KR20140120933A - 폴리머 담체 화물 복합체 및 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원을 포함하는 약학적 조성물 - Google Patents

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토마스 크람프스
숀케 보스
칼-요셉 칼렌
마리올라 포틴-믈레크제크
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큐어백 게엠바하
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Abstract

본 발명은 담체로써 이황화-가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체; 및 화물로써 적어도 하나의 핵산 분자, 및 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원으로부터 선택된 적어도 하나의 항원; 알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원; 자가면역 질병과 관련된 항원; 또는 암 또는 종양 질병과 관련된 항원, 또는 상기 항원의 각각의 절편, 변이체 및/또는 유도체를 포함하는, 폴리머 담체 화물 복합체를 포함하는(예를 들어 어쥬번트(adjuvant)로 사용을 위한) 약학적 조성물에 관한 것이다. 약학적 조성물은 상기 항원에 직접적으로 대항하여 적응 면역 반응을 효과적으로 유도한다. 본 발명은 나아가 특히 감염성 질병, 알러지, 자가면역 질병 및 종양 또는 암 질병의 치료에, 백신으로써 약학적 조성물 또는 키트의 사용뿐만 아니라, 키트를 제공한다.

Description

폴리머 담체 화물 복합체 및 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원을 포함하는 약학적 조성물{Pharmaceutical composition comprising a polymeric carrier cargo complex and at least one protein or pepide antigen}
본 발명은 폴리머 담체 화물 복합체 및 적어도 하나의 항원을 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다. 폴리머 담체 화물 복합체는 바람직하게는 담체 및 화물을 포함하며, 상기 담체는 이황화-가교결합된 양이온성 성분(component)이며 화물은 적어도 하나의 핵산 분자이다. 적어도 하나의 항원은 바람직하게는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원, 알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원, 자가면역 질병과 관련된 항원, 또는 암 또는 종양 질병과 관련된 항원, 또는 상기 항원 각각의 절편, 변이체 및/또는 유도체로부터 선택된다. 이러한 독창적인 약학적 조성물은 예를 들어 백신일 수 있으며 상기 폴리머 담체 화물 복합체는 항원에 대한 면역 반응을 돕기위한 어쥬번트(adjuvant)로써 제공될 수 있다. 따라서, 이러한 약학적 조성물은 그에 포함된 적어도 하나의 항원에 직접적으로 대항하는 적응 면역 반응, 특히 Th1-시프트(shifted) 면역 반응을 효과적으로 유도한다.
본 발명은 나아가, 특히 감염성 질병, 알러지, 자가면역 질병 및 종양 및 암 질병의 치료에, 백신으로써 독창적인 약학적 조성물 또는 독창적인 키트 또는 일부의 키트의 사용뿐만 아니라, 독창적인 약학적 조성물의 성분을 포함하는 키트 또는 일부의 키트를 제공한다. 나아가 본 발명은 하기를 제공한다: (a) 및 (b)의 각 경우에, 특히 감염성 질병, 알러지, 자가면역 질병 및 종양 또는 암 질병의 치료에 사용을 위한, (a) 적어도 하나의 항원 또는 이들의 절편, 변이체 및/또는 유도체와 결합한 치료에 사용을 위한 폴리머 담체 화물 복합체; 및 (b) 폴리머 담체 화물 복합체와 결합한 치료에 사용을 위한 적어도 하나의 항원 또는 이들의 절편, 변이체 및/또는 유도체.
오늘날 많은 질병은, 특히 백신 접종의 맥락에서, 적응 면역 반응을 돕기 위한 선천적(innate) 면역 반응을 제공하기 위한 어쥬번트의 투여를 요구한다. 이들 질병들 모두가 필수적인 것은 아니지만 일부는 펩타이드-, 단백질-, 및 핵산 기초 약물의 투여를, 예를 들어 세포 또는 조직 속으로 핵산을 형질전환(transfection), 추가적으로 또는 대안으로 요구한다. 이들 요구는 일반적으로 이러한 질병들의 치료에서 다른 양태(aspects)를 나타내며 한가지 방식으로 해결하기 일반적으로 힘들다. 결과적으로, 종래 기술은 일반적으로 별도의 방식을 통해 이러한 양태들을 다룬다.
상기 맥락에서, 백신 접종은 통상적으로 질병의 예방 또는 치료에 가장 효과적이고 비용-효율적인 방법 중의 하나로 여겨진다. 그럼에도 불구하고, 백신 개발에 몇몇 문제점들은 해결하기 어려운 것으로 나타났다: 백신은 종종 매우 어리거나 매우 나이든 사람에게 비효율적임; 많은 백신은 어느 정도 시간이 주어져야 함, 시간이 흐름에 따라 그들이 부여하는 보호는 덜해짐, 부스터 투여를 요구함, 그리고 HIV와 같은 일부 질병을 위해, 효과적인 백신의 개발이 시급히 요구된다. 일반적으로 인정된 바와 같이, 이들 백신의 다수는 만약 그들이 보다 강하고 보다 오래가는 면역 반응을 유도할 수 있다면 활성화 또는 개선될 수 있다.
따라서, 평행(parallel) 선천적 면역 반응을 유발 또는 부스팅에 의한 적응 면역 반응의 유도 및 유지를 돕는 백신 접종 목적을 위한 어쥬번트를 포함하는 새로운 효과적이고 안정한 약학적 조성물의 개발은 주요한 도전 과제로 나타난다.
어쥬번트는 일반적으로 항원의 본질적 면역원성(intrinsic immunogenicity)을 증진 및/또는 조절할 수 있는 화합물로 정의된다. 음성적인 부작용을 감소시키기 위해, 새로운 백신은 종래의 전-세포 또는 바이러스-기초 백신과 비교할 때 낮은 면역원성을 종종 일으키는 조성물로 보다 정의된다. 어쥬번트는 따라서 보다 적은 항원 및 보다 적은 주사가 요구되는 추가적인 이점과 함께 강력하고 계속적인(persistent) 면역 반응을 유도하는 새로운 백신을 돕는데 요구된다. 현재 적응 면역 반응은 감염 또는 백신 접종 이후에 선천적 면역 세포에 의해 감지되는 초기 위험 신호의 수준 및 특이성에 주로 의존하는 것이 명백하다(Guy, B. (2007), Nat Rev Microbiol 5(7): 505-17.). 특히, 매우 안정하면서 상당히 정제된 재조합 단백질을 점점 더 포함할, 새로운 세대 백신 후보자들은 약한 면역원성이며, 효과적인 어쥬번트는 점점 더 필요하게 될 것이다.
불행하게도, 지금까지는 몇몇 허가된 어쥬번트만을 사용할 수 있다. 가장 촉망되는 것은 알룸(Alum)으로, 안정한 것으로 알려져 있으나, 또한 매우 약한 어쥬번트를 대표한다. 많은 추가적인 어쥬번트가, 예를 들어 병원체의 투여, CpG-핵산 등을 포함, 개발되어 왔다. 이들 새롭거나 "확립된(established)" 어쥬번트의 대부분은 그러나, 여전히 상기 요구들을 만족시키지 못하며, 왜냐하면 많은 새롭고 드러나는 문제점들이 고려되고 해결되어야 하기 때문이다. 이들 문제점은 그 중에서도(inter alia) 새롭고 다시 드러나는 감염성 질병, 반복된 투여, 유행성 독감(pandemic flu)의 위협, 등을 포함한다.
나아가, 새로운 백신은 보다 개발하기 어려운 것을 목표로 하며 -이들의 특정하게 맞춰진 면역 반응 때문에- 성공을 위해 보다 강력한 어쥬번트를 필요로 한다. 게다가, 여전히 우리가 심지어 현재에 효과적인 백신으로 가지지 못한 중요한 병원체가 현저하게 많이 있다. 이는 매우 도전적인 미래의 목표를 나타낸다. 이러한 목표에 대한 백신 개발의 활성화를 위해, 어쥬번트 및 이러한 타겟을 포함하는 보다 강력한 약학적 조성물이 필요할 것이다. 따라서, 이러한 조성물 내 새로운 어쥬번트는 보다 이종(heterologous)의 항체 반응, 병원체 다양성을 커버, 강력한 기능성 항체 반응을 유도, 병원체를 사멸 또는 중화시키고 보다 효과적인 T 세포 반응을 유도, 직접 및 간접 병원체 사멸을 위해, 특히 Th1 면역 반응의 일부인 세포독성 T 세포의 유도를 포함하는 이점들을 제공하는 것이 필요할 것이다. 추가적으로, 어쥬번트는 복합 백신 내 항원 용량 감소 및 항원 경쟁을 극복하는 것을 포함하는 보다 실용적인 효과를 달성하기 위해 필요할 수 있다. 게다가, 감염성 질병에 점점 더 민감한, 인구 고령화의 배경에 대하여, 새로운 어쥬번트는 나이와 함께 면역 반응의 자연적인 악화(deterioration)를 극복하는데 필요할 것이다(O'Hagan, D. T. and E. De Gregorio (2009), Drug Discov Today 14(11-12): 541-51.).
O'Hagan (2009; supra)의 리뷰(review)는, 예를 들어 백신 내 낮은 항원 용량의 요구, 면역 반응 및 이종 활성의 폭(breadth)을 증가하는데 필요, 복잡한 복합 백신의 활성화를 위해, 및 항원 경쟁의 극복을 위해, 노인, 어린이, 및 유아와 같은, 인구의 일부 그룹에서 제한된 면역 반응의 극복을 위해, 만성 질병 및 면역력 약화된 환자, 주효(effector) T 세포 반응 및 항체 역가의 증가를 위해, 방어 반응을 보다 빠르게 유도하고 또한 기억 B 및 T 세포 반응의 증진을 통해 반응의 기간을 확장하기 위해, 새롭고 효과적인 어쥬번트가 긴급하게 필요한 몇가지 이유를 요약한다.
상기를 요약하면, 바람직하게는 선천적 면역 반응을 유도하는데 효과적인 것, 특히 항-바이러스 사이토카인 IFN-알파를 포함하는 것; 및 또한 적응 면역 반응을 돕는데 효과적인 것; 안정한 즉 어떤 장기 효과와 관련되지 않은 것; 내성이 좋은 것; 단순한 합성 경로를 통해 활용가능한 것; 낮은 비용 저장 조건을 보이는 것(특히 실현가능한 동결건조(lyophilisation)); 간단하고 저렴한 요소를 요구하는 것; 생분해성인 것; 많은 다양한 종류의 백신 항원과 호환가능한 것; 항원 및 면역 강화제(potentiator)의 전달(codelivery)이 가능한 것, 등의 면역자극 제제(immunostimulating agents) 또는 어쥬번트를 포함하는 새로운 효과적이고 안전한 약학적 조성물이 필요하다.
이미 설명한 것처럼 상기 어쥬번트 또는 면역 자극성 제제는 종종 선천적 면역 반응을 유도하기 위한 그들의 능력을 통해 활동한다. 선천적 면역 시스템은 대부분의 유기체 내 숙주 방어의 지배적 시스템을 형성하고 예를 들어 염증, 보체(complement) 시스템 및 세포성 장벽(barriers)을 포함하는 체액성 및 화학적 장벽과 같은 장벽을 포함한다. 선천적 면역 시스템은 전형적으로 패턴 인식 수용체로 불리는 수용체의 작은 수에 기초한다. 그들은 숙주의 세포 유래 바이러스, 박테리아, 진균 및 기생충과 같은 외부 유기체를 구별하는 보존된 분자 패턴을 인식한다. 이러한 병원체-관련 분자 패턴(PAMP)은 바이러스 핵산, 박테리아 및 진균 벽의 성분, 편모 단백질, 및 그 이상을 포함한다. 상세하게 연구된 패턴 인식 수용체(PAMP 수용체)의 첫번째 패밀리는 톨(Toll)-유사 수용체(TLR) 패밀리였다. TLRs는 세포밖 환경(milieu)의 또는 엔도솜(endosomes)의 루멘(lumen)의 리간드를 인식하는 막관통 단백질(transmembrane proteins)이다. 리간드-결합 이후 그들은 숙주-방어 반응을 일으키고 항균성 펩타이드, 전염증성 케모카인 및 사이토카인, 항바이러스 사이토카인, 등의 생산을 수반하는, 세포질 적응 단백질을 통해 신호를 도입한다(예를 들어 Meylan, E., J. Tschopp, et al. (2006), Nature 442(7098): 39-44 참조). 게다가 면역 시스템의 관련 있는 성분은 예를 들어 엔도소말(endosomal) TLRs, 세포질 수용체, 제1형 인터페론 및 세포질 수옹체를 포함한다. 따라서, 면역 자극성 제제 또는 어쥬번트는 바람직하게는 패턴 인식 수용체(PAMP 수용체)를 활성화시키는 선천적 면역 반응의 유도자로써 본 발명에서 정의된다. 이로써, 예를 들어 선천적 면역 반응을 돕는 사이토카인(예를 들어 IFN-알파)의 방출을 일으킬 수 있는, 신호의 연쇄가 유도된다. 따라서, 이는 이러한 수용체에 결합하고 이러한 PAMP 수용체를 활성화하기 위한 면역 자극성 제제 또는 어쥬번트의 바람직한 특징이다. 이상적으로, 이러한 제제 또는 어쥬번트는 추가적으로 예를 들어 Th 세포의 바람직한 종류가 활성화된 것과 같이 면역 반응을 변화시킴(shifting)에 의해 적응 면역 반응을 돕는다. 치료될 질병 또는 질환에 의존하여 Th1-기초 면역 반응으로 변화(shift)는 바람직할 수 있으며, 다른 경우에는 Th2 면역 반응으로의 변화가 바람직할 수 있다.
선행기술에서는 상기 정의된 요구되는 특징의 적어도 몇가지를 이행하는, 단 모두는 아닌, 일부 유망한 어쥬번트 후보자들이 있다.
일례로서, 상기 개발된 새로운 어쥬번트 가운데, CpG DNA 올리고뉴클레오티드 또는 isRNA(면역 자극성 RNA)와 같은 일부 핵산은 그들이 선천적 면역 반응의 치료적 또는 예방을 위한 유도를 일으키는 새로운 면역 자극성 제제 또는 어쥬번트를 위한 유망한 후보자로 나타났다. 알기 쉽게, 이러한 어쥬번트 기초한 핵산은 종종 어쥬번트 활성의 불필요한 손실이 없고, 경우에 따라서, 전신에(systemically) 허용 수준을 초과하는 투여된 부피를 증가시키기 위한 필요가 없이, 효과적인 선천적 면역 반응의 유도를 일으키기 위한 작용점(site of action)에 효과적으로 전달되어야 한다.
이러한 쟁점을 해결하기 위한 한가지 방법은 PAMP 수용체(예를 들어 Toll-유사 수용체(TLRs))의 리간드인 면역 자극성 핵산과 함께 선천적 면역 시스템(예를 들어 수상돌기세포(dendritic cells), 플라스마사이토이드 수상돌기세포(plasmacytoid dendritic cells, pDCs))의 일부인 세포의 감염일 수 있고, 따라서 핵산 리간드에 의한 면역 자극을 일으킬 수 있다. 게다가 접근 방법은 어쥬번트에 기초한 핵산의 직접 형질전환일 수 있다. 모든 이들 접근 방법은, 그러나, 전형적으로 핵산의 불충분한 전달에 의해 제기능을 못하며 그 결과, 특히 국소로 투여될 때 어쥬번트 활성을 약화시킨다.
그러나, 현재까지 이러한 핵산 기초 어쥬번트 접근 방법의 한가지 주요 단점은 약한 세포적 접근(cellular access) 및 불충분한 치료적 효과를 일으키는, 포유동물 세포의 원형질막을 가로지르는 그들의 제한된 능력이다. 오늘날 까지 이러한 장애물은, 예를 들어 생물 의학의 발달 및 많은 생물 약제의 상업적 성공에 부응하여, 핵산 형질전환 기초의 적용(applications)을 위한 주요한 도전을 나타낸다(예를 들어 Foerg, C. & Merkle, H.P., J Pharm Sci 97, 144-62 (2008) 참조).
세포 또는 조직 내로 핵산 또는 유전자의 형질전환은 생체 외 형질전환 목적의 맥락 및 유전자 치료 접근 방법의 맥락에서 현재까지 조사되어 왔다. 그러나, 효과적이고 안정한 이러한 유전자 전달 기술에 기초한 사용가능한 어쥬번트는, 특히 허가되지 않은 어쥬번트, 아직까지 없다. 이는 아마 핵산 기초 어쥬번트의 경우에 해결되어야 할 안정화 쟁점과 결합한 일반적으로 어쥬번트의 복합체 요구 때문이다.
그럼에도 불구하고, (선천적 및/또는 적응) 면역 반응을 유도하기 위해 세포 또는 조직내로 핵산 또는 유전자의 형질전환은 새로운 어쥬번트를 제공하기 위한 유망한 접근 방법을 제공하는 것으로 보인다.
그러나, 이들 접근 방법의 다수는 선천적 면역 반응을 유도하기 위한 목적 없이 세포 또는 조직으로 핵산 또는 유전자의 형질전환을 활용한다. 심지어 선천적 면역 반응의 유도를 엄격하게 피해야 하는, 일부 유전자 치료 요법(therapeutic therapies)이 있다. 심지어 드문 경우에, 핵산의 투여를 사용한 적응 항원-특이적 적응 면역 반응을 유도하기 위해 백신 접종이 수행되는 경우, 예를 들어 백신 접종이 DNA 또는 mRNA 코딩된(encoded) 항원을 사용하는 종양 백신 접종에서, 적응 면역 반응의 유도는 전형적으로 코딩된 항원에 대한 자동 면역법(active immunization)으로써 전형적으로 수행되고 어쥬번트 치료를 동반하지 않아 따라서 선천적 면역 반응을 유도하기 위한 분리 어쥬번트의 추가적인 투여를 요구할 수 있다.
만약 형질전환 방법의 다수가 기술분야에서 알려져 있다면, 개인의 세포로 핵산 또는 유전자의 이송 또는 삽입은 여전히 오늘날의 주요한 도전을 대표하고 아직까지 만족스럽게 해결되지 않았을 것이다. 이 복잡한 쟁점을 해결하기 위해 다양한 방법들이 지난 10년간 개발되었다. 이들은 칼슘 인산염, 양이온성 지질, 양이온성 폴리머, 및 리포좀에 의한 형질전환을 포함한다. 추가적인 형질전환을 위한 방법은 전기 천공법 및 바이러스 도입(transduction)이다.
그러나, 통상의 기술자에게 알려진 바와 같이, 핵산 또는 유전자의 전달 또는 삽입을 위한 시스템은 높은 기능성과 함께 개인의 세포내로 충분한 핵산 전달, 핵산가수분해효소를 편재적으로(ubiquitously) 발생시키는 것에 대항하는 핵산의 보호, 세포 내 핵산의 방출, 안전 염려가 없는, 낮은 비용 조건(예를 들어 실현가능한 동결 건조(lyophilisation)) 하에 확대(scale-up) 및 저장 안정성에 타협(amenable)할 수 있는 상업적으로 허용가능한 형태 내 실현가능한 제조를 포함하는 생체 내 적용을 위한 몇몇 요구를 이행해야 한다. 이들 요구는 특히 만약 상기 개설된(outlined) 것과 같은 핵산의 형태라면 어쥬번트의 복합체 요구에 추가된다.
오늘날 사용가능한 핵산 또는 유전자의 전달 또는 삽입을 위한 일부 성공적인 전략들은 아데노바이러스, 아데노-관련된 바이러스, 레트로바이러스, 및 헤르페스 바이러스와 같은 바이러스 벡터의 사용에 의존한다. 바이러스 벡터는 높은 효율 및 장기적인 유전자 발현의 가능성과 함께 유전자 전달을 조절할 수 있다. 그러나, 유전자 치료 임상 시험에서 발견된 급성 면역 반응("사이토카인 스톰"), 면역원성(immunogenicity), 및 삽입 돌연변이(mutagenesis)는 일부 통상적으로 사용되는 바이러스 벡터에 대한 심각한 안전 문제를 제기했다.
핵산 또는 유전자의 전달 또는 삽입의 문제에 대한 다른 해결책은 비-바이러스 벡터의 사용에서 발견될 수 있다. 비록 비-바이러스 벡터는 바이러스 벡터만큼 효과적이지 않더라도, 많은 비-바이러스 벡터는 보다 안전한 대안을 제공하기 위해 개발되어 왔다. 비-바이러스 핵산 전달의 방법은 물리적(담체 없는 핵산 전달) 및 화학적 접근 방법(합성 벡터 기초의 핵산 전달)을 사용하여 연구(explored)되었다. 물리적 접근 방법은 일반적으로 바늘 주사, 전기 천공법, 유전자 총, 초음파, 및 유체 역학적 전달을 포함, 세포막을 관통하고 세포내 유전자 전달을 촉진하는 물리적인 힘을 이용한다. 화학적 접근방법은 전형적으로 세포 내로 핵산을 전달하기 위한 담체로써 합성 또는 천연 화합물(예를 들어 양이온성 지질, 양이온성 폴리머, 지질-폴리머 혼성(hybrid) 시스템)을 사용한다. 현저한 진전이 기초 과학 및 다양한 비바이러스성 핵산 전달 시스템의 적용에 만들어졌으나, 비-바이러스 접근 방법의 대부분은, 특히 생체 내 유전자 전달을 위해, 바이러스 벡터보다 여전히 훨씬 덜 효율적이다(예를 들어 Gao, X., Kim, K. & Liu, D., AAPS J 9, E92-104 (2007) 참조).
상기 정의된 이러한 형질전환 제제는 전형적으로 체외 반응에서만 성공적으로 사용되었다. 생체 내 핵산의 적용을 위해, 그러나 추가적인 요구가 이행되어야 한다. 예를 들어, 핵산 및 형질전환 제제 사이의 복합체는 응집(agglomerisation)에 대한 생리적 염 용액에서 안정해야 한다. 나아가, 이러한 복합체는 전형적으로 숙주의 보체 시스템의 부분과 상호작용하지 않아야 하므로 담체로써 자체에 면역원성이 아니어 자체의 개별적인 적응 면역 반응을 유도하지 않아야 한다. 추가적으로, 복합체는 편재적으로 발생하는 핵산가수분해효소에 의한 조기 세포 외 분해로부터 핵산을 보호해야 한다.
기술 분야에서 많은 형질전환 시약이, 특히 세포 배양에 우수한 형질전환 활성을 나타내는 양이온성 지질, 사용가능하다. 그러나, 이들 형질전환 시약의 대부분은 혈청의 존재에서 잘 수행하지 않으며, 몇몇 만이 생체 내에서 활성이다. 리포플렉스(lipoplexes)가 혈액, 점액, 상피 내부 유체(epithelial lining fluid), 또는 조직 기질에 존재하는 음전하 및 종종 양쪽성 단백질 및 다당류의 압도적인 양에 노출될 때, 크기, 표면 전하, 및 지질 조성에 극적인 변화가 일어난다. 일단 생체에 투여된 리포플렉스는 음전하 혈액 성분과 상호작용하고 순환 적혈구의 표면에 흡수될 수 있는 큰 응집체를 형성, 두꺼운 점액층에 갇히거나, 미소혈관계(microvasculatures)에 색전 형성(embolized)되고, 먼 위치에 의도된 타겟 세포에 도달하는 것을 방지하는 경향이 있다. 그들이 혈액 순환에 투여된 후 일부는 용해된다(예를 들어 Gao, X., Kim, K. & Liu, D., AAPS J 9, E92-104 (2007) 참조).
하나의 보다 유망한 접근 방법은 양이온성 폴리머를 활용하는 것이다. 양이온성 폴리머는, 그들이 단단히 복잡하고 음전하를 띤 핵산을 응축할 수 있는 것처럼, 핵산의 형질전환에 효과적인 것으로 나타났다. 따라서 다수의 양이온성 폴리머는 생체 외 및 생체 내 유전자 전달을 위한 담체로써 연구(explored)되었다. 이들은 폴리에틸렌이민(PEI), 폴리아미도아민 및 폴리프로필아민 덴드리머, 폴리알릴아민, 양이온성 덱스트란, 키토산, 양이온성 단백질 및 양이온성 펩타이드를 포함한다. 비록 대부분의 양이온성 폴리머는 작은 입자로 DNA를 응축하는 기능을 공유하고 세포 표면의 음이온성 자리와 전하-전하 상호작용을 통한 세포내섭취(endocytosis)를 통해 세포성 흡수를 촉진하더라도, 이들의 형질전환 활성 및 독성은 극적으로 다르다.
기술분야에서 오직 한가지 접근 방법, 짧은 양이온성 펩타이드에 복합된 RNA의 면역 자극성 효과는 Fotin-Mleczek et al. (WO 2009/030481)에 의해 증명되었다. 이들 조성물(formulations)은 면역 능력이 있는(immunocompetent) 세포 내 사이토카인을 충분히 유도하는 것으로 보인다. 불행하게도 Fotin-Mleczek et al.은 이들 복합체에 의해 바람직한 항-바이러스 사이토카인 IFN-α의 유도를 측정하지 않았다. 추가적으로, 이들 복합체는 동결 건조 동안에 불안정한 것으로 밝혀졌다.
상기 맥락에서, 양이온성 폴리머는 증가하는 분자량과 함께 보다 나은 형질전환 효율을 보인다. 그러나, 분자량의 증가는 또한 양이온성 폴리머의 독성의 증가를 유도한다. 이러한 상기 맥락에서, (높은 분자량) PEI는 아마도 핵산의 형질전환을 위해, 특히 유전자 전달 목적을 위해, 가장 활성적이고 가장 연구된 폴리머이다. 불행하게도, 이의 비-생분해성 특성 및 독성 때문에 동일한 결점을 보인다. 게다가, 비록 높은 분자량 폴리머에 의해 형성된 폴리플렉스가 생리학적 조건에서 증진된 안정성을 보여도, 데이터는 이러한 폴리머가 벡터 풀림(vector unpacking)을 저해할 수 있는 것을 가리켰다. 이러한 부정적 영향을 극복하기 위해 Read et al. (Read, M.L. et al., J Gene Med. 5, 232-245 (2003); and Read, M.L. et al., Nucleic Acids Res 33, e86 (2005) 참조)는 펩타이드 Cys-Lys10-Cys의 산화성 중축합에 의해 제조된 선형 환원 폴리양이온(linear reducible polycation, RPC)에 기초한 합성 벡터의 새로운 형태를 개발했다. 이 펩타이드 Cys-Lys10-Cys는 핵산의 방출을 촉진하기 위해 세포내 환경에 의해 분해될 수 있다. 이러한 맥락에서 Read et al. (2003, supra)는 이들 RPCs에 의해 형성된 폴리플렉스가 DNA와 mRNA를 효율적으로 방출을 가능하게 하는 조건을 감소시킴으로써 불안정한 것을 보여줄 수 있다. 그러나, 생체 외 Read et al. (2003, supra) 형질전환 효율 실험은 또한 2의 N/P (인에 대한 질소 원자) 비율은 만족시키지 못하고 보다 높은 N/P 비율이 형질전환 효율의 증진에 필요함을 관찰하였다. 추가적으로 Read et al. (2003, supra)은 클로로퀸(chloroquine) 또는 양이온성 지질 DOTAP은 추가적으로 적절한 수준의 형질전환 효율을 증진시키는데 필요함을 관찰하였다. 결과적으로, Read et al. (2005, supra)는 엔도소말 완충 능력을 갖는 것으로 알려진 RPCs 내에 히스티딘 잔기를 포함하고 이러한 히스티딘-풍부 RPCs는 세포내 환원 환경에 의해 분해될 수 있음을 보였다. 이러한 접근 방법은 엔도소몰리틱(endosomolytic) 제제 클로로퀸에 대한 요구없이 플라스미드 DNA, mRNA 및 siRNA 분자를 포함하는, 넓은 범위의 핵산의 효과적인 세포질 전달을 가능하게 한다.
불행하게도, Read et al. (2003, supra) 또는 Read et al. (2005, supra) 모두 RPCs가 생체 내 적용을 위해 직접적으로 사용될 수 있는지 측정하지 않았다. 2005년에 이들 연구에서, 형질전환은 세포성 흡수를 제한하는 폴리플렉스에 혈청 단백질의 결합으로부터 일어날 수 있는 유전자 전달을 강화하기 위해 히스티딘 잔기의 능력을 가리는 것을 피하기 위해 혈청이 없이 수행되었다. 예비 실험에서, 그러나, 히스티딘-풍부 RPC 폴리플렉스의 형질전환 특성은 10% FCS에서 관찰된 GFP-양성 세포 내에 50% 감소와 함께 혈청 단백질의 존재에 의해 영향을 받을 수 있음을 가리켰다. 생체 내 적용을 위해 Read et al. (2005, supra)는 친수성 폴리머 폴리-[N-(2하이드록시-프로필)메타크릴아미드](poly-[N-(2hydroxy-propyl)methacrylamide])와 함께 변형을 제안하였다. 불행하게도, 그들은 폴리플렉스의 응집 및 혈청 단백질에 다중양이온성(polycationic) 복합체의 결합을 방지할 수 없었다. 게다가, 강한 양전하를 띤 복합체는 높은 N/P 비율에 의해 특징지어지는 양이온성 폴리머의 과량 때문에 핵산이 착화(complexing)될 때 형성된다(양성 제타 전위). 따라서, 이러한 복합체는 염 유도된 응집의 그들의 강한 경향성 및 혈청 내용물과 함께 상호작용(옵소닌 작용) 때문에 오직 생체 내에서만 제한되어 사용된다. 추가적으로, 이들 (양전하를 띤) 복합체는 유전자 치료의 목적으로 사용될 때, 보체 활성화를 들뜨게 할 수 있다. 또한 이들 양전하를 띤 RPC 기초 복합체는 피부에 국소 투여 이후 핵산 화물의 약한 트랜스레이션(translation)을 보이는 것이 밝혀졌다.
Read et al. McKenzie et al. (McKenzie, D. L., K. Y. Kwok, et al. (2000)과 유사한 접근 방법에서, J Biol Chem 275(14): 9970-7 and McKenzie, D. L., E. Smiley, et al. (2000), Bioconjug Chem 11(6): 901-9)은 짧은 합성 펩타이드에 다중 시스테인을 삽입함으로써 유전자 전달 제제로써 가교-결합 펩타이드를 개발하였다. 그들의 연구에서 그들은 DNA와 함께 최적의 복합체 형성을 실험하였고 결과적으로 그들은 적어도 2의 N/P 비율은 완전히 형성된 펩타이드 DNA 응축물을 위해 필요한 것을 보일 수 있었다. 따라서 오직 양전하를 띤 복합체가 최적의 DNA 응축을 보이는 것으로 나타났다. 이들 데이터와 대조적으로 그들은 생체 내 유전자 전달을 위해 음전하를 띤 복합체의 개발을 제안하였다, 왜냐하면 양전성인(electropositive) DNA 응축물의 정맥내 적용은 폐 및 간에 빠른 옵소닌 작용(opsonisation) 및 비특이적 생물학적 분배(biodistribution)를 유도하는 것으로 이전의 연구에서 나타났기 때문이다(Collard, W. T., Evers, D. L., McKenzie, D. L., and Rice, K. G. (2000), Carbohydr. Res. 323, 176-184). 따라서, McKenzie et al. (2000; supra)는 폴리에틸렌 글리콜 및 목표 리간드와 함께 담체의 유도체화(derivatization)를 제안하였다. 주목해야 할 것은 McKenzie et al. (2000, supra)의 접근 방법은, 특히 코딩 핵산, 안티센스 핵산 및 리보자임의 형질전환을 개시하는 특허(US 6,770,740 B1)의 추가적인 주제이다.
따라서, 생체 내 핵산의 적용은 음전하를 띤 혈장 단백질은 양전하를 띤 복합체에 비-특이적으로 결합할 수 있고 예를 들어 세망-내피계(reticulo-endothelial system)를 통해 그들을 빠르게 제거할 수 있기 때문에, 가장 도전적인 문제의 하나로 여전히 나타난다. 양이온성 복합체에 의한 옵소닌 작용 및 보체 시스템의 활성화는 생체 내 투여된 양이온성 복합체의 효과를 낮추는데 참여할 수 있는 추가적인 생리학적 현상이다. 이는, 특히 만약 코딩된 단백질 또는 펩타이드의 발현 형질전환된 핵산의 RNA의 전사체가 의도된 경우에, 특히 핵산-기초 약물의 투여, 예를 들어 세포 또는 조직에 핵산의 형질전환에 적용한다.
상기를 요약하면, 선행 기술은, 백신 접종 목적을 위한 어쥬번트를 포함하는 효과적이고 안정한 약학적 조성물을 확립하는, 특히 만약 Th1-시프트(shifted) 면역 반응이 요구되는 경우에, 실현가능한 수단 또는 방법을 제공하지 않는다.
따라서, 본 발명이 해결하고자 하는 과제는 이들 문제의 하나 또는 그 이상을 해결하는, 그러한 수단 또는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 기본적인 목적은, 바람직하게는 첨부된 청구 범위의 주제에 의해, 본 발명의 주제에 의해 해결된다.
명확성 및 가독성을 위해 하기와 같은 정의가 제공된다. 본 발명에 개시된 어떠한 기술적 특징은 본 발명의 각각의 일부 및 모든 실시 형태일 수 있다. 추가의 정의 및 설명은 본 발명의 맥락에서 제공될 수 있다.
핵산: 용어 핵산은 전형적으로 어떤 DNA- 또는 RNA-분자를 의미하며 폴리뉴클레오티드와 동의어로 사용된다. 나아가, 본 발명에서 정의된 핵산의 변이체 또는 유도체는 명백하게 일반적인 용어 "핵산"에 포함된다. 예를 들어, PNA는 또한 용어 "핵산"에 포함된다.
단일시스트론 RNA: 단일시스트론 RNA는 전형적으로 오직 하나의 오픈 리딩 프레임을 코딩하는 RNA, 바람직하게는 mRNA일 수 있다. 이러한 맥락에서 오픈 리딩 프레임은 펩타이드 또는 단백질로 번역될(translated) 수 있는 몇몇 뉴클레오티드 트리플렛(triplets) (코돈)의 서열이다.
바이-/멀티시스트로닉 RNA: 전형적으로 둘(바이시스트로닉) 또는 그 이상(멀티시스트로닉) 오픈 리딩 프레임(ORF)을 갖는 RNA, 바람직하게는 mRNA. 이러한 맥락에서 오픈 리딩 프레임은 펩타이드 또는 단백질로 번역될 수 있는 몇몇 뉴클레오티드 트리플렛(코돈)의 서열이다.
5'-캡 구조: 5' 캡은 RNA-분자의 5'-말단에 추가된, 전형적으로 변형된 뉴클레오티드, 특히 구아닌 뉴클레오티드다. 바람직하게는, 5'-캡은 5'-5'-삼인산염 결합을 사용하여 추가된다.
폴리(C) 서열: 폴리(C) 서열은 전형적으로 시토신(cytosine) 뉴클레오티드의 긴 서열, 전형적으로 약 10 내지 약 200 시티딘(cytidine) 뉴클레오티드, 바람직하게는 약 10 내지 약 100 시티딘 뉴클레오티드, 더욱 바람직하게는 약 10 내지 약 70 시티딘 뉴클레오티드 또는 더욱 더 바람직하게는 약 20 내지 약 50 또는 약 20 내지 약 30 시티딘 뉴클레오티드다. 폴리(C) 서열은 바람직하게는 핵산에 의해 포함되는 코딩 부위의 3'에 위치할 수 있다.
폴리(A) 꼬리: 또한 "3'-폴리(A) 꼬리"라 불리는 폴리(A) 꼬리는 RNA의 3'-말단에 추가된 전형적으로 약 400 아데노신(adenosine) 뉴클레오티드에 이르는, 예를 들어 약 25 내지 약 400, 바람직하게는 약 50 내지 약 400, 더욱 바람직하게는 약 50 내지 약 300, 더욱 더 바람직하게는 약 50 내지 약 250, 가장 바람직하게는 약 60 내지 약 250 아데노신 뉴클레오티드, 아데닌(adenine) 뉴클레오티드의 긴 서열이다.
안정화된 핵산: 안정화된 핵산, 전형적으로, 생체내 분해(예를 들어 엑소- 또는 엔도- 핵산가수분해효소에 의한 분해) 및/또는 생체외 분해(예를 들어 백신 투여 전 제조 과정에 의해, 예를 들어 투여되는 백신 용액의 제조의 과정 내에)에 기본적으로 내성이 있을 수 있다. mRNA의 안정화는 예를 들어 5'-캡 구조, 폴리(A) 꼬리, 폴리(C) 꼬리, 또는 어떤 다른 UTR 변형의 제공에 의해 수행될 수 있다. 또한 백본(backbone) 변형 또는 핵산의 G/C-함량의 변형에 의해 수행될 수 있다. 본 발명의 맥락에서 다양한 다른 방법이 가능하다(conceivable).
핵산의 변형(변형된 핵산): 핵산 분자의 변형은 전형적으로 백본 변형, 당 변형 또는 염기 변형을 포함할 수 있다. 본 발명과 관련하여 백본 변형은, 전형적으로, 화학적으로 변형될 수 있는 핵산 분자에 포함된 뉴클레오티드의 백본의 인산염 내 변형이다. 본 발명과 관련하여 당 변형은, 전형적으로 핵산의 뉴클레오티드의 당의 화학적 변형일 수 있다. 나아가, 본 발명과 관련된 염기 변형은, 전형적으로, 핵산 분자의 뉴클레오티드의 염기성 부분의 화학적 변형일 수 있다. 따라서 변형된 핵산은 또한 본 발명에서 정의된 핵산 유사체(analogues)를 포함할 수 있는 핵산 분자일 수 있다. 나아가 핵산 분자의 변형은 지질 변형을 포함할 수 있다. 이러한 지질-변형된 핵산은 전형적으로 본 발명에 정의된 핵산을 포함할 수 있다. 이러한 지질-변형된 핵산 분자는 나아가 전형적으로 핵산 분자와 연결된 적어도 하나의 연결자(linker), 및 각각의 연결자와 연결된 적어도 하나의 지질 공유 결합을 포함할 수 있다. 그렇지 않으면, 지질-변형된 핵산 분자는 본 발명에 정의된 적어도 하나의 핵산 분자 및 핵산 분자와 공유 결합된(연결자 없이) 적어도 하나의(두 기능을 가진) 지질을 포함할 수 있다. 세번째 대안에 따르면, 지질-변형된 핵산 분자는 본 발명에 정의된 핵산 분자, 핵산 분자와 공유결합된 적어도 하나의 연결자, 및 각각의 연결자와 공유결합된 적어도 하나의 지질, 및 또한 핵산 분자와 공유 결합된(연결자 없이) 적어도 하나의(두 기능을 가진) 지질을 포함할 수 있다.
핵산의 변형은 또한, 특별히 만약 핵산 분자가 mRNA의 형태일 경우, 핵산 분자의 코딩 부위의 G/C 함량의 변형을 포함할 수 있다. 이러한 맥락에서, 이의 특정한 야생형 코딩 서열, 즉 비변형된 mRNA의 코딩 부위의 G/C 함량에 비해, 핵산 분자의 코딩 부위의 G/C 함량이 증가하는 것이 특히 바람직하다. 핵산 서열의 코딩된 아미노산 서열은 바람직하게는 특정한 야생형 mRNA의 코딩된 아미노산 서열에 비해 변형되지 않는다. 핵산 분자의 G/C-함량의 변형은, 특별히 만약 핵산 분자가 mRNA의 형태 또는 mRNA를 위한 코드일 경우에, mRNA의 효과적인 번역을 위해 중요한 번역될 어떤 mRNA 부위의 서열이라는 사실에 기초한다. 따라서, 다양한 뉴클레오티드의 구성(composition) 및 서열은 중요하다. 특히, 증가된 G(구아노신)/C(시토신) 함량을 갖는 서열은 증가된 A(아데노신)/U(우라실) 함량을 갖는 서열에 비해 더욱 안정하다. 따라서, 번역된 아미노산 서열을 유지하는 동안, 그들이 G/C 뉴클레오티드의 증가된 양을 포함하더라도, 코딩 서열 또는 mRNA의 코돈은 따라서 이의 야생형 코딩 서열 또는 mRNA에 비해 다양하다. 하나 및 동일한 아미노산을 위한 여러 코돈 코드(소위 유전 코드의 축퇴(degeneration))가 있다는 사실의 관점에서, 안정성을 위해 가장 바람직한 코돈이 결정될 수 있다(소위 대체 코돈 사용). 바람직하게는, 핵산 분자의 코딩 부위의 G/C 함량은, 특히 만약 핵산이 mRNA 또는 mRNA를 위한 코드의 형태일 경우, 야생형 mRNA의 코딩 부위의 G/C 함량에 비해, 적어도 7%, 더욱 바람직하게는 적어도 15%, 특히 바람직하게는 적어도 20% 증가된다. 구체적인 실시예에 따르면, 본 발명에 따라 정의된 단백질 또는 펩타이드 또는 이의 절편, 변이체 및/또는 이의 유도체를 위한 코딩 부위에 치환가능한 코돈의 적어도 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 더욱 바람직하게는 적어도 70%, 더욱 더 바람직하게는 적어도 80% 및 가장 바람직하게는 적어도 90%, 95% 또는 100%, 또는 야생형 mRNA 서열 또는 코딩 서열의 전체 서열은 치환되고, 그에 따라 상기 서열의 G/C 함량을 증가시킨다. 이러한 맥락에서, 특별히 만약 핵산이 mRNA 또는 mRNA를 위한 코드의 형태일 경우에, 야생형 서열에 비해, 단백질을 코딩하는 특정한 부위에, 핵산 분자의 G/C 함량을 최대로(즉 100%의 치환가능한 코돈) 증가시키기는 것이 특히 바람직하다. 나아가, 핵산의 변형은, 특별히 만약 핵산이 mRNA 또는 mRNA를 위한 코드의 형태일 경우에, 전사 효율은 또한 세포 내 tRNAs의 발생의 다른 빈도에 의해 결정된다는 연구에 기초한다. 세포내 tRNAs의 발생의 빈도는, 및 따라서 상기 세포 내 코돈의 용도, 세포가 유래된 종에 의존한다. 따라서, 효모 세포는 일반적으로 인간 세포와 같은 포유류 세포에 비해 다른 코돈 사용을 보인다. 따라서, 만약 소위 "드문 코돈"이 핵산 분자 내에 존재한다면(각각의 발현 시스템의 관점에서), 특별히 만약 핵산이 mRNA 또는 mRNA를 위한 코드의 형태일 경우에, 증가된 규모에 대해, 상응하는 변형된 핵산 분자는 상대적으로 "빈번한" tRNAs의 코딩을 위한 코돈이 존재하는 경우에 비해 현저하게 보다 열악한(poorer) 정도로 번역된다. 따라서, 특별히 만약 변형된 핵산 분자가 mRNA 또는 mRNA를 위한 코드의 형태일 경우에, 변형된 핵산의 코딩 부위는 바람직하게는 야생형 mRNA의 상응하는 부위 또는 상대적으로 세포내에 드문 tRNA에 대한 코드가 상대적으로 세포내 빈번하고 상대적으로 드문 tRNA와 같이 동일한 아미노산을 수송하는 tRNA를 코딩하는 코돈으로 교환된 야생형 서열의 적어도 하나의 코돈과 같은 코딩 서열에 비해 바람직하게는 변형된다. 이러한 변형에 의해, 핵산 분자의 서열은, 특히 만약 핵산이 mRNA 또는 mRNA를 위한 코드의 형태일 경우에, 빈번하게 발생하는 tRNAs가 가능한 코돈이 삽입되도록 수정된다. 즉, 이러한 변형에 의해 세포 내 상대적으로 드문 tRNA를 코딩하는 야생형 서열의 모든 코돈은 각 경우에 세포 내 상대적으로 빈번하고, 각 경우에, 상대적으로 드문 tRNA처럼 동일한 아미노산을 수송하는 tRNA를 코딩하는 코돈으로 교환될 수 있다. 기술분야에서 통상의 기술자에게 상대적으로 드물게 발생하는 것으로 알려진 것과 대조적으로, 상기 tRNAs는 세포 내에 상대적으로 빈번하게 발생한다; 예를 들어 Akashi, Curr. Opin. Genet. Dev. 2001, 11(6): 660-666. 참조. 본 발명에서 사용된 단백질을 위해 코딩하는 핵산 서열은 인간 코돈 사용에 최적화된 코돈으로 특히 바람직하다. 가장 빈번하게 발생하는 특정한 아미노산 tRNA를 위해 사용되는 코돈은, 예를 들어 (인간) 세포 내에 가장 빈번하게 발생하는 tRNA를 사용하는 Gly codon, 특히 바람직하다. 이러한 맥락에서, 증가된 연결 순차적인 G/C 함량, 특히 최대화된, 변형된 핵산 분자에, 특별히 만약 핵산이 mRNA 또는 mRNA를 위한 코드의 형태일 경우에, 핵산 분자의 코딩 부위에 의해 코딩된 단백질의 아미노산 서열의 변형 없이 "빈번한" 코돈과 함께 특히 바람직하다. 본 바람직한 실시예는, 특별히 만약 핵산이 mRNA 또는 mRNA를 위한 코드의 형태일 경우에, 특히 효과적으로 번역되고 안정화된 (변형된) 핵산의 제공을 허용한다.
핵산 분자의 유도체: 핵산 분자의 유도체는 전형적으로 상기 정의된 바와 같이 변형된 핵산 분자로써 본 발명에서 이해될 수 있다.
핵산 유사체(analogues): 핵산 유사체는 전형적으로 인산염 백본 변형, 당 변형, 또는 핵염기의 변형을 포함하는 자연 발생 뉴클레오티드와 구조적으로 유사한(유사체(analogue)) 뉴클레오티드이다.
UTR 변형: UTR 변형은 전형적으로, 특히 핵산 분자를 코딩하는, 핵산 분자의 5' 및/또는 3' 부위의 변형이다. 그 안에, "UTR"은 전형적으로 "비번역된 부위"를 의미한다. UTR은 예를 들어 안정화 서열(UTR 변형)을 포함(contain), 구성(comprise) 또는 구성될(consist of) 수 있다. 5' 및/또는 3' 비번역된 부위 내 이들 안정화 서열은 시토졸(cytosol) 내 핵산의 반감기를 증가시키는 효과를 가질 수 있다. 이들 안정화 서열은 바이러스, 박테리아 및 진핵생물에서 발생하는 자연 발생 서열과 100% 서열 상동성을 가질 수 있으나, 또한 부분적 또는 전체적으로 합성일 수 있다. 예를 들어 호모 사피엔스(Homo sapiens) 또는 제노푸스 라에비스(Xenopus laevis)로부터, (알파-)글로빈 유전자의 비번역된 서열(UTR)은 안정화 핵산에 사용될 수 있는 안정화 서열의 예시로써 언급될 수 있다. 안정화 서열의 다른 예시는 (알파-)글로빈, 제1형-콜라겐, 15-리폭시게나아제 또는 티로신 수산화효소를 위한 매우 안정한 RNA의 3' UTR에서 포함되는 일반 화학식 (C/U)CCANxCCC(U/A)PyxUC(C/U)CC을 갖는다(Holcik et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1997, 94: 2410 to 2414 참조). 이러한 안정화 서열은 물론 개별적으로 또는 다른 것과 결합하고 또한 기술분야에서 통상의 기술자에게 알려진 다른 안정화 서열과 결합하여 사용될 수 있다. 본 발명의 맥락에서, UTR 변형은 5'- 및/또는 3'-UTR 추가 또는 교환에 의해, 바람직하게는 상기 구체화된 바와 같이 5'- 및/또는 3'-UTR 안정화를 위해 추가 또는 교환에 의해, 코딩 핵산, 이러한 유전자 또는 mRNA의 변형을 바람직하게 의미한다.
핵산 합성: 여기에 정의된 본 발명에 따라 사용된 핵산 분자는 예를 들어 고체상 합성 뿐만 아니라, 생체 외 전사 반응과 같은, 생체 외 방법과 같은 합성 방법을 포함하는, 기술분야에서 알려진 어떤 방법을 사용하여 제조될 수 있다.
핵산 분자의 제조를 위해, 특별히 만약 핵산이 mRNA의 형태일 경우, 상응하는 DNA 분자는, 예를 들어 생체 외 전사될 수 있다. 이러한 DNA 기질은 바람직하게는 핵산 분자를 코딩하는 원하는 뉴클레오티드 서열, 예를 들어 제조될 mRNA 및 생체 외 전사를 위한 종결 신호에 따르는, 생체 외 전사를 위해, 적절한 프로모터, 예를 들어 T7 또는 SP6 프로모터를 포함한다. 잔여 RNA의 적어도 하나의 기질을 형성하는 DNA 분자는 발효성 증식 및 박테리아에서 복제될 수 있는 플라스미드의 일부로써 차후(subsequent) 동정(isolation)에 의해 제조될 수 있다. 본 발명에 적합한 것으로 언급될 수 있는 플라스미드는 예를 들어 플라스미드 pT7Ts(GenBank accession number U26404; Lai et al., Development 1995, 121: 2349 to 2360), pGEM® 시리즈, 예를 들어 pGEM®-1 (GenBank accession number X65300; from Promega) 및 pSP64 (GenBank accession number X65327); 또한 Mezei and Storts, Purification of PCR Products, in: Griffin and Griffin (ed.), PCR Technology: Current Innovation, CRC Press, Boca Raton, FL, 2001 참조.
단백질: 단백질은 전형적으로 생물학적 기능을 촉진하는 3차원 형태로 접히는 하나 또는 그 이상의 폴리펩타이드로 구성된다.
펩타이드: 펩타이드는 전형적으로 펩타이드 결합에 의해 연결된 아미노산 모노머의 짧은 폴리머이다. 이는 전형적으로 50 모노머 단위 미만을 포함한다. 그럼에도 불구하고, 용어 펩타이드는 50 모노머 단위 이상을 갖는 분자에 대해 부인하지(disclaimer) 않는다. 긴 펩타이드는 또한 전형적으로 50 및 600 모노머 단위 사이, 더욱 구체적으로는 50 및 300 모노머 단위 사이를 갖는, 폴리펩타이드로 불린다. 게다가 "펩타이드"는 펩타이드 유사체를 포함하는, 어떠한 펩티딜 분자를 포함하기 위해 본 발명에서 정의된다.
펩타이드 유사체: 펩타이드 유사체는 전형적으로 본 발명의 목적을 위해 사용될 수 있는 자연 또는 비-자연적 발생 아미노산을 포함할 수 있다. 예를 들어 그들은 아미노산의 등배전자체(isostere) 또는 비대칭 유사체(chiral analog)(D-아미노산 또는 L-아미노산)으로부터 선택된 아미노산을 포함할 수 있다. 추가적으로, 유사체는 바람직하게는 하이드록시프롤린(hydroxyproline), 베타-알라닌(β-alanine), 2,3-디아미노프로피온산(2,3-diaminopropionic acid), 알파-아미노이소부틸산(α-aminoisobutyric acid), N-메틸글리신(N-methylglycine)(사르코신(sarcosine)), 오르니틴(ornithine), 시트룰린(citrulline), t-부틸알라닌(t-butylalanine), t-부틸글리신(t-butylglycine), N-메틸이소루신(N-methylisoleucine), 페닐글리신(phenylglycine), 사이클로헥실알라닌(cyclohexylalanine), 놀루신(norleucine), 나프틸알라닌(naphthylalanine), 피리딜아나닌 3-벤조티에닐 알라닌 4-클로로페닐알라닌(pyridylananine 3- benzothienyl alanine 4-chlorophenylalanine), 2-플루오로페닐알라닌(2-fluorophenylalanine), 3-플루오로페닐알라닌(3- fluorophenylalanine), 4-플루오로페닐알라닌(4-fluorophenylalanine), 페니실라민(penicillamine), 1,2,3,4-테트라하이드로-틱 이소퀴놀린-3-카르복실산 [베타]-2티에닐아닐린(1,2,3,4-tetrahydro-tic isoquinoline-3-carboxylic acid [beta]-2-thienylalanine), 메티오닌 설폭사이드(methionine sulfoxide), 호모아르기닌(homoarginine), N-아세틸 리신(N-acetyl lysine), 2,4-디아미노 부틸산(2,4-diamino butyric acid), p-아미노페닐알라닌(p-aminophenylalanine), N-메틸발린(N-methylvaline), 호모시스테인(homocysteine), 호모세린(homoserine), ε-아미노헥사노익산(ε-amino hexanoic acid), δ-아미노 발레릭산(δ-amino valeric acid), 2,3-디아미노부틸산(2,3- diaminobutyric acid)으로부터 선택된 하나 또는 그 이상의 아미노산을 포함할 수 있다. 본 발명에 정의된 펩타이드 유사체는 변형된 펩타이드를 더 포함할 수 있다. 용어는 구체적으로 기술분야에서 통상의 기술자에게 알려진 펩타이드 백-본 변형(즉 아미드 결합 모방(mimetics))을 포함한다. 이러한 변형은 아미드 질소, 알파-탄소, 아미드 카보닐, 아미드 결합의 완전한 교체, 확장, 결실 또는 백본 교차결합의 변형을 포함한다. ψ[CH2S], ψ[CH2NH], ψ[CSNH2], ψ[NHCO], ψ[COCH2], 및 ψ[(E) 또는 (Z) CH=CH]를 포함하는, 몇몇 펩타이드 백본 변형은 알려져 있다. 상기 사용된 명명법에서, ψ은 아미드 결합의 부재를 가리킨다. 아미드 그룹을 교체하는 구조는 브래킷(brackets) 내에 구체화된다. 다른 변형은 예를 들어 N-알킬(또는 아릴) 치환(ψ[CONR]), 또는 락탐 및 다른 원형(cyclic) 구조를 만들기 위한 백본 가교결합, C-말단 하이드록시메틸 변형, O-변형된 변형(예를 들어 C-말단 하이드록시메틸 벤질 에터), 알킬아니드(alkylaniides) 및 하이드라자이드(hydrazides)와 같은 치환된 아미드를 포함하는 N-말단 변형을 포함한다.
펩타이드 합성: 펩타이드, 펩타이드 유사체, 또는 이들의 유도체는 바람직하게는 통상의 기술자에게 알려진 화학적 방법을 사용하여 합성된다. 예를 들어, 합성 펩타이드는 고체상, 액체상 또는 펩타이드 응축, 또는 이들의 어떤 조합의 알려진 기술을 사용하여 제조되고, 자연 및/또는 비자연적 아미노산을 포함할 수 있다. 일반적으로 화학적 합성 방법은 펩타이드 체인을 성장시키기 위해 하나 또는 그 이상의 아미노산의 순차적인 추가를 포함한다. 보통, 첫번째 아미노산의 아미노 또는 카로복실 기는 적절한 보호기에 의해 보호된다. 보호되거나 유도된(derivatized) 아미노산은 아미드 결합의 형성을 허용하는 조건 하에서, 이후 불활성 고체 지지(support)에 결합되거나 적절히 보호된 상보적(아미노 또는 카르복실) 그룹을 갖는 서열 내 다음 아미노산의 추가에 의해 용액 내에서 활용된다. 보호기는 이후 새로 첨가된 아미노산 잔기로부터 제거되고 다음 아미노산(적절히 보호된)이 이후 첨가 등이 된다. 원하는 아미노산이 적절한 서열에 결합된 이후, 어느 잔여 보호기(및 만약 고체 상 합성 기술이 사용될 경우, 어느 고체 지지)는 최종 폴리펩타이드를 만들기 위해 순차적 또는 동시적으로 제거된다. 이들 방법은 본 발명의 목적을 위해 사용된 펩타이드(펩타이드 유사체와 같은) 또는 이의 유도체의 합성에 적절하다. 전형적인 보호기는 t-부틸옥시카보닐(t-butyloxycarbonyl, Boc), 9-플루오레닐메톡시카보닐(9- fluorenylmethoxycarbonyl, Fmoc) 벤질옥시카보닐(benzyloxycarbonyl, Cbz); p-톨루엔설포닐(p-toluenesulfonyl, Tx); 2,4-디니트로페닐(2,4-dinitrophenyl); 벤질(benzyl, BzI); 디페닐이소프로필옥시카르복시-카보닐(biphenylisopropyloxycarboxy-carbonyl), t-아밀옥시카보닐(t- amyloxycarbonyl), 이소보닐옥시카보닐(isobornyloxycarbonyl), o-브로모벤질옥시카보닐(o-bromobenzyloxycarbonyl), 사이클로헥실(cyclohexyl), 이소프로필(isopropyl), 아세틸(acetyl), 및 o-니트로페닐설포닐(o-nitrophenylsulfonyl) 등을 포함한다. 전형적인 고체 지지는 가교 결합된 폴리머 지지이다. 이들은 디비닐벤젠 가교-결합된-스티렌 베이스 폴리머(divinylbenzene cross-linked-styrene-based polymers), 예를 들어, 디비닐벤젠-하이드록시메틸스테린 코폴리머(divinylbenzene- hydroxymethylstyrene copolymers), 디비닐벤젠- 클로로메틸스티렌 코폴리머(divinylbenzene- chloromethylstyrene copolymers) 및 디비닐벤젠-벤즈하이드릴아미노폴리스티렌 코폴리머(divinylbenzene-benzhydrylaminopolystyrene copolymers)를 포함할 수 있다.
재조합 펩타이드 또는 단백질 생산: 펩타이드 또는 단백질 또는 이의 유도체는 재조합 단백질 또는 펩타이드 생산을 사용하여 생산될 수 있다. 재조합 펩타이드 또는 단백질의 생산을 촉진하기 위해, 같은 것을 코딩하는 적어도 하나의 핵산은 바람직하게는 동정되거나 합성된다. 전형적으로 재조합 단백질 또는 펩타이드를 코딩하는 핵산은 예를 들어 하나 또는 그 이상의 제한 효소를 사용하여 유기체로부터 핵산으로부터 증폭(예를 들어 PCR 사용) 또는 동정하거나 핵산 라이브러리로부터 동정과 같이, 알려진 방법을 사용하여 동정된다. 재조합 수단에 의한 단백질 또는 펩타이드의 발현을 위해, 단백질/펩타이드를 코딩하는 핵산은 세포가 없는 시스템 또는 세포 시스템 내 발현을 조절할 수 있는 프로모터 또는 다른 조절 서열과 결합하여 작동하도록 위치한다. 예를 들어 펩타이드 또는 단백질을 코딩하는 서열을 포함하는 핵산은 적절한 프로모터와 결합하여 작동하도록 위치하고 발현이 발생하기에 충분한 시간 동안 및 조건 하에 적절한 세포 내 유지된다. 생체 외 발현, 세포-없는 발현 또는 세포-기초 발현을 위한 전형적인 발현 벡터는 설명되었고 통상의 기술자에게 잘 알려져 있다. 이러한 맥락에서 세포-없는 발현 시스템은 E. coli S30 분획, 토끼 망상적혈구 용해질(rabbit reticulocyte lysate) 및 맥아 추출물을 포함할 수 있고 세포 시스템은 박테리아(예를 들어 대장균), 곤충, 식물 또는 포유류 세포(예를 들어 293, COS, CHO, 1OT cells, 293T cells)로부터 선택될 수 있다.
분비성 신호 펩타이드: 이러한 신호 펩타이드는 약 15 내지 30 아미노산의 길이를 전형적으로 보이는 서열이며, 코딩된 펩타이드의 N-말단에 바람직하게 위치할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 본 발명에서 정의된 신호 펩타이드는 바람직하게는 정의된 세포 구획(compartment), 바람직하게는 세포 표면, 소포체(endoplasmic reticulum, ER) 또는 엔도소말-리소소말(endosomal-lysosomal) 구획 내로 단백질 또는 펩타이드의 이송을 허용한다.
담체/폴리머 담체: 본 발명의 맥락에서 담체는 전형적으로 다른 화합물의 수송 및/또는 복합화를 촉진하는 화합물일 수 있다. 폴리머 담체는 전형적으로 폴리머의 형태의 담체이다. 본 발명의 맥락에서 담체는 바람직하게는 예를 들어 생리학적으로 허용가능한 액체 내 용해, 핵산 분자 또는 벡터의 수송 및 세포 흡수를 조절하기 위해, 핵산 분자에 담체로써 적절하다. 따라서, 본 발명의 맥락에서 담체는 저장 및 핵산 분자 또는 벡터의 전달에 적합할 수 있는 성분일 수 있다. 이러한 담체는 예를 들어 형질전환 또는 복합화 제제로 제공될 수 있는 양이온성 또는 다중양이온성(polycationic) 담체 또는 화합물일 수 있다. 특히 이러한 맥락에서 바람직한 담체 또는 폴리머 담체는 프로타민(protamine), 뉴클레올린(nucleoline), 스페르민(spermine) 또는 스페르미딘(spermidine), 또는 다른 양이온성 펩타이드 또는 단백질, 폴리-L-리신(poly-L-lysine, PLL), 폴리-아르기닌(poly-arginine)와 같은, 염기성 폴리펩타이드(basic polypeptides), 세포 관통 펩타이드(cell penetrating peptides, CPPs), HIV-결합 펩타이드 포함, HIV-1 Tat (HIV), Tat-유도된 펩타이드, 페네트라틴(Penetratin), VP22 유도되거나 유사체 펩타이드, HSV VP22 (헤르페스 심플렉스(Herpes simplex)), MAP, KALA 또는 단백질 이송 도메인(protein transduction domains, PTDs), PpT620, 프롤린 풍부 펩타이드(prolin-rich peptides), 아르기닌 풍부 펩타이드(arginine-rich peptides), 리신 풍부 펩타이드(lysine-rich peptides), MPG-펩타이드(s), Pep-1, L-올리고머, 칼시토닌 펩타이드(Calcitonin peptide(s)), 안테나페디아-유도된 펩타이드(Antennapedia-derived peptides)(특히 초파리(Drosophila antennapedia)로부터), pAntp, pIsl, FGF, 락토페린, 트랜스포탄(Transportan), 부포린-2(Buforin-2), Bac715-24, SynB, SynB(1), pVEC, hCT-유도된 펩타이드, SAP, 또는 히스톤을 포함하는 양이온성 또는 다중양이온성 화합물이다. 본 발명의 맥락에서, 이러한 양이온성 또는 다중 양이온성 담체는 바람직하게는, 이황화 결합, 바람직하게는 -SH 부위를 형성할 수 있는, 바람직하게는 포함하거나 적어도 하나의 부위를 포함하기 위해 추가적으로 변형될 수 있는 양이온성 또는 다중 양이온성 펩타이드 또는 단백질이다.
양이온성 성분: 용어 "양이온성 성분"은 전형적으로 전하를 띤 분자를 말하며, 이는 약 전형적으로 1 내지 9의 pH 값에, 바람직하게는 또는 9 미만(예를 들어 5 내지 9)의, 또는 8 미만(예를 들어 5 내지8)의, 또는 7미만(예를 들어 5 내지7)의, 가장 바람직하게는 예를 들어 약 7.3 내지 7.4 생리학적 pH 값에 양전하를(양이온) 띤다. 따라서, 본 발명에 따르는 양이온성 펩타이드는, 단백질 또는 폴리머는 생리학적 조건 하에서, 특히 생체 내 세포의 생리학적 염 조건 하에서, 양전하를 띤다. 양이온성 펩타이드 또는 단백질은 양이온성 아미노산의 다수, 예를 들어 음전하를 띠거나 중성 아미노산에 비해, Arg, His, Lys 또는 Orn의 다수를 포함한다. 바람직한 실시예에서 본 발명의 맥락에서 양이온성 펩타이드 또는 단백질은 양이온성 아미노산의 다수, 예를 들어 다른 잔기에 비해 Arg, His, Lys 또는 Orn의 다수를 포함한다. 정의 "양이온성"은 또한 "다중양이온성" 성분을 언급할 수 있다.
본 발명에서 정의된 양이온성 성분 또는 폴리머 담체 화물 복합체(A)와 같은 화합물, 복합체 또는 성분의 전하는, 예를 들어 약 5.5 및 7.5 사이의 pH에서, 약 7.0과 같이, 바람직하게는 약 6.0 및 7.4 사이의 pH에서, 약 25°C 및 40°C 사이의 온도에서, 약 37°C와 같이, 바람직하게는 약 35 및 38°C의 온도에서, 예를 들어 약 130 및 160 mM 사이의 생리학적 염 농도에서, 약 137mM과 같이, 바람직하게는약 137mM 및 150mM 사이에서, 바람직하게는 생리학적 조건 하에서 결정 또는 측정될 수 있다. 특히 본 발명에서 정의된 화합물, 복합체 또는 성분의 전하를 결정 또는 측정하는 바람직한 조건은 25°C에서 100% 링거 락테이트(Ringer lactate) 용액 내의 조건으로 밝혀졌다.
제타전위: "제타전위"는 입자의 전기적 표면 전하를 위해 광범위하게 사용되는 파라미터이다. 이는 전형적으로 전기장을 통해 전하를 띤 입자가 움직임으로써 결정된다. 본 발명의 맥락에서, 제타전위는 입자, 예를 들어 본 발명에 따른 약학적 조성물의 복합체(A)의 전하를 특정하는 바람직한 파라미터이다. 따라서, 본 발명의 맥락에서, 입자의 전하는 바람직하게는 25°C 및 173°의 산란각에서 제타사이저 나노 기구(Zetasizer Nano instrument)(Malvern Instruments, Malvern, UK)를 사용하여 레이저 도플러 전기천공법(laser Doppler electrophoresis method)에 의해 제타전위 결정에 의해 결정된다. 주어진 입자의 표면 전하는 또한 활용된 기질의 이온 강도(예를 들어 염 포함 버퍼) 및 용액의 pH에 의존한다. 따라서, 전하 비율(N/P)에서 주어진 복합체(A)의 실제 제타전위는 주사에 사용된 다른 버퍼 사이에 약간 다를 수 있다. 측정을 위해, 본 발명에 따른 약학적 조성물의 복합체(A)와 같은 입자는 바람직하게 링거 락테이트 용액 내 현탁된다. 본 발명은 따라서 주어진 주사 버퍼의 조건 하에서, 바람직하게는 링거 락테이트 용액의 조건 하에서, 이의 제타전위에 의해 측정된, 음전하를 띤 복합체(A)의 사용을 주장한다. 본 발명에 따른 링거 락테이트 용액은 바람직하게는 130 mmol/L 소듐 이온, 109 mmol/L 클로라이드 이온, 28 mmol/L 락테이트, 4 mmol/L 포타슘 이온 및 1.5 mmol/L 칼슘 이온을 포함한다. 소듐, 클로라이드, 포타슘, 및 락테이트는 전형적으로 NaCl(소듐 클로라이드), NaC3H5O3(소듐 락테이트), CaCl2(칼슘 클로라이드), 및 KCl(포타슘 클로라이드)로부터 유래된다. 링거 락테이트 용액의 삼투압은 273 mOsm/L 이며 pH는 6.5로 조절된다.
약학적으로 유효한 양: 본 발명의 맥락에서 약학적으로 유효한 양은 전형적으로 면역 반응을 유도하기에 충분한 양으로 이해된다.
면역 시스템: 면역 시스템은 유기체를 예를 들어 감염으로부터 보호할 수 있다. 만약 병원체가 유기체의 물리적 장벽을 뚫고 유기체로 침입하면, 선천적 면역 시스템은 즉시, 단 비-특이적인 반응을 제공한다. 만약 병원체가 이러한 선천적 반응을 침범하면, 척추동물은 보호의 두번째 층, 적응 면역 시스템을 갖는다. 여기에 면역 시스템은 병원체의 이의 인식을 증진시키기 위해 감염 동안 이의 반응을 맞춘다. 이러한 증진된 반응은 면역학적 기억의 형태로, 이후 병원체가 소멸된 이후에 남고, 이 병원체와 맞닥뜨릴 때 마다 빠르고 강력한 공격을 시작하는 적응 면역 시스템을 허용한다. 이에 따라, 면역 시스템은 선천적 및 적응 면역 시스템을 포함한다. 이들 두 부분의 각각은 소위 체액성 및 세포성 성분이다.
면역 반응: 면역 반응은 전형적으로 특정한(particular) 항원에 대한 적응 면역 시스템의 특이적(specific) 반응(소위 특이적 또는 적응 면역 반응) 또는 선천적 면역 시스템의 비특이적 반응(소위 비특이적 또는 선천적 면역 반응)일 수 있다. 본질적으로, 발명은 적응 면역 시스템의 특이적 반응(적응 면역 반응)과 관련된다. 그러나 이러한 특이적 반응은 추가적인 비특이적 반응(선천적 면역 반응)에 의해 지지될 수 있다. 따라서, 발명은 또한 충분한 적응 면역 반응을 떠올리기 위해 선천적 및 적응 면역 시스템의 동시 자극을 위한 화합물 또는 조성물과 관련된다.
적응 면역 반응: 적응 면역 반응은 전형적으로 항원-특이적인 것으로 이해된다. 항원 특이성은 특이적 항원, 항원-발현 세포, 병원체 또는 병원체-감염된 세포에 맞춰진 반응의 발생을 허용한다. 이들 맞춰진 반응을 시작하는 능력은 "기억 세포"에 의해 체내에 유지된다. 병원체가 인체를 한번 이상 감염해야 하고, 이들 특이적 기억 세포는 이를 빠르게 제거하는데 사용된다. 이러한 맥락에서, 적응 면역 반응의 첫번째 단계는 항원-제시 세포에 의한 항원 특이적 면역 반응을 유도할 수 있는 순수한 항원 특이적 T 세포 또는 다른 면역 세포의 활성화이다. 이는 순수한 T 세포가 지속적으로 지나는 림프 조직 및 기관 내에 발생한다. 항원 제시 세포로 제공될 수 있는 세포 타입은 그 중에서도 수상돌기세포, 대식세포, 및 B 세포이다. 이들 세포의 각각은 면역 반응을 유도하는데 뚜렷한 기능을 갖는다. 수상돌기세포는 그들이 성숙 수상돌기세포로 분화하는 곳에서 식균작용(phagocytosis) 및 대식세포작용(micropinocytosis)에 의해 항원을 흡수하고 예를 들어 국소 림프 조직에 외래 항원을 이동시킴과 함께 접촉에 의해 자극된다. 대식세포는 박테리아와 같은 입자 항원을 섭취하고 MHC 분자를 표현하는 감염성 항원 또는 다른 적절한 자극에 의해 유도된다. 그들의 수용체를 통해 용해성 단백질 항원을 결합 및 내재화(internalize)하는 B 세포의 특수한 능력은 T 세포를 유도하는데 또한 중요할 수 있다. MHC 분자에 항원의 제시는 무장(armed) 주효 T 세포로 그들의 증식 및 분화를 유도하는 T 세포의 활성화를 일으킨다. 주효 T 세포의 가장 중요한 기능은 함께 세포-매개 면역을 일으키는 CD8+ 세포독성 T 세포에 의한 감염된 세포의 사멸 및 Th1 세포에 의한 대식세포의 활성화, 및 그에 따라 체액성 면역 반응을 일으키는, 다른 종류의 항체를 생산하는 Th2 및 Th1 모두에 의한 B 세포의 활성화이다. T 세포는 항원을 직접적으로 인식 및 결합하지 못하는 그들의 T 세포 수용체에 의한 항원을 인식하지만, 그러나 대신 다른 세포의 표면에 MHC 분자에 결합하는, 예를 들어 병원체 유래 단백질 항원의, 짧은 펩타이드 절편을 인식한다.
적응 면역 시스템: 적응 면역 시스템은 전형적으로 병원체 생장을 제거 또는 방해하는 매우 특수화된, 전신 세포(systemic cells) 및 과정으로 구성된다. 적응 면역 반응은 특이적 병원체(면역을 발생시키는)를 인식 및 기억하고 병원체를 맞닥뜨릴때마다 강한 공격을 시작하는 능력을 갖는 척추동물 면역 시스템을 제공한다. 시스템은 체세포초돌연변이(somatic hypermutation)(가속된 체세포 돌연변이의 과정), 및 V(D)J 재조합(항원 수용체 유전자 부분(segments)의 비가역적 유전적 재조합)에 의해 매우 적응할 수 있다. 이러한 메커니즘은 이후 각 개별적인 림프구에 독특하게 발현된 이후, 다른 항원 수용체의 방대한 수를 발생시키는 유전자의 소수를 허용한다. 유전자 재배열은 각 세포의 DNA에 비가역적 변화를 일으키기 때문에, 수명이 긴 특이적 면역에 대해 핵심(key)인 기억 B 세포 및 기억 T 세포를 포함하는, 그 세포의 자손(progeny)(후손(offspring)) 모두는 이후 동일한 수용체 특이성을 코딩하는 유전자를 상속할 것이다. 면역 네트워크 이론은 다양한 부위를 갖는 T 세포, B 세포 및 T 세포 및 B 세포에 의해 만들어진 분자의 수용체의 다양한 부위 사이의 상호작용에 기초하는, 적응 면역 시스템이 어떻게 작동하는지에 대한 이론이다.
선천적 면역 시스템: 전형적으로, 또한 비-특이적 면역 시스템으로 알려진 선천적 면역 시스템은 비특이적 조건에 다른 유기체에 의한 감염으로부터 숙주를 방어하는 세포 및 메커니즘을 포함하는 것으로 이해된다. 이는 선천적 면역 시스템의 세포는 일반적으로 병원체를 인식 및 반응하지만, 적응 면역 시스템과는 다르게 숙주에 오래 지속되거나 방어적 면역을 부여하지 않는 것을 의미한다. 선천적 면역 시스템은 예를 들어 병원체-관련된 분자 패턴(PAMP) 수용체의 리간드, 예를 들어 Toll-유사 수용체(TLRs) 또는 리포폴리다당류(lipopolysaccharides), TNF-알파, CD40 리간드, 또는 사이토카인, 모노카인(monokines), 림포카인(lymphokines), 인터루킨(interleukins) 또는 케모카인(chemokines), IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-12, IL-13, IL-14, IL-15, IL-16, IL-17, IL-18, IL-19, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, IL-24, IL-25, IL-26, IL-27, IL-28, IL-29, IL-30, IL-31, IL-32, IL-33, IFN-알파, IFN-베타, IFN-감마, GM-CSF, G-CSF, M-CSF, LT-베타, TNF-알파, 성장 인자, 및 hGH, 인간 Toll-유사 수용체 TLR1, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8, TLR9, TLR10의 리간드, 쥣과(murine) Toll-유사 수용체 TLR1, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8, TLR9, TLR10, TLR11, TLR12 또는 TLR13의 리간드, NOD-유사 수용체의 리간드, RIG-I 유사 수용체의 리간드, 면역 자극성 핵산, 면역 자극성 RNA (isRNA), CpG-DNA, 항생제, 또는 항바이러스제와 같은 다른 보조(auxiliary) 물질에 의해 활성화될 수 있다. 전형적으로 선천적 면역 시스템의 반응은 사이토카인으로 불리는 특수한 화학 조절자를 포함하는, 화학적 인자의 생산을 통해, 감염의 부위에 면역 세포를 모으는 것(recruiting); 보체 연쇄(cascade)의 활성화; 특수한 백혈구 세포에 의해 기관, 조직, 혈액 및 림프 내에 존재하는 외래 물질의 선별 및 제거; 항원 제시로 알려진 과정을 통해 적응 면역 시스템의 활성화; 및/또는 감염성 제제에 물리적 및 화학적 장벽으로 활동을 포함한다.
세포 면역/세포 면역 반응: 세포 면역은 전형적으로 대식세포, 자연살상 세포(natural killer cells, NK), 항원 특이적 세포독성 T-림프구의 활성화, 및 항원에 반응하는 다양한 사이토카인의 방출과 관련된다. 보다 일반적인 방식으로, 세포 면역은 항체뿐만 아니라 면역 시스템의 세포의 활성화와 관련되지 않는다. 세포 면역 반응은 예를 들어 바이러스 감염된 세포, 세포내 박테리아가 있는 세포, 및 종양 항원을 보이는 암 세포와 같은 그들의 표면에 항원의 에피토프(epitopes)를 보이는 체 세포내 세포사멸을 유도할 수 있는 항원 특이적 세포독성 T-림프구의 활성화; 병원체를 파괴할 수 있는 대식세포 및 자연살생 세포의 활성화; 및 적응 면역 반응 및 선천적 면역 반응에 포함된 다른 세포의 기능에 영향을 주는 다양한 사이토카인을 방출하는 세포의 자극이 특징이다.
체액 면역/체액 면역 반응: 체액 면역은 전형적으로 항체 생산 및 이에 동반될 수 있는 부가적인 과정을 말한다. 체액 면역 반응은 전형적으로 예를 들어 Th2 활성화 및 사이토카인 생산, 배종(germinal) 중앙 형성 및 동형 전환(switching), 친화도 성숙 및 기억 세포 발생에 의해 특징될 수 있다. 체액 면역은 또한 전형적으로 병원체 및 독성 중화, 고전적(classical) 보체 활성화, 및 식균작용의 옵소닌 촉진 및 병원체 제거를 포함하는, 항체의 주효 기능을 말할 수 있다.
항원: 본 발명에 따르면, 용어 "항원"은 전형적으로, 예를 들어 적응 면역 반응의 일부로써 항체 또는 항원 특이적 T 세포의 형성을 통해, 면역 시스템에 의해 인지될 수 있고 항원 특이적 면역 반응을 일으킬 수 있는 물질을 말한다. 전형적으로, 항원은 단백질 또는 펩타이드뿐만 아니라 당, 지질, 핵산 등의 구조일 수 있다. 이러한 맥락에서 적응 면역 반응의 첫번째 단계는 항원 제시 세포에 의한 순수 항원 특이적 T 세포의 활성화이다. 이는 순수 T 세포가 지속적으로 통과하는 림프 조직 및 기관에서 발생한다. 항원 제시 세포로 제공될 수 있는 세가지 세포 타입은 수상돌기세포, 대식세포 및 B 세포이다. 이들 세포 각각은 면역 반응을 촉진하는데 뚜렷한 기능을 갖는다. 조직 수상돌기 세포는 그들이 성숙 수상돌기 세포로 분화하는 곳에서, 식균작용 및 대식세포작용에 의해 항원을 흡수하고 국소 림프 조직에 이동하는 감염에 의해 자극된다. 대식세포는 박테리아와 같은 입자 항원을 섭취하고 MHC 클래스 II 분자를 발현하는 감염성 제제에 의해 유도된다. 그들의 수용체를 통해 용해성 단백질 항원을 결합 및 내재화하는 B 세포의 독특한 능력은 T 세포를 유도하는데 중요할 수 있다. MHC 분자에 항원 제시를 통해 무장 주효 T 세포로 그들의 증식 및 분화를 유도하는 T 세포의 활성화를 일으킨다. 주효 T 세포의 가장 중요한 기능은 함께 세포-매개 면역을 일으키는 CD8+ 세포독성 T 세포에 의한 감염된 세포의 사멸 및 Th1 세포에 의한 대식세포의 활성화, 및 그에 따라 체액성 면역 반응을 일으키는, 다른 종류의 항체를 생산하는 Th2 및 Th1 모두에 의한 B 세포의 활성화이다. T 세포는 항원을 직접적으로 인식 및 결합하지 못하는 그들의 T 세포 수용체에 의한 항원을 인식하지만, 그러나 대신 다른 세포의 표면에 MHC 분자에 결합하는, 예를 들어 병원체의(pathogens') 단백질 항원의, 짧은 펩타이드 절편을 인식한다.
T 세포는 다른 주효 기능을 갖는 두가지 주요 클래스로 나뉜다. 두가지 클래스는 세포 표면 단백질 CD4 및 CD8의 발현에 의해 구별된다. 이들 T 세포의 두가지 타입은 그들이 인지하는 MHC 분자의 클래스에 따라 다르다. 체내 조직에서 그들의 구조 및 발현 패턴이 다른, MHC 분자의 두가지 클래스 -MHC 클래스 I 및 MHC 클래스 II 분자- 가 있다. CD4+ T 세포는 MHC 클래스 II 분자에 및 CD8+ T 세포는 MHC 클래스 I 분자에 결합한다. MHC 클래스 I 및 MHC 클래스 II 분자는 그들을 인지하는 T 세포의 다른 주효 기능을 비추는 세포들 사이에 뚜렷한 분포를 갖는다. MHC 클래스 I 분자는 그들이 특수하게 인지하는 어느 세포를 사멸시키는데 특수한 세포 독성 T 세포로 분화되는 CD8+ T 세포에 병원체, 통상적인 바이러스로부터 펩타이드를 제시한다. 비록 구성요소(constitutive) 발현의 수준이 하나의 세포 타입과 이웃이 서로 다르더라도, 대부분의 모든 세포는 MHC 클래스 I 분자를 발현한다. 바이러스로부터 오직 병원체 펩타이드뿐만이 MHC 클래스 I 분자에 의해 제시되는 것이 아니라, 또한 종양 항원과 같은 자가 항원은 그들에 의해 제시된다. MHC 클래스 I 분자는 시토졸(cytosol)에서 분해된 단백질로부터 펩타이드에 결합하고 소포체로 이송된다. 그에 따라 바이러스 또는 다른 시토졸 병원체에 감염된 세포의 표면에 MHC 클래스 I 분자는 이들 병원체 유래 펩타이드를 보인다. MHC 클래스 I:펩타이드 복합체를 인지하는 CD8+ T 세포는 외래 펩타이드를 보이는 어느 세포를 죽이도록 특수화되고 따라서 바이러스 및 다른 시토졸 병원체로 감염된 세포의 몸체를 제거한다. MHC 클래스 II 분자를 인식하는 CD4+ T 세포(CD4+ 도움 T 세포)의 주요 기능은 면역 시스템의 다른 주효 세포를 활성화하는 것이다. 따라서 MHC 클래스 II 분자는 일반적으로 B 림프구, 수상돌기 세포, 및 대식세포, 면역 반응에 참여하는 세포에서, 단 다른 조직 세포는 제외하고 발견된다. 대식세포는 예를 들어 그들이 하버(harbour) 방광내(intravesicular) 병원체를 사멸시키기 위해, 그리고 B 세포는 외래 분자에 대한 면역글로불린을 방출하기 위해 활성화된다. MHC 클래스 II 분자는 소포체 내 펩타이드에 결합으로부터 억제되고 따라서 MHC 클래스 II 분자는 엔도솜(endosomes)에서 분해된 단백질로부터 펩타이드에 결합한다. 그들은 대식세포의 소낭 시스템에 침입한 병원체로부터, 또는 미성숙 수상돌기 세포 또는 B 세포의 면역글로불린 수용체에 의해 내재화된 항원으로부터 펩타이드를 포획할 수 있다. 대식세포 및 수상돌기 세포 소포(vesicles) 내 다수 축적된 병원체는 TH1 세포의 분화를 촉진하는 경향이 있는 반면, 세포 외 항원은 TH2 세포의 생산을 촉진하는 경향이 있다.
TH1 세포는 대식세포의 살균(microbicidal) 특성 및 식균 세포에 의해 소화를 위한 세포 외 병원체의 옵소닌 작용이 매우 효과적인 IgG 항체를 만들기 위한 B 세포를 유도를 활성화하는 반면, TH2 세포는 IgM을 방출하기 위해 순수 B 세포의 활성화에 의해 체액 반응을 시작하고, IgG1 및 IgG3(마우스) 및 IgG2 및 IgG4(인간) 뿐만 아니라 IgA 및 IgE(마우스 및 인간)과 같은 약한 옵소닌 작용 항체의 생산을 유도한다.
백신: 백신은 전형적으로 적어도 하나의 항원 또는 항원 기능을 제공하는 예방(prophylactic) 또는 치료 물질로 이해된다. 항원 또는 항원 기능은 적응 면역 반응을 제공하는 인체의 적응 면역 시스템을 자극할 수 있다.
면역 자극 제제: 용어 "면역 자극 제제"는 전형적으로, 면역 경쟁 세포에 의해 외래로 인식되는 항원의 구조적 특성에 특이적인 반응이 특징인, 즉 면역 반응(및 그들 스스로에 의한 면역을 부여)을 촉진하는, 적응/세포독성 면역 반응, 예를 들어 "체액" 또는 "세포" 면역 반응을 유도하는, 예를 들어 항원(어떤 화학적 구조의)처럼 제제를 포함하지 않는 것으로 이해된다. 오히려, "면역자극 제제"에 의해, 전형적으로 예를 들어 "PAMP" 수용체를 활성화하고 실제 적응/세포독성 면역 반응을 지지하는 사이토카인의 방출을 일으킴에 따라, 그들 자체에 의해 어떤 적응/세포독성 면역 반응을 일으키지 않으나, 비특이적 방법에서 이러한 적응/세포독성 면역을 독점적으로(exlusively) 증진시킬 수 있는, 제제/화합물/복합체를 의미하는 것으로 이해된다. 따라서, 그들 자체에 의한(그들 자체에 의해 직접 또는 간접적으로 면역을 부여) 적응 및/또는 세포 독성 면역 반응을 떠올리는 제제(예를 들어 항원)에 의한 어떤 면역자극은 구절(phrase) "면역 자극 제제"에 의해 전형적으로 부인된다(disclaimed).
어쥬번트(Adjuvant): 용어 "어쥬번트"는 전형적으로 그들 자체에 의해 면역을 부여하는 제제를 포함하지 않는 것으로 이해된다. 따라서, 어쥬번트는 전형적으로 그들 자체에 의한 면역을 부여하지 않을 수 있으나, 예를 들어 면역 시스템에 항원의 제시를 촉진함으로써, 항원 특이적 면역 반응을 증진시키는 다양한 방법에 면역 시스템을 돕는다. 이로써, 어쥬번트는 바람직하게는, 예를 들어 Th1-기초 항원 특이적 반응의 지배를 더욱 Th2- 기초 항원 특이적 반응 또는 역으로 변환함으로써, 예를 들어 항원 특이적 면역 반응을 조절할 수 있다. 본 발명의 맥락에서 따라서, 용어 "면역 자극 제제" 및 "어쥬번트"는 전형적으로 예를 들어 사이토카인 발현/분비, 증진된 항원 제시, 면역 반응의 암(arms)의 본성(nature)의 변환 등의 비특이적 수단에 의해 항원 특이적 조절하는(적응 세포 및/또는 체액 면역 반응), 그들 자체에 의한 면역을 부여하지 않으나, 효과에 의해 비특이적 방식(항원 특이적 면역 반응과 대조적)으로 면역 반응을 독점적으로 돕는 제제, 화합물 또는 복합체를 의미하는 것으로 이해된다. 따라서, 그들 자체에 의해 면역을 떠올리는 어떤 제제는 전형적으로 용어 "어쥬번트" 또는 "면역 자극성 제제"에서 부인된다.
면역 자극성 RNA: 본 발명의 맥락에서 면역 자극성 RNA(isRNA)는 그 자체로 선천적 면역 반응을 유도할 수 있는 RNA일 수 있다. 이는 보통 오픈 리딩 프레임을 갖지 않으며 따라서 펩타이드-항원을 제공하지 않으나 예를 들어 병원체 관련된 분자 패턴(PAMP) 수용체(예를 들어 Toll-유사 수용체(TLR) 또는 다른 적절한 수용체)의 특이적 종류에 결합함으로써 선천적 면역 반응을 유도한다. 그러나, 물론 또한 오픈 리딩 프레임 및 mRNAs 및 펩타이드/단백질(예를 들어 항원 기능)의 코딩을 갖는 mRNAs는 선천적 면역 반응을 유도할 수 있다.
서열의 절편: 서열의 절편은 전형적으로 예를 들어 핵산 서열 또는 아미노산 서열의 총 길이 서열의 짧은 부분이다. 따라서, 서열의 절편은 전형적으로 전체 길이 서열 내 상응하는 스트레치(stretch) 또는 상응하는 스트레치들(stretches)과 동일한 서열로 구성된다. 본 발명의 맥락에서 서열의 바람직한 절편은 절편이 유래된 전체(즉 총 길이) 분자의 적어도 5%, 바람직하게는 적어도 20%, 바람직하게는 적어도 30%, 더욱 바람직하게는 적어도 40%, 더욱 바람직하게는 적어도 50%, 더욱 더 바람직하게는 적어도 60%, 더욱 더 바람직하게는 적어도 70%, 및 가장 바람직하게는 적어도 80%를 나타내는, 절편이 유래된 분자 내 독립체(entities)의 연속적인 스트레치에 상응하는, 뉴클레오티드 또는 아미노산과 같은, 독립체의 연속적인 스트레치로 이루어진다. 따라서, 예를 들어 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편은 바람직하게는 전체(즉 총 길이) 단백질 또는 펩타이드 항원의 적어도 5%, 바람직하게는 적어도 20%, 바람직하게는 적어도 30%, 더욱 바람직하게는 적어도 40%, 더욱 바람직하게는 적어도 50%, 더욱 더 바람직하게는 적어도 60%, 더욱 더 바람직하게는 적어도 70%, 및 가장 바람직하게는 적어도 80%를 나타내는, 절편이 유래된 단백질 또는 펩타이드 항원 내 독립체의 지속적인 스트레치에 상응한다. 특히 서열의 절편은 기능적 절편인, 즉 절편은 절편이 유래된 서열에 의해 수행되는 기능의 하나 또는 그 이상을 수행하는 것이 바람직하다. 예를 들어, 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편은 바람직하게는 절편이 유래된 단백질 또는 펩타이드 항원의 적어도 하나의 항원 기능을 보인다(예를 들어 상기 단백질 또는 펩타이드 항원 내 적어도 하나의 항원 결정 요인(determinant)에 대한 특이적 면역 반응을 촉진할 수 있는).
단백질의 절편: 단백질 또는 펩타이드의 "절편"은, 즉 아미노산 서열의 절편, 본 발명의 맥락에서, 전형적으로, 본래(천연) 단백질의 아미노산 서열(또는 이의 코딩된 핵산 분자)에 비해 N-말단, C-말단 및/또는 내부 연속적으로(intrasequentially) 절단된(truncated) 이의 아미노산 서열(또는 이의 코딩 핵산 분자)에 관하여, 본 발명에서 정의된 단백질 또는 펩타이드의 서열을 포함할 수 있다. 이러한 절단(truncation)은 따라서 아미노산 수준 또는 상응되는 핵산 수준에 따라 발생할 수 있다. 본 발명에서 정의된 이러한 절편에 대한 서열 유사성은 따라서 바람직하게는 본 발명에서 정의된 전체 단백질 또는 펩타이드 또는 이러한 단백질 또는 펩타이드의 전체(코딩) 핵산 분자를 말할 수 있다.
마찬가지로 본 발명의 맥락에서 핵산 서열의 "절편"은 본래(천연) 핵산 분자의 핵산 분자에 비해 5'-, 3'- 및/또는 내부 연속적으로 절단된 이의 핵산 분자에 관하여, 본 발명에서 정의된 핵산의 서열을 포함할 수 있다. 본 발명에서 정의된 이러한 절편에 관하여 서열 상동성은 따라서 바람직하게는 본 발명에서 정의된 전체 핵산을 말할 수 있다.
본 발명의 맥락에서 단백질 또는 펩타이드의 바람직한 절편은 나아가 예를 들어 MHC 클래스 I 분자에 의해 가공되고 제시된 절편, 바람직하게는 약 8 내지 약 10 아미노산, 예를 들어 8, 9, 또는 10, (또는 6, 7, 11, 또는 12 아미노산)의 길이를 갖는, 또는 MHC 클래스 II 분자에 의해 가공 및 제시되는 절편, 바람직하게는 약 13 또는 그 이상의 아미노산, 예를 들어 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 또는 그 이상이 아미노산의 길이를 갖는, 약 6 내지 약 20 또는 그 이상의 아미노산의 길이를 갖는, 본 발명에서 정의된 단백질 또는 펩타이드의 서열을 포함할 수 있고, 상기 이들 절편은 아미노산 서열의 어느 일부로부터 선택될 수 있다. 이들 바람직한 절편은 전형적으로 펩타이드 절편 및 MHC 분자로 이루어진 복합체의 형태로 T-세포에 의해 인식될 수 있어, 즉 절편은 전형적으로 그들의 천연 형태로 인식되지 않는다. 단백질 또는 펩타이드의 절편은 이들 단백질 또는 펩타이드의 적어도 하나의 에피토프를 포함할 수 있다. 게다가 또한, 세포외 도메인, 세포내 도메인 또는 막관통(transmembrane) 도메인 및 단백질의 짧거나 절단된 버전(versions)과 같이 단백질의 도메인은 단백질의 절편을 포함하는 것으로 이해될 수 있다.
에피토프(Epitope): (또한 "항원 결정요인"으로 불림): 본 발명의 맥락에서 T 세포 에피토프 또는 단백질의 일부는 예를 들어 MHC 클래스 I 분자에 의해 가공되고 제시된 절편, 바람직하게는 약 8 내지 약 10 아미노산, 예를 들어 8, 9, 또는 10, (또는 11, 또는 12 아미노산)의 길이를 갖는, 또는 MHC 클래스 II 분자에 의해 가공되고 제시된 절편, 바람직하게는 약 13 또는 그 이상의 아미노산, 예를 들어 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 또는 그 이상의 아미노산의 길이를 갖는, 바람직하게는 약 6 내지 약 20 또는 그 이상의 아미노산을 갖는 절편을 포함할 수 있고, 상기 이들 절편은 아미노산 서열의 어느 일부로부터 선택될 수 있다. 이들 절편은 전형적으로 펩타이드 절편 및 MHC 분자로 이루어진 복합체의 형태에서 T 세포에 의해 인식되고, 즉 절편은 전형적으로 그들의 천연 형태로 인식되지 않는다.
B 세포 에피토프는 전형적으로 항체에 의해 인식될 수 있는, 즉 그들의 천연 형태에서, 바람직하게는 5 내지 15 아미노산을 가지며, 보다 바람직하게는 5 내지 12 아미노산을 가지며, 더욱 더 바람직하게는 6 내지 9 아미노산을 갖는, 본 발명에서 정의된 (천연) 단백질 또는 펩타이드의 외부 표면에 위치한다.
이러한 단백질 또는 펩타이드의 에피토프는 나아가 이러한 단백질 또는 펩타이드의 본 발명에서 언급된 변이의 어느 하나로부터 선택될 수 있다. 이러한 맥락에서 항원 결정요인은 단일 폴리펩타이드 사슬로 구성된 본 발명에서 정의된 단백질 또는 펩타이드의 아미노산 서열 내 불연속적이지만 3차원 구조 또는 연속적 또는 선형 에피토프를 묶는(brought together) 본 발명에서 정의된 단백질 또는 펩타이드의 일부로 구성된 형태적 또는 불연속적 에피토프일 수 있다.
변이체: 서열의, 예를 들어 뉴클레오티드 또는 아미노산 서열의 변이체와 같은, 독립체의 변이체는, 변형된 서열, 예를 들어 변형된 뉴클레오티드 또는 아미노산 서열과 같이 변형된 독립체를 말한다. 예를 들어, 서열의 변이는 변이가 유래된 서열에 비해 하나 또는 그 이상의 뉴클레오티드 또는 아미노산 결실, 삽입, 추가 및/또는 치환을 보일 수 있다. 바람직하게는, 본 발명의 맥락에서 서열의 변이체는 변이체가 유래된 서열에 적어도 40%, 바람직하게는 적어도 50%, 더욱 바람직하게는 적어도 60%, 더욱 바람직하게는 적어도 70%, 더욱 더 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 더 바람직하게는 적어도 90%, 가장 바람직하게는 적어도 95% 유사하다. 따라서, 본 발명의 맥락에서 펩타이드 또는 단백질 항원의 변이체는 변이체가 유래된 단백질 또는 펩타이드 항원의 서열에 바람직하게는 적어도 40%, 바람직하게는 적어도 50%, 더욱 바람직하게는 적어도 60%, 더욱 바람직하게는 적어도 70%, 더욱 더 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 더 바람직하게는 적어도 90%, 가장 바람직하게는 적어도 95% 유사하다. 바람직하게는, 변이체는 기능적 변이체로, 즉 변이체는 변이체가 유래된 서열에 의해 수행되는 하나 또는 그 이상의 기능을 수행한다. 예를 들어, 단백질 또는 펩타이드 항원의 변이체는 바람직하게는 변이체가 유래된 단백질 또는 펩타이드 항원의 적어도 하나의 항원 기능(예를 들어 상기 단백질 또는 펩타이드 항원 내 적어도 하나의 항원 결정요인에 대한 특정한 면역 반응의 촉진이 가능한)을 보인다.
하나 또는 그 이상이 치환, 삽입 및/또는 결실된 아미노산(들)처럼 하나 또는 그 이상의 변이(들)에서 본래 서열과 다른 아미노산 서열을 갖는, 본 발명의 맥락에서 정의된 단백질 또는 펩타이드의 "변이체"는 발생될 수 있다. 바람직하게는, 이들 절편 및/또는 변이체는 총 길이 천연 단백질에 비해 동일한 생물학적 기능 또는 특이적 활성, 예를 들어 이의 특이적 항원 특성을 갖는다. 본 발명의 맥락에서 정의된 단백질 또는 펩타이드의 "변이체"는 예를 들어 그들의 본성(native)에 비해 보존적 아미노산 치환(들), 즉 생리학적으로 변이되지 않은, 서열을 포함할 수 있다. 그들 아미노산 서열 뿐만 아니라 그들을 코딩하는 핵산 서열도 특히 본 발명에 정의된 용어 변이체의 아래 들어간다(fall under). 다른 하나로 교환된, 같은 클래스로부터 유래된, 아미노산 내 치환은 보존적 치환으로 불린다. 특히, 이들은 지방족 곁사슬, 양전하 또는 음전하를 띤 곁사슬, 곁사슬 또는 아미노산 내 방향족 그룹, 수소 다리 내로 들어올 수 있는 곁사슬, 예를 들어 하이드록실 기능을 갖는 곁사슬을 갖는 아미노산이다. 이는 예를 들어 극성 곁사슬을 갖는 아미노산은 비슷한 극성 곁사슬을 갖는 다른 아미노산 또는, 예를 들어 소수성 곁사슬이 마찬가지로 소수성 곁사슬을 갖는 다른 아미노산에 의해 치환된 것이 특징인 아미노산(예를 들어 트레오닌(세린)에 의해 세린(트레오닌) 또는 이소루신(isoleucine)(루신(leucine))에 의해 루신(이소루신))에 의해 교체되는 것을 의미한다. 특히, 3차 구조에 변형을 일으키지 않거나 결합 부위에 영향을 주지 않는 그들 서열 위치에 삽입 및 치환이 가능하다. 삽입(들) 또는 결실(들)에 의한 3차 구조의 변형은 예를 들어 CD 스펙트라(spectra)(원형 디크로이즘 스펙트라(circular dichroism spectra))를 사용하여 쉽게 결정될 수 있다(Urry, 1985, Absorption, Circular Dichroism and ORD of Polypeptides, in: Modern Physical Methods in Biochemistry, Neuberger et al. (ed.), Elsevier, Amsterdam).
추가적으로 단백질 또는 펩타이드의 변이체는 본 발명에서 정의된 펩타이드 유사체를 포함할 수 있다. 나아가, 핵산 분자에 의해 코딩될 수 있는, 본 발명에서 정의된 단백질 또는 펩타이드의 변이체는 또한, 단백질 또는 펩타이드의 각각의 아미노산 서열의 변화를 유발함이 없이, 즉 아미노산 서열 또는 적어도 이들의 부분은 상기 의미 내에 하나 또는 그 이상의 돌연변이(들) 내 본래 서열과 다르지 않을 수 있는, 핵산의 뉴클레오티드가 유전적 코드의 축퇴(degeneration)에 따라 교환된, 이들 서열을 포함할 수 있다.
서열 상동성: 두 서열이 동일한지 백분율을 결정하기 위해, 예를 들어 본 발명에서 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 서열 또는 항원의 핵산 서열 또는 아미노산 서열에 의해 코딩된 아미노산 서열과 같이, 본 발명에서 정의된 핵산 서열 또는 아미노산 서열, 화물 핵산 서열 또는 아미노산 서열 그 자체, 서열은 이후에 서로 비교되기 위해 정렬될 수 있다. 따라서, 예를 들어 첫번째 서열의 위치는 두번째 서열의 위치에 상응하여 비교될 수 있다. 만약 첫번째 서열 내 위치가 두번째 서열 내 위치의 경우에서 처럼 동일한 성분에 의해 차지된다면, 두 서열은 이 위치에 동일하다. 만약 이러한 경우가 아니라면, 서열은 이 위치에서 다르다. 만약 첫번째 위치에 비해 두번째 위치에서 삽입이 발생한다면, 갭은 추가적인 정렬을 허용하기 위해 첫번째 서열에 삽입될 수 있다. 만약 첫번째 서열에 비해 두번째 서열에서 결실이 발생하는 경우, 갭은 추가적인 정렬을 허용하기 위해 두번째 서열 내에 삽입될 수 있다. 두 서열의 유사도에 대한 백분율은 이후 하나의 서열 내 단독으로 차지되는 이들의 위치를 포함하는 위치들의 총 숫자로 나눈 동일한 위치의 수의 함수이다. 두 서열의 유사도에 대한 백분율은 수학적 알고리즘을 사용하여 결정될 수 있다. 바람직하게는, 사용될 수 있는 수학적 알고리즘의 예시는 Karlin et al. (1993), PNAS USA, 90:5873-5877 or Altschul et al. (1997), Nucleic Acids Res., 25:3389-3402의 알고리즘이나, 이에 한정되지 않는다. 이러한 알고리즘은 BLAST 프로그램 내에 통합된다. 특정한 범위에 본 발명의 서열에 동일한 서열은 이 프로그램을 사용하여 식별될 수 있다. 단백질 또는 펩타이드의 "변이체"는, 예를 들어 10, 20, 30, 50, 75 또는 100 아미노산의 스트레치에 걸쳐, 바람직하게는 이러한 단백질 또는 펩타이드의 총 길이 서열에 걸쳐, 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% 또는 99% 아미노산 상동성을 가질 수 있다. 비슷하게, 핵산 서열의 "변이체"는, 예를 들어 10, 20, 30, 50, 75 또는 100 뉴클레오티드에 걸쳐, 바람직하게는 이러한 핵산 서열의 총 길이 서열에 걸쳐, 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% 또는 99% 뉴클레오티드 상동성을 가질 수 있다.
단백질 또는 펩타이드의 유도체: 펩타이드 또는 단백질의 유도체는 전형적으로 이러한 상기 펩타이드 또는 단백질의 다른 분자로부터 유래된 분자로 이해된다. 펩타이드 또는 단백질의 "유도체"는 또한 본 발명에서 사용된 펩타이드 또는 단백질을 포함하는 융합체(fusions)를 포함(encompasse)한다. 예를 들어, 융합체는 예를 들어 에피토프, 예를 들어 FLAG 에피토프 또는 V5 에피토프 또는 HA 에피토프와 같이 라벨(label)을 포함한다. 예를 들어 에피토프는 FLAG 에피토프이다. 이러한 태그(tag)는 예를 들어 융합 단백질의 정제에 유용하다. 펩타이드 또는 단백질의 용어 "유도체"는 또한 예를 들어 아미노산에 비해 하나 또는 그 이상의 화학적 일부(moiety)를 포함하기 위해 변형된 펩타이드 또는 단백질과 같이 유도된(derivatised) 펩타이드 또는 단백질을 포함한다. 화학적 일부는 예를 들어 아미노 말단 아미노산 잔기, 카르복실 말단 아미노산 잔기, 또는 내부 아미노산 잔기를 통해, 펩타이드 또는 단백질에 공유 결합 될 수 있다. 이러한 변형은 펩타이드 또는 단백질 내 반응성 있는 일부에 방어적 또는 캡핑(capping) 그룹의 추가, 탐지될 수 있는 라벨의 추가, 및 펩타이드 또는 단백질 화합물의 활성을 역으로 파괴하지 않는 다른 변화를 포함한다. 예를 들어, 유도체는 PEG 일부, 방사성 핵종(radionuclide), 유색 라텍스 등을 포함할 수 있다. 유도체는 일반적으로 예를 들어, 증가된 단백질 분해효소 저항성 및/또는 보다 긴 반감기 및/또는 인간 또는 동물 몸체의 세포 또는 조직 사이에 증진된 수송성(transportability) 및/또는 감소된 역효과(들) 및/또는 증진된 친화도 또는 면역원성에 관한 향상된 특성을 가지거나 보인다. WO 2010/003193은 예를 들어 페길화(PEGylation), 헤실화(HESylation), 또는 글리코실화(glycosylation)에 의해 단백질 또는 펩타이드의 유도(derivatisation)를 포함하는 통상의 기술자에게 알려진 표준 절차를 사용하여 각각 또는 결합되어 수행될 수 있는 펩타이드 또는 단백질 부산물을 제공하기 위한 다양한 방법론을 설명한다.
첫번째 양태에 따르면, 본 발명에 근본적인 하나 또는 그 이상의 목적은 하기를 포함하는 약학적 조성물에 의해 해결된다:
(A) 하기를 포함하는 폴리머 담체 화물 복합체:
a) 이황화-가교결합된 양이온성 성분을 포함하는, 바람직하게는 이황화-가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체; 및
b) 적어도 하나의 핵산 분자,
및
(B) 하기로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나의 항원:
(i) 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원;
(ii) 알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원;
(iii) 자가면역 질병과 관련된 항원; 및
(iv) 암 또는 종양 질병과 관련된 항원,
또는 상기 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체.
바람직하게는 성분 (B)는 성분 (A)와 공유결합 되지 않은, 특히 이황화결합에 의하지 않는다. 따라서, 성분 (B)는 바람직하게는 폴리머 담체 및/또는 적어도 하나의 핵산 분자에, 이황화 결합에 의한 것과 같이, 공유결합되지 않는다. 바람직하게는 적어도 하나의 항원은 폴리머 담체 화물 복합체에, 특히 폴리머 담체 화물 복합체의 폴리머 담체에 공유결합되지 않는다. 예를 들어, 바람직하게는 단백질 또는 펩타이드 항원과 같은 적어도 하나의 항원은 이황화 결합에 의해 폴리머 담체와 같은 폴리머 담체 화물 복합체에 공유결합되지 않는다. 그러나, 실시예에서, 상기 성분 (A) 및 성분 (B)는 이황화결합(disulphide bonds)을 통해 결합되고, 이러한 결합은 바람직하게는 3,6-디옥사-1,8-옥탄디티올(3,6-Dioxa-1,8-octanedithiol, DODT) 가교제를 통해서와 같이, 가교제(crosslinker)를 통해서 실현되지 않는다. 게다가, 실시예에서, 상기 성분 (A) 및 성분 (B)는 이황화결합을 통해 결합되고, 성분 (B)는 바람직하게는 오발부민(ovalbumine) 또는 오발부민의 절편이 아니다.
예를 들어 단백질 항원, 폴리머 담체에 공유결합되지 않은, 성분 (B)의 장점은, 항원, 예를 들어 단백질 항원의 구조가 방해되지 않고 이의 면역원성은 보존되는 것이다. 만약 항원, 예를 들어 단백질 항원이 폴리머 담체에 공유결합된다면, 예를 들어 이황화결합에 의해, 구조적 에피토프의 구조를 파괴할 수 있고 단백질을 약한 면역원성 또는 비 면역원성으로 만들 수 있도록, 항원의 3차 구조는 변화 또는 변성될 것이다. 면역 시스템에 의해 인지되는 에피토프는 아미노산의 연속적인 스트레치로 이루어진 선형 에피토프, 또는 단백질의 분명한 부분으로부터 아미노산으로 이루어진 특정한 삼차원 형태를 갖는 구조적 에피토프일 수 있다.
나아가, 바람직하게는, 폴리머 담체, 특히 폴리머 담체의 양이온성 성분, 및 폴리머 담체 화물 복합체의 적어도 하나의 핵산 분자는 공유결합되지 않으나, 이온 결합 및/또는 반 데르 발스(van der Waals) 결합에 의한 것과 같이, 공유결합 보다는 다른 결합을 통해 바람직하게 관련된다. 따라서, 폴리머 담체 화물 복합체에서, 오직 양이온성 성분들은 서로 공유결합되는 것이 바람직하나, 핵산 분자는 폴리머 담체와 비-공유적으로 관련된다.
게다가, 바람직한 실시예에서, 성분 (A) 및 (B)는 함께 미셀(micelle) 구조를 형성하지 않으며, 특히, 폴리머 담체는 바람직하게는 미셀 구조를 형성하지 않는다.
발명의 모든 양상의 특정한 실시예에서, 폴리머 담체 화물 복합체는 어쥬번트로써 사용하기 위한 것이다. 예를 들어, 이는 본 발명에서 설명된 방법론을 포함하여, 일반적인 방법론을 사용하여 통상의 기술자에 의해 쉽게 결정될 수 있는 것과 같이,
어쥬번트로써 사용되고/또는 어쥬번트 특성을 갖는다.
첫번째 성분(ingredient)으로써 독창적인 약학적 조성물은 하기를 포함하는 적어도 하나의 폴리머 담체 화물 복합체를 포함한다(예를 들어 어쥬번트로써).
a) (담체로써) 이황화-가교결합된 양이온성 성분을 포함하는, 바람직하게는 이황화-가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체, 및
b) (화물로써) 적어도 하나의 핵산 분자.
독창적인 약학적 조성물에 포함되는 폴리머 담체 화물 복합체는 백신 접종 목적을 위해 보다 효과적 및/또는 안정한 어쥬번트를 제공한다. 유리하게, 폴리머 담체 화물 복합체는 낮은 생분해도 또는 높은 독성, 응집, 생체 내 낮은 형질전환 활성 등과 같이, 상기 논의된 것처럼 고분자량 폴리머의 하나 또는 그 이상 감소된 부정적 부작용을 보이는 것처럼, 특히 핵산 형질전환의 목적을 위한 핵산을 압축 및 안정화를 위해, 핵산의 생체 내 전달에 적합하다. 폴리머 담체 화물 복합체는 또한 혈청 안정도, 염 안정도, 흡수의 효율, 감소된 보체 활성, 핵산 방출 등을 포함하는, 특히 피내(intradermal) 또는 근육내(intramuscular) 경로를 통해, 생체 내 증진된 핵산 전달을 제공한다. 이러한 폴리머 담체 화물 복합체는, 나아가 평행(parallel) 선천적 면역 반응을 시작 또는 촉진시킴으로써 적응 면역 반응의 유도 및 유지를 도울 수 있다. 추가적으로, 폴리머 담체 화물 복합체는 증진된 저장 안정성을, 특히 동결건조 동안, 보인다.
상기 정의된 폴리머 담체 화물 복합체는 이황화-가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 하나의 성분 폴리머 담체를 포함한다. 용어 "양이온성 성분"은 전형적으로 약 1 내지 9의 pH 값에, 바람직하게는 또는 9 이하의, 또는 8 이하의, 또는 7 이하의 pH 값의, 가장 바람직하게는 생리학적 pH 값, 예를 들어 약 7.3 내지 7.4에서, 양전하를 띤(양이온) 전하를 띤 분자를 말한다. 따라서, 본 발명에 따른 양이온성 펩타이드, 단백질 또는 폴리머는 생리학적 조건 하에서, 특히 생체 내 세포의 생리학적 염 조건 하에서 양전하를 띤다. 정의 "양이온성"은 또한 "다중양이온성" 성분을 말할 수 있다.
이러한 맥락에서, 이황화-가교결합에 의해 폴리머 담체 화물 복합체의 폴리머 담체를 위한 기초를 형성하는 양이온성 성분은 전형적으로 이러한 목적에 적합한 적절한 어느 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드, 단백질 또는 폴리머로부터, 특히 본 발명에 따라 정의된 것처럼 핵산에 복합될 수 있고, 그에 따라 바람직하게 핵산을 응축하는 어느 양이온성 또는 다중 양이온성 펩타이드, 단백질 또는 폴리머로부터 선택된다. 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드, 단백질 또는 폴리머는 바람직하게는 선형 분자이나, 가지가 있는(branched) 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드, 단백질 또는 폴리머가 또한 사용될 수 있다.
폴리머 담체의 양이온성 또는 다중양이온성 단백질, 펩타이드 또는 폴리머 각각은 본 발명에서 언급된 것처럼 폴리머 담체의 양이온성 성분으로써, 적어도 하나의 추가적 양이온성 또는 다중양이온성 단백질, 펩타이드 또는 폴리머와 함께 응축하도록 이황화 결합을 형성할 수 있는, 적어도 하나의 -SH 일부, 가장 바람직하게는 적어도 하나의 시스테인 잔기 또는 -SH 일부를 보이는 어느 추가적 화학적 그룹을 포함한다.
폴리머 담체의 양이온성 또는 다중양이온성 단백질, 펩타이드 또는 폴리머 또는 어느 추가적인 성분 각각은 바람직하게는 이황화-가교결합을 통해 이에 이웃하는 성분(들)(양이온성 단백질, 펩타이드, 폴리머 또는 다른 성분)에 결합된다. 바람직하게는, 이황화-가교결합은 적어도 하나의 양이온성 또는 다중양이온성 단백질, 펩타이드 또는 폴리머 및 적어도 하나의 추가적 양이온성 또는 다중양이온성 단백질, 펩타이드 또는 폴리머 또는 폴리머 담체의 다른 성분 사이에 (가역적) 이황화결합(-S-S-)이다. 이황화-결합은 전형적으로 특히 양이온성 성분의 폴리머 담체의 성분의 -SH- 부위의 응축에 의해 형성된다. 이러한 -SH- 부위는 이황화-가교결합 전에 양이온성 또는 다중양이온성 단백질, 펩타이드 또는 폴리머 또는 폴리머 담체의 어느 추가적 성분의 구조의 일부일 수 있거나 하기 정의된 것처럼 변형에 의해 이황화-가교결합 전에 첨가될 수 있다. 이러한 맥락에서, 이황화결합을 제공하기에 필수적인, 폴리머 담체의 하나의 성분에 인접한 황은, 예를 들어 본 발명에 정의된 것처럼 -SH 일부에 의해, 그 자체의 성분에 의해 제공될 수 있거나 -SH 일부를 보임에 따라 성분을 변형함에 의해 제공될 수 있다. 이들 -SH- 일부는 전형적으로 -SH 일부를 이송하는, 예를 들어 시스테인 또는 어느 추가적 (변형된) 아미노산 또는 성분의 화합물을 통해, 성분의 각각에 의해 제공된다. 양이온성 성분 또는 폴리머 담체의 어느 추가적 성분이 펩타이드 또는 단백질인 경우에 -SH 일부는 적어도 하나의 시스테인 잔기에 의해 제공되는 것이 바람직하다. 그렇지 않으면, 폴리머 담체의 성분은 적어도 하나의 이러한 -SH 일부를 이송하는 폴리머 담체의 성분의 각각과 같은, 바람직하게는 -SH 일부를 이송하는 화합물과 함께 화학 반응을 통해, -SH 일부에 따라 변형될 수 있다. -SH 일부를 이송하는 이러한 화합물은 -SH 일부를 이송하는, 예를 들어 (추가적) 시스테인 또는 어느 추가적 (변형된) 아미노산 또는 폴리머 담체의 성분의 화합물일 수 있다. 이러한 화합물은 또한 본 발명에서 정의된 성분 내로 -SH 일부를 포함하거나 도입하는 비 아미노산 화합물 또는 일부와 같이, 어떤 비 아미노산 화합물 또는 일부일 수 있다. 이러한 비-아미노 화합물은, 예를 들어 비 아미노산 화합물, 화학적 반응 또는 화합물의 결합을 통해, 예를 들어 3-티오 프로피온산 또는 2-이미노티올레인(2-iminothiolane)(트라웃 시약(Traut's reagent))의 결합에 의해, 아미드 형성(예를 들어 카르복실산, 설폰산, 아민 등)에 의해, 마이클 첨가(예를 들어 말레인이미드 일부, a,b 불포화된 카보닐, 등)에 의해, 클릭 화학(click chemistry)(예를 들어 아지드 또는 알킨)에 의해, 알켄/알킨 치환(metatesis)(예를 들어 알켄 또는 알킨)에 의해, 이민 또는 하이드로존 형성(알데하이드 또는 케톤, 하이드라진, 하이드록실아민, 아민), 복합화 반응(아비딘, 비오틴, 단백질 G) 또는 Sn-타입 치환 반응을 허용하는 성분(예를 들어 할로겐알칸, 티올, 알코올, 아민, 하이드라진, 하이드라지드, 설폰산 에스터, 옥시포스포늄 염) 또는 추가적 성분의 부착에 활용될 수 있는 다른 화학적 일부, 본 발명에 따른 폴리머 담체의 성분에 결합될 수 있다. 일부의 경우에 -SH 일부는 성분에 화학적 결합(attachment) 동안에 보호기에 의해 가려질 수 있다. 이러한 보호기는 기술분야에 알려져 있으며 화학적 짝지음 이후에 제거될 수 있다. 각 경우에, -SH 일부는, 예를 들어 시스테인의 또는 어느 추가적 (변형된) 아미노산 또는 화합물의, 폴리머 담체의 성분의 어느 위치에 말단 끝 또는 내부에 존재할 수 있다. 본 발명에 정의된 것처럼, 폴리머 담체의 성분들의 각각은, 바람직하게는 폴리머 담체의 양이온성 성분의 각각은, 전형적으로 적어도 하나의 -SH 일부를 보이지만, 또한 둘, 셋, 넷, 다섯, 또는 그 이상의 -SH- 일부를 포함할 수 있다.
바람직한 실시예에서, 단백질 또는 펩타이드 항원과 같은, 폴리머 담체, 화물 핵산 분자 및/또는 항원은, 바람직하게는 디티오피리딘(dithiopyridine)에 의해 변형되지 않은, 단백질 또는 펩타이드 항원과 같이, 특히 폴리머 담체, 화물 핵산 분자 및/또는 항원, 새로운 -SH-일부의 도입에 의한 것처럼, 이황화결합의 형성을 위한 새로운 짝지음 자리에 도입됨으로써 변형되지 않을 수 있다. 따라서, 특정한 바람직한 실시예에서, 폴리머 담체, 화물 핵산 분자 및/또는 항원은 디티오피리딘(dithiopyridine)을 포함하지 않는다.
나아가 바람직한 실시예에서, 폴리머 담체는 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 일부를 포함하지 않으며, 특히 바람직하게는 폴리머 담체의 양이온성 성분은 바람직하게는 PEG 일부를 포함하지 않는다. 그러나, 만약 폴리머 담체가 PEG 일부를 포함하는 경우, 양이온성 성분은 바람직하게는 폴리-L-리신이 아니다.
추가적으로 양이온성 성분의 결합에 -SH 일부는, 특히 아미노산 성분, 예를 들어 항원 에피토프, 항원, 항체, 세포 관통 펩타이드(예를 들어 TAT), 리간드 등, 본 발명에서 정의된 폴리머 담체에 추가적 성분을 부착하는데 사용될 수 있다. 만약 폴리머 담체가 양이온성 성분에 추가로 추가적인 성분을 포함한다면, 특히 만약 추가적 성분이 아미노산 성분일 경우, 추가적인 성분은 오발부민 또는 오발부민의 절편이 아닌 것이 바람직하다.
상기 정의된 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체의 폴리머 담체는 이황화-가교결합된 양이온성(또는 다중양이온성) 성분에 의해 형성된다.
하나의 첫번째 대안에 따르면, 폴리머 담체의 적어도 하나의 양이온성 (또는 다중양이온성) 성분은 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 단백질로부터 선택될 수 있다. 이러한 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 단백질은, 바람직하게는 약 3 내지 100 아미노산의 길이, 바람직하게는 약 3 내지 50 아미노산의 길이, 더욱 바람직하게는 약 3 내지 25 아미노산의 길이, 예를 들어 약 3 내지 10; 5 내지 20; 5 내지 15; 8 내지 15, 16 또는 17; 10 내지 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20; 또는 15 내지 25 아미노산의 길이를 보인다. 그렇지 않으면 또는 추가적으로, 이러한 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 단백질은 약 0.5 kDa 내지 약 100 kDa, 바람직하게는 약 10 kDa 내지 약 50 kDa, 더욱 바람직하게는 약 10 kDa 내지 약 30 kDa의 분자량을 포함하는, 약 0.01 kDa 내지 약 100 kDa의 분자량을 보일 수 있다. 이러한 맥락에서 또한 본 발명에서 정의된 단백질 또는 펩타이드의 유사체 및 유도체는 분명히 포함된다.
폴리머 담체의 양이온성 성분이 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 단백질을 포함하거나 이로 이루어지는 특정한 경우에, 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 단백질 또는 전체 폴리머 담체의 양이온성 특성은, 만약 폴리머 담체가 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 단백질로 이루어진 경우에는, 특히 음이온성 또는 중성 아미노산을 초과하는 양이온성 아미노산의 이의 함량에 기초하여, 및 따라서 이의 전체 양성 전하에 기초하여, 양이온성 아미노산의 이의 함량에 기초하여 결정될 수 있다. 바람직하게는, 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 단백질 및/또는 폴리머 담체 내 양이온성 아미노산의 함량은 적어도 10%, 20%, 또는 30%, 바람직하게는 적어도 40%, 보다 바람직하게는 적어도 50%, 60% 또는 70%, 그러나 또한 바람직하게는 적어도 80%, 90%, 또는 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%, 가장 바람직하게는 적어도 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 도는 100%, 또는 약 10% 내지 90%의 범위 내, 보다 바람직하게는 약 15% 내지 75%의 범위 내, 더욱 더 바람직하게는 약 20% 내지 50%의 범위 내, 예를 들어 20%, 30%, 40% 또는 50%일 수 있고, 또는 모든 아미노산의 함량이라면, 상기 언급된 값의 어느 둘에 의해 형성된 범위 내, 예를 들어 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 단백질 또는 전체 폴리머 담체 내, 양이온성, 지방친화성, 친수성, 방향성 및 추가적 아미노산, 만약 폴리머 담체가 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 단백질로 전체적으로 구성될 경우에는 100%이다.
이러한 맥락에서 양이온성 아미노산은 바람직하게는 자연적 발생 아미노산 Arg(아르기닌), Lys(리신), His(히스티딘), 및 Orn(오르니틴)이다. 그러나 넓은 의미에서 곁사슬에 양이온성 전하를 운반하는 어느 (비천연) 아미노산은 또한 본 발명을 수행하기 위해 구상될 수 있다. 그러나, 그들 양이온성 아미노산은 생리학적 pH 조건 하에서 양전하를 띤 곁사슬을 포함하는 것이 바람직하다. 더욱 바람직한 실시예에서, 이들 아미노산은 Arg, Lys, 및 Orn이다.
바람직하게는, 포함하거나 적어도 하나의 -SH 일부를 포함하기 위해 추가적으로 변형된, 이러한 폴리머 담체의 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 단백질은 프로타민(protamine), 뉴클레올린(nucleoline), 스페르민(spermine) 또는 스페르미딘(spermidine), 올리고- 또는 폴리-L-리신(poly-L-lysine)(PLL)과 같은 양이온성 펩타이드 또는 단백질, 염기성 폴리펩타이드, 올리고 또는 폴리-아르기닌, 세포 관통 펩타이드(cell penetrating peptides, CPPs), 트랜스포탄(Transportan), 또는 MPG 펩타이드와 같은, 키메라 CPPs, HIV-결합 펩타이드, Tat, HIV-1 Tat(HIV), Tat-유도된 펩타이드, 페네트라틴 패밀리의 멤버, 예를 들어 페네트라틴(Penetratin), 안테나페디아(Antennapedia)-유도된 펩타이드(특히 초파리(Drosophila antennapedia)로부터), pAntp, pIsl 등, 항미생물-유도된 CPPs 예를 들어 부포린-2(Buforin-2), Bac715-24, SynB, SynB(1), pVEC, hCT-유도된 펩타이드, SAP, MAP, KALA, PpTG20, L올리고머(Loligomere), FGF, 락토페린(Lactoferrin), 히스톤, VP22 유도된 또는 유사체 펩타이드, HSV, VP22(헤르페스 심플렉스(Herpes simplex)), MAP, KALA 또는 단백질 수송 도메인(PTDs, PpT620, 프롤린-풍부 펩타이드, 아르기닌 풍부 펩타이드, 리신 풍부 펩타이드, Pep-1, L-올리고머(L-oligomers), 칼시토닌 펩타이드(들) 등에서 선택되나, 이에 제한되지 않는다.
그렇지 않으면 또는 추가적으로, 포함하거나 적어도 하나의 -SH 일부를 포함하기 위해 추가적으로 변형된, 이러한 폴리머 담체의 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 단백질은, 이에 제한되지 않고, 하기 합계 화학식(I)를 갖는 하기 양이온성 펩타이드로부터 선택됨:
{(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x};
Arg(아르기닌), Lys(리신), His(히스티딘) 및 Orn(오르니틴)이 올리고펩타이드의 전체 아미노산의 적어도 10%를 나타나는 경우 상기 l + m + n + o + x = 3-100, 및 l, m, n 또는 o는 서로 독립적으로 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21-30, 31-40, 41-50, 51-60, 61-70, 71-80, 81-90 및 91-100에서 선택된 어느 수; 및 Xaa는 Arg, Lys, His 또는 Orn을 제외한 천연(=자연 발생) 또는 비천연 아미노산으로부터 선택된 어느 아미노산; 및 Xaa의 전체 함량이 올리고펩타이드의 모든 아미노산의 90%를 초과하지 않는 경우, x는 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21-30, 31-40, 41-50, 51-60, 61-70, 71-80, 81-90로부터 선택된 어느 수이다. 아미노산 Arg, Lys, His, Orn 및 Xaa의 어느 것은 펩타이드의 어느 장소에 위치할 수 있다. 이러한 맥락에서 7-30 아미노산의 범위 내 양이온성 펩타이드 또는 단백질은 특히 바람직하다. 이러한 화학식의 더욱 바람직한 펩타이드는 예를 들어 Arg7, Arg8, Arg9, Arg12, His3Arg9, Arg9His3, His3Arg9His3, His6Arg9His6, His3Arg4His3, His6Arg4His6, TyrSer2Arg9Ser2Tyr, (ArgLysHis)4, Tyr(ArgLysHis)2Arg 등과 같은 올리고아르기닌(oligoarginines)이다.
특정한 바람직한 실시예에 따르면, 이러한 상기와 같은 실험(empirical) 합계 화학식 (I)을 갖는 폴리머 담체의 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 단백질은, 이에 제한되지 않고, 하기 화학식(formulae)의 하위그룹의 적어도 하나를 포함할 수 있다:
Arg7, Arg8, Arg9, Arg10, Arg11, Arg12, Arg13, Arg14, Arg15-30;
Lys7, Lys8, Lys9, Lys10, Lys11, Lys12, Lys13, Lys14, Lys15-30;
His7, His8, His9, His10, His11, His12, His13, His14, His15-30;
Orn7, Orn8, Orn9, Orn10, Orn11, Orn12, Orn13, Orn14, Orn15-30.
나아가 특정한 바람직한 실시예에 따르면, 상기 실험 합계 화학식 (I)를 가지며 포함하거나 적어도 하나의 -SH 일부를 포함하기 위해 추가적으로 변형된 폴리머 담체의 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 단백질은, 바람직하게는, 이에 제한되지 않고, 화학식의 하기 하위그룹의 적어도 하나로부터 선택될 수 있다. 하기 화학식(실험식 (I)과 같이)은 어느 아미노산 순서를 지정(specify)하지 않으나, 각각 펩타이드의 성분으로써 아미노산(의 수)를 독점적으로 지정함으로써 실험식을 반영하려고 한다. 따라서, 실시예와 같이, 실험식 Arg(7-29)Lys1은 이 화학식에 해당하는 펩타이드는 어떤 순서이든지 7 내지 19 Arg 잔기 및 1 Lys 잔기를 포함하는 것을 의미한다. 만약 펩타이드가 7 Arg 잔기 및 1 Lys 잔기를 포함한다면, 7 Arg 잔기 및 1 Lys 잔기를 갖는 모든 변이체는 포함된다. Lys 잔기는 따라서 예를 들어 7 Arg 및 1 Lys 잔기로 이루어진 8 아미노산 길이 서열 내 어디든지 위치할 수 있다. 하위그룹은 바람직하게는 하기를 포함한다:
Arg(4-29)Lys1, Arg(4-29)His1, Arg(4-29Orn1, Lys(4-29)His1, Lys(4-29)Orn1, His(4-29)Orn1,
Arg(3-28)Lys2, Arg(3-28)His2, Arg(3-28)Orn2, Lys(3-28)His2, Lys(3-28)Orn2, His(3-28)Orn2,
Arg(2-27)Lys3, Arg(2-27)His3, Arg(2-27)Orn3, Lys(2-27)His3, Lys(2-27)Orn3, His(2-27)Orn3,
Arg(1-26)Lys4, Arg(1-26)His4, Arg(1-26)Orn4, Lys(1-26)His4, Lys(1-26)Orn4, His(1-26)Orn4,
Arg(3-28)Lys1His1, Arg(3-28)Lys1Orn1, Arg(3-28)His1Orn1, Arg1Lys(3-28)His1, Arg1Lys(3-28)Orn1, Lys(3-28)His1Orn1, Arg1Lys1His(3-28), Arg1His(3-28)Orn1, Lys1His(3-28)Orn1;
Arg(2-27)Lys2His1, Arg(2-27)Lys1His2, Arg(2-27)Lys2Orn1, Arg(2-27)Lys1Orn2, Arg(2-27)His2Orn1, Arg(2-27)His1Orn2, Arg2Lys(2-27)His1, Arg1Lys(2-27)His2, Arg2Lys(2-27)Orn1, Arg1Lys(2-27)Orn2, Lys(2-27)His2Orn1, Lys(2-27)His1Orn2, Arg2Lys1His(2-27), Arg1Lys2His(2-27), Arg2His(2-27)Orn1, Arg1His(2-27)Orn2, Lys2His(2-27)Orn1, Lys1His(2-27)Orn2;
Arg(1-26)Lys3His1, Arg(1-26)Lys2His2, Arg(1-26)Lys1His3, Arg(1-26)Lys3Orn1, Arg(1-26)Lys2Orn2, Arg(1-26)Lys1Orn3, Arg(1-26)His3Orn1, Arg(1-26)His2Orn2, Arg(1-26)His1Orn3, Arg3Lys(1-26)His1, Arg2Lys(1-26)His2, Arg1Lys(1-26)His3, Arg3Lys(1-26)Orn1, Arg2Lys(1-26)Orn2, Arg1Lys(1-26)Orn3, Lys(1-26)His3Orn1, Lys(1-26)His2Orn2, Lys(1-26)His1Orn3, Arg3Lys1His(1-26), Arg2Lys2His(1-26), Arg1Lys3His(1-26), Arg3His(1-26)Orn1, Arg2His(1-26)Orn2, Arg1His(1-26)Orn3, Lys3His(1-26)Orn1, Lys2His(1-26)Orn2, Lys1His(1-26)Orn3;
Arg(2-27)Lys1His1Orn1, Arg1Lys(2-27)His1Orn1, Arg1Lys1His(2-27)Orn1, Arg1Lys1His1Orn(2-27);
Arg(1-26)Lys2His1Orn1, Arg(1-26)Lys1His2Orn1, Arg(1-26)Lys1His1Orn2, Arg2Lys(1-26)His1Orn1, Arg1Lys(1-26)His2Orn1, Arg1Lys(1-26)His1Orn2, Arg2Lys1His(1-26)Orn1, Arg1Lys2His(1-26)Orn1, Arg1Lys1His(1-26)Orn2, Arg2Lys1His1Orn(1-26), Arg1Lys2His1Orn(1-26), Arg1Lys1His2Orn(1-26);
나아가 특히 바람직한 실시예에 따르면, 상기 실험 합계 화학식 (I)를 가지며 포함하거나 적어도 하나의 -SH 일부를 포함하기 위해 추가적으로 변형된 폴리머 담체의 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 단백질은 일반식 Arg7 (또한 R7로 명명), Arg9 (또한 R9로 명명), Arg12 (또한 R12로 명명)으로 이루어진 하위 그룹으로부터, 이에 제한되지 않고, 선택될 수 있다.
나아가 특히 바람직한 한 실시예에 따르면, 상기 화학식 {(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x} (화학식 (I))에 따라 정의될 때 및 포함하거나 적어도 하나의 -SH 일부를 포함하기 위해 추가적으로 변형된, 폴리머 담체의 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 단백질은, 이에 제한되지 않고, 하위 화학식 (Ia)로부터 선택될 수 있다:
{(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa')x (Cys)y} 화학식 (Ia)
Arg(아르기닌), Lys(리신), His(히스티딘) 및 Orn(오르니틴)의 전체 함량이 올리고펩타이드의 총 아미노산의 적어도 10%를 나타내는 경우, 상기 (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o; 및 x는 본 발명에 정의된 것과 같으며, Xaa'는 Arg, Lys, His, Orn 또는 Cys를 제외한 천연(=자연 발생) 또는 비천연 아미노산으로부터 선택된 어느 아미노산이고 y는 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21-30, 31-40, 41-50, 51-60, 61-70, 71-80 및 81-90로부터 선택된 어느 수이다.
이러한 실시예는(embodiment), 폴리머 담체의 다른 성분과 이황화 결합을 형성할 수 있는, 양이온성 성분으로써 이러한 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드는 적어도 하나의 시스테인을 이송하는 것처럼, 상기 의미 내에서 포함하거나 -SH 일부와 같이 적어도 하나의 시스테인과 함께 변형되었을 때, 예를 들어 상기 실험식 (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x (화학식 (I))에 따라 정의될 때, 폴리머 담체의 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 단백질인 상황에 적용될 수 있다.
특히 바람직한 다른 실시예에 따르면, 상기 화학식 {(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x} (화학식 (I))에 따라 정의될 때, 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 단백질은, 하위 화학식 (Ib)로부터, 이에 제한되지 않고 선택될 수 있다:
Cys1 {(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x} Cys2 (화학식 (Ib))
상기 실험식 {(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x} (화학식 (I))은 본 발명에서 정의된 것과 같고 (반실험식(semiempirical)) 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열의 코어를 형성하고 상기 Cys1 및 Cys2는 (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x의 근위에 또는 말단에 시스테인이다. 모범적인(Exemplary) 실시예는 두 Cys의 측면의 상기 서열 및 하기 서열의 어느 것을 포함할 수 있다:
Cys(Arg7)Cys, Cys(Arg8)Cys, Cys(Arg9)Cys, Cys(Arg10)Cys, Cys(Arg11)Cys, Cys(Arg12)Cys, Cys(Arg13)Cys, Cys(Arg14)Cys, Cys(Arg15)Cys, Cys(Arg16)Cys, Cys(Arg17)Cys, Cys(Arg18)Cys, Cys(Arg19)Cys, Cys(Arg20)Cys (SEQ ID NOs:1-14):
CysArg7Cys Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys (SEQ ID NO. 1)
CysArg8Cys Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys (SEQ ID NO. 2)
CysArg9Cys: Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys (SEQ ID NO. 3)
CysArg10Cys Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys (SEQ ID NO. 4)
CysArg11Cys Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys (SEQ ID NO. 5)
CysArg12Cys: Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys (SEQ ID NO. 6)
CysArg13Cys: Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys (SEQ ID NO. 7)
CysArg14Cys: Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys (SEQ ID NO. 8)
CysArg15Cys: Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys (SEQ ID NO. 9)
CysArg16Cys: Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys (SEQ ID NO. 10)
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CysArg18Cys: Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys (SEQ ID NO. 12)
CysArg19Cys: Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys (SEQ ID NO. 13)
CysArg20Cys: Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg Cys (SEQ ID NO. 14)
이러한 실시예는, 폴리머 담체의 다른 성분과 이황화 결합을 형성할 수 있는, 양이온성 성분으로써 폴리머 담체 화물 복합체의 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드는 적어도 둘(말단)의 시스테인을 이송하는 것처럼, 상기 의미 내에서 -SH 일부와 같이 적어도 둘의 시스테인과 함께 변형되었을 때, 예를 들어 상기 실험식 (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x (화학식 (I)) 에 따라 정의될 때, 폴리머 담체의 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 단백질인 상황에 적용될 수 있다.
두번째 대안에 따르면, 본 발명에 정의된 폴리머 담체의 다른 성분과 함께 양이온성 또는 다중양이온성 폴러미와 이황화결합으로 결합에 제공되는, 이러한 (비펩타이드) 양이온성 또는 다중양이온성 폴리머는 보이고 또는 적어도 하나의 -SH- 일부를 보이기 위해 변형될 경우, 폴리머 담체의 적어도 하나의 양이온성 (또는 다중양이온성)성분은 예를 들어 이러한 맥락에서 적절한 어느 (비-펩타이드) 양이온성 또는 다중양이온성 폴리머로부터 선택될 수 있다. 따라서, 본 발명에서 정의된 것과 마찬가지로, 폴리머 담체는 동일하거나 다른 양이온성 또는 다중양이온성 폴리머를 포함할 수 있다.
폴리머 담체의 양이온성 성분이 (비펩타이드) 양이온성 또는 다중양이온성 폴리머를 포함하는 특수한 경우, (비펩타이드) 양이온성 또는 다중양이온성 폴리머의 양이온성 특성은 양이온성 폴리머의 함량의 전체 전하에 비할 때 양이온성 전하의 이의 함량에 의해 결정될 수 있다.
바람직하게는 본 발명에서 정의된 (생리학적) pH에서 양이온성 폴리머 내, 양이온성 전하의 함량은, 바람직하게는 전체 양이온성 전하(즉 음이온성 및 중성 전하를 제외), 적어도 10%, 20%, 또는 30%, 바람직하게는 적어도 40%, 더욱 바람직하게는 적어도 50%, 60% 또는 70%, 단 또한 바람직하게는 적어도 80%, 90%, 또는 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%, 가장 바람직하게는 적어도 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%이며, 또는 약 10% 내지 90%의 범위 내, 더욱 바람직하게는 약 30% 내지 100%의 범위 내, 가장 바람직하게는 약 50% 내지 100%의 범위 내, 예를 들어 50, 60, 70, 80%, 90% 또는 100%, 또는 상기 언급된 값의 어느 둘에 의해 형성된 범위 내 일수 있다. 모든 전하의 함량은, 예를 들어 본 발명에서 정의된 (생리학적) pH에서 양전하 및 음전하, 전체 양이온성 폴리머 내 100%이다.
바람직하게는, 폴리머 담체의 (비펩타이드) 양이온성 성분은, 전형적으로 약 0.1 또는 0.5 kDa 내지 약 100 kDa의, 바람직하게는 약 1 kDa 내지 약 75 kDa의, 더욱 바람직하게는 약 5 kDa 내지 약 50 kDa의, 더욱 더 바람직하게는 약 5 kDa 내지 약 30 kDa의 분자량, 또는 약 10 kDa 내지 약 50 kDa의, 더욱 더 바람직하게는 약 10 kDa 내지 약 30 kDa의 분자량을 보이는, 양이온성 또는 다중양이온성 폴리머를 나타낸다. 추가적으로, (비펩타이드) 양이온성 또는 다중양이온성 폴리머는, 본 발명에서 정의된 폴리머 담체의 다른 양이온성 성분 또는 다른 성분과 함께 응축에 이황화결합을 형성할 수 있는, 전형적으로 적어도 하나의 SH-일부를 보인다.
상기 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 단백질은 통상의 기술자에게 알려진 모든 방법을 통해 또는 본 발명에 설명된 재조합 펩타이드 또는 단백질 생산에 의해 또는 펩타이드 합성에 의해 제조될 수 있다.
상기 맥락에서, 폴리머 담체의 (비펩타이드) 양이온성 성분은 아크릴레이트(acrylates), pDMAEMA (poly(dimethylaminoethyl methylacrylate))와 같은, 변형된 아크릴레이트, 키토산(chitosanes), 아지리딘(aziridines) 또는 2-에틸-2-옥사졸린(2-ethyl-2-oxazoline)(올리고 에틸렌이민(oligo ethylenimines) 또는 변형된 올리고에틸렌이민을 형성), 올리고 베타 아미노에스터 또는 폴리 아미도 아민을 형성하는 아민과 함께 비스아크릴레이트(bisacrylates)의 반응에 의해 얻어진 폴리머, 또는 폴리에스터와 같은 다른 폴리머, 폴리카보네이트 등으로부터 선택될 수 있다. 이들 (비펩타이드) 양이온성 또는 다중양이온성 폴리머의 각 분자는 전형적으로 적어도 하나의 -SH- 일부를 보이며, 이들 적어도 하나의 -SH- 일부는, 이러한 시스테인 또는 어느 추가적 (변형된) 아미노산과 같이, 예를 들어 이미노티올레인(iminothiolane), 3-티오 프로피온산 또는 아미노산을 포함하는 -SH- 일부의 도입을 사용하여, 화학적 변형에 의해 (비펩타이드) 양이온성 또는 다중양이온성 폴리머에 도입될 수 있다. 이러한 -SH- 일부는 바람직하게는 상기 정의된 바와 같다.
폴리머 담체의 맥락에서, 이황화-가교결합에 의해 폴리머 담체를 위한 기초를 형성하는, 양이온성 성분은 동일하거나 서로 다를 수 있다. 또한 본 발명의 폴리머 담체는 본 발명에서 설명된 것처럼 이황화결합에 의해 가교결합된, 양이온성 펩타이드, 단백질 또는 폴리머의 혼합물 및 본 발명에서 정의된 추가적 성분을 선택적으로 포함하는 것이 특히 바람직하다. 본 발명의 맥락에서 폴리머 담체의 특히 바람직한 양이온성 성분은 양이온성 펩타이드 또는 단백질이다.
이러한 맥락에서, 폴리머 담체 화물 복합체는 이의 다양한 폴리머 담체 때문에 다른 (짧은) 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드, 단백질 또는 폴리머 또는 다른 성분의 원하는 특성을 조합하는 것을 유리하게 허용한다. 폴리머 담체는, 특히 생체 외 다른 세포 라인에 핵산의 효과적인 형질전환, 단 특히 생체 내 형질전환을 보이는, 예를 들어 핵산의 효과적인 형질전환의 목적을 위해, 어쥬번트 치료를 위해, 유전자 치료의 목적을 위해, 유전자 넉-다운(knock-down) 또는 활성의 손실 없이 다른 전략을 위해, 핵산을 효과적으로 압축한다. 폴리머 담체 및 따라서 폴리머 담체 화물 복합체는 나아가 세포에 독성이 없는, 이의 핵산 화물의 효과적 방출을 제공하는, 동결 건조시 안정하고 면역 자극성 제제 또는 어쥬번트로써 적용가능하다. 바람직하게는 폴리머 담체 화물 복합체는 항 바이러스 사이토카인 IFN-알파를 유도할 수 있다.
특히, 이황화 결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체는 이의 펩타이드 또는 폴리머 함량을 다르게 하는 것 및 예를 들어 양이온성 성분으로써 동일하거나 다른 양이온성 펩타이드(들) 또는 폴리머(들) 합성 및 폴리머 담체로 다른 성분의 선택적인 추가에 의해, 따라서 이의 생물물리적/생물화학적 특성, 특히 매우 쉽고 빠른 폴리머 담체의 양이온성 특성을 조절하는 것을 상당히 허용한다. 매우 작은 비독성 모노머 단위로 이루어지더라도, 폴리머 담체는 핵산 화물의 강한 응축 및 복합체의 안정성을 제공하는 긴 양이온성 결합 서열을 형성한다. 시토졸(cytosole)(예를 들어 시토졸 GSH(cytosolic GSH))이 감소하는 조건 하에서, 복합체는 추가적으로 분해되는(예를 들어 올리고펩타이드), 이의 (양이온성) 성분으로 빠르게 분해된다. 이는 시토졸 내 핵산 화물의 숙고(deliberation)를 돕는다. 시토졸 내 작은 올리고펩타이드 또는 폴리머로 분해 때문에, 비독성은 고분자 올리고펩타이드 또는 폴리머로, 예를 들어 고분자 폴리아르기닌으로부터, 알려진 것처럼 관찰되었다.
따라서, 폴리머 담체 화물 복합체의 폴리머 담체는 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드, 상기 정의된 단백질 또는 (비펩타이드) 폴리머로부터 선택된, 선택적으로 본 발명에 정의된 추가적 성분과 함께, 다른 (짧은) 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드, 단백질 또는 폴리머를 포함할 수 있다.
추가적으로 상기 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 폴리머 담체는, 이황화 가교결합을 통해 폴리머 담체를 위한 기초를 형성하는 더욱 바람직하게는 다른 (짧은) 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 (비펩타이드) 폴리머의 적어도 하나, 바람직하게는 이황화 가교결합 전에, 적어도 하나의 추가적 성분과 함께 변형될 수 있다. 그렇지 않으면, 이러한 폴리머 담체는 적어도 하나의 추가적 성분과 함께 변형될 수 있다. 또한, 이황화 가교결합을 통해 상기 정의된 다른 (짧은) 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드와 함께 폴리머 담체 이황화물을 전형적으로 형성하는, 적어도 하나의 추가적 성분을 선택적으로 포함할 수 있다.
상기 정의된 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 (비펩타이드) 폴리머의 변형을 위하여, 폴리머 담체의 성분의 각각은 (바람직하게는 이미 이황화 가교결합 전에) 또한, 본 발명에 정의된 추가적 성분과 같이 부착을 허용하는, 적어도 하나의 추가적 기능적 일부를 포함할 수 있다. 이러한 기능적 일부는 추가적 성분의 부착을 허용하는 기능성으로부터, 예를 들어 본 발명에 정의된 기능성, 예를 들어 아민 형성(예를 들어 카르복실산, 설폰산, 아민 등)에 의해, 마이클 첨가(예를 들어 말레인이미드 일부, a,b 불포화 카보닐 등), 클릭 화학(예를 들어 아지드 또는 알킨)에 의해, 알켄/알킨 치환(methatesis)(예를 들어 알켄 또는 알킨)에 의해, 이민 또는 하이드로존 형성(알데하이드 또는 케톤, 하이드라진, 하이드록실아민, 아민), 복합화 반응(아비딘, 비오틴, 단백질 G) 또는 Sn-타입 치환 반응을 허용하는 성분(예를 들어 할로겐알칸, 티올, 알코올, 아민, 하이드라진, 하이드라지드, 설폰산 에스터, 옥시포스포늄 염) 또는 추가적 성분의 부착에 활용될 수 있는 다른 화학적 일부, 선택될 수 있다.
특히 바람직한 실시예에 따르면, 폴리머 담체 내 포함될 수 있거나 폴리머 담체 화물 복합체의 폴리머 담체의 기초를 형성하는 다른 (짧은) 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드 또는 (비펩타이드) 폴리머를 변형하는데 사용될 수 있는, 추가적인 성분은, 예를 들어 본 발명에 정의된 폴리머 담체의 생물물리적/생물화학적 특성을 변형할 수 있는, 아미노산 성분(AA)이다. 본 발명에 따르면, 아미노산 성분 (AA)는 바람직하게는 약 1 내지 100의 범위 내, 바람직하게는 약 1 내지 100의 범위 내, 바람직하게는 약 1 내지 50의 범위 내, 더욱 바람직하게는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 또는 15-20 포함하는 수에서 선택된, 또는 상기 언급된 값의 어느 둘에 의해 형성된 범위로부터 선택될 수 있는, 많은 수의 아미노산을 포함한다. 이러한 맥락에서 아미노산 성분 (AA)의 아미노산은 각각으로부터 독립적으로 선택될 수 있다. 예를 들어 만약 폴리머 담체 둘 또는 그 이상 (AA) 성분이 존재할 경우, 그들은 동일할 수 있거나 서로 다를 수 있다.
아미노산 성분(AA)은 포함하거나 본 발명에 정의된 폴리머 담체 내 이황화 결합을 통해 이 성분(AA)을 도입하는, -SH를 포함하는 일부의 측면(예를 들어 말단)일 수 있다. -SH 포함 일부가 시스테인을 나타내는 특수한 경우에, Cys는 시스테인을 나타내고 이황화결합을 위해 필수적인 -SH- 일부를 제공하는, 아미노산 성분(AA) 또한 -Cys-(AA)-Cys-로 읽을 수 있다. -SH 포함하는 일부는 또한 양이온성 성분 또는 이의 성분의 어느 것을 위해 상기 개시된 변형 또는 반응의 어느 것을 사용하여 아미노산 성분 (AA)에 도입될 수 있다.
나아가, 아미노산 성분(AA)은, 예를 들어 만약 아미노산 성분(AA)이 두 추가적 성분 사이에 연결자로 사용될 경우에(예를 들어 두 양이온성 폴리머 사이의 연결자로써), 예를 들어 이황화결합을 통해 두 기능(functionalities)에 결합을 허용하는 화학식 HS-(AA)-SH에 의해 나타나는 형태로, 두 -SH- 일부(또는 그 이상)와 함께 제공될 수 있다. 이러한 경우, 하나의 -SH 일부는, 화학식 HS-(AA)-S-보호기의 아미노산 성분(AA)을 유도하는, 바람직하게는 기술 분야에서 알려진 보호기를 사용하여 첫번째 단계에서 보호된다. 그 다음, 아미노산 성분(AA)은 비보호된 -SH 일부를 통해 첫번째 이황화 결합을 형성하도록, 폴리머 담체의 추가적 성분에 결합될 수 있다. 보호된 -SH-일부는 이후 전형적으로 탈보호되고 두번째 이황화 결합을 형성하는 폴리머 담체의 추가적 성분의 추가적 자유 -SH- 일부에 결합한다.
그렇지 않으면, 아미노산 성분(AA)은 폴리머 담체의 어느 성분에 아미노산 성분(AA)의 결합을 허용하는, 폴리머 담체의 다른 성분을 위한 이미 상기 설명된 다른 기능과 함께 제공될 수 있다.
실시예에서, 상기 아미노산 성분(AA)은 폴리머 담체에 이황화 결합을 통해 결합되고, 이는 이황화 결합은 3,6-디옥사-1,8-옥탄디티올(DODT) 가교제와 같은, 가교제를 통해 실현되지 않는 것이 바람직하다.
따라서, 아미노산 성분(AA)은 이황화 결합의 사용과 함께 또는 함께하지 않고 폴리머 담체의 추가적 성분에 결합될 수 있다. 이황화 결합을 사용하지 않는 결합은 상기 설명된 반응의 어느 것에 의해, 바람직하게는 본 발명에 정의된 아미드-화학을 사용하는 폴리머 담체의 다른 성분에 아미노산 성분(AA)의 결합에 의해 수행될 수 있다. 만약 목적으로 하거나 필수적인 경우, 아미노산 성분(AA)의 다른 말단, 예를 들어 N- 또는 C- 말단, 은 다른 성분에, 예를 들어 리간드 L, 짝지어 지는데 사용될 수 있다. 이러한 목적을 위하 아미노산 성분(AA)의 다른 말단은, 예를 들어 클릭-화학을 통해 다른 성분에 결합하는데 사용될 수 있는, 바람직하게는 포함하거나 또는 추가적 기능을 포함하기 위해, 예를 들어 알킨-종(alkyn-species)(상기 참조), 변형된다. 만약 리간드가 산-불안정한(labile) 결합을 통해 결합될 경우, 결합은 바람직하게는 엔도솜 내 쪼개지고 폴리머 담체는 이의 표면에 아미노산 성분(AA)을 제시한다.
아미노산 성분(AA)은 상기 정의된 폴리머 담체의 추가적 성분으로써 발생할 수 있다, 예를 들어 양이온성 성분 사이의 연결자로써 예를 들어 하나의 양이온성 펩타이드 및 추가적 양이온성 펩타이드 사이의 연결자로써, 하나의 양이온성 폴리머 및 추가적 양이온성 폴리머 사이의 연결자로써, 하나의 양이온성 펩타이드 및 양이온성 폴리머 사이의 연결자로써, 모두 바람직하게는 상기 정의된 것과 같이, 또는 폴리머 담체의 추가적 성분과 같이, 예를 들어 폴리머 담체 또는 이의 성분에 아미노산 성분(AA) 결합에 의해, 예를 들어 곁사슬, SH-일부를 통해 또는 본 발명에 정의된 추가적 일부를 통해, 상기 아미노산 성분은 바람직하게는 그에 따라서 변형된다.
추가적 및 특히 바람직한 대안에 따르면, 아미노산 성분(AA)는 폴리머 담체, 특히 상기 정의된 폴리머 담체 내 양이온성 성분의 함량을 변형하는데 사용될 수 있다.
이러한 맥락에서 폴리머 담체 내 양이온성 성분의 함량은 적어도 10%, 20%, 또는 30%, 바람직하게는 적어도 40%, 더욱 바람직하게는 적어도 50%, 60% 또는 70%, 단 또한 바람직하게는 적어도 80%, 90%, 또는 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%, 가장 바람직하게는 적어도 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%인 것이 바람직하며, 폴리머 담체 내 모든 성분의 함량이 100%인 경우에, 또는 약 30% 내지 100%의 범위 내, 더욱 바람직하게는 약 50% 내지 100%의 범위 내, 더욱 더 바람직하게는 약 70% 내지 100%의 범위 내, 예를 들어 70, 80, 90 또는 100%, 또는 상기 언급된 값의 어느 둘에 의해 형성된 범위 내 일 수 있다.
본 발명의 맥락에서, 아미노산 성분은(AA) 하기 대안으로부터 선택될 수 있다.
첫번째 대안에 따르면, 아미노산 성분(AA)은 방향족 아미노산 성분(AA)일 수 있다. 본 발명의 폴리머 담체에 아미노 방향족 산 성분(AA)으로써 방향족 아미노산 또는 서열의 합성은, 인산염 백본에 폴리머 담체 분자의 양전하를 띤 서열에 의해 이의 결합에 비해, 핵산 화물의 염기와 함께 방향족 아미노산의 상호작용 때문에, 핵산에 폴리머 담체의 다른 (두번째) 결합을 가능하게 한다. 이러한 상호작용은 예를 들어 층간(intercalations)에 의해 또는 최소 또는 최대 그루브(groove) 결합에 의해 발생할 수 있다. 상호작용의 종류는 생체 내 세포외 기질 내에 주로 발견되고 또한 염 효과에 덜 민감한 음이온성 복합 파트너(예를 들어 헤파린, 히알루론산)에 의해 탈응축(decompaction) 하기 쉽지 않다.
이러한 목적을 위해, 방향족 아미노산 성분(AA) 내 아미노산은 예를 들어 Trp, Tyr, 또는 Phe로부터 선택된 동일하거나 다른 방향족 아미노산으로부터 선택될 수 있다.
추가적으로, 방향족 아미노산 성분(AA)은 상기 정의된 폴리머 담체의 추가적 부분처럼 이황화 결합을 통한 이러한 성분을 도입하는, 예를 들어 연결자와 같은, 포함하거나 또는 -SH 포함하는 일부의 측면일 수 있다. 이러한 -SH를 포함하는 일부는 본 발명에서 정의된 추가적 성분에 본 발명에서 정의된 하나의 성분에 짝짓기에 적합한 본 발명에서 정의된 어느 일부 일 수 있다. 예를 들어, 이러한 -SH 포함하는 일부는 시스테인일 수 있다.
추가적으로, 방향족 아미노산 성분(AA)은 방향족 아미노산 성분(AA) 내 Trp, Tyr 및 Phe의 보다 긴 서열의 구조 파괴자(breaker)로써 제공될 수 있는, 적어도 하나의 프롤린, 바람직하게는 둘, 셋 또는 그 이상의 프롤린을 포함 또는 나타낼 수 있다.
두번째 대안에 따르면, 아미노산 성분(AA)은 친수성(및 바람직하게는 전하를 띠지 않는 극성) 아미노산 성분(AA)일 수 있다. 본 발명의 폴리머 담체로 아미노 친수성(및 바람직하게는 전하를 띠지 않는 극성) 산 성분(AA)으로써 친수성(및 바람직하게는 전하를 띠지 않는 극성) 아미노산 또는 서열의 합성은 핵산 화물에 보다 유연한 결합을 가능하게 한다. 이는 핵산 화물의 보다 효과적인 응축 및 그에 따른 핵산가수분해효소 및 원하지 않는 탈응축에 대한 보다 나은 방어를 유도한다. 이는 또한, 만약 원하거나 필요한 경우, 전체 담체의 양전하를 감소시키는 것을 보이고 이러한 맥락에서 결합 특성을 보다 잘 조절하기 위해 (긴) 폴리머 담체의 제공을 허용한다.
이러한 목적을 위해 친수성(및 바람직하게는 전하를 띠지 않는 극성) 아미노산 성분(AA) 내 아미노산은 예를 들어 Thr, Ser, Asn 또는 Gln으로부터 선택된, 동일하거나 다른 친수성(및 바람직하게는 전하를 띠지 않는 극성) 아미노산으로부터 선택될 수 있다.
추가적으로, 친수성(및 바람직하게는 전하를 띠지 않는 극성) 아미노산 성분 (AA)은, 상기 일반식 (I)의 추가적 부분 처럼 이황화결합을 통해 이러한 성분을 도입하는, 예를 들어 연결자와 같이, 포함하거나 -SH 포함하는 일부의 측면일 수 있다. 이러한 -SH 포함하는 일부는 본 발명에서 정의된 추가적 성분에 본 발명에서 정의된 하나의 성분을 짝짓기 적합한 본 발명에서 정의된 어느 일부일 수 있다. 실시예와 같이, 이러한 -SH 포함하는 일부는 시스테인일 수 있다.
추가적으로, 친수성(및 바람직하게는 전하를 띠지 않는 극성) 아미노산 성분 (AA)은, 친수성(및 바람직하게는 전하를 띠지 않는 극성) 아미노산 성분(AA) 내 Ser, Thr 및 Asn의 보다 긴 서열의 구조 파괴자로써 제공될 수 있는, 적어도 하나의 프롤린, 바람직하게는 둘, 셋 또는 그 이상의 프롤린을 포함할 수 있다.
세번째 대안에 따르면, 아미노산 성분(AA)은 지방 친화성(lipohilic) 아미노산 성분(AA)일 수 있다. 본 발명의 폴리머 담체 내 아미노 지방 친화성 산 성분 (AA)으로써 지방친화성 아미노산 또는 서열의 합성은 복합체를 형성할 때 핵산 화물 및/또는 폴리머 담체 및 이의 핵산 화물의 보다 강한 응축을 가능하게 한다. 이는 특히 폴리머 담체의 하나 또는 그 이상의 폴리머 가닥(strands)의, 특히 지방 친화성 아미노산 성분(AA) 및 핵산 화물의 지방 친화성 부위(sections)의 상호작용 때문이다. 이러한 상호작용은 바람직하게는 폴리머 담체 및 이의 핵산 화물 사이에 복합체에 추가적인 안정성을 추가할 것이다. 이러한 안정화는 다른 폴리머 가닥 사이에 비공유 가교결합의 종류에 어떻게든 비교될 수 있다. 특히 수용성 환경에서 이러한 상호작용은 전형적으로 강력하고 현저한 효과를 제공한다.
이러한 목적을 위해, 지방 친화성 아미노산 성분(AA) 내 아미노산은 예를 들어 Leu, Val, Ile, Ala, Met로부터 선택된, 동일하거나 다른 지방 친화성 아미노산으로부터 선택될 수 있다.
추가적으로, 지방 친화성 아미노산 성분(AA)는 상기 폴리머 담체의 추가적 부분과 같이 이황화 결합을 통해 이 성분에 도입을 허용하는, 예를 들어 연결자와 같이, 포함할 수 있거나 -SH 포함하는 일부의 측면일 수 있다. 이러한 -SH 포함하는 일부는 본 발명에서 정의된 추가적 성분에 본 발명에서 정의된 하나의 성분을 짝짓기에 적합한 본 발명에 정의된 어느 일부일 수 있다. 실시예와 같이, 이러한 -SH 포함하는 일부는 시스테인일 수 있다.
추가적으로, 지방 친화성 아미노산 성분(AA)은 지방 친화성 아미노산 성분 (AA) 내 Leu, Val, Ile, Ala 및 Met의 보다 긴 서열의 구조적 파괴자로써 제공될 수 있는, 적어도 하나의 프롤린, 바람직하게는 둘, 셋 또는 그 이상의 프롤린을 포함할 수 있다.
최종적으로 네번째 대안에 따르면, 아미노산 성분(AA)은 약학 염기성 아미노산 성분(AA)일 수 있다. 본 발명의 폴리머 담체에 약한 염기성 아미노산 성분(AA)으로써 약학 염기성 아미노산 또는 서열의 합성은 양성자 스폰지(proton sponge)로써 제공 및 엔도소말 탈출(endosomal escape)(또한 엔도소말 방출(release))로 불림)(양성자 스폰지 효과)을 촉진할 수 있다. 이러한 약한 염기성 아미노산 성분 (AA)의 합성은 바람직하게는 형질전환 효율을 증진시킨다.
이러한 목적을 위해, 약한 염기성 아미노산 성분 (AA) 내 아미노산은 예를 들어 히스티딘 또는 아스파르트산염(아스파르트산)으로부터 선택된, 동일하거나 다른 약한 아미노산으로부터 선택될 수 있다.
추가적으로, 약한 염기성 아미노산 성분(AA)은 상기 일반식 (I)의 추가적 일부로써 이황화 결합을 통해 이 성분에 도입을 허용하는, 예를 들어 연결자로써, 포함할 수 있거나 -SH- 포함하는 일부의 측면일 수 있다. 이러한 -SH 포함하는 일부는 본 발명에서 정의된 추가적 성분에 본 발명에서 정의된 하나의 성분을 짝짓기에 적합한 본 발명에서 정의된 어느 일부일 수 있다.
추가적으로, 약한 염기성 아미노산 성분(AA)은 약한 염기성 아미노산 성분 (AA) 내 히스티딘 또는 아스파르트산염(아스파르트산)의 보다 긴 서열의 구조적 파괴자로써 제공될 수 있는, 적어도 하나의 프롤린, 바람직하게는 둘, 셋 또는 그 이상의 프롤린을 포함할 수 있다.
다섯번째 대안에 따르면, 아미노산 성분(AA)은 신호 펩타이드 또는 신호 서열, 국재화(localization) 신호 또는 서열, 핵 국재화 신호 또는 서열(NLS), 항체, 세포 관통 펩타이드 (예를 들어 TAT) 등 일 수 있다. 바람직하게는 이러한 아미노산 성분(AA)은 (가역적) 이황화 결합을 통해 폴리머 담체 또는 폴리머 담체의 다른 성분에 결합한다. 이러한 맥락에서, 신호 펩타이드 또는 신호 서열, 국재화 신호 또는 서열, 핵 국재화 신호 또는 서열(NLS), 항체, 세포 관통 펩타이드(예를 들어 TAT) 등은 추가적으로 적어도 하나의 -SH- 일부를 포함한다. 이러한 맥락에서, 신호 펩타이드, 국재화 신호 또는 서열 또는 핵 국재화 신호 또는 서열(NLS)은 특정한 목표 세포에(예를 들어 간세포 또는 항원 제시 세포) 독창적인 폴리머 담체 화물 복합체에 지시(direct)하는데 사용될 수 있고 바람직하게는, 예를 들어 세포 내, 핵 내, 엔도솜 구획 내, 미토콘드리아 기질의 서열, 원형질막의 국부(localisation) 서열, 골지체의 국부 서열, 핵, 세포질 및 세포 골격(cytoskeleton) 등, 특정한 타겟에 폴리머 담체의 전좌(translocalization)를 허용한다. 이러한 신호 펩타이드, 국재화 신호 또는 서열 또는 핵 국재화 신호는 본 발명에서 정의된 핵산의 어느 것, 바람직하게는 RNA 또는 DNA, 보다 바람직하게는 shRNA 또는 pDNA의 수송을 위해, 예를 들어 핵 내로, 사용될 수 있다. 이러한 신호 펩타이드, 국재화 신호 또는 서열 또는 핵 국재화 신호는 예를 들어 소포체의 국부 서열을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 본 발명에서 정의된 분비성 신호 펩타이드의 예시는 고전적 또는 비고전적 MHC-분자의 신호 펩타이드(예를 들어 MHC I 및 II 분자의, 예를 들어 MHC 클래스 I 분자 HLA-A*0201의 신호서열), 본 발명에 정의된 사이토카인 또는 면역글로불린의 신호 펩타이드, 본 발명에 정의된 면역글로불린 또는 항체의 불변 사슬의 신호 펩타이드, Lamp1의 신호 펩타이드, 타파신(Tapasin), Erp57, 칼레티쿨린(Calreticulin), 칼넥신(Calnexin), 및 단백질 관련된 또는 소포체(ER) 또는 엔도소말-리소소말 구획과 관련된 단백질의 추가적 막(membrane)을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 특히 바람직하게는 MHC 클래스 I 분자 HLA-A*0201의 신호 펩타이드는 본 발명에 따라 사용될 수 있다. 이러한 추가적인 성분은 예를 들어 양이온성 폴리머 또는 본 발명에 정의된 폴리머 담체의 어느 다른 성분에 결합될 수 있다. 바람직하게는 이 신호 펩타이드, 국재화 신호 또는 서열 또는 핵 국재화 신호 또는 서열(NLS)은, (가역적) 이황화 결합을 통해 폴리머 담체 또는 폴리머 담체의 다른 성분에 결합된다. 이러한 목적을 위해 (AA) 성분은 추가적으로 본 발명에서 정의된 적어도 하나의 -SH 일부를 포함한다. 폴리머 담체의 어느 성분에 결합은 또한 예를 들어 본 발명에 정의된 생리학적 pH 값에서, 보다 낮은 pH-값에서 추가적인 성분을 분리(detach) 또는 방출하는, 바람직하게는 폴리머 담체의 어느 성분의 곁사슬을 통해, 산-불안정 결합을 사용하여 수행될 수 있다.
추가적으로, 다른 대안에 따르면, 아미노산 성분(AA)은 그에 따라 폴리머 담체의 기능성을 조절할 수 있는, 기능적 펩타이드 또는 단백질일 수 있다. 아미노산 성분(AA)처럼 이러한 기능적 펩타이드 또는 단백질은 예를 들어 치료적으로 활성 단백질로써 하기에 정의된 것처럼, 본 발명에서 정의된 어느 펩타이드 또는 단백질을 포함할 수 있다. 하나의 대안에 따르면, 이러한 추가적인 기능적 펩타이드 또는 단백질은 소위 세포 관통 펩타이드(CPPs) 또는 수송을 위한 양이온성 펩타이드를 포함할 수 있다. 특히 바람직하게는 엔도솜 내 pH-조절된 형태적 변화를 유도하고 리포솜의 지질층내로 삽입에 의해 엔도솜으로부터 폴리머 담체(핵산과 함께 복합체 내)의 향상된 방출을 유도하는, CPPs이다. 이들 세포 관통 펩타이드(CPPs) 또는 수송을 위한 양이온성 펩타이드는 프로타민, 뉴클레올린, 스페르민 또는 스페르미딘, 올리고- 또는 폴리-L-리신(PLL), 염기성 폴리펩타이드, 올리고 또는 폴리-아르기닌, 세포 관통 펩타이드(CPPs), 키메라 CPPs, 트랜스포탄과 같은, 또는 MPG 펩타이드, HIV-결합 펩타이드, Tat, HIV-1 Tat (HIV), Tat-유도된 펩타이드, 페네트라틴 패밀리의 멤버, 예를 들어 페네트라틴, 안테나페디아 유도된 펩타이드(특히 초파리(Drosophila antennapedia)로부터), pAntp, pIsl, 등, 항미생물 유도된 CPPs 예를 들어 부포린-2, Bac715-24, SynB, SynB(1), pVEC, hCT-유도된 펩타이드, SAP, MAP, KALA, PpTG20, L올리고머, FGF, 락토페린, 히스톤, VP22 유도된 또는 유사체 펩타이드, HSV, VP22(헤르페스 심플랙스), MAP, KALA 또는 단백질 수송 도메인(PTDs, PpT620, 프롤린 풍부 펩타이드, 아르기닌 풍부 펩타이드, 리신 풍부 펩타이드, Pep-1, L-올리고머, 칼시토닌 펩타이드(들) 등을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이러한 아미노산 성분(AA)은 또한 본 발명에서 정의된 폴리머 담체의 어느 성분에 결합될 수 있다. 바람직하게는 이는 폴리머 담체 또는 (가역적) 이황화 결합을 통한 폴리머 담체의 다른 성분에 결합된다. 상기 목적을 위해, 아미노산 성분(AA)은 바람직하게는 본 발명에서 정의된 적어도 하나의 -SH 일부를 포함한다. 폴리머 담체의 어느 성분에 결합은 또한, 예를 들어 본 발명에서 정의된 생리학적 pH 값에서, 보다 낮은 pH-값에서 추가적인 성분의 분리 또는 방출을 허용하는 바람직하게는 폴리머 담체의 어느 성분의 곁사슬을 통해, SH-일부 또는 산-불안정 결합을 사용하여 수행될 수 있다.
마지막 대안에 따르면, 아미노산 성분(AA)은 세포 내 어느 바람직한 기능을 실행할 수 있는 어느 펩타이드 또는 단백질로 이루어질 수 있다. 특히 바람직하게는 펩타이드 또는 단백질은 치료적으로 활성인 단백질 또는 펩타이드, 항원으로부터, 예를 들어 종양 항원, 병원체 항원(동물 항원, 바이러스 항원, 원생생물 항원, 박테리아 항원, 알러지 항원), 자가면역 항원, 또는 알레르겐으로부터, 항체로부터, 면역 자극성 단백질 또는 펩타이드로부터, 항원 특이적 T-세포 수용체로부터, 또는 핵산 코딩을 위한 하기 정의된 특이적 (치료적) 적용에 적합한 어느 다른 단백질 또는 펩타이드로부터 추가적 항원으로부터 선택된다. 특히 바람직하게는 본 발명에 정의된 적어도 하나의 항원(감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원; 알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원; 자가면역 질병과 관련된 항원; 또는 암 또는 종양 질병과 관련된 항원)으로부터 펩타이드 에피토프이다.
결국, 아미노산 성분(AA)은 특히 폴리머 담체에, 아미노산 성분(AA)은 바람직하게는 오발부민 또는 오발부민의 절편이 아닌, 폴리머 담체 화물 화합물에 공유 결합된다. 바람직하게는, 아미노산 성분은 오발부민 또는 오발부민의 절편이 아니다.
아미노산 성분의 펩타이드 본성 때문에 또한 펩타이드, 단백질, 또는 이의 절편, 변이체 및 유도체는 그에 따라 적용하고 명백하게 포함된다.
나아가, 상기 (AA) 성분은 통상의 기술자에게 알려진 모든 방법에 의해 또는 재조합 펩타이드 또는 단백질 생산에 의해 또는 본 발명에 설명된 펩타이드 합성에 의해 제조될 수 있다.
폴리머 담체는 상기 대안의 어느 것은 서로 조합될 수 있고, 그들의 -SH-일부를 통해 중합 응축 반응 내에서 동일한 것을 중합함으로써 형성될 수 있는, 상기 언급된 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드, 단백질 또는 폴리머 또는 추가적 성분, 예를 들어 (AA)의 적어도 하나를 포함할 수 있다.
다른 실시예에 따르면 폴리머 담체 화물 복합체의 폴리머 담체 또는 이의 단일 성분은, 예를 들어 상기 언급된 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드, 단백질 또는 폴리머 또는 추가적 성분 , 예를 들어 (AA)의, 바람직하게는 탄수화물, 더욱 바람직하게는 당, 더욱 더 바람직하게는 만노스(mannose), 리간드와 함께 추가적으로 변형될 수 있다. 바람직하게는 이 리간드는 폴리머 담체에 또는 (가역적) 이황화 결합을 통해 또는 마이클 첨가를 통해 폴러미 담체의 성분에 결합된다. 리간드가 이황화 결합에 의해 결합되는 경우 리간드는 추가적으로 적어도 하나의 -SH-일부를 포함한다. 이들 리간드는 특이적 목표 세포에 폴리머 담체 화물 복합체를 지시하는데 사용될 수 있다(예를 들어 간세포 또는 항원 제시 세포). 이러한 맥락에서 만노스는 수상돌기세포가 특히 백신 접종 또는 어쥬번트 목적을 위한 타겟일 경우에 리간드로써 특히 바람직하다.
본 발명의 추가적인 실시예에 따르면, 폴리머 담체 화물 복합체는 -SH 일부를 포함하지 않는 상기 정의된 (AA) 성분을 포함할 수 있다. 이들 (AA) 성분은 적어도 하나의 핵산 분자의 복합화 반응 이전 또는 중간에 첨가될 수 있다. 그에 따라, (AA) 성분(들)은 (공유) 중합화(polymerization)에 의해 그들의 폴리머 담체 내 (AA) 성분(들)의 포함 없이 폴리머 담체 화물 복합체에 (비공유적으로) 결합된다.
하나의 특정한 실시예에 따르면, 전체 폴리머 담체 화물 복합체는 첫단계에서 그들의 -SH- 일부를 통해 상기 언급된 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드, 단백질 또는 폴리머 또는 추가적 성분, 예를 들어 (AA)의 중합(polymerization) 응축(적어도 하나의) 및 두번째 단계에서 이러한 폴리머 복합체에 핵산을 복합화에 의해 형성될 수 있다. 폴리머 담체는 따라서 상기 정의된 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드, 단백질 또는 폴리머 또는 추가적 성분, 예를 들어 (AA)의 동일 또는 다른 것의 적어도 하나 또는 그 이상의 수를 포함할 수 있고, 수는 바람직하게는 상기 범위에 의해 결정된다.
하나의 대체적인 특정한 실시예에 따르면, 폴리머 담체 화물 복합체는 (제 자리에 준비된) 폴리머 담체에 핵산 화물을 복합화하는 동시에 그들의 -SH- 일부를 통해, 상기 정의된 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드, 단백질 또는 폴리머 또는 추가적 성분, 예를 들어 (AA)의 적어도 하나의 중합 응축을 수행함에 의해 형성된다. 비슷하게, 폴리머 담체는 따라서 또한 여기에 상기 정의된 양이온성 또는 다중양이온성 펩타이드, 단백질 또는 폴리머 또는 추가적 성분, 예를 들어 (AA)의 동일하거나 다른 것의 적어도 하나 또는 그 이상의 수를 포함할 수 있고, 수는 바람직하게는 상기 범위에 의해 결정된다.
폴리머 담체 화물 복합체는 추가적으로 적어도 하나의 핵산(분자)을 화물로써 포함한다. 본 발명의 맥락에서, 이러한 핵산 분자는 예를 들어 어느 (단일-가닥 또는 이중 가닥) DNA, 바람직하게는, 이에 제한되지 않고, 예를 들어 유전체 DNA, 단일 가닥 DNA 분자, 이중 가닥 DNA 분자, 코딩 DNA, DNA 프라이머, DNA 프로브, 면역 자극성 DNA, (짧은) DNA 올리고뉴클레오타이드((짧은) 올리고데스옥시리보뉴클레오타이드)로부터 선택된 또는 예를 들어 어느 PNA (펩타이드 핵산)으로부터 선택될 수 있는 또는 예를 들어 어느 (단일 가닥 또는 이중 가닥) RNA로부터, 바람직하게는, 이에 제한되지 않고, (짧은) RNA 올리고뉴클레오티드((짧은)올리고리보뉴클레오티드), 코딩 RNA, 메신저 RNA(mRNA), 면역 자극성 RNA, 짧은 간섭 RNA(small interfering RNA)(SiRNA), 안티센스 RNA, 마이크로 RNA, 작은 핵 RNA(snRNA), 작은 헤어핀(sh) RNA 또는 리보스위치, 리보자임 또는 압타머; 등으로부터 선택된 어느 적절한 핵산일 수 있다. 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자는 또한 리보솜 RNA(rRNA), 트랜스퍼 RNA(tRNA), 메신저 RNA(mRNA), 또는 바이러스 RNA(vRNA)일 수 있다. 바람직하게는 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자는 RNA이다. 더욱 바람직하게는, 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자는 (선형) 단일 가닥 RNA, 더욱 바람직하게는 mRNA 또는 면역 자극성 RNA이다. 본 발명의 맥락에서, mRNA는 폴리-A 꼬리(및/또는 폴리-C-꼬리)의 뒤를 이을 수 있는, 몇몇 구조적 요소(elements)로 구성된, 예를 들어 선택적인 5'-CAP 구조, 선택적인 5'-UTR 부위, 코딩 부위의 뒤를 이어 업스트림(upstream) 위치한 리보좀 결합 부위, 선택적 3'-UTR 부위, 전형적으로 RNA이다. mRNA는 모노-(mono-), 디-(di-), 또는 멀티시스트로닉(multicistronic RNA), 즉, 하나, 둘 또는 그 이상의 단백질 또는 펩타이드의 코딩 서열을 수송하는 RNA로써 발생할 수 있다. 디-, 또는 멀티시스트로닉 mRNA 내 이러한 코딩 서열은 적어도 하나의 IRES 서열에 의해, 예를 들어 본 발명에 정의된 것처럼 분리될 수 있다.
나아가, 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산은 단일 또는 이중 가닥 핵산 (분자)(두 단일 가닥 핵산(들) (분자)의 비공유 연관 때문에 핵산 (분자)처럼 또한 여겨질 수 있는) 또는 적어도 부분적으로 자가 상호보완적인 (이들 부분적인 이중 가닥 또는 부분적인 단일 가닥 핵산 분자 모두는 전형적으로 보다 길고 짧은 단일 가닥 핵산 분자에 의해 또는 길이가 거의 동일한, 두 단일 가닥 핵산 분자에 의해 형성되는 부분적으로 이중 가닥 또는 부분적으로 단일 가닥 핵산일 수 있고, 상기 하나의 단일 가닥 핵산 분자는 다른 단일 가닥 핵산 분자에 부분적으로 상호보완적이고 모두는 따라서 이 부위 내 이중 가닥 핵산 분자, 즉 부분적으로 이중 가닥 또는 부분적으로 단일 가닥 핵산(분자)을 형성한다. 바람직하게는, 핵산(분자)는 단일 가닥 핵산 분자일 수 있다. 나아가, 핵산(분자)는 원형 또는 선형 핵산 분자, 바람직하게는 선형 핵산 분자일 수 있다.
하나의 대안에 따르면, 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자는 코딩 핵산 분자, 예를 들어 DNA 또는 RNA일 수 있다. 이러한 코딩 DNA 또는 RNA는 본 발명에 정의된 어느 DNA 또는 RNA일 수 있다. 바람직하게는, 이러한 코딩 DNA 또는 RNA는 단일 또는 이중 가닥 DNA 또는 RNA, 보다 바람직하게는 단일 가닥 DNA 또는 RNA, 및/또는 원형 또는 선형 DNA 또는 RNA, 더욱 바람직하게는 선형 DNA 또는 RNA일 수 있다. 더욱 바람직하게는, 코딩 DNA 또는 RNA는 (선형) 단일 가닥 DNA 또는 RNA일 수 있다. 가장 바람직하게는, 본 발명에 따른 핵산 분자는 ((선형) 단일 가닥) 메신저 RNA(mRNA)일 수 있다. 이러한 mRNA는 모노-, 디-, 또는 멀티시스트로닉 RNA, 즉 하나, 둘 또는 그 이상의 단백질 또는 펩타이드의 코딩 서열을 수송하는 RNA처럼 나타날 수 있다. 디-, 또는 멀티시스트로닉 mRNA 내 이러한 코딩 서열은 예를 들어 본 발명에서 정의된 것처럼 적어도 하나의 IRES 서열에 의해 분리될 수 있다.
코딩 핵산:
폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자는, 이에 제한되지 않고, 예를 들어 어쥬번트 단백질을 포함하는 치료적으로 활성 단백질 또는 펩타이드로부터, 항원, 예를 들어 종양 항원, 병원체 항원(예를 들어 동물 항원으로부터, 바이러스 항원으로부터, 원생생물 항원으로부터, 박테리아 항원으로부터 선택된), 알러지성 항원, 자가면역 항원, 또는 추가적 항원으로부터, 알레르겐으로부터, 항체로부터, 면역 자극성 단백질 또는 펩타이드로부터, 항원 특이적 T-세포 수용체로부터, 또는 특이적 (치료적) 적용에 적합한 어느 다른 단백질 또는 펩타이드로부터 선택될 수 있는 단백질 또는 펩타이드를 코딩할 수 있고, 상기 코딩 핵산은 세포, 조직 또는 유기체 내로 수송될 수 있고 단백질은 이러한 세포, 조직 또는 유기체 내에서 지속적으로 발현될 수 있다. 이러한 맥락에서 코딩 핵산은 본 발명에서 정의된 신호 펩타이드에 추가적으로 코딩할 수 있다.
a) 치료적으로 활성 단백질
본 발명의 맥락에서, 치료적으로 활성 단백질 또는 펩타이드는 본 발명에서 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자에 의해 코딩될 수 있다. 치료적으로 활성 단백질은 치료, 병을 예방하여(prophylactically) 예방(prevent) 또는, 바람직하게는 본 발명에 정의된 질병 치료적으로(therapeutically) 치료(treat)에 효과를 갖는, 단백질로써 본 발명에 정의되고, 또는 개인이 필요한 단백질이다. 이들은 재조합을 발생시키는 어느 자연적으로 또는 합성적으로 설계된 것 또는 기술분야로부터 통상의 기술자에게 알려진 동정된 단백질로부터 선택될 수 있다. 이에 제한되지 않고 치료적으로 활성 단백질은 세포 내 신호 전달을 촉진 또는 억제할 수 있는 단백질, 예를 들어 사이토카인, 림포카인, 모노카인, 성장 인자, 수용체, 신호 전달 분자, 전사 인자 등; 항응고인자; 항트롬빈; 항알러지 단백질; 세포사멸 인자 또는 세포사멸 관련된 단백질, 치료적으로 활성 효소 및 어느 후천적 질병(acquired disease) 또는 어느 유전(hereditary) 질병 또는 어느 후천적 질병 또는 어느 유전적 질병의 치료에 바람직한 것과 연결된 어느 단백질 또는 펩타이드를 포함할 수 있다.
본 발명에서 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자에 의해 코딩될 수 있는, 치료적으로 활성 단백질은 또한 어쥬번트 단백질일 수 있다. 이러한 맥락에서, 어쥬번트 단백질은 바람직하게는, 본 발명에서 정의된 선천적 면역 반응을 유도할 수 있는, 어느 단백질로써 이해된다. 바람직하게는, 이러한 선천적 면역 반응은 예를 들어 인간 TLR1 내지 TLR10으로부터 또는 쥣과 Toll 유사 수용체 TLR1 내지 TLR13으로부터 선택된 Toll 유사 수용체를 포함하는, 예를 들어 Toll-유사 수용체(TLR)로부터 선택된 수용체와 같이 패턴 인식 수용체의 활성화를 포함한다. 더욱 바람직하게는, 어쥬번트 단백질은 이에 제한되지 않고, 박테리아 단백질, 원생생물 단백질, 바이러스 단백질, 또는 진균 단백질, 동물 단백질로 이루어진 그룹으로부터, 특히 박테리아 어쥬번트 단백질로부터 선택된, 인간 어쥬번트 단백질 또는 병원체 어쥬번트 단백질로부터 선택된다. 추가적으로, 어쥬번트 효과에 포함된 인간 단백질을 코딩하는 핵산은(예를 들어 패턴 인식 수용체의 리간드, 패턴 인식 수용체, 신호 전달 경로의 단백질, 전사 인자 또는 사이토카인) 또한 사용될 수 있다.
b) 항원
본 발명에서 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자는 그 대신에 항원을 코딩할 수 있다. 본 발명의 맥락에서, 본 발명에 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자에 의해 코딩되는 것처럼 항원은 어느 항원, 항원 에피토프 또는 항원 펩타이드, 상기 정의에 들어 맞는, 더욱 바람직하게는 단백질 또는 펩타이드 항원, 예를 들어 종양 항원, 알러지성 항원, 자가면역 자가 항원, 병원체 항원 등을 전형적으로 포함한다. 특히 본 발명에서 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자에 의해 코딩된 것처럼 항원은 세포 밖에서 발생된 항원, 보다 전형적으로 숙주 유기체(예를 들어 인간) 자체(즉 비자가 항원)로부터 유래되지 않았으나 숙주 유기체 밖의 숙주 세포로부터 유래된 항원, 예를 들어 바이러스 항원, 박테리아 항원, 진균 항원, 원생동물학적(protozoological) 항원, 동물 항원, 알러지성 항원 등일 수 있다. 알러지성 항원(알러지 항원)은 전형적으로, 인간에 알러지를 유발하고 인간 또는 다른 근원으로부터 유래될 수 있는 항원이다. 추가적으로, 본 발명에서 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자에 의해 코딩되는 것처럼 항원은 세포, 조직 또는 체내에서 발생된 추가적 항원일 수 있다. 이러한 항원은 숙주 유기체(예를 들어 인간) 자체로부터 유래된 항원, 예를 들어 자가면역 자기 항원 등과 같이, 종양 항원, 자기 항원(self-antigens) 또는 자가 항원(auto-antigens) 뿐만 아니라, 숙주 유기체 바깥에서 숙주 세포로부터 본래적으로 유래되었으나, 예를 들어 (단백질분해효소) 분해, 대사 등에 의해, 몸체, 조직 또는 세포 내에서 조각나거나 분해되는 본 발명에서 정의된 (비자기) 항원을 포함한다. 이러한 맥락에서 폴리머 담체 화물 복합체에 포함되는 핵산 화물에 의해 코딩되는 것과 같은 항원은 적어도 하나의 항원, 독창적인 약학적 조성물의 두번째 성분에 대해 하기 설명되는 것과 같이 정의된다.
핵산 화물에 의해 코딩되는 항원 또는 이의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 두번째 성분으로써 독창적인 약학적 조성물에 포함된 것과 같이 본 발명에서 정의된 적어도 하나의 항원과 같이 동일한 항원인 것이 특히 바람직하다. 대안적인 실시예에서, 그러나 핵산 화물에 의해 코딩되는 항원 또는 이의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 두번째 성분으로써 독창적 약학적 조성물 내에 포함되는 것처럼 본 발명에서 정의된 적어도 하나의 항원과 같이 다른 항원이다. 항원이 핵산 화물에 의해 코딩되는 특정한 경우에, 폴리머 담체와 함께 핵산 분자는 어쥬번트 또는 불특정 선천적 면역 반응을 유도하는 면역 자극성 제제로써 제공하는 반면, 핵산 화물에 의해 발현된 코딩된 단백질 또는 펩타이드 항원은 항원 특이적 적응 면역 반응을 유도하는 항원으로써 제공한다.
c) 항체
추가적 대안에 따르면, 본 발명에서 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자는 항체 또는 항체 절편을 코딩할 수 있다. 본 발명에 따르면, 이러한 항체는 어느 항체, 예를 들어 기술분야에서 알려진 어느 재조합적으로 생산되거나 자연 발생 항체, 특히 치료, 진단 또는 과학적 목적에 적합한 항체, 또는 특정한 암 질병에 관련된 것으로 밝혀진 항체로부터 선택될 수 있다. 본 발명에서 용어 "항체"는 이의 가장 넓은 의미로 사용되고 특수하게 단일클론성 및 다클론성 항체(작용제(agonist), 길항제(antagonist), 및 억제 또는 중화 항체) 및 폴리에피토프(polyepitopic) 특이성을 갖는 항체 종을 포함(covers) 한다. 본 발명에 따르면, 용어 "항체"는 전형적으로 자연 발생 항체, 숙주 유기체 내 면역에 의해 발생된 항체, 자연 발생 항체로부터 동정 및 선별된 항체 또는 숙주 유기체 내 면역에 의해 발생된 항체 및 기술분야에서 알려진 생물분자적 방법에 의해 재조합적으로 생성된 것 뿐만 아니라, 키메라 항체, 인간 항체, 인간화(humanized) 항체, 2중특이적(bispecific) 항체, 인트라바디(intrabodies)와 같이, 즉, 세포 내에 발현되고 특수한 세포 구획 내 선택적으로 국재화된 항체, 및 상기 언급된 항체의 절편 및 변이체, 기술분야에서 알려진 어느 항체(예를 들어 IgM, IgD, IgG, IgA 및 IgE 항체)를 포함한다. 일반적으로, 항체는 양쪽 모두 가변 및 불변 도메인을 갖는 경사슬 및 중사슬로 이루어진다. 경사슬은 N-말단 가변 도메인, VL, 및 C-말단 불변 도메인, CL로 이루어진다. 대조적으로, IgG 항체의 중사슬은 예를 들어, N-말단 가변 도메인, VH, 및 세가지 불변 도메인, CH1, CH2 및 CH3으로 구성된다.
본 발명의 맥락에서, 본 발명에 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자에 의해 코딩된 것과 같은 항체는 바람직하게는 전체 길이 항체, 즉 상기 정의된 전체 중(heavy) 및 전체 경(light) 사슬로 이루어진 항체를 포함할 수 있다. 그러나, 항체 절편, 변이체 또는 부가물(adducts)과 같은 항체의 유도체는 또한 본 발명에서 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자에 의해 코딩될 수 있다. 항체 절편은 바람직하게는 상기 언급된 (전체 길이) 항체의 Fab, Fab', F(ab')2, Fc, Facb, pFc', Fd 및 Fv 절편으로부터 선택된다. 일반적으로 항체 절편은 기술분야에서 알려져 있다. 예를 들어, Fab("절편, 항체 결합") 절편은 중 및 경사슬 각각의 하나의 불변 및 하나의 가변 도메인으로 이루어진다. 두가지 가변 도메인은 특이적 항원에 에피토프를 결합한다. 두 사슬은 이황화 결합을 통해 연결된다. scFv("단일 사슬 가변 절편") 절편은, 예를 들어, 전형적으로 경 및 중사슬의 가변 도메인으로 이루어진다. 도메인은 인위적인 결합, 일반적으로 15-25 글리신, 프롤린 및/또는 세린 잔기로 이루어진 펩타이드와 같은 폴레펩타이드 결합에 의해 연결된다.
본 맥락에서 항체 또는 항체 절편의 다른 사슬은 멀티시스트로닉 핵산 분자에 의해 코딩되는 것이 바람직하다. 그렇지 않으면, 항체 또는 항체 절편의 다른 종(strains)은 몇몇 모노시스트로닉 핵산(들)(서열)에 의해 코딩된다.
siRNA:
추가적 대안에 따르면, 본 발명에 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자는 dsRNA, 바람직하게는 siRNA의 형태일 수 있다. dsRNA 또는 siRNA는 특히 RNA 간섭의 현상과 관련된 관심 대상(interest)이다. RNA 간섭(RNAi)의 생체 외 기술은 유전자 발현의 서열 특이적 억제를 일으키는 이중 가닥 RNA 분자(dsRNA)에 기초한다(Zamore (2001) Nat. Struct. Biol. 9: 746-750; Sharp (2001) Genes Dev. 5:485-490: Hannon (2002) Nature 41: 244-251). 긴 dsRNA와 함께 포유동물 세포의 형질전환에서, 단백질 인산화효소 R 및 RnaseL의 활성화는, 예를 들어 인터페론 반응과 같이 비특이적인 효과를 가져온다(Stark et al. (1998) Annu. Rev. Biochem. 67: 227-264; He and Katze (2002) Viral Immunol. 15: 95-119). 이들 비특이적 효과는, 비특이적 효과가 30 bp보다 짧은 siRNA에 의해 시작되지 않기 때문에, 짧은, 예를 들어 21- 내지 23-mer, 소위 siRNA(작은 갑섭 RNA)가 사용될 때 회피된다.
본 발명에서 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자는 따라서 상기 정의된 (치료적으로 관련된) 단백질 또는 항원(활성 성분으로써)의 또는 본 발명에 정의된 어느 추가적 단백질의, 코딩 또는 비코딩 영역(section), 바람직하게는 코딩 영역, 핵산 분자의 영역(section)에 상호 보완적인 17 내지 29, 바람직하게는 19 내지 25의 길이를 가지며, 바람직하게는 적어도 90%, 더욱 바람직하게는 95% 및 특히 100%(dsRNA의 뉴클레오타이드의)인 이중 가닥 RNA(dsRNA)일 수 있다. 이러한 핵산 분자(의 영역)은 본 발명에서 "목표 서열"로 불릴(termed) 수 있고 본 발명에서 정의된 어느 핵산 분자, 바람직하게는 유전체DNA, cDNA, RNA, 예를 들어 mRNA 등일 수 있다. 90% 상호보완은, 예를 들어 20 뉴클레오타이드의 본 발명에서 정의된 dsRNA의 길이와 함께, dsRNA는 목표 서열의 상응하는 영역과 상호보완을 보이지 않는 2 뉴클레오티드 이상을 포함하지 않는 것을 의미한다. 본 발명에 따라 사용된 이중 가닥 RNA의 서열은 그러나, 바람직하게는 목표 서열의 영역과 함께 이의 일반적 구조 내 전적으로 상호보완적이다. 이러한 맥락에서 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자는 일반 구조 5'-(N17-29)-3'를 갖는, 바람직하게는 일반 구조 5'-(N19-25)-3'를 갖는, 더욱 바람직하게는 일반 구조 5'-(N19-24)-3'를 갖는, 또는 더욱 더 바람직하게는 일반 구조 5'-(N21-23)-3'를 갖는 상기 각 일반 구조에서 각 N은 목표 서열의 영역의 (바람직하게는 다른) 뉴클레오타이드인, 바람직하게는 목표 서열의 영역의 17 내지 29 뉴클레오티드의 연속적 수로부터 선택된, 그들의 자연적 순서 내 일반 구조 5'-(N17-29)-3'에 존재하는 dsRNA일 수 있다. 원칙적으로, 17 내지 29, 바람직하게는 19 내지 25의 길이를 갖는 모든 영역, 목표 서열에 발생하는 염기쌍은 본 발명에 정의된 dsRNA의 제조를 위해 제공할 수 있다. 동일하게 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자로 사용된 dsRNAs는 또한 코딩 부위에, 특히 목표 서열의 5' 비코딩 부위에 있지 않은, (치료적으로 관련된) 단백질 또는 상기 정의된 항원(활성 성분으로써)의, 뉴클레오티드 서열에 대해, 예를 들어 따라서 조절 기능을 갖는 목표 서열의 비코딩 부위에 대해 지시될 수 있다. 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자로 사용된 dsRNA의 목표 서열은 따라서 목표 서열의 번역된 및 비번역된 부위 및/또는 상기 정의된 단백질 또는 항원의 조절 요소의 부위에 위치할 수 있다. 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자로 사용된 dsRNA를 위한 목표 서열은 또한 비번역된 또는 번역된 서열의 겹치는 부위에 위치할 수 있다; 특히, 목표 서열은 예를 들어 유전체 DNA, cDNA, RNA, 또는 mRNA 등의, 코딩 부위의 시작 트리플렛(triplet)의 적어도 하나의 뉴클레오티드 업스트림을 포함할 수 있다.
면역 자극성 핵산:
a) 면역 자극성 CpG 핵산:
다른 대안에 따르면, 본 발명에 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자는 바람직하게는 선천적 면역 반응을 유도하는, (면역 자극성) CpG 핵산, 특히 CpG-RNA 또는 CpG-DNA의 형태일 수 있다. 본 발명에 따라 사용된 CpG-RNA 또는 CpG-DNA는 단일 가닥 CpG-DNA(ss CpG-DNA), 이중 가닥 CpG-DNA(dsDNA), 단일 가닥 CpG-RNA(ssCpG-RNA) 또는 이중 가닥 CpG-RNA(ds CpG-RNA)일 수 있다. 본 발명에 따라 사용된 CpG 핵산은 바람직하게는 CpG-RNA의 형태, 더욱 바람직하게는 단일 가닥 CpG-RNA(ss CpG-RNA)의 형태이다. 또한 바람직하게는, 이러한 CpG 핵산은 상기 정의된 길이를 갖는다. 바람직하게는 CpG 모티프는 비메틸화되었다. 바람직한 실시예에서, 특히 만약 단백질 또는 펩타이드 항원이 오발부민 또는 오발부민의 절편일 경우, CpG 핵산은 서열 5'TCCATGACGTTCCTGACGTT-3' (SEQ ID NO: 123)로 이루어진 CpG-DNA가 아니다. 나아가 바람직한 실시예에서, CpG 핵산은 SEQ ID NO:123을 포함하는 서열이 아니다. 바람직하게는, CpG 핵산은 CpG-DNA가 아니다. 본 발명의 일부 실시예에서, 폴리머 담체 화물 복합체는 CpG-DNA를 포함하지 않으며, 바람직하게는 CpG 핵산을 포함하지 않는다. 본 발명의 일부 실시예에서, 약학적 조성물은 CpG-DNA를 포함하지 않으며, 바람직하게는 CpG 핵산을 포함하지 않는다.
b) 면역 자극성 RNA (isRNA):
비슷하게, 추가적인 대안에 따르면, 폴리머 담체 화물 복합체의 (면역 자극성) 핵산 분자는, 바람직하게는 선천적 면역 반응을 유도하는, 면역 자극성 RNA의 형태일 수 있다. 이러한 면역 자극성 RNA는 어느 (이중 가닥 또는 단일 가닥) RNA, 예를 들어 본 발명에 정의된 코딩 RNA일 수 있다. 바람직하게는, 면역 자극성 RNA는 단일 가닥, 이중 가닥 또는 부분적으로 이중 가닥 RNA, 더욱 바람직하게는 단일 가닥 RNA, 및/또는 원형 또는 선형 RNA, 더욱 바람직하게는 선형 RNA일 수 있다. 더욱 바람직하게는 면역 자극성 RNA는 (선형) 단일 가닥 RNA일 수 있다. 더욱 더 바람직하게는, 면역 자극성 RNA는 (긴) (선형) 단일 가닥) 비코딩 RNA일 수 있다. 이러한 맥락에서, isRNA는 생체 외 전사된 RNA의 경우에 이의 5'-말단에 삼인산염을 수송하는 것이 특히 바람직하다. 면역 자극성 RNA는 또한 본 발명에 정의된 짧은 RNA 올리고뉴클레오티드로써 발생할 수 있다. 본 발명에서 사용된 면역 자극성 RNA는 나아가, 자연 또는 합성적으로 제조된 것에서 발견되고 선천적 면역 반응을 유도할 수 있고, 항원에 의해 유도된 적응 면역 반응을 도울 수 있는, RNA 분자의 어느 클래스로부터 선택될 수 있다. 이러한 맥락에서, 면역 반응은 다양한 방식으로 발생할 수 있다. 적절한 (적응) 면역 반응을 위한 상당한 요소는 다른 T-세포 하위-집단(sub-populations)의 자극이다. T-림프구는 전형적으로, 면역 시스템이 세포내 (Th1) 및 세포외 (Th2) 병원체(예를 들어 항원)의 파괴가 가능한, T-도움 1(T-helper 1, Th1) 세포 및 T-도움 2(Th2) 세포, 두가지 하위 집단으로 나뉜다. 두가지 Th 세포 집단은 그들에 의해 생산된 주효 단백질(사이토카인)의 패턴이 다르다. 따라서, Th1 세포는 대식세포 및 세포독성 T-세포의 활성화에 의해 세포성 면역 반응을 돕는다. 반면, Th2 세포는 형질 세포 내 전환(conversion)을 위한 B 세포의 자극에 의해 및 항체의 형성에 의해(예를 들에 항원에 대한) 체액 면역 반응을 촉진한다. Th1/Th2 비율은 따라서 적응 면역 반응의 유도 및 유지에 매우 중요하다. 본 발명과 관련하여, (적응) 면역 반응의 Th1/Th2 비율은 바람직하게는 세포성 반응(Th1 반응)의 방향으로 변환되고 세포성 면역 반응은 그에 따라 촉진된다. 하나의 실시예에 따르면, 적응 면역 반응을 도울 수 있는 선천적 면역 반응은 Toll-유사 수용체(TLRs)의 리간드에 의해 활성화될 수 있다. TLRs는 병원체 관련된 분자 패턴(PAMPs)를 인식하고 포유동물 내 선천적 면역에 주요한 역할을 하는, 매우 보존된 패턴 인식 수용체(PRR) 폴리펩타이드의 패밀리이다. 현재 적어도 열셋 패밀리 멤버가, 지정된 TLR1 - TLR13(Toll-유사 수용체: TLR1, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8, TLR9, TLR10, TLR11, TLR12 or TLR13), 밝혀졌다. 나아가, 다수의 특이적 TLR 리간드가 밝혀졌다. 예를 들어 비메틸화된 박테리아 DNA 및 이의 합성 유사체(CpG DNA)는 TLR9에 대한 리간드인 것으로 밝혀졌다(Hemmi H et al. (2000) Nature 408:740-5; Bauer S et al. (2001) Proc NatlAcadSci USA 98, 9237-42). 나아가, 특정 TLRs에 대한 리간드는 특정한 핵산 분자를 포함하고 RNA의 특정한 타입은 서열 독립적 또는 서열 의존적 방식으로 면역 자극성인, 상기 이들 다양한 면역 자극성 RNSs는 RIG-I, MDA-5 등과 같은, 예를 들어 자극 TLR3, TLR7, 또는 TLR8, 또는 세포내 수용체일 수 있는 것으로 보고되었고, 예를 들어 Lipford et al.는 TLR7 및 TLR8을 통해 활동함으로써 면역 자극성으로 특정 G,U-포함 올리고리보뉴클레오티드를 결정한다(WO 03/086280 참조). Lipford et al.에 의해 설명된 면역 자극성 G,U-포함 올리고리보뉴클레오티드는 리보솜 RNA, 트랜스퍼 RNA, 메신저 RNA 및 바이러스 RNA를 포함하는 RNA 근원으로부터 유도되는 것으로 생각된다.
본 발명에 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자로 사용된 면역 자극성 RNA(isRNA)는 따라서, 이에 제한됨이 없이, TLRs의 리간드를, 바람직하게는 인간 패밀리 맴버 TLR1 - TLR10 또는 쥣과 패밀리 맴버 TLR1 - TLR13로부터 선택된, 더욱 바람직하게는 (인간) 패밀리 맴버 TLR1 - TLR10으로부터, 더욱 더 바람직하게는 TLR7 및 TLR8, RNA에 대한 세포내 수용체를 위한 리간드(RIG-I 또는 MDA-5 등과 같이)(예를 들어 Meylan, E., Tschopp, J. (2006). Toll-like receptors and RNA helicases: two parallel ways to trigger antiviral responses. Mol. Cell 22, 561-569 참조) 또는 어느 다른 면역 자극성 RNA 서열로부터 선택된 것을 나타내고/또는 코딩하는 RNA 서열을 포함하는 면역 자극성으로 알려진 어느 RNA 서열을 포함할 수 있다. 나아가, 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 분자로 사용된 면역 자극성 RNA 분자(의 종류)는 선천적 면역 반응을 촉진할 수 있는 어느 다른 RNA를 포함할 수 있다. 이에 제한되지 않고, 이러한 면역 자극성 RNA는 리보솜 RNA(rRNA), 트랜스퍼 RNA(tRNA), 메신저 RNA(mRNA), 및 바이러스 RNA(vRNA)를 포함할 수 있으며, 바람직하게는 면역 자극성 RNA는 비코딩 RNA이다. 이러한 면역 자극성 RNA는 1000 내지 5000의, 500 내지 5000의, 5 내지 5000의, 또는 5 내지 1000의, 5 내지 500, 5 내지 250, 5 내지 100의, 5 내지 50의 또는 5 내지 30의 뉴클레오티드의 길이를 포함할 수 있다.
특히 바람직한 실시예에 따르면, 이러한 면역 자극성 핵산 서열은 바람직하게는 화학식 (II) 또는 (III)의 핵산 서열로 구성되거나 포함하는 바람직하게는 RNA이다:
G l X m G n , (화학식 (II))
상기:
G는 구아노신, 우라실 또는 구아노신 또는 우라실의 유사체;
X는 구아노신, 우라실, 아데노신, 티미딘, 시토신 또는 상기 언급된 뉴클레오티드의 유사체;
l은 1 내지 40의 정수,
상기
l=1일 때 G는 구아노신 또는 이의 유사체,
1>1일 때 뉴클레오티드의 적어도 50%는 구아노신 또는 이의 유사체;
m은 정수 및 적어도 3;
상기
m=3일 때 X는 우라실 또는 이의 유사체,
m>3일 때 적어도 3 연속적인 우라실 또는 우라실의 유사체 나타남;
n은 1 내지 40의 정수,
상기
n=1일 때 G는 구아노신 또는 이의 유사체,
n>1일 때 뉴클레오티드의 적어도 50%는 구아노신 또는 이의 유사체.
C l X m C n , (화학식 (III))
상기:
C는 시토신, 우라실 또는 시토신 또는 우라실의 유사체;
X는 구아노신, 우라실, 아데노신, 티미딘, 시토신 또는 상기 언급된 뉴클레오티드의 유사체;
l은 1 내지 40 정수,
상기
l=1일 때 C는 시토신 또는 이의 유사체,
l>1일 때 뉴클레오티드의 적어도 50%는 시토신 또는 이의 유사체;
m은 정수 및 적어도 3;
상기
m=3일 때 X는 우라실 또는 이의 유사체,
m>3일 때 적어도 3 연속적인 우라실 또는 우라실의 유사체 나타남;
n은 1 내지 40 정수,
상기
n=1일 때 C는 시토신 또는 이의 유사체,
n>1일 때 뉴클레오티드의 적어도 50%는 시토신 또는 이의 유사체.
폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 화물로 사용될 수 있는, 화학식 (II) 또는 (III)의 핵산은 약 5 내지 100(단 또한 특정한 실시예에서 100 뉴클레오티드보다 길 수 있음), 5 내지 90, 5 내지 80 뉴클레오티드, 바람직하게는 약 5 내지 70의 길이, 더욱 바람직하게는 약 8 내지 60의 길이 및, 더욱 바람직하게는 약 15 내지 60 뉴클레오티드의 길이, 더욱 바람직하게는 20 내지 60, 가장 바람직하게는 30 내지 60 뉴클레오티드의 전형적인 길이를 갖는 상대적으로 짧은 핵산 분자일 수 있다. 만약 핵산 화물 복합체의 핵산이 예를 들어 100 뉴클레오티드의 최대 길이를 갖는 다면, m은 전형적으로 <=98일 것이다. 화학식 (II)의 핵산 내 뉴클레오티드 G의 수는 l 또는 n에 의해 결정된다. l 및 n, 서로 독립적으로, 상기 l 또는 n=1일 때 G는 구아노신 또는 이의 유사체, l 또는 n>1일 때 뉴클레오티드의 적어도 50%느느 구아노신 또는 이의 유사체인, 각각 1 내지 40의 정수이다. 예를 들어, l 또는 n=4일 때 Gl 또는 Gn은 예를 들어 GUGU, GGUU, UGUG, UUGG, GUUG, GGGU, GGUG, GUGG, UGGG 또는 GGGG 등일 수 있음; l 또는 n= 5일 때 Gl 또는 Gn은 예를 들어 GGGUU, GGUGU, GUGGU, UGGGU, UGGUG, UGUGG, UUGGG, GUGUG, GGGGU, GGGUG, GGUGG, GUGGG, UGGGG, 또는 GGGGG 등 일수 있음; 등 이에 제한되지 않는다. 본 발명에 따른 화학식 (II)의 핵산 내 Xm에 인접한 뉴클레오티드는 바람직하게는 우라실이 아니다. 유사하게, 본 발명에 따른 화학식 (III)의 핵산 내 뉴클레오티드 C의 수는 l 또는 n에 의해 결정된다. l 및 n은, 서로 독립적으로, 각각 1 내지 40의 정수이며, 상기 l 또는 n=1일 때 C는 시토신 또는 이의 유사체, 및 l 또는 n>1일 때 뉴클레오티드의 적어도 50%는 시토신 또는 이의 유사체이다. 예를 들어, 어떤 제한을 의미하지 않고, l 또는 n=4일 때, Cl 또는 Cn은 예를 들어 CUCU, CCUU, UCUC, UUCC, CUUC, CCCU, CCUC, CUCC, UCCC 또는 CCCC 등일 수 있다; l 또는 n=5일 때 Cl 또는 Cn은 예를 들어 CCCUU, CCUCU, CUCCU, UCCCU, UCCUC, UCUCC, UUCCC, CUCUC, CCCCU, CCCUC, CCUCC, CUCCC, UCCCC, 또는 CCCCC 등일 수 있다; 등 이에 제한되지 않는다. 본 발명에 따른 화학식 (V)의 핵산 내 Xm에 인접한 뉴클레오티드는 바람직하게는 우라실이 아니다. 바람직하게는, 화학식 (II)에 대해, l 또는 n>1일 때, 뉴클레오티드의 적어도 60%, 70%, 80%, 90% 또는 100%는 상기 정의된 구아노신 또는 이의 유사체이다. G1 및/또는 Gn 측면(flanking) 서열 내 100%까지 잔여(remaining) 뉴클레오티드는(구아노신이 뉴클레오티드의 100% 미만일 때) 상기 정의된 우라실 또는 이의 유사체이다. 또한 바람직하게는, l 및 n은, 서로 독립적으로, 각각 2 내지 30의 정수, 더욱 바람직하게는 2 내지 20의 정수 및 더욱 더 바람직하게는 2 내지 15의 정수이다. l 또는 n의 하한(lower limit)은 만약 필요할 경우 다양할 수 있고 적어도 1, 바람직하게는 적어도 2, 더욱 바람직하게는 적어도 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10이다. 이러한 정의는 화학식 (III)에 상응하여 적용한다.
특히 바람직한 실시예에 따르면, 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산으로 사용될 수 있는, 상기 화학식 (II) 또는 (III)의 어느 것에 따른 핵산은 하기 서열의 어느 것으로 이루어지거나 포함하는 서열로부터 선택될 수 있다:
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- GGUUUUUUUUUUUUUGG (SEQ ID NO: 78);
- GGUUUUUUUUUUUUUUGG (SEQ ID NO: 79);
- GGUUUUUUUUUUUUUUUGG (SEQ ID NO: 80);
- GGGUUUGGG (SEQ ID NO: 81);
- GGGUUUUGGG (SEQ ID NO: 82);
- GGGUUUUUGGG (SEQ ID NO: 83);
- GGGUUUUUUGGG (SEQ ID NO: 84);
- GGGUUUUUUUGGG (SEQ ID NO: 85);
- GGGUUUUUUUUGGG (SEQ ID NO: 86);
- GGGUUUUUUUUUGGG (SEQ ID NO: 87);
- GGGUUUUUUUUUUGGG (SEQ ID NO: 88);
- GGGUUUUUUUUUUUGGG (SEQ ID NO: 89);
- GGGUUUUUUUUUUUUGGG (SEQ ID NO: 90);
- GGGUUUUUUUUUUUUUGGG (SEQ ID NO: 91);
- GGGUUUUUUUUUUUUUUUGGGUUUUUUUUUUUUUUUGGGUUUUUUUUU UUUUUUGGG (SEQ ID NO: 92);
- GGGUUUUUUUUUUUUUUUGGGGGGUUUUUUUUUUUUUUUGGG (SEQ ID NO: 93);
- GGGUUUGGGUUUGGGUUUGGGUUUGGGUUUGGGUUUGGGUUUGGGU UUGGG (SEQ ID NO: 94);
- GGUUUUUUUUUUUUUUUGGG (short GU-rich, SEQ ID NO: 95)
또는
- CCCUUUUUUUUUUUUUUUCCCUUUUUUUUUUUUUUUCCCUUUUUUUUU UUUUUUCCC (SEQ ID NO: 96)
- CCCUUUCCCUUUCCCUUUCCCUUUCCCUUUCCCUUUCCCUUUCCCUUUCCC (SEQ ID NO: 97)
- CCCUUUUUUUUUUUUUUUCCCCCCUUUUUUUUUUUUUUUCCC (SEQ ID NO: 98)
또는 상기 서열의 어느 것과 적어도 60%, 70%, 80%, 90% 또는 95% 서열 유사성을 갖는 서열로부터.
나아가 특히 바람직한 실시예에 따르면, 이러한 면역 자극성 핵산 서열, 특히 isRNA는 화학식 (IV) 또는 (V)의 핵산으로 이루어지거나 포함한다:
(N u G l X m G n N v ) a , (화학식 (IV))
상기:
G는 구아노신(구아닌), 우리딘(우라실) 또는 구아노신(구아닌) 또는 우리딘(우라실)의 유사체, 바람직하게는 구아노신(구아닌) 또는 이의 유사체;
X는 구아노신(구아닌), 우리딘(우라실), 아데노신(아데닌), 티미딘(티민), 시티딘(시토신), 또는 이들 뉴클레오티드(뉴클레오시드)의 유사체, 바람직하게는 우리딘(우라실) 또는 이의 유사체;
N은 약 4 내지 50의, 바람직하게는 약 4 내지 40의, 더욱 바람직하게는 약 4 내지 30 또는 4 내지 20 핵산의 길이를 갖는 핵산 서열이고, 각 N은 독립적으로 구아노신(구아닌), 우리딘(우라실), 아데노신(아데닌), 티미딘(티민), 시티딘(시토신) 또는 이들 뉴클레오티드(뉴클레오시드)의 유사체로부터 선택된다.
a는 1 내지 20, 바람직하게는 1 내지 15, 가장 바람직하게는 1 내지 10의 정수;
l은 1 내지 40의 정수,
상기 l=1일 때, G는 구아노신(구아닌) 또는 이의 유사체,
1>1일 때, 이들 뉴클레오티드(뉴클레오시드)의 적어도 50%는 구아노신(구아닌) 또는 유사체
이의(thereof);
m은 정수 및 적어도 3;
상기 m=3일 때, X는 우리딘(우라실) 또는 이의 유사체, 및
m>3일 때, 적어도 3 연속적인 우리딘(우라실) 또는 우리딘(우라실)의 유사체 나타남;
n은 1 내지 40의 정수,
n=1일 때, G는 구아노신(구아닌) 또는 이의 유사체,
n>1일 때, 이들 뉴클레오티드(뉴클레오시드)의 적어도 50%는 구아노신(구아닌) 또는 유사체
이의(thereof);
u,v는 서로 독립적으로 0 내지 50의 정수일 수 있음,
바람직하게는 상기 u=0, v≥1일 때, 또는
v=0, u≥ 1일 때;
상기 화학식 (IV)의 핵산 분자는 적어도 50 뉴클레오티드의, 바람직하게는 적어도 100 뉴클레오티드의, 더욱 바람직하게는 적어도 150 뉴클레오티드의, 더욱 더 바람직하게는 적어도 200 뉴클레오티드의 및 가장 바람직하게는 적어도 250 뉴클레오티드의 길이를 갖는다.
(N u C l X m C n N v ) a , (화학식 (V))
상기:
C는 시티딘(시토신), 우리딘(우라실) 또는 시티딘(시토신) 또는 우리딘(우라실)의 유사체, 바람직하게는 시티딘(시토신) 또는 이의 유사체;
X는 구아노신(구아닌), 우리딘(우라실), 아데노신(아데닌), 티미딘(티민), 시티딘(시토신) 또는 상기 언급된 뉴클레오티드(뉴클레오시드)의 유사체, 바람직하게는 우리딘(우라실) 또는 이의 유사체;
N은 서로 독립적으로 약 4 내지 50의, 바람직하게는 약 4 내지 40의, 더욱 바람직하게는 약 4 내지 30 또는 4 내지 20 핵산의 길이를 갖는 각각 핵산 서열이고, 각 N은 독립적으로 구아노신(구아닌), 우리딘(우라실), 아데노신(아데닌),티미딘(티민), 시티딘(시토신) 또는 이들 뉴클레오티드(뉴클레오시드)의 유사체로부터 선택된다;
a는 1 내지 20, 바람직하게는 1 내지 15, 가장 바람직하게는 1 내지 10의 정수;
l은 1 내지 40의 정수,
l=1일 때, C는 시티딘(시토신) 또는 이의 유사체,
l>1일 때, 이들 뉴클레오티드(뉴클레오시드)의 적어도 50%는 시티딘(시토신) 또는 유사체
이의;
m은 정수 및 적어도 3;
상기 m=3일 때, X는 우리딘(우라실) 또는 이의 유사체,
m>3일 때 적어도 3 연속적인 우리딘(우라실) 또는 우리딘(우라실)의 유사체 발생;
n은 1 내지 4o의 정수,
상기 n=1일 때 C는 시티딘(시토신) 또는 이의 유사체,
n>1일 때, 이들 뉴클레오티드(뉴클레오시드)의 적어도 50%는 시티딘(시토신) 또는 유사체
이들.
u, v는 서로 독립적으로 0 내지 50의 정수일 수 있음,
바람직하게는 상기 u=0, v≥1일 때, 또는
v=0, u≥1일 때;
상기 본 발명에 따른 화학식 (V)의 핵산 분자는 적어도 50 뉴클레오티드, 바람직하게는 적어도 100 뉴클레오티도, 더욱 바람직하게는 적어도 150 뉴클레오티드, 더욱 더 바람직하게는 적어도 200 뉴클레오티드 및 가장 바람직하게는 적어도 250 뉴클레오티드의 길이를 갖는다.
화학식 (V)에 대해, 요소 N(즉 Nu 및 Nv) 및 X (Xm)에 대해, 특히 상기 정의된 코어 구조 뿐만 아니라 정수 a, l, m, n, u 및 v에 대해, 상기 주어진 정의의 어느 것은, 화학식 (IV)의 요소에 상응하도록 유사하게 적용하며, 상기 화학식 (V) 내 코어 구조는 ClXmCn에 의해 정의된다. 경계 요소(bordering elements) Nu 및 Nv의 정의는 Nu 및 Nv에 대해 상기 주어진 정의와 동일하다.
매우 특히 바람직한 실시예에 따르면, 화학식 (IV)에 따른 핵산 분자는 예를 들어 하기 서열의 어느것을 포함, 바람직하게는 이루어진다:
UAGCGAAGCUCUUGGACCUAGGUUUUUUUUUUUUUUUGGGUGCGUUCCUAGAAGUACACG (SEQ ID NO: 99)
UAGCGAAGCUCUUGGACCUAGGUUUUUUUUUUUUUUUGGGUGCGUUCCUAGAAGUACACGAUCGCUUCGAGAACCUGGAUCCAAAAAAAAAAAAAAACCCACGCAAGGAUCUUCAUGUGC (SEQ ID NO: 100)
GGGAGAAAGCUCAAGCUUGGAGCAAUGCCCGCACAUUGAGGAAACCGAGUUGCAUAUCUCAGAGUAUUGGCCCCCGUGUAGGUUAUUCUUGACAGACAGUGGAGCUUAUUCACUCCCAGGAUCCGAGUCGCAUACUACGGUACUGGUGACAGACCUAGGUCGUCAGUUGACCAGUCCGCCACUAGACGUGAGUCCGUCAAAGCAGUUAGAUGUUACACUCUAUUAGAUC (SEQ ID NO: 101)
GGGAGAAAGCUCAAGCUUGGAGCAAUGCCCGCACAUUGAGGAAACCGAGUUGCAUAUCUCAGAGUAUUGGCCCCCGUGUAGGUUAUUCUUGACAGACAGUGGAGCUUAUUCACUCCCAGGAUCCGAGUCGCAUACUACGGUACUGGUGACAGACCUAGGUCGUCAGUUGACCAGUCCGCCACUAGACGUGAGUCCGUCAAAGCAGUUAGAUGUUACACUCUAUUAGAUCUCGGAUUACAGCUGGAAGGAGCAGGAGUAGUGUUCUUGCUCUAAGUACCGAGUGUGCCCAAUACCCGAUCAGCUUAUUAACGAACGGCUCCUCCUCUUAGACUGCAGCGUAAGUGCGGAAUCUGGGGAUCAAAUUACUGACUGCCUGGAUUACCCUCGGACAUAUAACCUUGUAGCACGCUGUUGCUGUAUAGGUGACCAACGCCCACUCGAGUAGACCAGCUCUCUUAGUCCGGACAAUGAUAGGAGGCGCGGUCAAUCUACUUCUGGCUAGUUAAGAAUAGGCUGCACCGACCUCUAUAAGUAGCGUGUCCUCUAG (SEQ ID NO: 102)
CUAAACUGGUCCAAUGUAUACGCAUUCGCUGAGCGGAUCGAUAAUAAAAGCUUGAAUU (SEQ ID NO: 103)
GGGAGAAAGCUCAAGCUUAUCCAAGUAGGCUGGUCACCUGUACAACGUAGCCGGUAUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUGACCGUCUCAAGGUCCAAGUUAGUCUGCCUAUAAAGGUGCGGAUCCACAGCUGAUGAAAGACUUGUGCGGUACGGUUAAUCUCCCCUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUAGUAAAUGCGUCUACUGAAUCCAGCGAUGAUGCUGGCCCAGAUC (SEQ ID NO: 104)
GGGAGAAAGCUCAAGCUUAUCCAAGUAGGCUGGUCACCUGUACAACGUAGCCGGUAUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUGACCGUCUCAAGGUCCAAGUUAGUCUGCCUAUAAAGGUGCGGAUCCACAGCUGAUGAAAGACUUGUGCGGUACGGUUAAUCUCCCCUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUAGUAAAUGCGUCUACUGAAUCCAGCGAUGAUGCUGGCCCAGAUCUUCGACCACAAGUGCAUAUAGUAGUCAUCGAGGGUCGCCUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUGGCCCAGUUCUGAGACUUCGCUAGAGACUACAGUUACAGCUGCAGUAGUAACCACUGCGGCUAUUGCAGGAAAUCCCGUUCAGGUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUCCGCUCACUAUGAUUAAGAACCAGGUGGAGUGUCACUGCUCUCGAGGUCUCACGAGAGCGCUCGAUACAGUCCUUGGAAGAAUCUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUGUGCGACGAUCACAGAGAACUUCUAUUCAUGCAGGUCUGCUCUA (R722A or isRNA722A; SEQ ID NO: 105).
GGGAGAAAGCUCAAGCUUAUCCAAGUAGGCUGGUCACCUGUACAACGUAGCCGGUAUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUGACCGUCUCAAGGUCCAAGUUAGUCUGCCUAUAAAGGUGCGGAUCCACAGCUGAUGAAAGACUUGUGCGGUACGGUUAAUCUCCCCUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUAGUAAAUGCGUCUACUGAAUCCAGCGAUGAUGCUGGCCCAGAUCUUCGACCACAAGUGCAUAUAGUAGUCAUCGAGGGUCGCCUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUGGCCCAGUUCUGAGACUUCGCUAGAGACUACAGUUACAGCUGCAGUAGUAACCACUGCGGCUAUUGCAGGAAAUCCCGUUCAGGUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUCCGCUCACUAUGAUUAAGAACCAGGUGGAGUGUCACUGCUCUCGAGGUCUCACGAGAGCGCUCGAUACAGUCCUUGGAAGAAUCUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUGUGCGACGAUCACAGAGAACUUCUAUUCAUGCAGGUCUGCUCUAG (R722B or isRNA722B; SEQ ID NO: 122)
UUUUUUUCAUAUUCCCAUGCUAAGCAAGGGAUGCCGCGAGUCAUGUUAAGCUUGAAUU (SEQ ID NO: 106)
또는 상기 정의된 서열의 어느 것에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 동일성을 갖는 핵산 서열.
다른 매우 특히 바람직한 실시예에 따르면, 화학식 (V)에 따른 핵산 분자는 예를 들어 하기 서열의 어느 것을 포함, 바람직하게는 이루어진다:
UAGCGAAGCUCUUGGACCUACCUUUUUUUUUUUUUUCCCUGCGUUCCUAGAAGUACACG (SEQ ID NO: 107)
또는
UAGCGAAGCUCUUGGACCUACCUUUUUUUUUUUUUUUCCCUGCGUUCCUAGAAGUACACGAUCGCUUCGAGAACCUGGAUGGAAAAAAAAAAAAAAAGGGACGCAAGGAUCUUCAUGUGC (SEQ ID NO: 108)
또는 상기 정의된 서열의 어느 것에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 유사성을 갖는 핵산 서열.
추가적인 바람직한 실시예에서, 본 발명에서 정의된 폴리머 다메 화물 복합체의 핵산 분자는 또한 변형된 핵산의 형태로 나타날 수 있다.
첫번째 실시예에 따르면, 본 발명에서 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산은, 상기 정의와 같이 생체 내 분해(예를 들어 엑소- 엔도- 뉴클레아제에 의해)에 근본적으로 내성인, "안정화된 핵산"로써, 바람직하게는 안정화된 RNA 또는 DNA로써, 더욱 바람직하게는 RNA로써 제공될 수 있다.
다른 실시예에 따르면, 본 발명에서 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산 화물은 핵산 분자, 특히 mRNA의, 바람직하게는 본 발명에서 정의된 이의 코딩 부위의 G/C 함량 변형에 의해, 특히 만약 핵산 분자가 코딩 핵산의 형태일 경우 예를 들어 mRNA, 본 발명에서 정의된 것처럼 변형 및/또는 안정화될 수 있다.
본 발명에서 정의된 폴리머 담체 화물 복합체에 포함된 화물로써 본 발명에 사용된 핵산 분자는 본 발명에서 정의된 핵산 합성 방벙을 포함하는, 기술분야에서 알려진 어느 방법을 사용하여 제조될 수 있다.
나아가, 본 발명은 폴리머 담체 화물 복합체 내 핵산 화물로써 포함된 본 발명에서 정의된 핵산 분자의 변이체 및 절편을 명백히 개시한다.
본 발명의 맥락에서 특히 바람직한 핵산 화물 분자는 SEQ ID NO. 105 또는 122에 따른 핵산 서열 또는 SEQ ID NO. 105 또는 122에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 유사한 서열을 포함하는, 바람직하게는 이로 이루어진 핵산 분자이다.
폴리머 담체 화물 복합체에서, 본 발명에 정의된 폴리머 담체의 양이온성 성분 및 핵산 화물은 전형적으로 핵산에 폴리머 담체의 약 1 내지 10000의 분자비로, 바람직하게는 약 5 내지 5000의 분자비로, 더욱 바람직하게는 약 10 내지 2500의 분자비로, 더욱 더 바람직하게는 약 25 내지 2000의 분자비로, 및 가장 바람직하게는 약 25 내지 1000의 분자비로 제공된다.
나아가, 폴리머 담체 화물 복합체, 본 발명에 정의된 폴리머 담체의 양이온성 성분 및 핵산 화물은 바람직하게는 적어도 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.75, 1, 1.5 또는 2의 N/P-비율로 제공된다. 바람직하게는, N/P- 비율은 약 0.1, 0.3, 0.4, 0.5, 0.75, 1.0, 1.5 또는 2 내지 20의 범위 내, 바람직하게는 약 0.2 (0.5 또는 0.75 또는 1.0) 내지 12의 범위 내, 더욱 바람직하게는 약 0.4(0.75 또는 1.0) 내지 10의 N/P-비율 내, 및 더욱 더 바람직하게는 약 0.4(0.75 또는 1.0) 내지 5의 N/P 비율 내에 놓여 있다. 가장 바람직하게는 N/P 비율은 0.1 및 0.9 사이 비율이다. 이러한 맥락에서, N/P 비율은 폴리머 담체의 양이온성 (곁사슬) 성분 또는 이와 같은 폴리머 담체의 이온 전하의 측정이다. 특히, 만약 양이온성 성분의 양이온성 특성이 질소(예를 들어 아미노산 곁사슬의)에 의해 생성되는 경우, N/P 비율은, 폴리머 담체의 양이온성 성분 내 (곁사슬) 질소 원자가 양전하를 제공하고 핵산의 인산염 백본의 인산염이 음전하를 제공하는 것을 고려하여, 뉴클레오티드 백본 내 인산염 잔기에 대한 염기성 질소 원자의 비율을 나타낸다. 일반적으로 하나의 인산염은 하나의 음전하를 제공하며, 예를 들어 화물 핵산 분자 내 하나의 뉴클레오티드는 하나의 음전하를 제공한다. 화학식은 실시예에 주어진다. N/P 비율은 전체 독창적인 폴리머 담체 화물 복합체의 질소/인산염 비율(N/P 비율)로써 정의된다. 이는 전형적으로 폴리머 담체 내, 양이온성 성분의 함량/양에 대해서 및 독창적 폴리머 담체 화물 복합체 내 결합 또는 복합화된 핵산의 함량/양에 대한 특유의 실례이다(illustrative). 이는 RNA가 염기의 통계적 분포(statistical distribution)를 보이는 경우, 예를 들어 1 μg RNA는 전형적으로 약 3 nmol 인산염 잔기를 포함하는 것에 기초하여 계산될 수 있다. 추가적으로 1 nmol 펩타이드는 전형적으로 이의 (양이온성) 아미노산의 분자량 및 수에 의존하여, 약 x nmol 질소 잔기를 포함한다.
이러한 맥락에서, 폴리머 담체 화물 복합체 내, 본 발명에 정의된 폴리머 담체의 양이온성 성분 및 핵산 화물은 적어도 약 1 또는, 바람직하게는 생체 외 적용(예를 들어 환자로부터 추출된 세포가 독창적 약학적 조성물과 함께 생체 외 처리되고(treated) 지속적으로 환자에게 투여될 경우)에는 약 1 내지 20의 범위의 N/P 비율로 제공되는 것이 바람직하다.
독창적 약학적 조성물의 생체 내 적용을 위해, 적어도 0.1 (0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6)의, 바람직하게는 약 0.1(0.2, 0.3, 0.4., 0.5, 또는 0.6) 내지 1.5의 범위의 N/P 비율이 바람직하다. 0.1 또는 0.2 내지 0.9의 N/P 비율 범위 또는 0.5 내지 0.9의 N/P 비율 범위가 더욱 바람직하다.
IFN-α의 유도가 있는 특정한 경우에, 적어도 0.1(0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 또는 0.6)의 N/P 비율 또는 0.1 내지 1의 N/P 비율 범위가 바람직하거나 0.1 또는 0.2 내지 0.9의 N/P 비율 범위 또는 0.5 내지 0.9의 N/P 비율 범위가 더욱 바람직하다. 그렇지 않으면, 만약 TNFa의 유도가 있는 경우, 1 내지 20의 N/P 비율이 특히 바람직하다.
N/P 비율은 생산된 폴리머 담체 화물 복합체의 표면 전하에 현저하게 영향을 준다. 따라서 생산된 폴리머 담체 화물 복합체가 생체 외 적용에 양전하를 띠고 생체 내 적용에 음전하 또는 중성 전하를 띠는 것이 바람직하다. 생산된 폴리머 담체 화물 복합체의 표면 전하는 제타사이저 나노(Zetasizer Nano)(Malvern Instruments, Malvern, UK)를 사용하여 도플러 전기천공법(Doppler electrophoresis)에 의해 측정될 수 있는 제타전위로 표시될 수 있다. 일반적으로, 1 미만의 N/P 비율은 음성 제타전위를 발생시키고, 1 초과의 N/P 비율은 양성 제타전위를 발생시킨다(전형적인 측정 오류의 범위 내).
일부 실시예에서, 폴리머 담체 화물 복합체의 표면 전하, 바람직하게는 제타전위는 양성, 즉, 1 mV 초과, 2 mV 초과, 4 mV 초과, 5 mV 초과, 또는 10 mV 초과와 같은, 0 mV 초과이다. 대안적인 실시예에서, 폴리머 담체 화물 복합체의 표면 전하, 바람직하게는 전타전위는 약 -1 mV 및 -50 mV 사이, 약 -2 mV 및 -40 mV 사이, 또는 약 -5 mV 및 -30 mV 사이와 같이, 즉 -1 mV 미만, -2 mV 미만, -4 mV 미만, -5 mV 미만, 또는 -10 mV 미만과 같이, 0 mV 미만인 음성이다.
어쥬번트로써 사용을 위한, 본 발명에서 사용된 폴리머 담체 화물 복합체는 바람직하게는 비항원 특이적, (선천적) 면역 반응(선천적 면역 시스템에 의해 제공된)을, 바람직하게는 면역 자극성 조건에서 시작할 수 있다. 면역 반응은 일반적으로 다양한 방법으로 야기될 수 있다. 적절한 면역 반응을 위한 중요한 성분은 다른 T 세포 하위 집단의 자극이다. T 림프구는 전형적으로 면역 시스템이 세포내(Th1) 및 세포외(Th2) 병원체(예를 들어 항원)을 파괴할 수 있는, 두개의 하위 집단, T-도움 1(Th1) 세포 및 T-도움 2(Th2) 세포로 구분된다. 두 Th 세포 집단은 그들에 의해 생산된 주효 단백질(사이토카인)의 패턴에 따라 다르다. 따라서, Th1 세포는 대식세포 및 세포독성 T 세포의 활성화에 의한 세포 면역 반응을 돕는다. 반면, Th2 세포는 형질 세포로 전환에 B 세포의 자극에 의해 및 항체(예를 들어 항원에 대해)의 형성에 의해 체액 면역 반응을 촉진한다. Th1/Th2 비율은 따라서 면역 반응에 매우 중요하다. 본 발명과 관련하여, 면역 반응의 Th1/Th2 비율은 특히 폴리머 담체 화물 복합체에서, 세포성 반응을 지시하는, Th1 반응으로 불리는, 바람직하게는 면역 자극성 제제에 의해 교체되고, 대부분의 세포 면역 반응이 그에 따라 유도된다. 상기 설명과 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 항원에 의해 유도된 특정한 적응 면역 반응의 도움을 허용할 수 있는, 불특정 선천적 면역 반응을 유도할 수 있다.
(선천적) 면역 자극성 또는 독창적 약학적 조성물 내 성분의 어쥬번트 능력의 결정:
면역 자극성 제제 또는 어쥬번트의(특히 본 발명에 사용된 폴리머 담체 화물 복합체의) 면역 자극성 능력의 결정을 위해 몇몇 방법이 기술분야에 알려지고 사용될 수 있다. 예를 들어, 생체 외 방법은 선천적 면역 시스템의 (독점적으로 또는 적어도 전형적으로) 일부인, 사이토카인을 유도하는 그들의 능력과 같이 화합물을 활용하는 데 유리하고 그에 따라 (면역 시스템의 추가적인 암(arm) 처럼) 전형적으로 항원에 의해 유발된 항원 특이적 면역 반응의 유도를 향상시킨다. 이러한 목적을 위해, 예를 들어 PBMCs는 혈액 샘플로부터 동정될 수 있고 특정한 면역 자극성 제제 또는 어쥬번트로 자극된다. 배양 이후, 선천적 면역 시스템의(및 항원 특이적 면역 시스템이 아닌 것의) 전형적인 일부인 원하는 사이토카인(예를 들어 PAMP 수용체의 활성화의 반응처럼)의 방출은 ELISA에 의해 결정된다. 이들 선택된 사이토카인은 체내 선천적 면역 반응의 유도의 결정인자로써 기술분야에 사용될 수 있다. 이러한 맥락에서 TNF-알파 및 IFN-알파의 방출은 화합물 또는 복합체에 의해 유발된, 바람직하게는 불특정(선천적 면역 반응)을 결정하기 위해 측정된다. 특히, IFN-알파는 바이러스 감염 이후 불특정 면역 반응의 유도에 중요한 역할을 하며, 암 또는 종양 질병의 치료의 맥락에서 특히 바람직한, Th1-변환된 적응 면역 반응의 유도의 지표(indicators)로써 사용될 수 있다. 따라서, 스크리닝 분석에서 실험된 면역 자극성 화합물 또는 복합체는 예를 들어 IFN-알파의 방출을 유도하는 것이 특히 바람직하다. 이러한 화합물 또는 복합체는 이후 예를 들어 백신 접종 치료에 면역 자극성 제제(불특정 (선천적) 면역 반응을 일으키는)로써 사용을 위해 적용될 수 있다.
IFN-알파는 타입 I 인터페론의 패밀리의 일부이다. 타입 I 인터페론 (IFN)은 항바이러스 면역 반응을 돕는데 필수적인 다면발현성(pleiotropic) 사이토카인이다. 그들은 자연 살생(NK) 및 T 세포 활성화에 더하여, 바이러스 감염된 세포의 세포사멸 및 바이러스 감염에 대한 세포 내성을 유도한다. 타입 I 인터페론은 사이토카인 및 케모카인의 큰 세트에 효과를 갖는다, 즉 면역 세포 성숙, 유도(homing), 주효 기능 및 세포자멸에 영향을 준다. 전형적으로 IFN-알파의 주요 역할은 사이토카인을 포함하는 다른 중재자(mediators)의 생산 및 조절에 영향을 주는 주된 상태(priming state)의 유도이다. 예를 들어, IFN-알파β 신호는 수상돌기세포(DCs) 및 T 세포에 의한 IFN-알파γ 생산을 상향조절(upregulates)하고 그에 따라 Th1 세포의 유도 및 유지를 돕는다. Th1 면역 반응의 지시에 면역 반응의 변환은 이들 백신은 일반적으로 세포독성 T 세포의 유도를 결과적으로 억제 또는 감소시키는 Th2-기초 면역 반응을 유도하기 때문에, 단백질 또는 펩타이드 백신이 사용되면, 특히 중요해질 수 있다.
따라서, 본 발명의 맥락에서 어쥬번트로 사용되는 화합물 또는 복합체는 Th1-기초 면역 반응에 항원에 의해 유발된 항원 특이적 면역 반응을 변환하는 특성을 바람직하게는 가질 수 있는 것이 바람직하다. 항원에 의해 유도된 면역 반응의 방향은 일반적으로 항원 특이적 항체의 몇몇 서브타입의 유도 및 항원 특이적 세포독성 CD8+ T 세포의 유도의 결정에 의해 측정된다. 이러한 맥락에서, 서브타입 항체 IgG1은 Th2 기초 면역 반응의 유도 및 서브타입 항체 IgG2a의 유도를 나타내며 세포독성 T 세포의 유도는 Th1 기초 면역 반응의 유도를 나타낸다. 항원 특이적 항체의 유도는 전형적으로 ELISA에 의한 백신의 혈액 내 항체 역가의 측정에 의해 결정된다. 항원 특이적 세포독성 T 세포의 유도는 전형적으로 ELISPOT에 의한 항원 특이적 펩타이드로 자극 이후 비장 내 IFN-감마 분비의 측정에 의해 결정된다. 이러한 맥락에서 IFN-감마 분비의 유도는 항원 특이적 세포독성 T 세포는 비장 내 존재하고 특이적으로 그들의 표면에 MHC I 분자에 항원의 에피토프를 나타내는 세포를 공격할 수 있는 증거를 제공한다.
어쥬번트의 유익한 특성의 결정을 위해, 생체 내 백신 접종은 전형적으로 수행된다. 그것과 함께, 어쥬번트 또는 면역 자극성 화합물 또는 복합체가 백신에 의해 유발된 항원 특이적 면역 반응을 향상시키는지 및, 나아가 어쥬번트 특성을 보이기 위해 원하는 방향으로 항원 특이적 면역 반응을 변환할 수 있는지, 조사하는 것이 가능하다. 특히, 항 종양 면역 반응의 유도에서 Th1-변형된 면역 반응의 유도, 특히 세포독성 T 세포의 유도는, 항원 특이적 세포 독성 T 세포의 유도가 종양과 성공적으로 싸우기 위한 필수적인 전제조건을 나타내는 것으로 생각되기 때문에, 주요한 역할을 하는 것으로 생각된다.
따라서, 어쥬번트로써 특성을 보이는 화합물 또는 복합체를 스크린, 테스트 및/또는 조사하는 방법은 기술분야에서 잘 알려져있고 예를 들어 테스트된 화합물/복합체에 의해 유도된 면역 반응을 측정하는 ELISA 테스트에 의해, 쉽게 적용될 수 있다.
다른 양태에서, 본 발명은 본 발명의 약학적 조성물을 제조하는 방법과 관련되고, 상기 방법은 하기 단계를 포함한다: (i) 본 발명의 어느곳에 정의된 적어도 하나의 폴리머 담체 화물 복합체를 제공; (ii) 본 발명의 어느곳에 정의된 항원을 제공; 및 (iii) 상기 폴리머 담체 화물 복합체 및 상기 항원을 결합. (iii)의 결합 단계는 환자에게 투여하기 전(상기 투여 약 1, 5, 15, 30 또는 60 분 전, 72시간까지)에 잠시 일어날 수 있거나, 상기 약학적 조성물의 제조 중에 일어날 수 있다. 각자의 통상의 기술자는(예를 들어 의사 또는 건강 전문가 또는 제조자) 이러한 결합 단계에 적합한 보통의 방법론을 알 것이다.
본 발명의 맥락에서, 본 발명에 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 제조 방법은 하기 단계를 포함할 수 있다:
a) 각각은 적어도 하나의 -SH 일부를 포함하는, 본 발명에 정의된 적어도 하나의 양이온성 단백질 또는 펩타이드 및/또는 적어도 하나의 양이온성 또는 다중양이온성 폴리머 및 선택적으로 본 발명에 정의된 적어도 하나의 아미노산 성분(AA)의 제공
b) 바람직하게는 상기 개시된 비율 내, 본 발명에 정의된 적어도 하나의 핵산 분자의 제공
c) 단계 a) 및 b) 내 제공된 성분을 혼합, 바람직하게는 본 발명에 정의된 염기성 또는 중성 환경(milieu) 내, 바람직하게는 산소 또는 본 발명에서 정의된 추가적 스타터(starter)의 존재 내, 바람직하게는 본 발명에 정의된 pH, 온도 및 시간에서, 및 그에 따라 응축 및 따라서 폴리머 담체를 수득하기 위해 이황화 결합(중합 응축 또는 중축합 내)을 통해 서로 단계 a) 내 제공된 양이온성 성분을 중합 및 단계 a) 내 제공된 양이온성 성분과 함께 단계 b) 내 제공된 핵산 분자를 복합화,
d) 바람직하게는 본 발명에 정의된 방법을 사용하여, 단계 c)에 따라 수득된 폴리머 담체 화물 복합체를 선택적으로 정제,
e) 선택적으로 단계 c) 또는 d)에 따라 수득된 폴리머 담체 화물 복합체의 동결 건조.
본 발명에서 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 제조 방법은 추출물의 -SH 일부, 예를 들어 본 발명에서 정의된 양이온성 펩타이드 또는 폴리머 및 선택적으로 단계 c) 내 추가적 아미노산 성분(AA)을 통해 다단계 응축 중합화 또는 중축합 반응을 포함할 수 있다. 핵산 분자의 복합화 또는 정전기적(electrostratic) 결합에 동시에 일어나는 응축 중합 또는 중축합 반응은 바람직하게는 폴리머 담체 화물 복합체를 유도하고, 상기 폴리머 담체는 응축 폴리머이며, 상기 단일 성분은 이황화 결합에 의해 연결된다.
본 발명에서 정의된 것처럼 폴리머 담체 화물 복합체의 제조 방법의 단계 a)에서, 본 발명에 정의된 적어도 하나의 양이온성 또는 다중양이온성 단백질 또는 펩타이드 및/또는 본 발명에 정의된 적어도 하나의 양이온성 또는 다중양이온성 폴리머가, 바람직하게는 상기 개시된 비율로 제공된다. 이들 성분은 바람직하게는 본 발명에 정의된 염기성 또는 중성 환경(milieu)에서, 바람직하게는 본 발명에 정의된 산소 또는 추가적 스타터(starter)의 존재하에, 바람직하게는 본 발명에 정의된 pH, 및 온도 및 시간에서, 및 응축 및 그에 따른 이황화 결합(중합 응축 또는 중축합 내)을 통해 서로 간의 이들 성분의 중합에 따라 본 발명에 정의된 핵산 분자에 복합화된 폴리머 담체를 얻기 위해, 단계 b)에서 제공된 핵산 분자와 단계 c)에서 혼합된다.
대안에 따르면, 폴리머 담체 화물 복합체의 제조 방법의 단계 a)에서 적어도 하나의 양이온성 또는 다중양이온성 단백질 또는 펩타이드 및/또는 적어도 하나의 양이온성 또는 다중양이온성 폴리머는 본 발명에서 정의된 것과 같이 제공되고, 선택적으로 적어도 하나의 아미노산 성분(AA)은, 본 발명에서 정의된 것과 같이 단계 a)에서 제공되고, 중합 응축 또는 중축합 및 복합화 반응에 단계 b)의 핵산을 첨가하기 전에 다만 단계 c)에 나타난 동일한 중합 조건을 사용하여, 사용된다. 단계 b)의 중합된 폴리머 담체 및 핵산은 이후 단계 c)에서 혼합된다. 바람직하게는 성분은, 바람직하게는 본 발명에 정의된 염기성 또는 중성 환경에서, 바람직하게는 본 발명에 정의된 산소 또는 추가적 스타터의 존재 하에서, 바람직하게는 본 발명에 정의된 pH, 온도 및 시간에서, 상기 개시된 비율로 모두 제공되고 혼합된다. 혼합 및 반응을 시작할 때, 성분은 응축 및 그에 따라 본 발명에 정의된 핵산 분자에 복합화된 폴리머 담체를 얻기 위해 이황화 결합(중합 응축 또는 중축합 내)을 통해 서로 중합된다.
상기 대안 양쪽 모두에서, 다른 폴리머 담체, 특히 다른 펩타이드 및/또는 다른 폴리머는 상기 개시된 응축 중합에서 선택될 수 있다. 이러한 맥락에서, 폴리머 담체의 다른 성분(들)의 선택은 전형적으로 최종 폴리머 담체의 원하는 특성 및 최종 폴리머 담체의 원하는 양이온 강도에 의존한다. 따라서, 양이온성 성분의 함량은 나아가 단계 a)의 상기 대안에, 예를 들어 본 발명에 정의된 아미노산 성분 (AA)의 도입에 의해, 바람직하게는 상기 정의된 비율에서, "희석" 또는 변형될 수 있다. 그에 따라, 변형된 폴리머 담체가 얻어질 수 있고, 상기 비변형된 폴리머 담체의 양이온성 특성은 전형적으로 본 발명에 정의된 한계 내에 유지된다. 최종 폴리머 담체의 특성은 따라서 단계 a)에서 본 발명에 정의된 아미노산 성분 (AA)의 삽입에 의해 성분 (AA)의 특성과 함께 원하는 바대로 조절될 수 있다.
단계 c)에서, 본 발명에 정의된 적어도 하나의 양이온성 또는 다중양이온성 단백질 또는 펩타이드 및/또는 본 발명에 정의된 적어도 하나의 양이온성 또는 다중양이온성 폴리머, 및 선택적으로 적어도 하나의 아미노산 성분 (AA) 및 본 발명에 정의된 적어도 하나의 핵산은, 독창적인 폴리머 담체 화물 복합체의 독창적인 제조 방법의 단계 a) 내 염기성 또는 중성 환경에서, 바람직하게 포함된다. 이러한 염기성 또는 중성 환경은 전형적으로 약 5 내지 약 10의 pH 범위, 바람직하게는 약 6 내지 약 9의 pH 범위, 더욱 바람직하게는 약 7 내지 약 8의 pH 범위, 예를 들어 약 6.5, 7, 7.5, 8, 8.5, 또는 9 또는 이들의 어느 둘 또는 상기 언급된 값으로부터 선택된 어느 범위를 보인다.
나아가, 단계 c) 내 용액의 온도는 바람직하게는 약 5°C 내지 약 60°C의 범위, 더욱 바람직하게는 약 15°C 내지 약 40°C의 범위, 더욱 더 바람직하게는 약 20°C 내지 약 30°C의 범위, 및 가장 바람직하게는 약 20°C 내지 약 25°C의 범위, 예를 들어 약 25°C이다.
본 발명에 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 제조 방법의 단계 c) 내, 버퍼는 적절하게 사용될 수 있다. 바람직한 버퍼는 바람직하게는, 이에 제한되지 않고, 버퍼제(buffering agent)로써, 탄산염 버퍼, 붕산염 버퍼, 비신(Bicine) 버퍼, CHES 버퍼, CAPS 버퍼, 에탄올아민 함유 버퍼, HEPES, MOPS 버퍼, 인산염 버퍼, PIPES 버퍼, 트리스(Tris) 버퍼, 트리신(Tricine) 버퍼, TAPS 버퍼, 및/또는 TES 버퍼로부터 선택될 수 있다. 특히 탄산염 버퍼가 바람직하다.
성분을 혼합할 때, 바람직하게는 산소의 존재 하에서, 바람직하게는 본 발명에 정의된 염기성 또는 중성 환경의 존재 하에서, 응축 중합 또는 중축합 반응 및 적어도 하나의 핵산 분자의 복합화는 시작된다. 이러한 목적을 위해, 단계 c) 내 혼합물은 바람직하게는 산소에 노출되거나 추가적 스타터, 예를 들어 산화제, 예를 들어 DMSO 등의 촉매량을 사용하여 시작될 수 있다. 적어도 하나의 양이온성 또는 다중양이온성 단백질 또는 펩타이드 및/또는 적어도 하나의 양이온성 또는 다중양이온성 폴리머 및 선택적으로 본 발명에 정의된 적어도 하나의 아미노산 성분 (AA)의 응축 중합 또는 중축합 반응의 시작 시, 응축되고 이에 따라 이황화 결합(중합 응축 또는 중축합)을 통해 서로 중합된다. 이러한 단계 a) 반응에서 바람직하게는 선형 폴리머는 적어도 하나의 반응성 -SH 일부를 갖는 모노머를 사용하여, 즉 적어도 하나의 양이온성 또는 다중양이온성 단백질 또는 펩타이드 및/또는 적어도 하나의 양이온성 또는 다중양이온성 폴리머 및 본 발명에 정의된 선택적으로 적어도 하나의 아미노산 성분 (AA), 본 발명에 정의된 적어도 하나의 자유 -SH 일부를 보이는 각각의 성분, 예를 들어 그들의 말단에, 생성된다. 그러나, 하나 이상, 바람직하게는 두 자유 -SH 일부를 갖는 성분이 사용될 수 있고, 분지된 폴리머로 유도될 수 있다. 중합 반응과 동시에 양이온성 폴리머는 적어도 하나의 핵산에 결합하고 그에 따라 이를 복합화된다.
하나의 대안에 따르면, 폴리머 담체 화물 복합체는 추가적으로 본 발명에 정의된 성분 (AA)으로 변형될 수 있다.
첫번째 실시예에 따르면, 성분 (AA) (예를 들어 리간드)은 단계 a)에 양이온성 성분을 제공하기 전에 본 발명에 정의된 어느 기능성을 통해, 예를 들어 -SH 일부, 양이온성 성분에 결합된다. 이러한 성분 (AA) 또는 (예를 들어 리간드)는 바람직하게는 이들 성분의 하나의 말단에 양이온성 성분에 결합된다. 만약 결합이 -SH 결합을 통해 수행된다면, 양이온성 성분은 바람직하게는 둘(또는 그 이상) -SH- 일부와 함께 제공된다. 성분(AA) 또는 (예를 들어 리간드)는 바람직하게는 단지 하나의 -SH 일부를 수송한다. 이러한 경우, 양이온성 성분의 하나의 -SH 일부는 바람직하게는 기술분야에서 알려진 보호기를 사용하여 첫번째 단계에서 보호된다. 이후, 양이온성 성분은 비보호된 -SH 일부를 통해 첫번째 이황화 결합을 형성하도록 성분 L에 결합할 수 있다. 양이온성 성분의 보호된 -SH-일부는 이후 전형적으로 추가적 반응에 대해 탈보호된다.
그렇지 않으면, 상기 언급된 성분 (AA) 또는 (예를 들어 리간드)는 상기 단계 a)에서 제공된 양이온성 성분과 짝지어 지도록 단계 c)에서, 예를 들어 자유 -SH 일부를 차단함이 없이 이황화 결합을 통해, 사용될 수 있다. 그러나 이러한 맥락에서 통상의 기술자에게 알려지거나 본 발명에 정의된 모든 방법은 양이온성 성분 또는 폴리머 담체에 성분 (AA)를 결합하는데 사용될 수 있다.
그렇지 않으면, 성분 (AA) 또는 (예를 들어 리간드)는 본 발명에 정의된 어느 기능성을 통해, 예를 들어 -SH 일부, 폴리머 담체 화물 복합체에 결합될 수 있다. 이러한 맥락에서 성분 (AA) (예를 들어 리간드)는 폴리머 담체 화물 성분의 자유 -SH 일부를 통해 결합되는 것이 바람직하다.
본 발명에 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 제조 방법의 단계 c)에 따르면, 본 발명에 따른 적어도 하나의 핵산 분자는 단계 b)에서 제공된 양이온성 성분과, 바람직하게는 상기 언급된 비율로 혼합된다. 전형적으로, 폴리머 담체 화물 복합체에서, 본 발명에 정의된 양이온성 성분, 및 적어도 하나의 핵산 분자가 핵산에 대한 양이온성 폴리머의 약 5 내지 10000의 분자비, 바람직하게는 약 5 내지 5000의 분자비, 더욱 바람직하게는 약 10 내지 2500의 분자비, 더욱 더 바람직하게는 약 10 내지 1000의 분자비로 제공된다. N/P 비율은 바람직하게는 상기 개시된 바와 같다. 이러한 맥락에서, N/P 비율은 생체 내 응집 및 독성을 피하여 선택된다.
특정한 실시예에서, -SH 일부를 포함하지 않는 상기 정의된 (AA) 성분은 (말단) -SH 일부에 의해 중합되지 않고 그에 따라 폴리머 담체 화물 복합체로 병합된 단계 c)에서 첨가될 수 있다. 따라서 이들 (AA) 성분은 전형적으로 공유결합되지 않고 추가적 성분으로써 복합체 내 비공유적으로 포함된다. 이러한 맥락에서 (AA) 성분으로써 폴리머 담체 화물 복합체 내 단백질 또는 펩타이드로 제공된, 적어도 하나의 항원 또는 이의 절편, 변이체 및/또는 유도체의 병합이 특히 바람직하다. 본 실시예는 만약 AA가 오발부민 또는 오발부민의 절편일 경우 더욱 바람직하다. 따라서, 특히 바람직한 실시예에서, 만약 AA가 오발부민 또는 이의 절편인 경우, AA는 폴리머 담체 화물 복합체에 공유결합되지 않고, 예를 들어 AA가 이황화결합을 통해 폴리머 담체 화물 복합체에 공유결합되지 않는다.
본 발명에 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 제조 방법의 추가적 단계 d)에 따르면, 단계 c)에 따라 얻어진 폴리머 담체 화물 복합체는 선택적으로 정제된다. 정제는 HPLC, FPLC, GPS, 투석 등과 같이 크로마토그래피 방법을 사용하여 일어날 수 있다.
본 발명에 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 제조 방법의 추가적 단계 e)에 따르면, 단계 c) 또는 d)에 따라 얻어진 폴리머 담체 화물 복합체는 선택적으로 동결건조된다. 이러한 목적을 위해 어느 적절한 동결보호제(cryoprotectant) 또는 동결건조보호제(lyoprotectant)가 단계 c) 또는 d)에서 얻어진 폴리머 담체 화물 복합체에 첨가될 수 있다.
본 발명에 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 제조 방법은 폴리머 담체의 이의 성분의 특이적 선택 때문에 그에 따라 생체 내 응집 및 독성을 회피하여 원하는 폴리머 담체 화물 복합체의 화학적 특징을 적응하는데 특히 적절하다.
두번째 성분으로써 독창적 약학적 조성물은 적어도 감염성 질병과 관련된 병원체의 항체로부터 선택된 적어도 하나의 항원; 알러지 또는 알러지 질병과 관련된 항원; 자가면역 질병과 관련된 항원; 또는 암 또는 종양 질병과 관련된 항원, 또는 상기 항원의 각각의 절편, 변이체 및/또는 유도체를 포함한다.
이러한 적어도 하나의 항원은 적어도 하나의 항원, 또는 항원 세포, 항원 세포 절편, 세포 분획; 적어도 하나의 항원을 포함하는 변형된, 약화된 또는 불활성화된(예를 들어 화학적으로 또는 방사선을 통해) 병원체(바이러스, 박테리아 등) 세포 벽 성분을 코딩하는 단백질 또는 펩타이드로써, 핵산으로써 제공된다.
특정한 실시예에서, 약학적 조성물 내 두번째 성분으로 포함된 항원은 펩타이드 또는 단백질 항원 또는 상기 펩타이드 또는 단백질 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체이다.
a) 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원:
감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원은 감염성 질병의 유도와 관련된 병원체로부터 유래된다. 특정한 실시예에서, 상기 항원은 펩타이드 또는 단백질 항원, 또는 상기 펩타이드 또는 단백질 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체, 및/또는 불활성화된 또는 약화된 상기 병원체, (예를 들어 본 발명에 정의된 어느 하나와 같은 바이러스)에 포함되거나 이로 제공된 및/또는 이로부터 유래된(예를 들어 제조된) 것이다.
이러한 맥락에서, (예를 들어 펩타이드 또는 단백질) 항원은 감염성 질병과 관련된 약화된 또는 불활성화된 병원체(예를 들어 본 발명에 정의된 어느 하나와 같은 바이러스)로써 제공된 것에 포함되고/또는 이로부터 유래(예를 들어 제조)될 수 있다.
본 발명의 모든 양태의 대안적인 실시예에서, 본 발명에 사용된 항원(예를 들어 펩타이드 또는 단백질 항원)은 불활성화된 또는 약화된 바이러스(본 발명에 정의된 어느 것와 같이, 또는 본 발명에 정의된 어느 병원체)에 포함된 것이 아니며/또는; 불활성화된 또는 약화된 상기 바이러스 또는 병원체로써 제공(예를 들어 제조)되지 않은 것이며/또는; 불활성화된 또는 약화된 상기 바이러스 또는 병원체로부터 유래(예를 들어 제조)되지 않은 것이다. 예를 들어, 본 발명의 어느 양태에 사용된 항원은 동정 및/또는 정제된 단백질 또는 펩타이드 항원이거나 이와 같이 제공될 수 있다. 통상의 기술자에게 알려진 바와 같이, 동정된(및/또는 정제된) 항원은 약 40%, 30%, 20%, 10%, 5%, 2% 또는 1% 원하지 않거나 다른 단백질/펩타이드 또는 불순물과 같이 다른 성분에 특이적인 (시작) 구성성분(composition)로 존재하는(또는 제공되는) 이러한 항원을 포함한다.
특정한 실시예에서, 본 발명에 사용된 (예를 들어 단백질 또는 펩타이드) 항원은 재조합 항원, 예를 들어 본 발명에 정의된 이러한 방법론을 사용하는 것과 같이 재조합 생산을 사용하여 제조된 것이다. 대안적 실시예에서, 본 발명에 사용된 (예를 들어 단백질 또는 펩타이드)항원은 합성 항원, 예를 들어 본 발명에 정의된 이들 방법론을 사용하는 것과 같이 펩타이드 합성을 사용하여 제조된 것이다.
감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원은 아시네토박터 바우마니(Acinetobacter baumannii), 아나플라스마 속(Anaplasma genus), 아나플라스마 파고시토필리움(Anaplasma phagocytophilum), 브라질구충(Ancylostoma braziliense), 십이지장충(Ancylostoma duodenale), 용혈성 아카노박테리아균(Arcanobacterium haemolyticum), 회충(Ascaris lumbricoides), 아스페르길루스 속(Aspergillus genus), 아스트로비리다에(Astroviridae), 바베시아 속(Babesia genus), 탄저균(Bacillus anthracis), 세레우스 균(Bacillus cereus), 바르토넬라 헨셀라에(Bartonella henselae), BK 바이러스, 블라스토시스티스 호미니스(Blastocystis hominis), 블라스토미세스 더마티티스(Blastomyces dermatitidis), 백일해균(Bordetella pertussis), 보렐리아 부르그도르페리(Borrelia burgdorferi), 보렐리아 속(Borrelia genus), 보렐리아 종(Borrelia spp), 브루셀라 속(Brucella genus), 말레이사상충(Brugia malayi), 부니아바이러스 패밀리(Bunyaviridae family), 부르크홀데리아 세파시아(Burkholderia cepacia) 및 다른 부르크홀데이라 종(Burkholderia species), 부루크홀데리아 말레이(Burkholderia mallei), 부르크홀데리아 슈도말레이(Burkholderia pseudomallei), 칼리시비리대 패밀리(Caliciviridae family), 캄필로박터 속(Campylobacter genus), 칸디다 알비칸스(Candida albicans), 칸디다 종(Candida spp), 클라미디아 트라코마티스 (Chlamydia trachomatis), 클라미도필라 뉴모니아(Chlamydophila pneumonia), 클라미도필라 프시타시(Chlamydophila psittaci), CJD 프리온, 간디스토마(Clonorchis sinensis), 클로스트리디움 보툴리늄(Clostridium botulinum), 클로스트리듐 디피실리(Clostridium difficile), 클로스트리듐 페르프린젠스(Clostridium perfringens), 클로스트리듐 페르프린젠스(Clostridium perfringens), 클로스트리듐 종(Clostridium spp), 클로스트리듐 테타니(Clostridium tetani), 코시디오이디스 종(Coccidioides spp), 코로나바이러스(coronaviruses), 코리네박테리아 디프테리아(Corynebacterium diphtheria), 콕시엘라 부르네티(Coxiella burnetii), 크리민 콩고 출혈열 바이러스(Crimean-Congo hemorrhagic fever virus), 크립토콕쿠스 네오포르만스(Cryptococcus neoformans), 크립토스포르디움 속(Cryptosporidium genus), 사이토메갈로바이러스(Cytomegalovirus), 뎅기열 바이러스(Dengue viruses) (DEN-1, DEN-2, DEN-3 및 DEN-4), 이핵아메바 프라질리스(Dientamoeba fragilis), 에볼라바이러스(Ebolavirus, EBOV), 에키노코커스 속(Echinococcus genus), 엘리키아 샤펜시스(Ehrlichia chaffeensis), 엘리키아 에인지(Ehrlichia ewingii), 엘리키아 속(Ehrlichia genus), 이핵아메바 히스톨리티카(Entamoeba histolytica), 엔테로코커스 속(Enterococcus genus), 엔테로바이러스 속(Enterovirus genus), 엔테로바이러스(Enteroviruses), 주로 콕사키 A 바이러스(Coxsackie A virus) 및 엔테로바이러스 71 (EV71), 에피데모피톤 종(Epidermophyton spp), 엡스테인바 바이러스(Epstein-Barr Virus, EBV), 대장균(Escherichia coli) O157:H7, O111 및 O104:H4, 파스시올라 헤파티카(Fasciola hepatica) 및 파스시올라 기간티카(Fasciola gigantica), FFI 프리온, 필라리오데아 수퍼패밀리(Filarioidea superfamily), 플라비바이러스(Flaviviruses), 프란시엘라 투라렌시스(Francisella tularensis), 푸소박테리움 속(Fusobacterium genus), 게오트리쿰 칸디툼(Geotrichum candidum), 지알디아편모충(Giardia intestinalis), 악구충속(Gnathostoma spp), GSS 프리온, 구아나리토 바이러스(Guanarito virus), 헤모필루스 듀크레이(Haemophilus ducreyi), 헤모필루스 인플루엔자(Haemophilus influenza), 헬리코박테 파일로리(Helicobacter pylori), 헤니파바이러스(Henipavirus) (헨드라 바이러스(Hendra virus) 니파 바이러스(Nipah virus)), A형 간염 바이러스(Hepatitis A Virus), B형 간염 바이러스(Hepatitis B Virus), C형 간염 바이러스(Hepatitis C Virus), D형 간염 바이러스(Hepatitis D Virus), E형 간염 바이러스(Hepatitis E Virus), 헤르페스 심플렉스 바이러스 1 및 2(Herpes simplex virus 1 and 2) (HSV-1 및 HSV-2), 히스토플라스마 캡슐라툼(Histoplasma capsulatum), HIV (인간 면역결핍 바이러스(Human immunodeficiency virus)), 호르테아 워넥키(Hortaea werneckii), 인간 보카바이러스(Human bocavirus, HBoV), 인간 헤르페스바이러스(Human herpesvirus 6, HHV-6) 및 인간 헤르페스 바이러스 7(Human herpesvirus 7, HHV-7), 인간 메타뉴모바이러스(Human metapneumovirus, hMPV), 인유두종 바이러스(Human papillomavirus, HPV), 인간 파라인플루엔자 바이러스(Human parainfluenza viruses, HPIV), 일본 뇌염 바이러스(Japanese encephalitis virus), JC 바이러스, 주닌 바이러스(Junin virus), 킨젤라 킨가에(Kingella kingae), 클레프시엘라균(Klebsiella granulomatis), 쿠루 프리온(Kuru prion), 라싸 바이러스(Lassa virus), 레지오넬라 뉴모필라(Legionella pneumophila), 리슈마니아 속(Leishmania genus), 렙토스피라 속(Leptospira genus), 리스테리아 모노사이토제니스(Listeria monocytogenes), 림프구성 맥락 수막염 바이러스(Lymphocytic choriomeningitis virus, LCMV), 마추포 바이러스(Machupo virus), 말라세지아 종(Malassezia spp), 마버그 바이러스(Marburg virus), 홍역 바이러스(Measles virus), 메타고니무스 요카가와이(Metagonimus yokagawai), 마이크로스포리디아 필룸(Microsporidia phylum), 몰루스쿰 콘타기오숨 바이러스(Molluscum contagiosum virus, MCV), 멈프 바이러스(Mumps virus), 마이코박테리움 레프레(Mycobacterium leprae) 및 마이코박테리움 레프로마토시스(Mycobacterium lepromatosis), 마이코박테리움 투버쿨로시스(Mycobacterium tuberculosis), 마이코박테리움 울세란스(Mycobacterium ulcerans), 마이코플라스마 뉴모니에(Mycoplasma pneumonia), 네글레리아 파울러리(Naegleria fowleri), 아메리카 구충(Necator americanus), 나이세리아 고노르호애(Neisseria gonorrhoeae), 나이세리아 메닌지티디스(Neisseria meningitides), 노카디아 아스테로이드(Nocardia asteroids), 노카디아 종(Nocardia spp), 온코세르카 볼부러스(Onchocerca volvulus), 오리엔티아 쯔쯔가무시(Orientia tsutsugamushi), 오르쏘믹소바이러스 패밀리(Orthomyxoviridae family), 브라질 파라콕시디오이디즈(Paracoccidioides brasiliensis), 파라고니무스 종(Paragonimus spp), 파라고니무스 웨스터마니(Paragonimus westermani), 파보바이러스(Parvovirus) B19, 파스퇴렐라 속(Pasteurella genus), 플라스모디움 속(Plasmodium genus), 뉴모시스티스 지로베시(Pneumocystis jirovecii), 폴리오바이러스(Poliovirus), 라비 바이러스(Rabies virus), 호흡기 합포체 바이러스(Respiratory syncytial virus, RSV), 리노바이러스(Rhinovirus), 리노바이러스(rhinoviruses), 레케치아 아카리(Rickettsia 맘갸), 리케치아 속(Rickettsia genus), 리케치아 프로와제키(Rickettsia prowazekii), 리케치아 리켓시(Rickettsia rickettsia), 리케치아 티피(Rickettsia typhi), 리프밸리열바이러스(Rift Valley fever virus), 로타바이러스(Rotavirus), 루벨라 바이러스(Rubella virus), 사비아 바이러스(Sabia virus), 살모넬라 속(Salmonella genus), 개선충(Sarcoptes scabiei), SARS 코로나바이러스, 주혈흡충 속(Schistosoma genus), 시겔라 속(Shigella genus), 신 놈브레 바이러스(Sin Nombre virus), 한타바이러스(Hantavirus), 스포로트릭 센키(Sporothrix schenckii), 스타필로코커스 속(Staphylococcus genus), 스타필로코커스 속(Staphylococcus genus), 스트렙토코커스 아갈락티아(Streptococcus agalactiae), 스트렙토코커스 뉴모니아(Streptococcus pneumonia), 스트렙토코커스 피오게네스(Streptococcus pyogenes), 분선충(Strongyloides stercoralis), 태니아 속(Taenia genus), 태니아 솔리움(Taenia solium), 진드기 매개 뇌염 바이러스(Tick-borne encephalitis virus, TBEV), 견회충(Toxocara canis) 또는 고양이 회충(Toxocara cati), 톡소플라스마 곤디(Toxoplasma gondii), 트레포네마 팔리둠(Treponema pallidum), 트리키넬라 스피랄리스(Trichinella spiralis), 트리코모나스 바기날리스(Trichomonas vaginalis), 트리코피톤 종(Trichophyton spp), 트리쿠리스 트리키우라(Trichuris trichiura), 트리파노소마 브루세이(Trypanosoma brucei), 트리파노소마 크루지(Trypanosoma cruzi), 우레플라스마 우렐리티쿰(Ureaplasma urealyticum), 수두 대상 포진 바이러스(Varicella zoster virus, VZV), 수두 대상 포진 바이러스(Varicella zoster virus, VZV), 바리올라 메이저(Variola major) 또는 바리올라 마이너(Variola minor), vCJD 프리온, 베네스 웰라형 마뇌염 바이러스(Venezuelan equine encephalitis virus), 비브리오 콜레라(Vibrio cholera), 웨스트 나일 바이러스(West Nile virus), 서부 마뇌염 바이러스(Western equine encephalitis virus), 반크로프트 사상충(Wuchereria bancrofti), 황열병 바이러스(Yellow fever virus), 예르시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica), 예르시니아 페스티스(Yersinia pestis), 및 예르시니아 슈도투버쿨로시스(Yersinia pseudotuberculosis) 병원체로부터의 항원으로부터 선택된다.
이러한 맥락에서 라비 바이러스, B형 간염 바이러스, 인유두종바이러스(hPV), 탄저균, 호흡기 합포체 바이러스(RSV), 헤르페스 심플렉스 바이러스(HSV), 인플루엔자 바이러스 및 결핵균으로부터 선택된 병원체 유래 항원이 특히 선호된다.
나아가, 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원은 하기 항원으로부터 선택될 수 있다: 외막 단백질 A OmpA, 생물막 관련 단백질 Bap, 수송 단백질 MucK (아시네토박터 바우마니(Acinetobacter baumannii), 아시네토박터 감염(Acinetobacter infections)); 가변성 표면 당단백질 VSG, 미소관(microtubule)-관련 단백질 MAPP15, 트랜스 시알리다제(trans-sialidase) TSA (트리파노소마 브루세이(Trypanosoma brucei), 아프리카 수면병(African sleeping sickness) (아프리칸 트리파노소미아시스(African trypanosomiasis)); HIV p24 항원, HIV 외피막(Eenvelope) 단백질 (Gp120, Gp41, Gp160), 다단백질 GAG, 음성 인자(negative factor) 단백질 Nef, 전사의 전사활성제(trans-activator of transcription) Tat (HIV (인간 면역 결핍 바이러스(Human immunodeficiency virus)), AIDS (후천적 면역결핍 증후군(Acquired immunodeficiency syndrome))); 갈락토스 억제성 접착 단백질(galactose-inhibitable adherence protein, GIAP), 29 kDa 항원 Eh29, Gal/GalNAc 렉틴, 단백질 CRT, 125 kDa 면역 우성 항원, 단백질 M17, 부착소(adhesion) ADH112, 단백질 STIRP (이질아메바(Entamoeba histolytica), 아메바증(Amoebiasis)); 주요 표면 단백질 1-5 (MSP1a, MSP1b, MSP2, MSP3, MSP4, MSP5), 타입 IV 분비 시스템 단백질(type IV secreotion system protein) (VirB2, VirB7, VirB11, VirD4) (아나플라스마 속(Anaplasma genus), 아나플라즈마병(Anaplasmosis)); 방어 항원 PA, 부종 인자 EF, 치사(lethal) 인자 LF, S-층 유사 상동(homology) 단백질 SLH (탄저균(Bacillus anthracis), 탄저병(Anthrax)); 아크라놀리신(acranolysin), 포스폴리파아제 D, 콜라겐-결합 단백질 CbpA (용혈성 아카노박테리아균(Arcanobacterium haemolyticum), 용혈성 아카노박테리아균 감염); 뉴클레오캡시드 단백질 NP, 당단백질 전구체 GPC, 당단백질 GP1, 당단백질 GP2 (주닌 바이러스, 아르헨티나 출혈열(Argentine hemorrhagic fever)); 키틴-단백질 층 단백질, 14 kDa 표면 항원 A14, 주요 정자 단백질 MSP, MSP 중합 조직(polymerization-organizing) 단백질 MPOP, MSP 섬유 단백질 2 MFP2, MSP 중합 활성화(polymerization-activating) 인산화효소 MPAK, ABA-1-유사 단백질 ALB, 단백질 ABA-1, 큐티쿨린(cuticulin) CUT-1 (회충(Ascaris lumbricoides), 회충증(Ascariasis)); 41 kDa 알레르겐 Asp v13, 알레르겐 Asp f3, 주요 분생자(conidial) 표면 단백질 작은 막대(rodlet) A, 프로테아제 Pep1p, GPI-정착 단백질 Gel1p, GPI-정착 단백질 Crf1p (아스페길루스 속(Aspergillus genus), 에스페길루스증(Aspergillosis)); 패밀리 VP26 단백질, VP29 단백질 (아스트로비리데(Astroviridae), 아스트로바이러스 감염(Astrovirus infection)); 롭트리(Rhoptry-)관련 단백질 1 RAP-1, 낭충 표면 항원 MSA-1, MSA-2 (a1, a2, b, c), 12D3, 11C5, 21B4, P29, 변이체 적혈구 표면 항원 VESA1, 정단(Apical) 막 항원 1 AMA-1 (바베시아 속(Babesia genus), 바베시아증(Babesiosis)); 용혈소(hemolysin), 장독소 C, PXO1-51, 글리콜산 산화효소, ABC-수송체(transporter), 페니실린 결합 단백질, 아연 수송체 패밀리 단백질, 슈도유리딘(pseudouridine) 합성효소 Rsu, 플라스미드 복제 단백질 RepX, 올리고엔도펩티다아제(oligoendopeptidase) F, 프로파지(prophage) 막 단백질, 단백질 HemK, 편모 항원 H, 28.5-kDa 세포 표면 항원 (세레우스균(Bacillus cereus), 세레우스균 감염); 라지 T 항원 LT, 스몰 T 항원, 캡시드 단백질 VP1, 캡시드 단백질 VP2 (BK 바이러스, BK 바이러스 감염); 29 kDa-단백질, 카스파제(caspase)-3-유사 항원, 당단백질 (블라스토시스티스 호미니스(Blastocystis hominis), 블라스토시스티스 호미니스 감염); 효모 표면 부착소 WI-1 (블라스토미세스 더마티티디스(Blastomyces dermatitidis), 블라스토미세스증(Blastomycosis)); 핵단백질 N, 중합효소 L, 기질 단백질 Z, 당단백질 GP (마추포 바이러스(Machupo virus), 볼리비아 출혈열(Bolivian hemorrhagic fever)); 외부 표면 단백질 A OspA, 외부 표면 단백질 OspB, 외부 표면 단백질 OspC, 데코린(decorin) 결합 단백질 A DbpA, 데코린 결합 단백질 B DbpB, 편모 필라멘트 41 kDa 코어 단백질 Fla, 염기성 막 단백질 A 전구체 BmpA (면역 우성 항원 P39), 외부 표면 22 kDa 지질단백질 전구체 (항원 IPLA7), 가변성 표면 지질단백질 vlsE (보렐리아 속(Borrelia genus), 보렐리아 감염); 보튤리눔 신경독소(Botulinum neurotoxins) BoNT/A1, BoNT/A2, BoNT/A3, BoNT/B, BoNT/C, BoNT/D, BoNT/E, BoNT/F, BoNT/G, 재조합 보튤리눔 독소 F Hc 도메인 FHc (클로스트리디움 보툴리눔(Clostridium botulinum), 보툴리눔 식중독(Botulism) (및 유아(Infant) 보툴리눔 식중독)); 뉴클레오캡시드, 당단백질 전구체 (사비아 바이러스(Sabia virus), 브라질 출혈열(Brazilian hemorrhagic fever)); 구리/아연 과산화물 디스무타제 SodC, 박테리오페리틴(bacterioferritin) Bfr, 50S 리보솜 단백질 RplL, OmpA-유사 트랜스막 도메인-포함 단백질 Omp31, 면역성 39-kDa 단백질 M5 P39, 아연 ABC 수송체 주변세포질 아연-결합 단백질 znuA, 주변세포질 면역성 단백질 Bp26, 30S 리보솜 단백질 S12 RpsL, 글리세르알데하이드-3-인산염 탈수소효소 Gap, 25 kDa 외막 면역성 단백질 전구체 Omp25, 침윤(invasion) 단백질 B lalB, 트리거 인자 Tig, 분자 샤페론 DnaK, 추정(putative) 펩티딜-프롤릴 시스-트랜스 이성질화효소 SurA, 지질단백질 Omp19, 외막 단백질 MotY Omp16, 보존된 외막 단백질 D15, 말산염(malate) 탈수소효소 Mdh, 타입-IV 분비 시스템의 요소 (T4SS) VirJ, 알수없는 기능의 지질단백질 BAB1_0187 (브루셀라 속(Brucella genus), 브루셀라병(Brucellosis)); ABC 수송체 패밀리의 멤버 (LolC, OppA, 및 PotF), 추정 지질단백질 방출 시스템 트랜스막 단백질 LolC/E, 플라겔린 FliC, 부르크홀데리아 세포내 운동성(motility) A BimA, 박테리아 신장(Elongation) 인자-Tu EF-Tu, 17 kDa OmpA-유사 단백질, boaA 코딩 단백질, boaB 코딩 단백질 (부르크홀데리아 세파시아(Burkholderia cepacia) 및 다른 부르크홀데리아 종, 부르크홀데리아 감염); 마이콜릴 전이효소(mycolyl-transferase) Ag85A, 열충격 단백질 Hsp65, 단백질 TB10.4, 19 kDa 항원, 단백질 PstS3, 열충격 단백질 Hsp70 (미코박테리움 울세란스(Mycobacterium ulcerans), 부룰리 궤양(Buruli ulcer)); 노로바이러스 주요 및 마이너 바이러스성(viral) 캡시드 단백질 VP1 및 VP2, 유전체 다단백질, 사포바이러스(Sapoviurus) 캡시드 단백질 VP1, 단백질 Vp3, 유전체(geome) 다단백질 (칼리시비리데(Caliciviridae) 패밀리, 칼리시바이러스 감염 (노로바이러스 및 사포바이러스); 주요 외막 단백질 PorA, 플라겔린 FlaA, 표면 항원 CjaA, 피브로넥틴 결합 단백질 CadF, 아스파르트산염/글루탐산염-결합 ABC 수송체 단백질 Peb1A, 단백질 FspA1, 단백질 FspA2 (캄필로박터 속(Campylobacter genus), 캄필로박테리아증(Campylobacteriosis)); 글리콜 효소 에놀라제(glycolytic enzyme enolase), 분비된 아스파틸 단백질분해효소 SAP1-10, 글리코포스파티딜이노시톨(glycophosphatidylinositol) (GPI)-연결된 세포 벽 단백질, 단백질 Hyr1, 보체 수용체 3-관련된 단백질 CR3-RP, 부착소 Als3p, 열충격 단백질 90 kDa hsp90, 세포 표면 소수성 단백질 CSH (보통 칸디다 알비칸스(Candida albicans) 및 다른 칸디다 종, 칸디다증(Candidiasis)); 17-kDa 항원, 단백질 P26, 삼량체의 오토트랜스포터 부착소(trimeric autotransporter adhesins, TAAs), 바르토넬라(Bartonella) 부착소 A BadA, 가변적으로 발현된 외막 단백질 Vomps, 단백질 Pap3, 단백질 HbpA, 외피-관련 프로테아제 HtrA, 단백질 OMP89, 단백질 GroEL, 단백질 LalB, 단백질 OMP43, 디히드로리포아미드 숙시닐트랜스퍼레이즈(dihydrolipoamide succinyltransferase) SucB (바르토넬라 헨셀라에(Bartonella henselae), 고양이 발톱병(Cat-scratch disease)); 무편모형(amastigote) 표면 단백질-2, 무편모형 특이적 표면 단백질 SSP4, 크루지페인(cruzipain), 트랜스-시알리다제(trans-sialidase) TS, 트리포마스티고트(trypomastigote) 표면 당단백질 TSA-1, 보체 조절(regulatory) 단백질 CRP-10, 단백질 G4, 단백질 G2, 파라쏘네말(paraxonemal) 막대 단백질 PAR2, 파라편모 막대 성분 Par1, 뮤신(mucin)-관련 표면 단백질 MPSP (트리파노소마 크루지(Trypanosoma cruzi), 샤가스 병(Chagas Disease) (아메리칸 트리파노소마증(American trypanosomiasis))); 외피 당단백질 (gB, gC, gE, gH, gI, gK, gL) (수두 대상 포진 바이러스(Varicella zoster virus, VZV), 수두(Chickenpox)); 주요 외막 단백질 MOMP, 예상(probable) 외막 단백질 PMPC, 외막 복합체 단백질 B OmcB, 열충격 단백질 Hsp60 HSP10, 단백질 IncA, 타입 III 분비 시스템으로부터 단백질, 리보뉴클레오티드 환원효소 작은 사슬 단백질 NrdB, 플라스미드 단백질 Pgp3, 클라미디아(chlamydial) 외부 단백질 N CopN, 항원 CT521, 항원 CT425, 항원 CT043, 항원 TC0052, 항원 TC0189, 항원 TC0582, 항원 TC0660, 항원 TC0726, 항원 TC0816, 항원 TC0828 (클라미디아 트라코마티스(Chlamydia trachomatis), 클라미디아증); 저 칼슘 반응 단백질 E LCrE, 클라미디아 외부 단백질 N CopN, 세린/트레오닌-단백질 인산화효소 PknD, 아실-수송-단백질 S-말로닐이성질화효소(S-malonyltransferase) FabD, 단일 가닥 DNA-결합 단백질 Ssb, 주요 외막 단백질 MOMP, 외막 단백질 2 Omp2, 다형성(polymorphic) 막 단백질 패밀리 (Pmp1, Pmp2, Pmp3, Pmp4, Pmp5, Pmp6, Pmp7, Pmp8, Pmp9, Pmp10, Pmp11, Pmp12, Pmp13, Pmp14, Pmp15, Pmp16, Pmp17, Pmp18, Pmp19, Pmp20, Pmp21) (클라미도필라 뉴모니아(Chlamydophila pneumoniae), 클라미도필라 뉴모니아 감염); 콜레라 독소 B CTB, 독소 공조절 필린(toxin coregulated pilin A, TcpA), 독소 공조절 필린 TcpF, 독소 공조절 필러스(pilus) 생합성 단백질 F TcpF, 콜레라 장독소 서브유닛 A, 콜레라 장독소 서브유닛 B, 열안정 장독소 ST, 만노스 감응성 헤마글루티닌(mannose sensitive hemagglutinin) MSHA, 외막 단백질 U 포린 ompU, 포린(Poring) B 단백질, 다형성 막 단백질-D (콜레라균(Vibrio cholerae), 콜레라(Cholera)); 프로피오닐-CoA 카르복시화효소 PCC, 14-3-3 단백질, 프로히비틴(prohibitin), 시스테인 프로테아제, 글루타치온 이성질화효소, 겔솔린(gelsolin), 카뎁신(cathepsin) L 단백질분해효소 CatL, 표피(Tegumental) 단백질 20.8 kDa TP20.8, 표피 단백질 31.8 kDa TP31.8, 리소포스파티드산 포스파타제(lysophosphatidic acid phosphatase) LPAP, (간흡충(Clonorchis sinensis), 간디스토마(Clonorchiasis); 표면 층 단백질 SLPs, 글루탐산 탈수소효소 항원 GDH, 독소 A, 독소 B, 시스테인 프로테아제 Cwp84, 시스테인 프로테아제 Cwp13, 시스테인 프로테아제 Cwp19, 세포 벽 단백질 CwpV, 편모 단백질 FliC, 편모 단백질 FliD (클로스트리듐 디피실리(Clostridium difficile), 클로스트리듐 디피실리 감염); 리노바이러스: 캡시드 단백질 VP1, VP2, VP3, VP4; 코로나바이러스: 스프라이크(sprike) 단백질 S, 외피 단백질 E, 막 단백질 M, 뉴클레오캡시드 단백질 N (보통 리노바이러스 및 코로나바이러스, 통상 감기(cold) (급성 바이러스성 비인두염(rhinopharyngitis); 급성 코감기(Acute coryza))); 프리온 단백질 Prp (CJD 프리온, 크로이츠펠트 야곱병(Creutzfeldt-Jakob disease, CJD)); 외피 단백질 Gc, 외피 단백질 Gn, 뉴클레오캡시드 단백질 (크리민 콩고 출혈열 바이러스(Crimean-Congo hemorrhagic fever virus), 크리민 콩고 출혈열(CCHF)); 독성(virulence)-관련 DEAD-박스 RNA 헬리카제 VAD1, 갈락토실로만난(galactoxylomannan)-단백질 GalXM, 글루쿠로녹실로만난(glucuronoxylomannan) GXM, 만노단백질 MP (크립토콕쿠스 네오포르만스(Cryptococcus neoformans), 크립토코커스증(Cryptococcosis)); 산성 리보솜 단백질 P2 CpP2, 뮤신 항원 Muc1, Muc2, Muc3 Muc4, Muc5, Muc6, Muc7, 표면 부착 단백질 CP20, 표면 부착 단백질 CP23, 표면 단백질 CP12, 표면 단백질 CP21, 표면 단백질 CP40, 표면 단백질 CP60, 표면 단백질 CP15, 표면-관련 글리코펩타이드 gp40, 표면-관련 글리코펩타이드 gp15, 접합자(oocyst) 벽 단백질 AB, 프로필린(profilin) PRF, 아피라제(apyrase) (크립토스포르디움 속(Cryptosporidium genus), 크립토스포리디오시스증(Cryptosporidiosis)); 지방산 및 레티놀 결합 단백질-1 FAR-1, 메탈로(metallo)의 조직 억제자 단백질분해효소 TIMP (TMP), 시스테인 단백질분해효소 ACEY-1, 시스테인 단백질분해효소 ACCP-1, 표면 항원 Ac-16, 분비된 단백질 2 ASP-2, 메탈로프로테아제 1 MTP-1, 아스파틸 프로테아제 억제자 API-1, 표면-관련 항원 SAA-1, 성인 특이적 분비된 인자 Xa 세린 프로테아제 억제자 항응고제(anticoagulant) AP, 카뎁신 D-유사 아스파틱 프로테아제 ARR-1 (보통 브라질 구충(Ancylostoma braziliense); 여러 다른 기생충, 피부의 유충 이행증(Cutaneous larva migrans, CLM)); 카뎁신 L-유사 프로테아제, 53/25-kDa 항원, 8kDa 패밀리 멤버, 미미한(marginal) 트립신-유사 활성을 갖는 낭미충(cysticercus) 단백질 TsAg5, 육구유충(oncosphere) 단백질 TSOL18, 육구유충 단백질 TSOL45-1A, 락테이트 탈수소효소 A LDHA, 락테이트 탈수소효소 B LDHB (유구조충(Taenia solium), 낭충증(Cysticercosis)); pp65 항원, 막 단백질 pp15, 캡시드-근위의 포피 단백질 pp150, 단백질 M45, DNA 중합효소 UL54, 헬리카제 UL105, 당단백질 gM, 당단백질 gN, glco단백질 H, 당단백질 B gB, 단백질 UL83, 단백질 UL94, 단백질 UL99 (시토메갈로바이러스(Cytomegalovirus), 시토메갈로바이러스 감염); 캡시드 단백질 C, 전막 단백질 prM, 막 단백질 M, 외피 단백질 E (도메인 I, 도메인 II, 도메인 II), 단백질 NS1, 단백질 NS2A, 단백질 NS2B, 단백질 NS3, 단백질 NS4A, 단백질 2K, 단백질 NS4B, 단백질 NS5 (뎅기열 바이러스(Dengue viruses) (DEN-1, DEN-2, DEN-3 및 DEN-4)-플라비바이러스(Flaviviruses), 뎅기열(Dengue fever)); 39 kDa 단백질 (이핵아메바 프라질리스(Dientamoeba fragilis), 이핵아메바증(Dientamoebiasis)); 디프테리아(diphtheria) 독소 전구체 독(Tox), 디프테리아 독소 DT, 필린-특이적 소타아제(sortase) SrtA, 샤프트(shaft) 필린 단백질 SpaA, 첨단(tip) 필린 단백질 SpaC, 마이너 필린 단백질 SpaB, 표면-관련 단백질 DIP1281 (디프테리아균(Corynebacterium diphtheriae), 디프테리아); 당단백질 GP, 핵단백질 NP, 마이너 기질 단백질 VP24, 주요 기질 단백질 VP40, 전사 활성제 VP30, 중합효소 공동 인자 VP35, RNA 중합효소 L (에볼라바이러스 (EBOV), 에볼라 출혈열(Ebola hemorrhagic fever)); 프리온 단백질 (vCJD 프리온, 변이체 크로이츠펠트 야곱병(Creutzfeldt-Jakob disease) (vCJD, nvCJD)); UvrABC 시스템 단백질 B, 단백질 Flp1, 단백질 Flp2, 단백질 Flp3, 단백질 TadA, 헤모글로빈 수용체 HgbA, 외막 단백질 TdhA, 단백질 CpsRA, 조절자 CpxR, 단백질 SapA, 18 kDa 항원, 외막 단백질 NcaA, 단백질 LspA, 단백질 LspA1, 단백질 LspA2, 단백질 LspB, 외막 성분 DsrA, 렉틴 DltA, 지질단백질 Hlp, 주요 외막 단백질 OMP, 외막 단백질 OmpA2 (헤모필루스 듀크레이(Haemophilus ducreyi), 연성 하감(Chancroid)); 아스파틸 프로테아제 1 Pep1, 포스폴리파아제 B PLB, 알파 만노시다제(alpha-mannosidase) 1 AMN1, 글루카노실전이효소(glucanosyltransferase) GEL1, 요소가수분해효소(urease) URE, 퍼옥시좀(peroxisomal) 기질 단백질 Pmp1, 프롤린 풍부 항원 Pra, 휴마(humal) T-세포 반응(reative) 단백질 TcrP (콕시디오이데스임미티스(Coccidioides immitis) 및 콕시디오이데스 포사다시(Coccidioides posadasii), 콕시디오이데스 진균증(Coccidioidomycosis)); 알레르겐 Tri r 2, 열충격 단백질 60 Hsp60, 곰팡이 액틴 Act, 항원 Tri r2, 항원 Tri r4, 항원 Tri t1, 단백질 IV, 글리세롤-3-인산염 탈수소효소 Gpd1, 삼투압감응자(osmosensor) HwSho1A, 삼투압감응자 HwSho1B, 히스티딘 인산화효소 HwHhk7B, 알레르겐 Mala s 1, 알레르겐 Mala s 11, 티오레독신(thioredoxin) Trx Mala s 13, 알레르겐 Mala f, 알레르겐 Mala s (보통 백선균 종(Trichophyton spp), 표피사상균 종(Epidermophyton spp.), 말라세지아 종(Malassezia spp.), 호르테아 워넥키(Hortaea werneckii), 피부 사상균증(Dermatophytosis)); 단백질 EG95, 단백질 EG10, 단백질 EG18, 단백질 EgA31, 단백질 EM18, 항원 EPC1, 항원 B, 항원 5, 단백질 P29, 단백질 14-3-3, 8-kDa 단백질, 마이오필린(myophilin), 열충격 단백질 20 HSP20, 당단백질 GP-89, 지방산 결합 단백질 FAPB (에키노코쿠스 종(Echinococcus genus), 포충증(Echinococcosis)); 주요 표면 단백질 2 MSP2, 주요 표면 단백질 4 MSP4, MSP 변이체 SGV1, MSP 변이체 SGV2, 외막 단백질 OMP, 외부 막(membrande) 단백질 19 OMP-19, 주요 항원 단백질 MAP1, 주요 항원 단백질 MAP1-2, 주요 항원 단백질 MAP1B, 주요 항원 단백질 MAP1-3, Erum2510 코딩 단백질, 단백질 GroEL, 단백질 GroES, 30-kDA 주요 외막 단백질, GE 100-kDa 단백질, GE 130-kDa 단백질, GE 160-kDa 단백질 (에를리키아 속(Ehrlichia genus), 엘리히증(Ehrlichiosis)); 분비된 항원 SagA, sagA-유사 단백질 SalA 및 SalB, 콜라겐 부착소 Scm, 표면 단백질 Fms1 (EbpA(fm), Fms5 (EbpB(fm), Fms9 (EpbC(fm) 및 Fms10, 단백질 EbpC(fm), 96 kDa 면역방어 당단백질 G1 (장구균 속(Enterococcus genus), 장구균 감염); 유전체 다단백질, 중합효소 3D, 바이러스성 캡시드 단백질 VP1, 바이러스성 캡시드 단백질 VP2, 바이러스성 캡시드 단백질 VP3, 바이러스성 캡시드 단백질 VP4, 프로테아제 2A, 프로테아제 3C (장내바이러스 속(Enterovirus genus), 장내바이러스 감염); 외막 단백질 OM, 60 kDa 외막 단백질, 세포 표면 항원 OmpA, 세포 표면 항원 OmpB (sca5), 134 kDa 외막 단백질, 31 kDa 외막 단백질, 29.5 kDa 외막 단백질, 세포 표면 단백질 SCA4, 세포 표면 단백질 Adr1 (RP827), 세포 표면 단백질 Adr2 (RP828), 세포 표면 단백질 SCA1, 탈수소효소 단백질 invA, 세포 분할 단백질 fts, 분비 단백질 sec 0패밀리, 독성 단백질 virB, tlyA, tlyC, 파불린(parvulin)-유사 단백질 Plp, 전구단백질 전위효소 SecA, 120-kDa 표면 단백질 항원 SPA, 138 kD 복합체 항원, 주요 100-kD 단백질 (단백질 I), 세포질내 단백질 D, 방어 표면 단백질 항원 SPA (리케치아 프로와제키(Rickettsia prowazekii), 발진티푸스(Epidemic typhus)); 엡스테인바 핵(Epstein-Barr nuclear) 항원 (EBNA-1, EBNA-2, EBNA-3A, EBNA-3B, EBNA-3C, EBNA-주도(leader) 단백질 (EBNA-LP)), 잠재 막 단백질 (LMP-1, LMP-2A, LMP-2B), 초기 항원 EBV-EA, 막 항원 EBV-MA, 바이러스성 캡시드 항원 EBV-VCA, 알칼리성 핵산가수분해효소 EBV-AN, 당단백질 H, 당단백질 gp350, 당단백질 gp110, 당단백질 gp42, 당단백질 gHgL, 당단백질 gB (엡스테인바 바이러스(Epstein-Barr Virus, EBV), 엡스테인바 바이러스 감염 단핵증(Epstein-Barr Virus Infectious Mononucleosis)); 캡시드(cpasid) 단백질 VP2, 캡시드 단백질 VP1, 주요 단백질 NS1 (파보바이러스(Parvovirus) B19, 전염성 홍반(Erythema infectiosum) (제5병(Fifth disease))); pp65 항원, 당단백질 105, 주요 캡시드 단백질, 외피 당단백질 H, 단백질 U51 (인간 헤르페스바이러스 6(Human herpesvirus 6, HHV-6) 및 인간 헤르페스바이러스 7 (HHV-7), 돌발성 발진(Exanthem subitum)); 티오레독신-글루타치온 환원효소 TGR, 카뎁신 L1 및 L2, 쿠니즈 형(Kunitz-type) 단백질 KTM, 류신 아미노펩티다아제(aminopeptidase) LAP, 시스테인 단백질분해효소 Fas2, 사포신(saposin)-유사 단백질-2 SAP-2, 티오레독신 과산화효소(peroxidases) TPx, Prx-1, Prx-2, 카뎁신 l 시스테인 단백질분해효소 CL3, 프로테아제 카뎁신 L CL1, 포르포글리세르산염(phosphoglycerate) 인산화효소 PGK, 27-kDa 분비성 단백질, 60 kDa 단백질 HSP35알파, 글루타치온 전이효소 GST, 28.5 kDa 표피 항원 28.5 kDa TA, 카뎁신 B3 프로테아제 CatB3, 타입 I 시스타틴 스테핀-1, 카뎁신 L5, 카뎁신 L1g 및 카뎁신 B, 지방산 결합 단백질 FABP, 류신 아미노펩티다아제 LAP (파스시올라 헤피티카(Fasciola hepatica) 및 파스시올라 기간티카(Fasciola gigantica), 간질증(Fasciolosis)); 프리온 단백질 (FFI 프리온, 치명적 가족성 불면증(Fatal familial insomnia, FFI)); 베놈(venom) 알레르겐 동족체(homolog)-유사 단백질 VAL-1, 풍부한 라바 전사체 ALT-1, 풍부한 라바 전사체 ALT-2, 티오레독신 과산화효소 TPX, 말벌 알레르겐 동족체(homologue) VAH, 티오레독신(thiordoxin) 과산화효소 2 TPX-2, 항원 단백질 SXP (펩타이드 N, N1, N2, 및 N3), 활성화 관련 단백질-1 ASP-1, 티오레독신 TRX, 트랜스글루타미나제 BmTGA, 글루타치온-S-이성질화효소 GST, 미오신, 말벌 알레르겐 동족체 VAH, 175 kDa 콜라겐분해효소, 글리세르알데하이드-3-인산염 탈수소효소 GAPDH, 표피 콜라겐 Col-4, 분비된 라바 산성 단백질 SLAPs, 키틴분해효소 CHI-1, 말토스 결합 단백질 MBP, 당분해 효소 과당-1,6-이인산 알돌라제(aldolase) Fba, 트로포미오신 TMY-1, 선충(nematode) 특이적 유전자 생산물 OvB20, 온코시스타틴 CPI-2, Cox-2 (필라리오이데(Filarioidea) 수퍼패밀리, 필라리아병(Filariasis)); 포스폴리파아제 C PLC, 열불안정 장독소 B, 이오타(Iota) 독소 성분 Ib, 단백질 CPE1281 , 피루브산염 페레독신 산화환원효소, 신장 인자 G EF-G, 퍼플린고라이신(perfringolysin) O Pfo, 글리세르알데하이드-3-인산염 탈수소효소 GapC, 과당-이인산 알돌라제 Alf2, 클로스트리듐 페르프린젠스(clostridium perfringens) 장독소 CPE, 알파 독소 AT, 알파 변성독소 ATd, 엡실론(epsilon)-변성독소 ETd, 단백질 HP, 라지 세포독소 TpeL, 내부-베타-N-아세틸글루코사미니다아제(acetylglucosaminidase) Naglu, 포스포글리세르산자리옮김효소(phosphoglyceromutase) Pgm (클로스트리듐 페프린젠스(Clostridium perfringens), 클로스트리듐 페프린젠스에 의한 식중독); 류코톡신(leukotoxin) lktA, 부착소 FadA, 외막 단백질 RadD, 고분자량 아르기닌-결합 단백질 (푸소박테리움 속(Fusobacterium genus), 푸소박테리움 감염); 포스폴리파아제 C PLC, 열불안정 장독소 B, 이오타 독소 성분 Ib, 단백질 CPE1281, 피루브산염 페레독신 산화환원효소, 신장 인자 G EF-G, 퍼플린고라이신 O Pfo, 글리세르알데하이드-3-인산염 탈수소효소 GapC, 과당-이인산 알돌라제 Alf2, 클로스트리듐 페프린젠스 장독소 CPE, 알파 독소 AT, 알파 변성독소 ATd, 엡실론-변성독소 ETd, 단백질 HP, 라지 세포독소 TpeL, 내부-베타-N- 아세틸글루코사미니다아제 Naglu, 포스포글리세르산자리옮김효소 Pgm (보통 클로스트리듐 페프린젠스; 다른 클로스트리듐 종, 가스 괴저(Gas gangrene) (클로스티리디아성 근괴저(Clostridial myonecrosis))); 리파제 A, 리파제 B, 과산화효소 Dec1 (지오트리쿰 캔디듐(Geotrichum candidum), 지오트리쿰증(Geotrichosis)); 프리온 단백질 (GSS 프리온, 게르스트만 슈트라우슬러 샤인커 증후군(Gerstmann-Straussler-Scheinker syndrome, GSS)); 낭포(cyst) 벽 단백질 CWP1, CWP2, CWP3, 변이체 표면 단백질 VSP, VSP1, VSP2, VSP3, VSP4, VSP5, VSP6, 56 kDa 항원, 피루브산염 페레독신 산화환원효소 PFOR, 알코올 탈수소효소 E ADHE, 알파-지아딘(giardin), 알파8-지아딘, 알파1-지아딘(guiardin), 베타-지아딘, 시스테인 프로테아제, 글루타치온-S-전이효소 GST, 아르기닌 디이미나제 ADI, 과당-1,6-이인산염(bisphosphat) 알돌라제 FBA, 편모충 영양체(Giardia trophozoite) 항원 GTA (GTA1, GTA2), 오르니틴 카르복실 전이효소 OCT, 가로무늬(striated) 섬유-조립(asseblin)-유사 단백질 SALP, 우리딘(uridine) 포스포릴-유사 단백질 UPL, 알파-튜불린, 베타-튜불린 (지알디아편모충(Giardia intestinalis), 편모충증(Giardiasis)); ABC 수송체 패밀리의 멤버 (LolC, OppA, 및 PotF), 추정 지질단백질 방출 시스템 트랜스막 단백질 LolC/E, 플라겔린 FliC, 부르크홀데리아 세포내 운동성 A BimA, 박테리아 신장 인자-Tu EF-Tu, 17 kDa OmpA-유사 단백질, boaA 코딩 단백질 (부르크홀데리아 말레이(Burkholderia mallei), 마비저(Glanders)); 시클로필린(cyclophilin) CyP, 24 kDa 제3단계 라바 단백질(third-stage larvae protien) GS24, 배설(excretion)-분비 생산물 ESPs (40, 80, 120 및 208 kDa) (유극악구충(Gnathostoma spinigerum) 및 강극악구충(Gnathostoma hispidum), 악구충증(Gnathostomiasis)); 필린 단백질, 마이너 필린-관련 서브유닛 pilC, 주요 필린 서브유닛 및 변이체 pilE, pilS, 상변이 단백질 porA, 포린 B PorB, 단백질 TraD, 네이세리알(Neisserial) 외막 항원 H.8, 70kDa 항원, 주요 외막 단백질 PI, 외막 단백질 PlA 및 PlB, W 항원, 표면 단백질 A NspA, 트랜스페린 결합 단백질 TbpA, 트랜스페린 결합 단백질 TbpB , PBP2, mtrR 코딩 단백질, ponA 코딩 단백질, 막 투과효소 FbpBC, FbpABC 단백질 시스템, LbpAB 단백질, 외막 단백질 Opa, 외막 수송체 FetA, 철-억제된 조절자 MpeR (임균(Neisseria gonorrhoeae), 임질(Gonorrhea)); 외막 단백질 A OmpA, 외막 단백질 C OmpC, 외막 단백질 K17 OmpK17 (클레프시엘라균(Klebsiella granulomatis), 서혜부 육아종(Granuloma inguinale) (도노바니아증(Donovanosis))); 피브로넥틴-결합 단백질 Sfb, 피브로넥틴/피브리노겐-결합 단백질 FBP54, 피브로넥틴-결합 단백질 FbaA, M 단백질 타입 1 Emm1, M 단백질 타입 6 Emm6, 면역글로불린-결합 단백질 35 Sib35, 표면 단백질 R28 Spr28, 과산화물 디스무타제 SOD, C5a 펩티드가수분해효소 ScpA, 항원 I/II AgI/II, 부착소 AspA, G-관련된 알파2-매크로글로불린-결합 단백질 GRAB, 표면 미소섬유(fibrillar) 단백질 M5 (스트렙토코커스 피오겐스(Streptococcus pyogenes), 세균성 인후염(Group A streptococcal infection)); C 단백질 β 항원, 아르기닌 디이미나제 단백질, 부착소 BibA, 105 kDA 단백질 BPS, 표면 항원 c, 표면 항원 R, 표면 항원 X, 트립신-내성 단백질 R1, 트립신-내성 단백질 R3, 트립신-내성 단백질 R4, 표면 면역성 단백질 Sip, 표면 단백질 Rib, 류신-풍부 반복 단백질 LrrG, 세린-풍부 반복 단백질 Srr-2, C 단백질 알파-항원 Bca, 베타 항원 Bag, 표면 항원 엡실론, 알파-유사 단백질 ALP1, 알파-유사 단백질 ALP5 표면 항원 델타, 알파-유사 단백질 ALP2, 알파-유사 단백질 ALP3, 알파-유사 단백질 ALP4, C베타 단백질 Bac (스트랩토코커스 아갈락티아(Streptococcus agalactiae), 그룹 B 스트렙토코커스 감염(Group B streptococcal infection)); 트랜스페린-결합 단백질 2 Tbp2, 인산가수분해효소 P4, 외막 단백질 P6, 펩티도글리칸-관련 지질단백질 Pal, 단백질 D, 단백질 E, 부착 및 관통 단백질 Hap, 외막 단백질 26 Omp26, 외막 단백질 P5 (핌브린(Fimbrin)), 외막 단백질 D15, 외막 단백질 OmpP2, 5'-뉴클레오티드분해효소(nucleotidase) NucA, 외막 단백질 P1, 외막 단백질 P2, 외막 지질단백질 Pcp, 지질단백질 E, 외막 단백질 P4, 푸쿨로키나제(fuculokinase) FucK, [Cu,Zn]-과산화물 디스무타제 SodC, 프로테아제 HtrA, 단백질 O145, 알파-갈락토실세라미드(galactosylceramide) (헤모필루스 인플루엔자(Haemophilus influenzae), 헤모필루스 인플루엔자 감염(Haemophilus influenzae infection)); 중합효소 3D, 바이러스성 캡시드 단백질 VP1, 바이러스성 캡시드 단백질 VP2, 바이러스성 캡시드 단백질 VP3, 바이러스성 캡시드 단백질 VP4, 프로테아제 2A, 프로테아제 3C (장내바이러스(Enteroviruses), 주로 콕사키(Coxsackie) A 바이러스 및 장내바이러스 71 (EV71), 수족구병(HFMD)); RNA 중합효소 L, 단백질 L, 당단백질 Gn, 당단백질 Gc, 뉴클레오캡시드 단백질 S, 외피 당단백질 G1, 핵단백질 NP, 단백질 N, 다단백질 M (신 놈브레 바이러스(Sin Nombre virus), 한타바이러스(Hantavirus), 한타바이러스 폐 증후군(Hantavirus Pulmonary Syndrome, HPS)); 열충격 단백질 HspA, 열충격 단백질 HspB, 구연산 합성효소 GltA, 단백질 UreB, 열충격 단백질 Hsp60, 호중성(neutrophil)-활성화 단백질 NAP, 과산화수소분해효소(catalase) KatA, 액포형성(vacuolating) 세포독소 VacA, 요소가수분해효소 알파 UreA, 요소가수분해효소 베타 Ureb, 단백질 Cpn10, 단백질 groES, 열충격 단백질 Hsp10, 단백질 MopB, 세포독성-관련 10 kDa 단백질 CAG, 36 kDa 항원, 베타-락타마제 HcpA, 베타-락타마제 HcpB (헬리코박터 파일로리(Helicobacter pylori), 헬리코박터 파일로리 감염); 내재(integral) 막 단백질, 응집하기 쉬운(aggregation-prone) 단백질, O-항원, 독소-항원 Stx2B, 독소-항원 Stx1B, 부착소-항원 절편 Int28, 단백질 EspA, 단백질 EspB, 인티민(Intimin), 단백질 Tir, 단백질 IntC300, 단백질 Eae (대장균 O157:H7, O111 및 O104:H4, 용혈성 요독성 증후군(Hemolytic-uremic syndrome, HUS)); RNA 중합효소 L, 단백질 L, 당단백질 Gn, 당단백질 Gc, 뉴클레오캡시드 단백질 S, 외피 당단백질 G1, 핵단백질 NP, 단백질 N, 다단백질 M (부니아바이러스(Bunyaviridae) 패밀리, 유행성 출혈열(Hemorrhagic fever with renal syndrome) (HFRS)); 당단백질 G, 기질 단백질 M, 핵단백질 N, 융합 단백질 F, 중합효소 L, 단백질 W, 단백질C, 인단백질 p, 비구조 단백질 V (헤니파바이러스(Henipavirus) (헨드라 바이러스(Hendra virus) 니파 바이러스(Nipah virus)), 헤니파바이러스 감염); 다단백질, 당단백질 Gp2, 간염 A 표면 항원 HBAg, 단백질 2A, 바이러스 단백질 VP1, 바이러스 단백질 VP2, 바이러스 단백질 VP3, 바이러스 단백질 VP4, 단백질 P1B, 단백질 P2A, 단백질 P3AB, 단백질 P3D (간염 A 바이러스, 간염 A); 간염 B 표면 항원 HBsAg, 간염 B 코어 항원 HbcAg, 중합효소, 단백질 Hbx, preS2 중간 표면 단백질, 표면 단백질 L, 라지 S 단백질, 바이러스 단백질 VP1, 바이러스 단백질 VP2, 바이러스 단백질 VP3, 바이러스 단백질 VP4 (간염 B 바이러스, 간염 B); 외피 당단백질 E1 gp32 gp35 , 외피 당단백질 E2 NS1 gp68 gp70, 캡시드 단백질 C , 코어 단백질 코어, 다단백질, 바이러스 단백질 VP1, 바이러스 단백질 VP2, 바이러스 단백질 VP3, 바이러스 단백질 VP4, 항원 G, 단백질 NS3, 단백질 NS5A, (간염 C 바이러스, 간염 C); 바이러스 단백질 VP1, 바이러스 단백질 VP2, 바이러스 단백질 VP3, 바이러스 단백질 VP4, 라지 간염(hepaptitis) 델타 항원, 스몰 간염(hepaptitis) 델타 항원 (간염 D 바이러스, 간염 D); 바이러스 단백질 VP1, 바이러스 단백질 VP2, 바이러스 단백질 VP3, 바이러스 단백질 VP4, 캡시드 단백질 E2 (간염 E 바이러스, 간염 E); 당단백질 L UL1, 우라실-DNA 글리코실화효소 UL2, 단백질 UL3, 단백질 UL4, DNA 복제 단백질 UL5, 포탈 단백질 UL6, 비리온 성숙 단백질 UL7, DNA 헬리카제 UL8, 복제 원점-결합 단백질 UL9, 당단백질 M UL10, 단백질 UL11, 알칼리성 핵산말단가수분해효소 UL12, 세린-트레오닌 단백질 인산화효소 UL13, 외피 단백질 UL14, 터미네이즈(terminase) UL15, 외피 단백질 UL16, 단백질 UL17, 캡시드 단백질 VP23 UL18, 주요 캡시드 단백질 VP5 UL19, 막 단백질 UL20, 외피 단백질 UL21, 당단백질 H (UL22), 티미딘 인산화효소 UL23, 단백질 UL24, 단백질 UL25, 캡시드 단백질 P40 (UL26, VP24, VP22A),g당단백질 B (UL27), ICP18.5 단백질 (UL28), 주요 DNA-결합 단백질 ICP8 (UL29), DNA 중합효소 UL30, 핵 기질 단백질 UL31, 외피 당단백질 UL32, 단백질 UL33, 내핵 막 단백질 UL34, 캡시드 단백질 VP26 (UL35), 라지 외피 단백질 UL36, 캡시드 조립 단백질 UL37, VP19C 단백질 (UL38), 리보뉴클레오티드 환원효소 (라지 서브유닛) UL39, 리보뉴클레오티드 환원효소 (스몰 서브유닛) UL40, 외피 단백질/비리온 숙주 차단 VHS 단백질 (UL41), DNA 중합효소 과정 인자 UL42, 막 단백질 UL43, 당단백질 C (UL44), 막 단백질 UL45, 외피 단백질 VP11/12 (UL46), 외피 단백질 VP13/14 (UL47), 비리온 성숙 단백질 VP16 (UL48, 알파-TIF), 외피 단백질 UL49, dUTP 디포스파타제 UL50, 외피 단백질 UL51, DNA 헬리카제/프리마제(primase) 복합체 단백질 UL52, 당단백질 K (UL53), 전사 조절 단백질 IE63 (ICP27, UL54), 단백질 UL55, 단백질 UL56, 바이러스성 복제 단백질 ICP22 (IE68, US1), 단백질 US2, 세린/트레오닌-단백질 인산화효소 US3, 당단백질 G (US4),g당단백질 J (US5), 당단백질 D (US6),당단백질 I (US7), 당단백질 E (US8), 외피 단백질 US9, 캡시드/외피 단백질 US10, Vmw21 단백질 (US11), ICP47 단백질 (IE12, US12), 주요 전사 활성제 ICP4 (IE175, RS1), E3 유비퀴틴 연결효소 ICP0 (IE110), 잠재-관련된 단백질 1 LRP1, 잠재(latency)-관련된 단백질 2 LRP2, 신경병원성 인자 RL1 (ICP34.5), 잠재-관련 전사체 LAT (헤르페스 심플렉스 바이러스 1 및 2 (HSV-1 및 HSV-2), 단순 포진(Herpes simplex)); 열충격 단백질 Hsp60, 세포 표면 단백질 H1C, 디펩티딜 펩티드가수분해효소 타입 IV DppIV, M 항원, 70 kDa 단백질, 17 kDa 히스톤-유사 단백질 (히스토플라스마 캡슐라툼(Histoplasma capsulatum), 히스토플라스마증(Histoplasmosis)); 지방산 및 레티놀 결합 단백질-1 FAR-1, 조직 억제자 of 메탈로단백질분해효소 TIMP (TMP), 시스테인 단백질분해효소 ACEY-1, 시스테인 단백질분해효소 ACCP-1, 표면 항원 Ac-16, 분비된 단백질 2 ASP-2, 메탈로프로테아제 1 MTP-1, 아스파틸 프로테아제 억제자 API-1, 표면-관련 항원 SAA-1, 표면-관련 항원 SAA-2, 성인-특이적 분비된 인자 Xa, 세린 프로테아제 억제자 항응고제 AP, 카뎁신 D-유사 아스파틱 프로테아제 ARR-1, 글루타치온 S-전이효소 GST, 아스파틱 프로테아제 APR-1, 아세틸콜린에스테라제(acetylcholinesterase) AChE (십이지장충(Ancylostoma duodenale) 및 아메리카구충(Necator americanus), 십이지장충 감염(Hookworm infection)); 단백질 NS1, 단백질 NP1, 단백질 VP1, 단백질 VP2, 단백질 VP3 (인간 보카바이러스(Human bocavirus) (HBoV), 인간 보카바이러스 감염); 주요 표면 단백질 2 MSP2, 주요 표면 단백질 4 MSP4, MSP 변이체 SGV1, MSP 변이체 SGV2, 외막 단백질 OMP, 외부 막(membrande) 단백질 19 OMP-19, 주요 항원 단백질 MAP1, 주요 항원 단백질 MAP1-2, 주요 항원 단백질 MAP1B, 주요 항원 단백질 MAP1-3, Erum2510 코딩 단백질, 단백질 GroEL, 단백질 GroES, 30-kDA 주요 외막 단백질, GE 100-kDa 단백질, GE 130-kDa 단백질, GE 160-kDa 단백질 (엘리키아 에인지(Ehrlichia ewingii), 인간 에인지 엘리히증(Human ewingii ehrlichiosis)); 주요 표면 단백질 1-5 (MSP1a, MSP1b, MSP2, MSP3, MSP4, MSP5), 타입 IV 분비(secreotion) 시스템 단백질 VirB2, VirB7, VirB11, VirD4 (아나플라즈마 파고사이토필리움(Anaplasma phagocytophilum), 인간 백혈구 아나플라즈마병(Human granulocytic anaplasmosis) (HGA)); 단백질 NS1, 스몰 소수성 단백질 NS2, SH 단백질, 융합 단백질 F, 당단백질 G, 기질 단백질 M, 기질 단백질 M2-1, 기질 단백질 M2-2, 인단백질 P, 핵단백질 N, 중합효소 L (Human metapneumovirus (hMPV), Human metapneumovirus infection); 주요 표면 단백질 2 MSP2, 주요 표면 단백질 4 MSP4, MSP 변이체 SGV1, MSP 변이체 SGV2, 외막 단백질 OMP, 외부 막(membrande) 단백질 19 OMP-19, 주요 항원 단백질 MAP1, 주요 항원 단백질 MAP1-2, 주요 항원 단백질 MAP1B, 주요 항원 단백질 MAP1-3, Erum2510 코딩 단백질, 단백질 GroEL, 단백질 GroES, 30-kDA 주요 외막 단백질, GE 100-kDa 단백질, GE 130-kDa 단백질, GE 160-kDa 단백질 (엘리키아 샤펜시스(Ehrlichia chaffeensis), 인간 단구 엘리히증(Human monocytic ehrlichiosis)); 복제 단백질 E1, 조절 단백질 E2, 단백질 E3, 단백질 E4, 단백질 E5, 단백질 E6, 단백질 E7, 단백질 E8, 주요 캡시드 단백질 L1, 마이너 캡시드 단백질 L2 (인간 파필로마바이러스(Human papillomavirus) (HPV), 인간 파필로마바이러스 (HPV) 감염); 융합 단백질 F, 헤마글루티닌-뉴라민산가수분해효소(neuramidase) HN, 당단백질 G, 기질 단백질 M, 인단백질 P, 핵단백질 N, 중합효소 L (인간 파라인플루엔자 바이러스(Human parainfluenza viruses) (HPIV), 인간 파라인플루엔자 바이러스 감염); "헤미글루티닌 HA, 뉴라민산가수분해효소 NA, 핵단백질 NP, 기질 단백질 M1, 기질 단백질 M2, 단백질 NS1, 중합효소 복합체 PA, PB1, PB2, 핵 배출 단백질 NEP; ; " (오르소믹소바이러스(Orthomyxoviridae) 패밀리, 인플루엔자 (감기)); 유전체 다단백질, 단백질 E, 단백질 M, 캡시드 단백질 C (일본 뇌염 바이러스(Japanese encephalitis virus), 일본 뇌염); RTX 독소, 타입 IV 필리, 주요 필러스 서브유닛 PilA, 조절 전사 인자들 PilS 및 PilR, 단백질 시그마54, 외막 단백질 (칸젤라 킨가에(Kingella kingae), 칸젤라 킨가에 감염); 프리온 단백질 (쿠루 프리온(Kuru prion), 쿠루병(Kuru)); 핵단백질 N, 중합효소 L, 기질 단백질 Z, 당단백질 GP (라사 바이러스(Lassa virus), 라사열); 펩티도글리칸-관련 지질단백질 PAL, 60 kDa 샤페로닌 Cpn60 (groEL, HspB), 타입 IV 필린 PilE, 외막 단백질 MIP, 주요 외막 단백질 MompS, 아연 메탈로단백질분해효소 MSP (레지오넬라 뉴모넬라(Legionella pneumophila), 레지오넬라증 (레지오넬라 병(Legionnaires' disease, Pontiac fever))); P4 핵산가수분해효소, 단백질 WD, 리보뉴클레오티드 환원효소 M2, 표면 막 당단백질 Pg46, 시스테인 단백질분해효소 CP, 글루코스-조절 단백질 78 GRP-78, 단계-특이적 S 항원-유사 단백질 A2, ATP가수분해효소 F1, 베타-튜불린, 열충격 단백질 70 Hsp70, KMP-11, 당단백질 GP63, 단백질 BT1, 뉴클레오시드 가수분해효소 NH, 세포 표면 단백질 B1, 리보솜 단백질 P1-유사 단백질 P1, 스테롤 24-c-메틸전이효소 SMT, LACK 단백질, 히스톤 H1, SPB1 단백질, 티올 특이적 항산화제 TSA, 단백질 항원 STl1, 신호 펩티드가수분해효소 SP, 히스톤 H2B, 표면 항원 PSA-2, 시스테인 단백질분해효소 b Cpb (리슈마니아 속(Leishmania genus), 리슈마니아증(Leishmaniasis)); 주요 막 단백질 I, 세린-풍부 항원- 45 kDa, 10 kDa 샤페로닌(caperonin) GroES, HSP kDa 항원, 아미노-옥소노나노에이트(amino-oxononanoate) 합성효소 AONS, 단백질 재조합효소 A RecA, 아세틸-/프로피오닐-co효소 A 카르복시화효소 알파, 알라닌 라세미화효소, 60 kDa 샤페로닌 2, ESAT-6-유사 단백질 EcxB (L-ESAT-6), 단백질 Lsr2, 단백질 ML0276, 헤파린-결합 헤마글루티닌 HBHA, 열충격 단백질 65 Hsp65, mycP1 또는 ML0041 코딩 단백질 , htrA2 또는 ML0176 코딩 단백질 , htrA4 또는 ML2659 코딩 단백질, gcp 또는 ML0379 코딩 단백질, clpC 또는 ML0235 코딩 단백질 (마이코박테리움 레프레(Mycobacterium leprae) 및 마이코박테리움 레프로마토시스(Mycobacterium lepromatosis), 나병(Leprosy)); 외막 단백질 LipL32, 막 단백질 LIC10258, 막 단백질 LP30, 막 단백질 LIC12238, Ompa-유사 단백질 Lsa66, 표면 단백질 LigA, 표면 단백질 LigB, 주요 외막 단백질 OmpL1, 외막 단백질 LipL41, 단백질 LigAni, 표면 단백질 LcpA, 부착소 단백질 LipL53, 외막 단백질 UpL32, 표면 단백질 Lsa63, 플라겔린 FlaB1, 막(membran) 지질단백질 LipL21, 막 단백질 pL40, 렙토스피라균(leptospiral) 표면 부착소 Lsa27, 외막 단백질 OmpL36, 외막 단백질 OmpL37, 외막 단백질 OmpL47, 외막 단백질 OmpL54, 아실전이효소 LpxA (렙토스피라 속(Leptospira genus), 렙토스피라증(Leptospirosis)); 리스테리오리신(listeriolysin) O 전구체 Hly (LLO), 탈수소효소-관련 단백질 Iap (P60), 리스테리오리신 조절 단백질 PrfA, 아연 메탈로단백질분해효소 Mpl, 포스파티딜이노시틀(Phosphatidylinositol)- 특이적 포스폴리파아제 C PLC (PlcA, PlcB), O-아세틸전이효소 Oat, ABC-수송체 투과효소 Im.G_1771, 부착소 단백질 LAP, LAP 수용체 Hsp60, 부착소 LapB, 용혈소 리스테리오리신 O LLO, 단백질 ActA, 인터날린(Internalin) A InlA, 단백질 lnlB (리스테리아 모노사이토제니스(Listeria monocytogenes), 선회병(Listeriosis)); 외부 표면 단백질 A OspA, 외부 표면 단백질 OspB, 외부 표면 단백질 OspC, 데코린 결합 단백질 A DbpA, 데코린 결합 단백질 B DbpB, 편모 필라멘트 41 kDa 코어 단백질 Fla, 염기성 막 단백질 A BmpA (면역 우성 항원 P39), 외부 표면 22 kDa 지질단백질 전구체 (항원 IPLA7), 가변성 표면 지질단백질 vlsE (보통 보렐리아 부르그도르페리(Borrelia burgdorferi) 및 다른 보렐리아 종, 라임병 (라임 보렐리아(Lyme borreliosis))); 베놈 알레르겐 동족체-유사 단백질 VAL-1, 풍부한 라바 전사체 ALT-1, 풍부한 라바 전사체 ALT-2, 티오레독신 과산화효소 TPX, 말벌 알레르겐 동족체 VAH, 티오레독신(thiordoxin) 과산화효소 2 TPX-2, 항원 단백질 SXP (펩타이드 N, N1, N2, 및 N3), 활성화 관련 단백질-1 ASP-1, 티오레독신 TRX, 트랜스글루타미나제 BmTGA, 글루타치온-S-이성질화효소 GST, 미오신, 말벌 알레르겐 동족체 VAH, 175 kDa 콜라겐분해효소, 글리세르알데하이드-3-인산염 탈수소효소 GAPDH, 표피 콜라겐 Col-4, 분비된 라바 산성 단백질 SLAPs, 키틴분해효소 CHI-1, 말토스 결합 단백질 MBP, 당분해 효소 과당-1,6-이인산 알돌라제 Fba, 트로포미오신 TMY-1, 선충 특이적 유전자 생산물 OvB20, 온코시스타틴 CPI-2, 단백질 Cox-2 (반크로프트사상충(Wuchereria bancrofti) 및 말레이사상충(Brugia malayi), 림프액 필라리아병(Lymphatic filariasis) (상피병(Elephantiasis))); 당단백질 GP, 기질 단백질 Z, 중합효소 L, 핵단백질 N (림프구성 맥락수막염바이러스(Lymphocytic choriomeningitis virus) (LCMV), 림프구성 맥락수막염); 트롬보스폰딘(thrombospondin)-관련 이상 단백질 TRAP, SSP2 종충(Sporozoite) 표면 단백질 2, 정단 막 항원 1 AMA1, 롭트리(rhoptry) 막 항원 RMA1, 산성 염기성 반복 항원 ABRA, 세포-횡단 단백질 PF, 단백질 Pvs25, 낭충 표면 단백질 1 MSP-1, 낭충 표면 단백질 2 MSP-2, 링-감염된 적혈구 표면 항원 RESALiver 단계 항원 3 LSA-3, 단백질 Eba-175, 세린 반복 항원 5 SERA-5, 포자소체(circumsporozoite) 단백질 CS, 낭충 표면 단백질 3 MSP3, 낭충 표면 단백질 8 MSP8, 에놀라제 PF10, hepatocyte 적혈구 단백질 17 kDa HEP17, 적혈구 막 단백질 1 EMP1, 단백질 Kbeta낭충 표면 단백질 4/5 MSP 4/5열충격 단백질 Hsp90, 글루탐산-풍부 단백질 GLURP, 낭충 표면 단백질 4 MSP-4, 단백질 STARP, circumsporozoite 단백질-관련된 항원 전구체 CRA (Plasmodium genus, Malaria); 핵단백질 N, 막-관련 단백질 VP24, 마이너 핵단백질 VP30, 중합효소 공동 인자 VP35, 중합효소 L, 기질 단백질 VP40, 외피 당단백질 GP (Marburg virus, Marburg hemorrhagic fever (MHF)); 단백질 C, 기질 단백질 M, 인단백질 P, 비구조 단백질 V, 헤마글루티닌 당단백질 H, 중합효소 L, 핵단백질 N, 융합 단백질 F (Measles virus, Measles); 멤버 of the ABC 수송체 패밀리 (LolC, OppA, 및 PotF), 추정 지질단백질 방출 시스템 트랜스막 단백질 LolC/E, 플라겔린 FliC, 부르크홀데리아 세포내 운동성 A BimA, 박테리아 신장 인자-Tu EF-Tu, 17 kDa OmpA-유사 단백질, boaA 코딩 단백질, boaB 코딩 단백질 (Burkholderia pseudomallei, Melioidosis (Whitmore's disease)); 필린 단백질, 마이너 필린-관련 서브유닛 pilC, 주요 필린 서브유닛 및 변이체 pilE, pilS, phase variation 단백질 porA, 포린 B PorB, 단백질 TraD, 네이세리알 외막 항원 H.8, 70kDa 항원, 주요 외막 단백질 PI, 외막 단백질 PlA 및 PlB, W 항원, 표면 단백질 A NspA, 트랜스페린 결합 단백질 TbpA, 트랜스페린 결합 단백질 TbpB , PBP2, mtrR 코딩 단백질, ponA 코딩 단백질, 막 투과효소 FbpBC, FbpABC 단백질 시스템, LbpAB 단백질, 외막 단백질 Opa, 외막 수송체 FetA, 철-억제된 조절자 MpeR, 인자 H-결합 단백질 fHbp, 부착소 NadA, 단백질 NhbA, 억제자 FarR (수막염균(Neisseria meningitidis), 수막염균병); 66 kDa 단백질, 22 kDa 단백질 (종종 메타고니무스 요카가와이(Metagonimus yokagawai), 메타고니미아시스(Metagonimiasis)); 극성 관 단백질 (글루기아증에서 34, 75, 및 170 kDa, 35, 55 및 장내 미포자충(Encephalitozoon)에서 150kDa), 키네신-관련된 단백질, RNA 중합효소 II 라지스트(largest) 서브유닛, 내재 막 단백질에 유사 YIPA, 미발현 방지(anti-silencing) 단백질 1, 열충격 전사 인자 HSF, 단백질 인산화효소, 티미딘 인산화효소, NOP-2 유사 핵인(nucleolar) 단백질 (마이크로스포리디아 필룸(Microsporidia phylum), 미포자충증(Microsporidiosis)); CASP8 및 FADD-유사 세포사멸 조절자, 글루타치온 과산화효소 GPX1, RNA 헬리카제 NPH-II NPH2, 폴리(A) 중합효소 촉매의 서브유닛 PAPL, 주요 외피 단백질 P43K, 초기 전사 인자 70 kDa 서브유닛 VETFS, 초기 전사 인자 82 kDa 서브유닛 VETFL, 메탈로엔도펩티다제(metalloendopeptidase) G1-타입, 뉴클레오시드 삼인산(triphosphatase) I NPH1, 복제 단백질 A28-유사 MC134L, RNA 중합효소 7 kDa 서브유닛 RPO7 (몰루스쿰 콘타지오숨 바이러스(Molluscum contagiosum virus) (MCV), 전염성 연속종(Molluscum contagiosum) (MC)); 기질 단백질 M, 인단백질 P/V, 스몰 소수성 단백질 SH, 핵단백질 N, 단백질 V, 융합 당단백질 F, 헤마글루티닌-뉴라민산가수분해효소 HN, RNA 중합효소 L (멈프 바이러스(Mumps virus), 유행성 이하선염); 외막 단백질 OM, 세포 표면 항원 OmpA, 세포 표면 항원 OmpB (sca5), 세포 표면 단백질 SCA4, 세포 표면 단백질 SCA1, 세포질내 단백질 D, 크리스탈린(crystalline) 표면 층 단백질 SLP, 방어 표면 단백질 항원 SPA (리케치아 티피(Rickettsia typhi), 발진열(Murine typhus, Endemic typhus)); 부착소 P1, 부착소 P30, 단백질 p116, 단백질 P40, 세포골격 단백질 HMW1, 세포골격 단백질 HMW2, 세포골격 단백질 HMW3, MPN152 코딩 단백질, MPN426 코딩 단백질, MPN456 코딩 단백질, MPN-500코딩 단백질 (폐렴 마이코플라스마(Mycoplasma pneumoniae), 마이코플라스마 폐렴(Mycoplasma pneumonia)); NocA, 철 의존 조절 단백질, VapA, VapD, VapF, VapG, 난포액(caseinolytic) 프로테아제, 필라멘트 tip-관련 43-kDa 단백질, 단백질 P24, 단백질 P61, 15-kDa 단백질, 56-kDa 단백질 (보통 노카디아 아스테로이드(Nocardia asteroides) 및 다른 노카디아 종, 노카디아증(Nocardiosis); 베놈 알레르겐 동족체-유사 단백질 VAL-1, 풍부한 라바 전사체 ALT-1, 풍부한 라바 전사체 ALT-2, 티오레독신 과산화효소 TPX, 말벌 알레르겐 동족체 VAH, 티오레독신(thiordoxin) 과산화효소 2 TPX-2, 항원 단백질 SXP (펩타이드 N, N1, N2, 및 N3), 활성화 관련 단백질-1 ASP-1, 티오레독신 TRX, 트랜스글루타미나제 BmTGA, 글루타치온-S-이성질화효소 GST, 미오신, 말벌 알레르겐 동족체 VAH, 175 kDa 콜라겐분해효소, 글리세르알데하이드-3-인산염 탈수소효소 GAPDH, 표피 콜라겐 Col-4, 분비된 라바 산성 단백질 SLAPs, 키틴분해효소 CHI-1, 말토스 결합 단백질 MBP, 당분해 효소 과당-1,6-이인산 알돌라제 Fba, 트로포미오신 TMY-1, 선충 특이적 유전자 생산물 OvB20, 온코시스타틴 CPI-2, Cox-2 (회선사상충(Onchocerca volvulus), 사상충증(Onchocerciasis, River blindness)); 43 kDa 분비된 당단백질, 당단백질 gp0, 당단백질 gp75, 항원 Pb27, 항원 Pb40, 열충격 단백질 Hsp65, 열충격 단백질 Hsp70, 열충격 단백질 Hsp90, 단백질 P10, 삼탄당 인산염 이성질화효소 TPI, N-아세틸-글루코사민-결합 렉틴 파라코크신(Paracoccin), 28 kDa 단백질 Pb28 (브라질 파라콕시디오이디즈(Paracoccidioides brasiliensis), 파라콕시디오이드진균증(Paracoccidioidomycosis) (남아메리카분아균증(South American blastomycosis))); 28-kDa 크루지페인(cruzipain)-유사 시스테인 프로테아제 Pw28CCP (보통 파라고니무스 웨스터마니(Paragonimus westermani) 및 다른 파라고니무스 종, 폐흡충증(Paragonimiasis)); 외막 단백질 OmpH, 외막 단백질 Omp28, 단백질 PM1539, 단백질 PM0355, 단백질 PM1417, 복구 단백질 MutL, 단백질 BcbC, 단백질 PM0305, 포름산염 탈수소효소-N, 단백질 PM0698, 단백질 PM1422, DNA 자이레이즈(gyrase), 지질단백질 PlpE, 부착 단백질 Cp39, 헴 습득(aquisition) 시스템 수용체 HasR, 39 kDa 캡슐(capsular) 단백질, 철-조절 OMP IROMP, 외막 단백질 OmpA87, 가장자리(fimbrial) 단백질 Ptf, 가장자리 서브유닛 단백질 PtfA, 트랜스페린 결합 단백질 Tbpl, 에스테라제 효소 MesA, 파스튜렐라 멀토시다(Pasteurella multocida) 독소 PMT, 부착 단백질 Cp39 (파스튜렐라 속(Pasteurella genus), 파스튜렐라증(Pasteurellosis)); "사상(filamentous) 헤마글루티닌 FhaB, 아데닐 시클라제(adenylate cyclase) CyaA, 백일해(pertussis) 독소 서브유닛 4 전구체 PtxD, 퍼택틴(pertactin) 전구체 Prn, 독소 서브유닛 1 PtxA, 단백질 Cpn60, 단백질 brkA, 백일해 독소 서브유닛 2 전구체 PtxB, 백일해 독소 서브유닛 3 전구체 PtxC, 백일해 독소 서브유닛 5 전구체 PtxE, 퍼택틴 Prn, 단백질 Fim2, 단백질 Fim3; " (백일해균(Bordetella pertussis), 백일해(Pertussis) (Whooping cough)); "F1 캡슐 항원, 독성-관련 V 항원, 분비된 주효 단백질 LcrV, V 항원, 외막 프로테아제 Pla,분비된 주효 단백질 YopD, 추정 분비된 단백질-티로신인산가수분해효소 YopH, 니들(needle 복합체 주요 서브유닛 YscF, 단백질 인산화효소 YopO, 추정 오토트랜스포터 단백질 YapF, 내 막 ABC-수송체 YbtQ (Irp7), 추정 당 결합 단백질 YPO0612, 열충격 단백질 90 HtpG, 추정 설파타제 단백질 YdeN, 외막 지질단백질 수송 단백질 LolA, 분비 샤페론 YerA, 추정 지질단백질 YPO0420, 용혈소 활성제 단백질 HpmB, 페스티신(pesticin)/예르시니아박틴(yersiniabactin) 외막 수용체 Psn, 분비된 주효 단백질 YopE, 분비된 주효 단백질 YopF, 분비된 주효 단백질 YopK, 외막 단백질 YopN , 외막 단백질 YopM, 응고효소(Coagulase)/피부리놀리신(fibrinolysin) 전구체 Pla ; " (페스트균(Yersinia pestis), 페스트(Plague)); 단백질 PhpA, 표면 부착소 PsaA, 폐렴구균용혈소(pneumolysin) Ply, ATP-의존 프로테아제 Clp, 리포에이트(lipoate)-단백질 연결효소 LplA, 세포 벽 표면 정착 단백질 psrP, 소타아제 SrtA, 글루타밀-tRNA 합성효소 GltX, 콜린 결합 단백질 A CbpA, 폐렴구균의(pneumococcal) 표면 단백질 A PspA, 폐렴구균의 표면 단백질 C PspC, 6-포스포글루콘산(phosphogluconate) 탈수소효소 Gnd, 철-결합 단백질 PiaA, 무레인(Murein) 가수분해효소 LytB, 프로테온(proteon) LytC, 프로테아제 A1 (폐렴연쇄구균(Streptococcus pneumoniae), 폐렴 감염); 주요 표면 단백질 B, 케신-유사 프로테아제 KEX1, 단백질 A12, 55 kDa 항원 P55, 주요 표면 당단백질 Msg (뉴모시스티스 지로베시(Pneumocystis jirovecii), 뉴모시스티스성 폐렴(Pneumocystis pneumonia) (PCP)); 유전체 다단백질, 중합효소 3D, 바이러스성 캡시드 단백질 VP1, 바이러스성 캡시드 단백질 VP2, 바이러스성 캡시드 단백질 VP3, 바이러스성 캡시드 단백질 VP4, 프로테아제 2A, 프로테아제 3C (폴리오바이러스(Poliovirus), 회백수염(Poliomyelitis)); 단백질 Nfa1, 엑센딘(exendin)-3, 분비성 리파제, 카뎁신 B-유사 프로테아제, 시스테인 프로테아제, 카뎁신, 퍼옥시리독신(peroxiredoxin), 단백질 Cry1Ac (보통 파울러 자유아메바(Naegleria fowleri), 원발성 아메바성 수막뇌염(Primary amoebic meningoencephalitis) (PAM)); 아그노단백질(agnoprotein), 라지 T 항원, 스몰 T 항원, 주요 캡시드 단백질 VP1, 마이너 캡시드 단백질 Vp2 (JC 바이러스, 진행성다병소성백질뇌증(Progressive multifocal leukoencephalopathy)); 저 칼슘 반응 단백질 E LCrE, 클라미디아 외부 단백질 N CopN, 세린/트레오닌-단백질 인산화효소 PknD, 아실-수송-단백질 S-말로닐전이효소 FabD, 단일 가닥 DNA-결합 단백질 Ssb, 주요 외막 단백질 MOMP, 외막 단백질 2 Omp2, 다형성 막 단백질 패밀리 (Pmp1, Pmp2, Pmp3, Pmp4, Pmp5, Pmp6, Pmp7, Pmp8, Pmp9, Pmp10, Pmp11, Pmp12, Pmp13, Pmp14, Pmp15, Pmp16, Pmp17, Pmp18, Pmp19, Pmp20, Pmp21) (클라미도필라 프시타시(Chlamydophila psittaci), 앵무새병(Psittacosis)); 외막 단백질 P1, 열충격 단백질 B HspB, 펩타이드 ABC 수송체, GTP-결합 단백질, 단백질 IcmB, 리보핵산가수분해효소 R, 인산가수분해효소(phosphatas) SixA, 단백질 DsbD, 외막 단백질 TolC, DNA-결합 단백질 PhoB, ATP가수분해효소 DotB, 열충격 단백질 B HspB, 막 단백질 Com1, 28 kDa 단백질, DNA-3-메틸아데닌 글리코시다제 I(DNA-3-methyladenine glycosidase I), p외막 단백질 OmpH, 외막 단백질 AdaA, 글리신 분할 시스템 T-단백질 (콕시엘라 부르네티(Coxiella burnetii), Q 열병(Q fever)); 핵단백질 N, 라지 구조 단백질 L, 인단백질(phophoprotein) P, 기질 단백질 M, 당단백질 G (라비 바이러스(Rabies virus), 광견병(Rabies)); 융합단백질 F, 핵단백질 N, 기질 단백질 M, 기질 단백질 M2-1, 기질 단백질 M2-2, 인단백질 P, 스몰 소수성 단백질 SH, 주요 표면 당단백질 G, 중합효소 L, 비구조 단백질 1 NS1, 비구조 단백질 2 NS2 (호흡기 합포체 바이러스(Respiratory syncytial virus) (RSV), 호흡기 합포체 바이러스 감염); 유전체 다단백질, 중합효소 3D, 바이러스성 캡시드 단백질 VP1, 바이러스성 캡시드 단백질 VP2, 바이러스성 캡시드 단백질 VP3, 바이러스성 캡시드 단백질 VP4, 프로테아제 2A, 프로테아제 3C (리노바이러스, 리노바이러스 감염); 외막 단백질 OM, 세포 표면 항원 OmpA, 세포 표면 항원 OmpB (sca5), 세포 표면 단백질 SCA4, 세포 표면 단백질 SCA1, 단백질 PS120, 세포질내 단백질 D, 방어 표면 단백질 항원 SPA (리케치아 속(Rickettsia genus), 리케치아 감염(Rickettsial infection)); 외막 단백질 OM, 세포 표면 항원 OmpA, 세포 표면 항원 OmpB (sca5), 세포 표면 단백질 SCA4, 세포 표면 단백질 SCA1, 세포질내 단백질 D (리케치아 아카리(Rickettsia 맘갸), 리케치아두창(Rickettsialpox)); 외피 당단백질 GP, 중합효소 L, 핵단백질 N, 비구조 단백질 NSS (리프트밸리열 바이러스 (Rift Valley fever virus), 리프트밸리열 (RVF)); 외막 단백질 OM, 세포 표면 항원 OmpA, 세포 표면 항원 OmpB (sca5), 세포 표면 단백질 SCA4, 세포 표면 단백질 SCA1, 세포질내 단백질 D (리케치아 리켓시(Rickettsia rickettsii), 로키산 홍반열(Rocky mountain spotted fever) (RMSF)); "비구조 단백질 6 NS6, 비구조 단백질 2 NS2, 중간(intermediate) 캡시드 단백질 VP6, 내 캡시드 단백질 VP2, 비구조 단백질 3 NS3, RNA-지시(directed) RNA 중합효소 L, 단백질 VP3, 비구조 단백질 1 NS1, 비구조 단백질 5 NS5, 외부 캡시드 당단백질 VP7, 비구조 당단백질 4 NS4, 외부 캡시드 단백질 VP4; ; " (로타바이러스(Rotavirus), 로타바이러스 감염); 다단백질 P200, 당단백질 E1, 당단백질 E2, 단백질 NS2, 캡시드 단백질 C (루벨라 바이러스(Rubella virus), 루벨라증(Rubella)); 샤페로닌 GroEL (MopA), 이노시톨(inositol) 인산염 인산가수분해효소 SopB, 열충격 단백질 HslU, 샤페론 단백질 DnaJ, 단백질 TviB, 단백질 철, 플라겔린 FliC, 탈수소효소 단백질 SipC, 당단백질 gp43, 외막 단백질 LamB, 외막 단백질 PagC, 외막 단백질 TolC, 외막 단백질 NmpC, 외막 단백질 FadL, 수송 단백질 SadA, 전이효소 WgaP, 주효 단백질 SifA, SteC, SseL, SseJ 및 SseF (살모넬라 속(Salmonella genus), 살모넬라증(Salmonellosis)); "단백질 14, 비구조 단백질 NS7b, 비구조 단백질 NS8a, 단백질 9b, 단백질 3a, 핵단백질 N, 비구조 단백질 NS3b, 비구조 단백질 NS6, 단백질 7a, 비구조 단백질 NS8b, 막 단백질 M, 외피 스몰 막 단백질 EsM, 복제효소 다단백질 1a, 스파이크(spike) 당단백질 S, 복제효소 다단백질 1ab ; " (SARS 코로나바이러스(SARS coronavirus), SARS (중증급성호흡기증후군(Severe Acute Respiratory Syndrome))); 세린 프로테아제, 이형 천공개선충(Atypical Sarcoptes) 항원 1 ASA1, 글루타치온 S-이성질화효소 GST, 시스테인 프로테아제, 세린 프로테아제, 아포지질단백질 (개선충(Sarcoptes scabiei), 옴(Scabies)); 글루타치온 S-이성질화효소 GST, 파라미오신, 헤모글로비나제(hemoglbinase) SM32, 주요 에그(egg) 항원, 14 kDa 지방산-결합 단백질 Sm14, 주요 라바 표면 항원 P37, 22,6 kDa 표피 항원, 칼페인(calpain) CANP, 삼인산(triphospate) 이성질화효소 Tim, 표면 단백질 9B, 외부 캡시드 단백질 VP2, 23 kDa 내재 막 단백질 Sm23, Cu/Zn-과산화물 디스무타제, 당단백질 Gp, 미오신 (주혈흡충 속(Schistosoma genus), 주혈흡충병(Schistosomiasis) (빌하르쯔주혈흡충증(Bilharziosis))); 60 kDa 샤페로닌, 56 kDa 타입-특이적 항원, 피루브산염 인산염 다이키나아제, 4-하이드록시벤조산 옥타프레닐 전이효소 (오리엔티아 쯔즈가무시(Orientia tsutsugamushi), 털진드기병(Scrub typhus)); 탈수소효소 GuaB, 탈수소효소 단백질 Spa32, 인베신(invasin) IpaA, 인베신 IpaB, 인베신 IpaC, 인베신 IpaD, 인베신 IpaH, 인베신 IpaJ (시겔라 속(Shigella genus), 적리(Shigellosis) (세균성 이질(Bacillary dysentery))); 단백질 P53, 비리온 단백질 US10 동족체, 전사 조절자 IE63, 전사 전사활성제 IE62, 프로테아제 P33, 알파 트랜스 유도인자 74 kDa 단백질, 디옥시우리딘 5'-삼인산염 핵산가수분해효소, 전사 전사활성제 IE4, 막 단백질 UL43 동족체, 핵 인단백질 UL3 동족체, 핵 단백질 UL4 동족체, 복제 원점-결합 단백질, 막 단백질 2, 인단백질 32, 단백질 57,DNA 중합효소 과정 인자, 포탈 단백질 54, DNA 프리마제, 외피 단백질 UL14 동족체, 외피 단백질 UL21 동족체, 외피 단백질 UL55 동족체, 삼부 터미나제(tripartite terminase) 서브유닛 UL33 동족체, 삼부 터미나제 서브유닛 UL15 동족체, 캡시드-결합 단백질 44, 비리온-포장(packaging) 단백질 43 (수두 대상 포진 바이러스(Varicella zoster virus) (VZV), 대상 포진(Shingles, Herpes zoster)); 절단된 3-베타 하이드록시-5-엔 스테로이드 탈수소효소 동족체, 비리온 막 단백질 A13, 단백질 A19, 단백질 A31, 절단된 단백질 A35 동족체, 단백질 A37.5 동족체, 단백질 A47, 단백질 A49, 단백질 A51, 세마포린(semaphorin)-유사 단백질 A43, 세린 단백질분해효소 억제자 1, 세린 단백질분해효소 억제자 2, 세린 단백질분해효소 억제자 3, 단백질 A6, 단백질 B15, 단백질 C1, 단백질 C5, 단백질 C6, 단백질 F7, 단백질 F8, 단백질 F9, 단백질 F11, 단백질 F14, 단백질 F15, 단백질 F16 (바리올라 메이저(Variola major) 또는 바리올라 마이너(Variola minor), 천연두(Smallpox, Variola)); 부착소/당단백질 gp70, 프로테아제 (스포로트릭스 셴키(Sporothrix schenckii), 스포로트리쿰증(Sporotrichosis));헴-철 결합 단백질 IsdB, 콜라겐 부착소 Cna, 군집(clumping) 인자 A ClfA, 단백질 MecA, 피브로넥틴-결합 단백질 A FnbA, 장독소 타입 A EntA, 장독소 타입 B EntB, 장독소 타입 C EntC1, 장독소 타입 C EntC2, 장독소 타입 D EntD, 장독소 타입 E EntE, 독성 충격 신드롬(Toxic shock syndrome) 독소-1 TSST-1, 스타필로카이네이스(Staphylokinase), 페니실린 결합 단백질 2a PBP2a (MecA), 분비성 항원 SssA (스타필로코커스 속(Staphylococcus genus), 스타필로코커스 식중독); 헴-철 결합 단백질 IsdB, 콜라겐 부착소 Cna, 군집 인자 A ClfA, 단백질 MecA, 피브로넥틴-결합 단백질 A FnbA, 장독소 타입 A EntA, 장독소 타입 B EntB, 장독소 타입 C EntC1, 장독소 타입 C EntC2, 장독소 타입 D EntD, 장독소 타입 E EntE, 독성 충격 신드롬 독소-1 TSST-1, 스타필로카이네이스(Staphylokinase), 페니실린 결합 단백질 2a PBP2a (MecA), 분비성 항원 SssA (스타필로코커스 속(Staphylococcus genus), 포도상구균 감염(Staphylococcal infection)); 항원 Ss-IR, 항원 NIE, 스트롱길라스타신(strongylastacin), Na+-K+ ATP가수분해효소 Sseat-6, 트로포마이신(tropomysin) SsTmy-1, 단백질 LEC-5, 41 kDa 항원 P5, 41-kDa 라바 단백질, 31-kDa 라바 단백질, 28-kDa 라바 단백질 (분선충(Strongyloides stercoralis), 간충증(Strongyloidiasis)); 글리세로포스포디에스터 포스포디에스테라제(glycerophosphodiester phosphodiesterase) GlpQ (Gpd), 외막 단백질 TmpB, 단백질 Tp92, 항원 TpF1, 반복 단백질 Tpr, 반복 단백질 F TprF, 반복 단백질 G TprG, 반복 단백질 I TprI, 반복 단백질 J TprJ, 반복 단백질 K TprK, 트레포네마(treponemal) 막 단백질 A TmpA, 지질단백질, 15 kDa Tpp15, 47 kDa 막 항원, 미니페리틴(miniferritin) TpF1, 부착소 Tp0751, 지질단백질 TP0136, 단백질 TpN17, 단백질 TpN47, 외막 단백질 TP0136, 외막 단백질 TP0155, 외막 단백질 TP0326, 외막 단백질 TP0483, 외막 단백질 TP0956 (트리포네마 팔리둠(Treponema pallidum), 매독(Syphilis)); 카뎁신 L-유사 프로테아제, 53/25-kDa 항원, 8kDa 패밀리 멤버, 미미한 트립신-유사 활성을 갖는 낭미충(cysticercus) 단백질 TsAg5, 육구유충 단백질 TSOL18, 육구유충 단백질 TSOL45-1A, 락테이트 탈수소효소 A LDHA, 락테이트 탈수소효소 B LDHB (태니아 속(Taenia genus), 촌충 기생(Taeniasis)); 파상풍(tetanus) 독소 TetX, 파상풍 독소 C TTC, 140 kDa S 층 단백질, 플래빈단백질 베타-서브유닛 CT3, 포스폴리파아제 (레시티나아제(lecithinase)), 포스포캐리어(phosphocarrier) 단백질 HPr (파상풍균(Clostridium tetani), 파상풍 (Lockjaw)); 유전체 다단백질, 단백질 E, 단백질 M, 캡시드 단백질 C (진드기 매개 뇌염 바이러스(Tick-borne encephalitis virus) (TBEV), 진드기 매개 뇌염); 58-kDa 항원, 68-kDa 항원, 톡소카라 라바 배설(Toxocara larvae excretory)-분비성 항원 TES, 32-kDa 당단백질, 당단백질 TES-70, 당단백질 GP31, 배설-분비성 항원 TcES-57, 장주위 액체(perienteric fluid) 항원 Pe, 가용성 추출물 항원 Ex, 배설/분비성 라바 항원 ES, 항원 TES-120, 다단백질 알레르겐 TBA-1, 카뎁신 L-유사 시스테인 프로테아제 c-cpl-1, 26-kDa 단백질 (견회충(Toxocara canis) or 고양이회충(Toxocara cati), 톡소카라증(Toxocariasis) (안구 유충이행증(Ocular Larva Migrans) (OLM) 및 장기 유충이행증(Visceral Larva Migrans) (VLM))); 미세간상체(microneme) 단백질 ( MIC1, MIC2, MIC3, MIC4, MIC5, MIC6, MIC7, MIC8), 롭트리 단백질 Rop2, 롭트리 단백질 (Rop1, Rop2, Rop3, Rop4, Rop5, Rop6, Rop7, Rop16, Rjop17), 단백질 SR1,표면 항원 P22, 주요 항원 p24, 주요 표면 항원 p30, 고밀도 과립 단백질 (GRA1, GRA2, GRA3, GRA4, GRA5, GRA6, GRA7, GRA8, GRA9, GRA10), 28 kDa 항원, 표면 항원 SAG1, SAG2 관련된 항원, 뉴클레오시드-트리포스파타제 1, 뉴클레오시드-트리포스파타제 2, 단백질 Stt3, HesB-유사 도메인-포함 단백질, 편능형(rhomboid)-유사 프로테아제 5, 톡소멥신(toxomepsin) 1 (톡소플라스마 곤디(Toxoplasma gondii), 톡소플라스마증(Toxoplasmosis)); 43 kDa 분비된 당단백질, 53 kDa 분비된 당단백질, 파라미오신, 항원 Ts21, 항원 Ts87, 항원 p46000, TSL-1 항원, 카베올린-1(caveolin-1) CAV-1, 49 kDa 신생 라바(newborn larva) 항원, 프로사포신(prosaposin) 동족체, 세린 프로테아제, 세린 단백질분해효소 억제자, 45 -kDa 당단백질 Gp45 (트리키넬라 스피랄리스(Trichinella spiralis), 선모충증(Trichinellosis)); Myb-유사 전사 인자들 (Myb1, Myb2, Myb3), 부착소 단백질 AP23, 부착소 단백질 AP33, 부착소 단백질 AP33-3, 부착소s AP51, 부착소 AP65, 부착소 단백질 AP65-1, 알파-액티닌(actinin), 키네신-관련 단백질, 테네우린(teneurin), 62 kDa 단백질분해효소, 서브틸리신(subtilisin)-유사 세린 프로테아제 SUB1, 시스테인 단백질분해효소 유전자 3 CP3, 알파-에놀라제 Eno1, 시스테인 단백질분해효소 CP30, 열충격 단백질 (Hsp70, Hsp60) , 면역성 단백질 P270, (트리코모나스 바기날리스(Trichomonas vaginalis), 질 트리코모나스증(Trichomoniasis)); 베타-튜불린, 47-kDa 단백질, 분비성 백혈구-유사 단백질분해효소-1 SLP-1, 50-kDa 단백질 TT50, 17 kDa 항원, 43/47 kDa 단백질 (트리쿠리스 트리키우라(Trichuris trichiura), 편충증(Trichuriasis) (편충 감염(Whipworm infection))); 단백질 ESAT-6 (EsxA), 10 kDa 여과 항원 EsxB, 분비된 항원 85-B FBPB, 피브로넥틴-결합 단백질 A FbpA (Ag85A), 세린 프로테아제 PepA, PPE 패밀리 단백질 PPE18, 피브로넥틴-결합 단백질 D FbpD, 면역성 단백질 MPT64, 분비된 단백질 MPT51, 과산화효소분해효소-과산화효소-퍼옥시니트리타제(peroxynitritase) T KATG, 주변세포질 인산염-결합 지질단백질 PSTS3 (PBP-3, Phos-1), 철-조절 헤파린 결합 헤마글루티닌 Hbha, PPE 패밀리 단백질 PPE14, PPE 패밀리 단백질 PPE68, 단백질 Mtb72F, 단백질 Apa, 면역성 단백질 MPT63, 주변세포질 인산염-결합 지질단백질 PSTS1 (PBP-1), 분자 샤페론 DnaK, 세포 표면 지질단백질 Mpt83, 지질단백질 P23, 인산염 수송 시스템 투과효소 단백질 pstA, 14 kDa 항원, 피브로넥틴-결합 단백질 C FbpC1, 알라닌 탈수소효소 TB43, 글루타민 합성효소 1, ESX-1 단백질, 단백질 CFP10, TB10.4 단백질, 단백질 MPT83, 단백질 MTB12, 단백질 MTB8, Rpf-유사 단백질, 단백질 MTB32, 단백질 MTB39, 크리스탈린(crystallin), 열충격 단백질 HSP65, 단백질 PST-S (보통 마이코박테리움 투버쿨로시스(Mycobacterium tuberculosis), 폐결핵(Tuberculosis)); 외막 단백질 FobA, 외막 단백질 FobB, 세포내 growth 로커스 lglC1, 세포내 생장 로커스 IglC2, 아미노전이효소 Wbtl, 샤페로닌 GroEL, 17 kDa 주요 막 단백질 TUL4, 지질단백질 LpnA, 키틴분해효소 패밀리 18 단백질, 이소시트르산염 탈수소효소, Nif3 패밀리 단백질, 타입 IV 필리 글리코실화 단백질, 외막 단백질 tolC, FAD 결합 패밀리 단백질, 타입 IV 필린 다중결합(multimeric) 외막 단백질, 이(two) 성분 센서 단백질 KdpD, 샤페론 단백질 DnaK, 단백질 TolQ (프란시엘라 투라렌시스(Francisella tularensis), 야토병(Tularemia)); "MB 항원, 요소가수분해효소, 단백질 GyrA, 단백질 GyrB, 단백질 ParC, 단백질 ParE, 지질 관련 막 단백질 LAMP, 티미딘 인산화효소 TK, 포스폴리파아제 PL-A1, 포스폴리파아제 PL-A2, 포스폴리파아제 PL-C, 표면-발현된 96-kDa 항원; " (우레플라스마 우렐리티쿰(Ureaplasma urealyticum), 우레플라스마 우렐리티쿰 감염(Ureaplasma urealyticum infection)); 비구조 다단백질, 구조 다단백질, 캡시드 단백질 CP, 단백질 E1, 단백질 E2, 단백질 E3, 프로테아제 P1, 프로테아제 P2, 프로테아제 P3 (베네스 웰라형 마뇌염 바이러스(Venezuelan equine encephalitis virus), 베네스 웰라형 마뇌염(Venezuelan equine encephalitis)); 당단백질 GP, 기질 단백질 Z, 중합효소 L, 핵단백질 N (구아나리토 바이러스(Guanarito virus), 베네수엘라 출혈열(Venezuelan hemorrhagic fever)); 다단백질, 단백질 E, 단백질 M, 캡시드 단백질 C, 프로테아제 NS3, 단백질 NS1, 단백질 NS2A, 단백질 AS2B, 브로테인(brotein) NS4A, 단백질 NS4B, 단백질 NS5 (웨스트나일 바이러스(West Nile virus), 서부 나일강 열(West Nile Fever)); 캡시드(cpasid) 단백질 CP, 단백질 E1, 단백질 E2, 단백질 E3, 프로테아제 P2 (서부 마뇌염 바이러스(Western equine encephalitis virus), 서부 마뇌염(Western equine encephalitis)); 유전체 다단백질, 단백질 E, 단백질 M, 캡시드 단백질 C, 프로테아제 NS3, 단백질 NS1, 단백질 NS2A, 단백질 AS2B, 단백질 NS4A, 단백질 NS4B, 단백질 NS5 (황열병 바이러스(Yellow fever virus), 황열병(Yellow fever)); 추정 Yop 표적(targeting) 단백질 YobB, 주효 단백질 YopD, 주효 단백질 YopE, 단백질 YopH, 주효 단백질 YopJ, 단백질 전좌 단백질 YopK, 주효 단백질 YopT, 단백질 YpkA, 편모 생합성 단백질 FlhA, 펩티드가수분해효소 M48, 포타슘 유출(potassium efflux) 시스템 KefA, 전사 조절자(regulatoer) RovA, 부착소 Ifp, 전이체(translocator) 단백질(portein) LcrV, 단백질 PcrV, 인베신 Inv, 외막 단백질 OmpF-유사 포린, 부착소 YadA, 단백질 인산화효소 C, 포스폴리파아제 C1, 단백질 PsaA, 만노실(mannosyl)전이효소-유사 단백질 WbyK, 단백질 YscU, 항원 YPMa (예르시니아 슈도투버쿨로시스(Yersinia pseudotuberculosis), 예르시니아 가성결핵 감염(Yersinia pseudotuberculosis infection)); 주효 단백질 YopB, 60 kDa 샤페로닌, 단백질 WbcP, 티로신-단백질 인산가수분해효소 YopH, 단백질 YopQ, 장독소, 갈락토시드 투과효소, 환원효소 NrdE, 단백질 YasN, 인베신 Inv, 부착소 YadA, 외막 포린 F OmpF, 단백질 UspA1, 단백질 EibA, 단백질 Hia, 세포 표면 단백질 Ail, 샤페론 SycD, 단백질 LcrD, 단백질 LcrG, 단백질 LcrV, 단백질 SycE, 단백질 YopE, 조절자 단백질 TyeA, 단백질 YopM, 단백질 YopN, 단백질 YopO, 단백질 YopT, 단백질 YopD, 프로테아제 ClpP, 단백질 MyfA, 단백질 FilA, 및 단백질 PsaA (예르시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica), 예르시니아증(Yersiniosis)).
(괄호안은 항원이 유래된 특정한 병원체 및 항원과 관련된 감염성 질병이다)
본 발명의 특정한 실시예에 있어서, 하기 감염성 질병과 관련된 병원체의 항원은 특히 바람직하다:
·라비 바이러스의 경우, 핵단백질(N), 인단백질(P), 기질단백질(M), 당단백질(G), 및 바이러스성 RNA 중합효소(L);
·B형 간염 바이러스의 경우, B형 간염 바이러스 표면 항원(HBsAg), B형 간염 바이러스 코어 항원(HbcAg), B형 간염 바이러스 DNA 중합효소, HBx 단백질, preS2 중간 표면 단백질, 라지 S 단백질, 바이러스 단백질 VP1, 바이러스 단백질 VP2, 바이러스 단백질 VP3, 및 바이러스 단백질 VP4;
·인유두종바이러스(hPV)의 경우, (E1 단백질, E2 단백질, E3 단백질, E4 단백질, E5 단백질, E6 단백질, E7 단백질, E8 단백질, L1 단백질, 및 L2 단백질;
·탄저균의 경우, 방어 항원(PA), 부종 인자 (EF), 치사 인자 (LF), 및 S-층 상동 단백질 (SLH);
·호흡기 합포체 바이러스(RSV)의 경우, 융합(F) 단백질, 뉴클레오캡시드(N) 단백질, 인단백질(P), 기질(M) 단백질, 당단백질 (G), 라지 단백질(L; RNA 중합효소), 비구조 단백질 1 (NS1), 비구조 단백질 2 (NS2), 작은 소수성(SH) 단백질, 신장 인자 M2-1, 및 전사 조절 단백질 M2-2;
·헤르페스 심플렉스 바이러스(HSV)의 경우, 당단백질 L (UL1), 우라실-DNA 글리코실화효소 UL2, UL3 단백질, UL4 단백질, DNA 복제 단백질 UL5, 포탈 단백질 UL6, 비리온 성숙 단백질 UL7, DNA 헬리카제 UL8, 복제 원점-결합 단백질 UL9, 당단백질 M (UL10), UL11 단백질, 알칼리성 핵산말단가수분해효소 UL12, 세린-트레오닌 단백질 인산화효소 UL13, 외피 단백질 UL14, 터미네이즈 (UL15), 외피 단백질 UL16, the UL17 단백질 , 캡시드 단백질 VP23 (UL18), 주요 캡시드 단백질 VP5 (UL19), 막 단백질 UL20, 외피 단백질 UL21, 당단백질 H (UL22), 티미딘 인산화효소 UL23, UL24 단백질, UL25 단백질, 캡시드 단백질 P40 (UL26, VP24, VP22A), 당단백질 B (UL27), ICP18.5 단백질 (UL28), 주요 DNA-결합 단백질 ICP8 (UL29), DNA 중합효소 UL30, 핵 기질 단백질 UL31, 외피 당단백질 UL32, UL33 단백질, 내핵 막 단백질 UL34, 캡시드 단백질 VP26 (UL35), 라지 외피 단백질 UL36, 캡시드 조립 단백질 UL37, VP19C 단백질 (UL38), 리보뉴클레오티드 환원효소 (라지 서브유닛) UL39, 리보뉴클레오티드 환원효소 (스몰 서브유닛) UL40, 외피 단백질/비리온 숙주 차단 VHS 단백질 (UL41), DNA 중합효소 과정 인자 UL42, 막 단백질 UL43, 당단백질 C (UL44), 막 단백질 UL45, 외피 단백질 VP11/12 (UL46), 외피 단백질 VP13/14 (UL47), 비리온 성숙 단백질 VP16 (UL48, 알파-TIF), 외피 단백질 UL49, dUTP 디포스파타제 UL50, 외피 단백질 UL51, DNA 헬리카제/프리마제 복합체 단백질 UL52, 당단백질 K (UL53), 전사 조절 단백질 IE63 (ICP27, UL54), UL55 단백질, UL56 단백질, 바이러스성 복제 단백질 ICP22 (IE68, US1), US2 단백질, 세린/트레오닌-단백질 인산화효소 US3, 당단백질 G (US4), 당단백질 J (US5), 당단백질 D (US6), 당단백질 I (US7), 당단백질 E (US8), 외피 단백질 US9, 캡시드/외피 단백질 US10, Vmw21 단백질 (US11), ICP47 단백질 (IE12, US12), 주요 전사 활성제 ICP4 (IE175, RS1), E3 유비퀴틴 연결효소 ICP0 (IE110), 잠재-관련 단백질 1 (LRP1), 잠재-관련 단백질 2 (LRP2), 신경병원성 인자 RL1 (ICP34.5), 및 잠재-관련 전사체(LAT); 또는
·마이코박테리움 투베쿨로시스(Mycobacterium tuberculosis)의 경우, ESAT-6 단백질, ESX-1 단백질, CFP10 단백질, TB10.4 단백질, MPT63 단백질, MPT64 단백질, MPT83 단백질, MTB12 단백질, MTB8 단백질, AG85A 단백질, AG85B 단백질, Rpf-유사 단백질, KATG 단백질, PPE18 단백질, MTB32 단백질, MTB39 단백질, 크리스탈린(Crystallin), HSP65 단백질, PST-S 단백질, 및 HBHA 단백질, 10 kDa 여과 항원 EsxB, 세린 프로테아제 PepA, 피브로넥틴-결합 단백질 D FbpD, 분비된 단백질 MPT51, 주변세포질 인산 결합 지질단백질 PSTS1 (PBP-1), 주변세포질 인산 결합 지질단백질 PSTS3 (PBP-3, Phos-1), PPE 패밀리 단백질 PPE14, PPE 패밀리 단백질 PPE68, 단백질 MTB72F, 분자 샤페론 DnaK, 세포 표면 지질단백질 MPT83, 지질단백질 P23, 인산염 수송 시스템 투과효소 단백질 PstA, the 14 kDa 항원, 피브로넥틴-결합 단백질 C FbpC1, 알라닌 탈수소효소 TB43, 및 글루타민 합성효소 1.
b)알러지 또는 알러지성 질병(알러지성 항원 또는 알레르겐)과 관련된 항원:
다른 대안에 따르면, 항원의 추가적인 그룹의 하나는 알러지성 항원을 포함한다. 이러한 알러지성 항원은 다른 원천, 예를 들어 동물, 식물, 진균, 박테리아 등으로부터 유래된 항원으로부터 선택될 수 있다. 이러한 맥락에서 알레르겐의 원천은 예를 들어 잔디, 화분, 곰팡이, 약물, 또는 다양한 환경적 트리거(triggers) 등을 포함한다. 알레르기성 항원은 전형적으로 핵산 및 그들의 절편, 단백질 또는 펩타이드 및 그들의 절편, 탄수화물, 다당류, 당, 지질, 인지질 등과 같은 화합물의 다른 종류에 속한다. 본 발명의 맥락에서 특별한 관심요소(interest)는 단백질 또는 펩타이드 항원 및 그들의 절편 또는 에피토프, 또는 핵산 및 그들의 절편, 특히 이러한 단백질 또는 펩타이드 항원 및 그들의 절편 또는 에피토프를 코딩하는 핵산 및 그들의 절편이다.
대안적 실시예에서, 상기 항원은 상기 원천으로부터 추출된 제조(preparation) 내에 포함된 펩타이드 또는 단백질 항원과 같은, 펩타이드 또는 단백질 항원, 또는 상기 펩타이드 또는 단백질 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체이다. 대안적 실시예에서, 본 발명에서 사용된 펩타이드 또는 단백질 항원은 상기 원천으로부터 추출된 제조 내 포함된 것이 아니며/또한 상기 원천으로부터 추출된 제조로부터 얻어진 것이 아니다.
알러지 또는 알러지성 질병(알레르겐)과 관련된 항원은 바람직하게는 하기로 이루어진 리스트로부터 선택된 원천으로부터 유래된다:
아카루스(Acarus) 종 (Aca s 1, Aca s 10, Aca s 10.0101, Aca s 13, Aca s 13.0101, Aca s 2, Aca s 3, Aca s 7, Aca s 8), 아칸토시비움(Acanthocybium) 종 (Aca so 1), 아칸토세일로네마(Acanthocheilonema) 종 (Aca v 3, Aca v 3.0101), 아세테스(Acetes) 종 (Ace ja 1), 악티니디아(Actinidia) 종 (Act a 1, Act c 1, Act c 10, Act c 10.0101, Act c 2, Act c 4, Act c 5, Act c 5.0101, Act c 8, Act c 8.0101, Act c 키티나제, Act d 1, Act d 1.0101, Act d 10, Act d 10.0101, Act d 10.0201, Act d 11, Act d 11.0101, Act d 2, Act d 2.0101, Act d 3, Act d 3.0101, Act d 3.02, Act d 4, Act d 4.0101, Act d 5, Act d 5.0101, Act d 6, Act d 6.0101, Act d 7, Act d 7.0101, Act d 8, Act d 8.0101, Act d 9, Act d 9.0101, Act d 키티나제, Act e 1, Act e 5), 아크리토시폰(Acyrthosiphon) 종 (Acy pi 7, Acy pi 7.0101, Acy pi 7.0102), 아데니아(Adenia) 종 (Ade v RIP), 아에데스(Aedes) 종 (Aed a 1, Aed a 1.0101, Aed a 2, Aed a 2.0101, Aed a 3, Aed a 3.0101, Aed a 4, Aed a 7, Aed a 7.0101, Aed a 7.0102, Aed a 7.0103, Aed a 7.0104, Aed a 7.0105, Aed a 7.0106, Aed a 7.0107, Aed a 7.0108, Aed a 7.0109, Aed a 7.0110, Aed a 7.0111, Aed al 1, Aed al 3, Aed al 37kD, Aed v 37kD, Aed v 63kD), 아에길롭스(Aegilops) 종 (Aeg ta 28, Aeg ta 알파 글리아딘(alpha_Gliadin), Aeg um 28, Aeg un 28), 아에탈로페르카(Aethaloperca) 종 (Aet ro 1), 아그로피론(Agropyron) 종 (Agr c 7), 아그로스티스(Agrostis) 종 (Agr ca 1, Agr ca 5, Agr g 1, Agr g 4, Agr s 5), 아그로박테리움(Agrobacterium) 종 (Agr sp CP4 EPSPS), 아일루로포다(Ailuropoda) 종 (Ail me 포스비틴(Phosvitin, Ail me TCTP), 아익스(Aix) 종 (Aix ga 1, Aix sp 1), 알레우로글리퍼스(Aleuroglyphus) 종 (Ale o 1, Ale o 10, Ale o 10.0101, Ale o 10.0102, Ale o 13, Ale o 14, Ale o 2, Ale o 20, Ale o 3, Ale o 5, Ale o 7, Ale o 8, Ale o 9), 알리움(Allium) 종 (All a 3, All a 알리움 릴라제(Alliin lyase), All c 3, All c 30kD, All c 4, All c 알린 릴라제(Alliin lyase), 모든 p Alliin 릴라제, All s 알린 릴라제), 알너스(Alnus) 종 (Aln g 1, Aln g 1.0101, Aln g 1/Bet v 1/Cor a 1 TPC7, Aln g 1/Bet v 1/Cor a 1 TPC9, Aln g 2, Aln g 4, Aln g 4.0101), 알로포첸(Alopochen) 종 (Alo ae 1), 알로페쿠러스(Alopecurus) 종 (Alo p 1, Alo p 5), 알테나리아(Alternaria) 종 (Alt a 1, Alt a 1.0101, Alt a 1.0102, Alt a 10, Alt a 10.0101, Alt a 12, Alt a 12.0101, Alt a 13, Alt a 13.0101, Alt a 2, Alt a 3, Alt a 3.0101, Alt a 4, Alt a 4.0101, Alt a 5, Alt a 5.0101, Alt a 6, Alt a 6.0101, Alt a 7, Alt a 7.0101, Alt a 70kD, Alt a 8, Alt a 8.0101, Alt a 9, Alt a MnSOD, Alt a NTF2, Alt a TCTP, Alt ar 1, Alt arg 1, Alt b 1, Alt bl 1, Alt br 1, Alt c 1, Alt ca 1, Alt ce 1, Alt ch 1, Alt ci 1, Alt co 1, Alt cr 1, Alt ct 1, Alt cu 1, Alt cy 1, Alt d 1, Alt du 1, Alt e 1, Alt et 1, Alt eu 1, Alt ga 1, Alt gr 1, Alt j 1, Alt l 1, Alt lo 1, Alt m 1, Alt me 1, Alt mi 1, Alt mo 1, Alt o 1, Alt p 1, Alt ph 1, Alt po 1, Alt ps 1, Alt r 1, Alt s 1, Alt se 1, Alt sm 1, Alt so 1, Alt su 1, Alt t 1, Alt te 1, Alt to 1), 아마란투스(Amaranthus) 종 (Ama r 2, Ama r 2.0101, Ama v 2, Ama v 2.0101, Ama v 2.0201), 암브로시아(Ambrosia) 종 (Amb a 1, Amb a 1.0101, Amb a 1.0201, Amb a 1.0202, Amb a 1.0301, Amb a 1.0302, Amb a 1.0303, Amb a 1.0304, Amb a 1.0305, Amb a 1.0401, Amb a 1.0402, Amb a 1.0501, Amb a 1.0502, Amb a 10, Amb a 10.0101, Amb a 3, Amb a 3.0101, Amb a 4, Amb a 4.0101, Amb a 5, Amb a 5.0101, Amb a 6, Amb a 6.0101, Amb a 7, Amb a 7.0101, Amb a 8, Amb a 8.0101, Amb a 8.0102, Amb a 9, Amb a 9.0101, Amb a 9.0102, Amb a CPI, Amb p 1, Amb p 5, Amb p 5.0101, Amb p 5.0201, Amb t 5, Amb t 5.0101, Amb t 8), 암모데아(Ammothea) 종 (Amm h 7, Amm h 7.0101), 아나다라(Anadara) 종 (Ana br 1), 아나나스(Ananas) 종 (Ana c 1, Ana c 1.0101, Ana c 2, Ana c 2.0101, Ana c 2.0101 (MUXF3)), 아나스(Anas) 종 (Ana ca 1), 아나리카스(Anarhichas) 종 (Ana l 1), 아나카디움(Anacardium) 종 (Ana o 1, Ana o 1.0101, Ana o 1.0102, Ana o 2, Ana o 2.0101, Ana o 3, Ana o 3.0101), 아나스(Anas) 종 (Ana p 1, Ana p 2, Ana p 3), 안겔라(Anguilla) 종 (Ang a 1, Ang j 1), 아니사키스(Anisakis) 종 (Ani s 1, Ani s 1.0101, Ani s 10, Ani s 10.0101, Ani s 11, Ani s 11.0101, Ani s 12, Ani s 12.0101, Ani s 2, Ani s 2.0101, Ani s 24kD, Ani s 3, Ani s 3.0101, Ani s 4, Ani s 4.0101, Ani s 5, Ani s 5.0101, Ani s 6, Ani s 6.0101, Ani s 7, Ani s 7.0101, Ani s 8, Ani s 8.0101, Ani s 9, Ani s 9.0101, Ani s CCOS3, Ani s 시토크롬(Cytochrome) B, Ani s FBPP, Ani s NADHDS4L, Ani s NARaS, Ani s PEPB, Ani s 트로포닌), 안노아(Annona) 종 (Ann c 키티나제), 아노펠레스(Anopheles) 종 (Ano da 17, Ano da 17.0101, Ano da 27, Ano da 27.0101, Ano da 7, Ano da 7.0101, Ano g 7, Ano g 7.0101), 안셀(Anser) 종 (Ans a 1, Ans a 2, Ans a 3, Ans in 1), 안톡산툼(Anthoxanthum) 종 (Ant o 1, Ant o 1.0101, Ant o 12, Ant o 13, Ant o 2, Ant o 4, Ant o 5, Ant o 6, Ant o 7), 아피스(Apis) 종 (Api c 1, Api c 1.0101, Api c 10, Api c 2, Api c 4, Api d 1, Api d 1.0101, Api d 4, Api fl 4), 아피움(Apium) 종 (Api g 1, Api g 1.0101, Api g 1.0201, Api g 2, Api g 2.0101, Api g 3, Api g 3.0101, Api g 4, Api g 4.0101, Api g 5, Api g 5.0101, Api g 6, Api g 6.0101), Apis 종 (Api m 1, Api m 1.0101, Api m 10, Api m 10.0101, Api m 11, Api m 11.0101, Api m 11.0201, Api m 13kD, Api m 2, Api m 2.0101, Api m 3, Api m 3.0101, Api m 4, Api m 4.0101, Api m 5, Api m 5.0101, Api m 6, Api m 6.0101, Api m 7, Api m 7.0101, Api m 8, Api m 8.0101, Api m 9, Api m 9.0101, Api m A1-A2, Api m A1-A2-A3, Api m 아팔부민(Apalbumin) 1, Api m 아팔부민 2, Api me 1, Api me 4), 아라키스(Arachis) 종 (Ara d 2, Ara d 6, Ara f 3, Ara f 4, Ara h 1, Ara h 1.0101, Ara h 10, Ara h 10.0101, Ara h 10.0102, Ara h 11, Ara h 11.0101, Ara h 2, Ara h 2.0101, Ara h 2.0102, Ara h 2.0201, Ara h 2.0202, Ara h 3, Ara h 3.0101, Ara h 4, Ara h 4.0101, Ara h 5, Ara h 5.0101, Ara h 6, Ara h 6.0101, Ara h 7, Ara h 7.0101, Ara h 7.0201, Ara h 7.0202, Ara h 8, Ara h 8.0101, Ara h 8.0201, Ara h 9, Ara h 9.0101, Ara h 9.0201, Ara h 아글루티닌(Agglutinin), Ara h 올레오신(Oleosin) 18kD, Ara i 2, Ara i 6), 아라비답시스(Arabidopsis) 종 (Ara t 3, Ara t 8, Ara t GLP), 아코살거스(Archosargus) 종 (Arc pr 1), 아케오포타모비우스(Archaeopotamobius) 종 (Arc s 8, Arc s 8.0101), 아에퀴펙텐(Aequipecten) 종 (Arg i 1), 알가스(Argas) 종 (Arg r 1, Arg r 1.0101), 아리옵시스(Ariopsis) 종 (Ari fe 1), 알모라시아(Armoracia) 종 (Arm r HRP), 알헤나데룸(Arrhenatherum) 종 (Arr e 1, Arr e 5), 알테미시아(Artemisia) 종 (Art a 1, Art ap 1), 알테미아(Artemia) 종 (Art fr 1, Art fr 1.0101, Art fr 5, Art fr 5.0101), 알트로박터(Arthrobacter) 종 (Art gl CO), 아코리온(Achorion) 종 (Art gy 7), 아토카푸스(Artocarpus) 종 (Art h 17kD, Art h 4), 아트로스피라(Arthrospira) 종 (Art pl beta_Phycocyanin), 알테미시아(Artemisia) 종 (Art v 1, Art v 1.0101, Art v 1.0102, Art v 1.0103, Art v 1.0104, Art v 1.0105, Art v 1.0106, Art v 1.0107, Art v 2, Art v 2.0101, Art v 3, Art v 3.0101, Art v 3.0201, Art v 3.0202, Art v 3.0301, Art v 4, Art v 4.0101, Art v 4.0201, Art v 47kD, Art v 5, Art v 5.0101, Art v 6, Art v 6.0101, Art v 60kD), 알트로데마(Arthroderma) 종 (Art va 4), 아스카리스(Ascaris) 종 (Asc l 3, Asc l 3.0101, Asc l 3.0102, Asc l 34kD, Asc s 1, Asc s 1.0101, Asc s 3, Asc s 3.0101, Asc s GST), 아스페길루스(Aspergillus) 종 (Asp aw 글루코아밀라제(Glucoamylase), Asp c 22, Asp f 1, Asp f 1.0101, Asp f 10, Asp f 10.0101, Asp f 11, Asp f 11.0101, Asp f 12, Asp f 12.0101, Asp f 13, Asp f 13.0101, Asp f 15, Asp f 15.0101, Asp f 16, Asp f 16.0101, Asp f 17, Asp f 17.0101, Asp f 18, Asp f 18.0101, Asp f 2, Asp f 2.0101, Asp f 22, Asp f 22.0101, Asp f 23, Asp f 23.0101, Asp f 27, Asp f 27.0101, Asp f 28, Asp f 28.0101, Asp f 29, Asp f 29.0101, Asp f 3, Asp f 3.0101, Asp f 34, Asp f 34.0101, Asp f 4, Asp f 4.0101, Asp f 5, Asp f 5.0101, Asp f 56kD, Asp f 6, Asp f 6.0101, Asp f 7, Asp f 7.0101, Asp f 8, Asp f 8.0101, Asp f 9, Asp f 9.0101, Asp f AfCalAp, Asp f AT_V, Asp f 과산화효소분해효소, Asp f 키토사네이즈(Chitosanase), Asp f CP, Asp f DPPV, Asp f FDH, Asp f 감마 액틴(gamma_Actin), Asp f 글루코시다제(Glucosidase), Asp f GPI, Asp f GST, Asp f GT, Asp f IAO, Asp f IPMI, Asp f LPL1, Asp f LPL3, Asp f 만노시다제(Mannosidase), Asp f MDH, Asp f PL, Asp f PUP, Asp f RPS3, Asp f SXR, Asp fl 13, Asp fl 13.0101, Asp fl 18, Asp fl 2, Asp fl 21, Asp fl 3, Asp fl 4, Asp fl 7, Asp fl 8, Asp fl 9, Asp me 시프로스(Seaprose), Asp n 14, Asp n 14.0101, Asp n 18, Asp n 18.0101, Asp n 25, Asp n 25.0101, Asp n 30, Asp n 글루코아밀라제, Asp n 헤미셀룰라제, Asp n 펙티나제, Asp o 13, Asp o 13.0101, Asp o 21, Asp o 21.0101, Asp o 3, Asp o 4, Asp o 7, Asp o 8, Asp o 락타제, Asp o 리파제, Asp oc 13, Asp r 1, Asp sa AP, Asp sp 글루코아밀라제, Asp sp 글루코세옥시다제, Asp sp PL, Asp sp PME, Asp sy 13, Asp v 13, Asp v 13.0101, Asp v 과산화효소분해효소 A, Asp v 에놀라제, Asp v GAPDH, Asp v MDH, Asp v SXR), 아스파라거스(Asparagus) 종 (Aspa o 1, Aspa o 1.01, Aspa o 1.02, Aspa o 17kD, Aspa o 4), 아스페길루스(Aspergillus) 종 (Aspe ni 2, Aspe ni 3, Aspe ni 4, Aspe ni 7, Aspe ni 8, Aspe ni 9), 아베나(Avena) 종 (Ave s 1, Ave s 12, Ave s 13, Ave s 2, Ave s 4, Ave s 5, Ave s 7), 바빌로니아(Babylonia) 종 (Bab ja 1), 바실러스(Bacillus) 종 (Bac al 서브틸리신(Subtilisin), Bac cl 서브틸리신, Bac l 서브틸리신, Bac li aA, Bac li 서브틸리신), 박트로세라(Bactrocera) 종 (Bac ol 27, Bac ol 27.0101), 바실러스(Bacillus) 종 (Bac sp aA1, Bac sp aA3, Bac sp 디카르복실라제, Bac st amyM, Bac su 서브틸리신, Bac t Cry1Ab, Bac t Cry1Fa, Bac t Cry3Bb1, Bac t Cry9c), 바그레(Bagre) 종 (Bag ma 1), 발리스테스(Balistes) 종 (Bal ca 1), 발라너스(Balanus) 종 (Bal r 1, Bal r 1.0101), 비우베리아(Beauveria) 종 (Bea b Ald, Bea b Enol, Bea b f2, Bea b Hex), 버토렐레티아(Bertholletia) 종 (Ber e 1, Ber e 1.0101, Ber e 2, Ber e 2.0101), 버릭스(Beryx) 종 (Ber sp 1), 베툴라(Betula) 종 (Bet ab 1, Bet al 1, Bet ch 1, Bet co 1, Bet da 1, Bet gr 1, Bet hu 1, Bet le 1, Bet me 1, Bet n 1, Bet p 1, Bet pa 1, Bet po 1, Bet pu 1, Bet pu 2, Bet pu 4, Bet pu 6, Bet pu 7, Bet sc 1, Bet ut 1, Bet v 1, Bet v 1 B1-B1-B1, Bet v 1 fv Mal 4x, Bet v 1.0101, Bet v 1.0102, Bet v 1.0103, Bet v 1.0201, Bet v 1.0301, Bet v 1.0401, Bet v 1.0402, Bet v 1.0501, Bet v 1.0601, Bet v 1.0602, Bet v 1.0701, Bet v 1.0801, Bet v 1.0901, Bet v 1.1001, Bet v 1.1101, Bet v 1.1201, Bet v 1.1301, Bet v 1.1401, Bet v 1.1402, Bet v 1.1501, Bet v 1.1502, Bet v 1.1601, Bet v 1.1701, Bet v 1.1801, Bet v 1.1901, Bet v 1.2001, Bet v 1.2101, Bet v 1.2201, Bet v 1.2301, Bet v 1.2401, Bet v 1.2501, Bet v 1.2601, Bet v 1.2701, Bet v 1.2801, Bet v 1.2901, Bet v 1.3001, Bet v 1.3101, Bet v 2, Bet v 2.0101, Bet v 3, Bet v 3.0101, Bet v 4, Bet v 4.0101, Bet v 6, Bet v 6.0101, Bet v 6.0102, Bet v 7, Bet v 7.0101, Bet v 8, Bet v 글루카나제), 베타(Beta) 종 (Beta v 1, Beta v 1.0101, Beta v 2, Beta v 2.0101), 블라텔라(Blattella) 종 (Bla g 1, Bla g 1.0101, Bla g 1.0102, Bla g 1.0103, Bla g 1.0201, Bla g 1.0202, Bla g 2, Bla g 2.0101, Bla g 2.0201, Bla g 36kD, Bla g 4, Bla g 4.0101, Bla g 4.0201, Bla g 5, Bla g 5.0101, Bla g 5.0201, Bla g 6, Bla g 6.0101, Bla g 6.0201, Bla g 6.0301, Bla g 7, Bla g 7.0101, Bla g 8, Bla g 8.0101, Bla g 9, Bla g 에놀라제, Bla g GSTD1, Bla g RACK1, Bla g TPI, Bla g 트립신, Bla g 비텔로게닌(Vitellogenin)), 블라타(Blatta) 종 (Bla o 1, Bla o 7), 블로미아(Blomia) 종 (Blo t 1, Blo t 1.0101, Blo t 1.0201, Blo t 10, Blo t 10.0101, Blo t 10.0102, Blo t 11, Blo t 11.0101, Blo t 12, Blo t 12.0101, Blo t 12.0102, Blo t 13, Blo t 13.0101, Blo t 14, Blo t 15, Blo t 18, Blo t 19, Blo t 19.0101, Blo t 2, Blo t 2.0101, Blo t 2.0102, Blo t 2.0103, Blo t 20, Blo t 21, Blo t 21.0101, Blo t 3, Blo t 3.0101, Blo t 4, Blo t 4.0101, Blo t 5, Blo t 5.0101, Blo t 6, Blo t 6.0101, Blo t 7, Blo t 8, Blo t 9, Blo t HSP70), 봄버스(Bombus) 종 (Bom ar 4, Bom hy 4, Bom p 1, Bom p 1.0101, Bom p 2, Bom p 3, Bom p 4, Bom p 4.0101, Bom t 1, Bom t 1.0101, Bom t 4, Bom t 4.0101), Bombyx 종 (Bomb m 1, Bomb m 1.0101, Bomb m 7, Bomb m 7.0101, Bomb m 7.0102, Bomb m 7.0103, Bomb m 7.0104, Bomb m 7.0105, Bomb m 7.0106), 부필러스(Boophilus) 종 (Boo m 1, Boo m 7, Boo m 7.0101), 보스(Bos) 종 (Bos d 2, Bos d 2.0101, Bos d 2.0102, Bos d 2.0103, Bos d 3, Bos d 3.0101, Bos d 4, Bos d 4.0101, Bos d 5, Bos d 5.0101, Bos d 5.0102, Bos d 6, Bos d 6 (MDA), Bos d 6.0101, Bos d 7, Bos d 7.0101, Bos d 8, Bos d 8 알파S1, Bos d 8 알파S2, Bos d 8 베타, Bos d 8 카파, Bos d 알파2I, Bos d 알파2I.0101, Bos d 키모신, Bos d 피브린, Bos d 젤라틴, Bos d HG, Bos d 인슐린, Bos d 락토페린, Bos d 락토퍼옥시다제, Bos d 미오글로빈, Bos d OBP, Bos d OSCP, Bos d 포스비틴, Bos d PLA2, Bos d PRVB, Bos d 트롬빈, Bos d TI, Bos gr ALA, Bos gr 미오글로빈), 보스롭스(Bothrops) 종 (Bot as 1, Bot at 1), 보우테로아(Bouteloua) 종 (Bou g 1), 비팅(Biting) 종 (Bov ov 1), 브라마(Brama) 종 (Bra du 1), 브라시카(Brassica) 종 (Bra j 1, Bra j 1.0101, Bra n 1, Bra n 1.0101, Bra n 4, Bra n 7, Bra n 8, Bra n PG, Bra ni 8, Bra o 3, Bra o 3.0101, Bra r 1, Bra r 1.0101, Bra r 2, Bra r 2.0101, Bra r 3, Bra r 4, Bra r 7), 브로머스(Bromus) 종 (Bro a 1, Bro a 4), 브로스메(Brosme) 종 (Bro br 1), 브로머스(Bromus) 종 (Bro i 1, Bro i 5, Bro i 7), 브루기아(Brugia) 종 (Bru m 3, Bru m 3.0101, Bru m Bm33), 부발러스(Bubalus) 종 (Bub b ALA, Bub b BLG, Bub b 카세인, Bub b 카세인 알파S1, Bub b 카세인 알파S2, Bub b 카세인 베타, Bub b 카세인 카파), 캐노하디티스(Caenorhabditis) 종 (Cae b 3, Cae b 3.0101, Cae br 3, Cae br 3.0101, Cae e 3, Cae e 3.0101, Cae e 3.0102, Cae re 13, Cae re 13.0101), 카자누스(Cajanus) 종 (Caj c 1), 칼리구스(Caligus) 종 (Cal cl 1, Cal cl 1.0101, Cal cl 1.0102), 칼라무스(Calamus) 종 (Cal le 1), 칼리넥테스(Callinectes) 종 (Cal s 2), 카멜루스(Camelus) 종 (Cam d ALA, Cam d 카세인, Cam d 카세인 알파S1, Cam d 카세인 알파S2, Cam d 카세인 베타, Cam d 카세인 카파), 캄포노투스(Camponotus) 종 (Cam fl 7, Cam fl 7.0101), 카니스(Canis) 종 (Can f 1, Can f 1.0101, Can f 2, Can f 2.0101, Can f 3, Can f 3.0101, Can f 4, Can f 4.0101, Can f 5, Can f 5.0101, Can f 6, Can f 6.0101, Can f Feld1-유사, Can f Homs2-유사, Can f 포스비틴, Can f TCTP), 칸티더미스(Canthidermis) 종 (Can ma 1), 캔서(Cancer) 종 (Can mg 2, Can p 1), 카나비스(Cannabis) 종 (Can s 3), 칸디다(Candida) 종 (Cand a 1, Cand a 1.0101, Cand a 3, Cand a 3.0101, Cand a CAAP, Cand a CyP, Cand a 에놀라제, Cand a FPA, Cand a MnSOD, Cand a PGK, Cand b 2, Cand b 2.0101, Cand b FDH, Cand r 리파제), 캅시쿰(Capsicum) 종 (Cap a 1, Cap a 1.0101, Cap a 17kD, Cap a 2, Cap a 2.0101, Cap a 30kD, Cap a 글루카나제, Cap ch 17kD), 카프렐라(Caprella) 종 (Cap e 1), 카프라(Capra) 종 (Cap h ALA, Cap h BLG, Cap h 카세인, Cap h 카세인 알파S1, Cap h 카세인 알파S2, Cap h 카세인 베타, Cap h 카세인 카파, Cap h GSA), 카피툴럼(Capitulum) 종 (Cap m 1), 카라시우스(Carassius) 종 (Car au 1), 카피너스(Carpinus) 종 (Car b 1, Car b 1.0101, Car b 1.0102, Car b 1.0103, Car b 1.0104, Car b 1.0105, Car b 1.0106, Car b 1.0107, Car b 1.0108, Car b 1.0109, Car b 1.0110, Car b 1.0111, Car b 1.0112, Car b 1.0113, Car b 1.0201, Car b 1.0301, Car b 1.0302, Car b 2, Car b 4), 카란스(Caranx) 종 (Car cr 1), 카리아(Carya) 종 (Car i 1, Car i 1.0101, Car i 2, Car i 4, Car i 4.0101), 카시너스(Carcinus) 종 (Car ma 2), 카리오타(Caryota) 종 (Car mi 2), 카리카(Carica) 종 (Car p 1, Car p 키티나제, Car p 키모파파인(Chymopapain), Car p 엔도프로티나제), 카스타네아(Castanea) 종 (Cas c 24kD, Cas s 1, Cas s 1.0101, Cas s 1.0102, Cas s 1.0103, Cas s 2, Cas s 5, Cas s 5.0101, Cas s 8, Cas s 8.0101, Cas s 9, Cas s 9.0101), 카타란투스(Catharanthus) 종 (Cat r 1, Cat r 1.0101, Cat r 17kD, Cat r 2), 카울로락틸러스(Caulolatilus) 종 (Cau ch 1), 카비아(Cavia) 종 (Cav p 1, Cav p 1.0101, Cav p 2, Cav p 2.0101, Cav p 3, Cav p 3.0101, Cav p 겔라틴, Cav p GSA), 센트로프리스티스(Centropristis) 종 (Cen s 1), 세팔로폴리스(Cephalopholis) 종 (Cep so 1), 카립디스(Charybdis) 종 (Cha f 1, Cha f 1.0101), 세토딥페루스(Chaetodipterus) 종 (Cha fa 1), 차미시파리스(Chamaecyparis) 종 (Cha o 1, Cha o 1.0101, Cha o 2, Cha o 2.0101), 케노포디움(Chenopodium) 종 (Che a 1, Che a 1.0101, Che a 2, Che a 2.0101, Che a 3, Che a 3.0101), 키로노머스(Chironomus) 종 (Chi k 1, Chi k 10, Chi k 10.0101), 친칠라(Chinchilla) 종 (Chi l 21kD_a, Chi l 21kD_b), 키오노에세테스(Chionoecetes) 종 (Chi o 1, Chi o 1.0101, Chi o 2, Chi o 4, Chi o 6, Chi o 알파_액틴, Chi o SERCA), 키로노무스(Chironomus) 종 (Chi t 1, Chi t 1.0101, Chi t 1.0201, Chi t 2, Chi t 2.0101, Chi t 2.0102, Chi t 3, Chi t 3.0101, Chi t 4, Chi t 4.0101, Chi t 5, Chi t 5.0101, Chi t 6, Chi t 6.0101, Chi t 6.0201, Chi t 7, Chi t 7.0101, Chi t 8, Chi t 8.0101, Chi t 9, Chi t 9.0101), 클라미스(Chlamys) 종 (Chl n 1), 클로에파가(Chloephaga) 종 (Chl pi 1), 콜토글리퍼스(Chortoglyphus) 종 (Cho a 10), 크리소멜라(Chrysomela) 종 (Chr tr 7, Chr tr 7.0101), 사이서(Cicer) 종 (Cic a 2S 알부민, Cic a 알부민), 시코리움(Cichorium) 종 (Cic i 1), 시멕스(Cimex) 종 (Cim l 니트로포린), 시트러스(Citrus) 종 (Cit l 1, Cit l 3, Cit l 3.0101), 시트룰러스(Citrullus) 종 (Cit la 2, Cit la MDH, Cit la TPI), 시트러스(Citrus) 종 (Cit r 3, Cit r 3.0101, Cit s 1, Cit s 1.0101, Cit s 2, Cit s 2.0101, Cit s 3, Cit s 3.0101, Cit s 3.0102, Cit s IFR), 클라도스포리움(Cladosporium) 종 (Cla c 14, Cla c 14.0101, Cla c 9, Cla c 9.0101, Cla h 1, Cla h 10, Cla h 10.0101, Cla h 12, Cla h 12.0101, Cla h 2, Cla h 2.0101, Cla h 42kD, Cla h 5, Cla h 5.0101, Cla h 6, Cla h 6.0101, Cla h 7, Cla h 7.0101, Cla h 8, Cla h 8 CSP, Cla h 8.0101, Cla h 9, Cla h 9.0101, Cla h abH, Cla h GST, Cla h HCh1, Cla h HSP70, Cla h NTF2, Cla h TCTP), 클로스트리디움(Clostridium) 종 (Clo hi 콜라겐분해효소, Clo t 톡소이드), 쿨루페(Clupea) 종 (Clu h 1, Clu h 1.0101, Clu h 1.0201, Clu h 1.0301), 코코스(Cocos) 종 (Coc n 2, Coc n 4, Coc n 5), 콕시디오이데스(Coccidioides) 종 (Coc po 8), 코피(Coffea) 종 (Cof a 1, Cof a 1.0101), 콜롬바(Columba) 종 (Col l PSA), 코프리너스(Coprinus) 종 (Cop c 1, Cop c 1.0101, Cop c 2, Cop c 2.0101, Cop c 3, Cop c 3.0101, Cop c 4, Cop c 5, Cop c 5.0101, Cop c 6, Cop c 7, Cop c 7.0101), 코릴러스(Corylus) 종 (Cor a 1, Cor a 1.0101, Cor a 1.0102, Cor a 1.0103, Cor a 1.0104, Cor a 1.0201, Cor a 1.0301, Cor a 1.0401, Cor a 1.0402, Cor a 1.0403, Cor a 1.0404, Cor a 10, Cor a 10.0101, Cor a 11, Cor a 11.0101, Cor a 12, Cor a 12.0101, Cor a 13, Cor a 13.0101, Cor a 14, Cor a 14.0101, Cor a 2, Cor a 2.0101, Cor a 2.0102, Cor a 8, Cor a 8.0101, Cor a 9, Cor a 9.0101), 코리네박테리움(Corynebacterium) 종 (Cor d 톡소이드), 코릴러스(Corylus) 종 (Cor he 1), 코리페나(Coryphaena) 종 (Cor hi 1), 코리안드룸(Coriandrum) 종 (Cor s 1, Cor s 11kD, Cor s 2), 코토네아스터(Cotoneaster) 종 (Cot l 3), 크란곤(Crangon) 종 (Cra c 1, Cra c 1.0101, Cra c 2, Cra c 2.0101, Cra c 4, Cra c 4.0101, Cra c 5, Cra c 5.0101, Cra c 6, Cra c 6.0101, Cra c 8, Cra c 8.0101), 크라소스트레아(Crassostrea) 종 (Cra g 1), 크리세투스(Cricetus) 종 (Cri c HSA), 크리벨리아(Crivellia) 종 (Cri pa 1), 크로커스(Crocus) 종 (Cro s 1, Cro s 1.0101, Cro s 2, Cro s 2.0101, Cro s 3, Cro s 3.01, Cro s 3.02), 크립토메리아(Cryptomeria) 종 (Cry j 1, Cry j 1.0101, Cry j 1.0102, Cry j 1.0103, Cry j 2, Cry j 2.0101, Cry j 2.0102, Cry j 3, Cry j 3.1, Cry j 3.2, Cry j 3.3, Cry j 3.4, Cry j 3.5, Cry j 3.6, Cry j 3.7, Cry j 3.8, Cry j 4, Cry j AP, Cry j 키티나제, Cry j CPA9, Cry j IFR, Cry j LTP, Cry j P1-P2), 크립포넥트리아(Cryphonectria) 종 (Cry p AP), 크테노세팔리데스(Ctenocephalides) 종 (Cte f 1, Cte f 1.0101, Cte f 2, Cte f 2.0101, Cte f 3, Cte f 3.0101), 크테노파린고돈(Ctenopharyngodon) 종 (Cte id 1), 쿠쿠미스(Cucumis) 종 (Cuc m 1, Cuc m 1.0101, Cuc m 2, Cuc m 2.0101, Cuc m 3, Cuc m 3.0101, Cuc m Lec17, Cuc m MDH), 쿠커비타(Cucurbita) 종 (Cuc ma 18kD, Cuc ma 2, Cuc p 2, Cuc p AscO), 쿠쿠미스(Cucumis) 종 (Cuc s 2), 쿨리코이데스(Culicoides) 종 (Cul n 1, Cul n 10, Cul n 11, Cul n 2, Cul n 3, Cul n 4, Cul n 5, Cul n 6, Cul n 7, Cul n 8, Cul n 9, Cul n HSP70), 쿨렉스(Culex) 종 (Cul q 28kD, Cul q 35kD, Cul q 7, Cul q 7.0101, Cul q 7.0102), 쿨리코이데스(Culicoides) 종 (Cul so 1), 쿠미눔(Cuminum) 종 (Cum c 1, Cum c 2), 쿠프레서스(Cupressus) 종 (Cup a 1, Cup a 1.0101, Cup a 1.02, Cup a 2, Cup a 3, Cup a 4, Cup a 4.0101, Cup s 1, Cup s 1.0101, Cup s 1.0102, Cup s 1.0103, Cup s 1.0104, Cup s 1.0105, Cup s 3, Cup s 3.0101, Cup s 3.0102, Cup s 3.0103, Cup s 8), 코클리오보러스(Cochliobolus) 종 (Cur l 1, Cur l 1.0101, Cur l 2, Cur l 2.0101, Cur l 3, Cur l 3.0101, Cur l 4, Cur l 4.0101, Cur l ADH, Cur l GST, Cur l MnSOD, Cur l 오리진, Cur l Trx, Cur l ZPS1), 시아노첸(Cyanochen) 종 (Cya cy 1), 시노스시온(Cynoscion) 종 (Cyn ar 1), 시노서루스(Cynosurus) 종 (Cyn cr 1, Cyn cr 5), 시노돈(Cynodon) 종 (Cyn d 1, Cyn d 1.0101, Cyn d 1.0102, Cyn d 1.0103, Cyn d 1.0104, Cyn d 1.0105, Cyn d 1.0106, Cyn d 1.0107, Cyn d 1.0201, Cyn d 1.0202, Cyn d 1.0203, Cyn d 1.0204, Cyn d 10, Cyn d 11, Cyn d 12, Cyn d 12.0101, Cyn d 13, Cyn d 15, Cyn d 15.0101, Cyn d 2, Cyn d 22, Cyn d 22.0101, Cyn d 23, Cyn d 23.0101, Cyn d 24, Cyn d 24.0101, Cyn d 4, Cyn d 5, Cyn d 6, Cyn d 7, Cyn d 7.0101), 시노스시온(Cynoscion) 종 (Cyn ne 1), 시노미스(Cynomys) 종 (Cyn sp 리포칼린), 시프리누스(Cyprinus) 종 (Cyp c 1, Cyp c 1.01, Cyp c 1.02), 다보이아(Daboia) 종 (Dab ru 1), 닥틸리스(Dactylis) 종 (Dac g 1, Dac g 1.01, Dac g 1.0101, Dac g 1.02, Dac g 12, Dac g 13, Dac g 2, Dac g 2.0101, Dac g 3, Dac g 3.0101, Dac g 4, Dac g 4.0101, Dac g 5, Dac g 5.0101, Dac g 7), 다마(Dama) 종 (Dam d CSA), 다니오(Danio) 종 (Dan re 1, Dan re 2, Dan re 알파2I, Dan re CK), 다시아티스(Dasyatis) 종 (Das ak 1, Das am 1, Das sa 1), 다우커스(Daucus) 종 (Dau c 1, Dau c 1.0101, Dau c 1.0102, Dau c 1.0103, Dau c 1.0104, Dau c 1.0105, Dau c 1.0201, Dau c 1.0301, Dau c 3, Dau c 4, Dau c 4.0101, Dau c CyP), 데카프테루스(Decapterus) 종 (Dec ru 1), 덴드로네프티아(Dendronephthya) 종 (Den n 1, Den n 1.0101), 데마토파고이데스(Dermatophagoides) 종 (Der f 1, Der f 1.0101, Der f 1.0102, Der f 1.0103, Der f 1.0104, Der f 1.0105, Der f 1.0106, Der f 1.0107, Der f 1.0108, Der f 1.0109, Der f 1.0110, Der f 10, Der f 10.0101, Der f 10.0102, Der f 11, Der f 11.0101, Der f 13, Der f 13.0101, Der f 14, Der f 14.0101, Der f 15, Der f 15.0101, Der f 16, Der f 16.0101, Der f 17, Der f 17.0101, Der f 18, Der f 18.0101, Der f 2, Der f 2.0101, Der f 2.0102, Der f 2.0103, Der f 2.0104, Der f 2.0105, Der f 2.0106, Der f 2.0107, Der f 2.0108, Der f 2.0109, Der f 2.0110, Der f 2.0111, Der f 2.0112, Der f 2.0113, Der f 2.0114, Der f 2.0115, Der f 2.0116, Der f 2.0117, Der f 20, Der f 21, Der f 22, Der f 22.0101, Der f 3, Der f 3.0101, Der f 4, Der f 5, Der f 6, Der f 6.0101, Der f 7, Der f 7.0101, Der f 8, Der f 9, Der f HSP70), 데마니서스(Dermanyssus) 종 (Der g 10, Der g 10.0101), 데마토파고이데스(Dermatophagoides) 종 (Der m 1, Der m 1.0101, Der p 1, Der p 1.0101, Der p 1.0102, Der p 1.0103, Der p 1.0104, Der p 1.0105, Der p 1.0106, Der p 1.0107, Der p 1.0108, Der p 1.0109, Der p 1.0110, Der p 1.0111, Der p 1.0112, Der p 1.0113, Der p 1.0114, Der p 1.0115, Der p 1.0116, Der p 1.0117, Der p 1.0118, Der p 1.0119, Der p 1.0120, Der p 1.0121, Der p 1.0122, Der p 1.0123, Der p 1.0124, Der p 10, Der p 10.0101, Der p 10.0102, Der p 10.0103, Der p 11, Der p 11.0101, Der p 13, Der p 14, Der p 14.0101, Der p 15, Der p 18, Der p 2, Der p 2.0101, Der p 2.0102, Der p 2.0103, Der p 2.0104, Der p 2.0105, Der p 2.0106, Der p 2.0107, Der p 2.0108, Der p 2.0109, Der p 2.0110, Der p 2.0111, Der p 2.0112, Der p 2.0113, Der p 2.0114, Der p 2.0115, Der p 20, Der p 20.0101, Der p 21, Der p 21.0101, Der p 23, Der p 23.0101, Der p 3, Der p 3.0101, Der p 4, Der p 4.0101, Der p 5, Der p 5.0101, Der p 5.0102, Der p 6, Der p 6.0101, Der p 7, Der p 7.0101, Der p 8, Der p 8.0101, Der p 9, Der p 9.0101, Der p 9.0102, Der p P1-P2, Der p P2-P1, Der s 1, Der s 2, Der s 3), 디안투스(Dianthus) 종 (Dia c RIP), 디크라놉테리스(Dicranopteris) 종 (Dic l 2S 알부민), 디오스피로스(Diospyros) 종 (Dio k 17kD, Dio k 4, Dio k IFR), 디오스코레아(Dioscorea) 종 (Dio p TSP), 디플로더스(Diplodus) 종 (Dip ho 1), 디스티클리스(Distichlis) 종 (Dis s 1, Dis s 7), 디트리마(Ditrema) 종 (Dit te 1), 돌리코베스풀라(Dolichovespula) 종 (Dol a 1, Dol a 2, Dol a 5, Dol a 5.0101), 돌리코스(Dolichos) 종 (Dol b 아글루티닌(Agglutinin)), 돌리코베스풀라(Dolichovespula) 종 (Dol m 1, Dol m 1.0101, Dol m 1.02, Dol m 2, Dol m 2.0101, Dol m 5, Dol m 5.0101, Dol m 5.02), 드로소필라(Drosophila) 종 (Dro an 7, Dro an 7.0101, Dro er 7, Dro er 7.0101, Dro er 7.0102, Dro gr 7, Dro gr 7.0101, Dro gr 7.0102, Dro m 7, Dro m 7.0101, Dro m 7.0102, Dro m 7.0103, Dro m 7.0104, Dro m 7.0105, Dro m 7.0106, Dro m 7.0107, Dro m 7.0108, Dro m 7.0109, Dro m 7.0110, Dro m 7.0111, Dro m 7.0112, Dro m 7.0113, Dro m 9, Dro m MnSOD, Dro mo 7, Dro mo 7.0101, Dro pp 7, Dro pp 7.0101, Dro se 7, Dro se 7.0101, Dro si 7, Dro si 7.0101, Dro si 7.0102, Dro vi 7, Dro vi 7.0101, Dro wi 7, Dro wi 7.0101, Dro y 7, Dro y 7.0101, Dro y 7.0102, Dro y 7.0103), 에키움(Echium) 종 (Ech p 시토크롬 C), 엘라이스(Elaeis) 종 (Ela g 2, Ela g Bd31kD), 엘롭스(Elops) 종 (Elo sa 1), 엠브렐리시아(Embellisia) 종 (Emb a 1, Emb i 1, Emb nz 1, Emb t 1), 엔글라우리스(Engraulis) 종 (Eng e 1), 엔테록토푸스(Enteroctopus) 종 (Ent d 1), 에피네펠루스(Epinephelus) 종 (Epi bl 1, Epi co 1, Epi fl 1, Epi mc 1, Epi mo 1), 에피코쿰(Epicoccum) 종 (Epi p 1, Epi p 1.0101, Epi p 12kD, Epi p GST), 에피네펠루스(Epinephelus) 종 (Epi po 1, Epi un 1), 에퀴세툼(Equisetum) 종 (Equ a 17kD), 에쿠스(Equus) 종 (Equ as 4, Equ as DSA, Equ bu 4, Equ c 1, Equ c 1.0101, Equ c 2, Equ c 2.0101, Equ c 2.0102, Equ c 3, Equ c 3.0101, Equ c 4, Equ c 4.0101, Equ c 5, Equ c 5.0101, Equ c ALA, Equ c BLG, Equ c 카세인, Equ c 카세인 베타, Equ c 카세인 카파, Equ c PRVB, Equ he 4, Equ z ZSA), 에리마크루스(Erimacrus) 종 (Eri i 1, Eri i 1.0101, Eri i 1.0102), 에리오케일(Eriocheir) 종 (Eri s 1, Eri s 1.0101, Eri s 2), 어위니아(Erwinia) 종 (Erw ch 아스파라기나제(Asparaginase)), 에스체리키아(Escherichia) 종 (Esc c 아스파라기나제(Asparaginase), Esc c 베타 GAL), 이삭스(Esox) 종 (Eso l 1), 유파우시아(Euphausia) 종 (Eup p 1, Eup p 1.0101), 유파시아(Euphasia) 종 (Eup s 1, Eup s 1.0101), 유로글리퍼스(Euroglyphus) 종 (Eur m 1, Eur m 1.0101, Eur m 1.0102, Eur m 1.0103, Eur m 10, Eur m 14, Eur m 14.0101, Eur m 2, Eur m 2.0101, Eur m 2.0102, Eur m 3, Eur m 3.0101, Eur m 4, Eur m 4.0101), 에빈니스(Evynnis) 종 (Evy j 1), 파고피럼(Fagopyrum) 종 (Fag e 1, Fag e 1.0101, Fag e 10kD, Fag e 19kD, Fag e 2, Fag e 2.0101, Fag e TI), 파거스(Fagus) 종 (Fag s 1, Fag s 1.0101, Fag s 2, Fag s 4), 파고피럼(Fagopyrum) 종 (Fag t 1, Fag t 10kD, Fag t 2, Fag t 2.0101), 펠리스(Felis) 종 (Fel d 1, Fel d 1.0101, Fel d 2, Fel d 2.0101, Fel d 3, Fel d 3.0101, Fel d 4, Fel d 4.0101, Fel d 5, Fel d 5.0101, Fel d 6, Fel d 6.0101, Fel d 7, Fel d 7.0101, Fel d 8, Fel d 8.0101, Fel d IgG), 페네로페네우스(Fenneropenaeus) 종 (Fen c 1, Fen c 2, Fen me 1, Fen me 1.0101), 페스투카(Festuca) 종 (Fes e 1, Fes e 13, Fes e 4, Fes e 5, Fes e 7, Fes p 1, Fes p 13, Fes p 4, Fes p 4.0101, Fes p 5, Fes r 1, Fes r 5), 피커스(Ficus) 종 (Fic c 17kD, Fic c 4, Fic c 피신), 포에니쿨럼(Foeniculum) 종 (Foe v 1, Foe v 2), 폴시티아(Forsythia) 종 (For s 1), 폴시포미아(Forcipomyia) 종 (For t 1, For t 1.0101, For t 2, For t 2.0101, For t 7, For t FPA, For t 미오신, For t TPI), 프라가리아(Fragaria) 종 (Fra a 1, Fra a 1.0101, Fra a 3, Fra a 3.0101, Fra a 3.0102, Fra a 3.0201, Fra a 3.0202, Fra a 3.0203, Fra a 3.0204, Fra a 3.0301, Fra a 4, Fra a 4.0101, Fra c 1), 프락시누스(Fraxinus) 종 (Fra e 1, Fra e 1.0101, Fra e 1.0102, Fra e 1.0201, Fra e 12, Fra e 2, Fra e 3, Fra e 9), 프라가리아(Fragaria) 종 (Fra v 1), 푸사리움(Fusarium) 종 (Fus c 1, Fus c 1.0101, Fus c 2, Fus c 2.0101, Fus c 3, Fus s 1, Fus s 45kD, Fus sp 리파제), 가두스(Gadus) 종 (Gad c 1, Gad c 1.0101, Gad c APDH, Gad m 1, Gad m 1.0101, Gad m 1.0102, Gad m 1.0201, Gad m 1.0202, Gad m 45kD, Gad m 겔라틴, Gad ma 1), 갈러스(Gallus) 종 (Gal d 1, Gal d 1.0101, Gal d 2, Gal d 2.0101, Gal d 3, Gal d 3.0101, Gal d 4, Gal d 4.0101, Gal d 5, Gal d 5.0101, Gal d 6, Gal d 6.0101, Gal d Apo I, Gal d Apo VI, Gal d GPI, Gal d HG, Gal d IgY, Gal d L-PGDS, Gal d 오보뮤신(Ovomucin), Gal d 포스비틴(Phosvitin), Gal d PRVB, Gal la 4), 갈레리아(Galleria) 종 (Gal m 18kD, Gal m 24kD), 갈러스(Gallus) 종 (Gal so 4), 감마러스(Gammarus) 종 (Gam s TM), 겔로니움(Gelonium) 종 (Gel m RIP), 지오텔푸사(Geothelphusa) 종 (Geo de 1), 글로시나(Glossina) 종 (Glo m 5, Glo m 5.0101, Glo m 7, Glo m 7.0101, Glo m 7.0102, Glo m 7.0103), 글리신(Glycine) 종 (Gly a Bd30K, Gly ar Bd30K, Gly ca Bd30K, Gly cl Bd30K, Gly cu Bd30K, Gly cy Bd30K), 글리시파거스(Glycyphagus) 종 (Gly d 10, Gly d 10.0101, Gly d 13, Gly d 2, Gly d 2.0101, Gly d 2.0201, Gly d 2.03, Gly d 2/Lep d 2 L1, Gly d 2/Lep d 2 L2, Gly d 2/Lep d 2 L3, Gly d 2/Lep d 2 L4, Gly d 2/Lep d 2 R1, Gly d 2/Lep d 2 R2, Gly d 2/Lep d 2 R3, Gly d 2/Lep d 2 R4, Gly d 2/Lep d 2 R5, Gly d 20, Gly d 3, Gly d 5, Gly d 5.01, Gly d 5.02, Gly d 7, Gly d 8), 글리신(Glycine) 종 (Gly f Bd30K, Gly l Bd30K, Gly m 1, Gly m 1.0101, Gly m 1.0102, Gly m 2, Gly m 2.0101, Gly m 2S 알부민, Gly m 3, Gly m 3.0101, Gly m 3.0102, Gly m 39kD, Gly m 4, Gly m 4.0101, Gly m 5, Gly m 5.0101, Gly m 5.0201, Gly m 5.0301, Gly m 5.0302, Gly m 50kD, Gly m 6, Gly m 6.0101, Gly m 6.0201, Gly m 6.0301, Gly m 6.0401, Gly m 6.0501, Gly m 68kD, Gly m 아글루티닌, Gly m Bd28K, Gly m Bd30K, Gly m Bd60K, Gly m CPI, Gly m EAP, Gly m TI, Gly mi Bd30K, Gly s Bd30K, Gly t Bd30K, Gly to Bd30K), 가시피움(Gossypium) 종 (Gos h 비실린), 헤모필러스(Haemophilus) 종 (Hae in P6), 헤마피살리스(Haemaphysalis) 종 (Hae l 7, Hae l 7.0101, Hae q 7, Hae q 7.0101), 할리오티스(Haliotis) 종 (Hal a 1, Hal d 1, Hal di 1, Hal di PM, Hal m 1, Hal m 1.0101, Hal r 1, Hal r 49kD, Hal ru 1), 하모니아(Harmonia) 종 (Har a 1, Har a 1.0101, Har a 2, Har a 2.0101), 하페그나토스(Harpegnathos) 종 (Har sa 7, Har sa 7.0101, Har sa 7.0102), 헬리안투스(Helianthus) 종 (Hel a 1, Hel a 1.0101, Hel a 2, Hel a 2.0101, Hel a 2S 알부민, Hel a 3, Hel a 3.0101, Hel a 4), 헬릭스(Helix) 종 (Hel ap 1, Hel as 1, Hel as 1.0101), 헬리그모소모이데스(Heligmosomoides) 종 (Hel p 3, Hel p 3.0101), 헬리안투스(Helianthus) 종 (Hel tu 1), 헤만티아스(Hemanthias) 종 (Hem le 1), 헤미푸서스(Hemifusus) 종 (Hem t 1), 헤테로데라(Heterodera) 종 (Het g 3, Het g 3.0101), 헤베아(Hevea) 종 (Hev b 1, Hev b 1.0101, Hev b 10, Hev b 10.0101, Hev b 10.0102, Hev b 10.0103, Hev b 11, Hev b 11.0101, Hev b 11.0102, Hev b 12, Hev b 12.0101, Hev b 13, Hev b 13.0101, Hev b 14, Hev b 14.0101, Hev b 2, Hev b 2.0101, Hev b 3, Hev b 3.0101, Hev b 4, Hev b 4.0101, Hev b 5, Hev b 5.0101, Hev b 6, Hev b 6.01, Hev b 6.02, Hev b 6.0202, Hev b 6.03, Hev b 7, Hev b 7.01, Hev b 7.02, Hev b 7.D2, Hev b 7.S2, Hev b 8, Hev b 8.0101, Hev b 8.0102, Hev b 8.0201, Hev b 8.0202, Hev b 8.0203, Hev b 8.0204, Hev b 9, Hev b 9.0101, Hev b 구연산 결합 단백질, Hev b GAPDH, Hev b HSP80, Hev b IFR, Hev b 프로테아솜 서브유닛, Hev b 로타마제(Rotamase), Hev b SPI, Hev b Trx, Hev b UDPGP), 헥사그라모스(Hexagrammos) 종 (Hex ot 1), 히포글로서스(Hippoglossus) 종 (Hip h 1), 히포글로소이데스(Hippoglossoides) 종 (Hip pl 1), 히포글로서스(Hippoglossus) 종 (Hip st 1), 히루도(Hirudo) 종 (Hir me 히루딘), 홀커스(Holcus) 종 (Hol l 1, Hol l 1.0101, Hol l 1.0102, Hol l 2, Hol l 4, Hol l 5, Hol l 5.0101, Hol l 5.0201), 홀록네무스(Holocnemus) 종 (Hol pl 9, Hol pl 헤모시아닌(Hemocyanin)), 호마루스(Homarus) 종 (Hom a 1, Hom a 1.0101, Hom a 1.0102, Hom a 1.0103, Hom a 3, Hom a 3.0101, Hom a 4, Hom a 6, Hom a 6.0101, Hom g 1, Hom g 2), 호모(Homo) 종 (Hom s 1, Hom s 1.0101, Hom s 2, Hom s 2.0101, Hom s 3, Hom s 3.0101, Hom s 4, Hom s 4.0101, Hom s 5, Hom s 5.0101, Hom s AAT, Hom s ACTH, Hom s 아달리무맙(Adalimumab), Hom s ALA, Hom s 알파_액틴, Hom s 알파-갈락토시다제, Hom s APDH, Hom s 아릴설파타제(Arylsulfatase) B, Hom s 카세인, Hom s CyP A, Hom s CyP B, Hom s CyP C, Hom s DSF70, Hom s DSG3, Hom s eIF6, Hom s 에타네셉(Etanercept), Hom s 인자 IX, Hom s 인자 VII, Hom s 인자 VIII, Hom s G-CSF, Hom s 글루코세레브로시다제(Glucocerebrosidase), Hom s 글루코시다제(Glucosidase), Hom s HLA-DR-알파, Hom s HSA, Hom s 이두로니다제(Iduronidase), Hom s 이두로설파제(Idursulfase), Hom s IgA, Hom s 인슐린, Hom s 락토페린, Hom s 라미닌 감마_2, Hom s MnSOD, Hom s 옥시토신, Hom s P2, Hom s 포스비틴, Hom s 프로필린, Hom s PSA, Hom s RP1, Hom s TCTP, Hom s TL, Hom s TPA, Hom s TPO, Hom s 트랜스알돌라제(Transaldolase), Hom s Trx, Hom s 튜불린(Tubulin)-알파, Hom s/Mus m 브라실리시맙(Basiliximab), Hom s/Mus m 세툭시맙(Cetuximab), Hom s/Mus m 세툭시맙 (Gal-Gal), Hom s/Mus m 인플릭시맙(Infliximab), Hom s/Mus m 나탈리주맙(Natalizumab), Hom s/Mus m 오말리주맙(Omalizumab), Hom s/Mus m 팔리비주맙(Palivizumab), Hom s/Mus m 리툭시맙(Rituximab), Hom s/Mus m 토실리주맙(Tocilizumab), Hom s/Mus m 트라투주맙(Trastuzumab)), 홉로스데투스(Hoplostethus) 종 (Hop a 1), 홀데움(Hordeum) 종 (Hor v 1, Hor v 12, Hor v 12.0101, Hor v 13, Hor v 14, Hor v 15, Hor v 15.0101, Hor v 16, Hor v 16.0101, Hor v 17, Hor v 17.0101, Hor v 18kD, Hor v 2, Hor v 21, Hor v 21.0101, Hor v 28, Hor v 33, Hor v 4, Hor v 5, Hor v 5.0101, Hor v BDAI, Hor v BTI), 후미콜라(Humicola) 종 (셀룰라제 내 Hum), 후물러스(Humulus) 종 (Hum j 1, Hum j 1.0101, Hum j 10kD, Hum j 2), 후소(Huso) 종 (Hus h 1), 힐로세레우스(Hylocereus) 종 (Hyl un LTP), 히메노세팔러스(Hymenocephalus) 종 (Hym st 1), 히페로글리페(Hyperoglyphe) 종 (Hyp by 1), 히포프탈미치크스(Hypophthalmichthys) 종 (Hyp mo 1), 히포프탈미크티(Hypophthalmichthy) 종 (Hyp no 1), 이크탈루러스(Ictalurus) 종 (Ict fu 1, Ict p 1), 임페라타(Imperata) 종 (Imp c 4, Imp c 5, Imp c VIIIe1), 익소데스(Ixodes) 종 (Ixo r 2, Ixo sc 7, Ixo sc 7.0101), 야수스(Jasus) 종 (Jas la 1, Jas la 1.0101, Jas la 1.0102), 주글란스(Juglans) 종 (Jug ca 1, Jug ca 2, Jug ci 1, Jug ci 2, Jug n 1, Jug n 1.0101, Jug n 2, Jug n 2.0101, Jug r 1, Jug r 1.0101, Jug r 2, Jug r 2.0101, Jug r 3, Jug r 3.0101, Jug r 4, Jug r 4.0101, Jug r 5), 주니페루스(Juniperus) 종 (Jun a 1, Jun a 1.0101, Jun a 1.0102, Jun a 2, Jun a 2.0101, Jun a 3, Jun a 3.0101, Jun c 1, Jun o 1, Jun o 4, Jun o 4.0101, Jun r 3, Jun r 3.1, Jun r 3.2, Jun v 1, Jun v 1.0101, Jun v 1.0102, Jun v 3, Jun v 3.0101, Jun v 3.0102, Jun v 4), 카츄워너스(Katsuwonus) 종 (Kat p 1), 키포서스(Kyphosus) 종 (Kyp se 1), 라크노라이무스(Lachnolaimus) 종 (Lac ma 1), 라체시스(Lachesis) 종 (Lac mu 1), 락투카(Lactuca) 종 (Lac s 1, Lac s 1.0101), 라고세팔러스(Lagocephalus) 종 (Lag la 1), 라루스(Larus) 종 (Lar a 1, Lar a 2, Lar a 3), 라리미크티스(Larimichthys) 종 (Lar po 1), 라테스(Lates) 종 (Lat c 1), 라테올라브락스(Lateolabrax) 종 (Lat ja 1), 라티러스(Lathyrus) 종 (Lat oc 아글루티닌), 레이오스토무스(Leiostomus) 종 (Lei xa 1), 렌스(Lens) 종 (Len c 1, Len c 1.0101, Len c 1.0102, Len c 1.0103, Len c 2, Len c 2.0101, Len c 3, Len c 3.0101, Len c 아글루티닌), 레오파더스(Leopardus) 종 (Leo p 1), 레피도글리푸스(Lepidoglyphus) 종 (Lep d 10, Lep d 10.0101, Lep d 12, Lep d 13, Lep d 13.0101, Lep d 2, Lep d 2.0101, Lep d 2.0102, Lep d 2.0201, Lep d 2.0202, Lep d 3, Lep d 39kD, Lep d 5, Lep d 5.0101, Lep d 5.0102, Lep d 5.0103, Lep d 7, Lep d 7.0101, Lep d 8, Lep d 알파 튜불린), 레포미스(Lepomis) 종 (Lep gi 1), 렙토멜라노소마(Leptomelanosoma) 종 (Lep i 1), 레포미스(Lepomis) 종 (Lep ma 1), 레피스마(Lepisma) 종 (Lep s 1, Lep s 1.0101, Lep s 1.0102), 레피오프테이러스(Lepeophtheirus) 종 (Lep sa 1, Lep sa 1.0101, Lep sa 1.0102, Lep sa 1.0103), 렙타일루러스(Leptailurus) 종 (Lep se 1), 레피도롬버스(Lepidorhombus) 종 (Lep w 1, Lep w 1.0101), 레토세러스(Lethocerus) 종 (Let in 7, Let in 7.0101, Let in 7.0102), 레우시스커스(Leuciscus) 종 (Leu ce 1), 레위아(Lewia) 종 (Lew in 1), 리거스트럼(Ligustrum) 종 (Lig v 1, Lig v 1.0101, Lig v 1.0102, Lig v 2), 릴리움(Lilium) 종 (Lil l 2, Lil l PG), 리만다(Limanda) 종 (Lim fe 1), 림노넥테스(Limnonectes) 종 (Lim m 1), 리물러스(Limulus) 종 (Lim p 1, Lim p 1.0101, Lim p 2, Lim p LPA), 리포스셀리스(Liposcelis) 종 (Lip b 1, Lip b 1.0101), 릿치(Litchi) 종 (Lit c 1, Lit c 1.0101, Lit c IFR, Lit c TPI), 리토바테스(Lithobates) 종 (Lit ca 1), 리토페나에우스(Litopenaeus) 종 (Lit se 1, Lit v 1, Lit v 1.0101, Lit v 2, Lit v 2.0101, Lit v 3, Lit v 3.0101, Lit v 4, Lit v 4.0101), 필리아리아(Filiaria) 종 (Loa lo 3, Loa lo 3.0101), 로보테스(Lobotes) 종 (Lob su 1), 로커스타(Locusta) 종 (Loc m 7, Loc m 7.0101), 로리고(Loligo) 종 (Lol b 1, Lol e 1), 롤리움(Lolium) 종 (Lol m 2, Lol m 5, Lol p 1, Lol p 1.0101, Lol p 1.0102, Lol p 1.0103, Lol p 10, Lol p 11, Lol p 11.0101, Lol p 12, Lol p 13, Lol p 2, Lol p 2.0101, Lol p 3, Lol p 3.0101, Lol p 4, Lol p 4.0101, Lol p 5, Lol p 5.0101, Lol p 5.0102, Lol p 7, Lol p CyP, Lol p FT, Lol p 레구민(Legumin)), 로노미아(Lonomia) 종 (Lon o 7, Lon o 7.0101), 로포디테스(Lophodytes) 종 (Lop cu 1), 로포네타(Lophonetta) 종 (Lop sp 1), 루피누스(Lupinus) 종 (Lup a 1, Lup a 알파_콩글루틴(Conglutin), Lup a 델타_콩글루틴, Lup a 감마_콩글루틴, Lup an 1, Lup an 1.0101, Lup an 알파_콩글루틴, Lup an 델타_콩글루틴, Lup an 감마_ 콩글루틴 , Lup l 17kD), 루트야누스(Lutjanus) 종 (Lut a 1, Lut c 1, Lut cy 1, Lut gr 1, Lut gu 1, Lut jo 1), 루트라리아(Lutraria) 종 (Lut p 1), 루트야누스(Lutjanus) 종 (Lut pu 1, Lut sy 1), 리코페시콘(Lycopersicon) 종 (Lyc e 1, Lyc e 1.0101, Lyc e 11S 글로불린, Lyc e 2, Lyc e 2.0101, Lyc e 2.0102, Lyc e 3, Lyc e 3.0101, Lyc e 4, Lyc e 4.0101, Lyc e ARP60S, Lyc e 키티나제, Lyc e 글루카나제, Lyc e 퍼옥시다제, Lyc e PG, Lyc e PME, Lyc e PR23, Lyc e 비실린), 마코넬리코커스(Maconellicoccus) 종 (Mac h 7, Mac h 7.0101), 마크루로누스(Macruronus) 종 (Mac ma 1, Mac n 1), 마크룰라(Maclura) 종 (Mac po 17kD), 마크로브라키움(Macrobrachium) 종 (Mac ro 1, Mac ro 1.0101, Mac ro 헤모시아닌), 마크로퍼스(Macropus) 종 (Macr s 젤라틴), 말러스(Malus) 종 (Mal d 1, Mal d 1.0101, Mal d 1.0102, Mal d 1.0103, Mal d 1.0104, Mal d 1.0105, Mal d 1.0106, Mal d 1.0107, Mal d 1.0108, Mal d 1.0109, Mal d 1.0201, Mal d 1.0202, Mal d 1.0203, Mal d 1.0204, Mal d 1.0205, Mal d 1.0206, Mal d 1.0207, Mal d 1.0208, Mal d 1.0301, Mal d 1.0302, Mal d 1.0303, Mal d 1.0304, Mal d 1.0401, Mal d 1.0402, Mal d 1.0403, Mal d 2, Mal d 2.0101, Mal d 3, Mal d 3.0101, Mal d 3.0102, Mal d 3.0201, Mal d 3.0202, Mal d 3.0203, Mal d 4, Mal d 4.0101, Mal d 4.0102, Mal d 4.0201, Mal d 4.0202, Mal d 4.0301, Mal d 4.0302), 마피기아(Malpighia) 종 (Mal g 4, Mal g Hevein), 말러스(Malus) 종 (Mal p 1), 말라세지아(Malassezia) 종 (Mala f 2, Mala f 2.0101, Mala f 3, Mala f 3.0101, Mala f 4, Mala f 4.0101, Mala g 10, Mala s 1, Mala s 1.0101, Mala s 10, Mala s 10.0101, Mala s 11, Mala s 11.0101, Mala s 12, Mala s 12.0101, Mala s 13, Mala s 13.0101, Mala s 5, Mala s 5.0101, Mala s 6, Mala s 6.0101, Mala s 7, Mala s 7.0101, Mala s 8, Mala s 8.0101, Mala s 9, Mala s 9.0101), 마니홋(Manihot) 종 (Man e 5, Man e 5.0101, Man e FPA, Man e GAPDH), 만기페라(Mangifera) 종 (Man i 1, Man i 14kD, Man i 2, Man i 3, Man i 3.01, Man i 3.02, Man i 키티나제), 마서페나에우스(Marsupenaeus) 종 (Mar j 1, Mar j 1.0101, Mar j 2, Mar j 4), 마트리카리아(Matricaria) 종 (Mat c 17kD), 메코포다(Mecopoda) 종 (Mec e 7), 메갈로브라마(Megalobrama) 종 (Meg am 2, Meg am CK), 메가투라(Megathura) 종 (Meg c 헤모시아닌(Hemocyanin)), 메갈롭스(Megalops) 종 (Meg sp 1), 멜라노글라무스(Melanogrammus) 종 (Mel a 1), 멜레아그리스(Meleagris) 종 (Mel g 1, Mel g 2, Mel g 3, Mel g PRVB, Mel g TSA), 멜리세투스(Melicertus) 종 (Mel l 1), 멘티실허스(Menticirrhus) 종 (Men am 1), 멜쿠리알리스(Mercurialis) 종 (Mer a 1, Mer a 1.0101), 멜루시우스(Merluccius) 종 (Mer ap 1, Mer au 1, Mer bi 1, Mer ca 1, Mer ga 1, Mer hu 1), 멜란기우스(Merlangius) 종 (Mer me 1), 멜루시우스(Merluccius) 종 (Mer mr 1, Mer pa 1, Mer po 1, Mer pr 1, Mer se 1), 메리오네스(Meriones) 종 (Mer un 23kD), 메타히지움(Metarhizium) 종 (Met a 30), 메타페네옵시스(Metapenaeopsis) 종 (Met ba 1), 메타페네우스(Metapenaeus) 종 (Met e 1, Met e 1.0101, Met e 2), 메테세퀘이아(Metasequoia) 종 (Met gl 2), 메타페네우스(Metapenaeus) 종 (Met j 1, Met j 2), 메타네프롭스(Metanephrops) 종 (Met ja 1), 메타페네옵시스(Metapenaeopsis) 종 (Met la 1), 메타네프롭스(Metanephrops) 종 (Met t 2), 마이크로메시스티우스(Micromesistius) 종 (Mic po 1), 마이크로포고니아스(Micropogonias) 종 (Mic un 1), 미마클라미스(Mimachlamys) 종 (Mim n 1), 모몰디카(Momordica) 종 (Mom c RIP), 모루스(Morus) 종 (Mor a 17kD, Mor a 4), 모로네(Morone) 종 (Mor am 1), 모러스(Morus) 종 (Mor n 3, Mor n 3.0101), 모로네(Morone) 종 (Mor sa 1, Mor sc 1), 머질(Mugil) 종 (Mug c 1), 무레놀레피스(Muraenolepis) 종 (Mur mi 1), 무사(Musa) 종 (Mus a 1, Mus a 1.0101, Mus a 2, Mus a 2.0101, Mus a 3, Mus a 3.0101, Mus a 4, Mus a 4.0101, Mus a 5, Mus a 5.0101, Mus a 5.0102), 무스(Mus) 종 (Mus m 1, Mus m 1.0101, Mus m 1.0102, Mus m 2, Mus m Gelatin, Mus m IgG, Mus m MSA, Mus m 무로모납(Muromonab), Mus m 포스비틴(Phosvitin)), 무스텔라(Mustela) 종 (Mus p 17kD), 무사(Musa) 종 (Mus xp 1, Mus xp 2, Mus xp 5), 미크테로페르카(Mycteroperca) 종 (Myc bo 1, Myc mi 1, Myc ph 1), 미셀리오프토라(Myceliophthora) 종 (Myc sp 락카제(Laccase)), 미르메시아(Myrmecia) 종 (Myr p 1, Myr p 1.0101, Myr p 2, Myr p 2.0101, Myr p 2.0102, Myr p 3, Myr p 3.0101), 미틸러스(Mytilus) 종 (Myt e 1, Myt g 1, Myt g PM), 미주스(Myzus) 종 (Myz p 7, Myz p 7.0101), 네모헤두스(Nemorhedus) 종 (Nae go Hya), 네카터(Necator) 종 (Nec a 칼레티쿨린(Calreticulin)), 네밉테루스(Nemipterus) 종 (Nem vi 1), 네오사토리아(Neosartorya) 종 (Neo fi 1, Neo fi 22), 네오첸(Neochen) 종 (Neo ju 1), 네오스코나(Neoscona) 종 (Neo n 7, Neo n 7.0101), 네펠리엄(Nephelium) 종 (Nep l GAPDH), 네프롭스(Nephrops) 종 (Nep n 1, Nep n DF9), 넵투니아(Neptunea) 종 (Nep po 1, Nep po 1.0101), 니코티아나(Nicotiana) 종 (Nic t 8, Nic t 오스모틴(Osmotin), Nic t 빌린(Villin)), 님비아(Nimbya) 종 (Nim c 1, Nim s 1), 니포스트롱길루스(Nippostrongylus) 종 (Nip b Ag1), 닉티세부스(Nycticebus) 종 (Nyc c 1), 옥토퍼스(Octopus) 종 (Oct f 1, Oct l 1, Oct v 1, Oct v 1.0101, Oct v PM), 오시우러스(Ocyurus) 종 (Ocy ch 1), 올레아(Olea) 종 (Ole e 1, Ole e 1.0101, Ole e 1.0102, Ole e 1.0103, Ole e 1.0104, Ole e 1.0105, Ole e 1.0106, Ole e 1.0107, Ole e 10, Ole e 10.0101, Ole e 11, Ole e 11.0101, Ole e 11.0102, Ole e 12, Ole e 13, Ole e 2, Ole e 2.0101, Ole e 3, Ole e 3.0101, Ole e 36kD, Ole e 4, Ole e 4.0101, Ole e 5, Ole e 5.0101, Ole e 6, Ole e 6.0101, Ole e 7, Ole e 7.0101, Ole e 8, Ole e 8.0101, Ole e 9, Ole e 9.0101), 옴마스트레페스(Ommastrephes) 종 (Omm b 1, Omm b 1.0101), 온코힌츄스(Oncorhynchus) 종 (Onc ke 1, Onc ke 18 kD, Onc ke 알파2I, Onc ke 비텔로게닌(Vitellogenin), Onc m 1, Onc m 1.0101, Onc m 1.0201, Onc m 알파2I, Onc m 프로타민(Protamine), Onc m 비텔로게닌(Vitellogenin), Onc ma 1, Onc ma FPA, Onc ma FSA, Onc ma TPI, Onc n 1), 온코셀카(Onchocerca) 종 (Onc o 3, Onc o 3.0101), 온코힌츄스(Oncorhynchus) 종 (Onc ts 1), 온코셀카(Onchocerca) 종 (Onc v 3, Onc v 3.0101), 오라토스퀼라(Oratosquilla) 종 (Ora o 1, Ora o 1.0101), 오레오크로미스(Oreochromis) 종 (Ore a 1, Ore mo 1, Ore mo 2, Ore mo FPA, Ore mo SCAF7145, Ore ni 1, Ore ni 18kD, Ore ni 45kD), 올니토니서스(Ornithonyssus) 종 (Orn sy 10, Orn sy 10.0101, Orn sy 10.0102), 올리토라구스(Oryctolagus) 종 (Ory c 1, Ory c 1.0101, Ory c 2, Ory c 카세인, Ory c 포스비틴(Phosvitin), Ory c RSA), 오리자(Oryza) 종 (Ory s 1, Ory s 1.0101, Ory s 11, Ory s 12, Ory s 12.0101, Ory s 13, Ory s 14, Ory s 17kD, Ory s 19kD, Ory s 2, Ory s 23, Ory s 3, Ory s 7, Ory s aA_TI, Ory s GLP52, Ory s GLP63, Ory s 글리옥살라제(Glyoxalase) I, Ory s NRA), 오스트리아(Ostrya) 종 (Ost c 1, Ost c 1.0101), 오비스(Ovis) 종 (Ovi a ALA, Ovi a BLG, Ovi a 카세인, Ovi a 카세인 알파S1, Ovi a 카세인 알파S2, Ovi a 카세인 베타, Ovi a 카세인 카파, Ovi a 포스비틴, Ovi a SSA), 파키콘딜라(Pachycondyla) 종 (Pac c 3), 파그루스(Pagrus) 종 (Pag m 1, Pag pa 1), 팜푸스(Pampus) 종 (Pam ar 1, Pam c 1), 판달루스(Pandalus) 종 (Pan b 1, Pan b 1.0101), 판가시우스(Pangasius) 종 (Pan bo 1), 판둘루스 종 (Pan e 1, Pan e 1.0101, Pan e 4), 파눌리루스(Panulirus) 종 (Pan h 1, Pan hy 1), 팡가시우스(Pangasius) 종 (Pan hy 18kD, Pan hy 45kD), 파눌리루스 종 (Pan j 1), 판테라(Panthera) 종 (Pan l 1, Pan o 1, Pan p 1), 파눌리루스 종 (Pan s 1, Pan s 1.0101), 판테라 종 (Pan t 1), 판(Pan) 종 (Pan tr TCTP), 파파벌(Papaver) 종 (Pap s 17kD, Pap s 2, Pap s 34kD), 파필리오(Papilio) 종 (Pap xu 7, Pap xu 7.0101, Pap xu 7.0102), 파라리크티스(Paralichthys) 종 (Par a 1), 파라실루러스(Parasilurus) 종 (Par as 1, Par c 1), 파라리토데스(Paralithodes) 종 (Par c 1.0101, Par c 1.0102, Par f 1), 파테니움(Parthenium) 종 (Par h 1), 파리에타리아(Parietaria) 종 (Par j 1, Par j 1.0101, Par j 1.0102, Par j 1.0103, Par j 1.0201, Par j 2, Par j 2.0101, Par j 2.0102, Par j 3, Par j 3.0101, Par j 3.0102, Par j 4, Par j 4.0101, Par j J1-J2), 파라리크티스(Paralichthys) 종 (Par le 1), 파리에타리아(Parietaria) 종 (Par m 1, Par o 1, Par o 1.0101), 파라리크티스 종 (Par ol 1, Par ol 알파2I), 파라후초(Parahucho) 종 (Par pe 비텔로게닌(Vitellogenin)), 파시플로라(Passiflora) 종 (Pas e 키티나제, Pas e 헤베인(Hevein)), 파스팔룸(Paspalum) 종 (Pas n 1, Pas n 1.0101, Pas n 13), 피티노펙텐(Patinopecten) 종 (Pat y 1), 페디쿨러스(Pediculus) 종 (Ped h 7, Ped h 7.0101), 페네우스(Penaeus) 종 (Pen a 1, Pen a 1.0101, Pen a 1.0102, Pen a 1.0102 (103-117), Pen a 1.0102 (109-123), Pen a 1.0102 (1-15), Pen a 1.0102 (115-129), Pen a 1.0102 (121-135), Pen a 1.0102 (127-141), Pen a 1.0102 (13-27), Pen a 1.0102 (133-147), Pen a 1.0102 (139-153), Pen a 1.0102 (145-159)), 파펜테페네우스(Farfantepenaeus) 종 (Pen a 1.0102 (151-165)), 페네우스(Penaeus) 종 (Pen a 1.0102 (157-171), Pen a 1.0102 (163-177), Pen a 1.0102 (169-183), Pen a 1.0102 (175-189), Pen a 1.0102 (181-195), Pen a 1.0102 (187-201), Pen a 1.0102 (193-207), Pen a 1.0102 (19-33), Pen a 1.0102 (199-213), Pen a 1.0102 (205-219), Pen a 1.0102 (211-225), Pen a 1.0102 (217-231), Pen a 1.0102 (223-237), Pen a 1.0102 (229-243)), 파펜테페네우스 종 (Pen a 1.0102 (235-249)), 페네우스 종 (Pen a 1.0102 (241-255), Pen a 1.0102 (247-261), Pen a 1.0102 (253-267), Pen a 1.0102 (25-39), Pen a 1.0102 (259-273), Pen a 1.0102 (265-279), Pen a 1.0102 (270-284), Pen a 1.0102 (31-45), Pen a 1.0102 (37-51), Pen a 1.0102 (43-57), Pen a 1.0102 (49-63)), 파펜테페네우스 종 (Pen a 1.0102 (55-69)), 페네우스 종 (Pen a 1.0102 (61-75), Pen a 1.0102 (67-81), Pen a 1.0102 (7-21), Pen a 1.0102 (73-87), Pen a 1.0102 (79-93), Pen a 1.0102 (85-99), Pen a 1.0102 (91-105), Pen a 1.0102 (97-111), Pen a 1.0103), 페니실리움(Penicillium) 종 (Pen b 13, Pen b 13.0101, Pen b 26, Pen b 26.0101, Pen c 1, Pen c 13, Pen c 13.0101, Pen c 18, Pen c 19, Pen c 19.0101, Pen c 2, Pen c 22, Pen c 22.0101, Pen c 24, Pen c 24.0101, Pen c 3, Pen c 3.0101, Pen c 30, Pen c 30.0101, Pen c 32, Pen c 32.0101, Pen c MnSOD, Pen ch 13, Pen ch 13.0101, Pen ch 18, Pen ch 18.0101, Pen ch 20, Pen ch 20.0101, Pen ch 31, Pen ch 31.0101, Pen ch 33, Pen ch 33.0101, Pen ch 35, Pen ch 35.0101, Pen ch MnSOD), 페네우스 종 (Pen i 1, Pen i 1.0101, Pen m 1, Pen m 1.0101, Pen m 1.0102, Pen m 2, Pen m 2.0101, Pen m 3, Pen m 3.0101, Pen m 4, Pen m 4.0101, Pen m 6, Pen m 6.0101), 페니실리움 종 (Pen o 18, Pen o 18.0101), 페네우스 종 (Pena o 1, Pena o 1.0101), 페리플라네타(Periplaneta) 종 (Per a 1, Per a 1.0101, Per a 1.0102, Per a 1.0103, Per a 1.0104, Per a 1.0105, Per a 1.0201, Per a 10, Per a 10.0101, Per a 2, Per a 3, Per a 3.0101, Per a 3.0201, Per a 3.0202, Per a 3.0203, Per a 4, Per a 5, Per a 6, Per a 6.0101, Per a 7, Per a 7.0101, Per a 7.0102, Per a 7.0103, Per a 9, Per a 9.0101, Per a 카뎁신(Cathepsin), Per a FABP, Per a 트립신, Per f 1, Per f 7, Per f 7.0101), 페르나(Perna) 종 (Per v 1), 페르세아(Persea) 종 (Pers a 1, Pers a 1.0101, Pers a 4), 페트로셀리눔(Petroselinum) 종 (Pet c 1, Pet c 2, Pet c 3), 팔라리스(Phalaris) 종 (Pha a 1, Pha a 1.0101, Pha a 5, Pha a 5.0101, Pha a 5.02, Pha a 5.03, Pha a 5.04), 파세울러스(Phaseolus) 종 (Pha v 3, Pha v 3.0101, Pha v 3.0201, Pha v aAI, Pha v aAI.0101, Pha v 키티나제, Pha v PHA, Pha v 파세올린(Phaseolin)), 플레움(Phleum) 종 (Phl p 1, Phl p 1.0101, Phl p 1.0102, Phl p 11, Phl p 11.0101, Phl p 12, Phl p 12.0101, Phl p 12.0102, Phl p 12.0103, Phl p 13, Phl p 13.0101, Phl p 2, Phl p 2.0101, Phl p 3, Phl p 3.0101, Phl p 3.0102, Phl p 4, Phl p 4.0101, Phl p 4.0102, Phl p 4.0201, Phl p 4.0202, Phl p 4.0203, Phl p 4.0204, Phl p 5, Phl p 5.0101, Phl p 5.0102, Phl p 5.0103, Phl p 5.0104, Phl p 5.0105, Phl p 5.0106, Phl p 5.0107, Phl p 5.0108, Phl p 5.0109, Phl p 5.0201, Phl p 5.0202, Phl p 5.0203, Phl p 5.0204, Phl p 5.0205, Phl p 5.0206, Phl p 5.0207, Phl p 6, Phl p 6.0101, Phl p 6.0102, Phl p 7, Phl p 7.0101, Phl p P1-P2-P5-P6, Phl p P2-P6, Phl p P5-P1, Phl p P6-P2), 피닉스(Phoenix) 종 (Pho d 2, Pho d 2.0101, Pho d 40kD, Pho d 90kD), 포도퍼스(Phodopus) 종 (Pho s 21kD), 포마(Phoma) 종 (Pho t 1), 프라그미테스(Phragmites) 종 (Phr a 1, Phr a 12, Phr a 13, Phr a 4, Phr a 5), 피토락카(Phytolacca) 종 (Phy a RIP), 핌피넬라(Pimpinella) 종 (Pim a 1, Pim a 2), 피나(Pinna) 종 (Pin a 1), 파이퍼(Piper) 종 (Pip n 14kD, Pip n 28kD), 피숨(Pisum) 종 (Pis s 1, Pis s 1.0101, Pis s 1.0102, Pis s 2, Pis s 2.0101, Pis s 5, Pis s 아글로티닌, Pis s 알부민), 피스타시아(Pistacia) 종 (Pis v 1, Pis v 1.0101, Pis v 2, Pis v 2.0101, Pis v 2.0201, Pis v 3, Pis v 3.0101, Pis v 4, Pis v 4.0101, Pis v 5, Pis v 5.0101), 플라타너스(Platanus) 종 (Pla a 1, Pla a 1.0101, Pla a 2, Pla a 2.0101, Pla a 3, Pla a 3.0101, Pla a 8), 플라티크티스(Platichthys) 종 (Pla f 1), 플란타고(Plantago) 종 (Pla l 1, Pla l 1.0101, Pla l 1.0102, Pla l 1.0103, Pla l 시토크롬 C), 플라타너스(Platanus) 종 (Pla oc 1, Pla or 1, Pla or 1.0101, Pla or 2, Pla or 2.0101, Pla or 3, Pla or 3.0101, Pla or 4, Pla or CyP, Pla r 1), 플렉트로포머스(Plectropomus) 종 (Ple ar 1), 플레오스포라(Pleospora) 종 (Ple h 1), 플렉트로포머스 종 (Ple le 1), 플로디아(Plodia) 종 (Plo i 1, Plo i 1.0101, Plo i 2, Plo i 2.0101), 포아(Poa) 종 (Poa p 1, Poa p 1.0101, Poa p 10, Poa p 12, Poa p 13, Poa p 2, Poa p 4, Poa p 5, Poa p 5.0101, Poa p 6, Poa p 7), 폴리스테스(Polistes) 종 (Pol a 1, Pol a 1.0101, Pol a 2, Pol a 2.0101, Pol a 5, Pol a 5.0101, Pol d 1, Pol d 1.0101, Pol d 1.0102, Pol d 1.0103, Pol d 1.0104, Pol d 4, Pol d 4.0101, Pol d 5, Pol d 5.0101, Pol e 1, Pol e 1.0101, Pol e 2, Pol e 4, Pol e 4.0101, Pol e 5, Pol e 5.0101, Pol f 5, Pol f 5.0101, Pol g 1, Pol g 1.0101, Pol g 2, Pol g 4, Pol g 5, Pol g 5.0101, Pol he MLT, Pol m 5, Pol m 5.0101), 폴리페딜럼(Polypedilum) 종 (Pol n 1), 폴리시페스(Pollicipes) 종 (Pol po 1), 폴라키우스(Pollachius) 종 (Pol vi 1), 폴리비아(Polybia) 종 (Poly p 1, Poly p 1.0101, Poly p 2, Poly p 5, Poly s 5, Poly s 5.0101), 포마토머스(Pomatomus) 종 (Pom sa 1), 폰고(Pongo) 종 (Pon ab HSA), 폰타스타커스(Pontastacus) 종 (Pon l 4, Pon l 4.0101, Pon l 7, Pon l 7.0101), 포르터너스(Portunus) 종 (Por s 1, Por s 1.0101, Por s 1.0102, Por tr 1, Por tr 1.0101), 프로토토니아(Protortonia) 종 (Pro ca 38kD), 프로컴바루스(Procumbarus) 종 (Pro cl 1, Pro cl 1.0101, Pro cl 21kD), 프로소피스(Prosopis) 종 (Pro j 20kD), 프루너스(Prunus) 종 (Pru ar 1, Pru ar 1.0101, Pru ar 3, Pru ar 3.0101, Pru av 1, Pru av 1.0101, Pru av 1.0201, Pru av 1.0202, Pru av 1.0203, Pru av 2, Pru av 2.0101, Pru av 3, Pru av 3.0101, Pru av 4, Pru av 4.0101, Pru c 1, Pru d 1, Pru d 2, Pru d 3, Pru d 3.0101, Pru d 4, Pru du 1, Pru du 2, Pru du 2S 알부민, Pru du 3, Pru du 3.0101, Pru du 4, Pru du 4.0101, Pru du 4.0102, Pru du 5, Pru du 5.0101, Pru du 6, Pru du 6.0101, Pru du 6.0201, Pru du 콩글루틴(Conglutin), Pru p 1, Pru p 1.0101, Pru p 2, Pru p 2.0101, Pru p 2.0201, Pru p 2.0301, Pru p 3, Pru p 3.0101, Pru p 3.0102, Pru p 4, Pru p 4.0101, Pru p 4.0201, Pru sa 3), 실로시베(Psilocybe) 종 (Psi c 1, Psi c 1.0101, Psi c 2, Psi c 2.0101), 소롭테스(Psoroptes) 종 (Pso o 1, Pso o 10, Pso o 10.0101, Pso o 11, Pso o 13, Pso o 14, Pso o 2, Pso o 21, Pso o 3, Pso o 5, Pso o 7), 푸마(Puma) 종 (Pum c 1), 푸니카(Punica) 종 (Pun g 3), 피루스(Pyrus) 종 (Pyr c 1, Pyr c 1.0101, Pyr c 3, Pyr c 3.0101, Pyr c 4, Pyr c 4.0101, Pyr c 5, Pyr c 5.0101, Pyr py 2), 퀘르커스(Quercus) 종 (Que a 1, Que a 1.0101, Que a 1.0201, Que a 1.0301, Que a 1.0401, Que a 2, Que a 4), 라키센트론(Rachycentron) 종 (Rac ca 1), 라나(Rana) 종 (Ran e 1, Ran e 1.0101, Ran e 2, Ran e 2.0101), 라니나(Ranina) 종 (Ran ra 1), 랑지펠(Rangifer) 종 (Ran t BLG), 라투스(Rattus) 종 (Rat n 1, Rat n 1.0101, Rat n 카세인, Rat n 겔라틴, Rat n IgG, Rat n 포스비틴, Rat n RSA, Rat n 트랜스페린), 리조뮤콜(Rhizomucor) 종 (Rhi m AP), 리조푸스(Rhizopus) 종 (Rhi nv Lipase, Rhi o Lipase), 롬봅리테스(Rhomboplites) 종 (Rho au 1), 로도토룰라(Rhodotorula) 종 (Rho m 1, Rho m 1.0101, Rho m 2, Rho m 2.0101), 리시너스(Ricinus) 종 (Ric c 1, Ric c 1.0101, Ric c 2, Ric c 3, Ric c 8, Ric c RIP), 리풀러스(Rivulus) 종 (Riv ma 1), 로비니아(Robinia) 종 (Rob p 2, Rob p 4, Rob p 글루카나제), 로사(Rosa) 종 (Ros r 3), 로이스토니아(Roystonea) 종 (Roy e 2), 루버스(Rubus) 종 (Rub i 1, Rub i 1.0101, Rub i 3, Rub i 3.0101, Rub i 키티나제, Rub i CyP), 사카로미세스(Saccharomyces) 종 (Sac c 카르복시펩티다제 Y, Sac c CyP, Sac c 에놀라제, Sac c 글루코시다제, Sac c 인버타제, Sac c MnSOD, Sac c P2, Sac c 프로필린), 살베리누스(Salvelinus) 종 (Sal f 1), 살솔라(Salsola) 종 (Sal k 1, Sal k 1.0101, Sal k 1.0201, Sal k 1.0301, Sal k 1.0302, Sal k 2, Sal k 2.0101, Sal k 3, Sal k 3.0101, Sal k 4, Sal k 4.0101, Sal k 4.0201, Sal k 5, Sal k 5.0101), 살베리누스 종 (Sal le 비텔로게닌), 살모 종 (Sal s 1, Sal s 1.0101, Sal s 1.0201, Sal s 2, Sal s 2.0101, Sal s 겔라틴), 삼부커스(Sambucus) 종 (Sam n 1), 샌더(Sander) 종 (San lu 1), 사포나리아(Saponaria) 종 (Sap o RIP), 사디놉스(Sardinops) 종 (Sar m 1), 사키디오니스(Sarkidiornis) 종 (Sar ml 1), 살디나(Sardina) 종 (Sar p 1), 살콥테스(Sarcoptes) 종 (Sar s 1, Sar s 14, Sar s 3, Sar s GST, Sar s PM), 살디놉스(Sardinops) 종 (Sar sa 1, Sar sa 1.0101), 스키스토소마(Schistosoma) 종 (Sch j GST, Sch j PM, Sch j Sj22, Sch j Sj67, Sch ma Sm20, Sch ma Sm21, Sch ma Sm22, Sch ma Sm31), 시아에놉스(Sciaenops) 종 (Sci oc 1), 스콤버(Scomber) 종 (Sco a 1), 스콤베모루스(Scombermorus) 종 (Sco ca 1), 스콤베로모루스(Scomberomorus) 종 (Sco g 1), 스콤버 종 (Sco j 1, Sco ma 1, Sco s 1), 스콜로펜드라(Scolopendra) 종 (Sco y 7, Sco y 7.0101), 실라(Scylla) 종 (Scy o 1, Scy o 1.0101, Scy o 2, Scy pa 1, Scy pa 2, Scy s 1, Scy s 1.0101, Scy s 2), 세바스테스(Sebastes) 종 (Seb fa 1, Seb in 1, Seb m 1, Seb m 1.0101, Seb m 1.0201), 세칼레(Secale) 종 (Sec c 1, Sec c 12, Sec c 13, Sec c 2, Sec c 20, Sec c 20.0101, Sec c 20.0201, Sec c 28, Sec c 3, Sec c 4, Sec c 4.0101, Sec c 4.0201, Sec c 5, Sec c 5.0101, Sec c aA_TI, Sec c aA_TI.0101), 세네시오(Senecio) 종 (Sen j MDH, Sen j PL), 세피아(Sepia) 종 (Sep e 1, Sep e 1.0101), 세피오테우티스(Sepioteuthis) 종 (Sep l 1, Sep l 1.0101), 세피아 종 (Sep m 1), 세리올라(Seriola) 종 (Ser d 1, Ser la 1), 세게스테스(Sergestes) 종 (Ser lu 1), 세리올라(Seriola) 종 (Ser q 1, Ser ri 1), 세사뭄(Sesamum) 종 (Ses i 1, Ses i 1.0101, Ses i 2, Ses i 2.0101, Ses i 3, Ses i 3.0101, Ses i 4, Ses i 4.0101, Ses i 5, Ses i 5.0101, Ses i 6, Ses i 6.0101, Ses i 7, Ses i 7.0101, Ses i 8), 시겔라(Shigella) 종 (Shi bo GST, Shi dy GST), 시물리아(Simulia) 종 (Sim vi 1, Sim vi 2, Sim vi 3, Sim vi 4, Sim vi 70kD), 시나피스(Sinapis) 종 (Sin a 1, Sin a 1.0101, Sin a 1.0104, Sin a 1.0105, Sin a 1.0106, Sin a 1.0107, Sin a 1.0108, Sin a 2, Sin a 2.0101, Sin a 3, Sin a 3.0101, Sin a 4, Sin a 4.0101), 시노노바쿨라(Sinonovacula) 종 (Sin c 1, Sin c 1.0101), 솔레놉시스(Solenopsis) 종 (Sol g 2, Sol g 2.0101, Sol g 3, Sol g 3.0101, Sol g 4, Sol g 4.0101, Sol g 4.0201, Sol i 1, Sol i 1.0101, Sol i 2, Sol i 2.0101, Sol i 3, Sol i 3.0101, Sol i 4, Sol i 4.0101), 솔레노세라(Solenocera) 종 (Sol me 1), 솔레놉시스(Solenopsis) 종 (Sol r 1, Sol r 2, Sol r 2.0101, Sol r 3, Sol r 3.0101, Sol s 2, Sol s 2.0101, Sol s 3, Sol s 3.0101, Sol s 4), 솔레아(Solea) 종 (Sol so 1, Sol so TPI), 솔라눔(Solanum) 종 (Sola t 1, Sola t 1.0101, Sola t 2, Sola t 2.0101, Sola t 3, Sola t 3.0101, Sola t 3.0102, Sola t 4, Sola t 4.0101, Sola t 8, Sola t Glucanase), 솔검(Sorghum) 종 (Sor b 1, Sor h 1, Sor h 1.0101, Sor h 12, Sor h 7), 스파루스(Sparus) 종 (Spa a 1), 스피나(Sphyrna) 종 (Sph ti 1), 스피룰리나(Spirulina) 종 (Spi mx 베타_피코시아닌(Phycocyanin)), 스피나시아(Spinacia) 종 (Spi o 2, Spi o RuBisCO), 스퀼라(Squilla) 종 (Squ ac 1, Squ ac 1.0101, Squ o 1, Squ o 1.0101), 스타필로코커스(Staphylococcus) 종 (Sta a FBP, Sta a SEA, Sta a SEB, Sta a SEC, Sta a SED, Sta a SEE, Sta a TSST), 스타키보트리스(Stachybotrys) 종 (Sta c 3, Sta c 3.0101, Sta c 셀룰라제, Sta c 용혈소, Sta c SchS34, Sta c 스타키라제(Stachyrase) A), 스템필리움(Stemphylium) 종 (Ste b 1, Ste c 1, Ste v 1), 스톨레포러스(Stolephorus) 종 (Sto i 1), 스트루티오(Struthio) 종 (Str c 1, Str c 2, Str c 3), 스트렙토코커스(Streptococcus) 종 (Str dy 스트렙토키나제(Streptokinase)), 스트렙토미세스(Streptomyces) 종 (Str g 프로나제(Pronase)), 스트렙토코커스(Streptococcus) 종 (Str pn PspC), 스트롱길로센트로투스(Strongylocentrotus) 종 (Str pu 18kD, Str pu 비텔로게닌(Vitellogenin)), 스트렙토코커스 종 (Str py SPEA, Str py SPEC, Str py 스트렙토키나제), 스트롱길로이데스(Strongyloides) 종 (Str st 45kD), 스트렙토미세스(Streptomyces) 종 (Str v PAT), 스틸레라(Styela) 종 (Sty p 1), 수이다시아(Suidasia) 종 (Sui m 1, Sui m 13, Sui m 2, Sui m 3, Sui m 5, Sui m 5.01, Sui m 5.02, Sui m 5.03, Sui m 6, Sui m 7, Sui m 8, Sui m 9), Sus 종 (Sus s ACTH, Sus s ALA, Sus s 아밀라제, Sus s BLG, Sus s 카세인, Sus s 카세인 알파S1, Sus s 카세인 알파S2, Sus s 카세인 베타, Sus s 카세인 카파, Sus s 겔라틴, Sus s HG, Sus s 인슐린, Sus s 리파제, Sus s 펩신, Sus s 포스비틴, Sus s PRVB, Sus s PSA, Sus s TCTP), 신텔로포데우마(Syntelopodeuma) 종 (Syn y 7, Syn y 7.0101), 시링가(Syringa) 종 (Syr v 1, Syr v 1.0101, Syr v 1.0102, Syr v 1.0103, Syr v 2, Syr v 3, Syr v 3.0101), 타바너스(Tabanus) 종 (Tab y 1, Tab y 1.0101, Tab y 2, Tab y 2.0101, Tab y 5, Tab y 5.0101), 타도나(Tadorna) 종 (Tad ra 1), 탈라로미세스(Talaromyces) 종 (Tal st 22, Tal st 3, Tal st 8), 타락사쿰(Taraxacum) 종 (Tar o 18kD), 탁소디움(Taxodium) 종 (Tax d 2), 테게나리아(Tegenaria) 종 (Teg d 헤모시아닌(Hemocyanin)), 텔라도사기아(Teladorsagia) 종 (Tel ci 3), 타우메토포에아(Thaumetopoea) 종 (Tha p 1, Tha p 1.0101, Tha p 2, Tha p 2.0101), 테라그라(Theragra) 종 (The c 1), 테모미세스(Thermomyces) 종 (The l 리파제, The sp 리파제, The sp 자일라나제(Xylanase)), 툰너스(Thunnus) 종 (Thu a 1, Thu a 1.0101, Thu a 콜라겐, Thu al 1, Thu at 1, Thu o 1, Thu o 콜라겐), 투자(Thuja) 종 (Thu oc 3, Thu p 1), 툰너스 종 (Thu t 1, Thu to 1), 타이시테스(Thyrsites) 종 (Thy at 1), 타이로피거스(Thyrophygus) 종 (Thy y 7, Thy y 7.0101), 토다로데스(Todarodes) 종 (Tod p 1, Tod p 1.0101, Tod p 1.0102), 톡소프테라(Toxoptera) 종 (Tox c 7, Tox c 7.0101), 톡소카라(Toxocara) 종 (Tox ca TES120, Tox ca TES26, Tox ca TES30), 톡소플라스마(Toxoplasma) 종 (Tox g HSP70), 트라키페네우스(Trachypenaeus) 종 (Tra c 1), 트라키노투스(Trachinotus) 종 (Tra ca 1), 트라츄러스(Trachurus) 종 (Tra j 1, Tra j 젤라틴, Tra tr 젤라틴), 트리티쿰(Triticum) 종 (Tri a 1, Tri a 10kD, Tri a 12, Tri a 12.0101, Tri a 12.0102, Tri a 12.0103, Tri a 12.0104, Tri a 13, Tri a 14, Tri a 14.0101, Tri a 14.0201, Tri a 15, Tri a 15.0101, Tri a 18, Tri a 18.0101, Tri a 19, Tri a 19.0101, Tri a 2, Tri a 21, Tri a 21.0101, Tri a 23kd, Tri a 25, Tri a 25.0101, Tri a 26, Tri a 26.0101, Tri a 27, Tri a 27.0101, Tri a 28, Tri a 28.0101, Tri a 29, Tri a 29.0101, Tri a 29.0201, Tri a 3, Tri a 30, Tri a 30.0101, Tri a 31, Tri a 31.0101, Tri a 32, Tri a 32.0101, Tri a 33, Tri a 33.0101, Tri a 34, Tri a 34.0101, Tri a 35, Tri a 35.0101, Tri a 36, Tri a 36.0101, Tri a 37, Tri a 37.0101, Tri a 4, Tri a 4.0101, Tri a 4.0201, Tri a 5, Tri a 7, Tri a aA_SI, Tri a 알파_글리아딘, Tri a bA, Tri a Bd36K, Tri a 베타_글리아딘, Tri a 키티나제, Tri a CM16, Tri a DH, Tri a 엔도키티나제(Endochitinase), Tri a 감마_글리아딘, Tri a 게르민(Germin), Tri a 글리아딘, Tri a GST, Tri a LMW Glu, Tri a LMW-GS B16, Tri a LMW-GS P42, Tri a LMW-GS P73, Tri a LTP2, Tri a 오메가2_글리아딘, Tri a 퍼옥시다제, Tri a 퍼옥시다제 1, Tri a SPI, Tri a TLP, Tri a 트리틴, Tri a XI), 트리티라키움(Tritirachium) 종 (Tri al 프로테이나제 K), 트리볼리움(Tribolium) 종 (Tri ca 17, Tri ca 17.0101, Tri ca 7, Tri ca 7.0101), 트리코스트롱길루스(Trichostrongylus) 종 (Tri co 3, Tri co 3.0101), 트리코피톤(Trichophyton) 종 (Tri eq 4), 트리고넬라(Trigonella) 종 (Tri fg 1, Tri fg 2, Tri fg 3, Tri fg 4), 트리코산테스(Trichosanthes) 종 (Tri k RIP), 트리키우러스(Trichiurus) 종 (Tri le 1), 트리티쿰(Triticum) 종 (Tri m 퍼옥시다제), 트리코피톤(Trichophyton) 종 (Tri me 2, Tri me 4), 트리세툼(Trisetum) 종 (Tri p 1, Tri p 5), 트리키넬라(Trichinella) 종 (Tri ps 3, Tri ps 3.0101), 트리코피톤(Trichophyton) 종 (Tri r 2, Tri r 2.0101, Tri r 4, Tri r 4.0101), 트리코더마(Trichoderma) 종 (Tri rs 셀룰라제), 트리티쿰 종 (Tri s 14), 트리코피톤(Trichophyton) 종 (Tri sc 2, Tri sc 4, Tri so 2), 트리키넬라(Trichinella) 종 (Tri sp 3, Tri sp 3.0101, Tri sp 3.0102, Tri sp 3.0103, Tri sp 3.0104, Tri sp 3.0105, Tri sp 3.0106), 트리코피톤(Trichophyton) 종 (Tri t 1, Tri t 1.0101, Tri t 4, Tri t 4.0101), 트리티쿰(Triticum) 종 (Tri td 14, Tri td aA_TI), 트리코데마(Trichoderma) 종 (Tri v 셀룰라제), 트리코피톤(Trichophyton) 종 (Tri ve 4), 트리아토마(Triatoma) 종 (Tria p 1, Tria p 1.0101), 트리플로키톤(Triplochiton) 종 (Trip s 1), 터보(Turbo) 종 (Tur c 1, Tur c PM), 티로파거스(Tyrophagus) 종 (Tyr p 1, Tyr p 10, Tyr p 10.0101, Tyr p 10.0102, Tyr p 13, Tyr p 13.0101, Tyr p 2, Tyr p 2.0101, Tyr p 24, Tyr p 24.0101, Tyr p 3, Tyr p 3.0101, Tyr p 4, Tyr p 5, Tyr p 5.01, Tyr p 5.02, Tyr p 5.03, Tyr p 7, Tyr p 알파 튜불린), 유로클라디움(Ulocladium) 종 (Ulo a 1, Ulo at 1, Ulo b 1, Ulo c 1, Ulo co 1, Ulo cu 1, Ulo mu 1, Ulo ob 1, Ulo se 1, Ulo su 1, Ulo tu 1), 언시아(Uncia) 종 (Unc u 1), 유로피시스(Urophycis) 종 (Uro te 1), 백시니움(Vaccinium) 종 (Vac m 3), 바로아(Varroa) 종 (Var j 13kD), 베네루피스(Venerupis) 종 (Ven ph 1, Ven ph 1.0101), 베스풀라(Vespula) 종 (Ves f 1, Ves f 2, Ves f 5, Ves f 5.0101, Ves g 1, Ves g 2, Ves g 5, Ves g 5.0101, Ves m 1, Ves m 1.0101, Ves m 2, Ves m 2.0101, Ves m 5, Ves m 5.0101, Ves m MLT, Ves p 1, Ves p 2, Ves p 5, Ves p 5.0101, Ves s 1, Ves s 1.0101, Ves s 2, Ves s 5, Ves s 5.0101, Ves v 1, Ves v 1.0101, Ves v 2, Ves v 2.0101, Ves v 2.0201, Ves v 3, Ves v 3.0101, Ves v 5, Ves v 5.0101, Ves v 5-Pol a 5, Ves vi 5, Ves vi 5.0101), 베스파(Vespa) 종 (Vesp c 1, Vesp c 1.0101, Vesp c 2, Vesp c 5, Vesp c 5.0101, Vesp c 5.0102, Vesp m 1, Vesp m 1.0101, Vesp m 5, Vesp m 5.0101, Vesp ma 1, Vesp ma 2, Vesp ma 5, Vesp ma MLT, Vesp v MLT), 비기나(Vigna) 종 (Vig r 1, Vig r 1.0101, Vig r 17kD, Vig r 5, Vig r 8S 글로불린, Vig r 알부민, Vig r 베타-콩글리시닌(Conglycinin)), 비티스(Vitis) 종 (Vit v 1, Vit v 1.0101, Vit v 4, Vit v 5, Vit v 글루카나제(Glucanase), Vit v TLP), 시피아스(Xiphias) 종 (Xip g 1, Xip g 1.0101, Xip g 25kD), 제아(Zea) 종 (Zea m 1, Zea m 1.0101, Zea m 11, Zea m 12, Zea m 12.0101, Zea m 12.0102, Zea m 12.0103, Zea m 12.0104, Zea m 12.0105, Zea m 13, Zea m 14, Zea m 14.0101, Zea m 14.0102, Zea m 2, Zea m 20S, Zea m 22, Zea m 25, Zea m 25.0101, Zea m 27kD Zein, Zea m 3, Zea m 4, Zea m 5, Zea m 50kD Zein, Zea m 7, Zea m 키티나제, Zea m G1, Zea m G2, Zea m PAO, Zea m Zm13), 제우스(Zeus) 종 (Zeu fa 1), 지지퍼스(Ziziphus) 종 (Ziz m 1, Ziz m 1.0101), 조아세스(Zoarces) 종 (Zoa a ISP III), 지고필럼(Zygophyllum) 종 (Zyg f 2)
이러한 맥락에서, 괄호 안 용어는 특정한 원천으로부터 특히 바람직한 알레르겐을 가리킨다.
가장 바람직하게는 알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원은 바람직하게는 잔디 화분(예를 들어 호밀(rye)의 화분), 나무 화분(예를 들어, 개암나무(hazel), 자작나무(birch), 오리나무(alder), 물푸레나무(ash)의 화분), 꽃 화분, 허브 화분(예를 들어 쑥의 화분), 먼지 진드기(예를 들어 Der f 1, Der p 1, Eur m 1, Der m 1 Der f 2, Der p 2, Eur m 2, Tyr p 2, Lep d 2), 곰팡이(예를 들어, 아크레모니움(Acremonium), 아스페길루스(Aspergillus), 클라도스포리움(Cladosporium), 푸사리움(Fusarium), 뮤코(Mucor), 페니실리움(Penicillium), 리조푸스(Rhizopus), 스타키보트리스(Stachybotrys), 트리코데마(Trichoderma), 또는 알테나리아(Alternaria)), 동물(예를 들어 고양이의 Fel d1, Fel d 2, Fel d3, 또는 Fel d4), 식품(생선(예를 들어 농어, 대구, 도다리)의 알레르겐), 해산물(예를 들어 게, 랍스터, 새우), 계란, 밀, 견과류(예를 들어 땅콩, 아몬드, 캐슈, 호두), 콩, 우유, 등) 또는 곤충 베놈(venom)(예를 들어 말벌(wasps), 벌(bees), 호넷(hornets), 개미, 모기, 또는 진드기로부터 알레르겐)으로 이루어진 리스트로부터 선택된 원천으로부터 유래된다.
c)자가면역 질병 관련 항원:
자가면역 질병 관련된 항원은 바람직하게는 애디슨병(Addison disease) (자가면역 부신염(autoimmune adrenalitis), 애디슨 질병(Morbus Addison)), 원형 탈모증(alopecia areata), 애디슨 빈혈증(Addison's anemia) 비에르머 질병(Morbus Biermer), 자가면역 용혈성 빈혈(autoimmune hemolytic anemia) (AIHA), 콜드(cold) 타입의 자가면역 용혈성 빈혈(AIHA) (한냉혈구응집소 질병(cold hemagglutinine disease), 콜드 자가면역 용혈성 빈혈(AIHA) (한랭응집소 질병(cold agglutinin disease)), (CHAD)), 웜(warm) 타입의 자가면역 용혈성 빈혈(AIHA)(웜 AIHA, 웜 자가면역 용혈성 빈혈(warm autoimmune haemolytic anemia) (AIHA)), 자가면역 용혈성 도나스-란트스타이너 빈혈(autoimmune hemolytic Donath-Landsteiner anemia) (발작성한랭혈색소뇨증(paroxysmal cold hemoglobinuria)), 휴즈 증후군(antiphospholipid syndrome)(APS), 아테롬성 동맥 경화증(atherosclerosis), 자가면역 관절염(autoimmune arthritis), 측두근 동맥염(arteriitis temporalis), 타카야수 동맥염(Takayasu arteriitis) (타카야수 질병(Takayasu's disease), 대동맥궁 질병(aortic arch disease)), 측두 동맥염(temporal arteriitis)/거세포동맥염(giant cell arteriitis), 자가면역 만성위염(autoimmune chronic gastritis), 자가면역 불임(autoimmune infertility), 자가면역 내이 질병(autoimmune inner ear disease) (AIED), 바제도병(Basedow's disease) (바제도 질병(Morbus Basedow)), 베크테레브병(Bechterew's disease) (베크테레브 질병(Morbus Bechterew), 강직성 척추염(ankylosing spondylitis, spondylitis ankylosans)), 베체트 증후군(Behcet's syndrome) (베체트 질병(Morbus Behcet)), 자가면역 염증성 장 질환을 포함하는 장 질환(bowel disease) (궤양성 대장염(colitis ulcerosa) (크론병(Morbus Crohn, Crohn's disease))을 포함), 심근증(cardiomyopathy), 특히 자가면역 심근증, 특발성 팽창 심근증(idiopathic dilated cardiomyopathy) (DCM), 스프루 피부염(celiac sprue dermatitis) (글루텐 매개 장질환(gluten mediated enteropathia)), 만성 피로 면역 장애 증후군(chronic fatigue immune dysfunction syndrome) (CFIDS), 만성 염증성 탈수초성 다발성 신경병증(chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy) (CIDP), 만성 다발성 관절염(chronic polyarthritis), 처그-스트라우스 증후군(Churg-Strauss syndrome), 반흔성유천포창(cicatricial pemphigoid), 코간 증후군(Cogan syndrome), CREST 증후군 (피부석회화(Calcinosis cutis), 레이노드 현상(Raynaud phenomenon), 식도의 운동 장애(motility disorders of the esophagus), 스크레로닥틸리아(sklerodaktylia) 및 모세혈관확장(teleangiectasia)을 갖는 증후군), 크론병(Crohn's disease) (크론 질병(Morbus Crohn), 궤양성 대장염(colitis ulcerosa)), 피부 자가면역 질병 동안, 포진성 피부염(dermatitis herpetiformis), 피부근염(dermatomyositis), 당뇨(Diabetes), 제1형 당뇨병(Diabetes mellitus Type 1) (제1형 당뇨, 인슐린 의존성 당뇨병), 제2형 당뇨병(Diabetes mellitus Type 2) (제2형 당뇨), 필수 혼합된 한성글로불린혈증(essential mixed cryoglobulinemia), 필수 혼합된 한성글로불린혈증, 섬유근육통(fibromyalgia), 섬유근염(fibromyositis), 굿파스튜어 증후군(Goodpasture syndrome) (항-GBM 매개 사구체 신염(glomerulonephritis)), 대숙주성 이식편병(graft versus host disease), 기엥 바레 증후군(Guillain-Barre syndrome) (GBM, 다발성신경근염(Polyradikuloneuritis)), 혈액 자가면역 질병(haematologic autoimmune diseases), 하시모토 갑상선염(Hashimoto thyroiditis), 혈우병(hemophilia), 후천적 혈우병(acquired hemophilia), 간염(hepatitis), 자가면역 간염(autoimmune hepatitis), 특히 만성 간염의 자가면역 형태, 특발성 폐섬유증(idiopathic pulmonary fibrosis) (IPF), 특발 혈소판감소 자색반증(idiopathic thrombocytopenic purpura), 면역-혈소판감소성자반병(Immuno-thrombocytopenic purpura) (워호프 질병(Morbus Werlhof); ITP), IgA 신장해(nephropathy), 불임(infertility), 자가면역 불임, 소아 류머티스 관절염(juvenile rheumatoid arthritis) (스틸 질병(Morbus Still), 스틸 증후군(Still syndrome)), 람베르트 이튼 증후군(Lambert-Eaton syndrome), 편평태선(lichen planus), 경화성태선(lichen sclerosus), 홍반성 낭창(lupus erythematosus), 전신 홍반성 낭창(systemic lupus erythematosus) (SLE), 홍반성 낭창(lupus erythematosus) (원반(discoid) 형태), 라임 관절염(Lyme arthritis) (라임 질병(Lyme disease), 보렐리아 관절염(borrelia arthritis)), 메니에르병(Meniere's disease) (메니에르병(Morbus Meniere)); 혼합결합조직병(mixed connective tissue disease) (MCTD), 다발성 경화증(multiple sclerosis) (MS, 뇌척수염 전파(encephalomyelitis disseminate), 샤콧 병(Charcot's disease)), 중증 근무력증(Myasthenia gravis) (근무력증(myasthenia), MG), 근염(myosits), 다발성근염(polymyositis), 신경 자가면역 질병(neural autoimmune diseases), 신경엽(neurodermitis), 심상성천포창(pemphigus vulgaris), 수포성류천포창(bullous pemphigoid), 흉터 형성 류천포창(scar forming pemphigoid); 결절성다발성동맥염(polyarteriitis nodosa) (결절성동맥주위염(periarteiitis nodosa)), 다연골염(polychondritis) (전연골염(panchondritis)), 다분비선성(polyglandular) (자가면역) 증후군 (PGA 증후군, 슈밋 증후군(Schmidt's syndrome)), 류마티스성 다발근육통(Polymyalgia rheumatica), 일차 감마글로불린 결여증(primary agammaglobulinemia), 원발담즙성간경변(primary biliary cirrhosis) PBC, 일차 자가면역 담관염(primary autoimmune cholangitis)), 진행성 전신성 경화증(progressive systemic sclerosis) (PSS), 건선(Psoriasis), 심상성 건선(Psoriasis vulgaris), 레이노 현상(Raynaud's phenomena), 라이터 증후군(Reiter's syndrome) (라이터 질병(Morbus Reiter), 요도 결합 활액 증후군(urethral conjunctive synovial syndrome))), 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis) (RA, 만성 다발성 관절염(chronic polyarthritis), 관절의 류마티스성 질병, 류마티스성 열), 유육종증(sarcoidosis) (보엑 질병(Morbus Boeck), 베스니어-보엑-샤우만 질병(Besnier-Boeck-Schaumann disease)), 강직인간 증후군(stiff-man syndrome), 피부경화증(Sclerodermia), 경피증(Scleroderma), 쇠그렌 증후군(Sjogren's syndrome), 교감성 안염(sympathetic ophtalmia); 일시적 글루텐 불내성(Transient gluten intolerance), 장기 이식 거부(transplanted organ rejection), 포도막염(uveitis), 자가면역 포도막염(autoimmune uveiitis), 맥관염(Vasculitis), 백반(Vitiligo), (백반(leucoderma), 백반(piebold skin)), 및 베게너병(Wegner's disease) (베게너 질병(Morbus Wegner), 베게너 육아종증(Wegner's granulomatosis))으로부터 선택된 자가면역 질병 관련된 자가항원으로부터 선택된다.
본 발명에 따라 특히 바람직하것은 하기로부터 선택된 자가항원이다:
·다발성 경화증(multiple sclerosis)(MS)과 관련된 경우, 수초 염기성 단백질(myelin basic protein) (MBP), 단백지질 단백질(proteolipid protein) (PLP), 및 미엘린 올리고덴드로사이트(myelin oligodendrocyte) 당단백질 (MOG);
·제1형 당뇨병과 관련된 경우에, CD44, 인슐린전구물질(preproinsulin), 프로인슐린(proinsulin), 인슐린, 글루탐산 디카르복실라제(glutamic acid decaroxylase) (GAD65), 티로신 인산가수분해효소-유사 인슐린종 항원 2 (IA2), 아연 수송체 ((ZnT8), 및 열충격 단백질 60 (HSP60);
·자가면역 포도막염과 관련된 광수용체 간 레티노이드 결합 단백질(interphotoreceptor retinoid-binding protein) (IRBP);
·중증 근무력증(Myasthenia gravis)과 관련된 경우, 아세틸콜린 수용체 AchR, 및 인슐린-유사 성장 인자-1 수용체(IGF-1R);
·류마티스성 열과 관련된 베타-용혈성 스트렙토콕시(beta-hemolytic streptocci (슈도-자가항원(pseudo-autoantigen))로부터 M-단백질;
·관절염과 관련된 대식세포 이동 억제 인자;
·쇠그렌 증후군과 관련된 경우, Ro/La RNP 복합체, 알파- 및 베타-포드린, 섬 세포 자가항원(islet cell autoantigen), 폴리(ADP)리보스 중합효소(PARP), NuMA, NOR-90, Ro60 자가항원, 및 p27 항원;
·홍반성 낭창과 관련된 경우, Ro60 자가항원, 저밀도 지질단백질, U-1 작은 핵 리보핵산단백질 복합체(B/B', D1, D2, D3, E, F, G)의 Sm 항원, 및 RNP 리보핵산단백질;
·아테롬성 동맥경화증과 관련된 경우, oxLDL, 베타(2)GPI, HSP60/65, 및 oxLDL/베타(2)GPI;
·특발성 팽창 심근증(idiopathic dilated cardiomyopathy) (DCM)과 관련된 심장 베타(1)-아드레날린 수용체;
·근염과 관련된 히스티딜-tRNA 합성효소(HisRS);
·경피증 질병과 관련된 토포이성질화효소 I.
나아가, 다른 실시예에서, 상기 항원은 상기 질병(본 발명에 정의된 어느 자가면역 질병과 같은) 내 자가면역 반응에 포함되는 면역 세포에 의해 발현되는 예를 들어 IL-17, 열충격 단백질, 및/또는 유전자형 병원체성(idiotype pathogenic) T 세포 또는 케모카인 수용체와 같은, 각각의 자가면역 질병과 관련된다.
d)암 또는 종양 질병과 관련된 항원("종양 항원"):
본 발명에서 "종양 항원"은 바람직하게는 (종양) 세포의 표면에 위치한 항원이다. 종양 항원은 또한 정상 세포에 비해 종양 세포에서 과발현된, 단백질로부터 선택될 수 있다. 나아가, 종양 항원은 또한 퇴화된 그들 자신(또는 본래 그들 자신이 아닌)이 아니나 추정된 종양과 관련된 세포 내 발현된 항원을 포함한다. 종양 공급 혈관 또는 이의 (재)형성과 결합된, 특히 신혈관 형성, 예를 들어 VEGF, bFGF 등과 같은 성장 인자와 관련된 그들 항원인 항원은 또한 본 발명에 포함된다. 종양과 결합된 항원은 나아가 전형적으로 종양에 묻힌, 세포 또는 조직으로부터 항원을 포함한다. 나아가, 이들 물질(보통 단백질 또는 펩타이드)는 암 질병으로부터 고통받는(고의 또는 비고의) 환자에서 발현되고 그들은 상기 환자의 체액(body fluids) 내 증가된 농도로 발생한다. 이들 물질은 또한 "종양 항원"으로 불리나, 그들은 물질을 유도하는 면역 반응의 엄중한 의미에서 항원이 아니다. 종양 항원의 종류는 추가로 종양 특이적 항원(TSAs) 및 종양 관련된 항원(TAAs)로 나뉠 수 있다. TSAs는 오직 종양 세포에 의해 나타날 수 있으며 정상 "건강"세포에 의해서는 나타날 수 없다. 그들은 전형적으로 종양 특이적 변이로부터의 결과이다. 보다 일반적인 TAAs는 보통 종양 및 건강 세포 양쪽 모두에 의해 나타난다. 이들 항원은 인식되고 항원 제시 세포는 세포독성 T 세포에 의해 파괴될 수 있다. 추가적으로, 종양 항원은 또한 예를 들어 변형된 수용체의 형태 내 종양의 표면에서 발생할 수 있다. 이러한 경우, 그들은 항원에 의해 인식될 수 있다. 특히 바람직한 종양 항원은 5T4, 707-AP, 9D7, AFP, AlbZIP HPG1, 알파-5-베타-1-인테그린, 알파-5-베타-6-인테그린, 알파-액티닌-4/m, 알파-메틸락틸-코엔자임 A 라세미화효소, ART-4, ARTC1/m, B7H4, BAGE-1, BCL-2, bcr/abl, 베타-카테닌/m, BING-4, BRCA1/m, BRCA2/m, CA 15-3/CA 27-29, CA 19-9, CA72-4, CA125, 칼레티쿨린(calreticulin), CAMEL, CASP-8/m, 카뎁신 B, 카뎁신 L, CD19, CD20, CD22, CD25, CDE30, CD33, CD4, CD52, CD55, CD56, CD80, CDC27/m, CDK4/m, CDKN2A/m, CEA, CLCA2, CML28, CML66, COA-1/m, 코아토신 유사 단백질, 콜라겐(collage) XXIII, COX-2, CT-9/BRD6, Cten, 사이클린(cyclin) B1, 사이클린 D1, cyp-B, CYPB1, DAM-10, DAM-6, DEK-CAN, EFTUD2/m, EGFR, ELF2/m, EMMPRIN, EpCam, EphA2, EphA3, ErbB3, ETV6-AML1, EZH2, FGF-5, FN, Frau-1, G250, GAGE-1, GAGE-2, GAGE-3, GAGE-4, GAGE-5, GAGE-6, GAGE7b, GAGE-8, GDEP, GnT-V, gp100, GPC3, GPNMB/m, HAGE, HAST-2, 헵신(hepsin), Her2/neu, HERV-K-MEL, HLA-A*0201-R17I, HLA-A11/m, HLA-A2/m, HNE, 호메오박스(homeobox) NKX3.1, HOM-TES-14/SCP-1, HOM-TES-85, HPV-E6, HPV-E7, HSP70-2M, HST-2, hTERT, iCE, IGF-1R, IL-13Ra2, IL-2R, IL-5, 비성숙 라미닌 수용체(immature laminin receptor), 칼리크레인(kallikrein)-2, 칼리크레인-4, Ki67, KIAA0205, KIAA0205/m, KK-LC-1, K-Ras/m, LAGE-A1, LDLR-FUT, MAGE-A1, MAGE-A2, MAGE-A3, MAGE-A4, MAGE-A6, MAGE-A9, MAGE-A10, MAGE-A12, MAGE-B1, MAGE-B2, MAGE-B3, MAGE-B4, MAGE-B5, MAGE-B6, MAGE-B10, MAGE-B16, MAGE-B17, MAGE-C1, MAGE-C2, MAGE-C3, MAGE-D1, MAGE-D2, MAGE-D4, MAGE-E1, MAGE-E2, MAGE-F1, MAGE-H1, MAGEL2, 맘마글로빈(mammaglobin) A, MART-1/멜란(melan)-A, MART-2, MART-2/m, 기질 단백질 22, MC1R, M-CSF, ME1/m, 메소델린(mesothelin), MG50/PXDN, MMP11, MN/CA IX-항원, MRP-3, MUC-1, MUC-2, MUM-1/m, MUM-2/m, MUM-3/m, 미오신 클래스 I/m, NA88-A, N-아세틸클루코스아미닐트랜스퍼라제(acetylglucosaminyltransferase)-V, Neo-PAP, Neo-PAP/m, NFYC/m, NGEP, NMP22, NPM/ALK, N-Ras/m, NSE, NY-ESO-1, NY-ESO-B, OA1, OFA-iLRP, OGT, OGT/m, OS-9, OS-9/m, 오스테오칼신(osteocalcin), 오스테오폰닌(osteopontin), p15, p190 마이너 bcr-abl, p53, p53/m, PAGE-4, PAI-1, PAI-2, PAP, PART-1, PATE, PDEF, Pim-1-키나제(Kinase), Pin-1, Pml/PAR알파, POTE, PRAME, PRDX5/m, 프로스테인(prostein), 프로테이나제(proteinase)-3, PSA, PSCA, PSGR, PSM, PSMA, PTPRK/m, RAGE-1, RBAF600/m, RHAMM/CD168, RU1, RU2, S-100, SAGE, SART-1, SART-2, SART-3, SCC, SIRT2/m, Sp17, SSX-1, SSX-2/HOM-MEL-40, SSX-4, STAMP-1, STEAP, 설비빈(surviving), 설비빈-2B, SYT-SSX-1, SYT-SSX-2, TA-90, TAG-72, TARP, TEL-AML1, TGF베타, TGF베타RII, TGM-4, TPI/m, TRAG-3, TRG, TRP-1, TRP-2/6b, TRP/INT2, TRP-p8, 티로시나제, UPA, VEGF, VEGFR1, VEGFR-2/FLK-1, 및 WT1로 이루어진 군에서 선택된다. 이러한 종양 항원은 바람직하게는 p53, CA125, EGFR, Her2/neu, hTERT, PAP, MAGE-A1, MAGE-A3, 메소텔린(Mesothelin), MUC-1, NY-ESO-1, GP100, MART-1, 티로시나제, PSA, PSCA, PSMA VEGF, VEGFR1, VEGFR2, Ras, CEA 또는 WT1로부터, 및 더욱 바람직하게는 PAP, NY-ESO-1, MAGE-A3, WT1, 및 MUC-1로부터 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
이러한 맥락에서, 및 본 발명의 모든 양태의 특정한 실시예에 대해서, 암 또는 종양 질병과 관련된 항원은 (x) 유전자형 면역글로불린(유전자형 항체 또는 유전자형 B 세포 수용체); 또는 (y) 유전자형 T 세포 수용체를 포함하지 않고, 및 선택적으로 이러한 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체가 아니다.
나아가, 만약 단백질 또는 펩타이드 항원으로 제공되는 경우, 적어도 하나의 항원은 오발부민 유래 펩타이드 SIINFEKL (SEQ ID NO: 116)와 같은, 모델 항원 오발부민 또는 오발부민의 절편이 아닌 특정한 실시예 내 이다.
독창적 약학적 조성물 내 적어도 하나의 항원은 단백질 또는 펩타이드로 제공될 수 있거나 핵산 예를 들어 DNA(예를 들어 플라스미드 DNA 또는 바이러스성 DNA), 또는 RNA(예를 들어 mRNA 또는 바이러스성 RNA)에 의해 코딩될 수 있다. 바람직하게는 적어도 하나의 항원은 단백질 또는 펩타이드, 또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체로써 제공된다. 특정한 실시예에서, 상기 단백질 또는 펩타이드 항원(또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체)은 또는 정의된 샘플, 예를 들어 알려진 수 및 또는 성분의 구성을 갖는 샘플로부터 유래된 것으로 제공된 것에, 포함된다. 예를 들어, 상기 단백질 또는 펩타이드 항원은, 불활성화된 또는 약화된 바이러스 또는 병원체(각각의 경우 본 발명에 정의된 어느 하나와 같이)의 제조된 혼합물과 같은, (예를 들어 비정의된) 다른 성분의 혼합물의 경우에, 포함되지 않거나; 이와 같이 제공되지 않거나; 이로부터 유래되지 않는다. 예를 들어, 본 발명의 어느 양태에 사용된 항원은 동정된 및/또는 정제된 단백질 또는 펩타이드 항원일 수 있거나, 이로 제공될 수 있다. 통상의 기술자에 의해 이해되는 것처럼, 동정된 (및/또는 정제된) 항원은 (시작) 구성성분(composition) 내 존재 (또는 제공된) 다른 단백질/펩타이드 또는 불순물과 같이 약 40%, 30%, 20%, 10%, 5%, 2% 또는 1% 원하지 않는 또는 특정한 다른 성분 미만을 갖는 이러한 항원을 포함한다.
단백질 또는 펩타이드는 예를 들어 하기와 같이 제조될 수 있다.
상기 정의된 단백질 또는 펩타이드 항원은, 본 발명에 정의된 것처럼 또는 예를 들어 통상의 기술자에게 알려진 분자 생물학적 방법의 도움과 함께, 재조합 생산 방법을 사용하여 제조될 수 있다. 이러한 항원은 "재조합 단백질 항원" 및/또는 "재조합 펩타이드 항원"으로, 적당한 것으로, 설명될 수 있다.
그렇지 않으면, 상기 정의된 단백질 또는 펩타이드(예를 들어 절편, 도메인, 에피토프 또는 단백질 항원 및/또는 펩타이드 유사체)는 본 발명에 정의된 것처럼, 또는 통상의 기술자에게 알려진 다른 방법론과 함께, 펩타이드 합성 방법을 사용하여 제조될 수 있다. 이러한 항원은 "합성 단백질 항원" 및/또는 "합성 펩타이드 항원"으로, 적당한 것으로, 설명될 수 있다.
적어도 하나의 항원이 단백질 또는 펩타이드 항원(또는 이의 절편, 변이체 및/또는 유도체)으로 제공되는 경우, 펩타이드 또는 단백질 항원은 독창적 약학적 조성물의 별도(separate) 성분에 내 첫번째 대안 내에 제공될 수 있다. 이러한 경우 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원은 폴리머 담체 화물 복합체의 일부가 아니거나 즉: 이러한 경우 폴리머 담체 화물 복합체는 적어도 하나의 항원을 포함하지 않는다. 두번째 대안에서 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원은 폴리머 담체 화물 복합체의 성분으로써 제공될 수 있다. 이러한 경우, 펩타이드 또는 단백질 항원은 본 발명에 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 제조 방법의 중합 단계 c) 동안 폴리머 담체 화물 복합체에 첨가될 수 있다. 따라서, 펩타이드 또는 단백질 항원은 폴리머 담체 화물 복합체에 통합된다. 본 발명에서 펩타이드 또는 단백질 항원이 폴리머 담체 화물 복합체 내 폴리머 담체의 다른 성분과 중합을 위해 적어도 하나의 SH-일부를 갖는 것이 특히 바람직하다. 나아가, 추가적인 대안에서 단백질 또는 펩타이드 항원은 폴리머 담체 화물 복합체의 폴리머 담체의 성분으로써 제공되고 적어도 하나의 추가적 단백질 또는 펩타이드 항원(동일 또른 다른)은 폴리머 담체 화물 복합체의 일부가 아닌 독창적 약학적 조성물의 별도 성분으로써 제공된다.
추가적으로, 적어도 하나의 항원(또는 이의 절편, 변이체 및/또는 유도체)는 적어도 하나의 항원(또는 이의 절편, 변이체 및/또는 유도체)을 코딩하는 핵산의 형태로 독창적 약학적 조성물 내에 제공될 수 있다.
이러한 맥락에서, 적어도 하나의 항원(또는 이의 절편, 변이체 및/또는 유도체)를 코딩하는 핵산은 독창적 약학적 조성물 내 어쥬번트로써 사용된 폴리머 담체 화물 복합체 내 포함된 핵산 화물에 대해 상기 개시된 것처럼 정의된다. 따라서, 또한 본 발명에 정의된 핵산의 절편, 변이체, 유도체 및 변형은 명백하게 포함된다.
만약 적어도 하나의 항원(또는 이의 절편, 변이체 및/또는 유도체)을 코딩하는 핵산의 형태로 독창적 약학적 조성물 내에 제공될 경우, 적어도 하나의 항원(또는 이의 절편, 변이체 및/또는 유도체)은 통상의 기술자에게 알려진 모든 핵산 합성 방법으로 제조될 수 있다. 특히 본 발명에 정의된 핵산 합성 방법이 바람직하다.
또한 이러한 경우 두가지 대안이 존재한다. 첫번째 대안은 폴리머 담체 화물 복합체의 일부로써(예를 들어 핵산 화물 분자로써) 적어도 하나의 항원을 코딩하는 핵산을 제공하고, 두번째 대안은 독창적 약학적 조성물의 별개 성분으로써 적어도 하나의 항원을 코딩하는 핵산을 제공한다. 따라서, 이러한 경우 적어도 하나의 항원을 코딩하는 핵산은 폴리머 담체 화물 복합체의 일부가 아니다.
본 발명의 추가적 실시예에서, 적어도 하나의 항원(또는 이의 절편, 변이체 및/또는 유도체)은 (어쥬번트) 폴리머 담체 화물 복합체(예를 들어 적어도 하나의 항원을 코딩하는 핵산 화물로써)의 일부로써 제공될 수 있고 추가적으로 핵산에 의해 코딩되는 항원은 폴리머 담체 화물 복합체의 일부가 아닌 별도 성분으로 제공될 수 있다.
본 발명은 나아가 적어도 하나의 항원이 핵산으로써(폴리머 담체 화물 복합체의 일부 또는 아닌 것으로써) 제공되고 적어도 하나의 추가적인 항원이 단백질 또는 펩타이드 항원으로써(폴리머 담체 화물 복합체의 일부 또는 아닌 것으로써) 제공되는 대안을 제공한다.
추가적 실시예와 같이 적어도 하나의 항원이 만약 단백질 또는 펩타이드로써 또는 적어도 하나의 항원을 코딩하는 핵산으로써 제공된다면, 나아가 본 발명에 정의된 신호 펩타이드를 포함 또는 코딩할 수 있다.
추가적 성분으로써 약학적 조성물은 적어도 하나의 추가적 약학적 활성 성분을 포함할 수 있다. 이와 관련된 약학적으로 활성인 성분은 특정한 지표(indication), 바람직하게는 종양 또는 암 질병, 자가면역 질병, 알러지 또는 감염성 질병을 치료, 경감 또는 예방하는 치료적 효과를 갖는 화합물이다. 이러한 화합물은, 이에 제한되지 않고, 바람직하게는 본 발명에 정의된 펩타이드 또는 단백질, 바람직하게는 본 발명에 정의된 핵산, 바람직하게는 본 발명에 정의된 (치료적으로 활성인) 저분자량 유기 또는 무기 화합물(5000 미만, 바람직하게는 1000 미만의 분자량), 당, 항원 또는 항체, 바람직하게는 본 발명에 정의된 기술분야에 이미 알려진 치료제, 항원 세포, 항원 세포 절편, 세포 분획; 세포벽 성분(예를 들어 다당류), 변형된, 약화된 또는 비활성화된(예를 들어 화학적으로 또는 방사선에 의해) 병원체(바이러스, 박테리아 등), 어쥬번트 등을 포함한다.
나아가, 독창적 약학적 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체 및/또는 수송체를 포함할 수 있다. 본 발명의 맥락에서, 약학적으로 허용가능한 담체는 전형적으로 약학적 조성물의 액체 또는 비액체 기초를 포함한다. 만약 약학적 조성물이 액체 형태로 제공된다면, 담체는 전형적으로 피로겐 없는 물; 등장성 식염수 또는 버퍼(수용성) 용액, 예를 들어 인산염, 구연산 등 버퍼 용액이다. 주사 버퍼는 특정한 기준 매질(Reference media)에 고장성, 등장성 또는 저장성 기준일 수 있어, 즉 버퍼는 특정한 기준 매질에 높은, 같은 또는 낮은 염 함량을 가질 수 있으며, 바람직하게는, 삼투압 또는 다른 농도 효과에 의한 세포 손상을 유도하지 않는, 앞서 언급된 염의 상기 이러한 농도가 사용될 수 있다. 기준 매질은 혈액, 림프, 세포질 액상, 또는 다른 체액, 또는 예를 들어 일반적인 버퍼 또는 액체로써 "생체 외" 방법에 기준 매질로 사용될 수 있는 체액과 같은, 예를 들어 "생체 내" 방법에서 발생하는 액체이다. 이러한 일반적 버퍼 또는 액체는 통상의 기술자에게 알려져 있다.
그러나, 하나 또는 그 이상의 호환가능한 고체 또는 액체 충전제 또는 희석제 또는 캡슐화(encapsulating) 화합물은 치료될 환자에 투여하기에 적절한, 약학적 조성물에 대해 잘 사용될 수 있다. 본 발명에 사용된 용어 "호환가능한"은 약학적 조성물의 이들 성분(constituents)이 전형적인 사용 환경 하에서 약학적 조성물의 약학적 효과를 상당히 감소시킬 수 있는 상호 작용이 일어나지 않는 조건에서 본 발명에 정의된 폴리머 담체 화물 복합체와 혼합될 수 있는 것을 의미한다. 약학적으로 허용가능한 담체, 충진제 및 희석제는 반드시, 물론, 치료될 사람에게 투여되기에 그들을 적합하게 하는 충분히 높은 순도 및 충분히 낮은 독성을 갖는다. 약학적으로 허용가능한 담체, 충진제 또는 이의 성분으로 사용될 수 있는 화합물의 일부 실시예는 예를 들어 락토스, 글루코스 및 수크로스와 같은 당; 예를 들어 옥수수 전분 또는 감자 전분과 같은 전분; 예를 들어 소듐 카르복시메틸셀룰로스, 에틸셀룰로스, 셀룰로스 아세테이트와 같은 셀룰로스 및 이의 유도체; 분말화된 트라가칸스; 맥아; 젤라틴; 수지; 예를 들어 스테아릭산, 마그네슘 스테아레이트와 같은 고체 활주제; 칼슘 설페이트; 예를 들어 땅콩 오일, 목화씨 오일, 참깨 오일, 올리브 오일, 옥수수 오일 및 테오브로마로부터 오일과 같은 식물성 오일; 예를 들어 폴리프로필렌 글리콜, 글리세롤, 솔비톨, 만니톨 및 폴리에틸렌그리콜, 알긴산과 같은 폴리올이다.
특정한 실시예에 따르면, 독창적 약학적 조성물은 (추가적) 어쥬번트를 포함할 수 있다. 이러한 맥락에서, 어쥬번트는 선천적 면역 시스템의 면역 반응, 즉 비특이적 면역 반응을 시작 또는 증가시키는데 적절한, 어느 화합물로 이해될 수 있다. 즉, 투여될 때, 약학적 조성물은 전형적으로, 선택적으로 내부에 포함된, 어쥬번트에 따른 선천적 면역 반응을 유도한다. 이러한 어쥬번트는 통상의 기술자에게 알려진 어느 어쥬번트로부터 선택될 수 있고 본 발명의 경우, 즉 포유류에서 선천적 면역 반응의 유도를 돕는데 적합하다.
독창적 약학적 조성물은 경구로, 비경구로, 흡입 스프레이에 의해, 국소적으로, 직장으로, 비강으로, 구강으로, 질 동맥으로 또는 이식된 저장소(implanted reservoir)를 통해 투여될 수 있다. 본 발명에 사용된 용어 비경구는 피하(subcutaneous), 정맥내(intravenous), 근육내(intramuscular), 관절내(intra-articular), 마디내(intra-nodal), 활액막내(intra-synovial), 흉골내(intrasternal), 척추강내(intrathecal), 간장내(intrahepatic), 병소내(intralesional), 두개내(intracranial), 경피(transdermal), 피내(intradermal), 인트라푸모날(intrapulmonal), 복강내(intraperitoneal), 심장내(intracardial), 동맥내(intraarterial), 및 설하(sublingual) 주사 또는 인퓨전(infusion) 기술을 포함한다.
바람직하게는, 독창적 약학적 조성물은 비경구 주사, 더욱 바람직하게는 피하(subcutaneous), 정맥내(intravenous), 근육내(intramuscular), 관절내(intra-articular), 마디내(intra-nodal), 활액막내(intra-synovial), 흉골내(intrasternal), 척추강내(intrathecal), 간장내(intrahepatic), 병소내(intralesional), 두개내(intracranial), 경피(transdermal), 피내(intradermal), 인트라푸모날(intrapulmonal), 복강내(intraperitoneal), 심장내(intracardial), 동맥내(intraarterial), 및 설하(sublingual) 주사 또는 인퓨전(infusion) 기술을 통해 투여될 수 있다. 특히 피내, 피하 및 근육내 주사가 바람직하다. 약학적 조성물의 살균 주사가능한 형태는 수용성 또는 유성 현탁액일 수 있다. 이들 현탁액은 적절한 분산 또는 습윤제 및 현탁제를 사용하여 기술분야에 알려진 기술에 따라 제조될 수 있다. 살균 주사가능한 제조는 또한 비독성 비경구적으로 적합한 희석제 또는 용액 내, 예를 들어 1,3-부탄디올 내 용액처럼 살균 주사가능한 용액 또는 현탁액일 수 있다. 허용가능한 수송체(vehicles) 및 용액 가운데 수행될 수 있는 것은 물, 링거(Ringer's) 용액 및 등장성 염화나트륨 용액이다. 추가로, 살균, 고정된 오일은 관습적으로 용액 또는 현탁 매질로써 수행된다. 이러한 목적을 위해 어느 완하성 지방유(bland fixed oil)는 합성 모노- 또는 디- 글리세라이드를 포함하여 수행될 수 있다. 올레산 및 이의 글리세라이드 유도체는 주사가능한 제조에 유용한 것과 같이, 지방산은 올리브 오일 또는 캐스터 오일과 같이, 특히 그들의 폴리옥시에틸렌화된 버전(polyoxyethylated versions) 내, 천연의 약학적으로 허용가능한 오일이다. 이들 오일 용액 또는 현탁액은 또한 에멀전 및 현탁액을 포함하는 약학적으로 허용가능한 투여 형태의 제형 내에 통상적으로 사용되는 긴사슬 알코올 희석제 또는 카르복시메틸 셀룰로스 또는 유사한 분산제와 같은 분산제를 포함할 수 있다. 다른 일반적으로 사용되는 트윈(Tweens), 스판(Spans) 및 다른 유화제와 같은 계면활성제 또는 약학적으로 허용가능한 고체, 액체 또는 다른 투여 형태의 제조에 일반적으로 사용되는 생물학적 이용가능성 증진제(bioavailability enhancers)는 또한 약학적 조성물의 제형의 목적을 위해 사용될 수 있다.
본 발명에 정의된 독창적인 약학적 조성물은 또한 캡슐, 정제, 수용성 현탁액 또는 용액을 포함하며, 이에 제한되지 않는, 어느 경구적으로 허용가능한 투여 형태 내 경구적으로 투여될 수 있다. 경구적 사용을 위한 정제의 경우에, 담체는 일반적으로 락토스 및 옥수수 전분을 포함하여 사용된다. 마그네슘 스테아레이트와 같은 활택제(Lubricating agents)는 또한 전형적으로 첨가된다. 캡슐 형태로 경구 투여를 위해, 유용한 희석제는 락토스 및 건조 옥수수 전분을 포함한다. 수용성 현탁액이 경구적 사용을 위해 필요한 경우, 활성 성분, 즉 폴리머 담체 화물 복합체는 유화 및 현탁제에 결합된다. 만약 필요한 경우, 특정한 감미(sweetening), 조미(flavoring) 또는 착색 제제는 또한 첨가될 수 있다.
독창적 약학적 조성물은 또한, 특히 치료 목표가 국소적 적용에 의해 즉시 접근 가능한 부위 또는 기관(organs)을 포함, 예를 들어 피부의 또는 어느 다른 접근가능한 상피 조직의 질병을 포함할 때, 국소적으로 투여될 수 있다. 적절한 국소 제형은 이들 부위 또는 기관의 각각을 위해 용이하게 제조될 수 있다. 국소 적용을 위해, 약학적 조성물은 폴리머 담체 화물 복합체가 현탁되거나 하나 또는 그 이상의 담체에 용해된 것을 포함하는, 적절한 연고(ointment)로 제조(formulated)될 수 있다. 국소 투여를 위한 담체는 미네랄 오일, 액체 광유(petrolatum), 백색 광유(white petrolatum), 프로필렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌, 폴리옥시프로필렌 화합물, 유화 왁스 및 물을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 그렇지 않으면, 약학적 조성물은 적절한 로션 또는 크림으로 제조(formulated)될 수 있다. 본 발명의 맥락에서, 적절한 담체는 미네랄 오일, 솔비탄 모노스테아레이트, 폴리솔베이트 60, 세틸 에스터 왁스, 세테아릴 알코올, 2-옥틸도데카놀, 벤질알콜 및 물을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
독창적 약학적 조성물은 전형적으로 특히 본 발명에 정의된 폴리머 담체 화물 복합체 또는 이와 같은 핵산의 약학적 조성물의 성분의 "안전하고 유효한 량"을 포함한다. 본 발명에 사용된 것처럼, "안전하고 유효한 량"은 본 발명에 정의된 질병 또는 질환(disorder)의 긍정적인 변화를 현저하게 유도하는데 충분한 것과 같은 폴리머 담체 화물 복합체의 양을 의미한다. 동시에, 그러나 "안정하고 효과적인 양"은 심각한 부작용을 피하고 장점 및 위험 사이의 민감한 관계를 허용하기에 충분히 작다. 이들 한계의 결정은 전형적으로 민감한 의료적 판단의 범위 내에 놓인다. 약학적 조성물의 성분의, 특히 본 발명에 정의된 폴리머 담체 화물 복합체의 또는 적어도 하나의 항원의 "안전하고 유효한 량"은 나아가 특히 치료될 특정한 조건 및 또한 치료될 환자의 연령 및 신체적 조건, 체중, 일반적 건강, 성별, 식습관(diet), 투여 시간, 배출(excretion) 속도, 약물 조합, 폴리머 담체 화물 복합체 또는 항원의 활성, 상태의 심각성, 치료의 기간, 병행 치료의 본성(nature), 특히 약학적으로 허용가능한 담체가 사용된 것의, 및 유사한 인자와 관련하여, 동행 의사의 지식 및 경험 내에서, 다양할 수 있다. 약학적 조성물은 인간을 위해 및 또한 가축과 관련된 의료 목적을 위해, 바람직하게는 일반적인 약학적 조성물로써 또는 백신으로써, 인간 의료 목적을 위해 사용될 수 있다.
독창적 약학적 조성물은 추가적으로 만약 필요한 경우, 이의 면역원성 또는 면역 자극성 용량(capacity)을 증가시키기 위해 하나 또는 그 이상의 보조(auxiliary) 물질을 포함할 수 있다. 본 발명에 정의된 독창적 약학적 조성물에 선택적으로 포함될 수 있는, 본 발명에 정의된 (어쥬번트) 폴리머 담체 화물 복합체의 및 보조 물질의 시너지 효과는 바람직하게는 이에 따라 달성된다. 보조 물질의 다양한 형태에 따라, 다양한 매커니즘이 이러한 점에 고려될 수 있다. 예를 들어 수상돌기세포(DCs)의 성숙을 허용하는 화합물, 예를 들어 리포폴리다당류, TNF-알파 또는 CD40 리간드는 적절한 보조 물질의 첫번째 클래스를 형성한다. 일반적으로, 보조 물질로써 목표된 환경에 증가되고/또는 영향을 주기 위한 면역 반응을 허용하는, "위험 신호" (LPS, GP96, 등) 또는 GM-CFS와 같은 사이토카인의 환경에서 면역 시스템에 영향을 주는 어느 제제를 사용하는 것이 가능하다. 특히 보조 물질은 나아가 선천적 면역 반응을 촉진하는, IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-12, IL-13, IL-14, IL-15, IL-16, IL-17, IL-18, IL-19, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, IL-24, IL-25, IL-26, IL-27, IL-28, IL-29, IL-30, IL-31, IL-32, IL-33, INF-알파, IFN-베타, INF-감마, GM-CSF, G-CSF, M-CSF, LT-베타 또는 TNF-알파, hGH와 같은 성장 인자와 같은, 모노카인, 림포카인, 인터루킨 또는 케모카인과 같은 사이토카인이다.
나아가, 독창적인 약학적 조성물 내 포함될 수 있는 첨가제는 예를 들어 Tween®과 같은 유화제; 예를 들어 소듐 라우릴 설페이트와 같은 습윤제; 착색제; 미감 전달(taste-imparting)제, 약학적 담체; 정제 형성 제제; 안정화제; 항산화제; 보존제이다.
독창적 약학적 조성물은 또한 추가적으로, 인간 Toll-유사 수용체 TLR1, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8, TLR9, TLR10에 이의 결합 친화도(리간드로써)에 따른 또한, 쥣과 Toll-유사 수용체 TLR1, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8, TLR9, TLR10, TLR11, TLR12 또는 TLR13에 이의 결합 친화도(리간드로써)에 따른 면역 자극성이 있는 것으로 알려진, 어느 추가 화합물을 포함할 수 있다.
독창적 약학적 조성물은 또한 추가적으로 또는 대안적으로 면역자극성 RNA, 즉 (선천적) 면역 반응을 시작하거나 증가시키는, 면역자극성 RNA로부터 유래된 RNA를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 이러한 면역자극성 RNA는 본 발명에 정의된 것처럼 일반적일 수 있다.
이러한 맥락에서 독창적 약학적 조성물에 첨가될 수 있는, 화합물의 다른 클래스는 CpG 핵산, 특히 CpG-RNA 또는 CpG-DNA일 수 있다. CpG-RNA 또는 CpG-DNA는 단일 가닥 CpG-DNA(ss CpG-DNA), 이중 가닥 CpG-DNA(dcDNA), 단일 가닥 CpG-RNA(ss CpG-RNA) 또는 이중 가닥 CpG-RNA(ds CpG-RNA)일 수 있다. CpG 핵산은 바람직하게는 CpG-RNA의 형태, 더욱 바람직하게는 단일 가닥 CpG-RNA (ss CpG-RNA)의 형태이다. CpG 핵산은 바람직하게는 적어도 하나 또는 그 이상의 (유사분열촉진(mitogenic)) 시토신/구아닌 이핵산 서열(들)(CpG 모티프(들))을 포함한다. 하나의 바람직한 대안에 따르면, 적어도 하나의 CpG 모티프는 이들 서열 내에 포함되고, 즉 CpG 모티프의 C(시토신) 및 G(구아닌)은 비메틸화된다. 이들 서열에 선택적으로 포함된 모든 추가적 시토신 또는 구아닌은 메틸화되거나 비메틸화될 수 있다. 나아가 바람직한 대안에 따르면, 그러나 CpG 모티프의 C(시토신) 및 G(구아닌)은 또한 메틸화된 형태로 존재할 수 있다.
본 발명의 맥락에서, 독창적 약학적 조성물 내 포함된 폴리머 담체 화물 복합체 내의 핵산 화물은 바람직하게는 상기 정의된 것과 같다. 더욱 바람직하게는, 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산, 바람직하게는 약학적 조성물에 포함된 것은 전형적으로 본 발명에 정의된 면역 자극성 핵산, 예를 들어 CpG-DNA 또는 면역자극성 RNA(isRNA), 바람직하게는 isRNA 이다. 그렇지 않으면 또한 추가적으로, 폴리머 담체 화물 복합체의 핵산, 바람직하게는 약학적 조성물 내에 포함된 것은 본 발명에 정의된 코딩 핵산 서열, 바람직하게는 cDNA 또는 mRNA, 더욱 바람직하게는 본 발명에 정의된 바람직한 코딩 어쥬번트 단백질이다. 이러한 맥락에서, 폴리머 담체 화물 복합체는 전형적으로 치료될 환자 내 선천적 면역 반응을 시작시킨다.
이러한 맥락 내 특정한 실시예에서, 어쥬번트 단백질은 폴리머 담체 화물 복합체의 및, 바람직하게는 폴리머 담체의 성분인 것이 바람직하다.
추가적 양태에 따르면, 본 발명은 또한 키트, 성분으로써 단독 또는 선택적인 추가 성분과의 조합을 포함하고, 하기를 포함하는(첫번째 성분으로써), 특히 일부의 키트를 제공한다:
(A) 하기를 포함하는 폴리머 담체 화물 복합체:
a) (담체로써) 이황화 가교결합된 양이온성 성분을 포함하는, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체; 및
b) (화물로써) 적어도 하나의 핵산 분자,
및 (두번째 성분으로써):
(B) 하기로부터 선택된 적어도 하나의 항원:
(i) 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원;
(ii) 알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원;
(iii) 자가면역 질병과 관련된 항원; 또는
(iv) 암 또는 종양 질병과 관련된 항원, 일부 실시예에서 암 또는 종양 질병과 관련된 항원은 하기를 포함하는 항원과 다른 것임: (x) 유전자형 면역글로불린(예를 들어 유전자형 항체 또는 유전자형 B 세포 수용체); 및/또는 (y) 적어도 하나의 유전자형 T 세포 수용체,
또는 상기 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체;
본 발명의 어느곳에 정의된 각 경우에, 및 선택적으로 투여에 대한 정보가 있는 기술적 지시 및 폴리머 담체 화물 복합체 및 적어도 하나의 항원의 투여량(dosage). 이러한 키트, 바람직하게는 일부의 키트는 예를 들어 어느 적용 또는 본 발명에 정의된 사용을 위해 적용될 수 있다. 일부의 키트로써 나타날 때, 이러한 키트는 추가로 키트의 다른 일부 내 독창적 약학적 조성물의 각 성분을 포함할 수 있다.
본 발명의 키트의 특정한 실시예에서, 항원은 백신에 포함된다.
본 발명은 나아가 독창적 약학적 조성물(예를 들어 보조용 백신(adjuvanted vaccine)) 또는 본 발명의 어느 곳에 정의된 것과 같은 키트 또는 일부의 키트의 여러 적용 및 사용을 제공한다.
이러한 맥락에서, 본 발명은 또한, 그에 따라 특히 치료 목적의 독창적 약학적 조성물을 적용 또는 투여하는, 형질전환 및/또는 세포, 조직 또는 유기체의 치료 방법을 제공한다. 이러한 맥락에서, 전형적으로 독창적 약학적 조성물을 제조한 이후에, 독창적 약학적 조성물은 바람직하게는, 바람직하게는 본 발명에 정의된 어느 투여 방법(modes)을 사용하여, 세포, 조직 또는 유기체에 투여된다. 형질전환 및/또는 세포 치료 방법은 생체 외(in vitro), 생체 내(in vivo) 또는 탈체(ex vitro)에서 수행될 수 있다.
나아가, 본 발명은 치료에 및/또는 약제(medicament)로써, 바람직하게는 보조 백신과 같은 백신으로써, 본 발명의 어느 곳에 정의된 각 경우에 약학적 조성물의 또는 키트 또는 일부의 키트의 사용을 제공한다.
또한 본 발명의 모든 양태의 특정한 실시예에서, 적어도 하나의 항원은 하기로부터 선택된 것이 아니다: (x) 유전자형 면역글로불린(유전자형 항체 또는 유전자형 B 세포 수용체); 또는 (y) 적어도 하나의 유전자형 T 세포 수용체; 및 선택적으로 이러한 항원의 절편, 변이체 및/또는 변이체가 아니다.
본 발명의 이러한 양태에서, 본 발명의 어느 곳에 정의된 각 경우에, 감염성 질병, 알러지 또는 알러지성 질병, 자가면역 질병 및 암 또는 종양 질병의 치료에, 특히 독창적 약학적 조성물의 또는 본 발명에 정의된 것과 동일한 것을 포함하는 키트 또는 일부의 키트의 사용이 바람직하다.
이러한 맥락에서, 감염성 질병은 바람직하게는 바이러스성, 박테리아성 또는 원생동물성(protozoological) 감염성 질병이다. 이러한 감염성 질병, 바람직하게는 (바이러스성, 박테리아성 또는 원생동물성) 감염성 질병은 전형적으로 아시네토박터 감염(Acinetobacter infections), 아프리카 수면병(African sleeping sickness) (아프리카 트리파노소마병(African trypanosomiasis)), AIDS (후천적 면역결핍 증후군(Acquired immunodeficiency syndrome)), 간아메바증(Amoebiasis), 아나플라즈마병(Anaplasmosis), 탄저병(Anthrax), 맹장염(Appendicitis), 용혈성 아카노박테리아균 감염(Arcanobacterium haemolyticum infections), 아르헨티나 출혈열(Argentine hemorrhagic fever), 회충증(Ascariasis), 에스페길루스증(Aspergillosis), 아스트로바이러스 감염(Astrovirus infections), 무좀(Athlete's foot), 바베시아증(Babesiosis), 바실러스 세레우스 감염(Bacillus cereus infections), 박테리아 수막염(Bacterial meningitis), 세균성 폐렴(Bacterial pneumonia), 세균성 질염(Bacterial vaginosis) (BV), 박테로이드 감염(Bacteroides infections), 발란티듐증(Balantidiasis), 베일리사스카리스 감염(Baylisascaris infections), 빌하르쯔주혈흡충증(Bilharziosis), BK 바이러스 감염, 흑색사모증(Black piedra), 블라스토시스티스 호미니스 감염(Blastocystis hominis infections), 블라스토미세스증(Blastomycosis), 볼리비아 출혈열(Bolivian hemorrhagic fever), 보렐리아 감염(Borrelia infections)(보렐리아증(Borreliosis)), 보툴리눔 식중독(Botulism)(및 유아 보툴리눔(Infant botulism)), 소 촌충(Bovine tapeworm), 브라질 출혈열(Brazilian hemorrhagic fever), 브루셀라병(Brucellosis), 부르크홀데리아 감염(Burkholderia infections), 부룰리 궤영(Buruli ulcer), 칼리시바이러스 감염(Calicivirus infections) (노로바이러스(Norovirus) 및 사포바이러스(Sapovirus)), 캄필로박테리아증(Campylobacteriosis), 칸디다증(Candidiasis) (구강칸디다증(Candidosis)), 카닌 촌충 감염증(Canine tapeworm infections), 고양이 발톱병(Cat-scratch disease), 샤가스병(Chagas Disease) (아메리칸 트리파노소마증(American trypanosomiasis)), 연성 하감(Chancroid), 수두(Chickenpox), 클라미디아 감염증(Chlamydia infections), 트라코마 클라미디아 감염증(Chlamydia trachomatis infections), 클라미도필라 뉴모니아 감염증(Chlamydophila pneumoniae infections), 콜레라(Cholera), 색소효모균증(Chromoblastomycosis), 성병림프육아종(Climatic bubo), 간흡충증(Clonorchiasis), 클로스트리듐 디피실리균 감염(Clostridium difficile infections), 콕시디오이데스 진균증(Coccidioidomycosis), 감기(Cold), 콜로라도진드기열(Colorado tick fever) (CTF), 보통 감기(Common cold) (급성 바이러스성 비인두염(Acute viral rhinopharyngitis); 급성 코감기(Acute coryza)), 광역동요법(Condyloma acuminata), 결막염(Conjunctivitis), 크로이츠펠트 야곱병(Creutzfeldt-Jakob disease) (CJD), 크림-콩고 출혈열(Crimean-Congo hemorrhagic fever) (CCHF), 효모균증(Cryptococcosis), 크립토스포리디오시스증(Cryptosporidiosis), 피부의 유충 이행증(Cutaneous larva migrans) (CLM), 피부의 레이쉬마니아증(Cutaneous Leishmaniosis), 원포자충 감염증(Cyclosporiasis), 낭충증(Cysticercosis), 사이토메갈로바이러스 감염(Cytomegalovirus infections), 뎅구열(Dengue fever), 피부 사상균증(Dermatophytosis), 이핵 아메바증(Dientamoebiasis), 디프테리아(Diphtheria), 열두조충증(Diphyllobothriasis), 도노바니아증(Donavanosis), 드라쿤쿨루스증(Dracunculiasis), 초여름 수막뇌염(Early summer meningoencephalitis) (FSME), 에볼라 출혈열(Ebola hemorrhagic fever), 포충증(Echinococcosis), 엘리히증(Ehrlichiosis), 요충증(Enterobiasis) (요충 감염(Pinworm infections)), 장구균 감염(Enterococcus infections), 장내바이러스 감염(Enterovirus infections), 발진티푸스(Epidemic typhus), 후두개염(Epiglottitis), 엡스테인-바 바이러스 전염성 단핵증(Epstein-Barr Virus Infectious Mononucleosis), 전염성 홍반(Erythema infectiosum) (제5병(Fifth disease)), 돌발성발진(Exanthem subitum), 비대흡충증(Fasciolopsiasis), 간질증(Fasciolosis), 치명적 가족성 불면증(Fatal familial insomnia) (FFI), 제5병(Fifth disease), 필라리아병(Filariasis), 어독(Fish poisoning) (시구아테라(Ciguatera)), 짼머리 촌충(Fish tapeworm), 독감(Flu), 클로스트리듐 페르프린젠스(Clostridium perfringens)에 의한 식중독, 여우 촌충(Fox tapeworm), 자유 생활 아메바 감염(Free-living amebic infections), 푸소박테리움 감염(Fusobacterium infections), 가스 괴저(Gas gangrene), 지오트리쿰증(Geotrichosis), 게르스트만 슈트라우슬러 샤인커 증후군(Gerstmann-Straussler-Scheinker syndrome) (GSS), 편모충증(Giardiasis), 마비저(Glanders), 악구충증(Gnathostomiasis), 임질(Gonorrhea), 서혜부 육아종(Granuloma inguinale) (도노바니아증(Donovanosis)), 그룹 A 연쇄상구균 감염(Group A streptococcal infections), 그룹 B 연쇄상구균 감염(Group B streptococcal infections), 헤모필루스속 인플루엔자 감염(Haemophilus influenzae infections), 수족구병(Hand foot and mouth disease) (HFMD), 한타바이러스 폐 증후군(Hantavirus Pulmonary Syndrome) (HPS), 헬리코박터 파일로리 감염(Helicobacter pylori infections), 용혈성 요독성 증후군(Hemolytic-uremic syndrome) (HUS), 유행성 출혈열(Hemorrhagic fever with renal syndrome) (HFRS), 헤니파바이러스 감염(Henipavirus infections), A형 간염(Hepatitis A), B형 간염(Hepatitis B), C형 간염(Hepatitis C), D형 간염(Hepatitis D), E형 간염(Hepatitis E), 단순 포진(Herpes simplex), I형 단순 포진(Herpes simplex type I), II형 단순 포진(Herpes simplex type II), 대상 포진(Herpes zoster), 히스토플라스마증(Histoplasmosis), 빈 무사마귀(Hollow warts), 십이지장충 감염(Hookworm infections), 인간 보카바이러스 감염(Human bocavirus infections), 인간 어윈지 엘리히증(Human ewingii ehrlichiosis), 인간 과립구 아나플라즈마증(Human granulocytic anaplasmosis) (HGA), 인간 메타뉴모바이러스 감염(Human metapneumovirus infections), 인간 단구 엘리히증(Human monocytic ehrlichiosis), 인유두종 바이러스 감염(Human papillomavirus (HPV) infections), 인간 파라인플루엔자 바이러스 감염(Human parainfluenza virus infections), 막양조충증(Hymenolepiasis), 인플루엔자(Influenza), 아이소스포라증(Isosporiasis), 일본 뇌염(Japanese encephalitis), 가와사키병(Kawasaki disease), 각막염(Keratitis), 킨젤라 킨가에 감염(Kingella kingae infections), 쿠루병(Kuru), 람블편모충증(Lambliasis) (지아르디아증(Giardiasis)), 라사열(Lassa fever), 리지오넬로시스(Legionellosis) (재향 군인병(Legionnaires' disease), 레지오넬라병(Pontiac fever)), 리슈마니어증(Leishmaniasis), 나병(Leprosy), 렙토스피라병(Leptospirosis), 이(Lice), 선회병(Listeriosis), 라임 보렐리아증(Lyme borreliosis), 라임병(Lyme disease), 림프액 필라리아병(Lymphatic filariasis) (상피병(Elephantiasis)), 림프구성 맥낙 수막염(Lymphocytic choriomeningitis), 말라리아(Malaria), 마르부르크 출혈열(Marburg hemorrhagic fever) (MHF), 마르부르그바이러스(Marburg virus), 홍역(Measles), 멜리오이도시스(Melioidosis) (휘트모어병(Whitmore's disease)), 수막염(Meningitis), 메닌고코컬병(Meningococcal disease), 메타고니미아시스(Metagonimiasis), 미포자충증(Microsporidiosis), 소형 촌충(Miniature tapeworm), 유산(Miscarriage) (전립선 염증(prostate inflammation)), 전염성 연속종(Molluscum contagiosum) (MC), 단핵증(Mononucleosis), 볼거리(Mumps), 발진열(Murine typhus) (고유 발진열(Endemic typhus)), 균종(Mycetoma), 미코플라스마 호미니스(Mycoplasma hominis), 마이코플라스마 폐렴(Mycoplasma pneumonia), 구데기증(Myiasis), 나피/디아퍼 피부염(Nappy/diaper dermatitis), 신생아 결막염(Neonatal conjunctivitis) (신생아 안염(Ophthalmia neonatorum)), 신생아 패혈증(Neonatal sepsis) (융모양막염(Chorioamnionitis)), 노카르디아증(Nocardiosis), 수암(Noma), 놀워크 바이러스 감염(Norwalk virus infections), 사상충증(Onchocerciasis) (사상충증(River blindness)), 골수염(Osteomyelitis), 중이염(Otitis media), 파라콕시디오이드진균증(Paracoccidioidomycosis) (남아메리카분아균증(South American blastomycosis)), 폐흡충증(Paragonimiasis), 파라티푸스(Paratyphus), 파스투렐라병(Pasteurellosis), 머리 이 기생증(Pediculosis capitis) (머리 이(Head lice)), 몸 이 기생증(Pediculosis corporis) (몸 이(Body lice)), 사면발이기생증(Pediculosis pubis) (사면발이(Pubic lice, Crab lice)), 골반내 염증 질환(Pelvic inflammatory disease) (PID), 백일해 (Whooping cough), 페이퍼 선열(Pfeiffer's glandular fever), 페스트(Plague), 폐렴구균 감염(Pneumococcal infections), 뉴머시스티스성 폐렴(Pneumocystis pneumonia) (PCP), 폐렴(Pneumonia), 소아마비(Polio) (아동기 절뚝거림(childhood lameness)), 급성 회백수염(Poliomyelitis), 돼지 촌충(Porcine tapeworm), 프레보텔라 감염(Prevotella infections), 원발성 아메바성 수막뇌염(Primary amoebic meningoencephalitis) (PAM), 진행성 다병소성 백질뇌증(Progressive multifocal leukoencephalopathy), 가성크루프(Pseudo-croup), 앵무병(Psittacosis), Q열병(Q fever), 야토병(Rabbit fever), 광견병(Rabies), 서교열(Rat-bite fever), 라이터 증후군(Reiter's syndrome), 호흡기 합포체 바이러스 감염(Respiratory syncytial virus infections) (RSV), 비육아종(Rhinosporidiosis), 리노바이러스 감염(Rhinovirus infections), 리케치아 감염(Rickettsial infections), 리케치아두창(Rickettsialpox), 리프트밸리열(Rift Valley fever) (RVF), 로키산 홍반열(Rocky mountain spotted fever) (RMSF), 로타바이러스 감염(Rotavirus infections), 풍진(Rubella), 살모넬라 파라티푸스(Salmonella paratyphus), 살모넬라 발진티푸스(Salmonella typhus), 살모넬라증(Salmonellosis), SARS (중증급성 호흡기 증후군(Severe Acute Respiratory Syndrome)), 옴(Scabies), 성홍열(Scarlet fever), 주혈흡충병(Schistosomiasis) (빌하르쯔주혈흡충증(Bilharziosis)), 털진드기병(Scrub typhus), 패혈증(Sepsis), 적리(Shigellosis) (세균성 이질(Bacillary dysentery)), 대상 포진(Shingles), 천연두(Smallpox) (바리올라(Variola)), 연성 하감(Soft chancre), 스포로트리코시스(Sporotrichosis), 포도상구균 식중독(Staphylococcal food poisoning), 포도상구균 감염(Staphylococcal infections), 간충증(Strongyloidiasis), 매독(Syphilis), 촌충 기생(Taeniasis), 파상풍(Tetanus), 삼일열(Three-day fever), 진드기매개뇌염(Tick-borne encephalitis), 백선성모창(Tinea barbae) (모창(Barber's itch)), 두부 백선(Tinea capitis) (두피의 백선(Ringworm of the Scalp)), 체부 백선(Tinea corporis) (몸의 백선(Ringworm of the Body)), 고부 백선(Tinea cruris) (완선(Jock itch)), 손 백선(Tinea manuum) (손의 백선(Ringworm of the Hand)), 흑색선(Tinea nigra), 족부백선(Tinea pedis) (무좀(Athlete's foot)), 손톱 백선(Tinea unguium) (조갑진균증(Onychomycosis)), 어루러기(Tinea versicolor) (전풍(Pityriasis versicolor)), 톡소카라증(Toxocariasis) (안구 유충이행증(Ocular Larva Migrans) (OLM) 및 장기 유충이행증(Visceral Larva Migrans) (VLM)), 톡소플라스마증(Toxoplasmosis), 선모충증(Trichinellosis), 트리코모나스증(Trichomoniasis), 편충증(Trichuriasis) (편충 감염(Whipworm infections)), 트리퍼(Tripper), 트리파노소마증(Trypanosomiasis) (수면병(sleeping sickness)), 털진드기병(Tsutsugamushi disease), 폐결핵(Tuberculosis), 야토병(Tularemia), 발진티푸스(Typhus), 발진티푸스(Typhus fever), 우레아플라스마 우레알리티쿰 감염(Ureaplasma urealyticum infections), 질염(Vaginitis) (질염(Colpitis)), 변종 크로이츠펠트 야곱병(Variant Creutzfeldt-Jakob disease) (vCJD, nvCJD), 베네스 웰라형 마뇌염(Venezuelan equine encephalitis), 베네수엘라 출혈열(Venezuelan hemorrhagic fever), 바이러스성 폐렴, 내재 레이쉬마니아증(Visceral Leishmaniosis), 무사마귀(Warts), 웨스트나일 열(West Nile Fever), 서부 마뇌염(Western equine encephalitis), 백색사모(White piedra) (블랑카 백선(Tinea blanca)), 백일해(Whooping cough), 효모 곰팡이 반점(Yeast fungus spots), 황열병(Yellow fever), 예르시니아 가성피저 감염(Yersinia pseudotuberculosis infections), 예르시니아증(Yersiniosis), 및 접합균증(Zygomycosis)으로 이루어진 리스트로부터 선택된다.
알러지 또는 알러지성 질병은 바람직하게는 화분 알러지(잔디 화분, 나무 화분(예를 들어 개암나무, 자작나무, 오리나무, 물푸레나무의 화분), 꽃 화분, 허브 화분(예를 들어 쑥 화분)에 대한 알러지), 털 진드기 알러지, 곰팡이 알러지(예를 들어 아크레모늄(Acremonium), 아스페르길루스(Aspergillus), 클라도스포리움(Cladosporium), 푸사리움(Fusarium), 뮤코(Mucor), 페니실리움(Penicillium), 리조푸스(Rhizopus), 스트키보트리스(Stachybotrys), 트리코데마(Trichoderma), 또는 알터나리아(Alternaria)에 대한 알러지), 애완동물 알러지(동물에 대한; 예를 들어 고양이, 개, 말에 대한 알러지), 식품 알러지(예를 들어 생선(예를 들어 농어, 대구, 도다리), 해산물(예를 들어 게, 랍스터, 새우), 달걀, 밀, 견과류(예를 들어 땅콩, 아몬드, 캐슈, 호두), 콩, 우유 등에 대한 알러지) 또는 곤충 자상 알러지(곤충 베놈(venom), 예를 들어 말벌(wasps), 벌(bees), 호넷(hornets), 개미, 모기, 또는 진드기에 대한 알러지)로부터 선택된다.
다른 특정한 실시예에 따르면, 본 발명에 정의된 질병은 하기에 정의된 자가면역 질병을 포함한다. 자가면역 질병은 바람직하게는 애디슨병(Addison disease) (자가면역 부신염(autoimmune adrenalitis), 애디슨 질병(Morbus Addison)), 원형 탈모증(alopecia areata), 애디슨 빈혈증(Addison's anemia) 비에르머 질병(Morbus Biermer), 자가면역 용혈성 빈혈(autoimmune hemolytic anemia) (AIHA), 콜드(cold) 타입의 자가면역 용혈성 빈혈(AIHA) (한냉혈구응집소 질병(cold hemagglutinine disease), 콜드 자가면역 용혈성 빈혈(AIHA) (한랭응집소 질병(cold agglutinin disease)), (CHAD)), 웜(warm) 타입의 자가면역 용혈성 빈혈(AIHA)(웜 AIHA, 웜 자가면역 용혈성 빈혈(warm autoimmune haemolytic anemia) (AIHA)), 자가면역 용혈성 도나스-란트스타이너 빈혈(autoimmune hemolytic Donath-Landsteiner anemia) (발작성한랭혈색소뇨증(paroxysmal cold hemoglobinuria)), 휴즈 증후군(antiphospholipid syndrome)(APS), 아테롬성 동맥 경화증(atherosclerosis), 자가면역 관절염(autoimmune arthritis), 측두근 동맥염(arteriitis temporalis), 타카야수 동맥염(Takayasu arteriitis) (타카야수 질병(Takayasu's disease), 대동맥궁 질병(aortic arch disease)), 측두 동맥염(temporal arteriitis)/거세포동맥염(giant cell arteriitis), 자가면역 만성위염(autoimmune chronic gastritis), 자가면역 불임(autoimmune infertility), 자가면역 내이 질병(autoimmune inner ear disease) (AIED), 바제도병(Basedow's disease) (바제도 질병(Morbus Basedow)), 베크테레브병(Bechterew's disease) (베크테레브 질병(Morbus Bechterew), 강직성 척추염(ankylosing spondylitis, spondylitis ankylosans)), 베체트 증후군(Behcet's syndrome) (베체트 질병(Morbus Behcet)), 자가면역 염증성 장 질환을 포함하는 장 질환(bowel disease) (궤양성 대장염(colitis ulcerosa) (크론병(Morbus Crohn, Crohn's disease))을 포함), 심근증(cardiomyopathy), 특히 자가면역 심근증, 특발성 팽창 심근증(idiopathic dilated cardiomyopathy) (DCM), 스프루 피부염(celiac sprue dermatitis) (글루텐 매개 장질환(gluten mediated enteropathia)), 만성 피로 면역 장애 증후군(chronic fatigue immune dysfunction syndrome) (CFIDS), 만성 염증성 탈수초성 다발성 신경병증(chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy) (CIDP), 만성 다발성 관절염(chronic polyarthritis), 처그-스트라우스 증후군(Churg-Strauss syndrome), 반흔성유천포창(cicatricial pemphigoid), 코간 증후군(Cogan syndrome), CREST 증후군 (피부석회화(Calcinosis cutis), 레이노드 현상(Raynaud phenomenon), 식도의 운동 장애(motility disorders of the esophagus), 스크레로닥틸리아(sklerodaktylia) 및 모세혈관확장(teleangiectasia)을 갖는 증후군), 크론병(Crohn's disease) (크론 질병(Morbus Crohn), 궤양성 대장염(colitis ulcerosa)), 피부 자가면역 질병 동안, 포진성 피부염(dermatitis herpetiformis), 피부근염(dermatomyositis), 당뇨(Diabetes), 제1형 당뇨병(Diabetes mellitus Type 1) (제1형 당뇨, 인슐린 의존성 당뇨병), 제2형 당뇨병(Diabetes mellitus Type 2) (제2형 당뇨), 필수 혼합된 한성글로불린혈증(essential mixed cryoglobulinemia), 필수 혼합된 한성글로불린혈증, 섬유근육통(fibromyalgia), 섬유근염(fibromyositis), 굿파스튜어 증후군(Goodpasture syndrome) (항-GBM 매개 사구체 신염(glomerulonephritis)), 대숙주성 이식편병(graft versus host disease), 기엥 바레 증후군(Guillain-Barre syndrome) (GBM, 다발성신경근염(Polyradikuloneuritis)), 혈액 자가면역 질병(haematologic autoimmune diseases), 하시모토 갑상선염(Hashimoto thyroiditis), 혈우병(hemophilia), 후천적 혈우병(acquired hemophilia), 간염(hepatitis), 자가면역 간염(autoimmune hepatitis), 특히 만성 간염의 자가면역 형태, 특발성 폐섬유증(idiopathic pulmonary fibrosis) (IPF), 특발 혈소판감소 자색반증(idiopathic thrombocytopenic purpura), 면역-혈소판감소성자반병(Immuno-thrombocytopenic purpura) (워호프 질병(Morbus Werlhof); ITP), IgA 신장해(nephropathy), 불임(infertility), 자가면역 불임, 소아 류머티스 관절염(juvenile rheumatoid arthritis) (스틸 질병(Morbus Still), 스틸 증후군(Still syndrome)), 람베르트 이튼 증후군(Lambert-Eaton syndrome), 편평태선(lichen planus), 경화성태선(lichen sclerosus), 홍반성 낭창(lupus erythematosus), 전신 홍반성 낭창(systemic lupus erythematosus) (SLE), 홍반성 낭창(lupus erythematosus) (원반(discoid) 형태), 라임 관절염(Lyme arthritis) (라임 질병(Lyme disease), 보렐리아 관절염(borrelia arthritis)), 메니에르병(Meniere's disease) (메니에르병(Morbus Meniere)); 혼합결합조직병(mixed connective tissue disease) (MCTD), 다발성 경화증(multiple sclerosis) (MS, 뇌척수염 전파(encephalomyelitis disseminate), 샤콧 병(Charcot's disease)), 중증 근무력증(Myasthenia gravis) (근무력증(myasthenia), MG), 근염(myosits), 다발성근염(polymyositis), 신경 자가면역 질병(neural autoimmune diseases), 신경엽(neurodermitis), 심상성천포창(pemphigus vulgaris), 수포성류천포창(bullous pemphigoid), 흉터 형성 류천포창(scar forming pemphigoid); 결절성다발성동맥염(polyarteriitis nodosa) (결절성동맥주위염(periarteiitis nodosa)), 다연골염(polychondritis) (전연골염(panchondritis)), 다분비선성(polyglandular) (자가면역) 증후군 (PGA 증후군, 슈밋 증후군(Schmidt's syndrome)), 류마티스성 다발근육통(Polymyalgia rheumatica), 일차 감마글로불린 결여증(primary agammaglobulinemia), 원발담즙성간경변(primary biliary cirrhosis) PBC, 일차 자가면역 담관염(primary autoimmune cholangitis)), 진행성 전신성 경화증(progressive systemic sclerosis) (PSS), 건선(Psoriasis), 심상성 건선(Psoriasis vulgaris), 레이노 현상(Raynaud's phenomena), 라이터 증후군(Reiter's syndrome) (라이터 질병(Morbus Reiter), 요도 결합 활액 증후군(urethral conjunctive synovial syndrome))), 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis) (RA, 만성 다발성 관절염(chronic polyarthritis), 관절의 류마티스성 질병, 류마티스성 열), 유육종증(sarcoidosis) (보엑 질병(Morbus Boeck), 베스니어-보엑-샤우만 질병(Besnier-Boeck-Schaumann disease)), 강직인간 증후군(stiff-man syndrome), 피부경화증(Sclerodermia), 경피증(Scleroderma), 쇠그렌 증후군(Sjogren's syndrome), 교감성 안염(sympathetic ophtalmia); 일시적 글루텐 불내성(Transient gluten intolerance), 장기 이식 거부(transplanted organ rejection), 포도막염(uveitis), 자가면역 포도막염(autoimmune uveiitis), 맥관염(Vasculitis), 백반(Vitiligo), (백반(leucoderma), 백반(piebold skin)), 및 베게너병(Wegner's disease) (베게너 질병(Morbus Wegner), 베게너 육아종증(Wegner's granulomatosis))으로부터 선택된다.
나아가, 암 또는 종양 질병은 바람직하게는 흑색종(melanomas), 악성 흑색종(malignant melanomas), 결장암(colon carcinomas), 림프종(lymphomas), 육종(sarcomas), 아세포종(blastomas), 신장암(renal carcinomas), 위장관 종양(gastrointestinal tumors), 신경교종(gliomas), 전립선 종양(prostate tumors), 방광암(bladder cancer), 직장 종양(rectal tumors), 위암(stomach cancer), 식도암(oesophageal cancer), 췌장암(pancreatic cancer), 간암(liver cancer), 유방암(mammary carcinomas) (= breast cancer), 자궁암(uterine cancer), 자궁 경부암(cervical cancer), 급성 골수 백혈병(acute myeloid leukaemia) (AML), 급성 림프 백혈병(acute lymphoid leukaemia) (ALL), 만성 골수성 백혈병(chronic myeloid leukaemia) (CML), 만성 림프구성 백혈병(chronic lymphocytic leukaemia) (CLL), 간종양(hepatomas), 예를 들어 파필로마 바이러스 유도된 암종(예를 들어 경부암(cervical carcinoma = cervical cancer)과 같은 다양한 바이러스 유도된 종양, 선암(adenocarcinomas), 헤르페스 바이러스 유도된 종양(herpes virus-induced tumors) (예를 들어 버키트 림프종(Burkitt's lymphoma), EBV 유도된 B 세포 림프종(EBV-induced B-cell lymphoma)), B형 간염 유도된 종양(heptatitis B-induced tumors) (간세포 암종(hepatocell carcinomas)), HTLV-1- 및 HTLV-2-유도된 림프종(lymphomas), 청신경종(acoustic neuroma), 폐암종(lung carcinomas) (= 폐암(lung cancer) = 기관지 암종(bronchial carcinoma)), 폐소세포암종(small-cell lung carcinomas), 인두암(pharyngeal cancer), 항문암(anal carcinoma), 교아종(glioblastoma), 직장 암종(rectal carcinoma), 성상 세포종(astrocytoma), 뇌종양(brain tumors), 망막아종(retinoblastoma), 기저세포종(basalioma), 뇌전이(brain metastases), 수아 세포종(medulloblastomas), 질암(vaginal cancer), 췌장암(pancreatic cancer), 정소암(testicular cancer), 호지킨 증후군(Hodgkin's syndrome), 수막종(meningiomas), 스니버거병(Schneeberger disease), 뇌하수체 종양(hypophysis tumor), 균상식육종(Mycosis fungoides), 암양종(carcinoids), 신경초종(neurinoma), 척수종(spinalioma), 버키트 림프종(Burkitt's lymphoma), 후두암(laryngeal cancer), 신장암(renal cancer), 흉선종(thymoma), 자궁체부암(corpus carcinoma), 골암(bone cancer), 비호지킨림프종(non-Hodgkin's lymphomas), 요도암(urethral cancer), CUP 증후군, 두부/경부 종양(head/neck tumors), 희돌기교종(oligodendroglioma), 외음암(vulval cancer), 장암(intestinal cancer), 결장 암종(colon carcinoma), 식도 암종(oesophageal carcinoma) (= 식도암(oesophageal cancer)), 무사마귀 관여(wart involvement), 소장의 종양, 두개인두종(craniopharyngeomas), 난소암종(ovarian carcinoma), 생식기 종양(genital tumors), 난소암(ovarian cancer) (= 난소 암종(ovarian carcinoma)), 췌장암종(pancreatic carcinoma) (= 췌장암(pancreatic cancer)), 자궁내막 암종(endometrial carcinoma), 간 전이(liver metastases), 음경암(penile cancer), 설암(tongue cancer), 담낭암(gall bladder cancer), 백혈병(leukaemia), 플라스마세포종(plasmocytoma), 안검 종양(lid tumor), 전립선암(prostate cancer) (= 전립선 종양(prostate tumors)) 등으로부터 선택된다.
추가적 양태에서, 본 발명은 하기를 포함하는 것과 같이 본 발명의 어느 곳에 정의된 폴리머 담체 화물 복합체를 제공한다:
a) (담체로써) 이황화 가교결합된 양이온성 성분을 포함, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체; 및
b) (화물로써) 적어도 하나의 핵산 분자
본 발명의 어느곳에 정의된 각 경우, 특히 상기 정의된 감염성 질병, 알러지 또는 알러지성 질병, 자가면역 질병 및 암 또는 종양 질병에, 적어도 하나의 항원, 바람직하게는 단백질 또는 펩타이드 항원 또는 이의 절편, 변이체 및/또는 유도체와 조합된 치료에 사용을 위해.
추가적으로 본 발명은 하기를 포함하는 것과 같이, 본 발명의 어느 곳에 정의된 폴리머 담체 화물 복합체와 조합된 치료에 사용을 위해, 본 발명의 어느 곳에 정의된 각 경우에, 적어도 하나의 항원, 바람직하게는 단백질 또는 펩타이드 항원 또는 이의 절편, 변이체 및/또는 유도체를 제공한다:
a) (담체로써) 이황화 가교결합된 양이온성 성분을 포함, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분으로 형성된 폴리머 담체, 및
b) (화물로써) 적어도 하나의 핵산 분자,
특히, 상기 정의된 감염성 질병, 알러지 또는 알러지성 질병, 자가면역 질병 및 암 또는 종양 질병의 치료에.
본 발명의 이러한 양태의 특정한 실시예에서, 항원은 시판되는 백신과 같은, 백신에 포함된다.
이러한 맥락에서, "조합되어"는 다른 성분(폴리머 담체 화물 복합체 및 적어도 하나의 항원, 또는 이의 절편, 변이체 및/또는 유도체)은 동일한 조성물 내 함께 제공될 수 있거나, 다른 조성물, 즉 본 발명에 정의된 폴리머 담체 화물 복합체를 포함 또는 나타내는 하나의 조성물, 및 본 발명에 정의된 적어도 하나의 항원 또는 이의 절편, 변이체 및/또는 유도체를 포함하는 다른 하나의 조성물 내에 별개로 제조될 수 있는 것을 의미한다. 만약 다른 조성물에 제공된 경우 폴리머 담체 화물 복합체 및 적어도 하나의 항원 또는 이의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 시간에 따라 분리되어(시간이 엇갈린 조건(time-staggered manner)에서) 투여될 수 있고/또는 다른 투여 자리에 및/또는 다른 투여 경로를 통해 투여될 수 있다. 이는 폴리머 담체 화물 복합체가 예를 들어 적어도 하나의 항원, 이의 절편, 변이체 및/또는 유도체 전, 동시에 또는 다음에, 또는 역으로 투여될 수 있는 것을 의미한다. 다음 투여는 치료에 사용된 각 성분이 각각 약 48시간, 24시간, 12시간, 8시간, 6시간, 4시간, 2시간, 1시간, 30분, 15분 또는 5분 내에 투여되는 것을 포함한다.
추가적 양태에서, 본 발명은 하기를 포함하는 약학적 패키지를 제공한다:
(A) 하기를 포함하는 폴리머 담체 화물 복합체:
a) (담체로써) 이황화 가교결합된 양이온성 성분을 포함, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분으로 형성된 폴리머 담체 화물, 및
b) (화물로써) 적어도 하나의 핵산 분자,
본 발명의 어느 곳에 정의된 것과 같이;
및
(B) 본 발명의 어느 곳에 정의된 적어도 하나의 항원 또는 이의 절편, 변이체 및/또는 유도체와 결합된 치료에 상기 폴리머 담체 화물 복합체의 사용을 설명하는 지시서.
약학적 패키지는 추가로 본 발명의 어느 곳에 정의된 적어도 하나의 항원 또는 이의 절편, 변이체 및/또는 유도체를 포함할 수 있다.
나아가, 본 발명은 추가적인 실시예에 하기를 포함하는 약학적 패키지를 제공한다:
(A) 본 발명의 어느 곳에 정의된 각 경우에, 적어도 하나의 항원 또는 이의 절편, 변이체 및/또는 유도체;
및
(B) 본 발명의 어느 곳에 정의된 폴리머 담체 화물 복합체와 결합된 치료에 상기 항원 또는 이의 절편, 변이체 및/또는 유도체의 사용을 설명하는 지시서.
약학적 패키지는 추가로 하기를 포함하는 폴리머 담체 화물 복합체를 제공할 수 있다:
a) (담체로써) 이황화 가교결합된 양이온성 성분을 포함, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분으로 형성된 폴리머 담체 화물, 및
b) (화물로써) 적어도 하나의 핵산 분자,
본 발명의 어느 곳에 정의된 것처럼.
이러한 맥락에서, 본 발명은 나아가 상기 정의된 감염성 질병, 알러지 또는 알러지성 질병, 자가면역 질병 또는 암 또는 종양 질병으로부터 선택된 특정한 질병(지표(indication))의 치료에 상기 정의된 약학적 패키지에 포함된 성분의 사용을 제공한다. 각각 질병은 본 발명의 어느 곳에 설명된 하나일 수 있다.
본 발명에서, 만약 다르게 지시되지 않으면, 대안 및 실시예의 다른 특징은 적절한 곳에서 서로 조합될 수 있다.
하나로 합친, 바람직한 실시예에서, 본 발명은
하기를 포함하는 약학적 조성물과 관련된다.
폴리머 담체 화물 복합체 및
적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체;
상기 폴리머 담체 화물 복합체는 하기를 포함한다
폴리머 담체
바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분을 포함, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분으로 형성된 폴리머 담체,
더욱 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (I) (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x에 따른 하나 또는 그 이상의 펩타이드 가장 바람직하게는 상기 정의된 하위 화학식 (IA) 또는 (IB)에 따른 것,
및 적어도 하나의 핵산 분자,
바람직하게는, SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 따르는 핵산 서열 또는 SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자, 예를 들어 SEQ ID NO. 105 또는 122에 따르는 핵산 서열 또는 SEQ ID NO. 105 또는 122에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자와 같이, 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (II) GlXmGn, 화학식 (III) ClXmCn, 화학식 (IV) (NuGlXmGnNv)a 또는 화학식 (V) (NuClXmCnNv)a에 따른 핵산을 포함, 바람직하게는 이로 이루어진 이루어진, 핵산 분자,
또는 항원을 코딩하는 핵산 분자, 더욱 바람직하게는 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원과 같이 동일한 항원인 항원을 코딩하는 핵산 분자.
더욱 바람직한 실시예에서, 본 발명은
하기를 포함하는 약학적 조성물에 관련된다
폴리머 담체 화물 복합체 및
적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편 또는 변이체 및/또는 유도체;
상기 폴리머 담체 화물 복합체는 하기를 포함한다
폴리머 담체,
바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분을 포함, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체,
더욱 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (I) (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x에 따른 하나 또는 그 이상의 펩타이드, 가장 바람직하게는 상기 정의된 하위화학식 (IA) 또는 (IB)에 따른 것,
및 적어도 하나의 핵산 분자,
바람직하게는, SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 따른 핵산 서열 또는 SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자, 예를 들어 SEQ ID NO. 105 또는 122에 따르는 핵산 서열 또는 SEQ ID NO. 105 또는 122에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자와 같이, 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (II) GlXmGn, 화학식 (III) ClXmCn, 화학식 (IV) (NuGlXmGnNv)a 또는 화학식 (V) (NuClXmCnNv)a에 따른 핵산을 포함, 바람직하게는 이로 이루어진 이루어진, 핵산 분자,
또는 항원을 코딩하는 핵산 분자, 더욱 바람직하게는 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원과 동일한 항원인 항원을 코딩하는 핵산 분자,
및 상기 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 하기로부터 선택된다:
감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원,
자가면역 질병과 관련된 항원,
암 또는 종양 질병과 관련된 항원.
더욱 바람직한 실시예에서, 본 발명은
하기를 포함하는 약학적 조성물에 관련된다
폴리머 담체 화물 복합체 및
적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체;
상기 폴리머 담체 화물 복합체는 하기를 포함한다
폴리머 담체,
바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분을 포함, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체,
더욱 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (I) (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x에 따른 하나 또는 그 이상의 펩타이드, 가장 바람직하게는 상기 정의된 하위화학식 (IA) 또는 (IB)에 따른 것,
및 적어도 하나의 핵산 분자,
바람직하게는, SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 따른 핵산 서열 또는 SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자, 예를 들어 SEQ ID NO. 105 또는 122에 따르는 핵산 서열 또는 SEQ ID NO. 105 또는 122에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자와 같이, 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (II) GlXmGn, 화학식 (III) ClXmCn, 화학식 (IV) (NuGlXmGnNv)a 또는 화학식 (V) (NuClXmCnNv)a에 따른 핵산을 포함, 바람직하게는 이로 이루어진 이루어진, 핵산 분자,
또는 항원을 코딩하는 핵산 분자, 더욱 바람직하게는 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원과 동일한 항원인 항원을 코딩하는 핵산 분자;
상기 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 하기로부터 선택된다:
감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원,
자가면역 질병과 관련된 항원,
암 또는 종양 질병과 관련된 항원;
및 바람직하게는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원 및/또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 폴리머 담체 화물 복합체에 포함되지 않는다.
더욱 바람직한 실시예에서, 본 발명은
하기를 포함하는 약학적 조성물에 관련된다
폴리머 담체 화물 복합체 및
적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체;
상기 폴리머 담체 화물 복합체는 하기를 포함한다
폴리머 담체,
바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분을 포함, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체,
더욱 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (I) (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x에 따른 하나 또는 그 이상의 펩타이드, 가장 바람직하게는 상기 정의된 하위화학식 (IA) 또는 (IB)에 따른 것,
및 적어도 하나의 핵산 분자,
바람직하게는, SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 따른 핵산 서열 또는 SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자, 예를 들어 SEQ ID NO. 105 또는 122에 따르는 핵산 서열 또는 SEQ ID NO. 105 또는 122에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자와 같이, 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (II) GlXmGn, 화학식 (III) ClXmCn, 화학식 (IV) (NuGlXmGnNv)a 또는 화학식 (V) (NuClXmCnNv)a에 따른 핵산을 포함, 바람직하게는 이로 이루어진 이루어진, 핵산 분자,
또는 항원을 코딩하는 핵산 분자, 더욱 바람직하게는 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원과 동일한 항원인 항원을 코딩하는 핵산 분자;
상기 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원,
자가면역 질병과 관련된 항원,
암 또는 종양 질병과 관련된 항원,
바람직하게는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
더욱 바람직하게는 라비 바이러스(Rabies virus), B형 간염 바이러스(Hepatitis B virus), 인유두종바이러스(human Papilloma virus) (hPV), 탄저균(Bacillus anthracis), 호흡기 합포체 바이러스(Respiratory syncytial virus) (RSV), 단순 포진 바이러스(Herpes simplex virus) (HSV), 인플루엔자 바이러스(Influenza virus) 및 결핵균(Mycobacterium tuberculosis)으로부터 선택된 병원체 유래 항원,
더욱 바람직하게는 라비 바이러스, B형 간염 바이러스, 인유두종바이러스(hPV)로부터 선택된 병원체 유래 항원;
으로부터 선택된다
및 바람직하게는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원 및/또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 폴리머 담체 화물 복합체에 포함되지 않는다.
더욱 바람직한 실시예에서, 본 발명은
하기를 포함하는 약학적 조성물에 관련된다
폴리머 담체 화물 복합체 및
적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체;
상기 폴리머 담체 화물 복합체는 하기를 포함한다
폴리머 담체,
바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분을 포함, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체,
더욱 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (I) (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x에 따른 하나 또는 그 이상의 펩타이드, 가장 바람직하게는 상기 정의된 하위화학식 (IA) 또는 (IB)에 따른 것,
및 적어도 하나의 핵산 분자,
바람직하게는, SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 따른 핵산 서열 또는 SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자, 예를 들어 SEQ ID NO. 105 또는 122에 따르는 핵산 서열 또는 SEQ ID NO. 105 또는 122에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자와 같이, 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (II) GlXmGn, 화학식 (III) ClXmCn, 화학식 (IV) (NuGlXmGnNv)a 또는 화학식 (V) (NuClXmCnNv)a에 따른 핵산을 포함, 바람직하게는 이로 이루어진 이루어진, 핵산 분자,
또는 항원을 코딩하는 핵산 분자, 더욱 바람직하게는 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원과 동일한 항원인 항원을 코딩하는 핵산 분자;
및 상기 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원,
자가면역 질병과 관련된 항원,
암 또는 종양 질병과 관련된 항원,
바람직하게는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
더욱 바람직하게는 라비 바이러스(Rabies virus), B형 간염 바이러스(Hepatitis B virus), 인유두종바이러스(human Papilloma virus) (hPV), 탄저균(Bacillus anthracis), 호흡기 합포체 바이러스(Respiratory syncytial virus) (RSV), 단순 포진 바이러스(Herpes simplex virus) (HSV), 인플루엔자 바이러스(Influenza virus) 및 결핵균(Mycobacterium tuberculosis)으로부터 선택된 병원체 유래 항원,
더욱 더 바람직하게는 라비 바이러스부터의 항원, 가장 바람직하게는 핵단백질(N), 인단백질(P), 기질단백질(M), 당단백질(G), 및 바이러스성 RNA 중합효소(L)로부터 선택된 라비 바이러스로부터의 항원;
으로부터 선택된다
및 바람직하게는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원 및/또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 폴리머 담체 화물 복합체에 포함되지 않는다.
더욱 바람직한 실시예에서, 본 발명은
하기를 포함하는 약학적 조성물에 관련된다
폴리머 담체 화물 복합체 및
적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체;
상기 폴리머 담체 화물 복합체는 하기를 포함한다
폴리머 담체,
바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분을 포함, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분으로 형성된 폴리머 담체,
SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 따른 핵산 서열 또는 SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자, 예를 들어 SEQ ID NO. 105 또는 122에 따르는 핵산 서열 또는 SEQ ID NO. 105 또는 122에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자와 같이, 더욱 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (I) (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x에 따른 하나 또는 그 이상의 펩타이드, 가장 바람직하게는 상기 정의된 하위화학식 (IA) 또는 (IB)에 따른 것,
및 적어도 하나의 핵산 분자,
바람직하게는 상기 정의된 화학식 (II) GlXmGn, 화학식 (III) ClXmCn, 화학식 (IV) (NuGlXmGnNv)a 또는 화학식 (V) (NuClXmCnNv)a에 따른 핵산을 포함, 바람직하게는 이로 이루어진 이루어진, 핵산 분자,
또는 항원을 코딩하는 핵산 분자, 더욱 바람직하게는 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원과 동일한 항원인 항원을 코딩하는 핵산 분자;
및 상기 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원,
자가면역 질병과 관련된 항원,
암 또는 종양 질병과 관련된 항원,
바람직하게는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
더욱 바람직하게는 라비 바이러스(Rabies virus), B형 간염 바이러스(Hepatitis B virus), 인유두종바이러스(human Papilloma virus) (hPV), 탄저균(Bacillus anthracis), 호흡기 합포체 바이러스(Respiratory syncytial virus) (RSV), 단순 포진 바이러스(Herpes simplex virus) (HSV), 인플루엔자 바이러스(Influenza virus) 및 결핵균(Mycobacterium tuberculosis)으로부터 선택된 병원체 유래 항원,
더욱 더 바람직하게는 B형 간염 바이러스로부터의 항원, 가장 바람직하게는 B형 간염 바이러스 표면 항원 (HBsAg), B형 간염 바이러스 코어 항원 (HbcAg), B형 간염 바이러스 DNA 중합효소, HBx 단백질, preS2 중간 표면 단백질, 라지 S 단백질, 바이러스 단백질 VP1, 바이러스 단백질 VP2, 바이러스 단백질 VP3, 및 바이러스 단백질 VP4로부터 선택된 B형 간염 바이러스로부터의 항원;
으로부터 선택된다
및 바람직하게는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원 및/또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 폴리머 담체 화물 복합체에 포함되지 않는다.
더욱 바람직한 실시예에서, 본 발명은
하기를 포함하는 약학적 조성물에 관련된다
폴리머 담체 화물 복합체 및
적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체;
상기 폴리머 담체 화물 복합체는 하기를 포함한다
폴리머 담체,
바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분을 포함, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체,
더욱 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (I) (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x에 따른 하나 또는 그 이상의 펩타이드, 가장 바람직하게는 상기 정의된 하위화학식 (IA) 또는 (IB)에 따른 것,
및 적어도 하나의 핵산 분자,
바람직하게는, SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 따른 핵산 서열 또는 SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자, 예를 들어 SEQ ID NO. 105 또는 122에 따르는 핵산 서열 또는 SEQ ID NO. 105 또는 122에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자와 같이, 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (II) GlXmGn, 화학식 (III) ClXmCn, 화학식 (IV) (NuGlXmGnNv)a 또는 화학식 (V) (NuClXmCnNv)a에 따른 핵산을 포함, 바람직하게는 이로 이루어진 이루어진, 핵산 분자,
또는 항원을 코딩하는 핵산 분자, 더욱 바람직하게는 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원과 동일한 항원인 항원을 코딩하는 핵산 분자;
및 상기 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원,
자가면역 질병과 관련된 항원,
암 또는 종양 질병과 관련된 항원,
바람직하게는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
더욱 바람직하게는 라비 바이러스(Rabies virus), B형 간염 바이러스(Hepatitis B virus), 인유두종바이러스(human Papilloma virus) (hPV), 탄저균(Bacillus anthracis), 호흡기 합포체 바이러스(Respiratory syncytial virus) (RSV), 단순 포진 바이러스(Herpes simplex virus) (HSV), 인플루엔자 바이러스(Influenza virus) 및 결핵균(Mycobacterium tuberculosis)으로부터 선택된 병원체 유래 항원,
더욱 더 바람직하게는 인플루엔자 바이러스로부터의 항원, 가장 바람직하게는 인플루엔자 바이러스의 헤마글루티닌(Hemagglutinin) (HA), 뉴라미니다제(Neuraminidase) (NA), 핵단백질(NP), M1 단백질, M2 단백질, NS1 단백질, NS2 단백질(NEP 단백질: 핵 방출(export) 단백질), PA 단백질, PB1 단백질 (중합효소 염기성 1 단백질), PB1-F2 단백질 및 PB2 단백질으로부터 선택된 인플루엔자 바이러스로부터의 항원;
으로부터 선택된다
및 바람직하게는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원 및/또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 폴리머 담체 화물 복합체에 포함되지 않는다.
더욱 바람직한 실시예에서, 본 발명은
하기를 포함하는 약학적 조성물에 관련된다
폴리머 담체 화물 복합체 및
적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체;
상기 폴리머 담체 화물 복합체는 하기를 포함한다
폴리머 담체,
바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분을 포함, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체,
더욱 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (I) (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x에 따른 하나 또는 그 이상의 펩타이드, 가장 바람직하게는 상기 정의된 하위화학식 (IA) 또는 (IB)에 따른 것,
및 적어도 하나의 핵산 분자,
바람직하게는, SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 따른 핵산 서열 또는 SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자, 예를 들어 SEQ ID NO. 105 또는 122에 따르는 핵산 서열 또는 SEQ ID NO. 105 또는 122에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자와 같이, 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (II) GlXmGn, 화학식 (III) ClXmCn, 화학식 (IV) (NuGlXmGnNv)a 또는 화학식 (V) (NuClXmCnNv)a에 따른 핵산을 포함, 바람직하게는 이로 이루어진 이루어진, 핵산 분자,
또는 항원을 코딩하는 핵산 분자, 더욱 바람직하게는 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원과 동일한 항원인 항원을 코딩하는 핵산 분자;
및 상기 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원,
자가면역 질병과 관련된 항원,
암 또는 종양 질병과 관련된 항원,
바람직하게는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
바람직하게는 라비 바이러스(Rabies virus), B형 간염 바이러스(Hepatitis B virus), 인유두종바이러스(human Papilloma virus) (hPV), 탄저균(Bacillus anthracis), 호흡기 합포체 바이러스(Respiratory syncytial virus) (RSV), 단순 포진 바이러스(Herpes simplex virus) (HSV), 인플루엔자 바이러스(Influenza virus) 및 결핵균(Mycobacterium tuberculosis)으로부터 선택된 병원체 유래 항원,
더욱 바람직하게는 인유두종바이러스(hPV)로부터의 항원, 더욱 더 바람직하게는 E1 단백질, E2 단백질, E3 단백질, E4 단백질, E5 단백질, E6 단백질, E7 단백질, E8 단백질, L1 단백질, 및 L2 단백질로부터 선택된 인유두종바이러스(hPV)로부터의 항원;
으로부터 선택된다
및 바람직하게는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원 및/또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 폴리머 담체 화물 복합체에 포함되지 않는다.
더욱 바람직한 실시예에서, 본 발명은
하기를 포함하는 약학적 조성물에 관련된다
폴리머 담체 화물 복합체 및
적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체;
상기 폴리머 담체 화물 복합체는 하기를 포함한다
폴리머 담체,
바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분을 포함, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체,
더욱 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (I) (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x에 따른 하나 또는 그 이상의 펩타이드, 가장 바람직하게는 상기 정의된 하위화학식 (IA) 또는 (IB)에 따른 것,
및 적어도 하나의 핵산 분자,
바람직하게는, SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 따른 핵산 서열 또는 SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자, 예를 들어 SEQ ID NO. 105 또는 122에 따르는 핵산 서열 또는 SEQ ID NO. 105 또는 122에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자와 같이, 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (II) GlXmGn, 화학식 (III) ClXmCn, 화학식 (IV) (NuGlXmGnNv)a 또는 화학식 (V) (NuClXmCnNv)a에 따른 핵산을 포함, 바람직하게는 이로 이루어진 이루어진, 핵산 분자,
또는 항원을 코딩하는 핵산 분자, 더욱 바람직하게는 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원과 동일한 항원인 항원을 코딩하는 핵산 분자;
및 상기 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원,
자가면역 질병과 관련된 항원,
암 또는 종양 질병과 관련된 항원,
바람직하게는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
바람직하게는 라비 바이러스(Rabies virus), B형 간염 바이러스(Hepatitis B virus), 인유두종바이러스(human Papilloma virus) (hPV), 탄저균(Bacillus anthracis), 호흡기 합포체 바이러스(Respiratory syncytial virus) (RSV), 단순 포진 바이러스(Herpes simplex virus) (HSV), 인플루엔자 바이러스(Influenza virus) 및 결핵균(Mycobacterium tuberculosis)으로부터 선택된 병원체 유래 항원,
더욱 바람직하게는 탄저균으로부터의 항원, 더욱 더 바람직하게는 방어 항원(PA), 부종 인자(EF), 치사 인자(LF), 및 S-층 상동체 단백질(SLH)로부터 선택된 탄저균으로부터의 항원;
으로부터 선택된다
및 바람직하게는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원 및/또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 폴리머 담체 화물 복합체에 포함되지 않는다.
더욱 바람직한 실시예에서, 본 발명은
하기를 포함하는 약학적 조성물에 관련된다
폴리머 담체 화물 복합체 및
적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체;
상기 폴리머 담체 화물 복합체는 하기를 포함한다
폴리머 담체,
바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분을 포함, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체,
더욱 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (I) (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x에 따른 하나 또는 그 이상의 펩타이드, 가장 바람직하게는 상기 정의된 하위화학식 (IA) 또는 (IB)에 따른 것,
및 적어도 하나의 핵산 분자,
바람직하게는, SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 따른 핵산 서열 또는 SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자, 예를 들어 SEQ ID NO. 105 또는 122에 따르는 핵산 서열 또는 SEQ ID NO. 105 또는 122에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자와 같이, 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (II) GlXmGn, 화학식 (III) ClXmCn, 화학식 (IV) (NuGlXmGnNv)a 또는 화학식 (V) (NuClXmCnNv)a에 따른 핵산을 포함, 바람직하게는 이로 이루어진 이루어진, 핵산 분자,
또는 항원을 코딩하는 핵산 분자, 더욱 바람직하게는 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원과 동일한 항원인 항원을 코딩하는 핵산 분자;
및 상기 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원,
자가면역 질병과 관련된 항원,
암 또는 종양 질병과 관련된 항원,
바람직하게는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
더욱 바람직하게는 라비 바이러스(Rabies virus), B형 간염 바이러스(Hepatitis B virus), 인유두종바이러스(human Papilloma virus) (hPV), 탄저균(Bacillus anthracis), 호흡기 합포체 바이러스(Respiratory syncytial virus) (RSV), 단순 포진 바이러스(Herpes simplex virus) (HSV), 인플루엔자 바이러스(Influenza virus) 및 결핵균(Mycobacterium tuberculosis)으로부터 선택된 병원체 유래 항원,
더욱 더 바람직하게는 호흡기 합포체 바이러스(RSV)로부터의 항원,
가장 바람직하게는 융합(F) 단백질, 핵캡시드(N) 단백질, 인단백질(P), 기질(M) 단백질, 당단백질(G), 라지 단백질(L; RNA 중합효소), 비구조 단백질 1(NS1), 비구조 단백질 2(NS2), 작은 소수성(SH) 단백질, 신장 인자 M2-1, 및 전사 조절 단백질 M2-2로부터 선택된 호흡기 합포체 바이러스(RSV)로부터의 항원;
으로부터 선택된다
및 바람직하게는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원 및/또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 폴리머 담체 화물 복합체에 포함되지 않는다.
더욱 바람직한 실시예에서, 본 발명은
하기를 포함하는 약학적 조성물에 관련된다
폴리머 담체 화물 복합체 및
적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체;
상기 폴리머 담체 화물 복합체는 하기를 포함한다
폴리머 담체,
바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분을 포함, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체,
더욱 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (I) (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x에 따른 하나 또는 그 이상의 펩타이드, 가장 바람직하게는 상기 정의된 하위화학식 (IA) 또는 (IB)에 따른 것,
및 적어도 하나의 핵산 분자,
바람직하게는, SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 따른 핵산 서열 또는 SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자, 예를 들어 SEQ ID NO. 105 또는 122에 따르는 핵산 서열 또는 SEQ ID NO. 105 또는 122에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자와 같이, 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (II) GlXmGn, 화학식 (III) ClXmCn, 화학식 (IV) (NuGlXmGnNv)a 또는 화학식 (V) (NuClXmCnNv)a에 따른 핵산을 포함, 바람직하게는 이로 이루어진 이루어진, 핵산 분자,
또는 항원을 코딩하는 핵산 분자, 더욱 바람직하게는 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원과 동일한 항원인 항원을 코딩하는 핵산 분자;
및 상기 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원,
자가면역 질병과 관련된 항원,
암 또는 종양 질병과 관련된 항원,
바람직하게는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
더욱 바람직하게는 라비 바이러스(Rabies virus), B형 간염 바이러스(Hepatitis B virus), 인유두종바이러스(human Papilloma virus) (hPV), 탄저균(Bacillus anthracis), 호흡기 합포체 바이러스(Respiratory syncytial virus) (RSV), 단순 포진 바이러스(Herpes simplex virus) (HSV), 인플루엔자 바이러스(Influenza virus) 및 결핵균(Mycobacterium tuberculosis)으로부터 선택된 병원체 유래 항원,
더욱 더 바람직하게는 단순 포진 바이러스(HSV)로부터의 항원,
가장 바람직하게는 당단백질 L (UL1), 우라실-DNA 글리코실라제 UL2, UL3 단백질, UL4 단백질, DNA 복제 단백질 UL5, 포탈 단백질 UL6, 비리온 성숙 단백질 UL7, DNA 헬리카제 UL8, 복제 원점 결합 단백질 UL9, 당단백질 M (UL10), UL11 단백질, 알칼리성 엑소뉴클레아제(Alkaline exonuclease) UL12, 세린-트레오닌 단백질 키나제 UL13, 외피(Tegument) 단백질 UL14, 터미나제 (UL15), 외피 단백질 UL16, UL17 단백질, 캡시드 단백질 VP23 (UL18), 주요(major) 캡시드 단백질 VP5 (UL19), 막 단백질 UL20, 외피 단백질 UL21, 당단백질 H (UL22), 티미딘 키나제 UL23, UL24 단백질, UL25 단백질, 캡시드 단백질 P40 (UL26, VP24, VP22A), 당단백질 B (UL27), ICP18.5 단백질 (UL28), 주요 DNA-결합 단백질 ICP8 (UL29), DNA 중합효소 UL30, 핵 기질 단백질 UL31, 외피막(Envelope) 당단백질 UL32, UL33 단백질, 내핵막 단백질 UL34, 캡시드 단백질 VP26 (UL35), 라지 외피 단백질 UL36, 캡시드 조립 단백질 UL37, VP19C 단백질 (UL38), 리보핵산 환원효소(라지 서브유닛) UL39, 리보핵산 환원효소(스몰 서브유닛) UL40, 외피 단백질/비리온 숙주 차단 VHS 단백질 (UL41), DNA 중합효소 반응진행성(processivity) 인자 UL42, 막 단백질 UL43, 당단백질 C (UL44), 막 단백질 UL45, 외피 단백질 VP11/12 (UL46), 외피 단백질 VP13/14 (UL47), 비리온 성숙 단백질 VP16 (UL48, 알파-TIF), 외피 단백질 UL49, dUTP 디포스파타아제 UL50, 외피 단백질 UL51, DNA 헬리카제/프리마제 복합체 단백질 UL52, 당단백질 K (UL53), 전사 조절 단백질 IE63 (ICP27, UL54), UL55 단백질, UL56 단백질, 바이러스 복제 단백질 ICP22 (IE68, US1), US2 단백질, 세린/트레오닌-단백질 키나제 US3, 당단백질 G (US4), 당단백질 J (US5), 당단백질 D (US6), 당단백질 I (US7), 당단백질 E (US8), 외피 단백질 US9, 캡시드/외피 단백질 US10, Vmw21 단백질 (US11), ICP47 단백질 (IE12, US12), 주요 전사 활성자 ICP4 (IE175, RS1), E3 유비퀴틴 리가제 ICP0 (IE110), 잠재(Latency)-관련 단백질 1 (LRP1), 잠재 관련 단백질 2 (LRP2), 신경병원성 인자 RL1 (ICP34.5), 및 잠재 관련 전사체(LAT)로부터 선택된 단순 포진 바이러스(HSV)로부터의 항원;
으로부터 선택된다
및 바람직하게는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원 및/또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 폴리머 담체 화물 복합체에 포함되지 않는다.
더욱 바람직한 실시예에서, 본 발명은
하기를 포함하는 약학적 조성물에 관련된다
폴리머 담체 화물 복합체 및
적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체;
상기 폴리머 담체 화물 복합체는 하기를 포함한다
폴리머 담체,
바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분을 포함, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체,
더욱 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (I) (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x에 따른 하나 또는 그 이상의 펩타이드, 가장 바람직하게는 상기 정의된 하위화학식 (IA) 또는 (IB)에 따른 것,
및 적어도 하나의 핵산 분자,
바람직하게는, SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 따른 핵산 서열 또는 SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자, 예를 들어 SEQ ID NO. 105 또는 122에 따르는 핵산 서열 또는 SEQ ID NO. 105 또는 122에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자와 같이, 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (II) GlXmGn, 화학식 (III) ClXmCn, 화학식 (IV) (NuGlXmGnNv)a 또는 화학식 (V) (NuClXmCnNv)a에 따른 핵산을 포함, 바람직하게는 이로 이루어진 이루어진, 핵산 분자,
또는 항원을 코딩하는 핵산 분자, 더욱 바람직하게는 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원과 동일한 항원인 항원을 코딩하는 핵산 분자;
및 상기 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원,
자가면역 질병과 관련된 항원,
암 또는 종양 질병과 관련된 항원,
바람직하게는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
더욱 바람직하게는 라비 바이러스(Rabies virus), B형 간염 바이러스(Hepatitis B virus), 인유두종바이러스(human Papilloma virus) (hPV), 탄저균(Bacillus anthracis), 호흡기 합포체 바이러스(Respiratory syncytial virus) (RSV), 단순 포진 바이러스(Herpes simplex virus) (HSV), 인플루엔자 바이러스(Influenza virus) 및 결핵균(Mycobacterium tuberculosis)으로부터 선택된 병원체 유래 항원,
더욱 더 바람직하게는 결핵균으로부터의 항원,
가장 바람직하게는 ESAT-6 단백질, ESX-1 단백질, CFP10 단백질, TB10.4 단백질, MPT63 단백질, MPT64 단백질, MPT83 단백질, MTB12 단백질, MTB8 단백질, AG85A 단백질, AG85B 단백질, Rpf-유사 단백질, KATG 단백질, PPE18 단백질, MTB32 단백질, MTB39 단백질, 크리스탈린, HSP65 단백질, PST-S 단백질, 및 HBHA 단백질, 10 kDa 여과 항원 EsxB, 세린 프로테아제PepA, 피브로넥틴 결합 단백질 D FbpD, 분비 단백질 MPT51, 주변세포질 인산염 결합(periplasmic phosphate-binding) 지질단백질 PSTS1 (PBP-1), 주변세포질 인산염 결합 지질단백질 PSTS3 (PBP-3, Phos-1), PPE 패밀리 단백질 PPE14, PPE 패밀리 단백질 PPE68, 단백질 MTB72F, 분자 샤페론 DnaK, 세포 표면 지질단백질 MPT83, 지질단백질 P23, 인산염 수송 시스템 투과효소 단백질 PstA, 14 kDa 항원, 피브로넥틴 결합 단백질 C FbpC1, 알라닌 탈수소화효소 TB43, 및 글루타민 합성효소 1로부터 선택된 결핵균으로부터의 항원;
으로부터 선택된다
및 바람직하게는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원 및/또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 폴리머 담체 화물 복합체에 포함되지 않는다.
더욱 바람직한 실시예에서, 본 발명은
하기를 포함하는 약학적 조성물에 관련된다
폴리머 담체 화물 복합체 및
적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체;
상기 폴리머 담체 화물 복합체는 하기를 포함한다
폴리머 담체,
바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분을 포함, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체,
더욱 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (I) (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x에 따른 하나 또는 그 이상의 펩타이드, 가장 바람직하게는 상기 정의된 하위화학식 (IA) 또는 (IB)에 따른 것,
및 적어도 하나의 핵산 분자,
바람직하게는, SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 따른 핵산 서열 또는 SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자, 예를 들어 SEQ ID NO. 105 또는 122에 따르는 핵산 서열 또는 SEQ ID NO. 105 또는 122에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자와 같이, 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (II) GlXmGn, 화학식 (III) ClXmCn, 화학식 (IV) (NuGlXmGnNv)a 또는 화학식 (V) (NuClXmCnNv)a에 따른 핵산을 포함, 바람직하게는 이로 이루어진 이루어진, 핵산 분자,
또는 항원을 코딩하는 핵산 분자, 더욱 바람직하게는 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원과 동일한 항원인 항원을 코딩하는 핵산 분자;
및 상기 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원,
자가면역 질병과 관련된 항원,
암 또는 종양 질병과 관련된 항원,
바람직하게는 알러지 또는 알러지성 질병과 관련되고 하기로 이루어진 리스트로부터 선택된 원천으로부터 유래된 단백질 또는 펩타이드 항원: 잔디 화분, 나무 화분, 꽃 화분, 허브 화분, 먼지 진드기, 곰팡이, 동물, 식품 및 곤충 독, 바람직하게는 나무 화분, 꽃 화분, 허브 화분 먼지 진드기, 식품, 및 곤충 독, 가장 바람직하게는 상기 정의된 알레르겐,
으로부터 선택된다
및 바람직하게는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원 및/또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 폴리머 담체 화물 복합체에 포함되지 않는다.
더욱 바람직한 실시예에서, 본 발명은
하기를 포함하는 약학적 조성물에 관련된다
폴리머 담체 화물 복합체 및
적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체;
상기 폴리머 담체 화물 복합체는 하기를 포함한다
폴리머 담체,
바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체,
더욱 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (I) (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x에 따른 하나 또는 그 이상의 펩타이드, 가장 바람직하게는 상기 정의된 하위화학식 (IA) 또는 (IB)에 따른 것,
및 적어도 하나의 핵산 분자,
바람직하게는, SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 따른 핵산 서열 또는 SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자, 예를 들어 SEQ ID NO. 105 또는 122에 따르는 핵산 서열 또는 SEQ ID NO. 105 또는 122에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자와 같이, 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (II) GlXmGn, 화학식 (III) ClXmCn, 화학식 (IV) (NuGlXmGnNv)a 또는 화학식 (V) (NuClXmCnNv)a에 따른 핵산을 포함, 바람직하게는 이로 이루어진 이루어진, 핵산 분자,
또는 항원을 코딩하는 핵산 분자, 더욱 바람직하게는 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원과 동일한 항원인 항원을 코딩하는 핵산 분자;
및 상기 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원,
자가면역 질병과 관련된 항원,
암 또는 종양 질병과 관련된 항원,
바람직하게는 자가면역 질병과 관련된 항원,
더욱 바람직하게는 다발성 경화증(MS); 제I형 당뇨; 자가면역 포도막염; 중증 근무력증; 류마티스성 열; 관절염; 쇠그렌 증후군; 홍반성 낭창; 아테롬성 동맥경화증; 특발성 팽창 심근증(DCM); 근염 또는 경피증과 관련된 항원,
더욱 더 바람직하게는 수초 염기성 단백질(MBP), 단백지질 단백질(PLP), 및 수초 올리고덴드로사이트 당단백질(myelin oligodendrocyte glycoprotein)(MOG), CD44, 인슐린전구물질(preproinsulin), 프로인슐린(proinsulin), 인슐린, 글루탐산 디카르복실라제(GAD65), 티로신 인산염 유사 인슐린종 항원(tyrosine phosphatase-like insulinoma antigen) 2 (IA2), 아연 수송체(zinc transporter) ( (ZnT8), 및 열충격단백질 60 (HSP60), 광수용체간 레티노이드 결합 단백질(IRBP), 아세틸콜린 수용체 AchR, 및 인슐린 유사 성장 인자-1 수용체 (IGF-1R), 베타-용혈성 스트렙토콕시(beta-hemolytic streptocci) (슈도-자가항원(pseudo-autoantigen))로부터 M 단백질, 대식세포 이동 저해 인자, Ro/La RNP 복합체, 알파- 및 베타-포드린(fodrin), 섬세포 자가항원(islet cell autoantigen), 폴리(ADP)리보스 중합효소(PARP), NuMA, NOR-90, Ro60 자가항원, 및 p27 항원, Ro60 자가항원, 저-밀도 지질단백질, U-1 작은 핵 리보핵산단백질 복합체(small nuclear ribonucleoprotein complex) (B/B', D1, D2, D3, E, F, G)의 Sm 항원, 및 RNP 리보핵산단백질, oxLDL, 베타(2)GPI, HSP60/65, 및 oxLDL/베타(2)GPI, 심장 베타(1)-아드레날린 수용체, 히스티딜-tRNA 합성효소(HisRS), 토포이성질화효소 I, IL-17; 또는 열충격 단백질을 포함하는 그룹으로부터 선택된 항원;
으로부터 선택된다
및 바람직하게는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원 및/또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 폴리머 담체 화물 복합체에 포함되지 않는다.
항원이 자가면역 질병과 관련된다면, 만약 항원이 면역글로불린 유전자형 또는 림프성 세포의, 바람직하게는 B 세포 또는 T 세포의 T 세포 수용체 유전자형이 보다 바람직할 수 있다. 이러한 림프성 세포, 예를 들어 B 세포 또는 T 세포는, 만약 그들이 인식에 대해 잘못 프로그램되고 몸체의 자가-에피토프와 싸운다면, 예를 들어 췌장 베타 세포와 같은 체세포의 파괴에 책임을 질 수 있다. 이러한 맥락에서, 면역글로불린 유전자형은 B 세포의 특정한 타입에 의해 발현되는 면역글로불린의 가변적 영역의 특정한 분자 형태를 갖는 펩타이드 또는 단백질로 이해될 수 있다. 이러한 유전자형은 B 세포의 특정한 타입에 대한, 예를 들어 악성 B-세포에 대한 면역 반응을 유도하기 위한 항원으로 사용될 수 있다. T 세포 수용체 유전자형은 T 세포의 특정한 타입에 의해 발현된 T 세포 수용체의 가변적 영역의 특정한 분자 형태를 갖는 펩타이드 또는 단백질로 이해될 수 있다. 이러한 유전자형은 이러한 T 세포의 특정한 타입에 대한, 예를 들어 악성 T 세포에 대한 면역 반응을 유도하기 위한 항원으로써 사용될 수 있다. 독창적 약학적 조성물은 예를 들어 이러한 잘못 프로그램된 림프성 세포에 대한 백신 접종을 위해 사용될 수 있다. 예를 들어 자가면역 질병, 예를 들어 당뇨병, 크론병, 다발성 경화증 또는 그밖에 유사한 것과 같은 것으로부터 고통받는 환자의 치료는 자신의 몸을 공격하는 불량 림프성 세포의 파괴, 독창적 약학적 조성물로 차후 백신 접종에 의해 일어날 수 있다.
더욱 바람직한 실시예에서, 본 발명은
하기를 포함하는 약학적 조성물에 관련된다
폴리머 담체 화물 복합체 및
적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체;
상기 폴리머 담체 화물 복합체는 하기를 포함한다
폴리머 담체,
바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분을 포함, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체,
더욱 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (I) (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x에 따른 하나 또는 그 이상의 펩타이드, 가장 바람직하게는 상기 정의된 하위화학식 (IA) 또는 (IB)에 따른 것,
및 적어도 하나의 핵산 분자,
바람직하게는, SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 따른 핵산 서열 또는 SEQ ID NOs. 15-108 및 122의 어느 하나에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자, 예를 들어 SEQ ID NO. 105 또는 122에 따르는 핵산 서열 또는 SEQ ID NO. 105 또는 122에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 이루어진 핵산 분자와 같이, 바람직하게는 상기 정의된 화학식 (II) GlXmGn, 화학식 (III) ClXmCn, 화학식 (IV) (NuGlXmGnNv)a 또는 화학식 (V) (NuClXmCnNv)a에 따른 핵산을 포함, 바람직하게는 이로 이루어진 이루어진, 핵산 분자,
또는 항원을 코딩하는 핵산 분자, 더욱 바람직하게는 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원과 동일한 항원인 항원을 코딩하는 핵산 분자;
및 상기 단백질 또는 펩타이드 항원
또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원,
알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원,
자가면역 질병과 관련된 항원,
암 또는 종양 질병과 관련된 항원,
바람직하게는 암 또는 종양 질병과 관련된 항원, 더욱 바람직하게는 p53, CA125, EGFR, Her2/neu, hTERT, PAP, MAGE-A1, MAGE-A3, 메소텔린(Mesothelin), MUC-1, NY-ESO-1, GP100, MART-1, 티로시나제, PSA, PSCA, PSMA VEGF, VEGFR1, VEGFR2, Ras, CEA 및 WT1로부터 선택된 항원;
으로부터 선택된다
및 바람직하게는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원 및/또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이체 및/또는 유도체는 폴리머 담체 화물 복합체에 포함되지 않는다.
이들 실시예의 각 경우에 폴리머 담체 화물 복합체는 바람직하게는 어쥬번트로써 사용을 위해, 상기 더욱 바람직하게는, 적어도 하나의 핵산 분자가 본 발명에 정의된 면역자극성 핵산이며, 더욱 더 바람직하게는 적어도 하나의 핵산 분자는 RNA, 가장 바람직하게는 면역자극성 RNA(isRNA)이다. 본 발명의 맥락에서 특히 바람직한 핵산 화물은 SEQ ID NO.105 또는 122에 따른 핵산 서열 또는 SEQ ID NO.105 또는 122에 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 및 가장 바람직하게는 적어도 95% 상동 서열을 포함 또는 이로 구성된 핵산 분자이다.
나아가, 이들 실시예의 각각에, 폴리머 담체 화물 복합체는 상기 폴리머 담체의 양이온성 성분 및 상기 폴리머 담체 화물 복합체 내에 포함된 핵산 분자 화물이 0.1-20의 범위 내, 또는 0.1-5의 범위 내, 또는 0.1-1의 범위 내, 또는 0.5-0.9의 범위 내 N/P 비율로 제공되는, 폴리머 담체 화물 복합체일 수 있다.
일부 실시예에서, 제공된 폴리머 담체 화물 복합체는, 약학적 조성물이 단백질 백신 오발부민(OVA 단백질)에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA722A (SEQ ID No. 105) 또는 isRNA722B (SEQ ID No. 122)에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체를 포함하는 조성물이 아닌, 폴리머 담체, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체 및 적어도 하나의 핵산 분자를 포함하는 것이, 바람직할 수 있다.
일부 실시예에서, 제공된 폴리머 담체 화물 복합체는, 약학적 조성물이 오발부민-특이적 펩타이드 백신 SIINFEKL에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA722A (SEQ ID No. 105) 또는 isRNA722B (SEQ ID No. 122)에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체를 포함하는 조성물이 아닌, 폴리머 담체, 바람직하게는 이황화 가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체 및 적어도 하나의 핵산 분자를 포함하는 것이, 바람직할 수 있다.
따라서, 일부 실시예에서, 약학적 조성물은 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C (SEQ ID No. 6) 및 핵산 화물로써 isRNA722A (SEQ ID No. 105) 또는 isRNA722B (SEQ ID No. 122)에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체 및 오발부민 (OVA 단백질) (SEQ ID No. 117)인 항원을 포함하는 조성물이 아닌 것이 바람직하다.
일부 실시예에서, 제공된 약학적 조성물이, 적어도 하나의 항원이 암 또는 종양 질병, 특히 림프종 또는 림프종 관련된 질병과 관련된 항원이 아닌, 상기 항원은 림프성 혈액 세포의 면역글로불린 유전자형 또는 림프성 혈액 세포의 T 세포 수용체 유전자형 또는 이러한 면역글로불린 유전자형 또는 T 세포 수용체 유전자형의 절편, 변이체 및/또는 유도체인, 이황화 가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체 및 적어도 하나의 핵산 분자를 포함하는 폴리머 담체 화물 복합체를 포함하는 것이 더욱 바람직할 수 있다.
이러한 맥락에서 면역글로불린 유전자형은 특정한 B 세포 타입에 의해 발현된 면역글로불린의 가변적 영역의 특정한 분자 형태를 갖는 펩타이드 또는 단백질로 이해될 수 있다. 이러한 유전자형은 이러한 B 세포의 특정한 타입에 대해, 예를 들어 악성 B 세포에 대해 면역 반응을 유도하는 항원으로써 사용될 수 있다. T 세포 수용체 유전자형은 T 세포의 특정한 타입에 의해 발현된 T 세포 수용체의 가변적 영역의 특정한 분자 형태를 갖는 펩타이드 또는 단백질로 이해될 수 있다. 이러한 유전자형은 T 세포의 이러한 특정 타입에 대한, 예를 들어 악성 T 세포에 대한 면역 반응을 유도하는 항원으로써 사용될 수 있다.
일부 실시예에서, 제공된 약학적 조성물이, 암 또는 종양 질병과 관련된 적어도 하나의 항원이 림프종과 관련된 항원이 아닌, 바람직하게는 B 세포 림프종, T 세포 림프종이 아닌 또는 비-호지킨 림프종, 이황화 가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체 및 적어도 하나의 핵산 분자를 포함하는 폴리머 담체 화물 복합체를 포함하는 것이 바람직할 수 있다.
일부 실시예에서, 제공된 약학적 조성물이, 암 또는 종양 질병과 관련된 적어도 하나의 항원이 악성 세포로부터 유래된 항원이 아닌, 바람직하게는 악성 B 세포 또는 악성 T 세포로부터가 아닌, 이황화 가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체 및 적어도 하나의 핵산 분자를 포함하는 폴리머 담체 화물 복합체를 포함하는 것이 바람직할 수 있다.
일부 추가적 실시예에서, 약학적 조성물은 성분 A) 및 B)에 보다 추가적 성분, 바람직하게는 다른 mRNA 성분(성분 A에 의해 포함되는 것 외에)를 포함하지 않을 수 있는 것, 바람직하게는 약학적 조성물이 어떤 mRNA도 전혀 포함하지 않을 수 있는 것이 바람직할 수 있다.
일부 추가적 실시예에서, 제공된 약학적 조성물은 mRNA(성분 A의 핵산 외에)를 포함하고, mRNA는 B)에 따른 펩타이드 또는 항원을 코딩하는 mRNA가 아닐 수 있는, 더욱 바람직하게는 mRNA는 오발부민, PSMA, 루시퍼라제 또는 STEAP를 코딩하는 mRNA가 아닐 수 있는 것이, 바람직할 수 있다.
일부 추가적 실시예에서, 제공된 약학적 조성물은 mRNA(성분 A의 핵산 외에), 특히 B)에 따른 펩타이드 또는 항원을 코딩하는 mRNA, 및/또는 오발부민, PSMA, 루시퍼라제 또는 STEAP을 코딩하는 mRNA를 포함하며, mRNA는 프로타민과 바람직하게는 2:1 또는 4:1 또는 2:1 및 4:1 사이가 아닌 비율로, 복합화되지 않을 수 있다.
일부 추가적 실시예에서, 주장된 약학적 조성물은 췌장 암종 또는 폐소세포 암종의 치료를 위해 사용되지 않는 것이 바람직할 수 있다.
일부 추가적 실시예에서, 제공된 약학적 조성물은 mRNA가 자유 mRNA가 아닐 수 있는, mRNA(성분 A의 핵산 외에)를 포함하는 것이 바람직할 수 있다.
일부 추가적 실시예에서, 제공된 약학적 조성물은 mRNA가 프로타민과 복합되지 않을 수 있는, mRNA(성분 A의 핵산 외에)를 포함하는 것이 바람직할 수 있다.
일부 추가적 실시예에서, 제공된 약학적 조성물은 mRNA가 치료적으로 활성인 단백질을 코딩하지 않으며 항체를 코딩하지 않으며 항원을 코딩하지 않는, 자유 mRNA를 포함하는 것이 바람직할 수 있다.
일부 추가적 실시예에서, 독창적 약학적 조성물의 성분 A)에 관하여, a)는 프로타민이 아닐 수 있는 것이 바람직할 수 있다.
일부 추가적 실시예에서, 독창적 약학적 조성물의 성분 A)에 관하여, 담체 단백질은 프로타민이 아닌 것이 바람직할 수 있다.
일부 추가적 실시예에서, 성분 A)의 a)가 프로타민인 경우, a)는 성분 A)의 b)에 관하여, 1:2 또는 1:4 또는 1:2 및 1:4 사이의 비율로 존재하지 않는 것이 바람직할 수 있다.
일부 추가적 실시예에서, 성분의 담체 단백질이 프로타민인 경우, 담체 단백질이 성분 A)의 핵산에 대해 1:2 또는 1:4의 비율로 존재하지 않는 것이 바람직할 수 있다.
일부 추가적 실시예에서, 성분 A)에 관하여 핵산은 mRNA가 아닌 것이 바람직할 수 있다.
일부 추가적 실시예에서, 성분 A)의 핵산이 mRNA인 경우, mRNA는 오발부민, PSMA, 루시퍼라제 또는 STEAP를 코딩하지 않는 것이 바람직할 수 있다.
일부 추가적 실시예에서, 성분 A)의 핵산, 즉 b)가 mRNA인 경우; RNA는 자유 mRNA가 아니며, 단 a)의 담체 단백질과 배타적으로 복합되는 것이 바람직할 수 있다.
일부 추가적 실시예에서, 성분 (B)는 오발부민 또는 오발부민의 절편이 아니다. 바람직하게는 본 발명에 따른 약학적 조성물, 키트 또는 약학적 패키지는 오발부민 또는 오발부민의 절편 또는 오발부민을 코딩하는 또는 오발부민의 절편을 코딩하는 핵산 서열을 포함하지 않는다.
본 발명의 약학적 조성물은 감염성 질병, 알러지 또는 알러지성 질병, 자가면역 질병, 또는 암 또는 종양 질병 등에 직접적으로 대항하여 적응 면역 반응을 효과적으로 유도한다.
하기 도면은 본 발명을 더욱 설명하기 위한 의도이다. 그들은 본 발명의 요지를 제한하는 것은 아니다.
도면 1: 제타사이저 나노(Zetasizer Nano) (Malvern Instruments, Malvern, UK)를 사용한 동적 광 산란에 의해 동결 건조 이후 담체(R12 및 R7)로써 비중합된 양이온성 펩타이드와 복합화하는 것에 비해 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 CR-7C에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 원시 상관관계 곡선을 보여준다. 유체역학적 직경은 새로 제조된 복합체로 및 동결 건조 이후 재구성된 복합체로 측정되었다 펩타이드:RNA의 질량비는 1:2였다. 결과와 같이 크기가 증가하고 그에 따라 동결 건조 단계 동안 안정하지 않은 비-중합화 펩타이드에 의해 형성된 복합체와 대조적으로, 이황화 결합에 의한 폴리머 담체의 중합화를 유도하는 양이온성 성분으로써 시스테인 포함 펩타이드를 포함하는 폴리머 담체 화물 복합체는 크기가 변하지 않는 것으로 보여질 수 있다. 따라서 폴리머 담체로써 중합된 펩타이드를 갖는 복합체는 동결 건조에 대해 유리한 특성을 보여준다.
도면 2: 다른 w/w 비율에 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 제타 전위를 보여준다. 나타난 바와 같이, 제타 전위는 w/w 비율이 과잉 펩타이드에서 1:1 비율(펩타이드/RNA)로 변할 때 양에서 음으로 변한다.
도면 3A: 1:2.5 (w/w) (CR12C/CpG 2216)의 질량비로 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 CpG 2216에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체로 자극 후에 hPBMCs 내 hIFNa 사이토카인(생체 외)의 분비를 보여준다. 나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 핵산 화물 단독 또는 양이온성 펩타이드 단독에 비해 hPBMCs 내 hIFNa 사이토카인 방출의 증가를 유도한다.
도 3B: 1:2.5 (w/w) (CR12C/CpG 2216)의 질량비로 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 CpG 2216에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체로 자극 후에 hPBMCs 내 hTNFa 사이토카인(생체 외)의 분비를 보여준다. 나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 핵산 화물 단독 또는 양이온성 펩타이드 단독에 비해 hPBMCs 내 hTNFa 사이토카인 방출의 증가를 유도하지 않는다.
도 4A: 1:2 (w/w) (CR12C/R491)의 질량비로 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 루시퍼라제를 코딩하는 mRNA R491에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체로 자극 후에 hPBMCs 내 hIFNa 사이토카인(생체 외)의 분비를 보여준다. 나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 핵산 화물 단독 또는 양이온성 펩타이드 단독에 비해 hPBMCs 내 hIFNa 사이토카인 방출의 증가를 유도한다.
도 4B: 1:2 (w/w) (CR12C/R491)의 질량비로 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 루시퍼라제를 코딩하는 mRNA R491에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체로 자극 후에 hPBMCs 내 hTNFa 사이토카인(생체 외)의 분비를 보여준다. 나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 핵산 화물 단독 또는 양이온성 펩타이드 단독에 비해 hPBMCs 내 hTNFa 사이토카인 방출의 증가를 유도한다.
도 5A: 1:2.5 (w/w) (CR12C/짧은 GU 풍부)의 질량비로 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 짧은 GU 풍부 RNA 올리고핵산(짧은 GU 풍부)에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체로 자극 후에 hPBMCs 내 hIFNa 사이토카인(생체 외)의 분비를 보여준다. 나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 핵산 화물 단독 또는 양이온성 펩타이드 단독에 비해 hPBMCs 내 hIFNa 사이토카인 방출의 증가를 유도한다.
도 5B: 1:2.5 (w/w) (CR12C/짧은 GU 풍부)의 질량비로 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 짧은 GU 풍부 RNA 올리고핵산(짧은 GU 풍부)에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체로 자극 후에 hPBMCs 내 hTNFa 사이토카인(생체 외)의 분비를 보여준다. 나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 핵산 화물 단독 또는 양이온성 펩타이드 단독에 비해 hPBMCs 내 hTNFa 사이토카인 방출의 증가를 유도한다.
도 6A: 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR7C 및 핵산 화물로써 긴 비코딩 GU-풍부 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체로 자극 후에 hPBMCs 내 hIFNa 사이토카인(생체 외)의 분비를 보여준다. 나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체(CR7C/R722)는 비중합화된 펩타이드 R7에 의해 형성된 화물 복합체(R7/R722)에 비해 hPBMCs 내 hIFNa 사이토카인 방출의 증가를 유도한다.
도 6B: 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR7C 및 핵산 화물로써 긴 비코딩 GU-풍부 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체로 자극 후에 hPBMCs 내 hTNFa 사이토카인(생체 외)의 분비를 보여준다. 나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체(CR7C/R722)는 비중합화된 펩타이드 R7에 의해 형성된 담체 화물 복합체(R7/R722)에 비해 hPBMCs 내 hTNFa 사이토카인 방출의 약한 증가를 단지 유도한다.
도 7A: 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR9C 및 핵산 화물로써 긴 비코딩 GU-풍부 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체로 자극 후에 hPBMCs 내 hIFNa 사이토카인(생체 외)의 분비를 보여준다. 나타난 바와 같이, 독창적인 폴리머 담체 화물 복합체(CR9C/R722)는 비중합화된 펩타이드 R9에 의해 형성된 담체 화물 복합체(R9/R722)에 비해 hPBMCs 내 hIFNa 사이토카인 방출의 증가를 유도한다.
도 7B: 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR9C 및 핵산 화물로써 긴 비코딩 GU-풍부 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체로 자극 후에 hPBMCs 내 hTNFa 사이토카인(생체 외)의 분비를 보여준다. 나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체(CR9C/R722)는 비중합화된 펩타이드 R9에 의해 형성된 담체 화물 복합체(R9/R722)에 비해 hPBMCs 내 hTNFa 사이토카인 방출의 증가를 유도하지 않는다.
도 8A: 다른 w/w 비율에서 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체로 자극 후에 hPBMCs 내 hIFNa 사이토카인(생체 외)의 분비를 보여준다. 나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 핵산 화물 단독 또는 양이온성 펩타이드 단독에 비해 hPBMCs 내 hIFNa 사이토카인 방출의 증가를 유도한다.
도 8B: 다른 w/w 비율에서 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체로 자극 후에 hPBMCs 내 hTNFa 사이토카인(생체 외)의 분비를 보여준다. 나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 핵산 화물 단독 또는 양이온성 펩타이드 단독에 비해 hPBMCs 내 hTNFa 사이토카인 방출의 증가를 유도한다.
도 9A: 른 N/P 비율에서 양이온성 펩타이드 CH6R4H6C, CH3R4H3C 및 CHK7HC 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체로 자극 후에 hPBMCs 내 hIFNa 사이토카인(생체 외)의 분비를 보여준다. 나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 핵산 화물 단독 또는 양이온성 펩타이드 단독에 비해 hPBMCs 내 hIFNa 사이토카인 방출의 증가를 유도한다.
도 9B: 다른 N/P 비율에서 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CH6R4H6C, CH3R4H3C 및 CHK7HC 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체로 자극 후에 hPBMCs 내 hTNFa 사이토카인(생체 외)의 분비를 보여준다. 나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 핵산 화물 단독 또는 양이온성 펩타이드 단독에 비해 hPBMCs 내 hTNFa 사이토카인 방출의 증가를 유도한다. 특히 1 보다 크거나 동일한 N/P 비율의 폴리머 화물 복합체는 TNF 알파 분비를 초래하였다.
도 10: 종양 시험(tumor challenge) 실험에 어쥬번트로써 사용을 위해 단백질 항원 오발부민(OVA 단백질)에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해 그룹 당 7 암컷 C57BL/6 쥐는 45 μg CR12C/R722과 조합된 μg 5 μg 오발부민 단백질(1:2; w/w)로 2주에 3회 백신 접종되었다. 비교를 위해 쥐들은 폴리머 담체 화물 복합체 없이 주사되었다.
나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 버퍼 대조군에 비해 종양 생장에 효과가 없는, 단백질 항원 단독에 비해 종양 생장을 극도로 감속시켰다.
도 11: 오발부민 특이적 IgG2a 항체의 유도에 어쥬번트로써 사용을 위해 단백질 항원 오발부민(OVA 단백질)에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해 그룹 당 5 암컷 C57BL/6 쥐는 45 μg CR12C/R722과 조합된 5 μg 오발부민 단백질(1:2; w/w)로 2주에 3회 백신 접종되었다. 비교를 위해 쥐들은 폴리머 담체 화물 복합체 없이 주사되었다.
나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 폴리머 담체 화물 복합체의 유익한 어쥬번트 특성을 증명하는, 특히 Th-1 시트프(shifted) 면역 반응의 유도에 관하여 B 세포 반응을 강하게 증가시켰다.
도 12: 오발부민 특이적 세포독성 T 세포의 유도에 어쥬번트로써 사용을 위해 단백질 항원 오발부민(OVA 단백질) 또는 오발부민 특이적 펩타이드 항원 SIINFEKL에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해 그룹 당 5 암컷 C57BL/6 쥐는 45 μg CR12C/R722과 조합된 5 μg 오발부민 단백질 또는 50 μg SIINFEKEL 펩타이드(1:2; w/w)로 2주에 3회 백신 접종되었다. 비교를 위해 쥐들은 폴리머 담체 화물 복합체 없이 주사되었다.
나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 폴리머 담체 화물 복합체의 유익한 어쥬번트 특성을 더욱 증명하는, 특히 Th-1 시트프(shifted) 면역 반응의 유도에 관하여 단백질 또는 펩타이드 단독으로 백신 접종에 비해 오발부민 특이적 세포독성 T 세포의 유도를 강하게 증가시켰다.
도 13: 광견병 특이적 IgG 항체의 유도에(OD 405nm로 의해 나타나는) 어쥬번트로써 사용을 위해 백신 Rabipur® (불활성화된 광견병 바이러스 포함)에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해 8 암컷 BALB/c 쥐는 Rabipur®의 0.1, 0.01, 및 0.001 배 인간 투여량(dose) 및 30 μg R722 및 8.1 μg CR12C (3.7:1 w/w)로 근육내 주사되었다. 21일 후 면역 혈액 샘플은 수거되고 광견병 바이러스에 대한 총 IgG 항체를 분석하였다.
나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 폴리머 담체 화물 복합체의 유익한 어쥬번트 특성을 더욱 증명하는, Rabipur® 단독으로 백신 접종에 비해 광견병 특이적 IgG 항체의 유도를 강하게 증가시켰다.
도 14: 광견병 특이적 세포독성 T 세포의 유도에(ELISPOT 분석 내 점(spots)의 갯수로 나타나는) 어쥬번트로써 사용을 위해 백신 Rabipur® 또는 HDC(불활성화된 광견병 바이러스 포함)에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해 5 암컷 BALB/c 쥐는 Rabipur®의 0.01배 인간 투여량(dose) 및 30 μg R722 및 8.1 μg CR12C (3.7:1 w/w)로 근육내 주사되었다. 5일 후 면역된(immunization) 쥐는 희생되었고, 비장이 제거되고 비장 세포가 동정되었다.
나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 폴리머 담체 화물 복합체의 유익한 어쥬번트 특성을 더욱 증명하는, 특히 Th1-시프트 면역 반응의 유도에 관하여, Rabipur® 또는 HDC 단독으로 백신 접종에 비해 광견병 특이적 세포독성 T 세포의 유도를 강하게 증가시켰다.
도 15: 광견병 특이적 IgG 항체의 유도에 어쥬번트로써 사용을 위해 백신 Rabipur®(불활성화된 광견병 바이러스 포함)에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다. 나아가 항체에 높은 친화성을 갖는(결합 IgG의 %로 나타난) 항체의 유도에 폴리머 담체 화물 복합체의 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해 8 암컷 BALB/c 쥐는 Rabipur®의 0.01배 인간 투여량(dose) 및 30 μg R722 및 8.1 μg CR12C (3.7:1 w/w)로 근육내 주사되었다. 7 및 21일 후 면역 혈액 샘플은 수집되었고 광견병 바이러스에 대한 총 IgG 항체가 분석되었다. 광견병 바이러스에 대해 발생된 항체의 친화성을 실험하기 위하여, ELISA의 수행 동안 결합 항체는 요소(urea)의 증가하는 농도로 세척되었다.
나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 폴리머 담체 화물 복합체의 유익한 어쥬번트 특성을 더욱 증명하는, 특히 높은 친화성의 항체의 유도에 관하여, Rabipur® 단독으로 백신 접종에 비해 항원에 높은 친화성을 갖는 광견병 특이적 IgG 항체의 유도를 강하게 증가시켰다.
도 16: 광견병 바이러스 중화 항체(IU/ml로 나타나는)의 유도에 어쥬번트로써 사용을 위해 백신 HDC(불활성화된 광견병 바이러스 포함)에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해 8 암컷 BALB/c 쥐는 HDC의 0.01배 인간 투여량(dose) 및 30 μg R722 및 15 μg CR12C (2:1 w/w)로 근육내 주사되었다. 21일 후 면역 혈액 샘플은 수집되었고 바이러스 중화가 분석되었다.
나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 폴리머 담체 화물 복합체의 유익한 어쥬번트 특성을 더욱 증명하는, HDC 단독으로 백신 접종에 비해 중화 항체 역가(titer)를 강하게 증가시켰다.
도 17: H1N1 인플루엔자 특이적 IgG2a 항체의 유도에 어쥬번트로써 사용을 위해 돼지 독감 백신 Pandemrix®(불활성화된 H1N1 인플루엔자 바이러스 포함)에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해 5 암컷 BALB/c 쥐는 0.1 μg Pandemrix® 및 30 μg R722 및 15 μg CR12C (2:1 w/w)으로 근육내 주사되었다. 14일 후 면역 혈액 샘플은 수집되었고 H1N1 인플루엔자 바이러스(OD 405nm로 나타남)에 대한 IgG2a 항체의 유도가 분석되었다.
나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 폴리머 담체 화물 복합체의 유익한 어쥬번트 특성을 더욱 증명하는, 특히 Th1 시프트 면역 반응의 유도에 관하여, Panemrix® 단독으로 백신 접종에 비해 인플루엔자 특이적 IgG2a 항체의 유도를 강하게 증가시켰다.
도 18: A(H1N1)pdm09특이적 세포독성 T 세포(ELISPOT 분석 내 점의 개수로 나타나는)의 유도에 어쥬번트로써 사용을 위해 A(H1N1)pdm09인플루엔자 백신 Celvapan® (불활성화된 A(H1N1)pdm09인플루엔자 바이러스 포함)에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해 5 암컷 BALB/c 쥐는 0.1 μg Celvapan® 및 15 μg R722 및 7.5 μg CR12C (2:1 w/w)으로 근육내 주사되었다. 6일 후 면역 쥐는 희생되었고, 비장은 제거되고 비장 세포는 동정되었다.
나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 폴리머 담체 화물 복합체의 유익한 어쥬번트 특성을 더욱 증명하는, 특히 Th1 시프트 면역 반응의 유도에 관하여, Celvapan® 단독으로 백신 접종에 비해 A(H1N1)pdm09-특이적 세포독성 T 세포의 유도를 강하게 증가시켰다.
도 19: 인플루엔자 특이적 IgG2a 항체(OD 405nm로 나타나는)의 유도에 어쥬번트로써 사용을 위해 계절 인플루엔자 백신 Begrivac®(WHO에 의해 추천되는 불활성화된 계절 인플루엔자 바이러스 균주를 포함)에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해 8 암컷 BALB/c 쥐는 0.1 μg Begrivac® 및 30 μg R722 및 15 μg CR12C (2:1 w/w)으로 근육내 주사되었다. 28일 후 면역 혈액 샘플은 수집되었고 인플루엔자 바이러스에 대한 IgG2a 항체가 분석되었다.
나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 폴리머 담체 화물 복합체의 유익한 어쥬번트 특성을 더욱 증명하는, 특히 Th1 시프트 면역 반응의 유도에 관하여, Begrivac® 단독으로 백신 접종에 비해 인플루엔자 특이적 IgG2a 항체의 유도를 강하게 증가시켰다.
도 20: HBsAG 특이적 항체(형광(fluorescence)에 의해 나타나는)의 유도에 어쥬번트로써 사용을 위해 B형 간염 백신 Engerix®-B(재조합 B형 간염 바이러스 표면 항원(HBsAg) 포함)에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해 8 암컷 BALB/c 쥐는 0.5 μg Engerix®-B 및 6.25 μg R722 및 1.7 μg CR12C (3.7:1 w/w)으로 근육내 주사되었다. 28일 후 면역 혈액 샘플은 수집되었고 HBsAGg에 대한 IgG2a 항체가 분석되었다.
나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 폴리머 담체 화물 복합체의 유익한 어쥬번트 특성을 더욱 증명하는, 특히 Th1 시프트 면역 반응의 유도에 관하여, Engerix®-B 단독으로 백신 접종에 비해 HBsAg-특이적 IgG2a 항체의 유도를 강하게 증가시켰다.
도 21: HPV16 E7 특이적 세포독성 T 세포(ELISPOT 분석 내 점의 개수로 나타나는)의 유도에 어쥬번트로써 사용을 위해 인유두종바이러스 16(HPV16) 유도된 펩타이드에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해 5 암컷 C57BL/6 쥐는 HPV16 E7 유도된 펩타이드 E7aa43-77의 100 μg 및 50 μg R722 및 25 μg CR12C (2:1 w/w)으로 근육내 주사되었다. 8일 후 면역된 쥐는 희생되었고, 비장이 제거되고 비장 세포가 동정되었다.
나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 폴리머 담체 화물 복합체의 유익한 어쥬번트 특성을 더욱 증명하는, 특히 Th1 시프트 면역 반응의 유도에 관하여, 펩타이드 단독으로 백신 접종에 비해 HPV16 E7 특이적 세포독성 T 세포의 유도를 강하게 증가시켰다.
도 22: HPV16 E7 특이적 세포독성 T 세포(ELISPOT 분석 내 점의 개수로 나타나는)의 유도에 어쥬번트로써 사용을 위해 인유두종바이러스 16(HPV16) 유도된 펩타이드에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해 5 암컷 C57BL/6 쥐는 HPV16 E7 유도된 펩타이드 E7aa43-77의 100 μg 및 50 μg R722 및 25 μg CR12C (2:1 w/w)으로 근육내 주사되었다. 나아가 쥐는 항원 펩타이드 E7aa43-77을 추가적으로 포함하는 폴리머 담체 화물 복합체로 주사되었다. 7일 후 면역된 쥐는 희생되었고, 비장이 제거되고 비장 세포가 동정되었다.
나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 펩타이드 단독으로 백신 접종에 비해 HPV16 E7 특이적 세포독성 T 세포의 유도를 강하게 증가시켰다. 나아가 결과는 폴리머 담체 화물 복합체 내 항원 펩타이드의 포함은 HPV16 E7 특이적 세포독성 T 세포의 유도를 추가적으로 증가시키는 것을 보여준다. 따라서 또한 이 실험은 특히 Th1 시프트 면역 반응의 유도에 관하여, 폴리머 담체 화물 복합체의 유익한 어쥬번트 특성을 증명한다.
도 23: NY-ESO-1 특이적 세포독성 T 세포(ELISPOT 분석 내 점의 개수로 나타나는)의 유도에 어쥬번트로써 사용을 위해 인간 NY-ESO-1 단백질에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해 5 암컷 C57BL/6 쥐는 HPV16 E7 유도된 펩타이드 5 μg NY-ESO-1 단백질 및 30 μg R722 및 15 μg CR12C (2:1 w/w)으로 근육내 주사되었다. 7일 후 마지막 면역된 쥐는 희생되었고, 비장이 제거되고 비장 세포가 동정되었다.
나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 폴리머 담체 화물 복합체의 유익한 어쥬번트 특성을 더욱 증명하는, 특히 Th1 시프트 면역 반응의 유도에 관하여, 단백질 단독으로 백신 접종에 비해 NY-ESO-1 특이적 세포독성 T 세포의 유도를 강하게 증가시켰다.
도 24: 치사 바이러스 시험(challenge) 감염에 대한 보호의 향상을 위한 어쥬번트로써 사용을 위해 백신 Rabipur® (불활성화된 광견병 바이러스 포함)에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해 8 암컷 BALB/c 쥐는 Rabipur®의 0.001배 인간 투여량 및 3 μg R722 및 0.81 μg CR12C (3.7:1 w/w)으로 근육내 주사되었다. 37일 후 백신 접종 쥐는 25 배 LD50 (치사량 50%)을 사용하여 시험 바이러스 균주(CVS)의 광견병 바이러스의 치사량으로 감염되었다.
나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는 폴리머 담체 화물 복합체의 유익한 어쥬번트 특성을 더욱 증명하는, Rabipur® 단독으로 백신 접종에 비해 치사 광견병 바이러스 감염에 대한 쥐의 생존을 강하게 증가시켰다.
도 25: 종양 시험 실험에 어쥬번트로써 사용을 위해 백신 인유두종바이러스 16(HPV16) 유도된 긴사슬 펩타이드 E7aa43-77에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해, 그룹당 8 C57BL/6 쥐는 HPV E6 및 E7 단백질을 발현하는 1x105 TC-1 세포로 1일에 시험되었다. 백신 접종은 종양 시험(중앙 종양 부피 31-48 mm3) 후 7일에 시작했다. 쥐는 50 μg CR12C/R722와 조합된 5 μg 또는 50 μg E7 펩타이드(1:2; w/w)로 5회(8, 12, 15, 19 및 22일에) 피부 내에 백신 접종되었다. 비교를 위해, 쥐는 폴리머 화물 복합체 단독으로 주사되었다.
나타난 바와 같이, HPV-16 유도된 E7 펩타이드 E7aa43-77과 조합된 폴리머 담체 화물 복합체는 폴리머 담체 화물 복합체 단독에 비해 종양의 성장을 더욱 악화시켰다.
도 26: 종양 시험 실험에 어쥬번트로써 사용을 위해 백신 인유두종바이러스 16(HPV16) 유도된 E7 펩타이드 E7aa43-77에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해, 그룹당 8 C57BL/6 쥐는 1x105 TC-1 세포로 1일에 시험되었다. 백신 접종은 종양 시험(중앙 종양 부피 31-48 mm3) 후 7일에 시작했다. 쥐는 50 μg CR12C/R722와 조합된 5 μg 또는 50 μg E7 펩타이드 E7aa43-77(1:2; w/w)로 5회(8, 12, 15, 19 및 22일에) 피부 내에 백신 접종되었다. 비교를 위해, 쥐는 E7 펩타이드 또는 폴리머 화물 복합체 단독으로 주사되었다. PBS 버퍼와 주사는 음성대조군으로 제공되었다.
나타난 바와 같이, HPV-16 유도된 E7 펩타이드와 조합된 폴리머 담체 화물 복합체는 E7 펩타이드 또는 50 폴리머 담체 화물 복합체 단독에 비해 종양을 갖는 쥐의 생존을 강하게 증가시켰다(50 μg E7 펩타이드 + 50 μg 폴리머 담체 화물 복합체에 대해 44.5일의 평균 생존 시간; 5 μg E7 펩타이드 + 50 μg 폴리머 담체 화물 복합체 22일의 평균 생존 시간).
도 27: 종양 시험 실험에 어쥬번트로써 사용을 위해 백신 인유두종바이러스 16(HPV16) 유도된 E7 펩타이드 E7aa43-77에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해, 그룹당 13 C57BL/6 쥐는 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722로 형성된 폴리머 담체 화물 복합체 및 도면에 지시된 것과 같은 E7 펩타이드로 4주 동안 주 1회 피부 내에 백신 접종되었다. 네번째 백신 접종 8주 후, 5 쥐/그룹이 희생되었고, 비장 세포들이 동정되었으며 항원 특이적 CD8+ T 세포의 빈도가 HPV 펜타머 염색 및 실시예 13에 따른 유동 세포 분석법(flow cytometry)에 의해 결정되었다.
나타난 바와 같이 HPV-16 유도된 E7 펩타이드 E7aa43-77과 조합된 폴리머 담체 화물 복합체는 E7 펩타이드 단독의 50 μg으로 백신 접종된 쥐에 비해 항원 특이적 CD8+ T 세포의 통계적으로 현저한 증가를 초래하였다 (5 μg E7 펩타이드에 대해 p=0.0007 및 50 μg E7 펩타이드 p= 0.0002; 그룹 간 통계적 차이는 짝이없는 t-테스트(unpaired t-test)에 의해 측정됨). 따라서, HPV-16 유도된 E7 펩타이드와 조합된 폴리머 담체 화물 복합체의 조합은 잠재 기억 CD8+ T 세포 반응을 유도한다.
도 28: 종양 시험 실험에 어쥬번트로써 사용을 위해 백신 인유두종바이러스 16(HPV16) 유도된 E7 펩타이드 E7aa43-77에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해, 그룹당 13 C57BL/6 쥐는 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722로 형성된 폴리머 담체 화물 복합체 및 도면에 지시된 것과 같은 E7 펩타이드로 4주 동안 주 1회 피부 내에 백신 접종되었다. 네번째 백신 접종 8주 후, 8쥐/그룹이 1x105 TC-1 종양 세포와 함께 시험되었고 종양 성장이 관찰되었다.
나타난 바와 같이 HPV-16 유도된 E7 펩타이드 E7aa43-77과 조합된 폴리머 담체 화물 복합체는 종양 생장의 급격한 지연을 초래하였다(5 μg E7 펩타이드 + 50 μg 폴리머 담체 화물 복합체의 50 μg에 대한 4 완벽한 반응; 50 μg E7 펩타이드 + 50 μg 폴리머 담체 화물 복합체의 50 μg에 대한 7 완벽한 반응자). 따라서, HPV-16 유도된 E7 펩타이드와 조합된 폴리머 담체 화물 복합체의 조합은 잠재 기억 CD8+ T 세포 반응을 유도한다.
도 29: 인플루엔자 특이적 헤마글루티닌 억제(HI) 역가(HI 역가로 나타나는)의 유도에 어쥬번트로써 사용을 위해 계절 인플루엔자 백신 Mutagrip®(WHO에 의해 추천되는 불활성화된 계절 인플루엔자 바이러스 균주를 포함)에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해, 8 암컷 BALB/c 쥐는 0.45 μg 또는 0.045 μg Mutagrip® 및 5 μg R722 + 1.35 μg CR12C (3.7:1, w/w)으로 근육내에 주사되었다. 21일 후 면역 혈액 샘플은 수집되고 HI 역가가 혈청 내에서 결정되었다. HI 역가는 인간 내 보호 한계으로써 일반적으로 정의된 =1:40의 HI 역가로 인플루엔자 백신 효율의 대리(surrogate) 파라미터로써 널리 사용된다.
나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는, 폴리머 담체 화물 복합체의 유익한 어쥬번트 특성을 더욱 증명하는, Mutagrip® 단독으로 백신 접종에 비해 인플루엔자 A H1N1 특이적 HI 역가 (A) 및 H3N2 특이적 HI 역가 (B)의 유도를 강하게 증가시켰다.
도 30: 인플루엔자 특이적 IgG2a 항체(IgG2a 역가로 나타나는)의 유도에 어쥬번트로써 사용을 위해 계절 인플루엔자 백신 Mutagrip®(WHO에 의해 추천되는 불활성화된 계절 인플루엔자 바이러스 균주를 포함)에 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체의 첨가의 (생체 내) 효과를 보여준다.
이러한 목적을 위해, 8 암컷 BALB/c 쥐는 0.45 μg 또는 0.045 μg Mutagrip® 및 5 μg R722 + 1.35 μg CR12C (3.7:1, w/w)으로 근육내에 주사되었다. 21일 후 면역 혈액 샘플은 수집되고 인플루엔자 A H1N1바이러스에 대한 IgG2a 항체가 분석되었다.
나타난 바와 같이, 폴리머 담체 화물 복합체는, 폴리머 담체 화물 복합체의 유익한 어쥬번트 특성을 더욱 증명하는, 특히 계절 인플루엔자 백신의 복용-절약(dose-sparing)에 관하여, Mutagrip® 단독으로 백신 접종에 비해 인플루엔자 A H1N1 특이적 IgG2a 항체의 유도를 강하게 증가시켰다.
하기 실시예들은 본 발명을 더욱 설명하기 위한 것이다. 그들은 본 발명의 요지를 제한하는 것은 아니다.
1. 시약(Reagents):
폴리머 담체의 양이온성 성분으로써 양이온성 펩타이드:
R7: Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg (Arg7) (SEQ ID NO. 109)
CR7C: Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys (CysArg7Cys) (SEQ ID NO. 1)
R9: Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg (Arg9) (SEQ ID NO. 110)
R12: Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg (Arg12) (SEQ ID NO. 111)
CR9C: Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys (Cys-Arg9-Cys) (SEQ ID NO. 2)
CR12C: Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys (Cys-Arg12-Cys) (SEQ ID NO. 6)
폴리머 담체 화물 복합체의 화물로써 핵산:
R1180: 루시퍼라제를 코딩하는 mRNA (SEQ ID NO. 112)
GCCAGGGCUACGGCCUGACCGAGACCACGAGCGCGAUCCUGAUCACCCCCGAGGGGGACGACAAGCCGGGCGCCGUGGGCAAGGUGGUCCCGUUCUUCGAGGCCAAGGUGGUGGACCUGGACACCGGCAAGACCCUGGGCGUGAACCAGCGGGGCGAGCUGUGCGUGCGGGGGCCGAUGAUCAUGAGCGGCUACGUGAACAACCCGGAGGCCACCAACGCCCUCAUCGACAAGGACGGCUGGCUGCACAGCGGCGACAUCGCCUACUGGGACGAGGACGAGCACUUCUUCAUCGUCGACCGGCUGAAGUCGCUGAUCAAGUACAAGGGCUACCAGGUGGCGCCGGCCGAGCUGGAGAGCAUCCUGCUCCAGCACCCCAACAUCUUCGACGCCGGCGUGGCCGGGCUGCCGGACGACGACGCCGGCGAGCUGCCGGCCGCGGUGGUGGUGCUGGAGCACGGCAAGACCAUGACGGAGAAGGAGAUCGUCGACUACGUGGCCAGCCAGGUGACCACCGCCAAGAAGCUGCGGGGCGGCGUGGUGUUCGUGGACGAGGUCCCGAAGGGCCUGACCGGGAAGCUCGACGCCCGGAAGAUCCGCGAGAUCCUGAUCAAGGCCAAGAAGGGCGGCAAGAUCGCCGUGUAAGACUAGUUAUAAGACUGACUAGCCCGAUGGGCCUCCCAACGGGCCCUCCUCCCCUCCUUGCACCGAGAUUAAUAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAUAUUCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCUCUAG (R1180)
R722A: 긴 비코딩 isGU-풍부 RNA (SEQ ID NO. 105)
R722B: 긴 비코딩 isGU-풍부 RNA (SEQ ID NO. 122)
R491: 루시퍼라제를 코딩하는 mRNA (SEQ ID NO. 113)
GCCAGGGCUACGGCCUGACCGAGACCACGAGCGCGAUCCUGAUCACCCCCGAGGGGGACGACAAGCCGGGCGCCGUGGGCAAGGUGGUCCCGUUCUUCGAGGCCAAGGUGGUGGACCUGGACACCGGCAAGACCCUGGGCGUGAACCAGCGGGGCGAGCUGUGCGUGCGGGGGCCGAUGAUCAUGAGCGGCUACGUGAACAACCCGGAGGCCACCAACGCCCUCAUCGACAAGGACGGCUGGCUGCACAGCGGCGACAUCGCCUACUGGGACGAGGACGAGCACUUCUUCAUCGUCGACCGGCUGAAGUCGCUGAUCAAGUACAAGGGCUACCAGGUGGCGCCGGCCGAGCUGGAGAGCAUCCUGCUCCAGCACCCCAACAUCUUCGACGCCGGCGUGGCCGGGCUGCCGGACGACGACGCCGGCGAGCUGCCGGCCGCGGUGGUGGUGCUGGAGCACGGCAAGACCAUGACGGAGAAGGAGAUCGUCGACUACGUGGCCAGCCAGGUGACCACCGCCAAGAAGCUGCGGGGCGGCGUGGUGUUCGUGGACGAGGUCCCGAAGGGCCUGACCGGGAAGCUCGACGCCCGGAAGAUCCGCGAGAUCCUGAUCAAGGCCAAGAAGGGCGGCAAGAUCGCCGUGUAAGACUAGUUAUAAGACUGACUAGCCCGAUGGGCCUCCCAACGGGCCCUCCUCCCCUCCUUGCACCGAGAUUAAUAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAUAUUCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCUCUAGACAAUUGGAAUU (R491)
CpG 2216: CpG 올리고뉴클레오티드 gggggacgatcgtcgggggg (SEQ ID NO. 114)
Short GU rich: GU-rich RNA 올리고뉴클레오티드 gguuuuuuuuuuuuuuuggg (SEQ ID NO. 115)
핵산 화물 R722의 사용을 지시하는 실험예는 서열 R722A 및/또는 R722B로 수행되었다.
항원 및 에피토프:
오발부민 유도된펩타이드 SIINFEKL (SEQ ID NO. 116)
오발부민: MGSIGAASMEFCFDVFKELKVHHANENIFYCPIAIMSALAMVYLGAKDSTRTQINKVVRF
DKLPGFGDSIEAQCGTSVNVHSSLRDILNQITKPNDVYSFSLASRLYAEERYPILPEYLQ
CVKELYRGGLEPINFQTAADQARELINSWVESQTNGIIRNVLQPSSVDSQTAMVLVNAIV
FKGLWEKAFKDEDTQAMPFRVTEQESKPVQMMYQIGLFRVASMASEKMKILELPFASGTM
SMLVLLPDEVSGLEQLESIINFEKLTEWTSSNVMEERKIKVYLPRMKMEEKYNLTSVLMA
MGITDVFSSSANLSGISSAESLKISQAVHAAHAEINEAGREVVGSAEAGVDAASVSEEFR
ADHPFLFCIKHIATNAVLFFGRCVSP (SEQ ID NO. 117)
HPV16 E7 aa43-77: GQAEPDRAHYNIVTFCCKCDSTLRLCVQSTHVDIR (SEQ ID NO. 118)
HPV16 E7 aa48-57: DRAHYNIVTF (SEQ ID NO. 119)
HPV16 E7 aa49-57 (H-2 Db): RAHYNIVTF (SEQ ID NO. 120)
NY-ESO-1:
MQAEGRGTGGSTGDADGPGGPGIPDGPGGNAGGPGEAGATGGRGPRGA
GAARASGPGGGAPRGPHGGAASGLNGCCRCGARGPESRLLEFYLAMPF
ATPMEAELARRSLAQDAPPLPVPGVLLKEFTVSGNILTIRLTAADHRQ
LQLSISSCLQQLSLLMWITQCFLPVFLAQPPSGQRR (SEQ ID NO. 121)
2. 핵산 서열의 제조:
본 실시예에 대해 실시예 1에서 개시된 핵산 서열은 제조되고 중합된 폴리머 담체 화물 복합체 또는 비교를 위한 비중합된 담체 화물 복합체의 제조를 위해 사용되었다. 이들 폴리머 담체 화물 복합체는 생체 외 및 생체 내 거래(transaction)에, 생체 외 면역자극에 및 입자 특징화에 사용되었다.
첫번째 제조에 따르면, 상응 RNA 서열 R1180, R722 및 R491 서열을 코딩하는 DNA 서열이 제조되었다. 상응 RNAs의 서열은 서열 목록 (SEQ ID NOs: 112, 105, 및 113)에 나타내었다.
짧은 GU 풍부 서열 및 CpG 2216 올리고뉴클레오티드는 포스포라미디트 화학의 수단에 의해 자동 고체상 합성으로 제조되었다. 서열은 서열 목록 (SEQ ID NOs: 115 및 114)에 나타내었다.
생체 외 전사:
R1180, R722 및 R491에 대한 실시예 2에 따라 제조된 각각의 DNA 플라스미드는 하기 제조 지시에 따라 T7-중합효소(T7-Opti mRNA 키트, CureVac, Tubingen, Germany)를 사용하여 생체 외 전사되었다. 그 다음 mRNA는 PureMessenger® (CureVac, Tubingen, Germany)를 사용하여 정제되었다.
3. 폴리머 담체 화물 복합체의 합성:
실시예 1에 상기 정의된 핵산 서열은 실시예 1에 정의된 양이온성 성분과 혼합되었다. 따라서 핵산 서열의 지시된 양은 지시된 질량비로 각각의 양이온성 성분과 혼합되었고, 그에 따라 복합체를 형성하였다. 만약 양이온성 성분의 중합화가 본 발명에 따라 사용된다면, 양이온성 성분의 중합화는 핵산 화물의 복합화와 동시에 일어난다. 그 후 생성 용액(resulting solution)은 50 μl의 최종 부피에 물로 조정되었고 실온에서 30분 동안 배양되었다. 실시예에 사용된 양이온성 성분/핵산의 다른 비율은 표 1에 나타내었다.
샘플 (양이온성 펩타이드/핵산) 질량비 N/P 비율 몰비
CR12C/R1180 1:2 0.9 44:1
CR12C/R1180 2:1 3.6 185:1
R12/R1180 1:2 0.7 48:1
R12/R1180 2:1 2.5 146:1
CR9C/R1180 2:1 0.9 55:1
R9/R1180 2:1 1.1 65:1
CR7C 1:2 0.8 70:1
R7 1:2 1.0 85:1
CR12C/CpG 1:2,5 4.9 8:1
CR12C/R491 1:2 0.9 150:1
CR12C/short GU-rich 1:2,5 4.9 8:1
CR12C/R722 5:1 9.6 444:1
CR12C/R722 4:1 7.6 355:1
CR12C/R722 3:1 5.7 266:1
CR12C/R722 2:1 3.8 177:1
CR12C/R722 1:1 1.9 88:1
CR12C/R722 1:2 0.9 44:1
CR12C/R722 1:3 0.6 29:1
CR12C/R722 1:4 0.5 22:1
CR12C/R722 1:5 0.4 17:1
N/P 비율 = 폴리머 담체의 양이온성 성분의 또는 이러한 폴리머 담체의 이온 전하의 척도(measure)이다. 양이온성 성분의 양이온성 특성이 질소 원자에 의해 제공되는 경우에 N/P 비율은, 질소 원자가 양전하를 부여하고(confer) 핵산의 인산염 백본의 인산염이 음전하를 부여하는 것을 고려할 때, 인산염 잔기에 대한 염기성 질소 원자의 비율이다.
N/P는 바람직하게는 하기 화학식에 의해 계산된다:
N/P = pmol [RNA]* 비율*양이온성 AS
μg RNA*3*1000
실시예와 같이 186 kDa의 분자량을 갖는 SEQ ID NO: 122에 따른 RNA R722가 적용되었다. 따라서 1 μg R722 RNA는 5.38 pmol RNA를 부여한다.
4. hPBMCs 내 사이토카인 자극:
건강한 제공자의 말초 혈액(peripheral blood)으로부터 HPBMC 세포는 Ficoll 구배(gradient)를 사용하여 동정되었고 1xPBS (인산염-버퍼 식염수)로 그 다음 세척되었다. 세포는 이후 96 웰 마이크로타이터 플레이트(200x103/웰)에 시드(seeded)되었다. hPBMC 세포는 X-VIVO 15 배지(BioWhittaker) 내 핵산의 지시된 양을 포함하는 실시예 3으로부터 폴리머 담체 화물 복합체의 10 μl로 24시간 동안 배양되었다. 면역자극성 효과는 hPBMCs의 사이토카인 생산(종양 괴사 인자 알파 및 인터페론 알파)을 검출하여 측정되었다. 따라서, ELISA 마이크로티터 플레이트(Nunc Maxisorb)는 결합 버퍼(0.02% NaN3, 15 mM Na2CO3, 15 mM NaHCO3, pH 9.7)로, 추가적으로 특이적 사이토카인 항체를 포함하여 밤새(o/n) 배양되었다. 세포는 이후 1% BSA(소혈청 알부민)를 포함하는 1xPBS로 봉쇄되었다. 세포 상청액이 추가되고 37°C에서 4시간 동안 배양되었다. 그 다음, 마이크로티터 플레이트는 0.05% Tween-20을 포함하는 1xPBS로 세척되었고 이후 비오틴-표지된 이차 항체 (BD Pharmingen, Heidelberg, Germany)로 배양되었다. 스트렙타비딘-짝지어진 서양고추냉이 과산화효소가 플레이트에 첨가되었다. 이후, 플레이트는 다시 0.05% Tween-20를 포함하는 1xPBS로 세척되었고, ABTS(2,2'-아지노-비스(3-에틸-벤즈티아졸린-6-설폰산)(2,2'-azino-bis(3-ethyl-benzthiazoline-6-sulfonic acid))는 기질로써 첨가되었다. 사이토카인의 양은 Tecan (Crailsheim, Germany)으로부터 선라이즈 ELISA-리더(Sunrise ELISA-Reader)로 재조합 사이토카인(BD Pharmingen, Heidelberg, Germany)으로 표준 곡선을 사용하여 405 nm (OD 405)에서 흡수를 측정하여 결정되었다. 각각의 결과를 도 3-9에 나타내었다.
5. 제타 전위 측정:
폴리머 담체 화물 복합체의 제타 전위는 제타사이저 나노(Zetasizer Nano)(Malvern Instruments, Malvern, UK)를 사용하는 레이저 도플러 전기영동법(laser Doppler electrophoresis method)을 통해 평가되었다. 측정은 25°C에서 수행되었고 173°의 산락각이 사용되었다. 결과는 도 2에 나타내었다.
6. 동결 건조 이후 복합체의 안정성
상기 제조된 폴리머 담체 화물 복합체의 유체역학적 직경은 제조자의 지시에 따른 제타사이저 나노(Zetasizer Nano) (Malvern Instruments, Malvern, UK)를 사용하여 동적 광 산란에 의해 측정되었다. 측정은 버퍼 내 25°C에서 수행되었고 유체역학적 직경 및 폴리머 담체 화물 복합체의 다분산성 색인을 얻기 위해 누적률법(cumulant method)으로 분석되었다. 폴리머 담체 화물 복합체는 실시예 3에서 지시된 것과 같이 형성되었고 유체역학적 직경은 새로 제조된 복합체로 및 동결 건조 이후 재구성된 복합체로 측정되었다. 실험의 각각의 결과는 도 1에 나타내었다.
7. 면역화(Immunization) 실험:
a) 오발부민 또는 SIINFEKL로 면역화:
면역화를 위해 백신 오발부민 단백질 (OVA) (5 μg) 또는 오발부민-특이적 펩타이드 SIINFEKL (50 μg)이 어쥬번트로 폴리머 화물 복합체 R722/CR12C와(2:1 w/w의 비율로) (30 μg R722 / 15 μg CR12C) 조합되고 암컷 C57BL/6 쥐에 피부내로 주사되었다(종양 시험을 위해 그룹 당 7마리의 쥐 및 면역 반응의 검출을 위해 그룹 당 5마리의 쥐). 백신 접종은 2주에 2회 반복되었다. 비교를 위해 쥐는 항원으로 단독 주사되었다.
b) 광견병 백신으로 면역화:
면역화를 위해 백신 Rabipur® 또는 HDC (모두 비활성화된 광견병 바이러스를 포함) (0.1, 0.01 및 0.001 배 인간 투여량)이 어쥬번트로 폴리머 화물 복합체 R722/CR12C와(3.7:1 w/w의 비율로) (30 μg R722 / 8.1 μg CR12C) 조합되고 암컷 Balb/c 쥐에 피부내로 주사되었다(지시된 것처럼 그룹 당 5 또는 8마리의 쥐). 비교를 위해 쥐는 Rabipur® 또는 HDC 단독으로 주사되었다.
c) 인플루엔자 A(H1N1)pdm09 (돼지 독감) 백신으로 면역화:
면역화를 위해 백신 Pandemrix® 또는 Celvapan® (모두 비활성화된 A(H1N1)pdm09 인플루엔자 바이러스 포함) (0.1 μg/dose)이 어쥬번트로 폴리머 화물 복합체 R722/CR12C와(2:1 w/w의 비율로) (15 μg R722 / Celvapan®에 7.5 μg CR12C 및 Pandemrix®에 30 μg R722 / 15 μg CR12C) 조합되고 암컷 Balb/c 쥐에 근육내로 주사되었다(그룹 당 5마리 쥐). 비교를 위해 쥐는 Pandemrix® 또는 Celvapan® 단독으로 주사되었다.
d) 계절 인플루엔자 백신으로 면역화:
면역화를 위해 계절 인플루엔자 백신 Begrivac® (WHO에 의해 추천된 비활성화된 인플루엔자 바이러스 균주 포함; 시즌 2009/2010) (0.1 μg/dose)이 어쥬번트로 폴리머 화물 복합체 R722/CR12C와(2:1 w/w의 비율로) (30 μg R722 / 15 μg CR12C) 조합되고 암컷 Balb/c 쥐에 근육내로 주사되었다(그룹 당 8마리 쥐). 비교를 위해 쥐는 Begrivac® 단독으로 주사되었다.
e) B형 간염 백신으로 면역화:
면역화를 위해 B형 간염 백신 Engerix®-B (재조합 B형 간염 바이러스 표면 항원 포함) (0.5 μg/dose)이 어쥬번트로 폴리머 화물 복합체 R722/CR12C와(3.7:1 w/w의 비율로) (6.25 μg R722 / 1.7 μg CR12C) 조합되고 암컷 Balb/c 쥐에 근육내로 주사되었다(그룹 당 8마리 쥐). 비교를 위해 쥐는 Engerix®-B 단독으로 주사되었다.
f) 인유두종바이러스 16 (HPV16) E7 유도된 펩타이드로 면역화:
면역화를 위해 HPV16-유도된 펩타이드 E7 aa43-77 (100 μg/dose) 이 어쥬번트로 폴리머 화물 복합체 R722/CR12C와(2:1 w/w의 비율로) (50 μg R722 / 25 μg CR12C) 조합되고 암컷 C57BL/6 쥐에 피부내로 주사되었다(그룹 당 5마리 쥐). 비교를 위해 쥐는 펩타이드 단독으로 주사되었다.
추가적 실험에서(도 22) HPV 유도된 펩타이드 E7 aa43-77 (100 μg/dose)은 상기 정의와 같이 복합화된 폴리머 담체 화물을 제조하는 방법의 중합화 단계 c) 동안 폴리머 화물 복합체 R722/CR12C와 (2:1 w/w의 비율로) (50 μg R722 / 25 μg CR12C) 조합되었다. 따라서 HPV 유도된 펩타이드는 폴리머 담체 화물 복합체의 일부이며 E7 aa43-77/R722/CR12C처럼 지시된다. 비교를 위해 이러한 추가적 실험에서, 쥐는 펩타이드 단독 (E7 aa43-77) 및 항원으로 E7 aa43-77 펩타이드 및 어쥬번트로 폴리머 담체 화물 복합체를 포함하는 독창적 약학적 조성물로 주사되고, 상기 폴리머 담체 화물 복합체는 항원 (E7 aa43-77 + R722/CR12C)을 포함하지 않는다.
g) NY-ESO-1 단백질로 면역화:
면역화를 위해 종양 항원 NY-ESO-1 단백질(5 μg/dose)이 어쥬번트로 폴리머 화물 복합체 R722/CR12C와(2:1 w/w의 비율로) (30 μg R722 / 15 μg CR12C) 조합되고 암컷 C57BL/6 쥐에 피부내로 15일 내에 2회 주사되었다(그룹 당 5마리 쥐). 비교를 위해 쥐는 단백질 단독으로 주사되었다.
8. 항원 특이적 면역 반응 (B-세포 면역 반응)의 검출:
a) 오발부민에 대한 항체의 검출:
항원 특이적 면역 반응 (B 세포 면역 반응)의 검출은 항원 특이적 항체의 검출에 의해 수행되었다. 따라서, 혈액 샘플은 최종 백신 접종 5일 후 백신 접종된 쥐로부터 수집되고 혈청이 준비되었다. MaxiSorb 플레이트(Nalgene Nunc International)는 갈루스 갈루스(Gallus gallus) 오발부민 단백질로 코팅되었다. 0.05% Tween-20 및 1% BSA를 포함하는 1xPBS로 봉쇄 이후에 플레이트는 희석된 쥐 혈청과 함께 배양되었다. 그 다음 비오틴 짝지어진 이차 항체 (항-마우스-IgG2a Pharmingen)가 첨가되었다. 세척 후, 플레이트는 서양고추냉이 과산화효소-스트렙타비딘으로 배양되고 그 다음 ABTS 기질 (2,2'-아지노-비스(3-에틸-벤즈티아졸린-6-설폰산)(2,2'-azino-bis(3-ethyl-benzthiazoline-6-sulfonic acid))의 전환(conversion)이 측정되었다. 독창적 약학적 조성물과 함께 백신 접종에 이러한 항체의 유도 결과를 도 11에 나타내었다.
b) 광견병 바이러스에 대한 항체의 검출:
항원 특이적 면역 반응 (B 세포 면역 반응)의 검출은 광견병 바이러스 특이적 총 IgG 항체의 검출에 의해 수행되었다. 따라서, 혈액 샘플은 백신 접종 7 및 21일 후 백신 접종된 쥐로부터 수집되었고 혈청이 준비되었다. MaxiSorb 플레이트 (Nalgene Nunc International)는 비활성화 바이러스를 포함하는 시판중인 광견병 백신(HDC; 1:10000)으로 코팅되었다. 0.05% Tween-20 및 1% BSA를 포함하는 1xPBS로 봉쇄 이후에 플레이트는 희석된 쥐 혈청과 함께 배양되었다. 그 다음 서양고추냉이 과산화효소 짝지어진 이차 항체 (항-마우스-IgG2a Pharmingen)가 첨가되었다. 세척 후, 플레이트는 ABTS를 사용하여 발달되었고 그 다음 ABTS 기질 (2,2'-아지노-비스(3-에틸-벤즈티아졸린-6-설폰산))의 전환이 측정되었다. 독창적 약학적 조성물과 함께 백신 접종에 이러한 항체의 유도 결과를 도 13에 나타내었다.
c) 광견병 바이러스에 대한 항체의 친화도의 결정:
광견병 바이러스에 대한 총 IgG 항체의 검출은 쥐 혈청이 오직 1:40의 희석에서 실험된 차이를 가지고 b) 하에 개시된 것처럼 수행되었다. 나아가 쥐 혈청으로 배양 후에 플레이트는 요소(urea) (6, 7 및 8 M 요소)의 증가하는 농도로 세척되었다. 요소(urea)로 세척을 통해 오직 항원에 높은 친화도를 갖는 항체가 검출될 수 있다. 독창적 약학적 조성물로 백신 접종에 이러한 항체의 유도 결과는 도 15에 나타내었다.
d) A(H1N1)pdm09 인플루엔자 바이러스(돼지 독감)에 대한 항체의 검출:
항원 특이적 면역 반응(B 세포 면역 반응)의 검출은 A(H1N1)pdm09 인플루엔자 바이러스 특이적 IgG2a 항체의 검출을 통해 수행되었다. 따라서, 혈액 샘플은 백신 접종 14일 이후 백신 접종된 쥐로부터 수집되고 혈청이 준비되었다. MaxiSorb 플레이트 (Nalgene Nunc International)는 인플루엔자 A/캘리포니아(California)/7/09 A(H1N1)pdm09 비활성화 바이러스(NIBSC, UK) (1 μg/ml에서)로 코팅되었다. 0.05% Tween-20 및 1% BSA를 포함하는 1xPBS로 봉쇄 이후에 플레이트는 희석된 쥐 혈청과 함께 배양되었다. 그 다음 비오틴 짝지어진 이차 항체 (항-마우스-IgG2a Pharmingen)가 첨가되었다. 세척 후, 플레이트는 서양고추냉이 과산화효소-스트랩타비딘으로 배양되었고 그 다음 ABTS 기질 (2,2'-아지노-비스(3-에틸-벤즈티아졸린-6-설폰산))의 전환이 IgG2a 항체의 유도를 결정하기 위해 측정되었다. 독창적 약학적 조성물로 백신 접종에 이러한 항체의 유도 결과는 도 17에 나타내었다.
e) 계절 인플루엔자 바이러스 균주에 대한 항체의 검출:
항원 특이적 면역 반응 (B 세포 면역 반응)의 검출은 인플루엔자 바이러스 특이적 IgG2a 항체의 검출을 통해 수행되었다. 따라서, 혈액 샘플이 백신 접종 28일 후 백신 접종된 쥐로부터 수집되었고 혈청이 준비되었다. MaxiSorb 플레이트 (Nalgene Nunc International)는 백신 접종을 위해 사용된 인플루엔자 백신과 동일한 바이러스성 인플루엔자 항원을 포함하는 Influvac 2009/10® (5 μg/ml에서)로 코팅되었다. 0.05% Tween-20 및 1% BSA를 포함하는 1xPBS로 봉쇄 이후에 플레이트는 희석된 쥐 혈청과 함께 배양되었다. 그 다음 비오틴 짝지어진 이차 항체 (항-마우스-IgG2a Pharmingen)가 첨가되었다. 세척 후, 플레이트는 서양고추냉이 과산화효소-스트랩타비딘으로 배양되었고 그 다음 ABTS 기질 (2,2'-아지노-비스(3-에틸-벤즈티아졸린-6-설폰산))의 전환이 IgG2a 항체의 유도를 결정하기 위해 측정되었다. 독창적 약학적 조성물로 백신 접종에 이러한 항체의 유도 결과는 도 19에 나타내었다.
f) B형 간염 바이러스 표면 항원 (HBsAg)에 대한 항체의 검출:
항원 특이적 면역 반응 (B 세포 면역 반응)의 검출은 HBsAG 특이적 IgG2a 항체 검출에 의해 수행되었다. 따라서, 혈액 샘플이 백신 접종 28일 후 백신 접종된 쥐로부터 수집되었고 혈청이 준비되었다. MaxiSorb 플레이트 (Nalgene Nunc International)는 재조합 B형 간염 바이러스 표면 항원 (HBsAG) (Aldevron, USA) (1 μg/ml)으로 코팅되었다. 0.05% Tween-20 및 1% BSA를 포함하는 1xPBS로 봉쇄 이후에 플레이트는 희석된 쥐 혈청과 함께 배양되었다. 그 다음 비오틴 짝지어진 이차 항체 (항-마우스-IgG2a Pharmingen)가 첨가되었다. 세척 후, 플레이트는 서양고추냉이 과산화효소-스트랩타비딘으로 배양되었고 그 다음 ABTS 기질 (2,2'-아지노-비스(3-에틸-벤즈티아졸린-6-설폰산))의 전환이 IgG2a 항체의 유도를 결정하기 위해 측정되었다. 독창적 약학적 조성물로 백신 접종에 이러한 항체의 유도 결과는 도 20에 나타내었다.
9. ELISPOT에 의한 항원 특이적 세포 면역 반응의 검출:
a) 오발부민에 대한 세포독성 T 세포 반응의 검출:
최종 백신 접종 5일 후 쥐는 희생되었고, 비장은 제거되며 비장 세포가 동정되었다. INF감마의 검출을 위해 코트 멀티스크린 플레이트(coat multiscreen plate) (Millipore)가 INFγ (BD Pharmingen, Heidelberg, Germany)에 대한 항체를 포함하는 코팅 버퍼 (0.1 M Carbonat-Bicarbonat 버퍼 pH 9.6, 10.59 g/l Na2CO3, 8.4g/l NaHCO3)로 밤새 배양되었다. 다음 날 1x 106 세포/웰이 첨가되었고 관련 펩타이드 (오발부민의 SIINFEKL); 무관한 펩타이드 (코넥신(Connexin = 대조군 펩타이드) 또는 펩타이드 없는 버퍼의 1 μg/웰로 재-자극되었다. 그 다음 세포는 37°C에서 24시간 동안 배양되었다. 다음날 플레이트는 PBS로 3회, 물로 한번 및 PBS/0.05% Tween-20으로 한번 세척되었고 그 다음 4°C에서 11-24시간 동안 비오틴 짝지어진 이차 항체로 배양되었다. 이후 플레이트는 PBS/0.05% Tween-20으로 세척되었고, 봉쇄(blocking) 버퍼 내 스트렙타비딘에 짝지어진 염기성 포스파타제로 실온에서 2시간 동안 배양되었다. PBS/0.05%로 세척한 후 Tween-20 기질 (Sigma Aldrich, Taufkirchen, Germany 로부터 5-브로모-4-클로로-3-인돌릴 포스페이트/니트로 블루 테트라졸리움 액체 기질 시스템(5-Bromo-4-Cloro-3-Indolyl Phosphate/Nitro Blue Tetrazolium Liquid Substrate System))이 플레이트에 첨가되고 기질의 전환이 시각적으로 검출될 수 있었다. 반응은 이후 물로 플레이트를 세척함으로써 중지되었다. 건조된 플레이트는 이후 ELISPOT 플레이트 리더를 통해 해독되었다. 점(spot) 수준의 시각화를 위해 수(numbers)는 배경 제거(background subtraction)를 통해 수정되었다. 독창적 약학적 조성물로 백신 접종에 이러한 특이적 세포독성 T 세포의 유도의 결과를 도 12에 나타내었다.
b) 광견병 바이러스에 대한 세포독성 T 세포 반응의 검출:
백신 접종 5일 후 쥐는 희생되었고, 비장은 제거되며 비장 세포가 동정되었다. INF감마의 검출을 위해 코트 멀티스크린 플레이트(coat multiscreen plate) (Millipore)가 INFγ (BD Pharmingen, Heidelberg, Germany)에 대한 항체를 포함하는 코팅 버퍼 (0.1 M Carbonat-Bicarbonat 버퍼 pH 9.6, 10.59 g/l Na2CO3, 8.4g/l NaHCO3)로 밤새 배양되었다. 다음 날 5x 105 세포/웰이 첨가되었고 비활성화된 광견병 바이러스 (Rabipur® 1:100 or HDC 1:100)) 또는 펩타이드 없는 버퍼(BSA)로 재-자극되었다. 그 다음 세포는 37°C에서 24시간 동안 배양되었다. 다음날 플레이트는 PBS로 3회, 물로 5분 동안 및 PBS/0.05% Tween-20으로 한번 세척되었고 그 다음 4°C에서 11-24시간 동안 비오틴 짝지어진 이차 항체로 배양되었다. 이후 플레이트는 PBS/0.05% Tween-20으로 세척되었고, 봉쇄(blocking) 버퍼 내 스트렙타비딘에 짝지어진 염기성 포스파타제로 실온에서 2시간 동안 배양되었다. PBS/0.05%로 세척한 후 Tween-20 기질 (Sigma Aldrich, Taufkirchen, Germany 로부터 5-브로모-4-클로로-3-인돌릴 포스페이트/니트로 블루 테트라졸리움 액체 기질 시스템(5-Bromo-4-Cloro-3-Indolyl Phosphate/Nitro Blue Tetrazolium Liquid Substrate System))이 플레이트에 첨가되고 기질의 전환이 시각적으로 검출될 수 있었다. 반응은 이후 물로 플레이트를 세척함으로써 중지되었다. 건조된 플레이트는 이후 ELISPOT 플레이트 리더를 통해 해독되었다. 점(spot) 수준의 시각화를 위해 수(numbers)는 배경 제거(background subtraction)를 통해 수정되었다. 독창적 약학적 조성물로 백신 접종에 이러한 특이적 세포독성 T 세포의 유도의 결과를 도 14에 나타내었다.
c) 돼지 독감 (A(H1N1)pdm09)에 대한 세포독성 T 세포 반응의 검출:
백신 접종 6일 후 쥐는 희생되었고, 비장은 제거되며 비장 세포가 동정되었다. INF감마의 검출을 위해 코트 멀티스크린 플레이트(coat multiscreen plate) (Millipore)가 INFγ (BD Pharmingen, Heidelberg, Germany)에 대한 항체를 포함하는 코팅 버퍼 (0.1 M Carbonat-Bicarbonat 버퍼 pH 9.6, 10.59 g/l Na2CO3, 8.4g/l NaHCO3)로 밤새 배양되었다. 다음 날 5x 105 세포/웰이 첨가되었고 비활성화된 인플루엔자 A/캘리포니아/7/09 A(H1N1)pdm09 비활성화된 바이러스 (NIBSC, UK) (10 μg/ml?) 또는 펩타이드 없는 버퍼(BSA)로 재-자극되었다. 그 다음 세포는 37°C에서 24시간 동안 배양되었다. 다음날 플레이트는 PBS로 3회, 물로 5분 동안 및 PBS/0.05% Tween-20으로 한번 세척되었고 그 다음 4°C에서 11-24시간 동안 비오틴 짝지어진 이차 항체로 배양되었다. 이후 플레이트는 PBS/0.05% Tween-20으로 세척되었고, 봉쇄(blocking) 버퍼 내 스트렙타비딘에 짝지어진 염기성 포스파타제로 실온에서 2시간 동안 배양되었다. PBS/0.05%로 세척한 후 Tween-20 기질 (Sigma Aldrich, Taufkirchen, Germany 로부터 5-브로모-4-클로로-3-인돌릴 포스페이트/니트로 블루 테트라졸리움 액체 기질 시스템(5-Bromo-4-Cloro-3-Indolyl Phosphate/Nitro Blue Tetrazolium Liquid Substrate System))이 플레이트에 첨가되고 기질의 전환이 시각적으로 검출될 수 있었다. 반응은 이후 물로 플레이트를 세척함으로써 중지되었다. 건조된 플레이트는 이후 ELISPOT 플레이트 리더를 통해 해독되었다. 점(spot) 수준의 시각화를 위해 수(numbers)는 배경 제거(background subtraction)를 통해 수정되었다. 독창적 약학적 조성물로 백신 접종에 이러한 특이적 세포독성 T 세포의 유도의 결과를 도 18에 나타내었다.
d) 인유두종바이러스 16 (HPV16)의 E7 단백질에 대한 세포독성 T 세포 반응의 검출:
백신 접종 8일 후 쥐는 희생되었고, 비장은 제거되며 비장 세포가 동정되었다. INF감마의 검출을 위해 코트 멀티스크린 플레이트(coat multiscreen plate) (Millipore)가 INFγ (BD Pharmingen, Heidelberg, Germany)에 대한 항체를 포함하는 코팅 버퍼 (0.1 M Carbonat-Bicarbonat 버퍼 pH 9.6, 10.59 g/l Na2CO3, 8.4g/l NaHCO3)로 밤새 배양되었다. 다음 날 5x105 세포/웰이 첨가되었고 E7 유도된 펩타이드(E7 aa43-77, E748-57, E7 aa49-57) (1 μg/ml), 무관(irrelevant) 펩타이드(LacZ 펩타이드 H-2 Ld) 또는 펩타이드 없는 버퍼(DMSO)로 재-자극되었다. 그 다음 세포는 37°C에서 24시간 동안 배양되었다. 다음날 플레이트는 PBS로 3회, 물로 5분 동안 및 PBS/0.05% Tween-20으로 한번 세척되었고 그 다음 4°C에서 11-24시간 동안 비오틴 짝지어진 이차 항체로 배양되었다. 이후 플레이트는 PBS/0.05% Tween-20으로 세척되었고, 봉쇄(blocking) 버퍼 내 스트렙타비딘에 짝지어진 염기성 포스파타제로 실온에서 2시간 동안 배양되었다. PBS/0.05%로 세척한 후 Tween-20 기질 (Sigma Aldrich, Taufkirchen, Germany 로부터 5-브로모-4-클로로-3-인돌릴 포스페이트/니트로 블루 테트라졸리움 액체 기질 시스템(5-Bromo-4-Cloro-3-Indolyl Phosphate/Nitro Blue Tetrazolium Liquid Substrate System))이 플레이트에 첨가되고 기질의 전환이 시각적으로 검출될 수 있었다. 반응은 이후 물로 플레이트를 세척함으로써 중지되었다. 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 펩타이드 항원을 포함하는 독창적 약학적 조성물로 백신 접종에 이러한 특이적 세포독성 T 세포의 유도의 결과는 E7aa43-77 펩타이드 항체는 폴리머 화물 복합체에 포함되지 않는 것은 도 18에, 추가적으로 E7aa43-77 펩타이드 항원이 폴리머 화물 복합체에 포함될 때는 도 22에 나타내었다.
e) 종양 항원 NY-ESO-1에 대한 세포독성 T 세포 반응의 검출:
백신 접종 7일 후 쥐는 희생되었고, 비장은 제거되며 비장 세포가 동정되었다. INF감마의 검출을 위해 코트 멀티스크린 플레이트(coat multiscreen plate) (Millipore)가 INFγ (BD Pharmingen, Heidelberg, Germany)에 대한 항체를 포함하는 코팅 버퍼 (0.1 M Carbonat-Bicarbonat 버퍼 pH 9.6, 10.59 g/l Na2CO3, 8.4g/l NaHCO3)로 밤새 배양되었다. 다음 날 1 x 106 세포/웰이 첨가되었고 예견되는 MHC I 및 MHC II 에피토프를 포함하는 NY-ESO-1의 에피토프 라이브러리로 재-자극되었다. 그 다음 세포는 37°C에서 24시간 동안 배양되었다. 다음날 플레이트는 PBS로 3회, 물로 한번 및 PBS/0.05% Tween-20으로 한번 세척되었고 그 다음 4°C에서 11-24시간 동안 비오틴 짝지어진 이차 항체로 배양되었다. 이후 플레이트는 PBS/0.05% Tween-20으로 세척되었고, 봉쇄(blocking) 버퍼 내 스트렙타비딘에 짝지어진 염기성 포스파타제로 실온에서 2시간 동안 배양되었다. PBS/0.05%로 세척한 후 Tween-20 기질 (Sigma Aldrich, Taufkirchen, Germany 로부터 5-브로모-4-클로로-3-인돌릴 포스페이트/니트로 블루 테트라졸리움 액체 기질 시스템(5-Bromo-4-Cloro-3-Indolyl Phosphate/Nitro Blue Tetrazolium Liquid Substrate System))이 플레이트에 첨가되고 기질의 전환이 시각적으로 검출될 수 있었다. 반응은 이후 물로 플레이트를 세척함으로써 중지되었다. 건조된 플레이트는 이후 ELISPOT 플레이트 리더를 통해 해독되었다. 점(spot) 수준의 시각화를 위해 수(numbers)는 배경 제거(background subtraction)를 통해 수정되었다. 적어도 하나의 종양 항원을 포함하는 독창적 약학적 조성물로 백신 접종에 이러한 특이적 세포독성 T 세포의 유도의 결과를 도 23에 나타내었다.
10. 종양 시험(challenge):
최종 백신 접종 1주 이후에 1x106 E.G7-OVA 세포 (안정하게 오발부민을 발현하는 종양 세포)가 백신 접종된 쥐에 피하 이식되었다. 종양 성장은 캘리퍼(calliper)를 사용하여 3차원으로 종양 크기를 측정함으로써 관찰되었다. 독창적 약학적 조성물로 백신 접종에 항-종양 반응의 유도의 결과를 도 10에 나타내었다.
11. 바이러스 중화 실험:
바이러스 중화 항체 반응 (특이적 B 세포 면역 반응)의 검출은 바이러스 중화 분석의 수단을 통해 수행되었다. 따라서 혈액 샘플은 백신 접종 21일 후 백신 접종된 쥐로부터 수집되었고 혈청이 준비되었다. 이들 혈청은 OIE (세계동물보건기구)에 의해 추천되고 Cliquet F., Aubert M. & Sagne L. (1998); J. Immunol. Methods, 212, 79-87에서 처음 설명된 광견병 바이러스의 시험 바이러스 균주 (CVS)로 조정된(adapted) 세포 배양을 사용한 형광 항체 바이러스 중화(FAVN) 실험에 사용되었다. 곧, 열 비활성화된 혈청은 50 μl의 부피 내 CVS의 100 TCID50 (조직 배양 감염 투여량 50 %)을 중화시키는데 이들 가능성을 위해 4배체(quadruplicates)로써 연속 두번 희석해 4배체로 실험될 것이다. 따라서 혈청 희색액은 37°C에서 1시간 동안(5% CO2로 습한 배양기 내) 바이러스와 함께 배양되었고 그다음 트립신화된 BHK-21 세포가 첨가되었다(웰당 4x105 cells/ml; 50 μl). 감염된 세포 배양은 37°C 및 5 % CO2에서 습한 배양기 내 48 시간 동안 배양되었다. 세포의 감염은 FITC 항-광견병 바이러스 배합체(conjugate)를 사용하여 실온에서 80% 아세톤을 사용하여 세포의 고정 후에 분석되었다. 플레이트는 PBS를 사용하여 두번 세척되었고 과량의 PBS는 제거되었다. 세포 배양은 광견병 바이러스의 존재에 대해 양성(positive) 또는 음성(negative)으로 점수화되었다. 혈청 처리된 웰에서 음성 점수화된 세포는 광견병 바이러스의 중화를 나타낸다. 각 FAVN 실험은 분석의 표준화를 위한 기준으로써 제공되는 WHO 또는 OIE 표준 혈청 (양성 기준 혈청)을 포함한다. 실험 혈청의 중화 활성은 표준 혈청에 기준과 함께 계산되고 국제 단위/ml (IU/ml)로 표시되었다. 본 실험의 결과는 도 16에 나타내었다.
12. 쥐의 광견병 바이러스 시험 감염:
Rabipur®의 0.001 배 인간 투여량 및 3 μg R722 및 0.81 μg CR12C (3.7:1 w/w)을 사용하여 쥐의 단일 근육내 면역화 37일 이후에, 실험 내 모든 쥐는 두개내(intracranially)(i.c.) 광견병 바이러스의 CVS 균주의 25 배 LD50를 사용하여 감염되었다. 쥐는 광견병의 특이적 증상 및 체중 발달에 대해 관찰되었다. 본 실험의 결과를 도 24에 나타내었다.
13. TC-1 세포로 종양 시험 (치료 환경(therapeutic setting) 내 종양 성장 및 동물 생존의 측정):
그룹 당 8마리 C57BL/6 쥐는 HPV E6 및 E7 단백질을 발현하는 1x105 TC-1 세포로 1일에 시험되었다. 백신 접종은 종양 시험(중앙 종양 부피 31-48 mm3) 후 7일에 시작되었다. 쥐는 50 μg CR12C/R722와 조합된 5 μg 또는 50 μg E7 펩타이드(1:2; w/w)로 5회(8, 12, 15, 19 및 22일에) 피부내 백신 접종되었다. 비교를 위해, 쥐는 폴리머 화물 복합체 단독으로 주사되었다.
HPV-16 유도된 E7 펩타이드 E7aa43-77과 조합된 폴리머 담체 화물 복합체는 폴리머 담체 화물 복합체 단독에 비해 종양의 생장을 심지어 손상시켰다(도 25).
HPV-16 유도된 E7 펩타이드와 조합된 폴리머 담체 화물 복합체는 E7 펩타이드 또는 50 폴리머 담체 화물 복합체 단독에 비해 종양을 갖고있는 쥐의 생존을 강하게 향상시켰다(50 μg E7 펩타이드 + 50 μg 폴리머 담체 화물 복합체에는 44.5일의 평균 생존 시간; 5 μg E7 펩타이드 + 50 μg 폴리머 담체 화물 복합체에는 22일의 평균 생존 시간)(도 26).
14. TC-1 세포로 종양 시험 (T 세포 기억 반응의 유도):
그룹당 13마리의 C57BL/6 쥐가 담체로써 이황화 가교결합된 양이온성 펩타이드 CR12C 및 핵산 화물로써 isRNA R722에 의해 형성된 폴리머 담체 화물 복합체 및 E7 펩타이드로 4주 동안 일주일에 한번(0, 7, 14 및 21일에) 피부내 백신 접종되었다.
네번째 백신 접종 8주 후, 5마리 쥐/그룹 이 희생되었고 비장 세포가 동정되었으며 항원 특이적 CD8+ T 세포의 빈도가 HPV-펜타머 염색 및 실시예 15에 따른 유동 세포 분석법(flow cytometry)에 의해 결정되었다.
HPV-16 유도된 E7 펩타이드 E7aa43-77와 조합된 폴리머 담체 화물 복합체는 E7 펩타이드 단독의 50 μg으로 백신 접종된 쥐에 비해, 항원 특이적 CD8+ T 세포의 통계적으로 현저한 증가를 초래하였다(5 μg E7 펩타이드에 p-0.0007 및 p= 0.0002 50 μg E7 펩타이드; 그룹 간 통계적 차이는 짝이없는(unpaired) t-테스트에 의해 측정됨). 따라서, HPV-16 유도된 E7 펩타이드와 조합된 폴리머 담체 화물 복합체의 조합은 잠재 기억 CD8+ T 세포 반응을 유도한다(도 27).
네번째 백신 접종 8주 후 8마리 쥐/그룹은 1x105 TC-1 종양 세포로 시험되었고 종양 성장이 관찰되었다.
HPV-16 유도된 E7 펩타이드 E7aa43-77과 조합된 폴리머 담체 화물 복합체는 종양 성장의 급격한 지연을 초래하였다(5 μg E7 펩타이드 + 50 μg 폴리머 담체 화물 복합체의 50 μg에 대한 4 완벽한 반응; 50 μg E7 펩타이드 + 50 μg 폴리머 담체 화물 복합체의 50 μg에 대한 7 완벽한 반응자). 따라서, HPV-16 유도된 E7 펩타이드와 조합된 폴리머 담체 화물 복합체의 조합은 잠재 기억 CD8+ T 세포 반응을 유도한다(도 28).
15. 펜타머 염색에 의한 항원 특이적 세포 면역 반응의 검출:
새로 동정된 비장 세포는 96 웰 플레이트에 시드(2x106 세포/웰)되고 Fc-Block (1:100, 항 CD16/CD32; BD Biosciences)로 염색되었다. 20분 배양 후, H-2Db - RAHYNIVTF - 펜타머 (HPV 16 E7 49-57)-펜타머-PE(10μl/웰)이 첨가되고 세포는 4 oC에서 추가 30분 동안 배양되었다. 세척 후 세포는 하기 항체로 염색되었다: CD19-FITC (1:200), CD8-PerCP-Cy5.5 (1:200), KLRG1-PECy7 (1:200), CD44-APC (1:100), CD127-eFluor450 (1:100) (eBioscience) 및 CD3-APC-Cy7 (1:200) (BD Biosciences). 아쿠아 다이(Aqua Dye)는 생존/죽은 세포를 구별하기 위해 사용되었다(Invitrogen). 세포는 칸토 II 유동 세포 분석기(Canto II flow cytometer)를 사용하여 수집되었다(Beckton Dickinson). 유동 세포 분석 데이터는 FlowJo 소프트웨어를 사용하여 분석되었다 (Tree Star, Inc.). 통계적 분석은 GraphPad Prism 소프트웨어, 버전 5.01을 사용하여 수행되었다. 그룹 간 통계적 차이는 웰치 정정(Welch's correction)으로 짝이 없는 t 테스트에 의해 측정되었다.
16. 계절 인플루엔자의 면역화 및 항체의 검출:
면역화를 위해, 계절 인플루엔자 백신 Mutagrip®(WHO에 의해 추천되는 비활성화된 인플루엔자 바이러스 균주를 포함; season 2011/2012) (4.5, 0.45 및 0.045 μg)은 어쥬번트로 폴리머 담체 화물 복합체 R722/CR12C(3.7:1 w/w의 비율로)와 조합되었으며 암컷 Balb/c 쥐(그룹당 8마리 쥐)에 근육내 주사되었다. 비교를 위해 쥐는 Mutagrip® 단독으로 주사되었다.
항원 특이적 면역 반응 (B 세포 면역 반응)의 검출은 인플루엔자 바이러스 헤마글루티닌 억제 (HI) 역가 검출을 통해 수행되었다. 따라서, 혈액 샘플은 백신 접종 21일 후 백신 접종된 쥐로부터 수집되었고 혈청은 열 비활성화, 카올린으로 배양, 및 닭 적혈구에 전-흡수(pre-adsorbed)되었다. HI 분석을 위해, 전처리된 혈청의 2배 희석물의 50 ?는 비활성화된 인플루엔자 A/캘리포니아/7/2009 H1N1 또는 인플루엔자 A/빅토리아/210/2009 H3N2 (모두 NIBSC)로 배양되었으며, 50 ? 0.5% 닭 적혈구가 첨가되었다. 독창적 약학적 조성물로 백신 접종에 이러한 HI 역가의 유도 결과는 도 29에 나타내었다.
항원 특이적 면역 반응 (B 세포 면역 반응)의 검출은 인플루엔자 바이러스 특이적 IgG2a 항체 검출을 통해 수행되었다. 따라서, 혈액 샘플은 백신 접종 21일 후 백신접종된 쥐로부터 수집되었고 혈청이 준비되었다. MaxiSorb 플레이트 (Nalgene Nunc International)는 1 μg/ml에서 비활성화된 인플루엔지 A/캘리포니아/7/2009 H1N1 (NIBSC, Potters Bar, UK)로 코팅되었다. 0.05% Tween 20 및 1% BSA를 포함하는 1xPBS로 봉쇄 이후, 플레이트는 희석된 쥐 혈청과 함께 배양되었다. 그 다음, 비오틴 짝지어진 이차 항체 (항-마우스-IgG2a Pharmingen)가 첨가되었다. 세척 이후, 플레이트는 서양고추냉이 과산화효소-스트랩타비딘으로 배양되었으며 ABTS 기질(2,2'-아지노-비스(3-에틸-벤즈티아졸린-6-설폰산)) (2,2'-azino-bis(3-ethyl-benzthiazoline-6-sulfonic acid)의 전환은 IgG2a 항체의 유도를 결정하기 위해 측정되었다. 독창적 약학적 조성물로 백신 접종에 이러한 항체의 유도 결과를 도 30에 나타내었다.
SEQUENCE LISTING <110> Curevac GmbH <120> Pharmaceutical composition comprising a polymeric carrier cargo complex and at least one protein or peptide antigen <130> IMP142292 <150> PCT/EP2012/000420 <151> 2012-01-31 <160> 123 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 9 <212> PRT <213> artificial <220> <223> cationic or polycationic peptide selected from subformula (Ib): Cys {(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x} Cys <400> 1 Cys Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Cys 1 5 <210> 2 <211> 10 <212> PRT <213> artificial <220> <223> cationic or polycationic peptide selected from subformula (Ib): Cys {(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x} Cys <400> 2 Cys Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Cys 1 5 10 <210> 3 <211> 11 <212> PRT <213> artificial <220> <223> cationic or polycationic peptide selected from subformula (Ib): Cys {(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x} Cys <400> 3 Cys Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Cys 1 5 10 <210> 4 <211> 12 <212> PRT <213> artificial <220> <223> cationic or polycationic peptide 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23 ggggggguuu uuuugggggg 20 <210> 24 <211> 20 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 24 gggggguuuu uuuugggggg 20 <210> 25 <211> 20 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 25 gggggguuuu uuuuuggggg 20 <210> 26 <211> 20 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 26 gggggguuuu uuuuuugggg 20 <210> 27 <211> 20 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 27 ggggguuuuu uuuuuugggg 20 <210> 28 <211> 20 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 28 ggggguuuuu uuuuuuuggg 20 <210> 29 <211> 20 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 29 gggguuuuuu uuuuuuuggg 20 <210> 30 <211> 20 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 30 gggguuuuuu uuuuuuuugg 20 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<211> 22 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 38 ggggggguuu uuuuuugggg gg 22 <210> 39 <211> 22 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 39 ggggggguuu uuuuuuuggg gg 22 <210> 40 <211> 22 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 40 gggggguuuu uuuuuuuggg gg 22 <210> 41 <211> 22 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 41 gggggguuuu uuuuuuuugg gg 22 <210> 42 <211> 22 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 42 ggggguuuuu uuuuuuuugg gg 22 <210> 43 <211> 22 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 43 ggggguuuuu uuuuuuuuug gg 22 <210> 44 <211> 22 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 44 ggguuuuuuu uuuuuuuuug gg 22 <210> 45 <211> 22 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 45 gguuuuuuuu uuuuuuuuuu gg 22 <210> 46 <211> 24 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 46 gggggggggg guuugggggg gggg 24 <210> 47 <211> 24 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 47 gggggggggg uuuugggggg gggg 24 <210> 48 <211> 24 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 48 gggggggggu uuuuuggggg gggg 24 <210> 49 <211> 24 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 49 gggggggggu uuuuuugggg gggg 24 <210> 50 <211> 24 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 50 gggggggguu uuuuuugggg gggg 24 <210> 51 <211> 24 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 51 gggggggguu uuuuuuuggg gggg 24 <210> 52 <211> 24 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 52 gggggggguu uuuuuuuugg gggg 24 <210> 53 <211> 24 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 53 ggggggguuu uuuuuuuugg gggg 24 <210> 54 <211> 24 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 54 ggggggguuu uuuuuuuuug gggg 24 <210> 55 <211> 23 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 55 gggggguuuu uuuuuuuuug ggg 23 <210> 56 <211> 24 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 56 gggggguuuu uuuuuuuuuu gggg 24 <210> 57 <211> 24 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 57 gggguuuuuu uuuuuuuuuu gggg 24 <210> 58 <211> 24 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 58 ggguuuuuuu uuuuuuuuuu uggg 24 <210> 59 <211> 32 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 59 guuuuuuuuu uuuuuuuuuu uuuuuuuuuu ug 32 <210> 60 <211> 34 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 60 gguuuuuuuu uuuuuuuuuu uuuuuuuuuu uugg 34 <210> 61 <211> 36 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 61 ggguuuuuuu uuuuuuuuuu uuuuuuuuuu uuuggg 36 <210> 62 <211> 37 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 62 gggguuuuuu uuuuuuuuuu uuuuuuuuuu uuuuggg 37 <210> 63 <211> 39 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 63 ggggguuuuu uuuuuuuuuu uuuuuuuuuu uuuuugggg 39 <210> 64 <211> 41 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 64 gggggguuuu uuuuuuuuuu uuuuuuuuuu uuuuuugggg g 41 <210> 65 <211> 43 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 65 ggggggguuu uuuuuuuuuu uuuuuuuuuu uuuuuuuggg ggg 43 <210> 66 <211> 45 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 66 gggggggguu uuuuuuuuuu uuuuuuuuuu uuuuuuuugg ggggg 45 <210> 67 <211> 47 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 67 gggggggggu uuuuuuuuuu uuuuuuuuuu uuuuuuuuug ggggggg 47 <210> 68 <211> 7 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 68 gguuugg 7 <210> 69 <211> 8 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 69 gguuuugg 8 <210> 70 <211> 9 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 70 gguuuuugg 9 <210> 71 <211> 10 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 71 gguuuuuugg 10 <210> 72 <211> 11 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 72 gguuuuuuug g 11 <210> 73 <211> 12 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 73 gguuuuuuuu gg 12 <210> 74 <211> 13 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 74 gguuuuuuuu ugg 13 <210> 75 <211> 14 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 75 gguuuuuuuu uugg 14 <210> 76 <211> 15 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 76 gguuuuuuuu uuugg 15 <210> 77 <211> 16 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 77 gguuuuuuuu uuuugg 16 <210> 78 <211> 17 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 78 gguuuuuuuu uuuuugg 17 <210> 79 <211> 18 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 79 gguuuuuuuu uuuuuugg 18 <210> 80 <211> 19 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 80 gguuuuuuuu uuuuuuugg 19 <210> 81 <211> 9 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 81 ggguuuggg 9 <210> 82 <211> 10 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 82 ggguuuuggg 10 <210> 83 <211> 11 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 83 ggguuuuugg g 11 <210> 84 <211> 12 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 84 ggguuuuuug gg 12 <210> 85 <211> 13 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 85 ggguuuuuuu ggg 13 <210> 86 <211> 14 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 86 ggguuuuuuu uggg 14 <210> 87 <211> 15 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 87 ggguuuuuuu uuggg 15 <210> 88 <211> 16 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 88 ggguuuuuuu uuuggg 16 <210> 89 <211> 17 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 89 ggguuuuuuu uuuuggg 17 <210> 90 <211> 18 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 90 ggguuuuuuu uuuuuggg 18 <210> 91 <211> 19 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 91 ggguuuuuuu uuuuuuggg 19 <210> 92 <211> 57 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 92 ggguuuuuuu uuuuuuuugg guuuuuuuuu uuuuuugggu uuuuuuuuuu uuuuggg 57 <210> 93 <211> 42 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 93 ggguuuuuuu uuuuuuuugg gggguuuuuu uuuuuuuuug gg 42 <210> 94 <211> 51 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 94 ggguuugggu uuggguuugg guuuggguuu ggguuugggu uuggguuugg g 51 <210> 95 <211> 20 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (II) <400> 95 gguuuuuuuu uuuuuuuggg 20 <210> 96 <211> 57 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (III) <400> 96 cccuuuuuuu uuuuuuuucc cuuuuuuuuu uuuuuucccu uuuuuuuuuu uuuuccc 57 <210> 97 <211> 51 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (III) <400> 97 cccuuucccu uucccuuucc cuuucccuuu cccuuucccu uucccuuucc c 51 <210> 98 <211> 42 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (III) <400> 98 cccuuuuuuu uuuuuuuucc ccccuuuuuu uuuuuuuuuc cc 42 <210> 99 <211> 60 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (IV) <400> 99 uagcgaagcu cuuggaccua gguuuuuuuu uuuuuuuggg ugcguuccua gaaguacacg 60 <210> 100 <211> 120 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (IV) <400> 100 uagcgaagcu cuuggaccua gguuuuuuuu uuuuuuuggg ugcguuccua gaaguacacg 60 aucgcuucga gaaccuggau ccaaaaaaaa aaaaaaaccc acgcaaggau cuucaugugc 120 <210> 101 <211> 229 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (IV) <400> 101 gggagaaagc ucaagcuugg agcaaugccc gcacauugag gaaaccgagu ugcauaucuc 60 agaguauugg cccccgugua gguuauucuu gacagacagu ggagcuuauu cacucccagg 120 auccgagucg cauacuacgg uacuggugac agaccuaggu cgucaguuga ccaguccgcc 180 acuagacgug aguccgucaa agcaguuaga uguuacacuc uauuagauc 229 <210> 102 <211> 547 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (IV) <400> 102 gggagaaagc ucaagcuugg agcaaugccc gcacauugag gaaaccgagu ugcauaucuc 60 agaguauugg cccccgugua gguuauucuu gacagacagu ggagcuuauu cacucccagg 120 auccgagucg cauacuacgg uacuggugac agaccuaggu cgucaguuga ccaguccgcc 180 acuagacgug aguccgucaa agcaguuaga uguuacacuc uauuagaucu cggauuacag 240 cuggaaggag caggaguagu guucuugcuc uaaguaccga gugugcccaa uacccgauca 300 gcuuauuaac gaacggcucc uccucuuaga cugcagcgua agugcggaau cuggggauca 360 aauuacugac ugccuggauu acccucggac auauaaccuu guagcacgcu guugcuguau 420 aggugaccaa cgcccacucg aguagaccag cucucuuagu ccggacaaug auaggaggcg 480 cggucaaucu acuucuggcu aguuaagaau aggcugcacc gaccucuaua aguagcgugu 540 ccucuag 547 <210> 103 <211> 1083 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (IV) <400> 103 gggagaaagc ucaagcuugg agcaaugccc gcacauugag gaaaccgagu ugcauaucuc 60 agaguauugg cccccgugua gguuauucuu gacagacagu ggagcuuauu cacucccagg 120 auccgagucg cauacuacgg uacuggugac agaccuaggu cgucaguuga ccaguccgcc 180 acuagacgug aguccgucaa agcaguuaga uguuacacuc uauuagaucu cggauuacag 240 cuggaaggag caggaguagu guucuugcuc uaaguaccga gugugcccaa uacccgauca 300 gcuuauuaac gaacggcucc uccucuuaga cugcagcgua agugcggaau cuggggauca 360 aauuacugac ugccuggauu acccucggac auauaaccuu guagcacgcu guugcuguau 420 aggugaccaa cgcccacucg aguagaccag cucucuuagu ccggacaaug auaggaggcg 480 cggucaaucu acuucuggcu aguuaagaau aggcugcacc gaccucuaua aguagcgugu 540 ccucuagagc uacgcagguu cgcaauaaaa gcguugauua gugugcauag aacagaccuc 600 uuauucggug aaacgccaga augcuaaauu ccaauaacuc uucccaaaac gcguacggcc 660 gaagacgcgc gcuuaucuug uguacguucu cgcacaugga agaaucagcg ggcauggugg 720 uagggcaaua ggggagcugg guagcagcga aaaagggccc cugcgcacgu agcuucgcug 780 uucgucugaa acaacccggc auccguugua gcgaucccgu uaucaguguu auucuugugc 840 gcacuaagau ucauggugua gucgacaaua acagcgucuu ggcagauucu ggucacgugc 900 ccuaugcccg ggcuugugcc ucucaggugc acagcgauac uuaaagccuu caagguacuc 960 gacgugggua ccgauucgug acacuuccua agauuauucc acuguguuag ccccgcaccg 1020 ccgaccuaaa cugguccaau guauacgcau ucgcugagcg gaucgauaau aaaagcuuga 1080 auu 1083 <210> 104 <211> 229 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (IV) <400> 104 gggagaaagc ucaagcuuau ccaaguaggc uggucaccug uacaacguag ccgguauuuu 60 uuuuuuuuuu uuuuuuuuga ccgucucaag guccaaguua gucugccuau aaaggugcgg 120 auccacagcu gaugaaagac uugugcggua cgguuaaucu ccccuuuuuu uuuuuuuuuu 180 uuuuuaguaa augcgucuac ugaauccagc gaugaugcug gcccagauc 229 <210> 105 <211> 546 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (IV) <400> 105 gggagaaagc ucaagcuuau ccaaguaggc uggucaccug uacaacguag ccgguauuuu 60 uuuuuuuuuu uuuuuuuuga ccgucucaag guccaaguua gucugccuau aaaggugcgg 120 auccacagcu gaugaaagac uugugcggua cgguuaaucu ccccuuuuuu uuuuuuuuuu 180 uuuuuaguaa augcgucuac ugaauccagc gaugaugcug gcccagaucu ucgaccacaa 240 gugcauauag uagucaucga gggucgccuu uuuuuuuuuu uuuuuuuuuu uggcccaguu 300 cugagacuuc gcuagagacu acaguuacag cugcaguagu aaccacugcg gcuauugcag 360 gaaaucccgu ucagguuuuu uuuuuuuuuu uuuuuuccgc ucacuaugau uaagaaccag 420 guggaguguc acugcucucg aggucucacg agagcgcucg auacaguccu uggaagaauc 480 uuuuuuuuuu uuuuuuuuuu uugugcgacg aucacagaga acuucuauuc augcaggucu 540 gcucua 546 <210> 106 <211> 1083 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (IV) <400> 106 gggagaaagc ucaagcuuau ccaaguaggc uggucaccug uacaacguag ccgguauuuu 60 uuuuuuuuuu uuuuuuuuga ccgucucaag guccaaguua gucugccuau aaaggugcgg 120 auccacagcu gaugaaagac uugugcggua cgguuaaucu ccccuuuuuu uuuuuuuuuu 180 uuuuuaguaa augcgucuac ugaauccagc gaugaugcug gcccagaucu ucgaccacaa 240 gugcauauag uagucaucga gggucgccuu uuuuuuuuuu uuuuuuuuuu uggcccaguu 300 cugagacuuc gcuagagacu acaguuacag cugcaguagu aaccacugcg gcuauugcag 360 gaaaucccgu ucagguuuuu uuuuuuuuuu uuuuuuccgc ucacuaugau uaagaaccag 420 guggaguguc acugcucucg aggucucacg agagcgcucg auacaguccu uggaagaauc 480 uuuuuuuuuu uuuuuuuuuu uugugcgacg aucacagaga acuucuauuc augcaggucu 540 gcucuagaac gaacugaccu gacgccugaa cuuaugagcg ugcguauuuu uuuuuuuuuu 600 uuuuuuuuuc cucccaacaa augucgauca auagcugggc uguuggagac gcgucagcaa 660 augccguggc uccauaggac guguagacuu cuauuuuuuu uuuuuuuuuu uuuucccggg 720 accacaaaua auauucuugc uugguugggc gcaagggccc cguaucaggu cauaaacggg 780 uacauguugc acaggcuccu uuuuuuuuuu uuuuuuuuuu uucgcugagu uauuccgguc 840 ucaaaagacg gcagacguca gucgacaaca cggucuaaag cagugcuaca aucugccgug 900 uucguguuuu uuuuuuuuuu uuuuuuguga accuacacgg cgugcacugu aguucgcaau 960 ucauagggua ccggcucaga guuaugccuu gguugaaaac ugcccagcau acuuuuuuuu 1020 uuuuuuuuuu uucauauucc caugcuaagc aagggaugcc gcgagucaug uuaagcuuga 1080 auu 1083 <210> 107 <211> 59 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (V) <400> 107 uagcgaagcu cuuggaccua ccuuuuuuuu uuuuuucccu gcguuccuag aaguacacg 59 <210> 108 <211> 120 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (V) <400> 108 uagcgaagcu cuuggaccua ccuuuuuuuu uuuuuuuccc ugcguuccua gaaguacacg 60 aucgcuucga gaaccuggau ggaaaaaaaa aaaaaaaggg acgcaaggau cuucaugugc 120 <210> 109 <211> 7 <212> PRT <213> artificial <220> <223> cationic or polycationic peptide selected from formula (I): {(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x} <400> 109 Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg 1 5 <210> 110 <211> 9 <212> PRT <213> artificial <220> <223> cationic or polycationic peptide selected from formula (I): {(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x} <400> 110 Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg 1 5 <210> 111 <211> 12 <212> PRT <213> artificial <220> <223> cationic or polycationic peptide selected from formula (I): {(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x} <400> 111 Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg 1 5 10 <210> 112 <211> 1845 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> mRNA coding for luciferase <400> 112 gggagaaagc uugaggaugg aggacgccaa gaacaucaag aagggcccgg cgcccuucua 60 cccgcuggag gacgggaccg ccggcgagca gcuccacaag gccaugaagc gguacgcccu 120 ggugccgggc acgaucgccu ucaccgacgc ccacaucgag gucgacauca ccuacgcgga 180 guacuucgag augagcgugc gccuggccga ggccaugaag cgguacggcc ugaacaccaa 240 ccaccggauc guggugugcu cggagaacag ccugcaguuc uucaugccgg ugcugggcgc 300 ccucuucauc ggcguggccg ucgccccggc gaacgacauc uacaacgagc gggagcugcu 360 gaacagcaug gggaucagcc agccgaccgu gguguucgug agcaagaagg gccugcagaa 420 gauccugaac gugcagaaga agcugcccau cauccagaag aucaucauca uggacagcaa 480 gaccgacuac cagggcuucc agucgaugua cacguucgug accagccacc ucccgccggg 540 cuucaacgag uacgacuucg ucccggagag cuucgaccgg gacaagacca ucgcccugau 600 caugaacagc agcggcagca ccggccugcc gaagggggug gcccugccgc accggaccgc 660 cugcgugcgc uucucgcacg cccgggaccc caucuucggc aaccagauca ucccggacac 720 cgccauccug agcguggugc cguuccacca cggcuucggc auguucacga cccugggcua 780 ccucaucugc ggcuuccggg ugguccugau guaccgguuc gaggaggagc uguuccugcg 840 gagccugcag gacuacaaga uccagagcgc gcugcucgug ccgacccugu ucagcuucuu 900 cgccaagagc acccugaucg acaaguacga ccugucgaac cugcacgaga ucgccagcgg 960 gggcgccccg cugagcaagg aggugggcga ggccguggcc aagcgguucc accucccggg 1020 cauccgccag ggcuacggcc ugaccgagac cacgagcgcg auccugauca cccccgaggg 1080 ggacgacaag ccgggcgccg ugggcaaggu ggucccguuc uucgaggcca agguggugga 1140 ccuggacacc ggcaagaccc ugggcgugaa ccagcggggc gagcugugcg ugcgggggcc 1200 gaugaucaug agcggcuacg ugaacaaccc ggaggccacc aacgcccuca ucgacaagga 1260 cggcuggcug cacagcggcg acaucgccua cugggacgag gacgagcacu ucuucaucgu 1320 cgaccggcug aagucgcuga ucaaguacaa gggcuaccag guggcgccgg ccgagcugga 1380 gagcauccug cuccagcacc ccaacaucuu cgacgccggc guggccgggc ugccggacga 1440 cgacgccggc gagcugccgg ccgcgguggu ggugcuggag cacggcaaga ccaugacgga 1500 gaaggagauc gucgacuacg uggccagcca ggugaccacc gccaagaagc ugcggggcgg 1560 cgugguguuc guggacgagg ucccgaaggg ccugaccggg aagcucgacg cccggaagau 1620 ccgcgagauc cugaucaagg ccaagaaggg cggcaagauc gccguguaag acuaguuaua 1680 agacugacua gcccgauggg ccucccaacg ggcccuccuc cccuccuugc accgagauua 1740 auaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa 1800 aaaaaauauu cccccccccc cccccccccc cccccccccc ucuag 1845 <210> 113 <211> 1857 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> mRNA coding for luciferase <400> 113 gggagaaagc uugaggaugg aggacgccaa gaacaucaag aagggcccgg cgcccuucua 60 cccgcuggag gacgggaccg ccggcgagca gcuccacaag gccaugaagc gguacgcccu 120 ggugccgggc acgaucgccu ucaccgacgc ccacaucgag gucgacauca ccuacgcgga 180 guacuucgag augagcgugc gccuggccga ggccaugaag cgguacggcc ugaacaccaa 240 ccaccggauc guggugugcu cggagaacag ccugcaguuc uucaugccgg ugcugggcgc 300 ccucuucauc ggcguggccg ucgccccggc gaacgacauc uacaacgagc gggagcugcu 360 gaacagcaug gggaucagcc agccgaccgu gguguucgug agcaagaagg gccugcagaa 420 gauccugaac gugcagaaga agcugcccau cauccagaag aucaucauca uggacagcaa 480 gaccgacuac cagggcuucc agucgaugua cacguucgug accagccacc ucccgccggg 540 cuucaacgag uacgacuucg ucccggagag cuucgaccgg gacaagacca ucgcccugau 600 caugaacagc agcggcagca ccggccugcc gaagggggug gcccugccgc accggaccgc 660 cugcgugcgc uucucgcacg cccgggaccc caucuucggc aaccagauca ucccggacac 720 cgccauccug agcguggugc cguuccacca cggcuucggc auguucacga cccugggcua 780 ccucaucugc ggcuuccggg ugguccugau guaccgguuc gaggaggagc uguuccugcg 840 gagccugcag gacuacaaga uccagagcgc gcugcucgug ccgacccugu ucagcuucuu 900 cgccaagagc acccugaucg acaaguacga ccugucgaac cugcacgaga ucgccagcgg 960 gggcgccccg cugagcaagg aggugggcga ggccguggcc aagcgguucc accucccggg 1020 cauccgccag ggcuacggcc ugaccgagac cacgagcgcg auccugauca cccccgaggg 1080 ggacgacaag ccgggcgccg ugggcaaggu ggucccguuc uucgaggcca agguggugga 1140 ccuggacacc ggcaagaccc ugggcgugaa ccagcggggc gagcugugcg ugcgggggcc 1200 gaugaucaug agcggcuacg ugaacaaccc ggaggccacc aacgcccuca ucgacaagga 1260 cggcuggcug cacagcggcg acaucgccua cugggacgag gacgagcacu ucuucaucgu 1320 cgaccggcug aagucgcuga ucaaguacaa gggcuaccag guggcgccgg ccgagcugga 1380 gagcauccug cuccagcacc ccaacaucuu cgacgccggc guggccgggc ugccggacga 1440 cgacgccggc gagcugccgg ccgcgguggu ggugcuggag cacggcaaga ccaugacgga 1500 gaaggagauc gucgacuacg uggccagcca ggugaccacc gccaagaagc ugcggggcgg 1560 cgugguguuc guggacgagg ucccgaaggg ccugaccggg aagcucgacg cccggaagau 1620 ccgcgagauc cugaucaagg ccaagaaggg cggcaagauc gccguguaag acuaguuaua 1680 agacugacua gcccgauggg ccucccaacg ggcccuccuc cccuccuugc accgagauua 1740 auaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa 1800 aaaaaauauu cccccccccc cccccccccc cccccccccc ucuagacaau uggaauu 1857 <210> 114 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> CpG 2216 <400> 114 gggggacgat cgtcgggggg 20 <210> 115 <211> 20 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Short GU rich <400> 115 gguuuuuuuu uuuuuuuggg 20 <210> 116 <211> 8 <212> PRT <213> artificial <220> <223> Ovalbumine-derived peptide <400> 116 Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu 1 5 <210> 117 <211> 386 <212> PRT <213> Gallus gallus <400> 117 Met Gly Ser Ile Gly Ala Ala Ser Met Glu Phe Cys Phe Asp Val Phe 1 5 10 15 Lys Glu Leu Lys Val His His Ala Asn Glu Asn Ile Phe Tyr Cys Pro 20 25 30 Ile Ala Ile Met Ser Ala Leu Ala Met Val Tyr Leu Gly Ala Lys Asp 35 40 45 Ser Thr Arg Thr Gln Ile Asn Lys Val Val Arg Phe Asp Lys Leu Pro 50 55 60 Gly Phe Gly Asp Ser Ile Glu Ala Gln Cys Gly Thr Ser Val Asn Val 65 70 75 80 His Ser Ser Leu Arg Asp Ile Leu Asn Gln Ile Thr Lys Pro Asn Asp 85 90 95 Val Tyr Ser Phe Ser Leu Ala Ser Arg Leu Tyr Ala Glu Glu Arg Tyr 100 105 110 Pro Ile Leu Pro Glu Tyr Leu Gln Cys Val Lys Glu Leu Tyr Arg Gly 115 120 125 Gly Leu Glu Pro Ile Asn Phe Gln Thr Ala Ala Asp Gln Ala Arg Glu 130 135 140 Leu Ile Asn Ser Trp Val Glu Ser Gln Thr Asn Gly Ile Ile Arg Asn 145 150 155 160 Val Leu Gln Pro Ser Ser Val Asp Ser Gln Thr Ala Met Val Leu Val 165 170 175 Asn Ala Ile Val Phe Lys Gly Leu Trp Glu Lys Ala Phe Lys Asp Glu 180 185 190 Asp Thr Gln Ala Met Pro Phe Arg Val Thr Glu Gln Glu Ser Lys Pro 195 200 205 Val Gln Met Met Tyr Gln Ile Gly Leu Phe Arg Val Ala Ser Met Ala 210 215 220 Ser Glu Lys Met Lys Ile Leu Glu Leu Pro Phe Ala Ser Gly Thr Met 225 230 235 240 Ser Met Leu Val Leu Leu Pro Asp Glu Val Ser Gly Leu Glu Gln Leu 245 250 255 Glu Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu Thr Glu Trp Thr Ser Ser Asn 260 265 270 Val Met Glu Glu Arg Lys Ile Lys Val Tyr Leu Pro Arg Met Lys Met 275 280 285 Glu Glu Lys Tyr Asn Leu Thr Ser Val Leu Met Ala Met Gly Ile Thr 290 295 300 Asp Val Phe Ser Ser Ser Ala Asn Leu Ser Gly Ile Ser Ser Ala Glu 305 310 315 320 Ser Leu Lys Ile Ser Gln Ala Val His Ala Ala His Ala Glu Ile Asn 325 330 335 Glu Ala Gly Arg Glu Val Val Gly Ser Ala Glu Ala Gly Val Asp Ala 340 345 350 Ala Ser Val Ser Glu Glu Phe Arg Ala Asp His Pro Phe Leu Phe Cys 355 360 365 Ile Lys His Ile Ala Thr Asn Ala Val Leu Phe Phe Gly Arg Cys Val 370 375 380 Ser Pro 385 <210> 118 <211> 35 <212> PRT <213> artificial <220> <223> HPV16 E7 aa43-77 <400> 118 Gly Gln Ala Glu Pro Asp Arg Ala His Tyr Asn Ile Val Thr Phe Cys 1 5 10 15 Cys Lys Cys Asp Ser Thr Leu Arg Leu Cys Val Gln Ser Thr His Val 20 25 30 Asp Ile Arg 35 <210> 119 <211> 10 <212> PRT <213> artificial <220> <223> HPV16 E7 aa48-57 <400> 119 Asp Arg Ala His Tyr Asn Ile Val Thr Phe 1 5 10 <210> 120 <211> 9 <212> PRT <213> HPV16 E7 aa49-57 (H-2 Db) <400> 120 Arg Ala His Tyr Asn Ile Val Thr Phe 1 5 <210> 121 <211> 180 <212> PRT <213> artificial <220> <223> NY-ESO.1 <400> 121 Met Gln Ala Glu Gly Arg Gly Thr Gly Gly Ser Thr Gly Asp Ala Asp 1 5 10 15 Gly Pro Gly Gly Pro Gly Ile Pro Asp Gly Pro Gly Gly Asn Ala Gly 20 25 30 Gly Pro Gly Glu Ala Gly Ala Thr Gly Gly Arg Gly Pro Arg Gly Ala 35 40 45 Gly Ala Ala Arg Ala Ser Gly Pro Gly Gly Gly Ala Pro Arg Gly Pro 50 55 60 His Gly Gly Ala Ala Ser Gly Leu Asn Gly Cys Cys Arg Cys Gly Ala 65 70 75 80 Arg Gly Pro Glu Ser Arg Leu Leu Glu Phe Tyr Leu Ala Met Pro Phe 85 90 95 Ala Thr Pro Met Glu Ala Glu Leu Ala Arg Arg Ser Leu Ala Gln Asp 100 105 110 Ala Pro Pro Leu Pro Val Pro Gly Val Leu Leu Lys Glu Phe Thr Val 115 120 125 Ser Gly Asn Ile Leu Thr Ile Arg Leu Thr Ala Ala Asp His Arg Gln 130 135 140 Leu Gln Leu Ser Ile Ser Ser Cys Leu Gln Gln Leu Ser Leu Leu Met 145 150 155 160 Trp Ile Thr Gln Cys Phe Leu Pro Val Phe Leu Ala Gln Pro Pro Ser 165 170 175 Gly Gln Arg Arg 180 <210> 122 <211> 547 <212> RNA <213> artificial <220> <223> nucleic acid sequence according to formula (IV) <400> 122 gggagaaagc ucaagcuuau ccaaguaggc uggucaccug uacaacguag ccgguauuuu 60 uuuuuuuuuu uuuuuuuuga ccgucucaag guccaaguua gucugccuau aaaggugcgg 120 auccacagcu gaugaaagac uugugcggua cgguuaaucu ccccuuuuuu uuuuuuuuuu 180 uuuuuaguaa augcgucuac ugaauccagc gaugaugcug gcccagaucu ucgaccacaa 240 gugcauauag uagucaucga gggucgccuu uuuuuuuuuu uuuuuuuuuu uggcccaguu 300 cugagacuuc gcuagagacu acaguuacag cugcaguagu aaccacugcg gcuauugcag 360 gaaaucccgu ucagguuuuu uuuuuuuuuu uuuuuuccgc ucacuaugau uaagaaccag 420 guggaguguc acugcucucg aggucucacg agagcgcucg auacaguccu uggaagaauc 480 uuuuuuuuuu uuuuuuuuuu uugugcgacg aucacagaga acuucuauuc augcaggucu 540 gcucuag 547 <210> 123 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> CpG-DNA <400> 123 tccatgacgt tcctgacgtt 20

Claims (22)

  1. 하기를 포함하는 약학적 조성물:
    (A) 하기를 포함하는 폴리머 담체 화물 복합체:
    a) 담체로써 이황화-가교결합된 양이온성 성분을 포함하는, 바람직하게는 이황화-가교결합된 양이온성 성분에 의해 형성된 폴리머 담체; 및
    b) 화물(cargo)로써 적어도 하나의 핵산 분자,
    및
    (B) 하기로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원:
    (i) 감염성 질병과 관련된 병원체 유래 항원;
    (ii) 알러지 또는 알러지성 질병과 관련된 항원;
    (iii) 자가면역 질병과 관련된 항원; 및
    (iv) 암 또는 종양 질병과 관련된 항원
    또는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원의 절편, 변이 및/또는 유도체.
  2. 제1항에 있어서, 상기 성분 (B)는 성분 (A)에 공유결합 되지 않은 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 단백질 또는 펩타이드 항원은 하기로 이루어진 리스트(list)에서 선택된 병원체 유래인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물: 광견병 바이러스(Rabies virus), B형 간염 바이러스(Hepatitis B virus), 인유두종 바이러스(human Papilloma virus, hPV), 바실러스 안트라시스(Bacillus anthracis), 호흡기 신시티움 바이러스(Respiratory syncytial virus, RSV), 헤르페스 심플렉스 바이러스(Herpes simplex virus, HSV), 인플루엔자 바이러스 및 결핵균(Mycobacterium tuberculosis).
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단백질 또는 펩타이드 항원은 하기로 이루어진 리스트에서 선택된 것을 특징으로 하는 약학적 조성물:
    ·인플루엔자 바이러스의 헤마글루티닌(the Hemagglutinin, HA), 뉴라미니다아제(the Neuraminidase, NA), 핵단백질(the Nucleoprotein, NP), M1 단백질, M2 단백질, NS1 단백질, NS2 단백질(NEP 단백질: 핵 방출 단백질(nuclear export protein)), PA 단백질, PB1 단백질(중합효소 염기성 1 단백질, polymerase basic 1 protein), PB1-F2 단백질 및 PB2 단백질;
    ·광견병 바이러스의 경우에, 핵단백질(N), 인단백질(P), 기질 단백질(M), 당단백질(G), 및 바이러스 RNA 중합효소(L);
    ·B형 간염 바이러스의 경우에, B형 간염 바이러스 표면 항원(HBsAg), B형 간염 바이러스 코어 항원(HbcAg), B형 간염 바이러스 DNA 중합효소, HBx 단백질, preS2 중간 표면 단백질(the preS2 middle surface protein), 큰 S 단백질(large S protein), 바이러스 단백질 VP1, 바이러스 단백질 VP2, 바이러스 단백질 VP3, 및 바이러스 단백질 VP4;
    ·인유두종 바이러스(hPV)의 경우에, E1 단백질, E2 단백질, E3 단백질, E4 단백질, E5 단백질, E6 단백질, E7 단백질, E8 단백질, L1 단백질, 및 L2 단백질;
    ·바실러스 안트라시스의 경우에, 방어 항원(PA), 부종(edema) 인자(EF), 치사 인자(LF), 및 S-층 상동 단백질(S-layer homology proteins, SLH);
    ·호흡기 신시티움 바이러스의 경우에, 융합(F) 단백질, 뉴클레오캡시드(N) 단백질, 인단백질(P), 기질(M) 단백질, 당단백질(G), 큰 단백질(L; RNA 중합효소), 비-구조 단백질 1(non-structural protein 1, NS1), 비-구조 단백질 2(NS2), 작은 소수성(SH) 단백질, 신장(elongation) 인자M2-1, 및 전사 조절 단백질 M2-2;
    ·헤르페스 심플렉스 바이러스(HSV)의 경우에, 당단백질 L(UL1), 우라실-DNA 글리코실화 효소 UL2, UL3 단백질, UL4 단백질, DNA 복제 단백질 UL5, 포탈 단백질 UL6, 비리온 성숙 단백질 UL7, DNA 헬리카제(helicase) UL8, 복제 원점-결합 단백질 UL9, 당단백질 M(UL10), UL11 단백질, 알칼리성 엑소뉴클레아제 UL12, 세린-트레오닌 단백질 인산화효소 UL13, 외피(Tegument) 단백질 UL14, 터미네이즈(terminase)(UL15), 외피 단백질 UL16, UL17 단백질, 캡시드 단백질 VP23(UL18), 주요 캡시드 단백질 VP5(UL19), 막 단백질(UL20), 외피 단백질 UL21, 당단백질 H(UL22), 티미딘 인산화효소 UL23, UL24 단백질, UL25 단백질, 캡시드 단백질 P40(UL26, VP24, VP22A), 당단백질 B(UL27), ICP18.5 단백질(UL28), 주요 DNA-결합 단백질 ICP8(UL29), DNA 인산화효소 UL30, 핵 기질 단백질 UL31, 외피막(envelope) 당단백질 UL32, UL33 단백질, 내핵 막 단백질 UL34, 캡시드 단백질 VP26(UL35), 큰 외피 단백질 UL36, 캡시드 조립 단백질 UL37, VP19C 단백질(UL38), 리보뉴클레오티드 환원효소(Ribonucleotide reductase)(큰 서브유닛) UL39, 리보뉴클레오티드 환원효소(작은 서브유닛) UL40, 외피 단백질/비리온 숙주 차단(shutoff) VHS 단백질(UL41), DNA 중합효소 반응진행성(processivity) 인자 UL42, 막 단백질 UL43, 당단백질 C(UL44), 막 단백질 UL45, 외피 단백질 VP11/12(UL46), 외피 단백질 VP13/14(UL47), 비리온 성숙 단백질 VP16(UL48, 알파 TIF), 외피막(envelope) 단백질 UL49, dUTP 이인산가수분해효소 UL50, 외피 단백질 UL51, DNA 헬리카제/프라마제 복합체 단백질 UL52, 당단백질 K(UL53), 전사 조절 단백질 IE63(ICP27, UL54), UL55 단백질, UL56 단백질, 바이러스 복제 단백질 ICP22(IE68, US1), US2 단백질, 세린/트레오닌 단백질 인산화효소 US3, 당단백질 G(US4), 당단백질 J(US5), 당단백질 D(US6), 당단백질 I(US7), 당단백질 E(US8), 외피 단백질 US9, 캡시드/외피 단백질 US10, Vmw21 단백질(US11), ICP47 단백질(IE12, US12), 주요 전사 활성자 ICP4(IE175, RS1), E3 유비퀴틴 결합효소 ICP0(IE110), 대기(Latency)-관련 단백질 1(LRP1), 대기-관련 단백질 2(LRP2), 신경 병원성 인자 RL1(ICP34.5), 및 대기-연관 전사체(transcript)(LAT); 또는
    ·결핵균의 경우에, ESAT-6 단백질, ESX-1 단백질, CFP10 단백질, TB10.4 단백질, MPT63 단백질, MPT64 단백질, MPT83 단백질, MTB12 단백질, MTB8 단백질, AG85A 단백질, AG85B 단백질, Rpf-유사(like) 단백질, KATG 단백질, PPE18 단백질, MTB32 단백질, MTB39 단백질, 크리스탈린(crystalline), HSP65 단백질, PST-S 단백질, 및 HBHA 단백질, 10 kDa 여과 항원 EsxB, 세린 단백질 분해효소 PepA, 피브로넥틴-결합 단백질 D FbpD, 분비 단백질 MPT51, 주변 세포질 인산염-결합 지방단백질 PSTS1(PBP-1), 주변 세포질 인산염-결합 지방단백질 PSTS3(PBP-3, Phos-1), PPE 패밀리 단백질 PPE14, PPE 패밀리 단백질 PPE68, 단백질 MTB72F, 분자 샤페론 DnaK, 세포 표면 지방단백질 MPT83, 지방단백질 P23, 인산염 수송 시스템 투과효소 단백질 PstA, 14 kDa 항원, 피브로넥틴-결합 단백질 C FbpC1, 알라닌 탈수소효소 TB43, 및 글루타민 합성효소 1.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 단백질 또는 펩타이드 항원은 알러지 또는 알러지 질병과 관련되고 하기로 이루어진 리스트에서 선택된 원천(source)으로부터 유래된 것을 특징으로 하는 약학적 조성물: 잔디 화분(pollen), 나무 화분, 꽃 화분, 허브 화분, 먼지 진드기(dust mite), 곰팡이, 동물, 음식, 및 곤충 독(venom).
  6. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 단백질 또는 펩타이드 항원은 하기로 이루어진 리스트에서 선택된 자가면역 질병과 관련된 것을 특징으로 하는 약학적 조성물:
    ·다발성 경화증(multiple sclerosis, MS)과 관련된 경우에, 수초 염기성 단백질(myelin basic protein, MBP), 단백지질 단백질(proteolipid protein, PLP), 및 수초 올리고덴드로사이트 당단백질(myelin oligodendrocyte glycoprotein, MOG);
    ·제1형 당뇨와 관련된 경우에, CD44, 인슐린전구물질(preproinsulin), 프로인슐린(proinsulin), 인슐린, 글루탐산 탈카르복실화효소(decaroxylase)(GAD65), 티로신 인산염-유사 인슐린종 항원 2(IA2), 아연 수송체((ZnT8), 및 열충격단백질 60(HSP60);
    ·자가면역 포도막염(uveitis)과 관련된 광수용체 간 레티노이드-결합 단백질(interphotoreceptor retinoid-binding protein, IRBP);
    ·중증 근무력증(Myasthenia gravis)과 관련된 경우에, 아세틸콜린 수용체 AchR, 및 인슐린 유사 성장 인자-1 수용체(IGF-1R);
    ·류마티스성 열과 관련된 베타-용혈성 스트렙토콕시(beta-hemolytic streptocci)(슈도-자가항원(pseudo-autoantigen))로부터 M-단백질;
    ·관절염과 관련된 대식세포 이동(migration) 억제 인자;
    ·쇠그렌 증후군(Sjogren's syndrome)과 관련된 각 경우에, Ro/La RNP 복합체, 알파- 및 베타-포드린(fodrin), 섬 세포 자가항원(islet cell autoantigen), 폴리(ADP)리보스 중합효소(PARP), NuMA, NOR-90, Ro60 자가항원, 및 p27 항원;
    ·홍반성 낭창(lupus erythematosus)과 관련된 각 경우에, Ro60 자가항원, 저-밀도 지질단백질, U-1 작은 핵 리보핵산단백질 복합체의 Sm 항원(B/B', D1, D2, D3, E, F, G), 및 RNP 리보핵산단백질;
    ·아테롬성 동맥 경화증(Atherosclerosis)과 관련된 각 경우에, oxLDL, 베타(2)GPI, HSP60/65, 및 oxLDL/베타(2)GPI;
    ·특발성 팽창 심근증(idiopathic dilated cardiomyopathy, DCM)과 관련된 심장 베타(1)-아드레날린 수용체(cardiac beta(1)-adrenergic receptor);
    ·근염(myositis)과 관련된 히스티딜-tRNA 합성효소(HisRS);
    ·경피증(scleroderma)과 관련된 토포이성질화효소 I(topoisomerase I);
    ·IL-17; 또는
    열충격단백질.
  7. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 단백질 또는 펩타이드 항원은 암 또는 종양 질병과 관련되고 하기로 이루어진 리스트에서 선택된 것을 특징으로 하는 약학적 조성물: p53, CA125, EGFR, Her2/neu, hTERT, PAP, MAGE-A1, MAGE-A3, 메소텔린(Mesothelin), MUC-1, NY-ESO-1, GP100, MART-1, 티로시나제(Tyrosinase), PSA, PSCA, PSMA VEGF, VEGFR1, VEGFR2, Ras, CEA 및 WT1.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리머 담체 화물 복합체는 어쥬번트(adjuvant)로써 사용되는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 핵산 분자 화물은 면역 자극성(immunostimulatory) 핵산인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 핵산 분자 화물은 RNA; 바람직하게는 상기 핵산 분자 화물은 면역 자극성 RNA(isRNA)인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리머 담체 화물 복합체에 포함되는 상기 폴리머 담체의 양이온성 성분 및 핵산 분자 화물은 0.1-20의 범위, 또는 0.1-5의 범위, 또는 0.1-1의 범위, 또는 0.5-0.9의 범위의 N/P 비율로 제공되는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리머 담체 화물 복합체에 포함되는 폴리머 담체의 양이온성 성분은 양이온성 펩타이드인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  13. 제12항에 있어서, 상기 양이온성 펩타이드는 화학식(I)
    (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x,
    에 따르는 펩타이드로부터 선택된 것을 특징으로 하는 약학적 조성물
    상기
    l + m + n +o + x = 3-100, 및
    l, m, n 또는 o = Arg, Lys, His 및 Orn의 총량은 양이온성 펩타이드의 모든 아미노산의 적어도 10%를 나타내는 경우에, 각각은 독립적으로 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21-30, 31-40, 41-50, 51-60, 61-70, 71-80, 81-90 및 91-100로부터 선택된 어느 수; 및 Xaa는 Arg, Lys, His 또는 Orn을 제외하는 천연(=자연 발생) 또는 비-천연 아미노산으로부터 선택된 어느 아미노산; 및
    x = Xaa의 총량이 양이온성 펩타이드의 모든 아미노산의 90%를 초과하지 않을 경우, 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21-30, 31-40, 41-50, 51-60, 61-70, 71-80, 81-90로부터 선택된 어느 수,
    또는 상기 양이온성 펩타이드는 하위 화학식(subformula) (IIIa)
    {(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa')x (Cys)y}
    에 따르는 펩타이드로부터 선택됨
    또는 상기 양이온성 펩타이드는 하위 화학식 (Ib)
    Cys1 {(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x} Cys2
    에 따르는 펩타이드로부터 선택됨
    상기 (Arg)l; (Lys)m; (His)n; (Orn)o; 및 x는 상기 정의와 같음; Xaa'는 Arg, Lys, His, Orn을 제외한 천연(=자연 발생) 또는 비-천연 아미노산으로부터 선택된 어느 아미노산이며; 또는 Arg(아르기닌), Lys(리신), His(히스티딘) 및 Orn(오르니틴)의 총량이 올리고펩타이드의 모든 아미노산의 적어도 10%를 나타내며 상기 Cys1 및 Cys2는 (Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x의 근위(proximal) 또는 말단의 시스테인일 경우에, Cys 및 y는 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21-30, 31-40, 41-50, 51-60, 61-70, 71-80, 및 81-90로부터 선택된 어느 수임.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리머 담체 화물 복합체는 상기 단백질 또는 펩타이드 항원을 포함하지 않는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  15. 하기를 포함하는 키트 또는 키트의 일부:
    a) 제1항, 제2항, 또는 제8항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따라 정의된 폴리머 담체 화물 복합체; 및
    b) 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 따라 정의된 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원 또는 이들의 절편, 변이 및/또는 유도체.
  16. 백신으로 사용하는 것을 특징으로 하는, 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항의 약학적 조성물 또는 제15항의 키트 또는 일부의 키트.
  17. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 따라 정의된 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원 또는 이들의 절편, 변이체 및/또는 유도체와 결합하여 치료(therapy)에 사용되는 것을 특징으로 하는 제1항, 제2항, 또는 제8항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따라 정의된 폴리머 담체 화물 복합체.
  18. 제1항, 제2항, 또는 제8항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따라 정의된 폴리머 담체 화물 복합체와 결합하여 치료에 사용되는 것을 특징으로 하는 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 따라 정의된 단백질, 펩타이드 항원 또는 이들의 절편, 변이체 및/또는 유도체.
  19. 하기의 치료에 사용되는 것을 특징으로 하는 제17항의 폴리머 담체 화물 복합체; 또는 하기의 치료에 사용되는 것을 특징으로 하는 제18항의 단백질 또는 펩타이드 항원 또는 이들의 절편, 변이체 및/또는 유도체:
    (i) 감염성 질병;
    (ii) 알러지 또는 알러지성 질병;
    (iii) 자가면역 질병; 또는
    (iv) 암 또는 종양 질병.
  20. 하기를 포함하는 약학적 패키지:
    (A) 제1항, 제2항, 또는 제8항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따라 정의된 폴리머 담체 화물 복합체; 및
    (B) 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 따라 정의된 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원 또는 이들의 절편, 변이체 및/또는 유도체와 결합한 치료에 상기 폴리머 담체 화물 복합체의 사용을 설명하는 지시서.
  21. 하기를 포함하는 약학적 패키지:
    (A) 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 따라 정의된 적어도 하나의 단백질 또는 펩타이드 항원 또는 이들의 절편, 변이체 및/또는 유도체; 및
    (B) 제1항, 제2항, 또는 제8항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따라 정의된 폴리머 담체 화물 복합체와 결합한 치료에 상기 단백질 또는 펩타이드 항원 또는 이들의 절편, 변이체 및/또는 유도체의 사용을 설명하는 지시서.
  22. 제20항 또는 제21항에 있어서, 상기 지시서는 추가적으로 하기의 치료에서의 사용을 설명하는 것을 특징으로 하는 약학적 패키지:
    (i) 감염성 질병;
    (ii) 알러지 또는 알러지성 질병;
    (iii) 자가면역 질병; 또는
    (iv) 암 또는 종양 질병.
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