제약상 허용되는 염을 포함한다. 일부 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 그의 제약상 허용되는 염 또는 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물이다. 일부 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 제약상 허용되는 염이다.
임의의 상기 측면 및 그의 실시양태의 일부 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다. 일부 실시양태에서, 제약상 허용되는 염은 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 아연, 알루미늄, 암모늄, 디에틸아민, 이소프로필아민, 올라민, 벤자틴, 베네타민, 트로메타민 (2-아미노-2-(히드록시메틸)프로판-1,3-디올), 모르폴린, 에폴라민, 피페리딘, 피페라진, 피콜린, 디시클로헥실아민, N,N'-디벤질에틸렌디아민, 2-히드록시에틸아민, 트리-(2-히드록시에틸)아민, 클로로프로카인, 콜린, 데아놀, 이미다졸, 디에탄올아민, 에틸렌디아민, 메글루민 (N-메틸글루카민), 프로카인, 디벤질피페리딘, 데히드로아비에틸아민, 글루카민, 콜리딘, 퀴닌, 퀴놀론, 에르부민, 리신 및 아르기닌 염으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
임의의 상기 측면 또는 그의 실시양태의 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 그의 이나트륨 염으로서 제공된다. 일부 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 그의 이나트륨 염, 또는 그의 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물로서 제공된다.
임의의 상기 측면 및 그의 실시양태의 일부 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 인간 STING 의존성 IFN-β 생산의 유도를 측정하는 세포 검정에서 1종 이상의 참조 화합물과 비교하여 더 활성이다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 참조 화합물은 2'3'-(A)(A), 2'3'-(G)(A), 3'2'-(G)(A), 2'3'-RR-(A)(A) 및 2'3'-RR-(G)(A)로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 모노- 또는 디-F-ML-RR-CDN 화합물이고, 1종 이상의 참조 화합물은 2'3'-RR-(A)(A) 및 2'3'-RR-(G)(A)로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 참조 화합물은 디-OH 참조 화합물이다. 일부 실시양태에서, 세포 검정은 hPBMC 검정, 예를 들어 실시예 15에 기재된 바와 같은 검정이다. 일부 실시양태에서, 세포 검정은 THP1 검정, 예를 들어 실시예 16에 기재된 바와 같은 검정이다. 바람직한 실시양태에서, 세포 검정은 검정 세포에 의한 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 또는 참조 화합물의 흡수를 증진시키는 작용제 또는 검정 세포에 대한 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 또는 참조 화합물의 투과성을 증진시키는 작용제의 첨가 없이 수행된다. 일부 실시양태에서, 세포 검정은 검정 세포에 의한 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 또는 참조 화합물의 흡수를 증진시키는 작용제 또는 검정 세포에 대한 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 또는 참조 화합물의 투과성을 증진시키는 작용제의 첨가 없이 수행되는 THP1 세포 검정이며, 여기서 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 40 μM 미만, 30 μM 미만, 20 μM 미만, 15 μM 미만, 또는 10 μM 미만의 EC50을 갖는다. 일부 실시양태에서 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 인간 STING 의존성 IFN-β 생산의 유도를 측정하는 세포 검정에서 40 μM 미만, 30 μM 미만, 20 μM 미만, 15 μM 미만, 또는 10 μM 미만의 EC50을 가지며, 여기서 세포 검정은 검정 세포에 의한 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물의 흡수를 증진시키는 작용제 또는 검정 세포에 대한 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물의 투과성을 증진시키는 작용제의 첨가 없이 수행된다. 한 실시양태에서 세포 검정은 실시예 16에 기재된 바와 같은 THP1 세포 검정이며, 여기서 검정은 디기토닌의 첨가 없이 수행된다. 일부 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 인간 STING 의존성 IFN-β 생산의 유도를 측정하는 세포 검정에서 2'3'-(A)(A), 2'3'-(G)(A), 3'2'-(G)(A), 2'3'-RR-(A)(A) 및 2'3'-RR-(G)(A)로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 참조 화합물의 EC50 미만인 EC50을 가지며, 바람직하게는 여기서 세포 검정은 검정 세포에 의한 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 또는 참조 화합물의 흡수를 증진시키는 작용제 또는 검정 세포에 대한 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 또는 참조 화합물의 투과성을 증진시키는 작용제의 첨가 없이 수행된다. 일부 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 실시예 16에 기재된 바와 같은 THP1 세포 검정에서 디-OH 참조 화합물의 EC50 미만인 EC50을 가지며, 바람직하게는 여기서 검정은 디기토닌의 첨가 없이 수행된다. 일부 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 실시예 16에 기재된 바와 같은 THP1 세포 검정에서 디-OH 참조 화합물의 EC50보다 적어도 2배, 적어도 3배, 적어도 4배, 적어도 5배, 적어도 6배, 적어도 7배 또는 적어도 8배 더 낮은 EC50을 가지며, 여기서 검정은 디기토닌의 첨가 없이 수행된다.
임의의 상기 측면 및 그의 실시양태의 일부 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 적어도 1종의 인간 STING 단백질을 사용하여 측정하였을 때 2'3'-(A)(A), 2'3'-(G)(A), 3'2'-(G)(A), 2'3'-RR-(A)(A) 및 2'3'-RR-(G)(A)로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 참조 화합물보다 더 큰 친화도로 적어도 1종의 인간 STING 대립유전자 단백질 산물 (WT, REF, HAQ, AQ 및 Q 대립유전자 중 어느 하나를 포함함)에 결합한다. 임의의 상기 측면 및 그의 실시양태의 일부 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 디-OH 참조 화합물보다 더 큰 친화도로 적어도 1종의 인간 STING 대립유전자 단백질 산물에 결합한다. 바람직하게, 이것은 hSTING (WT), hSTING (HAQ) 또는 hSTING (REF) 대립유전자에 의해 코딩된 단리된 단백질을 사용하여 (Ishikawa, H., and Barber, G.N. (2008). Nature 455, 674-678; Yi et al., 2013, PLos One 2013 Oct 21, 8(10):e77846; REF 대립유전자의 단백질 서열은 NCBI 참조 서열 NP_938023임) 하기 및 실시예 14에 기재된 바와 같은 시차 주사 형광측정법 (DSF)과 같은 방법을 사용하여 측정된다.
제20 측면에서, 본 발명은 본원 상기에 기재된 바와 같은 제1 내지 제19 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물, 또는 그의 임의의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물, 및 화합물의 세포 흡수 및/또는 안정성을 증진시키는 전달 비히클을 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 일부 실시양태에서, 전달 비히클은 아주반트, 지질, 리포솜, 이중층내 가교된 다층 소포, 생분해성 폴리(D,L-락트산-코-글리콜산) [PLGA]-기재 또는 폴리 무수물-기재 나노입자 또는 마이크로입자, 및 나노다공성 입자-지지된 지질 이중층으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 작용제를 포함한다.
제21 측면에서, 본 발명은 본원 상기에 기재된 바와 같은 제1 내지 제19 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물, 또는 그의 임의의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물, 및 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다.
제21 측면의 제1 실시양태에서, 제약 조성물은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물의 세포 투과성을 증진시키는 작용제를 포함하지 않는다.
제21 측면의 제2 실시양태에서, 제약 조성물은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물의 세포 흡수를 증진시키는 작용제를 포함하지 않는다.
제21 측면의 제3 실시양태에서, 제약 조성물은 화합물의 세포 흡수 및/또는 안정성을 증진시키는 전달 비히클을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 전달 비히클은 아주반트, 지질, 리포솜, 이중층내 가교된 다층 소포, 생분해성 폴리(D,L-락트산-코-글리콜산) [PLGA]-기재 또는 폴리 무수물-기재 나노입자 또는 마이크로입자, 및 나노다공성 입자-지지된 지질 이중층으로 이루어진 군부터 선택된 1종 이상의 작용제를 포함한다.
제20 측면 및 그의 실시양태 또는 제21 측면 및 그의 제1, 제2 또는 제3 실시양태의 일부 실시양태에서, 제약 조성물은 면역 체크포인트 억제제 (예를 들어 CTLA-4, PD-1, Tim-3, Vista, BTLA, LAG-3 및 TIGIT 경로 길항제; PD-1 경로 차단제; PD-L1 억제제; 비제한적으로 항-PD-1 항체 니볼루맙, 펨브롤리주맙 또는 피딜리주맙을 포함함; PD-1 억제제 AMP-224; 항-CTLA-4 항체 이필리무맙; 및 항-PD-L1 항체 BMS-936559, MPDL3280A, MEDI4736 또는 아벨루맙; 대식세포 상에 발현된 CD47 또는 그의 주요 리간드 신호-조절 단백질 알파 (SIRPα)를 표적화하는 항체); A 증식-유도 리간드 (APRIL)를 표적화하는 항체; TLR 효능제 (예를 들어 CpG 또는 모노포스포릴 지질 A); 선천성 면역을 유도하는 불활성화 또는 약독화된 박테리아 (예를 들어, 불활성화 또는 약독화된 리스테리아 모노시토게네스); 톨-유사 수용체 (TLR)를 통해, (NOD)-유사 수용체 (NLR)를 통해, 레티노산 유도성 유전자-기반 (RIG)-I-유사 수용체 (RLR)를 통해, C-유형 렉틴 수용체 (CLR)를 통해, 또는 병원체-연관된 분자 패턴 (PAMP)을 통해 선천성 면역 활성화를 매개하는 조성물; 및 화학요법제로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 추가의 제약 활성 성분을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 면역 체크포인트 억제제는 CTLA-4 경로 길항제, PD-1 경로 길항제, Tim-3 경로 길항제, Vista 경로 길항제, BTLA 경로 길항제, LAG-3 경로 길항제 및 TIGIT 경로 길항제로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 면역 체크포인트 억제제는 항-PD-1 항체, 항-PD-L1 항체, 항-CTLA-4 항체, 항-TIM-3 항체, 항-Vista 항체, 항-BTLA 항체, 항-TIGIT 항체, 항-CD47 항체, 항-SIRPα 항체 또는 항-LAG-3 항체이다. 일부 실시양태에서, 면역 체크포인트 억제제는 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 피딜리주맙, AMP-224, 이필리무맙, BMS-936559, MPDL3280A, MEDI4736 및 아벨루맙으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, TLR 효능제는 CpG 또는 모노포스포릴 지질 A이다.
제20 측면 또는 제21 측면 및 그의 임의의 상기 실시양태의 일부 실시양태에서, 제약 조성물은 수지상 세포 유도, 동원 및/또는 성숙을 자극하는 1종 이상의 시토카인을 발현 및 분비하거나, 또는 gp96-Ig 융합 단백질을 포함한 1종 이상의 열 쇼크 단백질을 발현 및 분비하는 불활성화된 종양 세포를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 시토카인은 GM-CSF, CCL20, CCL3, IL-12p70 및 FLT-3 리간드로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 종양 세포는 방사선을 사용한 처리에 의해 불활성화된다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 시토카인은 GM-CSF, CCL20, CCL3, IL-12p70 및 FLT-3 리간드로 이루어진 군으로부터 선택되고, 종양 세포는 방사선을 사용한 처리에 의해 불활성화된다. 일부 실시양태에서, 불활성화된 종양 세포는 gp96-Ig 융합 단백질을 발현 및 분비한다.
제20 측면 또는 제21 측면 및 그의 임의의 상기 실시양태의 일부 실시양태에서, 제약 조성물은 조성물이 개체에게 투여되는 경우에 1종 이상의 항원(들)에 대한 면역 반응을 유도하기 위한 목적으로 선택된 1종 이상의 항원을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 항원은 재조합 단백질 항원이다. 일부 실시양태에서, 항원은 감염성 질환, 악성종양 또는 알레르기와 관련된 재조합 단백질 항원이다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 항원은 표 1에서의 1종 이상의 항원이다.
제20 측면 또는 제21 측면 및 그의 임의의 상기 실시양태의 일부 실시양태에서, 제약 조성물은 수성 또는 수중유 에멀젼으로서 제제화된다.
제22 측면에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 암을 앓고 있는 개체에게 본원 상기에 기재된 바와 같은 제1 내지 제19 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물, 또는 그의 임의의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물, 또는 본원 상기에 기재된 바와 같은 제20 및 제21 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 그의 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함하는, 상기 개체를 치료하는 방법을 제공한다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 또는 그의 조성물은 비-비경구로 또는 비경구로 투여된다. 일부 실시양태에서, 투여는 정맥내, 피하, 근육내, 피내, 경구, 점막, 질, 자궁경부, 종양주위, 종양내, 또는 직접 종양-배액 림프절(들) 내로의 투여이다. 일부 실시양태에서, 투여는 점막 또는 경구, 바람직하게는 경구 투여이다.
제22 측면의 제1 실시양태에서, 이러한 치료를 받는 개체는 결장직장암, 호흡소화기 편평 세포암, 폐암, 뇌암, 간암, 위암, 방광암, 갑상선암, 부신암, 위장암, 구인두암, 식도암, 두경부암, 난소암, 자궁암, 자궁경부암, 자궁내막암, 유방암, 흑색종, 전립선암, 췌장 암종, 신암종, 육종, 백혈병, 림프종 및 다발성 골수종으로 이루어진 군으로부터 선택된 암을 앓고 있을 수 있다.
제22 측면 및 그의 제1 실시양태의 제2 실시양태에서, 암을 앓고 있는 개체를 치료하는 방법은 1종 이상의 추가의 암 요법을 투여하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 추가의 암 요법은 방사선 요법, 수술, 화학요법, 또는 면역요법 (예를 들어, 비제한적으로, 면역조정제, 면역 체크포인트 억제제, 세포 면역요법, 또는 암 백신)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 추가의 암 요법은 1종 이상의 시토카인 또는 1종 이상의 열 쇼크 단백질을 발현 및 분비하는 불활성화된 종양 세포를 포함한다. 일부 실시양태에서, 시토카인은 GM-CSF, CCL20, CCL3, IL-12p70 및 FLT-3 리간드로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서 열 쇼크 단백질은 gp96-Ig 단백질이다. 일부 실시양태에서, 방법은 화학요법제; 면역 체크포인트 억제제; TLR 효능제; 1종 이상의 암 항원에 대한 면역 반응을 자극하기 위해 선택된 백신, 항체-의존성 세포성 세포독성을 유도하는 치료 항체; 면역조정 세포주; 선천성 면역을 유도하는 불활성화 또는 약독화된 박테리아; 면역 반응을 유도하기 위한 목적으로 선택된 항원, 및 톨-유사 수용체 (TLR), (NOD)-유사 수용체 (NLR), 레티노산 유도성 유전자-기반 (RIG)-I-유사 수용체 (RLR), C-유형 렉틴 수용체 (CLR) 또는 병원체-연관된 분자 패턴 ("PAMP")을 통해 선천성 면역 활성화를 매개하는 조성물로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 추가의 암 요법을 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 면역 체크포인트 억제제는 항-PD-1 항체, 항-PD-L1 항체, 항-CTLA-4 항체, 항-TIM-3 항체, 항-Vista 항체, 항-BTLA 항체, 항-TIGIT 항체, 항-CD47 항체, 항-SIRPα 항체 또는 항-LAG-3 항체이다. 일부 실시양태에서, TLR 효능제는 CpG 또는 모노포스포릴 지질 A이다. 일부 실시양태에서, 항체-의존성 세포성 세포독성을 유도하는 치료 항체는 리툭시맙, 이브리투모맙, 토시투모맙, 세툭시맙, 트라스투주맙, 브렌툭시맙 베도틴, 알렘투주맙, 온콜림, 이필리무밥, 비탁신 또는 베바시주맙이다.
제22 측면 및 그의 제1 및 제2 실시양태의 일부 실시양태에서, 개체는 암 항원을 발현하는 암을 앓고 있고, 상기 개체를 치료하는 방법은 개체에게 암 항원을 발현하는 암 세포를 제거 또는 사멸시키기 위한 최초 요법을 투여하는 것을 추가로 포함하며, 여기서 최초 요법의 투여는 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 또는 그의 조성물의 투여와 동시에, 그 전에 또는 그 후에 이루어진다. 일부 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 또는 그의 조성물은 최초 요법에 대한 신보조 요법으로서 투여된다. 바람직한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 또는 그의 조성물은 최초 요법 후에 투여된다. 일부 실시양태에서, 최초 요법은 포유동물로부터 암 세포를 제거하기 위한 수술, 포유동물에서 암 세포를 사멸시키기 위한 방사선 요법, 또는 수술 및 방사선 요법 둘 다를 포함한다.
제23 측면에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 개체에게 i) 본원 상기에 기재된 바와 같은 제1 내지 제19 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물, 또는 그의 임의의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물, 또는 본원 상기에 기재된 바와 같은 제20 및 제21 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 그의 조성물의 유효량; 및 ii) 항체-의존성 세포성 세포독성을 유도하는 1종 이상의 치료 항체의 유효량을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 질환은 암, 기관 이식의 급성 거부, 제I형 당뇨병, 류마티스 관절염, 건선, 크론병, 재협착 및 알레르기성 천식으로 이루어진 군으로부터 선택된 것인, 개체에서 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 일부 실시양태에서, 암은 림프종 (예를 들어 B-세포 림프종), 유방암, 만성 림프구성 백혈병, 결장직장암, 흑색종, 비소세포 폐 암종, 소세포 폐암, 방광암, 전립선암 및 다른 고형 종양으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 치료 항체는 무로모납-CD3, 인플릭시맙, 다클리주맙, 오말리주맙, 압식시맙, 리툭시맙, 이브리투모맙, 토시투모맙, 세툭시맙, 트라스투주맙, 브렌툭시맙 베도틴, 알렘투주맙, 온콜림, 이필리무밥, 비탁신 및 베바시주맙으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
제24 측면에서, 본 발명은 Th1에서 Th2 면역으로의 이동이 임상 이익을 부여하는 장애의 치료 방법을 제공하며, 여기서 방법은 상기 치료를 필요로 하는 개체에게 본원 상기에 기재된 바와 같은 제1 내지 제19 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물, 또는 그의 임의의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물, 또는 본원 상기에 기재된 바와 같은 제20 및 제21 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 그의 조성물을 투여하는 것을 포함한다. 세포-매개된 면역 (CMI)은 시토카인 IL-2, 인터페론 (IFN)-γ 및 종양 괴사 인자 (TNF)-α를 생산하는 TH1 CD4+ T 림프구와 연관된다. 대조적으로, 체액성 면역은 IL-4, IL-6 및 IL-10을 생산하는 TH2 CD4+ T 림프구와 연관된다. TH1 반응을 향한 면역 치우침은 전형적으로 세포독성 T-세포 림프구 (CTL), 자연 킬러 (NK) 세포, 대식세포 및 단핵구의 활성화를 가져온다. 일반적으로, Th1 반응은 세포내 병원체 (숙주 세포 내부에 있는 바이러스 및 박테리아) 및 종양에 대해 보다 효과적인 반면, Th2 반응은 세포외 박테리아, 연충을 포함한 기생충 및 독소에 대해 보다 효과적이다. 추가로, 선천성 면역의 활성화는 T-헬퍼 유형 1 및 2 (Th1/Th2) 면역계 균형을 정상화하고 이뮤노글로불린 (Ig) E-의존성 알레르기 및 알레르기성 천식을 야기하는 Th2 유형 반응의 과도한 반응을 억제할 것으로 예상된다.
제25 측면에서, 본 발명은 만성 감염성 질환을 앓고 있는 개체를 치료하는 방법을 제공하며, 여기서 방법은 상기 치료를 필요로 하는 개체에게 본원 상기에 기재된 바와 같은 제1 내지 제19 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물, 또는 그의 임의의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물, 또는 본원 상기에 기재된 바와 같은 제20 및 제21 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 그의 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 또는 그의 조성물은 만성 감염성 질환을 치료하는데 사용하기 위한 또 다른 작용제와 조합되어 투여된다. 일부 실시양태에서, 만성 감염성 질환은 HBV 감염, HCV 감염, HPV 감염, HSV 감염 및 간세포성암으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
본원 상기에 기재된 바와 같은 제1 내지 제19 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물, 또는 그의 임의의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물, 또는 본원에 기재된 바와 같은 제20 및 제21 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 그의 조성물은, 본원 상기에 기재된 바와 같은 제22 내지 제25 측면 및 그의 임의의 실시양태의 방법에 기재된 바와 같은 치료를 필요로 하는 개체에게, 다양한 비경구 및 비-비경구 경로에 의해 제약상 허용되는 부형제 (예를 들어 담체, 아주반트, 비히클 등)를 함유하는 제제로 투여될 수 있다. 바람직한 비-비경구 경로는 경구, 점막, 질, 비강 및 자궁경부 경로를 포함한다. 바람직한 비경구 경로는 피하, 정맥내, 근육내, 동맥내, 피내, 척수강내 및 경막외 투여 중 1종 이상을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 바람직하게 투여는 피하, 종양내 또는 종양주위 경로에 의한 투여이다.
본원 상기에 기재된 바와 같은 제1 내지 제19 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물, 또는 그의 임의의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물, 또는 본원에 기재된 바와 같은 제20 및 제21 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 그의 조성물은, 본원 상기에 기재된 바와 같은 제22 내지 제25 측면 및 그의 임의의 실시양태의 방법에 기재된 바와 같은 치료를 필요로 하는 개체에게, 1종 이상의 추가의 제약 활성 성분, 예컨대 아주반트, 지질, 이중층내 가교된 다층 소포, 생분해성 폴리(D,L-락트산-코-글리콜산) [PLGA]-기재 또는 폴리 무수물-기재 나노입자 또는 마이크로입자, 및 나노다공성 입자-지지된 지질 이중층, 면역 체크포인트 억제제 (예를 들어 CTLA-4, PD-1, Tim-3, Vista, BTLA, LAG-3 및 TIGIT 경로 길항제; PD-1 경로 차단제; PD-L1 억제제; 비제한적으로 항-PD-1 항체 니볼루맙, 펨브롤리주맙 또는 피딜리주맙을 포함함; PD-1 억제제 AMP-224; 항-CTLA-4 항체 이필리무맙; 및 항-PD-L1 항체 BMS-936559, MPDL3280A, MEDI4736 또는 아벨루맙), 선천성 면역을 유도하는 불활성화 또는 약독화된 박테리아 (예를 들어, 불활성화 또는 약독화된 리스테리아 모노시토게네스), 톨-유사 수용체 (TLR), (NOD)-유사 수용체 (NLR), 레티노산 유도성 유전자-기반 (RIG)-I-유사 수용체 (RLR), C-유형 렉틴 수용체 (CLR) 또는 병원체-연관된 분자 패턴 ("PAMP")을 통해 선천성 면역 활성화를 매개하는 조성물, 또는 화학요법제와 함께 공-투여될 수 있다.
제26 측면에서, 본 발명은 치료적 또는 예방적 백신과 조합되는 아주반트로서 사용하기 위한, 본원 상기에 기재된 바와 같은 제1 내지 제19 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물, 또는 그의 임의의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물, 또는 본원 상기에 기재된 바와 같은 제20 및 제21 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 그의 조성물을 제공한다. 일부 실시양태에서, 백신은 1종 이상의 미리 결정된 항원에 대한 면역 반응을 자극하기 위해 선택된다. 일부 실시양태에서, 백신은 감염성 질환, 악성종양 또는 알레르기와 관련된 재조합 단백질 항원을 포함한, 1종 이상의 항원을 포함한다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 또는 그의 조성물은 백신과 동시에, 그 전에 또는 그 후에 사용된다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 또는 그의 조성물은 백신과 동일한 조성물로 제제화된다.
제26 측면의 제1 실시양태에서, 백신은 1종 이상의 관심 항원, 1종 이상의 정제된 항원, 1종 이상의 항원을 발현 및/또는 분비하도록 재조합적으로 조작된 생 바이러스 또는 박테리아 전달 벡터, 1종 이상의 항원이 로딩되거나 1종 이상의 항원을 코딩하는 핵산을 포함하는 조성물로 형질감염된 세포를 포함하는 항원 제시 세포 (APC) 벡터, 리포솜 항원 전달 비히클, 또는 1종 이상의 항원을 코딩하는 네이키드 핵산 벡터를 포함하는 불활성화 또는 약독화된 박테리아 또는 바이러스를 포함한다. 일부 실시양태에서, 백신은 항박테리아, 항바이러스 또는 항암 치료적 또는 예방적 백신이다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 항원은 바이러스 항원, 박테리아 항원 및 암 항원으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 항원이다.
제26 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, 백신은 1종 이상의 시토카인을 발현 및 분비하는 불활성화된 종양 세포를 포함한다. 일부 실시양태에서, 시토카인은 GM-CSF, CCL20, CCL3, IL-12p70 및 FLT-3 리간드로 이루어진 군으로부터 선택된다.
제26 측면 및 그의 제1 실시양태의 일부 실시양태에서, 백신은 1종 이상의 열 쇼크 단백질을 발현 및 분비하는 불활성화된 종양 세포를 포함한다. 일부 실시양태에서, 열 쇼크 단백질은 gp96-Ig 융합 단백질이다.
제27 측면에서, 본 발명은 본원 상기에 기재된 바와 같은 임의의 제22 내지 제26 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 질환 또는 적응증을 치료하는데 사용하기 위한, 본원 상기에 기재된 바와 같은 제1 내지 제19 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물, 또는 그의 임의의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물, 또는 본원 상기에 기재된 바와 같은 제20 및 제21 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 그의 조성물을 제공한다. 바람직한 실시양태에서, 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이다. 일부 실시양태에서, 암은 결장직장암, 호흡소화기 편평 세포암, 폐암, 뇌암, 간암, 위암, 방광암, 갑상선암, 부신암, 위장암, 구인두암, 식도암, 두경부암, 난소암, 자궁암, 자궁경부암, 자궁내막암, 유방암, 흑색종, 전립선암, 췌장 암종, 신암종, 육종, 백혈병, 림프종 및 다발성 골수종으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
제28 측면에서, 본 발명은 본원 상기에 기재된 바와 같은 임의의 제22 내지 제26 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 질환 또는 적응증의 치료를 위한 의약의 제조에 사용하기 위한, 본원 상기에 기재된 바와 같은 제1 내지 제19 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물, 또는 그의 임의의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물, 또는 본원 상기에 기재된 바와 같은 제20 및 제21 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 그의 조성물을 제공한다. 바람직한 실시양태에서, 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 암의 치료를 위한 의약의 제조에 사용하기 위한 것이다. 일부 실시양태에서, 암은 결장직장암, 호흡소화기 편평 세포암, 폐암, 뇌암, 간암, 위암, 방광암, 갑상선암, 부신암, 위장암, 구인두암, 식도암, 두경부암, 난소암, 자궁암, 자궁경부암, 자궁내막암, 유방암, 흑색종, 전립선암, 췌장 암종, 신암종, 육종, 백혈병, 림프종 및 다발성 골수종으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
제29 측면에서, 본 발명은 본원 상기에 기재된 바와 같은 제1 내지 제19 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물, 또는 그의 임의의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물, 또는 본원 상기에 기재된 바와 같은 제20 및 제21 측면 및 그의 임의의 실시양태에 기재된 바와 같은 그의 조성물을 포함하는 키트를 제공한다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 또는 그의 조성물은, 예를 들어 바이알, 병 또는 유사한 용기에 포장되며, 이는 추가로, 예를 들어 박스, 봉투 또는 유사한 용기 내에 포장될 수 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 또는 그의 조성물은 포유동물, 예를 들어 인간에게의 투여에 대해 미국 식품 의약품국 또는 유사한 규제 기관에 의해 승인된다. 한 실시양태에서, 이러한 키트는 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 또는 그의 조성물이 적합한 질환 또는 상태에 대해 포유동물, 예를 들어 인간에게 투여하기에 적합하거나 승인된 다른 적응증 및/또는 사용에 대한 서면 지침서를 포함한다. 일부 실시양태에서, 화합물 또는 조성물은 단위 용량 또는 단일 용량 형태, 예를 들어 단일 용량 환제, 캡슐 등으로 포장된다.
도 1a-c는 인간 STING WT (도 1a), HAQ 대립유전자 (도 1b) 및 REF 대립유전자 (도 1c) 단백질에 대한 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물의 DSF 검정에서의 Tm 이동을 도시한다.
도 2는 디-아데닌 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물의 10 μM로의 자극 2시간 후 인간 PBMC에서의 STINGWT/WT, STINGHAQ/HAQ 및 STINGREF/REF 에 의한 상대 IFNβ 발현을 도시한다.
도 3은 구아닌-아데닌 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물의 10 μM로의 자극 2시간 후 인간 PBMC에서의 STINGWT/WT, STINGHAQ/HAQ 및 STINGREF/REF에 의한 상대 IFNβ 발현을 도시한다.
도 4a-e는 화합물 45 및 49의 10 μM 또는 100 μM로의 자극 2 및 6시간 후 인간 PBMC에서의 STINGWT/WT, STINGHAQ/HAQ 및 STINGREF/REF에 의한 IFNβ (4a), TNFα (4b), IFNγ (4c), IL-6 (4d) 및 IL-12p35 (4e)의 상대 발현을 도시한다.
도 5a-d는 1 μg, 10 μg 또는 100 μg의 화합물 26 (5a,b) 및 화합물 35 (5c,d)의 3가지 종양내 주사 후 및 10 μg 또는 100 μg의 참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A)의 종양내 주사 후 B16.SIY 흑색종 마우스 모델에서의 종양 부피를 도시하며, 여기서 종양 부피는 원발성 성장에 대해 (5a,c) 또는 리챌린지 후 (5b,d) 측정되었다.
도 6a-b는 1 μg, 10 μg 또는 100 μg의 화합물 26 (6a) 및 화합물 35 (6b)의 3가지 종양내 주사 및 10 μg 또는 100 μg의 참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A)의 종양내 주사 7일 후 FACS 검정에서 측정된, B16.SIY 흑색종 마우스 모델에서의 PBMC에서의 SIY+ CD8+ T-세포를 도시한다.
도 7a-e는 0.1 μg, 1 μg, 10 μg 또는 100 μg의 화합물 5 (7a), 화합물 10 (7b), 화합물 20 (7c), 화합물 49 (7d) 또는 화합물 50 (7e) 및 1 μg의 참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A)의 종양내 주사 6시간 후 B16.SIY 흑색종 마우스 모델에서의 염증유발 시토카인 TNF-α, IL-6, MCP-1 및 IFN-γ의 혈청 농도를 도시한다.
도 8은 0.1 μg, 1 μg, 10 μg 또는 100 μg의 화합물 5, 10, 20, 49 또는 50 및 1 μg의 참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A)의 종양내 주사 후 B16.SIY 흑색종 마우스 모델에서의 종양 부피를 도시한다.
도 9a-b는 FACS (9a) 또는 IFN-γ ELISPOT (9b)에 의해 측정된, 0.1 μg, 1 μg, 10 μg 또는 100 μg의 화합물 5, 10, 20, 49 또는 50 및 1 μg의 참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A)의 종양내 주사 후 B16.SIY 흑색종 마우스 모델에서의 비장세포에서의 SIY+ CD8+ T-세포를 도시한다.
도 2는 디-아데닌 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물의 10 μM로의 자극 2시간 후 인간 PBMC에서의 STINGWT/WT, STINGHAQ/HAQ 및 STINGREF/REF 에 의한 상대 IFNβ 발현을 도시한다.
도 3은 구아닌-아데닌 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물의 10 μM로의 자극 2시간 후 인간 PBMC에서의 STINGWT/WT, STINGHAQ/HAQ 및 STINGREF/REF에 의한 상대 IFNβ 발현을 도시한다.
도 4a-e는 화합물 45 및 49의 10 μM 또는 100 μM로의 자극 2 및 6시간 후 인간 PBMC에서의 STINGWT/WT, STINGHAQ/HAQ 및 STINGREF/REF에 의한 IFNβ (4a), TNFα (4b), IFNγ (4c), IL-6 (4d) 및 IL-12p35 (4e)의 상대 발현을 도시한다.
도 5a-d는 1 μg, 10 μg 또는 100 μg의 화합물 26 (5a,b) 및 화합물 35 (5c,d)의 3가지 종양내 주사 후 및 10 μg 또는 100 μg의 참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A)의 종양내 주사 후 B16.SIY 흑색종 마우스 모델에서의 종양 부피를 도시하며, 여기서 종양 부피는 원발성 성장에 대해 (5a,c) 또는 리챌린지 후 (5b,d) 측정되었다.
도 6a-b는 1 μg, 10 μg 또는 100 μg의 화합물 26 (6a) 및 화합물 35 (6b)의 3가지 종양내 주사 및 10 μg 또는 100 μg의 참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A)의 종양내 주사 7일 후 FACS 검정에서 측정된, B16.SIY 흑색종 마우스 모델에서의 PBMC에서의 SIY+ CD8+ T-세포를 도시한다.
도 7a-e는 0.1 μg, 1 μg, 10 μg 또는 100 μg의 화합물 5 (7a), 화합물 10 (7b), 화합물 20 (7c), 화합물 49 (7d) 또는 화합물 50 (7e) 및 1 μg의 참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A)의 종양내 주사 6시간 후 B16.SIY 흑색종 마우스 모델에서의 염증유발 시토카인 TNF-α, IL-6, MCP-1 및 IFN-γ의 혈청 농도를 도시한다.
도 8은 0.1 μg, 1 μg, 10 μg 또는 100 μg의 화합물 5, 10, 20, 49 또는 50 및 1 μg의 참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A)의 종양내 주사 후 B16.SIY 흑색종 마우스 모델에서의 종양 부피를 도시한다.
도 9a-b는 FACS (9a) 또는 IFN-γ ELISPOT (9b)에 의해 측정된, 0.1 μg, 1 μg, 10 μg 또는 100 μg의 화합물 5, 10, 20, 49 또는 50 및 1 μg의 참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A)의 종양내 주사 후 B16.SIY 흑색종 마우스 모델에서의 비장세포에서의 SIY+ CD8+ T-세포를 도시한다.
본 발명은 STING (인터페론 유전자의 자극제)로서 공지된 세포질 수용체를 통해 DC를 활성화시키는 모노- 또는 디-플루오로 치환된 혼합된 연결 시클릭-디-뉴클레오티드 (모노- 또는 디-F-ML-CDN) 면역 자극제의 제조 및 용도에 관한 것이다.
병원체-연관된 분자 패턴 (PAMP)으로서 공지된 보존된 미생물 구조는 숙주 세포 패턴 인식 수용체 (배선 코딩된 특이성을 갖는 PRR)에 의해 감지되어, 시토카인 및 케모카인의 유도를 가져오는 하류 신호전달 캐스케이드, 및 특이적 적응 면역 반응의 개시를 촉발한다 (Iwasaki and Medzhitov, Science 327, 291-5, 2010). 선천성 면역계가 감염원으로부터 제시된 PAMP에 의해 어떻게 관여되는지는 침입 병원체가 질환을 야기하는 것을 방지하는데 적절한 적응 반응의 발생을 구체화한다.
면역 조정제 및 아주반트의 설계에 있어서의 한 목적은 지정된 PRR을 활성화시키고 목적하는 반응을 개시하는 정의된 PAMP 또는 합성 분자를 선택하는 것이다. 아주반트, 예컨대 모노포스포릴 지질 A (MPL) 및 CpG는, MyD88 및 TRIF 어댑터 분자를 통해 신호를 전달하고 NF-kB 의존성 염증유발 시토카인의 유도를 매개하는 PRR의 부류인 톨-유사 수용체 (TLR)에 의해 인식되는 미생물-유래된 PAMP이다 (Pandey et al., Cold Spring Harb Perspect Biol 2015;7: a016246). MPL (TLR-4 효능제) 및 CpG (TLR-9 효능제)는 가장 임상적으로 진전된 아주반트이고, FDA에 의해 승인되거나 승인중인 백신의 성분이다 (Einstein et al., Human Vaccines, 5: 705-19, 2009; Ahmed et al., Nature Immunol. 12: 509-17, 2011). 세포 표면 상에 존재하는 TLR (예를 들어, TLR-4) 및 엔도솜 상에 존재하는 TLR (예를 들어, TLR-9)이 세포외 및 공포 병원체를 감지하는 동안에, 바이러스 및 세포내 박테리아를 포함한 다중 병원체의 생산적 성장 사이클이 시토졸에서 발생한다. 세포외, 공포 및 시토졸 PRR의 구획화는 선천성 면역계가 시토졸을 모니터링함으로써 생산적으로 복제되는 병원성 미생물을 감지할 수 있다는 가설을 유도하였다 (Vance et al., Cell Host & Microbe 6: 10-21, 2009). 이것은 시토졸 감시 경로를 포함하는 PRR을 활성화시키는 효능제의 사용에 대한 근거를 제공하며, 세포내 병원체에 대한 보호 및 암에서의 치료 이익과 상관관계가 있는 면역인 세포성 면역을 도출하기 위한 효과적인 백신의 설계를 위한 효과적인 전략일 수 있다.
제I형 인터페론 (IFN-α, IFN-β)은 2종의 별개의 TLR-비의존성 시토졸 신호전달 경로에 의해 유도된 시그너처 시토카인이다. 제1 경로에서, 다양한 형태의 단일-가닥 및 이중-가닥 (ds) RNA는, 레티노산-유도성 유전자 I (RIG-I) 및 흑색종 분화-연관된 유전자 5 (MDA-5)를 포함한 RNA 헬리카제에 의해 감지되고, IFN-β 프로모터 자극제 1 (IPS-1) 어댑터 단백질을 통해 IRF-3 전사 인자의 인산화를 매개하여, IFN-β의 유도를 가져온다 (Ireton and Gale, Viruses 3: 906-19, 2011). IPS-1-/- 결핍 마우스는 RNA 바이러스에 의한 감염에 대한 증가된 감수성을 가졌다. IPS-1 경로를 통해 신호를 전달하는 센서는 다양한 바이러스 단백질에 의한 불활성화를 위해 직접 표적화되며, 이는 생산적 바이러스 감염을 제어하기 위한 이 시토졸 숙주 방어 경로의 요건을 입증한다. 합성 dsRNA, 예컨대 폴리이노신산:폴리시티딜산 (폴리 (I:C)) 및 RNase 소화에 저항하기 위해 폴리 L 리신으로 제제화된 유사체인 폴리 ICLC는 TLR3 및 MDA5 경로 둘 다에 대한 효능제이고, IFN-β의 강력한 유도제이며, 여러 다양한 임상 세팅에서 현재 평가중이다 (Caskey et al., J. Exp. Med. 208: 2357-77, 2011).
STING (인터페론 유전자의 자극제)는 감염성 병원체 또는 이상 숙주 세포로부터 시토졸 이중-가닥 (ds) DNA (위험 연관된 분자 패턴, DAMPS) 감지에 반응하여 제1형 인터페론을 촉발하는 제2 시토졸 경로에 대한 중심 매개자이다 (Barber, Immunol. Rev 243: 99-108, 2011). 대안적으로 TMEM173, MITA, ERIS 및 MPYS로서 공지된 STING은 대식세포, 수지상 세포 (DC) 및 섬유모세포에서 발현된 MyD88-비의존성 숙주 세포 방어 인자가 단순 포진 바이러스에 의한 감염에 반응하여 세포질 DNA 감지에 반응하여 IFN-β 및 NF-κB 의존성 염증유발 시토카인의 발현을 유도하는 것으로 밝혀진 바와 같이 cDNA 발현 클로닝 방법을 사용하여 발견되었다 (Ishikawa and Barber, Nature 455: 674-79, 2008).
시클릭 디뉴클레오티드 (CDN)는 바이오필름의 운동성 및 형성을 포함한 다양한 과정을 조절하는 박테리아에 의해 합성된 편재성 소분자 제2 메신저로서 연구되었다 (Romling et al., Micrb. Mol. Biol. Rev., 77: 1-52, 2013). CDN은 또한 STING에 대한 리간드이다 (Burdette et al., Nature 478: 515-18, 2011). CDN 결합에 반응하여, STING은 TBK-1/IRF-3 축 및 NF-κB 축을 통해 신호전달을 활성화시키고 IFN-β 및 다른 공동-조절되는 유전자의 발현을 유도한다 (Burdette and Vance, Nat Immunol. 14: 19-26, 2013; McWhirter et al., J. Exp. Med. 206: 1899-1911, 2009). 시클릭 (c)-디-AMP는 세포내 박테리아 리스테리아 모노시토게네스로부터 감염된 숙주 항원 제시 세포의 시토졸 내로 다중약물 저항성 유출 펌프에 의해 분비되고, 마우스 리스테리아증 모델에서 CD4+ 및 CD8+ T 세포-매개된 보호와 상관관계가 있다 (Woodward et al., Science 328, 1703-05, 2010; Crimmins et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 105: 10191-10196, 2008). Lm-감염된 대식세포에서의 IFN-β의 유도는 STING 신호전달 경로의 활성화에 의존성이고, MyD88-/- Trif-/- 또는 C57BL/6 모 마우스로부터의 대식세포에서의 c-디-AMP에 의해 유도된 제I형 IFN의 수준은 구별불가능하다 (Leber et al., PLoS Pathog 4(1): e6. doi:10.1371, 2008; Witte et al., mBio 4: e00282-13, 2012). 대조적으로, IFN-β는 비기능성 돌연변이체 STING 단백질을 코딩하는 골든티켓 (gt) 마우스로부터 유래된 대식세포에서 CDN에 의해 유도되지 않는다 (Sauer et al., Infect. Immun. 79: 688-94, 2011). 세포외 박테리아인 비브리오 콜레라(Vibrio cholera)는 하이브리드 c-GMP-AMP (cGAMP) 분자를 생산하며, 이는 또한 STING 경로를 유도한다 (Davies et al., Cell 149: 358-70, 2012). 이들 편재성 제2 메신저에 의한 선천성 면역의 활성화는 CDN 감지가 박테리아 감염에 대한 숙주 방어에 필수적일 수 있다는 것을 시사한다.
STING이 단순 포진 바이러스에 의한 감염에 반응하여 IFN-β의 생산을 유도하기 위한 중요한 센서인 것으로서 발견되었지만, 이 바이러스 병원체로부터의 DNA가 처음에 세포질에서 어떻게 검출되었는지는 규정하기 힘든 것으로 남아있다. 이 난제는, dsDNA에 직접 결합하고 이에 반응하여 STING 경로를 활성화시키고 IFN-β 발현을 유도하는 제2 메신저 시클릭 GMP-AMP (cGAMP)를 합성하는 숙주 세포 뉴클레오티딜 트랜스퍼라제인 시클릭 GMP-AMP 신타제 (cGAS)의 발견에 의해 해결되었다 (Sun et al., Science 339: 786-91, 2013; Wu et al., Science 339: 826-30, 2013). 기능적 cGAS가 없는 세포는 시토졸 DNA에 의한 자극에 반응하여 IFN-β를 발현할 수 없다. 특정한 STING 대립유전자를 발현하는 세포는 CDN에 의한 자극에 비-반응성이었지만, cGAS-의존성 및 TLR9 (MyD88)-비의존성 방식으로의 dsDNA에 의한 자극에 반응성인 것으로 이후에 제시되었다 (Diner et al., 2013). 이러한 관찰은 시토졸 dsDNA 감지에 반응하여 STING-활성화 CDN 리간드를 합성하는 cGAS에 의해 정의된 메카니즘과 비상용성이었다. 이 분명한 역설은 여러 독립적 조사자에 의해 해결되었으며, 이들은 cGAS가 정규 CDN에 비-반응성인 STING 대립유전자를 활성화시키는 비-정규 CDN (c-GMP-AMP; cGAMP)을 생산한다는 것을 입증하였다 (Civril et al., Nature 498: 332-37, 2013, Diner et al., 2013, Gao et al., 2013, Ablasser et al., Nature 498: 380-84, 2013, Kranzusch et al., Cell Reports 3: 1362-68, 2013, Zhang et al., Mol. Cell. 51: 226-35, 2013). 따라서, cGAMP는 STING에 결합하고 이를 활성화시키는 제2 메신저로서 기능한다. 2개의 퓨린 뉴클레오시드가 비스-(3', 5') 연결로 포스페이트 가교에 의해 연결되어 있는, 박테리아에 의해 생산된 CDN 제2 메신저와는 달리, cGAS에 의해 합성된 시클릭-GMP-AMP에서의 뉴클레오티드간 포스페이트 가교는 비-정규 2',5' 및 3',5' 연결 (대안적으로 "혼합된" 연결 또는 ML로 지칭됨)에 의해 연결되어 있으며, c[G(2',5')pA(3',5')p]로 나타내어진다. 이들 2',5'-3',5' 분자는 nM 친화도로 STING에 결합하며, 일부는 박테리아 c-디-GMP보다 300배 더 우수하다. 따라서, 2',5'-3',5' 분자가 STING 표적화의 관점에서 훨씬 더 강력한 생리학적 리간드를 나타내는 것으로 시사되었다. 문헌 [Zhang et al., 2013]; 또한 [Xiao and Fitzgerald, Mol. Cell 51: 135-39, 2013] 참조. 박테리아에 의해 생산된 CDN 사이의 뉴클레오티드간 포스페이트 가교 구조 [정규 비스-(3', 5') 연결] 및 숙주 세포 cGAS에 의해 생산된 CDN 사이의 뉴클레오티드간 포스페이트 가교 구조 (비-정규 2',5' 및 3',5' 연결)의 차이는 STING 수용체가 박테리아에 의해 또는 숙주 세포 cGAS에 의해 생산된 CDN을 구별하도록 진화하였다는 것을 나타낸다.
인간 STING은 정규 CDN에 불응성이지만 비-정규 CDN에는 불응성이 아닌 위치 232에서의 히스티딘을 코딩하는 대립유전자를 포함한 공지된 다형성을 갖는다 (Diner et al., 2013, Jin et al., 2011). hSTING 유전자에서의 단일 뉴클레오티드 다형성은 박테리아-유래된 정규 CDN에 대한 반응성에 영향을 미치는 것으로 제시되었다 (Diner et al., 2013; Gao et al., 2013; Conlon et al., 2013). hSTING의 5종의 반수체형이 확인되었으며 (WT, REF, HAQ, AQ 및 Q 대립유전자), 이는 아미노산 위치 71, 230, 232 및 293에서 다르다 (Jin et al., 2011; Yi et al., 2013). hSTING를 발현하는 세포는 보고된 바로는 비스-(3', 5') 연결을 갖는 박테리아 CDN인 cGAMP, c-디-AMP 및 c-디-GMP에 의한 자극에 약하게 반응하지만, 내인성으로 생산된 cGAS 산물인 ML cGAMP에는 반응성이다 (Diner et al., 2013). 따라서, 공개된 문헌은 모든 인간 STING 대립유전자의 광범위한 활성화를 위해 CDN 뉴클레오티드간 포스페이트 가교가 비-정규, 혼합된 연결 c[G(2',5')pA(3',5')p] 구조를 갖는 것이 바람직하다고 나타낸다. 시클릭 퓨린 디뉴클레오티드의 예는, 예를 들어 미국 특허 번호 7,709458 및 7,592,326; WO2007/054279, WO2014/093936 및 WO2014/189805; 및 문헌 [Yan et al., Bioorg. Med. Chem Lett. 18: 5631 (2008)]에 일부 상세히 기재되어 있다.
천연 CDN 분자는 상기 천연 CDN 분자를 함유하는 백신 제제를 흡수하는 숙주 세포, 예를 들어 항원 제시 세포에 존재하는 포스포디에스테라제에 의한 분해에 감수성이다. 정의된 아주반트의 효력은 이러한 분해에 의해 감소될 수 있는데, 아주반트가 그의 정의된 PRR 표적에 결합하고 이를 활성화시킬 수 없을 것이기 때문이다. 보다 낮은 아주반트 효력은, 예를 들어 측정된 항원-특이적 면역 반응의 크기에 의해 정의된 바와 같은 보다 약한 백신 효력과 상관관계가 있는 보다 낮은 양의 유도된 선천성 면역의 시그너처 분자 (예를 들어, IFN-β)의 발현에 의해 측정될 수 있다.
정의
인간, 포유동물, 포유동물 대상체, 동물, 수의학 대상체, 위약 대상체, 연구 대상체, 실험 대상체, 세포, 조직, 기관 또는 생물학적 유체와 관련하여 본원에 사용된 바와 같은 "투여"는 비제한적으로 대상체, 세포, 조직, 기관 또는 생물학적 유체 등에의 외인성 리간드, 시약, 위약, 소분자, 제약 작용제, 치료제, 진단제 또는 조성물의 접촉을 지칭한다. "투여"는, 예를 들어 치료, 약동학, 진단, 연구, 위약 및 실험 방법을 지칭할 수 있다. 세포의 치료는 세포에의 시약의 접촉, 뿐만 아니라 세포와 접촉하고 있는 유체에의 시약의 접촉을 포괄한다. "투여"는 또한 세포의, 시약, 진단, 결합 조성물에 의한, 또는 또 다른 세포에 의한 시험관내 및 생체외 치료를 포괄한다. "함께 투여된" 또는 "공-투여된"은 2종 이상의 작용제가 단일 조성물로서 투여되는 것을 암시하는 것으로 의도되지 않는다. 단일 조성물로서의 투여가 본 발명에 의해 고려될 지라도, 이러한 작용제는 동일한 또는 상이한 시간에 수행될 수 있거나 동일한 투여 경로 또는 상이한 투여 경로에 의해 수행될 수 있는 개별 투여로서 단일 대상체에게 전달될 수 있다. "동시에 투여된"은 2종 이상의 작용제가 반드시 단일 조성물로서 또는 동일한 투여 경로에 의해 투여되지 않을 지라도, 본질적으로 동일한 시간에 투여되는 것을 암시하는 것으로 의도된다.
"효능제"는, 리간드 및 수용체와 관련할 때, 수용체를 자극하는 분자, 분자의 조합, 복합체 또는 시약의 조합을 포함한다. 예를 들어, 과립구-대식세포 콜로니 자극 인자 (GM-CSF) 수용체의 효능제는 GM-CSF, GM-CSF의 뮤테인 또는 유도체, GM-CSF의 펩티드 모방체, GM-CSF의 생물학적 기능을 모방하는 소분자, 또는 GM-CSF 수용체를 자극하는 항체를 포괄할 수 있다.
본원에 사용된 용어 "알킬"은 24개 이하의 탄소 원자를 함유하는 포화 직쇄형 또는 분지형 탄화수소 라디칼을 지칭한다. 알킬 기의 예는 비제한적으로, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 이소프로필, n-헥실, 옥틸, 데실, 도데실 등을 포함한다. 알킬 기는 전형적으로 1 내지 약 24개의 탄소 원자, 보다 전형적으로 1 내지 약 12개의 탄소 원자, 보다 바람직하게는 1 내지 약 6개의 탄소 원자를 포함한다. 본원에 사용된 용어 "저급 알킬"은 1 내지 약 6개의 탄소 원자를 포함한다. 본원에 사용된 알킬 기는 임의로 1종 이상의 추가의 치환기를 포함할 수 있다.
"길항제"는, 리간드 및 수용체와 관련할 때, 수용체를 억제, 상쇄, 하향조절 및/또는 탈감작화시키는 분자, 분자의 조합 또는 복합체를 포함한다. "길항제"는 수용체의 구성적 활성을 억제하는 임의의 시약을 포괄한다. 구성적 활성은 리간드/수용체 상호작용의 부재 하에서 분명한 것이다. "길항제"는 또한 수용체의 자극된 (또는 조절된) 활성을 억제 또는 방지하는 임의의 시약을 포괄한다. 예로서, GM-CSF 수용체의 길항제는, 임의의 제한을 암시하지 않으면서, 리간드 (GM-CSF)에 결합하고 이것이 수용체에 결합하는 것을 방지하는 항체, 또는 수용체에 결합하고 리간드가 수용체에 결합하는 것을 방지하는 항체, 또는 항체가 수용체를 불활성 입체형태로 잠그는 경우를 포함한다.
본원에 사용된 용어 "항체"는 항원 또는 에피토프에 특이적으로 결합할 수 있는 이뮤노글로불린 유전자 또는 이뮤노글로불린 유전자들 또는 그의 단편으로부터 유래되거나, 이를 모델링하여 만들어지거나, 또는 이에 의해 실질적으로 코딩되는 펩티드 또는 폴리펩티드를 지칭한다. 예를 들어, 문헌 [Fundamental Immunology, 3rd Edition, W.E. Paul, ed., Raven Press, N.Y. (1993); Wilson (1994; J. Immunol. Methods 175:267-273; Yarmush (1992) J. Biochem. Biophys. Methods 25:85-97]을 참조한다. 용어 항체는 항원에 결합하는 능력을 보유하는 항원-결합 부분, 즉, "항원 결합 부위" (예를 들어, 단편, 하위서열, 상보성 결정 영역 (CDR))를 포함하며, (i) VL, VH, CL 및 CH1 도메인으로 이루어진 1가 단편인 Fab 단편; (ii) 힌지 영역에서 디술피드 가교에 의해 연결된 2개의 Fab 단편을 포함하는 2가 단편인 F(ab')2 단편; (iii) VH 및 CH1 도메인으로 이루어진 Fd 단편; (iv) 항체의 단일 아암의 VL 및 VH 도메인으로 이루어진 Fv 단편, (v) VH 도메인으로 이루어진 dAb 단편 (Ward et al., (1989) Nature 341:544-546); 및 (vi) 단리된 상보성 결정 영역 (CDR)을 포함한다. 단일 쇄 항체는 또한 용어 "항체"에 참조로 포함된다.
본원에 사용된 용어 "디-OH 참조 화합물"은 본원에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물의 임의의 2' 및/또는 3' 플루오로 치환기가 결여되어 있으며, 대신에 이들 위치에 -OH 치환기를 갖는 공지된 ML-CDN 화합물을 지칭한다. 바람직하게는, 본원에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물에 대한 공지된 디-OH 참조 화합물은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물과 동일한 베이스를 갖고, 동일한 포스포디에스테르 연결 (예를 들어 포스포디에스테르 또는 티오포스페이트 유사체)을 갖는다. 예를 들어, 2'3'-RR-(3'F-A)(2'F-A), 2'3'-RR-(3'F-A)(A), 2'3'-RR-(A)(2'F-A), 및 2'3'-RR-(3'βF-A)(2'F-A)에 대한 디-OH 참조 화합물은 2'3'-RR-(A)(A)이고; 2'3'-RR-(G)(2'F-A), 3'2'-RR-(2'F-G)(3'F-A), 및 3'2'-RR-(2'F-G)(A)에 대한 디-OH 참조 화합물은 2'3'-RR-(G)(A)이고; 2'3'-(G)(2'F-A) 및 2'3'-(3'F-G)(2'F-A)에 대한 디-OH 참조 화합물은 2'3'-(G)(A)이다. 디-OH 참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A) 및 2'3'-RR-(G)(A)는, 예를 들어 PCT 공개 WO 2014/189805에 기재되어 있다.
세포 투과성 또는 세포에 의한 화합물의 흡수와 관련하여 본원에 사용된 "투과성을 증진시키는 작용제" 또는 "흡수를 증진시키는 작용제"는, 시험관내 또는 생체내에서 화합물에 대한 세포의 투과성을 증진시키거나 또는 세포에 의한 화합물의 흡수를 증진시키는 작용제이다. 본원에 기재된 바와 같은 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물 또는 디-OH 참조 화합물은 시험관내 세포 기반 검정에서 비교될 수 있으며, 여기서 검정은 화합물이 세포에 의해 흡수되도록 하는 작용제, 예컨대 디기토닌의 존재 또는 부재 하에 수행될 수 있다. 본원에 기재된 바와 같은 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물은 놀랍게도 세포의 투과성을 증진시키거나 세포에 의한 화합물의 흡수를 증진시키는 상기 작용제에 대한 필요가 없는 상기 세포 기반 검정, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 THP-1 세포 검정에서 활성이다. 본원에 기재된 바와 같은 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조성물은 세포의 투과성을 증진시키거나 세포에 의한 화합물의 흡수를 증진시키는 작용제 없이, 예를 들어 세포의 투과성을 증진시키거나 세포 흡수를 증진시키는 전달 비히클 없이 제제화될 수 있다. 이러한 첨가제 또는 전달 비히클은 비제한적으로 지질 또는 지질-유사 아주반트, 리포솜, 이중층내 가교된되 다층 소포, 나노담체, 나노입자 등, 예컨대 폴리(락트산) (PLA), 폴리(글리콜산) (PGA) 및/또는 그의 공중합체를 포함하는 나노입자, 예컨대 생분해성 폴리(D,L-락트산-코-글리콜산) [PLGA]-기재 또는 폴리 무수물-기재 나노입자 또는 마이크로입자를 포함한다.
본 발명의 CDN과 관련하여 "실질적으로 정제된"은 명시된 종이 조성물에 존재하는 CDN 활성의 적어도 50 중량%를 차지하고, 보다 종종 적어도 60 중량%를 차지하고, 전형적으로 적어도 70 중량%를 차지하고, 보다 전형적으로 적어도 75 중량%를 차지하고, 가장 전형적으로 적어도 80 중량%를 차지하고, 통상적으로 적어도 85 중량%를 차지하고, 보다 통상적으로 적어도 90 중량%를 차지하고, 가장 통상적으로 적어도 95 중량%를 차지하고, 통상적으로 적어도 98 중량% 또는 그 초과를 차지하는 것으로 의도된다. 물, 완충제, 염, 세제, 환원제, 프로테아제 억제제, 안정화제 (첨가된 단백질, 예컨대 알부민을 포함함) 및 부형제의 중량은 일반적으로 순도의 결정에 사용되지 않는다.
리간드/수용체, 핵산/상보적 핵산, 항체/항원 또는 다른 결합 쌍 (예를 들어, 시토카인 수용체에 대한 시토카인) (각각 일반적으로 "표적 생체분자" 또는 "표적"으로서 본원에서 지칭됨)을 지칭할 때 "특이적으로" 또는 "선택적으로" 결합한다는 단백질 및 다른 생물제제의 불균질 집단에서의 표적의 존재와 관련된 결합 반응을 나타낸다. 특이적 결합은, 예를 들어 고려된 방법의 결합 화합물, 핵산 리간드, 항체, 또는 항체의 항원-결합 부위로부터 유래된 결합 조성물이 비-표적 분자와의 친화도보다 종종 적어도 25% 더 큰, 보다 종종 적어도 50% 더 큰, 가장 종종 적어도 100% (2배) 더 큰, 통상적으로 적어도 10배 더 큰, 보다 통상적으로 적어도 20배 더 큰, 가장 통상적으로 적어도 100배 더 큰 친화도로 그의 표적에 결합하는 것을 의미할 수 있다.
"리간드"는 표적 생체분자에 결합하는 소분자, 핵산, 펩티드, 폴리펩티드, 사카라이드, 폴리사카라이드, 글리칸, 당단백질, 당지질 또는 그의 조합을 지칭한다. 이러한 리간드는 수용체의 효능제 또는 길항제일 수 있지만, 리간드는 또한 효능제 또는 길항제가 아니고 효능제 또는 길항제 특성을 갖지 않는 결합제를 포괄한다. 리간드의 그의 동족 표적에 대한 특이적 결합은 종종 "친화도"의 관점에서 표현된다. 바람직한 실시양태에서, 본 발명의 리간드는 약 104 M-1 내지 약 108 M-1의 친화도로 결합한다. 친화도는 Kd = koff/kon으로서 계산된다 (koff는 해리율 상수이고, Kon은 회합률 상수이고, Kd는 평형 상수임).
친화도는 평형에서 다양한 농도 (c)의 표지된 리간드의 결합 분율 (r)을 측정함으로써 결정될 수 있다. 데이터는 스캐차드 방정식을 사용하여 그래프화된다: r/c = K(n-r): 여기서 r = 평형에서의 결합된 리간드의 몰/수용체의 몰; c = 평형에서의 유리 리간드 농도; K = 평형 회합 상수; 및 n = 수용체 분자당 리간드 결합 부위의 수. 그래프 분석에 의해, r/c가 X-축 상의 r에 대해 Y-축 상에 플롯팅되어, 스캐차드 플롯이 생성된다. 스캐차드 분석에 의한 친화도 측정은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 문헌 [van Erp et al., J. Immunoassay 12: 425-43, 1991; Nelson and Griswold, Comput. Methods Programs Biomed. 27: 65-8, 1988]을 참조한다. 대안적으로, 친화도는 등온 적정 열량측정법 (ITC)에 의해 측정될 수 있다. 전형적 ITC 실험에서, 리간드의 용액이 그의 동족 표적의 용액 내로 적정된다. 그의 상호작용 시에 방출된 열 (ΔH)이 시간 경과에 따라 모니터링된다. 연속 양의 리간드가 ITC 세포 내로 적정됨에 따라, 흡수 또는 방출된 열의 양은 결합의 양에 정비례한다. 시스템이 포화에 도달할 때, 열 신호는 단지 희석 열이 관찰될 때까지 감소한다. 이어서, 결합 곡선이 세포에서의 리간드 및 결합 파트너의 비에 대한 각각의 주사로부터의 열의 플롯으로부터 얻어진다. 결합 곡선이 적절한 결합 모델에 의해 분석되어 KB, n 및 △H가 결정된다. KB = 1/Kd를 주목한다.
본원에 사용된 용어 "전구약물"은, 변형된 화합물이 (비변형된 화합물과 비교하여) 보다 적은 약리학적 활성을 나타내고 변형된 화합물이 신체 내에서 (예를 들어, 표적 세포 또는 표적 기관에서) 효소적 또는 비-효소적 반응을 통해 비변형된 형태로 다시 전환되는 것인, 고려된 화합물의 변형을 지칭한다. 특정 실시양태에서, 한 리보스 상의 히드록실은 전구약물 이탈기를 포함한다. 전구약물은 약물의 물리화학적, 생물제약적 및 약동학적 특성을 변형시킬 수 있다. 종래 전구약물은 활성 약물을 형성하기 위해 생체내에서 형질전환을 겪음으로써 활성화되는 약물로서 분류된다. 전구약물 개발의 이유는 전형적으로 불량한 수용해도, 화학적 불안정성, 낮은 경구 생체이용률, 혈액 뇌 장벽 침투의 결여, 및 모 약물과 연관된 높은 1차 통과 대사이다. 적합한 전구약물 모이어티는, 예를 들어 문헌 ["Prodrugs and Targeted Delivery," J. Rautico, Ed., John Wiley & Sons, 2011]에 기재되어 있다. 예는 세포성 에스테라제에 의해 제거된 이탈기, C6 내지 C18 지방산 에스테르, 미리스토일 에스테르, 펜타노일 에스테르, 헥사노일 에스테르 및 헵타노일 에스테르를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 모노-2'F-ML-CDN 또는 모노-3'F-ML-CDN 화합물은 이러한 에스테르를 형성하기 위해 각각 3' 히드록실 또는 2' 히드록실에서의 치환을 포함할 수 있다.
본원에 사용된 용어 "대상체" 또는 "개체"는 인간 또는 비-인간 유기체를 지칭한다. 따라서, 본원에 기재된 방법 및 조성물은 인간 및 수의학적 질환 둘 다에 적용가능하다. 특정 실시양태에서, 대상체는 "환자", 즉 질환 또는 상태에 대한 의료 관리를 받고 있는 살아있는 인간이다. 이는 병리상태의 징후에 대해 조사되고 있는, 정의된 질병을 갖지 않는 사람을 포함한다. 본 발명의 조성물 및 방법에 의해 표적화되는 특정한 암의 기존 진단을 갖는 대상체가 바람직하다. 본원에 기재된 조성물을 사용한 치료에 바람직한 암은 전립선암, 신암종, 흑색종, 췌장암, 자궁경부암, 난소암, 결장암, 두경부암, 폐암 및 유방암을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
"치료 유효량"은 환자 이익을 보여주기에, 즉 치료될 상태의 증상의 감소, 예방 또는 호전을 유발하기에 충분한 시약 또는 제약 조성물의 양으로서 정의된다. 작용제 또는 제약 조성물이 진단제를 포함하는 경우에, "진단 유효량"은 신호, 영상 또는 다른 진단 파라미터를 생성하기에 충분한 양으로서 정의된다. 제약 제제의 유효량은 개체의 감수성의 정도, 개체의 연령, 성별 및 체중, 및 개체의 특이 반응과 같은 인자에 따라 달라질 것이다. "유효량"은 비제한적으로, 의학적 상태 또는 장애의 증상 또는 징후 또는 그의 원인 과정을 호전, 반전, 완화, 예방 또는 진단할 수 있는 양을 포괄한다. 명백하게 또는 문맥에서 달리 기재되지 않는 한, "유효량"은 상태를 호전시키기에 충분한 최소량으로 제한되지 않는다.
"치료" 또는 "치료하는" (상태 또는 질환에 관하여)은 유익하거나 목적하는 결과, 예컨대 및 바람직하게숙주 세포는 임상 결과를 얻기 위한 접근법이다. 본 발명의 목적상, 질환에 관한 유익하거나 목적하는 결과는 하기 중 1종 이상을 포함하나 이에 제한되지는 않는다: 질환을 예방하는 것, 질환과 연관된 상태를 개선시키는 것, 질환을 치유하는 것, 질환의 중증도를 경감시키는 것, 질환의 진행을 지연시키는 것, 질환과 연관된 1종 이상의 증상을 완화시키는 것, 질환을 앓고 있는 자의 삶의 질을 증가시키는 것, 및/또는 생존을 연장시키는 것. 마찬가지로, 본 발명의 목적상, 상태에 관한 유익하거나 목적하는 결과는 하기 중 1종 이상을 포함하나 이에 제한되지는 않는다: 상태를 예방하는 것, 상태를 개선시키는 것, 상태를 치유하는 것, 상태의 중증도를 경감시키는 것, 상태의 진행을 지연시키는 것, 상태와 연관된 1종 이상의 증상을 완화시키는 것, 상태를 앓고 있는 자의 삶의 질을 증가시키는 것, 및/또는 생존을 연장시키는 것. 예를 들어, 본원에 기재된 조성물이 암의 치료에 사용되는 실시양태에서, 유익하거나 목적하는 결과는 하기 중 1종 이상을 포함하나 이에 제한되지는 않는다: 신생물성 또는 암성 세포의 증식을 감소시키는 것 (또는 파괴하는 것), 암에서 발견된 신생물성 세포의 전이를 감소시키는 것, 종양의 크기를 수축시키는 것, 암으로부터 유발되는 증상을 감소시키는 것, 암을 앓고 있는 자의 삶의 질을 증가시키는 것, 질환을 치료하는데 요구되는 다른 의약의 용량을 감소시키는 것, 암의 진행을 지연시키는 것, 및/또는 암을 갖는 환자의 생존을 연장시키는 것. 문맥에 따라, 대상체의 "치료"는, 예를 들어 대상체가 시약의 투여에 의해 호전될 것으로 예상되는 장애를 포함하는 상황에서 대상체가 치료를 필요로 하는 것을 의미할 수 있다.
"백신"은 예방적 백신을 포괄한다. 백신은 또한 치료 백신, 예를 들어 백신에 의해 제공되는 항원 또는 에피토프와 연관된 상태 또는 장애를 포함하는 포유동물에게 투여되는 백신을 포괄한다.
시클릭 퓨린 디뉴클레오티드
원핵 뿐만 아니라 진핵 세포는 세포 신호전달 및 세포내 및 세포간 소통을 위한 다양한 소분자를 사용한다. cGMP, cAMP 등과 같은 시클릭 뉴클레오티드는 원핵 및 진핵 세포에서 조절 및 개시 활성을 갖는 것으로 공지되어 있다. 진핵 세포와 달리, 원핵 세포는 또한 조절 분자로서 시클릭 퓨린 디뉴클레오티드를 사용한다. 원핵생물에서, 2개의 GTP 분자의 축합이 효소 디구아닐레이트 시클라제 (DGC)에 의해 촉매되어 c-디GMP를 제공하며, 이는 박테리아에서의 중요한 조절제를 나타낸다.
최근 연구는 시클릭 디GMP 또는 그의 유사체가 또한 환자에서 면역 또는 염증 반응을 자극 또는 증진시킬 수 있거나 또는 포유동물에서 아주반트로서 역할을 함으로써 백신에 대한 면역 반응을 증진시킬 수 있는 것으로 시사한다. 병원체-유래된 DNA의 시토졸 검출은 TANK 결합 키나제 1 (TBK1) 및 그의 하류 전사 인자인 IFN-조절 인자 3 (IRF3)을 통한 신호전달을 요구한다. STING (IFN 유전자의 자극제; 또한 MITA, ERIS, MPYS 및 TMEM173으로 공지됨)으로 불리는 막횡단 단백질은 이들 시클릭 퓨린 디뉴클레오티드에 대한 신호전달 수용체로서 기능하여, TBK1-IRF3 신호전달 축의 자극 및 STING-의존성 제I형 인터페론 반응을 유발한다. 예를 들어, 도 1을 참조한다. 문헌 [Burdette et al., Nature 478: 515-18, 2011]은 STING이 시클릭 디구아닐레이트 모노포스페이트에 직접 결합하며, 다른 비관련 뉴클레오티드 또는 핵산에는 결합하지 않는다는 것을 입증하였다.
본 발명의 CDN을 유도하기 위한 전구체로 사용하기 위한 시클릭 퓨린 디뉴클레오티드는, 예를 들어 문헌 [Gao et al., Cell (2013) 153: doi: 10.1016/j.cell.2013.04.046]; 미국 특허 번호 7,709458 및 7,592,326; WO2007/054279, WO2014/093936, 및 WO2014/189805; 및 [Yan et al., Bioorg. Med. Chem Lett. 18: 5631 (2008)]에 일부 상세히 기재되어 있다. 이들 CDN은 본 발명의 CDN을 생산하기 위해 표준 유기 화학 기술을 사용하여 변형될 수 있다.
본원에 기재된 바와 같은 본 발명의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 강력한 STING 효능제이고, 마우스 종양 모델에서 효과적인 것으로 제시된 (Corrales et al., Cell Reports 2015, 11:1018-1031) STING 효능제인 2'3'-RR-(A)(A)와 같은 공지된 비-플루오로 치환된 ML-CDN 화합물에 비해 예상외의 개선을 나타낸다. 본 발명의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 2' 및 3' 위치에서의 치환이 상이한 공지된 화합물, 예를 들어 디-OH 참조 화합물, 예컨대 2'3'-(A)(A), 2'3'-(G)(A), 3'2'-(G)(A), 2'3'-RR-(A)(A) 또는 2'3'-RR-(G)(A)와 비교된다. 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물의 특성은 하기 실시예 14-16에서 입증되며, 여기서 화합물은 i) hSTING (WT), hSTING (HAQ) 또는 hSTING (REF) 중 1종 이상에 대해 실시예 14에 기재된 바와 같은 DSF 검정에서 더 높은 Tm 이동; ii) hSTING (WT), hSTING (HAQ) 또는 hSTING (REF) 중 1종 이상에 대해 실시예 15에 기재된 바와 같은 hPBMC 검정에서 IFN-β 전사체의 더 높은 상대 발현; 또는 iii) 바람직하게는 디기토닌의 부재 하에 수행된, 실시예 16에 기재된 바와 같은 THP1 세포 검정에서 더 낮은 EC50 중 1종 이상을 갖는 것으로서 디-OH 참조 화합물에 비해 개선됨을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN은 i) hSTING (WT), hSTING (HAQ) 또는 hSTING (REF) 중 1종 이상에 대해 실시예 14에 기재된 바와 같은 DSF 검정에서 더 높은 Tm 이동; ii) hSTING (WT), hSTING (HAQ) 또는 hSTING (REF) 중 1종 이상에 대해 실시예 15에 기재된 바와 같은 hPBMC 검정에서 IFN-β 전사체의 더 높은 상대 발현; 또는 iii) 바람직하게는 디기토닌의 부재 하에 수행된, 실시예 16에 기재된 바와 같은 THP1 세포 검정에서 더 낮은 EC50 중 2종 이상을 갖는 것으로서 디-OH 참조 화합물에 비해 개선됨을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN은 i) hSTING (WT), hSTING (HAQ) 또는 hSTING (REF) 중 1종 이상에 대해 실시예 14에 기재된 바와 같은 DSF 검정에서 더 높은 Tm 이동; ii) hSTING (WT), hSTING (HAQ) 또는 hSTING (REF) 중 1종 이상에 대해 실시예 15에 기재된 바와 같은 hPBMC 검정에서 IFN-β 전사체의 더 높은 상대 발현; 또는 iii) 바람직하게는 디기토닌의 부재 하에 수행된, 실시예 16에 기재된 바와 같은 THP1 세포 검정에서 더 낮은 EC50 중 각각을 갖는 것으로서 디-OH 참조 화합물에 비해 개선됨을 나타낸다. 본원에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물의 일부 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 2'3'-RR-(A)(A)와 비교하여 hSTING REF 대립유전자에 대해 실시예 15에 기재된 바와 같은 hPBMC 검정에서 IFN-β 전사체의 적어도 2배, 적어도 5배, 적어도 10배, 적어도 50배, 적어도 100배, 적어도 500배, 또는 적어도 1000배 더 높은 상대 발현을 갖는다. 일부 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 디기토닌의 첨가가 없는 실시예 16에 기재된 THP1 검정에서 디-OH 참조 화합물의 EC50보다 적어도 2배, 적어도 3배, 적어도 4배, 적어도 5배, 적어도 6배, 적어도 7배, 또는 적어도 8배 더 낮은 EC50을 갖는다. 일부 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 세포에 대한 화합물의 투과성을 증진시키는 작용제 또는 세포에 의한 화합물의 흡수를 증진시키는 작용제의 첨가가 없는 THP1 세포 검정에서 40 μM 미만, 30 μM 미만, 20 μM 미만, 15 μM 미만, 또는 10 μM 미만인 EC50을 갖는다. 일부 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 디기토닌의 첨가가 없는 실시예 16에 기재된 THP1 검정에서 40 μM 미만, 30 μM 미만, 20 μM 미만, 15 μM 미만, 또는 10 μM 미만인 EC50을 갖는다.
본원에 기재된 바와 같은 본 발명의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 본원에서 "티오포스페이트"로서 지칭되는 포스포로티오에이트 유사체일 수 있다. 포스포로티오에이트는 비가교 산소 중 하나가 황에 의해 대체된 정상 뉴클레오티드의 변이체이다. 뉴클레오티드간 결합의 황화는 5'에서 3' 및 3'에서 5' DNA POL 1 엑소뉴클레아제, 뉴클레아제 S1 및 P1, RNase, 혈청 뉴클레아제 및 뱀독 포스포디에스테라제를 포함한 엔도- 및 엑소뉴클레아제의 작용을 극적으로 감소시킨다. 추가로, 지질 이중층을 교차시키기 위한 잠재력이 증가한다.
포스포로티오에이트 연결은 본질적으로 키랄성이다. 통상의 기술자는 이 구조에서의 티오포스페이트가 각각 R 또는 S 형태로 존재할 수 있다는 것을 인식할 것이다. 따라서, Rp,Rp, Sp,Sp, Sp,Rp, 및 Rp,Sp 형태가 가능하다. 상기에 기재된 바와 같이, 본 발명의 모노- 또는 디-F-ML-RR-CDN 화합물은 바람직하게는 Rp,Rp 형태, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 2'F-ML-RR-CDN, 3'F-ML-RR-CDN 또는 2'3'F-ML-RR-CDN 화합물이다.
상기에 기재된 바와 같이, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 또한 CDN의 전구약물 형태를 포함한다. 전구약물은 약물의 물리화학적, 생물제약적 및 약동학적 특성을 변형시킬 수 있다. 종래 전구약물은 활성 약물을 형성하기 위해 생체내 변환을 겪음으로써 활성화되는 약물로서 분류된다. 전구약물 개발의 이유는 전형적으로 불량한 수용해도, 화학적 불안정성, 낮은 경구 생체이용률, 혈액 뇌 장벽 침투의 결여, 및 모 약물과 연관된 높은 1차 통과 대사이다. 적합한 전구약물 모이어티는, 예를 들어 문헌 ["Prodrugs and Targeted Delivery," J. Rautico, Ed., John Wiley & Sons, 2011]에 기재되어 있다.
디티오-디포스페이트 ML 시클릭 퓨린 디뉴클레오티드와 관련하여 본원에 사용된 용어 "실질적으로 순수한"은 본원에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-RR-CDN 화합물에 나타난 키랄 인 중심에서의 다른 가능한 입체화학에 비해 적어도 75% 순수한 Rp,Rp 형태를 지칭한다. 예로서, "실질적으로 순수한 2'3'-RR-(G)(2'F-A)"는 Rp,Sp, Sp,Rp 및 Sp,Sp, 즉 2'3'-RS-(G)(2'F-A), 2'3'-SR-(G)(2'F-A) 및 2'3'-SS-(G)(2'F-A)에 관하여 적어도 75% 순수할 것이다. 바람직한 실시양태에서, 실질적으로 순수한 시클릭 퓨린 디뉴클레오티드는 적어도 85% 순수, 적어도 90% 순수, 적어도 95% 순수, 적어도 97% 순수, 및 적어도 99% 순수하다. 본 발명의 실질적으로 순수한 시클릭 퓨린 디뉴클레오티드 제제가 "입체화학적으로 순수"하지만, 이것은 이들 키랄 중심에서의 특정한 입체화학을 갖는 제제 내의 모든 CDN가 달리 동일하다는 것을 나타내는 것으로 의도되지 않는다. 예를 들어, 실질적으로 순수한 시클릭 퓨린 디뉴클레오티드 제제는 2'3'-RR-(G)(2'F-A)티오포스페이트 및 2'3'-RR-(A)(2'F-A)티오포스페이트의 조합을 함유할 수 있고, 여전히 실질적으로 순수한 시클릭 퓨린 디뉴클레오티드 제제일 수 있다. 이러한 제제는 또한 환자 치료에 유리한 하기에 기재된 바와 같은 다른 성분을 포함할 수 있으며, 단 이들 키랄 중심에서의 특정한 입체화학을 갖는 제제 내의 모든 CDN은 동일하다.
본원에 기재된 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 및 조성물은 숙주에게, 단독으로 또는 제약상 허용되는 부형제와 조합되어, 면역 반응을 유도, 변형 또는 자극하기에 충분한 양으로 투여될 있다. 면역 반응은 비제한적으로, 특이적 면역 반응, 비-특이적 면역 반응, 특이적 및 비-특이적 반응 둘 다, 선천성 반응, 1차 면역 반응, 적응 면역, 2차 면역 반응, 기억 면역 반응, 면역 세포 활성화, 면역 세포 증식, 면역 세포 분화, 및 시토카인 발현을 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, 본원에 기재된 모노- 또는 디-F-ML-CDN 및 조성물은 1종 이상의 미리 결정된 항원; 아주반트; CTLA-4 및 PD-1 경로 길항제, 지질, 리포솜, 화학요법제, 면역조정 세포주 등에 대한 면역 반응을 자극하도록 의도된 백신을 포함한 1종 이상의 추가의 조성물과 함께 투여된다.
본원에 기재된 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 및 조성물은 추가의 치료적 또는 예방적 조성물 또는 양식 전에, 그 후에 및/또는 그와 동시에 투여될 수 있다. 이들은 비제한적으로, B7 공동자극 분자, 인터류킨-2, 인터페론-γ, GM-CSF, CTLA-4 길항제, OX-40/OX-40 리간드, CD40/CD40 리간드, 사르그라모스팀, 레바미솔, 백시니아 바이러스, 바실레 칼메트-게랭 (BCG), 리포솜, 명반, 프로인트 완전 또는 불완전 아주반트, 해독된 내독소, 미네랄 오일, 표면 활성 물질, 예컨대 리포레시틴, 플루로닉 폴리올, 다가음이온, 펩티드, 및 오일 또는 탄화수소 에멀젼을 포함한다. 항체 반응에 비해 세포용해 T 세포 반응을 우선적으로 자극하는 T 세포 면역 반응을 유도하기 위한 담체가 바람직하며, 두 유형의 반응을 자극할 수 있는 것도 또한 사용될 수 있다. 작용제가 폴리펩티드인 경우, 폴리펩티드 자체 또는 폴리펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드가 투여될 수 있다. 담체는 세포, 예컨대 항원 제시 세포 (APC) 또는 수지상 세포일 수 있다. 항원 제시 세포는 대식세포, 수지상 세포 및 B 세포와 같은 세포 유형을 포함한다. 다른 전문 항원-제시 세포는 단핵구, 변연부 쿠퍼 세포, 소교세포, 랑게르한스 세포, 지상감입 수지상 세포, 여포성 수지상 세포, 및 T 세포를 포함한다. 통성 항원-제시 세포가 또한 사용될 수 있다. 통성 항원-제시 세포의 예는 성상세포, 여포 세포, 내피 및 섬유모세포를 포함한다. 담체는 폴리펩티드를 발현하도록 또는 백신접종된 개체의 세포에서 후속적으로 발현되는 폴리뉴클레오티드를 전달하도록 형질전환된 박테리아 세포일 수 있다. 면역 반응을 촉발, 증진, 또는 지속시키는 백신의 능력을 증가시키기 위해 아주반트, 예컨대 수산화알루미늄 또는 인산알루미늄이 첨가될 수 있다. 기재된 조성물과 개별적으로 또는 조합되어 사용되는 추가의 물질, 예컨대 시토카인, 케모카인, 및 박테리아 핵산 서열, 예컨대 CpG, 톨-유사 수용체 (TLR) 9 효능제 뿐만 아니라 TLR 2, TLR 4, TLR 5, TLR 7, TLR 8, TLR9에 대한 추가의 효능제, 예컨대 지단백질, LPS, 모노포스포릴리피드 A, 리포테이코산, 이미퀴모드, 레시퀴모드, 및 추가로 레티노산-유도성 유전자 I (RIG-I) 효능제, 예컨대 폴리 I:C도 또한 잠재적 아주반트이다. 아주반트의 다른 대표적인 예는 퀼라야 사포나리아(Quillaja saponaria) 및 코리네박테리움 파르붐(Corynebacterium parvum)의 목피로부터 정제된 균질 사포닌을 포함하는 합성 아주반트 QS-21을 포함한다 (McCune et al., Cancer, 1979; 43:1619). 아주반트는 최적화에 적용된다는 것이 이해될 것이다. 다시 말해서, 통상의 기술자는 사용하기 위한 최고 아주반트를 결정하기 위해 상용 실험에 관여할 수 있다.
추가의 치료제와의 공-투여를 위한 방법은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다 (Hardman, et al. (eds.) (2001) Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th ed., McGraw-Hill, New York, NY; Poole and Peterson (eds.) (2001) Pharmacotherapeutics for Advanced Practice:A Practical Approach, Lippincott, Williams & Wilkins, Phila., PA; Chabner and Longo (eds.) (2001) Cancer Chemotherapy and Biotherapy, Lippincott, Williams & Wilkins, Phila., PA). 일반적으로, 공-투여 또는 함께 투여는 동시에 또는 상이한 시간에 투여될 수 있는 2종 이상의 작용제로 대상체를 치료하는 것을 나타낸다. 예를 들어, 이러한 작용제는 본질적으로 동일한 시간 또는 상이한 시간에 수행될 수 있고 동일한 투여 경로 또는 상이한 투여 경로에 의해 수행될 수 있는 개별 투여로서 단일 대상체에게 전달될 수 있다. 이러한 작용제는 이들이 동일한 시간에 동일한 투여 경로에 의해 투여되도록 동일한 투여 (예를 들어 동일한 제제)로 단일 대상체에게 전달될 수 있다.
본 발명의 화합물의 아주반트 특성 때문에, 그의 용도는 또한 다른 백신, 아주반트, 항원, 항체 및 면역 조정제를 포함한 다른 치료 양식과 조합될 수 있다. 예는 하기에 제공된다.
아주반트
본원 상기에 기재된 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 및 조성물에 추가로, 본 발명의 조성물 또는 방법은, 그의 성질 때문에 표적화된 종양 세포(들)에 존재하는 암 항원에 반응하도록 면역계를 자극하는 작용을 하거나 또는 달리 면역계를 이용할 수 있는 1종 이상의 추가의 물질을 추가로 포함할 수 있다. 이러한 아주반트는 지질, 리포솜, 선천성 면역을 유도하는 불활성화된 박테리아 (예를 들어, 불활성화 또는 약독화된 리스테리아 모노시토게네스), 톨-유사 수용체 (TLR), (NOD)-유사 수용체 (NLR), 레티노산 유도성 유전자-기반 (RIG)-I-유사 수용체 (RLR), C-유형 렉틴 수용체 (CLR), 및/또는 병원체-연관된 분자 패턴 ("PAMP")을 통해 선천성 면역 활성화를 매개하는 조성물을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. PAMP의 예는 지단백질, 리포폴리펩티드, 펩티도글리칸, 지모산, 리포폴리사카라이드, 네이세리아 포린, 플라젤린, 프로필린, 갈락토세라미드, 뮤라밀 디펩티드를 포함한다. 펩티도글리칸, 지단백질 및 리포테이코산은 그람-양성의 세포벽 성분이다. 리포폴리사카라이드는 대부분의 박테리아에 의해 발현되며, MPL이 한 예이다. 플라젤린은 병원성 및 공생 박테리아에 의해 분비되는 박테리아 편모의 구조적 성분을 지칭한다. α-갈락토실세라미드 (α-GalCer)는 자연 킬러 T (NKT) 세포의 활성화제이다. 뮤라밀 디펩티드는 모든 박테리아에 공통인 생물활성 펩티도글리칸 모티프이다. 이 목록은 제한적인 것으로 의도되지 않는다. 바람직한 아주반트 조성물은 하기에 기재된다.
면역 체크포인트 억제제
본원에 기재된 바와 같은 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물은 면역 체크포인트 억제제, 예컨대 CTLA-4 경로 길항제, PD-1 경로 길항제, Tim-3 경로 길항제, Vista 경로 길항제, BTLA 경로 길항제, LAG-3 경로 길항제 또는 TIGIT 경로 길항제로 이루어진 군으로부터 선택된 면역 체크포인트 억제제와 조합되어 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 면역 체크포인트 억제제는 항-CTLA-4 항체, 항-PD-1 항체, 항-Tim-3 항체, 항-Vista 항체, 항-BTLA 항체, 항-LAG-3 항체, 항-TIGIT 항체, 항-CD47 항체 또는 항-SIRPα 항체로 이루어진 군으로부터 선택된다.
본원에 기재된 바와 같은 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물은 CTLA-4 경로 길항제와 조합되어 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 조합은 고형 종양 또는 혈액 악성종양을 치료하는데 사용된다. CTLA-4는 적응 면역 반응의 중요한 음성 조절제인 것으로 생각된다. 활성화된 T 세포는 CTLA-4를 상향조절하여, 이것이 CD28보다 더 높은 친화도로 항원-제시 세포 상의 CD80 및 CD86에 결합하여, T-세포 자극, IL-2 유전자 발현 및 T-세포 증식을 억제한다. CTLA4 차단의 항종양 효과는 결장 암종, 전이성 전립선암 및 전이성 흑색종의 뮤린 모델에서 관찰되었다. 일부 실시양태에서, CTLA-4 경로 길항제는 트레멜리무맙 및 이필리무맙으로 이루어진 군으로부터 선택된 항-CTLA-4 항체 분자이다. 일부 실시양태에서, 항-CTLA-4 항체는, 예를 들어 미국 특허 번호 5,811,097에 개시된 바와 같은 항-CTLA-4 항체이다.
이필리무맙 (예르보이(Yervoy)™, CTLA-4 항체, 또한 MDX-010으로 공지됨, CAS 번호 477202-00-9) 및 트레멜리무맙 (화이자(Pfizer)로부터 이용가능한 IgG2 모노클로날 항체, 이전에 티실리무맙, CP-675,206으로 공지됨)은 인간 CTLA4에 결합하고 이의 CD80 및 CD86과의 상호작용을 방지하는 인간화 모노클로날 항체이다. 이필리무맙 및 트레멜리무맙을 사용하는 I상 및 II상 연구는 암 환자에서 임상 활성을 입증하였다. 유사한 전략에 의해 표적화될 수 있는 다른 음성 면역 조절제는 프로그램화된 세포 사멸 1 (PD-1), B 및 T 림프구 감쇠자, 형질전환 성장 인자 베타 β, 인터류킨-10 및 혈관 내피 성장 인자를 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물은 항-CTLA-4 항체 및 항-PD-1 항체와 조합되어 사용될 수 있다. 한 실시양태에서, 조합은 항-PD-1 항체 분자, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 것, 및 항-CTLA-4 항체, 예를 들어, 이필리무맙을 포함한다. 사용될 수 있는 예시적인 용량은 약 1 내지 10 mg/kg, 예를 들어 3 mg/kg의 항-PD-1 항체 분자의 용량, 및 약 3 mg/kg의 항-CTLA-4 항체, 예를 들어 이필리무맙의 용량을 포함한다.
본원에 기재된 바와 같은 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물은 PD-1 경로 길항제와 조합되어 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 조합은 고형 종양 또는 혈액 악성종양을 치료하는데 사용된다. PD-1은 활성화된 T-세포 상에 발현되는 적응 면역 반응의 또 다른 음성 조절제이다. PD-1은 B7-H1 및 B7-DC에 결합하고, PD-1의 부착은 T-세포 활성화를 억제한다. 항종양 효과는 PD-1 경로 차단으로 입증되었다. 항-PD-1 항체 분자 (예를 들어 니볼루맙 (옵디보(Opdivo)™), 펨브롤리주맙 (키트루다(Keytruda)™), 및 피딜리주맙), 및 AMP-224는 본 발명에서의 사용을 발견할 수 있는 PD-1 경로 차단제의 예인 것으로 문헌에서 보고되었다. 일부 실시양태에서, PD-1 경로 길항제는 니볼루맙, 펨브롤리주맙 또는 피딜리주맙으로 이루어진 군으로부터 선택된 항-PD-1 항체 분자이다.
일부 실시양태에서, 항-PD-1 항체는 니볼루맙이다. 니볼루맙에 대한 대체 명칭은 MDX-1106, MDX-1106-04, ONO-4538, 또는 BMS-936558을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-PD-1 항체는 니볼루맙 (CAS 등록 번호: 946414-94-4)이다. 니볼루맙은 PD1을 특이적으로 차단하는 완전 인간 IgG4 모노클로날 항체이다. 니볼루맙 (클론 5C4) 및 PD1에 특이적으로 결합하는 다른 인간 모노클로날 항체는 US 8,008,449 및 WO2006/121168에 개시되어 있다. 한 실시양태에서, PD-1의 억제제는 니볼루맙이며, 본원에 개시된 서열 (또는 그에 대해 실질적으로 동일 또는 유사한 서열, 예를 들어 명시된 서열에 대해 적어도 85%, 90%, 95% 또는 그 초과 동일한 서열)을 갖는다.
니볼루맙의 중쇄 아미노산 서열은 하기와 같다:
니볼루맙의 경쇄 아미노산 서열은 하기와 같다:
일부 실시양태에서, 항-PD-1 항체는 펨브롤리주맙이다. 펨브롤리주맙 (또한 람브롤리주맙, MK-3475, MK03475, SCH-900475 또는 키트루다®로 지칭됨; 머크(Merck))은 PD-1에 결합하는 인간화 IgG4 모노클로날 항체이다. 펨브롤리주맙 및 다른 인간화 항-PD-1 항체는 문헌 [Hamid, O. et al. (2013) New England Journal of Medicine 369 (2): 134-44], US 8,354,509 및 WO2009/114335에 개시되어 있다. 한 실시양태에서, PD-1의 억제제는 펨브롤리주맙이며, 본원에 개시된 서열 (또는 그에 대해 실질적으로 동일 또는 유사한 서열, 예를 들어 명시된 서열에 대해 적어도 85%, 90%, 95% 또는 그 초과 동일한 서열)을 갖는다.
펨브롤리주맙의 중쇄 아미노산 서열은 하기와 같다:
펨브롤리주맙의 경쇄 아미노산 서열은 하기와 같다:
일부 실시양태에서, 항-PD-1 항체는 피딜리주맙이다. 피딜리주맙 (CT-011; 큐어 테크(Cure Tech))은 PD-1에 결합하는 인간화 IgG1k 모노클로날 항체이다. 피딜리주맙 및 다른 인간화 항-PD-1 모노클로날 항체는 WO2009/101611에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 항-PD-1 항체는 AMP 514 (암플리뮨(Amplimmune)), 또는 US 8,609,089, US 2010028330, 및/또는 US 20120114649에 개시된 바와 같은 항-PD-1 항체이다.
일부 실시양태에서 PD-1 경로 길항제는 발명의 명칭 "PD-1에 대한 항체 분자 및 그의 용도"로 2015년 7월 30일에 공개된 US 2015/0210769에 개시된 항-PD-1 항체 분자이다.
한 실시양태에서, 항-PD-1 항체 분자는 BAP049-클론-A, BAP049-클론-B, BAP049-클론-C, BAP049-클론-D, 또는 BAP049-클론-E의 아미노산 서열; 또는 US 2015/0210769의 표 1에 기재된 바와 같은 것, 또는 그 안의 표 1 내 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 것; 또는 상기 서열 중 어느 것에 대해 실질적으로 동일한 (예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 초과 동일한) 서열을 포함하는 적어도 1 또는 2개의 중쇄 가변 도메인 (임의로 불변 영역을 포함함), 적어도 1 또는 2개의 경쇄 가변 도메인 (임의로 불변 영역을 포함함), 또는 둘 다를 포함한다. 항-PD-1 항체 분자는 임의로, US 2015/0210769의 표 4에 제시된 바와 같은 중쇄, 경쇄, 또는 둘 다로부터의 리더 서열; 또는 그에 대해 실질적으로 동일한 서열을 포함한다.
또 다른 실시양태에서, 항-PD-1 항체 분자는 US 2015/0210769에 기재된 항체, 예를 들어 BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-클론-A, BAP049-클론-B, BAP049-클론-C, BAP049-클론-D, 또는 BAP049-클론-E 중 어느 것으로부터 선택된 항체; 또는 그 안의 표 1에 기재된 바와 같은 것, 또는 그 안의 표 1 내 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 것; 또는 상기 서열 중 어느 것에 대해 실질적으로 동일한 (예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 초과 동일한) 서열의 중쇄 가변 영역 및/또는 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 상보성 결정 영역 영역 (CDR)을 포함한다.
또 다른 실시양태에서, 항-PD-1 항체 분자는 US 2015/0210769의 표 1에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR (또는 집합적으로 모든 CDR)을 포함한다. 한 실시양태에서, CDR 중 1개 이상 (또는 집합적으로 모든 CDR)은 표 1에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열에 비해 1, 2, 3, 4, 5, 6개 또는 그 초과의 변화, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다.
또 다른 실시양태에서, 항-PD-1 항체 분자는 US 2015/0210769의 표 1에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR (또는 집합적으로 모든 CDR)을 포함한다. 한 실시양태에서, CDR 중 1개 이상 (또는 집합적으로 모든 CDR)은 그 안의 표 1에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열에 비해 1, 2, 3, 4, 5, 6개 또는 그 초과의 변화, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다. 특정 실시양태에서, 항-PD-1 항체 분자는 경쇄 CDR에서의 치환, 예를 들어 경쇄의 CDR1, CDR2 및/또는 CDR3에서의 1개 이상의 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, 항-PD-1 항체 분자는 표 1에 따른 경쇄 CDR3에서의 경쇄 가변 영역의 위치 102에서의 치환, 예를 들어 시스테인에서 티로신으로의 치환, 또는 경쇄 가변 영역의 위치 102에서의 시스테인에서 세린 잔기로의 치환을 포함한다 (예를 들어, 변형되지 않은 뮤린 또는 키메라의 경우 서열식별번호: 16 또는 24; 또는 변형된 서열의 경우 서열식별번호: 34, 42, 46, 54, 58, 62, 66, 70, 74, 또는 78 중 어느 것).
또 다른 실시양태에서, 항-PD-1 항체 분자는 US 2015/0210769의 표 1에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개의 CDR (또는 집합적으로 모든 CDR)을 포함한다. 한 실시양태에서, CDR 중 1개 이상 (또는 집합적으로 모든 CDR)은 그 안의 표 1에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열에 비해 1, 2, 3, 4, 5, 6개 또는 그 초과의 변화, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다.
한 실시양태에서, 항-PD-1 항체 분자는 다음을 포함한다: (a) 각각 US 2015/0210769의 표 1에 개시된 바와 같은, 서열식별번호: 4의 VHCDR1 아미노산 서열, 서열식별번호: 5의 VHCDR2 아미노산 서열 및 서열식별번호: 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH); 및 서열식별번호: 13의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열식별번호: 14의 VLCDR2 아미노산 서열 및 서열식별번호: 33의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL); (b) 각각 US 2015/0210769의 표 1에 개시된 바와 같은, 서열식별번호: 1로부터 선택된 VHCDR1 아미노산 서열; 서열식별번호: 2의 VHCDR2 아미노산 서열; 및 서열식별번호: 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VH; 및 서열식별번호: 10의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열식별번호: 11의 VLCDR2 아미노산 서열 및 서열식별번호: 32의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VL; (c) 각각 US 2015/0210769의 표 1에 개시된 바와 같은, 서열식별번호: 224의 VHCDR1 아미노산 서열, 서열식별번호: 5의 VHCDR2 아미노산 서열 및 서열식별번호: 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VH; 및 서열식별번호: 13의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열식별번호: 14의 VLCDR2 아미노산 서열 및 서열식별번호: 33의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VL; 또는 (d) 각각 US 2015/0210769의 표 1에 개시된 바와 같은, 서열식별번호: 224의 VHCDR1 아미노산 서열; 서열식별번호: 2의 VHCDR2 아미노산 서열; 및 서열식별번호: 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VH; 및 서열식별번호: 10의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열식별번호: 11의 VLCDR2 아미노산 서열 및 서열식별번호: 32의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VL.
또 다른 실시양태에서, 항-PD-1 항체 분자는 각각 US 2015/0210769의 표 1에 개시된 바와 같은, (i) 서열식별번호: 1, 서열식별번호: 4 또는 서열식별번호: 224로부터 선택된 VHCDR1 아미노산 서열; 서열식별번호: 2 또는 서열식별번호: 5의 VHCDR2 아미노산 서열; 및 서열식별번호: 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH); 및 (ii) 서열식별번호: 10 또는 서열식별번호: 13의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열식별번호: 11 또는 서열식별번호: 14의 VLCDR2 아미노산 서열, 및 서열식별번호: 32 또는 서열식별번호: 33의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함한다.
일부 실시양태에서 PD-1 경로 길항제는 이뮤노어드헤신 (예를 들어, 불변 영역 (예를 들어, 이뮤노글로불린 서열의 Fc 영역)에 융합된 PD-L1 또는 PD-L2의 세포외 또는 PD-1 결합 부분을 포함하는 이뮤노어드헤신)이다. 일부 실시양태에서, PD-1 억제제는 AMP-224 (B7-DCIg; 암플리뮨; 예를 들어 WO2010/027827 및 WO2011/066342에 개시됨)이고, PD-1과 B7-H1 사이의 상호작용을 차단하는 PD-L2 Fc 융합 가용성 수용체이다.
일부 실시양태에서 PD-1 경로 길항제는 PD-L1 또는 PD-L2 억제제이다. 일부 실시양태에서 PD-L1 또는 PD-L2 억제제는 항-PD-L1 항체 또는 항-PD-L2 항체이다.
일부 실시양태에서, PD-L1 억제제는 항-PD-L1 항체이다. 항-PD-L1 항체 분자의 예시적인 비제한적 조합 및 용도는 발명의 명칭 "PD-L1에 대한 항체 분자 및 그의 용도"로 2016년 4월 21일 공개된 US 2016/0108123에 개시되어 있다.
한 실시양태에서, 항-PD-L1 항체 분자는 BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-hum10, BAP058-hum11, BAP058-hum12, BAP058-hum13, BAP058-hum14, BAP058-hum15, BAP058-hum16, BAP058-hum17, BAP058-클론-K, BAP058-클론-L, BAP058-클론-M, BAP058-클론-N, 또는 BAP058-클론-O 중 어느 것의 아미노산 서열; 또는 US 2016/0108123의 표 1에 기재된 바와 같은 것, 또는 그 안의 표 1 내 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 것; 또는 상기 서열 중 어느 것에 대해 실질적으로 동일한 (예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 초과 동일한) 서열을 포함하는, 적어도 1 또는 2개의 중쇄 가변 도메인 (임의로 불변 영역을 포함함), 적어도 1 또는 2개의 경쇄 가변 도메인 (임의로 불변 영역을 포함함), 또는 둘 다를 포함한다.
또 다른 실시양태에서, 항-PD-L1 항체 분자는 본원에 기재된 항체, 예를 들어 BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-hum10, BAP058-hum11, BAP058-hum12, BAP058-hum13, BAP058-hum14, BAP058-hum15, BAP058-hum16, BAP058-hum17, BAP058-클론-K, BAP058-클론-L, BAP058-클론-M, BAP058-클론-N, 또는 BAP058-클론-O 중 어느 것으로부터 선택된 항체; 또는 US 2016/0108123의 표 1에 기재된 바와 같은 것, 또는 그 안의 표 1 내 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 것; 또는 상기 서열 중 어느 것에 대해 실질적으로 동일한 (예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 초과 동일한) 서열의 중쇄 가변 영역 및/또는 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 상보성 결정 영역 (CDR)을 포함한다.
또 다른 실시양태에서, 항-PD-L1 항체 분자는 US 2016/0108123의 표 1에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR (또는 집합적으로 모든 CDR)을 포함한다. 한 실시양태에서, CDR 중 1개 이상 (또는 집합적으로 모든 CDR)은 표 1에 제시된 아미노산 서열, 또는 표 1에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열에 비해 1, 2, 3, 4, 5, 6개 또는 그 초과의 변화, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다.
또 다른 실시양태에서, 항-PD-L1 항체 분자는 US 2016/0108123의 표 1에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR (또는 집합적으로 모든 CDR)을 포함한다. 한 실시양태에서, CDR 중 1개 이상 (또는 집합적으로 모든 CDR)은 표 1에 제시된 아미노산 서열, 또는 표 1에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열에 비해 1, 2, 3, 4, 5, 6개 또는 그 초과의 변화, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다. 특정 실시양태에서, 항-PD-L1 항체 분자는 경쇄 CDR에서의 치환, 예를 들어 경쇄의 CDR1, CDR2 및/또는 CDR3에서의 1개 이상의 치환을 포함한다.
또 다른 실시양태에서, 항-PD-L1 항체 분자는 US 2016/0108123의 표 1에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개의 CDR (또는 집합적으로 모든 CDR)을 포함한다. 한 실시양태에서, CDR 중 1개 이상 (또는 집합적으로 모든 CDR)은 표 1에 제시된 아미노산 서열, 또는 표 1에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열에 비해 1, 2, 3, 4, 5, 6개 또는 그 초과의 변화, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다.
한 실시양태에서, 항-PD-L1 항체 분자는 다음을 포함한다: (i) 각각 US 2016/0108123의 표 1에 개시된, 서열식별번호: 1, 서열식별번호: 4 또는 서열식별번호: 195로부터 선택된 VHCDR1 아미노산 서열; 서열식별번호: 2의 VHCDR2 아미노산 서열; 및 서열식별번호: 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH); 및 (ii) 각각 US 2016/0108123의 표 1에 개시된, 서열식별번호: 9의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열식별번호: 10의 VLCDR2 아미노산 서열, 및 서열식별번호: 11의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL).
한 실시양태에서, 항-PD-L1 항체 분자는 다음을 포함한다: (i) 각각 US 2016/0108123의 표 1에 개시된, 서열식별번호: 1, 서열식별번호: 4 또는 서열식별번호: 195로부터 선택된 VHCDR1 아미노산 서열; 서열식별번호: 5의 VHCDR2 아미노산 서열, 및 서열식별번호: 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH); 및 (ii) 각각 US 2016/0108123의 표 1에 개시된, 서열식별번호: 12의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열식별번호: 13의 VLCDR2 아미노산 서열, 및 서열식별번호: 14의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL).
한 실시양태에서, 항-PD-L1 항체 분자는 서열식별번호: 1의 VHCDR1 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 항-PD-L1 항체 분자는 서열식별번호: 4의 VHCDR1 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 항-PD-L1 항체 분자는 각각 US 2016/0108123의 표 1에 개시된, 서열식별번호: 195의 VHCDR1 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-PD-L1 억제제는 YW243.55.S70, MPDL3280A, MEDI-4736, MSB-0010718C, 또는 MDX-1105로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, PD-L1 억제제는 항-PD-L1 항체 MSB0010718C이다. MSB0010718C (또한 A09-246-2로 지칭됨; 머크 세로노(Merck Serono))는 PD-L1에 결합하는 모노클로날 항체이다. MSB0010718C 및 다른 인간화 항-PD-L1 항체는 WO2013/079174에 개시되어 있고, 그 안에 개시된 서열 (또는 그에 대해 실질적으로 동일 또는 유사한 서열, 예를 들어 명시된 서열에 대해 적어도 85%, 90%, 95% 또는 그 초과 동일한 서열)을 갖는다.
MSB0010718C의 중쇄 아미노산 서열 (WO2013/079174에 개시된 바와 같은 서열식별번호: 24)은 적어도 하기를 포함한다:
MSB0010718C의 경쇄 아미노산 서열 (WO2013/079174에 개시된 바와 같은 서열식별번호: 25)은 적어도 하기를 포함한다:
한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 YW243.55.S70이다. YW243.55.S70 항체는 WO 2010/077634에 기재된 바와 같은 항-PD-L1 항체 (각각 서열식별번호: 20 및 21에 제시된 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열)이고, 그 안에 개시된 서열 (또는 그에 대해 실질적으로 동일 또는 유사한 서열, 예를 들어 명시된 서열에 대해 적어도 85%, 90%, 95% 또는 그 초과 동일한 서열)을 갖는다.
한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 MDX-1105이다. BMS-936559로도 공지된 MDX-1105는 WO2007/005874에 기재된 항-PD-L1 항체이고, 그 안에 개시된 서열 (또는 그에 대해 실질적으로 동일 또는 유사한 서열, 예를 들어 명시된 서열에 대해 적어도 85%, 90%, 95% 또는 그 초과 동일한 서열)을 갖는다.
한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 MDPL3280A (제넨테크(Genentech) / 로슈(Roche))이다. MDPL3280A는 PD-L1에 결합하는 인간 Fc 최적화된 IgG1 모노클로날 항체이다. MDPL3280A 및 PD-L1에 대한 다른 인간 모노클로날 항체는 미국 특허 번호 7,943,743 및 미국 공개 번호 20120039906에 개시되어 있다.
다른 실시양태에서, PD-L2 억제제는 AMP-224이다. AMP-224는 PD1과 B7-H1 사이의 상호작용을 차단하는 PD-L2 Fc 융합 가용성 수용체 (B7-DCIg; 암플리뮨; 예를 들어, WO2010/027827 및 WO2011/066342에 개시됨)이다.
본원에 기재된 바와 같은 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물은 TIM-3 경로 길항제와 조합되어 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 조합은 고형 종양 또는 혈액 악성종양을 치료하는데 사용된다. 일부 실시양태에서, TIM-3 경로 길항제는 항-TIM-3 항체이다. 일부 실시양태에서, 항-TIM-3 항체 분자는 발명의 명칭 "TIM-3에 대한 항체 분자 및 그의 용도"로 2015년 8월 6일에 공개된 US 2015/0218274에 개시되어 있다.
한 실시양태에서, 항-TIM-3 항체 분자는 ABTIM3, ABTIM3-hum01, ABTIM3-hum02, ABTIM3-hum03, ABTIM3-hum04, ABTIM3-hum05, ABTIM3-hum06, ABTIM3-hum07, ABTIM3-hum08, ABTIM3-hum09, ABTIM3-hum10, ABTIM3-hum11, ABTIM3-hum12, ABTIM3-hum13, ABTIM3-hum14, ABTIM3-hum15, ABTIM3-hum16, ABTIM3-hum17, ABTIM3-hum18, ABTIM3-hum19, ABTIM3-hum20, ABTIM3-hum21, ABTIM3-hum22, ABTIM3-hum23의 아미노산 서열; 또는 US 2015/0218274의 표 1-4에 기재된 바와 같은 것; 또는 그 안의 표 1-4 내 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 것; 또는 상기 서열 중 어느 것에 대해 실질적으로 동일한 (예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 초과 동일한) 서열을 포함하는 적어도 1 또는 2개의 중쇄 가변 도메인 (임의로 불변 영역을 포함함), 적어도 1 또는 2개의 경쇄 가변 도메인 (임의로 불변 영역을 포함함), 또는 둘 다를 포함한다. 항-TIM-3 항체 분자는 임의로, US 2015/0218274에 제시된 바와 같은 중쇄, 경쇄, 또는 둘 다로부터의 리더 서열; 또는 그에 대해 실질적으로 동일한 서열을 포함한다.
또 다른 실시양태에서, 항-TIM-3 항체 분자는 US 2015/0218274에 기재된 항체, 예를 들어 ABTIM3, ABTIM3-hum01, ABTIM3-hum02, ABTIM3-hum03, ABTIM3-hum04, ABTIM3-hum05, ABTIM3-hum06, ABTIM3-hum07, ABTIM3-hum08, ABTIM3-hum09, ABTIM3-hum10, ABTIM3-hum11, ABTIM3-hum12, ABTIM3-hum13, ABTIM3-hum14, ABTIM3-hum15, ABTIM3-hum16, ABTIM3-hum17, ABTIM3-hum18, ABTIM3-hum19, ABTIM3-hum20, ABTIM3-hum21, ABTIM3-hum22, ABTIM3-hum23 중 어느 것으로부터 선택된 항체; 또는 US 2015/0218274의 표 1-4에 기재된 바와 같은 것; 또는 그 안의 표 1-4 내 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 것; 또는 상기 서열 중 어느 것에 대해 실질적으로 동일한 (예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 초과 동일한) 서열의 중쇄 가변 영역 및/또는 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 상보성 결정 영역 (CDR)을 포함한다.
또 다른 실시양태에서, 항-TIM-3 항체 분자는 US 2015/0218274의 표 1-4에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1-4에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR (또는 집합적으로 모든 CDR)을 포함한다. 한 실시양태에서, CDR 중 1개 이상 (또는 집합적으로 모든 CDR)은 그 안의 표 1-4에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1-4에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열에 비해 1, 2, 3, 4, 5, 6개 또는 그 초과의 변화, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다.
또 다른 실시양태에서, 항-TIM-3 항체 분자는 US 2015/0218274의 표 1-4에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1-4에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR (또는 집합적으로 모든 CDR)을 포함한다. 한 실시양태에서, CDR 중 1개 이상 (또는 집합적으로 모든 CDR)은 그 안의 표 1-4에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1-4에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열에 비해 1, 2, 3, 4, 5, 6개 또는 그 초과의 변화, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다. 특정 실시양태에서, 항-TIM-3 항체 분자는 경쇄 CDR에서의 치환, 예를 들어 경쇄의 CDR1, CDR2 및/또는 CDR3에서의 1개 이상의 치환을 포함한다.
또 다른 실시양태에서, 항-TIM-3 항체 분자는 US 2015/0218274의 표 1-4에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1-4에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개의 CDR (또는 집합적으로 모든 CDR)을 포함한다. 한 실시양태에서, CDR 중 1개 이상 (또는 집합적으로 모든 CDR)은 그 안의 표 1-4에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1-4에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열에 비해 1, 2, 3, 4, 5, 6개 또는 그 초과의 변화, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다.
한 실시양태에서, 항-TIM-3 항체 분자는 다음을 포함한다: (a) 각각 US 2015/0218274의 표 1-4에 개시된 바와 같은, 서열식별번호: 9로부터 선택된 VHCDR1 아미노산 서열; 서열식별번호: 10의 VHCDR2 아미노산 서열; 및 서열식별번호: 5의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH); 및 서열식별번호: 12의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열식별번호: 13의 VLCDR2 아미노산 서열, 및 서열식별번호: 14의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL); (b) 각각 US 2015/0218274의 표 1-4에 개시된 바와 같은, 서열식별번호: 3으로부터 선택된 VHCDR1 아미노산 서열; 서열식별번호: 4의 VHCDR2 아미노산 서열; 및 서열식별번호: 5의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VH; 및 서열식별번호: 6의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열식별번호: 7의 VLCDR2 아미노산 서열, 및 서열식별번호: 8의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VL; (c) 각각 US 2015/0218274의 표 1-4에 개시된 바와 같은, 서열식별번호: 9로부터 선택된 VHCDR1 아미노산 서열; 서열식별번호: 25의 VHCDR2 아미노산 서열; 및 서열식별번호: 5의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VH; 및 서열식별번호: 12의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열식별번호: 13의 VLCDR2 아미노산 서열, 및 서열식별번호: 14의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VL; (d) 각각 US 2015/0218274의 표 1-4에 개시된 바와 같은, 서열식별번호: 3으로부터 선택된 VHCDR1 아미노산 서열; 서열식별번호: 24의 VHCDR2 아미노산 서열; 및 서열식별번호: 5의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VH; 및 서열식별번호: 6의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열식별번호: 7의 VLCDR2 아미노산 서열, 및 서열식별번호: 8의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VL; (e) 각각 US 2015/0218274의 표 1-4에 개시된 바와 같은, 서열식별번호: 9로부터 선택된 VHCDR1 아미노산 서열; 서열식별번호: 31의 VHCDR2 아미노산 서열; 및 서열식별번호: 5의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VH; 및 서열식별번호: 12의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열식별번호: 13의 VLCDR2 아미노산 서열, 및 서열식별번호: 14의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VL; 또는 (f) 각각 US 2015/0218274의 표 1-4에 개시된 바와 같은, 서열식별번호: 3으로부터 선택된 VHCDR1 아미노산 서열; 서열식별번호: 30의 VHCDR2 아미노산 서열; 및 서열식별번호: 5의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VH; 및 서열식별번호: 6의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열식별번호: 7의 VLCDR2 아미노산 서열, 및 서열식별번호: 8의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VL.
일부 실시양태에서, TIM-3 경로 길항제는 미국 특허 번호 8,552,156, WO 2011/155607, EP 2581113 또는 미국 공개 번호 2014/044728에 개시된 바와 같은 항-TIM-3 항체이다.
본원에 기재된 바와 같은 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물은 LAG-3 경로 길항제와 조합되어 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 조합은 고형 종양 또는 혈액 악성종양을 치료하는데 사용된다. 일부 실시양태에서, LAG-3 경로 길항제는 항-LAG-3 항체이다. 일부 실시양태에서 항-LAG-3 항체 분자는 발명의 명칭 "LAG-3에 대한 항체 분자 및 그의 용도"로 2015년 3월 13일에 출원된 US 2015/0259420에 개시되어 있다.
한 실시양태에서, 항-LAG-3 항체 분자는 BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (예를 들어, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, 또는 BAP050-hum20-Ser), BAP050-클론-F, BAP050-클론-G, BAP050-클론-H, BAP050-클론-I, 또는 BAP050-클론-J 중 어느 것의 아미노산 서열; 또는 US 2015/0259420의 표 1에 기재된 바와 같은 것, 또는 그 안의 표 1 내 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 것; 또는 상기 서열 중 어느 것에 대해 실질적으로 동일한 (예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 초과 동일한) 서열을 포함하는 적어도 1 또는 2개의 중쇄 가변 도메인 (임의로 불변 영역을 포함함), 적어도 1 또는 2개의 경쇄 가변 도메인 (임의로 불변 영역을 포함함), 또는 둘 다를 포함한다.
또 다른 실시양태에서, 항-LAG-3 항체 분자는 본원에 기재된 항체, 예를 들어 BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (예를 들어, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, 또는 BAP050-hum20-Ser), BAP050-클론-F, BAP050-클론-G, BAP050-클론-H, BAP050-클론-I, 또는 BAP050-클론-J 중 어느 것으로부터 선택된 항체; 또는 US 2015/0259420의 표 1에 기재된 바와 같은 것, 또는 그 안의 표 1 내 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 것; 또는 상기 서열 중 어느 것에 대해 실질적으로 동일한 (예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 초과 동일한) 서열의 중쇄 가변 영역 및/또는 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 상보성 결정 영역 (CDR)을 포함한다.
또 다른 실시양태에서, 항-LAG-3 항체 분자는 US 2015/0259420의 표 1에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR (또는 집합적으로 모든 CDR)을 포함한다. 한 실시양태에서, CDR 중 1개 이상 (또는 집합적으로 모든 CDR)은 그 안의 표 1에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열에 비해 1, 2, 3, 4, 5, 6개 또는 그 초과의 변화, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다.
또 다른 실시양태에서, 항-LAG-3 항체 분자는 US 2015/0259420의 표 1에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR (또는 집합적으로 모든 CDR)을 포함한다. 한 실시양태에서, CDR 중 1개 이상 (또는 집합적으로 모든 CDR)은 그 안의 표 1에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열에 비해 1, 2, 3, 4, 5, 6개 또는 그 초과의 변화, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다. 특정 실시양태에서, 항-PD-L1 항체 분자는 경쇄 CDR에서의 치환, 예를 들어 경쇄의 CDR1, CDR2 및/또는 CDR3에서의 1개 이상의 치환을 포함한다.
또 다른 실시양태에서, 항-LAG-3 항체 분자는 US 2015/0259420의 표 1에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개의 CDR (또는 집합적으로 모든 CDR)을 포함한다. 한 실시양태에서, CDR 중 1개 이상 (또는 집합적으로 모든 CDR)은 그 안의 표 1에 제시된 아미노산 서열, 또는 그 안의 표 1에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열에 비해 1, 2, 3, 4, 5, 6개 또는 그 초과의 변화, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다.
한 실시양태에서, 항-LAG-3 항체 분자는 다음을 포함한다: (i) 각각 US 2015/0259420의 표 1에 개시된 바와 같은, 서열식별번호: 1, 서열식별번호: 4 또는 서열식별번호: 286으로부터 선택된 VHCDR1 아미노산 서열; 서열식별번호: 2의 VHCDR2 아미노산 서열; 및 서열식별번호: 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH); 및 (ii) 각각 US 2015/0259420의 표 1에 개시된 바와 같은, 서열식별번호: 10의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열식별번호: 11의 VLCDR2 아미노산 서열, 및 서열식별번호: 12의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL).
또 다른 실시양태에서, 항-LAG-3 항체 분자는 다음을 포함한다: (i) 각각 US 2015/0259420의 표 1에 개시된 바와 같은, 서열식별번호: 1, 서열식별번호: 4 또는 서열식별번호: 286으로부터 선택된 VHCDR1 아미노산 서열; 서열식별번호: 5의 VHCDR2 아미노산 서열 및 서열식별번호: 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH); 및 (ii) 각각 US 2015/0259420의 표 1에 개시된 바와 같은, 서열식별번호: 13의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열식별번호: 14의 VLCDR2 아미노산 서열, 및 서열식별번호: 15의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL).
한 실시양태에서, 항-LAG-3 항체 분자는 US 2015/0259420의 표 1에 개시된 바와 같은 서열식별번호: 1의 VHCDR1 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 항-LAG-3 항체 분자는 US 2015/0259420의 표 1에 개시된 바와 같은 서열식별번호: 4의 VHCDR1 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 항-LAG-3 항체 분자는 US 2015/0259420의 표 1에 개시된 바와 같은 서열식별번호: 286의 VHCDR1 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-LAG-3 항체는 BMS-986016이다. BMS-986016 (또한 BMS986016으로 지칭됨; 브리스톨-마이어스 스큅(Bristol-Myers Squibb))은 LAG-3에 결합하는 모노클로날 항체이다. BMS-986016 및 다른 인간화 항-LAG-3 항체는 US 2011/0150892, WO2010/019570 및 WO2014/008218에 개시되어 있다.
본원에 기재된 바와 같은 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물은 APRIL 길항제와 조합되어 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 조합은 혈액 악성종양을 치료하는데 사용된다. 일부 실시양태에서, APRIL 길항제는 항-APRIL 항체이다. 일부 실시양태에서 항-APRIL 항체 분자는 hAPRIL.01A 또는 hAPRIL.03A이다 (Guadagnoli et al., Blood 2011 117:6856-6865; doi:10.1182/blood-2011-01-330852).
T-세포 수용체 효능제
본원에 기재된 바와 같은 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물은 T-세포 수용체 효능제, 예컨대 CD28 효능제, OX40 효능제, GITR 효능제, CD137 효능제, CD27 효능제 또는 HVEM 효능제와 조합되어 사용될 수 있다.
본원에 기재된 바와 같은 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물은 CD27 효능제와 조합되어 사용될 수 있다. 예시적인 CD27 효능제는, 예를 들어 PCT 공개 번호 WO 2012/004367에 기재된 바와 같은 항-CD27 효능작용 항체를 포함한다.
본원에 기재된 바와 같은 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물은 CD47/SIRPα 경로 길항제와 조합되어 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 조합은 고형 종양 또는 혈액 악성종양을 치료하는데 사용된다. 일부 실시양태에서, CD47/SIRPα 경로 길항제는 항-CD47 항체이다. 일부 실시양태에서 항-CD47 항체 분자는 Hu5F9-G4이다 (Liu et al., PLoS One 10(9):e0137345. doi: 10.1371/journal.pone.0137345, 2015). 일부 실시양태에서, CD47/SIRPα 경로 길항제는 항-SIRPα 항체이다. 일부 실시양태에서 항-SIRPα 항체 분자는 WO2015138600 또는 WO2013056352에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, CD47/SIRPα 경로 길항제는 문헌 [Weiskopf et al., Science 2013; 341(6141):10.1126/science.1238856. doi:10.1126/science.1238856]에 기재된 바와 같은 SIRPα 변이체이다.
본원에 기재된 바와 같은 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물은 GITR 효능제와 조합되어 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 조합은 고형 종양 또는 혈액 악성종양을 치료하는데 사용된다. 예시적인 GITR 효능제는, 예를 들어 GITR 융합 단백질 및 항-GITR 항체 (예를 들어, 2가 항-GITR 항체), 예컨대 미국 특허 번호 6,111,090, 유럽 특허 번호 0920505B1, 미국 특허 번호 8,586,023, PCT 공개 번호 WO 2010/003118 및 2011/090754에 기재된 GITR 융합 단백질, 또는 예를 들어 미국 특허 번호 7,025,962, 유럽 특허 번호 1947183B1, 미국 특허 번호 7,812,135, 미국 특허 번호 8,388,967, 미국 특허 번호 8,591,886, 유럽 특허 번호 EP 1866339, PCT 공개 번호 WO 2011/028683, 미국 특허 번호 8,709,424, PCT 공개 번호:WO 2013/039954, 국제 공개 번호 WO2013/039954, 미국 공개 번호 US2014/0072566, 국제 공개 번호 WO2015/026684, PCT 공개 번호 WO2005/007190, PCT 공개 번호 WO 2007/133822, PCT 공개 번호 WO2005/055808, PCT 공개 번호 WO 99/40196, PCT 공개 번호 WO 2001/03720, PCT 공개 번호 WO99/20758, 미국 특허 번호 6,689,607, PCT 공개 번호 WO2006/083289, PCT 공개 번호 WO 2005/115451, 미국 특허 번호 7,618,632, PCT 공개 번호 WO 2011/051726, 국제 공개 번호 WO2004060319, 및 국제 공개 번호 WO2014012479에 기재된 항-GITR 항체를 포함한다.
한 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물은, 예를 들어 WO2015/026684에 기재된 바와 같이 PD-1 억제제와 조합되어 사용된 GITR 효능제와 조합되어 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물은, 예를 들어 WO2004060319 및 국제 공개 번호 WO2014012479에 기재된 바와 같이 TLR 효능제와 조합되어 사용된 GITR 효능제와 조합되어 사용된다.
TLR 효능제
본원에 기재된 바와 같은 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물은 톨 유사 수용체 효능제와 조합되어 사용될 수 있다. 본원에 사용된 용어 "톨 유사 수용체" (또는 "TLR")는 미생물 산물을 감지하고/거나 적응 면역 반응을 개시하는 단백질 또는 그의 단편의 톨-유사 수용체 패밀리의 구성원을 지칭한다. 한 실시양태에서, TLR은 수지상 세포 (DC)를 활성화시킨다. 톨 유사 수용체 (TLR)는 미생물 병원체를 인식하는 선천성 면역계의 센서로서 처음에 확인되었다. TLR은 류신-풍부 반복부의 엑토도메인, 막횡단 도메인 및 세포내 TIR (톨/IL-1R) 도메인을 포함하는 보존된 막 관통 분자의 패밀리를 포함한다. TLR은 "PAMP" (병원체 연관된 분자 패턴)로 종종 지칭되는, 미생물에서의 뚜렷한 구조를 인식한다. TLR에 대한 리간드 결합은 염증 및 면역에 수반되는 인자의 생산을 유도하는 세포내 신호전달 경로의 캐스케이드를 불러온다.
인간에서, 10개의 TLR이 확인되었다. 세포의 표면 상에 발현되는 TLR은 TLR-1, -2, -4, -5, 및 -6을 포함하며, 한편 TLR-3, -7/8, 및 -9는 ER 구획에서 발현된다. 인간 수지상 세포 하위세트는 뚜렷한 TLR 발현 패턴에 기초하여 확인될 수 있다. 예로서, 골수성 또는 "통상적인" 하위세트의 DC (mDC)는 자극될 때 TLR 1-8을 발현하고, 활성화 마커의 캐스케이드 (예를 들어 CD80, CD86, MHC 부류 I 및 II, CCR7), 염증유발 시토카인 및 케모카인이 생산된다. 이 자극 및 유발된 발현의 결과는 항원-특이적 CD4 + 및 CD8+ T 세포 프라이밍이다. 이들 DC는 항원을 흡수하여 이들을 T 세포에 적절한 형태로 제시할 수 있는 증진된 능력을 획득한다. 대조적으로, 형질세포양 하위세트의 DC (pDC)는 활성화 시에 단지 TLR7 및 TLR9만을 발현하며, T-세포 뿐만 아니라 NK 세포의 활성화가 유발된다. 죽어가는 종양 세포가 DC 기능에 불리한 영향을 미칠 수 있으므로, TLR 효능제로 DC를 활성화시키는 것은 암 치료에 대한 면역요법 접근법에서 항종양 면역을 프라이밍하는데 유익할 수 있는 것으로 시사되었다. 방사선 및 화학요법을 사용한 유방암의 성공적인 치료는 TLR4 활성화가 요구되는 것으로 또한 시사되었다.
관련 기술분야에 공지되어 있고 본 발명에서의 사용이 발견된 TLR 효능제는 하기를 포함하나 이에 제한되지는 않는다:
TLR-1/2 효능제인 Pam3Cys;
TLR-2 효능제인 CFA;
TLR-2 효능제인 MALP2;
TLR-2 효능제인 Pam2Cys;
TLR-2 효능제인 FSL-1;
TLR-2 효능제인 Hib-OMPC;
TLR-3 효능제인 폴리리보이노신산:폴리리보시티딜산 (폴리 I:C);
TLR-3 효능제인 폴리아데노신산-폴리우리딜산 (폴리 AU);
TLR-3 효능제인 폴리-L-리신 및 카르복시메틸셀룰로스로 안정화된 폴리이노신산-폴리시티딜산 (힐토놀(Hiltonol)®);
TLR-4 효능제인 모노포스포릴 지질 A (MPL);
TLR-4 효능제인 LPS;
TLR-4 효능제인 글루코피라노실 지질 아주반트 (GLA);
TLR-5 효능제인 박테리아 플라젤린;
TLR-4 효능제 및 다수의 인간 암 세포 상의 MUC1 뮤신과 연관된 탄수화물인 시알릴-Tn (STn);
TLR-7 효능제인 이미퀴모드;
TLR-7/8 효능제인 레시퀴모드;
TLR-7/8 효능제인 록소리빈; 및
TLR-9 효능제인 비메틸화 CpG 디뉴클레오티드 (CpG-ODN).
TLR 효능제는, 그의 아주반트 특성 때문에, 바람직하게는, 다른 백신, 아주반트 및/또는 면역 조정제와 조합되어 사용되며, 다양한 조합으로 조합될 수 있다. 따라서, 특정 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같이, STING에 결합하여 STING-의존성 TBK1 활성화, 및 수지상 세포 유도, 동원 및/또는 성숙을 자극하는 1종 이상의 시토카인을 발현 및 분비하는 불활성화된 종양 세포를 유도하는 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 치료 목적을 위해 1종 이상의 TLR 효능제와 함께 투여될 수 있다.
항체 치료제
본원에 기재된 바와 같은 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물은 치료 항체와 조합되어 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 치료 항체의 작용 메카니즘은 항체-의존성 세포-매개된 세포독성 (ADCC)이다. ADCC는 면역계의 이펙터 세포가 막-표면 항원이 특이적 항체에 의해 결합된 표적 세포를 활발히 용해시키는 세포-매개된 면역 방어의 메카니즘이다. 이는 체액성 면역 반응의 일부로서 항체가 감염을 제한하고 함유하는 작용을 할 수 있는 메카니즘 중 하나이다. 전형적 ADCC는 자연 킬러 (NK) 세포에 의해 매개되며; 대식세포, 호중구 및 호산구가 또한 ADCC를 매개할 수 있다. ADCC는 트라스투주맙 및 리툭시맙을 포함한, 종양에 대한 치료 모노클로날 항체의 중요한 작용 메카니즘이다. 본 발명의 화합물은 ADCC를 강화하는 작용을 할 수 있다.
하기는 본 발명의 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물과 함께 사용될 수 있는 항체의 예시적인 목록이다.
무로모납-CD3: 기관, 예를 들어 신장, 이식물의 급성 거부를 예방하는데 사용된다. 인간화 버전은 제1형 당뇨병에서 베타 세포의 자가면역 파괴를 억제하는데 있어서의 가능성을 제시한다.
인플릭시맙 (레미케이드(Remicade)®) 및 아달리무맙 (휴미라(Humira)®): 종양 괴사 인자-알파 (TNF-α)에 결합한다. 일부 염증성 질환, 예컨대 류마티스 관절염, 건선, 크론병에서 사용된다.
오말리주맙 (졸레어(Xolair)®). IgE에 결합하고 따라서 IgE가 비만 세포에 결합하는 것을 방지한다. 알레르기성 천식에 사용된다.
다클리주맙 (제나팍스(Zenapax)®). 활성화된 T 세포의 표면에 노출된 IL-2 수용체의 부분에 결합한다. 이식된 신장의 급성 거부를 방지하는데 사용된다.
리툭시맙 (상표명 = 리툭산(Rituxan)®). 대부분의 B-세포 상에서 발견되는 CD20 분자에 결합하고, B-세포 림프종을 치료하는데 사용된다.
이브리투모맙 (상표명 = 제발린(Zevalin)®). 이것은 동위원소에 접합된 B 세포 (및 림프종) 상의 CD20 분자에 대한 모노클로날 항체이다. 리툭산이 보충되는 림프종 환자에게 제공된다.
토시투모맙 (벡사르(Bexxar)®). 이것은 CD20에 대한 모노클로날 항체 및 방사성 동위원소 아이오딘-131 (131I)의 접합체이다.
세툭시맙 (에르비툭스(Erbitux)®). 일부 종양 세포 (일부 유방암, 림프종)에서 발견되는 표피 성장 인자 (EGF)에 대한 수용체인 HER1을 차단한다.
트라스투주맙 (헤르셉틴(Herceptin)®). 유방암의 일부 20%에서 과다-발현되는 성장 인자 수용체인 HER2를 차단한다.
애드세트리스(Adcetris)®. 일부 림프종의 세포에 의해 발현되지만 골수를 재생산하는데 필요한 정상 줄기 세포에서는 발견되지 않는 세포-표면 분자인 CD30에 결합하는 모노클로날 항체의 접합체.
알렘투주맙 (캄파트-1H(Campath-1H)®). 림프구 상에서 발견되는 분자인 CD52에 결합하고, T 세포 및 B 세포를 둘 다 고갈시킨다. 만성 림프구성 백혈병의 완전한 완화를 가져오고, 신장 이식의 거부를 방지하는데 있어서의 가능성을 제시한다.
Lym-1 (온콜림(Oncolym)®). 림프종 세포 상에서 높은 수준으로 발현될 수 있는 HLA-DR-코딩된 조직적합성 항원에 결합한다.
이필리무맙 (예르보이(Yervoy)®) 종양에 대한 신체 자신의 면역 반응을 증진시키는 작용을 한다.
비탁신. 종양의 혈관 상에서 발견되지만 정상 조직에 공급되는 혈관 상에서는 발견되지 않는 혈관 인테그린 (알파-v/베타-3)에 결합한다. II상 임상에서, 비탁신은 유해 부작용 없이 고형 종양을 수축시키는데 있어서의 일부 가능성을 제시하였다.
베바시주맙 (아바스틴(Avastin)®). 혈관 내피 성장 인자 (VEGF)에 결합하여 그가 그의 수용체에 결합하는 것을 방지한다. 결장직장암의 치료에 사용된다.
압식시맙 (레오프로(ReoPro)®). 정상적으로는 피브리노겐에 의해 연결되는 혈소판의 표면 상의 수용체에 결합함으로써 혈소판의 응괴를 억제한다. 혈관성형술을 겪은 환자에서 관상 동맥의 재막힘을 방지하는데 도움이 된다.
본원에 기재된 바와 같은 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물과 조합되어 사용될 수 있는 추가의 치료 항체는, 예를 들어 미국 특허 7,867,493에 개시된 바와 같은 프로락틴 수용체 (PRLR) 억제제, 예를 들어 PCT 공개 번호 WO 2012/022814에 개시된 바와 같은 HER3 억제제, 예를 들어 PCT 공개 번호 WO 2014/160160에 개시된 바와 같은 EGFR2 및/또는 EGFR4 억제제, 예를 들어 PCT 공개 번호 WO 2004/045532에 개시된 바와 같은 M-CSF 억제제, 예를 들어 미국 특허 8,895,705에 개시된 바와 같은 항-APRIL 항체, 또는 예를 들어 미국 특허 8,728,476 및 미국 특허 8,562,997에 개시된 바와 같은 항-SIRPα 또는 항-CD47 항체를 포함한다.
한 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 프로락틴 수용체 (PRLR) 억제제, 미국 특허 7,867,493에 개시된 바와 같은 인간 모노클로날 항체 분자 (화합물 A26)와 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, PRLR 억제제는 US 7,867,493에 개시된 인간 모노클로날 항체 (화합물 A26)이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 미국 특허 7,867,493에 기재된 인간 모노클로날 항체 분자 (화합물 A26)와 조합되어 장애, 예컨대 암, 전립선암 또는 유방암을 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 HER3 억제제, 화합물 A31 또는 PCT 공개 번호 WO 2012/022814에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, HER3 억제제는 화합물 A31 또는 PCT 공개 WO 2012/022814에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 화합물 A31 또는 PCT 공개 WO 2012/022814에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 위암, 식도암, 두경부암, 편평 세포 암종, 위암, 유방암 (예를 들어, 전이성 유방암), 또는 소화기/위장 암을 치료하는데 사용된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A31은 인간 모노클로날 항체 분자이다. 한 실시양태에서, HER3 억제제 또는 화합물 A31은 약 3, 10, 20, 또는 40 mg/kg의 용량으로, 예를 들어 매주 1회 (QW) 투여된다. 한 실시양태에서, 화합물은 약 3-10, 10-20, 또는 20-40 mg/kg의 용량으로 투여된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 FGFR2 및/또는 FGFR4 억제제, 화합물 A32 또는 공개문헌 PCT 공개 번호 WO 2014/160160에 개시된 화합물 (예를 들어, FGFR2 및/또는 FGFR4에 대한 항체 분자 약물 접합체, 예를 들어 그 안에 기재된 바와 같은 mAb 12425)과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, FGFR2 및/또는 FGFR4 억제제는 화합물 A32 또는 공개문헌 PCT 공개 번호 WO 2014/160160에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 화합물 A32와 조합되어, 또는 추가로 표 2에 기재된 바와 같은 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암, 위암, 유방암, 횡문근육종, 간암, 부신암, 폐암, 식도암, 결장암 또는 자궁내막암을 치료하는데 사용된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A32는 FGFR2 및/또는 FGFR4에 대한 항체 분자 약물 접합체, 예를 들어 mAb 12425이다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 M-CSF 억제제, 화합물 A33 또는 PCT 공개 번호 WO 2004/045532에 개시된 화합물 (예를 들어, M-CSF에 대한 항체 분자 또는 Fab 단편)과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, M-CSF 억제제는 화합물 A33 또는 PCT 공개 번호 WO 2004/045532에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 화합물 A33 또는 PCT 공개 번호 WO 2004/045532에 기재된 바와 같은 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암, 전립선암, 유방암 또는 색소성 융모결절성 활막염 (PVNS)을 치료하는데 사용된다. 실시양태에서, 화합물 A33은 M-CSF에 대한 모노클로날 항체 분자 또는 그의 단편 (예를 들어, Fab 단편)이다. 실시양태에서, M-CSF 억제제 또는 화합물 A33은 약 10mg/kg의 평균 용량으로 투여된다.
전달 작용제
리포솜은 1층 ("단층") 또는 그 초과의 층 ("다층")의 인지질로부터 형성된 소포이다. 인지질 빌딩 블록의 양친매성 특징 때문에, 리포솜은 전형적으로 친수성 외부 면을 제시하며 친수성 코어를 둘러싸는 친수성 층을 포함한다. 친수성/소수성 성분의 혼입, 그의 비-독성 성질, 생분해성, 생체적합성, 아주반트성, 세포성 면역의 유도, 지속 방출의 특성 및 대식세포에 의한 신속한 흡수에 있어서의 리포솜의 다용성은 이들을 항원의 전달을 위한 매력적인 후보로 만든다.
WO2010/104833은 적합한 리포솜 제제를 기재한다. 본원에서 베시박스(VesiVax)® (몰레큘라 익스프레스, 인크.(Molecular Express, Inc.))로 지칭되는 이러한 리포솜 제제는 상기에 언급된 "면역원성 폴리펩티드(들) 또는 탄수화물(들)"의 존재 또는 부재 하에 1종 이상의 추가의 성분, 예컨대 펩티도글리칸, 리포펩티드, 리포폴리사카라이드, 모노포스포릴 지질 A, 리포테이코산, 레시퀴모드, 이미퀴모드, 플라젤린, 비메틸화 CpG 모티프를 함유하는 올리고뉴클레오티드, 베타-갈락토실세라미드, 뮤라밀 디펩티드, 올-트랜스 레티노산, 이중-가닥 바이러스 RNA, 열 쇼크 단백질, 디옥타데실디메틸암모늄 브로마이드, 양이온성 계면활성제, 톨-유사 수용체 효능제, 디미리스토일트리메틸암모늄프로판, 및 nod-유사 수용체 효능제를 함유할 수 있다. 유리하게는, 이들 리포솜 제제는 본 발명에 따라 본원에 기재된 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 및 그의 조성물을 전달하는데 사용될 수 있다.
더욱이, 상기에 논의된 리포솜 제제가 리포솜에 면역원성 폴리펩티드 또는 탄수화물을 부착시키기 위한 앵커로서 "스테로이드 유도체"를 사용하지만, 스테로이드는 간단히 비접합 스테로이드, 예컨대 콜레스테롤로서 제공될 수 있다.
지질 혼합물로부터 리포솜을 제조하기 위한 적합한 방법은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 문헌 [Basu & Basu, Liposome Methods and Protocols (Methods in Molecular Biology), Humana Press, 2002; Gregoriadis, Liposome Technology, 3rd Edition, Informa HealthCare, 2006]을 참조한다. 바람직한 방법은 그 안에 기재된 압출, 균질화 및 초음파처리 방법을 포함한다. 지질 혼합물을 건조시키고, 이어서 수성 비히클 중 수화 및 초음파처리를 수행하여 리포솜을 형성하는 것을 포함하는, 본 발명에 사용하기 위한 리포솜을 제조하기 위한 예시적인 방법이 WO2010/104833에 기재되어 있다.
특정 실시양태에서, 리포솜은 특정한 평균 크기 범위 내로 제공된다. 리포솜 크기는, 예를 들어 미리 선택된 세공 크기를 가지며 그를 통해 유동하는 물질을 수집하는 막을 통해 리포솜을 포함하는 수성 비히클을 압출시킴으로써 선택될 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 리포솜은 실질적으로 50 내지 500 nm 직경, 보다 바람직하게는 실질적으로 50 내지 200 nm 직경, 가장 바람직하게는 실질적으로 50 내지 150 nm 직경이 되도록 선택된다. 이와 관련하여 본원에 사용된 용어 "실질적으로"는 적어도 75%, 보다 바람직하게는 80%, 가장 바람직하게는 적어도 90%의 리포솜이 지정된 범위 내에 있다는 것을 의미한다.
본 발명에서의 사용을 발견할 수 있는 다른 지질 및 지질-유사 아주반트는 수중유 (o/w) 에멀젼 (예를 들어, 문헌 [Muderhwa et al., J. Pharmaceut. Sci. 88: 1332-9, 1999] 참조), 베시박스® TLR (몰레큘라 익스프레스, 인크.), 디기토닌 (예를 들어, 미국 특허 번호 5,698,432 참조), 및 글루코피라노실 지질 (예를 들어, 미국 특허 출원 번호 20100310602 참조)을 포함한다.
나노입자는 또한 대부분의 투여 경로에 적합한 약물 전달 시스템을 나타낸다. 수년에 걸쳐, 다양한 천연 및 합성 중합체가 나노입자의 제조를 위해 탐구되었으며, 이 중 폴리(락트산) (PLA), 폴리(글리콜산) (PGA) 및 그의 공중합체 (PLGA)가 그의 생체적합성 및 생분해성 때문에 광범위하게 조사되었다. 나노입자 및 다른 나노담체는 여러 부류의 약물, 예컨대 항암제, 항고혈압제, 면역조정제 및 호르몬; 및 거대분자, 예컨대 핵산, 단백질, 펩티드 및 항체에 대한 잠재적인 담체로서 작용한다. 예를 들어, 문헌 [Crit. Rev. Ther. Drug Carrier Syst. 21:387-422, 2004; Nanomedicine: Nanotechnology, Biology and Medicine 1:22-30, 2005]을 참조한다.
화학요법제
본원에 기재된 방법의 추가의 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 화학요법제 (예를 들어 소분자 제약 화합물)와 조합되어 사용된다. 따라서 방법은 대상체에게 추가의 치료 또는 조합 치료로서 유효량의 1종 이상의 화학요법제를 투여하는 것을 추가로 포함한다. 특정 실시양태에서 1종 이상의 화학요법제는 아비라테론 아세테이트, 알트레타민, 안히드로빈블라스틴, 아우리스타틴, 벡사로텐, 비칼루타미드, BMS 184476, 2,3,4,5,6-펜타플루오로-N-(3-플루오로-4-메톡시페닐)벤젠 술폰아미드, 블레오마이신, N,N-디메틸-L-발릴-L-발릴-N-메틸-L-발릴-L-프롤릴-1-L프롤린-t-부틸아미드, 카켁틴, 세마도틴, 클로람부실, 시클로포스파미드, 3',4'-디데히드로-4'-데옥시-8'-노르빈-카류코블라스틴, 도세탁솔, 도세탁셀, 시클로포스파미드, 카르보플라틴, 카르무스틴, 시스플라틴, 크립토피신, 시클로포스파미드, 시타라빈, 다카르바진 (DTIC), 닥티노마이신, 다우노루비신, 데시타빈 돌라스타틴, 독소루비신 (아드리아마이신), 에토포시드, 5-플루오로우라실, 피나스테리드, 플루타미드, 히드록시우레아 및 히드록시우레아탁산, 이포스파미드, 리아로졸, 로니다민, 로무스틴 (CCNU), 엔잘루타미드, 메클로레타민 (질소 머스타드), 멜팔란, 미보불린 이세티오네이트, 리족신, 세르테네프, 스트렙토조신, 미토마이신, 메토트렉세이트, 탁산, 닐루타미드, 오나프리스톤, 파클리탁셀, 프레드니무스틴, 프로카르바진, RPR109881, 에스트라무스틴 포스페이트, 타목시펜, 타소네르민, 탁솔, 트레티노인, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 빈데신 술페이트, 및 빈플루닌으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
본원에 기재된 방법의 추가의 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 본원에 기재된 바와 같은 적응증을 치료하기 위해 화학요법제 및/또는 추가의 작용제와 조합되어 사용된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 소트라스타우린, 닐로티닙, 5-(2,4-디히드록시-5-이소프로필페닐)-N-에틸-4-(4-(모르폴리노메틸)페닐)이속사졸-3-카르복스아미드, 닥톨리십, 8-(6-메톡시-피리딘-3-일)-3-메틸-1-(4-피페라진-1-일-3-트리플루오로메틸-페닐)-1,3-디히드로-이미다조[4,5-c]퀴놀린-2-온, 3-(2,6-디클로로-3,5-디메톡시페닐)-1-(6-((4-(4-에틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)-1-메틸우레아, 부파를리십, 8-(2,6-디플루오로-3,5-디메톡시페닐)-N-(4-((디메틸아미노)메틸)-1H-이미다졸-2-일)퀴녹살린-5-카르복스아미드, (S)-N1-(4-메틸-5-(2-(1,1,1-트리플루오로-2-메틸프로판-2-일)피리딘-4-일)티아졸-2-일)피롤리딘-1,2-디카르복스아미드, (S)-1-(4-클로로페닐)-7-이소프로폭시-6-메톡시-2-(4-(메틸(((1r,4S)-4-(4-메틸-3-옥소피페라진-1-일)시클로헥실)메틸)아미노)페닐)-1,2-디히드로이소퀴놀린-3(4H)-온, 데페라시록스, 레트로졸, (4S,5R)-3-(2'-아미노-2-모르폴리노-4'-(트리플루오로메틸)-[4,5'-비피리미딘]-6-일)-4-(히드록시메틸)-5-메틸옥사졸리딘-2-온, (S)-5-(5-클로로-1-메틸-2-옥소-1,2-디히드로피리딘-3-일)-6-(4-클로로페닐)-2-(2,4-디메톡시피리미딘-5-일)-1-이소프로필-5,6-디히드로피롤로[3,4-d]이미다졸-4(1H)-온, 4-((2-(((1R,2R)-2-히드록시시클로헥실)아미노)벤조[d]티아졸-6-일)옥시)-N-메틸피콜린아미드, 이마티닙 메실레이트, 2-플루오로-N-메틸-4-(7-(퀴놀린-6-일메틸)이미다조[1,2-b][1,2,4]트리아진-2-일)벤즈아미드, 룩솔리티닙, 파노비노스타트, 오실로드로스타트, (S)-N-((S)-1-시클로헥실-2-((S)-2-(4-(4-플루오로벤조일)티아졸-2-일)피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2-(메틸아미노)프로판아미드, (S)-N-((S)-1-시클로헥실-2-((S)-2-(4-(4-플루오로벤조일)티아졸-2-일)피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2-(메틸아미노)프로판아미드, 소니데깁 포스페이트, 세리티닙, 7-시클로펜틸-N,N-디메틸-2-((5-(피페라진-1-일)피리딘-2-일)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-카르복스아미드, N-(4-((1R,3S,5S)-3-아미노-5-메틸시클로헥실)피리딘-3-일)-6-(2,6-디플루오로페닐)-5-플루오로피콜린아미드, 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 엔코라페닙, 7-시클로펜틸-N,N-디메틸-2-((5-((1R,6S)-9-메틸-4-옥소-3,9-디아자비시클로[4.2.1]노난-3-일)피리딘-2-일)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-카르복스아미드, 비니메티닙, 미도스타우린, 에베롤리무스, 1-메틸-5-((2-(5-(트리플루오로메틸)-1H-이미다졸-2-일)피리딘-4-일)옥시)-N-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1H-벤조[d]이미다졸-2-아민, 파시레오티드 디아스파르테이트, 도비티닙, (R,E)-N-(7-클로로-1-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-에노일)아제판-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-2-메틸이소니코틴아미드, N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(1-메틸피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민, 3-(4-(4-((5-클로로-4-((5-메틸-1H-피라졸-3-일)아미노)피리미딘-2-일)아미노)-5-플루오로-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)티에탄 1,1-디옥시드, 5-클로로-N2-(2-플루오로-5-메틸-4-(1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피페리딘-4-일)페닐)-N4-(5-메틸-1H-피라졸-3-일)피리미딘-2,4-디아민, 5-클로로-N2-(4-(1-에틸피페리딘-4-일)-2-플루오로-5-메틸페닐)-N4-(5-메틸-1H-피라졸-3-일)피리미딘-2,4-디아민, 발스포다르, 및 바탈라닙 숙시네이트로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 작용제와 조합되어 사용된다.
한 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 PKC 억제제, 소트라스타우린 (화합물 A1) 또는 PCT 공개 번호 WO 2005/039549에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, PKC 억제제는 소트라스타우린 (화합물 A1) 또는 PCT 공개 번호 WO 2005/039549에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 소트라스타우린 (화합물 A1) 또는 PCT 공개 번호 WO 2005/039549에 기재된 바와 같은 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암, 흑색종, 비호지킨 림프종, 염증성 장 질환, 이식 거부, 안과 장애 또는 건선을 치료하는데 사용된다. 특정 실시양태에서, 소트라스타우린 (화합물 A1)은 약 20 내지 600 mg, 예를 들어 약 200 내지 약 600 mg, 약 50 mg 내지 약 450 mg, 약 100 mg 내지 400 mg, 약 150 mg 내지 350 mg, 또는 약 200 mg 내지 300 mg, 예를 들어 약 50 mg, 100 mg, 150mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg, 500 mg, 또는 600 mg의 용량으로 투여된다. 투여 스케줄은, 예를 들어 격일 내지 매일, 1일 2회 또는 3회로 달라질 수 있다.
한 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 BCR-ABL 억제제, 타시그나 (화합물 A2, 닐로티닙) 또는 PCT 공개 번호 WO 2004/005281에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, BCR-ABL 억제제는 타시그나 또는 PCT 공개 번호 WO 2004/005281에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 타시그나 (화합물 A2) 또는 PCT 공개 번호 WO 2004/005281에 기재된 바와 같은 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 림프구성 백혈병, 파킨슨병, 신경계암, 흑색종, 소화기/위장 암, 결장직장암, 골수성 백혈병, 두경부암 또는 폐고혈압을 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, BCR-ABL 억제제 또는 타시그나는 약 300 mg (예를 들어, 1일 2회, 예를 들어 새로 진단된 Ph+ CML-CP의 경우), 또는 약 400 mg (예를 들어 1일 2회, 예를 들어 저항성 또는 불내성 Ph+ CML-CP 및 CML-AP의 경우)의 용량으로 투여된다. BCR-ABL 억제제 또는 화합물 A2는 약 300-400 mg의 용량으로 투여된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 HSP90 억제제, 예컨대 5-(2,4-디히드록시-5-이소프로필페닐)-N-에틸-4-(4-(모르폴리노메틸)페닐)이속사졸-3-카르복스아미드 (화합물 A3), 또는 PCT 공개 번호 WO 2010/060937 또는 WO 2004/072051에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, HSP90 억제제는 5-(2,4-디히드록시-5-이소프로필페닐)-N-에틸-4-(4-(모르폴리노메틸)페닐)이속사졸-3-카르복스아미드 (화합물 A3), 또는 PCT 공개 번호 WO 2010/060937 또는 WO 2004/072051에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 5-(2,4-디히드록시-5-이소프로필페닐)-N-에틸-4-(4-(모르폴리노메틸)페닐)이속사졸-3-카르복스아미드 (화합물 A3), 또는 PCT 공개 번호 WO 2010/060937 또는 WO 2004/072051에 기재된 바와 같은 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암, 다발성 골수종, 비소세포 폐암, 림프종, 위암, 유방암, 소화기/위장 암, 췌장암, 결장직장암, 고형 종양 또는 조혈 장애를 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 PI3K 및/또는 mTOR의 억제제, 닥톨리십 (화합물 A4) 또는 8-(6-메톡시-피리딘-3-일)-3-메틸-1-(4-피페라진-1-일-3-트리플루오로메틸-페닐)-1,3-디히드로-이미다조[4,5-c]퀴놀린-2-온 (화합물 A41), 또는 PCT 공개 번호 WO 2006/122806에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, PI3K 및/또는 mTOR 억제제는 닥톨리십 (화합물 A4), 8-(6-메톡시-피리딘-3-일)-3-메틸-1-(4-피페라진-1-일-3-트리플루오로메틸-페닐)-1,3-디히드로-이미다조[4,5-c]퀴놀린-2-온 (화합물 A41), 또는 PCT 공개 번호 WO 2006/122806에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 닥톨리십 (화합물 A4), 8-(6-메톡시-피리딘-3-일)-3-메틸-1-(4-피페라진-1-일-3-트리플루오로메틸-페닐)-1,3-디히드로-이미다조[4,5-c]퀴놀린-2-온 (화합물 A41), 또는 PCT 공개 번호 WO 2006/122806에 기재된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암, 전립선암, 백혈병 (예를 들어, 림프구성 백혈병), 유방암, 뇌암, 방광암, 췌장암, 신암, 고형 종양 또는 간암을 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 FGFR 억제제, 3-(2,6-디클로로-3,5-디메톡시페닐)-1-(6-((4-(4-에틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)-1-메틸우레아 (화합물 A5) 또는 미국 특허 8,552,002에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, FGFR 억제제는 3-(2,6-디클로로-3,5-디메톡시페닐)-1-(6-((4-(4-에틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)-1-메틸우레아 (화합물 A5) 또는 미국 특허 8,552,002에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 화합물 A5 또는 US 8,552,002에 기재된 바와 같은 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 소화기/위장 암, 혈액암 또는 고형 종양을 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, FGFR 억제제 또는 3-(2,6-디클로로-3,5-디메톡시페닐)-1-(6-((4-(4-에틸피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-4-일)-1-메틸우레아 (화합물 A5)는 약 100-125 mg (예를 들어, 1일에), 예를 들어 약 100 mg 또는 약 125 mg의 용량으로 투여된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 PI3K 억제제, 부파를리십 (화합물 A6) 또는 PCT 공개 번호 WO 2007/084786에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, PI3K 억제제는 부파를리십 (화합물 A6) 또는 PCT 공개 번호 WO 2007/084786에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 부파를리십 (화합물 A6) 또는 PCT 공개 번호 WO 2007/084786에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 전립선암, 비소세포 폐암, 내분비암, 백혈병, 난소암, 흑색종, 방광암, 유방암, 여성 생식기계 암, 소화기/위장 암, 결장직장암, 다형성 교모세포종, 고형 종양, 비-호지킨 림프종, 조혈 장애 또는 두경부암을 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, PI3K 억제제 또는 부파를리십 (화합물 A6)은 약 100 mg의 용량으로 (예를 들어, 1일에) 투여된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 FGFR 억제제, 8-(2,6-디플루오로-3,5-디메톡시페닐)-N-(4-((디메틸아미노)메틸)-1H-이미다졸-2-일)퀴녹살린-5-카르복스아미드 (화합물 A7) 또는 PCT 공개 번호 WO 2009/141386에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, FGFR 억제제는 8-(2,6-디플루오로-3,5-디메톡시페닐)-N-(4-((디메틸아미노)메틸)-1H-이미다졸-2-일)퀴녹살린-5-카르복스아미드(화합물 A7) 또는 PCT 공개 번호 WO 2009/141386에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, FGFR 억제제는 8-(2,6-디플루오로-3,5-디메톡시페닐)-N-(4-((디메틸아미노)메틸)-1H-이미다졸-2-일)퀴녹살린-5-카르복스아미드 (화합물 A7)이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 8-(2,6-디플루오로-3,5-디메톡시페닐)-N-(4-((디메틸아미노)메틸)-1H-이미다졸-2-일)퀴녹살린-5-카르복스아미드 (화합물 A7) 또는 PCT 공개 번호 WO 2009/141386에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 혈관신생을 특징으로 하는 암을 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, FGFR 억제제 또는 8-(2,6-디플루오로-3,5-디메톡시페닐)-N-(4-((디메틸아미노)메틸)-1H-이미다졸-2-일)퀴녹살린-5-카르복스아미드 (화합물 A7)는 1일에 1인당 대략 3 mg 내지 대략 5 g, 보다 바람직하게는 대략 10 mg 내지 대략 1.5 g의 용량으로 투여되고, 임의로 예를 들어 동일한 크기일 수 있는 1 내지 3회의 단일 용량으로 분할되어 투여된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 PI3K 억제제, (S)-N1-(4-메틸-5-(2-(1,1,1-트리플루오로-2-메틸프로판-2-일)피리딘-4-일)티아졸-2-일)피롤리딘-1,2-디카르복스아미드 (화합물 A8) 또는 PCT 공개 번호 WO 2010/029082에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, PI3K 억제제는 (S)-N1-(4-메틸-5-(2-(1,1,1-트리플루오로-2-메틸프로판-2-일)피리딘-4-일)티아졸-2-일)피롤리딘-1,2-디카르복스아미드 (화합물 A8) 또는 PCT 공개 번호 WO 2010/029082에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 (S)-N1-(4-메틸-5-(2-(1,1,1-트리플루오로-2-메틸프로판-2-일)피리딘-4-일)티아졸-2-일)피롤리딘-1,2-디카르복스아미드 (화합물 A8) 또는 PCT 공개 번호 WO 2010/029082에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 위암, 유방암, 췌장암, 소화기/위장 암, 고형 종양 및 두경부암을 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, PI3K 억제제 또는 (S)-N1-(4-메틸-5-(2-(1,1,1-트리플루오로-2-메틸프로판-2-일)피리딘-4-일)티아졸-2-일)피롤리딘-1,2-디카르복스아미드 (화합물 A8)는 약 150-300, 200-300, 200-400, 또는 300-400 mg (예를 들어, 1일에), 예를 들어 약 200, 300, 또는 400 mg의 용량으로 투여된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 시토크롬 P450의 억제제 (예를 들어, CYP17 억제제) 또는 PCT 공개 번호 WO 2010/149755에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, 시토크롬 P450 억제제 (예를 들어, CYP17 억제제)는 PCT 공개 번호 WO 2010/149755에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 PCT 공개 번호 WO 2010/149755에 개시된 화합물과 조합되어 전립선암을 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 HDM2 억제제, (S)-1-(4-클로로페닐)-7-이소프로폭시-6-메톡시-2-(4-(메틸(((1r,4S)-4-(4-메틸-3-옥소피페라진-1-일)시클로헥실)메틸)아미노)페닐)-1,2-디히드로이소퀴놀린-3(4H)-온(화합물 A10) 또는 PCT 공개 번호 WO 2011/076786에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, HDM2 억제제는 (S)-1-(4-클로로페닐)-7-이소프로폭시-6-메톡시-2-(4-(메틸(((1r,4S)-4-(4-메틸-3-옥소피페라진-1-일)시클로헥실)메틸)아미노)페닐)-1,2-디히드로이소퀴놀린-3(4H)-온 (화합물 A10) 또는 PCT 공개 번호 WO 2011/076786에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 (S)-1-(4-클로로페닐)-7-이소프로폭시-6-메톡시-2-(4-(메틸(((1r,4S)-4-(4-메틸-3-옥소피페라진-1-일)시클로헥실)메틸)아미노)페닐)-1,2-디히드로이소퀴놀린-3(4H)-온 (화합물 A10) 또는 PCT 공개 번호 WO 2011/076786에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 고형 종양을 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, HDM2 억제제 또는 (S)-1-(4-클로로페닐)-7-이소프로폭시-6-메톡시-2-(4-(메틸(((1r,4S)-4-(4-메틸-3-옥소피페라진-1-일)시클로헥실)메틸)아미노)페닐)-1,2-디히드로이소퀴놀린-3(4H)-온 (화합물 A10)은 약 400 내지 700 mg의 용량으로 투여되고, 예를 들어 매주 3회, 2주 투여 및 1주 휴약으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 용량은 약 400, 500, 600, 또는 700 mg; 약 400-500, 500-600, 또는 600-700 mg이고, 예를 들어 매주 3회 투여된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 철 킬레이트화제, 데페라시록스 (또한 엑스자이드로 공지됨; 화합물 A11) 또는 PCT 공개 번호 WO 1997/049395에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, 철 킬레이트화제는 데페라시록스 또는 PCT 공개 번호 WO 1997/049395에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 철 킬레이트화제는 데페라시록스 (화합물 A11)이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 데페라시록스 (화합물 A11) 또는 PCT 공개 번호 WO 1997/049395에 개시된 화합물과 조합되어 철 과부하, 혈색소증 또는 골수이형성증을 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 아로마타제 억제제, 레트로졸 (또한 페마라로 공지됨; 화합물 A12) 또는 US 4,978,672에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, 아로마타제 억제제는 레트로졸 (화합물 A12) 또는 미국 특허 4,978,672에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 레트로졸 (화합물 A12) 또는 미국 특허 4,978,672에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암, 평활근육종, 자궁내막암, 유방암, 여성 생식기계 암 또는 호르몬 결핍을 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 PI3K 억제제, 예를 들어 범-PI3K 억제제, (4S,5R)-3-(2'-아미노-2-모르폴리노-4'-(트리플루오로메틸)-[4,5'-비피리미딘]-6-일)-4-(히드록시메틸)-5-메틸옥사졸리딘-2-온 (화합물 A13) 또는 PCT 공개 번호 WO2013/124826에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, PI3K 억제제는 (4S,5R)-3-(2'-아미노-2-모르폴리노-4'-(트리플루오로메틸)-[4,5'-비피리미딘]-6-일)-4-(히드록시메틸)-5-메틸옥사졸리딘-2-온 (화합물 A13) 또는 PCT 공개 번호 WO2013/124826에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 (4S,5R)-3-(2'-아미노-2-모르폴리노-4'-(트리플루오로메틸)-[4,5'-비피리미딘]-6-일)-4-(히드록시메틸)-5-메틸옥사졸리딘-2-온 (화합물 A13) 또는 PCT 공개 번호 WO2013/124826에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암 또는 진행성 고형 종양을 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 p53 억제제 및/또는 p53/Mdm2 상호작용 억제제, (S)-5-(5-클로로-1-메틸-2-옥소-1,2-디히드로피리딘-3-일)-6-(4-클로로페닐)-2-(2,4-디메톡시피리미딘-5-일)-1-이소프로필-5,6-디히드로피롤로[3,4-d]이미다졸-4(1H)-온 (화합물 A14) 또는 PCT 공개 번호 WO2013/111105에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, p53 및/또는 p53/Mdm2 상호작용 억제제는 (S)-5-(5-클로로-1-메틸-2-옥소-1,2-디히드로피리딘-3-일)-6-(4-클로로페닐)-2-(2,4-디메톡시피리미딘-5-일)-1-이소프로필-5,6-디히드로피롤로[3,4-d]이미다졸-4(1H)-온 (화합물 A14) 또는 PCT 공개 번호 WO2013/111105에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 (S)-5-(5-클로로-1-메틸-2-옥소-1,2-디히드로피리딘-3-일)-6-(4-클로로페닐)-2-(2,4-디메톡시피리미딘-5-일)-1-이소프로필-5,6-디히드로피롤로[3,4-d]이미다졸-4(1H)-온 (화합물 A14) 또는 PCT 공개 번호 WO2013/111105에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암 또는 연부 조직 육종을 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 CSF-1R 티로신 키나제 억제제, 4-((2-(((1R,2R)-2-히드록시시클로헥실)아미노)벤조[d]티아졸-6-일)옥시)-N-메틸피콜린아미드 (화합물 A15) 또는 PCT 공개 번호 WO 2005/073224에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, CSF-1R 티로신 키나제 억제제는 4-((2-(((1R,2R)-2-히드록시시클로헥실)아미노)벤조[d]티아졸-6-일)옥시)-N-메틸피콜린아미드 (화합물 A15) 또는 PCT 공개 번호 WO 2005/073224에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 4-((2-(((1R,2R)-2-히드록시시클로헥실)아미노)벤조[d]티아졸-6-일)옥시)-N-메틸피콜린아미드 (화합물 A15) 또는 PCT 공개 번호 WO 2005/073224에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암을 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 아폽토시스 유도제 및/또는 혈관신생 억제제, 예컨대 이마티닙 메실레이트 (또한 글리벡으로 공지됨; 화합물 A16) 또는 PCT 공개 번호 WO1999/003854에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, 아폽토시스 유도제 및/또는 혈관신생 억제제는 이마티닙 메실레이트 (화합물 A16) 또는 PCT 공개 번호 WO1999/003854에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 이마티닙 메실레이트 (화합물 A16) 또는 PCT 공개 번호 WO1999/003854에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암, 다발성 골수종, 전립선암, 비소세포 폐암, 림프종, 위암, 흑색종, 유방암, 췌장암, 소화기/위장 암, 결장직장암, 다형성 교모세포종, 간암, 두경부암, 천식, 다발성 경화증, 알레르기, 알츠하이머 치매, 근위축성 측삭 경화증 또는 류마티스 관절염을 치료하는데 사용된다. 특정 실시양태에서, 이마티닙 메실레이트 (화합물 A16)는 약 100 내지 1000 mg, 예를 들어 약 200 mg 내지 800 mg, 약 300 mg 내지 700 mg, 또는 약 400 mg 내지 600 mg, 예를 들어 약 200 mg, 300 mg, 400 mg, 500 mg, 600 mg, 또는 700 mg의 용량으로 투여된다. 투여 스케줄은, 예를 들어 격일 내지 매일, 1일 2회 또는 3회로 달라질 수 있다. 한 실시양태에서, 이마티닙 메실레이트는 매일 약 100 mg 내지 600 mg, 예를 들어 매일 약 100 mg, 200 mg, 260 mg, 300 mg, 400 mg 또는 600 mg의 경구 용량으로 투여된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 JAK 억제제, 2-플루오로-N-메틸-4-(7-(퀴놀린-6-일메틸)이미다조[1,2-b][1,2,4]트리아진-2-일)벤즈아미드 (화합물 A17) 또는 그의 이염산 염, 또는 PCT 공개 번호 WO 2007/070514에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, JAK 억제제는 2-플루오로-N-메틸-4-(7-(퀴놀린-6-일메틸)이미다조[1,2-b][1,2,4]트리아진-2-일)벤즈아미드 (화합물 A17) 또는 그의 이염산 염, 또는 PCT 공개 번호 WO 2007/070514에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 2-플루오로-N-메틸-4-(7-(퀴놀린-6-일메틸)이미다조[1,2-b][1,2,4]트리아진-2-일)벤즈아미드 (화합물 A17) 또는 그의 이염산 염, 또는 PCT 공개 번호 WO 2007/070514에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 결장직장암, 골수성 백혈병, 혈액암, 자가면역 질환, 비-호지킨 림프종 또는 혈소판혈증을 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, JAK 억제제 또는 2-플루오로-N-메틸-4-(7-(퀴놀린-6-일메틸)이미다조[1,2-b][1,2,4]트리아진-2-일)벤즈아미드 (화합물 A17) 또는 그의 이염산 염은 약 400-600 mg (예를 들어, 1일에), 예를 들어 약 400, 500, 또는 600 mg, 또는 약 400-500 또는 500-600 mg의 용량으로 투여된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 JAK 억제제, 룩솔리티닙 포스페이트 (또한 자카피로 공지됨; 화합물 A18) 또는 PCT 공개 번호 WO 2007/070514에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, JAK 억제제는 룩솔리티닙 포스페이트 (화합물 A18) 또는 PCT 공개 번호 WO 2007/070514에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 룩솔리티닙 포스페이트 (화합물 A18) 또는 PCT 공개 번호 WO 2007/070514에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 전립선암, 림프구성 백혈병, 다발성 골수종, 림프종, 폐암, 백혈병, 악액질, 유방암, 췌장암, 류마티스 관절염, 건선, 결장직장암, 골수성 백혈병, 혈액암, 자가면역 질환, 비-호지킨 림프종 또는 혈소판혈증을 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, JAK 억제제 또는 룩솔리티닙 포스페이트 (화합물 A18)는 약 15-25 mg의 용량으로, 예를 들어 1일 2회 투여된다. 일부 실시양태에서, 용량은 약 15, 20, 또는 25 mg, 또는 약 15-20 또는 20-25 mg이다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 히스톤 데아세틸라제 (HDAC) 억제제와 조합되어 사용된다. 일부 실시양태에서, HDAC 억제제는 파노비노스타트, 보리노스타트, 로미뎁신, 키다미드, 발프로산, 벨리노스타트, 피록사미드, 모세티노스타트, 아벡시노스타트, 엔티노스타트, 프라시노스타트, 레스미노스타트, 기비노스타트, 퀴시노스타트, 리콜리노스타트, CUDC-101, AR-42, CHR-2845, CHR-3996, 4SC-202 및 CG200745로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 히스톤 데아세틸라제 (HDAC) 억제제, 파노비노스타트 (화합물 A19) 또는 PCT 공개 번호 WO 2014/072493에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, HDAC 억제제는 파노비노스타트 (화합물 A19) 또는 PCT 공개 번호 WO 2014/072493에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 파노비노스타트 (화합물 A19), PCT 공개 번호 WO 2014/072493에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 소세포 폐암, 호흡기/흉부 암, 전립선암, 다발성 골수종, 골수이형성 증후군, 골암, 비소세포 폐암, 내분비암, 림프종, 신경계암, 백혈병, HIV/AIDS, 면역 장애, 이식 거부, 위암, 흑색종, 유방암, 췌장암, 결장직장암, 다형성 교모세포종, 골수성 백혈병, 혈액암, 신암, 비-호지킨 림프종, 두경부암, 조혈 장애 또는 간암을 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, HDAC 억제제 또는 파노비노스타트 (화합물 A19)는 약 20 mg의 용량으로 (예를 들어, 1일에) 투여된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 시토크롬 P450 (예를 들어, 11B2), 알도스테론 또는 혈관신생 중 1종 이상의 억제제, 오실로드로스타트 (화합물 A20) 또는 PCT 공개 번호 WO2007/024945에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, 시토크롬 P450 (예를 들어, 11B2), 알도스테론 또는 혈관신생 중 1종 이상의 억제제는 오실로드로스타트 (화합물 A20) 또는 PCT 공개 번호 WO2007/024945에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 오실로드로스타트 (화합물 A20) 또는 PCT 공개 번호 WO2007/024945에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 쿠싱 증후군, 고혈압 또는 심부전 요법을 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 IAP 억제제, (S)-N-((S)-1-시클로헥실-2-((S)-2-(4-(4-플루오로벤조일)티아졸-2-일)피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2-(메틸아미노)프로판아미드 (화합물 A21) 또는 US 8,552,003에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, IAP 억제제는 (S)-N-((S)-1-시클로헥실-2-((S)-2-(4-(4-플루오로벤조일)티아졸-2-일)피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2-(메틸아미노)프로판아미드 (화합물 A21) 또는 미국 특허 8,552,003에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 (S)-N-((S)-1-시클로헥실-2-((S)-2-(4-(4-플루오로벤조일)티아졸-2-일)피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2-(메틸아미노)프로판아미드 (화합물 A21) 또는 미국 특허 8,552,003에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 다발성 골수종, 유방암, 난소암, 췌장암 또는 조혈 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, IAP 억제제 또는 (S)-N-((S)-1-시클로헥실-2-((S)-2-(4-(4-플루오로벤조일)티아졸-2-일)피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2-(메틸아미노)프로판아미드 (화합물 A21) 또는 US 8,552,003에 개시된 화합물은 대략 1800 mg의 용량으로, 예를 들어 매주 1회 투여된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 스무슨드 (SMO) 억제제, 소니데깁 포스페이트 (화합물 A22), (R)-2-(5-(4-(6-벤질-4,5-디메틸피리다진-3-일)-2-메틸피페라진-1-일)피라진-2-일)프로판-2-올 (화합물 A25), 또는 PCT 공개 번호 WO 2007/131201 또는 WO 2010/007120에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, SMO 억제제는 소니데깁 포스페이트 (화합물 A22), (R)-2-(5-(4-(6-벤질-4,5-디메틸피리다진-3-일)-2-메틸피페라진-1-일)피라진-2-일)프로판-2-올 (화합물 A25), 또는 PCT 공개 번호 WO 2007/131201 또는 WO 2010/007120에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 소니데깁 포스페이트 (화합물 A22), (R)-2-(5-(4-(6-벤질-4,5-디메틸피리다진-3-일)-2-메틸피페라진-1-일)피라진-2-일)프로판-2-올 (화합물 A25), 또는 PCT 공개 번호 WO 2007/131201 또는 WO 2010/007120에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암, 수모세포종, 소세포 폐암, 전립선암, 기저 세포 암종, 췌장암 또는 염증을 치료하는데 사용된다. 특정 실시양태에서, 소니데깁 포스페이트 (화합물 A22)는 약 20 내지 500 mg, 예를 들어 약 40 mg 내지 400 mg, 약 50 mg 내지 300 mg, 또는 약 100 mg 내지 200 mg, 예를 들어 약 50 mg, 100 mg, 150 mg, 200 mg, 250 mg, 또는 300 mg의 용량으로 투여된다. 투여 스케줄은, 예를 들어 격일 내지 매일, 1일 2회 또는 3회로 달라질 수 있다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 Alk 억제제, 세리티닙 (또한 지카디아로 공지됨; 화합물 A23) 또는 PCT 공개 번호 WO 2007/131201에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, Alk 억제제는 세리티닙 (화합물 A23) 또는 PCT 공개 번호 WO 2007/131201에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 세리티닙 (화합물 A23) 또는 PCT 공개 번호 WO 2007/131201에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 비소세포 폐암 또는 고형 종양을 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, Alk 억제제 또는 세리티닙 (화합물 A23)은 대략 750 mg의 용량으로, 예를 들어 매일 1회 투여된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 JAK 및/또는 CDK4/6 억제제, 7-시클로펜틸-N,N-디메틸-2-((5-(피페라진-1-일)피리딘-2-일)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-카르복스아미드 (화합물 A24) 또는 미국 특허 8,415,355 또는 미국 특허 8,685,980에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, JAK 및/또는 CDK4/6 억제제는 7-시클로펜틸-N,N-디메틸-2-((5-(피페라진-1-일)피리딘-2-일)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-카르복스아미드 (화합물 A24) 또는 미국 특허 8,415,355 또는 미국 특허 8,685,980에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 7-시클로펜틸-N,N-디메틸-2-((5-(피페라진-1-일)피리딘-2-일)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-카르복스아미드 (화합물 A24), 또는 US 8,415,355 또는 US 8,685,980에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 림프종, 신경계암, 흑색종, 유방암 또는 고형 종양을 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, JAK 및/또는 CDK4/6 억제제 또는 7-시클로펜틸-N,N-디메틸-2-((5-(피페라진-1-일)피리딘-2-일)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-카르복스아미드 (화합물 A24)는, 예를 들어 1일에 대략 200-600 mg의 용량으로 투여된다. 한 실시양태에서, 화합물은 약 200, 300, 400, 500, 또는 600 mg, 또는 약 200-300, 300-400, 400-500, 또는 500-600 mg의 용량으로 투여된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 PIM 키나제 억제제, N-(4-((1R,3S,5S)-3-아미노-5-메틸시클로헥실)피리딘-3-일)-6-(2,6-디플루오로페닐)-5-플루오로피콜린아미드 (화합물 A27) 또는 PCT 공개 번호 WO 2010/026124에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, PIM 키나제 억제제는 N-(4-((1R,3S,5S)-3-아미노-5-메틸시클로헥실)피리딘-3-일)-6-(2,6-디플루오로페닐)-5-플루오로피콜린아미드 (화합물 A27) 또는 PCT 공개 번호 WO 2010/026124에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 N-(4-((1R,3S,5S)-3-아미노-5-메틸시클로헥실)피리딘-3-일)-6-(2,6-디플루오로페닐)-5-플루오로피콜린아미드 (화합물 A27), 또는 PCT 공개 번호 WO 2010/026124에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 다발성 골수종, 골수이형성 증후군, 골수성 백혈병 또는 비-호지킨 림프종을 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 Wnt 신호전달 억제제, 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드 (화합물 A28) 또는 PCT 공개 번호 WO 2010/101849에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, Wnt 신호전달 억제제는 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드 (화합물 A28) 또는 PCT 공개 번호 WO 2010/101849에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, Wnt 신호전달 억제제는 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드 (화합물 A28)이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드 (화합물 A28), 또는 PCT 공개 번호 WO 2010/101849에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 고형 종양 (예를 들어, 두경부암, 편평 세포 암종, 유방암, 췌장암 또는 결장암)을 치료하는데 사용된다. 특정 실시양태에서, 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드 (화합물 A28)는 약 1 내지 50 mg, 예를 들어 약 2 mg 내지 45 mg, 약 3 mg 내지 40 mg, 약 5 mg 내지 35 mg, 5 mg 내지 10 mg, 또는 약 10 mg 내지 30 mg, 예를 들어 약 2 mg, 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg, 또는 40 mg의 용량으로 투여된다. 투여 스케줄은, 예를 들어 격일 내지 매일, 1일 2회 또는 3회로 달라질 수 있다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 BRAF 억제제, 엔코라페닙 (화합물 A29) 또는 PCT 공개 번호 WO 2011/025927에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, BRAF 억제제는 엔코라페닙 (화합물 A29) 또는 PCT 공개 번호 WO 2011/025927에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 엔코라페닙 (화합물 A29) 또는 PCT 공개 번호 WO 2011/025927에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 비소세포 폐암, 흑색종 또는 결장직장암을 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, BRAF 억제제 또는 엔코라페닙 (화합물 A29)은, 예를 들어 1일에 약 200-300, 200-400, 또는 300-400 mg의 용량으로 투여된다. 한 실시양태에서, 화합물은 약 200, 약 300 또는 약 400 mg의 용량으로 투여된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 CDK4/6 억제제, 7-시클로펜틸-N,N-디메틸-2-((5-((1R,6S)-9-메틸-4-옥소-3,9-디아자비시클로[4.2.1]노난-3-일)피리딘-2-일)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-카르복스아미드 (화합물 A30) 또는 PCT 공개 번호 WO 2011/101409에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, CDK4/6 억제제는 7-시클로펜틸-N,N-디메틸-2-((5-((1R,6S)-9-메틸-4-옥소-3,9-디아자비시클로[4.2.1]노난-3-일)피리딘-2-일)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-카르복스아미드 (화합물 A30) 또는 PCT 공개 번호 WO 2011/101409에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 7-시클로펜틸-N,N-디메틸-2-((5-((1R,6S)-9-메틸-4-옥소-3,9-디아자비시클로[4.2.1]노난-3-일)피리딘-2-일)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-카르복스아미드 (화합물 A30) 또는 PCT 공개 번호 WO 2011/101409에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암, 외투 세포 림프종, 지방육종, 비소세포 폐암, 흑색종, 편평 세포 식도암 또는 유방암을 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 MEK 억제제, 비니메티닙 (화합물 A34) 또는 PCT 공개 번호 WO 2003/077914에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, MEK 억제제는 비니메티닙 (화합물 A34) 또는 PCT 공개 번호 WO 2003/077914에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 비니메티닙 (화합물 A34) 또는 PCT 공개 번호 WO 2003/077914에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 비소세포 폐암, 다기관 유전 장애, 흑색종, 난소암, 소화기/위장 암, 류마티스 관절염 또는 결장직장암을 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, MEK 억제제 또는 비니메티닙 (화합물 A34)은 약 45 mg의 용량으로, 예를 들어 1일 2회 투여된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 c-KIT, 히스타민 방출, Flt3 (예를 들어, FLK2/STK1) 또는 PKC 중 1종 이상의 억제제, 미도스타우린 (화합물 A35) 또는 PCT 공개 번호 WO 2003/037347에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, 억제제는 미도스타우린 (화합물 A35) 또는 PCT 공개 번호 WO 2003/037347에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, c-KIT, 히스타민 방출, Flt3 (예를 들어, FLK2/STK1) 또는 PKC 중 1종 이상의 억제제는 미도스타우린이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 미도스타우린 (화합물 A35) 또는 PCT 공개 번호 WO 2003/037347에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암, 결장직장암, 골수성 백혈병, 골수이형성 증후군, 연령-관련된 황반 변성, 당뇨병성 합병증 또는 피부과 장애를 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 TOR 억제제 (예를 들어, mTOR 억제제), 에베롤리무스 (또한 아피니토르로 공지됨; 화합물 A36) 또는 PCT 공개 번호 WO 2014/085318에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, TOR 억제제는 에베롤리무스 (화합물 A36) 또는 PCT 공개 번호 WO 2014/085318에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 에베롤리무스 (화합물 A36)와 조합되어 장애, 예컨대 간질성 폐 질환, 소세포 폐암, 호흡기/흉부 암, 전립선암, 다발성 골수종, 육종, 연령-관련된 황반 변성, 골암, 결절성 경화증, 비소세포 폐암, 내분비암, 림프종, 신경계 장애, 성상세포종, 자궁경부암, 신경계암, 백혈병, 면역 장애, 이식 거부, 위암, 흑색종, 간질, 유방암 또는 방광암을 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, TOR 억제제 또는 에베롤리무스 (화합물 A36)는 약 2.5-20 mg/일의 용량으로 투여된다. 한 실시양태에서, 화합물은 약 2.5, 5, 10 또는 20 mg/일, 예를 들어 약 2.5-5, 5-10 또는 10-20 mg/일의 용량으로 투여된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 VEGFR-2, PDGFR베타, KIT 또는 Raf 키나제 C 중 1종 이상의 억제제, 1-메틸-5-((2-(5-(트리플루오로메틸)-1H-이미다졸-2-일)피리딘-4-일)옥시)-N-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1H-벤조[d]이미다졸-2-아민 (화합물 A37) 또는 PCT 공개 번호 WO 2007/030377에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, VEGFR-2, PDGFR베타, KIT 또는 Raf 키나제 C 중 1종 이상의 억제제는 1-메틸-5-((2-(5-(트리플루오로메틸)-1H-이미다졸-2-일)피리딘-4-일)옥시)-N-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1H-벤조[d]이미다졸-2-아민 (화합물 A37) 또는 PCT 공개 번호 WO 2007/030377에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 1-메틸-5-((2-(5-(트리플루오로메틸)-1H-이미다졸-2-일)피리딘-4-일)옥시)-N-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1H-벤조[d]이미다졸-2-아민 (화합물 A37) 또는 PCT 공개 번호 WO 2007/030377에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암, 흑색종 또는 고형 종양을 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 소마토스타틴 효능제 및/또는 성장 호르몬 방출 억제제, 파시레오티드 디아스파르테이트 (또한 시그니포로 공지됨; 화합물 A38) 또는 PCT 공개 번호 WO2002/010192 또는 미국 특허 번호 7,473,761에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, 소마토스타틴 효능제 및/또는 성장 호르몬 방출 억제제는 파시레오티드 디아스파르테이트 (화합물 A38) 또는 PCT 공개 번호 WO2002/010192 또는 미국 특허 번호 7,473,761에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 파시레오티드 디아스파르테이트 (화합물 A38), 또는 PCT 공개 번호 WO2002/010192 또는 미국 특허 번호 7,473,761에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 전립선암, 내분비암, 신경계암, 피부암 (예를 들어, 흑색종), 췌장암, 간암, 쿠싱 증후군, 위장 장애, 선단비대증, 간 및 담도 장애, 또는 간 경변증을 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 신호 전달 조정제 및/또는 혈관신생 억제제, 도비티닙 (화합물 A39) 또는 PCT 공개 번호 WO 2009/115562에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, 신호 전달 조정제 및/또는 혈관신생 억제제는 도비티닙 (화합물 A39) 또는 PCT 공개 번호 WO 2009/115562에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 도비티닙 (화합물 A39) 또는 PCT 공개 번호 WO 2009/115562에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암, 호흡기/흉부 암, 다발성 골수종, 전립선암, 비소세포 폐암, 내분비암 또는 신경계 유전 장애를 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 EGFR 억제제, (R,E)-N-(7-클로로-1-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-에노일)아제판-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-2-메틸이소니코틴아미드 (화합물 A40) 또는 PCT 공개 번호 WO 2013/184757에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, EGFR 억제제는 (R,E)-N-(7-클로로-1-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-에노일)아제판-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-2-메틸이소니코틴아미드 (화합물 A40) 또는 PCT 공개 번호 WO 2013/184757에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 (R,E)-N-(7-클로로-1-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-에노일)아제판-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-2-메틸이소니코틴아미드 (화합물 A40) 또는 PCT 공개 번호 WO 2013/184757에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암, 예를 들어 고형 종양을 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, EGFR 억제제 또는 (R,E)-N-(7-클로로-1-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-에노일에서)아제판-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-2-메틸이소니코틴아미드 (화합물 A40)는, 예를 들어 1일에 150-250 mg의 용량으로 투여된다. 한 실시양태에서, 화합물은 약 150, 200 또는 250 mg, 또는 약 150-200 또는 200-250 mg의 용량으로 투여된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 ALK 억제제, N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(1-메틸피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민 (화합물 A42) 또는 PCT 공개 번호 WO 2008/073687에 개시된 화합물과 조합되어 사용된다. 한 실시양태에서, ALK 억제제는 N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(1-메틸피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민 (화합물 A42) 또는 PCT 공개 번호 WO 2008/073687에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(1-메틸피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민 (화합물 A42) 또는 PCT 공개 번호 WO 2008/073687에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암, 역형성 대세포 림프종 (ALCL), 비소세포 폐 암종 (NSCLC) 또는 신경모세포종을 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 IGF-1R 억제제, 3-(4-(4-((5-클로로-4-((5-메틸-1H-피라졸-3-일)아미노)피리미딘-2-일)아미노)-5-플루오로-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)티에탄 1,1-디옥시드 (화합물 A43), 5-클로로-N2-(2-플루오로-5-메틸-4-(1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피페리딘-4-일)페닐)-N4-(5-메틸-1H-피라졸-3-일)피리미딘-2,4-디아민 (화합물 A44) 또는 5-클로로-N2-(4-(1-에틸피페리딘-4-일)-2-플루오로-5-메틸페닐)-N4-(5-메틸-1H-피라졸-3-일)피리미딘-2,4-디아민 (화합물 A45) 또는 PCT 공개 번호 WO 2010/002655에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, IGF-1R 억제제는 3-(4-(4-((5-클로로-4-((5-메틸-1H-피라졸-3-일)아미노)피리미딘-2-일)아미노)-5-플루오로-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)티에탄 1,1-디옥시드 (화합물 A43), 5-클로로-N2-(2-플루오로-5-메틸-4-(1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피페리딘-4-일)페닐)-N4-(5-메틸-1H-피라졸-3-일)피리미딘-2,4-디아민 (화합물 A44), 5-클로로-N2-(4-(1-에틸피페리딘-4-일)-2-플루오로-5-메틸페닐)-N4-(5-메틸-1H-피라졸-3-일)피리미딘-2,4-디아민 (화합물 A45), 또는 PCT 공개 번호 WO 2010/002655에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 3-(4-(4-((5-클로로-4-((5-메틸-1H-피라졸-3-일)아미노)피리미딘-2-일)아미노)-5-플루오로-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)티에탄 1,1-디옥시드 (화합물 A43), 5-클로로-N2-(2-플루오로-5-메틸-4-(1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피페리딘-4-일)페닐)-N4-(5-메틸-1H-피라졸-3-일)피리미딘-2,4-디아민 (화합물 A44), 5-클로로-N2-(4-(1-에틸피페리딘-4-일)-2-플루오로-5-메틸페닐)-N4-(5-메틸-1H-피라졸-3-일)피리미딘-2,4-디아민 (화합물 A45) 또는 PCT 공개 번호 WO 2010/002655에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암 또는 육종을 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 P-당단백질 1 억제제, 발스포다르 (또한 암드레이로 공지됨; 화합물 A46) 또는 EP 296122에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, P-당단백질 1 억제제는 발스포다르 (화합물 A46) 또는 EP 296122에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 발스포다르 (화합물 A46) 또는 EP 296122에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암 또는 약물-내성 종양을 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 VEGFR 억제제 중 1종 이상, 바탈라닙 숙시네이트 (화합물 A47) 또는 WO 98/35958에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, VEGFR 억제제는 바탈라닙 숙시네이트 (화합물 A47) 또는 WO 98/35958에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 바탈라닙 숙시네이트 (화합물 A47) 또는 EP 296122에 개시된 화합물과 조합되어 암을 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 IDH 억제제 또는 WO2014/141104에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, IDH 억제제는 PCT 공개 번호 WO2014/141104에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 WO2014/141104에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암을 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 BCL-ABL 억제제 또는 PCT 공개 번호 WO2013/171639, WO2013/171640, WO2013/171641 또는 WO2013/171642에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, BCL-ABL 억제제는 PCT 공개 번호 WO2013/171639, WO2013/171640, WO2013/171641 또는 WO2013/171642에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 PCT 공개 번호 WO2013/171639, WO2013/171640, WO2013/171641 또는 WO2013/171642에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암을 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 c-RAF 억제제 또는 PCT 공개 번호 WO2014/151616에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, c-RAF 억제제는 화합물 A50 또는 PCT 공개 번호 WO2014/151616에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 PCT 공개 번호 WO2014/151616에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암을 치료하는데 사용된다.
또 다른 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 ERK1/2 ATP 경쟁적 억제제 또는 PCT 공개 번호 WO2015/066188에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예를 들어 본원에 기재된 장애를 치료하는데 사용된다. 한 실시양태에서, ERK1/2 ATP 경쟁적 억제제는 PCT 공개 번호 WO2015/066188에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 화합물 A51 또는 PCT 공개 번호 WO2015/066188에 개시된 화합물과 조합되어 장애, 예컨대 암을 치료하는데 사용된다. 일부 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 및 화합물 A51 또는 PCT 공개 번호 WO2015/066188에 개시된 화합물을 포함하는 조합은 화합물 A8, 화합물 A17, 화합물 A23, 화합물 A24, 화합물 A27, 화합물 A29 및 화합물 A33으로부터 선택된 1종 이상의 작용제와 조합되어 투여된다.
일부 실시양태에서, 조합, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물을 포함하는 조합은 면역 세포 검정에서, 예를 들어 huMLR 검정, T 세포 증식 검정 및 B-세포 증식 검정 (여기서 이러한 검정은 관련 기술분야에 공지됨) 중 1종 이상에서 공지된 활성을 갖는 항암제와 조합되어 투여되고, 화합물이 면역 반응을 억제하지 않을 것임을 입증하는데 (즉, 이러한 검정에서 억제가 거의 또는 전혀 없음을 입증하는데) 사용될 수 있다. 이러한 검정에서의 IC50은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물과 조합되어 사용될 화합물에 대해 결정될 수 있다. 실시양태에서, 항암제는, 예를 들어 >1 μM, 1-4 μM, 또는 4 μM 초과, 예를 들어, 4-10 μM 또는 4-20 μM, 또는 20 μM 초과의 IC50을 갖는다. 실시양태에서, 제2 치료제는 다음 중 1종 이상으로부터 선택된다: 화합물 A9, 화합물 A16, 화합물 A17, 화합물 A21, 화합물 A22, 화합물 A25, 화합물 A28, 화합물 A48 및 화합물 A49.
일부 실시양태에서, 화합물 A28 (또는 화합물 A28과 관련된 화합물)은 대략 5-10 또는 10-30 mg의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A22 (또는 화합물 A22와 관련된 화합물)는 약 200 mg의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A17 (또는 화합물 A17과 관련된 화합물)은 대략 400-600 mg의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A16 (또는 화합물 A16과 관련된 화합물)은 대략 400-600 mg의 용량으로 PO q일 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A29 (또는 화합물 A29와 관련된 화합물)는 대략 200-400 또는 300-400 mg의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A24 (또는 화합물 A24와 관련된 화합물)는 대략 200-600 mg의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A23 (세리티닙) (또는 세리티닙과 관련된 화합물)은 대략 750 mg의 용량으로 1일 1회 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A8 (또는 화합물 A8과 관련된 화합물)은 대략 200-400 또는 300-400 mg의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A5 (또는 화합물 A5와 관련된 화합물)는 대략 100-125 mg의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A6 (또는 화합물 A6과 관련된 화합물)은 약 100 mg의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A1 (또는 화합물 A1과 관련된 화합물)은 대략 200-300 또는 200-600 mg의 용량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 화합물 A40 (또는 화합물 A40과 관련된 화합물)은 대략 150-250 mg의 용량으로 투여된다. 실시양태에서, 화합물 A10 (또는 화합물 A10과 관련된 화합물)은 대략 400 내지 700 mg의 용량으로 투여되고, 예를 들어 매주 3회, 2주 투여 및 1주 휴약으로 투여된다. 실시양태에서, BCR-ABL 억제제는 대략 20 mg bid-80 mg bid의 용량으로 투여된다.
표 2. 본원에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물과 조합되어 투여될 수 있는 치료제.
면역조정 세포주
"불활성화된 종양 세포"는 세포의 분할을 방지하도록 치료된 종양 세포 (환자에 대해 "자가" 또는 "동종"임)를 의미한다. 본 발명의 목적상, 이러한 세포는 그의 면역원성 및 그의 대사 활성을 보존한다. 이러한 종양 세포는 암 요법의 일부로서 환자 내에서 발현되는 트랜스진을 발현하도록 유전자 변형된다. 따라서, 본 발명의 조성물 또는 백신은 치료를 겪는 환자에 대해 자가 또는 동종인 신생물성 (예를 들어, 종양) 세포를 포함하고, 가장 바람직하게는 환자에게 피해를 주는 것과 동일한 일반 유형의 종양 세포이다. 예를 들어, 흑색종을 앓고 있는 환자는 전형적으로 흑색종으로부터 유래된 유전자 변형된 세포가 투여될 것이다. 본 발명에 사용하기 위한 종양 세포를 불활성화시키는 방법, 예컨대 조사의 사용은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다.
일부 실시양태에서, 본 발명의 불활성화된 종양 세포는 1종 이상의 열 쇼크 단백질을 발현 및 분비하도록 변형된다. 예를 들어, gp96-Ig 융합 단백질이 발현 및 분비되어 면역 반응을 자극할 수 있다 (Yamazaki et al., The Journal of Immunology, 1999, 163:5178-5182; Strbo et al., Immunol Res. 2013 Dec;57(1-3):311-25). 일부 실시양태에서 불활성화된 종양 세포는 gp96-Ig 융합 단백질을 발현 및 분비하도록 변형된다.
본 발명의 불활성화된 종양 세포는 1종 이상의 공동자극 분자 또는 작용제와 함께 환자에게 투여된다. 바람직한 공동자극 작용제는 수지상 세포 유도, 동원 및/또는 성숙을 자극하는 1종 이상의 시토카인을 포함한다. 이러한 공동자극 작용제를 평가하는 방법은 문헌에 널리 공지되어 있다. DC의 유도 및 성숙은 전형적으로 자극 후 특정 막 분자, 예컨대 CD80 및 CD86의 증가된 발현 및/또는 염증유발 시토카인, 예컨대 IL-12 및 제I형 인터페론의 증가된 분비에 의해 평가된다.
바람직한 실시양태에서, 불활성화된 종양 세포 그 자체가 수지상 세포 유도, 동원 및/또는 성숙을 자극하는 1종 이상의 시토카인을 발현 및 분비하도록 변형된다. 본 발명은 GM-CSF의 사용과 관련하여 예시적인 관점에서 기재된다. 따라서, 예로서, 종양 세포는 미국 특허 번호 5,637,483, 5,904,920, 6,277,368 및 6,350,445, 뿐만 아니라 미국 특허 공개 번호 20100150946에 기재된 바와 같은 GM-CSF를 코딩하는 트랜스진을 발현할 수 있다. GM-CSF-발현 유전자 변형된 암 세포의 형태 또는 췌장암의 치료를 위한 "시토카인-발현 세포 백신"이 미국 특허 번호 6,033,674 및 5,985,290에 기재되어 있다.
GM-CSF 대신에 또는 이와 함께 상기 불활성화된 종양 세포 및/또는 방관자 세포에 의해 발현될 수 있는 다른 적합한 시토카인은 CD40 리간드, FLT-3 리간드, IL-12, CCL3, CCL20 및 CCL21 중 1종 이상을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 이 목록은 제한적인 것으로 의도되지 않는다.
대상체에게 투여되는 불활성화된 종양 세포가 1종 이상의 관심 시토카인을 발현하는 것이 바람직하지만, 종양 세포주는 수지상 세포 유도, 동원 및/또는 성숙을 자극하는 1종 이상의 시토카인을 발현 및 분비하는 불활성화된 방관자 세포주를 동반할 수 있다. 방관자 세포주는 수지상 세포 유도, 동원 및/또는 성숙을 자극하는 모든 시토카인을 제공할 수 있거나, 또는 불활성화된 종양 세포에 의해 발현 및 분비된, 수지상 세포 유도, 동원 및/또는 성숙을 자극하는 시토카인을 보충할 수 있다. 예로서, 면역조정 시토카인-발현 방관자 세포주는 미국 특허 번호 6,464,973, 및 8,012,469, 문헌 [Dessureault et al., Ann. Surg. Oncol. 14: 869-84, 2007, 및 Eager and Nemunaitis, Mol. Ther. 12: 18-27, 2005]에 개시되어 있다.
"과립구-대식세포 콜로니 자극 인자 (GM-CSF) 폴리펩티드"는 면역조정 활성을 가지며 진뱅크 수탁 번호 AAA52122.1에 대해 적어도 약 85% 아미노산 서열 동일성을 갖는 시토카인 또는 그의 단편을 의미한다.
백신
특정 실시양태에서, CDN 조성물은 1종 이상의 미리 결정된 항원에 대한 면역 반응을 자극하도록 의도된 1종 이상의 백신과 함께 투여된다. 본 발명에서의 사용을 발견할 수 있는 표적 항원의 예는 하기 표에 열거된다. 표적 항원은 또한 표에 열거된 항원의 면역학적 활성 부분을 포함하는 단편 또는 융합 폴리펩티드일 수 있다. 이 목록은 제한적인 것으로 의도되지 않는다.
백신 조성물은 폴리펩티드 항원을 발현하도록 또는 관심 항원으로서 백신접종된 개체의 세포에서 후속적으로 발현되는 폴리뉴클레오티드를 전달하도록 형질전환된 박테리아 세포를 포함할 수 있다. 시겔라 플렉스네리(Shigella flexneri), 에스케리키아 콜라이(Escherichia coli), 리스테리아 모노시토게네스(Listeria monocytogenes), 예르시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica), 살모넬라 티피무리움(Salmonella typhimurium), 살모넬라 티피(Salmonella typhi) 또는 미코박테리움 종을 포함하나 이에 제한되지는 않는 수많은 박테리아 종이 백신으로서 사용하기 위해 개발되었고, 본 발명에서 백신 플랫폼으로서 사용될 수 있다. 이 목록은 제한적인 것으로 의도되지 않는다. 본 발명은 백신 플랫폼으로서 약독화, 공생, 및/또는 사멸되었지만 대사적으로 활성인 박테리아 균주의 사용을 고려한다. 바람직한 실시양태에서 박테리아는 리스테리아 모노시토게네스이다.
표 1. 본원에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물과의 조합에 사용하기 위한 항원의 목록.
적합한 항원이 관련 기술분야에 공지되어 있는 다른 유기체는 클라미디아 트라코마티스(Chlamydia trachomatis), 스트렙토코쿠스 피오게네스(Streptococcus pyogenes) (군 A 스트렙), 스트렙토코쿠스 아갈락티아에(Streptococcus agalactiae) (군 B 스트렙), 스트렙토코쿠스 뉴모니아(Streptococcus pneumonia), 스타필로코쿠스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 에스케리키아 콜라이(Escherichia coli), 헤모필루스 인플루엔자에(Haemophilus influenzae), 네이세리아 메닌기티디스(Neisseria meningitidis), 네이세리아 고노레아에(Neisseria gonorrheae), 비브리오 콜레라에(Vibrio cholerae), 살모넬라(Salmonella) 종 (티피(typhi), 티피뮤리움(typhimurium)을 포함함), 엔테리카(enterica) (헬리코박터 필로리(Helicobactor pylori), 시겔라 플렉스네리(Shigella flexneri) 및 다른 군 D 시겔라 종을 포함함), 부르크홀데리아 말레이(Burkholderia mallei), 부르크홀데리아 슈도말레이(Burkholderia pseudomallei), 클레브시엘라 뉴모니아에(Klebsiella pneumoniae), 클로스트리디움(Clostridium) 종 (씨. 디피실레(C. difficile)를 포함함), 비브리오 파라헤몰리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus) 및 브이. 불니피쿠스(V. vulnificus)를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 이 목록은 제한적인 것으로 의도되지 않는다.
종양 신생항원
상기 논의된 바와 같이, 종양 세포 뿐만 아니라 일부 정상 조직에 의해서도 발현되는 (또는 과다발현되는) 종양-연관된 항원은 본원에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물과 조합된 사용을 발견할 수 있다. 그러나, 종양-연관된 항원을 표적화하려는 시도는 정상 조직 파괴로 인한 중증 독성을 유도할 수 있다. "신생항원"은 아미노산 코딩 서열을 변경하는 돌연변이를 통해 발생하는 종양-특이적 항원이다. 일부 신생항원이 세포 표면 상에서 발현, 프로세싱 및 제시될 수 있기 때문에, 이들은 중추 및 말초 내성을 나타내지 않고 정상 조직 파괴를 유도하는 능력이 결여된 T 세포에 의해 인식되는 표적을 제공할 수 있다. 따라서, 본원에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 1종 이상의 신생항원에 대한 면역 반응을 자극하도록 의도된 1종 이상의 백신과 함께 투여될 수 있다.
본 발명에서의 사용이 발견되는 신생항원은 일반적으로 특정 부류의 종양이 공유하는 돌연변이, 예컨대 악성 신경교종에서의 EGFRvIII, 신암에서의 KIAA1440, 폐암에서의 NF-YC 등일 수 있다. 상위의 "개인맞춤형 의약" 하에 언급되는 특정 적용에서, 본 발명에서의 사용이 발견되는 신생항원은 환자 사이에서 의미있는 빈도로 공유되지 않고 따라서 환자-특이적인 것으로 간주될 수 있는 돌연변이일 수 있다. 이들 적용에서, 암 엑솜-기반 서열 분석을 사용하여, "에피토프 예측"으로서 언급되는 과정인, 확인된 돌연변이 중 어느 것이 펩티드-MHC 복합체로서 프로세싱 및 제시되는지를 확인하는 예측 알고리즘을 통해 여과되는 돌연변이의 세트를 수집할 수 있다. 이러한 방법은, 예를 들어 문헌 [Schumacher and Schreiber, Science 348: 69-74, 2015]에 기재되어 있다.
특정 실시양태에서, 신생항원의 투여는 하기 전략 중 1종 이상을 사용하여 수행될 수 있다 (이 목록은 제한적인 것으로 의도되지 않는다):
관심 항원을 포함하는 불활성화 또는 약독화된 박테리아 또는 바이러스;
정제된 항원;
항원을 발현 및/또는 분비하도록 재조합적으로 조작된 생 바이러스 또는 박테리아 전달 벡터;
항원이 로딩되거나 항원을 코딩하는 핵산을 포함하는 조성물로 형질감염된 세포를 포함하는 항원 제시 세포 (APC) 벡터, 예컨대 수지상 세포 (DC) 벡터;
리포솜 항원 전달 비히클; 및
네이키드 DNA 벡터 및 네이키드 RNA 벡터.
본원에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물과 조합된 신생항원의 사용에 추가로, 이러한 조합은 1종 이상의 추가의 제약 활성 성분, 예를 들어 면역 체크포인트 억제제 (예를 들어 CTLA-4, PD-1, Tim-3, Vista, BTLA, LAG-3 및 TIGIT 경로 길항제; PD-1 길항제 작용제; PD-L1 길항제; CD47/SIRPα 경로 길항제, 예컨대 CD47 또는 SIRPα를 표적화하는 항체; APRIL 길항제; TLR 효능제; 선천성 면역을 유도하는 불활성화 또는 약독화된 박테리아; 톨-유사 수용체 (TLR)를 통해, (NOD)-유사 수용체 (NLR)를 통해, 레티노산 유도성 유전자-기반 (RIG)- I-유사 수용체 (RLR)를 통해, C-유형 렉틴 수용체 (CLR)를 통해, 또는 병원체-연관된 분자 패턴 (PAMP)을 통해 선천성 면역 활성화를 매개하는 조성물; 및 화학요법제로 이루어진 군으로부터 선택된 것의 투여를 추가로 포함할 수 있다.
제약 조성물
본원에 사용된 용어 "제약"은 질환의 치유, 치료 또는 예방에 사용하기 위해 의도되고 처방 또는 비처방 약물 제품으로서 미국 식품 의약품국에 의한 승인 과정 (또는 그의 비-미국 등가물)에 적용되는 화학 물질을 지칭한다. 이러한 조성물의 제제화 및 투여를 위한 기술에 대한 세부사항은 문헌 [Remington, The Science and Practice of Pharmacy 21st Edition (Mack Publishing Co., Easton, PA) 및 Nielloud and Marti-Mestres, Pharmaceutical Emulsions and Suspensions: 2nd Edition (Marcel Dekker, Inc, New York)]에서 찾을 수 있다.
본 개시내용의 목적상, 제약 조성물은 제약상 허용되는 담체, 아주반트 및 비히클을 함유하는 제제로 비-비경구로, 비경구로, 흡입 스프레이에 의해, 국소로 또는 직장으로를 포함한 다양한 수단에 의해 투여될 수 있다. "비-비경구 투여"는 경구, 협측, 설하, 국소, 경피, 눈, 귀, 코, 직장, 자궁경부, 폐, 점막 및 질 경로를 포괄한다. 본원에 사용된 용어 비경구는 다양한 주입 기술을 사용한 피하, 정맥내, 근육내, 동맥내, 피내, 척수강내 및 경막외 주사를 포함하나 이에 제한되지는 않느다. 본원에 사용된 동맥내 및 정맥내 주사는 카테터를 통한 투여를 포함한다. 관상동맥내 스텐트 및 관상동맥내 저장소를 통한 투여가 또한 고려된다. 본 발명의 화합물의 종양내 (종양 덩이 내로 직접) 또는 종양주위 (종양 덩이 주위에) 투여는 국부로 침윤하는 DC를 직접적으로 활성화시키거나, 종양 세포 아폽토시스를 직접적으로 촉진하거나, 종양 세포를 세포독성제에 감수성이게 할 수 있다. 본원에 사용된 용어 경구는 경구 흡수 또는 설하 또는 협측 경로에 의한 전달을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 경구 투여는 유체 드링크, 에너지 바, 뿐만 아니라 환제 제제를 포함한다.
제약 조성물은 의도된 투여 방법에 적합한 임의의 형태일 수 있다. 예를 들어 경구 사용을 위해 사용되는 경우에, 정제, 트로키, 로젠지, 수성 또는 오일 현탁액, 분산성 분말 또는 과립, 에멀젼, 경질 또는 연질 캡슐, 시럽 또는 엘릭시르가 제조될 수 있다. 경구 용도로 의도된 조성물은 제약 조성물의 제조에 대한 기술분야에 공지된 임의의 방법에 따라 제조될 수 있고, 이러한 조성물은 맛우수한 제제를 제공하기 위해 감미제, 향미제, 착색제 및 보존제를 포함한 1종 이상의 작용제를 함유할 수 있다. 약물 화합물을 정제의 제조에 적합한 비-독성 제약상 허용되는 부형제와 혼합하여 함유하는 정제가 허용된다. 이들 부형제는, 예를 들어, 불활성 희석제, 예컨대 탄산칼슘 또는 탄산나트륨, 락토스, 인산칼슘 또는 인산나트륨; 과립화제 및 붕해제, 예컨대 옥수수 전분 또는 알긴산; 결합제, 예컨대 전분, 젤라틴 또는 아카시아; 및 윤활제, 예컨대 스테아르산마그네슘, 스테아르산 또는 활석일 수 있다. 정제는 비코팅될 수 있거나, 또는 위장관에서의 붕해 및 흡착을 지연시키고/거나 보다 긴 기간에 걸쳐 지속된 작용을 제공하도록 장용 코팅, 결장 코팅 또는 마이크로캡슐화를 포함한 공지된 기술에 의해 코팅될 수 있다. 예를 들어, 시간 지연 물질, 예컨대 글리세릴 모노스테아레이트 또는 글리세릴 디스테아레이트는 단독으로 또는 왁스와 조합되어 사용될 수 있다.
경구 사용을 위한 제제는 또한 약물 화합물이 불활성 고체 희석제, 예를 들어 인산칼슘 또는 카올린과 혼합된 경질 젤라틴 캡슐로서, 또는 활성 성분이 물 또는 오일 매질, 예컨대 땅콩 오일, 액체 파라핀 또는 올리브 오일과 혼합된 연질 젤라틴 캡슐로서 제공될 수 있다.
제약 조성물은 수성-현탁액의 제조에 적합한 부형제와 혼합된 수성 현탁액으로서 제제화될 수 있다. 이러한 부형제는 현탁화제, 예컨대 소듐 카르복시메틸셀룰로스, 메틸셀룰로스, 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 알긴산나트륨, 폴리비닐피롤리돈, 트라가칸트 검 및 아카시아 검, 및 분산제 또는 습윤제, 예컨대 자연 발생 포스파티드 (예를 들어, 레시틴), 알킬렌 옥시드와 지방산과의 축합 생성물 (예를 들어, 폴리옥시에틸렌 스테아레이트), 에틸렌 옥시드와 장쇄 지방족 알콜과의 축합 생성물 (예를 들어, 헵타데카에틸렌옥시세탄올), 에틸렌 옥시드와 지방산 및 헥시톨 무수물로부터 유도된 부분 에스테르와의 축합 생성물 (예를 들어, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레에이트)을 포함한다. 수성 현탁액은 또한 1종 이상의 보존제, 예컨대 에틸 또는 n-프로필 p-히드록시-벤조에이트, 1종 이상의 착색제, 1종 이상의 향미제 및 1종 이상의 감미제, 예컨대 수크로스 또는 사카린을 함유할 수 있다.
오일 현탁액은 활성 성분을 식물성 오일, 예컨대 아라키스 오일, 올리브 오일, 참깨 오일 또는 코코넛 오일 중에, 또는 미네랄 오일, 예컨대 액상 파라핀 중에 현탁시킴으로써 제제화될 수 있다. 경구 현탁액은 증점제, 예컨대 밀랍, 경질 파라핀 또는 세틸 알콜을 함유할 수 있다. 감미제, 예컨대 상기 제시된 것, 및 향미제가 첨가되어 맛우수한 경구 제제를 제공할 수 있다. 이들 조성물은 항산화제, 예컨대 아스코르브산의 첨가에 의해 보존될 수 있다.
물의 첨가에 의한 수성 현탁액의 제조에 적합한 본 개시내용의 분산성 분말 및 과립은 분산제 또는 습윤제, 현탁화제, 및 1종 이상의 보존제와 혼합된 활성 성분을 제공한다. 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁화제는 상기 개시된 것에 의해 예시된다. 추가의 부형제, 예를 들어 감미제, 향미제 및 착색제가 또한 제공될 수 있다.
본 개시내용의 제약 조성물은 또한 수중유 에멀젼 형태일 수 있다. 유성 상은 식물성 오일, 예컨대 올리브 오일 또는 아라키스 오일, 미네랄 오일, 예컨대 액체 파라핀 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 적합한 유화제는 자연 발생 검, 예컨대 아카시아 검 및 트라가칸트 검, 자연 발생 포스파티드, 예컨대 대두 레시틴, 지방산 및 헥시톨 무수물로부터 유도된 에스테르 또는 부분 에스테르, 예컨대 소르비탄 모노올레에이트, 및 이들 부분 에스테르와 에틸렌 옥시드와의 축합 생성물, 예컨대 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레에이트를 포함한다. 에멀젼은 또한 감미제 및 향미제를 함유할 수 있다.
시럽 및 엘릭시르는 감미제, 예컨대 글리세롤, 소르비톨 또는 수크로스와 함께 제제화될 수 있다. 이러한 제제는 또한 완화제, 보존제, 향미제 또는 착색제를 함유할 수 있다.
본 개시내용의 제약 조성물은 멸균 주사가능한 제제, 예컨대 멸균 주사가능한 수성 또는 유성 현탁액의 형태일 수 있다. 이러한 현탁액은 상기 언급된 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁화제를 사용하여 공지된 기술분야에 따라 제제화될 수 있다. 멸균 주사가능한 제제는 또한 비-독성의 비경구로 허용되는 희석제 또는 용매 중의 멸균 주사가능한 용액 또는 현탁액, 예컨대 1,3-부탄-디올 중의 용액일 수 있거나, 또는 동결건조된 분말로서 제조될 수 있다. 사용될 수 있는 허용되는 비히클 및 용매 중에는 물, 링거액 및 등장성 염화나트륨 용액이 있다. 추가로, 멸균 고정 오일이 통상적으로 용매 또는 현탁 매질로서 사용될 수 있다. 이러한 목적을 위해, 합성 모노- 또는 디글리세리드를 포함한 임의의 무자극 고정 오일이 사용될 수 있다. 추가로, 지방산, 예컨대 올레산이 마찬가지로 주사제의 제조에 사용될 수 있다.
단일 투여 형태를 생성하기 위해 담체 물질과 조합될 수 있는 활성 성분의 양은 치료되는 숙주 및 특정한 투여 방식에 따라 달라질 것이다. 예를 들어, 인간에게 경구 투여하도록 의도된 시한-방출 제제는, 총 조성물의 약 5 내지 약 95%로 달라질 수 있는 적절하고도 편리한 양의 담체 물질과 배합된 대략 20 내지 500 mg의 활성 물질을 함유할 수 있다. 투여를 위한 용이하게 측정가능한 양을 제공하는 제약 조성물이 제조되는 것이 바람직하다. 전형적으로, 전신 투여될 유효량은 약 0.1 mg/kg 내지 약 100 mg/kg이고, 예를 들어 대상체 (예를 들어, 포유동물 예컨대 인간)의 연령 및 체중, 치료가 요구되는 정확한 상태 및 그의 중증도, 투여 경로를 포함한 수많은 인자에 좌우되며, 궁극적으로는 담당 의사 또는 수의사가 판단할 것이다. 그러나, 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 잘 이해되는 바와 같이, 임의의 특정한 환자에 대한 구체적 용량 수준은 사용된 구체적 화합물의 활성, 치료될 개체의 연령, 체중, 전반적 건강, 성별 및 식이; 투여 시간 및 경로; 배출 속도; 이전에 투여된 다른 약물; 및 요법을 받고 있는 특정한 상태의 중증도를 포함한 다양한 인자에 좌우될 것임이 이해될 것이다.
상기에 기재된 바와 같이, 경구 투여에 적합한 본 개시내용의 제제는 이산 단위, 예컨대 각각 미리 결정된 양의 활성 성분을 함유하는 캡슐, 카쉐 또는 정제로서; 분말 또는 과립으로서; 수성 또는 비-수성 액체 중의 용액 또는 현탁액으로서; 또는 수중유 액체 에멀젼 또는 유중수 액체 에멀젼으로서 제공될 수 있다. 제약 조성물은 또한 볼루스, 연약, 또는 페이스트로서 투여될 수 있다.
정제는 임의로 1종 이상의 보조 성분과 함께, 압축 또는 성형에 의해 제조될 수 있다. 압축 정제는 적합한 기계에서, 임의로 결합제 (예를 들어, 포비돈, 젤라틴, 히드록시프로필메틸 셀룰로스), 윤활제, 불활성 희석제, 보존제, 붕해제 (예를 들어, 소듐 스타치 글리콜레이트, 가교된 포비돈, 가교된 소듐 카르복시메틸 셀룰로스), 표면활성제 또는 분산제와 혼합된, 분말 또는 과립과 같은 자유 유동 형태의 활성 성분을 압축함으로써 제조될 수 있다. 성형된 정제는 적합한 기계에서 불활성 액체 희석제로 습윤된 분말화 화합물의 혼합물을 사용하여 제조될 수 있다. 정제는 임의로 코팅 또는 스코어링될 수 있으며, 예를 들어 목적하는 방출 프로파일을 제공하기 위해 다양한 비율의 히드록시프로필메틸 셀룰로스를 사용하여 그 안의 활성 성분의 느린 또는 제어 방출을 제공하도록 제제화될 수 있다. 정제는 임의로 위 이외의 다른 장 부분에서의 방출을 제공하도록 장용 또는 결장 코팅이 제공될 수 있다. 이는 본원에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물이 산 가수분해에 감수성일 때 이러한 화합물에 특히 유리하다.
구강으로의 국소 투여에 적합한 제제는 향미 베이스, 통상적으로 수크로스 및 아카시아 또는 트라가칸트 중에 활성 성분을 포함하는 로젠지; 불활성 베이스, 예컨대 젤라틴 및 글리세린 또는 수크로스 및 아카시아 중에 활성 성분을 포함하는 파스틸; 및 적합한 액체 담체 중에 활성 성분을 포함하는 구강세정제를 포함한다.
직장 투여를 위한 제제는, 예를 들어 코코아 버터 또는 살리실레이트를 포함하는 적합한 베이스를 갖는 좌제로서 제공될 수 있다.
질 투여에 적합한 제제는 활성 성분에 추가하여 적절한 것으로 관련 기술분야에 공지된 바와 같은 담체를 함유하는 페사리, 탐폰, 크림, 겔, 페이스트, 발포체 또는 스프레이 제제로서 제공될 수 있다.
비경구 투여에 적합한 제제는 항산화제, 완충제, 정박테리아제, 및 제제를 의도된 수용자의 혈액과 등장성이도록 하는 용질을 함유할 수 있는 수성 및 비-수성 등장성 멸균 주사 용액; 및 현탁화제 및 증점제를 포함할 수 있는 수성 및 비-수성 멸균 현탁액을 포함한다. 제제는 단위-용량 또는 다중-용량 용기, 예를 들어 앰플 및 바이알 중에 제공될 수 있고, 사용 직전에 단지 멸균 액체 담체, 예를 들어 주사용수의 첨가만이 요구되는 냉동-건조된 (동결건조된) 상태로 보관될 수 있다. 주사 용액 및 현탁액은 이전에 기재된 종류의 멸균 분말, 과립 및 정제로부터 제조될 수 있다.
개시된 화합물 또는 그의 염이 명명되거나 또는 구조에 의해 도시되는 경우에, 그의 용매화물 (특히, 수화물)을 포함한 화합물 또는 염은 결정질 형태, 비-결정질 형태 또는 그의 혼합물로 존재할 수 있는 것으로 이해되어야 한다. 화합물 또는 그의 염 또는 용매화물 (특히, 수화물)은 또한 다형성 (즉, 상이한 결정질 형태로 발생하는 능력)을 나타낼 수 있다. 이들 상이한 결정질 형태는 전형적으로 "다형체"로 공지되어 있다. 명명되거나 또는 구조에 의해 도시되는 경우에, 개시된 화합물 또는 그의 용매화물 (특히, 수화물)은 또한 그의 모든 다형체를 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 다형체는 동일한 화학적 조성을 갖지만 패킹, 기하학적 배열, 및 결정질 고체 상태의 다른 서술적 특성이 상이하다. 다형체는 상이한 물리적 특성, 예컨대 밀도, 형상, 경도, 안정성 및 용해 특성을 가질 수 있다. 다형체는 전형적으로 확인에 사용될 수 있는 상이한 융점, IR 스펙트럼, 및 X선 분말 회절 패턴을 나타낸다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는, 예를 들어 화합물을 결정화 또는 재결정화하는 동안 사용되는 조건을 변화 또는 조정함으로써 상이한 다형체가 제조될 수 있음을 인지할 것이다.
결정질 형태의 본 발명의 화합물 또는 그의 염의 용매화물의 경우에, 통상의 기술자는 용매 분자가 결정화 동안 결정 격자에 혼입되는 제약상 허용되는 용매화물이 형성될 수 있음을 인지할 것이다. 용매화물은 비수성 용매, 예컨대 에탄올, 이소프로판올, 디메틸 술폭시드, 아세트산, 에탄올아민 및 에틸 아세테이트를 수반할 수 있거나, 또는 이들은 결정질 격자 내로 혼입되는 용매로서 물을 수반할 수 있다. 결정질 격자 내로 혼입되는 용매가 물인 용매화물은 전형적으로 "수화물"로 지칭된다. 수화물은 화학량론적 수화물 뿐만 아니라 가변량의 물을 함유하는 조성물을 포함한다. 본 발명은 모든 이러한 용매화물을 포함한다.
본 발명의 화합물의 염은 의약에서의 그의 잠재적 용도 때문에 바람직하게는 제약상 허용되는 염이다. 적합한 제약상 허용되는 염은 문헌 [P. Heinrich Stahl and Camille G. Wermuth in Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, 2nd ed. (Wiley-VCH: 2011)] 및 또한 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed. (Mack Publishing, Easton PA: 1990) ] 및 또한 [Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19th ed. (Mack Publishing, Easton PA: 1995)]에 기재된 것을 포함한다. 용어 "제약상 허용되는 염" 내에 포괄되는 염은 본 발명의 화합물의 비-독성 염을 지칭한다.
염기성 아민 또는 다른 염기성 관능기를 함유하는 본 발명의 화합물의 염은 유리 염기를 무기 산, 예컨대 염산, 브로민화수소산, 황산, 질산, 인산 등으로 처리 또는 유기 산, 예컨대 아세트산, 트리플루오로아세트산, 말레산, 숙신산, 만델산, 푸마르산, 말론산, 포름산, 알긴산, 피루브산, 옥살산, 글리콜산, 살리실산, 피라노시딜산, 예컨대 글루쿠론산 또는 갈락투론산, 알파히드록시산, 예컨대 시트르산 또는 타르타르산, 아미노산, 예컨대 아스파르트산 또는 글루탐산, 방향족 산, 예컨대 벤조산 또는 신남산, 술폰산, 예컨대 p-톨루엔술폰산, 메탄술폰산, 에탄술폰산 등으로 처리하는 것을 포함한, 관련 기술분야에 공지된 임의의 적합한 방법에 의해 제조될 수 있다. 제약상 허용되는 염의 예는 술페이트, 피로술페이트, 비술페이트, 술파이트, 비술파이트, 포스페이트, 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포르메이트, 이소부티레이트, 카프로에이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트 숙시네이트, 수베레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말레에이트, 부틴-1,4-디오에이트, 헥신-1,6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로벤조에이트, 히드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부트레이트, 시트레이트, 락테이트, 글리콜레이트, 레지네이트, 락테이트, 캄실레이트, 타르트레이트, 만델레이트 및 술포네이트, 예컨대 크실렌술포네이트, 메탄술포네이트, 프로판술포네이트, 나프탈렌-1-술포네이트 및 나프탈렌-2-술포네이트를 포함한다.
포스페이트 디에스테르, 포스포로티오에이트 디에스테르 또는 다른 산성 관능기를 함유하는 본 발명의 화합물의 염은 적합한 염기와 반응시킴으로써 제조될 수 있다. 제약상 허용되는 염은 다음을 포함하나 이에 제한되지는 않는다: 피리딘, 암모늄, 피페라진, 디에틸아민, 니코틴아미드, 포름산, 우레아, 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 아연, 리튬, 신남산, 메틸아미노, 메탄술폰산, 피크르산, 타르타르산, 트리에틸아미노, 디메틸아미노, 및 트리스(히드록시메틸)아미노메탄. 추가의 제약상 허용되는 염은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지되어 있다.
이러한 제약상 허용되는 염은 제약상 허용되는 양이온을 제공하는 염기를 사용하여 제조될 수 있으며, 이는 알칼리 금속 염 (특히 나트륨 및 칼륨), 알칼리 토금속 염 (특히 칼슘 및 마그네슘), 알루미늄 염 및 암모늄 염, 아연, 뿐만 아니라 생리학상 허용되는 유기 염기, 예컨대 디에틸아민, 이소프로필아민, 올라민, 벤자틴, 베네타민, 트로메타민 (2-아미노-2-(히드록시메틸)프로판-1,3-디올), 모르폴린, 에폴라민, 피페리딘, 피페라진, 피콜린, 디시클로헥실아민, N,N'-디벤질에틸렌디아민, 2-히드록시에틸아민, 트리-(2-히드록시에틸)아민, 클로로프로카인, 콜린, 데아놀, 이미다졸, 디에탄올아민, 에틸렌디아민, 메글루민 (N-메틸글루카민), 프로카인, 디벤질피페리딘, 데히드로아비에틸아민, 글루카민, 콜리딘, 퀴닌, 퀴놀론, 에르부민 및 염기성 아미노산, 예컨대 리신 및 아르기닌으로부터 제조된 염을 포함한다.
그의 염을 포함하는 본원에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물은 포스페이트 또는 티오포스페이트 결합에서의 -SH 또는 -OH (즉, 본원에 기재된 바와 같은 화합물의 X1 또는 X2)가 -S- 또는 -O-로서 나타내어지는 구조가 상응하는 양이온과 함께 본원에 기재된 바와 같은 화합물의 염을 형성한 것으로 설명될 수 있다. 예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 제1 측면의 화합물의 염은 하기 구조에 의해 나타내어질 수 있다:
여기서 Ay+는 모노 또는 다가 염 양이온을 나타내고, n 및 m은 주어진 y에 대한 가장 낮은 가능한 정수이다. 예를 들어 Ay+가 1가일 때, 즉 y가 1, 예컨대 Na+, K+, NH4 +, TEAH+ 등일 때, n은 1이고 m은 2이고; y가 2, 예컨대 Ca2+, Mg2+ 등일 때, n은 1이고 m은 1이고; y가 3, 예를 들어 Al3+ 등일 때, n은 3이고 m은 2이다. 예를 들어, 1가 또는 2가 염 양이온의 염은 각각
로 나타내어질 수 있거나, 또는 n = 1인 경우에, 이들은 괄호 없이, 예를 들어 각각
로 나타내어질 수 있다.
대안적으로, 1가 염은 각각의 -S- 또는 -O-에 인접한 A+로 도시될 수 있다. 예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-RR-CDN 화합물의 나트륨 염은
로 도시될 수 있다.
다른 비-제약상 허용되는 염, 예를 들어 트리플루오로아세테이트 또는 트리에틸암모늄은, 예를 들어 본 발명의 화합물의 단리에 사용될 수 있으며, 이는 본 발명의 범주 내에 포함된다.
본 발명은 그의 범주 내에 본 발명의 화합물의 염의 모든 가능한 화학량론적 및 비-화학량론적 형태를 포함한다.
염기성 아민 또는 다른 염기성 관능기를 함유하는 본 발명의 화합물이 염으로서 단리되는 경우에, 그 화합물의 상응하는 유리 염기 형태는 염을 무기 또는 유기 염기, 적합하게는 화합물의 유리 염기 형태보다 더 높은 pKa를 갖는 무기 또는 유기 염기로 처리하는 것을 포함한, 관련 기술분야에 공지된 임의의 적합한 방법에 의해 제조될 수 있다. 유사하게, 포스페이트 디에스테르, 포스포로티오에이트 디에스테르 또는 다른 산성 관능기를 함유하는 본 발명의 화합물이 염으로서 단리되는 경우에, 그 화합물의 상응하는 유리 산 형태는 염을 무기 또는 유기 산, 적합하게는 화합물의 유리 산 형태보다 더 낮은 pKa를 갖는 무기 또는 유기 산으로 처리하는 것을 포함한, 관련 기술분야에 공지된 임의의 적합한 방법에 의해 제조될 수 있다.
본원에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물의 유효량은 치료될 상태, 환자의 전반적 건강, 투여 경로 및 용량, 및 부작용의 중증도와 같은 인자에 따라 달라질 수 있다. 치료 및 진단 방법에 대한 안내가 이용가능하다 (예를 들어, 문헌 [Maynard, et al. (1996) A Handbook of SOPs for Good Clinical Practice, Interpharm Press, Boca Raton, FL; Dent (2001) Good Laboratory and Good Clinical Practice, Urch Publ., London, UK] 참조).
유효량은 1회 용량으로 주어질 수 있지만, 1회 용량으로 제한되지 않는다. 따라서, 투여는 본원에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물을 포함하는 제약 조성물의 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20회 또는 그 초과의 투여일 수 있다. 본 방법에서 제약 조성물의 1회 초과의 투여가 존재하는 경우에, 투여는 1분, 2분, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 또는 그 초과의 분의 시간 간격으로, 약 1시간, 2시간, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24시간 등의 간격으로 이격될 수 있다. 시간과 관련하여, 용어 "약"은 30분 이내의 플러스 또는 마이너스 임의의 시간 간격을 의미한다. 투여는 또한 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 7일, 8일, 9일, 10일, 11일, 12일, 13일, 14일, 15일, 16일, 17일, 18일, 19일, 20일, 21일 및 그의 조합의 시간 간격으로 이격될 수 있다. 본 발명은 시간상 동일하게 이격되는 투여 간격으로 제한되는 것이 아니라, 비-동일 간격의 용량을 포괄한다.
예를 들어, 1회/주, 2회/주, 3회/주, 4회/주, 5회/주, 6회/주, 7회/주, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회 등의 투여 스케줄이 본 발명에 이용가능하다. 투여 스케줄은, 예를 들어 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 6주, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 및 12개월의 총 기간 동안의 투여를 포괄한다.
상기 투여 스케줄의 주기가 제공된다. 주기는 약, 예를 들어 7일마다; 14일마다; 21일마다; 28일마다; 35일마다; 42일; 49일마다; 56일마다; 63일마다; 70일마다; 등으로 반복될 수 있다. 비 투여의 간격이 주기 사이에 발생할 수 있으며, 여기서 간격은 약, 예를 들어 7일; 14일; 21일; 28일; 35일; 42일; 49일; 56일; 63일; 70일; 등일 수 있다. 이와 관련하여, 용어 "약"은 플러스 또는 마이너스 1일, 플러스 또는 마이너스 2일, 플러스 또는 마이너스 3일, 플러스 또는 마이너스 4일, 플러스 또는 마이너스 5일, 플러스 또는 마이너스 6일, 또는 플러스 또는 마이너스 7일을 의미한다.
추가의 치료제와의 공-투여 방법은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다 (Hardman, et al. (eds.) (2001) Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th ed., McGraw-Hill, New York, NY; Poole and Peterson (eds.) (2001) Pharmacotherapeutics for Advanced Practice:A Practical Approach, Lippincott, Williams & Wilkins, Phila., PA; Chabner and Longo (eds.) (2001) Cancer Chemotherapy and Biotherapy, Lippincott, Williams & Wilkins, Phila., PA). 일반적으로, 공-투여 또는 함께 투여는 동시에 또는 상이한 시간에 투여될 수 있는 2종 이상의 작용제로 대상체를 치료하는 것을 나타낸다. 예를 들어, 이러한 작용제는 본질적으로 동일한 시간 또는 상이한 시간에 수행될 수 있고 동일한 투여 경로 또는 상이한 투여 경로에 의해 수행될 수 있는 개별 투여로서 단일 대상체에게 전달될 수 있다. 이러한 작용제는 이들이 동일한 시간에 동일한 투여 경로에 의해 투여되도록 동일한 투여 (예를 들어 동일한 제제)로 단일 대상체에게 전달될 수 있다.
기재된 바와 같이, 본 발명의 조성물은 바람직하게는 비경구 또는 경장 전달을 위한 제약 조성물로서 제제화된다. 동물 대상체에게 투여하기 위한 전형적 제약 조성물은 제약상 허용되는 비히클, 예컨대 수용액, 비-독성 부형제, 예를 들어 염, 보존제, 완충제 등을 포함한다. 예를 들어, 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 15th Ed., Easton ed. , Mack Publishing Co., pp 1405-1412 and 1461- 1487 (1975); The National Formulary XIV, 14th Ed., American Pharmaceutical Association, Washington, DC (1975)]을 참조한다. 비-수성 용매의 예는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 식물성 오일 및 주사가능한 유기 에스테르, 예컨대 에틸올레에이트다. 수성 담체는 물, 알콜/수성 용액, 염수 용액, 비경구 비히클, 예컨대 염화나트륨, 링거 덱스트로스 등을 포함한다. 정맥내 비히클은 유체 및 영양소 보충체를 포함한다. 보존제는 항미생물제, 항산화제, 킬레이트화제 및 불활성 기체를 포함한다. 제약 조성물의 다양한 성분의 pH 및 정확한 농도는 관련 기술분야에서의 상용 기술에 따라 조정된다.
특정한 백신의 반복 투여 (동종 부스팅)는 체액성 반응을 부스팅하는데 효과적인 것으로 입증되었다. 이러한 접근법은 벡터에 대한 이전 면역이 강건한 항원 제시 및 적절한 염증성 신호의 생성을 손상시키는 경향이 있기 때문에 세포성 면역을 부스팅하는데는 효과적이지 않을 수 있다. 이 문제를 피하기 위한 하나의 접근법은 상이한 항원-전달 시스템을 사용하는 백신의 순차적 투여 (이종 부스팅)였다. 이종 부스팅 요법에서, 적어도 1종의 프라임 또는 부스트 전달은 불활성화된 종양 세포/본원에 기재된 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 또는 그의 조성물의 전달을 포함한다. 요법의 이종 부문은 하기 전략 중 1종 이상을 사용하는 1종 이상의 항원 (예를 들어, 1종 이상의 신생항원)의 전달을 포함할 수 있다:
병원성 침습을 탑재하는데 비효과적 또는 비효율적으로 만드는 일부 변성 조건으로 처리된 입자인, 관심 항원을 포함하는 불활성화 또는 약독화된 박테리아 또는 바이러스;
전형적으로 병원체의 세포 배양물 또는 병원체를 함유하는 조직 샘플로부터 정제된 자연-생산된 항원인 정제된 항원, 또는 그의 재조합 버전;
대상체의 숙주 세포에서 항원을 발현 및/또는 분비하도록 재조합적으로 조작된 생 바이러스 또는 박테리아 전달 벡터. 이들 전략은 (예를 들어, 유전자 조작을 통해) 바이러스 또는 박테리아 벡터를 비-병원성 및 비-독성이 되도록 약독화시키는 것에 좌우된다;
항원이 로딩되거나 항원을 코딩하는 핵산을 포함하는 조성물로 형질감염된 세포를 포함하는 항원 제시 세포 (APC) 벡터, 예컨대 수지상 세포 (DC) 벡터 (예를 들어, 거세-저항성 전이성 전립선암의 치료를 위한 프로벤지(Provenge)® (덴드레온 코포레이션(Dendreon Corporation)));
리포솜 항원 전달 비히클; 및
유전자 총, 전기천공, 박테리아 유령, 마이크로구체, 마이크로입자, 리포솜, 다가양이온성 나노입자 등에 의해 투여될 수 있는 네이키드 DNA 벡터 및 네이키드 RNA 벡터.
예로서, 프라임/부스트 요법은 비경구 경로 (예를 들어, 종양내 또는 종양주위 주사)에 의한 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물의 투여를 포함할 수 있고, 이 후 상기 기재된 전략 중 1종 이상을 사용하는 1종 이상의 항원 (예를 들어, 신생항원)의 "부스트" 투여가 이어질 수 있다. 상기 기재된 바와 같이, 항원 투여는 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물의 제2 투여, 1종 이상의 면역 체크포인트 억제제의 투여, CD47/SIRPα 경로 길항제의 투여, TLR 효능제의 투여, APRIL 길항제의 투여 등 또는 그의 조합과 조합될 수 있다.
프라임 백신 및 부스트 백신은 하기 경로 중 어느 하나 또는 조합에 의해 투여될 수 있다. 한 측면에서, 프라임 백신 및 부스트 백신은 동일한 경로에 의해 투여된다. 또 다른 측면에서, 프라임 백신 및 부스트 백신은 상이한 경로에 의해 투여된다. 용어 "상이한 경로"는 신체 상의 상이한 부위, 예를 들어 경구, 비-경구, 경장, 비경구, 직장, 절내 (림프절), 정맥내, 동맥, 피하, 근육내, 종양내, 종양주위, 종양내, 주입, 점막, 비강, 뇌척수 공간 또는 뇌척수액 등인 부위, 뿐만 아니라 상이한 방식, 예를 들어, 경구, 정맥내 및 근육내에 의한 것을 포괄하나 이에 제한되지는 않는다.
프라임 또는 부스트 백신의 유효량은 1회 용량으로 주어질 수 있지만, 1회 용량으로 제한되지 않는다. 따라서, 투여는 백신의 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20회 또는 그 초과의 투여일 수 있다. 백신의 1회 초과의 투여가 존재하는 경우에, 투여는 1분, 2분, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 또는 그 초과의 분의 시간 간격으로, 약 1시간, 2시간, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24시간 등의 간격으로 이격될 수 있다. 시간과 관련하여, 용어 "약"은 30분 이내의 플러스 또는 마이너스 임의의 시간 간격을 의미한다. 투여는 또한 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 7일, 8일, 9일, 10일, 11일, 12일, 13일, 14일, 15일, 16일, 17일, 18일, 19일, 20일, 21일 및 그의 조합의 시간 간격으로 이격될 수 있다. 본 발명은 시간상 동일하게 이격되는 투여 간격으로 제한되는 것이 아니라, 비-동일 간격의 용량을 포괄하며, 예컨대 단지 비제한적 예를 제공하는 것으로, 프라이밍 스케줄은 1일, 4일, 7일 및 25일에서의 투여로 이루어진다.
실시예
하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위해 제공된다. 이들 실시예는 결코 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 의도되지 않는다.
일반적 방법
용액 상 올리고뉴클레오티드 합성에 적합한 무수 용매 및 시약은 상업적 공급업체 (알드리치, 켐진스 코포레이션, 미국 매사추세츠주 윌밍톤)로부터 구입하고, 무수 기술을 사용하여 건조 아르곤 또는 질소 하에 취급하였다. 포스포르아미다이트 커플링 반응 및 H-포스포네이트 고리화는 건조 아르곤 또는 질소 하에 무수 아세토니트릴 또는 피리딘 중에서 수행하였다. 건조 피리딘 중 모든 반응에 대한 출발 물질은 달리 나타내지 않는 한 피리딘으로부터의 농축 (3회)에 의해 건조시켰다. 크로마토그래피 조건은 달리 나타내지 않는 한 하기 실시예에서와 같다. 정제용 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피는 디클로로메탄 중 메탄올의 구배를 사용하는 콤비플래쉬 Rf+ UV-Vis (텔레다인 이스코) 상에서의 레디셉 Rf 실리카 칼럼 (텔레다인 이스코, 네브래스카주 링컨)을 사용하는 중압 크로마토그래피 (MPLC) 하에 수행하였다. 역상 정제용 크로마토그래피는 수성 10 mM TEAA 용액 중 아세토니트릴의 구배를 사용하는 콤비플래쉬 Rf+ UV-Vis 상에서의 레디셉 Rf C18 Aq 칼럼 (텔레다인 이스코)을 사용하는 MPLC 조건 하에 수행하였다. 분석용 고압 액체 크로마토그래피 (HPLC)는 마이크로소브 10 마이크로미터 C18 250 x 4.6mm 또는 써모 사이언티픽 아클라임(Acclaim)™ 120 5μm C18 100 x 4.6mm 칼럼 및 10 mM TEAA 및 아세토니트릴의 구배를 사용하는 254nm에서 모니터링되는 포토다이오드 어레이 검출기가 장착된 시마즈 프로미넌스 HPLC 상에서 수행하였다. 정제용 HPLC는 50 mL/분의 유량으로 10 mM TEAA 및 아세토니트릴의 구배를 사용하는 배리안 마이크로소브 60-8 C-18 41.6 x 250 mm 칼럼 상에서의 254nm에서 모니터링되는 SPD-20A UV/Vis 검출기가 장착된 시마즈 정제용 LC20-AP HPLC 시스템 상에서 수행하였다. C-18 Sep-Pak (워터스)를 사용하는 고체 상 추출은 3% (wt/wt)의 로딩에서 수행하였다. 실시예 2-12의 화합물에 대해, 전기분무 이온화 공급원 (ESI)을 사용하는, 시마즈 LCMS-2020 단일 사중극자 질량 분광계에 커플링된 프로미넌스 HPLC를 특색으로 하는 시마즈 LCMS 시스템을 사용하여 분석용 LCMS를 기록하였다. 중간체 화합물의 합성에 대해, LCMS 데이터는 실시예 1에 기재된 바와 같이 기록하였다.
최종 화합물은 TEAH 염으로서 존재할 수 있으며, 이는 표준 이온 교환 기술 또는 다른 널리 공지된 방법을 사용하여 다른 염 형태 (Na 및 NH4를 포함하나 이에 제한되지는 않음)로의 전환이 가능하다.
인에서의 입체화학의 할당은 문헌 방법 (Zhao et al. Nucleosides, Nucleotides, and Nucleic Acid 289:352-378, 2009)과 유사하게 또는 하기 실시예에 논의된 바와 같이 이루어졌다.
화합물 명칭은 미국 02140 매사추세츠주 캠브리지 캠브리지파크 드라이브 100 소재의 캠브리지소프트 코포레이션으로부터 이용가능한 소프트웨어 프로그램 켐바이오드로우 울트라 V 14.0을 사용하여 생성되었다. 켐바이오드로우에 의해 명칭이 생성될 수 없는 화합물 또는 실시예에 사용된 참조 화합물의 요약된 명칭이 하기 표 3에 제공된다. 참조 화합물 2'3'-RR-(G)(A) 및 2'3'-RR-(A)(A)는 합성에 관하여 참조로 포함된 PCT 공개 번호 WO2014/189805에 기재된 바와 같이 제조되었다. 실시예에서의 구조는 또한 염, 예를 들어 -O- A+ 또는 -S- A+ (여기서 A+는 염 양이온임)로서 나타내어질 수 있다.
표 3: 요약된 화합물 명칭 및 구조.
약어 및 두문자어. SalPCl = 살리실 클로로포스파이트. DCA = 디클로로아세트산. DDTT = 3-((N,N-디메틸-아미노메틸리덴)아미노)-3H-1,2,4-디티아졸-5-티온. DAST = 디에틸아미노황 트리플루오라이드. NaHCO3 = 중탄산나트륨. DCM = CH2Cl2 = 디클로로메탄. EtOH = 에탄올. EtOAc = 에틸 아세테이트. KOAc = 아세트산칼륨. MeCN = 아세토니트릴. MeOH = 메탄올. DMAP = N,N-디메틸피리딘-4-아민. DMOCP = 2-클로로-5,5-디메틸-1,3,2-디옥사포스포리난-2-옥시드. DMTCl = 4,4′-디메톡시트리틸 클로라이드. DMT = 4,4-디메톡시트리틸. N-페닐트리플아미드 = 1,1,1-트리플루오로-N-페닐-N-((트리플루오로메틸)술포닐)메탄술폰아미드. TBAF = 테트라부틸암모늄 플루오라이드. TBS = tert-부틸디메틸실릴. TEAA = 트리에틸암모늄 아세테이트. TEA = 트리메틸아민. TEAH = 트리에틸암모늄. TEAB = 트리에틸암모늄 비카르보네이트. TFA = 트리플루오로아세트산. TMSCl = 트리메틸실릴 클로라이드. HF = 플루오린화수소산. THF = 테트라히드로푸란. G = 구아닌. Gib = 이소부티릴 구아닌. A = 아데닌. ABz = 벤조일 아데닌. AMA = 수산화암모늄/물 중 40% 메틸아민 용액.
실시예 1: 중간체 화합물의 합성.
반응식 1A의 중간체 화합물에 대해, LCMS를 방법 A로 지칭되는 워터스 시스템 (마이크로매스 ZQ 질량 분광계; 칼럼: 선파이어 C18 3.5 마이크로미터, 3.0 x 30 mm; 구배: 2.0분 기간에 걸쳐 0.05% TFA를 함유하는 물 중 40-98% 아세토니트릴; 유량 2 mL/분; 칼럼 온도 40℃)을 사용하여 기록하였다. 반응식 1B의 중간체 화합물에 대해, 방법 B-D의 경우, LCMS를 워터스 시스템 (마이크로매스 SQ 질량 분광계; 칼럼: 액퀴티 UPLC BEH C18 1.7 마이크로미터, 2.1 x 50 mm)을 사용하여 기록하였다. 방법 B: 1.76분 기간에 걸쳐 물 중 2-98% 아세토니트릴 + 5mM 수산화암모늄, 0.3분 동안 등용매 후 2.5분에 2% 아세토니트릴로 되돌아감 - 총 실행 시간 5.2분; 유량 1 mL/분; 칼럼 온도 50℃. 방법 C: 4.40분 기간에 걸쳐 물 중 2-98% 아세토니트릴 + 5mM 수산화암모늄, 0.65분 동안 등용매 후 5.19분에 2% 아세토니트릴로 되돌아감 - 총 실행 시간 5.2분; 유량 1 mL/분; 칼럼 온도 50℃. 방법 D: 3.20분까지 구배 1%에서 30% 아세토니트릴에 이어서 5.2분 기간에 걸쳐 구배: 0.1% 포름산을 함유하는 물 중 30-98% 아세토니트릴; 유량 1 mL/분; 칼럼 온도 50℃. 반응식 1B에 대해, 방법 E의 경우, HRMS 데이터를 워터스 시스템 (액퀴티 G2 Xevo QTof 질량 분광계; 칼럼: 액퀴티 BEH 1.7 마이크로미터, 2.1 x 50 mm; 구배: 3.4분 기간에 결쳐 0.1% 포름산을 함유하는 물 중 40-98% 아세토니트릴, 1.75분 동안 등용매 98% 아세토니트릴 후 5.2분에 40%로 되돌아감; 유량 1 mL/분; 칼럼 온도 50℃). 모든 보고된 질량은 달리 나타내지 않는 한 양성자화된 모 이온의 것이다.
중간체 i6 (실시예 2 및 5에 사용됨) 및 i7 (실시예 7에 사용됨)을 하기 반응식 1A에 따라 제조하였다:
단계 1: (2R,3R,4R,5R)-5-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-2-((비스(4-메톡시페닐) (페닐)메톡시)메틸)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)테트라히드로푸란-3-일 트리플루오로메탄-술포네이트 (i2)의 제조: N-(9-((2R,3R,4R,5R)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-4-히드록시테트라히드로푸란-2-일)-9H-퓨린-6-일)벤즈아미드 (i1, 5.6 g, 7.11 mmol, 켐진스) 및 DMAP (0.174 g, 1.42 mmol)의 혼합물을 무수 THF (35 mL) 중에 현탁시키고, DIPEA (6.21 mL, 35.5 mmol)의 첨가로 용액을 생성한 후 여기에 N-페닐트리플아미드 (5.08 g, 14.21 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3.5시간 동안 교반하고, 이 시점에서 이를 5% 염수 (100 mL)에 붓고, EtOAc (2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 건조시키고 (Na2SO4), 건조제를 여과하고, 진공 하에 실리카 겔 (10g) 상에서 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (구배 용리 25-100% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 목적 화합물 i2를 황갈색 고체로서 수득하였다; 5.53 g; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.05 (s, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.06 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.66 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.61 - 7.48 (m, 4H), 7.48 - 7.25 (m, 7H), 6.88 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 6.04 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 5.50 (dd, J = 7.5, 4.7 Hz, 1H), 5.32 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.50 (t, J = 4.1 Hz, 1H), 3.82 (s, 6H), 3.77 (dt, J = 10.8, 5.2 Hz, 1H), 3.41 (dd, J = 10.8, 3.7 Hz, 1H), 0.77 (s, 9H), -0.01 (s, 3H), -0.46 (s, 3H); LCMS (방법 A) Rt = 1.65분; m/z 920.5 [M+H]+.
단계 2: (2R,3S,4R,5R)-5-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-2-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)테트라히드로푸란-3-일 아세테이트 (i3)의 제조: 톨루엔 (40 mL) 중 화합물 i2 (5.5 g, 5.98 mmol), KOAc (2.93 g, 29.9 mmol), 및 18-크라운-6 (1,4,7,10,13,16-헥사옥사시클로옥타데칸, 0.79 g, 2.99 mmol)의 혼합물을 110℃에서 4시간 동안 가열하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 실리카 겔 (10g)을 첨가하고, 용매를 진공 하에 제거하였다. 조 물질을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (구배 용리 25-100% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 목적 화합물 i3을 황갈색 고체로서 수득하였다: 3.3g; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.70 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.84 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.44 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.35 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.28 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.21 - 7.02 (m, 7H), 6.67 (dd, J = 8.9, 2.1 Hz, 4H), 5.98 (s, 1H), 4.97 (dd, J = 3.6, 1.4 Hz, 1H), 4.61 - 4.52 (m, 1H), 4.35 (s, 1H), 3.62 (s, 6H), 3.41 (dd, J = 9.8, 6.2 Hz, 1H), 3.18 (dd, J = 9.8, 5.6 Hz, 1H), 1.53 (s, 3H), 0.77 (s, 9H), 0.03 (s, 3H), 0.0 (s, 3H). LCMS (방법 A) Rt 1.68분; m/z 830.2 [M+H]+.
단계 3: N-(9-((2R,3R,4S,5R)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-4-히드록시테트라히드로푸란-2-일)-9H-퓨린-6-일)벤즈아미드 (i4)의 제조: 화합물 i3 (6.78 g, 8.17 mmol)을 MeOH (120 mL) 중에 용해시키고, MeOH 중 2.0 M 디메틸아민 용액 (20.4 mL, 40.8 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 17시간 동안 교반하였다. 실리카 겔 (12g)을 첨가하고, 용매를 진공 하에 제거하였다. 조 물질을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (구배 용리 25-75% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 목적 화합물 i4를 황갈색 고체로서 수득하였다: 3.9 g; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.94 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.97 - 7.90 (m, 2H), 7.58 - 7.38 (m, 3H), 7.38 - 7.32 (m, 2H), 7.32 - 7.00 (m, 7H), 6.80 - 6.65 (m, 4H), 5.83 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 5.38 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.42 (s, 1H), 4.29 (t, J = 4.6 Hz, 1H), 4.02 - 3.95 (m, 1H), 3.75 - 3.61 (m, 6H), 3.53 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 0.81 (s, 9H), 0.0 (s, 6H). LCMS (방법 A) Rt 1.57분; m/z 788.2 [M+H]+.
단계 4: N-(9-((2R,3S,4S,5R)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-4-플루오로테트라히드로푸란-2-일)-9H-퓨린-6-일)벤즈아미드 (i5a) 및 N-(9-((2R,3S,4R,5R)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-4-플루오로테트라히드로푸란-2-일)-9H-퓨린-6-일)벤즈아미드 (i5b)의 제조: 화합물 i4 (750 mg, 0.952 mmol)를 불활성 질소 분위기 하에 무수 DCM (7 mL) 중에 용해시키고, 용액을 0℃로 냉각시켰다. DAST의 1.0 M 용액 (1.90 mL, 1.90 mmol)을 첨가하고, 후속적으로 반응물을 -5℃에서 17시간 동안 크리오-쿨을 사용하여 반응 온도를 제어하였다. 용기를 0℃로 가온하고, 포화 NaHCO3 (2 mL)을 첨가하였다. 30분 동안 교반한 후, 혼합물을 5% 염수 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기부를 건조시키고 (Na2SO4), 건조제를 여과하고, 실리카 겔 (2g)을 여과물에 첨가하고, 용매를 진공 하에 제거하였다. 조 물질을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (구배 용리 10-75% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 부분입체이성질체 i5a 및 i5b의 혼합물을 황갈색 고체로서 수득하였다: 193 mg; 주요 (2R,3S,4S,5R) 부분입체이성질체 LCMS (방법 A) Rt 1.53분; m/z 790.4 (M+H)+; 부차 (2R,3S,4R,5R) 부분입체이성질체 Rt 1.58분; m/z 790.4 [M+H]+.
단계 5: N-(9-((2R,3S,4S,5R)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로-3-히드록시테트라히드로푸란-2-일)-9H-퓨린-6-일)벤즈아미드 (i6)의 제조: i5a 및 i5b의 부분입체이성질체 혼합물 (2.0 g, 2.53 mmol)을 무수 THF (100 mL) 중에 용해시키고, 불활성 질소 분위기 하에 -42℃로 냉각시킨 후, 1.0 M TBAF (3.80 mL, 3.80 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 2.5시간 동안 교반한 다음, 포화 NaHCO3 (20 mL)으로 켄칭하였다. 냉각 조를 제거하고, 슬러리를 10분 동안 교반한 후, 혼합물을 5% 염수 (150 mL)로 희석하고, DCM (2 x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 상을 건조시키고 (Na2SO4), 건조제를 여과하고, 실리카 겔 (4g)을 여과물에 첨가하고, 용매를 진공 하에 제거하였다. 조 물질을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (구배 용리 25-100% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 목적 화합물 i6을 백색 고체로서 수득하였다: 355 mg; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.16 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.99 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.59 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.48 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.41 - 7.31 (m, 3H), 7.31 - 7.11 (m, 7H), 6.79 (d, J = 8.9 Hz, 4H), 6.16 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 5.77 (br s, 1H), 5.27 - 5.10 (m, 2H), 4.53 (dt, J = 28.0 Hz, 3.4 Hz, 1H), 3.77 (s, 6H), 3.51 (dd, J = 10.7, 3.7 Hz, 1H), 3.34 (dd, J = 10.7, 3.3 Hz, 1H); 19F NMR (376.4 MHz, CDCl3) δ -197.5; 13C NMR (101 MHz, CDCl3) δ 164.66, 158.64, 158.62, 152.60, 151.43, 149.34, 144.22, 141.66, 135.29, 135.13, 133.40, 132.93, 129.96, 128.87, 127.99, 127.93, 127.86, 127.07, 122.65, 113.26, 93.85, 92.02, 87.56 (d, J = 144 Hz), 83.56 (d, J = 23 Hz), 77.30, 74.63 (d, J = 16 Hz), 62.82 (d, J = 11 Hz), 55.26; LCMS (방법 A) Rt 0.89분; m/z 676.3 [M+H]+.
단계 6: (2R,3S,4R,5R)-2-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로테트라히드로푸란-3-일 (2-시아노에틸) 디이소프로필포스포르아미다이트 (i7)의 제조: THF (5.0 mL) 중 i6 (830 mg, 1.4 mmol, 1 당량)의 건조된 용액에 DMAP (18 mg, 0.15 mmol, 0.1 당량) 및 DIPEA (0.9 mL, 5.5 mmol, 4 당량)를 첨가하였다. 2-시아노에틸 N,N-디이소프로필클로로포스포르아미다이트 (340 μL, 1.5 mmol, 1.1 당량)를 천천히 첨가하고, 반응을 16시간 동안 진행시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (이는 5% NaHCO3 수성 용액으로 미리 세척됨)로 희석하고, 염수 용액 (5 x 100 mL)으로 세척하였다. 합한 수성 층을 EtOAc로 추출하고, 모든 유기 층을 합하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. MPLC-SiO2 (DCM:Hex:TEA 50:44:6)로 인 입체중심에서의 부분입체이성질체의 혼합물로서의 i7 810 mg을 수득하였다. LCMS (10분 동안 50-100% MeCN/10mm TEAA, 이어서 14분 동안 100% MeCN, 1 mL/분) Rt 12.3 및 13.0분; m/z 877.15 [M+H]+.
중간체 i13 (실시예 3에 사용됨)을 하기 반응식 1B에 따라 제조하였다:
단계 1: (2R,3R,4R,5R)-5-(6-(트리틸아미노)-9H-퓨린-9-일)-4-(트리틸옥시)-2-((트리틸옥시)메틸) 테트라히드로푸란-3-올 (i9)의 제조: 실온에서 피리딘 (250 mL, 3.09 mol) 중 아데노신 (i8, 5.0 g, 18.7 mmol)의 용액에 DMAP (1.943 g, 15.9 mmol)에 이어서 트리틸 클로라이드 (17.47 g, 62.7 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 교반하고, 24시간 후에 추가의 트리틸 클로라이드 (6.2 g, 22.3 mmol)를 첨가하고, 80℃에서 계속 교반하였다. 48시간 후, 추가의 트리틸 클로라이드 (5.2 g, 18.7 mmol)를 첨가하고, 교반을 추가로 48시간 동안 계속하였으며, 그 시점에 반응물을 실온으로 냉각시키고, EtOH (50 mL)를 첨가하여 켄칭하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시킨 다음, 생성된 잔류물을 톨루엔 (35 mL) 중에 현탁시키고, 여과하여 고체를 제거하고, 진공 하에 농축시켰다. 생성된 조 물질을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (구배 용리 0-10% B/A, 여기서 A = 8:1 CH2Cl2:헵탄, B = EtOAc)에 의해 정제하여 목적 화합물 i9를 수득하였다: 3.27 g; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.94 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.39-7.45 (m, 6H), 7.14-7.35 (m, 36H), 7.06-7.12 (m, 6H), 7.02 (br s, 1H), 6.35 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 5.15 (dd, J = 7.4, 4.6 Hz, 1H), 4.07 (t, J = 3.0 Hz, 1H), 3.28 (dd, J = 10.5, 3.5 Hz, 1H), 3.01 (dd, J = 10.4, 3.3 Hz, 1H), 2.85 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 2.26 (s, 1 H); LCMS (방법 B) Rt 4.22분; m/z 995.5 [M+H]+.
단계 2: 9-((2R,3S,4S,5R)-4-플루오로-3-(트리틸옥시)-5-((트리틸옥시)메틸)테트라히드로푸란-2-일)-N-트리틸-9H-퓨린-6-아민 (i10)의 제조: 실온에서 CHCl3 (145 mL) 중 화합물 i9 (5.72 g, 5.75 mmol)의 용액에 피리딘 (11.6 mL, 144 mmol)에 이어서 디에틸아미노황 트리플루오라이드 (3.80 mL, 28.8 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반한 후, 반응물을 포화 수성 NaHCO3의 용액 (150 mL)의 첨가에 의해 켄칭하였다. 혼합물을 추가로 CH2Cl2 (150 mL)로 희석하고, 층을 분리하고, 유기 층을 추가로 물 (2 x 150 mL)로 세척하고, 건조시켰다 (Na2SO4). 건조제를 여과한 후, 여과물을 진공 하에 농축시켰다. 생성된 조 물질을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (구배 용리 0-45% EtOAc / 헵탄)에 의해 정제하여 목적 화합물 i10을 수득하였다: 2.91 g; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.05 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.27-7.36 (m, 18H), 7.07-7.25 (m, 28H), 6.81 (br s, 1H), 6.40 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 4.31 (dd, J = 14.0, 1.3 Hz, 1H), 4.02-4.23 (m, 1H), 3.63, (dd, J = 50.2, 1.8 Hz, 1H), 3.40 (dd, J = 8.9, 7.2 Hz, 1H), 3.20 (dd, J = 9.7, 6.4 Hz, 1H); 19F NMR (376.4 MHz, CDCl3) δ -199.59; HRMS (방법 E) Rt 3.28분; m/z 996.4261 [M+H]+.
단계 3: (2R,3S,4R,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-4-플루오로-5-(히드록시메틸)테트라히드로-푸란-3-올 (i11)의 제조: CH2Cl2 (40 mL) 중 화합물 i10 (3.92 g, 3.94 mmol)의 용액을 0℃로 냉각시킨 후, 트리플루오로아세트산 (3.94 mL, 51.2 mmol)을 적가하였다. 생성된 암황색 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반되도록 한 다음, 실온으로 가온하고, 16시간 동안 교반하였다. 완결 시에 반응물을 물 (20 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, CH2Cl2 (50 mL)로 희석하였다. 합한 층을 밤새 동결건조시켰다. 동결건조로부터 생성된 조 물질을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (등용매 용리 10% MeOH / CH2Cl2)에 의해 정제하여 목적 화합물 i11을 수득하였다: 858 mg; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.17 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.35 (br s, 2H), 6.29 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 5.94 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 4.97-5.24 (m, 2H), 4.71-4.80 (m, 1H), 4.20-4.43 (m, 1H), 3.64-3.84 (m, 2H); 19F NMR (376.4 MHz, DMSO-d6) δ -200.84; LCMS (방법 C) Rt 0.44분; m/z 270.0 [M+H]+.
단계 4: N-(9-((2R,3S,4R,5R)-4-플루오로-3-히드록시-5-(히드록시메틸)테트라히드로푸란-2-일)-9H-퓨린-6-일)벤즈아미드 (i12)의 제조: 실온에서 피리딘 (6.0 mL) 중 화합물 i11 (488 mg, 1.27 mmol)의 용액에 TMSCl (0.81 mL, 6.37 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, 벤조일 클로라이드 (0.74 mL, 6.37 mmol)를 첨가하고, 교반을 실온에서 계속하였다. 3시간 후, 반응물을 0℃로 냉각시키고, 물 (1.5 mL)을 첨가하여 켄칭하였다. 혼합물을 10분 동안 교반되도록 한 후, 진한 암모니아 (3.0 mL)를 첨가하고, 반응물을 실온으로 가온하였다. 추가로 30분 후, 반응물을 물 (10 mL)로 희석하고, EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 건조시키고 (Na2SO4), 건조제를 여과하고, 여과물을 진공 하에 농축시켰다. 생성된 조 물질을 디에틸 에테르로부터 연화처리하여 목적 화합물 i12를 수득하였다: 240 mg; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.22 (br s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.02-8.08 (m, 2H), 7.62-7.68 (m, 1H), 7.52-7.59 (m, 2H), 6.38 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.1 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 5.04-5.22 (m, 2H), 4.80-4.88 (m, 1H), 4.31-4.44 (m, 1H), 3.70-3.84 (m, 2H); 19F NMR (376.4 MHz, DMSO-d6) δ -200.61; LCMS (방법 D) Rt 1.47분; m/z 374.3 [M+H]+.
단계 5: N-(9-((2R,3S,4R,5R)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로-3-히드록시테트라히드로푸란-2-일)-9H-퓨린-6-일)벤즈아미드 (i13)의 제조: 실온에서 피리딘 (3.5 mL) 중 화합물 i12 (720 mg, 1.93 mmol)의 용액에 4,4'-디메톡시트리페닐메틸 클로라이드 (686 mg, 2.03 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반한 후, MeOH (5 mL)를 첨가하고, 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 생성된 조 물질을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (구배 용리 0-10% MeOH / CH2Cl2)에 의해 정제하여 목적 화합물 i13을 수득하였다: 885 mg; 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 11.24 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.04 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.63-7.67 (m, 1H), 7.53-7.58 (m, 2H), 7.38-7.46 (m, 4H), 7.25-7.31 (m, 6H), 7.20-7.24 (m, 1H), 6.86 (dd, J = 12.1, 8.7 Hz, 4H), 6.44 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.14 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 5.20 (dd, J = 51.4, 2.3 Hz, 1H), 4.88 (br d, J = 15.5 Hz, 1H), 4.54-4.63 (m, 1H), 3.72 (d, J = 3.8 Hz, 6H), 3.38-3.43 (m, 2H); 19F NMR (376.4 MHz, DMSO-d6) δ -199.41; HRMS (방법 E) Rt 1.23분; m/z 676.2561 [M+H]+.
중간체 i16 N-(9-((2R,3S,4S,5R)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로-3-히드록시테트라히드로푸란-2-일)-6-옥소-6,9-디히드로-1H-퓨린-2-일)이소부티르아미드 (실시예 12에 사용됨)를 하기 반응식 1C에 따라 제조하였다:
단계 1: N-(9-((2R,3S,4S,5R)-4-플루오로-3-히드록시-5-(히드록시메틸)테트라히드로푸란-2-일)-6-옥소-6,9-디히드로-1H-퓨린-2-일)이소부티르아미드 이소부티르산 염 (i15)의 제조: 실온에서 피리딘 (27.0, 334 mmol) 중 2-아미노-9-((2R,3S,4S,5R)-4-플루오로-3-히드록시-5-(히드록시메틸)테트라히드로푸란-2-일)-1,9-디히드로-6H-퓨린-6-온 (i14, 1.69 g, 5.91 mmol, 캘리포니아주 샌디에고 소재 카르보신트)의 용액에 클로로트리메틸실란 (5.67 mL, 44.4 mmol)을 5분에 걸쳐 적가하였다. 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 용액을 0℃로 냉각시키고, 이소부티릴 클로라이드 (1.86 mL, 17.74 mmol)를 10분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 0℃에서 5분 동안 교반되도록 한 다음, 실온으로 3.5시간 동안 가온하였다. 이어서, 반응물을 0℃로 냉각시키고, 물 (9.0 mL)을 첨가하여 켄칭하고, 0℃에서 10분 동안 교반한 다음, 실온으로 가온하였다. 5분 동안 교반한 후, 진한 암모니아 (28% 수성 NH4OH 용액, 18 mL)를 첨가하고, 혼합물을 35분 동안 교반한 다음, 혼합물을 물 (80 mL)로 희석하고, DCM (40 mL)으로 세척하였다. 수성 층을 분리하고, 진공 하에 농축시킨 다음, 생성된 조 물질을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (구배 용리 0-50% MeOH / CH2Cl2)에 의해 정제하여 화합물 i15 (1.32 g)를 수득하였다: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.27 (s, 1H), 6.01 (d, J 7.6 Hz, 1H), 5.02-5.20 (m, 1H), 4.76-4.84 (m, 1H), 4.29-4.41 (m, 1H), 3.79 (d, J = 3.3 Hz, 2H), 2.72 (hept, J 6.8 Hz, 1H), 2.47 (hept, J 6.8 Hz, 1H), 1.23 (d, J 6.8 Hz, 6H), 1.12 (d, J 6.8 Hz, 6H); 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -200.84; LCMS (방법 F) Rt 0.66분; m/z 356.2 (M+H+).
단계 2: N-(9-((2R,3S,4S,5R)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로-3-히드록시테트라히드로푸란-2-일)-6-옥소-6,9-디히드로-1H-퓨린-2-일)이소부티르아미드 (i16)의 제조: 실온에서 1:1 THF:CHCl3 (400 mL) 중 화합물 i15 (2.18 g, 6.14 mmol)의 현탁액에 N-메틸모르폴린 (2.70 mL, 24.54 mmol)에 이어서 4,4'-디메톡시트리틸 클로라이드 (8.32 g, 24.54 mmol)를 단일 부분으로 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 35분 동안 교반한 후, 반응물을 포화 수성 NaHCO3 용액 (250 mL)의 첨가에 의해 켄칭하였다. 유기 층을 층 분리하고, 수성 층을 추가로 DCM (2 x 150 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 건조시킨 (MgSO4) 다음, 건조제를 여과하고, 여과물을 진공 하에 농축시켜 오일을 수득하였다. 생성된 조 물질을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (구배 0-60% EtOAc/헵탄으로 N-메틸모르폴린을 제거하고, 이어서 0-60% MeOH/DCM)에 의해 정제하여 화합물 i16 (3.57 g)을 수득하였다: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.04 (s, 1H), 7.36-7.42 (m, 2H), 7.17-7.31 (m, 7H), 6.78-6.85 (m, 4H), 6.00 (d, J 7.1 Hz, 1H), 5.00-5.25 (m, 2H), 4.41 (m, 1H), 3.76 (s, 6H), 3.46 (dd, J 10.6, 4.3 Hz, 1H), 3.37 (dd, J 10.6, 3.0 Hz, 1H), 2.57 (hept, J 6.8 Hz, 1H), 1.19 (d, J 6.8 Hz, 3H), 1.16 (d, J 6.8 Hz, 3H); 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -200.35; LCMS (방법 C) Rt 2.16분; m/z 658.3 (M+H+).
실시예 2: 2'3'-RR-(3'F-A)(2'F-A) (5) 및 2'3'-RS-(3'F-A)(2'F-A) (5a)의 합성
디티오-[RP, RP]-시클릭-[3'F-A(2',5')p-2'F-A(3',5')p]로서 또한 지칭되는 2'3'-RR-(3'F-A)(2'F-A) (5)를 하기 반응식 2에 따라 제조하였다:
단계 1: (2R,3S,4R,5R)-2-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-4-플루오로-5-(히드록시메틸)테트라히드로푸란-3-일 히드로겐 포스포네이트 (1)의 제조: 1,4-디옥산 (8 mL) 및 피리딘 (2.5 mL) 중 N-(9-((2R,3S,4S,5R)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로-3-히드록시테트라히드로푸란-2-일)-9H-퓨린-6-일)벤즈아미드 (i6, 실시예 1 반응식 1A, 0.75 g, 1.1 mmol)의 용액에 1,4-디옥산 (4 mL) 중 SalPCl (0.27 g, 1.3 mmol)의 용액을 첨가하였다. 45분 후, 실온에서 교반 반응 혼합물에 물 (1 mL)을 도입하고, 혼합물을 1N 수성 NaHCO3 용액 (40 mL)에 부었다. 이 수성 혼합물을 EtOAc (3 x 40 mL)로 추출하고, 층을 분배하였다. EtOAc 추출물을 합하고, 무색 발포체로서 농축 건조시켰다. 생성된 발포체를 실리카 겔 크로마토그래피 (CH2Cl2 중 0.5% 피리딘을 함유하는 0%에서 50% MeOH)에 의해 정제하여 중간체 (2R,3S,4R,5R)-2-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로-테트라히드로푸란-3-일 히드로겐 포스포네이트 (220 mg, 27%)를 무색 발포체로서 수득하였다. CH2Cl2 (4 mL) 중 이 중간체 (220 mg, 0.3 mmol)의 용액에 물 (0.05 mL) 및 CH2Cl2 중 DCA의 6% (v/v) 용액 (3.8 mL)을 첨가하였다. 10분 후, 적색 용액에 피리딘 (0.4 mL)을 충전하여, 백색 혼합물이 생성되었다. 백색 혼합물을 진공 하에 농축시키고, MeCN (20 mL)으로 농축시킨 후 공비증류로서 물을 제거하였다. 이 공비증류 과정을 MeCN (20 mL)으로 2회 더 반복하였다. 마지막 증발 시에, 화합물 1의 백색 슬러리가 MeCN (5 mL) 중에 남았다.
단계 2: (2R,3S,4R,5R)-2-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-5-((((((2R,3R,4R,5R)-5-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-2-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로테트라히드로푸란-3-일)옥시)(2-시아노에톡시)포스포로티오일)옥시)메틸)-4-플루오로테트라히드로푸란-3-일 히드로겐 포스포네이트 (3)의 제조: MeCN (20 mL) 중 (2R,3R,4R,5R)-5-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-2-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로테트라히드로푸란-3-일 (2-시아노에틸) 디이소프로필포스포르아미다이트 (2, 0.31 g, 0.36 mmol, 켐진스)의 용액을 진공 하의 농축을 통해 건조시켰다. 이 과정을 공비증류로서 물을 제거하기 위해 2회 더 반복하였다. 마지막 공비증류에서, MeCN 중 화합물 2의 용액 (1.5 mL)에 10개의 3Å 분자체를 도입하고, 용액을 질소의 분위기 하에 저장하였다. MeCN 중 화합물 1과 잔류 피리디늄 디클로로아세테이트와의 교반 혼합물 (5 mL)에 MeCN 중 화합물 2의 용액 (1.5 mL)을 첨가하였다. 5분 후, 교반 혼합물에 DDTT (68 mg, 0.33 mmol)를 첨가하여, 황색 혼합물이 생성되었다. 30분 후, 황색 혼합물을 진공 하에 농축시켜 목적 화합물 3을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 3: 보호된 2'3'-디티오-(3'F-A)(2'F-A) (4)의 제조: CH2Cl2 (4 mL) 중 화합물 3 (~371 mg, 0.3 mmol)의 용액에 물 (0.04 mL) 및 CH2Cl2 중 DCA의 6% (v/v) 용액 (4 mL)을 첨가하였다. 10분 후, 적색 용액에 피리딘 (5 mL)을 도입하여, 적색 용액이 황색 혼합물로 변화하였다. 황색 혼합물을 대략 3 mL의 황색 혼합물이 남아있을 때까지 진공 하에 농축시켰다. 황색 혼합물에 피리딘 (5 mL)을 도입하고, 혼합물을 대략 3 mL의 황색 혼합물이 남아있을 때까지 증발시키고, 피리딘의 첨가 및 3 mL까지의 증발을 반복하였다. 피리딘 중 교반 황색 혼합물 (3 mL)에 DMOCP (0.165 g, 0.9 mmol)를 첨가하였다. 7분 후, 암오렌지색 용액에 물 (0.15 mL)을 첨가하고, 이어서 3H-1,2-벤조디티올-3-온 (75 mg, 0.45 mmol)을 즉시 도입하였다. 5분 후, 암오렌지색 용액을 1N 수성 NaHCO3 용액 (40 mL)에 부었다. 15분 후, 2상 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 추출하였다. 층을 분리한 후, 수성 층을 EtOAc (50 mL)로 2회 역추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 농축시켰다. 농축된 황색 오일에 톨루엔 (20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 증발시켜 잔류 피리딘을 제거하였다. 이 절차를 톨루엔 (20 mL)으로 2회 반복하였다. 생성된 오일을 실리카 겔 크로마토그래피 (CH2Cl2 중 0%에서 10% MeOH)에 의해 정제하여 화합물 4 (20 mg, 7%)를 백색 고체로서 수득하였다.
단계 4: 2'3'-RR-(3'F-A)(2'F-A) (5)의 제조: MeOH (1.0 mL) 중 화합물 4 (20 mg, 0.02 mmol)의 교반 용액에 수성 수산화암모늄 (0.5 mL)을 첨가하고, 오렌지색 슬러리를 50℃로 가열하였다. 90분 후, 황색 용액을 냉각되도록 하고, 이후에 진공 하에 농축시켰다. 황색 잔류물을 역상 실리카 겔 크로마토그래피 (10 mM 수성 TEAA 중 0%에서 20% MeCN)에 의해 정제하여 동결건조 후 화합물 5 (5.3 mg, 76%, 순도 99%)를 백색 비스-트리에틸암모늄 염으로서 수득하였다. LCMS-ESI: 694 [M-H]- (C20H22F2N10O8P2S2에 대한 계산치: 693.30); Rt: 8.372분. 1H NMR (400 MHz, 45℃, D2O) δ 8.61 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 6.57 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 6.44 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.90 (dd, J = 30.0, 3.5 Hz, 1H), 5.75 (dd, J = 28.0, 3.5 Hz, 1H), 5.67 (td, J = 8.0, 3.5 Hz, 1H), 5.47-5.38 (m, 1H), 4.93 (d, J = 25.0 Hz, 1H), 4.74-4.59 (m, 3H), 4.46 (dd, J = 12.0, 3.5 Hz, 1H), 4.28 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.34 (q, J = 7.0 Hz, 12H), 1.43 (t, J = 7.0 Hz, 18H). 19F NMR (400 MHz, 45℃, D2O) δ -197.95 내지 -198.23 (m), -200.24 내지 -200.35 (m). 31P NMR (45℃, D2O) δ 54.98, 52.70.
2'3'-RS-(3'F-A)(2'F-A) (5a)를 비스-트리에틸암모늄 염으로서 최종 정제 단계에서 단리하였다. LCMS-ESI: 694 [M-H]- (C20H22F2N10O8P2S2에 대한 계산치: 693.30); Rt: 7.973분. 이 반응의 규모-확장에서, SR 및 SS 이성질체를 또한 단리하였다: 2'3'-SR-(3'F-A)(2'F-A) (5b); LCMS-ESI: 693.65 [M-H]- (C20H22F2N10O8P2S2에 대한 계산치: 694.05); Rt: 7.057' 분, 및 2'3'-SS-(3'F-A)(2'F-A) (5c); LCMS-ESI: 695.65 [M+H]+; 693.65 [M-H]- (C20H22F2N10O8P2S2에 대한 계산치: 694.05); Rt: 6.327' 분. 모든 4종의 이성질체에 대한 LCMS는 20 mM 수성 NH4OAc 중 2%에서 50% MeCN의 10분 구배를 사용하였다.
실질적으로 순수한 화합물 5 (2'3'-RR-(3'F-A)(2'F-A))를 야생형 STING 단백질과 함께 공-결정화하고, STING에 결합된 이 화합물의 X선 구조는 반응식 2, 화합물 5에 도시된 바와 같은 입체화학을 확인시켜 주었다. A-3'-5'-A 인에서 S 배위를 갖는 상응하는 입체이성질체를 화합물 5로부터 분리하였으며, 여기서 S 이성질체의 체류 시간은 8.128분이었다. 하기 추가의 화합물은 아직 공-결정화되지 않았지만, 이들 화합물을 사용한 경험은 Rp, Rp 이성질체가 상응하는 Rp, Sp 이성질체 또는 Sp, Rp 이성질체보다 더 긴 체류 시간을 갖는다는 것을 나타낸다. Rp, Rp 및 Rp, Sp 또는 Sp, Rp 이성질체는 전형적으로 디-OH 유사체에 비해 STING 결합에서의 개선을 나타내지만, 하기 실시예에서 Rp, Rp 이성질체의 정체는 Rp, Sp 또는 Sp, Rp 이성질체보다 개선된 생물학적 활성 (예를 들어, STING에 대한 결합, IFNβ의 유도)을 갖는 것으로 추가로 검증된다.
실시예 3: 2'3'-RR-(3'βF-A)(2'F-A) (10) 및 2'3'-RS-(3'βF-A)(2'F-A) (10a)의 합성
디티오-[RP, RP]-시클릭-[3'βF-A(2',5')p-2'F-A(3',5')p]로서 또한 지칭되는 2'3'-RR-(3'βF-A)(2'F-A) (10)를 하기 반응식 3에 따라 제조하였다:
단계 1: (2R,3S,4S,5R)-2-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로테트라히드로푸란-3-일 히드로겐 포스포네이트 (6)의 제조: 디옥산 (7.1 mL) 중 N-(9-((2R,3S,4R,5R)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로-3-히드록시테트라히드로푸란-2-일)-9H-퓨린-6-일)벤즈아미드 (i13, 실시예 1, 반응식 1B; 630 mg, 0.92 mmol, 1 당량)의 용액에 피리딘 (1.9 mL, 24 mmol, 26 당량)에 이어서 2-클로로-4H-1,3,2-벤조디옥사포스포린-4-온 (225 g, 1.10 mmol, 1.2 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 물 5 mL에 이어서 물 52 mL 중 1.9 g NaHCO3으로 켄칭하였다. EtOAc (3 x 62 mL) 및 DCM (1 x 50 mL)으로 추출한 후, 합한 유기 층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 0.92 g 조 화합물 6을 수득하였다. 정제용 MPLC-SiO2 (99% DCM:1% (99.5% MeOH, 0.5% 피리딘)에서 50:50)로 화합물 6 460 mg을 수득하였다.
단계 2: (2R,3S,4S,5R)-2-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-5-((((((2R,3R,4R,5R)-5-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-2-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로테트라히드로푸란-3-일)옥시)(2-시아노에톡시)포스포로티오일)옥시)메틸)-4-플루오로테트라히드로푸란-3-일 히드로겐 포스포네이트 (8)의 제조: 화합물 2 (실시예 2, 반응식 2, 단계 2 참조, 750 mg, 0.86 mmol, 1.3 당량)를 무수 아세토니트릴 (3 x 10 mL)과 함께 공증발시켜 아세토니트릴 4 mL가 남았다. (단계 2a) DCM (8.0 mL) 중 화합물 6 (490 mg, 0.67 mmol, 1 당량)의 용액에 물 (0.12 mL)에 이어서 DCM 중 6% DCA 용액 8.0 mL를 첨가하였다. 반응 혼합물을 10분 동안 교반한 다음, 피리딘 (93 μL)으로 켄칭하고, 진공 하에 농축시켰다. 혼합물을 무수 아세토니트릴 (3 x 5 mL)과 함께 공증발시켜 아세토니트릴 중 화합물 7 1.8 mL가 남았다. 무수 아세토니트릴 (4 mL) 중 화합물 2 (750 mg)의 용액을 첨가하고, 3분 동안 교반하였다. DDTT (150 mg)를 첨가한 후, 반응 혼합물을 30분 동안 교반한 다음, 진공 하에 농축시켜 조 화합물 8 2.1 g을 수득하였다.
단계 3: 보호된 2'3'-디티오-(3'βF-A)(2'F-A) (9)의 제조: DCM (16 mL) 중 조 화합물 8 (2.1 g)의 용액에 물 (120 μL)에 이어서 DCM 중 6% DCA 용액 16 mL를 첨가하였다. 반응 혼합물을 10분 동안 교반한 다음, 피리딘 (6.6 mL)으로 켄칭하였다. 혼합물을 농축시켜 DCM을 제거한 다음, 무수 피리딘 (1 x 20 mL)과 함께 공증발시켜 13 mL가 남았다. DMOCP (370 mg, 2.0 mmol, 3 당량)를 첨가하고, 3분 동안 교반하고, 이어서 물 (0.37 mL, 20 mmol, 30 당량)을 첨가하고, 직후에 3H-1,2-벤조디티올-3-온 (170 mg, 1.0 mmol, 1.5 당량)을 첨가하였다. 반응을 5분 동안 진행되도록 하고, NaHCO3의 3% 용액 (100 mL)으로 희석하고, 디에틸 에테르 및 EtOAc의 1:1 용액 100 mL에 이어서 100 mL DCM으로 추출하였다. 합한 유기 층을 농축시켜 조 화합물 9 1g을 수득하였다. 정제용 MPLC-SiO2 (100% DCM에서 15% DCM/MeOH)로 부분입체이성질체의 혼합물로서의 9 170 mg을 수득하였다.
단계 4: 2'3'-RR-(3'βF-A)(2'F-A) (10)의 제조: EtOH (3 mL) 중 9 (170 mg, 0.17 mmol, 1 당량)의 용액에 진한 NH4OH (3 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 캡 및 파라필름으로 밀봉하고, 3시간 동안 50℃로 가열하였다. 이어서, 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 10분 동안 Ar 기체로 폭기하고, 진공 하에 농축시켰다. 정제용 MPLC-C18 (100% 10 mM TEAA에서 20% 아세토니트릴/10 mM TEAA)로 7.0 mg의 화합물 10 (Rt: 7.94분, 94% 순도) 및 4.1 mg의 R,S 부분입체이성질체 (Rt: 7.00분)를 수득하였다. LCMS-ESI: 693.7 [M-H]- (C20H22F2N10O8P2S2에 대한 계산치: 694.05); 1H NMR (400 MHz, 45℃, D2O) δ 8.49 (s, 1H), 8.44 (s, 2H), 8.36 (s, 1H), 6.62 (d, J = 18.4 Hz, 1H), 6.54 (s, 1H), 5.99-5.94 (m, 1H), 5.87-5.81 (m, 1H), 5.36 (m. 1H), 5.25-5.10 (m, 1H), 5.07-4.95 (m, 1H), 4.85-4.60 (m, 3H), 4.32 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 3.34 (q, J = 6.8 Hz, 12H), 2.11 (s, 0.73 H), 1.43 (t, J = 7.2 Hz, 18H), 5.25-5.10. 19F NMR (376 MHz, 45℃, D2O) δ -199.1; -203.1 (td, J = 56.0, 24.0 Hz), 200.1 (td, J = 56.0, 24.0, 20.0 Hz), 31P NMR (162 MHz, 45℃, D2O) δ 57.2; 54.6.
2'3'-RS-(3'βF-A)(2'F-A) (10a)를 비스-트리에틸암모늄 염으로서 최종 정제 단계에서 단리하였다.
실시예 4: 2'3'-RR-(A)(2'F-A) (16) 및 2'3'-SR-(A)(2'F-A) (16a)의 합성
디티오-[RP, RP]-시클릭-[A(2',5')p-2'F-A(3',5')p]로서 또한 지칭되는 2'3'-RR-(A)(2'F-A) (16)를 하기 반응식 4에 따라 제조하였다:
단계 1: (2R,3R,4R,5R)-5-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-4-플루오로-2-(히드록시메틸)테트라히드로푸란-3-일 히드로겐 포스포네이트 (12)의 제조: 1,4-디옥산 (20 mL) 및 피리딘 (6.7 mL) 중 N-(9-((2R,3R,4R,5R)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-3-플루오로-4-히드록시테트라히드로푸란-2-일)-9H-퓨린-6-일)벤즈아미드 (11, 1.5 g, 2.3 mmol, 켐진스)의 교반 용액에 1,4-디옥산 (10 mL) 중 SalPCl (0.45 g, 2.3 mmol)의 용액을 첨가하였다. 30분 후, 실온에서 교반 반응 혼합물에 물 (3 mL)을 도입하고, 혼합물을 1N 수성 NaHCO3 용액 (60 mL)에 부었다. 이 수성 혼합물을 EtOAc (2 x 120 mL)로 추출하고, 층을 분리하였다. EtOAc 추출물을 합하고, 무색 발포체로서 농축 건조시켰다. 무색 발포체를 CH2Cl2 (25 mL) 중에 용해시켜 무색 용액을 수득하였다. 이 용액에 물 (0.4 mL) 및 CH2Cl2 중 DCA의 6% (v/v) 용액 (23 mL)을 첨가하였다. 10분 후, 적색 용액에 피리딘 (3.0 mL)을 충전하여, 적색 용액이 백색 혼합물로 변화하였다. 이 백색 혼합물을 진공 하에 농축시키고, MeCN (33 mL)으로 농축시킨 후 공비증류로서 물을 제거하였다. 이 공비증류 과정을 MeCN (33 mL)으로 2회 더 반복하였다. 마지막 증발 시에, 화합물 12의 백색 슬러리가 MeCN (10 mL) 중에 남았다.
단계 2: (2R,3R,4R,5R)-5-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-2-((((((2R,3R,4R,5R)-2-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)테트라히드로푸란-3-일)옥시)(2-시아노에톡시)포스포로티오일)옥시)메틸)-4-플루오로테트라히드로푸란-3-일 히드로겐 포스포네이트 (14)의 제조: MeCN (15 mL) 중 (2R,3R,4R,5R)-2-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)테트라히드로푸란-3-일 (2-시아노에틸) 디이소프로필포스포르아미다이트 (13, 1.0 g, 2.3 mmol, 켐진스)의 용액을 진공 하에 농축시켰다. 이 과정을 3회 더 반복하여 공비증류로서 물을 제거하였다. 마지막 공비증류에서, MeCN 중 화합물 13의 용액 (8 mL)에 10개의 3Å 분자체를 도입하고, 이 용액을 질소의 분위기 하에 저장하였다. MeCN 중 화합물 12와 잔류 피리디늄 디클로로아세테이트와의 교반 혼합물 (10 mL)에 MeCN 중 화합물 13의 용액 (8 mL)을 첨가하였다. 5분 후, 교반 혼합물에 DDTT (520 mg, 2.6 mmol)를 첨가하여, 황색 혼합물이 생성되었다. 30분 후, 황색 혼합물을 진공 하에 농축시켜 화합물 14를 황색 오일로서 수득하였다.
단계 3: 보호된 2'3'-디티오-(A)(2'F-A) (15)의 제조: CH2Cl2 중 화합물 14의 용액 (30 mL)에 물 (0.2 mL) 및 CH2Cl2 중 DCA의 6% (v/v) 용액 (30 mL)을 첨가하였다. 10분 후, 적색 용액에 피리딘 (10 mL)을 도입하여, 용액이 황색 혼합물로 변화하였다. 황색 혼합물을 대략 10 mL의 황색 혼합물이 남아있을 때까지 진공 하에 농축시켰다. 황색 혼합물에 피리딘 (40 mL)을 도입하고, 혼합물을 대략 20 mL의 황색 혼합물이 남아있을 때까지 증발시키고, 피리딘의 첨가 및 20 mL까지의 첨가를 반복하였다. 피리딘 중 교반 황색 혼합물 (20 mL)에 DMOCP (0.9 g, 4.8 mmol)를 첨가하였다. 7분 후, 암오렌지색 용액에 물 (0.8 mL)을 첨가하고, 이어서 즉시 3H-1,2-벤조디티올-3-온 (0.4 g, 2.4 mmol)을 도입하였다. 5분 후, 암오렌지색 용액을 1N 수성 NaHCO3 용액 (200 mL)에 부어, 2상 혼합물이 생성되었다. 10분 동안 교반한 후, 2상 혼합물을 EtOAc (100 mL) 및 디에틸 에테르 (100 mL)로 추출하였다. 층을 분리한 후, 수성 층을 EtOAc/ 디에틸 에테르 (1:1) 200 mL로 2회 역추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 농축시켰다. 농축된 황색 오일에 톨루엔 (75 mL)을 첨가하고, 혼합물을 증발시켜 잔류 피리딘을 제거하였다. 이 절차를 톨루엔 (75 mL)으로 2회 반복하였다. 생성된 오일을 실리카 겔 크로마토그래피 (CH2Cl2 중 0%에서 10% MeOH)에 의해 정제하여 화합물 15 (90 mg, 10%)를 오렌지색 오일로서 수득하였다.
단계 4: 2'3'-RR-(A)(2'F-A) (16)의 제조: 메탄올 (1.0 mL) 중 화합물 15 (90 mg, 0.08 mmol)의 교반 용액에 수성 수산화암모늄 (1.0 mL)을 첨가하고, 오렌지색 슬러리를 50℃로 가열하였다. 2시간 후, 오렌지색 용액을 냉각되도록 하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류 고체에 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.6 mL)를 도입하고, 황색 용액을 40℃로 가열하였다. 2시간 후, 황색 용액을 실온으로 냉각되도록 하였다. 이 황색 용액을 1M TEAB (3 mL) 및 TEA (0.5 mL)의 냉각 용액에 천천히 첨가하였다. 황색 혼합물을 30분 동안 교반되도록 하였다. 황색 혼합물을 역상 실리카 겔 크로마토그래피 (10 mM 수성 TEAA 중 0%에서 20% MeCN)에 의해 정제하여, 동결건조 후 백색 비스-트리에틸암모늄 염으로서 R,S 부분입체이성질체 (Rt: 11.927분)로부터 분리된 화합물 16 (14 mg, 27%, 순도 89%)을 수득하였다. LCMS-ESI: 692 [M-H]- (C20H23FN10O9P2S2에 대한 계산치: 691.25); Rt: 14.712분. 1H NMR (400 MHz, 45℃, D2O) δ 8.62 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 6.57 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.81 (dd, J = 50.0, 4.0 Hz, 1H), 5.58 (td, J = 8.8, 4.0 Hz, 1H), 5.42-5.35 (m, 1H), 5.05 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.77-4.59 (m, 4H), 4.43 (dd, J = 12, 4.0 Hz, 1H), 4.28 (dd, J = 12.0, 4.0 Hz, 1H), 3.34 (q, J = 7.0 Hz, 12H), 1.43 (t, J = 7.0 Hz, 18H). 19F NMR (400 MHz, 45℃, D2O) δ -200.17 내지 -200.41 (m). 31P NMR (45℃, D2O) δ 55.16, 52.19.
2'3'-SR-(A)(2'F-A) (16a)를 비스-트리에틸암모늄 염으로서 최종 정제 단계에서 단리하였다. LCMS-ESI: 692 [M-H]- (C20H23FN10O9P2S2에 대한 계산치: 691.25); Rt: 11.977분.
실시예 5: 2'3'-RR-(3'F-A)(A) (20) 및 2'3'-RS-(3'F-A)(A) (20a)의 합성
디티오-[RP, RP]-시클릭-[3'F-A(2',5')p-A(3',5')p]로서 또한 지칭되는 2'3'-RR-(3'F-A)(A) (20)를 하기 반응식 5에 따라 제조하였다:
단계 1: (2R,3S,4R,5R)-2-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-4-플루오로-5-(히드록시메틸)테트라히드로푸란-3-일 히드로겐 포스포네이트 (1)의 제조: N-(9-((2R,3S,4S,5R)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로-3-히드록시테트라히드로푸란-2-일)-9H-퓨린-6-일)벤즈아미드 i6 (실시예 1 반응식 1A)을 반응식 2 단계 1 (실시예 2)의 방법에 따라 반응시켜 화합물 1을 수득하였다.
단계 2: (2R,3S,4R,5R)-2-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-5-((((((2R,3R,4R,5R)-5-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-2-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)테트라히드로푸란-3-일)옥시)(2-시아노에톡시)포스포로티오일)옥시)메틸)-4-플루오로테트라히드로푸란-3-일 히드로겐 포스포네이트 (18)의 제조: MeCN (20 mL) 중 (2R,3R,4R,5R)-5-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-2-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)테트라히드로푸란-3-일 (2-시아노에틸) 디이소프로필포스포르아미다이트 (17, 0.811 g, 0.82 mmol, 켐진스)의 용액을 진공 하의 농축을 통해 건조시켰다. 이 과정을 2회 더 반복하여 공비증류로서 물을 제거하였다. 마지막 공비증류에서, MeCN 중 화합물 17의 용액 (2.5 mL)에 10개의 3Å 분자체를 도입하고, 용액을 질소의 분위기 하에 저장하였다. MeCN 중 화합물 1과 잔류 피리디늄 디클로로아세테이트와의 교반 혼합물 (10 mL)에 MeCN 중 화합물 17의 용액 (2.5 mL)을 첨가하였다. 5분 후, 교반 혼합물에 DDTT (145 mg, 0.71 mmol)를 첨가하였다. 30분 후, 황색 혼합물을 진공 하에 농축시켜 화합물 18을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 3: 보호된 2'3'-디티오-(3'F-A)(A) (19)의 제조: CH2Cl2 (10 mL) 중 화합물 18 (~855 mg, 0.6 mmol)의 용액에 물 (0.08 mL) 및 CH2Cl2 중 DCA의 6% (v/v) 용액 (10 mL)을 첨가하였다. 10분 후, 적색 용액에 피리딘 (3 mL)을 도입하여, 적색 용액이 황색 혼합물로 변화하였다. 황색 혼합물을 대략 10 mL의 황색 혼합물이 남아있을 때까지 진공 하에 농축시켰다. 황색 혼합물에 피리딘 (15 mL)을 도입하고, 혼합물을 대략 10 mL의 황색 혼합물이 남아있을 때까지 증발시키고, 피리딘의 첨가 및 10 mL까지의 증발을 반복하였다. 피리딘 (10 mL) 중 교반 황색 혼합물에 DMOCP (0.350 g, 1.9 mmol)를 첨가하였다. 7분 후, 암오렌지색 용액에 물 (0.3 mL)을 첨가하고, 이어서 즉시 3H-1,2-벤조디티올-3-온 (160 mg, 0.95 mmol)을 도입하였다. 5분 후, 암오렌지색 용액을 1N 수성 NaHCO3 용액 (100 mL)에 부었다. 15분 동안 교반한 후, 2상 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 추출하였다. 층을 분리한 후, 수성 층을 EtOAc (50 mL)로 3회 역추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 농축시켰다. 농축된 황색 오일에 톨루엔 (50 mL)을 첨가하고, 혼합물을 증발시켜 잔류 피리딘을 제거하였다. 이 절차를 톨루엔 (50 mL)으로 2회 반복하였다. 생성된 오일을 실리카 겔 크로마토그래피 (CH2Cl2 중 0%에서 10% MeOH)에 의해 정제하여 화합물 19 (37 mg, 11%)를 백색 고체로서 수득하였다.
단계 4: 2'3'-RR-(3'F-A)(A) (20)의 제조: 메탄올 (1.0 mL) 중 화합물 19 (37 mg, 0.03 mmol)의 교반 용액에 수성 수산화암모늄 (0.5 mL)을 첨가하고, 오렌지색 슬러리를 50℃로 가열하였다. 3시간 후, 오렌지색 용액을 냉각되도록 하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류 고체에 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.5 mL)를 도입하고, 황색 용액을 40℃로 가열하였다. 4시간 후, 황색 용액을 실온으로 냉각되도록 하였다. 황색 용액을 1M TEAB (3 mL) 및 TEA (0.5 mL)의 냉각 용액에 천천히 첨가하였다. 황색 혼합물을 30분 동안 교반되도록 하였다. 황색 혼합물을 역상 실리카 겔 크로마토그래피 (10 mM 수성 TEAA 중 0%에서 20% MeCN)에 의해 정제하여, 동결건조 후 백색 비스-트리에틸암모늄 염으로서 R,S 부분입체이성질체 (Rt: 6.546분)로부터 분리된 화합물 20 (9.4 mg, 39%, 순도 99%)을 수득하였다. LCMS-ESI: 693 [M-H]- (C20H23FN10O9P2S2에 대한 계산치: 692.00); Rt: 8.397분. 1H NMR (400 MHz, 45℃, D2O) δ 8.65 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 6.45 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.29 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 5.90 (dd, J = 52.0, 4.0 Hz, 1H), 5.69 (td, J = 8.0, 4.0 Hz, 1H), 5.39-5.29 (m, 1H), 5.04 (m, 1H), 4.95 (d, J = 25.0 Hz, 1H), 4.77-4.50 (m, 3H), 4.49 (m, 1H), 4.30 (m, 1H), 3.29 (q, J = 7.0 Hz, 12H), 1.41 (t, J = 7.0 Hz, 18H). 19F NMR (400 MHz, 45℃, D2O) δ -198.10 내지 -198.38 (m). 31P NMR (45℃, D2O) δ 54.7, 52.9.
2'3'-RS-(3'F-A)(A) (20a)를 비스-트리에틸암모늄 염으로서 최종 정제 단계에서 단리하였다. LCMS-ESI: 693 [M-H]- (C20H23FN10O9P2S2에 대한 계산치: 692.00); Rt: 6.546분.
실시예 6: 2'3'-RR-(G)(2'F-A) (26) 및 2'3'-SR-(G)(2'F-A) (26a)의 합성
디티오-[RP, RP]-시클릭-[G(2',5')p-2'F-A(3',5')p]로서 또한 지칭되는 2'3'-RR-(G)(2'F-A) (26)를 하기 반응식 6에 따라 제조하였다:
단계 1: (2R,3S,4R,5R)-2-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로테트라히드로푸란-3-일 히드로겐 포스포네이트 (21)의 제조: 디옥산 (45 mL) 중 N-(9-((2R,3R,4R,5R)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-3-플루오로-4-히드록시테트라히드로푸란-2-일)-9H-퓨린-6-일)벤즈아미드 11 (5.0 g, 7.4 mmol, 1 당량, 켐진스)의 용액에 피리딘 (13 mL)에 이어서 2-클로로-4H-1,3,2-벤조디옥사포스포린-4-온 (1.05 g, 5.18 mmol, 0.7 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 추가의 2-클로로-4H-1,3,2-벤조디옥사포스포린-4-온 (2.0 g, 9.8 mmol, 1.3 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 물 7.5 mL에 이어서 포화 NaHCO3 용액 300 mL로 켄칭하였다. EtOAc로 추출한 후, 합한 유기 층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 5.8 g 조 화합물 21을 수득하였다. 조 물질 3.2 g의 정제용 MPLC-C18 (100% 10 mM TEAA에서 10 mM TEAA 중 60% 아세토니트릴)로 화합물 21 1.3 g을 수득하였다.
단계 2: (2R,3R,4R,5R)-5-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-2-((((((2R,3R,4R,5R)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-2-(2-이소부티르아미도-6-옥소-1,6-디히드로-9H-퓨린-9-일)테트라히드로푸란-3-일)옥시)(2-시아노에톡시)포스포로티오일)옥시)메틸)-4-플루오로테트라히드로푸란-3-일 히드로겐 포스포네이트 (23)의 제조: (2R,3R,4R,5R)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-2-(2-이소부티르아미도-6-옥소-1,6-디히드로-9H-퓨린-9-일)테트라히드로푸란-3-일 (2-시아노에틸) 디이소프로필포스포르아미다이트 (22, 2.2 g, 2.3 mmol, 1.3 당량, 켐진스)를 무수 아세토니트릴 (3 x 10 mL)과 함께 공증발시켜 아세토니트릴 7 mL가 남았다. (단계 2a) DCM (21 mL) 중 화합물 21 (1.3 g, 1.75 mmol, 1 당량)의 용액에 물 (0.32 mL)에 이어서 DCM 중 6% DCA 용액 22.3 mL를 첨가하였다. 반응 혼합물을 10분 동안 교반한 다음, 피리딘 (2.4 mL)으로 켄칭하고, 진공 하에 농축시켜 잔류 피리디늄 디클로로아세테이트를 포함하는 화합물 12를 수득하였다. 화합물 12의 조 혼합물을 무수 아세토니트릴 (3 x 10 mL)과 함께 공증발시켜 아세토니트릴 2.4 mL가 남았다. 무수 아세토니트릴 (7 mL) 중 화합물 22 (2.2 g)의 용액을 첨가하고, 3분 동안 교반하였다. DDTT (0.4 g)를 첨가한 후, 반응 혼합물을 30분 동안 교반한 다음, 진공 하에 농축시켜 화합물 23을 수득하였다.
단계 3: 보호된 2'3'-디티오-(G)(2'F-A) (24)의 제조: DCM 중 화합물 23의 용액 (42 mL)에 물 (1.7 mL)에 이어서 DCM 중 6% DCA 용액 42 mL를 첨가하였다. 반응 혼합물을 10분 동안 교반한 다음, 피리딘 (17.6 mL)으로 켄칭하였다. 혼합물을 농축시켜 DCM을 제거한 다음, 무수 피리딘 (1 x 50 mL)과 함께 공증발시켜 35 mL가 남았다. DMOCP (1 g, 2.6 mmol, 1.5 당량)를 첨가하고, 3분 동안 교반하고, 이어서 물 (0.92 mL, 51 mmol, 29 당량)을 첨가하고, 직후에 3H-1,2-벤조디티올-3-온 (0.45 g, 2.7 mmol, 1.5 당량)을 첨가하였다. 반응을 5분 동안 진행되도록 하고, NaHCO3의 3% 용액 (250 mL)으로 희석하고, 에테르 및 EtOAc의 1:1 용액 250 mL에 이어서 250 mL DCM으로 추출하였다. 합한 유기 층을 농축시켜 조 화합물 24 3 g을 수득하였다. 정제용 MPLC-SiO2 (100% DCM에서 15% DCM/MeOH)로 부분입체이성질체의 혼합물로서의 화합물 24 70 mg을 수득하였다.
단계 4: 보호된 2'3'-디티오-(G)(2'F-A) (25)의 제조: EtOH (0.2 mL) 중 화합물 24 (70 mg, 0.067 mmol, 1 당량)의 용액에 AMA (0.5 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 캡 및 파라필름으로 밀봉하고, 90분 동안 50℃로 가열하였다. 이어서, 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 10분 동안 Ar 기체로 폭기하고, 진공 하에 농축시켜 부분입체이성질체의 혼합물로서의 조 화합물 25 37 mg을 수득하였다.
단계 5: 2'3'-RR-(G)(2'F-A) (26)의 제조: 화합물 25 (37 mg, 0.045 mmol, 1 당량)의 조 혼합물에 TEA 3HF (0.4 mL)를 첨가하였다. 반응물을 2.5시간 동안 50℃로 가열하였다. 혼합물을 TEA (0.8 mL) 및 TEAB (2.1 mL)의 0℃ 용액에 붓고, 교반하면서 실온으로 가온되도록 하였다. 용액의 절반을 탈염시키고, 정제용-MPLC-C18 (100% 20 mM NH4OAc에서 20% 아세토니트릴/20 mM NH4OAc)을 사용하여 정제하여 (칼럼 1) 화합물 26 1 mg (80% 순도, HPLC에 의함)을 수득하였다. 용액의 다른 절반을 최소 분리를 가져오는 확장 구배로 정제하였다 (칼럼 2). R,S 이성질체를 함유한 칼럼 1로부터의 분획을 칼럼 2로부터의 분획과 합하고, 이틀 밤에 걸쳐 동결건조시켰다. 합한 질량의 분획을 정제용 HPLC (6-18% 아세토니트릴/10 mM TEAA)에 의해 정제하여 1 mg의 화합물 26 (>95% 순도, Rt: 9.84분) 및 2 mg의 R,S 이성질체 (85% 순도, Rt: 8.8분)를 TEAH 염으로서 수득하였다. LCMS-ESI: 708.8. [M-H]- (C20H23FN10O10P2S2에 대한 계산치: 708.53). 1H NMR (400 MHz, 45℃, D2O) δ 8.46 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 6.63 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 6.09 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 5.93 (m, 1H), 5.83-5.67 (m, 2H), 5.46-5.39 (m, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.61 (s, 2H), 4.33 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.26 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.37-3.34 (m, 12H), 1.45-1.42 (t, J = 6.0 Hz, 18H). 19F NMR (376 MHz, 45℃, D2O) δ -201.3 - -201.7, 31P NMR (162 MHz, 45℃, D2O) δ 55.7; 51.4.
2'3'-SR-(G)(2'F-A) (26a)를 비스-트리에틸암모늄 염으로서 최종 정제 단계에서 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, 45℃, D2O) δ 8.68 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 6.64 (d, J = 14, 1H), 6.14-6.11 (m, 1H), 6.00-5.90 (m, 1H), 5.70 (d, J = 52, 1H), 5.55-5.40 (m, 1H), 4.60 (d, J = 18.8, 4H), 4.32-4.25 (m, 3H), 3.35-3.34 (m, 12H), 1.43 (t, J = 6.8, 18H); 13P NMR (162 MHz, 45℃, (D2O) δ 55.9, 54.2; HRMS (FT-ICR) m / z C20H23FN10O10P2S2에 대한 계산치: (M + H)+ 709.05, 실측치 709.75; HPLC (20 mM NH4OAC 완충제 중 2-50% 아세토니트릴 - 20분) 8.79분.
화합물 2'3'-RR-(G)(2'F-A) 26을 하기 반응식 6a에 따라 추가로 반응시켰다:
여기서 무수 피리딘 1.1 mL를 무수 DMF (2.2 mL) 중 화합물 26 (50 mg, 0.071 mmol, 1 당량)의 용액에 첨가하고, 이어서 데카노일 클로라이드 (36 μL, 0.176 mmol, 2.5 당량) 및 DMAP (20 mg)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 11일 동안 교반한 다음, MeOH (10 mL)로 켄칭하고, 진공 하에 농축시켰다. 생성된 물질을 정제용 MPLC (15.5 g-C18 칼럼, TEAA (10 mM) 중 0-100% 아세토니트릴의 구배: 2.25분 동안 0%, 4.5분에 걸쳐 0-20%, 2.25분 동안 20%, 27분에 걸쳐 20-60%, 2.25분 동안 60%, 2.25분에 걸쳐 60-100%, 4.5분 동안 100%)에 의해 정제하여 트리에틸암모늄 염으로서 2'3'-RR-(3'데카노일-O-G)(2'F-A) 화합물 50 5.2 mg을 수득하였다. LCMS 10분에 걸쳐 수성 10 mM TEAA 중 2-80% MeCN, Rt 9.57분, >95% 순도. LCMS-ESI: 863.9 [M+H]+ (C30H41FN10O11P2S2에 대한 계산치: 862.19).
실시예 7: 3'2'-RR-(2'F-G)(3'F-A) (32), 3'2'-RS-(2'F-G)(3'F-A) (32a) 및 3'2'-SS-(2'F-G)(3'F-A) (32b)의 합성
디티오-[RP, RP]-시클릭-[2'F-G(3',5')p-3'F-A(2',5')p]로서 또한 지칭되는 3'2'-RR-(2'F-G)(3'F-A) (32)를 하기 반응식 7에 따라 제조하였다:
단계 1: (2R,3R,4R,5R)-2-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로-5-(2-이소부티르아미도-6-옥소-1,6-디히드로-9H-퓨린-9-일)테트라히드로푸란-3-일 히드로겐 포스포네이트 (28)의 제조: 아세토니트릴 (12 mL) 중 (2R,3R,4R,5R)-2-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로-5-(2-이소부티르아미도-6-옥소-1,6-디히드로-9H-퓨린-9-일)테트라히드로푸란-3-일 (2-시아노에틸) 디이소프로필포스포르아미다이트 (27, 2.1 g, 2.5 mmol, 1 당량, 켐진스)의 용액에 물 (0.087 mL)에 이어서 피리디늄 트리플루오로아세테이트 (0.57 g, 3.0 mmol, 1.2 당량)를 첨가하였다. 반응물을 7분 동안 교반하고, tert-부틸 아민 (12.1 mL, 0.12 mol, 47 당량)을 첨가하였다. 10분 동안 교반한 후, 반응물을 농축시켜 조 화합물 28 2.95 g을 수득하였다. 정제용 MPLC-SiO2 (99% DCM:1% (MeOH, 0.5% 피리딘)에서 60:40)로 화합물 28 1.84 g을 수득하였다.
단계 2: (2R,3R,4R,5R)-2-((((((2R,3S,4R,5R)-2-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로테트라히드로푸란-3-일)옥시)(2-시아노에톡시)포스포로티오일)옥시)메틸)-4-플루오로-5-(2-이소부티르아미도-6-옥소-1,6-디히드로-9H-퓨린-9-일)테트라히드로푸란-3-일 히드로겐 포스포네이트 (30)의 제조: 화합물 i7 (실시예 1, 반응식 1A, 810 mg, 0.93 mmol, 1 당량)을 무수 아세토니트릴 (3 x 10 mL)과 함께 공증발시켜 아세토니트릴 3 mL가 남았다. (단계 2a) DCM (9.4 mL) 중 화합물 28 (670 mg, 0.93 mmol, 1 당량)의 용액에 물 (0.16 mL)에 이어서 DCM 중 6% DCA 용액 9.5 mL를 첨가하였다. 반응 혼합물을 10분 동안 교반한 다음, 피리딘 (1.4 mL)으로 켄칭하고, 진공 하에 농축시켜 (2R,3R,4R,5R)-4-플루오로-2-(히드록시메틸)-5-(2-이소부티르아미도-6-옥소-1,6-디히드로-9H-퓨린-9-일)테트라히드로푸란-3-일 히드로겐 포스포네이트 화합물 29를 수득하였다. 29의 조 혼합물을 무수 아세토니트릴 (3 x 10 mL)과 함께 공증발시켜 아세토니트릴 5.0 mL가 남았다. 무수 아세토니트릴 (3 mL) 중 화합물 i7 (810 mg)의 용액을 아세토니트릴 중 화합물 29의 용액에 첨가하고, 5분 동안 교반하였다. DDTT (0.22 g)를 첨가한 후, 반응 혼합물을 30분 동안 교반한 다음, 진공 하에 농축시켜 조 화합물 30 2.8 g을 수득하였다.
단계 3: 보호된 3'2'-디티오-(2'F-G)(3'F-A) (31)의 제조: DCM (19 mL) 중 조 화합물 30 (2.8 g)의 용액에 물 (0.11 mL)에 이어서 DCM 중 6% DCA 용액 19 mL를 첨가하였다. 반응 혼합물을 10분 동안 교반한 다음, 피리딘 (8 mL)으로 켄칭하였다. 혼합물을 진공 하에 농축시켜 DCM을 제거한 다음, 무수 피리딘 (1 x 3 mL 및 1 x 5 mL)과 함께 2회 공증발시켜 5 mL가 남았다. DMOCP (0.5 g, 2.7 mmol)를 첨가하고, 7분 동안 교반하고, 이어서 물 (0.44 mL, 24 mmol)을 첨가하고, 직후에 3H-1,2-벤조디티올-3-온 (0.20 g, 1.2 mmol)을 첨가하였다. 반응을 5분 동안 진행되도록 하고, NaHCO3의 1M 용액 (44 mL)으로 희석하고, EtOAc (3 x 33 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 진공 하에 농축시킨 다음, 톨루엔 (3 x 10 mL)과 함께 공증발시켜 조 화합물 31 2.1 g을 수득하였다. 정제용 MPLC-SiO2 (100% DCM에서 50% DCM/MeOH)로 입체이성질체의 혼합물로서의 화합물 31 30 mg을 수득하였다.
단계 4: 3'2'-RR-(2'F-G)(3'F-A) (32)의 제조: EtOH (0.3 mL) 중 화합물 31 (30 mg, 0.032 mmol, 1 당량)의 용액에 AMA (0.5 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 캡 및 파라필름으로 밀봉하고, 교반하고, 90분 동안 50℃로 가열하였다. 이어서, 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 진공 하에 농축시켜 입체이성질체의 혼합물로 조 화합물 32 27 mg을 수득하였다. 반응물을 정제용-MPLC-C18 (100% 10 mM TEAA에서 25% 아세토니트릴/ 10 mM TEAA)을 사용하여 정제하여 2 mg의 화합물 32 (>95% 순도, Rt: 7.78분) 및 0.2 mg의 R,S 이성질체 (Rt: 7.10분)를 TEAH 염으로서 수득하였다. LCMS-ESI: 710.7 [M-H]- (C20H22F2N10O9P2S2에 대한 계산치: 710.05); 1H NMR (400 MHz, 45℃, D2O) δ 8.62 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 6.47 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 18.0 Hz, 1H), 5.93 (m, 1H), 5.82 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 5.70-5.59 (m, 2H), 4.97 (s, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.51 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.40 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.31-4.27 (m, 1H), 3.37-3.32 (q, J = 5.6 Hz, 10H), 1.43 (t, J = 6.0 Hz, 15H). 19F NMR (376 MHz, 45℃, D2O) δ -197.6 - -197.9; -198.6 - -198.8, 31P NMR (162 MHz, 45℃, D2O) δ 55.1; 53.7.
화합물 3'2'-RS-(2'F-G)(3'F-A) (32a)를 비스-트리에틸암모늄 염으로서 최종 정제 단계에서 또한 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, 45℃, D2O) δ 8.62 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 6.47 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 18 Hz, 1H), 5.93 - 5.59 (m, 4H), 4.98 (d, J = 25.6 Hz, 1H), 4.52-4.27 (m, 3H), 3.34 (q, J = 5.6 Hz, 10H), 1.43 (t, J = 6 Hz, 15H).
화합물 3'2'-SS-(2'F-G)(3'F-A) (32b)를 비스-트리에틸암모늄 염으로서 최종 정제 단계에서 또한 단리하였다. 1H NMR (400 MHz, 45℃, D2O) δ 9.02 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 6.48 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 18.8 Hz, 1H), 6.08 - 5.55 (m, 4H), 4.90 (d, J = 25.2 Hz, 1H), 4.67-4.25 (m, 3H), 3.33 (q, J = 5.6 Hz, 14H), 1.42 (t, J = 6.0 Hz, 22H).
실시예 8
3'2'-RR-(2'F-G)(A) (35) 및 3'2'-RS-(2'F-G)(A) (35a)의 합성
디티오-[RP, RP]-시클릭-[2'F-G(3',5')p-A(2',5')p]로서 또한 지칭되는 3'2'-RR-(2'F-G)(A) (35)를 하기 반응식 8에 따라 제조하였다:
단계 1: (2R,3R,4R,5R)-4-플루오로-2-(히드록시메틸)-5-(2-이소부티르아미도-6-옥소-1,6-디히드로-9H-퓨린-9-일)테트라히드로푸란-3-일 히드로겐 포스포네이트 (29)의 제조: MeCN (14 mL) 및 H2O (0.09 mL) 중 화합물 27 (2.0 g, 2.3 mmol)의 용액에 피리디늄 트리플루오로아세테이트 (587 mg, 3.03 mmol)를 첨가하였다. 10분 후, 무색 반응 용액에 tert-부틸아민 (11.5 mL)을 도입하였다. 5분 후, 무색 용액을 감압 하에 농축시키고, MeCN (20 mL)으로 농축시킨 후 공비증류로서 물을 제거하였다. 이 공비증류 과정을 MeCN (15 mL)으로 2회 더 반복하여 무색 발포체를 수득하였으며, 이는 N-(9-((2R,3R,4R,5R)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-3-플루오로-4-히드록시테트라히드로푸란-2-일)-6-옥소-6,9-디히드로-1H-퓨린-2-일)이소부티르아미드 및 화합물 28 (실시예 7 참조)의 혼합물을 함유하였다. 1,4-디옥산 중 이 혼합물 (20 mL)에 1,4-디옥산 (10 mL) 중 SalPCl (0.197 g, 1.0 mmol)의 용액을 첨가하였다. 5분 후, 복숭아색 반응 혼합물에 피리딘 (6.5 mL)을 첨가하였다. 35분 후, 실온에서 반응 혼합물에 물 (4 mL)을 도입하고, 10분 후, 반응 혼합물을 1N 수성 NaHCO3 용액 (100 mL)에 부었다. 이 수성 혼합물을 EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하였다. EtOAc 추출물을 합하고, 무색 발포체로서 농축 건조시시켰다. 무색 발포체를 CH2Cl2 (25 mL) 중에 용해시켜 무색 용액을 수득하였다. 이 무색 용액에 물 (0.3 mL) 및 CH2Cl2 중 DCA의 6% (v/v) 용액 (25 mL)을 첨가하였다. 실온에서 10분 동안 교반한 후, 오렌지색 용액에 피리딘 (3.0 mL)을 충전하여, 오렌지색 용액이 백색 혼합물로 변화하였다. 이 백색 혼합물을 진공 하에 농축시키고, MeCN (30 mL)으로 농축시킨 후 공비증류로서 물을 제거하였다. 이 공비증류 과정을 MeCN (30 mL)으로 1회 더 반복하였다. 마지막 증발 시에, 생성된 화합물 29의 복숭아색 용액이 MeCN (6 mL) 중에 남았다.
단계 2: (2R,3R,4R,5R)-2-((((((2R,3R,4R,5R)-2-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)테트라히드로푸란-3-일)옥시)(2-시아노에톡시)포스포로티오일)옥시)메틸)-4-플루오로-5-(2-이소부티르아미도-6-옥소-1,6-디히드로-9H-퓨린-9-일)테트라히드로푸란-3-일 히드로겐 포스포네이트 (33)의 제조: MeCN (15 mL) 중 화합물 13 (실시예 4 참조, 3.3 g, 3.4 mmol)의 용액을 5 mL의 용액이 남아있을 때까지 진공 하의 농축을 통해 건조시켰다. 이 5 mL 용액에 MeCN (10 mL)을 첨가하고, 용액을 5 mL의 용액이 남아있을 때까지 진공 하에 농축시켰다. 이 과정을 2회 더 반복하여 공비증류로서 물을 제거하였다. 마지막 공비증류에서, MeCN 중 화합물 13의 용액 (5 mL)에 3Å 분자체를 도입하고, 이 용액을 질소의 분위기 하에 저장하였다. MeCN 중 화합물 29와 잔류 피리딘-1-윰 디클로로아세테이트와의 교반 혼합물 (6 mL)에 MeCN 중 화합물 13의 용액 (5 mL)을 첨가하였다. 5분 후, 교반 혼합물에 DDTT (530 mg, 2.6 mmol)를 첨가하여, 황색 용액이 생성되었다. 1시간 후, 황색 혼합물을 감압 하에 농축시켜 화합물 33을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 3: 보호된 3'2'-디티오-(2'F-G)(A) (34)의 제조: CH2Cl2 중 화합물 33의 용액 (55 mL)에 물 (0.4 mL) 및 CH2Cl2 중 DCA의 6% (v/v) 용액 (50 mL)을 첨가하였다. 실온에서 10분 동안 교반한 후, 오렌지색 용액에 피리딘 (20 mL)을 도입하여, 용액이 황색 혼합물로 변화하였다. 황색 혼합물을 대략 15 mL의 황색 혼합물이 남아있을 때까지 진공 하에 농축시켰다. 황색 혼합물에 피리딘 (33 mL)을 도입하고, 혼합물을 대략 15 mL의 황색 혼합물이 남아있을 때까지 증발시켰다. 황색 혼합물에 피리딘 (50 mL)을 첨가하고, 혼합물을 대략 15 mL의 황색 혼합물이 남아있을 때까지 농축시키고, 피리딘의 첨가 및 20 mL까지의 증발을 반복하였다. 추가량의 피리딘 (50 mL)을 혼합물에 첨가하였다. 피리딘 중 교반 황색 혼합물 (70 mL)에 DMOCP (1.4 g, 7.5 mmol)를 첨가하였다. 5분 후, 암오렌지색 용액에 물 (1.4 mL)을 첨가하고, 이어서 즉시 3H-1,2-벤조디티올-3-온 (0.6 g, 3.5 mmol)을 도입하였다. 8분 후, 암오렌지색 용액을 1N 수성 NaHCO3 용액 (400 mL)에 부었다. 15분 후, 2상 혼합물을 EtOAc (250 mL)로 추출하였다. 층을 분리한 후, 수성 층을 EtOAc (250 mL에 이어서 150 mL)로 2회 역추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 농축시켰다. 농축된 황색 오일에 톨루엔 (75 mL)을 첨가하고, 혼합물을 증발시켜 잔류 피리딘을 제거하였다. 이 절차를 톨루엔 (75 mL)으로 1회 더 반복하였다. 생성된 오일을 실리카 겔 크로마토그래피 (CH2Cl2 중 0%에서 10% MeOH)에 의해 정제하여 화합물 34 (1.0 g, 43%)를 황색 오일로서 수득하였다.
단계 4: 3'2'-RR-(2'F-G)(A) (35)의 제조: EtOH (4.0 mL) 중 화합물 34 (816 mg, 0.08 mmol)의 교반 용액에 AMA (12.0 mL)를 첨가하고, 황색 슬러리를 50℃로 가열하였다. 3시간 후, 황색 용액을 냉각되도록 하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류 베이지색 고체에 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (5.1 mL)를 도입하고, 황색 용액을 40℃로 가열하였다. 2시간 후, 황색 용액을 실온으로 냉각되도록 하였다. 이 황색 용액을 1M TEAB (31 mL) 및 TEA (5 mL)의 냉각 용액에 천천히 첨가하였다. 황색 혼합물을 30분 동안 교반되도록 한 다음, 역상 실리카 겔 크로마토그래피 (10 mM 수성 TEAA 중 0%에서 20% MeCN)에 의해 정제하여 동결건조 후 백색 비스-트리에틸암모늄 염으로서 R,S 부분입체이성질체 (Rt: 6.11분)로부터 분리된 화합물 35 (104 mg, 38%, 순도 95%)을 수득하였다. LCMS-ESI: 707.80 [M-H]- (C20H23FN10O10P2S2에 대한 계산치: 708.53); Rt: LCMS 조건 (10분에 걸쳐 20 mM 수성 NH4OAc 중 2%에서 50% MeCN)에 의해 6.67분. 1H NMR (400 MHz, 45℃, D2O) δ 8.64 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.90 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.68 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 6.41 (s, 1H), 6.40 (d, J = 24.8 Hz, 1H), 5.85 (d, J = 51.0 Hz, 1H), 5.52 (m, 2H), 4.92 (br s, 1H), 4.77-4.62 (m, 4H), 4.50 (m, 1H), 4.36 (m, 1H), 4.27 (m, 1H), 3.34 (q, J = 7.0 Hz, 12H), 1.42 (t, J = 7.0 Hz, 18H). 19F NMR (400 MHz, 45℃, D2O) δ 198.71, 198.82. 31P NMR (45℃, D2O) δ 55.19, 53.07.
3'2'-RS-(2'F-G)(A) (35a)를 비스-트리에틸암모늄 염으로서 최종 정제 단계에서 단리하였다. LCMS-ESI: 707.80 [M-H]- (C20H23FN10O10P2S2에 대한 계산치: 708.53); Rt: LCMS 조건 (10분에 걸쳐 20 mM 수성 NH4OAc 중 2%에서 50% MeCN)에 의해 6.15분. 1H NMR. (400 MHz, 45℃, D2O) δ 8.76 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 6.45-6.37(m, 2H), 6.05 (s, 1H), 65.91 (s, 1H), 5.7-5.6 (m, 1H), 5.51-5.48 (m, 1H), 4.75-4.54 (m, 4H), 4.31-4.20 (m, 2H), 3.33 (q, J = 6.8 Hz, 6H), 2.05 (s, 8H), 1.41 (t, J = 6.8 Hz, 6H). 19P NMR (400 MHz, 45℃, D2O) δ 58.10.
이 반응의 규모-확장에서, 화합물 27 (5.0 g, 5.9 mmol)로 출발하여 화합물 29를 수득하고 이와 화합물 13 (7.5 g, 7.7 mmol)을 상기에 따라 수행하여 정제 단계를 거쳐, 3'2'-SR-(2'F-G)(A) (35b, 90.3 mg, 2%)를 동결건조 후 백색 트리에틸암모늄 염으로서 단리하였다: LCMS-ESI: 709.70 [M+H]- (C20H23FN10O10P2S2에 대한 계산치: 708.53); Rt: LCMS 조건 (10분에 걸쳐 20 mM 수성 NH4OAc 중 2%에서 80% MeCN)에 의해 5.13분. 1H NMR. (400 MHz, D2O) δ 8.79 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 6.16 - 6.09 (m, 2H), 5.77 - 5.65 (d, J = 40 Hz, 1H), 5.45 -5.56 (m, 1H), 5.58-5.45 (m, 2H), 5.31 - 5.23 (m, 1H), 4.51 (s, 1H), 4.39 - 4.30 (m, 3H), 4.25 - 4.20 (m, 1H), 4.03 - 4.00 (m, 1H), 3.96 - 3.93 (m, 1H), 3.05 (q, J = 8.8 Hz, 18H), 1.81 (s, 4H), 1.12 (t, J = 8.8 Hz, 27H). 19F NMR (400 MHz, D2O) δ -200.98 내지 -201.21. 31P NMR (400 MHz, D2O) δ 58.06, 53.35.
실시예 9: 2'3'-(G)(2'F-A) (38)의 효소적 합성
시클릭-[G(2',5')p-2'F-A(3',5')p]로서 또한 지칭되는 2'3'-(G)(2'F-A) (38)를 하기 반응식 9에 따라 효소적으로 제조하였다:
반응을 병행하여 이중으로 수행하였다: 100 mM 수성 2'F-dATP (36, 250 μL, 0.025 mmol; N-1007, 트리링크 바이오테크놀로지스, 미국 캘리포니아주 샌디에고)에, 100 mM 수성 GTP (37, 250 μL, 0.025 mmol, 시그마 촉매 번호 51120), 헤링 정자 DNA 용액 (250 μL, 10 mg/mL 수성; #9605-5-D, 트레비겐 인크., 미국 메릴랜드주 게이더스버그) 및 인간 cGAS (1500 μL, 2.1 mg/mL, 다음 단락에 기재된 바와 같이 제조됨)를 반응 완충제 (50 mM 트리스, 2.5 mM 마그네슘 아세테이트, 10 mM KCl, 수성 NaOH 5 M을 사용하여 8.2로 조정된 pH; 25 mL) 중에서 첨가하였다. 반응물을 오비탈 진탕기 상에서 37℃ 및 150 rpm에서 16시간 동안 인큐베이션하였다. 반응의 완결을 반응 혼합물의 분취물 (100 μL)의 분석을 통해 확인하고, 아세토니트릴 (100 μL)로 희석하고, 원심분리하고, 목적 화합물 형성을 UV 분석에 의해 결정하였다. 반응물을 아세토니트릴 (20 mL)과 혼합하고, 오비탈 진탕기 상에서 실온에서 10분 동안 인큐베이션하고, 후속 원심분리 (5분 동안 7000 g) 후 상청액을 여과지를 통해 여과하였다. 여과물을 아세트산 (100 μL)과 혼합하고, 직접 20 x 250 mm 이너트실 아미드 5 μm 칼럼 상에 로딩하였다 (유량 30 mL/분; 용매 A: 수성 10 mM 아세트산암모늄, 2 mM 아세트산, 용매 B: 아세토니트릴; 26% 상 A / 74% 상 B를 사용하여 등용매 용리를 사용함, 분획 크기 50 mL). 목적 화합물 38을 함유하는 분획을 합하고, 용매를 진공 하에 증발시켜 약 10 mL의 최종 부피가 되도록 하였다. 제1 크로마토그래피로부터의 농축된 화합물 38 용액을 250 nm에서의 UV 검출이 구비된 1 x 50 cm 세파덱스 G10 HPLC 칼럼 (유량 1.0 mL/분; 0.25 mM 수산화암모늄 및 25% 아세토니트릴을 함유하는 이동상) 상으로의 직접 주입에 의해 다시 정제하였다. 목적 화합물 38을 함유하는 모든 분획을 합하고, 동결건조에 의해 건조시켜 비스-암모늄 염으로서 화합물 38 4.5 mg을 수득하였다; 1H NMR (600.1 MHz, D2O) δ 8.35 (br s, 1H), 8.06 (br s, 1H), 7.77 (s, 1H), 6.31 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 5.86 (s, 1H), 5.62 (s, 1H), 5.35 (d, J = 50.8 Hz, 1H), 4.97 (d, J = 19.0 Hz, 1H), 4.46 (s, 1H), 4.42 (s, 1H), 4.33 (s, 1H), 4.24 (s, 1H), 4.21 (s, 2H), 3.97 (s, 1H); MS m/z 677.2 [M+H]+.
본 실시예 및 실시예 10에 사용된 cGAS를 인간 및 마우스 cGAS의 클로닝 및 발현에 의해 제조하였다. 아미노산 155-522 (인간) 및 아미노산 147-507 (마우스)을 포함하는 인간 또는 마우스 cGAS의 코딩 영역을 pET 기반 발현 벡터 내로 클로닝하였다. 생성된 발현 구축물은 N-말단 6x-His-태그에 이어서 ZZ-태그 및 인간 cGAS 155-522 및 마우스 cGas 147-507을 생성되게 하는 조작된 HRV3C 프로테아제 절단 부위와 Gly-Pro의 N-말단 연장부를 함유하였다. 플라스미드 둘 다를 박테리아 발현을 위해 이. 콜라이 균주·BL21 (DE3) 파지 저항성 세포 (C2527H, 뉴잉글랜드 바이오랩스, 매사추세츠주 입스위치)에 형질전환시켰다. cGas 발현 플라스미드를 보유하는 파지 저항성 이. 콜라이 세포 BL21(DE3)를 인포스 생물반응기에서 1.5 L 규모로 발현시켰다. 전배양물을 LB 배지에서 성장시켰다.
카나마이신 (50μg/mL)을 함유하는 1.5 L 자가-유도 배지 (Studier, Protein Expr Purif. 2005 May; 41(1):207-34)를 100 mL 전배양물로 접종하고, 하기 조건 하에 대략 10의 OD로 배양하였다: 온도 37℃; 교반기 (pO2를 통한 캐스케이드 조절) 500; pH 7.0; pO2 (캐스케이드 조절 계속) 5%; 유량 2.5 L/분; 및 기체 혼합물 (pO2를 통한 캐스케이드 조절) 0. 이어서, 온도를 18℃로 감소시키고, 발현을 밤새 실행하였다. 세포를 원심분리에 의해 수거하고, 아베스틴 에멀시플렉스 프렌치 프레스를 사용하여 용해시켰다. 문헌 [Kato et al. (PLoS One, 2013, 8(10) e76983)]에 의한 공개된 프로토콜에 따라 Ni-친화성 크로마토그래피, DNA를 제거하기 위한 헤파린 정제 단계 및 최종 크기 배제 크로마토그래피를 사용하여 정제를 수행하였다. cGAS는 균질한 분획으로 용리되었고, 이를 적어도 5 mg/mL로 농축시켰다.
실시예 10: 2'3'-(3'F-G)(2'F-A) (40)의 효소적 합성
시클릭-[3'F-G(2',5')p-2'F-A(3',5')p]로서 또한 지칭되는 2'3'-(3'F-G)(2'F-A) (41)를 하기 반응식 10에 따라 효소적으로 제조하였다:
반응을 각각 26 mL 규모로 병행하여 4회 수행하였다: 100 mM 수성 2'F-dATP (36, 250 μL, 0.025 mmol)에, 100 mM 수성 3'F-d GTP (39, 250 μL, 0.025 mmol; N-3002, 트리링크 바이오테크놀로지스), 헤링 정자 DNA 용액 (800 μL, 10 mg/mL 수성; #9605-5-D, 트레비겐 인크.) 및 마우스 cGAS 제제 (250 μL, 6.5 mg/mL, 상기 인간 cGAS에 대해 기재된 바와 같이 제조됨)를 반응 완충제 (50 mM 트리스, 2.5 mM 마그네슘 아세테이트, 수성 NaOH 5 M을 사용하여 8.2로 조정된 pH; 25 mL) 중에서 첨가하였다. 반응물을 오비탈 진탕기 상에서 37℃ 및 150 rpm에서 16시간 동안 인큐베이션하였다. 반응물을 아세토니트릴 (20 mL)과 혼합하고, 오비탈 진탕기 상에서 실온에서 10분 동안 인큐베이션하였다. 후속 원심분리 (5분 동안 7000 g) 후 모든 4개 반응물의 상청액을 합하고, 여과지를 통해 여과하였다. 여과물을 대략 20 mL의 잔류량으로 진공 하에 증발시키고, 0.5 mL 아세트산 (0.5 mL) 및 1.0M 수성 트리에틸암모늄 아세테이트 (5 mL)와 혼합하였다. 조 물질을 크로모리스 RP18e 2.1 x 10 cm 칼럼 상으로 직접 주입하였다. 크로마토그래피 (유량 80 mL/분; 등용매 이동 10 mM 트리에틸암모늄 아세테이트 및 1 vol% 아세토니트릴)로 목적 화합물 40 분획을 수득하고, 이를 합하고, 수성 25% 암모니아 용액 (20 μL)과 혼합하고, 동결건조에 의해 건조시켰다. 화합물 40을 비스-트리에틸암모늄 염으로서 수득하였다; 39.8 mg; 1H NMR (600.1 MHz, D2O) δ 8.16 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 6.33 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 5.91 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.61 (m, 1H), 5.40 (dd, J = 51.5, 2.6 Hz, 1H), 5.30 (dd, J = 53.3, 3.2 Hz, 1H), 4.98 (m, 1H), 4.56 (d, J = 25.8 Hz, 1H), 4.44 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.39 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 4.20 (m, 1H), 4.08 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.04 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 3.06 (q, J = 7.3 Hz, 12H), 1.13 (t, J = 7.3 Hz, 18H); 31P NMR (376.4 MHz, D2O) δ -1.68, -2.77; 19F NMR (376.4 MHz, D2O) δ -199.72, -203.23; MS 677.2 [M-1]-.
실시예 11: 2'3'-RR-(3'H-A)(2'F-A) (45) 및 2'3'-RS-(3'H-A)(2'F-A) (45a)의 합성
디티오-[RP, RP]-시클릭-[3'H-A(2',5')p-2'F-A(3',5')p]로서 또한 지칭되는 2'3'-RR-(3'H-A)(2'F-A) (45), 및 디티오-[RP, SP]-시클릭-[3'H-A(2',5')p-2'F-A(3',5')p]로서 또한 지칭되는 2'3'-RS-(3'H-A)(2'F-A) (45a)를 하기 반응식 11에 따라 제조하였다:
단계 1: (2R,3R,5S)-2-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-5-(히드록시메틸)테트라히드로푸란-3-일 히드로겐 포스포네이트 (42)의 제조: 1,4-디옥산 (16 mL) 및 피리딘 (6 mL) 중 N-(9-((2R,3R,5S)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-3-히드록시테트라히드로푸란-2-일)-9H-퓨린-6-일)벤즈아미드 (41, 1.0 g, 1.5 mmol, 베리 앤드 어소시에이츠, 미시간주 덱스터)의 용액에 1,4-디옥산 (8 mL) 중 SalPCl (462 mg, 2.3 mmol)의 용액을 첨가하였다. 실온에서 30분 후, 반응 혼합물을 1N 수성 NaHCO3 용액 (100 mL)에 부었다. 이 수성 혼합물을 EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하고, 층을 분배하였다. EtOAc 추출물을 합하고, 진공 하에 농축 건조시켜 중간체를 무색 고체로서 수득하였다. 무색 고체를 CH2Cl2 (15 mL) 중에 용해시켜 무색 용액을 수득하였다. 이 용액에 물 (270 μL) 및 CH2Cl2 중 DCA의 6% (v/v) 용액 (15 mL)을 첨가하였다. 실온에서 10분 동안 교반한 후, 적색 용액에 피리딘 (2 mL)을 충전하였다. 생성된 백색 혼합물을 진공 하에 농축시키고, MeCN (50 mL)으로 농축시킨 후 공비증류로서 물을 제거하였다. 이 공비증류 과정을 MeCN (50 mL)으로 2회 더 반복하였다. 마지막 증발 시에, 생성된 화합물 42의 담복숭아색 오일이 MeCN (20 mL) 중에 남았다.
단계 2: (2R,3R,5S)-5-2-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-5-((((((2R,3R,4R,5R)-5-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-2-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로테트라히드로푸란-3-일)옥시)(2-시아노에톡시)포스포로티오일)옥시)메틸)테트라히드로푸란-3-일 히드로겐 포스포네이트 (43)의 제조: MeCN (20 mL) 중 (2R,3R,4R,5R)-5-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-2-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로테트라히드로푸란-3-일 (2-시아노에틸) 디이소프로필포스포르아미다이트 (2, 1.7 g, 2.0 mmol, 켐진스)의 용액을 진공 하에 건조시켰다. 이 과정을 2회 더 반복하여 공비증류로서 물을 제거하고, 마지막 공비증류 후 MeCN 중 화합물 2의 용액 (10 mL)이 남았다. 10개의 3Å 분자체를 도입하고, 용액을 질소의 분위기 하에 저장하였다. MeCN 중 화합물 42와 잔류 피리딘-1-윰 디클로로아세테이트와의 교반 혼합물 (20 mL)에 MeCN 중 화합물 2의 용액 (10 mL)을 첨가하였다. 8분 후, 교반 혼합물에 DDTT (350 mg, 1.7 mmol)를 첨가하였다. 1시간 후, 황색 혼합물을 진공 하에 농축시켜 화합물 43을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 3: 보호된 2'3'-디티오-(3'H-A)(2'F-A) (44)의 제조: CH2Cl2 중 화합물 43의 황색 용액 (28 mL)에 물 (190 μL) 및 CH2Cl2 중 DCA의 6% (v/v) 용액 (26 mL)을 첨가하였다. 실온에서 10분 후, 적색 용액에 피리딘 (6 mL)을 도입하였다. 생성된 황색 용액을 대략 8 mL의 황색 혼합물이 남아있을 때까지 진공 하에 농축시켰다. 황색 혼합물에 피리딘 (30 mL)을 도입하고, 혼합물을 대략 15 mL의 황색 혼합물이 남아있을 때까지 진공 하에 농축시켰다. 황색 혼합물에 피리딘 (20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 대략 15 mL의 황색 혼합물이 남아있을 때까지 진공 하에 농축시켰다. 나머지 용액 (15 mL)에 피리딘 (25 mL)을 첨가하고, 혼합물을 대략 24 mL의 황색 혼합물이 남아있을 때까지 진공 하에 농축시켰다. 피리딘 중 교반 황색 혼합물 (24 mL)에 DMOCP (845 mg, 4.6 mmol)를 첨가하였다. 5분 후, 갈색빛 황색 용액에 물 (0.8 mL)을 첨가하고, 이어서 즉시 3H-1,2-벤조디티올-3-온 (385 mg, 2.3 mmol)을 도입하였다. 20분 후, 갈색빛 황색 용액을 1N 수성 NaHCO3 용액 (100 mL)에 부었다. 20분 후, 2상 혼합물을 EtOAc (400 mL)로 추출하였다. 분리한 후, 수성 층을 EtOAc (400 mL)로 역추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 진공 하에 농축시켰다. 농축된 황색 오일에 톨루엔 (30 mL)을 첨가하고, 혼합물을 진공 하에 증발시켜 잔류 피리딘을 제거하였다. 이 절차를 톨루엔 (30 mL)으로 2회 더 반복하였다. 생성된 오일을 실리카 겔 크로마토그래피 (CH2Cl2 중 0%에서 10% MeOH)에 의해 정제하여 화합물 44 (323 mg)를 오렌지색 발포체로서 수득하였다.
단계 4: 2'3'-RR-(3'H-A)(2'F-A) (45) 및 2'3'-RS-(3'H-A)(2'F-A) (45a)의 제조: MeOH (3.5 mL) 중 화합물 44 (323 mg, 0.36 mmol)의 혼합물의 교반 용액에 수성 30% NH4OH (2 mL)를 첨가하고, 우윳빛 슬러리를 50℃에서 가열하였다. 2시간 후, 오렌지색 용액을 실온으로 냉각되도록 하였다. 1시간 후, 오렌지색 용액을 진공 하에 농축시켰다. 오렌지색 잔류물을 역상 실리카 겔 크로마토그래피 (10 mM 수성 TEAA 중 0%에서 20% MeCN)에 의해 정제하여 화합물 45 (68.0 mg, 57% 수율)를 동결건조 후 백색 트리스-트리에틸암모늄 염으로서 수득하였다. LCMS-ESI: 677.05 [M+H]+ (C20H23FN10O8P2S2에 대한 계산치: 676.06) Rt: UPLC 조건 (10분에 걸쳐 20 mM 수성 NH4OAc 중 2%에서 20% MeCN)에 의해 2.111분. 1H NMR (400 MHz, 45℃, D2O) δ 8.49 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 6.60 (d, J = 17 Hz, 1H), 6.33 (s, 1H), 5.84 (dd, J = 51, 1 Hz, 1H), 5.49 (t, J = 3.6 Hz, 1H), 5.40 - 5.22 (m, 1H), 4.85 - 4.65 (m, 4H), 4.45 - 4.37 (m, 1H), 4.31 - 4.18 (m, 1H), 3.33 (q, J = 7.2 Hz, 18H), 3.05 - 2.95 (m, 1H), 2.75 - 2.65 (m, 1H), 1.42 (t, J = 7.2 Hz, 27H). 31P NMR (45℃, D2O) δ 56.19, 53.18.
화합물 2'3'-RS-(3'H-A)(2'F-A) (45a)를 또한 역상 크로마토그래피 단계에서의 정제 후 동결건조 후 백색 비스-트리에틸암모늄 염으로서 단리하였다 (22 mg, 18%). LCMS-ESI: 677.05 [M+H]+ (C20H23FN10O8P2S2에 대한 계산치: 670.06); Rt: 동일한 UPLC 조건에 의해 1.880분. 1H NMR. (400 MHz, 45℃, D2O) δ 8.77 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 6.59 (d, J = 16 Hz, 1H), 6.23 (br s, 1H), 6.11 (d, J = 49 Hz, 1H), 5.51 (br s, 1H), 5.41 - 5.24 (m, 1H), 4.78 - 4.63 (m, 3H), 4.35 - 4.29 (m, 3H), 3.33 (q, J = 7.2 Hz, 12H), 2.84 (br s, 2H), 1.42 (t, J = 7.2 Hz, 18H). 31P NMR (45℃, D2O) δ 54.10, 52.27.
실시예 12: 2'3'-RR-(3'F-G)(2'F-A) (49) 및 2'3'-RS-(3'F-G)(2'F-A) (49a)의 합성
디티오-[RP, RP]-시클릭-[3'F-G(2',5')p-2'F-A(3',5')p]로서 또한 지칭되는 2'3'-RR-(3'F-G)(2'F-A) (49), 및 디티오-[RP, SP]-시클릭-[3'F-G(2',5')p-2'F-A(3',5')p]로서 또한 지칭되는 2'3'-RS-(3'F-G)(2'F-A) (49a)를 하기 반응식 12에 따라 제조하였다:
단계 1: (2R,3S,4R,5R)-4-플루오로-5-(히드록시메틸)-2-(2-이소부티르아미도-6-옥소-1,6-디히드로-9H-퓨린-9-일)테트라히드로푸란-3-일 히드로겐 포스포네이트 (46)의 제조: 1,4-디옥산 (7 mL) 및 피리딘 (2.3 mL) 중 N-(9-((2R,3S,4S,5R)-5-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로-3-히드록시테트라히드로푸란-2-일)-6-옥소-6,9-디히드로-1H-퓨린-2-일)이소부티르아미드 (i16, 501 mg, 1.2 mmol)의 용액에 1,4-디옥산 (5 mL) 중 SalPCl (207 mg, 1.0 mmol)의 용액을 첨가하였다. 1시간 후, 실온에서 교반 반응 혼합물을에 물 (1.2 mL)을 도입하고, 30분 후, 생성된 혼합물을 1N 수성 NaHCO3 용액 (50 mL)에 부었다. 이 수성 혼합물을 EtOAc (3 x 40 mL)로 추출하고, 층을 분배하였다. EtOAc 추출물을 합하고, 진공 하에 농축 건조시켰다. 잔류물을 정상 실리카 겔 크로마토그래피 (DCM 중 0.5% 피리딘을 함유하는 1%에서 50% MeOH)에 의해 정제하여 중간체를 무색 오일로서 수득하였다. 무색 오일을 CH2Cl2 (15 mL) 중에 용해시켜 무색 용액을 수득하였다. 이 용액에 물 (150 μL) 및 CH2Cl2 중 DCA의 7% (v/v) 용액 (10 mL)을 첨가하였다. 실온에서 10분 동안 교반한 후, 적색 용액에 피리딘 (1.2 mL)을 충전하였다. 생성된 백색 혼합물을 진공 하에 농축시키고, MeCN (30 mL)으로 농축시킨 후 공비증류로서 물을 제거하였다. 이 공비증류 과정을 MeCN (20 mL)으로 2회 더 반복하였다. 마지막 증발 시에, 생성된 화합물 46의 담복숭아색 오일이 MeCN (15 mL) 중에 남았다.
단계 2: (2R,3S,4R,5R)-5-((((((2R,3R,4R,5R)-5-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-2-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로테트라히드로푸란-3-일)옥시)(2-시아노에톡시)포스포로티오일)옥시)메틸)-4-플루오로-2-(2-이소부티르아미도-6-옥소-1,6-디히드로-9H-퓨린-9-일)테트라히드로푸란-3-일 히드로겐 포스포네이트 (47)의 제조: MeCN (20 mL) 중 (2R,3R,4R,5R)-5-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-2-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로테트라히드로푸란-3-일 (2-시아노에틸) 디이소프로필포스포르아미다이트 (2, 629 mg, 0.7 mmol, 켐진스)의 용액을 진공 하의 농축을 통해 건조시켰다. 이 과정을 2회 더 반복하여 공비증류로서 물을 제거하였다. 마지막 공비증류에서, MeCN 중 화합물 2의 용액 (15 mL)에 10개의 3Å 분자체를 도입하고, 용액을 질소의 분위기 하에 저장하였다. MeCN 중 화합물 46과 잔류 피리딘-1-윰 디클로로아세테이트와의 교반 혼합물 (15 mL)에 MeCN 중 화합물 2의 용액 (15 mL)을 첨가하였다. 20분 후, 교반 혼합물에 DDTT (138 mg, 0.67 mmol)를 첨가하였다. 1시간 후, 황색 혼합물을 진공 하에 농축시켜 화합물 47을 황색 페이스트로서 수득하였다.
단계 3: 보호된 2'3'-디티오-(3'F-G)(2'F-A) (48)의 제조: CH2Cl2 중 화합물 47의 용액 (20 mL)에 물 (100 μL) 및 CH2Cl2 중 DCA의 6% (v/v) 용액 (20 mL)을 첨가하였다. 실온에서 15분 후, 피리딘 (10 mL)을 적색 용액에 첨가하여 황색 용액이 생성되고, 이를 진공 하에 대략 10 mL로 농축시켰다. 황색 혼합물에, 피리딘 (25 mL)을 첨가하고, 혼합물을 진공 하에 대략 5 mL로 농축시켰다. 황색 혼합물에, 피리딘 (20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 진공 하에 대략 5 mL로 농축시킨 다음, 피리딘 (45 mL)을 첨가하였다. 피리딘 중 교반 황색 혼합물 (50 mL)에 DMOCP (361 mg, 2.0 mmol)를 첨가하였다. 10분 후, 갈색빛 황색 용액에 물 (0.7 mL)을 첨가하고, 이어서 즉시 3H-1,2-벤조디티올-3-온 (158 mg, 0.9 mmol)을 도입하였다. 30분 후, 갈색빛 황색 용액을 1N 수성 NaHCO3 용액 (100 mL)에 부었다. 20분 후, 2상 혼합물을 EtOAc (250 mL)로 추출하였다. 분리한 후, 수성 층을 EtOAc (2 x 100 mL)로 역추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 진공 하에 농축시켰다. 농축된 황색 오일에 톨루엔 (30 mL)을 첨가하고, 혼합물을 진공 하에 증발시켜 잔류 피리딘을 제거하였다. 이 절차를 톨루엔 (30 mL)으로 다시 반복하였다. 생성된 오일을 실리카 겔 크로마토그래피 (CH2Cl2 중 0%에서 40% MeOH)에 의해 정제하여 불순물을 포함하는 화합물 48 (259 mg, 56% 수율)을 황색 페이스트로서 수득하였다.
단계 4: 2'3'-RR-(3'F-G)(2'F-A) (49) 및 2'3'-RS-(3'F-G)(2'F-A) (49a)의 제조: EtOH (2.5 mL) 중 화합물 48 (259 mg, 0.27 mmol)의 혼합물의 교반 용액에 수성 AMA (4.8 mL)를 첨가하고, 황색 용액을 50℃에서 가열하였다. 2시간 후, 무색 용액을 냉각되도록 하고, 진공 하에 농축시켰다. 무색 페이스트 잔류물을 역상 실리카 겔 크로마토그래피 (10 mM 수성 TEAA 중 0%에서 20% MeCN)에 의해 정제하여 화합물 49 (32.0 mg, 17% 수율)를 동결건조 후 백색 비스-트리에틸암모늄 염으로서 수득하였다. LCMS-ESI: 708.85 [M-H]- (C20H22F2N10O9P2S2에 대한 계산치: 710.05) Rt: UPLC 조건 (10분에 걸쳐 20 mM 수성 NH4OAc 중 2%에서 20% MeCN)에 의해 1.531분. 1H NMR (400 MHz, 45℃, D2O) δ 8.44 (dd, J = 16, 1.6 Hz, 2H), 8.03 (s, 1H), 6.60 (dd, J = 14, 1.2 Hz, 1H), 6.17 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.09 - 5.85 (m, 1H), 5.73 (d, J = 13 Hz, 1H), 5.60 (d, J = 16 Hz, 1H), 5.49 - 5.35 (m, 1H), 4.87 (d, J = 24.8 Hz, 1H), 4.80 - 4.65 (m, 2H), 4.32 - 4.30 (m, 3H), 3.33 (q, J = 7.2 Hz, 12H), 1.42 (t, J = 7.2 Hz, 18H). 19F NMR (400 MHz, 45℃, D2O) δ -198.34 내지 -198.55. 31P NMR (45℃, D2O) δ 55.69, 52.08.
화합물 2'3'-RS-(3'F-G)(2'F-A) (49a)를 또한 역상 크로마토그래피 단계에서의 정제 후 동결건조 후 백색 절반-트리에틸암모늄 염으로서 단리하였다 (7.35 mg, 4%). LCMS-ESI: 708.95 [M-H]- (C20H22F2N10O9P2S2에 대한 계산치: 710.5); Rt: 동일한 UPLC 조건에 의해 1.298분. 1H NMR. (400 MHz, 45℃, D2O) δ 8.45 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 6.62 (d, J = 15 Hz, 1H), 6.19 (s, 1H), 6.03 (d, J = 49 Hz, 1H), 5.79 - 5.65 (m, 2H), 5.40 - 5.28 (m, 1H), 4.94 (d, J = 24 Hz, 1H), 4.75 - 4.67 (m, 2H), 4.46 (s, 1H), 4.35 (s, 2H), 3.33 (s, 3H), 1.41 (s, 5H). 19F NMR (400 MHz, 45℃, D2O) δ -198.63 내지 -198.70, -201.57.
실시예 13: 디티오-2'3'-(3'βF-A)(A) (53)의 합성
디티오-시클릭-[3'βF-A(2',5')p-A(3',5')p]로서 또한 지칭되는 디티오-2'3'-(3'βF-A)(A) (53)를 하기 반응식 13에 따라 제조하였다:
단계 1: 화합물 6을 11 mL 무수 디옥산 중 화합물 i13 (1.0 g, 1.5 mmol)으로 실시예 3에 기재된 바와 같이 유사하게 제조하고, 피리딘 (6 mL)을 첨가하고, 이어서 1.5 mL 디옥산 중 2-클로로-4H-1,3,2-벤조디옥사포스포린-4-온 (390 mg, 1.92 mmol, 시그마 알드리치)을 첨가하고, 16시간 동안 교반하였다. 물 (3.0 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 1N 수성 NaHCO3 / EtOAc 사이에 분배하고, EtOAc (x3)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 건조시키고 (Na2SO4), 용매를 진공 하에 제거하고, 생성된 오일을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (구배 용리 0%에서 30% MeOH/CH2Cl2)에 의해 정제하여 화합물 6 (418 mg, 38% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. 미반응 출발 물질을 회수하여 이를 출발으로 반응 조건에 재적용하여 화합물 6의 추가의 50 mg (27%)을 수득하였다: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.25 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.05 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 7.65 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.55 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.46 - 7.37 (m, 2H), 7.33 - 7.15 (m, 7H), 6.86 (t, J = 9.3 Hz, 4H), 6.24 (s, 1H), 5.98 (s,1H), 5.39 (d, J = 54.2 Hz, 1H), 5.26 - 5.11 (m, 1H), 4.72 - 4.40 (m, 1H), 3.72 (s, 6H), 3.30 (s, 2H); 19F NMR (376 MHz, DMSO-d6) δ - 199.22; 31P NMR (162 MHz, DMSO-d6) δ 0.08; LCMS (방법 F) Rt: 1.72분; m/z 740.1 [M+H]+.
단계 2: (2R,3S,4S,5R)-2-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-5-((((((2R,3R,4R,5R)-5-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-2-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)테트라히드로푸란-3-일)옥시)(2-시아노에톡시)포스포로티오일)옥시)메틸)-4-플루오로테트라히드로푸란-3-일 포스포네이트 (51)의 제조: (단계 2a) DCM (5 mL) 중 화합물 6 (468 mg, 0.63 mmol)의 용액에 물 (0.100 mL)에 이어서 DCM 용액 중 6% DCA 용액 6 mL를 첨가하였다. 반응 혼합물을 10분 동안 교반한 다음, 피리딘 (0.700 mL)으로 켄칭하고, 진공 하에 농축시켰다. 생성된 오일을 무수 MeCN (3 x 10 mL)을 사용하여 공비증류시켜 조 화합물 7을 투명한 황색 오일 (277 mg, 0.63 mmol, 조 물질)로서 수득하였다: LCMS (방법 G) Rt: 0.38분; m/z 438.1 [M+H]+. 포스포르아미다이트 17 (613 mg, 0.62 mmol, 0.9 당량, 켐진스)을 MeCN (3 x 10 mL)으로 진공 하에 공비증류시켜 건조시킨 후 3A 오븐-건조된 분자체와 함께 무수 MeCN (3 mL) 중에 용해시켰다. 이 용액을 MeCN 중 조 화합물 7의 교반 용액 (5 mL) 내로 피펫을 통해 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 다음, DDTT (169 mg, 0.82 mmol, 1.3 당량)를 첨가하고; 추가로 45분 후 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켜 화합물 51 (859 mg, 0.63 mmol)을 부분입체이성질체의 조 혼합물로서 수득하였다: LCMS (방법 F) Rt 2.31 및 2.34분; m/z 1357.3 [M+H]+.
단계 3: 보호된 디티오-2'3'-(3'βF-A)(A) (52): DCM (10 mL) 중 화합물 51 (859 mg, 0.63 mmol)의 용액에 물 (80 μL)에 이어서 DCM 중 6% v/v DCA의 용액 (6 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 10분 동안 교반하고, 피리딘 (2 mL)으로 켄칭하였다. 혼합물을 진공 하에 농축시켜 DCM을 제거한 다음, MeCN (2 x 10 mL)에 이어서 무수 피리딘 (2 x 30 mL)으로 진공 하에 공비증류시켰다. 나중의 용액을 20 mL로 감소시킨 후 피리딘 (20 mL)을 첨가하고, 이어서 DMOCP (351 mg, 1.9 mmol, 3.0 당량)를 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 1시간 동안 교반한 후, 물 (80 μL)을 첨가하고, 이어서 즉시 3H-1,2-벤조디티올-3-온 (160 mg, 0.95 mmol, 1.5 당량)을 첨가하였다. 반응물을 2시간 동안 교반한 다음, 1 N NaHCO3 (100 mL) / EtOAc 사이에 분배하고, EtOAc (3x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 진공 하에 농축시켜 점성 호박색 오일을 수득하였다. 이를 MeCN (4 x100 mL)으로 진공 하에 공비증류시키고, 생성된 반고체 화합물 52를 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (구배 용리 0%에서 20% MeOH / CH2Cl2)에 이어서 HPLC 정제 (엑스-브리지 30 x 50 mm 5 μm 칼럼; MeCN/H2O w/5 mM NH4OH)에 의해 정제하여 2종의 부분입체이성질체를 수득하였다: 52a (10 mg, 1.5%) LCMS (방법 F) Rt: 1.70분; m/z 1068.3 [M+H]+; 및 52b (35 mg, 5%) 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.20 (d, J = 17.7 Hz, 2H), 8.87 - 8.65 (m, 3H), 8.36 (s, 1H), 8.05 (d, J = 7.6 Hz, 7H), 7.70 - 7.41 (m, 8H), 6.35 (s, 1H), 6.14 (s, 2H), 5.97 (d, J = 51.4 Hz, 1H), 5.17 - 4.98 (m,3H), 4.58 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.36- 4.06 (m, 1H), 3.88 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 2.89 (d, J = 12.9 Hz, 2H), 0.88 (s, 9H), 0.13 (s, 3H), 0.11 (s, 3H); 19F NMR (376 MHz, DMSO-d6) δ -203.48; 31P NMR (162 MHz, DMSO-d6) δ 65.09, 53.10; LCMS (방법 F) Rt: 1.82분; m/z 1068.3 [M+H]+.
단계 4: 디티오-2'3'-(3'βF-A)(A) (53)의 제조: MeOH (600 μL) 중 주요 부분입체이성질체 화합물 52b (35 mg, 0.03 mmol, 1 당량)의 용액에 진한 NH4OH (255 μL)를 첨가하고, 용액을 50℃로 5시간 동안 가열하였다. 이어서, 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 진공 하에 농축시켜 MeOH를 제거하고, HPLC-C18 (엑스-브리지 30 x 50 mm 5 μm 칼럼 MeCN/H2O w/5 mM NH4OH)을 사용하여 정제하여 동결건조 후 2'-OTBS 중간체 (13 mg, 0.01 mmol, 49%)를 수득하였다: 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 8.65 (s, 1H), 8.36 (d, J = 15.1 Hz, 2H), 8.21 (s, 2H), 6.19 (s, 1H), 5.97 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.72 (d, J = 50.5 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 9.2, 3.9 Hz, 1H), 4.97 - 4.88 (m, 1H), 4.83 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.53 - 4.40 (m, 1H), 4.28 - 4.02 (m, 4H), 0.88 (s, 9H), 0.00 (s, 6H); 19F NMR (376 MHz, DMSO-d6) δ -202.66; 31P NMR (162 MHz, DMSO-d6) δ 59.85, 53.98; LCMS (방법 F) Rt: 1.53분; m/z 807.1 [M+H]+. 이 물질 (13 mg, 0.016 mmol)을 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (200 μL) 중에 용해시키고, 40℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 이 용액을 1M TEAB (3 mL) 및 트리에틸아민 (0.5 mL)의 냉각 용액에 천천히 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반되도록 한 후, MeCN을 첨가하고, 용매를 진공 하에 증발 건조시켰다. 화합물을 탈이온수 (1 mL) 및 MeCN (1 mL) 중에 용해시키고, 용액을 미리 조건화된 GE-미니트랩 G-10 중력 칼럼 상에 첨가하였다. 조 화합물 53을 동결건조 후 과량의 트리에틸암모늄 염을 갖는 백색 고체 (9.2 mg, 6 μmol, 37%)로서 단리하였다. C18 실리카 겔 상에서의 크로마토그래피 (구배 용리액 0 내지 80% MeCN/물)에 의해 정제하여 53 (비할당 입체화학의 입체화학적으로 순수한 부분입체이성질체)을 ~0.5 당량의 트리에틸암모늄 염을 함유하는 그의 비스-트리에틸암모늄 염으로서 수득하였다: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.44 (s, 1H), 8.17 (d, J = 9.4 Hz, 2H), 8.00 (s, 1H), 7.34 (d, J = 14.0 Hz, 4H), 7.13 (s, 1H), 6.94 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 5.88 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.66 (d, J = 51.3 Hz, 1H), 5.00 (s, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.77 (s, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.44 (s, 1H), 4.19 (s, 1H), 4.13 - 3.95 (m, 3H), 3.06 (s, 15H), 1.16 (t, J = 7.2 Hz, 23H); 19F NMR (376 MHz, DMSO) δ -202.86; 31P NMR (162 MHz, DMSO) δ 60.06, 54.06; HRMS C20H23FN10O9P2S2에 대한 계산치 693.0627 실측치 693.0629 [M+H]+.
본 실시예에 사용된 HPLC 방법을 각각의 샘플로 나타내었다. 방법 F: LCMS 데이터를 워터스 시스템 (마이크로매스 SQ 질량 분광계; 칼럼: 액퀴티 UPLC BEH C18 1.7 마이크로미터, 2.1 x 30 mm; 구배 3.20분까지 1%에서 30% 아세토니트릴에 이어서 구배: 1.55분 기간에 걸쳐 5mM 수산화암모늄을 갖는 물 중 30-98% 아세토니트릴 후 5.19분에 1% 아세토니트릴로 되돌아감 - 총 실행 시간 5.2분; 유량 1 mL/분; 칼럼 온도 50℃)을 사용하여 기록하였다. 방법 G: LCMS 데이터를 워터스 시스템 (마이크로매스 SQ 질량 분광계; 칼럼: 액퀴티 UPLC BEH C18 1.7 마이크로미터, 2.1 x 30 mm; 구배 1.20분까지 1%에서 30% 아세토니트릴에 이어서 구배: 0.55분 기간에 걸쳐 5mM 수산화암모늄을 갖는 물 중 30-98% 아세토니트릴 후 2.19분에 1% 아세토니트릴로 되돌아감 - 총 실행 시간 2.2분; 유량 1 mL/분; 칼럼 온도 50℃)을 사용하여 기록하였다.
실시예 14: 정제된 STING 단백질을 사용한 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물의 의 시험관내 결합 분석.
아미노산 140-379를 코딩하는 DNA (아미노산 넘버링은 스위스 프롯 Q86WV6에 상응함)를 하기 프라이머를 사용한 폴리머라제 연쇄 반응을 통해 인간 STING 대립유전자의 전장 서열을 함유하는 플라스미드로부터 증폭시켰다: 정방향 TACTTCCAATCCAATGCAGCCCCAGCTGAGATCTCTG (서열식별번호: 9) 및 역방향 TTATCCACTTCCAATGTTATTATTATCAAGAGAAATCCGTGCGGAG (서열식별번호: 10). STING 변이체 대립유전자를 문헌 [Yi, et al., (2013), PLoS One, 8(10), e77846 (DOI: 10.1371/journal.pone.0077846]에 따라 할당하였다. PCR 생성물을 N-말단 헥사-히스티딘 친화성 태그 (6xHIS)에 이어서 소형 유비퀴틴-유사 조절제 (SUMO) 용해도 서열 (Butt, et al., (2005) Protein expression and purification 43.1, 1-9) 및 담배 식각 바이러스 프로테아제 절단 부위 (TEV)를 코딩하는 박테리아 발현 벡터 내로 라이게이션 독립적 클로닝을 사용하여 클로닝하였다 (Aslanidis, et al., (1990) Nucleic acids research, 18.20, 6069-6074).
6xHIS-SUMO-TEV-STING 아미노산 140-379를 코딩하는 플라스미드를 단백질 발현을 위해 로제타2 (DE3) 이. 콜라이 세포 (이엠디 밀리포어) 내로 형질전환시켰다. 세포를 600 nM 흡광도 0.6에 도달할 때까지 37℃에서 용원성 브로쓰 중에서 성장시켰다. 이어서, 세포를 18℃로 옮기고, 이소프로필 β-D-1-티오갈락토피라노시드를 배지에 0.25 mM의 농도로 첨가하여 밤새 단백질 발현을 유도하였다. 세포를 10분 동안 6,000배 중력의 원심분리에 의해 수거하였다. 세포 펠릿을 얼음 상에서 50 mM 트리스 히드로클로라이드 (트리스-HCl) pH 7.5, 500 mM 염화나트륨 (NaCl), 20 mM 이미다졸, 10% 글리세롤, 1 mM 트리스(2-카르복시에틸)포스핀 히드로클로라이드 (TCEP) 및 프로테아제 억제제 정제 (피어스)를 함유하는 완충제 (완충제 A) 중에 재현탁시켰다. 세포를 얼음 상에서 S-450D 소니파이어 (에머슨 인더스트리얼)를 사용하여 용해시켰다. 세포 용해물을 4℃에서 30분 동안 15,000배 중력으로 원심분리하였다. 가용성 물질을 4℃에서 완만하게 요동시키면서 1시간 동안 니켈-니트릴로트리아세트산 (Ni-NTA) 커플링된 세파로스 CL-6B (퀴아젠)에 적용하였다. 중력 유동 폴리-프렙 칼럼 (바이오-라드)으로 옮긴 후 에, 수지를 완충제 A 중에서 광범위하게 세척하였다. 단백질을 20 mM 트리스-HCl pH 7.5, 150mM NaCl, 300 mM 이미다졸, 10% 글리세롤 및 0.5 mM TCEP를 함유하는 완충제 중에서 칼럼으로부터 용리시켰다. 6xHIS-SUMO 태그를 제거하기 위해 용리된 단백질을 TEV 프로테아제 (시그마)와 1:250 (w:w)의 비로 혼합하고, 20 mM 트리스-HCl pH 7.5, 150mM NaCl, 5 mM 이미다졸, 10% 글리세롤 및 0.5 mM TCEP를 함유하는 완충제에 대해 밤새 투석하였다. TEV 프로테아제 및 6xHIS-SUMO 태그는 샘플에 Ni-NTA 수지 (퀴아젠)를 첨가하여 고갈시키고, 정제된 STING 아미노산 140-379를 폴리-프렙 칼럼을 사용하여 수지의 제거에 의해 수집하였다. STING AA140-379를 10,000 달톤 분자량 컷오프 원심분리 농축기 (이엠디 밀리포어)를 사용하여 최종 농도 대략 10 mg/mL로 농축시켰다. 단백질을 분취하고, 액체 질소 중에 급속 동결시키고, 사용시까지 -80℃에서 저장하였다.
시차 주사 형광측정법 (DSF)은 리간드가 정제된 단백질에 결합하여 이를 안정화시키는 능력을 측정하는 기술이다 (Niesen, et al., (2007) Nature protocols 2.9, 2212-2221). 단백질은 소수성 환경에서 결합하고 형광을 내는 염료의 존재 하에 가열된다. 단백질은 가열에 의해 열적으로 변성되어 비폴딩 단백질에 대한 염료 결합 및 형광 증가가 유발된다. 단백질 변성의 온도 중간점 (Tm)은 변성 곡선의 절반 최대 값을 계산함으로써 확립된다. 리간드의 존재 하의 단백질의 온도 중간점은 단백질에 대한 리간드의 친화도 및 이에 따라 보다 높은 온도에서 단백질을 안정화시키는 그의 능력과 직접 관련된다.
DSF를 20 mM 트리스-HCl pH 7.5, 150 mM NaCl, SYPRO 오렌지 (라이프 테크놀로지스)의 1:500 희석물, 1 mg/mL 정제된 STING AA140-379 단백질 및 1 mM의 농도의 리간드를 포함하는 20 μL 반응물 중에서 수행하였다. 표 4에 열거된 바와 같이 각각의 야생형 hSTING, HAQ 대립유전자 hSTING 및 REF 대립유전자 hSTING를 각각의 참조 화합물 및 본 발명의 화합물과 함께 사용하였다. 포스포디에스테르 화합물 및 RR 배위를 갖는 디티오포스페이트 화합물에 대한 결과가 또한 도 1-3에서 비교된다. 샘플을 경질 쉘 PCR 플레이트 (바이오-라드)에 배치하였다. 온도의 함수로서의 형광은 HEX 채널, 여기 450-490, 방출 560-580 nm에서 판독되는 CFX 96 실시간 PCR 기계 (바이오-라드)에서 기록되었다. 온도 구배는 15초당 0.5℃로 상승하고 0.5℃마다 기록되는 15-80℃였다. 단백질 및 리간드가 결여된 샘플로부터의 배경 신호의 차감 후에, 중간점 온도 (Tm)를 온도의 함수로서의 형광 곡선을 볼츠만 S자형 함수에 피팅시켜 계산하였다 (그래프 패드 프리즘). 리간드의 존재 하의 STING AA140-379의 열적 안정성에서의 변화 (Tm 이동)를 Tm (단백질 단독)으로부터 Tm (단백질 및 리간드)을 차감하여 계산하였다.
표 4: hSTING WT, HAQ 대립유전자 및 REF 대립유전자에서의 Tm 이동
도 1a (hSTING (WT)), 1b (hSTING (HAQ)) 및 1c (hSTING (REF))는 시험된 많은 디티오포스페이트 연결된 RR 이성질체 화합물, 뿐만 아니라 2종의 포스포디에스테르 연결된 화합물에 대한 Tm 이동을 제시한다. 이들 도면은 야생형 및 HAQ 대립유전자의 경우, 플루오로 치환된 화합물 모두가 마우스 종양 모델에서 효과적인 것으로 제시된 (Corrales et al., Cell Reports 2015, 11:1018-1031) 2'3'-RR-(A)(A) 참조 화합물보다 더 크거나 동일한 Tm 이동을 나타냈다는 것을 제시한다. 표 4에 제시된 바와 같은 모든 시험된 화합물의 결과를 볼 때, 디-아데닌 RR 이성질체 중 단지 2'3'-RR-(3'βF-A)(2'F-A) 화합물만이 REF 대립유전자에의 결합에 대해 2'3'-RR-(A)(A)보다 더 적은 Tm 이동을 나타냈다. 모노- 또는 디-F 치환된 디-아데닌 RR 이성질체 화합물은 상기에 기재된 바와 같은 2'3'-RR-(3'βF-A)(2'F-A)를 제외하고는 각각의 WT, HAQ 대립유전자 및 REF 대립유전자에 대해 2'3'-RR-(A)(A) 디-OH 참조 화합물보다 더 크거나 대략 동일한 Tm 이동을 나타냈다. RS 또는 SR 이성질체의 경우, 이들 모두가 상응하는 RR 이성질체보다 더 낮은 Tm 이동을 갖지만, 화합물 2'3'-RS-(3'F-A)(2'F-A) 및 2'3'-SR-(A)(2'F-A)는 각각의 WT, HAQ 대립유전자 및 REF 대립유전자에 대해 디-OH 참조 2'3'-SR-(A)(A)보다 더 높은 Tm 이동을 나타낸다. 아데닌-구아닌 화합물의 경우, 포스포디에스테르 연결된 2'3'-(G)(2'F-A) 및 2'3'-(3'F-G)(2'F-A) 화합물 둘 다는 디-OH 참조 화합물 2'3'-(G)(A)보다 더 높은 Tm 이동을 나타냈다. 디티오포스페이트 연결된 RR 이성질체 화합물의 경우, 2'3'-RR-(G)(2'F-A) 및 2'3'-RR-(3'F-G)(2'F-A)는 각각의 WT, HAQ 대립유전자 및 REF 대립유전자에 대해 디-OH 참조 2'3'-RR-(G)(A)보다 더 높은 Tm 이동을 나타냈다. 3'2'-RR-(2'F-G)(3'F-A) 및 3'2'-RR-(2'F-G)(A) 화합물은 모든 대립유전자에 대한 우수한 결합을 나타냈다. 참조 화합물은 구아닌-아데닌 화합물의 RS 또는 SR 이성질체에 대해 이용가능하지 않았다. 본원에 기재된 바와 같은 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물은 시험된 많은 화합물이 각각의 WT, HAQ 대립유전자 및 REF 대립유전자에 대해 디-OH 참조 화합물보다 더 높은 Tm 이동을 나타낸 Tm 이동에 기초하여 STING에 대한 우수한 결합을 나타낸다.
실시예 15: hPBMC에서의 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물에 의한 제I형 인터페론의 유도.
본원에 기재된 바와 같은 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물의 효력을 평가하기 위해 인간 1차 혈액 단핵 세포 (hPBMC)에서 제I형 인터페론의 유도를 측정하였다. 다음 3종의 고유한 공여자로부터의 hPBMC를 사용하였다: 한 공여자는 야생형 (WT) STING 대립유전자에 대해 동형접합이고 (STINGWT/WT), 한 공여자는 소위 참조 (REF) (R232H) STING 대립유전자에 대해 동형접합이고 (STINGREF/REF), 제3 공여자는 HAQ (R71H, G230A, R293Q) STING 대립유전자에 대해 동형접합이었다 (STINGHAQ/HAQ). 이들 공여자의 STING 유전자형을 다음 PCR 증폭 및 서열분석에 의해 결정하였다: 게놈 DNA를 퀵 익스트랙트 DNA 추출 용액 (에피센터)을 사용하여 hPBMC로부터 단리하고, 이를 사용하여 인간 STING 유전자의 엑손 3, 6 및 7의 영역을 증폭시켰다. 증폭 및 서열분석을 위한 프라이머는 다음과 같았다: hSTING 엑손3F GCTGAGACAGGAGCTTTGG (서열식별번호: 11), hSTING 엑손3R AGCCAGAGAGGTTCAAGGA (서열식별번호: 12), hSTING 엑손6F GGCCAATGACCTGGGTCTCA (서열식별번호: 13), hSTING 엑손6R CACCCAGAATAGCATCCAGC (서열식별번호: 14), hSTING 엑손7F TCAGAGTTGGGTATCAGAGGC (서열식별번호: 15), hSTING 엑손7R ATCTGGTGTGCTGGGAAGAGG (서열식별번호: 16). STING 변이체 대립유전자를 문헌 [Yi, et al., 2013, PLoS One, 8(10), e77846 (DOI: 10.1371/journal.pone.0077846)]에 따라 할당하였다.
동결보존된 hPBMC를 해동시키고, 106개의 세포를 비처리 상태로 두거나 또는 10% 태아 소 혈청 및 1% 페니실린/스트렙토마이신이 보충된 RMPI 배지에서 10 μM의 디-아데닌 화합물 2'3'-RR-(A)(A) (디-OH 참조), 2'3'-RR-(A)(2'F-A) (실시예 4, 화합물 16), 2'3'-RR-(3'F-A)(A) (실시예 5, 화합물 20), 2'3'-RR-(3'F-A)(2'F-A) (실시예 2, 화합물 5), 및 2'3'-RR-(3'βF-A)(2'F-A) (실시예 3, 화합물 10) 또는 아데닌-구아닌 화합물 2'3'-(G)(A) (디-OH 참조), 2'3'-(G)(2'F-A) (실시예 9, 화합물 38), 2'3'-RR-(G)(A) (디-OH 참조), 2'3'-RR-(G)(2'F-A) (실시예 6, 화합물 26), 3'2'-RR-(2'F-G)(A) (실시예 8, 화합물 35), 및 3'2'-RR-(2'F-G)(3'F-A) (실시예 7, 화합물 32)로 처리하였다. 2시간 자극 후에, 세포를 원심분리에 의해 수거하고, 포스페이트-완충 염수 중에서 1회 세척하였다. 세포 RNA를 아우룸 총 RNA 96 키트를 사용하여 단리하고, cDNA를 아이스트립트 cDNA 합성 키트를 사용하여 합성하였다. 표적 (IFN-β) 및 참조 (HSP90AB1 및 GUSB) 유전자 발현을 프라임PCR 프로브 검정 및 CFX96 유전자 사이클러를 사용하는 실시간 qRT-PCR에 의해 평가하였다 (바이오라드로부터의 모든 시약 및 장비). 상대 IFN-β 발현을 비처리 세포와 비교하고, 참조 유전자에 대해 정규화하였다 (2-ΔΔCt 방법).
도 2 (디-아데닌 화합물) 및 도 3 (구아닌-아데닌 화합물)은 WT STING, HAQ STING 대립유전자 및 REF STING 대립유전자에 대해 동형접합인 hPBMC에 의한 IFN-β 전사체의 상대 발현을 제시한다. 그래프에서의 점선은 2'3'-RR-(A)(A) 또는 2'3'-RR-(G)(A)에 대한 상대 발현 값을 나타낸다.
디-아데닌 화합물 2'3'-RR-(A)(2'F-A) (화합물 16), 2'3'-RR-(3'F-A)(A) (화합물 20), 2'3'-RR-(3'F-A)(2'F-A) (화합물 5) 및 2'3'-RR-(3'βF-A)(2'F-A) (화합물 10) 모두는 hSTING의 각각의 WT, HAQ 대립유전자 및 REF 대립유전자에 대해 디-OH 참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A)보다 더 높은 수준의 IFN-β 전사체를 자극하였다. 2'3'-RR-(A)(2'F-A) 및 2'3'-RR-(3'F-A)(2'F-A)는 hSTING REF 대립유전자에 대해 2'3'-RR-(A)(A)보다 실질적으로 더 높은 수준 (>80배 더 높은)을 나타낸다.
구아닌-아데닌 화합물의 경우, 화합물 2'3'-(G)(2'F-A) (화합물 38)는 hSTING의 각각의 WT, HAQ 대립유전자 및 REF 대립유전자에 대해 2'3'-(G)(A) 디-OH 참조 화합물보다 실질적으로 더 높은 수준 (>100배 더 높은)을 나타냈으며, 심지어 2'3'-RR-(G)(A) 화합물보다 더 높은 수준을 나타냈다. 화합물 2'3'-RR-(G)(2'F-A) (화합물 26)는 hSTING의 각각의 WT, HAQ 대립유전자 및 REF 대립유전자에 대해 2'3'-RR-(G)(A) 디-OH 참조 화합물보다 더 높은 수준을 나타냈으며, hSTING REF 대립유전자에 대해서는 2'3'-RR-(G)(A) 디-OH 참조 화합물보다 > 4배 더 높은 수준을 나타냈다. 화합물 3'2'-RR-(2'F-G)(A) (화합물 35) 및 3'2'-RR-(2'F-G)(3'F-A) (화합물 32)는 또한 매우 활성이고, hSTING WT 및 hSTING HAQ 대립유전자에 대해 디-OH 화합물 2'3'-RR-(G)(A)보다 더 높은 수준의 IFN-β 전사체를 자극하였으며, 반면 3'2'-RR-(2'F-G)(3'F-A)는 hSTING REF 대립유전자에 대해 디-OH 화합물 2'3'-RR-(G)(A)와 비교하여 대략 동일한 수준을 자극하였다.
2'3'-RR-(3'H-A)(2'F-A) (실시예 11, 화합물 45) 및 (2'3'-RR-(3'F-G)(2'F-A) (실시예 12, 화합물 49)를 2'3'-RR-(A)(A) 및 2'3'-RR-(G)(A)와 비교하여 유사하게 검정하였으며, 여기서 화합물을 10 μM 및 100 μM로 시험하고, 세포를 자극 2시간 또는 6시간 후에 수거하였다. IFNβ 발현은 비처리 세포에 대해 상대적으로 표현하였다. IFNβ에 추가로, 표적 유전자는 Th1-연관된 시토카인 (IFNγ, IL-12p35) 및 NF-kB 의존성 염증성 시토카인 (TNFα, IL-6)을 포함하였다. 결과는 hSTING의 WT, HAQ 대립유전자 및 REF 대립유전자에 대해 IFNβ의 경우 도 4a에, TNFα의 경우 도 4b에, IFNγ의 경우 도 4c에, IL-6의 경우 도 4d에, IL-12p35의 경우 도 4e에 제시되어 있다. 이들 결과는 화합물 45 및 49 둘 다가 강력한 STING 활성화제라는 것을 입증한다.
실시예 16: 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물은 THP1 세포에서 인간 STING 신호전달을 강력하게 활성화시킨다.
아주반트 효력의 시그너처로서 각각의 모노- 또는 디-F-ML-CDN에 의해 인간 세포에서 유도된 제I형 인터페론의 상대 수준을 결정하기 위해, 100,000개의 THP1-이중 세포 (5종의 IFN-자극된 반응 요소로 구성된 프로모터의 제어 하에 분비된 루시페라제를 발현하는 IRF-3 유도성 분비된 루시페라제 리포터 유전자 (인비보젠)로 형질감염된 hSTING HAQ 대립유전자를 함유하는 인간 단핵구 세포주)를 96-웰 디쉬에서 밤새 30 ng/mL 포르볼 12-미리스테이트 13-아세테이트로 활성화시켰다. 세포를 신선한 배지로 세척하고, PB 완충제 (50 mM 4-(2-히드록시에틸)-1-피페라진에탄술폰산, 100 mM KCl, 3mM MgCl2, 0.1mM 디티오트레이톨, 85 mM 수크로스, 1 mM ATP, 0.1 mM GTP 및 0.2% 소 혈청 알부민) 중 2,000에서 0.0338 μM로의 3배 적정 단계의 화합물과 함께 5% CO2 하에 37℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 균일한 화합물 세포 침투에 의한 제I형 인터페론 활성화를 측정하기 위해, 세포를 10 μg/mL 디기토닌을 함유하는 PB 완충제 중 12에서 0.00001 μM로의 4배 적정 단계의 화합물로 자극하였다. 30분 후에, 세포를 세척하고, 10% FBS를 함유하는 신선한 RPMI 배치를 첨가하고, 세포를 5% CO2 하에 37℃에서 인큐베이션하였다. 각각의 샘플로부터의 세포 배양 상청액을 밤새 인큐베이션한 후에 수집하고, 10 μL의 세포 배양 상청액을 50 μL QUANTI-Luc 시약 (인비보젠)에 첨가하였다. 스펙트라맥스 M3분광광도계 (몰레큘라 디바이시스) 상에서 분비된 루시페라제 수준을 측정하여 제I형 인터페론 활성화를 결정하였다. 표 5에 열거된 바와 같이 본 검정에서 시험된 본 발명의 화합물 및 참조 화합물의 연속 희석물로부터의 10종 농축물에 대한 용량-반응 곡선으로부터 EC50 값을 결정하였으며, 이는 디기토닌 부재 하 및 이용가능한 경우 디기토닌 존재 하의 결과를 제시한다 ("-"는 디기토닌의 존재 하에 시험되지 않은 화합물을 나타낸다).
표 5: THP1 세포 (HAQ 대립유전자)에서 디기토닌의 존재 및 부재 하의 EC50.
디기토닌 투과가 없는 THP1 검정에서의 모노- 및 디-F 디-아데닌 화합물 2'3'-RR-(A)(2'F-A), 2'3'-RR-(3'F-A)(A), 2'3'-RR-(3'F-A)(2'F-A), 2'3'-RR-(3'βF-A)(2'F-A) 및 2'3'-RR-(3'H-A)(2'F-A) 모두는 디-OH 참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A)에 비해 개선된 활성을 나타내며, 모두 20 μM 미만의 EC50을 갖는다. 이는 참조 화합물과 비교하여 모노- 또는 디-F 아데닌 화합물의 증진된 세포 투과성을 입증한다. 대략 5 μM의 EC50을 갖는 디-F 화합물 2'3'-RR-(3'F-A)(2'F-A) 및 2'3'-RR-(3'βF-A)(2'F-A)는 2'3'-RR-(A)(A) 참조 화합물에 비해 8배 개선된 것이며, 이들 화합물에 대한 디기토닌 존재 하의 검정의 결과는 최대로 단지 2배 개선된다.
구아닌-아데닌 화합물의 경우, 포스포디에스테르 연결된 화합물 2'3'-(G)(2'F-A) 및 2'3'-(3'F-G)(2'F-A)는 디기토닌 부재 하의 EC50 검정에서 개선을 나타내며, 반면에 2'3'-(G)(2'F-A)는 디기토닌 존재 하의 검정에서 대략 5배 더 적은 활성을 나타낸다. 디티오포스페이트 연결된 유사체의 경우, 2'3'-RR-(G)(2'F-A)는 디-OH 참조 화합물 2'3'-RR-(G)(A)와 비교하여 디기토닌 존재 하의 검정에서 활성의 대략 1.5배 개선을 나타내며, 반면에 디기토닌 부재 하에서는 활성이 거의 동일하다. 모노-F 화합물 3'2'-RR-(2'F-G)(A)는 디기토닌 부재 하의 검정에서 2'3'-RR-(G)(A) 화합물에 비해 활성의 대략 3배 개선을 나타내며, 반면에 디기토닌 존재 하의 검정에서는 대략 5배 더 적은 활성을 나타낸다. 디-F 화합물 2'3'-RR-(3'F-G)(2'F-A) 및 3'2'-RR-(2'F-G)(3'F-A)는 참조 화합물 2'3'-RR-(G)(A)에 비해 디기토닌 부재 하의 검정에서 각각 대략 2배 및 7배 더 활성이었다. 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물, 특히 디티오포스페이트 연결된 화합물에 대한 RR 이성질체는 디기토닌의 부재 하의 THP1 검정에서 개선된 활성을 나타내는 경향이 있었으며, 따라서 디-OH 참조 화합물과 비교하여 우수한 세포 흡수 특성을 나타낸다.
실시예 17: 모노-F-ML-CDN 화합물 26 및 35의 생체내 효능
공격성 뮤린 종양 모델에서 종양 성장을 억제하고 항종양 면역 반응을 유도하는 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물의 능력을 평가하기 위해, 6-8주령 암컷 C57BL/6 마우스 (군당 8마리의 마우스)의 측복부에 B16.SIY 흑색종 세포 (100 μL PBS 중 1x106개의 세포)를 이식하였다. 연구는 참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A)와 비교하여 수행하였으며, 여기서 마우스를 2'3'-RR-(G)(2'F-A) (실시예 6, 화합물 26) 또는 3'2'-RR-(2'F-G)(A) (실시예 8, 화합물 35)로 처리하였다. 각각의 화합물을 총 부피 40 μL HBSS 중 1, 10 및 100 μg으로 투여하고, 총 부피 40 μL HBSS 중 10 μg 및 100 μg의 2'3'-RR-(A)(A) 또는 HBSS 비히클 대조군과 비교하였다. 종양 이식 후 대략 제9일에 종양이 대략 100 mm3의 부피에 도달하였을 때 처리를 시작하였다. 화합물을 1주에 걸쳐 총 3회의 주사로 27-게이지 바늘을 사용하여 종양의 중심 내 (IT)로의 피하 주사에 의해 투여하였다. 종양을 매주 2회 측정하였다. 생존 마우스를 종양 이식 후 제45일 후에 리챌린지하고, 나이브 (비챌린지) 마우스에서의 종양 성장과 비교하여 종양 생장을 거부하는 능력에 대해 모니터링하였다.
도 5a에 제시된 바와 같이, 화합물 26은 참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A)와 비교하여 시험된 모든 용량에서 강력한 종양 억제를 나타내며, 완전한 종양 거부는 100 μg 용량에서 나타났다. 참조 화합물 및 화합물 26에 대한 100 μg 용량 군에서의 생존 마우스를 제45일에 B16-SIY (100 μL PBS 중 1x106개의 세포)로 리챌린지하였으며, 참조 화합물과 유사하게 대다수의 마우스에서 종양 이식 거부가 발견되었다 (도 5b). 유사하게, 화합물 35는 시험된 모든 용량에서 강력한 종양 억제를 나타냈으며, 완전한 종양 거부는 100 μg 용량에서 나타났다 (도 5c). 100 μg 용량 군에서의 생존 마우스를 제56일에 리챌린지하였으며, 대다수의 마우스는 또한 참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A)와 유사하게 종양 챌린지를 거부하였다 (도 5d). 이들 데이터는 공격성 뮤린 종양 모델에서 구아닌-아데닌 모노-F-ML-CDN 화합물의 강력하고 지속적인 항종양 효과를 입증한다.
항종양 효과가 적응 T 세포 면역 반응에 의해 매개된다는 것을 입증하기 위해, 상기와 같이 처리된 마우스를 제3 IT 주사 후 제7일에 출혈시키고, SIY-특이적 오량체 유동 세포측정법 (FACS)에 의해 SIY 종양 항원에 대한 면역 반응을 평가하였다. PBMC (2x105개)를 피콜 구배에 의해 준비하고, 항-CD16/32 모노클로날 항체와 함께 사전-인큐베이션하여 잠재적인 비특이적 결합을 차단한 다음, SIYRYYGL (SIY) (서열식별번호: 17) 펩티드에 복합체화된 뮤린 H-2Kb, 항-TCRβ-AF700 (H57-597), 항-CD8-퍼시픽 블루 (53-6.7), 항-CD4-퍼시픽 오렌지 (RM4-5) (모두 캘리포니아주 샌디에고 소재 바이오레전드로부터의 항체임) 및 픽서블 바이어빌러티 다이 이플루오르 450 (캘리포니아주 샌디에고 소재 이바이오사이언스)으로 이루어진 PE-MHC 부류 I 오량체 (프로이뮨, 플로리다주 사라소타)로 표지하였다. 염색된 세포를 FACS디바 소프트웨어가 구비된 FACS 버사 세포측정기 (비디 바이오사이언시스, 캘리포니아주 산호세)를 사용하여 분석하였다. 데이터 분석을 플루우조 소프트웨어 (트리 스타, 오레곤주 앳슈랜드)로 수행하였다.
도 6a에 제시된 바와 같이, 2'3'-RR-(G)(2'F-A) (화합물 26)는 HBSS와 비교하여, 1 μg 용량에서 SIY 펩티드 자극에 반응하여 IFNγ의 유의하게 더 높은 T 세포 생산을 도출하며, 10 μg에서 참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A)에 필적하는 T 세포 반응을 도출한다 (* P < 0.05, 스튜던트 t- 검정). 도 6b에 제시된 바와 같이, 3'2'-RR-(2'F-G)(A) (화합물 35)는 나이브, 비챌린지 마우스와 비교하여, 1 μg 용량에서, 반응이 전체 참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A)보다 낮긴 하지만 측정가능한 T 세포 반응을 나타낸다. 이들 데이터는 이들 구아닌-아데닌 모노-F-ML-CDN 화합물의 강력한 항종양 효과가 항원-특이적이고 T 세포 매개된다는 것을 입증한다.
실시예 18: 모노- 또는 디-F-ML-CDN 화합물 5, 10, 20, 49 및 50의 생체내 효능
참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A)와 비교하여 항종양 면역 반응을 평가하기 위해 일련의 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물에 대한 연구를 또한 수행하였다. 마우스를 2'3'-RR-(3'F-A)(2'F-A) (실시예 2, 화합물 5), 2'3'-RR-(3'βF-A)(2'F-A) (실시예 3, 화합물 10), 2'3'-RR-(3'F-A)(A) (실시예 5, 화합물 20), 2'3'-RR-(3'F-G)(2'F-A) (실시예 12, 화합물 49) 또는 2'3'-RR-(3'데카노일-O-G)(2'F-A) (실시예 6, 화합물 50)로 처리하였으며, 여기서 각각의 화합물을 총 부피 40 μL HBSS 중 0.1, 1, 10 및 100 μg으로 투여하고, 총 부피 40 μL HBSS 중 1 μg 2'3'-RR-(A)(A) 또는 HBSS 비히클 대조군과 비교하였다. 종양 이식 후 대략 제9일에 종양이 대략 100 mm3의 부피에 도달하였을 때 처리를 시작하였다. 화합물을 27-게이지 바늘을 사용하여 종양의 중심 내 (IT)로의 단일 피하 주사에 의해 투여하였다. 종양을 매주 2회 측정하였다. 마우스를 IT 주사 후 제7일에 안락사시키고, 비장을 수거하고, 비장세포를 준비하였다. 비장세포 (2x105개)를 항-CD16/32 모노클로날 항체와 함께 사전-인큐베이션하여 잠재적인 비특이적 결합을 차단하고, SIYRYYGL (SIY) (서열식별번호: 17) 펩티드에 복합체화된 뮤린 H-2Kb, 항-TCRβ-AF700 (H57-597), 항-CD8-퍼시픽 블루 (53-6.7), 항-CD4-퍼시픽 오렌지 (RM4-5) (모두 바이오레전드로부터의 항체임) 및 픽서블 바이어빌러티 다이 이플루오르 450 (이바이오사이언스)으로 이루어진 PE-MHC 부류 I 오량체 (프로이뮨)로 표지하였다. 염색된 세포를 FACS디바 소프트웨어가 구비된 FACS 버사 세포측정기 (비디 바이오사이언시스)를 사용하여 분석하였다. 데이터 분석을 플루우조 소프트웨어 (트리 스타)로 수행하였다. 추가적으로, 비장세포를 배지 단독 하의 또는 1 μM SIYRYYGL (SIY) (서열식별번호: 17) 펩티드 존재 하의 IFNγ ELISPOT 검정에서 밤새 자극하였다. IFNγ ELISPOT 플레이트를 발색시키고, CTL 플레이트 판독기 및 이뮤노스팟 소프트웨어를 사용하여 정량화하였다.
안전성 및 내약성의 척도로서 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물에 의한 전신 혈청 시토카인의 상대 유도를 평가하기 위해, 마우스를 제1 IT 주사 6시간 후에 출혈시키고, 그의 혈청을 마우스 염증 세포측정 비드 어레이 (CBA, 비디 바이오사이언시스)에 의해 평가하였다. 도 7a - d에 제시된 바와 같이 (7a-화합물 5, 7b-화합물 10, 7c-화합물 20, 7d-화합물 49), 1 μg 용량에서의 염증유발 시토카인 (TNF-α, IL-6, MCP-1 및 IFN-γ)의 농도는 2'3'-RR-(A)(A)와 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물 5, 10, 20 및 49 사이에서 유사하였다. 도 7e에 제시된 바와 같이, 화합물 50은 2'3'-RR-(A)(A)보다 유의하게 더 낮은 전신 시토카인을 나타냈다 (* P < 0.05, ** P < 0.01, *** P < 0.001, 스튜던트 t- 검정). 이들 데이터는, 참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A)와 비교하여 화합물 5, 10, 20 및 49에 대한 유사한 안전성 프로파일 및 화합물 50에 대한 우수한 안전성 프로파일을 입증한다.
수거 시에, 모든 화합물은 1 μg 용량의 참조 화합물 2'3'-RR-(A)(A) 및 HBSS 대조군과 비교하여 용량-의존성 방식으로 측정가능한 항종양 반응을 나타냈으며, 화합물 10은 100 μg 용량에서 완전한 종양 억제를 나타냈다 (도 8). SIY 종양 항원에 대한 면역 반응을 SIY-특이적 CD8+ T 세포의 FACS 오량체 염색에 의해서 뿐만 아니라 ELISPOT에 의한 SIY 펩티드 자극에 반응하는 IFNγ 생산에 의해 측정하였다. 도 9a에 제시된 바와 같이, 화합물 5, 10, 20 및 49 모두는 HBSS 대조군보다 유의하게 더 높은 빈도의 SIY+ CD8+ T 세포를 나타내고, 화합물 20을 제외한 모두는 1 μg 용량에서 2'3'-RR-(A)(A)와 필적하는 반응을 나타낸다. 추가로, 화합물 50은 참조 화합물과 비교하여 10 μg 용량에서 유의하게 더 높은 T 세포 반응을 나타냈다 (* P < 0.05, ** P < 0.01, *** P < 0.001, 스튜던트 t- 검정). 항원 특이적 T 세포 관능성의 척도로서, 이들 T 세포는 FACS 검정에 대한 경향을 반영하는 방식으로 ELISPOT 검정에서 SIY 펩티드 자극에 반응하여 IFNγ를 분비할 수 있었다 (도 9b). 이들 데이터는 항원-특이적 방식으로 기능적 T 세포-매개된 항종양 면역을 도출하는 이들 모노- 및 디-F-ML-CDN 화합물의 능력을 입증한다.
관련 기술분야의 통상의 기술자는 본 발명이 목적을 수행하고 언급된 목표 및 장점 뿐만 아니라 그 안에 고유한 것을 얻기 위해 잘 적합화된다는 것을 용이하게 인지할 것이다. 본원에 제공된 실시예는 바람직한 실시양태를 대표하고, 예시적이며, 본 발명의 범주에 대한 제한으로 의도되지 않는다.
본 발명은 그 적용에 있어서 하기 설명에 기재되거나 도면에 예시된 성분의 구성 및 배열의 세부사항에 제한되지 않는다는 것이 이해되어야 한다. 본 발명은 기재된 것 이외의 실시양태를 수용할 수 있으며, 다양한 방식으로 실시 및 수행될 수 있다. 또한, 본원 뿐만 아니라 요약서에서 사용되는 어구 및 용어는 설명을 목적으로 하는 것이며, 제한하는 것으로 간주되어서는 안된다는 것이 이해되어야 한다.
따라서, 관련 기술분야의 통상의 기술자는 본 개시내용이 기초하는 개념이 본 발명의 여러 목적을 수행하기 위한 다른 구조, 방법 및 시스템의 설계를 위한 기초로서 용이하게 이용될 수 있다는 것을 인지할 것이다. 따라서, 본 발명의 취지 및 범주에서 벗어나지 않는 한, 이러한 등가의 구성은 청구범위에 포함되는 것으로 간주된다는 것이 중요하다.
본 발명은 본 기술분야의 통상의 기술자가 이를 제조 및 사용하기에 충분히 상세하게 기재 및 예시되었지만, 본 발명의 취지 및 범주에서 벗어나지 않는 다양한 변경, 변형 및 개선이 분명할 것이다. 본원에 제공된 실시예는 바람직한 실시양태를 대표하고, 예시적이며, 본 발명의 범주에 대한 제한으로 의도되지 않는다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 그 안의 변형 및 다른 사용을 수행할 것이다. 이들 변형은 본 발명의 취지 내에 포괄되고, 청구범위의 범주에 의해 정의된다.
치환 및 변형을 변경하는 것이 본 발명의 범주 및 취지를 벗어나지 않으면서 본원에 개시된 본 발명에 대해 이루어질 수 있다는 것이 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 자명할 것이다.
명세서에 언급된 모든 특허 및 공개는 본 발명이 속하는 관련 기술분야의 통상의 기술자의 수준을 나타낸다.
본원에 예시적으로 기재된 본 발명은 본원에 구체적으로 개시되지 않은 임의의 요소 또는 요소들, 제한 또는 제한들의 부재 하에 실시될 수 있다. 따라서, 예를 들어, 본원에서의 각각의 예에서 용어 "포함하는", "본질적으로 이루어진" 및 "이루어진" 중 어느 것은 다른 두 용어 중 어느 하나로 대체될 수 있다. 사용된 용어 및 표현은 설명의 관점으로서 사용되고, 제한적인 것이 아니며, 이러한 용어 및 표현을 사용함에 있어 제시 및 기재된 특색 또는 그의 부분의 어떠한 등가물도 배제하려는 의도는 없으나, 다양한 변형이 청구된 본 발명의 범주 내에서 가능한 것으로 인지된다. 따라서, 본 발명이 바람직한 실시양태 및 임의적인 특색에 의해 구체적으로 개시되었지만, 본원에 개시된 개념의 변형 및 변경이 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 이루어질 수 있으며, 이러한 변형 및 변경이 첨부된 청구범위에 의해 정의된 바와 같은 본 발명의 범주 내에 있는 것으로 간주된다는 것이 이해되어야 한다.
다른 실시양태는 하기 청구범위에 기재된다.
SEQUENCE LISTING
<110> ADURO BIOTECH, INC.
NOVARTIS AG
<120> COMPOSITIONS AND METHODS FOR ACTIVATING "STIMULATOR OF INTERFERON
GENE"-DEPENDENT SIGNALLING
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Phe Arg Gly Val Gly Leu Leu Asn Thr Gly Ser Tyr Tyr Glu His Val
50 55 60
Lys Ile Ser Ala Pro Asn Glu Phe Asp Val Met Phe Lys Leu Glu Val
65 70 75 80
Pro Arg Ile Gln Leu Glu Glu Tyr Ser Asn Thr Arg Ala Tyr Tyr Phe
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100 105 110
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115 120 125
Ile Ile Lys Glu Glu Ile Asn Asp Ile Lys Asp Thr Asp Val Ile Met
130 135 140
Lys Arg Lys Arg Gly Gly Ser Pro Ala Val Thr Leu Leu Ile Ser Glu
145 150 155 160
Lys Ile Ser Val Asp Ile Thr Leu Ala Leu Glu Ser Lys Ser Ser Trp
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Thr Cys Cys Glu Asn Lys Glu Glu Lys Cys Cys Arg Lys Asp Cys Leu
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Lys Lys His Leu Asp Lys Phe Ser Ser Tyr His Val Lys Thr Ala Phe
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Asp Leu Gly Leu Cys Phe Asp Asn Cys Val Thr Tyr Phe Leu Gln Cys
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20 25 30
Leu Leu Arg Arg Met Gln Lys Arg Glu Ser Glu Phe Lys Gly Val Glu
35 40 45
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50 55 60
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65 70 75 80
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100 105 110
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115 120 125
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130 135 140
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355 360
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Ser Ile Tyr Arg Tyr Tyr Gly Leu
1 5
Claims (38)
- 화학식 I의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
여기서
R1 및 R2는 독립적으로 N9 위치를 통해 구조에 결합된 구아닌 또는 아데닌이며, 단 R1 및 R2는 둘 다 구아닌이 아니고;
R3 및 R4는 독립적으로 -H, -OH, -O-C(=O)-C1-14 알킬 또는 -F이며, 단 R3 및 R4 중 적어도 하나는 -F이고;
X1 및 X2는 독립적으로 -OH 또는 -SH이다. - 제1항에 있어서, 화학식 I-c의 화합물인 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, R3 및 R4가 독립적으로 -OH 또는 -F이며, 단 R3 및 R4 중 적어도 하나는 -F인 화합물.
- 화학식 IA의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
여기서
R3a 및 R4a는 독립적으로 -H, -OH, -O-C(=O)-C1-14 알킬 또는 -F이며, 단 R3a 및 R4a 중 적어도 하나는 -F이고;
X1a 및 X2a는 독립적으로 -OH 또는 -SH이다. - 제4항에 있어서, 화학식 IA-c의 화합물인 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
- 제4항 또는 제5항에 있어서, R3a 및 R4a가 독립적으로 -OH 또는 -F이며, 단 R3a 및 R4a 중 적어도 하나는 -F인 화합물.
- 화학식 IB의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
여기서
R1b 및 R2b 중 하나는 N9 위치를 통해 구조에 결합된 구아닌이고, R1b 및 R2b 중 다른 것은 N9 위치를 통해 구조에 결합된 아데닌이고;
R3b 및 R4b는 독립적으로 -H, -OH, -O-C(=O)-C1-14 알킬 또는 -F이며, 단 R3b 및 R4b 중 적어도 하나는 -F이고;
X1b 및 X2b는 독립적으로 -OH 또는 -SH이다. - 제7항에 있어서, 화학식 IB-g의 화합물인 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
- 제7항에 있어서, 화학식 IB-n의 화합물인 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
- 제7항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, R3b 및 R4b가 독립적으로 -OH 또는 -F이며, 단 R3b 및 R4b 중 적어도 하나는 -F인 화합물.
- 제1항에 있어서, 화학식 IC의 화합물인 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
여기서
R1c 및 R2c는 독립적으로 N9 위치를 통해 구조에 결합된 구아닌 또는 아데닌이며, 단 R1c 및 R2c는 둘 다 구아닌이 아니고;
R4c는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고;
X1c 및 X2c는 독립적으로 -OH 또는 -SH이다. - 제1항에 있어서, 화학식 ID의 화합물인 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
여기서
R1d 및 R2d는 독립적으로 N9 위치를 통해 구조에 결합된 구아닌 또는 아데닌이며, 단 R1d 및 R2d는 둘 다 구아닌이 아니고;
R3d는 -H, -OH 또는 -O-C(=O)-C1-14 알킬이고;
X1d 및 X2d는 독립적으로 -OH 또는 -SH이다. - 제1항에 있어서, 화학식 IE의 화합물인 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
여기서
R1e 및 R2e는 독립적으로 N9 위치를 통해 구조에 결합된 구아닌 또는 아데닌이며, 단 R1e 및 R2e는 둘 다 구아닌이 아니고;
X1e 및 X2e는 독립적으로 -OH 또는 -SH이다. - 제1항에 있어서, 하기 구조를 갖는 2'3'-RR-(3'F-A)(2'F-A)인 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
- 제1항에 있어서, 하기 구조를 갖는 2'3'-RR-(3'βF-A)(2'F-A)인 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
- 제1항에 있어서, 하기 구조를 갖는 2'3'-RR-(A)(2'F-A)인 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
- 제1항에 있어서, 하기 구조를 갖는 2'3'-RR-(3'F-A)(A)인 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
- 제1항에 있어서, 하기 구조를 갖는 2'3'-RR-(3'H-A)(2'F-A)인 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
- 제1항에 있어서, 하기 구조를 갖는 2'3'-RR-(G)(2'F-A)인 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
- 제1항에 있어서, 하기 구조를 갖는 2'3'-RR-(3'데카노일-O-G)(2'F-A)인 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
- 제1항에 있어서, 하기 구조를 갖는 2'3'-RR-(3'F-G)(2'F-A)인 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
- 제1항에 있어서, 하기 구조를 갖는 3'2'-RR-(2'F-G)(3'F-A)인 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
- 제1항에 있어서, 하기 구조를 갖는 3'2'-RR-(2'F-G)(A)인 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
- 제1항에 있어서, 하기 구조를 갖는 2'3'-(G)(2'F-A)인 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
- 제1항에 있어서, 하기 구조를 갖는 2'3'-(3'F-G)(2'F-A)인 화합물 또는 그의 전구약물, 제약상 허용되는 염, 제약상 허용되는 용매화물 또는 제약상 허용되는 수화물.
- 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 따른 1종 이상의 화합물 및 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 조성물.
- 제26항에 있어서, 1종 이상의 화합물의 세포 투과성을 증진시키는 작용제 또는 1종 이상의 화합물의 세포 내로의 흡수를 증진시키는 작용제를 포함하지 않는 조성물.
- 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 따른 1종 이상의 화합물 및 화합물의 세포 흡수 및/또는 안정성을 증진시키는 전달 비히클을 포함하는 조성물.
- 제28항에 있어서, 전달 비히클이 지질, 리포솜, 이중층내 가교된 다층 소포, 생분해성 폴리(D,L-락트산-코-글리콜산) [PLGA]-기재 또는 폴리 무수물-기재 나노입자 또는 마이크로입자, 및 나노다공성 입자-지지된 지질 이중층으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 작용제를 포함하는 것인 조성물.
- 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 따른 1종 이상의 화합물 및 면역 체크포인트 억제제; 톨-유사 수용체 (TLR) 효능제; TLR을 통해, (NOD)-유사 수용체 (NLR)를 통해, 레티노산 유도성 유전자-기반 (RIG)-I-유사 수용체 (RLR)를 통해, C-유형 렉틴 수용체 (CLR)를 통해, 또는 병원체-연관된 분자 패턴 ("PAMP")을 통해 선천성 면역 활성화를 매개하는 조성물; 및 화학요법제로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 작용제를 포함하는 조성물.
- 제30항에 있어서, 1종 이상의 작용제가 면역 체크포인트 억제제인 조성물.
- 제30항에 있어서, 1종 이상의 작용제가 히스톤 데아세틸라제 억제제인 조성물.
- 제26항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 개체에게 투여되는 경우에 항원(들)에 대한 면역 반응을 유도하기 위한 목적으로 선택된 1종 이상의 항원을 추가로 포함하는 조성물이며, 임의로 여기서 항원은 1종 이상의 재조합 단백질 항원이고, 여기서 재조합 단백질 항원은 신생항원이거나, 감염성 질환과 관련되거나, 악성종양과 관련되거나, 알레르기와 관련된 것인 조성물.
- 암을 앓고 있는 개체에게 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 제26항 내지 제33항 중 어느 한 항에 따른 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함하는, 상기 개체를 치료하는 방법.
- 제34항에 있어서, 투여가 정맥내, 피하, 근육내, 피내, 경구, 점막, 질, 자궁경부, 종양주위, 종양내, 또는 직접 종양-배액 림프절(들) 내로의 투여인 방법.
- 제34항 또는 제35항에 있어서, 개체에게 1종 이상의 추가의 암 요법을 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.
- 질환의 치료를 필요로 하는 개체에게 i) 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 제26항 내지 제33항 중 어느 한 항에 따른 조성물의 유효량; 및 ii) 항체-의존성 세포성 세포독성을 유도하는 1종 이상의 치료 항체의 유효량을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 질환은 암, 기관 이식의 급성 거부, 제I형 당뇨병, 류마티스 관절염, 건선, 크론병, 재협착 및 알레르기성 천식으로 이루어진 군으로부터 선택된 것인, 상기 개체에서 질환을 치료하는 방법.
- 제37항에 있어서, 투여가 정맥내, 피하, 근육내, 피내, 경구, 점막, 질, 자궁경부, 종양주위, 종양내, 또는 직접 종양-배액 림프절(들) 내로의 투여인 방법.
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