KR20180011780A - 암을 치료하는 방법 - Google Patents

암을 치료하는 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20180011780A
KR20180011780A KR1020177034603A KR20177034603A KR20180011780A KR 20180011780 A KR20180011780 A KR 20180011780A KR 1020177034603 A KR1020177034603 A KR 1020177034603A KR 20177034603 A KR20177034603 A KR 20177034603A KR 20180011780 A KR20180011780 A KR 20180011780A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
rad1901
tumor
tumor growth
dose
treatment
Prior art date
Application number
KR1020177034603A
Other languages
English (en)
Other versions
KR102676629B1 (ko
Inventor
피오나 가너
개리 해터슬리
Original Assignee
래디어스 파마슈티컬스, 인코포레이티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 래디어스 파마슈티컬스, 인코포레이티드 filed Critical 래디어스 파마슈티컬스, 인코포레이티드
Priority to KR1020247019929A priority Critical patent/KR20240095372A/ko
Publication of KR20180011780A publication Critical patent/KR20180011780A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102676629B1 publication Critical patent/KR102676629B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A61K31/137—Arylalkylamines, e.g. amphetamine, epinephrine, salbutamol, ephedrine or methadone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A61K31/138—Aryloxyalkylamines, e.g. propranolol, tamoxifen, phenoxybenzamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/436—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having oxygen as a ring hetero atom, e.g. rapamycin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/565—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/565—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol
    • A61K31/568—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol substituted in positions 10 and 13 by a chain having at least one carbon atom, e.g. androstanes, e.g. testosterone
    • A61K31/5685—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol substituted in positions 10 and 13 by a chain having at least one carbon atom, e.g. androstanes, e.g. testosterone having an oxo group in position 17, e.g. androsterone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/675—Phosphorus compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pyridoxal phosphate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/683—Diesters of a phosphorus acid with two hydroxy compounds, e.g. phosphatidylinositols
    • A61K31/685—Diesters of a phosphorus acid with two hydroxy compounds, e.g. phosphatidylinositols one of the hydroxy compounds having nitrogen atoms, e.g. phosphatidylserine, lecithin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Figure pct00027

약물-내성 에스트로겐 수용체 알파 양성 암 또는 돌연변이체 에스트로겐 수용체 알파 양성 암을 갖는 대상체에서 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법이 본 명세서에 개시된다. 상기 방법은 대상체에게 치료적 유효량의 상기 구조를 갖는 RAD1901 또는 이의 염 또는 용매화물을 투여하는 단계를 수반한다.

Description

암을 치료하는 방법
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 2015년 4월 29일자로 출원된 미국 가출원 특허 제62/154,699호, 2015년 4월 30일자로 출원된 미국 가출원 특허 제62/155,451호, 2015년 11월 6일자로 출원된 미국 가출원 특허 제62/252,085호, 2015년 12월 10일자로 출원된 미국 가출원 특허 제62/265,696호, 2015년 5월 7일자로 출원된 미국 가출원 특허 제62/158,469호, 2015년 11월 9일자로 출원된 미국 가출원 특허 제62/252,916호, 2015년 12월 10일자로 출원된 미국 가출원 특허 제62/265,774호, 2015년 7월 15일자로 출원된 미국 가출원 특허 제62/192,940호, 2015년 12월 10일자로 출원된 미국 가출원 특허 제62/265,658호, 2016년 4월 15일자로 출원된 미국 가출원 특허 제62/323,572호, 2015년 7월 15일자로 출원된 미국 가출원 특허 제62/192,944호, 2015년 12월 10일자로 출원된 미국 가출원 특허 제62/265,663호, 및 2016년 4월 15일자로 출원된 미국 가출원 특허 제62/323,576호의 유익을 주장하며, 이들 모두는 본 명세서에 그들의 전문이 참고로 포함된다.
유방암은 3가지 수용체의 발현에 기반하여 3가지 아형으로 분류된다: 에스트로겐 수용체(ER), 프로게스테론 수용체(PR) 및 인간 상피성장인자 수용체-2 (Her2). ER의 과발현은 다수의 유방암 환자에서 발견된다. ER-양성(ER+) 유방암은 모든 유방암의 2/3를 포함한다. 유방암 이외에, 에스트로겐 및 ER은, 예를 들어, 난소암, 결장암, 전립선암 및 자궁내막암과 관련된다.
ER은 에스트로겐에 의해 활성화되고, 핵 내로 전위되어 DNA에 결합됨으로써, 다양한 유전자의 활성을 조절할 수 있다. 예를 들어, 문헌[Estrogen Signaling Multiple Pathways to Impact Gene Transcription," Curr. Genomics 7(8): 497-508 (2006); 및 Heldring et al., "Estrogen Receptors: How Do They Signal and What Are Their Targets," Physiol. Rev. 87(3): 905-931 (2007)].
에스트로겐 생성을 저해하는 제제, 예컨대 방향화효소 저해제(aromatase inhibitor: AI, 예를 들어, 레트로졸, 아나스트로졸 및 아로마신), 또는 ER 활성을 직접적으로 차단하는 것, 예컨대 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(SERM, 예를 들어, 타목시펜, 토레미펜, 드롤록시펜, 이독시펜, 랄록시펜, 라소폭시펜, 아르족시펜, 미프록시펜, 레보르멜록시펜 및 EM-652(SCH 57068)) 및 선택적 에스트로겐 수용체 분해제(SERD, 예를 들어, 풀베스트란트, TAS-108(SR16234), ZK191703, RU58668, GDC-0810(ARN-810), GW5638/DPC974, SRN-927, ICI182782 및 AZD9496)는 이전에 사용되었거나 또는 ER-양성 유방암의 치료에서 개발 중에 있다.
SERM(예를 들어, 타목시펜) 및 AI는 종종 ER-양성 유방암에 대한 가장 중요한 보조제 전신 요법으로서 사용된다. 타목시펜은 현재 폐경 전 및 후 여성에서 초기와 진행된 ER-양성 유방암 둘 다에 대해 현재 사용된다. 그러나, 타목시펜은 혈액 응고 및 뇌졸중과 같은 심각한 부작용을 가질 수 있다. 타목시펜은 폐경 후 여성에서 골 손실을 예방할 수 있지만, 폐경 전 여성에서 골다공증을 야기할 수 있다. 타목시펜은 자궁내막에 대한 부분적 작용제로서 작용하기 때문에, 이는 또한 자궁내막암의 위험을 증가시킨다.
AI는 방향화효소의 활성을 차단함으로써 주변 조직에서 에스트로겐 생성을 억제하는데, 이는 결국 안드로겐을 신체 내 에스트로겐으로 전환시킨다. 그러나, AI는 난소가 에스트로겐을 생성하는 것을 중단시킬 수 없다. 따라서, AI는 폐경 후 여성을 치료하기 위해 주로 사용된다. 더 나아가, AI는 심각한 부작용이 더 적어서 타목시펜보다 훨씬 더 효과적이기 때문에, AI는 또한 난소 기능이 억제된 폐경전 여성을 치료하기 위해 사용될 수 있다. 예를 들어, 문헌[Francis et al., "Adjuvant Ovarian Suppression in Premenopausal Breast Cancer," the N. Engl. J. Med., 372:436-446 (2015)] 참조.
이들 제제에 의한 초기 치료는 성공적 수 있지만, 다수의 환자는 종국적으로 약물-내성 유방암이 재발한다. ER에 영향을 미치는 돌연변이는 이 내성의 발생을 위한 한 가지 잠재적 메커니즘으로서 나타났다. 예를 들어, 문헌[Robinson et al., "Activating ESR1 mutations in hormone-resistant metastatic breast cancer," Nat. Genet. 45:1446-51 (2013)] 참조. ER의 리간드 결합 도메인(LBD)에서의 돌연변이는 내분비 치료 중 적어도 하나의 계통을 받은 환자로부터의 21%의 전이성 ER-양성 유방 종양 샘플에서 발견된다. 문헌[Jeselsohn, et al., "ESR1 mutations - a mechanism for acquired endocrine resistance in breast cancer," Nat. Rev. Clin. Oncol., 12:573-83 (2015)] 참조.
풀베스트란트는 항에스트로겐 요법 후에 질환이 진행된 ER-양성 전이성 유방암의 치료용으로 승인된 현재의 유일한 SERD이다. 임상 효능에도 불구하고, 풀베스트란트의 효용은 단일 주사로 투여될 수 있는 약물의 양에 의해 그리고 감소된 생체 이용 가능성에 의해 제한되었다. 18F-플루오로에스트라다이올 양전자 방출 단층촬영술(FES-PET)을 이용하는 영상화 연구는 500㎎ 용량 수준에서 조차, 일부 환자가 완전한 ER 저해를 가질 수 없고, 불충분한 투약이 요법 실패에 대한 이유일 수 있다는 것을 시사한다.
에스트로겐-관련 요법과 관련된 다른 도전은 자궁, 뼈 및 다른 조직에 대한 바람직하지 않은 효과를 가질 수 있다는 것이다. ER은 매우 다양한 조직 및 세포 유형에서 에스트로겐-반응 유전자의 전사를 지시한다. 이는 에스트로겐 및 다른 난소 호르몬의 내인성 수준이 폐경기 동안 감소하기 때문에 특히 확연할 수 있다. 예를 들어, 타목시펜은 폐경전 여성의 골다공증을 야기하고, 자궁내막암의 위험을 증가시킬 수 있는데, 그것이 자궁내막에 대한 부분적 작용제로서 작용하기 때문이다. 폐경 후 여성에서, AI는 타목시펜보다 더 많은 골 손실 및 더 많은 골절을 야기할 수 있다. 풀베스트란트로 치료된 환자는 또한 그의 메커니즘에 기인하여 골다공증의 위험에 노출될 수 있다.
따라서, 현재의 내분비 요법과 관련된 일부 도전을 극복하기 위한 그리고 내성의 발생과 싸우기 위한 더 지속 가능하고 효과적인 ER-표적화된 요법에 대한 필요가 남아있다.
일 양상에서, 본 개시내용은 약물-내성 에스트로겐 수용체 알파 양성 암을 갖는 대상체에서 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 대상체에게 치료적 유효량의 하기 구조를 갖는 RAD1901 또는 이의 염 또는 용매화물을 투여하는 단계를 수반한다:
Figure pct00001
다른 양상에서, 본 개시내용은 돌연변이체 에스트로겐 수용체 알파 양성 암을 갖는 대상체에서 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 대상체에게 치료적 유효량의 하기 구조를 갖는 RAD1901을 투여하는 단계를 수반한다:
Figure pct00002
일부 실시형태에서, 상기 암은 유방암, 자궁암, 난소암 및 뇌하수체 암을 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, 암은 전이성 암이다. 일부 실시형태에서, 암은 Y537X1, L536X2, P535H, V534E, S463P, V392I, E380Q 및 이들의 조합(여기서, X1은 S, N 또는 C임), D538G; (X2는 R 또는 Q임)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 돌연변이를 포함하는 돌연변이체 에스트로겐 수용체 알파에 대해 양성이다. 예를 들어, 돌연변이는 Y537S이다.
일부 실시형태에서, 종양은 항-에스트로겐, 방향화효소 저해제 및 이들의 조합물로 이루어진 군으로부터 선택된 약물에 대해 내성이 있다. 예를 들어, 항-에스트로겐은 타목시펜 또는 풀베스트란트이고, 방향화효소 저해제는 아로마신이다.
도 1: ESR1 상태 및 사전 내분비 요법과 상관 없이 다양한 환자 유래 이종이식(PDx) 모델에서 RAD1901이 종양 성장을 저해하였다는 것을 도시한 도면. RAD1901로 치료한 PDx 모델에서 종양 성장 저해(TGI)의 백분율을 나타낸다.
도 2a 내지 도 2e: 야생형(WT) ERα MCF-7 마우스 이종이식 모델(PR+, Her2-)에서 RAD1901이 종양 성장 및 종양 퇴행의 용량 의존적 저해를 보여주는 것을 도시한 도면. (도 2a): 박스 및 위스커(whisker)는 비히클 대조군, RAD1901(0.3, 1, 3, 10, 30, 및 60㎎/㎏ p.o., q.d.), 타목시펜(TAM)(1㎎/용량, s.c., q.o.d.) 및 풀베스트란트(FUL)(0.5㎎/용량, s.c., q.d.)로 치료한 MCF-7 마우스 이종이식 모델에서 그룹에 따른 제40일 종양 용적을 나타낸다; (도 2b): 비히클 대조군, RAD1901(60, 90 및 120㎎/㎏, p.o. q.d.), 타목시펜(1㎎/용량, s.c., q.o.d.) 및 풀베스트란트(0.5㎎/용량, s.c., q.d.)로 치료한 MCF-7 마우스 이종이식 모델에서 시간에 따른 중앙값 종양 용적(도 2c): 비히클 대조군, RAD1901(60, 90 및 120㎎/㎏, p.o., q.d.), 타목시펜(1㎎/용량, s.c., q.o.d.) 및 풀베스트란트(0.5㎎/용량, s.c., q.d.)로 치료한 MCF-7 마우스 이종이식 모델에서 제42일에 개개 동물로부터의 종양 용적; (도 2d): 비히클 대조군, RAD1901 (RAD)(0.3, 1, 3, 10, 30 및 60㎎/㎏ p.o., q.d.), 타목시펜(1㎎/용량, s.c., q.o.d.) 및 풀베스트란트(0.5㎎/용량, s.c., q.d.)로 치료한 MCF-7 마우스 이종이식 모델에서 시간에 따른 중앙값 종양 용적; (도 2e): 비히클 대조군, RAD1901(RAD)(0.3, 1, 3, 10, 30 및 60㎎/㎏ p.o., q.d.), 타목시펜(1㎎/용량, s.c., q.o.d.) 및 풀베스트란트(0.5㎎/용량, s.c., q.d.)로 치료한 MCF-7 마우스 이종이식 모델에서 제1일로부터의 그룹 평균 체중 변화%.
도 3A 내지 도 3B: RAD1901은 WT ERα MCF-7 이종이식 모델(PR+, Her2-)에서 종양 성장 저해 및 종양 퇴행을 보여주는 도면. (도 3A): 비히클 대조군, RAD1901(30 및 60㎎/㎏, p.o., o.d.) 및 풀베스트란트(3㎎/용량, s.c., qwk)로 치료한 MCF-7 이종이식 모델의 종양 성장; (도 3B): 비히클 대조군, RAD1901(30 및 60㎎/㎏, p.o., o.d.) 및 풀베스트란트(3㎎/용량, s.c., qwk)로 치료한 MCF-7 이종이식 모델에서의 연구 마지막에 기준으로부터의 개개 종양 크기 변화.
도 4A 내지 도 4B: RAD1901은 WT ERα PDx-4 모델(PR+, Her2-, 치료 나이브)에서 종양 성장 저해 및 종양 퇴행을 보여주는 도면. (도 4A): 비히클 대조군, RAD1901(30, 60 및 120㎎/㎏, p.o., o.d.) 및 풀베스트란트(3㎎/용량, s.c., qwk)로 치료한 PDx-4 모델의 종양 성장; (도 4B): 비히클 대조군, RAD1901(30, 60, 120㎎/㎏, p.o., o.d.) 및 풀베스트란트(3㎎/용량, s.c., qwk)로 치료한 PDx-4 모델에서 기준으로부터 연구 마지막까지 개개 종양 크기의 변화.
도 5: RAD1901의 효능은 RAD1901 치료가 종료된 후 적어도 2개월 동안 지속된 반면, 에스트라다이올 치료는 WT ERα PDx-4 모델(PR+, Her2-, 치료 나이브)에서 계속되었다. 비히클 대조군, RAD1901 (30㎎/㎏, p.o., q.d.) 및 풀베스트란트(1㎎/용량, s.c., qwk)로 치료한 PDx-4 모델의 종양 성장.
도 6: RAD1901은 WT ERα PDx-2 모델(PR+, Her2+, 치료 나이브)에서 종양 성장 저해를 도시한 도면. 비히클 대조군, RAD1901(60㎎/㎏, p.o., q.d.), 풀베스트란트(3㎎/용량, s.c., qwk) 및 (60㎎/㎏, p.o., q.d.) 및 풀베스트란트(3㎎/용량, s.c., qwk)의 조합물로 치료한 PDx-2 모델의 종양 성장. n = 8 내지 10/그룹.
도 7A 내지 도 7B: RAD1901은 WT ERα PDx-11 모델에서 종양 성장 저해 및 종양 퇴행을 입증하였다(방향화효소 저해제, 풀베스트란트, 및 화학요법으로 이미 치료한 PR+, Her2+). (도 7A): 비히클 대조군, RAD1901(60㎎/㎏, p.o., q.d.) 및 풀베스트란트(3㎎/용량, s.c., qwk)로 치료한 PDx-11 모델의 종양 성장; (도 7B): 비히클 대조군, RAD1901(60㎎/㎏, p.o., q.d.) 및 풀베스트란트(3㎎/용량, s.c., qwk)로 치료한 PDx-11 모델에서 기준으로부터 연구 마지막까지의 개개 종양 크기의 변화. n = 8 내지 10/그룹.
도 8: RAD1901은 WT ERα PDx-12 모델(PR+, Her2+, 치료 나이브)에서 다양한 용량에서 종양 성장 저해 및 종양 퇴행을 보여준 도면. 비히클 대조군, RAD1901(30 및 60㎎/㎏, p.o., q.d.) 및 풀베스트란트(1㎎/용량, s.c., qwk)로 치료한 PDx-11 모델의 종양 성장.
도 9a 내지 도 9c: RAD1901은 돌연변이체(Y537S) ERα PDx-5 모델에서 종양 성장 저해를 보여주는 도면(PR+, Her2+, 방향화효소 저해제에 의한 사전 치료). (도 9a): 비히클 대조군, RAD1901(60, 120㎎/㎏, p.o., q.d.) 및 풀베스트란트(3㎎/용량, s.c., qwk)로 치료한 PDx-11 모델의 종양 성장; (도 9b): 비히클 대조군, RAD1901(60, 120㎎/㎏, p.o., q.d.), 및 풀베스트란트(3㎎/용량, s.c., qwk)로 치료한 PDx-5 모델에서 기준으로부터 제17일까지의 개개 종양 크기의 변화; (도 9c): RAD1901(60, 120㎎/㎏, p.o., q.d.)로 치료한 PDx-5 모델에서 기준으로부터 제56일가지의 개개 종양 크기의 변화.
도 10a 내지 도 10b: RAD1901은 돌연변이체(Y537S) ERα PDx-6 모델(PR+, Her2:1+, 사전에 타목시펜, 방향화효소 저해제 및 풀베스트란트로 치료)에서 종양 성장 저해 및 종양 퇴행을 보여주는 도면. (도 10a): 비히클 대조군, RAD1901(30, 60 및 120㎎/㎏ p.o., q.d.), 타목시펜(1㎎/용량, s.c., q.o.d.) 및 풀베스트란트(1㎎/용량, s.c., qwk)로 치료한 PDx-6 모델의 종양 성장; (도 10b): 비히클 대조군, RAD1901(30, 60 및 120㎎/㎏ p.o., q.d.), 및 풀베스트란트(1㎎/용량, s.c., qwk)로 치료한 PDx-6 모델에서 기준으로부터 연구의 마지막까지 개개 종양 크기의 변화.
도 11: 누드 마우스에서 풀베스트란트의 약동학적 분석. 1㎎/용량(민무늬 다이아몬드), 3㎎/용량(민무늬 원) 및 5㎎/용량(민무늬 삼각형)에서 풀베스트란트의 혈장 농도를 나타낸다. 제1일에 누드 마우스에 풀베스트란트를 피하로 투약하고 나서, 제8일에 두 번째로 투약하였다. 풀베스트란트의 혈장 농도를 두 번째 투약 후 168시간까지 동안 표시 시점에 모니터링하였다.
도 12: 두개 내 MCF-7 종양 모델에서 마우스 생존에 대한 RAD1901 및 풀베스트란트(파슬로덱스)의 효과를 도시한 도면.
도 13: ER+ 진행 유방암에 대한 RAD1901 치료의 1상 연구.
도 14a 내지 도 14b: ER+ 진행 유방암에 대한 RAD1901 치료의 1상 연구에 등록된 대상체의 사전 치료 이력 및 RAD1901 치료. (도 14a): 사전 암 치료; (도 14b): RAD1901 치료.
도 15a 내지 도 15c: 200 및 500㎎ RAD1901 p.o., q.d.로 치료한 대상체 자궁의 FES-PET 스캔의 대표적인 영상, 및 RAD1901 치료 후 ER 맞물림의 변화. (도 15a): 200㎎ RAD1901 치료 전 (a) 및 후 (c) 자궁 CT 스캔의 단면도, 및 RAD1901 치료 전 (b) 및 후 (d) 자궁 FES-PET 스캔의 단면도; (도 15b): 500㎎ RAD1901 치료 전(상부 (a) 패널) 및 후(하부 (a) 패널) 자궁 CT 스캔의 시상면도, RAD1901 치료 전(상부 (b) 패널) 및 후(하부 (b) 패널)의 자궁 FES-PET 스캔의 시상면도, RAD1901 치료 전(상부 (c) 패널) 및 후(하부 (c) 패널) 자궁 CT 스캔의 단면도, RAD1901 치료 전(상부 (d) 패널) 및 후(하부 (d) 패널) 자궁 FES-PET 스캔의 단면도; (도 15c): 기준(RAD1901 치료 전)에 비해 대상체 1 내지 3(200㎎) 및 대상체 4 내지 7(500㎎)의 RAD1901 치료 후 ER 맞물림의 변화%.
도 16A 내지 도 16B: RAD1901 치료(500㎎) 전(기준) 및 치료 후 자궁(도 16A) 및 뇌하수체(도 16B)의 FES-PET 스캔의 대표적인 영상을 도시한 도면. (a) 측면 단면도; (b) 세로 단면도; 및 (c) 세로 단면도.
도 17a 내지 도 17b: RAD1901 치료가 시험관내 MCF-7 세포주 (도 17a) 및 T47D 세포주 (도 17b)에서 완전한 ER 분해를 초래하고, ER 신호전달을 저해하였다는 것을 도시한 도면. 각각 0.001μM, 0.01μM, 0.1μM 및 1μM의 다양한 농도로 RAD1901 및 풀베스트란트로 치료한 세포주 둘 다에서의 ER 발현을 나타내었다. ER 신호전달을 시험한 3가지 ER 표적 유전자에 의해 나타내었다: PGR, GREB1 및 TFF1.
도 18a 내지 도 18c: RAD1901 치료는 MCF-7 이종이식 모델의 ER 신호전달의 ER 분해 및 폐기를 초래하였다는 것을 도시한 도면. (도 18a): 마지막 투약 후 2시간 또는 8시간에 비히클 대조군, 30 및 60㎎/㎏로 RAD1901 및 3mg/용량으로 풀베스트란트로 치료한 MCF-7 이종이식 모델에서의 PR 및 ER 발현을 나타내는 웨스턴 블롯; (도 18b): 마지막 투약 후 2시간에 비히클 대조군, 30 및 60㎎/㎏으로 RAD1901, 및 3mg/용량으로 풀베스트란트로 치료한 MCF-7 이종이식 모델에서의 ER 단백질 발현; (도 18c): 마지막 투약 후 8시간에 비히클 대조군, 30 및 60㎎/㎏로 RAD1901, 및 3mg/용량으로 풀베스트란트로 치료한 MCF-7 이종이식 모델에서의 PR 단백질 발현.
도 19A 내지 도 19C: RAD1901 치료가 MCF-7 이종이식 모델에서 PR의 빠른 감소를 초래하였다는 것을 도시한 도면. (도 19A): 단일 투약 후 8시간 또는 12시간에 비히클 대조군 및 30, 60 및 90㎎/㎏으로 RAD1901로 치료한 MCF-7 이종이식 모델에서의 PR 발현을 나타내는 웨스턴 블롯; (도 19B): 7번째 투약 후 4시간 또는 24시간에 30, 60 및 90㎎/㎏에서 비히클 대조군 및 RAD1901로 치료한 MCF-7 이종이식 모델에서의 PR 발현을 나타내는 웨스턴 블롯; (도 19C): 30, 60 및 90㎎/㎏에서 RAD1901로 치료한 MCF-7 이종이식 모델에서의 PR 발현의 용량 의존적 감소.
도 20A 내지 도 20B: RAD1901 치료가 MCF-7 이종이식 모델에서 증식의 빠른 감소를 초래한다는 것을 도시한 도면. (도 20A): 증식 마커 Ki-67로 염색한, 단일 투약 후 8시간 및 4번째 투약 후 24시간에 비히클 대조군 및 90㎎/㎏으로 RAD1901로 치료한 MCF-7 이종이식 모델로부터 채취한 절개된 종양의 대표적인 사진; (도 20BD): 단일 투약 후 8시간 및 4번째 투약 후 24시간에 비히클 대조군 및 90㎎/㎏으로 RAD1901로 치료한 MCF-7 이종이식 모델에서 증식 마커 Ki-67의 감소를 나타내는 히스토그램.
도 21: 30, 60 및 120㎎/㎏로 RAD1901 치료는 연구 마지막에 효능 연구 56일의 마지막 날에 4시간 동안 PDx-4 모델의 종양의 연구 마지막에서 풀베스트란트(1㎎/동물) 보다 Ki67을 상당히 더 많이 감소시켰다는 것을 도시한 도면.
도 22: 60 및 120㎎/㎏에서 RAD1901 치료는 감소된 PR 발현을 갖는 PDx-5 모델에서 생체내에서 감소된 ER 신호전달을 초래하였다는 것을 도시한 도면.
도 23a 내지 도 23d: 새로 젖을 뗀 암컷 스프레그-돌리 래트에서 자궁 조직에 대한 RAD1901의 효과를 도시한 도면. (도 23a): 최종 투약 후 24시간에 안락사시킨 래트의 자궁 습윤 중량; (도 23b): 자궁의 조직 절개에서의 상피 높이; (도 23c): 400x 배율에서 톨루이딘 블루 O-염색 자궁의 대표적인 절개, 화살표는 자궁 상피를 나타낸다; (도 23d): 자궁 조직으로부터 추출하고, 18S 리보솜 RNA 하우스키핑 유전자에 대한 적격 C3 발현 수준에 대해 정량적 RT-PCR에 의해 분석한, 총 RNA.
도 24: 제7일에 투약 후 200, 500, 750 및 1000㎎/㎏에서 RAD1901의 혈장 약동학적 결과.
도 25: 3ERT (I).
도 26: 3ERT (II).
도 27: 표 13에 요약한 ERα LBD-길항제 복합체의 겹침(Superimposition).
도 28a 내지 도 28b: (도 28a) RAD1901-1R5K; 및 (도 28b) GW5-1R5K의 모델링을 도시한 도면.
도 29a 내지 도 29b: (도 29a) RAD1901-1SJ0; 및 (도 29b) E4D-1SJ0의 모델링을 도시한 도면.
도 30a 내지 도 30b: (도 30a) RAD1901-2JFA; 및 (도 30b) RAL-2JFA의 모델링을 도시한 도면.
도 31a 내지 도 31b: (도 31a) RAD1901-2BJ4; 및 (도 31b) OHT-2BJ4의 모델링을 도시한 도면.
도 32a 내지 도 32b: (도 32a) RAD1901-2IOK; 및 (도 32b) IOK-2IOK의 모델링을 도시한 도면.
도 33: 1R5K 및 2OUZ를 이용하는 IFD 분석으로부터 초래된 RAD1901 입체배좌의 겹침을 도시한 도면.
도 34: RAD1901 입체배좌의 겹침은 2BJ4 및 2JFA를 이용하는 IFD 분석으로부터 초래된다는 것을 도시한 도면.
도 35a 내지 도 35b: 2BJ4, 2JFA 및 1SJ0를 이용하는 IFD 분석으로부터 초래된 RAD1901 입체배좌의 겹침을 도시한 도면.
도 36a 내지 도 36c: 2BJ4에 의한 RAD1901의 IFD를 도시한 도면.
도 37a 내지 도 37c: IFD에 의한 2BJ4에서 도킹된(docked) RAD1901의 단백질 표면 상호작용을 도시한 도면.
도 38a 내지 도 38c: 2BJ4에 의한 풀베스트란트의 IFD를 도시한 도면.
도 39a 내지 도 39b: 2BJ4에 의한 풀베스트란트 및 RAD1901의 IFD를 도시한 도면.
도 40a 내지 도 40b: 2BJ4에 의한 풀베스트란트 및 RAD1901의 IFD의 겹침을 도시한 도면.
도 41: WT 및 LBD 돌연변이체의 ERα 작제물에 의한 시험관내 결합 분석에서의 RAD1901을 도시한 도면.
도 42: 에스트로겐 수용체.
표 1. ER+ 진행 유방암의 치료를 위한 RAD1901의 1상 연구의 중요한 기준 인구통계학.
표 2. ER+ 진행 유방암의 치료를 위한 RAD1901의 1상 연구에서 치료 관련 AE.
표 3. 40일 동안 치료한 후 MCF7 세포를 이식한 마우스의 혈장, 종양 및 뇌에서의 RAD1901 수준. *BLQ: 정량화의 하한.
표 4. 6일 동안 200㎎ 용량 PO 1/일로 치료한 인간 대상체에 대한 자궁, 근육 및 뼈에 대한 SUV.
표 5. 6일 동안 500㎎ 용량 PO 1/일로 치료한 인간 대상체(n=4)에 대한 자궁, 근육 및 뼈에 대한 SUV.
표 6. 난소 절제 래트에서의 BMD 에 대한 RAD1901의 효과. 성체 암컷 래트는 비히클, E2(0.01㎎/㎏) 또는 RAD1901(3㎎/㎏) 1일 1회(처리군 당 n=20)으로 치료 시작 전에 모의(sham) 또는 난소절제술 중 하나를 받았다. 기준에서 그리고 치료 4주 후에 이중 방출 x선 흡광 분석법에 의해 BMD를 측정하였다. 데이터를 평균 ± SD로서 표현한다. 대응하는 OVX+Veh 대조군에 대한 *P < 0.05. BMD, 골밀도; E2, 베타 에스트라다이올; OVX, 난소 절제한; Veh, 비히클.
표 7. 난소 절제 래트에서 대퇴골 마이크로구조에 대한 RAD1901의 효과. 성인 암컷 래트는 비히클, E2(0.01㎎/㎏) 또는 RAD1901(3㎎/㎏) 1일 1회(처리군 당 n=20)로 주사 전 모의 또는 난소절제술을 받았다. 4주 후에, 마이크로컴퓨터 단층촬영을 이용하여 뼈 마이크로구조를 평가하였다. 데이터를 평균 ± SD로서 표현한다. 대응하는 OVX+Veh 대조군에 대한 *P < 0.05. ABD, 겉보기 골밀도; BV/TV, 골용적 밀도; ConnD, 연결 밀도; E2, 베타 에스트라다이올; OVX, 난소 절제한; TbN, 섬유주 수; TbTh, 섬유주 두께; TbSp, 섬유주 간격; Veh, 비히클.
표 8. RAD1901의 1상 용량 상승 연구의 중요한 기준 인구 통계학.
표 9. RAD1901의 1상 용량 상승 연구에서 가장 빈번한 (>10%) 치료 관련 AE. AE를 CTCAE v4.0에 따라 등급화하였다. 동일한 바람직한 기간의 다중 시나리오에 의해 임의의 환자를 가장 중증의 등급으로 1회만 계수화하였다. * 임의의 관련된 TEAE를 갖는 총 활동 그룹에서 환자의 10% 초과. n= 주어진 범주에서 적어도 하나의 치료 관련 AE를 지니는 대상체의 수.
표 10. RAD1901의 1상 용량 상승 연구에서의 약동학적 매개변수(제7일).
표 11. LBD 돌연변이의 빈도.
표 12. 3ERT에 대한 잔기 위치에서의 ER-α LBD-길항제 복합체의 차이.
표 13. RMSD 계산에 의한 ER-α LBD-길항제 복합체의 구조적 중복의 평가.
표 14. ER-α LBD-길항제 복합체에서 리간드 결합의 분석.
표 15. RAD1901 도킹에 대한 모델 평가.
표 16. 1R5K, 2IFA, 2BJ4 및 2OUZ에 의한 RAD1901의 유도 적합 도킹 스코어.
이하의 실시예 부문에서 제시하는 바와 같이, RAD1901(이하의 구조)은 ESR1 상태 및 사전 내분비 요법과 상관없이 유방암 이종이식 모델에서 종양 성장을 저해하고/하거나 종양 퇴행을 유도하는 것으로 발견되었다(실시예 I(A)). 치료된 이종이식 모델은 높은 또는 낮은 Her2 발현과 함께, 그리고 사전 내분비 요법(예를 들어, 타목시펜(tam), AI, 화학요법(chemo), Her2 저해제(Her2i, 예를 들어, 트라스투주맙, 라파티닙), 베바시주맙, 및/또는 리툭시맙)과 함께 또는 이들 없이 WT 또는 돌연변이체(예를 들어, Y537S) ERα를 발현시키는 종양을 가졌다(도 1). 그리고, 모든 경우에 RAD1901은 종양 성장을 저해하였다. WT ER PDx 모델 및 돌연변이체 ER PDx 모델은 풀베스트란트 치료에 대해 상이한 수준의 반응을 가질 수 있다. 그러나, PDx 모델이 풀베스트란트 치료에 대해 반응성인지의 여부와 상관없이, RAD1901은 종양 성장을 저해하는 것으로 발견되었다. 따라서, RAD1901은 개선된 종양 성장 저해를 갖는 풀베스트란트에 반응성인 유방암을 치료하기 위해 그리고 마찬가지로 풀베스트란트에 의해 덜 효과적으로 치료된 유방암을 치료하기 위해 풀베스트란트 대체로서 사용될 수 있다. 예를 들어, RAD1901은 풀베스트란트 치료에 대해 반응성이 변한 WT ER+ PDx 모델에서의 종양 퇴행(예를 들어, MCF-7 세포주 이종이식 모델, 풀베스트란트 치료에 반응성인 PDx-4, PDx-2 및 PDx-11 모델, 및 풀베스트란트 치료에 대해 거의 반응성이 아닌 PDx-12 모델), 및 풀베스트란트 치료에 대한 반응성의 수준을 달리한 돌연변이체(예를 들어, Y537S) ER+ PDx 모델(예를 들어, 풀베스트란트 치료에 반응성인 PDx-6 모델, 및 풀베스트란트 치료에 거의 반응성이 아닌 PDx-5 모델)을 야기하였다. RAD1901은 치료가 종료된 후에 종양 성장을 저해함에 있어서 지속된 효능을 나타내는 반면, 에스트라다이올 치료는 계속되었다(예를 들어, PDx-4 모델). 본 명세서에 제공된 결과는 또한 RAD1901이 뇌에 전달될 수 있고(실시예 II), 상기 전달은 야생형 ERα를 발현시키는 두개 내 종양 모델(MCF-7 이종이식 모델, 실시예 I(B))에서 마우스 생존을 개선시켰다. RAD1901은 강력한 항-ER+ 유방암 요법이다.
Figure pct00003
RAD1901은 또한 다른 내분비 요법(예를 들어, 다른 SERM, 예컨대 타목시펜 및 SERD, 예컨대 풀베스트란트)에 비해 부작용을 거의 야기하지 않을 가능성이 있다. 예를 들어, 타목시펜은 자궁내막암의 위험을 증가시킬 수 있다. 타목시펜은 또한 폐경 전 여성에서 골다공증을 야기할 수 있다. 풀베스트란트는 또한 치료된 환자에서 골 손실 위험을 증가시킬 수 있다. RAD1901은 유사한 부작용을 가질 가능성이 없다. RAD1901은 약 35까지 종양에서의 RAD1901 수준 대 혈장 중의 RAD1901 수준(T/P 비)(T/P 비)로 (실시예 II) 종양에서 우선적으로 축적되는 것으로 발견되었다. 약 200㎎ 내지 약 500㎎ q.d.의 용량에서 RAD1901로 치료한 인간 대상체에 대해 자궁, 근육 및 뼈에 대한 표준화된 흡수값(SUV)을 계산하였다. (실시예 III(A)). 투약 후 자궁 신호는 "비 표적 조직"(에스트로겐 수용체를 발현시키지 않는 조직)으로부터의 수준에 가까웠는데, 이는 RAD1901 치료 후 FES-PET 흡수의 완전한 약화를 시사하였다. 에스트로겐 수용체를 상당히 발현시키지 않는 조직(예를 들어, 근육, 뼈)에서 치료 전 대 치료 후 PET 스캔에서 변화는 거의 관찰되지 않았다(실시예 III(A)). RAD1901 치료는 난소 절제(OVX) 래트에서 자궁 조직의 에스트라다이올 자극을 길항하였고(실시예 IV(A)), 치료된 대상체의 뼈 품질을 상당히 보존하였다. 따라서, RAD1901 치료는 다른 내분비 요법과 같이 환자의 뼈 구조를 손상시킬 가능성이 없다. 예를 들어, RAD1901로 치료된 OVX 래트는 BMD 및 대퇴골 마이크로구조가 유지되었다는 것을 나타내었다(실시예 IV(A)). 따라서, RAD1901 치료는 골다공증 또는 더 고위험의 골다공증을 갖는 환자에 대해 특히 유용할 수 있다.
더 나아가, RAD1901은 야생형 ERα을 분해하고, MCF-7 세포주 이종이식 모델에서 생체내 ER 신호전달을 없애는 것으로 발견되었으며, 이들 MCF-7 세포주 이종이식 모델에서 PR의 용량 의존적 감소를 나타내었다(실시예 III(B)). RAD1901은 치료된 대상체로부터 채취한 종양 내 증식 마커 Ki67의 감소에 의해 증명된 바와 같이 MCF-7 세포주 이종이식 모델 및 PDx-4 모델의 증식을 감소시켰다. RAD1901은 또한 풀베스트란트 치료에 거의 반응하지 않는 돌연변이체 ER PDx 모델에서 ER 신호전달을 감소시켰다(실시예 III(B)).
풀베스트란트 치료에 거의 반응하지 않는 종양에 대해 그리고 돌연변이체 ERα을 발현시키는 종양에서 RAD1901의 예상치 못한 효능은 RAD1901과 ERα 사이의 독특한 상호작용에 기인할 수 있다. RAD1901 및 다른 ERα-결합 화합물에 결합된 ERα의 구조적 모델은 특정 결합 상호작용에 관한 정보를 얻기 위해 분석되었다(실시예 V). 컴퓨터 모델링은 RAD1901-ERα 상호작용이, 내분비 치료의 적어도 하나의 계통을 받은 환자로부터의 전이성 ER 양성 유방 종양 샘플의 최근의 연구에서 발견된 LBD 돌연변이의 약 81.7%를 차지하는 ERα의 LBD 돌연변이체, 예를 들어, Y537X 돌연변이체(여기서, X는 S, N 또는 C임); D538G; 및 S463P에 의해 영향받을 가능성이 없다는 것을 나타내었다(표 11, 실시예 V). 이는 결합에 중요한 ERα의 C-말단의 리간드 결합 도메인 내 특정 잔기의 동정, 야생형 ERα뿐만 아니라 이의 특정 돌연변이 및 변이체에 결합하고 길항하는 화합물을 개발하기 위해 사용될 수 있는 정보를 생성하였다.
이들 결과에 기반하여, 대상체에게 치료적 유효량의 RAD1901 또는 용매화물(예를 들어, 수화물) 또는 이의 염을 투여함으로써 ERα 양성 암 또는 종양 성장의 저해 또는 퇴행의 생성이 필요한 대상체에서 ERα-양성 암 또는 종양의 성장을 저해하거나 또는 이의 퇴행을 생성하기 위한 방법이 제공된다. 특정 실시형태에서, RAD1901 또는 염 또는 용매화물(예를 들어, 수화물)의 투여는 종양 성장의 저해에 추가로, 예를 들어 암세포 증식 저해 또는 ERα 활성 저해를 포함하는(예를 들어, 에스트라다이올 결합을 저해함으로써 또는 ERα를 분해시킴으로써), 추가적인 치료적 이점을 가진다. 특정 실시형태에서, 상기 방법은 근육, 뼈, 유방 및 자궁에 대한 부정적 효과를 제공하지 않는다.
본 명세서에서 또한 ERα 및 돌연변이체 ERα를 조절 및 분해하는 방법, ERα 및 돌연변이체 ERα 활성 또는 발현과 관련된 병태를 치료하는 방법, 이들 방법에서 사용하기 위한 화합물, 및 ERα 및 돌연변이체 ERα에 결합된 상기 화합물의 복합체 및 결정이 제공된다.
본 명세서에 제공된 종양 성장 저해 또는 종양 퇴행 방법의 특정 실시형태에서, 대상체에게 치료적 유효량의 RAD1901 또는 이의 염 또는 용매화물(예를 들어, 수화물)을 투여함으로써 종양 성장의 저해 또는 종양 퇴행이 필요한 대상체에서 ERα-양성 종양 성장을 저해하거나 또는 이의 퇴행을 생성하는 방법이 제공된다. 특정 이들 실시형태에서, 이의 염은 하기 구조를 갖는 RAD1901 다이하이드로클로라이드이다:
Figure pct00004
본 명세서에서 사용되는 바와 같은 ERα-양성 종양의 "성장을 저해하는"은 종양 성장의 속도를 늦추거나 또는 종양 성장을 완전히 멈추게 하는 것을 지칭할 수 있다.
본 명세서에 사용된 바와 같은 ERα-양성 종양의 "종양 퇴행" 또는 "퇴행"은 종양의 최대 크기를 감소시키는 것을 지칭할 수 있다. 특정 실시형태에서, RAD1901 또는 이의 용매화물(예를 들어, 수화물) 또는 염의 투여는 기준에 대한 종양 크기의 감소(즉, 치료 개시 전 크기) 또는 심지어 종양의 근절 또는 부분적 근절을 초래할 수 있다. 따라서, 특정 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 종양 퇴행의 방법은 대안적으로 기준에 대해 종양 크기를 감소시키는 방법으로서 특성규명될 수 있다.
본 명세서에서 사용된 바와 같은 "종양"은 악성 종양이고, "암"과 상호 호환적으로 사용된다.
종양 성장 저해 또는 퇴행은 특정 조직 또는 기관 내의 단일 종양 또는 종양의 세트로 국소화될 수 있거나, 또는 전신일 수 있다(즉, 모든 조직 또는 기관 내 종양에 영향을 미칠 수 있다).
RAD1901은 에스트로겐 수용체 베타(ERβ)에 비해 ERα에 우선적으로 결합하는 것으로 알려져 있기 때문에, 달리 구체화되지 않는 한, 에스트로겐 수용체, 에스트로겐 수용체 알파, ERα, ER, 야생형 ERα 및 ESR1은 본 명세서에서 상호호환적으로 사용된다. 본 명세서에 사용된 바와 같은 "에스트로겐 수용체 알파" 또는 "ERα"는 유전자 ESR1에 의해 암호화된 야생형 ERα 아미노산 서열을 포함하거나, 이루어지거나 또는 본질적으로 이루어진 폴리펩타이드를 지칭한다. 본 명세서에 사용된 바와 같은 "에스트로겐 수용체 알파에 대해 양성", "ERα-양성", "ER+" 또는 "ERα+"인 종양은 하나 이상의 세포가 ERα의 적어도 하나의 아이소폼을 발현시키는 종양을 지칭한다. 특정 실시형태에서, 이들 세포는 ERα를 발현시킨다. 특정 실시형태에서, 환자는 에스트로겐 수용체 베타의 하나 이상의 형태를 발현시키는 종양 내에서 하나 이상의 세포를 가진다. 특정 실시형태에서, ERα-양성 종양 및/또는 암은 유방, 자궁, 난소 또는 뇌하수체암과 관련된다. 특정 이들 실시형태에서, 환자는 유방, 자궁, 난소 또는 뇌하수체 조직에 위치된 종양을 가진다. 환자가 유방 내 위치된 종양을 갖는 실시형태에서, 종양은 HER2에 대해 그리고 HER2+ 종양에 대해 양성일 수 있거나 또는 양성이 아닐 수도 있는 내강 유방암과 관련될 수 있으며, 종양은 높은 또는 낮은 HER2를 발현시킬 수 있다(예를 들어, 도 1). 다른 실시형태에서, 환자는 다른 조직 또는 기관(예를 들어, 뼈, 근육, 뇌)에 위치된 종양을 갖지만, 그럼에도 불구하고 유방, 자궁, 난소 또는 뇌하수체암(예를 들어, 유방, 자궁, 난소 또는 뇌하수체암의 이동 또는 전이로부터 유래된 종양)과 관련된다. 따라서, 본 명세서에 제공된 종양 성장 저해 또는 퇴행 방법의 특정 실시형태에서, 표적되고 있는 종양은 전이성 종양이고/이거나 종양은 다른 기관(예를 들어, 뼈 및/또는 근육)에서 ER의 과발현을 가진다. 특정 실시형태에서, 표적화되고 있는 종양은 뇌 종양 및/또는 암이다. 특정 실시형태에서, 표적화되고 있는 종양은 다른 SERD(예를 들어, 풀베스트란트, TAS-108(SR16234), ZK191703, RU58668, GDC-0810 (ARN-810), GW5638/DPC974, SRN-927, ICI182782 및 AZD9496), Her2 저해제(예를 들어, 트라스투주맙, 라파티닙, 아도-트라스투주맙 엠탄신, 및/또는 퍼투주맙), 화학 요법(예를 들어, 아브락산, 아드리아마이신, 카보플라틴, 사이톡산, 다우노루비신, 독실, 엘렌스, 플루오로유라실, 겜자르, 헬라벤, 익셈프라, 메토트렉세이트, 미토마이신, 미콕산트론, 나벨빈, 탁솔, 탁소텔, 티오테파, 빈크리스틴 및 젤로다), 방향화효소 저해제(예를 들어, 아나스트로졸, 엑세메스탄 및 레트로졸), 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(예를 들어, 타목시펜, 랄록시펜, 라소폭시펜 및/또는 토레미펜), 혈관형성 저해제(예를 들어, 베바시주맙) 및/또는 리툭시맙에 의한 치료보다 본 명세서에 개시된 바와 같은 RAD1901 치료에 더 민감하다.
본 명세서에 제공된 종양 성장 저해 또는 퇴행 방법의 특정 실시형태에서, 상기 방법은 환자가 RAD1901 또는 이의 용매화물(예를 들어, 수화물) 또는 염을 투여하기 전에 ERα를 발현시키는 종양을 갖는지의 여부를 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 본 명세서에 제공된 종양 성장 저해 또는 퇴행 방법의 특정 실시형태에서, 상기 방법은 환자가 RAD1901 또는 용매화물(예를 들어, 수화물) 또는 이의 염을 투여하기 전에 돌연변이체 ERα를 발현시키는 종양을 갖는지의 여부를 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 본 명세서에 제공된 종양 성장 저해 또는 퇴행 방법의 특정 실시형태에서, 환자가 RAD1901 또는 용매화물 (예를 들어, 수화물) 또는 이의 염을 투여하기 전에 풀베스트란트 치료에 대해 반응성 또는 비반응성인 ERα를 발현시키는지의 여부를 결정하는 단계를 더 포함한다. 이들 결정은 당업계에 공지된 발현 검출의 임의의 방법을 이용하여 이루어질 수 있고, 대상체로부터 제거된 종양 또는 조직 샘플을 이용하여 시험관내에서 수행될 수 있다.
야생형 ERα를 발현시키는 종양에서 종양 성장을 저해시키는 RAD1901의 능력을 입증하는 것에 추가로, 본 명세서에 제공된 결과는 RAD1901이 ERα의 돌연변이체 형태, 즉, Y537S ERα를 발현시키는 종양의 성장을 저해하는 예상치 못한 능력을 나타내었다는 것을 나타낸다(실시예 I(A)). ERα 돌연변이의 예의 컴퓨터 모델링 평가는 이들 돌연변이, 예를 들어, Y537X 돌연변이체를 갖는 ERα(여기서, X는 S, N 또는 C임), D538G 돌연변이체를 갖는 ERα 및 S463P 돌연변이체를 갖는 ERα로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 돌연변이체를 갖는 ERα 중 어떤 것도 리간드 결합 도메인에 영향을 미치거나 또는 RAD1901 결합을 특이적으로 저해하는 것으로 예상되지 않는다는 것을 나타내었다(실시예 V(A)). 이들 결과에 기반하여, 대상체에게 치료적 유효량의 RAD1901 또는 이의 용매화물(예를 들어, 수화물) 또는 염을 투여함으로써 암을 갖는 대상체에서, Y537X1(여기서, X1은 S, N 또는 C임), D538G, L536X2(여기서, X2는 R 또는 Q임), P535H, V534E, S463P, V392I, E380Q, 특히 Y537S ERα로 이루어진 군으로부터 선택된 리간드-결합 도메인(LBD) 내에서 하나 이상의 돌연변이체를 갖는 ERα에 대해 양성인 종양의 성장을 저해하거나 또는 퇴행을 초래하기 위한 본 명세서에 제공된 방법이 제공된다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같은 "돌연변이체 ERα"는 ERα의 아미노산 서열에 대해 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%, 또는 적어도 99.5% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나, 이루어지거나 또는 본질적으로 이루어진 하나 이상의 치환 또는 결실을 포함하는 ERα 및 이의 변이체를 지칭한다.
동물 이종이식 모델에서 유방암 종양 성장을 저해하는 것에 추가로, 본 명세서에 개시된 결과는 RAD1901이 종양 세포 내에서 상당한 축적을 나타내고, 혈액 뇌 장벽에 침투할 수 있다는 것을 나타낸다(실시예 II). 혈액 뇌 장벽을 침투하는 능력은 RAD1901 투여가 뇌 전이성 이종이식 모델에서 생존을 상당히 연장시켰다는 것을 나타냄으로써 확인되었다(실시예 I(B)). 따라서, 본 명세서에 제공된 종양 성장 저해 또는 퇴행 방법의 특정 실시형태에서, 표적화되고 있는 ERα-양성 종양은 뇌에서 또는 중추 신경계 어디에서나 위치된다. 특정 이들 실시형태에서, ERα-양성 종양은 주로 뇌암과 관련된다. 다른 실시형태에서, ERα-양성 종양은 유방, 자궁, 난소 또는 뇌하수체암과 같은 다른 유형의 암과 주로 관련된 전이성 종양, 또는 다른 조직 또는 기관으로부터 이동된 종양이다. 특정 이들 실시형태에서, 종양은 뇌 전이, 예컨대 유방암 뇌 전이(BCBM)이다. 본 명세서에 개시된 방법의 특정 실시형태에서, RAD1901 또는 이의 염 또는 용매화물은 표적 종양 내에서 하나 이상의 세포 내에 축적된다.
본 명세서에 개시된 방법의 특정 실시형태에서, RAD1901 또는 이의 용매화물(예를 들어, 수화물) 또는 염은 바람직하게는 약 15 이상, 약 18 이상, 약 19 이상, 약 20 이상, 약 25 이상, 약 28 이상, 약 30 이상, 약 33 이상, 약 35 이상, 또는 약 40 이상의 T/P(혈장 내 종양/RAD1901 농도 중의 RAD1901 농도) 비로 종양 내에서 축적된다.
본 명세서에 제공된 결과는 RAD1901 투여가 난소 절제 래트에서의 골 손실에 대해 보호한다는 것을 나타낸다(실시예 IV(A)). 따라서, 본 명세서에 제공된 종양 성장 저해 또는 퇴행 방법의 특정 실시형태에서, RAD1901 또는 이의 용매화물(예를 들어, 수화물) 또는 염의 조합물의 투여는 치료되는 대상체의 골용적 밀도, 골 표면 밀도, 골밀도, 섬유주 수, 섬유주 두께, 섬유주 간격, 연결 밀도, 및/또는 겉보기 골밀도에 대해 바람직하지 않은 효과를 포함하는, 바람직하지 않은 효과를 갖지 않는다. RAD1901은 골다공증 또는 더 고위험의 골다공증을 갖는 환자에 대해 특히 유용할 수 있다. 타목시펜은 폐경전 여성에서의 골 손실과 관련될 수 있고, 풀베스트란트는 그의 작용 메커니즘에 기인하여 뼈 구조를 손상시킬 수 있다. RAD1901은 폐경전 여성 및/또는 타목시펜 또는 항에스트로겐 요법에 대해 내성인 종양에 특히 유용할 수 있단.
본 명세서에 제공된 결과는 RAD1901이 난소 절제 래트에서 자궁 조직의 에스트라다이올 자극을 길항하였다는 것을 나타낸다(실시예 IV(A)). 더 나아가, 200㎎ 또는 500㎎ q.d.의 투약량에서 RAD1901로 치료된 인간 대상체에서, ER을 상당히 발현시키지 않는 자궁, 근육 및 골 조직에 대해 표준화된 흡수값(SUV)은 신호에서 치료 전 및 치료 후 임의의 변화를 거의 나타내지 않았다(실시예 III(A)). 따라서, 특정 실시형태에서, 이러한 투여는 또한, 예를 들어 자궁, 근육 또는 유방 조직을 포함하는 다른 조직에 대해 바람직하지 않은 효과를 초래하지 않는다.
본 명세서에 개시된 방법에서 사용하기 위한 치료적 유효량의 RAD1901은 특정 시간 간격으로 투여될 때, 한 가지 이상의 치료적 기준(예를 들어, 종양 성장의 늦춤 또는 멈춤, 증상의 중단 등)의 달성을 초래하는 양이다. 이상적으로, 치료적 유효량은 치료되는 대상체의 50% 이상이 추가 약물 투여를 막는 구역 또는 다른 독성 반응을 경험하는 최대 내약성 용량을 초과하지 않는다. 치료적 유효량은 대상체의 증상, 성별, 연령, 체중 또는 일반적 건강 상태의 다양성 및 정도, 투여 방식 및 염 또는 용매화물 유형, 약물에 대한 민감성의 변화, 특정 유형의 질환 등을 포함하는 다양한 인자에 따라 대상체에 대해 다를 수 있다.
본 명세서에 개시된 방법에서 사용하기 위한 RAD1901의 치료적 유효량의 예는 내성 ER-유도 종양 또는 암을 갖는 대상체에 대해 약 150 내지 약 1,500㎎, 약 200 내지 약 1,500㎎, 약 250 내지 약 1,500㎎, 또는 약 300 내지 약 1,500㎎ 투약량 q.d.; 야생형 ER 유도 종양 및/또는 암과 내성 종양 및/또는 암을 갖는 대상체에 대해 약 150 내지 약 1,500㎎, 약 200 내지 약 1,000㎎ 또는 약 250 내지 약 1,000㎎ 또는 약 300 내지 약 1,000㎎ 투약량 q.d.; 및 대다수의 야생형 ER 유도 종양 및/또는 암을 갖는 대상체에 대해 약 300 내지 약 500㎎, 약 300 내지 약 550㎎, 약 300 내지 약 600㎎, 약 250 내지 약 500㎎, 약 250 내지 약 550㎎, 약 250 내지 약 600㎎, 약 200 내지 약 500㎎, 약 200 내지 약 550㎎, 약 200 내지 약 600㎎, 약 150 내지 약 500㎎, 약 150 내지 약 550㎎, 또는 약 150 내지 약 600㎎ 투약량 q.d.을 포함하지만, 제한되지 않는다. 특정 실시형태에서, 성인 대상체에 대해 일반적인 현재 개시된 방법에서 사용하기 위한 RAD1901 또는 용매화물(예를 들어, 수화물) 또는 이의 염의 투약량은 대략 200㎎, 400㎎, 500㎎, 30㎎ 내지 2,000㎎, 100㎎ 내지 1,500㎎, 또는 150㎎ 내지 1,500㎎ p.o., q.d.일 수 있다. 이 매일의 투약량은 단일 투여 또는 다회 투여를 통해 달성될 수 있다.
내성 균주를 포함하는 유방암뿐만 아니라 돌연변이체 수용체(들)을 발현시키는 예의 치료에서 RAD1901의 투약은 1일 당 100㎎ 내지 1,000㎎의 범위이다. 예를 들어, RAD1901은 1일당 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900 또는 1,000㎎으로 투약될 수 있다. 특히, 1일당 200㎎, 400㎎, 500㎎, 600㎎, 800㎎ 내지 1,000㎎이 주목된다. 놀랍게도 PO 투약 후 인간에서 RAD1901의 긴 반감기는 이 선택사항을 특히 실행 가능하게 만든다. 따라서, 약물은 200㎎ bid(매일 총 400㎎), 250㎎ bid(매일 총 500㎎), 300㎎ bid(매일 총 600㎎), 400㎎ bid(매일 800㎎) 또는 500㎎ bid(매일 총 1,000㎎)으로서 투여될 수 있다. 바람직하게는 투약은 경구이다.
특정 실시형태에서, 암 또는 종양은 내성 ER-유도 암 또는 종양(예를 들어, 돌연변이체 ER 결합 도메인(예를 들어, Y537X1(여기서, X1은 S, N 또는 C임), D538G, L536X2(여기서, X2는 R 또는 Q임), P535H, V534E, S463P, V392I, E380Q 및 이들의 조합물을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는 하나 이상의 돌연변이를 포함하는 ERα)이며, ER 또는 종양의 과발현 및/또는 암 증식은 리간드 독립적이며, 종양 및/또는 암은 SERD(예를 들어, 풀베스트란트, TAS-108(SR16234), ZK191703, RU58668, GDC-0810(ARN-810), GW5638/DPC974, SRN-927, ICI182782 및 AZD9496), Her2 저해제(예를 들어, 트라스투주맙, 라파티닙, 아도(ado)-트라스투주맙 엠탄신, 및/또는 퍼투주맙), 화학 요법(예를 들어, 아브락산, 아드리아마이신, 카보플라틴, 사이톡산, 다우노루비신, 독실, 엘렌스, 플루오로유라실, 겜자르, 헬라벤, 익셈프라, 메토트렉세이트, 미토마이신, 미콕산트론, 나벨빈, 탁솔, 탁소텔, 티오테파, 빈크리스틴, 및 젤로다), 방향화효소 저해제(예를 들어, 아나스트로졸, 엑세메스탄, 및 레트로졸), 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(예를 들어, 타목시펜, 랄록시펜, 라소폭시펜, 및/또는 토레미펜), 혈관형성 저해제(예를 들어, 베바시주맙), 및/또는 리툭시맙의 치료에 의해 진행된다.
현재 개시된 방법에서 사용하기 위한 RAD1901 또는 이의 용매화물(예를 들어, 수화물) 또는 염은 대상체에게 1회 또는 다회로 투여될 수 있다. 화합물이 다회로 투여되는 해당 실시형태에서, 그들은 한 세트의 간격으로, 예를 들어 매일, 격일, 매주 또는 매달 투여될 수 있다. 대안적으로, 그들은 비정기적 간격으로, 예를 들어 증상, 환자 건강상태 등에 기반하여 필요한 기준에 따라 투여될 수 있다.
현재 개시된 방법에서 사용하기 위한 RAD1901 또는 이의 용매화물(예를 들어, 수화물) 또는 염은 단위 제형으로 제형화될 수 있는데, 이는 치료를 받고 있는 대상체에 대해 단위 투약량으로서 적합한 물리적으로 별개의 단위를 의미하며, 각각의 단위는 선택적으로 적합한 약제학적 담체와 관련하여 목적으로 하는 치료적 효과를 생성하도록 계산된 활성 물질의 사전결정된 양을 함유한다. 단위 제형은 단일 1일 용량 또는 다회의 1일 용량 중의 하나(예를 들어, 약 1 내지 4회 이상 q.d.)일 수 있다. 다회의 1일 용량이 사용될 때, 단위 투약 형태는 각각의 용량에 대해 동일 또는 상이할 수 있다. 특정 실시형태에서, 화합물은 제어 방출을 위해 제형화될 수 있다.
현재 개시된 방법에서 사용하기 위한 RAD1901 또는 이의 용매화물(예를 들어, 수화물) 또는 염은 임의의 이용 가능한 통상적인 방법에 따라 제형화될 수 있다. 바람직한 투약 형태의 예는 정제, 분말, 미세한 과립, 과립, 코팅된 정제, 캡슐, 시럽, 트로키, 흡입제, 좌약, 주사용, 연고, 안연고, 안약, 비강 점적, 귀약, 습포제, 로션 등을 포함한다. 제형에서, 일반적으로 사용되는 첨가제, 예컨대 희석제, 결합제, 붕해제, 윤활제, 착색제, 향미제, 및 필요하다면, 안정제, 유화제, 흡수 향상제, 계면활성제, pH 조절제, 방부제, 항산화제 등이 사용될 수 있다. 추가로, 제형은 또한 통상적인 방법에 따라 약제학적 제형에 대한 원료로서 일반적으로 사용되는 조성물을 조합함으로써 수행된다. 이들 조성물의 예는, 예를 들어, (1) 오일, 예컨대 대두유, 우지 및 합성 글리세라이드; (2) 탄화수소, 예컨대 액체 파라핀, 스쿠알렌 및 고체 파라핀; (3) 에스터 오일, 예컨대 옥틸도데실 미리스트산 및 아이소프로필 미리스트산; (4) 더 고급 알코올, 예컨대 세토스테아릴 알코올 및 베헤닐 알코올; (5) 실리콘 수지; (6) 실리콘 오일; (7) 계면활성제, 예컨대 폴리옥시에틸렌 지방산 에스터, 솔비탄 지방산 에스터, 글리세린 지방산 에스터, 폴리옥시에틸렌 솔비탄 지방산 에스터, 고체 폴리옥시에틸렌 피마자유 및 폴리옥시에틸렌 폴리옥시프로필렌 블록 공중합체; (8) 수용성 거대분자, 예컨대 하이드록시에틸 셀룰로스, 폴리아크릴산, 카복시비닐 중합체, 폴리에틸렌글리콜, 폴리비닐피롤리돈 및 메틸셀룰로스; (9) 저급 알코올, 예컨대 에탄올 및 아이소프로판올; (10) 다가 알코올, 예컨대 글리세린, 프로필렌글리콜, 다이프로필렌글리콜 및 솔비톨; (11) 당, 예컨대 글루코스 및 자당; (12) 무기 분말, 예컨대 무수 규산, 규산알루미늄 마그네슘 및 규산알루미늄; (13) 정제수 등을 포함한다. 상기 제형에서 사용하기 위한 첨가제는, 예를 들어, 1) 희석제로서 락토스, 옥수수 전분, 수크로스, 글루코스, 만니톨, 솔비톨, 결정질 셀룰로스 및 이산화규소; 2) 결합제로서 폴리비닐 알코올, 폴리비닐 에터, 메틸 셀룰로스, 에틸 셀룰로스, 아라비아검, 트래거캔스, 젤라틴, 셸락, 하이드록시프로필 셀룰로스, 하이드록시프로필메틸 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 폴리프로필렌 글리콜-폴리 옥시에틸렌-블록 공중합체, 메글루민, 시트르산칼슘, 덱스트린, 펙틴 등; 3) 붕해제로서 전분, 한천, 젤라틴 분말, 결정질 셀룰로스, 탄산칼슘, 중탄산나트륨, 시트르산칼슘, 덱스트린, 펙틴, 카복시메틸셀룰로스/칼슘 등; 4) 윤활제로서 스테아르산마그네슘, 탈크, 폴리에틸렌글리콜, 실리카, 축합 식물성유 등; 5) 첨가가 약제학적으로 허용 가능한 임의의 착색제가 착색제로서 적절함; 6) 향미제로서 코코아 분말, 멘솔, 방향제, 페퍼민트유, 신나몬 분말; 7) 첨가가 약제학적으로 허용 가능한 항산화제, 예컨대 아스코르브산 또는 알파-토코페롤을 포함할 수 있다.
본 명세서에 개시된 방법에서 사용하기 위한 RAD1901 또는 이의 용매화물(예를 들어, 수화물) 또는 염은 본 명세서에 기재된 활성 화합물 중 임의의 1종 이상 및 생리학적으로 허용 가능한 담체(또한 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 용액 또는 희석제로서 지칭됨)로서 약제학적 조성물로 제형화될 수 있다. 이러한 담체 및 용액은 본 발명의 방법에서 사용되는 RAD1901의 약제학적으로 허용 가능한 염 및 용매화물, 및 이러한 화합물 중 둘 이상을 포함하는 혼합물, 화합물의 약제학적으로 허용 가능한 염 및 화합물의 약제학적으로 허용 가능한 용매화물을 포함한다. 이러한 조성물은 본 명세서에 참고로 포함된 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th edition, ed. Alfonso R. Gennaro, Mack Publishing Company, Eaton, Pa. (1985)]에 기재된 것과 같은 허용 가능한 약제학적 절차에 따라 제조된다.
용어 "약제학적으로 허용 가능한 담체"는 그것이 투여되는 환자에서 알레르기 반응 또는 다른 뜻밖의 효과를 야기하지 않고, 제형 내 다른 성분과 양립 가능한 담체를 지칭한다. 약제학적으로 허용 가능한 담체는 의도된 투여 형태에 대해 적합하게 선택되고, 통상적인 약제학적 실행과 일치되는, 예를 들어, 약제학적 희석제, 부형제 또는 담체를 포함한다. 예를 들어, 고체 담체/희석제는 검, 전분(예를 들어, 옥수수 전분, 전호화 전분), 당(예를 들어, 락토스, 만니톨, 수크로스, 덱스트로스), 셀룰로스 물질(예를 들어, 미정질 셀룰로스), 아크릴레이트(예를 들어, 폴리메틸아크릴레이트), 탄산칼슘, 산화마그네슘, 탈크 또는 이들의 혼합물을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 약제학적으로 허용 가능한 담체는 치료제의 보관 수명 또는 유효성을 향상시키는 소량의 보조 물질, 예컨대 습윤제 또는 유화제, 보존제 또는 완충제를 추가로 포함할 수 있다.
유리 형태로 RAD1901은 통상적인 방법에 의해 염으로 전환될 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 용어 "염"은, 염이 RAD1901에 의해 형성되고, 약학적으로 허용 가능하다면, 제한되지 않으며; 염의 바람직한 예는 할로겐화수소염(예를 들어, 염산, 브롬화수소산, 요오드화수소산 등), 무기산염(예를 들어, 황산염, 질산염, 과염소산염, 인산염, 탄산염, 중탄산염 등), 유기 카복실산염(예를 들어, 아세트산염, 말레산염, 타르타르산염, 푸마르산염, 시트르산염 등), 유기 설폰산염(예를 들어, 메탄설폰산염, 에탄설폰산염, 벤젠설폰산염, 톨루엔설폰산염, 캠퍼설폰산염 등), 아미노산염(예를 들어, 아스파르트산염, 글루탐산염 등), 4차 암모늄염, 알칼리토금속염(예를 들어, 나트륨염, 칼륨염 등), 알칼리토금속염(마그네슘염, 칼슘염 등) 등을 포함한다. 추가로, 염산염, 황산염, 메탄설폰산염, 아세트산염 등은 본 발명에 따른 화합물의 "약학적으로 허용 가능한 염"으로서 바람직하다.
RAD1901의 이성질체(예를 들어, 기하학적 이성질체, 광학 이성질체, 회전이성질체, 호변체 등)의 이성질체는, 예를 들어 재결정화, 광학적 분해, 예컨대 부분입체이성질체 염 방법, 효소 분획화 방법, 다양한 크로마토그래피(예를 들어, 박층 크로마토그래피, 칼럼 크로마토그래피, 유리 크로마토그래피 등)을 포함하는 일반적 분리 수단을 이용하여 단일 이성질체로 정제될 수 있다. 본 명세서의 용어 "단일 이성질체"는 100% 순도를 갖는 이성질체뿐만 아니라 통상적인 정제 조작을 통할 때조차 존재하는 표적 이외의 이성질체를 함유하는 이성질체를 포함한다. 결정 다형체는 때때로 RAD1901 또는 이의 염에 대해 존재하고, 이들의 모든 결정 다형체는 본 발명에 포함된다. 결정 다형체는 때때로 단일이며, 때때로 혼합물 및 둘 다 본 명세서에 포함된다.
특정 실시형태에서, RAD1901은 프로드러그 형태일 수 있는데, 이는 그의 활성 형태를 달성하기 위해 일부 변경(예를 들어, 산화 또는 가수분해)를 겪어야 한다는 것을 의미한다. 대안적인, RAD1901은 모 프로드러그의 그의 활성 형태로의 변경에 의해 생성된 화합물일 수 있다.
특정 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 종양 성장 저해 방법은 대상체를 프로파일링하는 유전자를 추가로 포함하되, 프로파일링될 유전자는 ABL1, AKT1, AKT2, ALK, APC, AR, ARID1A, ASXL1, ATM, AURKA, BAP, BAP1, BCL2L11, BCR, BRAF, BRCA1, BRCA2, CCND1, CCND2, CCND3, CCNE1, CDH1, CDK4, CDK6, CDK8, CDKN1A, CDKN1B, CDKN2A, CDKN2B, CEBPA, CTNNB1, DDR2, DNMT3A, E2F3, EGFR, EML4, EPHB2, ERBB2, ERBB3, ESR1, EWSR1, FBXW7, FGF4, FGFR1, FGFR2, FGFR3, FLT3, FRS2, HIF1A, HRAS, IDH1, IDH2, IGF1R, JAK2, KDM6A, KDR, KIF5B, KIT, KRAS, LRP1B, MAP2K1, MAP2K4, MCL1, MDM2, MDM4, MET, MGMT, MLL, MPL, MSH6, MTOR, MYC, NF1, NF2, NKX2-1, NOTCH1, NPM, NRAS, PDGFRA, PIK3CA, PIK3R1, PML, PTEN, PTPRD, RARA, RB1, RET, RICTOR, ROS1, RPTOR, RUNX1, SMAD4, SMARCA4, SOX2, STK11, TET2, TP53, TSC1, TSC2 및 VHL로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 유전자이다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 유방암 환자의 하위 집단을 치료하는 방법 및 상기 하위 집단을 본 개시내용에 기재된 바와 같은 투약 실시형태에 따라 유효 용량의 RAD1901(또는 조합물)로 치료하는 방법을 제공하되, 상기 하위 집단은 다음의 유전자 중 하나 이상의 발현이 증가되었다.
종양 성장을 저해하는 RAD1901의 능력을 확립하는 것에 추가로, 본 명세서에 제공된 결과는 RAD1901이 자궁 및 뇌하수체에서 에스트라다이올이 ER에 결합하는 것을 저해하는 것으로 나타난다(실시예 III(A)). 이들 실험에서, 자궁 및 뇌하수체 조직에서 ER에 대한 에스트라다이올 결합은 FES-PET 영상화에 의해 평가되었다. RAD1901에 의한 치료 후에, ER 결합의 관찰된 수준은 배경 수준 이하이다. 이들은 ER 활성에 대한 RAD1901의 길항 효과가 실시간 스캐닝을 이용하여 평가될 수 있다는 것을 확립한다. 이들 결과에 기반하여, 하나 이상의 표적 조직에서 에스트라다이올-ER 결합을 측정함으로써 본 명세서에 개시된 병용 요법에서 RAD1901 또는 이의 염 또는 용매화물의 치료 효능을 모니터링하기 위한 방법이 본 명세서에 제공되되, 결합의 감소 또는 소실은 효능을 나타낸다.
추가로, 에스트라다이올-ER 결합에 기반하여 RAD1901 또는 염 또는 용매화물의 투약량을 조절하는 방법이 제공된다. 이들 방법의 특정 실시형태에서, 결합은 화합물의 제1 투약량의 1회 이상의 투여 후 일정 시점에 측정된다. 에스트라다이올-ER 결합이 영향 받지 않거나 또는 사전결정된 역치 미만(예를 들어, 5% 미만, 10% 미만, 20% 미만, 30%, 또는 50% 미만의 기준에 대한 결합의 감소)의 감소를 나타낸다면, 제1 투약량은 너무 낮은 것으로 여겨진다. 특정 실시형태에서, 이들 방법은 화합물의 증가된 제2 투약량을 투여하는 추가적인 단계를 포함한다. 에스트라다이올-ER 결합의 목적으로 하는 감소가 달성될 때까지 투약량을 반복적으로 증가시키면서, 이들 단계가 반복될 수 있다. 특정 실시형태에서, 이들 단계는 본 명세서에 제공된 종양 성장을 저해하는 방법에 포함될 수 있다. 이들 방법에서, 에스트라다이올-ER 결합은 종양 성장 저해를 위한 대용물, 또는 성장 저해를 평가하는 보충적 수단으로서 작용할 수 있다. 다른 실시형태에서, 이들 방법은, 예를 들어 암세포 증식의 저해를 포함하는 종양 성장의 저해 이외의 목적을 위해 RAD1901의 투여와 함께 사용될 수 있다.
특정 실시형태에서, 병용 요법에서 RAD1901 또는 이의 염 또는 용매화물(예를 들어, 수화물)의 투약량을 조절하기 위해 본 명세서에 제공된 방법은 하기를 포함한다:
(1) 3, 4, 5, 6 또는 7일 동안 RAD1901 또는 용매화물(예를 들어, 수화물) 또는 염의 제1 투약량(예를 들어, 약 350 내지 약 500㎎ 또는 약 200 내지 약 600㎎/일)을 투여하는 단계;
(2) 예를 들어 본 명세서에 개시된 바와 같은 FES-PET 영상화를 이용하여, 에스트라다이올-ER 결합 활성을 검출하는 단계로서;
(i) ER 결합 활성이 검출 가능하지 않거나 또는 사전결정된 역치 수준 미만이라면, 계속해서 제1 투약량을 투여하는(즉, 투약량 수준을 유지하는) 단계; 또는
(ii) ER 결합 활성이 검출 가능하지 않거나 또는 사전 결정된 역치 수준 초과라면, 3, 4, 5, 6 또는 7일 동안 제1 투약량 초과의 제2 투약량(제1 투약량 + 약 50 내지 약 200㎎)을 투여하고, 이어서, 단계 (3)으로 진행하는 단계;
(3) 에스트라다이올-ER 결합 활성, 예를 들어 본 명세서에 개시된 바와 같은 FES-PET 영상화를 이용하여 에스트라다이올-ER 결합 활성을 검출하는 단계로서,
(i) ER 결합 활성이 검출 가능하지 않거나 또는 사전 결정된 역치 수준 미만이라면, 계속해서 제2 투약량을 투여하는(즉, 투약량 수준을 유지하는) 단계; 또는
(ii) ER 결합 활성이 검출 가능하거나 또는 사전 결정된 역치 수준 초과라면, 3, 4, 5, 6, 또는 7일 동안 제2 투약량 초과의 제3 투약량(예를 들어, 제2 투약량 + 약 50 내지 약 200㎎)을 투여하고, 이어서 단계 (4)로 진행하는 단계;
(4) ER 결합 활성이 검출되지 않을 때까지 제4 투약량, 제5 투약량 등을 통해 상기 단계를 반복하는 단계.
특정 실시형태에서, 본 발명은 용량 ER 민감성 또는 ER 내성 암을 검출하고/하거나 투약하기 위한 PET 영상화의 사용을 포함한다.
본 명세서에 개시된 RAD1901 또는 이의 용매화물(예를 들어, 수화물) 또는 염의 투여 경로는 국소 투여, 경구 투여, 피내 투여, 근육내 투여, 복강내 투여, 정맥내 투여, 방광내 주입, 피하 투여, 경피 투여, 및 경점막 투여를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
RAD1901-ERα 상호작용
(1) 적어도 하나의 계통의 내분비 치료를 받은 환자로부터의 ER 양성 유방 종양 샘플 내 돌연변이체 ERα
과거 2년에 보고된 5가지 연구에서, 내분비 치료 중 적어도 한 가지 계통을 받은 환자로부터의 총 187개의 전이성 ER 양성 유방 종양 샘플을 서열분석하고, ER LBD 돌연변이를 39명(21%)의 환자에서 확인하였다(제셀손(Jeselsohn)). 39명의 환자 중에서, 6가지의 가장 빈번한 LBD 돌연변이를 도 42에 나타낸 바와 같이 제셀손으로부터 개작하여 반응식 1에 나타낸다.
모든 LBD 돌연변이의 빈도를 표 11에 요약한다.
컴퓨터 모델링은 RAD1901-ERα 상호작용이 내분비 치료의 적어도 한 가지 계통을 받은 환자로부터의 전이성 ER 양성 유방 종양 샘플의 최근의 연구에서 발견된 LBD 돌연변이의 약 81.7%를 차지하는 ERα의 LBD의 돌연변이체, 예를 들어, Y537X 돌연변이체(여기서, X는 S, N 또는 C임); D538G; 및 S463P에 의해 영향받을 가능성이 없다는 것을 나타내었다(표 11, 실시예 V).
본 명세서에서 ERα 및/또는 돌연변이체 ERα에 결합된 RAD1901의 복합체 및 결정이 제공되며, 돌연변이체 ERα는 Y537X1(여기서, X1은 S, N 또는 C임), D538G, L536X2(여기서, X2는 R 또는 Q임), P535H, V534E, S463P, V392I, E380Q 및 이들의 조합을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는 하나 이상의 돌연변이를 포함한다.
본 명세서에 제공된 방법의 특정 실시형태에서, ERα 및 돌연변이체 ERα의 LBD는 AF-2를 포함한다. 다른 실시형태에서, LBD는 ERα의 아미노산 299 내지 554를 포함하거나, 이들로 이루어지거나 또는 본질적으로 이루어진다. 특정 실시형태에서, 돌연변이체 ERα의 LBD는 Y537X1(여기서, X1은 S, N 또는 C임), D538G, L536X2(여기서, X2는 R 또는 Q임), P535H, V534E, S463P, V392I, E380Q 및 이들의 조합을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는 하나 이상의 돌연변이를 포함한다. 본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "및/또는"은 "및" 경우와 "또는" 경우를 둘 다 포함한다.
청구되는 본 발명을 더 잘 예시하기 위해 다음의 실시예를 제공하며, 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 해석되어서는 안 된다. 특정 물질이 언급되는 정도로, 이는 단지 예시의 목적을 위한 것이며, 본 발명을 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 당업자는 본 발명의 능력의 실행 없이 그리고 본 발명의 범주로부터 벗어나는 일 없이 동등한 의미 또는 반응물을 개발할 수 있다. 다수의 변형이 본 명세서에 기재된 절차에서 만들어질 수 있는 한편, 또한 본 발명의 경계 내에 남아있다는 것이 이해될 것이다. 이러한 변형이 본 발명의 범주 내에 포함된다는 것은 본 발명자들의 의도이다.
실시예
물질 및 방법
시험 화합물
이하의 실시예에서 사용되는 RAD1901은 IRIS 파마슈티칼스 인코포레이티드(IRIX Pharmaceuticals, Inc.)(사우스캐롤라이나주 플로렌스에 소재)에 의해 제조된 (6R)-6-(2-(N-(4-(2-(에틸아미노)에틸)벤질)-N-에틸아미노)-4-메톡시페닐)-5,6,7,8-테트라하이드로나프탈렌-2-올 다이하이드로클로라이드였다. RAD1901은 탈이온수 중에서 0.5%(w/v) 메틸셀룰로스 중의 균질한 현탁액으로서 사용하기 위해 제형화된 건조 분말로서 저장하고, 동물 모델에 대해 p.o.로 투여하였다. 타목시펜, 랄록시펜 및 에스트라다이올(E2)을 시그마-알드리치(Sigma-Aldrich)(미주리주 세인트루이스에 소재)로부터 얻고 나서, 피하 주사에 의해 투여하였다. 풀베스트란트를 토크리스 바이오사이언시즈(미네소타주 미니애폴리스에 소재)로부터 얻고 나서, 피하 주사에 의해 투여하였다. 달리 언급되지 않는 한, 다른 실험실 시약을 시그마-알드리치로부터 구입하였다.
세포주
MCF-7 세포(인간 유방 전이성 선암종)를 미국 미생물 보존 센터(메릴랜드주 록빌에 소재)로부터 구입하고 나서, 5% CO2에서 0.01㎎/㎖ 소 인슐린 및 10% 소 태아 혈청(캘리포니아주 칼스베드에 소재한 인비트로젠(Invitrogen))으로 보충한 2mM L-글루타민 및 이글스 BSS, 0.1mM 비필수 아미노산 및 1mM 피루브산 나트륨을 함유하는 페놀 레드-유리 무기염 필수 배지(MEM)에서 일상적으로 유지하였다.
10% FBS 및 5㎍/㎖ 인간 인슐린으로 보충한 RPMI 성장 배지에서 대략 75% 합류로 10㎝ 접시 내 5% CO2 인큐베이터에서 T47D 세포를 배양시켰다.
생체내 이종이식 모델
모든 마우스를 멸균시키고, 먼지가 없는 잠자리가 있는 개개로 환기시킨 우리에서 무병원균 덮개로 수용하고, 명암주기(인공광의 12 내지 14시간 생체주기) 하에 멸균 사료 및 물에 임의로 접근시키고, 실온 및 습도를 제어하였다. 버니어 캘리퍼스(Vernier caliper)를 이용하여 종양을 1주 2회 측정하고 나서, 식 (L*W2)*0.52를 이용하여 용적을 계산하였다.
PDx 모델
환자 유래 이종이식 모델(PDx 모델)의 일부 예를 도 1에 나타낸다. 환자 유래 유방암 종양을 갖는 PDx 모델을 종양 이질성을 유지하기 위해 제한된 횟수로 동물(무흉선 누드 마우스(Nu(NCF)-Foxn1nu))에서 연속 계대시킨 살아있는 인간 종양 조직 또는 유체로부터 확립하였다. 사전 연구 종양 용적을 그의 추정 시작일의 대략 1주전에 시작해서 각각의 실험에 대해 기록하였다. 종양이 적절한 종양 용적 개시(Tumor Volume Initiation: TVI) 범위(150 내지 250㎣)에 도달되었을 때, 동물을 처리군 및 대조군으로 무작위화하고 나서, 투약을 개시하고(제0일, 각각의 군에서 8 내지 10 대상체); 모든 연구에서 동물은 개개로 각각의 실험을 전체적으로 따랐다. 초기 투약을 제0일에 시작하고; 모든 그룹의 동물을 체중에 따라 투약하였다(0.01㎖/그램; 10㎖/㎏). 각각의 그룹을 제0일로부터 구체화하여 비히클(대조군, p.o., 종점까지 q.d.), 타목시펜(1㎎/대상체, s.c., 종점까지 q.o.d.), 풀베스트란트(파슬로덱스(등록상표); 1㎎/대상체 또는 필요하다면 3㎎/대상체, SC/주, X 5 그리고 필요하다면 연장함), 또는 RAD1901(30, 60 또는 120㎎/㎏의 대상체, p.o., 종점까지 q.d.)로 치료하였다. 모델에 따라서 56 내지 60일 동안 치료 기간을 지속하였다. 이들 PDx 모델에 대한 음용수를 17β-에스트라다이올을 이용하여 보충하였다.
제제 효능
모든 연구를 위해, 제0일에 시작해서, 디지털 캘리퍼에 의해 종양 치수를 측정하고, 개개 및 평균 추정 종양 용적(평균 TV ± SEM)을 포함하는 데이터를 각각의 그룹에 대해 기록하고 나서; 식을 이용하여 종양 용적을 계산하였다(Yasui et al. Invasion Metastasis 17:259-269 (1997), 이는 본 명세서에 참고로 포함됨): TV= 폭 2 x 길이 x 0.52. 일단 추정 그룹 평균 종양 용적이 종양 용적(TV) 종말점에 도달되면 각각의 그룹 또는 연구를 종료하였고(시간 종점은 60일이었고; 용적 종말점은 그룹 평균 2㎤이었음); 종양 용적이 2㎤ 이상에 도달된 개개 마우스를 연구로부터 제거하고 나서, 평균이 용적 종점에 도달되거나 또는 연구가 시간 종점에 도달될 때까지 최종 측정을 그룹에 포함시켰다.
효능 계산 및 통계학적 분석
종양 성장 저해%(TGI%) 값을 (대조군이 종양 용적 또는 시간 종점에 도달되었을 때) 단일 시점에 계산하고 나서, 하기 식에 의해 초기(i) 및 최종(f) 종양 측정을 이용하여 각각의 처리군(T) 대 대조군(C)에 대해 보고하였다(Corbett TH et al. In vivo methods for screening and preclinical testing. In: Teicher B, ed., Anticancer Drug Development Guide. Totowa, NJ: Humana. 2004: 99-123.): TGI%= 1- Tf-Ti / Cf-Ci.
통계
TGI 연구 - 일원 ANOVA + 던넷 다중 비교 검정(Dunnett's Multiple Comparisons Test)(Corbett TH et al).
샘플 수집
종말점에서, 종양을 제거하였다. 한 개의 단편을 순간 냉동시키는 한편, 다른 단편을 적어도 24시간 동안 10% NBF 중에 넣고 나서, 포말린 고정 파라핀 포매시켰다(FFPE). 순간 냉동시킨 샘플을 -80℃에서 저장하고 나서; FFPE 블록을 실온에서 저장하였다.
웨스턴 블롯
세포를 채취하고 나서, 표준 실행을 이용하여 단백질 발현을 분석하였다. 투약 마지막 날 후에 표시한 시점에 종양을 채취하고 나서, 조직용해기(Tissuelyser)(퀴아젠(Qiagen))를 이용하여 프로테아제 및 포스파타제 저해제와 함께 RIPA 완충제 중에서 균질화시켰다. MX에 의해 동등한 양의 단백질을 분리시키고, 나이트로셀룰로스 막에 옮기고 나서, 표준 실행을 이용하여 다음의 항체로 블롯팅하였다:
Figure pct00005
에스트로겐 수용체(산타크루즈(SantaCruz)(HC-20); sc-543)
Figure pct00006
프로게스테론 수용체(세포 신호전달 기법; 3153)
Figure pct00007
빈쿨린(Vinculin)(시그마-알드리치(Sigma-Aldrich), v9131)
qPCR 분석을 다음과 같이 수행하였다: 세포를 채취하고 나서, mRNA를 추출하고, 프로게스테론 수용체, GREB1 및 TFF1(라이프테크(LifeTech))에 특이적인 프라이머를 이용하여 cDNA 합성 및 qPCR을 위해 동일한 양을 사용하였다. 1D 퀀트 소프트웨어(Quant software)(GE)를 이용하여 밴드를 정량화하였다.
면역조직화학
종양을 채취하고 나서, 포말린-고정시키고 파라핀 내로 포매시켰다. 포매 종양을 절편화하고 나서(6μM), ER, PR, 및 Her2에 특이적인 항체로 염색하였다. 다음과 같이 정량화를 수행하였다: 양성 세포(0 내지 100%) 및 염색 강도(0 내지 3+)에 대해 5개 필드를 계수화하였다. 다음의 식을 이용하여 H-스코어(0 내지 300)를 계산하였다: 명확성% * 강도.
실시예 I. RAD1901은 상이한 사전 내분비 요법에 의해 WT ER 또는 돌연변이체 ER(예를 들어, Y537S)를 발현시키는 종양 및/또는 암에서 종양 성장을 저해하였다.
I(A). 동물 이종이식 모델에 대한 RAD1901의 유효성
I(A)(i) RAD1901은 ER 상태 및 사전 내분비 요법과 상관없이 PDx 모델(PDx-1 내지 PDx-12)에서 종양 성장을 저해하였다
도 1은 RAD1901 단독으로 치료한 마우스에 대한 다양한 PDx 모델에서 종양 성장 저해 효과를 입증한다. ER, PR 및 Her2 수준을 변화시키면서 다양한 일반적 배경에서 RAD1901 반응을 시험하기 위해 12마리의 환자-유래 이종이식 모델을 선별하였다. "*"로 표시한 PDx 모델(PDx-1 내지 PDx-4, 및 PDx-12)(n = 8 내지 10)에 대해 완전한 효능 연구를 수행하였다. 이들 PDx 모델을 60일 동안 비히클(음성 대조군) 또는 60㎎/㎏ p.o., q.d.의 투약량으로 RAD1901로 치료하였다. 90㎎/㎏, 60일 동안, p.o., q.d의 투약량에서 비히클(음성 대조군) 또는 RAD1901로 치료한 n = 3에서 다른 PDx 모델(PDx-5 내지 PDx-11)에 대해 선별 연구를 수행하였다. 도 1에서 입증하는 바와 같이, ER 및 추가적인 유도자(예를 들어, PR+ 및/또는 Her2+)에 의해 성장이 유도된 PDx 모델은 RAD1901 치료가 유리하였다. RAD1901은 사전 치료, 치료 나이브(Rx-나이브) 또는 방향화효소 저해제, 타목시펜(tam), 화학요법(chemo), Her2 저해제(Her2i, 예를 들어, 트라스투주맙, 라파티닙), 베바시주맙, 풀베스트란트 및/또는 리툭시맙에 의한 치료와 상관없이, ER 돌연변이 및/또는 Her2(PDx)의 고수준의 발현을 갖는 모델에서 종양 성장을 저해하는 데 효능이 있었다.
I(A)(ii) RAD1901은 WT ER을 발현시키는 이종이식 모델에서 퇴행을 유도하였다
I(A)(ii)(1) RAD1901은 풀베스트란트 치료에 대해 반응성인 MCF-7 이종이식에서 퇴행을 유도하였다.
MCF-7 이종이식 모델-I
암컷 무흉선 누드 마우스(Crl:NU(NCr) - Foxn1nu)에서 제1 MCF-7 이종이식 모델(MCF-7 이종이식 모델-I)을 이용하여 RAD1901의 항종양 효과를 시험하고, 에스트라다이올 투여로 종양 성장을 자극하였다. 종양 세포 이식 3일 전에, 멸균 투관침을 이용하여 모든 시험 동물의 견갑골 사이에서 에스트로겐 펠렛(0.36㎎ E2, 60-일 방출; 플로리다주 새러소타에 소재한 이노베이티브 리서치 오브 아메리카(Innovative Research of America))을 피하로 이식하였다. MCF-7 인간 유방 선암종 세포를 10% 소 태아 혈청, 100 단위/mL 페니실린 G, 100㎍/㎖ 스트렙토마이신 설페이트, 2mM 글루타민, 10mM HEPES, 0.075% 중탄산나트륨, 및 25㎍/㎖ 젠타마이신을 함유하는 RPMI-1640 배지 내 대수기 중간까지 배양시켰다. 종양 세포 이식일에, MCF-7 세포를 트립신처리하고 나서, 펠렛화하고, 5x 107개 세포/㎖의 농도로 인산염 완충 식염수 중에서 재현탁시켰다. 각각의 시험 마우스는 우측 옆구리에서 피하로 이식한 1 x 107개 MCF-7 세포를 받았고, 종양 성장을 모니터링하였다. 필요할 때, 1㎣의 종양 용적이 1㎎ 종양 습윤 중량과 동일하다는 추정에 기반하여 종양 중량을 추정하였다. MCF-7 세포 이식 후 5일 동안, 이어서, 연구의 나머지 내내 1주 2회 체중을 q.d.로 측정하였다.
종양 세포 이식 후 14일(연구의 제1일로 표기함), 마우스는 21.4 내지 32.5그램 범위의 체중으로 9주령이었고, 개개 종양 용적은 75 내지 144㎣ 범위이었으며, 그룹 평균 종양 용적(MTV)은 108㎣였다. 마우스를 각각 15마리 동물의 9개 그룹으로 무작위화하고 나서, 비히클 p.o., 타목시펜(1㎎/동물 s.c., q.o.d.), 풀베스트란트(0.5㎎/동물 s.c., q.d.) 또는 RAD1901(0.3, 1, 3, 10, 30, 60, 90 및 120㎎/㎏ p.o., q.d.)로 치료하였다.
총 용적을 1주 2회 평가하였다. 종양 종점을 대조군에서의 1,500㎣의 MTV로서 정의하였다. 체중 측정 및 치료 관련 부작용의 임상 징후에 대한 빈번한 관찰을 통해 치료 내약성을 평가하였다. 한 번의 측정에 대해 30%를 초과하거나, 또는 3회의 측정에 대해 25%를 초과하는 체중 감소를 갖는 동물을 인도적으로 안락사시키고 나서, 치료 관련 사망으로 분류하였다. 허용 가능한 독성은 연구 동안 20% 미만의 그룹 평균 체중 감소 및 10마리의 치료 동물 중에서 1 이하의 치료 관련 사망 또는 10%로서 정하였다. 연구 동물의 마지막에 아이소플루란 마취 하에 최종 심장천자에 의해 안락사시켰다.
종양 성장 저해(TGI) 백분율에 기반하여 치료 결과를 평가하고, 기준(즉, 제1일) 종양 용적과 연구 마지막(즉, 제42일)에 종양 용적 사이의 차이 백분율로서 정하였다. TGI 분석을 위한 데이터 세트는 치료 관련 또는 비치료 관련 원인에 기인하여 사망한 임의의 동물보다 더 적게 각각의 그룹에서 모든 동물을 포함하였다. 잠재적 치료 활성을 위한 역치는 ≥60% TGI의 치료 효과로서 정하였다. 크러스칼-왈리스 또는 맨-휘트니 검정을 이용하여 결과를 분석하였고, 미리 특정된 알파는 0.05이었다.
30 및 60㎎/㎏의 투약량에서 RAD1901에 의한 치료는 상당한 TGI(각각 제40일에 66% TGI(P<0.05) 및 88% TGI(P<0.001))를 초래하였다. 이들 결과는 타목시펜(제40일에 86% TGI) 및 풀베스트란트(제40일에 88% TGI)에 의해 얻은 것과 유사하였다(도 2a). 도 2a에서, 박스는 관찰의 25번째 내지 75번째 백분위를 나타내고, 선은 관찰의 중앙값을 나타내며, 휘스커는 극도의 관찰을 나타낸다.
더 고용량의 RAD1901이 이 모델에서 강한 효과를 유도하였는지의 여부를 연구하기 위해, 120㎎/㎏까지의 RAD1901의 투약량을 평가하였다(도 2b 내지 도 2d). 더 초기의 결과와 일치되게, RAD1901은 60㎎/㎏의 투약량에서 상당한 종양 저해를 유도하였다(2/10 부분적 퇴행에 의해 제42일에 94% TGI). 더 높은 투약량은 훨씬 더 높은 TGI를 초래하였다(90㎎/㎏에서 8/10 PR에 의해 97% TGI; 120㎎/㎏에서 7/10 PR에 의해 96% TGI). 시험한 모든 투약량에서, RAD1901은 타목시펜 또는 풀베스트란트 중 하나보다 더 큰 정도로 종양 성장을 저해하였다. 타목시펜 치료는 (2/10 PR에 의해) 90%의 TGI를 수득한 반면, 풀베스트란트 치료는 (1/10 PR에 의해) 87% TGI를 초래하였다. 90 및 120㎎/㎏ 그룹에서 RAD1901 저해는 타목시펜(P<0.05)과 풀베스트란트(P<0.05) 둘 다에 비해 유의하게 더 컸다.
전반적으로, 이들 결과는 RAD1901이 용량 의존적 방식으로 에스트로겐-유도 종양 성장을 저해한다는 것을 나타낸다. RAD1901로 치료한 마우스에서 치료 종양 용적의 마지막은 기준과 동일하거나 또는 더 낮았는데, 이는 RAD1901이 종양 성장을 저해할 뿐만 아니라 마우스 이종이식 모델에서 종양 크기의 퇴행을 생성할 수 있다는 것을 나타낸다.
RAD1901은 체중에 대한 이상 반응 없이 모든 투약량 수준에서 잘 용인되었다(도 2e).
RAD1901의 항종양 효과는 이하에 기재한 바와 같이 제조한 제2 MCF-7 이종이식(MCF-7 이종이식 모델-II)을 이용하여 추가로 시험하였다.
MCF -7 이종이식 모델-II
세포 이식 2일 전에, 0.18/90-일 방출 17β-에스트라다이올 펠렛으로 Balb/C-누드 마우스를 접종하였다. MCF-7 세포(PR+, Her2-)를 채취하고 나서, 1 x 107개 세포를 Balb/C-누드 마우스의 우측 옆구리에 피하로 이식하였다. 종양이 평균 200㎣에 도달되었을 때, 마우스를 종양 용적에 따라 처리군 내로 무작위화하고, 시험 화합물로 치료하였다. 각각의 그룹을 제0일에 특정된 비히클(대조군, p.o., 종점까지 q.d.), 풀베스트란트(파슬로덱스(등록상표); 3㎎/대상체, s.c., qwk X 5 및 필요하다면 연장함) 또는 RAD1901(대상체의 30㎎/㎏ 또는 60㎎/㎏, p.o., 종점까지 q.d.)로 치료하였다. 치료 기간은 28일 동안 지속되었다.
도 3A 내지 도 3B는 MCF-7 이종이식 모델-II에서, RAD1901(30㎎/㎏ 및 60㎎/㎏, p.o., q.d.)이 풀베스트란트(3㎎/대상체, s.c., qwk)보다 더 상당한 종양 성장 저해를 초래하였다는 것을 보여준다. 예상치 못하게, 풀베스트란트 치료군에서 10마리 대상체 중 한 마리만이 연구의 마지막에 약한 종양 퇴행을 나타낸 반면, 30㎎/㎏ RAD1901 치료군에서 10마리 대상체 중 5마리 및 60㎎/㎏ RAD1901 치료군에서 10마리 대상체 중 8마리는 다양한 퇴행 수준을 나타내었다(도 3B).
I(A)(ii)(2) RAD1901은 풀베스트란트 치료에 반응성인 WT ER PDx 모델(예를 들어, PDx-4, PDx-2 및 PDx-11)에서 종양 퇴행을 유도하였다.
상이한 WT ER PDx 모델(PDx-4, PR+, Her2- 및 PDx-2 모델, PR+, Her2+, 둘 다 치료 나이브; 및 PDx-11, PR+, Her2+(AI, 풀베스트란트, 및 chemo로 치료))은 풀베스트란트(1㎎/용량, 또는 3㎎/용량, s.c., qwk)에 대해 상이하게 반응하였지만, 다양한 용량(30㎎/㎏, 60㎎/㎏ 및/또는 120㎎/㎏, p.o., q.d.)에서 RAD1901 치료는 풀베스트란트보다 모든 PDx 모델에서 더 유의한 종양 성장 저해를 야기하였다(PDx-4 모델에 대해 도 4A, PDx-2 모델에 대해 도 6, 및 PDx-11 모델에 대해 도 7). 예를 들어, 풀베스트란트 치료(1㎎/용량)에 대해 반응성인 PDx-4 모델에서, RAD1901은 예상치 못하게 풀베스트란트(1㎎/대상체)보다 더 많은 대상체에서 종양 성장을 중단시키거나 또는 종양 퇴행을 유도하였다(도 4B). 더 나아가, 풀베스트란트 치료(3㎎/용량)에 대해 반응성인 PDx-11 모델에서, RAD1901은 예상치 못하게 치료한 모든 대상체에서 종양 성장을 중단시키고, 종양 퇴행을 유도한 반면, 풀베스트란트(3㎎/대상체)는 치료한 10명의 대상체 중 단지 2명에서 퇴행을 야기하였다(도 7B).
60㎎/㎏ p.o. 단독에서 RAD1901은 PDx-2 모델에서 3㎎/용량 s.c. 단독에서 풀베스트란트와 유사한 종양 성장 저해를 달성하였다(도 6). 더 나아가, RAD1901과 풀베스트란트의 조합은 추가적인 이점을 제공하지 않았다.
최종적으로, 풀베스트란트 치료(1㎎/용량, s.c., qwk)에 반응성인 PDx-4 모델에서, RAD1901-매개 종양 성장 저해는 RAD1901 치료(30㎎/㎏, p.o., q.d.) 기간이 종료되고 적어도 2개월 후에 치료 없이 유지된 반면, 에스트라다이올 치료는 계속되었다(도 5).
I(A)(ii)(3) RAD1901은 풀베스트란트 치료에 거의 반응하지 않는 WT ER PDx 모델(예를 들어, PDx-12)에서 퇴행을 유도하였다.
풀베스트란트(1㎎/용량, s.c., qwk)에 거의 반응하지 않는 WT ER PDx-12(PR+, Her2+, 치료 나이브)에서, 다양한 용량(30㎎/㎏ 또는 60㎎/㎏, p.o., q.d.)에서 RAD1901 치료는 예상치 못하게 PDx-12 모델에서 종양 퇴행을 야기하였다(도 8).
I(A)(iii) RAD1901은 돌연변이체 ER(ERα Y537S)을 발현시키는 이종이식 모델에서 종양 성장을 저해하고/하거나 퇴행을 유도하였다
I(A)(iii)(1) RAD1901은 풀베스트란트 치료에 거의 반응하지 않은 PDx-5 모델에서 종양 성장을 저해하였다.
PDx 모델에 대해 상기 기재한 바와 유사한 프로토콜 후에 PDx-5 모델을 준비하였다. 각각의 투약 그룹의 종양 크기를 1주 2회 베니어 캘리퍼로 측정하고 나서, 식 (L*W2)*0.52을 이용하여 용적을 계산하였다.
RAD1901은 풀베스트란트 치료(3㎎/용량, s.c., qwk)에 거의 반응성이 아닌 PDx-5 모델에서 풀베스트란트보다 종양 성장 저해(60㎎/㎏ 또는 120㎎/㎏, p.o., q.d.)에서 더 효과적이었다(도 9a 내지 도 9c). 더 고용량(120㎎/㎏)에 의한 RAD1901 치료는 더 저용량(60㎎/㎏)에 의한 RAD1901 치료보다 더 효과적이었다(도 9a 내지 도 9c). 개개 동물의 종양 크기를 제17일(도 9b) 및 제56일(도 9c)에 각각 측정하였다.
I(A)(iii)(2) RAD1901은 풀베스트란트 치료에 반응성인 PDx-6 모델에서 퇴행을 유도하였다.
돌연변이체 ER(예를 들어, Y537S)를 발현시키는 PDx 모델은 풀베스트란트 치료(1㎎/용량, s.c., qwk) 및 타목시펜(1㎎/용량, s.c., 3qwk) 치료, 예를 들어, PDx-6(PR+, Her2:1+, 타목시펜, AI, 및 풀베스트란트로 이전에 치료)에 대해 반응성일 수 있다(도 10a 내지 도 10b). RAD1901(30㎎/㎏, 60㎎/㎏ 및 120㎎/㎏, p.o., q.d.)은 풀베스트란트 및 타목시펜보다 종양 성장 저해에서 더 효과적이었다(도 10a 내지 도 10b). 예를 들어, PDx-6 모델의 RAD1901 치료는 종양 퇴행을 나타낸 반면, 풀베스트란트 치료(1㎎/용량)는 그렇지 않았다(도 10b, 기준으로부터 연구의 마지막에 개개 종양 크기의 변화를 나타냄).
I(A)(iv) 비-종양 보유 마우스에 대한 풀베스트란트 치료의 약동학적 평가.
다양한 용량의 풀베스트란트를 마우스에 투여하고 나서, 대상체에 대한 상당한 용량 노출을 보여주었다(도 11).
제1일(D1 Rx) 및 제8일(D8 Rx, n=4/용량 수준)에 누드 마우스에 피하로 1, 3 또는 5㎎/용량으로 풀베스트란트를 투여하였다. 제2 투약 후에 168시간까지 표시 시점에서 혈액을 수집하고 나서, 원심분리하고 나서, 혈액을 액체 크로마토그래피-질량 분석법에 의해 분석하였다.
I(B) RAD1901은 뇌 전이성의 마우스 이종이식 모델에서 생존을 촉진시켰다 (MCF-7 두개 내 모델).
혈액 뇌 장벽을 가로지르고 종양 성장을 저해하는 RAD1901의 잠재적 능력은 MCF-7 두개 내 종양 이종이식 모델을 이용하여 추가로 평가하였다.
암컷 무흉선 누드 마우스(Crl:NU(NCr)-Foxn1nu )를 종양 이종이식 연구를 위해 사용하였다. 종양 세포 이식 3일 전에, 에스트로겐 펠렛(0.36㎎ E2, 60일 방출, 플로리다주 사라소타에 소재한 이노베이티브 리서치 오브 아메리카(Innovative Research of America))를 멸균 투관침을 이용하여 모든 시험 동물의 견갑골 사이에 피하로 이식하였다. MCF-7 인간 유방 선암종 세포를 10% 소 태아 혈청, 100 단위/㎖ 페니실린 G, 100㎍/㎖ 스트렙토마이신 설페이트, 2mM 글루타민, 10mM HEPES, 0.075% 중탄산나트륨 및 25㎍/㎖ 젠타마이신을 함유하는 RPMI-1640 배지에서 대수기 중간까지 배양시켰다. 종양 세포 이식일에, 세포를 트립신처리하고 나서, 펠렛화하고, 5x 107개 세포/㎖의 농도로 인산염 완충 식염수 중에서 재현탁시켰다. 각각의 시험 마우스는 두개 내로 이식한 1 x 106개 MCF-7 세포를 받았다.
종양 세포 이식 5일 후에(연구 제1일로 표기), 마우스를 각각 12마리 동물의 3개 그룹으로 무작위화하고 나서, 상기 기재한 바와 같이 비히클, 풀베스트란트(0.5㎎/동물 q.d.) 또는 RAD1901(120㎎/㎏ q.d.)로 치료하였다.
종점은 사망률 또는 대조군의 3X 생존 중 먼저 도래되는 것으로 정하였다. 체중 측정 및 치료 관련 부작용의 임상 징후에 대한 빈번한 관찰에 의해 치료 내약성을 평가하였다. 1회 측정에 대해 30%를 초과하거나 또는 3회 측정에 대해 25%를 초과하는 체중 감소가 있는 동물을 인도적으로 안락사시키고 나서, 치료 관련 사망으로 분류하였다. 허용 가능한 독성은 연구 동안 20% 미만의 그룹 평균 체중 감소 및 10마리의 치료 동물 중에서 1 이하의 치료 관련 사망 또는 10%로서 정하였다. 연구 동물의 마지막에 아이소플루란 마취 하에 최종 심장천자에 의해 안락사시켰다. LC-MS/MS를 이용하여 혈장 및 종양 중의 RAD1901 및 풀베스트란트 농도를 결정하였다.
카플란 마이어(Kaplan Meier) 생존 분석은 RAD1901은 풀베스트란트에 비해 생존이 상당히 연장되었다는 것을 입증하였다(P<0.0001; 도 12). 대조군 또는 풀베스트란트 그룹 중 어떤 동물도 각각 제20일 및 제34일 이상으로 생존하지 않은 반면, 제54일의 마지막까지 RAD1901 치료 동물의 41%(5/12)는 생존하였다.
혈장 중의 RAD1901 농도는 738 ± 471ng/㎖이었고, 두개 내 종양에서 462 ± 105ng/g이었는데, 이는 RAD1901이 혈액 뇌 장벽을 효과적으로 가로지를 수 있다는 가설을 뒷받침한다. 대조적으로, 풀베스트란트의 농도는 혈장 중에서(21 ± 10ng/㎖) 그리고 두개 내 종양(8.3 ± 0.8ng/g)에서 실질적으로 더 낮았다.
I(C). ER+ 진행 유방암에 대한 RAD1901 치료의 1상 연구.
1상 연구에서, 안전성, 내약성 및 약동학을 44명의 폐경 후 여성에서 평가하였다. 용량 제한 독성은 관찰되지 않았고, 최대 허용 용량(MTD)은 확립되지 않았다. 혈장 노출은 시험한 용량 범위에 걸쳐 비례하여 용량 초과로 증가되었다.
대상체
유방의 선암종이 진행된 8명의 폐경 후 여성(IHC에 의해 1% 미만의 염색이 없는 ER+ 종양, 0 또는 1의 ECOG 수행도를 갖는 HER2-음성 종양)을 1상 연구를 위해 대상체로서 등록하였다. 대상체는 다음의 사전 치료를 받아야 한다:
Figure pct00008
진행/전이 상황에서 2가지 이하의 사전 화학요법
Figure pct00009
6개월 사전 내분비 요법 및 사전 내분비 요법에 대해 진행됨
Figure pct00010
다음의 창 내에서 비치료 또는 증상이 있는 CNS 전이 또는 사전 항암 치료가 있는 대상체를 제외하였다:
Figure pct00011
타목시펜 < 제1 용량 연구 치료의 14일 전
Figure pct00012
풀베스트란트 < 제1 용량 연구 치료의 90일 전
Figure pct00013
화학요법 < 제1 용량 연구 치료의 28일 전
Figure pct00014
LHRH 유사체 < 제1 용량 연구 치료 12개월 전
DLT 기준
Figure pct00015
비혈액학적 독성의 3 이상의 임의의 등급(최적의 의약으로 치료되지 않은 탈모 및 구역, 구토 또는 설사를 제외함)
Figure pct00016
비혈액학적 독성의 3 이상의 임의의 등급
Figure pct00017
7일 초과 동안 연구 약물 중단을 야기하는 임의의 등급 독성
Figure pct00018
용량 제한 독성 관찰 기간이 1주기의 제1일 내지 제28일임
투약 및 종양 평가
대상체를 200㎎ 또는 400㎎ p.o., q.d.에서 1회 용량으로 치료하고 나서, 질환 진행까지 q8w에 평가하였다(도 13). 1상 연구에 등록한 유방 선암종이 진행된 8명의 폐경 후 여성의 중요한 기준 인구통계를 표 1에서 요약한다.
대상체의 사전 암 치료는 도 14a에 나타내고; 받은 RAD1901 치료를 도 14b에 나타내고, 대상체 1 내지 3을 200㎎ RAD1901 p.o., q.d.로 치료하고 나서, 대상체 4 내지 7을 400㎎ RAD1901 p.o., q.d로 치료하였다. 화살표는 진행 중인 연구를 나타내고, 막대는 중단된 치료를 나타낸다. 도 14a에서, "AC"는 독소루비신/사이클로포스파마이드이고; "FAC"는 5-플루오로유라실/독소루비신/사이클로포스파마이드이다.
치료 관련 이상 반응( TEAE )
TEAE를 연구 내내 기록하였다. 예비 데이터를 표 2에 요약한다. "n"은 주어진 범주에서 적어도 하나의 치료-관련 AE를 갖는 대상체의 수이고, AE를 이상반응에 대한 공통평가기준(Common Terminology Criteria for Adverse Event: CTCAE) v4.0에 따라 등급화하고 나서, 동일한 바람직한 용어의 다중 시나리오를 갖는 임의의 환자를 가장 중증 등급으로 단지 1회 계수화하였다. 사망 또는 용량 제한 독성은 관찰되지 않았고, 최대 허용 용량(MTD)은 확립되지 않았다. 대부분의 AE는 등급 1 또는 2였다. 가장 통상적인 치료 관련 AE는 소화불량(5/8 환자) 및 구역(3/8 환자)였다. 두 중증의 AE(SAE)를 관찰하였는데, 하나는 3등급 치료 관련 변비이고, 숨(흉수)의 다른 단축은 치료와 관련되지 않았다.
이 1상 연구의 심하게 전치료된 대상체는 다중 내분비 및 표적화제, 예를 들어, CDK4/6, PI3K 및 mTOR 저해제로 이미 치료한 대상체를 포함하였다. 200㎎ 용량 p.o., q.d.에서 6개월까지, 그리고 400㎎ 용량 p.o., q.d.에서 2개월까지 RAD1901 치료 후에 용량 제한 독성은 관찰되지 않았다. 따라서, RAD1901은 특히 내분비 및/또는 표적화제, 예컨대 CDK4/6, PI3K 및 mTOR 저해제로 이미 치료한 대상체에서 ER+ 진행 유방암을 치료하기 위한 잠재력을 나타내었다.
실시예 II. RAD1901은 종양에 바람직하게 축적되었고, 뇌에 전달될 수 있었다.
실시예 I(A)(i)에 기재한 바와 같은 MCF-7 이종이식은 LC-MS/MS를 이용하여 혈장 미치 종양에서 RAD1901 농도에 대해 추가로 평가하였다. 연구의 마지막에, 혈장 중의 RAD1901 농도는 344 ± 117ng/㎖이었고, 종양에서 60㎎/㎏ 용량 수준에 대해 11,118 ± 3,801ng/㎖였다. 종양 농도가 혈장 중에서보다 대략 20 내지 30배 더 높은 경우, 더 낮은 용량 수준에서 유사한 종양 대 혈장 비를 또한 관찰하였다. 40일 동안 치료한 마우스에 대한 혈장, 종양 및 뇌에서의 RAD1901 수준을 표 3에 요약한다. 상당한 양의 RAD1901을 치료 마우스의 뇌에 전달하였는데(예를 들어, B/P 비(뇌에서의 RAD1901 농도/혈장 중의 RAD1901 농도) 참조), 이는 RAD1901이 혈액 뇌 장벽(BBB)을 가로지를 수 있다는 것을 나타낸다. 예상치 못하게, RAD1901은 바람직하게는 종양에서 축적된다. 예를 들어, 표 3에 나타낸 T/P(종양에서의 RAD1901 농도/혈장 중의 RAD1901 농도) 비 참조.
실시예 III. RAD1901은 ER 경로를 저해하고, ER을 분해하였다.
III(A). RAD1901은 건강한 폐경 후 여성 인간 대상체에서의 자궁 및 뇌하수체에서의 ER-맞물림을 감소시켰다.
대상체는 적어도 12개월의 무월경 기간 및 폐경기와 일치되는 혈청 FSH를 가졌다. 대상체는 40 내지 75세이고, BMI가 18.0 내지 30㎏/㎡였다. 대상체는 무손상 자궁을 가졌다. 임상적으로 적절한 병리의 증거를 갖는 대상체는 뇌졸중 및 정맥 혈전 색전증 사건 이력이 증가되었거나, 또는 임상 연구 센터에 대한 입원 14일 미만 전에 병행 의약의 사용(파라세타몰이 3일 전까지 허용됨)을 배제하였다.
기준에서 그리고 RAD1901에 대한 노출 6일 후에 FES-PET를 수행하여 자궁 내 ER 맞물림을 평가하였다. RAD1901은 각각 200㎎(7 대상체) 및 500㎎(6 대상체) 용량 수준에서 자궁 내 ER의 83% 및 92%를 차지하였다.
FES-PET 영상화는 200㎎ 또는 500㎎(p.o., q.d, 6일)으로 RAD1901 치료 후에 자궁과 뇌하수체 둘 다에 대한 표지-에스트라다이올의 결합의 상당한 감소를 나타내었다.
높은 ER 발현에 기인하여, 자궁은 RAD1901 치료 전 기준에서 강한 FES-PET 신호를 나타내었다(도 15a), 200㎎ 용량 수준으로 치료한 대상체 3의 자궁 FES-PET 스캔에 대한 기준 단면도; 도 15b, 500㎎ 용량 수준으로 치료한 대상체 7의 자궁 FES-PET 스캔 각각에 대한 기준 시상면상 및 단면도. 그러나, 연구에서 제6일에 투약 후 4시간에 스캐닝하였을 때, 자궁은 거의 보이지 않았다(배경 FES-PET 신호에 있거나 근처임(도 15a), 대상체 3의 자궁 스캔에 대한 제6일 단면도; 및 도 15b, 대상체 7의 자궁 스캔 각각에 대한 제6일 시상면 상 및 단면도). 이러한 데이터는 수용체에 대한 결합에 대해 ER 분해 및/또는 경쟁과 일치되었다. 도 15a 내지 도 15b는 또한 RAD1901 치료 전에 그리고 후에 자궁의 존재를 나타내는 FES-PET에 의해 스캐닝된 자궁의 CT 스캔을 포함한다.
FES-PET 자궁 스캔 결과는 7명 대상체에 대한 기준으로부터의 투약 후 ER 결합의 변화를 나타내도록 추가로 정량화되는데(도 15c), 이는 각각 200㎎ 용량 그룹 및 500㎎ 용량 그룹의 예로서 대상체 1 내지 3 및 대상체 4 내지 7을 나타낸다. RAD1901은 더 낮은 용량 수준(200㎎)에서 강한 ER 맞물림을 나타내었다.
도 16은 6일 후에 500㎎ p.o., q.d.에서 (기준) 전에 그리고 (치료 후) RAD1901 치료 후에 자궁(A) 및 뇌하수체(B)의 FES-PET 스캔의 대표적인 영상을 나타내었다. 도 16A는 (a) 측면 단면도; (b) 세로 단면도; 및 (c) 세로 단면도에 의한 자궁의 FES-PET 스캔을 나타내었다.
자궁 및 뇌하수체의 대상체의 투약 후 FES-PET 스캔은 자궁에서(도 16A, 치료 후) 그리고 뇌하수체에서(도 16B, 치료 후) 각각 ER 결합의 주목할 만한 신호를 나타내지 않았다.
따라서, 결과는 RAD1901이 6일 후에 200 및 500㎎ p.o., q.d.의 투약량에서 인간에서의 ER과 효과적으로 맞물린다는 것을 나타내었다.
자궁, 근육 및 뼈에 대한 표준 흡수 값(SUV)을 계산하고 나서, 각각 표 4 및 표 5에서 200㎎ 내지 500㎎ p.o., q.d.에서 RAD1901 치료에 대해 요약하였다. 투약 후 자궁 신호는 "비표적 조직"으로부터의 수준에 가까웠는데, 이는 RAD1901 치료 후 FES-PET 흡수의 완전한 약화를 시사한다. 에스트로겐 수용체를 상당하게 발현시키지 않은 조직에서 치료 전 대 치료 후 PET 스캔에서 변화는 거의 관찰되지 않았다.
따라서, RAD1901 또는 이의 염 또는 용매화물(예를 들어, 수화물)은 다른 기관(예를 들어, 뼈, 근육)에 대한 부정적 효과 없이 ER의 과발현을 갖는 암 및/또는 종양 세포(예를 들어, 유방암, 자궁암 및 난소암)를 치료하는 데 사용될 수 있다. 상기 기관에 대한 부정적 효과 없이 다른 기관(예를 들어, 뼈, 근육)에서 유방암, 자궁암 및/또는 난소암 병변을 치료하기 위해 RAD1901 또는 이의 염 또는 용매화물(예를 들어, 수화물)은 다른 기관에서 ER의 과발현을 갖는 전이성 암 및/또는 종양, 예를 들어 다른 기관(예를 들어, 뼈, 근육)으로 이동된 본래의 유방암, 자궁암 및/또는 난소암을 치료하는 데 특히 유용할 수 있다.
III(B). RAD1901은 ER 발현을 감소시키고, ER 경로를 저해하였다.
III(B)(i)(1) MCF -7 및 T47D 세포주에서 RAD1901 및 풀베스트란트의 비교.
MCF7 및 T47D 세포주(둘 다 인간 유방암 세포주임)를 이용하여 다양한 농도, 0.01μM, 0.1μM 및 1μM에서 RAD1901과 풀베스트란트의 효과를 비교하였다(MCF-7 세포주 분석에 대한 도 17a; 및 T47D 세포주에 대한 도 17b). 3개의 ER 표적 유전자, 프로게스테론 수용체(PgR), 유방암 1에서 에스트로겐에 의한 성장 조절(GREB1) 및 트레포일 인자(trefoil factor 1: TFF1)를 마커로서 사용하였다. RAD1901은 ER 분해를 야기하였고, ER 신호전달을 야기하였다(도 17a 내지 도 17b). 예상치 못하게, RAD1901은 실시예 I(A) 및 실시예 I(B)에서 상기 개시한 바와 같이 종양 성장을 저해하고, 종양 퇴행을 유도함에 있어서 풀벱스트란트와 비슷하거나 또는 더 효과적이었다.
III(B)(i)(2) RAD1901 치료는 실시예 I(A)(ii)(1)에서 상기 기재한 MCF -7 이종이식 모델-II에서 ER 분해 및 ER 신호전달의 폐기를 초래하였다.
RAD1901 치료는 생체내 ER 분해를 초래하였고(도 18a 내지 도 18c, 스튜던트 t-검정: *p-값 <0.05, **p-값 <0.01), 생체내 ER 신호전달을 저해하였다(도 19A 및 도 19C, 스튜던트 t검정: *p-값 <0.05, **p-값 <0.01).
RAD1901(30㎎/㎏, 60㎎/㎏, p.o., q.d.) 또는 풀베스트란트(3mg/용량, s.c., qwk)의 최종 투약 2시간 후에 MCF-7 이종이식으로부터 채취한 종양은 상당히 감소된 ER 및 PR 발현을 나타내었다(도 18a 내지 도 18b). 풀베스트란트 치료의 최종 투약 8시간 후에 MCF-7 이종이식으로부터 채취한 종양은 변화된 PR 및 ER 발현을 나타내었다. 그러나, RAD1901 치료의 최종 투약 8시간 후에 MCF-7 이종이식으로부터 채취한 종양은 감소된 PR 및 ER 발현을 나타내었다(도 18a 및 도 18c).
RAD1901의 단일 용량(30㎎/㎏, 60㎎/㎏ 또는 90㎎/㎏, p.o., q.d.) 8시간 또는 12시간 후 MCF-7 이종이식물로부터 채취한 종양은 빠르게 감소된 PR 발현을 나타내었다(도 19A). RAD1901의 7번째 투약(30㎎/㎏, 60㎎/㎏ 또는 90㎎/㎏, p.o., q.d.)의 4시간 또는 24시간 후에 MCF-7 이종이식물로부터 채취한 종양은 ER 신호전달의 일관된 그리고 안정한 저해를 나타내었다(도 19B). RAD1901(30㎎/㎏, 60㎎/㎏, 또는 90㎎/㎏, p.o., q.d.)의 치료 동안 다양한 시점에 MCF-7 이종이식물로부터 채취한 종양의 웨스턴 블롯 분석의 정량화는 PR의 용량 의존적 감소를 나타내었다(도 19c).
RAD1901 치료는 MCF-7 이종이식 모델에서 증식의 빠른 감소를 야기하였다. 예를 들어, RAD1901의 단일 투약(90㎎/㎏, p.o., q.d.) 8시간 후 그리고 RAD1901의 4번째 투약(90㎎/㎏, p.o., q.d.) 24시간 후 MCF-7 이종이식 모델로부터 채취한 종양을 절단하고 나서, 증식 마커 Ki67의 빠른 감소를 나타내기 위해 염색하였다(도 20A 내지 도 20B).
이들 결과는 생체내 WT ER 이종이식에서 ER 분해 및 ER 신호전달의 저해를 초래한다는 것을 시사한다.
III(B)(i)(3) RAD1901 치료는 실시예 I(A)(ii)에서 상기 기재한 PDx -4 모델에서 ER 분해 및 ER 신호전달의 폐기를 초래하였다.
RAD1901 치료는 PDx-4 모델에서 증식의 빠른 감소를 야기하였다. 예를 들어, 56일 효능 연구의 마지막 날에 최종 투약 4시간 후, 종양을 RAD1901(30, 60 또는 120㎎/㎏, p.o., q.d.) 또는 풀베스트란트(1㎎/동물, qwk)로 치료한 PDx-4 모델로부터 채취하고 나서, 절편화하고, 풀베스트란트로 치료한 PDx-4 모델에 비교한 증식 마커 Ki67의 빠른 감소를 나타내었다(도 21).
이들 결과는 RAD1901 치료가 생체내 WT ER 이종이식에서 ER 분해 및 ER 신호전달의 저해를 초래한다는 것을 시사한다.
III(B)(ii) RAD1901 치료는 실시예 I(A)(iii)(1)에서 상기 기재한 돌연변이체 ER 이종이식 모델(PDx-5)에서 감소된 ER 신호전달을 초래하였다.
(달리 구체화되지 않는 한) 투약 마지막날 후 표시된 시점에 종양을 채취하고 나서, 조직용해기(퀴아젠)을 이용하여 프로테아제 및 포스파타제 저해제와 함께 RIPA 완충제 중에서 균질화시켰다. 동일한 양의 단백질을 MW에 의해 분리시키고, 나이트로셀룰로스 막에 전달하고 나서, 물질 및 방법 부문에 기재한 바와 같이 다음의 항체로 블롯팅하였다: 프로게스테론 수용체(PR, 세포 신호전달 기법(Cell Signaling Technologies); 3153).
밴드를 1D 퀀트 소프트웨어(Quant software)(GE)를 이용하여 정량화하고 나서, 실시예 I(A)(iii)(1)에 기재한 바와 같이 PDx-5 모델로부터 얻은 PR(Allred 스코어)를 도 22에 나타낸다. 풀베스트란트는 PR 발현에 대해 영향을 거의 발휘하지 않은 반면, RAD1901은 60㎎/㎏과 120㎎/㎏(p.o., q.d., 도 22) 둘 다의 투약량에서 효능을 나타내었다.
이들 결과는 특정 ERα 돌연변이(예를 들어, Y537S)를 발현시키는 종양에 대해, 종양이 풀베스트란트/타목시펜 치료에 반응성인지(PDx -5에 대해 도 9 및 PDx -6에 대해 도 10) 여부에 상관 없이 RAD1901은 종양 성장을 저해하는 데 풀베스트란트보다 더 효과적이며, 특히 풀베스트란트 치료에 대해 거의 반응하지 않은 종양 성장을 저해하는 데 효과적이라는 것을 나타낸다(예를 들어, 3㎎/용량의 투약량에서, s.c., qwk, PDx-5에 대해 도 9). 더 나아가, 풀베스트란트 치료(예를 들어, PDx-5)에 잘 반응하지 않은 종양에 대해, RAD1901은 생체내 PR 발현을 감소시키는 데 효과적인 반면, 풀베스트란트는 그렇지 않았다(도 23).
실시예 IV 자궁 조직 및/또는 BMD에 대한 RAD1901 치료의 영향
IV(A(1)): RAD1901은 자궁 조직의 에스트라다이올 자극을 길항하였다.
자궁 중량, 조직학 및 비성숙 래트에서 C3 유전자 발현의 변화를 평가함으로써 RAD1901의 자궁비대반응 효과를 조사하였다. 대표적인 연구로부터의 결과를 도 23에 나타낸다.
자궁비대반응 활성의 평가
스프래그 돌리 래트 새끼를 19일령에 이유를 시작하고 나서, 그룹으로 무작위화하고(n = 4), 비히클(수성 메틸셀룰로스), E2(0.01㎎/㎏), 랄록시펜(3㎎/㎏), 타목시펜(1㎎/㎏), RAD1901 단독(0.3 내지 100㎎/㎏), 또는 E2 (0.01㎎/㎏)와 조합한 RAD1901(0.01 내지 10㎎/㎏)을 s.c. 또는 p.o. 적절한 것으로(상기 시약 참조,) q.d.로 3연속일 동안 투여하였다. 최종 투약 24시간 후에, 모든 동물을 이산화탄소 흡입에 의해 안락사시켰다. 각각의 동물에 대해 체중 및 습윤 자궁 중량을 기록하였다. 또한 래트 및 마우스(퀘벡주 몬트리올에 소재한 찰스 리버 래버러토리즈(Charles River Laboratories))에서 RAD1901(0.03 내지 100㎎/㎏)을 이용하여 유사한 분석을 수행하였다.
각각의 래트로부터의 새로운 자궁 조직을 4% 파라폼알데하이드 중에서 고정시키고 나서, 에탄올로 탈수시키고, JB4 플라스틱 수지에 포매시켰다. 8㎛에서 절편을 절단하고 나서, 0.1% 톨루이딘 블루 O으로 염색하였다. 스팟 어드벤스드(Spot Advanced) 프로그램)을 이용하는 제이스 악시오스콥 40(Zeiss Axioskop 40) 현미경을 이용하여 자궁 내막 상피의 두께를 측정하였고; 표본 당 9회 측정의 평균을 계산하였다.
자궁 보체 성분 3(C3) 유전자 발현
치료 자궁 조직에서 C3의 상대적 발현 수준을 결정하기 위해, 제조업자의 설명서에 따라 마이크로 내지 미디 총 RNA 정제 키트(Micro to Midi Total RNA Purification Kit)(캘리포니아주 칼스베드에 소재한 인비트로젠)를 이용하여 남아있는 조직으로부터 RNA를 추출하였다. RNA를 정량화하고 나서, 고성능 cDNA 아카이브 키트(High Capacity cDNA Archive Kit)(캘리포니아주 포스터 시티에 소재한 어플라이드 바이오시스템즈(Applied Biosystems))를 이용하여 동일한 양을 역전사시켰다.
ABI 프리즘 7300 시스템(어플라이드 바이오시스템즈(Applied Biosystems))를 이용하여 정량적 PCR을 수행하였다. C3에 대해 그리고 기준 유전자로서 18S 리보솜 RNA에 대해 프로브 세트를 이용하는 태크맨 유니버셜 마스터 믹스(Taqman Universal Master Mix)를 이용하여 PCR을 행하였다. 열 순환 조건은 95℃에서 10분 동안 초기 변성 단계 다음에 95℃에서 15초 그리고 60℃에서 1분 동안 40주기를 포함하였다.
각각의 샘플을 내인성 대조군(18S)에 대해 정규화시킴으로써 그리고 캘리브레이터(비히클)와 비교함으로써 상대적 유전자 발현을 결정하였다. 다음의 식을 이용하여 상대적 유전자 발현을 결정하였다: 2-ΔΔCt(여기서, Ct = 순환 역치 또는 PCR 산물이 처음 검출된 주기 수, ΔCt = 정규화된 샘플 값, 및 ΔCt = 투약된 대상체와 비히클 사이의 정규화된 차이). 5회의 복제물 유전자 발현 결정을 각각의 연구 내에서 각각의 용량에 대해 수행하였다.
E2(0.01㎎/㎏), 랄록시펜(RAL, 3㎎/㎏) 또는 타목시펜(TAM, 1㎎/㎏)에 의한 치료는 비히클 단독에 비해 자궁 습윤 중량의 상당한 증가를 초래한 반면, 0.3 내지 100㎎/㎏의 용량 범위에서 RAD1901 치료는 자궁 습윤 중량에 상당하게 영향을 미치지 않았다(도 23a). 나타낸 데이터(도 23a)는 평균(± SEM)이고; 그룹 당 n=4 래트; P 대 비히클: * < 0.05; 대 E2:
Figure pct00019
< 0.05. 추가로, E2(0.01㎎/㎏)과 조합하여 투여할 때, RAD1901은 용량 의존적 방식으로 E2-매개 자궁 자극을 길항하였는데, 이는 0.1㎎/㎏ 이상의 용량에서 자궁비대반응 활성의 상당한 저해 및 3㎎/㎏에서 완전한 저해를 나타낸다. RAD1901에 대한 EC50은 대략 0.3㎎/㎏이었다. RAD1901 용량 0.03 내지 100㎎/㎏이 또한 자궁 습윤 중량 또는 상피 두께에 대해 효과를 갖지 않은 경우(데이터 미제시) 마우스에서 유사한 결과를 얻었다.
자궁 조직에서의 치료-의존적 변화는 정량적 현미경 조직학에 의해 추가로 조사하였다. 0.01과 0.3㎎/㎏ 둘 다에서 E2에 의한 치료 후 자궁 내막 상피 두께에서 통계학적으로 유의한 증가가 있었다(도 23b). 타목시펜(1㎎/㎏) 또는 랄록시펜(3㎎/㎏)에 의한 치료 후 상피 두께의 상당한 증가를 관찰하였다. 대조적으로, RAD1901 치료는 100㎎/㎏의 가장 높이 평가된 용량까지 자궁 내막 상피 두께를 증가시키지 않았다. 자궁 내막 상피의 대표적인 영상을 도 23c에 나타낸다.
자궁 중량과 자궁 내막 상피 두께 둘 다에서의 변화와 일치되게, E2, 타목시펜 및 랄록시펜은 모두 에스트로겐-조절 상보체 유전자인 C3의 발현을 상당히 증가시켰다(도 23d)). 대조적으로, RAD1901은 임의의 시험 용량(0.3 내지 100㎎/㎏)에서 C3 유전자 발현을 증가시키지 않았다. 더 나아가, 1, 3 및 10㎎/㎏에서 RAD1901은 E2-자극 C3 유전자 발현을 상당히 억제하였다.
RAD1901은 비성숙 암컷 래트의 자궁을 자극하지 않았다
비성숙 암컷 래트에 비히클(VEH), 에스트라다이올(E2), 랄록시펜(RAL), 타목시펜(TAM), RAD1901 또는 RAD1901+E2로 3연속일 동안 p.o., q.d.로 투여하였다. 습윤 자궁 중량을 측정하였다. 나타낸 데이터(도 23a)는 평균(± SEM)이며; 그룹 당 n=4 래트; P 대 비히클: * < 0.05; 대 E2:
Figure pct00020
< 0.05.
실시예 II(A)(2). RAD1901에 의한 치료는 난소 절제 래트에서 골 손실에 대해 보호하였다
RAD1901의 뼈 특이적 효과를 난소 절제 래트에서 시험하였다.
폐경 후 골 손실의 모델로서, 마취시킨 성체 암컷 스프레그 돌리 래트 상에서 난소 절제술을 수행하고, 대조군으로서 모의 수술을 하였다. 수술 후에, 난소 절제 래트를 4주 동안 비히클, E2(0.01㎎/㎏), 또는 RAD1901(0.1, 0.3, 1, 3㎎/㎏)로 q.d.로 치료하고 나서, 상기 기재한 바와 같이 투여하였다(그룹 당 20마리 동물). 모의 수술 그룹에서 동물을 비히클 처리하였다. 모든 동물을 최종 투약 24시간 후에 이산화탄소 흡입에 의해 안락사시켰다. 골 무기염 밀도를 이중 방출 x선 흡광 광도 분석법을 이용하여 기준시 그리고 치료 4주 후에 다시 평가하였다.
부검 시, 각각의 동물의 좌측 대퇴골을 제거하고 나서, 연조직 없이 해부하고, 분석 전에 70% 에탄올 중에서 저장하였다. 마이크로-CT40 시스템(펜실베니아주 웨인에 소재)을 이용하여 상세한 정성적 그리고 정량적 3-D 평가를 수행하였다. 각각의 표본에 대해, 원위 대퇴골 대퇴골 골간단의 250개의 영상 슬라이스를 획득하였다. 사전 선택된 분석 영역에서 직접적 3D 접근을 이용하여 형태적 매개변수를 결정하였다. 해면골에서 결정한 매개변수는 골용적 밀도, 골표면 밀도, 섬유주 수, 섬유주 두께, 섬유주 간격, 연결 밀도 및 겉보기 골밀도를 포함하였다.
난소 절제술 후에, 비처리(비히클 대조군) 래트는 기준에 비교하여 전체 대퇴골에서 그리고 요추에서 골밀도의 감소를 경험하였다(표 6). E2에 의한 치료는 대퇴골과 척추 둘 다에서 골 손실의 예방과 관련되었다. RAD1901에 의한 치료는 난소 절제술-유도 골 손실의 용량 의존적이며, 통계학적으로 유의한 억제를 초래하였다(3㎎/㎏ 처리군에 대해 나타낸 데이터). 0.1㎎/㎏ 내지 3㎎/㎏의 용량에서, RAD1901-치료 래트에서의 골밀도는 완전하며, E2-처리군으로부터 통계학적으로 유의한 차이는 없었다.
원위 대퇴골의 마이크로-CT 분석(표 7)은 모의 수술 동물에 비교할 때 난소 절제술이 다수의 중요한 마이크로-구조 매개변수의 상당한 변화를 유도하였다는 것을 입증하였다. 이들 변화는 골질량의 감소와 일치되며, 감소된 뼈 용적, 감소된 섬유주 수 및 밀도, 및 증가된 섬유주 분리를 포함한다. RAD1901에 의한 치료 후에 관찰한 골밀도의 보존과 일치되게, 중요한 마이크로구조 매개변수에서 섬유주 구조의 상당한 보존이 관찰되었다(표 7)
실시예 IV(B): 건강한 폐경 후 여성에서 RAD101의 1상 용량 상승 연구
1상 연구에서, 44명의 건강한 폐경후 여성에서 안전성, 내약성 및 약동학을 평가하였다. 용량 제한적 독성(DLT)은 관찰되지 않았으며, 최대 허용 용량(MTD)은 확립되지 않았다. 용량 노출은 시험한 용량 범위에 걸쳐 용량을 비례적으로 더 많이 증가시켰다.
대상체
44명의 건강한 폐경 후 여성을 이 1상 연구에 대해 대상체로서 등록시켰다. 대상체는 적어도 12개월의 무월경 지속기간 및 폐경기와 일치되는 혈청 FSH를 가졌다. 대상체는 40 내지 75세이며, BMI가 18.0 내지 30 ㎏/㎡였다. 임상적으로 적절한 병리 증거를 갖는 대상체는 뇌졸중 및 정맥 혈전 색전증 사건 이력이 증가되었거나, 또는 임상 연구 센터에 대한 입원 14일 미만 전에 병행 의약의 사용(파라세타몰이 3일 전까지 허용됨)을 배제하였다.
투약
각각 200㎎, 500㎎, 750㎎ 내지 1000㎎의 용량 수준에서 7일 동안 가벼운 아침식사 후에 위약 또는 적어도 1회 용량으로 p.o., q.d.에 의해 대상체를 치료하였다. 1상 연구에 등록한 44명의 건강한 폐경 후 여성의 중요한 기준 인구통계학을 표 8에 요약한다.
치료 관련 이상 반응(Treatment emergent adverse event: TEAE )
TEAE를 기록하고 나서, 가장 빈번한(임의의 관련 TEAE를 갖는 총 활성 그룹에서 환자의 10% 초과) 이상 반응(AE)을 표 9에 요약하고, "n"은 주어진 범주에서 적어도 하나의 치료 관련 AE를 갖는 대상체의 수이며, AE를 이상반응에 대한 공통평가기준(Common Terminology Criteria for Adverse Event: CTCAE) v4.0에 따라 등급화하고 나서, 동일한 바람직한 용어의 다중 시나리오를 갖는 임의의 환자를 가장 중증 등급으로 단지 1회 계수화하였다. 용량 제한 독성은 관찰되지 않았으며, 최대 허용 용량(MTD)은 확립되지 않았다.
약동학적 평가
혈장 중에서 RAD1901의 분석을 위해 연구 동안 일련의 혈액 샘플을 취하였다. 내재 IV 카테터를 통해 또는 항응고제로서 K3-EDTA를 함유하는 관 내로 직접적 정맥천자에 의해 각각 5㎖의 혈액 샘플을 취하였다. 5일의 치료까지 정상상태를 달성하였다. RAD1901의 기하평균(Geo-평균) 혈장 농도를 평가하였다. 연구 제7일(N=35)에 RAD1901(200, 500, 750 또는 1,000㎎)로 치료한 그룹의 혈장 약동학 결과를 예로서 표 10 및 도 24에 제공한다. 중앙값 t1/2는 37.5 내지 42.3시간 사이였다(표 10). RAD1901의 다회 용량 투여 후에, 중앙값 tmax는 투약 후 3 내지 4시간의 범위였다.
실시예 V(A)-1. 선택 공개된 ER 구조를 이용하는 RAD1901 - ERα 결합의 모델링 .
달리 구체화되지 않는 한, 구조를 그들의 막대 모델로 나타낼 때, 결합의 각각의 말단은 부착된 원자와 동일한 색이되, 회색은 탄소이고, 적색은 산소이며, 청색은 질소이고, 흰색은 수소이다.
다양한 ER 리간드와 복합체화된 ERα 리간드-결합 도메인(LBD)의 14가지 공개된 구조(즉, 모델)를 주의 깊은 평가에 의해 96 공개 모델로부터 선택하였다. 이들 14개 모델 중 하나는 3ERT였다(4-하이드록시타목시펜(OHT)에 결합된 인간 ERα LBD). OHT는 타목시펜의 활성 대사물질이고, 유방 조직 내 길항제로서 작용하는 1세대 SERM이다.
3ERT(도 25 및 도 26)에서, ERα 결합 부위는 나선 3(H3), 나선 5(H5) 및 나선 11(H11)을 포함하는 소수성 포켓을 형성하는 3층 "나선 샌드위치"를 채택한다(도 25). 도 26의 점선 박스는 중요하거나 또는 OHT 결합에 의해 달성된 결합 부위 및 결합 부위 내의 잔기를 나타낸다. OHT는 LXXLL 공활성제(들)가 결합하는 부위로 H12를 대체함으로써 길항제로서 작용한다. OHT는 L540에 의해 정상적으로 충족되는 공간을 점유하고, 나선 11의 C-말단의 4개 잔기(G521, H524, L525 및 M528)의 입체배좌를 변형시킨다. OHT는 또한 중성 전하를 초래하는 D351을 갖는 염 브릿지를 형성한다.
다른 13개의 ERα LBD-ER 리간드 모델을 3ERT와 비교하였다. 그들의 잔기 위치의 차이는 표 12에 요약한다. 14개 모델의 ERα 구조의 겹침(도 27)은 잔기 E380, M421, G521, M522, H524, Y526, S527, M528, P535, Y537, L540 및 이들의 다양한 조합에서 이들 구조가 상당하게 차이가 있다는 것을 나타낸다.
14개 모델의 임의의 쌍의 평균 제곱근 편차(Root-mean-square deviation: RMSD) 계산을 표 13에 요약한다. 그들의 RMSD가 <2Å가 되었을 때 구조는 중복되는 것으로 고려하였다. 표 13은 모두 14가지 모델이 RMSD <1.5 Å을 가진다는 것을 나타낸다. 조건적 형식화 분석을 이용하는 것은 1R5K 및 3UUC가 다른 모델과 적어도 유사하였다는 것을 시사하였다(분석은 나타내지 않음). 따라서, 1R5K 및 3UUC는 시험할 독특한, 별개의 구조적 클러스터를 고려하였다.
14가지 모델에서 리간드에 의해 결합되는 ERα 잔기를 표 14에 요약한다. 표 14는 또한 ERα LBD-길항제 복합체의 EC50을 나타낸다. 14가지 모델 중에서, 13가지는 리간드와 E353 사이의 H 결합 상호작용을 나타내었고; 12가지는 리간드와 F404 사이의 파이(pi) 상호작용을 나타내었으며; 5가지는 리간드와 D351 사이의 H결합 상호작용을 나타내었고; 6가지는 리간드와 H524 사이의 H결합 상호작용을 나타내었으며; 4가지는 리간드와 R394 사이의 H결합 상호작용을 나타내었고; 하나의 (3UUC)는 리간드와 T347 사이의 상호작용을 나타내었다.
각각 14개의 모델을 사용하여 1,000 화합물 + 리간드의 무작위 라이브러리를 도킹하였고, 모델이 공지된 길항제를 확인하고, 우선 순위를 매길 수 있는지의 여부를 결정하기 위해 모델을 (공지된 길항제를 이용) 공개하였다. 모델이 공지된 길항체를 확인할 수 있다면, 모델은 그 자신의 공개된 리간드의 위치를 예측할 수 있도록 결정하였다. 이어서, EF50을 계산하여 그것이 무작위 선택보다 얼마나 더 양호한지를 알아보기 위해 모델 강도를 정량화하였다. 선택 모델에서 RAD1901을 도킹하였다(예를 들어, 도 28 내지 32). 모델에서 공개 리간드 및 RAD1901의 도킹 스코어를 결정하였다. EC50을 또한 결정하였다. RAD1901의 시각적 검사는 1R5K, 1SJ0, 2JFA, 2BJ4 및 2OUZ에서 공개된 리간드와의 나타낸 상호작용에 따른다는 것을 나타내었다. 공간적 충돌은 주목하지 않았다. 특정 실시형태에서, 예를 들어, 1R5k 및 2BJ4에서, RAD1901은 공개된 리간드보다 더 높은 도킹 스코어를 가졌다.
9가지 모델(1ERR, 3ERT, 3UCC, 2IOK, 1R5K, 1SJ0, 2JFA, 2BJ4 및 2OUZ)의 평가 결과를 표 15에 요약한다.
1ERR 및 3ERT는 그들의 결정 리간드의 정확한 위치를 예측할 수 없었다. RAD1901은 3UCC에서 도킹하지 않았다. 2IOK-RAD1901에서 테트라하이드로나프탈렌은 비전통적 방식으로 결합되었다.
모델 1R5K, 1SJ0, 2JFA, 2BJ4와 2OUZ 사이의 주된 차이는 나선 11의 C-말단 내 잔기(G521-M528) 였다.
도 28a 내지 도 28b는 RAD1901-1R5K (a) 및 GW5-1R5K (b)의 모델링을 나타낸다. RAD1901은 E353, R394 및 L536에 대한 H-결합 상호작용에 의해; 그리고 F404와의 p-상호작용에 의해 결합된다.
도 29a 내지 도 29b는 RAD1901-1SJ0(a) 및 E4D-1SJ0(b)의 모델링을 나타낸다. RAD1901은 E353, 및 D351에 대한 H-결합 상호작용과; 그리고 F404과의 p-상호작용과 결합되었다.
도 30a 내지 도 30b는 RAD1901-2JFA (a) 및 RAL-2JFA (b)의 모델링을 나타낸다. RAD1901은 F404와의 p-상호작용과 결합된다.
도 31a 내지 도 31b는 RAD1901-2BJ4 (a) 및 OHT-2BJ4 (b)의 모델링을 나타낸다. RAD1901은 E353 및 R394와의 H-결합 상호작용;그리고 F404와의 p-상호작용과 결합되었다.
도 32a 내지 도 32b는 RAD1901-2IOK (a) 및 IOK-2IOK (b)의 모델링을 나타낸다. RAD1901은 E353, R394 및 D351과의 H-결합 상호작용; 및 F404와의 p-상호작용과 결합되었다.
모델에서 공개된 리간드는 다음의 구조를 가진다:
Figure pct00021
Figure pct00022
Figure pct00023
Figure pct00024
실시예 V(A)-2. RAD1901 및 풀베스트란트를 이용한 ERα의 유도적합 도킹(Induced fit docking: IFD)
ERα에서 RAD1901의 결합 입체배좌를 5개 ERα 결정 구조 1R5K, 1SJ0, 2JFA, 2BJ4 및 2OUZ의 IFD 분석에 의해 추가로 최적화하였다. IFD 분석은 그의 정확한 결합 입체배좌를 수용하기 위한 (리간드 결합 시) 수용체 가요성을 설명하였다.
회전 가능한 결합에 대한 회전의 함수로서 국소 최저치를 찾음으로써 각각의 리간드(예를 들어, RAD1901 및 풀베스트란트)에 대한 상이한 입체배좌의 라이브러리를 생성하였다. RAD1901에 대한 라이브러리는 25개의 상이한 입체배좌를 가졌다.
5개의 ERα 결정 구조를 제조하고 나서, 최소화하였다. 공개된 X선 구조 내 대응하는 리간드를 사용하여 ERα 결합 포켓을 정하였다.
제조된 ERα 구조 내로 RAD1901 입체배좌를 도킹하되, 그들은 결합 포켓 내에 위치된 잔기에 대한 측쇄 또는 골격 이동을 유도하도록 허용되었다. 이들 움직임은 ERα가 그의 결합 부위를 변경시키도록 허용하며, 따라서 이는 RAD1901 입체배좌의 형상 및 결합 방식에 더 가깝게 일치되었다. 일부 예에서, 수용체 구조 및 상당한 측쇄 입체배좌 변화에서 작은 골격 이환은 IFD 분석에서 허용되었다.
경험적 스코어링 기능을 사용하여 리간드 결합 자유 에너지의 근사치를 내어 도킹 스코어 또는 G스코어를 제공하였다. G스코어는 또한 본 실시예에서 도킹 스코어와 상호호환적으로 사용될 수 있는 글라이드스코어(GlideScore)로서 알려져 있다. 도킹 스코어는 결합 친화도의 추정치였다. 따라서 도킹 스코어 값이 낮을 수록, 리간드는 그의 수용체에 "더 양호하게" 결합한다. -13 내지 -14의 도킹 스코어는 매우 양호한 결합 상호작용에 대응하였다.
각각 1R5K, 1SJ0, 2JFA, 2BJ4, 및 2OUZ에 의한 IFD 분석으로부터 초래된 RAD1901 입체배좌를 그들의 차이를 나타내도록 겹쳐 놓았다(도 33 내지 35, 막대 모델에 나타냄). 각각의 RAD1901 입체배좌 내 모든 결합을 도 33, 도 34 및 도 35a과 동일한 색으로 나타내었다.
1R5K(청색) 및 2OUZ(황색)에 의한 IFD 분석으로부터 초래된 RAD1901 입체배좌는 앞쪽에 RAD1901의 N-벤질-N-에틸아닐린기를 가졌다(도 33). 2BJ4(녹색) 및 2JFA(핑크)에 의한 IFD 분석으로부터 초래된 RAD1901 입체배좌는 뒤쪽에 RAD1901의 N-벤질-N-에틸아닐린기를 가졌다(도 34). 2BJ4(녹색), 2JFA(핑크) 및 1SJ0(갈색)에 의한 IFD 분석으로부터 초래된 RAD1901 입체배좌는 그들의 겹침에 의해 나타난 것과 상당히 유사하였다(도 34A 및 34B)). RAD1901 IFD 도킹 스코어를 표 16에 요약한다.
2BJ4에 의한 RAD1901의 IFD는 E353 및 D351과의 수소 결합 상호작용 및 F404와의 파이 상호작용을 나타내었다(도 36a 내지 도 36c). 도 36a는 H-결합 수용자(acceptor) 기(적색), H-결합 공여자(청색) 및 소수성기(황색)에 대해 적합한 결합 부위 내의 영역을 나타내었다. 도 36a 내지 도 36B에서, 밝은 청색은 RAD1901에 대한 탄소에 대한 것이었다. 도 37a 내지 도 37c는 RAD1901의 IFD와 2BJ4의 단백질-표면 상호작용을 나타낸다. 도 37a 및 37B는 정면도이며, 도 37c는 측면도이다. RAD1901의 분자 표면은 도 37c에서 청색이었고, 도 37c에서 녹색이었다. 도 37b 내지 도 37c는 ERα의 용매 접근성 표면의 정전기적 표현이되, 적색은 전기음성이고 청색은 전기양성이었다.
상기 기재한 바와 같이 2BJ4에 의한 풀베스트란트에 대해 유사한 IFD 분석을 수행하였다. 풀베스트란트-2BJ4 IFD는 -14.945의 G스코어를 초래하였고, E353, Y526, 및 H524와의 수소 결합 상호작용 및 F404와의 파이 상호작용을 나타내었다(도 38a 내지 도 38c). 도 38a는 H-결합 수용자 기(적색), H-결합 공여자 기(청색) 및 소수성 기(황색)에 적합한 결합 부위 내의 영역을 나타내었다. 도 38a에서, 밝은 청색은 RAD1901에 대한 탄소에 대한 것이다.
도 39a 내지 도 39b는 IFD에 의해 2BJ4에 도킹된 RAD1901 및 풀베스트란트가 둘 다 F404와의 파이 상호작용 및 E353과의 수소 결합 상호작용을 가진다는 것을 나타내었다. 더 나아가, RAD1901은 D351과의 수소 결합 상호작용(청색은 RAD1901 분자 표면을 나타냄, 도 39b)을 갖는 반면, 풀베스트란트는 Y526, 및 H524와의 수소결합 상호작용을 가진다(녹색은 풀베스트란트 분자 표면을 나타냄, 도 39C). RAD1901 및 풀베스트란트에 의해 도킹된 2BJ4의 겹침은 도 40a 내지 도 40b에 나타낸다. 도 40a에서, 녹색은 풀베스트란트 분자 표면을 나타내고, 청색은 RAD1901 분자 표면을 나타낸다. 도 40b에서, 갈색 구조는 풀베스트란트이고, 청색 구조는 RAD1901이다.
실시예 V(A)-3. 선택 ERα 돌연변이의 모델링 평가.
C-말단 리간드-결합 도메인에 대한 다양한 ERα 돌연변이의 효과를 평가하였다. 평가한 특정 ERα 돌연변이는 Y537X 돌연변이체(X는 S, N 또는 C임); D538G; 및 S463P이다.
Y537은 나선 12에 존재한다. 이는 일단 인산화된다면 리간드 결합, 동종이량체화 및 DNA 결합을 조절할 수 있고, ERα가 인산화-매개 대조군을 탈출하도록 허용하며, 잠재적인 선택적 종양형성의 이점을 갖는 세포를 제공한다. 추가로, 이는 수용체를 구성적으로 활성으로 만드는 입체배좌 변화를 야기할 수 있다.
Y537S 돌연변이는 리간드에 의해 점유되든 아니든 전사 활성 폐쇄 포켓 입체배좌를 선호한다. 폐쇄되었지만, 점유되지 않은 포켓은 ERα의 구성 활성을 설명할 수 있다(Carlson et al. Biochemistry 36:14897-14905 (1997)). Ser537은 Asp351과의 수소 결합 상호작용을 확립하여 나선 11 내지 12 루프의 변경된 입체배좌 및 용매 비접근 위치에서 Leu536의 묻힘을 초래하였다. 이는 Y537S 돌연변이체 단백질의 구성적 활성에 기여할 수 있다. Y537S 표면 돌연변이는 LBD 포켓의 구조에 대해 영향이 없었다.
Y537N은 ERα-음성 전이성 유방암에서 통상적이다. 이 부위에서 돌연변이는 ERα가 인산화-매개 대조군을 탈출하는 것을 허용하며 잠재적인 선택적 종양형성의 이점을 갖는 세포를 제공할 수 있다. 구체적으로, Y537N 치환은 이량체화하는 수용체의 능력에 영향을 미치지 않지만, 수용체에 대해 구성적인 전사활성화 기능을 부여하는, 호르몬 결합을 모방할 수 있는 ERα의 입체배좌 변화를 유도한다(Zhang et al. Cancer Res 57:1244-1249 (1997)).
Y537C는 Y537N에 대해 유사한 효과를 가졌다.
D538G는 더 바람직하게는 활성이지만, 활성 입체배좌와 비활성 입체배좌를 둘 다 안정화시킴으로써 전체 에너지 배치를 이동시킬 수 있다. 이는 호르몬 내성 유방암에서 관찰한 바와 같은 호르몬의 부재 하에서 이 돌연변이체의 구성적 활성을 야기할 수 있다(Huang et al., "A newfound cancer-activating mutation reshapes the energy landscape of estrogen-binding domain," J. Chem . Theory Comput. 10:2897-2900 (2014)).
이들 돌연변이 중 어떤 것도 리간드 도메인에 영향을 주거나 또는 RAD1901 결합을 특이적으로 방해하는 것으로 예상되지 않았다. Y537 및 D538은 리간드 결합과 독립적인 구성적 수용체 활성화를 야기하는 입체배좌 변화를 야기할 수 있다.
실시예 V(B). RAD1901 및 다른 화합물에 의한 야생형 및 LBD 돌연변이체의 ERα 작제물의 시험관내 결합 분석
RAD1901에 의한 야생형(WT) 및 LBD 돌연변이체의 ERα 작제물의 시험관내 결합 분석은 RAD1901이 WT ERα와 유사한 친화도로 돌연변이체 ERα에 결합하였다는 것을 나타내었다.
N-말단의 티오레독신, 및 TEV 프로테아제에 의해 절단된 6xHis 태그를 갖는 대응하는 LBD 잔기 302 내지 552를 발현시킴으로써 그리고 정제함으로써 WT 및 LBD 돌연변이체의 ERα 작제물을 제조하였다.
2nM 플루오로몬, WT 또는 LBD 돌연변이체의 100nM ERα 작제물을 이용하여 제조업자의 설명서(폴라 스크린((Polar Screen), 인비트로젠)에 따라 ERα에 대한 시험 화합물(RAD1901, 풀베스트란트, 바제독시펜, 랄록시펜, 타목시펜 및 AZD9496)의 결합을 결정하기 위해 형광 편광(Fluorescence polarization: FP)을 사용하였다. 각각의 세트를 2회 중복해서 수행하고 나서, 하나의 시험 화합물을 시험하여 상이한 ERα 작제물에 대한 IC50을 결정하였다(RAD1901 결합 분석에 대해 도 41).
상기 언급한 바와 같이, 앞서 언급한 것은 단지 본 발명의 다양한 실시형태를 예시하는 것으로 의도된다. 상기 논의한 특정 변형은 본 발명의 범주에 대한 제한으로서 해석되어서는 안 된다. 다양한 동등물, 변화 및 변형이 본 발명의 범주로부터 벗어나는 일 없이 이루어질 수 있다는 것은 당업자에게 명확할 것이며, 이러한 동등한 실시형태는 본 명세서에 포함된다는 것이 이해된다. 본 명세서에 인용된 모든 참고문헌은 본 명세서에 완전히 제시된 바와 같이 참고로 포함된다.

Claims (17)

  1. 약물-내성 에스트로겐 수용체 알파-양성암을 갖는 대상체에서 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법으로서, 상기 대상체에게 치료적 유효량의 하기 구조를 갖는 RAD1901 또는 이의 염 또는 용매화물을 투여하는 단계를 포함하는, 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법:
    Figure pct00025
    .
  2. 돌연변이체 에스트로겐 수용체 알파-양성암을 갖는 대상체에서 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법으로서, 상기 대상체에게 치료적 유효량의 하기 구조를 갖는 RAD1901 또는 이의 염 또는 용매화물을 투여하는 단계를 포함하는, 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법:
    Figure pct00026
    .
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 암은 유방암, 자궁암, 난소암 및 뇌하수체암으로 이루어진 군으로부터 선택된, 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 암은 전이성 암인, 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 암은 Y537X1(X1은 S, N 또는 C임), L536X2(X2는 R 또는 Q임), P535H, V534E, S463P, V392I, E380Q, D538G 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 돌연변이를 포함하는 돌연변이체 에스트로겐 수용체 알파에 대해 양성인, 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법.
  6. 제5항에 있어서, 상기 돌연변이는 Y537S인, 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법.
  7. 제1항 또는 제2항에 있어서, 투여 후에, 상기 종양에서의 RAD1901 또는 이의 염 또는 용매화물의 농도 대 혈장 중에서 RAD1901 또는 이의 염 또는 용매화물의 농도의 비(T/P)는 적어도 약 15인, 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법.
  8. 제1항 또는 제2항에 있어서, 대상체는 골다공증 또는 고위험의 골다공증을 갖는, 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법.
  9. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 대상체는 폐경전 여성인, 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법.
  10. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 대상체는 SERM 및/또는 AI에 의한 사전 치료 후에 재발되거나 또는 진행된 폐경 후 여성인, 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법.
  11. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 치료적 유효량은 약 150 내지 약 1,500㎎ q.d인, 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법.
  12. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 염은 RAD1901 다이하이드로클로라이드인, 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법.
  13. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 종양은 항-에스트로겐, 방향화효소 저해제 및 이들의 조합물로 이루어진 군으로부터 선택된 약물에 대해 내성인, 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법.
  14. 제13항에 있어서, 상기 항-에스트로겐은 타목시펜 또는 풀베스트란트인, 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법.
  15. 제13항에 있어서, 상기 방향화효소 저해제는 아로마신인, 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법.
  16. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 치료적 유효량은 150㎎ 내지 2,000㎎인, 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법.
  17. 제16항에 있어서, 상기 치료적 유효량은 200㎎, 400㎎ 또는 500㎎인, 종양 성장을 저해하거나 또는 종양 퇴행을 생성하는 방법.



KR1020177034603A 2015-04-29 2016-04-29 암을 치료하는 방법 KR102676629B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020247019929A KR20240095372A (ko) 2015-04-29 2016-04-29 암을 치료하는 방법

Applications Claiming Priority (27)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562154699P 2015-04-29 2015-04-29
US62/154,699 2015-04-29
US201562155451P 2015-04-30 2015-04-30
US62/155,451 2015-04-30
US201562158469P 2015-05-07 2015-05-07
US62/158,469 2015-05-07
US201562192944P 2015-07-15 2015-07-15
US201562192940P 2015-07-15 2015-07-15
US62/192,944 2015-07-15
US62/192,940 2015-07-15
US201562252085P 2015-11-06 2015-11-06
US62/252,085 2015-11-06
US201562252916P 2015-11-09 2015-11-09
US62/252,916 2015-11-09
US201562265658P 2015-12-10 2015-12-10
US201562265663P 2015-12-10 2015-12-10
US201562265774P 2015-12-10 2015-12-10
US201562265696P 2015-12-10 2015-12-10
US62/265,658 2015-12-10
US62/265,774 2015-12-10
US62/265,696 2015-12-10
US62/265,663 2015-12-10
US201662323572P 2016-04-15 2016-04-15
US201662323576P 2016-04-15 2016-04-15
US62/323,572 2016-04-15
US62/323,576 2016-04-15
PCT/US2016/030317 WO2016176665A1 (en) 2015-04-29 2016-04-29 Methods of treating cancer

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020247019929A Division KR20240095372A (ko) 2015-04-29 2016-04-29 암을 치료하는 방법

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20180011780A true KR20180011780A (ko) 2018-02-02
KR102676629B1 KR102676629B1 (ko) 2024-06-18

Family

ID=57198783

Family Applications (6)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020247019929A KR20240095372A (ko) 2015-04-29 2016-04-29 암을 치료하는 방법
KR1020247019989A KR20240097966A (ko) 2015-04-29 2016-04-29 암을 치료하는 방법
KR1020177034606A KR102682763B1 (ko) 2015-04-29 2016-04-29 암을 치료하는 방법
KR1020177034608A KR102676705B1 (ko) 2015-04-29 2016-04-29 암을 치료하는 방법
KR1020247022060A KR20240110098A (ko) 2015-04-29 2016-04-29 암을 치료하는 방법
KR1020177034603A KR102676629B1 (ko) 2015-04-29 2016-04-29 암을 치료하는 방법

Family Applications Before (5)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020247019929A KR20240095372A (ko) 2015-04-29 2016-04-29 암을 치료하는 방법
KR1020247019989A KR20240097966A (ko) 2015-04-29 2016-04-29 암을 치료하는 방법
KR1020177034606A KR102682763B1 (ko) 2015-04-29 2016-04-29 암을 치료하는 방법
KR1020177034608A KR102676705B1 (ko) 2015-04-29 2016-04-29 암을 치료하는 방법
KR1020247022060A KR20240110098A (ko) 2015-04-29 2016-04-29 암을 치료하는 방법

Country Status (14)

Country Link
US (10) US20180169101A1 (ko)
EP (4) EP3288382A4 (ko)
JP (8) JP6926065B2 (ko)
KR (6) KR20240095372A (ko)
CN (5) CN108024540B (ko)
AU (3) AU2016256469B2 (ko)
BR (3) BR112017023269A2 (ko)
CA (3) CA2984357A1 (ko)
HK (3) HK1251409A1 (ko)
IL (7) IL255261B2 (ko)
MX (6) MX2017013801A (ko)
RU (3) RU2737496C2 (ko)
SG (4) SG11201708858WA (ko)
WO (3) WO2016176664A1 (ko)

Families Citing this family (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9421264B2 (en) 2014-03-28 2016-08-23 Duke University Method of treating cancer using selective estrogen receptor modulators
ES2939940T3 (es) 2014-03-28 2023-04-28 Univ Duke Tratamiento del cáncer de mama utilizando moduladores selectivos de los receptores de estrógenos
RU2737496C2 (ru) * 2015-04-29 2020-12-01 Радиус Фармасьютикалз, Инк. Способы лечения рака
SG11201806829TA (en) 2016-02-15 2018-09-27 Sanofi Sa 6,7-dihydro-5h-benzo[7]annulene derivatives as estrogen receptor modulators
TWI794171B (zh) 2016-05-11 2023-03-01 美商滬亞生物國際有限公司 Ｈｄａｃ抑制劑與ｐｄ-ｌ１抑制劑之組合治療
TWI808055B (zh) 2016-05-11 2023-07-11 美商滬亞生物國際有限公司 Hdac 抑制劑與 pd-1 抑制劑之組合治療
CN109715149A (zh) * 2016-09-27 2019-05-03 雷迪厄斯健康公司 治疗卵巢癌的方法
JP6892151B2 (ja) 2016-10-11 2021-06-23 デューク ユニバーシティ Ｅｒ＋乳がんのラソフォキシフェン処置
RU2742278C2 (ru) 2016-11-17 2021-02-04 Санофи Новые соединения замещенного n-(3-фторпропил)пирролидина, способы их получения и их терапевтическое применение
FI3565542T3 (fi) * 2017-01-05 2024-06-24 Radius Pharmaceuticals Inc Rad1901-2hcl:n polymorfisia muotoja
CA3056701A1 (en) * 2017-03-16 2018-09-20 Eisai R&D Management Co., Ltd. Combination therapies for the treatment of breast cancer
US12012421B2 (en) 2017-07-07 2024-06-18 Hoffmann-La Roche Inc. Solid forms of [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-oxo-thiazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl)-4-hydroxy-tetrahydrofuran-2-yl]propyl] acetate
EP3434272A1 (en) * 2017-07-25 2019-01-30 Sanofi Combination comprising palbociclib and 6-(2,4-dichlorophenyl)-5-[4-[(3s)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl]oxyphenyl]-8,9-dihydro-7h-benzo[7]annulene-2-carboxylic acid
CN111315378A (zh) 2017-11-16 2020-06-19 诺华股份有限公司 包含lsz102和瑞博西尼的药物组合
US12012420B2 (en) 2017-11-21 2024-06-18 Hoffmann-La Roche, Inc. Solid forms of [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-oxo-thiazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl)-4-hydroxy-tetrahydrofuran-2-yl]propyl] acetate
WO2019106604A1 (en) 2017-12-01 2019-06-06 Novartis Ag Pharmaceutical combination comprising lsz102 and alpelisib
EP3773524A4 (en) 2018-04-10 2021-12-22 Duke University TREATMENT OF BREAST CANCER WITH LASOFOXIFEN
CN110585429B (zh) * 2018-06-12 2022-10-21 江苏恒瑞医药股份有限公司 酪氨酸激酶抑制剂联合单克隆抗体以及紫杉醇类药物治疗肿瘤疾病的用途
US11643385B2 (en) 2018-07-04 2023-05-09 Radius Pharmaceuticals, Inc. Polymorphic forms of RAD1901-2HCl
AR116300A1 (es) 2018-09-07 2021-04-21 Sanofi Sa Proceso para la preparación de 6-(2,4-diclorofenil)-5-[4-[(3s)-1-(3-fluoropropil)pirrolidin-3-il]oxifenil]-8,9-dihidro-7h-benzo[7]anuleno-2-carboxilato de metilo
KR20210097170A (ko) * 2018-11-30 2021-08-06 래디어스 파마슈티컬스, 인코포레이티드 유방암을 갖는 여성에서 아베마시클립과 조합된 엘라세스트란트
SG11202105915UA (en) * 2018-12-06 2021-07-29 Radius Pharmaceuticals Inc Methods for treating cancer in models harboring esr1 mutations
JP7504097B2 (ja) * 2018-12-06 2024-06-21 ラジウス ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド Ｃｄｋ４／６阻害剤に耐性の癌を治療するための方法
MX2021006915A (es) * 2018-12-12 2021-08-24 Chemocentryx Inc Inhibidores de cxcr7 para el tratamiento de cancer.
KR102341347B1 (ko) * 2019-11-28 2021-12-20 의료법인 성광의료재단 암 치료제에 대한 내성 암의 진단을 위한 조성물, 키트 및 방법
CA3169679A1 (en) * 2020-03-06 2021-09-10 Olema Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating estrogen receptor-associated diseases
KR20230009390A (ko) * 2020-05-12 2023-01-17 제넨테크, 인크. Gdc-9545 및 cdk4/6 억제제를 포함하는 병용 요법을 사용한 유방암 치료
CN113662942B (zh) * 2021-08-19 2023-02-07 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院 药物组合物及其在smo突变性髓母细胞瘤中的应用
WO2023064519A1 (en) 2021-10-14 2023-04-20 Teva Pharmaceuticals International Gmbh Solid state forms of elacestrant and processes for preparation thereof
GB202116903D0 (en) 2021-11-18 2022-01-05 Sermonix Pharmaceuticals Inc Lasofoxifene treatment of aromatase-resistant er+ cancer
WO2024104268A1 (zh) * 2022-11-15 2024-05-23 苏州科睿思制药有限公司 艾拉司群二盐酸盐的共晶及其制备方法和用途
KR20240105964A (ko) * 2022-12-29 2024-07-08 주식회사 삼양홀딩스 약동학적 특성이 우수한 풀베스트란트의 약학 조성물 및 그 제조 방법

Family Cites Families (160)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3939346A1 (de) 1989-11-29 1991-06-06 Behringwerke Ag Arzneimitel zur subkutanen oder intramuskulaeren applikation enthaltend polypeptide
US5821225A (en) 1992-07-14 1998-10-13 Syntex (U.S.A.) Inc. Method for the treatment of corticosteroid induced osteopenia comprising administration of modified PTH or PTHrp
US5589452A (en) 1992-07-14 1996-12-31 Syntex (U.S.A.) Inc. Analogs of parathyroid hormone and parathyroid hormone related peptide: synthesis and use for the treatment of osteoporosis
US5977070A (en) 1992-07-14 1999-11-02 Piazza; Christin Teresa Pharmaceutical compositions for the nasal delivery of compounds useful for the treatment of osteoporosis
DE19517430A1 (de) 1995-05-12 1996-11-14 Boehringer Mannheim Gmbh Pharmazeutische Darreichungsform von Parathormon mit einer zwei- bis sechsstündigen Wirkstoff-Freisetzungsperiode
IT1285405B1 (it) 1995-06-06 1998-06-03 Alza Corp Modificazione di farmaci polipeptidici per accrescere il flusso per elettrotrasporto.
US5955574A (en) 1995-07-13 1999-09-21 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A. Analogs of parathyroid hormone
US5723577A (en) 1995-07-13 1998-03-03 Biomeasure Inc. Analogs of parathyroid hormone
US7410948B2 (en) 1995-07-13 2008-08-12 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, Sas Analogs of parathyroid hormone
US6544949B1 (en) 1995-07-13 2003-04-08 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A.S. Analogs of parathyroid hormone
US5969095A (en) 1995-07-13 1999-10-19 Biomeasure, Inc. Analogs of parathyroid hormone
DE19538687A1 (de) 1995-10-17 1997-04-24 Boehringer Mannheim Gmbh Stabile pharmazeutische Darreichungsformen enthaltend Parathormon
DE19539574A1 (de) 1995-10-25 1997-04-30 Boehringer Mannheim Gmbh Zubereitungen und Verfahren zur Stabilisierung biologischer Materialien mittels Trocknungsverfahren ohne Einfrieren
TWI240627B (en) 1996-04-26 2005-10-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Erythropoietin solution preparation
TW505654B (en) 1996-07-30 2002-10-11 Hoffmann La Roche Synthesis of analogs of PTH and PTHrP
DE69740107D1 (de) 1996-12-23 2011-03-10 Immunex Corp Rezeptor aktivator von nf-kappa b, rezeptor is mitglied der tnf rezeptor superfamilie
US6136784A (en) 1997-01-08 2000-10-24 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Amylin agonist pharmaceutical compositions containing insulin
US6316408B1 (en) 1997-04-16 2001-11-13 Amgen Inc. Methods of use for osetoprotegerin binding protein receptors
EP1005359B1 (en) 1997-09-09 2005-06-15 F. Hoffmann-La Roche Ag FRACTURE HEALING USING PTHrP ANALOGS
US6770623B1 (en) 1997-12-09 2004-08-03 Eli Lilly And Company Stabilized teriparatide solutions
MY120063A (en) 1997-12-09 2005-08-30 Lilly Co Eli Stabilized teriparatide solutions
CA2313698C (en) 1997-12-11 2008-04-15 Alza Corporation Device for enhancing transdermal agent flux
KR100572539B1 (ko) 1997-12-11 2006-04-24 알자 코포레이션 경피성 작용제 유동률을 증진시키기 위한 장치
EP0922467A3 (en) 1997-12-12 2000-05-24 Takeda Chemical Industries, Ltd. Iontophoretic drug delivery
JP4154017B2 (ja) 1997-12-30 2008-09-24 久光製薬株式会社 イオントフォレーシス装置および薬物ユニット
US6091975A (en) 1998-04-01 2000-07-18 Alza Corporation Minimally invasive detecting device
SE9801495D0 (sv) 1998-04-28 1998-04-28 Astra Ab Protein formulationa
US6316410B1 (en) 1999-09-22 2001-11-13 National Research Council Of Canada Parathyroid hormone analogues for the treatment of osteoporosis
AU1280701A (en) 1999-11-17 2001-05-30 Novartis Ag Iontophoretic transdermal delivery of peptides
GB9930882D0 (en) 1999-12-30 2000-02-23 Nps Allelix Corp GLP-2 formulations
US20010044431A1 (en) 2000-03-21 2001-11-22 Rodriguez Gustavo C. Prevention of ovarian cancer by administration of products that induce biologic effects in the ovarian epithelium
US6756480B2 (en) 2000-04-27 2004-06-29 Amgen Inc. Modulators of receptors for parathyroid hormone and parathyroid hormone-related protein
US20050124537A1 (en) 2000-04-27 2005-06-09 Amgen Inc. Modulators of receptors for parathyroid hormone and parathyroid hormone-related protein
AR030312A1 (es) 2000-08-03 2003-08-20 Antares Pharma Ipl Ag Composicion novedosa para la administracion transdermica y/o transmucosica de compuestos activos, que asegura adecuados niveles terapeuticos
IL154408A0 (en) 2000-08-23 2003-09-17 Akzo Nobel Nv 10-ARYL-11-H BENZO [b] FLUORENE DERIVATIVES AND ANALOGS FOR MEDICINAL USE
US7371721B2 (en) 2000-09-18 2008-05-13 Sanos Bioscience A/S Use of GLP-2 and related compounds for the treatment, prevention, diagnosis, and prognosis of bone-related disorders and calcium homeostasis related syndromes
US7186683B2 (en) 2000-09-18 2007-03-06 Sanos Bioscience A/S Use of GLP for the treatment, prevention, diagnosis, and prognosis of bone-related and nutrition-related disorders
HUP0302924A2 (en) 2000-10-26 2003-12-29 Alza Corp Transdermal drug delivery devices having coated microprotrusions
CN100349632C (zh) 2001-04-20 2007-11-21 阿尔扎公司 具有包含有益药剂的涂层的微小突出物阵列
YU103003A (sh) 2001-06-26 2006-05-25 Abgenix Inc. Antitela za opgl
US6881203B2 (en) 2001-09-05 2005-04-19 3M Innovative Properties Company Microneedle arrays and methods of manufacturing the same
US8853266B2 (en) 2001-12-06 2014-10-07 University Of Tennessee Research Foundation Selective androgen receptor modulators for treating diabetes
HUP0402605A2 (hu) 2001-12-20 2005-06-28 Alza Corporation Eszköz mikroszkopikus bemetszések ejtésére állat bőrszövetén
EP1465619A1 (en) 2002-01-14 2004-10-13 Nordic Bioscience A/S Suppression of cartilage degradation via the estrogen receptor
WO2003068805A2 (en) 2002-02-14 2003-08-21 Bayer Pharmaceuticals Corporation Formulation strategies in stabilizing peptides in organic solvents and in dried states
CA2496618A1 (en) 2002-05-23 2003-12-04 Michael Holick Use of a parathyroid hormone peptide analogs for the treatment of vaginal atrophy
TW200307553A (en) 2002-05-24 2003-12-16 Akzo Nobel Nv Treatment of post-menopausal complaints in breast cancer patients
AU2003251527A1 (en) 2002-06-13 2003-12-31 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Analogs of parathyroid hormone and pth-related protein as bone anabolic agents
EP1539212A4 (en) 2002-07-12 2007-05-02 Medarex Inc METHOD AND COMPOSITIONS FOR PREVENTING OXIDATIVE DEGRADATION OF PROTEINS
CN102872526A (zh) 2002-07-19 2013-01-16 3M创新有限公司 微针装置和微针施用设备
BR0314920A (pt) 2002-10-14 2005-08-02 Novo Nordisk As Peptìdeo glp-2, construto de polinucleotìdeo, célula hospedeira, derivado de glp-2 compreendendo um peptìdeo glp-2, composição farmacêutica, uso de um derivado de glp-2, método para o tratamento de uma insuficiência intestinal ou outra condição acarretando a má absorção de nutrientes no intestino, método para o tratamento de doenças, e, método para produzir o peptìdeo glp-2
US7411039B2 (en) 2002-10-14 2008-08-12 Novo Nordisk A/S GLP-2 compounds, formulations, and uses thereof
US8133505B2 (en) 2002-10-31 2012-03-13 Transpharma Medical Ltd. Transdermal delivery system for dried particulate or lyophilized medications
US7662404B2 (en) 2002-10-31 2010-02-16 Transpharma Medical Ltd. Transdermal delivery system for dried particulate or lyophilized peptides and polypeptides
IL152574A (en) 2002-10-31 2009-09-22 Transpharma Medical Ltd A system for passing through the skin of dry items or dried medicines
US7383084B2 (en) 2002-10-31 2008-06-03 Transpharma Medical Ltd. Transdermal delivery system for dried particulate or lyophilized medications
AU2002359391A1 (en) 2002-11-01 2004-07-29 Amgen, Inc. Modulators of receptors for parathyrois hormone and parathyroid hormone-related protein
AU2003292625B2 (en) * 2002-12-26 2008-07-24 Eisai R & D Management Co., Ltd. Selective estrogen receptor modulators
EP1636167A2 (en) 2003-06-10 2006-03-22 SmithKline Beecham Corporation 1-aminonaphthalenes as modulators of androgen, glucocorticoid, mineralocorticoid and progesterone receptors
EP1654221A2 (en) 2003-06-10 2006-05-10 Smithkline Beecham Corporation Aniline derivatived androgen-, glucocorticoid-, mineralcorticoid- and progesterone- receptor modulators
WO2005000309A2 (en) 2003-06-27 2005-01-06 Ionix Pharmaceuticals Limited Chemical compounds
AU2004255228A1 (en) 2003-06-30 2005-01-20 Alza Corporation Method for coating skin piercing microprojections
EP1638523B8 (en) 2003-06-30 2013-12-25 ALZA Corporation Formulations for coated microprojections containing non-volatile counterions
US20050032698A1 (en) 2003-07-14 2005-02-10 Nps Allelix Corp. Stabilized formulation of parathyroid hormone
US7141544B2 (en) 2003-10-10 2006-11-28 Baxter International, Inc. Stabilization of pharmaceutical protein formulations with small peptides
US20050124625A1 (en) 2003-10-21 2005-06-09 Salvati Mark E. Piperazine derivatives and their use as modulators of nuclear hormone receptor function
GB0324551D0 (en) 2003-10-21 2003-11-26 Karobio Ab Novel compounds
CN1897883A (zh) 2003-10-28 2007-01-17 阿尔扎公司 通过涂覆的微喷射体释放治疗用肽和蛋白的聚合物缀合物
JP4682144B2 (ja) 2003-10-31 2011-05-11 アルザ・コーポレーシヨン 微小突起列のための自己−作動性アプリケーター
WO2005051456A2 (en) 2003-11-13 2005-06-09 Alza Corporation Composition and apparatus for transdermal delivery
JP2007521328A (ja) 2003-11-20 2007-08-02 ワーナー−ランバート カンパニー リミテッド ライアビリティー カンパニー アンドロゲン受容体モジュレーター
KR20070011252A (ko) 2003-11-21 2007-01-24 알자 코포레이션 초음파 보조 경피 백신전달방법 및 시스템
IL159273A0 (en) 2003-12-09 2004-06-01 Transpharma Medical Ltd Transdermal delivery system for sustained release of polypeptides
AU2003297904A1 (en) 2003-12-12 2005-07-14 University Of Maryland, Baltimore Immunomodulatory compounds that target and inhibit the py+3 binding site of tyrosene kinase p56 lck sh2 domain
TWI383993B (zh) 2004-01-07 2013-02-01 Endorech Inc 螺旋１２取向性醫藥品
IL160033A0 (en) 2004-01-25 2004-06-20 Transpharma Medical Ltd Transdermal delivery system for polynucleotides
TWI359026B (en) 2004-02-12 2012-03-01 Sankyo Co Pharmaceutical composition for the osteoclast rela
GB0405033D0 (en) 2004-03-05 2004-04-07 Karobio Ab Novel pharmaceutical compositions
US20080125399A1 (en) 2004-04-08 2008-05-29 Jiabing Wang 17 Beta-Acetamide-4-Azasteroids As Androgen Receptor Modulators
CN101151048A (zh) 2004-05-10 2008-03-26 纳斯泰克制药公司 增强甲状旁腺激素粘膜递送的组合物和方法
JP2007537236A (ja) 2004-05-11 2007-12-20 ファイザー・プロダクツ・インク 筋骨格の脆弱性を治療するためのベンゾニトリル誘導体
JP5007427B2 (ja) 2004-05-13 2012-08-22 アルザ コーポレイション 副甲状腺ホルモン剤の経皮送達のための装置および方法
EP1765406A4 (en) 2004-05-21 2012-11-28 Mediplex Corp ADDITIVES FOR IMPROVED MUCOSAL ABSORPTION OF THERAPEUTIC AGENTS
US7906137B2 (en) 2004-05-21 2011-03-15 Mediplex Corporation, Korea Delivery agents for enhancing mucosal absorption of therapeutic agents
US20090069226A1 (en) 2004-05-28 2009-03-12 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Transmucosal delivery of peptides and proteins
TW200621282A (en) 2004-08-13 2006-07-01 Wyeth Corp Stabilizing formulations
CA2585276A1 (en) 2004-10-29 2006-06-08 Merck & Co., Inc. N-(pyridin-3-yl)-2-phenylbutanamides as androgen receptor modulators
AU2005306426B2 (en) 2004-11-18 2011-04-28 3M Innovative Properties Company Masking method for coating a microneedle array
US8057842B2 (en) 2004-11-18 2011-11-15 3M Innovative Properties Company Method of contact coating a microneedle array
JP2008520331A (ja) 2004-11-18 2008-06-19 トランスファーマ メディカル リミテッド 薬剤の経皮的送達のためのマイクロチャネル形成とイオントフォレーシスの組合せ
CA2593112A1 (en) 2005-01-21 2006-07-27 Alza Corporation Therapeutic peptide formulations for coating microneedles with improved stability containing at least one counterion
EP1871379A4 (en) 2005-04-15 2010-06-02 Glaxosmithkline Llc CYANOARYLAMINE
KR100700869B1 (ko) 2005-06-03 2007-03-29 재단법인 목암생명공학연구소 Ｐｔｈ, 완충제 및 안정제를 포함하는 안정한 ｐｔｈ조성물
US20090170907A1 (en) 2005-06-06 2009-07-02 Smithkline Beecham Corporation Chemical Compounds
AR057656A1 (es) 2005-07-01 2007-12-12 Ligand Pharm Inc Compuestos moduladores de receptores de androgeno y metodods relacionados
US20070021216A1 (en) 2005-07-19 2007-01-25 Sony Ericsson Mobile Communications Ab Seamless gaming method and apparatus
JP2008303145A (ja) 2005-09-22 2008-12-18 Takeda Chem Ind Ltd Ｇｒｋ阻害剤からなる強心薬
EP1948139A4 (en) 2005-11-18 2012-04-04 3M Innovative Properties Co COATING COMPOSITIONS, COATINGS DERIVED THEREFROM, AND MICRO-NETWORKS COMPRISING SUCH COATINGS
US8632801B2 (en) 2005-12-28 2014-01-21 Alza Corporation Stable therapeutic formulations
EP2001453A4 (en) 2006-03-15 2012-09-12 Alza Corp APPARATUS AND METHOD FOR TRANSDERMAL DELIVERY OF PARATHYROID HORMONE AGENTS FOR TREATING OR PREVENTING OSTEOPENIA
WO2007124411A1 (en) 2006-04-20 2007-11-01 3M Innovative Properties Company Device for applying a microneedle array
WO2007124465A2 (en) 2006-04-20 2007-11-01 Amgen Inc. Stable emulsion formulations
JP5362552B2 (ja) 2006-04-20 2013-12-11 ヴェロシス，インク． マイクロチャネルプロセス技術を用いて非ニュートン流体を処理し、および／または形成させるためのプロセス
CN101085743B (zh) 2006-06-06 2012-02-15 浙江大德药业集团有限公司 含氟烷氧基康普立停衍生物及制法和用途
US8933130B2 (en) 2006-06-23 2015-01-13 Radius Health, Inc. Treatment of vasomotor symptoms with selective estrogen receptor modulators
BRPI0713179A2 (pt) 2006-07-12 2012-03-27 Univ Tennessee Res Foundation processo para substituição e uso de compostos substitutos de acilanilidea
ES2581765T3 (es) 2006-08-24 2016-09-07 University Of Tennessee Research Foundation Acilanilidas sustituidas y métodos de uso de las mismas
US8207115B2 (en) 2006-08-25 2012-06-26 Ares Trading S.A. Treatment of cartilage disorders with FGF-18
CN1927815A (zh) 2006-09-25 2007-03-14 天津理工大学 邻苄胺基苯基醚化合物、化合物的衍生物及其制备方法与用途
DK2957278T3 (en) 2006-10-03 2017-07-31 Radius Health Inc STABLE COMPOSITION COMPREHENSIVE PTHRP AND APPLICATIONS THEREOF
US7803770B2 (en) 2006-10-03 2010-09-28 Radius Health, Inc. Method of treating osteoporosis comprising administration of PTHrP analog
WO2008044033A1 (en) 2006-10-11 2008-04-17 Astrazeneca Ab Amide derivatives
US20100030100A1 (en) 2007-02-06 2010-02-04 Hisamitsu Pharmaceutical Co., Inc. Microneedle Device For Diagnosis Of Allergy
WO2008121602A1 (en) 2007-03-29 2008-10-09 Smithkline Beecham Corporation Chemical compounds
WO2008124000A2 (en) 2007-04-02 2008-10-16 Ligand Pharmaceuticals Incorporated Thiazole derivatives as androgen receptor modulator compounds
US9114238B2 (en) 2007-04-16 2015-08-25 Corium International, Inc. Solvent-cast microprotrusion arrays containing active ingredient
GB0707938D0 (en) 2007-04-25 2007-05-30 Univ Strathclyde Precipitation stabilising compositions
WO2008145125A1 (en) * 2007-05-31 2008-12-04 Dako Denmark A/S Methods for utilizing esr copy number changes in breast cancer treatments and prognoses
US20110009387A1 (en) 2007-06-12 2011-01-13 Andrea Dawn Basso-Porcaro Histone h2ax (hh2ax) biomarker for fti sensitivity
WO2008157425A2 (en) 2007-06-14 2008-12-24 The Regents Of The University Of California Compounds for inhibiting protein aggregation, and methods for making and using them
US20120150023A1 (en) 2007-08-06 2012-06-14 Kaspar Roger L Microneedle arrays for active agent delivery
EP2205169B1 (en) 2007-09-28 2016-11-16 The Queen's University of Belfast Delivery device and method
US20090117158A1 (en) 2007-10-23 2009-05-07 Mahmoud Ameri Transdermal sustained release drug delivery
EP2052736A1 (en) 2007-10-26 2009-04-29 Nycomed Danmark ApS Parathyroid hormone formulations und uses thereof
WO2009065126A2 (en) 2007-11-16 2009-05-22 Boston Protein Solutions Excipients for protein stabilization
WO2009133861A1 (ja) 2008-04-28 2009-11-05 武田薬品工業株式会社 環状アミン化合物
WO2009137104A1 (en) * 2008-05-09 2009-11-12 Radius Health, Inc. Combination therapy for breastcancer comprising an antiestrogenic agent
WO2010022176A1 (en) 2008-08-19 2010-02-25 Ferring International Center S.A. Methods of treatment for skeletal conditons
NZ592113A (en) 2008-10-15 2012-04-27 Intarcia Therapeutics Inc Highly concentrated drug particles, formulations, suspensions and uses thereof
ES2548378T3 (es) 2008-11-04 2015-10-16 Aska Pharmaceutical Co., Ltd. Composición acuosa que contiene hormona foliculoestimulante
EP2355887B1 (en) 2008-11-18 2017-08-02 3M Innovative Properties Company Hollow microneedle array
KR101634836B1 (ko) 2008-12-26 2016-06-29 히사미쓰 세이야꾸 가부시키가이샤 마이크로 니들 디바이스
US20100203014A1 (en) 2009-02-04 2010-08-12 Aegis Therapeutics Llc Zwitterionic buffered acidic peptide and protein formulations
US20100226966A1 (en) 2009-03-03 2010-09-09 Daddona Peter E Method for transdermal controlled release drug delivery
WO2010118287A1 (en) 2009-04-10 2010-10-14 Radius Health, Inc. Selective androgen receptor modulators
WO2010124255A2 (en) 2009-04-24 2010-10-28 Corium International, Inc. Methods for manufacturing microprojection arrays
ES2661063T3 (es) 2009-07-31 2018-03-27 3M Innovative Properties Company Matrices de micro agujas huecas
US20120219538A1 (en) 2009-11-02 2012-08-30 Therapeomic Ag Stabilized protein formulations and use thereof
US20110172609A1 (en) 2010-01-08 2011-07-14 Ratio, Inc. Microneedle component assembly for drug delivery device
CN101912600B (zh) 2010-01-11 2014-01-29 杨国汉 改善胰岛素在溶液中稳定性的方法
IE20100174A1 (en) 2010-03-25 2012-02-29 Trinity College Dublin Transdermal administration of peptides
JP6327852B2 (ja) 2010-05-04 2018-05-23 コリウム インターナショナル， インコーポレイテッド 微小突起アレイを使用した副甲状腺ホルモンの経皮送達のための方法及びデバイス
EP3225247B1 (en) 2010-05-28 2020-09-02 3M Innovative Properties Company Aqueous formulations for coating microneedle arrays
KR20130031339A (ko) * 2010-06-16 2013-03-28 앙도르쉐르슈 인코포레이티드 에스트로겐-관련 질병의 치료 또는 예방 방법
WO2012075375A1 (en) 2010-12-02 2012-06-07 Lanco Biosciences, Inc. Delivery of parathyroid hormones by microinjection systems
AU2012223279A1 (en) 2011-03-01 2013-09-26 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Parathyroid hormone analogs, compositions and uses thereof
MX2013012349A (es) 2011-04-22 2014-07-09 Radius Health Inc Metodo para suministro de farmaco para pth, pthrp y peptidos relacionados.
EP2785327B1 (en) 2011-11-30 2023-11-22 Kindeva Drug Delivery L.P. Microneedle device having a peptide therapeutic agent and an amino acid, methods of making and using the same
GB201217439D0 (en) 2012-09-28 2012-11-14 Topotarget As Combination therapy
RU2015152171A (ru) 2013-06-19 2017-07-25 Серагон Фармасьютикалз, Инк. Азетидиновые модуляторы эстрогеновых рецепторов и их применения
WO2014203129A1 (en) * 2013-06-19 2014-12-24 Olema Pharmaceuticals, Inc. Combinations of benzopyran compounds, compositions and uses thereof
CN104436194B (zh) 2013-09-18 2018-03-30 北京大学 具有协同增效作用的抗癌组合物
US10093982B2 (en) * 2014-01-27 2018-10-09 Dna-Seq, Inc. Methods and systems for determination of an effective therapeutic regimen and drug discovery
KR20160124909A (ko) 2014-03-13 2016-10-28 에프. 호프만-라 로슈 아게 에스트로겐 수용체 조절제를 함유하는 치료 조합물
ES2939940T3 (es) * 2014-03-28 2023-04-28 Univ Duke Tratamiento del cáncer de mama utilizando moduladores selectivos de los receptores de estrógenos
US9421264B2 (en) 2014-03-28 2016-08-23 Duke University Method of treating cancer using selective estrogen receptor modulators
US20150320754A1 (en) 2014-04-16 2015-11-12 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Combination therapies
JP6807841B2 (ja) 2014-12-18 2021-01-06 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト エストロゲン受容体モジュレーター及びその使用
AR104068A1 (es) * 2015-03-26 2017-06-21 Hoffmann La Roche Combinaciones de un compuesto inhibidor de fosfoinosítido 3-cinasa y un compuesto inhibidor de cdk4/6 para el tratamiento del cáncer
RU2737496C2 (ru) * 2015-04-29 2020-12-01 Радиус Фармасьютикалз, Инк. Способы лечения рака

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Breast Cancer Research, 16(494), 1-8쪽(2014.) 1부.* *
인터넷 뉴스(globeNewswire, FDA Accepts IND Application for Radius Health's Investigational Drug RAD1901 Being Developed for Potential Use in Metastatic Breast Cancer, 2014.12.19.) 1부.* *

Also Published As

Publication number Publication date
MX2021003389A (es) 2021-05-28
MX2017013794A (es) 2018-08-15
HK1251408A1 (zh) 2019-02-01
IL307981A (en) 2023-12-01
IL255148B2 (en) 2023-04-01
JP2024120996A (ja) 2024-09-05
MX2021004881A (es) 2021-07-21
EP3294065A4 (en) 2019-03-20
RU2745678C2 (ru) 2021-03-30
RU2017140676A (ru) 2019-05-29
CN113288887A (zh) 2021-08-24
IL255261B2 (en) 2024-03-01
IL255189B1 (en) 2023-12-01
US20180169101A1 (en) 2018-06-21
WO2016176666A1 (en) 2016-11-03
CN108024541B (zh) 2021-07-20
IL297369B2 (en) 2024-06-01
EP3288382A4 (en) 2019-01-30
AU2016256470A1 (en) 2017-12-14
SG11201708861VA (en) 2017-11-29
JP2021105064A (ja) 2021-07-26
US20200046655A1 (en) 2020-02-13
EP3294065A1 (en) 2018-03-21
EP3288383A4 (en) 2019-01-23
IL307983A (en) 2023-12-01
WO2016176665A1 (en) 2016-11-03
SG11201708860SA (en) 2017-11-29
IL255261A0 (en) 2017-12-31
AU2016256471B2 (en) 2020-09-10
CN113750091A (zh) 2021-12-07
JP7146992B2 (ja) 2022-10-04
IL297369B1 (en) 2024-02-01
AU2016256471A1 (en) 2017-12-21
JP2018514549A (ja) 2018-06-07
US20180214393A1 (en) 2018-08-02
US20240099996A1 (en) 2024-03-28
MX2017013801A (es) 2018-08-15
KR102682763B1 (ko) 2024-07-05
US20220339126A1 (en) 2022-10-27
US20200368183A1 (en) 2020-11-26
US20220110890A1 (en) 2022-04-14
CN108024541A (zh) 2018-05-11
KR102676705B1 (ko) 2024-06-18
KR102676629B1 (ko) 2024-06-18
RU2747228C2 (ru) 2021-04-29
KR20240095372A (ko) 2024-06-25
US20200038343A1 (en) 2020-02-06
JP2018518529A (ja) 2018-07-12
JP2018514593A (ja) 2018-06-07
CN108024540A (zh) 2018-05-11
AU2016256469A8 (en) 2017-12-21
RU2017140676A3 (ko) 2019-09-27
IL255189A0 (en) 2017-12-31
CN108135177B (zh) 2021-06-01
JP7019422B2 (ja) 2022-02-15
IL255148A0 (en) 2017-12-31
JP6926065B2 (ja) 2021-08-25
RU2737496C2 (ru) 2020-12-01
AU2016256469B2 (en) 2020-12-10
JP2021102640A (ja) 2021-07-15
RU2017140674A (ru) 2019-05-29
KR20180042155A (ko) 2018-04-25
RU2017140675A (ru) 2019-05-29
KR20180043202A (ko) 2018-04-27
BR112017023269A2 (pt) 2018-11-06
BR112017023233A2 (pt) 2018-11-06
KR20240097966A (ko) 2024-06-27
CA2984195C (en) 2023-10-24
CA2984195A1 (en) 2016-11-03
CN108024540B (zh) 2021-09-17
IL255148B (en) 2022-12-01
IL255189B2 (en) 2024-04-01
SG11201708858WA (en) 2017-11-29
EP3288383A1 (en) 2018-03-07
MX2017013802A (es) 2018-08-15
US11413258B2 (en) 2022-08-16
WO2016176664A1 (en) 2016-11-03
IL255261B1 (en) 2023-11-01
US20240091177A1 (en) 2024-03-21
MX2021005561A (es) 2022-07-01
AU2016256470B2 (en) 2020-10-15
IL297369A (en) 2022-12-01
US11819480B2 (en) 2023-11-21
BR112017023228A2 (pt) 2018-11-06
KR20240110098A (ko) 2024-07-12
HK1251409A1 (zh) 2019-02-01
HK1251407A1 (zh) 2019-02-01
CN108135177A (zh) 2018-06-08
JP2022172039A (ja) 2022-11-14
IL310069A (en) 2024-03-01
JP7516472B2 (ja) 2024-07-16
JP7262508B2 (ja) 2023-04-21
JP6926066B2 (ja) 2021-08-25
RU2017140675A3 (ko) 2019-09-27
AU2016256469A1 (en) 2017-12-14
JP2023052631A (ja) 2023-04-11
SG10202104177VA (en) 2021-05-28
RU2017140674A3 (ko) 2019-09-27
CA2984200C (en) 2024-03-19
EP3288382A1 (en) 2018-03-07
EP4039253A1 (en) 2022-08-10
CA2984200A1 (en) 2016-11-03
CA2984357A1 (en) 2016-11-03
US20180153828A1 (en) 2018-06-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7262508B2 (ja) 癌を治療するための方法

Legal Events

Date Code Title Description
AMND Amendment
E902 Notification of reason for refusal
AMND Amendment
E601 Decision to refuse application
X091 Application refused [patent]
AMND Amendment
X701 Decision to grant (after re-examination)
GRNT Written decision to grant