KR20140122281A

KR20140122281A - 숙시네이트 염의 결정질 형태

Info

Publication number: KR20140122281A
Application number: KR1020147026108A
Authority: KR
Inventors: 캐서린 하우샴; 크리스티안 린덴베르크; 아네트 펄베르크; 니콜라 투필리
Original assignee: 노파르티스 아게
Priority date: 2012-03-19
Filing date: 2013-03-15
Publication date: 2014-10-17
Also published as: ES2565811T3; PE20142352A1; MY165082A; US8809340B2; ECSP14023397A; GT201400200A; MX2014011294A; EA201491719A1; MA37391B1; PH12014502064A1; ZA201406238B; HK1200454A1; EP2828261B1; EA023716B1; HRP20160420T1; TN2014000369A1; CA2865536A1; HUE028761T2; CL2014002339A1; MX352185B

Abstract

본 발명은 상피 나트륨 채널 (ENaC) 차단제 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르의 숙시네이트 염의 신규 결정질 형태, 상기 결정질 형태를 포함하는 제약 조성물, 상기 결정질 형태 및 제약 조성물의 용도, 및 상기 결정질 형태의 제조 방법에 관한 것이다.

Description

숙시네이트 염의 결정질 형태 {CRYSTALLINE FORM OF A SUCCINATE SALT}

국제 특허 출원 공개 WO 2012/035158 (PCT/EP2011/066151)은 ENaC 차단제 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 및 그의 숙시네이트 염의 제조 방법을 개시한다.

상피 나트륨 채널의 차단에 의해 매개되는 질환은 상피 막을 가로지르는 유체 부피의 조절과 연관된 질환을 포함한다. 예를 들어, 기도 표면 액체의 부피는 점액 섬모 클리어런스 및 폐 건강 유지의 핵심 조절제이다. 상피 나트륨 채널의 차단은 기도 상피의 점막 측에 유체 축적을 촉진시켜 점액 클리어런스를 촉진시키고, 호흡 조직 (폐 기도 포함)에서 점액 및 객담의 축적을 방지할 것이다. 이러한 질환은 호흡기 질환, 예컨대 낭성 섬유증, 원발성 섬모 이상운동증, 만성 기관지염, 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 천식, 기도 감염 (급성 및 만성; 바이러스성 및 박테리아성) 및 폐 암종을 포함한다. 상피 나트륨 채널의 차단에 의해 매개되는 질환은 또한 상피를 가로지르는 비정상적인 유체 조절과 연관된 호흡성 질환 이외의 질환, 아마도 그의 표면 상의 보호성 표면 액체의 비정상적인 생리상태와 관련된 질환, 예를 들어 구강건조증 (구강 건조) 또는 각결막염 (안구 건조)을 포함한다. 추가로, 신장에서의 상피 나트륨 채널의 차단은 이뇨를 촉진시켜 혈압강하 효과를 유도하기 위해 사용될 수 있었다.

도 1은 형태 A (실시예 3)에 대해 기록된 X선 분말 회절 패턴을 제시하며, CuKα 방사선 (λ = 1.5418 Å)을 사용하여 브루커(Bruker)™ D8 회절계 상에서 기록하였다.
도 2는 형태 A (실시예 3)의 시차 주사 열량측정 (DSC) 트레이스를 제시하며, 알루미늄 팬이 장착된 퍼킨 엘머 다이아몬드(Perkin Elmer Diamond) DSC 기기 (퍼킨 엘머, 유형 BO14-3018) 상에서 기록하였다; 가열 속도 20 K/min, 온도 범위: 30 내지 250℃.
도 3은 형태 A (실시예 3)의 적외선 스펙트럼을 제시하며, 감쇠 전반사 (ATR) 모드로 브루커 알파(Alpha) 기기 상에서 기록하였다. 측정 파라미터는 다음과 같았다: 범위 400-4000 cm^-1, 해상도 2 cm^-1, 64 스캔, 속도 7.5 kHz, 아포디제이션: 블랙맨-해리스(Blackman-Harris) 3-텀.
도 4는 형태 A (실시예 1, 2)에 대해 기록된 X선 분말 회절 패턴을 제시하며, CuKα 방사선 (λ = 1.5418 Å)을 사용하여 브루커™ D8 회절계 상에서 기록하였다.
도 5는 형태 A (실시예 1, 2)의 시차 주사 열량측정 (DSC) 트레이스를 제시하며, 알루미늄 팬이 장착된 퍼킨 엘머 다이아몬드 DSC 기기 (퍼킨 엘머, 유형 BO14-3018) 상에서 기록하였다; 가열 속도 20 K/min, 온도 범위: 30 내지 250℃.
도 6은 형태 B (실시예 4, 5, 6, 7)에 대해 기록된 X선 분말 회절 패턴을 제시하며, CuKα 방사선 (λ = 1.5418 Å)을 사용하여 브루커™ D8 회절계 상에서 기록하였다.
도 7은 형태 C (실시예 10)에 대해 기록된 X선 분말 회절 패턴을 제시하며, CuKα 방사선 (λ = 1.5418 Å)을 사용하여 브루커™ D8 회절계 상에서 기록하였다.
도 8은 형태 C (실시예 10)의 시차 주사 열량측정 (DSC) 트레이스를 제시하며, 알루미늄 팬이 장착된 퍼킨 엘머 다이아몬드 DSC 기기 (퍼킨 엘머, 유형 BO14-3018) 상에서 기록하였다; 가열 속도 20 K/min, 온도 범위: 30 내지 250℃.
도 9는 형태 C (실시예 10)의 적외선 스펙트럼을 제시하며, 감쇠 전반사 (ATR) 모드로 브루커 알파(Alpha) 기기 상에서 기록하였다. 측정 파라미터는 다음과 같았다: 범위 400-4000 cm^-1, 해상도 2 cm^-1, 64 스캔, 속도 7.5 kHz, 아포디제이션: 블랙맨-해리스 3-텀.
도 10은 형태 C (실시예 8, 9)에 대해 기록된 X선 분말 회절 패턴을 제시하며, CuKα 방사선 (λ = 1.5418 Å)을 사용하여 브루커™ D8 회절계 상에서 기록하였다.
도 11은 형태 C (실시예 8, 9)의 DSC 트레이스를 제시하며, 알루미늄 팬이 장착된 퍼킨 엘머 다이아몬드 DSC 기기 (퍼킨 엘머, 유형 BO14-3018) 상에서 기록하였다; 가열 속도 20 K/min, 온도 범위: 30 내지 250℃.

ENaC 차단제 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르의 숙시네이트 염 (3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 : 숙신산 = 1 : 1)의 3종의 다형체 형태 (형태 A, B 및 C)가 개시된다. 형태 A 및 B의 제조 방법은 국제 특허 출원 공개 WO 2012/035158 (PCT/EP2011/066151)에 기재되었다.

따라서, 제1 측면에서, 본 발명은 형태 C를 포함하는 하기 화학식의 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트의 결정질 형태를 제공한다.

제1 측면의 한 실시양태에서, 결정질 형태는 형태 C로 본질적으로 이루어진다.

제1 측면의 또 다른 실시양태에서, 결정질 형태는 상기 형태 C가 실질적으로 순수한 형태인 형태 C를 포함한다.

제1 측면의 또 다른 실시양태에서, 결정질 형태는 21-26℃의 온도에서 7.0˚±0.2, 10.6˚±0.2, 14.3˚±0.2, 18.2˚±0.2, 18.6˚±0.2, 19.2˚±0.2, 21.2˚±0.2, 21.8˚±0.2, 24.7˚±0.2, 29.0˚±0.2 및 31.5˚±0.2의 군으로부터 선택된 4개 이상의 2-세타 값을 포함하는 X선 분말 회절 패턴을 특징으로 한다.

제1 측면의 또 다른 실시양태에서, 결정질 형태는 21-26℃의 온도에서 7.0˚±0.2, 10.6˚±0.2, 14.3˚±0.2, 18.2˚±0.2, 18.6˚±0.2, 19.2˚±0.2, 21.2˚±0.2, 21.8˚±0.2, 24.7˚±0.2, 29.0˚±0.2 및 31.5˚±0.2의 군으로부터 선택된 6개 이상의 2-세타 값을 포함하는 X선 분말 회절 패턴을 특징으로 한다.

제1 측면의 또 다른 실시양태에서, 결정질 형태는 도 7에 제시된 X선 분말 회절 스펙트럼과 실질적으로 동일한 X선 분말 회절 스펙트럼을 갖는다.

제1 측면의 또 다른 실시양태에서, 결정질 형태는 도 8에 제시된 것과 실질적으로 동일한 시차 주사 열량측정 온도기록도를 갖는다.

특정한 다형체 형태와 관련하여 본원에 사용된 용어 "실질적으로 순수한"은, 다형체 형태가 화합물의 임의의 다른 물리적 형태 (다형체)를 10 중량% 미만, 바람직하게는 5 중량% 미만, 보다 바람직하게는 3 중량% 미만, 가장 바람직하게는 1 중량% 미만으로 포함하는 것을 의미한다.

본원에 사용된 "다형체"는 동일한 화학적 조성을 갖지만 결정을 형성하는 분자, 원자 및/또는 이온의 상이한 공간적 배열을 갖는 결정질 형태를 나타낸다.

본 명세서 전반에 걸쳐 및 하기 특허청구범위에서, 문맥상 달리 요구되지 않는 한, 용어 "포함하다", 또는 "포함한다" 또는 "포함하는"과 같은 변형은 언급된 정수 또는 단계, 또는 정수 또는 단계의 군의 포함을 의미하지만, 임의의 다른 정수 또는 단계, 또는 정수 또는 단계의 군의 배제를 의미하지는 않는다는 것으로 이해되어야 한다.

본원에 사용된 용어 "본 발명의 결정질 형태"는 제1 측면 또는 제1 측면의 임의의 실시양태에 정의된 바와 같은 결정질 형태를 의미한다.

제2 측면에서, 제1 측면 또는 제1 측면의 임의의 실시양태에 따른 결정질 형태 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물이 제공된다.

제2 측면의 한 실시양태에서, 형태 C는 실질적으로 순수한 형태이다.

제2 측면의 또 다른 실시양태에서, 제약 조성물은 흡입가능한 형태이다.

제3 측면에서, 하나 이상의 추가의 활성 성분과 조합된 제2 측면 또는 제2 측면의 한 실시양태에 따른 제약 조성물이 제공된다.

제4 측면에서, 호흡기 질환, 예컨대 낭성 섬유증, 원발성 섬모 이상운동증, 만성 기관지염, 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 천식, 기도 감염 (급성 및 만성; 바이러스성 및 박테리아성) 및 폐 암종의 치료에 사용하기 위한 제1 측면 또는 제1 측면의 임의의 실시양태에 따른 결정질 형태 및 제2 측면 또는 제2 측면의 임의의 실시양태에 따른 제약 조성물이 제공된다.

제5 측면에서, 호흡기 질환, 예컨대 낭성 섬유증, 원발성 섬모 이상운동증, 만성 기관지염, 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 천식, 기도 감염 (급성 및 만성; 바이러스성 및 박테리아성) 및 폐 암종의 치료를 위한 의약의 제조에 있어서 제1 측면 또는 제1 측면의 임의의 실시양태에 따른 결정질 형태 또는 제2 측면 또는 제2 측면의 임의의 실시양태에 따른 조성물의 용도가 제공된다.

제6 측면에서, 호흡기 질환, 예컨대 낭성 섬유증, 원발성 섬모 이상운동증, 만성 기관지염, 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 천식, 기도 감염 (급성 및 만성; 바이러스성 및 박테리아성) 및 폐 암종의 치료를 필요로 하는 환자에게 제1 측면 또는 제1 측면의 임의의 실시양태에 따른 결정질 형태 또는 제2 측면 또는 제2 측면의 임의의 실시양태에 따른 제약 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함하는, 상기 질환을 치료하는 방법이 제공된다.

제7 측면에서, 제1 측면 또는 제1 측면의 임의의 실시양태에 따른 결정질 형태를 함유하고 그를 폐 투여에 의해 전달하도록 적합화된 흡입 장치가 제공된다. 특정의 바람직한 실시양태에서 흡입 장치는 건조 분말 흡입기, 예를 들어 브리즈할러(BREEZHALER)® 흡입 장치이다.

3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트의 신규 다형체 형태 C는 형태 A보다 열역학적으로 보다 안정한 것으로 나타났다.

형태 B는 형태 A의 결정화 동안 현탁액 중에 과도 결정질 형태로서 나타나는 동형 용매화물의 군이다. 형태 B는 건조시에 형태 A로 변형된다.

본 발명의 작용제는 임의의 적절한 경로에 의해, 예를 들어 경구로, 예를 들어 정제 또는 캡슐의 형태로; 비경구로, 예를 들어 정맥내로; 피부에 국소적으로; 예를 들어 알레르기성 비염의 치료에서 비강내로; 또는 바람직하게는, 특히 폐쇄성 또는 염증성 기도 질환의 치료에서 흡입에 의해 투여될 수 있다. 특히, 본 발명의 작용제는 COPD, 낭성 섬유증 또는 천식의 치료를 위해 흡입가능한 제제로서 전달될 수 있다.

제약 조성물은 특정한 투여 경로, 예컨대 경구 투여, 비경구 투여 및 직장 투여 등을 위해 제제화될 수 있다. 또한, 본 발명의 제약 조성물은 고체 형태 (비제한적으로, 캡슐, 정제, 환제, 과립, 분말 또는 좌제 포함), 또는 액체 형태 (비제한적으로, 용액, 현탁액 또는 에멀젼 포함)로 제조될 수 있다. 제약 조성물은 통상의 제약 작업, 예컨대 멸균에 적용될 수 있고/거나, 통상의 불활성 희석제, 윤활제 또는 완충제, 뿐만 아니라 아주반트, 예컨대 보존제, 안정화제, 습윤제, 유화제 및 완충제 등을 함유할 수 있다.

전형적으로, 제약 조성물은 활성 성분을 다음과 함께 포함하는 정제 또는 젤라틴 캡슐이다:

a) 희석제, 예를 들어 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 만니톨, 소르비톨, 셀룰로스 및/또는 글리신;

b) 윤활제, 예를 들어 실리카, 활석, 스테아르산, 그의 마그네슘 또는 칼슘 염 및/또는 폴리에틸렌글리콜; 정제의 경우에 또한

c) 결합제, 예를 들어 규산알루미늄마그네슘, 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸트, 메틸셀룰로스, 소듐 카르복시메틸셀룰로스 및/또는 폴리비닐피롤리돈; 원하는 경우에

d) 붕해제, 예를 들어 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염, 또는 발포성 혼합물; 및/또는

e) 흡수제, 착색제, 향미제 및 감미제.

정제는 당업계에 공지된 방법에 따라 필름 코팅되거나 장용 코팅될 수 있다. 경구 투여에 적합한 조성물은 유효량의 본 발명의 결정질 형태를 정제, 로젠지, 수성 또는 유성 현탁액, 분산성 분말 또는 과립, 에멀젼, 경질 또는 연질 캡슐, 또는 시럽 또는 엘릭시르의 형태로 포함한다. 경구 사용을 위해 의도된 조성물은 제약 조성물의 제조에 대해 당업계에 공지된 임의의 방법에 따라 제조되고, 이러한 조성물은 제약상 우아하고 맛좋은 제제를 제공하기 위해 감미제, 향미제, 착색제 및 보존제로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 작용제를 함유할 수 있다. 정제는 활성 성분을 정제의 제조에 적합한 비독성의 제약상 허용되는 부형제와 혼합하여 함유할 수 있다. 이들 부형제는, 예를 들어, 불활성 희석제, 예컨대 탄산칼슘, 탄산나트륨, 락토스, 인산칼슘 또는 인산나트륨; 과립화제 및 붕해제, 예를 들어 옥수수 전분 또는 알긴산; 결합제, 예를 들어 전분, 젤라틴 또는 아카시아; 및 윤활제, 예를 들어 스테아르산마그네슘, 스테아르산 또는 활석이다. 정제는 코팅되지 않거나, 또는 공지된 기술에 의해 코팅되어 위장관에서의 붕해 및 흡수를 지연시킴으로써 보다 장기간에 걸쳐 지속되는 작용을 제공한다. 예를 들어, 시간 지연 물질 예컨대 글리세릴 모노스테아레이트 또는 글리세릴 디스테아레이트가 사용될 수 있다. 경구 사용을 위한 제제는, 활성 성분이 불활성 고체 희석제, 예를 들어 탄산칼슘, 인산칼슘 또는 카올린과 혼합된 경질 젤라틴 캡슐, 또는 활성 성분이 물 또는 오일 매질, 예를 들어 땅콩 오일, 액상 파라핀 또는 올리브 오일과 혼합된 연질 젤라틴 캡슐로서 제공될 수 있다.

특정의 주사가능한 조성물은 수성 등장성 용액 또는 현탁액이고, 좌제는 지방 에멀젼 또는 현탁액으로부터 유리하게 제조된다. 상기 조성물은 멸균될 수 있고/거나, 아주반트, 예컨대 보존제, 안정화제, 습윤제 또는 유화제, 용해 촉진제, 삼투압 조절용 염 및/또는 완충제를 함유할 수 있다. 추가로, 이들은 또한 다른 치료상 유익한 물질을 함유할 수 있다. 상기 조성물은 각각 통상적인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 따라 제조되며, 약 0.1-75%의 활성 성분을 함유하거나, 또는 약 1-50%의 활성 성분을 함유한다.

경피 적용을 위한 적합한 조성물은 유효량의 본 발명의 결정질 형태를 적합한 담체와 함께 포함한다. 경피 전달에 적합한 담체는 숙주의 피부를 통한 통과를 보조하는 흡수가능한 약리학상 허용되는 용매를 포함한다. 예를 들어, 경피 장치는 백킹 부재, 화합물을 임의로 담체와 함께 함유하는 저장소, 임의로 장기간에 걸쳐 제어된 예정 속도로 숙주의 피부에 화합물을 전달하기 위한 속도 제어 장벽, 및 장치를 피부에 고정시키는 수단을 포함하는 붕대 형태이다.

예를 들어 피부 및 눈에의 국소 적용에 적합한 조성물은 수용액, 현탁액, 연고, 크림, 겔, 또는 예를 들어 에어로졸 등에 의한 전달을 위한 분무가능한 제제를 포함한다. 이러한 국소 전달 시스템은 선 크림, 로션, 스프레이 등으로 피부 적용을 위해, 예를 들어, 피부암의 치료를 위해, 예를 들어, 예방적 용도를 위해 특히 적절할 것이다. 이들은 따라서 당업계에 널리 공지된, 예컨대 화장품 제제를 비롯한 제제에 사용하기에 특히 적합하다. 이들은 가용화제, 안정화제, 장성 증진제, 완충제 및 보존제를 함유할 수 있다.

본원에 사용된 국소 적용은 또한 흡입 또는 비강내 적용에 관한 것일 수 있다. 이들은 편리하게는 적합한 추진제를 사용하거나 또는 사용하지 않고, 건조 분말 흡입기로부터 건조 분말의 형태로 (단독으로, 혼합물로서, 예를 들어 락토스와의 건조 블렌드로서, 또는 예를 들어 인지질과의 혼합 성분 입자로서) 또는 가압 용기, 펌프, 스프레이, 아토마이저 또는 네뷸라이저로부터 에어로졸 스프레이 제제 형태로 전달될 수 있다.

활성 성분의 흡입가능한 형태가 에어로졸 조성물인 경우에, 흡입 장치는 계량된 용량, 예컨대 조성물 10 내지 100 μl, 예를 들어 25 내지 50 μl를 전달하도록 적합화된 밸브가 장착된 에어로졸 바이알, 즉 계량 용량 흡입기로 공지된 장치일 수 있다. 적합한 이러한 에어로졸 바이알, 및 가압 하에서 그의 내부에 에어로졸 조성물을 수용하기 위한 절차는 흡입 요법의 당업자에게 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 에어로졸 조성물은 예를 들어 EP-A-0642992에 기재된 바와 같이 코팅된 캔으로부터 투여될 수 있다. 활성 성분의 흡입가능한 형태가 분무가능한 수성, 유기 또는 수성/유기 분산물인 경우에, 흡입 장치는 공지된 네뷸라이저, 예를 들어 통상적인 기압식 네뷸라이저, 예컨대 에어젯 네뷸라이저, 또는 초음파 네뷸라이저 (이는 예를 들어 분산물 1 내지 50 ml, 통상적으로 1 내지 10 ml를 함유할 수 있음); 또는 때때로 소프트 미스트 또는 소프트 스프레이 흡입기로 언급되는 수동 네뷸라이저, 예를 들어 전기로 제어되는 장치, 예컨대 AERx (아라다임(Aradigm), 미국) 또는 에어로도즈(Aerodose) (에어로겐(Aerogen)), 또는 기계 장치, 예컨대 레스피마트(RESPIMAT) (베링거 잉겔하임(Boehringer Ingelheim)) 네뷸라이저 (이는 통상적인 네뷸라이저보다 훨씬 적은 분무 용량, 예컨대 10 내지 100 μl를 가능하게 함)일 수 있다. 활성 성분의 흡입가능한 형태가 미분된 미립자 형태인 경우에, 흡입 장치는 예를 들어 (A) 및/또는 (B)의 투여량 단위를 포함하는 건조 분말을 함유하는 캡슐 또는 블리스터로부터 건조 분말을 전달하도록 적합화된 건조 분말 흡입 장치, 또는 예를 들어 작동당 (A) 및/또는 (B)의 투여량 단위를 포함하는 건조 분말 3-25 mg을 전달하도록 적합화된 다중용량 건조 분말 흡입 (MDPI) 장치일 수 있다. 건조 분말 조성물은 바람직하게는 희석제 또는 담체, 예컨대 락토스, 및 수분으로 인한 제품 성능 악화에 대해 보호하도록 보조하는 화합물, 예를 들어 스테아르산마그네슘을 함유한다. 적합한 이러한 건조 분말 흡입 장치는 US 3991761 (에어로라이저(AEROLIZER)™ 장치 포함), WO 05/113042 (브리즈할러™ 장치 포함), WO 97/20589 (서티할러(CERTIHALER)™ 장치 포함), WO 97/30743 (트위스트할러(TWISTHALER)™ 장치 포함), WO 05/37353 (자이로할러(GYROHALER)™ 장치 포함), US6536427 (디스쿠스(DISKUS)™ 장치 포함), WO 97/25086 (디스크할러(DISKHALER)™ 장치 포함), WO 95/14089 (제미니(GEMINI)™ 장치 포함), WO 03/77979 (프로할러(PROHALER)™ 장치 포함)에 개시된 장치, 및 또한 WO 08/51621, WO 09/117112 및 US 2005/0183724에 개시된 장치를 포함한다.

본 발명은 또한 (A) 흡입가능한 형태의 본 발명의 결정질 형태; (B) 흡입가능한 형태의 이러한 본 발명의 결정질 형태를 흡입가능한 형태의 제약상 허용되는 담체와 함께 포함하는 흡입가능한 의약; (C) 흡입가능한 형태의 이러한 본 발명의 결정질 형태를 흡입 장치와 함께 포함하는 제약 제품; 및 (D) 흡입가능한 형태의 이러한 본 발명의 결정질 형태를 함유하는 흡입 장치를 포함한다.

본 발명을 실시하는데 사용되는 본 발명의 작용제의 투여량은 물론, 예를 들어 치료할 특정한 상태, 목적하는 효과 및 투여 방식에 따라 달라질 것이다. 일반적으로, 흡입에 의한 투여에 적합한 1일 투여량은 대략 0.0001 내지 30 mg/kg, 전형적으로 환자당 0.01 내지 10 mg이며, 경구 투여에 적합한 1일 용량은 대략 0.01 내지 100 mg/kg이다.

본 발명은 활성 성분으로서 본 발명의 결정질 형태를 포함하는 무수 제약 조성물 및 투여 형태를 추가로 제공하며, 이는 물이 특정 화합물의 분해를 용이하게 할 수 있기 때문이다.

본 발명의 무수 제약 조성물 및 투여 형태는 무수 성분 또는 저수분 함유 성분 및 저수분 또는 저습 조건을 사용하여 제조할 수 있다. 무수 제약 조성물은 그의 무수 성질이 유지되도록 제조 및 저장될 수 있다. 따라서, 무수 조성물을 물에 대한 노출을 방지하기 위해 공지된 물질을 사용하여 포장하여 이들이 적합한 규정 키트 내에 포함될 수 있도록 한다. 적합한 포장의 예는 기밀 호일, 플라스틱, 단위 투여 용기 (예를 들어, 바이알), 블리스터 팩 및 스트립 팩을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

본 발명은 활성 성분으로서의 본 발명의 결정질 형태가 분해될 비율을 감소시키는 하나 이상의 작용제를 포함하는 제약 조성물 및 투여 형태를 추가로 제공한다. 본원에서 "안정화제"로 지칭되는 이러한 작용제는 항산화제, 예컨대 아스코르브산, pH 완충제 또는 염 완충제 등을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

본 발명의 결정질 형태는 하나 이상의 다른 치료제와 동시에, 또는 그의 전에 또는 후에 투여될 수 있다. 본 발명의 결정질 형태는 동일하거나 상이한 투여 경로에 의해 개별적으로 투여되거나, 또는 다른 작용제와 동일한 제약 조성물 내에서 함께 투여될 수 있다.

한 실시양태에서, 본 발명은 요법에서의 동시, 개별 또는 순차적 사용을 위한 조합 제제로서 본 발명의 결정질 형태 및 하나 이상의 다른 치료제를 포함하는 생성물을 제공한다. 한 실시양태에서, 요법은 상피 나트륨 채널의 차단에 의해 매개되는 질환 또는 상태의 치료이다. 조합 제제로서 제공되는 생성물은, 동일한 제약 조성물로 본 발명의 결정질 형태 및 다른 치료제(들)를 함께 포함하는 조성물, 또는 개별 형태로, 예를 들어 키트의 형태로 본 발명의 결정질 형태 및 다른 치료제(들)를 포함하는 조성물을 포함한다.

한 실시양태에서, 본 발명은 본 발명의 결정질 형태 및 또 다른 치료제(들)를 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 임의로, 제약 조성물은 상기 기재된 바와 같은 제약상 허용되는 부형제를 포함할 수 있다.

한 실시양태에서, 본 발명은, 둘 이상의 개별 제약 조성물을 포함하며 이들 중 하나 이상이 본 발명의 결정질 형태를 함유하는 키트를 제공한다. 한 실시양태에서, 키트는 상기 조성물을 개별적으로 보유하기 위한 수단, 예컨대 용기, 분할된 병 또는 분할된 호일 패킷을 포함한다. 이러한 키트의 예는 정제, 캡슐 등의 포장에 전형적으로 사용되는 블리스터 팩이다.

본 발명의 키트는 상이한 투여 형태, 예를 들어 경구 및 비경구로 투여하기 위해, 개별 조성물을 상이한 투여 간격으로 투여하기 위해, 또는 개별 조성물을 서로에 대해 적정하기 위해 사용될 수 있다. 편의를 도모하기 위해, 본 발명의 키트는 전형적으로 투여 지침서를 포함한다.

특히, 본 발명의 결정질 형태는 인간 혈장 중에서 유리한 안정성 프로파일을 나타낸다. 인간 혈장 중에서 유리한 안정성 프로파일을 나타내는 화합물을 제공함에 있어, 본 발명은 상피 나트륨 채널 (ENaC)을 개선된 약동학으로 효과적으로 차단하는 화합물을 제공한다.

본 발명의 조합 요법에서, 본 발명의 결정질 형태 및 다른 치료제는 동일하거나 상이한 제조업체에 의해 제조되고/거나 제제화될 수 있다. 더욱이, 본 발명의 결정질 형태 및 다른 치료제는 (i) 의사에게 조합 생성물로 배포되기 전에 (예를 들어, 본 발명의 결정질 형태 및 다른 치료제를 포함하는 키트의 경우); (ii) 투여 직전에 의사 자신에 의해 (또는 의사의 지시 하에); (iii) 예를 들어, 본 발명의 결정질 형태 및 다른 치료제의 순차적 투여 동안에 환자 자신에서, 조합 요법으로 합해질 수 있다.

따라서, 본 발명은 의약이 또 다른 치료제와 함께 투여하기 위해 제조되는 것인, 상피 나트륨 채널의 차단에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하기 위한 본 발명의 결정질 형태의 용도를 제공한다. 본 발명은 또한 상피 나트륨 채널의 차단에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하기 위한 또 다른 치료제의 용도를 제공하며, 의약은 본 발명의 결정질 형태로 투여된다.

본 발명은 또한 상피 나트륨 채널의 차단에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하는 방법에 사용하기 위한 본 발명의 결정질 형태를 제공하며, 여기서 본 발명의 결정질 형태는 또 다른 치료제를 함께 투여하기 위해 제조된다. 본 발명은 또한 상피 나트륨 채널의 차단에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하는 방법에 사용하기 위한 또 다른 치료제를 제공하며, 여기서 다른 치료제는 본 발명의 결정질 형태와 함께 투여하기 위해 제조된다.

본 발명은 또한 상피 나트륨 채널의 차단에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하기 위한 본 발명의 결정질 형태의 용도를 제공하며, 여기서 환자는 이전에 (예를 들어, 24시간 내에) 또 다른 치료제로 치료되었다. 본 발명은 또한 상피 나트륨 채널의 차단에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하기 위한 또 다른 치료제의 용도를 제공하며, 여기서 환자는 이전에 (예를 들어, 24시간 내에) 본 발명의 결정질 형태로 치료되었다.

한 실시양태에서, 다른 치료제는 특히 상기 본원에 언급된 것들과 같은 낭성 섬유증 또는 폐쇄성 또는 염증성 기도 질환의 치료에서, 예를 들어 이러한 약물의 치료 활성의 강화제로서 또는 이러한 약물의 요구 투여량 또는 잠재적 부작용을 감소시키는 수단으로서 항염증, 기관지확장, 항히스타민, 충혈제거 및 진해 약물 물질로부터 선택된다.

따라서, 본 발명은 추가 측면으로서 본 발명의 상피 나트륨 채널 차단제 삼투제 (고장성 염수, 덱스트란, 만니톨, 크실리톨), CFTR 기능의 조절제, 야생형 및 돌연변이형 둘 다 (교정제 및 강화제), 예를 들어 WO2007/021982, WO2006/099256, WO2006/127588, WO2004/080972, WO2005/026137, WO2005/035514, WO2005/075435, WO2004/111014, WO2006/101740, WO2004/110352, WO2005/120497 및 US2005/0176761에 기재된 것들, 항염증, 기관지확장, 항히스타민, 진해, 항생제 또는 DNase 약물 물질과의 조합물을 포함하며, 상기 상피 나트륨 채널 차단제 및 상기 약물 물질은 동일하거나 상이한 제약 조성물 중에 있다.

CFTR 기능의 적합한 조절제는 CFTR 강화제, 특히 하기 화학식의 화합물 VX-770을 포함한다.

적합한 항생제는 마크롤리드 항생제, 예를 들어 토브라마이신 (토비(TOBI)™)을 포함한다.

적합한 DNase 약물 물질은 DNA를 선택적으로 절단하는 재조합 인간 데옥시리보뉴클레아제 I (rhDNase)의 고도로 정제된 용액인 도르나제 알파 (풀모자임(Pulmozyme)™)를 포함한다. 도르나제 알파는 낭성 섬유증을 치료하는데 사용된다.

상피 나트륨 채널 차단제 항염증 약물과의 다른 유용한 조합물은 케모카인 수용체, 예를 들어 CCR-1, CCR-2, CCR-3, CCR-4, CCR-5, CCR-6, CCR-7, CCR-8, CCR-9 및 CCR10, CXCR1, CXCR2, CXCR3, CXCR4, CXCR5의 길항제, 특히 CCR-5 길항제, 예컨대 쉐링-플라우(Schering-Plough) 길항제인 SC-351125, SCH-55700 및 SCH-D; 다케다(Takeda) 길항제, 예컨대 N-[[4-[[[6,7-디히드로-2-(4-메틸-페닐)-5H-벤조-시클로헵텐-8-일]카르보닐]아미노]페닐]-메틸]테트라히드로-N,N-디메틸-2H-피란-4-아미늄 클로라이드 (TAK-770); 및 USP6,166,037 (특히 청구항 18 및 19), WO00/66558 (특히 청구항 8), WO00/66559 (특히 청구항 9), WO04/018425 및 WO04/026873에 기재된 CCR-5 길항제와의 조합물이다.

적합한 항염증 약물은 스테로이드, 특히 글루코코르티코스테로이드, 예컨대 부데소니드, 베클라메타손 디프로피오네이트, 플루티카손 프로피오네이트, 시클레소니드 또는 모메타손 푸로에이트, 또는 WO 02/88167, WO 02/12266, WO 02/100879, WO 02/00679 (특히, 실시예 3, 11, 14, 17, 19, 26, 34, 37, 39, 51, 60, 67, 72, 73, 90, 99 및 101의 스테로이드), WO 03/35668, WO 03/48181, WO 03/62259, WO 03/64445, WO 03/72592, WO 04/39827 및 WO 04/66920에 기재된 스테로이드; 비-스테로이드성 글루코코르티코이드 수용체 효능제, 예컨대 DE 10261874, WO 00/00531, WO 02/10143, WO 03/82280, WO 03/82787, WO 03/86294, WO 03/104195, WO 03/101932, WO 04/05229, WO 04/18429, WO 04/19935 및 WO 04/26248에 기재된 것들; LTD4 길항제, 예컨대 몬테루카스트 및 자피르루카스트; PDE4 억제제, 예컨대 실로밀라스트 (아리플로(Ariflo)® 글락소스미스클라인(GlaxoSmithKline)), 로플루밀라스트 (빅 굴덴(Byk Gulden)), V-11294A (나프(Napp)), BAY19-8004 (바이엘(Bayer)), SCH-351591 (쉐링-플라우), 아로필린 (알미랄 프로데스파르마(Almirall Prodesfarma)), PD189659/PD168787 (파르케-데이비스(Parke-Davis)), AWD-12-281 (아스타 메디카(Asta Medica)), CDC-801 (셀진(Celgene)), SelCID(TM) CC-10004 (셀진), VM554/UM565 (베르날리스(Vernalis)), T-440 (다나베(Tanabe)), KW-4490 (교와 핫코 고교(Kyowa Hakko Kogyo)), 및 WO 92/19594, WO 93/19749, WO 93/19750, WO 93/19751, WO 98/18796, WO 99/16766, WO 01/13953, WO 03/104204, WO 03/104205, WO 03/39544, WO 04/000814, WO 04/000839, WO 04/005258, WO 04/018450, WO 04/018451, WO 04/018457, WO 04/018465, WO 04/018431, WO 04/018449, WO 04/018450, WO 04/018451, WO 04/018457, WO 04/018465, WO 04/019944, WO 04/019945, WO 04/045607 및 WO 04/037805에 개시된 것들; 아데노신 A2B 수용체 길항제, 예컨대 WO 02/42298에 기재된 것들; 및 베타-2 아드레날린수용체 효능제, 예컨대 알부테롤 (살부타몰), 메타프로테레놀, 테르부탈린, 살메테롤 페노테롤, 프로카테롤, 특히 포르모테롤, 카르모테롤 및 그의 제약상 허용되는 염, 및 WO0075114의 화학식 I의 화합물 (유리 형태 또는 염 형태 또는 용매화물 형태) (상기 문헌은 본원에 참조로 포함됨), 바람직하게는 그의 실시예의 화합물, 특히 인다카테롤에 상응하는 하기 화학식의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염:

,

뿐만 아니라 WO 04/16601의 화학식 I의 화합물 (유리 형태 또는 염 형태 또는 용매화물 형태), 및 또한 EP 1440966, JP 05025045, WO 93/18007, WO 99/64035, USP 2002/0055651, WO 01/42193, WO 01/83462, WO 02/66422, WO 02/70490, WO 02/76933, WO 03/24439, WO 03/42160, WO 03/42164, WO 03/72539, WO 03/91204, WO 03/99764, WO 04/16578, WO 04/22547, WO 04/32921, WO 04/33412, WO 04/37768, WO 04/37773, WO 04/37807, WO 04/39762, WO 04/39766, WO 04/45618, WO 04/46083, WO 04/80964, WO 04/108765 및 WO 04/108676의 화합물을 포함한다.

적합한 기관지확장 약물은 항콜린제 또는 항무스카린제, 특히 이프라트로피움 브로마이드, 옥시트로피움 브로마이드, 티오트로피움 염 및 CHF 4226 (키에시(Chiesi)) 및 글리코피롤레이트, 및 또한 EP 424021, USP 3,714,357, USP 5,171,744, WO 01/04118, WO 02/00652, WO 02/51841, WO 02/53564, WO 03/00840, WO 03/33495, WO 03/53966, WO 03/87094, WO 04/018422 및 WO 04/05285에 기재된 것들을 포함한다.

적합한 이중 항염증 및 기관지확장 약물은 이중 베타-2 아드레날린수용체 효능제/무스카린성 길항제, 예컨대 USP 2004/0167167, WO 04/74246 및 WO 04/74812에 개시된 것들을 포함한다.

적합한 항히스타민 약물 물질은 세티리진 히드로클로라이드, 아세트아미노펜, 클레마스틴 푸마레이트, 프로메타진, 로라티딘, 데스로라티딘, 디펜히드라민 및 펙소페나딘 히드로클로라이드, 악티바스틴, 아스테미졸, 아젤라스틴, 에바스틴, 에피나스틴, 미졸라스틴 및 테페나딘, 뿐만 아니라 JP 2004107299, WO 03/099807 및 WO 04/026841에 개시된 것들을 포함한다.

본원에 사용된 용어 "제약상 허용되는 담체"는 당업자에게 공지된 임의의 모든 용매, 분산 매질, 코팅, 계면활성제, 항산화제, 보존제 (예를 들어, 항박테리아제, 항진균제), 등장화제, 흡수 지연제, 염, 보존제, 약물, 약물 안정화제, 결합제, 부형제, 붕해제, 윤활제, 감미제, 향미제, 염료 등, 및 이들의 조합을 포함한다 (예를 들어, 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed. Mack Printing Company, 1990, pp. 1289- 1329] 참조). 임의의 통상의 담체가 활성 성분과 상용적이지 않은 경우를 제외하고는, 치료 또는 제약 조성물에서의 사용이 고려된다.

용어 본 발명의 결정질 형태의 "치료 유효량"은 대상체의 생물학적 또는 의학적 반응, 예를 들어 효소 또는 단백질 활성의 감소 또는 억제, 또는 증상의 완화, 상태의 경감, 질환 진행의 둔화 또는 지연, 또는 질환의 예방 등을 도출할 본 발명의 형태의 양을 지칭한다. 한 비제한적 실시양태에서, 용어 "치료 유효량"은, 대상체에게 투여되는 경우에, (1) (i) 상피 나트륨 채널에 의해 매개되거나, 또는 (ii) 상피 나트륨 채널 활성과 연관되거나, 또는 (iii) 상피 나트륨 채널의 활성 (정상적 또는 비정상적)을 특징으로 하는 상태 또는 장애 또는 질환을 적어도 부분적으로 경감, 억제, 예방 및/또는 완화시키는데 효과적이거나; 또는 (2) 상피 나트륨 채널의 활성을 감소시키거나 억제하는데 효과적인 본 발명의 결정질 형태의 양을 지칭한다. 또 다른 비제한적 실시양태에서, 용어 "치료 유효량"은 세포 또는 조직 또는 비-세포 생물학적 물질 또는 배지에 투여하는 경우에 상피 나트륨 채널의 활성을 적어도 부분적으로 감소시키거나 억제하는데 효과적인 본 발명의 결정질 형태의 양을 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "대상체"는 동물을 지칭한다. 전형적으로, 동물은 포유동물이다. 대상체는 또한, 예를 들어 영장류 (예를 들어, 인간), 소, 양, 염소, 말, 개, 고양이, 토끼, 래트, 마우스, 어류, 조류 등을 지칭한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 영장류이다. 또 다른 실시양태에서, 대상체는 인간이다.

본원에 사용된 용어 "억제하다", "억제" 또는 "억제하는"은 주어진 상태, 증상 또는 장애 또는 질환의 감소 또는 저해, 또는 생물학적 활성 또는 과정의 기저 활성에서의 유의한 감소를 지칭한다.

본원에 사용된 임의의 질환 또는 장애에 대한 용어 "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는, 한 실시양태에서, 질환 또는 장애의 개선 (즉, 질환 또는 그의 하나 이상의 임상적 증상의 발달의 둔화 또는 정지 또는 감소)을 지칭한다. 또 다른 실시양태에서, "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 하나 이상의 물리적 파라미터 (환자에 의해 인식가능하지 않을 수 있는 것들 포함)의 완화 또는 개선을 지칭한다. 또 다른 실시양태에서, "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 질환 또는 장애를 물리적으로 (예를 들어, 인식가능한 증상의 안정화), 생리학적으로 (예를 들어, 물리적 파라미터의 안정화) 또는 둘 다의 방식으로 조절하는 것을 지칭한다. 또 다른 실시양태에서, "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 질환 또는 장애의 발병 또는 발달 또는 진행의 예방 또는 지연을 지칭한다.

본원에 사용된 바와 같이, 대상체가 치료로부터 생물학적으로, 의학적으로 또는 삶의 질에 있어 유익할 경우에, 상기 대상체는 이러한 치료를 "필요로 한다".

본원에 사용된 바와 같이, 본 발명의 문맥에서 (특히, 특허청구범위의 문맥에서) 사용된 단수 용어 및 유사한 용어들은, 본원에 달리 나타내거나 또는 문맥상 명백히 모순되지 않는 한, 단수형 및 복수형 둘 다를 포함하는 것으로 해석될 것이다.

실시예

일반적 조건:

질량 스펙트럼을 전기분무 이온화를 사용한 LCMS 시스템 상에서 실행하였다. 이들은 애질런트(Agilent) 1100 HPLC/마이크로매스 플랫폼(Micromass Platform) 질량 분광측정계 조합, 또는 애질런트 1200 HPLC/애질런트 6130 사중극자 질량 분광측정계 조합, 또는 SQD 질량 분광측정계가 구비된 워터스 액퀴티(Waters Acquity) UPLC였다. [M+H]⁺는 단일-동위원소 분자량을 지칭한다.

NMR 스펙트럼은 ICON-NMR을 사용하는 개방 접근 브루커 아반스(Bruker AVANCE) 400 NMR 분광계 상에서 실행하였다. 스펙트럼을 298K에서 측정하고, 용매 피크를 사용하여 참조하였다. 일부 양성자는 그의 교환가능한 공명의 매우 넓은 성질로 인해 직접적으로 관찰되지 않았다.

달리 나타내지 않는 한, 분석 HPLC 조건은 다음과 같다:

방법 (i)

칼럼 애질런트 조르박스(Zorbax) SB-C18 (신속 분해) 30x2.1 mm, 3.5 A

칼럼 온도 30℃

용리액 B: H₂O, C: 아세토니트릴, 둘 다 0.1% 포름산 함유

유량 0.8 mL/min

구배 1 min 5% C; 5% → 95% C (5 min), 3.00 min 95% C

방법 (ii)

칼럼 SB-C18 50x4.6 mm, 1.8 M

칼럼 온도 30℃

용리액 A: H₂O, B: 아세토니트릴, 둘 다 0.1% 포름산 함유

유량 1 mL/min

구배 1 min 2% B; 2% → 70% B (4 min), 70% → 90% B (0.1 min), 4.9 min 95%B

방법 2minLC_v003

칼럼 워터스 BEH C18 50x2.1 mm, 1.7 m

칼럼 온도 50℃

용리액 A: H₂O, B: 아세토니트릴, 둘 다 0.1% TFA 함유

유량: 0.8 mL/min

구배 0.20 min 5% B; 5% → 95% B (1.30 min), 0.25 min 95% B

약어:

Br 넓음

d 이중선

DCM 디클로로메탄

DSC 시차 주사 열량측정

DMF N,N-디메틸포름아미드

DMI 1,3-디메틸-2-이미다졸리디논

DMSO 디메틸술폭시드

EDCI N-(3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸-카르보디이미드

EtOAc 에틸 아세테이트

h 시간

HOBt 1-히드록시벤조트리아졸

HPLC 고압 액체 크로마토그래피

LC-MS 액체 크로마토그래피 및 질량 분광측정법

MeOH 메탄올

MS 질량 분광측정법

m 다중선

2-meTHF 2-메틸테트라히드로푸란

min 분

ml 밀리리터

m/m 질량 대 질량 비

m/z 질량 대 전하 비

NMR 핵 자기 공명

iPrOH 이소프로판올

ppm 백만분율

PS 지지된 중합체

PEAX PE-음이온 교환 (예를 들어, 바이오타지(Biotage)로부터의 이솔루트(Isolute)® PE-AX 칼럼)

Rt 체류 시간

s 단일선

SCX-2 강한 양이온 교환 (예를 들어, 바이오타지로부터의 이솔루트® SCX-2 칼럼)

t 삼중선

TEA 트리에틸아민

TFA 트리플루오로아세트산

THF 테트라히드로푸란

제조예 1: 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르

표제 화합물은 방법 A 또는 B에 의해 제조될 수 있다.

방법 A:

THF (50 ml) 중 3-(2-디프로필카르바모일메톡시카르보닐-에틸술파모일)-벤조산 (제조예 2와 같이 제조될 수 있음; 6.1 g, 12.60 mmol)의 교반 용액에 순차적으로 물 (25 ml), N-메틸모르폴린 (7 ml, 63 mmol) 및 HOBt 수화물 (2.9 g, 18.9 mmol)을 첨가하였다. 내부 온도를 ≤ 20℃로 유지하였다. 3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르복실산[1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데스-(2E)-일리덴]-아미드 히드로클로라이드 (WO09/074575, 실시예 38, 페이지 123) (65% 순도, 6.3 g, 12.6 mmol)를 첨가하고, 투명한 용액이 형성될 때까지 교반하였다. EDCI.HCl (3.6 g, 18.9 mmol)을 첨가하고, 반응물을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 2-MeTHF (200 ml) 및 2% 수성 Na₂CO₃ (150 ml)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 층을 분리하고, 수성 상을 추가의 2-MeTHF (100 ml)로 세척하였다. 합한 유기 층을 2% 수성 Na₂CO₃ (200 ml) 및 물 (2 x 200 ml)로 세척하였다. 아세토니트릴 (100 ml)을 첨가하고, 용액을 30℃에서 70 ml의 부피로 농축시켰다. 아세토니트릴 (300 ml)을 첨가하고, 용액을 다시 30℃에서 150 ml의 부피로 농축시켰다. 용액을 50℃로 가열하고, 말레산 (1.62 g)을 생성된 용액에 첨가하였다. 회백색 침전물이 즉시 형성되었고, 온도를 1시간에 걸쳐 실온으로 냉각시켰다. 고체를 여과를 통해 수집하여 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르를 말레에이트 염으로서 수득하고; DCM (200 ml) 및 2% 수성 Na₂CO₃ (200 ml)을 첨가하고, 고체가 완전히 용해될 때까지 교반하였다. 유기 층을 분리하고, 물 (2 x 100 ml)로 세척하고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다.

방법 B:

THF (50 ml) 중 3-(2-디프로필카르바모일메톡시카르보닐-에틸술파모일)-벤조산 (Int. AA) (6.1 g, 12.60 mmol)의 교반 용액에 순차적으로 물 (25 ml), N-메틸모르폴린 (7 ml, 63 mmol) 및 HOBt 수화물 (2.9 g, 18.9 mmol)을 첨가하였다. 내부 온도를 ≤ 20℃로 유지하였다. 3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르복실산 [1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데스-(2E)-일리덴]-아미드 히드로클로라이드 (WO09074575, 실시예 38, 페이지 123) (65% 순도, 6.3 g, 12.6 mmol)를 첨가하고, 투명한 용액이 형성될 때까지 교반하였다. EDCI.HCl (3.6 g, 18.9 mmol)을 첨가하고, 반응물을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 2-MeTHF (200 ml) 및 2% 수성 Na₂CO₃ (150 ml)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 층을 분리하고, 수성 상을 추가의 2-MeTHF (100 ml)로 세척하였다. 합한 유기 층을 2% 수성 Na₂CO₃ (200 ml) 및 물 (2 x 200 ml)로 세척하였다. 아세토니트릴 (100 ml)을 첨가하고, 용액을 30℃에서 70 ml의 부피로 농축시켰다. 아세토니트릴 (300 ml)을 첨가하고, 용액을 다시 30℃에서 150 ml의 부피로 농축시켰다. 용액을 50℃로 가열하고, 말레산 (1.62 g)을 생성된 용액에 첨가하였다. 회백색 침전물이 즉시 형성되었고, 온도를 1시간에 걸쳐 실온으로 냉각되도록 하였다. 고체를 여과에 의해 수집하여 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르를 말레에이트 염으로서 수득하고; DCM (200 ml) 및 2% 수성 Na₂CO₃ (200 ml)을 첨가하고, 고체가 완전히 용해될 때까지 교반하였다. 유기 층을 분리하고, 물 (2 x 100 ml)로 세척하고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다.

제조예 2: 3-(2-디프로필카르바모일메톡시카르보닐-에틸술파모일)-벤조산

표제 화합물은 방법 A 또는 B에 의해 제조될 수 있다:

방법 A:

단계 1: 3-벤질옥시카르보닐아미노-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르

DMF (150 ml) 중 벤질옥시카르보닐아미노-프로피온산 (22.3 g, 99.9 mmol)의 용액에 탄산칼륨 (19.3 g, 139.9 mmol)을 첨가하였다. 2-클로로-N,N-디프로필-아세트아미드 (17.7 g, 99.9 mmol)를 30분에 걸쳐 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃로 가열하고, 2.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하고, 물 (500 ml)로 희석하고, 이소프로필 아세테이트 (총 500 ml)로 추출하였다. 합한 유기 상을 물 (3 x 200 ml)로 세척하여 이소프로필 아세테이트 중 3-벤질옥시카르보닐아미노-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르의 용액을 수득하였으며, 이를 추가로 단리하지 않았다.

단계 2: 3-아미노-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 트리플루오로아세테이트

이소프로필 아세테이트 (용액의 총 질량 129.9 g 중 33.2 g, 91.0 mmol) 중 3-벤질옥시카르보닐아미노-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르의 용액을 내부 온도를 20℃로 유지하면서 TFA (7.05 ml, 92.0 mmol)에 이어서 10% Pd/C (3.3g, 50% 습윤)로 처리하고, H₂ (3 atm) 분위기 하에 3.5시간 동안 교반하여 3-아미노-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 트리플루오로아세테이트를 수득하였다. 용액을 직접 후속 반응에 단리 없이 사용하였다.

단계 3: 3-(2-디프로필카르바모일메톡시카르보닐-에틸술파모일)-벤조산 벤질 에스테르

이소프로필 아세테이트 중 3-아미노-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 트리플루오로아세테이트 (25.4 g 73.8 mmol)의 용액을 0℃로 냉각시키고, N-메틸모르폴린 (26.3 g, 221.5 mmol), 물 (40 ml) 및 DMAP (90.4 mg, 0.74 mmol)로 처리하였다. 이소프로필 아세테이트 (44 ml) 중 3-클로로술포닐-벤조산 벤질 에스테르 (24.1 g, 77.5 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 2시간 동안 0-5℃에서 교반하였다. 층을 분리하고, 유기 상을 포화 수성 NaHCO₃ (3 x 26 ml)으로 세척하고, 물 (10 ml)로 희석하고, pH를 1N HCl 용액을 사용하여 6으로 조정하고, 염수로 세척하였다. 생성된 용액을 농축시켜 이소프로필 아세테이트 중 3-(2-디프로필카르바모일메톡시카르보닐-에틸술파모일)-벤조산 벤질 에스테르의 용액을 수득하였으며, 이를 추가 반응에 단리 없이 사용하였다.

단계 4: 3-(2-디프로필카르바모일메톡시카르보닐-에틸술파모일)-벤조산의 합성

이소프로필 아세테이트 (82 ml) 중 3-(2-디프로필카르바모일메톡시카르보닐-에틸술파모일)-벤조산 벤질 에스테르 (5 g, 33.25 mmol)의 용액을 10% Pd/C (0.84 g, 50% 습윤)로 처리하고, H₂ (3 atm) 하에 밤새 교반하였다. 촉매를 여과에 의해 제거하였다. 여과물에 10% Pd/C (1.68 g, 50% 습윤)를 첨가하고, 반응물을 H₂ (3 atm) 하에 18시간 동안 교반하였다. 촉매를 여과에 의해 제거하고, 추가의 10% Pd/C (1.68 g, 50 % 습윤)를 첨가하고, 반응물을 H₂ (1 atm) 하에 18시간 동안 교반하였다. 촉매를 여과에 의해 제거하고, 이소프로필 아세테이트 (20 ml)로 세척하였다. 합한 여과물을 진공 하에 농축시키고, 헵탄을 형성된 용액에 첨가하고, 실온에서 2시간 동안에 이어서 -2℃에서 4시간 동안 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하고, 진공 하에 40℃에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다;

방법 B:

단계 1: 3-tert-부톡시카르보닐아미노-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르

DMF (200 ml) 중 Boc-베타-Ala-OH (40.0 g, 211 mmol)의 교반 현탁액에 탄산칼륨 (40.0 g, 289 mmol)을 60℃에서 N₂ 하에 첨가하였다. 이 혼합물에 DMF (75 ml) 중 2-클로로-N,N-디프로필-아세트아미드 (36.7 g, 207 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 밤새 교반되도록 하였다. 반응물을 실온으로 냉각되도록 하고, DCM (400 ml)에 이어서 물 (500 ml)로 희석하였다. 유기 층을 분리하고, 염수 (200 ml)로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 연황색 오일을 수득하였다. 오일에 n-헵탄 (500ml) (DMF의 공비혼합물)을 첨가하고, 이를 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다;

단계 2: 3-아미노-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르

건조 디옥산 중 3-tert-부톡시카르보닐아미노-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 (단계 1)(36.5 g, 110 mmol)의 냉각된 교반 용액에 디옥산 중 4N HCl (18.12 ml, 597 mmol)을 N₂ 하에 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온으로 가온되도록 하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하고, 조 생성물을 EtOAc (500 ml) 중에 현탁시키고, 1시간 동안 초음파처리하였다. 생성된 백색 침전물을 여과에 의해 단리시키고, 진공 하에 40℃에서 1시간 동안 건조시켜 연황색 고체를 수득하였다. EtOAc로부터 재결정화하여 표제 화합물을 수득하였다;

단계 3: 3-(2-디프로필카르바모일메톡시카르보닐-에틸술파모일)-벤조산

DCM (240 ml) 중 3-아미노-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 (단계 2) (20.1 g, 75 mmol)의 교반 용액에 DMAP (0.46 g, 3.76 mmol)에 이어서 TEA (38.8 ml, 278 mmol)을 0℃에서 N₂ 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 DCM (200 ml) 중 3-클로로술포닐벤조산의 용액 (16.6 g, 75 mmol)으로 처리하였다. 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반되도록 하고, 이어서 실온으로 1시간 동안 가온하였다. 물 (200 ml)을 첨가하고, pH를 1N HCl (100 ml)을 사용하여 조정하였다. 유기 층을 분리하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. MeCN/물 (1% HCl)로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물을 수득하였다;

실시예 1: 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트 염: 결정질 형태 A의 제조

2.5 g의 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 (제조예 1과 같이 제조될 수 있음; 3.47 mmol)를 50℃에서 25 mL 아세토니트릴 및 1.5 mL 물 중에 용해시켰다. 409 mg 숙신산 (3.47 mmol)을 첨가하였다. 산을 즉시 용해시키고, 투명한 용액을 30분에 걸쳐 실온으로 냉각시켰다. 대략 30℃에서 결정화가 일어났다. 이어서, 슬러리를 실온에서 대략 16시간 동안 교반하였다. 결정을 여과에 의해 수집하였다. 필터 케이크를 여러 번으로 나누어 9 ml 아세토니트릴/물 95:5 v/v로 세척하고, 50℃ 및 약 10 mbar에서 16시간 동안 건조시켰다.

실시예 2: 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트 염: 결정질 형태 A의 제조

숙신산 (0.50 g, 4.23 mmol) 및 아세톤 (20 g)을 포함하는 혼합물을 투명한 용액이 형성될 때까지 45℃로 가열하고, 이어서 여과하였다 (0.2 μm PTFE 필터).

제2 반응 용기에서, 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 (제조예 1, 방법 B)(3.00 g, 4.16 mmol) 및 아세톤 (30 g)을 투명한 용액이 형성될 때까지 45℃로 가열하고, 이어서 여과하였다 (0.2 μm PTFE 필터).

아세톤 (20 ml) 중 숙신산 (0.50 g, 4.23 mmol)의 용액을 45℃에서 1시간 동안 가열하고, 아세톤 (1.62 g의 용액) 중 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐 아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르의 용액의 일부로 10분에 걸쳐 처리하였다. 생성된 혼합물을 아세톤 (300 mg) 중 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트 염 (실시예 1의 제조 방법을 사용하여 제조됨, 20 mg)의 시드 결정의 현탁액으로 처리하고, 45℃에서 30분 동안 교반하였다. 아세톤 (31.38 g) 중 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐 아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일 메틸 에스테르의 나머지 용액을 혼합물에 5시간에 걸쳐 첨가하고, 45℃에서 1시간 동안 계속 가열하였다. 현탁액을 1시간에 걸쳐 25℃로 냉각시키고, 추가 1시간 동안 교반하였다. 현탁액을 유리 프릿으로 여과하고, 필터 케이크를 아세톤 (2 x 5 g)으로 세척하였다. 필터 케이크를 50℃에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다;

(주의: 2개의 교환가능한 숙시네이트 양성자 및 3-4 산성 NH 공명은 일부 교환가능한 공명의 매우 넓은 성질로 인해 직접 관찰되지 않았다; 융점 T_m (DSC) = 149 ℃.

실시예 3: 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트 염: 결정질 형태 A의 제조

3 g의 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트 염 (실시예 1 또는 2와 같이 제조될 수 있음)을 앵커 교반기 (150 rpm), 응축기, 투입 유닛 및 탁도 탐침이 장착된 100 ml 반응기에 충전하였다. 20 g의 아세톤/물 혼합물 (92.5/7.5 m/m)을 첨가하고, 전체를 50℃로 가열하고, 모두 용해될 때까지 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 45℃로 냉각시켰다. 300 mg 아세톤 중 현탁된 30 mg의 시드 결정 (실시예 1 또는 2에 제시된 바와 같이 제조될 수 있음)을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 1시간에 걸쳐 25℃로 냉각시켰다. 전체를 3.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 28 ml EtOAc를 2시간에 걸쳐 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간에 걸쳐 0℃로 추가로 냉각시키고, 이어서 전체를 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 유리 프릿을 통해 여과한 다음, 수득된 고체를 5 ml 아세톤으로 2회 세척하고, 24시간 동안 40℃ 및 1 mbar에서 건조시켰다.

실시예 4: 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트 염: 결정질 형태 B의 제조

3 g의 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 (실시예 1과 같이 제조됨)를 앵커 교반기 (150 rpm)가 장착된 100 mL 유리 반응기 중에서 50℃에서 22.7 g의 아세톤 중에 용해시켰다. 5 mL의 숙신산 용액 (아세톤 중 2.94 중량%)을 반응기에 첨가하였다. 10 mg의 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트 염, 결정질 형태 A (실시예 1 또는 2와 같이 제조될 수 있음)를 0.2 g 아세톤 중에 현탁시키고, 초음파처리하고, 반응기에 첨가하였다. 추가의 40 mL의 숙신산 용액 (아세톤 중 2.94 중량%)을 반응기에 20시간에 걸쳐 천천히 첨가하였다. 그 후, 혼합물을 20℃로 냉각시킨 다음, 19시간 동안 추가로 교반하였다. 생성된 현탁액을 여과하고, 필터 케이크를 실온에서 10 g 아세톤으로 2회 세척하였다.

실시예 5: 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트 염: 결정질 형태 B의 제조

3 g의 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 (제조예 1과 같이 제조될 수 있음) 및 0.5 g 숙신산을 50℃에서 앵커 교반기 (150 rpm)가 장착된 100 mL 유리 반응기 중에서 28.5g 아세톤 및 1.5 g 물의 혼합물 중에 용해시켰다. 그 후, 용액을 20℃로 냉각시켰다. 7 mg의 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트 염, 결정질 형태 A (실시예 1 또는 2와 같이 제조될 수 있음)를 0.18 g 아세톤/물 95:5 (v/v) 중에 현탁시키고, 초음파처리하고, 반응기에 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 15시간 동안 교반하고, 이어서 10분 내에 0℃로 냉각시켰다. 생성된 현탁액을 여과하고, 필터 케이크를 10 g 아세톤/물 95/5 (v/v)로 실온에서 세척하였다.

실시예 6: 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트 염: 결정질 형태 B의 제조

0.536 g의 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 (제조예 1과 같이 제조될 수 있음) 및 0.12 g 숙신산을 50℃에서 자기 교반 유리 바이알 중에서 15.25 g 2-프로판올 중에 용해시켰다. 용액을 20℃로 냉각시킨 다음, 이 온도에서 밤새 교반하였다. 생성된 현탁액을 여과하였다.

실시예 7: 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트 염: 결정질 형태 B의 제조

0.535 g의 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 (제조예 1과 같이 제조될 수 있음) 및 0.12 g 숙신산을 60℃에서 자기 교반 유리 바이알 중에서 7.27 g 메틸 에틸 케톤 중에 용해시켰다. 용액을 20℃로 냉각시킨 다음, 이 온도에서 밤새 교반하였다. 생성된 현탁액을 여과하였다.

실시예 8: 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트 염: 결정질 형태 C의 제조

3 g의 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 (제조예 1과 같이 제조될 수 있음)를 60℃에서 앵커 교반기 (150 rpm)가 장착된 100 mL 유리 반응기 중에서 80.3 g 에탄올 중에 용해시켰다. 25 mL의 숙신산 용액 (에탄올 중 2.94 중량 %)을 용액에 첨가하고, 이어서 2.5 g 물을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 30℃로 냉각시켰다. 5 mg의 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트 염의 시드 결정, 형태 A (실시예 1 또는 2의 제조를 사용하여 제조될 수 있음)를 0.1g 에탄올 중에 현탁시키고, 초음파처리하고, 반응기에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 96시간 동안 교반하였다 (150 rpm). 그 후, 결정을 여과에 의해 수집하였다. 필터 케이크를 40℃ 및 30 mbar에서 24시간 동안 건조시켰다.

실시예 9: 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트 염: 결정질 형태 C의 제조

1 g의 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 (제조예 1과 같이 제조될 수 있음) 및 0.18 g 숙신산을 50℃에서 유리 바이알 중에서 7.97 g 메탄올 중에 용해시켰다. 용액을 0℃로 냉각시킨 다음, 그 온도에서 24시간 동안 교반하였다. 그 후, 결정을 여과에 의해 수집하고, 60℃ 및 1 mbar에서 3시간 동안 건조시켰다. 형태 C의 회백색 내지 황색빛 결정을 수득하였다.

실시예 10: 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트 염: 결정질 형태 C의 제조

10.1 시드 결정의 제조:

앵커 교반기 (150 rpm), 응축기, 투입 유닛 및 탁도 탐침이 장착된 100 ml 반응기에, 6 g의 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트 염 (실시예 1 또는 2에 제시된 바와 같이 제조될 수 있음)을 27 g의 아세톤/물 혼합물 (92.5/7.5 m/m) 중에 현탁시켰다. 현탁액을 물질이 용해될 때까지 50℃로 가열하였다. 5분 동안 초음파처리 된 600 mg 아세톤 중 40 mg의 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트 염 (실시예 9에 제시된 바와 같이 제조됨)을 첨가하고, 전체를 6시간 동안 교반하였다. 76 ml의 EtOAc를 4시간에 걸쳐 첨가한 다음, 반응 혼합물을 2시간에 걸쳐 25℃로 냉각시켰다. 침전물을 여과하고, 10 ml 아세톤으로 2회 세척한 다음, 60℃에서 10 mbar 하에 밤새 건조시켰다. 이어서, 생성된 고체를 나선형 제트 밀을 사용하여 5 bar에서 마이크로화하였다.

10.2 결정질 형태 C의 제조:

3 g의 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트 염 (실시예 1 또는 2에 제시된 바와 같이 제조될 수 있음)을 앵커 교반기 (150 rpm), 응축기, 투입 유닛 및 탁도 탐침이 장착된 100 ml 반응기에 충전하였다. 29.5 g의 아세톤/물 혼합물 (92.5/7.5 m/m)을 첨가하고, 전체를 50℃로 가열하고, 모두 용해될 때까지 교반하였다. 300 mg 아세톤 중에 현탁된 90 mg의 시드 결정 (10.1 참조)을 첨가하고, 전체를 4시간 동안 교반하였다. 38 ml EtOAc를 4시간에 걸쳐 첨가한 다음, 반응 혼합물을 2시간 동안 교반하고, 이어서 2시간에 걸쳐 25℃로 냉각시켰다. 전체를 밤새 교반한 다음, 유리 프릿을 통해 여과하였다. 이어서, 수득된 고체를 5 ml 아세톤으로 2회 세척하고, 40℃ 및 10 mbar에서 24시간 동안 건조시켰다.

3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트 염의 결정질 형태의 특성화:

모든 X선 분말 회절 패턴은 반사 모드로 기록하였다.

형태 A:

a) X선 분말 회절

a1) X선 분말 회절 패턴은 CuKα 방사선 (λ = 1.5418 Å)을 사용하여 브루커™ D8 회절계 상에서 기록하였다. 이와 같이 결정된 실시예 3의 X선 회절 패턴은 도 1에 제시하고, 가장 중요한 선의 반사 선은 하기 표 1에 나타내었다. 2-세타 각도에 대한 오차 한계는 ±0.2˚이다.

<표 1>

a2) X선 분말 회절 패턴은 CuKα 방사선 (λ = 1.5418 Å)을 사용하여 브루커™ D8 회절계 상에서 기록하였다. 이와 같이 결정된 실시예 1 또는 2의 X선 회절 패턴은 도 4에 제시하고, 가장 중요한 선의 반사 선은 하기 표 2에 나타내었다. 2-세타 각도에 대한 오차 한계는 ±0.2˚이다.

<표 2>

b) 원소 분석:

수분 함량 (칼 피셔(Karl Fischer) 적정): < 0.2% m/m

<표 3>

실험 데이터는 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 및 숙신산에 의해 형성된 1:1 염에 대한 예상치에 상응한다.

c) 시차 주사 열량측정 (DSC):

DSC 트레이스는 알루미늄 팬이 장착된 퍼킨 엘머 다이아몬드 DSC 기기 (퍼킨 엘머, 유형 BO14-3018) 상에서 기록하였다; 가열 속도 20 K/min, 온도 범위: 30 내지 250℃.

도 2는 형태 A의 DSC 트레이스를 제시한다. 용융 흡열: T_개시 = 153.6℃, ΔH = 76.8 J/g.

도 5는 형태 A의 DSC 트레이스를 제시한다. 용융 흡열: T_개시 = 152.5℃, ΔH = 74.5 J/g.

c) 적외선 분광법:

도 3은 형태 A (실시예 3)의 적외선 스펙트럼을 제시하며, 감쇠 전반사 (ATR) 모드로 브루커 알파 기기 상에서 기록하였다. 측정 파라미터는 다음과 같았다: 범위 400-4000 cm^-1, 해상도 2 cm^-1, 64 스캔, 속도 7.5 kHz, 아포디제이션: 블랙맨-해리스 3-텀. 확인된 주요 피크는 1621.5 cm^-1, 1157.5 cm^-1 및 1080.7 cm^-1이다.

형태 B:

X선 분말 회절:

X선 분말 회절 패턴은 CuKα 방사선 (λ = 1.5418 Å)을 사용하여 브루커™ D8 회절계 상에서 기록하였다. 이와 같이 결정된 X선 회절 패턴은 도 6에 제시하고, 가장 중요한 선의 반사 선은 하기 표 4에 나타내었다. 2-세타 각도에 대한 오차 한계는 ±0.2˚이다.

<표 4>

형태 C:

a) X선 분말 회절:

a1) X선 분말 회절 패턴은 CuKα 방사선 (λ = 1.5418 Å)을 사용하여 브루커™ D8 회절계 상에서 기록하였다. 이와 같이 결정된 X선 회절 패턴은 도 7에 제시하고, 가장 중요한 선의 반사 선은 하기 표 5에 나타내었다. 2-세타 각도에 대한 오차 한계는 ±0.2˚이다.

<표 5>

a2) X선 분말 회절 패턴은 CuKα 방사선 (λ = 1.5418 Å)을 사용하여 브루커™ D8 회절계 상에서 기록하였다. 실시예 8 또는 9에 대한 이와 같이 결정된 X선 회절 패턴은 도 10에 제시하고, 가장 중요한 선의 반사 선은 하기 표 6에 나타내었다. 2-세타 각도에 대한 오차 한계는 ±0.2˚이다.

<표 6>

XRPD 데이터의 기록 동안 실험실 내의 온도는 21 내지 26℃ 사이에서 달라졌다.

b) 시차 주사 열량측정 (DSC):

도 8은 형태 C (실시예 10)의 DSC 트레이스를 제시한다. 용융 흡열: T_개시 = 165.7℃, ΔH = 102.2 J/g.

도 11은 형태 C (실시예 8, 9)의 DSC 트레이스를 제시한다. 용융 흡열: T_개시 = 159.7℃, ΔH = 91.8 J/g.

c) 적외선 분광법:

도 9는 형태 C (실시예 10)의 적외선 스펙트럼을 제시하고, 감쇠 전반사 (ATR) 모드로 브루커 알파 기기 상에서 기록하였다. 측정 파라미터는 다음과 같았다: 범위 400-4000 cm^-1, 해상도 2 cm^-1, 64 스캔, 속도 7.5 kHz, 아포디제이션: 블랙맨-해리스 3-텀. 확인된 주요 피크는 1626.5 cm^-1, 1155cm^-1 및 1084.7 cm^-1이다.

Claims

형태 C를 포함하는 하기 화학식의 3-(3-{2-[(E)-3,5-디아미노-6-클로로-피라진-2-카르보닐이미노]-1,3,8-트리아자-스피로[4.5]데칸-8-카르보닐}-벤젠술포닐아미노)-프로피온산 디프로필카르바모일메틸 에스테르 숙시네이트의 결정질 형태.
제1항에 있어서, 형태 C로 본질적으로 이루어진 결정질 형태.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 형태 C가 실질적으로 순수한 형태인 결정질 형태.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 21-26℃의 온도에서 7.0˚±0.2, 10.6˚±0.2, 14.3˚±0.2, 18.2˚±0.2, 18.6˚±0.2, 19.2˚±0.2, 21.2˚±0.2, 21.8˚±0.2, 24.7˚±0.2, 29.0˚±0.2 및 31.5˚±0.2의 군으로부터 선택된 4개 이상의 2-세타 값을 포함하는 X선 분말 회절 패턴을 특징으로 하는 결정질 형태.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 21-26℃의 온도에서 7.0˚±0.2, 10.6˚±0.2, 14.3˚±0.2, 18.2˚±0.2, 18.6˚±0.2, 19.2˚±0.2, 21.2˚±0.2, 21.8˚±0.2, 24.7˚±0.2, 29.0˚±0.2 및 31.5˚±0.2의 군으로부터 선택된 6개 이상의 2-세타 값을 포함하는 X선 분말 회절 패턴을 특징으로 하는 결정질 형태.
제1항에 있어서, X선 분말 회절 스펙트럼이 도 7에 제시된 X선 분말 회절 스펙트럼과 실질적으로 동일한 것인 결정질 형태.
제1항에 있어서, 시차 주사 열량측정 온도기록도가 도 8에 제시된 것과 실질적으로 동일한 것인 결정질 형태.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 따른 결정질 형태 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물.
제8항에 있어서, 하나 이상의 추가의 활성 성분과 조합된 제약 조성물.
제8항 또는 제9항에 있어서, 흡입가능한 형태인 제약 조성물.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 호흡기 질환, 예컨대 낭성 섬유증, 원발성 섬모 이상운동증, 만성 기관지염, 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 천식, 기도 감염 (급성 및 만성; 바이러스성 및 박테리아성) 및 폐 암종의 치료에 사용하기 위한 결정질 형태.
호흡기 질환, 예컨대 낭성 섬유증, 원발성 섬모 이상운동증, 만성 기관지염, 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 천식, 기도 감염 (급성 및 만성; 바이러스성 및 박테리아성) 및 폐 암종의 치료를 위한 의약의 제조에 있어서 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 따른 결정질 형태의 용도.
호흡기 질환, 예컨대 낭성 섬유증, 원발성 섬모 이상운동증, 만성 기관지염, 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 천식, 기도 감염 (급성 및 만성; 바이러스성 및 박테리아성) 및 폐 암종의 치료를 필요로 하는 환자에게 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 따른 결정질 형태의 유효량을 투여하는 것을 포함하는, 상기 질환의 치료 방법.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 따른 결정질 형태를 함유하고 그를 폐 투여에 의해 전달하도록 적합화된 흡입 장치.