KR20100005064A

KR20100005064A - 한약 조성물, 이에 함유된 곤충 추출물 및 그의 제법

Info

Publication number: KR20100005064A
Application number: KR1020097020651A
Authority: KR
Inventors: 일링 위
Original assignee: 허베이 이링 메디슨 리서치 인스티튜트 코오포레이션 리미티드
Priority date: 2007-03-05
Filing date: 2007-03-05
Publication date: 2010-01-13
Also published as: RU2427381C2; KR101082007B1; WO2008106821A1; HK1137661A1; RU2009132927A; CN101657208B; CN101657208A

Abstract

산동인으로부터 제조되는 한약 조성물의 제조방법 및 전갈, 지네, 지별, 선태 및 수질로부터 제조되는 곤충 추출물의 제조방법을 제공한다. 상기 방법들을 통하여 수득되는 한약 조성물 및 추출물을 제공한다.

한약, 곤충 추출물, 전갈, 지네, 지별, 수질, 선태, 인삼, 조제 유향, 백작약, 강진향, 단향, 용뇌, 산동인

Description

한약 조성물, 이에 함유된 곤충 추출물 및 그의 제법 {A CHINESE MEDICINE COMPOSITION AND THE EXTRACT OF WORMS THEREOF AND THEIR PREPARATION}

본 발명은 심혈관 및 뇌혈관 질환을 치료하는 한약 조성물, 이에 함유된 곤충 약재 추출물과 그의 제법에 관한 것이다.

관상형 죽상경화성 심장 질환은 죽상반(atheromatous plaque)이 관상 동맥벽에 축적되어 생기는 것으로, 혈관을 좁히거나 막아 심근 허혈 및 저산소증을 일으킨다. 관상형 죽상경화성 심장 질환 및 관상동맥 경련도 허혈성 심장 질환에 속한다.

일링 위(Yiling Wu) 교수는 죽상경화성 심장 질환의 병리 연구에서 한방과학의 부차적 효과 이론을 처음 주창하였으며 이에, 죽상경화성 심장 질환 및 협심증 치료를 목적으로 다섯가지 곤충, 예컨대, 전갈(Buthus martenS1i Karsch), 지네(Scolopendra subspinipes mutilans L. Koch), 지별(Eupolyphaga S1nenS1s Walker), 수질(Whitmania pigra Whitman) 및 선태(Cryptotympana pustulata Fabricius) 등을 조합한 "통심락" 캡슐을 성공적으로 개발하였다. "통심락" 캡슐은 특히 죽상경화성 심장 질환, 협심증, 뇌혈전 등의 치료에 효과적이며 현재 중국 특허 ZL01131203.3을 취득하여 그 권리를 보호받고 있다. "통심락" 캡슐은, 전갈, 수질, 지네, 지별, 선태, 인삼(Panax ginseng C. A. Mey), 조제 유향 (Boswellia carterii Birdw., B. bhaw-dijiana Birdw.), 백작약(Paeonia lactiflora Pall.), 강진향(Dalbergia odorifera T. Chen), 단향(Santalum album L.), 용뇌, 산동인(Ziziphus jujuba Mill. var. spinosa (Bunge) Hu ex H. F. Chou) 등으로 구성되며 상기 다섯가지 곤충 약재, 즉 전갈, 지네, 지별, 수질 및 선태를 조합하여 사용시, 혈류 순환을 활성화하고 혈관내 장애물을 제거하며, 풍을 막고 발작을 완화할 수 있다. "통심락" 캡슐은 죽상경화성 심장 질환 및 협심증 특히 각종 협심 증세의 치료에 특히 바람직한 효과를 나타낸다.

곤충 약재 개발 및 응용에는 많은 난제가 많다. 예를 들어, 대부분의 활성 성분이 완전히 규명되지 않고 이의 추출 및 정제 공정이 정교하지 못하며 표준 물질이 부족한 점 등 다수의 문제가 있다. 종래 기술에 따르면, 통상의 분쇄법으로 곤충 약재를 분쇄하여 분말로 만들고 이를 약물에 조합한다. 그러나 통상의 분쇄공정은, (1) 곤충 약재가 세포 구조까지 파괴되지 않아 활성 성분을 추출 혹은 세포막을 통해 밖으로 용출하기 어렵고; (2) 분쇄중 기계적 동작 탓에 분쇄물의 온도가 약 80℃까지 상승하므로 곤충 약재내 활성 단백질 성분의 안정성에 부정적인 영향을 미치고; (3) 상기 곤충 약재의 각 부분마다 분쇄 난이도가 상이하여 입자크기에 차이가 생기고, 결과적으로 곤충 약재의 분포가 불균일하여 산물의 품질 균일성에 영향을 미치게 된다. 이러한 단점은 약제 조성물에 함유된 활성 성분의 안정도 및 인체 흡수도에 직접적인 영향을 미치며, 따라서 약제 조성물의 치료 효능이 충분히 발휘되지 못한다.

CN 1593623 A (중국 특허출원 제 200410049615.X호)는 경구 붕해형 "통심락" 태블릿 및 이의 제조방법에 대해 기술하고 있으며, 여기서 상기 경구 붕해형 태블릿은 전갈, 지네, 지별, 수질 및 선태로 이루어진 15 내지 70중량부의 수성 추출물, 인삼 및 백작약으로 이루어진 1 내지 12중량부의 에탄올 추출물, 또한 용뇌의 포접 화합물과 약제학적 부형제를 10 내지 100중량부로서 포함한다. 상기 제법의 특징은 생약재의 경우 거대기공 수지 흡착 기술을 이용하여 불순물을 제거하는 한편, 상기 다섯가지 곤충 약재는 초음파 진동으로 추출, 농축 및 회전형 스크레이프 필름법 (scraped film method)에 따라 분리한다.

실온에서 행한 상기 다섯가지 곤충 약재의 초음파 추출 공정에서, 일부 활성 성분은 추출되지 않는데 이는 추출시 비교적 높은 온도가 필요하기 때문이다. 따라서, 종래의 제조 공정은 약제 조성물의 치료 효능에 영향을 미칠 뿐만 아니라, 귀한 곤충 약재를 낭비한다.

공지 기술에 따른 통상의 한약 제조에 있어서, 곤충 약재는 대개 직접 분쇄, 물에 넣어 전제처리 (95 내지 100℃), 60% 에탄올을 이용한 가온 추출 (60℃), 및 염수 가온 추출 (60℃) 등의 방법으로 처리한다. 이러한 처리 방법 중 저온 추출은 활성 성분을 충분히 우려내지 못하며 물에 넣어 전제시 (95 내지 100℃) 활성 성분 중 일부가 파괴되기도 한다.

이에 따라, 곤충 약재를 추출하는 종래의 기술을 개선할 필요가 있으며 특히, 추출 대상이 되는 약재 성분에 따라 저온 및 비교적 고온에서의 추출을 조합한 새로운 곤충 약재 추출 기술의 개발이 요구된다.

수년간의 연구 결과, 본 발명자는 곤충 약재, 예를 들어, 전갈(Buthus martenS1i Karsch), 지네(Scolopendra subspinipes mutilans L. Koch), 지별(Eupolyphaga S1nenS1s Walker), 수질(Whitmania pigra Whitman) 및 선태(Cryptotympana pustulata Fabricius) 등에 함유된 활성 성분을 저온 추출하는 방법은 그 한계가 커서 충분한 혹은 완벽한 추출 수준에 미치지 못하며, 저온 동적 환류 추출 후 (예, 비등점을 낮추기 위해 진공 장치를 이용하여 감압 수행하며 비교적 저온에서 용매를 비등 증발시키는 방법으로서, 상대적으로 고온에서 약재의 활성 성분이 분해되는 것을 막고, 약재내 열 민감성 성분을 신속 추출하며, 제조 비용 및 대기 오염을 감소시키고 또한 제조 기간을 단축하는 효과가 있다), 탕약의 찌꺼기를 비교적 고온에서 추출한다. 저온 추출이나 직접 분쇄로 간단히 수득되는 경우와 달리, 상기 방법으로 얻은 추출물은 치료 효능이 크게 향상되며, 투약량 및 위내 자극을 감소시킬 수 있는 사실을 발견하였다.

따라서, 본 발명의 목적은 종래의 기술보다 우수한 심혈관 및 뇌혈관계 질환 치료용 한약 조성물, 상기 조성물에 함유되는 것으로서 곤충 약재 추출물, 및 이를 제조하는 방법을 제공하는데 있다.

본 발명에 따른 심혈관 및 뇌혈관계 질환 치료용 한약 조성물은 다음과 같은 제조 공정에 따라 제조된다: 각각의 적절한 처방 함량/비율로서 전갈, 지네, 지별, 수질, 선태, 인삼(Panax ginseng C. A. Mey), 조제 유향 (Boswellia carterii Birdw., B. bhaw-dijiana Birdw.), 백작약(Paeonia lactiflora Pall.), 강진향(Dalbergia odorifera T. Chen), 단향(Santalum album L.), 용뇌, 산동인(Ziziphus jujuba Mill. var. spinosa (Bunge) Hu ex H. F. Chou)를 준비하고 이들 원료를 추출 및 각 추출물을 혼합하여 생약을 조제하며, 전갈, 지네, 지별, 수질 및 선태의 추출은: (1) 각 곤충 약재를 분쇄하여 거친 입자물로 만들고; (2) 8 내지 12배의 물을 상기 거친 입자물에 가하여 이 혼합물을 25 내지 65℃까지 가열하고, 각회마다 1 내지 5시간씩 1 내지 3회 추출하고, 이 추출물 및 탕약의 찌꺼기(dregs of the decoction)를 분리하고; (3) 상기 찌꺼기의 중량에 대한 부피비로서 8 내지 12배의 물을 찌꺼기에 가하고 이 혼합물을 70 내지 100℃까지 가열하고, 각회마다 1 내지 3시간씩 1 내지 3회 추출하고, 이 추출물 및 탕약의 찌꺼기를 분리하고; 또한 (4) 상술한 각 공정으로부터 수득한 추출물을 배합한 뒤 농축 건조하여 최종의 곤충 약재 추출물을 수득한다.

본 발명의 또다른 목적은 상술한 바와 같이 조제된 한약 조성물을 태블릿, 경구 붕해성 태블릿, 분산성 태블릿, 발포성 태블릿, 캡슐, 정제, 과립, 경구형 액제, 마이크로필, 마이크로캡슐 및 분무제로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 형태로 제조한 제형을 제공하는데 있다.

또 다른 본 발명의 목적은 곤충 약재의 추출 방법을 제공하는데 있다. 이러한 곤충 약재는 전갈, 지네, 지별, 수질 및 선태 등으로 구성되며 상기 방법은: (1) 각 곤충 약재를 분쇄하여 거친 입자형 약재로 만들고; (2) 이 거친 입자형 약재의 중량에 대한 부피비로서 8 내지 12배의 물을 약재에 가하여 이 혼합물을 25 내지 65℃까지 가열하고, 각회마다 1 내지 5시간씩 1 내지 3회 추출하고, 이 추출물 및 탕약의 찌꺼기를 분리하고; (3) 상기 찌꺼기의 중량에 대한 부피비로서 8 내지 12배의 물을 찌꺼기에 가하고 이 혼합물을 70 내지 100℃까지 가열하고, 각회마다 1 내지 3시간씩 1 내지 3회 추출하고, 이 추출물 및 탕약의 찌꺼기를 분리하고; 또한 (4) 상술한 각 공정으로부터 수득한 추출물을 배합한 뒤 농축 건조하여 최종의 곤충 약재 추출물을 수득하는 단계를 포함한다.

따라서, 본 발명의 또다른 목적은 상술한 방법에 따라 제조한 곤충 약재의 추출물을 제공하는 것으로서, 이 추출물은 황갈색 내지 진한 황색의 색상을 갖고, 자극취 및 짠맛을 갖는다.

본 발명은 다음과 같이 더욱 상세히 기술한다.

본 발명에 따른 한약 조성물은 인삼 3 내지 10g, 수질 3 내지 11g, 지별 5 내지 10g, 조제 유향 1 내지 5g, 백작약 3 내지 9g, 강진향 1 내지 5g, 단향 1 내지 5g, 전갈 3 내지 9g, 선태 3 내지 12g, 지네 1 내지 3g, 용뇌 1 내지 7g 및 산동인 3 내지 10g을 함유한다. 이에 대한 상세 내용은 ZL 01131203.3에 기술되어 있다.

본 발명의 추출 단계에서, 다섯가지 약재로서 전갈, 지네, 지별, 수질 및 선태는 각각 혹은 함께 추출할 수 있다. 상기 곤충 약재의 추출 단계를 다음과 같이 상세히 기술한다:

단계 1:

곤충 약재를 분쇄하여 18 내지 40메쉬, 바람직하게는 24메쉬의 거친 입자물로 만든다.

단계 2:

곤충 약재의 중량에 대해 부피비로서 8 내지 12배, 바람직하게는 10배의 물을 상기 거친 입자형 약재에 가하고; 이 혼합물을 25 내지 65℃까지 가열하고; 각회마다 1 내지 5시간씩 바람직하게는 3시간씩 1 내지 3회 바람직하게는 2회 추출하고; 또한 상기 추출물 및 탕약의 찌꺼기를 분리한다. 특정 제조 방법에 따라, 상기 단계에서 저온 수성 추출법, 저온 동적 추출법 혹은 초음파 추출법 등을 이용할 수 있다. 저온 수성 추출법을 이용할 경우, 추출 온도는 약 50℃가 바람직하다. 저온 동적 추출법을 이용할 경우, 0.05 내지 0.1MPa의 감압하에 교반하면서 추출처리하여 비교적 저온에서 물을 증발시키고, 이 결과 추출이 더욱 신속히 또한 충분히 수행되도록 한다. 초음파 추출법을 이용할 경우, 초음파 추출장치의 출력 및 진동 주파수를 적절히 제어할 필요가 있다; 즉, 초음파 추출장치의 출력은 200 내지 10,000W, 바람직하게는 250 내지 8,000W, 더 바람직하게는 1,000 내지 6,000W, 가장 바람직하게는 2,000 내지 6,000W 이고, 초음파 추출장치의 진동 주파수는 20 내지 80KHz, 바람직하게는 20 내지 60KHz, 더 바람직하게는 30 내지 50KHz이며; 실험시에는 각각 200 내지 2,000W 및 20 내지 80KHz로 할 수 있는 반면, 산업적 응용시에는 소정 범위의 온도에서 2,000 내지 10,000W 및 20 내지 80KHz, 바람직하게는 3,000 내지 8,000W 및 30 내지 60KHz를 이용하여 추출할 수 있다. 초음파 추출시의 온도는 30 내지 50℃가 바람직하며 약 40℃가 더 바람직하다.

단계 3:

찌꺼기의 중량당 부피비로서 8 내지 12배, 바람직하게는 10배의 물을 상기 단계(2)의 찌꺼기에 가하고; 이 혼합물을 70 내지 100℃, 바람직하게는 95℃ 까지 가열하고; 각회마다 1 내지 3시간씩 바람직하게는 2시간씩, 1 내지 3회 바람직하게는 2회 추출하고; 이 추출물 및 탕약의 찌꺼기를 분리한다.

단계 4:

수득한 각각의 추출물을 배합한 뒤 농축 건조하여 최종의 곤충 약재 추출물을 수득한다. 농축 공정은 적절히는 50 내지 60℃에서 실시하여 추출물을 1.05 내지 1.10g/㎤ 정도의 밀도를 갖는 투명한 플래스터로 농축하는 것이며, 건조 공정은 적절히는 50 내지 60℃에서 실시하여 상기의 투명한 플래스터를 감압하에 건조하는 것이다.

본 발명의 한약 조성물을 제조함에 있어서, 인삼 추출은 특별히 한정되지 않으나 다음과 같은 방법을 포함한다:

1. 인삼의 중량에 대한 부피비로 4 내지 12배의 40 내지 95% 에탄올을 이용하여 각회당 1 내지 2시간씩 총 1회 내지 3회에 걸쳐 인삼을 환류 추출하고, 그 추출물을 서로 배합 및 여과한다. 에탄올을 추출물로부터 회수하고 에탄올 재순환후 남은 잔사를 농축 건조 혹은 분무 건조하여 최종 인삼 추출물을 수득한다.

2. 인삼의 중량에 대한 부피비로 4 내지 12배의 40 내지 95% 에탄올을 이용하여 각회당 1 내지 2시간씩 총 1회 내지 3회에 걸쳐 인삼을 환류 추출하고, 그 추출물을 서로 배합 및 여과한다. 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 추출물로부터 에탄올을 회수한다. 인삼의 중량에 대한 부피비로 6 내지 8배의 물을 가하여 상기 추출물을 용해한다. 용액을 사전처리된 거대기공의 수지 컬럼에 통과시킨다. 컬럼을 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 3 내지 8배의 물로 세척하고 물 용리액을 제거한다. 다시 컬럼을 40 내지 95% 에탄올로 세척하고 용리액을 농축하여 에탄올을 회수한 뒤, 감압 건조 혹은 분무 건조하여 최종 인삼 추출물을 수득한다.

3. 인삼의 중량에 대한 부피비로 4 내지 12배의 40 내지 95% 에탄올을 이용하여 각회당 1 내지 2시간씩 총 1회 내지 3회에 걸쳐 인삼을 환류 추출하고, 그 추출물을 서로 배합 및 여과한다. 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 추출물로부터 에탄올을 회수한다. 인삼의 중량에 대한 부피비로 6 내지 8배의 물을 가하여 상기 추출물을 용해한다. 용액을 사전처리된 거대기공의 수지 컬럼에 통과시킨다. 컬럼을 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 3 내지 8배의 물로 세척하고 물 용리액을 제거한다. 다시 컬럼을 40 내지 95% 에탄올로 세척하고 용리액을 알루미나 컬럼에 통과시킨다. 또다시 컬럼을 40 내지 80% 에탄올로 세척하고 용리액을 농축하여 에탄올을 회수한 뒤, 감압 건조 혹은 분무 건조하여 최종 인삼 추출물을 수득한다.

4. 인삼의 중량에 대한 부피비로 4 내지 12배의 물을 이용하여 각회당 1 내지 3시간씩 총 1회 내지 3회에 걸쳐 인삼을 환류 추출하고, 그 추출물을 서로 배합, 여과 및 농축하여 인삼 중량에 대한 부피비로 2 내지 4배의 양으로 만든다. 아직 뜨거울 때(40 내지 80℃), 농축액을 에탄올로 희석하여 40 내지 90%의 에탄올 농도로 만들고 이 용액을 12시간 동안 놓아둔다. 다음에, 상청액을 취하고 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 추출물로부터 에탄올을 회수한다. 인삼의 중량에 대한 부피비로 6 내지 8배의 물을 가하여 상기 추출물을 용해한다. 용액을 사전처리된 거대기공의 수지 컬럼에 통과시킨다. 컬럼을 무색이 될 때까지 1차로 물세척한 후 물 용리액을 버린다. 다음에, 이 컬럼을 다시 컬럼 부피의 3 내지 8배의 40 내지 95% 에탄올로 세척하고 용리액은 알루미나 컬럼에 통과시킨다. 컬럼을 또다시 컬럼 부피의 3 내지 6배의 40 내지 80% 에탄올로 세척하고 용리액을 농축하여 에탄올을 회수한 뒤, 감압 건조 혹은 분무 건조하여 최종 인삼 추출물을 수득한다.

본 발명의 한약 조성물을 제조함에 있어서, 백작약 추출은 특별히 한정되지 않으나 다음과 같은 방법을 포함한다:

1. 백작약의 중량에 대한 부피비로 4 내지 12배의 40 내지 90% 에탄올을 이용하여 각회당 1 내지 3시간씩 총 1회 내지 4회에 걸쳐 백작약을 환류 추출하고, 그 추출물을 서로 혼합 및 여과한다. 에탄올을 추출물로부터 회수하고 에탄올 재순환후 남은 잔사를 농축한 뒤, 건조 혹은 분무 건조하여 최종 백작약 추출물을 수득한다.

2. 백작약의 중량에 대한 부피비로 4 내지 12배의 40 내지 90% 에탄올을 이용하여 각회당 1 내지 2시간씩 총 1회 내지 3회에 걸쳐 백작약 추출하고, 그 추출물을 서로 배합 및 여과한다. 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 추출물로부터 에탄올을 회수한다. 백작약의 중량에 대한 부피비로 6 내지 8배의 물을 가하여 상기 추출물을 용해한다. 용액을 사전처리된 거대기공의 수지 컬럼에 통과시킨다. 컬럼을 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 3 내지 8배의 물로 세척하고 물 용리액을 제거한다. 다시 컬럼 부피의 3 내지 8배의 30 내지 90% 에탄올로 컬럼을 세척하고 에탄올 회수후 용리액을 농축한 뒤, 감압 건조 혹은 분무 건조하여 최종 백작약 추출물을 수득한다.

3. 백작약의 중량에 대한 부피비로 4 내지 12배의 40 내지 90% 에탄올을 이용하여 각회당 1 내지 2시간씩 총 1회 내지 3회에 걸쳐 백작약을 환류 추출하고, 그 추출물을 서로 배합 및 여과한다. 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 추출물로부터 에탄올을 회수한다. 백작약의 중량에 대한 부피비로 6 내지 8배의 물을 가하여 상기 추출물을 용해한다. 용액을 사전처리된 거대기공의 수지 컬럼에 통과시킨다. 컬럼을 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 3 내지 8배의 물로 세척하고 물 용리액을 제거한다. 다시 컬럼 부피의 3 내지 8배의 30 내지 90% 에탄올로 세척하고 용리액을 알루미나 컬럼에 통과시킨다. 컬럼을 30 내지 80% 에탄올로 세척하고 에탄올 회수후 용리액을 농축한 뒤, 감압 건조 혹은 분무 건조하여 최종 백작약 추출물을 수득한다.

4. 백작약의 중량에 대한 부피비로 4 내지 12배의 물을 이용하여 각회당 1 내지 2시간씩 총 1회 내지 3회에 걸쳐 백작약을 환류 추출하고, 그 추출물을 서로 배합 및 농축하여 백작약 중량에 대한 부피비로 2 내지 4배의 양으로 만든다. 아직 뜨거울 때(40 내지 80℃), 농축액을 에탄올로 희석하여 60 내지 85%의 에탄올 농도로 만든 후 이 용액을 12시간 동안 놓아둔다. 다음에, 상청액을 취하고 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 추출물로부터 에탄올을 회수한다. 백작약의 중량에 대한 부피비로 6 내지 8배의 물을 가하여 상기 추출물을 용해한다. 용액을 사전처리된 거대기공의 수지 컬럼에 통과시킨다. 컬럼을 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 3 내지 8배의 물로 세척한 후 물 용리액을 버린다. 다음에, 이 컬럼을 다시 컬럼 부피의 3 내지 8배의 30 내지 90% 에탄올로 세척하고 용리액은 알루미나 컬럼에 통과시킨다. 컬럼을 또다시 컬럼 부피의 3 내지 6배의 30 내지 80% 에탄올로 세척하고 에탄올 회수후 용리액을 농축한 뒤, 감압 건조 혹은 분무 건조하여 최종 백작약 추출물을 수득한다.

5. 백작약의 중량에 대한 부피비로 4 내지 12배의 30 내지 90% 에탄올을 이용하여 각회당 1 내지 2시간씩 총 1회 내지 3회에 걸쳐 백작약을 환류 추출하고, 그 추출물을 서로 배합 및 여과한다. 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 추출물로부터 에탄올을 회수한다. 백작약의 중량에 대한 부피비로 6 내지 8배의 물을 가하여 상기 추출물을 용해한 후 이를 12시간 동안 놓아둔다. 상청액을 취하여 사전처리된 거대기공의 수지 컬럼에 통과시킨다. 컬럼을 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 3 내지 8배의 물로 세척한 후 물 용리액을 버린다. 다음에, 이 컬럼을 다시 컬럼 부피의 3 내지 8배의 30 내지 90% 에탄올로 세척하고 용리액은 알루미나 컬럼에 통과시킨다. 컬럼을 또다시 40 내지 80% 에탄올로 세척하고 에탄올 회수후 용리액을 농축한 뒤, 감압 건조 혹은 분무 건조하여 최종 백작약 추출물을 수득한다.

본 발명의 한약 조성물을 조제함에 있어서, 산동인 추출은 특별히 한정되지 않으나 다음과 같은 방법을 포함한다:

1. 산동인의 중량에 대한 부피비로 4 내지 12배의 40 내지 90% 에탄올을 이용하여 각회당 1 내지 3시간씩 총 1회 내지 3회에 걸쳐 산동인을 환류 추출하고, 그 추출물을 서로 혼합 및 여과한다. 에탄올을 추출물로부터 회수하고 에탄올 회수 후 남은 잔사를 감압하에 농축 건조 혹은 분무 건조하여 최종 산동인 추출물을 수득한다.

2. 산동인의 중량에 대한 부피비로 4 내지 12배의 40 내지 90% 에탄올을 이용하여 각회당 1 내지 3시간씩 총 1회 내지 3회에 걸쳐 산동인을 추출하고, 그 추출물을 서로 배합 및 여과한다. 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 추출물로부터 에탄올을 회수한다. 산동인의 중량에 대한 부피비로 6 내지 8배의 물을 가하여 상기 추출물을 용해한다. 용액을 사전처리된 거대기공의 수지 컬럼에 통과시킨다. 컬럼을 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 3 내지 8배의 물로 세척하고 물 용리액을 제거한다. 다시 컬럼 부피의 3 내지 8배의 30 내지 90% 에탄올로 컬럼을 세척하고 에탄올 회수후 용리액을 농축한 뒤, 건조 혹은 분무 건조하여 최종 산동인 추출물을 수득한다.

3. 산동인의 중량에 대한 부피비로 4 내지 12배의 40 내지 95% 에탄올을 이용하여 각회당 1 내지 3시간씩 총 1회 내지 3회에 걸쳐 산동인을 환류 추출하고, 그 추출물을 서로 배합 및 여과한다. 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 추출물로부터 에탄올을 회수한다. 산동인의 중량에 대한 부피비로 6 내지 8배의 물을 가하여 상기 추출물을 용해하고 이 용액을 12시간 동안 놓아둔다. 상청액을 취하여 이를 사전처리된 수지 컬럼에 통과시킨다. 컬럼을 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 3 내지 8배의 물로 세척하고 물 용리액을 제거한다. 다시 컬럼 부피의 3 내지 8배의 30 내지 90% 에탄올로 세척하고 용리액을 알루미나 컬럼에 통과시킨다. 컬럼을 40 내지 80% 에탄올로 세척하고 에탄올 회수후 용리액을 농축한 뒤, 감압 건조 혹은 분무 건조하여 최종 산동인 추출물을 수득한다.

4. 산동인의 중량에 대한 부피비로 4 내지 12배의 물을 이용하여 각회당 1 내지 3시간씩 총 1회 내지 3회에 걸쳐 산동인을 환류 추출하고 그 수성 추출물을 서로 배합 및 농축하여 산동인 중량의 2 내지 4배의 양으로 만든다. 아직 뜨거울 때(40 내지 80℃), 농축액을 에탄올로 희석하여 60 내지 85%의 에탄올 농도로 만든 후 이 용액을 12시간 동안 놓아둔다. 다음에, 상청액을 취하고 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 추출물로부터 에탄올을 회수한다. 산동인의 중량에 대한 부피비로 6 내지 8배의 물을 가하여 상기 추출물을 용해한다. 용액을 사전처리된 거대기공의 수지 컬럼에 통과시킨다. 컬럼을 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 6 내지 8배의 물로 세척한 후 물 용리액을 버린다. 다음에, 이 컬럼을 다시 컬럼 부피의 3 내지 8배의 30 내지 90% 에탄올로 세척하고 용리액은 알루미나 컬럼에 통과시킨다. 컬럼을 또다시 컬럼 부피의 3 내지 6배의 30 내지 80% 에탄올로 세척하고 에탄올 회수 후 용리액을 농축한 뒤, 감압 건조 혹은 분무 건조하여 최종 산동인 추출물을 수득한다.

본 발명의 한약 조성물을 조제함에 있어서, 강진향 추출은 특별히 한정되지 않으나 다음과 같은 방법을 포함한다:

1. 강진향의 중량에 대한 부피비로 4 내지 15배의 물을 이용하여 약 4시간 동안 증류처리해서 휘발성 정유를 추출한다. 휘발성 정유을 수거하여 최종 강진향 추출물을 수득한다.

2. 강진향을 초임계 CO₂ 추출법으로 추출한 후 강진향 중량의 10 내지 50중량%으로 70 내지 100% 에탄올을 조정제로서 첨가한다. 추출물을 수거 및 건조하여 최종 강진향 추출물을 수득한다.

3. 강진향의 중량에 대한 부피비로 4 내지 15배의 석유 에테르를 이용하여 4시간 정도 추출함으로써 강진향으로부터 휘발성 정유를 얻고 이를 수거하여 최종 강진향 추출물을 수득한다.

본 발명의 한약 조성물을 조제함에 있어서, 단향 추출은 특별히 한정되지 않으나 다음과 같은 방법을 포함한다:

1. 단향의 중량에 대한 부피비로 4 내지 15배의 물을 이용하여 약 4시간 동안 증류처리해서 휘발성 정유를 추출한다. 휘발성 정유을 수거하여 최종 단향 추출물을 수득한다.

2. 단향을 초임계 CO₂ 추출법으로 추출한 후 단향 중량의 10 내지 50중량%으로 70 내지 100% 에탄올을 조정제로서 첨가한다. 추출물을 수거 및 건조하여 최종 단향 추출물을 수득한다.

3. 단향의 중량에 대한 부피비로 4 내지 15배의 석유 에테르를 이용하여 4시간 정도 추출함으로써 단향으로부터 휘발성 정유를 얻고 이를 수거하여 최종 단향 추출물을 수득한다.

본 발명의 한약 조성물을 조제함에 있어서, 조제 유향의 추출은 특별히 한정되지 않으나 다음과 같은 방법을 포함한다:

1. 조제 유향의 중량에 대한 부피비로 4 내지 15배의 물을 이용하여 약 4시간 동안 증류처리해서 휘발성 정유를 추출한다. 휘발성 정유를 수거하여 최종 조제 유향 추출물을 수득한다.

2. 조제 유향의 중량에 대한 부피비로 4 내지 15배의 물을 이용하여 약 4시간 동안 증류처리해서 휘발성 정유를 추출한다. 휘발성 정유를 수거하고, 찌꺼기를 동결건조하고, 상기 휘발성 정유 및 동결건조된 찌꺼기를 상기 조제 유향의 추출물로 한다.

3. 조제 유향을 초임계 CO₂ 추출법으로 추출한 후 조제 유향 중량의 10 내지 50중량%으로 70 내지 100% 에탄올을 조정제로서 첨가한다. 추출물을 수거 및 건조하여 최종 조제 유향 추출물을 수득한다.

4. 조제 유향의 중량에 대한 부피비로 4 내지 15배의 석유 에테르를 이용하여 4시간 정도 추출함으로써 조제 유향으로부터 휘발성 정유를 얻고 이를 수거하여 최종 조제 유향 추출물을 수득한다.

5. 조제 유향의 중량에 대한 부피비로 4 내지 15배의 물을 이용하여 4시간 동안 증류처리해서 휘발성 정유를 추출하고, 찌꺼기는 이의 중량에 대한 부피비로 4 내지 15배의 에탄올로 각회 1 내지 2시간 동안 총 1 내지 3회에 걸쳐 추출하고, 에탄올 용액을 배합 및 농축, 감압 건조 또는 동결 건조하고, 또한 휘발성 정유 및 상기 건조된 산물을 최종 조제 유향 추출물로 한다.

본 발명의 한약 조성물을 제조함에 있어서, 용뇌 포집 화합물은 다음의 방법에 따라 조제한다:

처방 용량의 용뇌를 분쇄하여 60메쉬의 거친 입자물로 준비하고; 용뇌 중량의 1 내지 3배의 PEG-6000을 60 내지 80℃에서 가열 융해한 뒤 상기 용뇌 분말을 가하고 강하게 교반한다. 저온으로 냉각한 후 혼합물을 분쇄하여 60메쉬의 미분말로 만들어 용뇌 포집 화합물을 수득한다.

본 발명의 한약 조성물을 제조함에 있어서, 곤충 약재를 제외한 7가지 약재를 각각 다음과 같은 공정에 따라 추출 혹은 조제하는 것이 바람직하다:

- 처방 용량의 인삼을 분쇄하여 거친 입자물로 만들고 인삼 중량에 대한 부피비로 10배의 70% 에탄올을 이용하여 각회마다 2시간씩 총 2회 환류 추출하며, 상기 추출 온도는 95℃로 하고 상기 추출물을 배합하여 준비하고; 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 상기 추출물로부터 에탄올을 회수하고; 인삼 중량에 대한 부피비로 10배의 물을 첨가한다. 이 용액을 12시간 동안 놓아둔 후 여과하고; 여액을 사전처리된 AB-8 거대기공 수지 컬럼에 통과시키고; 컬럼을 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 4배의 물로 세척한 후 물 용리액을 버리고; 이 컬럼을 다시 컬럼 부피의 5배의 70% 에탄올로 세척하고 용리액은 농축 후 분무 건조하여 최종 인삼 추출물을 수득하고;

- 처방 용량의 백작약을 분쇄하여 거친 입자물로 만들고 백작약 중량에 대한 부피비로 10배의 50% 에탄올을 이용하여 각회마다 2시간씩 총 2회 환류 추출하며, 추출 온도를 95℃로 하고 추출물을 서로 배합하고; 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 추출물로부터 에탄올을 회수하고; 백작약 중량에 대한 부피비로 8배의 물을 가하고; 용액을 12시간 동안 놓아둔 후 여과하고; 이 여액을 사전처리된 AB-8 거대기공 수지 컬럼에 통과시키고; 컬럼을 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 5배의 물로 세척하고 물 용리액을 버리고; 이 컬럼을 다시 컬럼 부피의 5배의 70% 에탄올로 세척하고 용리액을 농축 및 분무 건조하여 최종 백작약 추출물을 수득하고;

- 처방 용량의 산동인을 분쇄하여 거친 입자물로 만들고 산동인 중량에 대한 부피비로 10배의 80% 에탄올을 이용하여 각회마다 2시간씩 총 2회 환류 추출하며,추출 온도를 95℃로 하고 추출물을 서로 배합하고; 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 추출물로부터 에탄올을 회수하고; 산동인 중량에 대한 부피비로 8배의 물을 가하고; 용액을 12시간 동안 놓아둔 후 여과하고; 이 여액을 사전처리된 AB-8 거대기공 수지 컬럼에 통과시키고; 컬럼을 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 4배의 물로 세척하고 물 용리액을 버리고; 이 컬럼을 다시 컬럼 부피의 5배의 80% 에탄올로 세척하고 용리액을 농축 및 분무 건조하여 최종 산동인 추출물을 수득하고;

- 처방 용량의 강진향을 이의 중량에 대한 부피비로 8배의 물을 이용하여 6시간 동안 증류처리하여 휘발성 정유를 추출하고;

- 처방 용량의 단향을 이의 중량에 대한 부피비로 8배의 물을 이용하여 4시간 동안 증류처리하여 휘발성 정유를 추출하고;

- 처방 용량의 조제 유향을 이의 중량에 대한 부피비로 8배의 물을 이용하여 6시간 동안 증류처리하여 휘발성 정유를 수거하고; 찌꺼기는 조제 유향의 중량에 대한 부피비로 6배의 에탄올을 이용하여 각회 1시간씩 총 2회 추출하며, 이 에탄올 추출물을 상기 수거물과 배합한 뒤 농축 및 감압 건조하고; 또한

- 처방 용량의 용뇌를 분쇄하여 거친 입자물로 만들고, 여기에 용뇌 중량에 대한 부피비로서 2배의 용융 기질 PEG-6000을 강하게 교반하면서 첨가하고; 혼합물을 0 내지 20℃의 저온으로 냉각한 후 분쇄하여 미세분말로 만든다.

상술한 한약재 원료의 추출 공정에서, 거대기공 수지 컬럼은 D101, NKA-9, DA201, DM130, WLD-3, HPD-400, HPD-450, HPD-500 및 AB-8로 이루어진 군에서 선택되는 거대기공 수지를 이용하며; 상기 알루미늄 컬럼은 또한 산성 알루미나 컬럼, 중성 알루미나 컬럼 혹은 알칼리성 알루미나 컬럼일 수 있다.

상술한 한약재 원료의 추출 공정에서, 인삼 추출물은 총 10 내지 60% 이상의인삼 여주(momordica) 사포닌을 함유하며, 백작약 추출물은 총 15 내지 70% 이상의 백작약 사포닌을 함유하고, 또한 산동인 추출물은 총 10 내지 60% 이상의 산동인 여주 사포닌을 함유한다.

본 발명의 추출 공정에서, 상기 강진향, 단향 및 조제 유향은 각각 별도로 추출하거나 이들 중 2가지 또는 3가지를 함께 추출할 수도 있다.

상술한 방법에 따라 제조한 본 발명의 한약 조성물의 산물은 태블릿, 경구 붕해형 태블릿, 분산성 태블릿, 발포성 태블릿, 캡슐, 정제, 과립, 경구액제, 마이크로필, 마이크로캡슐 혹은 분무제 등의 형태로 될 수 있다. 본 발명의 제형에서 이용되는 부형제는 붕해제, 충전제, 윤활제, 접착제, 흡수제, 분산제, 계면활성제, 현탁물, 방부제, 착색제, 항산화제, 현탁제, 습윤제, 가용화제, 추진제 혹은 코팅제나 이들의 혼합물 중에서 선택할 수 있다.

본 발명의 곤충 약재는 전갈, 지네, 지별, 수질 및 선태를 포함한다. 이들 다섯가지 곤충 약재는 각각 혹은 함께 추출할 수 있다. 곤충 약재의 추출 공정은 상술한 바와 같으므로 반복하여 설명하지 않는다.

공지 기술과 비교시, 본 발명은 저온 추출 및 고온 추출을 조합하여 곤충 약재를 효과적으로 추출한다. 수득한 추출물의 치료 효능은 저온 추출만으로 얻은 추출물보다 훨씬 향상되며 따라서 곤충 약재의 필요량이 크게 감소한다. 본 발명의 한약 조성물은 효과적인 제조 공정의 실현, 특이적이고 현저한 치료 효능 및 필요한 투약량 감소 등의 장점이 있다. 약동학적 측면의 비교 실험을 통해, 본 발명 조성물의 제형이 항-심근 허혈증 및 항-혈소판 응집 효능이 크고, 심장병, 협심증, 심근경색 등의 치료에 더욱 우수한 효과를 발휘하는 것을 확인하였다.

이상과 같이, 본 발명의 제조 방법 및 제형에 대해 기술하였으며, 이를 바람직한 구현예를 들어 다음과 같이 더욱 상세히 기술하나, 본원 발명이 이들 구현예에 의해 한정되는 것은 아니다.

실시예 1

본 발명에 따른 곤충 약재 추출물 및 이를 함유하는 것으로서 캡슐 형태의 한약 조성물의 구체적인 제법을 설명한다.

처방 용량으로서 수질 2075g, 지별 1375g, 지네 275g, 전갈 1375g 및 선태 1375g을 분쇄하여 24메쉬의 거친 입자물로 준비한다. 이들 곤충 약재의 중량에 대한 부피비로 10배의 물을 가하고 그 혼합물을 60℃까지 가열하고 3시간 동안 동적 추출한다. 추출물 및 찌꺼기는 서로 분리한다. 찌꺼기의 중량에 대한 부피비로서 8배의 물을 찌꺼기에 첨가하고 그 혼합물을 최고 60℃까지 가열하고 다시 2시간 동안 동적 추출한다. 이 추출물 및 찌꺼기를 서로 분리한다. 찌꺼기의 중량에 대한 부피비로서 10배의 물을 찌꺼기에 첨가하고 그 혼합물을 95℃까지 가열하고 2시간 동안 동적 추출한다. 다시 결과로 나온 추출물 및 찌꺼기를 서로 분리한다. 또다시 찌꺼기의 중량에 대한 부피비로서 8배의 물을 찌꺼기에 첨가하고 그 혼합물을 95℃까지 가열하고 1시간 동안 동적 추출한다. 추출물 및 찌꺼기를 다시 분리한다. 이 4가지 수성 추출물을 서로 배합 및 구형 진공농축 탱크 (기종: QN-500, Wenzhou Lihong Light Industry Machinery Co., Ltd. 제작)를 이용하여 55℃에서 농축하여 1.20g/㎤ (40℃에서 측정시) 밀도의 투명한 플래스터를 만든다. 투명한 플래스터는 60℃의 진공 건조 오븐에서 건조한다 (기종: DGT2006, Chongqing Hengda Instruments Manufacture Co., Ltd. 제작). 상기 곤충 약재의 최종 추출물을 1180g의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 1100g의 인삼을 인삼 중량에 대한 부피비로서 10배, 8배 및 6배의 70% 에탄올을 이용하여 각각 환류 추출하며 추출 시간은 각각 2시간, 2시간 및 1시간으로 하고 추출 온도는 95℃이며; 상기 추출물을 서로 배합한다. 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 추출물로부터 에탄올을 회수한다. 인삼의 중량에 대한 부피비로서 10배의 물(ml/g)을 첨가한다. 용액을 12시간 동안 놓아둔 후 여과하고; 이 여액을 사전처리된 AB-8 거대기공 수지 컬럼에 통과시킨다 (Wuxi Xuelang Chemical Equipments Co. Ltd. 제작). 이때 수지에 대한 인삼의 비는 1:2 (g/ml)이고 또한 컬럼의 종횡비는 1:9이다. 컬럼은 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 4배의 물로 세척하고 이 물 용리액을 버린다. 다음에, 컬럼을 컬럼 부피의 5배의 70% 에탄올을 이용하여 세척하고 그 용리액을 농축 및 분무 건조하여 40.5g의 컬럼 정제 된 인삼 추출을 수득한다.

처방 용량으로서 950g의 백작약을 분쇄하여 거친 입자물로 준비하고 이를 백작약 중량에 대한 부피비로서 10배, 8배 및 6배의 50% 에탄올을 각각 이용하여 환류 추출하고 이때의 추출 시간은 각각 2시간, 2시간 및 1시간으로 하고 또한 추출 온도는 95℃로 하며; 상기 추출물을 서로 배합한다. 에탄올을 추출물로부터 회수하고 나머지 용액은 농축하여 1.18g/㎤ 밀도(55℃에서 측정시)의 투명 플래스터를 형성하고 이를 분무 건조하여 최종 백작약 추출물을 250g의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 925g의 산동인을 분쇄하여 거친 입자물로 준비하고 이를 산동인 중량에 대한 부피비로서 8배, 8배 및 6배의 80% 에탄올을 각각 이용하여 환류 추출하고 이때의 추출 시간은 각각 2시간, 2시간 및 1시간으로 하고 또한 추출 온도는 95℃로 하며; 상기 추출물을 서로 배합한다. 에탄올을 추출물로부터 회수하고 나머지 용액은 농축하여 1.18g/㎤ 밀도(50℃에서 측정시)의 투명 플래스터를 형성하고 이를 분무 건조하여 최종 산동인 추출물을 130g의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 475g의 강진향 및 450g의 단향을 수증기로 6시간 동안 증류처리하여 휘발성 정유를 추출한다. 강진향 및 단향의 휘발성 정유를 11ml의 양으로 수득하고 수성 추출물을 농축하여 1.18g/㎤ 밀도(50℃에서 측정시)의 투명 플래스터를 형성하고 이를 분무 건조하여 최종 강진향 및 단향 추출물을 18g의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 450g의 조제 유향을 분쇄하여 60메쉬의 미세분말로 준비한다.

처방 용량으로서 275g의 용뇌를 분쇄하여 미세분말로 준비하고 이를 280g의 용융 기질 PEG-6000 (폴리에틸렌글리콜-6000, Tianjin Guangfu Fine Chemical Institution 제품)에 첨가한다. 여기에 상술한 휘발성 정유를 가하고 그 혼합물을 충분히 교반하여 동결기에 부어 냉각한 뒤 분쇄하여 60메쉬의 분말로 만든다. 556g의 용뇌 포집 화합물 및 휘발성 정유를 수득한다.

상술한 곤충 약재 추출물, 인삼, 백작약, 산동인, 강진향 및 단향을 배합하여 70% 에탄올을 이용하여 과립화하고, 여기에 조제 유향 분말, 용뇌 포집 화합물 및 휘발성 정유를 첨가한 뒤 잘 혼합하여 20,000개의 캡슐에 충전한다. 본 발명의 방법에 따라 제조한 한약 조성물을 수득하고 이를 "S1" 라고 한다.

실시예 2

처방 용량으로서 수질 2075g, 지별 1375g, 지네 275g, 전갈 1375g 및 선태 1375g을 분쇄하여 24메쉬의 거친 입자물로 준비한다. 이들 곤충 약재의 중량에 대한 부피비로 각각 10배, 8배 및 8배의 물을 가한다. 혼합물을 3회 초음파 추출하고 (250W, 40KHz 및 35℃) 추출 시간은 각각 2시간, 2시간 및 1시간으로 한다. 수성 추출물을 서로 배합한다. 찌꺼기의 중량에 대한 부피비로서 10배 및 8배의 물을 찌꺼기에 첨가하고 그 혼합물을 최고 95℃까지 가열하고 각각 2시간 및 1시간 동안 추출한다. 5가지 추출물을 배합하여 실시예 1에서와 동일한 농도, 건조 장치 및 조건하에 농축하여 1.18g/㎤ (40℃에서 측정시) 밀도의 투명한 플래스터를 만든 다. 투명한 플래스터는 저온에서 감압하에 건조한다. 수질, 지별, 지네, 전갈 및 선태의 최종 추출물을 1175g의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 1100g의 인삼을 인삼 중량에 대한 부피비로서 10배, 8배 및 6배의 70% 에탄올을 이용하여 각각 환류 추출하며 추출 시간은 각각 2시간, 2시간 및 1시간으로 하고 추출 온도는 95℃이며; 상기 추출물을 서로 배합한다. 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 추출물로부터 에탄올을 회수하고 나머지 용액은 농축하여 1.10g/㎤ (50℃에서 측정시) 밀도의 투명한 플래스터로 만든 후 분무 건조하여 인삼의 에탄올 추출물을 220g의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 950g의 백작약을 분쇄하여 거친 입자물로 준비하고 이를 백작약 중량에 대한 부피비로서 10배, 8배 및 6배의 물을 이용하여 환류 추출하고 이때의 추출 시간은 각각 2시간, 2시간 및 1시간으로 하고 또한 추출 온도는 99℃로 하며; 상기 추출물을 서로 배합 및 농축하여 1900ml로 만든다. 에탄올을 가하여 70부피%의 에탄올 농도로 만든 후 이 용액을 12시간 동안 놓아둔다. 상청액을 취하여 이로부터 에탄올을 회수하고 나머지 용액은 농축하여 1.10g/㎤ 밀도(50℃에서 측정시)의 투명 플래스터를 형성하고 이를 분무 건조하여 최종 백작약 추출물을 230g의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 925g의 산동인을 분쇄하여 거친 입자물로 준비하고 이를 산동인 중량에 대한 부피비로서 10배, 8배 및 6배의 80% 에탄올을 각각 이용하여 환류 추출하고 이때의 추출 시간은 각각 2시간, 2시간 및 1시간으로 하고 또한 추출 온도는 99℃로 한다. 수성 추출물을 서로 배합 및 농축하여 산동인 중량에 대한 부피비로 2배의 양(ml/g)으로 만든다. 아직 뜨거울 때(60℃), 농축액을 에탄올로 희석하여 80부피%의 에탄올 농도로 만들고 이 용액을 12시간 동안 놓아둔다. 상청액을 취하고 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 추출물로부터 에탄올을 회수한다. 나머지 용액은 농축하여 1.10g/㎤ 밀도(50℃에서 측정시)의 투명 플래스터를 형성하고 이를 분무 건조하여 최종 산동인 추출물을 105g의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 475g의 강진향 및 450g의 단향을 물로 6시간 동안 증류처리하여 휘발성 정유를 추출한다. 강진향 및 단향의 휘발성 정유를 11ml의 양으로 수득하고 수성 추출물을 농축하여 1.10g/㎤ 밀도(50℃에서 측정시)의 투명 플래스터를 형성하고 이를 분무 건조하여 최종 강진향 및 단향 추출물을 18g의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 450g의 조제 유향을 분쇄하여 미세분말로 준비한다.

275g의 용뇌를 분쇄하여 미세분말로 준비한다.

상술한 곤충 약재 추출물, 인삼, 백작약, 산동인, 강진향 및 단향을 분쇄하여 80메쉬의 미세분말로 준비하고 이를 조제 유황 분말과 혼합 및 70% 에탄올을 이용하여 과립화한다. 건조후, 용뇌 혼합물 및 소정량의 에탄올에 용해한 휘발성 정유를 상기 과립 혼합물에 분무 첨가한 뒤 틈새를 30분간 봉입하여 메운다. 혼합물을 타정하여 20,000개의 태블릿을 만든다. 본 발명의 방법에 따라 제조한 한약 조성물의 제형을 수득한다.

실시예 3

본 발명에 따른 곤충 약재 추출물 및 이를 함유하는 것으로서 연성 캡슐 형 태의 한약 조성물의 구체적인 제법을 설명한다.

처방 용량으로서 수질 2075g, 지별 1375g, 지네 275g, 전갈 1375g 및 선태 1375g을 분쇄하여 24메쉬의 거친 입자물로 준비한다. 이들 곤충 약재의 중량에 대한 부피비로 각각 10배, 8배 및 8배의 물을 가한다. 혼합물을 3회 초음파 추출하고 (1500W, 40KHz 및 40℃) 추출 시간은 각각 3시간, 2시간 및 2시간으로 한다. 추출물을 서로 배합한다. 찌꺼기의 중량에 대한 부피비로서 10배 및 8배의 물을 찌꺼기에 각각 첨가하고 그 혼합물을 최고 98℃까지 가열하고, 추출 시간은 각각 2시간 및 1시간으로 한다. 5가지 추출물을 배합하여 실시예 1에서와 동일한 농도, 건조 장치 및 조건하에 농축하여 1.10g/㎤ (40℃에서 측정시) 밀도의 투명한 플래스터를 만든다. 투명한 플래스터는 저온에서 감압하에 건조한다. 수질, 지별, 지네, 전갈 및 선태의 최종 추출물을 1170g의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 1100g의 인삼을 인삼 중량에 대한 부피비로서 10배, 8배 및 6배의 70% 에탄올을 이용하여 각각 환류 추출하며 추출 시간은 각각 2시간, 2시간 및 1시간으로 하고 추출 온도는 95℃이며; 상기 추출물을 서로 배합한다. 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 추출물로부터 에탄올을 회수한다. 인삼 중량의 중량에 대한 부피비로 10배의 물을 첨가한다. 용액을 12시간 동안 놓아둔 후 여과하고, 그 여액을 사전처리된 AB-8 거대기공 수지 컬럼 (Wuxi Xuelang Chemical Instrument 제작)에 통과시키며 이때의 인삼 대 수지비는 1:2(g/ml)이고 컬럼의 종횡비는 1:9이다. 컬럼을 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 4배의 물로 세척하고 물 용리액을 버린다. 다음에, 컬럼을 다시 컬럼 부피의 5배의 70% 에탄올로 세척하고 그 용리액을 농축 및 분무 건조하여 컬럼 정제된 인삼 추출물을 40.5g의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 950g의 백작약을 분쇄하여 거친 입자물로 준비하고 이를 백작약 중량에 대한 부피비로서 10배, 8배 및 6배의 50% 에탄올을 이용하여 환류 추출하고 이때의 추출 시간은 각각 2시간, 1.5시간 및 1시간으로 하고 또한 추출 온도는 95℃로 하며; 상기 추출물을 서로 배합한다. 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 추출물로부터 에탄올을 회수한다. 백작약 중량에 대한 부피비로 10배의 물을 첨가한다. 이 용액을 12시간 동안 놓아둔 후 여과하고; 그 여액을 사전처리된 AB-8 거대기공 수지 컬럼 (Wuxi Xuelang Chemical Instrument 제작)에 통과시키며 이때의 인삼 대 수지비는 1:2.2(g/ml)이고 컬럼의 종횡비는 1:8이다. 컬럼을 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 4배의 물로 세척하고 물 용리액을 버린다. 다음에, 컬럼을 다시 컬럼 부피의 6배의 70% 에탄올로 세척하고 그 용리액을 농축 및 분무 건조하여 컬럼 정제된 백작약 추출물을 92.5g의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 925g의 산동인을 분쇄하여 거친 입자물로 준비하고 이를 산동인 중량에 대한 부피비로서 8배, 8배 및 6배의 80% 에탄올을 각각 이용하여 환류 추출하고 이때의 추출 시간은 각각 2시간 및 1시간으로 하고 또한 추출 온도는 95℃로 하며 추출물을 서로 배합한다. 산동인 중량에 대한 부피비로 10배의 물을 첨가한다. 용액을 12시간 동안 놓아둔 후 여과하고; 그 여액을 사전처리된 D-101 거대기공 수지 컬럼 (Wuxi Xuelang Chemical Instrument 제작)에 통과하고 이때 산동인 대 수지의 비는 1:2(g/ml)이고 컬럼의 종횡비는 1:8이다. 컬럼을 무색이 될 때 까지 컬럼 부피의 4배의 물로 세척하고 물 용리액을 버린다. 다음에, 이 컬럼을 컬럼 부피의 6배의 80% 에탄올로 세척하고 그 용리액을 농축 및 분무 건조하여 컬럼 조제된 산동인 추출물을 32g의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 475g의 강진향 및 450g의 단향을 물로 6시간 동안 증류처리하여 휘발성 정유를 추출한다. 강진향 및 단향의 휘발성 정유를 24ml의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 275g의 용뇌를 분쇄하여 미세분말로 준비한다.

상술한 추출물, 휘발성 정유 및 용뇌를 잘 혼합하고 수득 추출물에 대해 중량비로서 1.9배의 식물성 오일을 첨가한다. 혼합물을 콜로이드 밀로 분쇄하여 20,000개의 연성 캡슐을 형성한다. 경구 투약시 일일 3회 각회마다 2 내지 4개의 캡슐을 투약한다.

실시예 4

본 발명에 따른 곤충 약재 추출물 및 이를 함유하는 것으로서 정제 형태의 한약 조성물의 구체적인 제법을 설명한다.

처방 용량으로서 수질 2075g, 지별 1375g, 지네 275g, 전갈 1375g 및 선태 1375g을 분쇄하여 24메쉬의 거친 입자물로 준비하고 이를 각각 추출한다. 곤충 약재 각각의 추출 단계는 다음과 같다: 곤충 약재의 중량에 대한 부피비로 각각 10배 및 8배의 물을 가하고, 추출온도는 60℃이며 추출 시간은 각각 3시간 및 2시간으로 한다. 추출물 및 찌꺼기를 분리한다. 찌꺼기를 다음과 같이 2회 추출한다: 찌꺼기의 중량에 대한 부피비로서 10배 및 8배의 물을 찌꺼기에 각각 첨가하고 추출 온도 를 98℃로 하고 추출 시간을 각각 2시간 및 1시간으로 한다. 4가지 추출물을 배합하여 실시예 1에서와 동일한 농도, 건조 장치 및 조건하에 농축하여 1.08g/㎤ (40℃에서 측정시) 밀도의 투명한 플래스터를 만든다. 투명한 플래스터는 50℃에서 감압 건조하여 상기 곤충 약재의 수성 추출물을 얻는다. 수질, 지별, 지네, 전갈 및 선태의 수성 추출물은 각각 481g, 262g, 50g, 255g 및 152g이고 이들 수성 추출물의 총량은 1200g이 된다.

처방 용량으로서 1100g의 인삼을 인삼 중량에 대한 부피비로서 10배, 8배 및 6배의 70% 에탄올을 이용하여 각각 환류 추출하며 추출 시간은 각각 2시간, 2시간 및 1시간으로 하고 추출 온도는 95℃이며; 상기 추출물을 서로 배합한다. 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 추출물로부터 에탄올을 회수한다. 인삼 중량의 중량에 대한 부피비로 10배의 물을 첨가한다. 용액을 12시간 동안 놓아둔 후 여과하고, 그 여액을 사전처리된 AB-8 거대기공 수지 컬럼 (Wuxi Xuelang Chemical Instrument 제작)에 통과시키며 이때의 인삼 대 수지비는 1:2(g/ml)이고 컬럼의 종횡비는 1:9이다. 컬럼을 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 4배의 물로 세척하고 물 용리액을 버린다. 다음에, 컬럼을 다시 컬럼 부피의 5배의 70% 에탄올로 세척하고 그 용리액을 알루미나 컬럼에 통과시키고 (인삼 대 알루미나 중량비는 1:1), 다시 컬럼을 50% 에탄올로 세척한 뒤 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 농축 및 분무 건조하여 컬럼 정제된 인삼 추출물을 34.5g의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 950g의 백작약을 분쇄하여 거친 입자물로 준비하고 이를 백작약 중량에 대한 부피비로서 10배, 8배 및 6배의 50% 에탄올을 이용하여 환류 추 출하고 이때의 추출 시간은 각각 2시간, 1.5시간 및 1시간으로 하고 또한 추출 온도는 95℃로 하며; 상기 추출물을 서로 배합한다. 추출물로부터 에탄올을 회수한다. 상청액을 사전처리된 AB-8 거대기공 수지 컬럼에 통과시키고 이때 백작약 대 수지의 비가 1:2.3(g/ml)이고 컬럼의 종횡비는 1:10이다. 컬럼을 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 5배의 물로 세척하고 물 용리액을 버린다. 다음에, 컬럼을 다시 컬럼 부피의 8배의 50% 에탄올로 세척하고 그 용리액을 농축 및 분무 건조하여 컬럼 정제된 백작약 추출물을 94.5g의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 925g의 산동인을 분쇄하여 거친 입자물로 준비하고 이를 산동인 중량에 대한 부피비로서 8배, 8배 및 6배의 80% 에탄올을 각각 이용하여 환류 추출하고 이때의 추출 시간은 각각 2시간, 2시간 및 1시간으로 하고 또한 추출 온도는 95℃로 하며 추출물을 서로 배합한다. 산동인을 사전처리된 HPD-400 거대기공 수지 컬럼 (Cangzhou Enbao Chemical Co. Ltd. 제작)에 통과하고 이때 산동인 대 수지의 비는 1:2(g/ml)이고 컬럼의 종횡비는 1:8이다. 컬럼을 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 5배의 물로 세척하고 물 용리액을 버린다. 다음에, 이 컬럼을 컬럼 부피의 7배의 80% 에탄올로 세척하고 그 용리액을 농축 및 분무 건조하여 컬럼 조제된 산동인 추출물을 34g의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 475g의 강진향 및 450g의 단향을 초임계 CO₂ 추출로 추출처리하고, 상술한 약재의 중량에 대해 30부피%의 95% 에탄올을 조정제로 첨가한다. 추출물을 수거하고 총 추출물을 205g의 양으로 수득한다.

상술한 추출물, 휘발성 정유 및 용뇌를 잘 혼합하고 용융후 기질 PEG-6000을 상기 혼합물과 혼합하며 혼합물 대 기질의 비는 1:2이고 수득한 혼합물은 70℃에서 유지하며; 용뇌 및 휘발성 정유를 여기에 첨가하여 잘 혼합한다. 최종 혼합물을 40방울/분의 속도로 냉각제인 액상 파라핀에 점적하고 액상 파라핀을 여과지를 통해 제거하면서 점적 방울을 수거한다. 20,000정의 정제를 수득하고 각 정제의 무게는 27mg이다. 경구 투약시 일일 2 내지 3회 각회당 20 내지 40알의 정제를 투여한다.

비교예 1

이 실시예는 분말형 곤충 약재를 직접 이용하여 한약 조성물 캡슐을 제조하는 방법에 대해 기술한다.

처방 용량으로서 수질 103.75g, 지별 68.75g, 지네 13.75g, 전갈 68.75g 및 선태 68.75g을 기계적으로 분쇄하여 80메쉬의 분말을 318g의 양으로 준비한다.

처방 용량으로서 55g의 인삼을 인삼 중량에 대한 부피비로서 10배, 8배 및 6배의 70% 에탄올을 이용하여 각각 환류 추출하며 추출 시간은 각각 2시간, 2시간 및 1시간으로 하고; 상기 추출물을 서로 배합한다. 추출물로부터 에탄올을 회수하고 잔사물은 농축 및 분무 건조하여 최종 인삼 추출물을 11g의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 47.5g의 백작약을 분쇄후 백작약 중량에 대한 부피비로서 10배, 8배 및 6배의 50% 에탄올을 이용하여 각각 환류 추출하며 추출 시간은 각각 2시간, 2시간 및 1시간으로 하고; 상기 추출물을 서로 배합한다. 추출물로부터 에 탄올을 회수하고 잔사물은 농축 및 분무 건조하여 최종 백작약 추출물을 12.8g의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 46.25g의 산동인을 분쇄후 산동인 중량에 대한 부피비로서 10배, 8배 및 6배의 80% 에탄올을 이용하여 각각 환류 추출하며 추출 시간은 각각 2시간, 2시간 및 1시간으로 하고; 상기 추출물을 서로 배합한다. 추출물로부터 에탄올을 회수하고 잔사물은 농축 및 분무 건조하여 최종 산동인 추출물을 6.5g의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 23.75g의 강진향 및 22.50g의 단향을 물로 6시간 동안 증류처리한다. 강진향과 단향의 휘발성 정유를 0.5ml의 양으로 수득한다.

처방 용량으로서 22.50g의 조제 유향을 분쇄하여 60메쉬의 미세분말로 만든다.

처방 용량으로서 275g의 용뇌를 분쇄하여 미립자로 만들고 여기에 14g의 용융 기질 PEG-6000 (폴리에틸렌글리콜-6000, Tianjin guangfu fine chemical institution 제품)을 첨가한다. 상술한 휘발성 정유를 여기에 첨가하고 그 혼합물을 충분히 교반한 후, 동결기에 부어 냉각하고 이를 분쇄하여 60메쉬의 분말로 만든다. 결과로서, 27.5g의 용뇌 포집 화합물 및 휘발성 정유를 수득한다.

상술한 곤충 약재, 인삼, 백작약. 산동인, 강진향 및 단향의 추출물들을 배합하고 70% 에탄올을 이용하여 과립화 한 후, 조제 유향 분말, 용뇌 포집 화합물 및 휘발성 정유를 첨가한다. 상기 혼합물을 잘 혼합하여 1,000개의 캡슐에 충전한다. 결과로서 제조된 한약 조성물 산물 D1을 수득한다.

비교예 2

이 실시예는 저온 초음파 처리법에 따른 곤충 약재 추출물 제조 방법 및 이를 함유하는 한약 조성물의 제조 방법에 대해 기술한다.

처방 용량으로서 수질 103.75g, 지별 68.75g, 지네 13.75g, 전갈 68.75g 및 선태 68.75g을 분쇄하여 24메쉬의 미립자물을 준비한다. 미립자물을 초음파 탱크에 도입하고 상기 곤충 약재의 중량에 대한 부피비로서 6배의 물을 첨가한다. 혼합물을 50분간 초음파 추출하고 이때 출력 및 진동 주파수는 각각 250W 및 40KHz로 한다. 추출 온도는 20℃로 조절하고 추출은 3회 시행한다. 추출물을 배합 및 여과한다. 회전형 스크라이프 필름법으로 농축하고 이때의 온도는 65℃로 하며 이를 건조하여 초음파 수성 추출물을 32g의 양으로 수득한다.

인삼, 백작약, 산동인, 강진향, 단향 및 용뇌의 양과 조제 방법은 상술한 실시예 1과 동일하다.

상술한 곤충 약재, 인삼, 백작약. 산동인, 강진향 및 단향의 추출물들을 배합하고 70% 에탄올을 이용하여 과립화 한 후, 조제 유향 분말, 용뇌 포집 화합물 및 휘발성 정유를 첨가하여 잘 혼합한 뒤 1,000개의 캡슐에 충전한다. 결과로서 제조된 한약 조성물 D2를 수득한다.

비교예 3

이 실시예는 곤충 약재 분말을 직접 이용하여 한약 조성물을 캡슐 형태로 제조하는 방법에 대해 기술한다.

처방 용량으로서 수질 103.75g, 지별 68.75g, 지네 13.75g, 전갈 68.75g 및 선태 68.75g을 기계적으로 분쇄하여 80메쉬의 미립자물 318g의 양으로 준비한다.

상술한 곤충 약재, 인삼, 백작약. 산동인, 강진향 및 단향의 추출물들을 배합하고 70% 에탄올을 이용하여 과립화 한 후, 조제 유향 분말, 용뇌 인클루전 화합물과 휘발성 정유를 첨가하고 잘 혼합한 뒤 1,000개의 캡슐에 충전한다. 결과로서 제조된 한약 조성물 D3을 수득한다.

약학 실험

비교 실험예 1

이 비교 실험은 다양한 방법으로 제조한 한약 조성물이 래트의 급성 심근 허혈에 대해 미치는 영향을 검토 확인하기 위한 것이다.

그룹 분리 및 투여: 실시예 1에서 조제한 캡슐에 관하여, 투여량은 각각 1.2g 생약/Kg, 0.6g 생약/kg 및 0.3g 생약/Kg으로 하고; 비교예 1 내지 3에서 조제한 캡슐 D1, D2 및 D3에 관하여 투여량은 0.6g 생약/Kg으로 하며; 수술대조군 및 대조군을 추가로 준비한다.

실험 동물: 1마리당 220 내지 240g의 체중을 가진 112마리의 깨끗한 SD 래트로서 총 수의 절반은 수컷 나머지 절반은 암컷이고, 베이징 바이탈 리버에서 구입하였으며 라이센스 번호는 SCXK (베이징) 2002-0003이다.

모델링 및 색인 검출 방법: 최종 투여뒤 30분 후 동물을 우레탄 마취시키고 외과 수술에 앞서 II-리드 ECG를 측정한 뒤, 좌측 쇄골선을 따라 종방향으로 2cm 길이로 절개하여 제3 및 제4 늑골 사이의 근육층을 해부하고, 흉부와 심막을 개방하고 흉부의 우측을 천천히 눌러 심장을 노출하고, 또한 폐동맥추의 좌측 끝과 좌심방개의 하부 끝의 제로선(line 0)에서 중앙 쇄골을 1mm 관통하여 좌전 하방 관상 동맥을 결찰한 뒤 (수술대조군의 경우 결찰 없음), 심장을 흉부 안으로 다시 넣고 신속히 봉합한다.

심강에서 방출되는 잔사 혈액과 함께 새 심장을 적출하고 이를 염수로 세척한다. 여과지로 물을 흡수한다. 지방 및 혈관 같은 심장외 조직을 제거한 후 심장의 무게를 재고 약 1시간 동안 -4℃에서 냉동한다. 정점에서 기저부까지 방실구를 따라 심장 근육을 0.1cm 두께로 슬라이스 절단한다. 염수로 세척한 후 슬라이스를 1% TTC 용액 (pH 7.4 인산 염용액으로 조제)에 담그고, 37℃ 수조에서 15분간 염색하고, 염색후 즉시 증류수로 세척하여 과량의 염료를 제거한다. 경색부 및 무경색부를 분리하고 무게를 측정하여 심근경색 경사도를 계산한다. 한편, 염색된 심근 슬라이스편을 사진으로 찍고 영상 분석 장치를 이용하여 심근 및 심근 경색부의 전 영역을 분석한다. 허혈 심근의 일반 사진을 이용하여 심근 경색 면적율을 계산한다.

통계적 방법: 실험 데이터는 평균값±표준편차(

±SD)를 이용하여 나타내고 소프트웨어 SPSS 11.5를 이용하여 t 테스트를 실행한다. t 는 통계학의 기본 개념으로서 표준 정규분포의 대략적인 패턴이다.

실험 결과: 상세 결과는 표 1에 나타낸다.

분석: 모델군 및 D1 내지 D3와 비교시, S1의 중간 및 고약량군은 심장에 대 한 심근 허혈부의 중량백분율이 현저히 감소하고 (P<0.05 또는 P<0.01); 또한 모델군 및 D1 내지 D3과 비교시, S1의 저약량, 중간 및 고약량군은 심장에 대한 심근 허혈부의 중량백분율이 현저히 감소하였다 (P<0.05). P는 무작위 가능성을 설명하는데 이용되는 통계학의 기본 개념으로서 확률을 뜻한다.

그룹	동물수	투약량 (생약g/kg)	심근허혈의 면적율	심근허혈의 중량백분율
수술대조군	14	-	0.0±0.0	0.0±0.0
모델군	14	-	8.8±4.9^△△	13.2±3.7^△△
S1 그룹	14	1.20	2.7±2.2* abc	8.2±3.2**
S1 그룹	14	0.60	3.3±1.2*	8.6±3.1*
S1 그룹	14	0.30	3.8±1.3*	8.7±5.1
D1 그룹	14	0.60	4.5±1.3	10.7±2.7
D2 그룹	14	0.60	5.2±2.0	11.2±3.3
D3 그룹	14	0.60	4.9±2.1	9.8±2.3

참조: 모델군과 비교 *P<0.05; **P<0.01

수술대조군과 비교 ^△△P<0.01

D1 그룹과 비교 a P<0.05

D2 그룹과 비교 b P<0.05

D3 그룹과 비교 c P<0.05

비교 실험예 2

이 비교 실험은 다양한 방법에 따라 제조한 한약 조성물이 래트의 국소 뇌 허혈에 대하여 미치는 영향을 검토 확인하기 위한 것이다.

그룹 분리 및 투여: 실시예 1에서 조제한 S1 캡슐에 관하여, 투여량은 각각 2.4g 생약/Kg/일, 1.2g 생약/Kg/일 및 0.6g 생약/Kg/일로서 이는 인체의 경우 각각 4.557g 생약/일, 0.076g 생약/kg체중 (표준 체중 60kg)에 해당하고; 비교예 1 내지 3에서 조제한 캡슐 D1, D2 및 D3에 관하여, 투여량은 1.2g 생약/Kg/일로 하며; 수술대조군 및 대조군을 추가로 준비한다.

실험 동물: 1마리당 160 내지 180g의 체중을 가진 140마리의 건강하고 깨끗한 위스타(Wistar) 래트로서 총 수의 절반은 수컷 나머지 절반은 암컷이고, 베이징 바이탈 리버에서 구입하였으며 라이센스 번호는 SCXK (베이징) 2002-0003, 품질 인증번호는 0048343이다.

모델링 및 색인 검출 방법: 클로랄 수화물로 마취후, 래트를 눕혀 고정시킨다. 수술대조군을 제외하고 다른 그룹에 다음과 같은 수술을 행한다. 눈의 안각 및 외이도의 중간 부분을 절개하여 작은 개구부를 내고 측두근을 노출한다. 측두근을 측두근 클램프로 고정하여 양측으로 분리하고 안면 신경을 손상하지 않도록 주의한다. 편평골의 대부분을 노출시키고 관골궁 및 편평골의 연결부를 드릴 천공하여 앞뒤로 약 2mm의 구멍을 낸다. 수술 현미경 아래서, 소형 직선 스트립 클램프를 이용하여 약 2mm 직경의 두개골 창을 개방함으로써 뇌동맥을 노출한다. 10㎕의 50% 삼염화철 용액 (희석 염산을 첨가하여 산성화함)을 작은 여과지 조각에 점적한 뒤 이 여과지를 뇌동맥에 올려놓는다. 30분후 뇌동맥이 검게 변하면 여과지를 제거하고 국소 조직을 염수로 세척한다. 래트를 층별 봉합후 우리에 되돌려 놓는다. 수술대조군은 삼염화철 용액 처리를 제외하고 위와 동일한 방식으로 처리한다. 수술뒤 24시간 후, 경동맥의 혈액을 배출하고 단수술한 동물의 뇌를 후각, 소뇌 및 하부 뇌간 제거와 함께 적출한다. 관상부를 4회에 걸쳐 다섯 조각으로 절단한다. 제1 절단 위치는 뇌와 시신경 교차부 사이의 중점부이고, 제2 절단 위치는 시신경 교차부이고 제3 절단 위치는 깔대기 조정부이고, 또한 제4 절단 위치는 깔대기 조정부와 후엽 꼬리의 말단 사이이다. 뇌 조각을 적색 테트라졸륨(TTC)로 염색한다. 염색후, 정상 조직이 적색으로 변하고 경색 조직부는 백색으로 변한다. 각 뇌의 평면을 균일 밀도의 알루미늄 호일에 투영하고 경색부는 신중히 적출한다. 전체 뇌 및 반뇌의 수술부에 대한 경색부 조직의 중량 백분율은 경색부 범위를 표시한다 (%).

실험 결과: 단수술한 래트의 뇌를 수술뒤 24시간 후 적출하고 TTC로 염색한다. 경색부 영역의 중량을 측정하여 비교하였다. 상세 결과는 표 2에 나타낸다.

그룹	투약량	동물수	반뇌에 대한 경색부의 면적율	전뇌에 대한 경색부의면적율
수술대조군	-	10	0±0	0±0
모델군	-	10	9.02±2.01^△△	4.44±1.03^△△
S1 그룹	2.4g/kg	10	3.63±1.87** abc	2.23±1.10**
S1 그룹	1.2g/kg	10	5.81±2.60*	2.98±1.21*
S1 그룹	0.6g/kg	10	7.15±1.85*	3.55±0.98*
D1 그룹	1.2g/kg	10	6.44±1.23	3.42±0.83
D2 그룹	1.2g/kg	10	5.33±1.10	2.89±0.94
D3 그룹	1.2g/kg	10	6.52±2.12	3.22±1.02

참조: 모델군과 비교 *p<0.05; **p<0.01

수술대조군과 비교 ^△△p<0.01

D1 그룹과 비교 a P<0.05

D2 그룹과 비교 b P<0.05

D3 그룹과 비교 c P<0.05

Claims

전갈, 지네, 지별, 수질, 선태, 인삼, 조제 유향, 백작약, 강진향, 단향, 용뇌 및 산동인을 처방 용량에 따라 준비하고; 상기 약재 원료를 추출하여 수득한 추출물을 혼합하여 제조하는 것으로서,

전갈, 지네, 지별, 수질 및 선태의 추출은: (1) 곤충 약재를 분쇄하여 거친 입자물로 만들고; (2) 곤충 약재의 중량에 대한 부피비로 8 내지 12배의 물을 상기 거친 입자물에 가하고 이 혼합물을 25 내지 65℃까지 가열 및 각회 1 내지 5시간씩 1 내지 3회에 걸쳐 추출하고, 탕약의 찌꺼기에서 추출물을 분리하고; (3) 찌꺼기 중량의 8 내지 12배의 물을 가하고 이 혼합물을 70 내지 100℃까지 가열 및 각회 1 내지 3시간씩 1 내지 3회에 걸쳐 추출하고, 탕약의 찌꺼기에서 추출물을 분리하고; (4) 수득된 추출물을 서로 배합하고 농축 및 건조하여 최종 곤충 약재 추출물을 수득하는 것을 포함하는 한약 조성물의 제조방법.
제 1항에 있어서,

전갈, 지네, 지별, 수질 및 선태는 각각 별도로 혹은 함께 추출하며 이들 곤충 약재의 추출 공정은,

단계 (1): 곤충 약재를 분쇄하여 18 내지 40메쉬의 거친 입자물로 만들고;

단계 (2): 곤충 약재의 중량에 대해 부피비로서 8 내지 10배의 물을 상기 거친 입자물에 가하고; 이 혼합물을 30 내지 50℃까지 가열하고; 각회마다 1 내지 3 시간씩 2 내지 3회 추출하고; 또한 상기 추출물 및 탕약의 찌꺼기를 분리하고; 이 공정은 감압하의 수성 추출법 혹은 초음파 추출법을 이용하고;

단계 (3): 찌꺼기 중량의 8 내지 12배의 물을 상기 단계(2)의 찌꺼기에 가하고; 이 혼합물을 75 내지 100℃까지 가열하고; 각회마다 1 내지 3시간씩 2 내지 3회 추출하고; 이 추출물 및 탕약의 찌꺼기를 분리하며; 또한

㎤단계 (4): 수득한 각각의 추출물을 배합한 뒤 농축하여 50 내지 60℃에서 1.05 내지 1.10g/㎤의 밀도를 갖는 투명한 플래스터를 형성하고; 이 투명한 플래스터를 감압하에 50 내지 60℃에서 건조하는 것을 포함하는 제조방법.
제 2항에 있어서,

상기 단계(2)의 추출 공정은 0.05 내지 0.1MPa의 감압하에 시행되고 추출물은 함께 교반되며; 또는 초음파 추출법을 이용하여 시행하며 이때의 출력 및 진동 주파수는 각각 200 내지 10,000W 및 20 내지 80KHz인 제조방법.
제 3항에 있어서,

상기 단계(2)의 추출 공정은 초음파 추출법을 이용하며 이때의 출력 및 진동 주파수는 각각 1,500 내지 8,000W 및 30 내지 60KHz인 제조방법.
제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 있어서,

인삼, 조제 유향, 백작약, 강진향, 단향, 용뇌 및 산동인을 다음의 단계에 따라 처리하는 것으로서;

- 처방 용량의 인삼을 분쇄하여 거친 입자물로 만들고 인삼 중량에 대한 부피비로 10배의 70% 에탄올을 이용하여 각회마다 2시간씩 총 2회 환류 추출하며 상기 추출 온도는 95℃로 하고 상기 추출물을 배합하여 준비하고; 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 상기 추출물로부터 에탄올을 회수하고; 인삼 중량에 대한 부피비로 8배의 물을 첨가하고; 이 용액을 12시간 동안 놓아둔 후 여과하고; 여액을 사전처리된 AB-8 거대기공 수지 컬럼에 통과시키고; 컬럼을 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 4배의 물로 세척한 후 물 용리액을 버리고; 이 컬럼을 다시 컬럼 부피의 6배의 70% 에탄올로 세척하고 용리액은 농축 후 분무 건조하여 최종 인삼 추출물을 수득하고;

- 처방 용량의 백작약을 분쇄하여 거친 입자물로 만들고 백작약 중량에 대한 부피비로 10배의 50% 에탄올을 이용하여 각회마다 2시간씩 총 2회 환류 추출하며, 추출 온도를 95℃로 하고 추출물을 서로 배합하고; 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 추출물로부터 에탄올을 회수하고; 백작약 중량에 대한 부피비로 10배의 물을 가하고; 용액을 12시간 동안 놓아둔 후 여과하고; 이 여액을 사전처리된 AB-8 거대기공 수지 컬럼에 통과시키고; 컬럼을 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 4배의 물로 세척하고 물 용리액을 버리고; 다시 컬럼 부피의 6배의 60% 에탄올로 컬럼을 세척하고 용리액을 농축 및 분무 건조하여 최종 백작약 추출물을 수득하고;

- 처방 용량의 산동인을 분쇄하여 거친 입자물로 만들고 산동인 중량에 대한 부피비로 10배의 80% 에탄올을 이용하여 각회마다 2시간씩 총 2회 환류 추출하며, 추출 온도를 95℃로 하고 추출물을 서로 배합하고; 에탄올 냄새가 나지 않을 때까지 추출물로부터 에탄올을 회수하고; 산동인 중량에 대한 부피비로 8배의 물을 가하고; 용액을 12시간 동안 놓아둔 후 여과하고; 이 여액을 사전처리된 AB-8 거대기공 수지 컬럼에 통과시키고; 컬럼을 무색이 될 때까지 컬럼 부피의 4배의 물로 세척하고 물 용리액을 버리고; 다시 컬럼 부피의 6배의 80% 에탄올로 컬럼을 다시 세척하고 용리액을 농축 및 분무 건조하여 최종 산동인 추출물을 수득하고;

- 처방 용량의 강진향을 이의 중량에 대한 부피비로 8배의 물을 이용하여 6시간 동안 증류처리하여 휘발성 정유를 추출하고;

- 처방 용량의 단향을 이의 중량에 대한 부피비로 8배의 물을 이용하여 4시간 동안 증류처리하여 휘발성 정유를 추출하고;

- 처방 용량의 조제 유향을 이의 중량에 대한 부피비로 8배의 물을 이용하여 6시간 동안 증류처리하여 휘발성 정유를 수거하고; 찌꺼기는 조제 유향의 중량에 대한 부피비로 6배의 에탄올을 이용하여 각회 1시간씩 총 2회 추출하며, 이 에탄올 추출물을 상기 수거물과 배합한 뒤 농축 및 감압 건조하고; 또한

- 처방 용량의 용뇌를 분쇄하여 거친 입자물로 만들고, 여기에 용뇌 중량에 대한 부피비로서 2배의 용융 기질 PEG-6000을 강하게 교반하면서 첨가하고; 및 혼합물을 냉각한 후 분쇄하는 것을 포함하는 제조방법.
제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 따른 방법에 따라 제조되는 것으로서, 태블릿, 경구 붕해성 태블릿, 분산성 태블릿, 발포성 태블릿, 캡슐, 정제, 과립, 경구액제, 마이크로필, 마이크로캡슐 및 분무제로 이루어진 군에서 선택되는 한약 조성물의 제형.
곤충 약재의 추출물을 제조하는 것으로서, 상기 곤충 약재는 전갈, 지네, 지별, 수질 및 선태를 포함하고 상기 추출 방법은:

(1) 곤충 약재를 분쇄하여 거친 입자물로 만들고; (2) 곤충 약재의 중량에 대한 부피비로 8 내지 12배의 물을 상기 거친 입자물에 가하고 이 혼합물을 25 내지 65℃까지 가열 및 각회 1 내지 5시간씩 1 내지 3회에 걸쳐 추출하고, 추출물과 탕약의 찌꺼기를 분리하고; (3) 찌꺼기 중량의 8 내지 12배의 물을 가하고 이 혼합물을 70 내지 100℃까지 가열 및 각회 1 내지 3시간씩 1 내지 3회에 걸쳐 추출하고, 추출물과 탕약의 찌꺼기를 분리하고; (4) 수득된 추출물을 서로 배합하고 농축 및 건조하여 최종 곤충 약재 추출물을 수득하는 추출물의 제조방법.
제 7항에 있어서,

상기 곤충 약재의 추출 공정은:

단계 (1): 곤충 약재를 분쇄하여 18 내지 40메쉬의 거친 입자물로 만들고;

단계 (2): 곤충 약재의 중량에 대한 부피비로서 8 내지 12배의 물을 상기 거친 입자물에 가하고; 이 혼합물을 25 내지 50℃까지 가열하고 각회마다 1 내지 3시간씩 2 내지 3회 추출하고; 상기 추출물 및 탕약의 찌꺼기를 분리하고; 또한 이 단계는 감압하의 수성 추출법 혹은 초음파 추출법을 이용하고;

단계 (3): 찌꺼기 중량의 8 내지 12배의 물을 상기 단계(2)의 찌꺼기에 가하고; 이 혼합물을 75 내지 100℃까지 가열하고 각회마다 1 내지 3시간씩 2 내지 3회 추출하고; 이 추출물 및 탕약의 찌꺼기를 분리하며; 또한

단계 (4): 수득한 각각의 추출물을 배합한 뒤 농축하여 50 내지 60℃에서 1.05 내지 1.10g/㎤ 의 밀도를 갖는 투명한 플래스터를 형성하고; 이 투명한 플래스터를 감압하에 50 내지 60℃에서 건조하는 것을 포함하는 제조방법.
제 7항에 있어서,

상기 단계(2)의 추출 공정은 0.05 내지 0.1MPa의 감압하에 시행되고 동시에 추출물을 교반하며; 또는 초음파 추출법을 이용하여 시행하고, 이때의 출력 및 진동 주파수는 각각 200 내지 10,000W 및 20 내지 80KHz인 제조방법.
제 9항에 있어서,

상기 단계(2)의 추출 공정은 초음파 추출법을 이용하며, 이때의 출력 및 진동 주파수는 각각 1,500 내지 8,000W 및 30 내지 60KHz인 제조방법.
제 7항 내지 제 10항 중 어느 한 항에 따른 방법에 의해 제조되는 것으로서, 상기 곤충 약재의 추출물은 황갈색 내지 진한 황색의 색상을 갖고, 자극취 및 짠맛을 갖는 추출물