CN107007784A - 用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药组合物及其制备方法与应用 - Google Patents

用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药组合物及其制备方法与应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开一种用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药组合物及其制备方法和应用。所述中药组合物包括如下重量份原药方剂的提取物：天麻3‑9份、褚实3‑9份、人参3‑9份、茯苓5‑12份、肉苁蓉3‑9份、益智仁3‑9份、远志3‑9份、石菖蒲3‑9份、银杏叶5‑15份。本发明中药组合物能有效减轻Aβ1‑40对PC12神经细胞的损伤，从而防治和减缓阿尔兹海默病的进程，起到从根本上防治阿尔兹海默病症的作用，其制备方法能够有效保证方剂配伍的稳定和药效的稳定，且安全无毒，质量可控，成本低，产业化可行性好。

Description

用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药组合物及其制备 方法与应用
技术领域
本发明属于中药药物制剂技术领域，具体涉及一种用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药组合物及其制备方法和含有所述中药组合物的中药药品。
背景技术
中国已进入人口老龄化社会，统计数据显示，截至2014年底，中国60岁以上老年人口已达2.12亿，占总人口的15.5％，我国成为全球老龄大国。据报道，全球65岁以上的老年人中，10％患有老年性痴呆，80岁以上的患病率高达20％。老年性痴呆(阿尔茨海默病Alzheimer's disease,简称AD)已成为人类继心脏病、癌症、中风后的第四大杀手。流行病学调查显示，我国至少有600万以上老年性痴呆患者，每年的医药费用至少在300亿元以上。
现代医学研究表明，阿尔茨海默病的发病机制极为复杂，涉及多基因缺陷、环境影响、神经毒素、细胞凋亡、氧化应激、β-AP(β淀粉蛋白)聚集、炎症反应、Ca2+超载、胆碱能等多系统退行性变等多个环节和方面。针对阿尔茨海默病的发病机制，现在市场上治疗药物主要有胆碱酯酶抑制剂、谷氨酸受体拮抗剂、钙离子拮抗剂、自由基清除剂及抗氧化剂、雌激素等等。上述药物主要以化学药为主，毒副作用较大。2010年欧洲《关于AD治疗指南》中指出，AD药物治疗时首选胆碱酯酶抑制剂。但由于AD需要长期服药，而胆碱酯酶抑制剂长期服用后耐药现象。鉴于目前西药对AD治疗效果的局限性、不良反应以及AD病因的复杂性，充分发挥中医药的特色和优势，整体综合调治，多环节、多靶点发挥作用，故开发安全、有效的预防和治疗阿尔茨海默病的中药新药/保健品，势在必行，也迫在眉睫。
现有专利对AD病因病机进行了阐述，但尚未形成系统认识。如在中国专利CN105056151 A中公开了一种治疗阿尔茨海默病的药丸，其是按下面各中药质量份比组合制作成药丸：水牛角15份、熟地15份、牛膝20份、石菖蒲15份、鳖甲20份、煅牡蛎30份、栀子15份、郁金15份、陈皮15份、藿香15份、竹叶10份、板兰根15份、金银花15份。在中国专利CN104997943 A中公开了一种用于治疗阿尔茨海默病的中药，其是由以下重量配比的原料药材制备而成：吹云草10份、陈壶卢瓢10份、升麻10份、盾翅藤18份、茜草18份、夜交藤20份、伽喃香10份。在中国专利CN 104069424 A中公开了一种具有治疗阿尔茨海默病的中药，其由以下重量份的原料药制成：巴戟天5-20，石菖蒲5-20份，郁金5-30份，黄芪5-30份，远志1-20份。
因此，现有中药对AD治疗靶向不明确，导致治疗效果不理想以及对AD认识还有待提高。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的上述不足，提供一种用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药组合物及其制备方法，以解决现有防治阿尔茨海默病治疗靶向不明确，治疗疗效不太理想的技术问题。
本发明另一目的在于提供一种用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药药品，以解决现有防治阿尔茨海默病治疗药品治疗疗效不太理想的技术问题。
为了实现上述发明目的，本发明实施例一方面，提供了一种中药组合物。所述中药组合物用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞，其包括如下重量份原药方剂的提取物：
天麻3-9份、褚实3-9份、人参3-9份、茯苓5-12份、肉苁蓉3-9份、益智仁3-9份、远志3-9份、石菖蒲3-9份、银杏叶5-15份。
本发明实施例另一方面，提供了一种用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药组合物的制备方法。所述制备方法包括如下步骤：
按照权利要求1-2任一所述的中药组合物的原药方剂称取各组分中药材；
将称取的所述中药材进行粉碎处理后，用乙醇溶液提取处理，对滤液进行减压浓缩处理，得到第一浓缩稠膏；
将所述乙醇溶液提取处理后的滤渣用水提取处理，滤液采用70％v/v乙醇溶液进行沉淀处理后减压浓缩处理，得到第二浓缩稠膏；
将所述第一浓缩稠膏和所述第二浓缩稠膏混合后采用微波干燥；
其中，在所述乙醇溶液提取处理和水提取处理过程中均伴随微波处理。
本发明实施例再一方面，提供了一种用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药药品。所述中药药品包括药物可接受的辅料，其还包括有效剂量的本发明中药组合物或由本发明制备方法制备的中药组合物。
与现有技术相比，本发明防治阿尔茨海默病中药组合物通过其方剂中各成分的配伍，使得其有效逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞向正常转化，减轻Aβ对神经细胞的损伤，从而降低神经元的损伤和死亡，以防治和减缓阿尔兹海默的进程，起到靶向防治和治疗阿尔兹海默病症的作用。
本发明用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药组合物的制备方法将各组分中药材按照固定的步骤进行处理，使得中药材中有效成分被提取，并控制其含量，从而保证了组合物的方剂配伍，使得到的中药组合物有效逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞，减轻Aβ对神经细胞的损伤，从而防治和减缓阿尔兹海默的进程，起到防治和治疗阿尔兹海默病症的作用。另外，本发明制备方法能够有效保证方剂配伍的稳定和药效的稳定，且安全无毒，质量可控，成本低，产业化可行性好。
本发明用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药药品由于含有有效剂量的本发明的中药组合物，因此，具有有效逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞，减轻Aβ对神经细胞的损伤，起到防治和治疗阿尔兹海默病症的作用，且安全无毒副作用。
附图说明
图1是在做对Aβ1-40诱导PC12细胞形态及轴突生长影响的实验中的空白对照组、NGF组、AD细胞模型组和实施例1提供的中药组合物设置低剂量组、中剂量组、高剂量组对Aβ1-40诱导PC12细胞形态及轴突生长图1；其中，图1中的A为空白对照组细胞形态及轴突生长图、B为NGF组细胞形态及轴突生长图、C为AD细胞模型组细胞形态及轴突生长图、D为实施例1提供的中药组合物低剂量组细胞形态及轴突生长图、E为实施例1提供的中药组合物中剂量组细胞形态及轴突生长图、F为实施例1提供的中药组合物高剂量组细胞形态及轴突生长图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
本发明实施例说明书中所提到的各组分的重量不仅仅可以指代各组分的具体含量，也可以表示各组分间重量的比例关系，因此，只要是按照本发明实施例说明书组合物各组分的含量按比例放大或缩小均在本发明实施例说明书公开的范围之内。具体地，本发明实施例说明书中所述的重量份可以是μg、mg、g、kg等医药领域公知的重量单位，当然可以看作是重量百分比。
从中药的角度看，阿尔茨海默病基本病机是精亏髓减，气血亏虚，痰疲痹阻脑络，致元神受损，神机失用。究其原因一方面由于年老脏腑虚衰，肾精亏虚，脑髓失养，导致神机失用；另一方面，年老脏腑功能失常，痰浊瘀血阻滞，清窍失养。其病性不外虚实两种，虚证与五脏相关，主要责之于脾、肾两脏，包括肾精亏损和脾虚不运，但以肾精亏虚为主；实证则划归于体内的气血、津液运行不畅，久则化疲、成痰，痹阻脑络、蒙闭清窍。同时二者又可互相影响，因虚致实，因实伤正，继则相兼为病，成虚实夹杂之证。就本病而言，令其治疗多以补肾为主，并根据不同证型辅以活血化瘀、醒脾化湿、祛痰开窍、清心泻火等方药。
据文献记载，目前，“Aβ假说”是AD发病的主要机制之一，已被广泛接受，并且认为Aβ聚集是AD发病过程中的关键机制，Aβ在特定脑区的聚集沉淀是AD患者主要的病理变化，现已证实其神经毒性，造成突触报伤，神经元死亡，导致AD的发生。其中，Aβ是从APP(淀粉样前体蛋白)的第6772到711为残基间裂解产生的片段。Aβ1-40是Aβ中的其中一种分子，由39-43个氨基酸组成，其升级毒性作用主要与氧化自由基代谢、与细胞内钙稳态紊乱、细胞凋亡等有关，而且其更倾向于灵长类动物。
因此，本发明基于AD基本病机的认知，一方面，提供了一种用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药组合物。本发明实施例用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药组合物包括如下重量份原药方剂的提取物：
天麻3-9份、褚实3-9份、人参3-9份、茯苓5-12份、肉苁蓉3-9份、益智仁3-9份、远志3-9份、石菖蒲3-9份、银杏叶5-15份。
在具体实施例中，上述中药组合物可以是包含如下重量份原药方剂的提取物：
天麻3份、褚实6份、人参3份、茯苓6份、肉苁蓉6份、益智仁6份、远志3份、石菖蒲3份、银杏叶6份。
上述各实施例方剂中的原料可以是常规的各原药材的药用部分。
其中，君药天麻性味甘平，入肝经。具有息风定惊、抗风湿、抗癫痫、抗惊厥、镇静和镇痉等作用，临床上主要用于治疗头痛眩晕、肢体麻木、小儿惊风、癫痫抽搐和破伤风等。其主要有效成分为天麻素、香荚兰醇、香荚兰醛、对羟基苯甲醛和对羟基苄醇等。
褚实，别名楮实子，其性甘、寒，归肝、肾经。其主要含皂甙等成分，其能够补肾清肝，明目，利尿。用于腰膝酸软、虚劳骨蒸、砂晕目昏、目生翳膜、水肿胀满。
人参，味甘、微苦，性平，归肺、脾、心经。《神农本草经》把人参列为上品，言其“主补五脏、安精神、定魂魄、止惊悸、明目、开心益智，久服有轻身延年之功效。”现代研究进一步拓展了人参的功效，作为补益药代表的人参，大量实验和临床研究发现，它具有防治老年痴呆的功效。
茯苓利水渗湿，健脾，宁心，主要用于治疗用于水肿尿少，痰饮眩悸，脾虚食少，便溏泄泻，心神不安，惊悸失眠。
肉苁蓉别名疆芸、寸芸、苁蓉、查干告亚，味甘；咸；性温，其含有甙类化合物、甜菜碱、β-谷甾醇、甘露醇、N，N-二甲基甘按酸甲酯和十五种氨基酸及琥珀酸(succinic acid)，三十烷醇(TCMLIBiacontanol)，多糖类。具有补肾阳、益精血、润肠道、主肾阳虚衰、精血不足之阳痿、遗精、白浊、尿频余沥、腰痛脚弱、耳鸣目花、月经衍期、宫寒不孕、肠燥便秘等作用。
益智仁味辛、性温，主要治疗脾胃虚寒、呕吐、泄泻、腹中冷痛、口多唾涎、肾虚遗尿、尿频、遗精、白浊。
远志别名葽绕、蕀蒬等。其性味苦、辛、温，含有皂甙，水解后可分得两种皂甙元结晶，远志皂甙元A和远志皂甙元B。原药用于心肾不交引起的失眠多梦、健忘惊悸，神志恍惚，咳痰不爽，疮疡肿毒，乳房肿痛。
石菖蒲主要成分包括β-细辛醚，顺式甲基异丁香油酚、榄香脂素、细辛醛、δ-荜澄匣烯、百里香酚、肉豆劳动酸等，原药主要用于化湿开胃，开窍豁痰，醒神益智。用于脘痞不饥，噤口下痢，神昏癫痫，健忘耳聋。理气，活血，散风，去湿。治癫痫，痰厥，热病神昏，健忘，气闭耳聋，心胸烦闷，胃痛，腹痛，风寒湿痹，痈疽肿毒，跌打损伤。
银杏叶，性甘、苦、涩、平，归心、肺经，原药具有活血化瘀，通络止痛，敛肺平喘，涩肠止泻，化浊降脂的作用。其主要成分银杏黄酮，具有扩张冠状动脉、改善冠脉血流量、缓解心绞痛、降血脂、抗脂质氧化、促进脑血流和改善脑代谢等作用。现代广泛用于治疗高血脂、高血压、冠心病、心绞痛、脑血管痉挛、老年性脑功能障碍、脑损伤后遗症及中风后遗症等。
在上述各实施例原药方剂中，以天麻为君药，人参、褚实为臣药，银杏叶、茯苓、肉苁蓉、益智仁、远志和石菖蒲为佐使药，通过对原药方剂进行提取有效成分，从而使得各原药药效成分起到中药配伍协效作用，使得其有效逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞向正常转化，减轻Aβ特别是Aβ1-40对神经细胞的损伤，从而降低神经元的损伤和死亡，以起到靶向防治和治疗阿尔兹海默病症的作用。
另外，上述各实施例中药组合物可以是将方剂中的相应中药材采用药物可接受的溶媒进行提取处理获得。在一实施例中，是将方剂中原药进行粉粹处理后，以乙醇溶液和水提取处理，减压回收溶剂，得到合适密度的稠膏，再将所述水提稠膏采用70％乙醇溶液进行沉淀处理，干燥处理。在所述浸提处理过程中，还施加有微波处理。
在具体实施例中，所述乙醇溶液和水提取处理方法为：将粉碎处理后的所述中药材与浓度为30％-70％v/v乙醇溶液混合后进行微波提取处理至少2次，每次10±2min，功率560瓦，对滤液进行减压浓缩处理，得到第一浓缩稠膏；然后将滤渣于水中进行微波提取提2次，每次12±2min，功率560瓦，滤液采用70％v/v乙醇溶液进行沉淀处理后减压浓缩处理，得到第二浓缩稠膏；最后将所述第一浓缩稠膏和所述第二浓缩稠膏混合后采用微波干燥。
通过对工艺条件的控制，以实现对提取药物药效成分和含量的控制，以赋予本发明实施例中药组合物有效逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞向正常转化，减轻Aβ特别是Aβ1-40对神经细胞的损伤，起到靶向防治和治疗阿尔兹海默病症的作用。
再一方面，在上述本发明实施例的基础上，本发明实施例提供了上文所述用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药组合物的制备方法。所述制备方法包括如下步骤：
步骤S01：按照上文所述的本发明实施例中药组合物的原药方剂称取各组分中药材；
步骤S02：将称取的所述中药材进行粉碎处理后，用乙醇溶液提取处理，对滤液进行减压浓缩处理，得到第一浓缩稠膏；
步骤S03：将所述乙醇溶液提取处理后的滤渣用水提取处理，滤液采用70％v/v乙醇溶液进行沉淀处理后减压浓缩处理，得到第二浓缩稠膏；
步骤S04：将所述第一浓缩稠膏和所述第二浓缩稠膏混合后采用微波干燥。
其中，上述步骤S01中所述中药组合物的原药方剂所含组分和各组分含量如上文所述，为了节约篇幅，在此不再赘述。
上述步骤S02中的粉碎处理可以按照中药领域常规方法粉碎处理，如按照散剂的要求进行粉碎处理，在具体实施例中，粉碎后的混合物过10目筛。
该步骤S02中，乙醇溶液提取处理的过程中同时施加了微波。因此，所述乙醇溶液对经粉碎处理的中药材提取处理，使得中药材中的有效功能成分被浸出。在一实施例中，所述乙醇溶液提取处理方法为：将粉碎处理后的所述中药材与浓度为30％-70％v/v乙醇溶液混合后进行微波提取处理至少2次，每次10±2min，所述微波功率560瓦。在另一实施例中，粉碎处理后的所述中药材与所述乙醇溶液混合重量比为1:10。
待步骤S02中的对滤液进行减压浓缩处理可以采用常规的减压浓缩处理，如在一实施例中，经浓缩处理后获得的第一浓缩稠膏的密度为1.6-2.5g/ml。
上述步骤S03中，水提取处理的过程中也同时施加了微波。因此，采用水对滤渣提取处理，使得滤渣中药材中的有效功能成分被浸出。在一实施例中，所述水提取处理方法为：将滤渣与水混合后进行微波提取处理至少2次，每次12±2min，所述微波功率560瓦。在另一实施例中，所述滤渣与水混合重量比为1:10。
水提取处理后，进行固液分离，将滤液收集浓缩后与浓度为70％v/v乙醇溶液混合后，将非溶乙醇溶液的蛋白质、多糖等以及其他成分进行沉淀并除去。通过70％v/v乙醇溶液使得提取获得的提取物与步骤S02中的提取物形成的混合物也即是使得本发明实施例的中药组合物具有合理的配伍含量，从而赋予上述中药组合物有效逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞向正常转化，减轻Aβ特别是Aβ1-40对神经细胞的损伤，起到靶向防治和治疗阿尔兹海默病症的作用。
待步骤S03中的乙醇溶液进行沉淀处理后，进行固液分离，收集滤液，并将滤液进行减压浓缩处理。该步骤中的减压浓缩处理可以采用常规的减压浓缩处理，如在一实施例中，经浓缩处理后获得的第二浓缩稠膏的密度为1.6-2.5g/ml。
通过对乙醇溶液提取处理和水提取处理工艺条件的控制，使得经粉碎处理的中药材在上述提取温度和时间以及提取工艺条件下，中药材中的有效功能成分被浸出，并使得有效成分具有合理的配伍量。
上述步骤S04中，一实施例中，对第一浓缩稠膏和所述第二浓缩稠膏微波干燥处理的条件为：微波功率5kW±0.5kw，干燥时间14±5min，铺盘厚度2.0±0.5cm，真空度-0.05～-0.09MPa。通过微波干燥处理，一方面能够有效除去溶媒，另一方面对提取物中的成分一步帅选和控制，并使得有效成分具有合理的配伍含量，从而赋予上述中药组合物有效逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞向正常转化，减轻Aβ特别是Aβ1-40对神经细胞的损伤，起到靶向防治和治疗阿尔兹海默病症的作用。同时，时间短，效率高，能耗低。
因此，本发明实施例用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药组合物的制备方法将各组分中药材按照固定的步骤进行处理，使得中药材中有效成分被提取，并控制其含量，从而保证了组合物的方剂配伍，使得到的中药组合物有效逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞向正常转化，减轻Aβ特别是Aβ1-40对神经细胞的损伤，从而防治和减缓阿尔兹海默的进程，起到靶向防治和治疗阿尔兹海默病症的作用。另外，本发明实施例制备方法能够有效保证方剂配伍的稳定和药效的稳定，且安全无毒，质量可控，成本低，产业化可行性好。
再一方面，本发明实施例在上文用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药组合物及其制备方法的基础上，还提供了一种用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药药品。本发明实施例中药药品包括药物可接受的辅料，还包括有效剂量的上文所述的本发明实施例中药组合物或由上文所述的本发明实施例制备方法提取制备的中药组合物。
其中，该上文所述的本发明实施例中药组合物的有效剂量是指治疗有效量，是指足以对个体显示益处或临床意义的本发明的化合物的量。本领域技术人员将会理解，给药的实际量或剂量以及给药时程将取决于被治疗的疾病的性质和严重性、被治疗的受试者的年龄和一般状况以及给药方式等。
在一实施例中，本发明实施例中药药品所含的药物可接受的辅料是指本领域技术人员已知的适合于特定的给药模式的任何辅料。如在具体实施例中，该药物可接受的辅料可以包括可与本发明实施例中药组合物配伍的一种或多种药学上可接受的载体、溶剂、赋形剂、缓冲剂、稳定剂、佐剂、前药和治疗能够受益于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞向正常转化，减轻Aβ特别是Aβ1-40对神经细胞的损伤的靶向治疗效果或增强上述中药组合物活性的其他治疗剂。
应当理解的是，上述各辅料应当是无毒的、不干扰或不损害本发明实施例上述中药组合物的效力。另外，该辅料所选用可以根据上述实施例防治阿尔茨海默病的药物或保健食品的存在剂型而灵活选用。另外，上述中药药品可以单独给药，也可以与如果必要的其他组合物联合给药。
在一实施例中，根据上述本发明实施例中药药品的给药模式，可以灵活选用药物可接受的辅料与有效剂量的上文中药组合物制备成不同剂型，诸如合剂、口服液、胶囊剂、片剂、丸剂、散剂、粉剂或颗粒剂中的任一剂型。
因此，本发明实施例用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药药品由于含有有效剂量的上文本发明实施例中药组合物，因此，其具有有效减轻Aβ1-40对PC12神经细胞的损伤，起到防治和治疗阿尔兹海默病症的作用，且安全无毒副作用，临床顺应性良好。
以下通过用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药组合物及其制备方法具体实施例对本发明做进一步说明。
实施例1
本实施例提供一种用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药组合物及其制备方法。该包括如下重量份原药方剂的提取物：
天麻3份、褚实6份、人参3份、茯苓6份、肉苁蓉6份、益智仁6份、远志3份、石菖蒲3份、银杏叶6份。
本实施例中药组合物的制备方法：
S11：按本实施例原药方剂的计量比取天麻、褚实、人参、茯苓、肉苁蓉、益智仁、远志、石菖蒲、银杏叶原药；
S12：将称取的所述中药材进行粉碎处理后，用如下乙醇溶液提取处理，对滤液进行减压浓缩处理，得到第一浓缩稠膏：
将粉碎处理后的所述中药材与浓度为30％-70％v/v乙醇溶液混合后进行微波提取处理至少2次，每次10±2min，所述微波功率560瓦；粉碎处理后的所述中药材与所述乙醇溶液混合重量比为1:10；
S13：将所述乙醇溶液提取处理后的滤渣用水提取处理，滤液采用70％v/v乙醇溶液进行沉淀处理后减压浓缩处理，得到第二浓缩稠膏；所述水提取处理方法为：将滤渣与水混合后进行微波提取处理至少2次，每次12±2min，所述微波功率560瓦；滤渣与所述水混合重量比为1:10；
S14：将所述第一浓缩稠膏和所述第二浓缩稠膏混合后采用微波干燥；所述微波干燥的工艺条件为：微波功率5kW±0.5kw，干燥时间14±5min，铺盘厚度2.0±0.5cm，真空度-0.05～-0.09MPa。
实施例2
本实施例提供一种用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药组合物及其制备方法。该包括如下重量份原药方剂的提取物：
天麻6份、褚实9份、人参3份、茯苓5份、肉苁蓉3份、益智仁3份、远志4份、石菖蒲4份、银杏叶5份。
本实施例中药组合物的制备方法：
S21：按本实施例原药方剂的计量比取天麻、褚实、人参、茯苓、肉苁蓉、益智仁、远志、石菖蒲、银杏叶原药；
S22：按照实施例1中步骤S12进行操作；
S23：按照实施例1中步骤S13进行操作。
实施例3
本实施例提供一种用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药组合物及其制备方法。包括如下重量份原药方剂的提取物：
天麻9份、褚实3份、人参3份、茯苓12份、肉苁蓉6份、益智仁3份、远志3份、石菖蒲3份、银杏叶15份。
本实施例中药组合物的制备方法：
S31：按本实施例原药方剂的计量比取天麻、褚实、人参、茯苓、肉苁蓉、益智仁、远志、石菖蒲、银杏叶原药；
S32：按照实施例1中步骤S12进行操作；
S33：按照实施例1中步骤S13进行操作。
实施例4
本实施例提供一种用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药组合物及其制备方法。该包括如下重量份原药方剂的提取物：
天麻3份、褚实3份、人参3份、茯苓6份、肉苁蓉6份、益智仁5份、远志5份、石菖蒲5份、银杏叶10份。
本实施例中药组合物的制备方法：
S41：按本实施例原药方剂的计量比取天麻、褚实、人参、茯苓、肉苁蓉、益智仁、远志、石菖蒲、银杏叶原药；
S42：按照实施例1中步骤S12进行操作；
S43：按照实施例1中步骤S13进行操作。
对比例1
本对比例提供一种中药组合物及其制备方法。该包括如下重量份原药方剂的提取物：
天麻3份、人参3份、茯苓6份、肉苁蓉6份、益智仁6份、远志3份、银杏叶6份。
本对比例中药组合物制备方法按照上述实施例1的制备方法制备。
对比例2
本对比例提供一种中药组合物及其制备方法。该包括如下重量份原药方剂的提取物：
人参3份、茯苓6份、肉苁蓉6份、益智仁6份、远志3份。
本对比例中药组合物制备方法按照上述实施例1的制备方法制备。
对比例3
本对比例提供一种中药组合物及其制备方法。该中药组合物与上述实施例1相同，包括如下重量份原药方剂的提取物：
天麻3份、褚实6份、人参3份、茯苓6份、肉苁蓉6份、益智仁6份、远志3份、石菖蒲3份、银杏叶6份。
本对比例中药组合物的制备方法：
S31：按本对比例原药方剂的计量比取天麻、褚实、人参、茯苓、肉苁蓉、益智仁、远志、石菖蒲、银杏叶原药；
S32：将称取的所述中药材进行粉碎处理后采用沸水浸提处理；收集提取液，直接浓缩干燥处理。
相关性能测试：
将上述实施例1-4提供的中药组合物和对比例1-3提供的中药组合物分别做对Aβ1-40诱导PC12细胞形态及轴突生长影响的实验。该实验设置空白对照组、添加有神经生长因子组(NGF组)、AD细胞模型组和上述实施例1-4提供的中药组合物和对比例1-3提供的中药组合物分别设置样品组；其中，实施例1提供的中药组合物设置低剂量组、中剂量组、高剂量组，上述实施例2-4提供的中药组合物和对比例1-3提供的中药组合物分别设置的中剂量组。测得结果如图1和表1所示。
表1各组细胞突起阳性细胞率及平均突起长度(n＝18)
注：与AD细胞模型组比较，▲P＜0.05，*P＜0.01；与NGF组比较，#P＜0.05。
其中，空白对照组、NGF组、AD细胞模型组和实施例1提供的中药组合物设置低剂量组、中剂量组、高剂量组对Aβ1-40诱导PC12细胞形态及轴突生长的影响如图1所示。其中，图1中的A为空白对照组细胞形态及轴突生长图、B为NGF组细胞形态及轴突生长图、C为AD细胞模型组细胞形态及轴突生长图、D为实施例1提供的中药组合物低剂量组细胞形态及轴突生长图、E为实施例1提供的中药组合物中剂量组细胞形态及轴突生长图、F为实施例1提供的中药组合物高剂量组细胞形态及轴突生长图。
结合图1和表1所见，不含NGF的PC12细胞贴壁生长后，细胞形态呈圆形，椭圆型，未见明显的突起。加入NGF处理后，细胞突起明显，一些成熟的神经元细胞的突起长度可达到100μm以上，有些甚至已经达到200μm，阳性细胞率96.58％。添加Aβ1-40处理后，部分细胞死亡，细胞碎片增多，细胞形态多样呈圆形、椭圆型、三角形、锥形或多角形，可见l～3个短小突起；同时分别采用低、中、高剂量提取物含药脑脊液作用后，细胞突起明显增多增长，中高剂量组细胞轴突交织成网状，有些细胞突起达100μm以上，阳性细胞率及细胞平均突起长度显著高于模型组，(P<0.05或P<0.01)。另外，实施例2-4的实验结果与实施例1的近似，均对Aβ1-40所致的抑制PC12细胞分化的细胞毒性具有明显的拮抗和改善作用，可促进细胞突起生长并向神经样细胞分化。但是与对比实例相比，对比例1和2由于原药方剂的配伍不同，其对Aβ1-40所致的抑制PC12细胞分化的细胞毒性拮抗和改善作用明显不如本实施例1-4的效果，其促进细胞突起生长并向神经样细胞分化效果也明显不及本实施例1-4的效果。由于对比文件3虽然其原药方剂与实施例1相同，但是由于其提取工艺与实施例1-4的不同，因此，其对Aβ1-40所致的抑制PC12细胞分化的细胞毒性拮抗和改善作用也明显不如本实施例1-4的效果，其促进细胞突起生长并向神经样细胞分化效果也明显不及本实施例1-4的效果。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种中药组合物，其特征在于，用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞，包括如下重量份原药方剂的提取物：
天麻3-9份、褚实3-9份、人参3-9份、茯苓5-12份、肉苁蓉3-9份、益智仁3-9份、远志3-9份、石菖蒲3-9份、银杏叶5-15份。
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，包括如下重量份原药方剂的提取物：
天麻3份、褚实6份、人参3份、茯苓6份、肉苁蓉6份、益智仁6份、远志3份、石菖蒲3份、银杏叶6份。
3.一种用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
按照权利要求1-2任一所述的中药组合物的原药方剂称取各组分中药材；
将称取的所述中药材进行粉碎处理后，用乙醇溶液提取处理，对滤液进行减压浓缩处理，得到第一浓缩稠膏；
将所述乙醇溶液提取处理后的滤渣用水提取处理，滤液采用70％v/v乙醇溶液进行沉淀处理后减压浓缩处理，得到第二浓缩稠膏；
将所述第一浓缩稠膏和所述第二浓缩稠膏混合后采用微波干燥；
其中，在所述乙醇溶液提取处理和水提取处理过程中均伴随微波处理。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述乙醇溶液提取处理方法为：将粉碎处理后的所述中药材与浓度为30％-70％v/v乙醇溶液混合后进行微波提取处理至少2次，每次10±2min，所述微波功率560瓦；
所述水提取处理方法为：将滤渣与水混合后进行微波提取处理至少2次，每次12±2min，所述微波功率560瓦。
5.根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于：对所述第一浓缩稠膏和所述第二浓缩稠膏混合后采用微波干燥的条件为：微波功率5kW±0.5kw，干燥时间14±5min，铺盘厚度2.0±0.5cm，真空度-0.01～-0.09MPa。
6.根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于：粉碎处理后的所述中药材与所述乙醇溶液混合重量比为1:10；所述滤渣与水混合重量比为1:10；和/或
所述第一浓缩稠膏和所述第二浓缩稠膏的密度为1.6-2.5g/ml。
7.根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于：所述中药材被粉碎处理后过10目筛。
8.一种用于逆转Aβ淀粉样蛋白损伤神经细胞的中药药品，包括药物可接受的辅料，其特征在于：还包括有效剂量的权利要求1-2所述的中药组合物或由权利要求3-7任一所述的制备方法制备的中药组合物。
9.根据权利要求8所述的中药药品，其特征在于：所述中药药品的剂型为合剂、胶囊剂、片剂、丸剂、散剂、粉剂或颗粒剂中的任一剂型。
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