본 발명자들은, 상기 과제를 해결하기 위해서 당질의 이용에 착안하여, 예의연구를 계속해 왔다. 즉, 식물성 가식물이나 식물성 항산화 물질 등의 식물 유래의 활성산소 소거능을 가진 물질에 각종 당질을 함유시켜, 그 활성산소 소거능의 저감 억제 효과에 미치는 당질의 영향을 조사하였다. 그 결과, 아래의 화학식 1로 나타내어지는 환상 4당이 다른 당질에 비해서 현저한 효과를 나타내고, 식물 유래의 활성산소 소거능의 저감을 현저하게 억제하는 것을 발견하여 본 발명을 완성하였다.
[화학식 1]
화학식 1로 나타내어지는 환상 4당은, 문헌[Gail M. Bradbrook 등, Carbohydrate Research, Vol. 329, pp. 655-665 (2000년)]에 기재되어 있는 바와 같이, 글루코오스가 4개, α-1,3과 α-1,6결합에 의해 환상구조를 형성한, 즉, 사이클로{→6)-α-D-글루코피라노실-(1→3)-α-D-글루코피라노실-(1→6)-α-D-글루코피라노실-(1→3)-α-D-글루코피라노실-(1→}의 환상구조를 가진 비환원성의 당질이다(이후, 본 명세서에 있어서는 간단히 「환상 4당」이라 함。)。이 당질은, 예를들면, 본 출원인이 국제특허출원 PCT/JPOl/04276호 명세서, 국제특허출원 PCT/JPOl/06412호 명세서 등에서 나타낸 방법에 준하여, 전분으로부터 α-이소말토실글루코 당질 생성 효소와 α-이소말토실 전이 효소를 이용하는 효소 당화법을 이용해서 얻을 수 있다. 그리고 환상 4당의 형상으로서는, 시럽, 매스키트 결정 분말, 함수결정, 무수결정 또는 비정질 고체 등을 적당히 채용할 수 있다. 본 발명의 활성산소 소거능 저감 억제제 중의 환상 4당의 함량은, 식물성 가식물 등에 함유시켜 식물성 가식물 등이 가진 활성산소 소거능의 저감의 억제 효과를 발휘할 수 있으면 좋고, 통상적으로, 무수물 환산으로, 약 10w/w%(이하, 본 명세서에서는 별달리 명시하지 않는 한, w/w%을 간단히 %로 나타냄.) 이상, 바람직하게는 약 20% 이상, 보다 바람직하게는 약 50% 이상이 적합하다. 또한, 본 발명의 식물성 가식물 및/또는 식물성 항산화 물질 함유 조성물에 대하여, 환상 4당으로서, 무수물 환산으로, 통상, 약 1% 이상, 바람직하게는 약 5% 이상, 보다 바람직하게는 약 20% 이상 함유시키는 것이 적합하다. 일반적으로, 환상 4당의 량이, 무수물 환산으로 약 1% 미만에서는 활성산소 소거능의 저감 억제 작용이 불충분한 경향이 있다. 그리고 본 발명에서 말하는 "무수물 환산"이라 함은, "본 발명의 식물성 가식물 및/또는 식물성 항산화 물질 함유 조성물에 있어서 수분을 전혀 함유하지 않는다고 하는 이상적인 건조 상태하에 있어서의 고형물 중량으로 환산"하는 것으로서, 예를 들면, 통상적으로 실시되는 건조 공정에서는 제거할 수 없는 수분을 카알 피셔법 등의 방법에 의해 측정하고, 조성물의 건조 중량으로부터 그 수분량을 뺌으로써 산출할 수 있다.
본 발명에서 하는 "함유시킨다"라 함은 "공존시킨다"는 것을 뜻하고, 식물 유래의 활성산소 소거능을 가진 물질에 본 발명의 활성산소 소거능 저감 억제제 혹은 그 유효성분인 환상 4당을 함유시킬 경우에는, 그렇게 함으로써, 식물 유래의 활성산소 소거능의 저감을 억제시키는 효과를 발휘할 수 있는 통상적인 방법이면 모두 이용할 수 있다. 바람직하게는, 식물성 가식물 및/또는 식물성 항산화 물질과 환상 4당을 수성매체 존재하에 될 수 있는 한 균일하게 접촉시켜서 함유시키는 것이 좋다. 구체적으로 설명하면, 예를 들면, 식물성 가식물 등이 액상물 내지 현탁상물과 같은 다즙(多汁) 상태인 경우에는, 여기에 분말, 결정 등의 고상의 환상 4당을 될 수 있는 한 균일하게 혼합용해시켜 함유시키거나, 또는 시럽상의 환상 4당을 될 수 있는 한 균일하게 혼합해서 함유시키면 좋다. 그리고 식물성 가식물 및 식물성 항산화 물질 등이 고상일 경우에는, 여기에 적당량의 수성 매체를 첨가해서 액상물 내지 현탁상물과 같은 다즙 상태로 한 후, 환상 4당을,
(가) 상기한 바와 같이 처리해서 함유시키거나, 또는,
(나) 적당량의 수성 매체에 의해 시럽상으로 된 환상 4당을 준비하고, 여기에 고상의 식물성 가식물 및/또는 식물성 항산화 물질을 분산, 용해 내지 현탁하고, 될 수 있는 한 균일하게 접촉시켜, 식물성 가식물 및/또는 식물성 항산화 물질에 환상 4당을 함유시키면 좋다.
수성매체로서는, 보통 물이 사용되고, 경우에 따라서는, 바닷물, 해양 심층수, 우유, 혈청, 수프 등으로 예시되는, 산, 염기, 미네랄, 당질, 알코올, 아미노산, 및 단백질 등의 물질을 본 발명의 효과를 해치지 않는 범위 내에서 함유하는수용액을 사용할 수도 있다. 그리고 식물성 가식물이 생(生)식물조직을 잘게 절단하거나 혹은 슬라이스한 것과 같은 것일 경우에는, 여기에 고상의 환상 4당을 뿌려 혼합해서 용해하여 함유시키거나, 또는 시럽상 환상 4당 용액에 침지 하는 등으로 하여 이 식물의 조직 내부에 될 수 있는 한 균일하게 환상 4당을 함유시키면 좋다. 식물성 가식물 등에 환상 4당을 접촉시켜 함유시킬 때의 온도, 시간 등의 조건은, 필요에 따라 적당히 선택할 수 있다.
본 발명에서 사용할 수 있는 식물 유래의 활성산소 소거능을 가진 물질이라 함은, 가식성 식물의 기관 및/또는 조직 바로 그 자체이거나, 가식성 식물의 가식부(可食部)의 절단물, 파쇄물, 분쇄물, 건조물, 절임물, 및 그 가식부의 추출물 및/또는 식물성 항산화 물질 등을 의미한다. 가식성 식물로서는, 예를 들면, 당근, 연근, 양파, 우엉, 무우, 토란, 마, 고구마, 감자 등의 근채(根菜); 레터스, 치커리, 배추, 양배추, 케일, 모로헤이야, 갈대속, 시금치, 덩굴지치, 평지나물, 습지나물, 쑥갓, 친겐사이, 순무뿌리 등의 잎나물; 오크라, 콜리플라워, 브로콜리, 가지, 토마토, 오이, 호박, 서양 호박, 피망, 코뚜리째 먹는 청대 완두, 코뚜리째 먹는 강낭콩 등의 과채(果菜); 알팔파, 대두 콩나물, 녹두 콩나물 등 콩나물류 등의 야채류; 표고버섯, 팽나무 버섯, 시메지 버섯 등의 버섯류; 녹미채, 미역, 다시마 등의 해초류; 레몬, 유자, 초귤, 주란귤 등의 감귤; 바나나, 파인애플, 키위 프루츠, 딸기, 산사나무, 블루베리, 포도, 복숭아, 사과, 배, 밤 등의 과일류; 마늘, 생강, 고추냉이, 겨자, 파슬리, 중국 파슬리, 푸른 차조기, 붉은 차조기, 부추, 파, 셀러리, 미나리, 크레송, 고추, 산초나무, 페퍼, 로즈마리, 박하 등의 허브류;쑥, 질경이, 삼백초, 용담뿌리, 알로에, 감초, 울금, 쪽(藍), 브라질 당근(파피아), 비파나무의 잎, 야생 속새잎, 솔잎, 대나무잎, 매실, 차잎, 보리 새잎, 밀잎, 귀리잎, 라이잎, 메밀 잎, 은행 잎, 두중차, 바나바, 루이보스, 김네마 등의 약초; 생약류, 그 외에, 율무, 메밀, 참깨, 쌀, 보리, 옥수수, 잠두콩, 대두, 땅콩, 호도, 솔방울, 종실(種實) 배아, 피스타치오 너트, 아몬드, 캐슈 너트, 마카다미아 너트 등의 종실류 등의 가능부가 적당히 사용된다. 또한, 가식성 식물의 절인 것으로서는 앞서 설명한 근채, 잎나물, 과채 등의 야채류의 소금절임, 겨(糠)절임, 누룩 절임, 박(粕) 절임, 된장 우러난 물 절임, 식초 절임, 김치 등 각종의 절임류가 적당히 사용된다.
식물성 항산화 물질로서는, 예를 들면, 슈퍼옥사이드 디스무타아제, 카탈라아제, 퍼옥시다아제 등의 활성산소 소거능을 가진 식물 유래의 효소 등의 외에, 루틴, α-글루코실 루틴, 헤스페리딘, α-글루코실 헤스페리딘, 나린진, α-글루코실 나린진, 클로로필, 카로티노이드, 안토시아닌 등의 식물 유래의 색소, 몰식자산, 카테킨, α-글루코실 카테킨, 탄닌산, 엔조지놀(소나무 껍질 추출물), 그레이프 시이드 추출물 등의 식물 유래의 폴리페놀; 및 α-토코페롤, L-아스코르브산, 리보플라빈 등의 식물 유래의 비타민 등의 식물 유래의 비교적 저분자량의 항산화 물질의 1종 또는 2종 이상이 적절히 선택된다. 본 발명에 있어서, 식물 유래의 비교적 저분자량의 항산화 물질은, 가식성 식물에 원래 포함되어 있어도 좋고, 필요에 따라서, 가식성 식물의 가식부를 가공 처리할 때에 새롭게 첨가된 것이어도 좋고, 더욱이 가식성 식물과는 별도로 단독으로 존재하는 것이어도 좋다. 또한, 이들 식물성항산화 물질은 반드시 실제로 식물로부터 추출된 것일 필요는 없고, 인위적으로 합성, 제조된 것이어도 좋다.
본 발명의 활성산소 소거능의 저감을 억제한 조성물의 제조 방법에 대해서 보다 구체적으로 설명하면, 가식성 식물의 가식부를, 예를 들면,
(1) 필요에 따라서 가열 살균한 후, 믹서, 쥬서, 세단기(細斷機), 절단기, 슬라이서 등으로 파쇄 또는 절단해서 페이스트 내지 현탁 상태의 것 또는 절단물로 하고, 여기에 환상 4당을 혼합용해시켜서 함유시키거나, 또는,
(2) 열수(熱水), 알코올 등의 용매로 추출하여 여과하고, 필요에 따라서, 농축해서 액상 내지 페이스트상의 것으로 하고, 여기에 환상 4당을 혼합용해시켜서 함유시키면 좋다.
이렇게 하여 얻게 되는 조성물은, 통상적으로 시럽상 내지 페이스트상 조성물 또는 절단물 함유 다즙(多汁) 조성물이며, 수분함량이 비교적 높고, 안정하게 유지하는데 저온저장을 필요로 하는 난점이 있다. 이들 시럽상 내지 페이스트상 조성물 또는 절단물 함유 다즙 조성물을 그대로 건조하거나 혹은 건조 후에 분말화하거나, 또는 가열 살균 후에, 건조하거나 혹은 건조·분말화하는 등에 의하여, 분말상 또는 세편상(細片狀)의 고상 조성물을 얻는다. 건조·분말화의 방법은 공지의 방법을 적절히 채용할 수 있다. 예를 들면, 이들 조성물을 분말상 제품으로 제조할 경우에 있어서,
(1) 진공 건조, 통풍 건조, 드럼 건조의 후에 분쇄 및 체가름(sieving)하거나, 혹은
(2) 분무 건조, 유동 건조의 후에 체가름 하여 분말상 제품으로 하거나, 또는
(3) 무수 말토오스, 무수 트레할로오스, 또는 무수 환상 4당 등의 무수 당질을 혼합하고, 탈수, 건조시킨 후에 체가름하는 등에 의해서 분말제품으로 한다.
이들 분말제품을, 필요에 따라서, 다시 과립, 정제, 캡슐 등의 적당한 형상으로 해서 이용하는 것도 유리하게 실시할 수 있다. 이러한 고상 조성물까지 가공도를 높임으로써, 보존 안정성이 향상하고, 활성산소 소거능 저감 억제 효과가 더욱 높아질 뿐만 아니라 취급도 용이해진다. 또한, 이렇게 하여 얻은 식물성 가식물 함유 고상의 조성물은 원료인 가식성 식물이 원래 가지고 있는, 예를 들면, 클로로필, 카로티노이드, 안토시아닌, 플라보노이드 등의 식물성 색소의 열화가 억제되어 있고, 더욱이 본래의 색조를 잘 유지하는 특징이 있고, 또한, 쓴 맛, 떫은 맛 등의 불필요한 맛을 마스크 하는 특징도 있다.
본 발명의 활성산소 소거능의 저감을 억제한 조성물에는, 활성산소 소거능을 가진 식물성 가식물, 식물성 항산화 물질 및 환상 4당 외에, 필요에 따라서, 더욱이 기타의 당질, 필수 미네랄, 식물(食物)섬유, 비피더스균 증식촉진 당질, 비타민, 생리활성 물질 및 보존료 등으로부터 선택되는 1종 또는 2종 이상의 적당한 물질을 고상 또는 용액상으로 함유하게 하는 것도 유리하게 실시할 수 있다.
당질로서는, 예를 들면, 트레할로오스, 말티톨, 만니톨 등을 유리하게 이용할 수 있다. 필수 미네랄로서는, 예를 들면, 칼슘, 마그네슘, 인, 철, 구리, 아연, 코발트 등으로부터 선택되는 미네랄을 적당량 사용하면 좋다. 식물(食物) 섬유로서는, 예를 들면, 펙틴, 아르긴산, 카라기난, 아라비아 고무, 글루코만난, 시클로덱스트린, 풀룰란 등을 유리하게 이용할 수 있다. 특히, 트레할로오스 및/또는 풀룰란 및/또는 시클로덱스트린이 바람직하고, 활성산소 소거능의 저감을 억제한 조성물의 제조에 환상 4당과 함께 유리하게 이용할 수 있다.
비피더스균 증식 당질로서는, 예를 들면, 락토수크로오스, 프룩토올리고당, 갈락토올리고당, 이소말토올리고당 등이, 필요에 따라서 적당히 사용된다.
비타민으로서는, 예를 들면, 티아민, 리보플라빈, L-아스코르브산, 루틴, 헤스페리딘, 나린진, 나이아신, 피리독신, 시아노코발라민 등의 수용성 비타민 혹은 이들의 유도체나, 비타민 A, 비타민 D, α-토코페롤, 비타민 K 등의 지용성 비타민 혹은 이들의 유도체 등이 유리하게 이용된다.
생리활성 물질로서는, 예를 들면, 호르몬, 항생물질, 사이토카인, 프로폴리스 등의 1종 또는 2종 이상을, 필요에 따라 이용하는 것도 마음대로이다. 보존료로서는, 예를 들면, 에탄올, 아세트산, 락트산, 식염 등의 적당량을, 필요에 따라 이용하는 것도 마음대로이다.
더욱이 본 발명의 조성물이나 본 발명의 조성물을 함유시킨 제품의 품질을 향상시키기 위해서, 필요에 따라서, 적당한 착향료, 착색료, 맛 부여제, 안정제, 증량제 등을 병용하는 것도 유리하게 실시할 수 있다.
또한, 본 발명에 따르면, 환상 4당을 유효성분으로 하는 활성산소 소거능 저감 억제제를, 식물 유래의 활성산소 소거능을 가진 물질에 함유시켜서 그 활성산소 소거능의 저감을 억제하는 것도 유리하게 실시할 수 있다. 활성산소 소거능 저감억제제에서의 환상 4당의 함량은, 식물 유래의 활성산소 소거능의 저감을 억제시키는 효과를 발휘할 수 있으면 좋고, 통상적으로, 이 억제제에 대하여, 무수물 환산으로 약 10% 이상, 바람직하게는 약 20% 이상, 보다 바람직하게는 약 50% 이상이다. 본 발명의 활성산소 소거능 저감 억제제는, 유효성분인 환상 4당만으로 구성되어도 좋고, 필요에 따라서, 위에 나온 필수 미네랄, 식물(食物) 섬유, 비피더스균 증식촉진 당질, 비타민, 생리활성 물질 및 보존료 등 기타의 물질로부터 선택되는 1종 또는 2종 이상을 병용하는 것도 마음대로이다.
이렇게 하여 얻게 되는 활성산소 소거능 저감 억제제는, 그 형상을 막론하고, 예를 들면, 시럽, 분말, 결정, 과립, 정제 등 어느 하나의 형상이어도 좋다. 또한, 본 발명의 활성산소 소거능 저감 억제제는, 식물성 가식물 등이 가진 활성산소 소거능의 저감 억제 효과를 발휘할 수 있으면 좋고, 그 사용 방법은 묻지 않는다. 예를 들면, 앞서 설명한, 환상 4당을 함유시키는 식물 유래의 활성산소 소거능 저감 억제방법에 준해서 사용하면 좋다. 구체적으로는, 식물성 가식물 및/또는 식물성 항산화 물질에 대한 유효성분인 환상 4당의 사용량도, 또한 사용 방법, 사용 조건 등에 대해서도, 앞서 설명한, 환상 4당을 함유시키는 활성산소 소거능 저감 억제방법과 마찬가지로 하면, 식물 유래의 활성산소 소거능의 저감 억제 효과를 유리하게 발휘할 수 있어, 활성산소 소거능 저감을 억제한 각종 조성물을 용이하게 조제할 수 있다.
이상 설명한 바와 같이 하여 얻어진 본 발명의 조성물은, 아래에서 설명하는 실험 2에서 설명하는 니토로블루우 테트라졸륨법에 의해 측정한 활성산소 소거능이, 고형물 1g당 5 단위 이상, 바람직하게는 10 단위 이상이다. 또한 이들 조성물은 경시 변화도 적고, 안정한 활성산소 소거능을 가지며, 경구, 경관, 경피, 경점막 등의 적당한 경로에 의해 환자에게 용이하게 투여하여 이들의 질을 실질적으로 열화함이 없이 활성산소 소거능을 부여할 수 있다. 본 발명의 식물성 가식물 함유 조성물의 섭취는, 생체에 있어서, 식물성 가식물이 원래 가진 비타민, 미네랄, 식물 섬유 등의 기능성 성분에 더해서, 새로이 활성산소 소거능을 강화하는 것이 되므로, 건강의 유지 증진, 노화 방지, 성인병의 예방, 난치병의 치료 촉진, 발암의 억제 등에 만족스럽게 사용할 수 있고, 또한, 음식물, 화장품, 의약품, 이들의 원재료 또는 가공중간물 등으로서 유리하게 이용할 수 있다.
본 발명의 조성물의 용도에 대해서는, 각종 건강 음식물에의 이용은 물론이고, 일반적인 음식물로서도, 예를 들면, 조미된 어육, 소스, 케첩, 불고기용 소오스, 커리 루우, 인스탄트 수프 믹스 등의 조미료; 쌀떡, 경단, 캔디, 츄잉검, 구운 과자, 스낵 과자, 와플, 스폰지 케익, 만두 및 빵 등의 각종 일본 과자 및 서양 과자류; 아이스 크림, 아이스 캔디 등의 빙과류; 프루츠 페이스트, 프루츠 소스, 땅콩 페이스트, 생(生) 잼류 등의 페이스류; 피클 및 절임류; 소세지, 햄 등의 축육(畜肉)제품; 어묵, 오뎅, 생선 굳힌 식품, 소세지 등의 어육제품; 진미; 해산물 조림; 반찬; 주류; 야채 쥬스, 두유, 쥬스, 탄산음료 등의 청량음료; 죽, 잡탕죽, 조미료, 고기, 야채를 넣은 볶음밥 등의 쌀밥류; 냉면, 스파게티, 마카로니, 파스타 등의 국수 종류; 스낵 식품, 푸린 믹스, 핫케이크 믹스, 즉석 쥬스, 즉석 수프, 냉동 식품 등의 음식물; 이들의 원재료 또는 가공중간물 등으로서 품질개량, 맛개량,기호성 개선, 영양강화 등의 목적으로 유리하게 이용된다.
또한, 본 발명의 조성물을 화장품으로서 사용할 수 있는데, 예컨대, 피부 미화제, 팩제, 크림, 샴푸, 린스, 육모제, 목욕용제, 효소제, 치약 등에 있어서, 예를 들면, 액제, 페이스트제, 분제, 과립제, 이들의 원재료 또는 가공중간물 등으로서 유리하게 이용된다.
더욱이 의약품으로서는, 경구 및/또는 경관 영양제, 치료제, 인터페론 유도제 등으로, 예를 들면, 액제, 페이스트제, 과립제, 정제, 캡슐제 또는 이들의 원재료 등으로서 유리하게 이용되고, 또한, 경피, 경점막 영양제, 치료제 등으로, 예를 들면 점안제, 점비제, 소화제, 건위제, 효소제, 연고, 팝제, 이들의 원재료 또는 가공 중간물 등으로 하여 앞서 설명한 노화에 따르는 각종 질환의 치료, 예방 등에 유리하게 이용된다.
본 발명의 활성산소 소거능의 저감을 억제한 조성물은, 기본적으로는, 식품재료로 구성되어 독성을 우려하지 않고 이용할 수 있고, 이것을 경구섭취할 경우, 통상적으로 성인 1일당, 무수물 환산으로, 약 0.1 내지 1000g, 바람직하게는 약 0.2 내지 500g, 보다 바람직하게는 약 1 내지 100g의 범위에서 이용하는 것이 바람직하다. 경관, 경피, 경점막 등의 다른 경로에 의한 이용의 경우도, 경구섭취의 경우의 양에 준해서 이용하면 좋다.
이하, 본 발명을 실험에 의해 상세히 설명한다.
실험 1: α-이소말토실글루코 당질 생성 효소와 α-이소말토실 전이 효소의 제조
전분 부분 분해물(상품명 『PINE-DEX #4』, 일본국의 松谷화학 주식회사제) 4.0w/v%, 효모 추출물(상품명 『ASAHIMEAST』(일본국의 아사히 맥주 주식회사제) 1.8w/v%, 인산 2칼륨 0.1w/v%, 인산 1나트륨·12수염(水鹽) 0.06w/v%, 황산 마그네슘·7수염 0.05w/v%, 및 물로 된 액체배지를 500ml 용량의 삼각 플라스크에 100ml씩 넣고, 오토클레이브에서 121℃에서 20분간 멸균하여 냉각하고, 바실루스 글로비스포루스 C9 (FERM BP-7143)를 접종하고, 27℃, 230rpm에서 48시간 회전진탕 배양한 것을 종배양으로 하였다.
용량 30L의 퍼멘터에 상기한 종배양에서 사용한 것과 동일 조성의 액체배지를 약 20L 넣고, 가열 멸균, 냉각해서 온도 27℃로 한 후, 종배양액 1v/v%을 접종하고, 온도 27℃, pH 6.0 내지 8.0으로 유지하면서 48시간 통기교반 배양하였다. 배양 후, 배양액 중의 α-이소말토실글루코 당질 생성 효소활성은 약 0.45 단위/ml이고, α-이소말토실 전이 효소활성은 약 1.5 단위/ml이며, 환상 4당 생성 활성은 약 0.95 단위/ml이고, 원심분리(10,000rpm, 30분간)하여 회수한 상청 약 18L의 효소활성을 측정한 결과, 이 상청은, α-이소말토실글루코 당질 생성 효소는 약 0.45 단위/ml의 활성(총 활성 약 8,110 단위)이고, α-이소말토실 전이 효소는 약 1.5 단위/ml의 활성(총 활성 약 26,900 단위)을 가지고 있었다. 이 배양상청을 80% 포화 황산 암모늄액으로 염석하여 4℃에서 24시간 방치한 후, 그 염석 침전물을 원심분리(10,000rpm, 30분간)하여 회수하고 10mM 인산 완충액(pH 7.5)에 용해 후, 이 완충액에 대하여 투석해서 조(粗)효소액 약 400ml을 얻었다. 이 조효소액은, α-이소말토실글루코 당질 생성 효소활성을 8,110 단위와, α-이소말토실 전이 효소활성을 24,700 단위와, 환상 4당 생성 활성을 약 15,600 단위 가지고 있었다.
한편, 상기 효소활성은 다음과 같이 해서 측정하였다. 즉, α-이소말토실글루코 당질 생성 효소활성은, 말토트리오스를 농도 2w/v%가 되도록 100mM 아세트산 완충액(pH 6.0)에 용해시켜 기질액으로 하고, 그 기질액 0.5ml에 효소액 0.5ml을 가하고 35℃에서 60분간 효소반응하고, 그 반응액을 10분간 펄펄 끓여서 반응을 정지시킨 후, 그 반응액 중에 주로 생성하는 이소말토실말토오스와 말토오스의 중에서, 이 말토오스의 량을 고속 액체 크로마토그래피(이하, 『HPLC법』이라 약기함.)로써 정량하였다. HPLC법은, 『YMC Pack ODS-AQ303』 칼럼(일본국의 주식회사 YMC제)을 사용하여 칼럼 온도 40℃, 유속 0.5ml/min 물의 조건으로 실시하고, 검출은 사차(示差) 굴절계 『RI-8012』(일본국의 Tosoh 주식회사제)을 사용하여 하였다. α-이소말토실글루코 당질 생성 효소의 활성 1 단위는, 상기의 효소반응 조건하에서 1분간에 1 μ몰의 말토오스를 생성하는 효소량으로 정의하였다.
그리고 α-이소말토실 전이 효소활성은, 파노오스를 농도 2w/v%가 되도록 100mM 아세트산 완충액(pH 6.0)에 용해시켜 기질액으로 하고, 그 기질액 0.5ml에 효소액 0.5ml을 가하고 35℃에서 30분간 효소반응하고, 그 반응액을 10분간 펄펄 끓여서 반응을 정지시킨 후, 그 반응액 중에 주로 생성하는 환상 4당과 글루코오스의 중에서, 이 글루코오스의 량을 글루코오스 옥시다아제법으로 정량하였다. α-이소말토실 전이 효소의 활성 1 단위는, 상기의 효소반응 조건하에서 1분간에 1 μ몰의 글루코오스를 생성하는 효소량으로 정의하였다.
더욱이 환상 4당 생성 활성은, 전분 부분 분해물(상품명 『PINE-DEX #100』,일본국의 松谷화학 주식회사제)을 농도 2w/v%이 되도록 50mM 아세트산 완충액(pH 6.0)에 용해시켜 기질액으로 하고, 그 기질액 0.5ml에 효소액을 O.5ml 가하고, 35℃에서 60분간 효소반응하고, 그 반응액을 100℃에서 10분간 열처리해서 반응을 정지시킨 후, 다시 α-글루코시다아제(상품명 『트란스글루코시다아제 L 아마노』, 일본국의 天野제약제) 70 단위/ml와 글루코아밀라아제(일본국의 나가세 생화학공업 주식회사 판매) 27 단위/ml를 함유하는 50mM 아세트산 완충액(pH 5.0)을 1 ml 가하고, 50℃에서 60분간 처리하고, 그 액을 100℃에서 10분간 열처리하여 효소를 실활시킨 후, 환상 4당의 량을 상기한 HPLC법으로 정량하였다. 환상 4당 생성활성 1 단위는, 상기한 효소반응 조건하에서 1분간에 1 μ몰의 환상 4당을 생성하는 효소량으로 정의하였다.
실험 2: 환상 4당의 조제
옥수수 유래의 피토글리코겐(일본국의 Q. P. 주식회사제)의 수용액(약 100L)을 농도 4w/v%, pH 6.0, 온도 30℃로 조정한 후, 실험 1의 방법으로 얻은 바실루스 글로비스포루스 C9 유래의 α-이소말토실글루코 당질 생성 효소와 α-이소말토실 전이 효소를 함유하는 효소액을 전분 1 그램당 0.15ml 가하고 48시간 반응시킨 후, 100℃에서 10분간 열처리해서 효소를 실활시켰다. 이 효소 반응액의 일부를 샘플링하여 HPLC법에 의해 환상 4당의 생성량을 정량(定量)한 결과, 당조성으로 약 84%이었다.
그리고 HPLC법은, 『쇼덱스(Shodex) KS-801 칼럼』(일본국의 昭和電工 주식회사제)을 사용하여 칼럼 온도 60℃, 유속 0.5ml/min 물의 조건으로 실시하고, 검출은 시차 굴절계 『RI-8012』(일본국의 Tosoh 주식회사제)를 사용하여 하였다.
이 효소 반응액을 pH 5.0, 온도 45℃로 조정한 후, α-글루코시다아제(상품명 『트란스글루코시다아제 아마노』, 일본국의 天野제약제)를 전분 1 그램당 1500 단위와, 글루코아밀라아제(상품명 『ⅩL-4』, 일본국의 나가세 생화학공업 주식회사제)를 전분 1 그램당 75 단위를 가하고 24시간 반응시켜서 잔존하는 환원성 올리고 당 등을 가수분해하였다. 수득한 배양액에 수산화 나트륨을 가하여 pH 5.8로 조정하고, 온도 90℃에서 1시간 유지해서 효소를 실활시킨 다음, 불용물을 여과하여 제거하였다. 이 여액(濾液)을 역침투막(상품명 『HOLLOSEP HR5155PI』, 일본국의 東洋紡績 주식회사제)을 사용하여 고형분 농도 약 16%까지 농축한 후, 통상적인 방법에 따라 탈색, 탈염, 여과, 농축함으로써, 고형분 약 3,700g을 함유하는 당액을 약 6.2kg 얻었다. 이 당액을, 이온교환 수지(상품명 『AMBERLITE CR-1310 (Na+형)형』, 일본국의 오르가노사제)를 충전한 칼럼(겔량 약 225L)에 사용하여 칼럼 온도 60℃에서 유속 약 45L/h의 조건으로 크로마토그래프 처리를 하였다. 용출액의 당 조성을 상기 HPLC법으로 모니터하고, 환상 4당의 순도가 98% 이상인 획분을 회수하여, 이것을 통상적인 방법에 따라 탈염, 탈색, 여과, 농축하여 고형분 약 2,500g을 함유하는 당액 약 7.5kg을 얻었다. 이 당액의 당 조성을 HPLC법으로 측정한 결과, 환상 4당의 순도는 약 99.5%이었다.
얻어진 환상 4당 함유 당액을 에바포레이터에서 농도 약 50%까지 농축한 후, 이 농축액 약 5kg을 원통상 플라스틱 용기에 넣고, 완만하게 회전시키면서 약20시간 동안 온도를 65℃로부터 20℃까지 강하시켜서 환상 4당을 결정석출시켰다. 계속해서, 원심여과기를 이용해서 결정화된 농축물을 분리하여 환상 4당 결정을 습중량으로 1,360g 회수하고, 다시 60℃에서 3시간 건조하여 환상 4당 결정 분말을 1,170g 얻었다. 이 결정 분말의 당 조성을 HPLC법으로 측정한 결과, 환상 4당 결정 분말의 순도는 99.9% 이상으로서 극히 고순도이었다.
실험 3: 활성산소 소거능의 저감 억제에 미치는 각종 당질의 영향
신선한 당근을 믹서에서 파쇄하고, 이 파쇄물에 대하여 각종 당질을 무수당질 중량으로 환산해서 10%의 농도가 되도록 혼합용해하고, 40℃에서 2일간 감압건조한 후, 같은 온도에서 24시간 진공건조하고, 믹서에서 분쇄하여 분말상 당근 함유 조성물을 조제하였다. 사용한 당질은, 실험 2의 방법으로 얻은 환상 4당, 시판의 시약인 글루코오스, 만니톨, 소르비톨, 말토오스, 수크로오스, 트레할로오스, 및 풀룰란을 사용하였다. 조제한 분말상 조성물 약 100g씩을 500ml 용량의 폴리스티렌제 용기에 넣어 밀봉하고, 40℃에서 7일간 보존하였다. 보존 전후의 각 조성물의 활성산소 소거능을 서로 비교하였다. 활성산소 소거능의 측정은, 니트로블루우 테트라졸륨(NBT)법[Toshio IMANARI et al. in Igakuno Ayumi, Vol. 101, pp. 496-497 (1977)]에 따라, 크산틴-크산틴 옥시다아제계에서 생성하는 슈퍼옥사이드량을, NBT를 환원해서 생기는 포르마잔량을 비색정량하여 측정하는 방법에 의해 실시하였다. 대조로서 정제수를 시험액으로 하였다. 대조와 비교해서 포르마잔 생성량을 50% 저해하는 활성을 활성산소 소거능의 활성 1 단위로 정의하였다. 조제한 분말상 조성물의 조성과 보존 개시 전후의 조성물 1g당의 활성산소 소거능을 표 1에 정리하였다. 표 1로부터 명백한 바와 같이, 시험한 당질 중에서, 환상 4당 및 트레할로오스를 사용한 것이 가장 활성산소 소거능의 잔존율이 높아, 환상 4당이 활성산소 소거능의 저감 억제에 현저한 효과를 나타내는 것이 밝혀지고, 그 억제 효과는 트레할로오스와 동등한 정도로 강한 것을 알았다. 따라서, 환상 4당은 활성산소 소거능 저감 억제제의 유효성분으로서 바람직하다. 또한, 환상 4당 및 트레할로오스의 다음으로, 풀룰란도 활성산소 소거능의 저감 억제 효과가 높았다.
[표 1]
당질 |
분말상 조성물 (%) |
당질함량,무수물 환산(%) |
활성(단위/g) |
활성잔존율(%) |
당근 |
당질 |
수분 |
보존 전 |
보존 후 |
무첨가 |
93.4 |
0.0 |
6.6 |
0.0 |
870 |
100 |
11 |
환상 4당 |
47.9 |
45.7 |
6.4 |
48.8 |
590 |
390 |
66 |
글루코오스 |
48.8 |
46.4 |
4.8 |
48.7 |
580 |
170 |
29 |
만니톨 |
49.8 |
47.5 |
2.7 |
48.8 |
520 |
59 |
11 |
소르비톨 |
48.2 |
46.0 |
5.8 |
48.8 |
560 |
26 |
5 |
말토오스 |
48.1 |
45.8 |
6.1 |
48.8 |
550 |
180 |
33 |
수크로오스 |
48.2 |
46.0 |
5.8 |
48.8 |
660 |
180 |
27 |
트레할로오스 |
47.9 |
45.7 |
6.4 |
48.8 |
580 |
380 |
66 |
풀룰란 |
47.7 |
45.5 |
6.8 |
48.8 |
710 |
360 |
51 |
실험 4: 활성산소 소거능의 저감 억제에 미치는 각종 당질의 영향
실험 3과 마찬가지로 신선한 당근을 파쇄하고, 이 파쇄물에 대하여 당질을 무수당질 중량으로 환산해서 10% 혼합용해하고, 40℃에서 1일간 감압건조한 후, 같은 온도에서 17시간 진공건조하고, 믹서로 분쇄하여 분말상 당근 함유 조성물을 조제하였다. 사용한 당질은, 실험 2의 방법으로 얻은 환상 4당, 시판의 시약인 글루코오스, 말토오스, 및 트레할로오스를 사용하였다. 조제한 분말상 조성물 약 100g씩을 500ml 용량의 폴리스티렌제 용기에 넣어 밀봉하고, 40℃에서 7일간 및 14일간 보존하였다. 보존 전후의 활성산소 소거능을 서로 비교하였다. 활성산소 소거능의 측정은, 전자 스핀 공명법(ESR법)[Toshihiko OZAWA in BUNSEKI, Vol. 2, pp. 68-74 (2000)]에 따라, 히포크산틴-크산틴 옥시다아제계에서 생성하는 슈퍼옥사이드를 5,5-디메틸-1-피롤린-N-옥사이드로써 스핀 트래핑함으로써, ESR에 의해서 측정하는 방법에 의해 실시하였다. 시판 슈퍼옥사이드 디스무타아제(일본국의 Sigma사제)를 0.1M 인산 완충액(pH 7.4)에 0.5 - 13.5 단위/ml가 되도록 희석하여 표준으로 하였다. 이 표준 효소액과 비교해서 활성산소 소거능의 활성을 정의하였다. 조제한 분말상 조성물의 조성과 보존 개시 전후의 조성물 1g당의 활성산소 소거능을 표 2에 정리하였다. 표 2로부터 명백한 바와 같이, 시험한 당질 중에서, 환상 4당 및 트레할로오스를 사용한 것이 가장 활성산소 소거능의 잔존율이 높아, 환상 4당이 활성산소 소거능의 저감 억제에 현저한 효과를 나타내는 것이 밝혀지고, 그 억제 효과는 트레할로오스와 동등한 정도로 강한 것을 알았다. 따라서, 환상 4당은 활성산소 소거능 저감 억제제의 유효성분으로서 바람직하다.
[표 2]
당질 |
분말상 조성물 (%) |
당질함량,무수물 환산(%) |
활성 (단위/g) |
당근 |
당질 |
수분 |
보존 전 |
보존1주간 |
보존2주간 |
무첨가 |
96.0 |
0.0 |
4.0 |
0.0 |
375 |
113(30%) |
87(23%) |
환상 4당 |
46.1 |
47.7 |
6.3 |
50.9 |
186 |
88(47%) |
66(36%) |
글루코오스 |
46.3 |
48.0 |
5.7 |
50.9 |
172 |
48(28%) |
36(21%) |
말토오스 |
46.5 |
48.5 |
5.0 |
51.1 |
236 |
56(24%) |
53(22%) |
트레할로오스 |
46.2 |
47.7 |
6.0 |
50.8 |
198 |
91(46%) |
73(37%) |
주) 표에서 괄호 속의 (%)는 활성 잔존율을 의미함.
실험 5: 활성산소 소거능의 저감 억제에 미치는 환상 4당 농도의 영향
실험 3과 마찬가지로, 당근 파쇄물에 대하여, 환상 4당을 무수당질 중량으로 환산해서 0 내지 20%의 양으로 혼합용해하고, 40℃에서 24시간 진공건조하고, 분쇄를 하여 분말상 당근 함유 조성물을 조제하였다. 이들 분말상 조성물을 실험 3과 마찬가지로 폴리스티렌제 용기에 넣어 밀봉하고, 40℃에서 7일간 보존하여 활성산소 소거능의 저감 억제 효과를 조사하였다. 조제한 분말상 조성물의 조성과 보존 전후의 조성물 1g당의 활성산소 소거능을 실험 3의 방법에 따라서 측정하였다.
그 결과를 표 3에 나타낸다. 표 3으로부터 환상 4당 공존량이, 무수물 환산으로 약 1% 이상, 바람직하게는 약 5% 이상, 보다 바람직하게는 약 20% 이상이 활성산소 소거능의 저감 억제 효과가 우수하였다.
[표 3]
당근 당의 환상 4당의 첨가량 (%) |
분말상 조성물의 조성 (%) |
환상 4당 함량, 무수물 환산 (%) |
활성(단위/g) |
활성잔존율(%) |
당근 |
환상4당 |
수분 |
보존 전 |
보존 후 |
0.0 |
95.3 |
0.0 |
4.7 |
0.0 |
940 |
330 |
35 |
0.1 |
94.3 |
1.0 |
4.7 |
1.0 |
930 |
390 |
42 |
0.5 |
90.4 |
4.7 |
4.9 |
4.9 |
820 |
470 |
57 |
1.0 |
85.9 |
8.9 |
5.2 |
9.4 |
740 |
450 |
61 |
2.5 |
75.3 |
19.6 |
5.1 |
20.7 |
700 |
460 |
66 |
5.0 |
62.3 |
32.4 |
5.3 |
34.2 |
550 |
340 |
62 |
10.0 |
46.1 |
48.1 |
5.8 |
51.1 |
420 |
290 |
69 |
20.0 |
30.3 |
63.1 |
6.6 |
67.6 |
390 |
280 |
64 |
실험 6: 각종 야채의 활성산소 소거능의 저감 억제에 미치는 환상 4당의 영향
각종 야채에 대해서 실험 3과 마찬가지로 처리하고, 야채 파쇄물에 대하여환상 4당을 무수당질 중량으로 환산해서 10% 첨가하고, 45℃에서 20시간 진공건조하여 분쇄해서 분말상 야채 함유 조성물을 조제하고, 이들을 실험 3과 마찬가지로 용기에 넣고, 40℃에서 6일간 보존하였다. 보존 전후의 조성물 1g당의 활성산소 소거능을, 환상 4당을 사용하지 않은 것과 비교하였다. 조제한 분말상 조성물의 조성과 활성산소 소거능을 표 4에 나타낸다. 당근, 양파, 무우, 양배추, 시금치, 오이, 호박 등의 여러가지 야채에 있어서, 환상 4당을 함유시킴으로써 활성산소 소거능의 저감 억제 효과가 나타났다.
[표 4]
야채 |
분말상 조성물의조성 (%) |
무수물 환산 환상 4당 함량 (%) |
활성 (단위/g) |
활성잔존율(%) |
야채 |
환상4당 |
수분 |
보존 전 |
보존 후 |
당근(수분 90.1%) |
94.5 |
0.0 |
5.5 |
0.0 |
1200 |
370 |
31 |
46.0 |
46.8 |
7.2 |
50.4 |
560 |
460 |
75 |
양파(수분 89.3%) |
93.2 |
0.0 |
6.8 |
0.0 |
440 |
210 |
48 |
47.7 |
44.1 |
8.2 |
48.0 |
220 |
160 |
73 |
무우(수분 94.0%) |
92.7 |
0.0 |
7.3 |
0.0 |
1100 |
630 |
57 |
34.7 |
58.6 |
6.7 |
62.8 |
400 |
320 |
80 |
양배추(수분 93.8%) |
94.8 |
0.0 |
5.2 |
0.0 |
4100 |
2500 |
63 |
36.0 |
57.3 |
6.7 |
61.4 |
1500 |
1300 |
87 |
시금치(수분 94.1%) |
93.2 |
0.0 |
6.8 |
0.0 |
3500 |
1300 |
36 |
34.1 |
58.6 |
7.3 |
63.2 |
1300 |
900 |
69 |
가지(수분 93.7%) |
91.5 |
0.0 |
8.5 |
0.0 |
38000 |
31000 |
82 |
35.0 |
55.3 |
9.7 |
61.2 |
13000 |
11000 |
85 |
오이(수분 95.0%) |
92.7 |
0.0 |
7.3 |
0.0 |
4600 |
1300 |
30 |
30.1 |
60.6 |
9.3 |
66.8 |
1500 |
890 |
59 |
호박(수분 84.0%) |
93.2 |
0.0 |
6.8 |
0.0 |
1600 |
610 |
38 |
56.3 |
35.1 |
8.6 |
38.4 |
900 |
450 |
50 |
실험 7: 환상 4당에 의한 슈퍼옥사이드 디스무타아제 및 각종 항산화 물질에 대한 활성산소 소거능의 저감 억제 효과
실험 2의 방법에 의해 얻은 환상 4당을 농도 30%의 용액으로 하고, 이 용액 1ml당, 서양 고추냉이 유래의 슈퍼옥사이드 디스무타아제(미합중국의 Sigma Chemical사제)를 5 ㎍, α-글루코실 헤스페리딘(일본국의 (주) 林原 생물화학 연구소제)을 10mg, α-글루코실 루틴(일본국의 (주) 林原 생물화학 연구소제)을 10mg, 몰식자산(일본국의 和光純藥공업제)을 250 ㎍ 및 카테킨(일본국의 和光純藥공업제)을 50 ㎍을 각각 용해하여 액상 조성물을 얻고, 이들을 각각 유리제 시험관에 넣어 고무 마개로 밀봉하고, 차광하에서 보존하였다. 대조로서, 상기 환상 4당 용액 대신에 물을 사용하였다. 이들의 보존 조건과 보존 전후의 활성산소 소거능을 표 5에 나타낸다. 표 5에 나온 바와 같이, 슈퍼옥사이드 디스무타아제, α-글루코실 헤스페리딘, α-글루코실 루틴, 몰식자산 및 카테킨 등의 식물 유래의 항산화 물질이 가진 활성산소 소거능에 대해서도, 환상 4당이 현저한 저감 억제 효과를 발휘하는 것이 확인되었다. 그리고 별도로, 환상 4당 함수결정 분말과 각 항산화 물질 분말을 각각 혼합분말로 하고, 이들을 상기와 마찬가지로 보존 시험을 하였으나, 모두 활성산소 소거능에 대해서 거의 변화가 나타나지 않았다. 이로부터, 환상 4당은, 분말상으로 혼합한 것 만으로는 그 효과를 발휘하기 어렵고, 환상 4당을 용해한 상태에서 접촉시켜 함유시킴으로써, 바꾸어 말하면 수성 매체 존재하에서 함유시킴으로써 그 효과를 발휘하는 것이 밝혀졌다.
[표 5]
항산화 물질의 함량 |
보존조건 |
환상 4당 농도 (%) |
활성(단위/mg 항산화물질) |
활성잔존율(%) |
보존 전 |
보존 후 |
슈펴옥사이드 디스무타아제(5 ㎍/ml) |
60℃17시간 |
0 |
10000 |
4600 |
46 |
30 |
12000 |
7300 |
61 |
α-글루코실 헤스페리딘(10 mg/ml) |
80℃5일간 |
0 |
3.8 |
1.0 |
26 |
30 |
4.0 |
2.1 |
53 |
α-글루코실 루틴(10 mg/ml) |
80℃5일간 |
0 |
25 |
18 |
72 |
30 |
26 |
22 |
85 |
몰식자산 (250 ㎍/ml) |
80℃5일간 |
0 |
590 |
390 |
66 |
30 |
600 |
450 |
75 |
카테킨 (50 ㎍/ml) |
25℃20시간 |
0 |
470 |
2.2 |
0 |
30 |
450 |
240 |
53 |
이하, 약간의 실시예에 의해 본 발명을 설명한다. 실시예 A에서 본 발명의 활성산소 소거능 저감 억제제를, 실시예 B에서 활성산소 소거능의 저감을 억제한 조성물을 설명한다.
실시예 A-1: 활성산소 소거능 저감 억제제
옥수수 전분을 농도 약 20%의 전분유로 하고, 여기에 탄산 칼슘 0.1% 가하여 pH 6.5로 조정하고, α-아밀라아제(상품명 『TERMAMYL 60L』, 덴마크국의 Novo사제)를 전분 1 그램당 0.3% 가하고, 95℃에서 15분간 반응시키고, 이어서 120℃에서 20분간 오토클레이브한 다음, 약 35℃로 급냉해서 DE 약 4의 액화 용액을 얻고, 여기에 실험 1의 방법으로 얻은 바실루스 글로비스포루스 C9 유래의 α-이소말토실글루코 당질 생성 효소와 α-이소말토실 전이 효소를 함유하는 효소액을 전분1 그램당 0.2ml 첨가하고, 또한 시클로말토덱스트린 글루카노트란스페라아제(주식회사 林原 생물화학연구소 제조)를 전분 고형물 1 그램당 10 단위가 되도록 가하고, pH 6.0, 온도 35℃에서 48시간 반응시켰다. 그 반응액을 95℃에서 30분간 유지한 후, pH 5.0, 온도 50℃로 조정한 후, α-글루코시다아제제(상품명 『트란스글루코시다아제 L 아마노』, 일본국의 天野제약 주식회사 제조)를 고형물 1 그램당 300 단위 가하여 24 시간 반응시키고, 다시 글루코아밀라아제제(劑)(상품명 『GLUCOZYME』, 일본국의 나가세 생화학공업(주)제)를 고형물 1 그램당 30 단위 가하여 17 시간 반응시키고, 그 반응액을 95℃로 가열하여 30분간 유지한 후, 냉각하고, 여과하여 얻게 되는 여액(濾液)을 통상적인 방법에 따라 활성탄으로 탈색하고, H형 및 OH형 이온교환 수지에 의해 탈염하여 정제하고, 더욱 농축하여, 고형물당 글루코오스 34.2%, 환상 4당 62.7%, 기타의 당질을 3.1% 함유하는 농도 60%의 환상 4당 함유 시럽을 얻었다.
이 환상 4당 함유 시럽을 강산성 양이온 교환 수지(상품명 『AMBERLITE CR-1310 (Na+형)』, 일본국의 오르가노(주)제)를 사용해서 칼럼 분획을 하였다. 수지를 내경 5.4cm의 재킷 부착 스텐레스제 칼럼 4개에 충전하고, 직렬로 연결하여 수지층 전장(全長) 20m (각 칼럼의 수지층 길이는 5m)로 하였다. 칼럼 내의 온도를 60℃로 유지하면서, 당액을 수지에 대하여 5v/v% 첨가하고, 여기에 60℃의 온수를 SV O.13으로 흘려서 분획하고, 용출액의 당 조성을 HPLC법으로 모니터하여 환상 4당 고함유 획분을 채취하고, 정제하여, 고형물당 약 98%의 환상 4당을 함유하는 환상4당 고함유액을 얻었다.
이 용액을 농도 약 70%로 농축한 후, 조정관(助晶瓘; crystallizer)에 넣고, 종정(種晶)으로서 환상 4당 함수결정을 고형물당 약 2% 가하고 서냉하여, 결정 석출율 약 45%의 매스키트를 얻었다. 이 매스키트를 건조탑 위의 노즐로부터 150kg/cm2의 고압으로 분무함과 동시에 85℃의 열풍을 건조탑의 상부에서 송풍하고, 저부에 설치한 이송용 철망 컨베이어 위에서 결정 분말을 포집하고, 컨베이어 아래로부터 45℃의 온풍을 보내면서 그 분말을 건조탑 밖으로 서서히 이동시켜 꺼냈다. 이 결정 분말을 숙성탑에 충전해서 온풍을 보내면서 10시간 숙성시켜 결정화와 건조를 완료하여, 원료전분 고형물당 수율 약 20%로서 환상 4당 함수결정 분말을 얻었다. 이 분말상 당질은, 순도가 높은 환상 4당 함수결정이며, 본 발명의 활성산소 소거능 저감 억제제로서 바람직하며, 식물성 가식물(可食物; edible substance) 등의 활성산소 소거능의 저감 억제에 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 A-2: 활성산소 소거능 저감 억제제
실시예 A-1의 방법으로 얻은 고순도 환상 4당 함수결정 100 중량부에 풀룰란 1 중량부를 균일하게 혼합하여 고상의 활성산소 소거능 저감 억제제를 제조하였다. 이 제품은 식물성 가식물 등의 활성산소 소거능의 저감 억제에 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 A-3: 활성산소 소거능 저감 억제제
실시예 A-1의 방법으로 얻은 농도 60%의 환상 4당 함유 시럽 100 중량부에풀룰란 0.5 중량부 및 수용성이 좋은 시클로덱스트린 0.5 중량부를 균일하게 혼합용해하여 시럽상의 활성산소 소거능 저감 억제제를 제조하였다. 이 제품은 식물성 가식물 등의 활성산소 소거능의 저감 억제에 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 A-4: 활성산소 소거능 저감 억제제
실시예 A-1의 방법으로 얻은 고순도 환상 4당 함수결정 100 중량부에 트레할로오스 함수결정 100 중량부, 풀룰란 1 중량부 및 수용성이 좋은 시클로덱스트린 1 중량부를 균일하게 혼합하여 분말상의 활성산소 소거능 저감 억제제를 제조하였다.
이 제품은 식물성 가식물 등의 활성산소 소거능의 저감 억제에 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 B-1: 시금치 함유 조성물
시금치를 믹서에서 파쇄하고, 이 파쇄물 10 중량부에 대하여, 실시예 A-4의 방법으로 얻은 활성산소 소거능 저감 억제제를 1 중량부 및 α-글루코실 루틴을 0.1 중량부를 적당량의 물에 용해한 후 혼합하고, 100℃에서 10분간 가열처리하고, 40℃에서 2시간 통풍 건조한 후, 40℃에서 16시간 진공건조를 하고, 분쇄기로 분쇄하여 활성산소 소거능이 1g당 약 1,200 단위인 분말상 시금치 함유 조성물을 얻었다. 이 조성물은 시금치 본래의 색조를 잘 유지하고 있어, 식욕을 자극하는 것이었다. 이 조성물을 섭취하면, 생체에 있어서, 시금치가 본래 가진 비타민, 미네랄, 식물(食物)섬유 등의 기능성 성분 외에 활성산소 소거능을 강화하는 것이 되어, 건강의 유지 증진, 노화 방지, 성인병의 예방, 난치병의 치료 촉진, 발암의 억제 등에 만족스럽게 사용할 수 있다. 따라서, 음식물, 화장품, 의약품, 이들의 원재료또는 가공 중간물 등으로서 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 B-2: 양배추 함유 조성물
양배추를 절단하여 브랜칭한 후, 세단기에서 약 5mm 폭으로 절단하고, 이 양배추 절단물 10 중량부에 대하여 실시예 A-3의 방법으로 얻은 활성산소 소거능 저감 억제제 1 중량부 및 α-글루코실 루틴 0.05 중량부를 혼합하고 실온에서 2시간 방치한 다음, 40℃에서 2시간 통풍 건조하고, 다시 40℃에서 16시간 진공건조를 하여, 활성산소 소거능이 1g당 약 1,300 단위인 세편상(細片狀) 양배추 함유 조성물을 얻었다. 이 조성물은 양배추 본래의 색조를 잘 유지하고 있어, 식욕을 자극하는 것이었다. 이 조성물을 섭취하면, 생체에 있어서, 양배추가 본래 가진 비타민, 미네랄, 식물섬유 등의 기능성 성분 외에 활성산소 소거능을 강화하는 것이 되어, 건강의 유지 증진, 노화 방지, 성인병의 예방, 난치병의 치료 촉진, 발암의 억제 등에 만족스럽게 사용할 수 있다. 따라서, 음식물, 화장품, 의약품, 이들의 원재료 또는 가공 중간물 등으로서 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 B-3: 가지 함유 조성물
싱싱한 가지를 슬라이스하여 물로 세척하고, 이 슬라이스 10 중량부에 대하여 실시예 A-1의 방법으로 얻은 활성산소 소거능 저감 억제제 1 중량부를 적당량의 물에 용해한 후 혼합하고, 70℃에서 2일간 통풍 건조하여 활성산소 소거능이 1g당 약 11,000 단위인 세편상 가지 함유 조성물을 얻었다. 이 조성물은 가지의 껍질부가 본래의 색조를 잘 유지하고 있어 식욕을 자극하는 것이었다. 이 조성물을 섭취하면, 생체에 있어서, 가지가 본래 가진 비타민, 미네랄, 식물섬유 등의 기능성 성분 외에 활성산소 소거능을 강화하는 것이 되어, 건강의 유지 증진, 노화 방지, 성인병의 예방, 난치병의 치료 촉진, 발암의 억제 등에 만족스럽게 사용할 수 있다. 따라서, 음식물, 화장품, 의약품, 이들의 원재료 또는 가공 중간물 등으로서 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 B-4: 당근 함유 조성물
싱싱한 당근을 브랜칭한 후, 슬라이서로써 슬라이스하고, 이 슬라이스 10 중량부에 대하여, 실시예 A-4의 방법으로 얻은 활성산소 소거능 저감 억제제 1 중량부를 적당량의 물에 용해한 후 혼합하고, 50℃에서 16시간 통풍 건조하여 활성산소 소거능이 1g 당 약 450 단위인 세편상 당근 함유 조성물을 얻었다. 이 조성물은 당근 본래의 색조를 잘 유지하고 있어 식욕을 자극하는 것이었다. 또한, 이 조성물은 흡습성이 낮고, 보존 안정성이 우수하며, 취급이 용이하였다. 이 조성물을 섭취하면, 생체에 있어서, 당근이 본래 가진 비타민, 미네랄, 식물섬유 등의 기능성 성분 외에 활성산소 소거능을 강화하는 것이 되어, 건강의 유지 증진, 노화 방지, 성인병의 예방, 난치병의 치료 촉진, 발암의 억제 등에 만족스럽게 사용할 수 있다.
따라서, 음식물, 화장품, 의약품, 이들의 원재료 또는 가공 중간물 등으로서 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 B-5: 녹미채 함유 조성물
녹미채를 물속에서 원상태로 한 후, 파쇄기로 파쇄하고, 이 파쇄물 10 중량부에 대하여, 실시예 A-2의 방법으로 얻은 활성산소 소거능 저감 억제제 5 중량부를 혼합용해하고, 50℃에서 8시간 통풍 건조한 후, 40℃에서 진공건조하고, 분쇄하여 활성산소 소거능이 1g당 약 24 단위인 분말상 녹미채 함유 조성물을 얻었다. 이 조성물을 섭취하면, 생체에 있어서, 녹미채가 본래 가진 비타민, 미네랄, 식물섬유 등의 기능성 성분 외에 활성산소 소거능을 강화하는 것이 되어, 건강의 유지 증진, 노화 방지, 성인병의 예방, 난치병의 치료 촉진, 발암의 억제 등에 만족스럽게 사용할 수 있다. 따라서, 음식물, 화장품, 의약품, 이들의 원재료 또는 가공 중간물 등으로서 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 B-6: 표고버섯 함유 조성물
말림 표고버섯을 물속에서 원상태로 하고, 100℃에서 15분간 가열한 후, 파쇄기로 파쇄하고, 이 파쇄물 100 중량부에 대하여, 실시예 A-3의 방법으로 얻은 활성산소 소거능 저감 억제제 10 중량부와 함께 차 추출물 0.1 중량부를 혼합용해하고, 50℃에서 8시간 통풍 건조한 후, 40℃에서 진공건조하고, 분쇄하여 활성산소 소거능이 1g당 약 560 단위인 분말상 표고버섯 함유 조성물을 얻었다. 이 조성물을 섭취하면, 생체에 있어서, 표고버섯이 본래 가진 비타민, 미네랄, 식물섬유 등의 기능성 성분 외에 활성산소 소거능을 강화하는 것이 되어, 건강의 유지 증진, 노화 방지, 성인병의 예방, 난치병의 치료 촉진, 발암의 억제 등에 만족스럽게 사용할 수 있다. 따라서, 음식물, 화장품, 의약품, 이들의 원재료 또는 가공 중간물 등으로서 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 B-7: 유자 함유 조성물
유자의 껍질을 파쇄기에서 파쇄하고, 이 파쇄물 5 중량부에 대하여, 실시예 A-1의 방법으로 얻은 활성산소 소거능 저감 억제제 1 중량부를 적당량의 물에 용해한 후 혼합하고, 예비동결한 후, 3일간 동결 건조하고, 분쇄하여 활성산소 소거능이 1g당 약 12 단위인 분말상 유자 함유 조성물을 얻었다. 이 조성물은 유자 본래의 향기, 색조를 잘 유지하고 있었다. 이 조성물을 섭취하면, 생체에 있어서, 유자가 본래 가진 비타민, 미네랄, 식물섬유 등의 영양성분에 더해서, 활성산소 소거능을 강화하는 것이 되어, 건강의 유지 증진, 노화 방지, 성인병의 예방, 난치병의 치료 촉진, 발암의 억제 등에 만족스럽게 사용할 수 있다. 따라서, 음식물, 화장품, 의약품, 이들의 원재료 또는 가공 중간물 등으로서 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 B-8: 생강 함유 조성물
생강을 믹서에서 파쇄하고, 이 파쇄물 5 중량부에 대하여, 실시예 A-2의 방법으로 얻은 활성산소 소거능 저감 억제제 1 중량부를 적당량의 물에 용해한 후 혼합하고, 예비동결한 후, 3일간 동결 건조하고, 파쇄기로 분쇄하여 활성산소 소거능이 1g당 약 120 단위인 분말상 생강 함유 조성물을 얻었다. 이 조성물을 섭취하면, 생체에 있어서, 생강이 본래 가진 비타민, 미네랄, 식물섬유 등의 기능성 성분 외에 활성산소 소거능을 강화하는 것이 되어, 건강의 유지 증진, 노화 방지, 성인병의 예방, 난치병의 치료 촉진, 발암의 억제 등에 만족스럽게 사용할 수 있다. 따라서, 음식물, 화장품, 의약품, 이들의 원재료 또는 가공 중간물 등으로서 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 B-9: 푸른 차조기 함유 조성물
푸른 차조기의 잎을 브랜칭한 후, 믹서에서 파쇄하고, 이 파쇄물 5 중량부에 대하여, 실시예 A-1의 방법으로 얻은 활성산소 소거능 저감 억제제 1 중량부 및α-글루코실 루틴 0.5 중량부를 적당량의 물에 용해한 후 혼합하고, 이어서, 탈수제로서 환상 4당 무수결정을 35 중량부 혼합하여 실온에서 1일 방치하고, 분쇄기로 분쇄하여 활성산소 소거능이 1g당 약 230 단위인 분말상 푸른 차조기 함유 조성물을 얻었다. 이 조성물은 푸른 차조기 본래의 색조나 풍미를 잘 유지하고 있어 식욕을 자극하는 것이었다. 이 조성물을 섭취하면, 생체에 있어서, 푸른 차조기가 본래 가진 비타민, 미네랄, 식물섬유 등의 기능성 성분 외에 활성산소 소거능을 강화하는 것이 되어, 건강의 유지 증진, 노화 방지, 성인병의 예방, 난치병의 치료 촉진, 발암의 억제 등에 만족스럽게 사용할 수 있다. 따라서, 음식물, 화장품, 의약품, 이들의 원재료 또는 가공 중간물 등으로서 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 B-10: 쑥 함유 조성물
쑥을 통상적인 방법에 따라 적당량의 식염을 첨가한 끓는 물에 넣어서 떫고 쓴 맛을 우려내고, 이것을 가볍게 탈수한 후, 파쇄기에서 파쇄하고, 이 파쇄물 5 중량부에 실시예 A-4의 방법으로 얻은 활성산소 소거능 저감 억제제 1.3 중량부 및 α-글루코실 루틴 0.05 중량부를 적당량의 물에 용해 후 혼합하고, 50℃에서 4시간 통풍 건조하고, 40℃에서 16시간 진공건조하고 분쇄하여 활성산소 소거능이 1g당 약 780 단위인 분말상 쑥 함유 조성물을 얻었다. 이 조성물은 쑥 본래의 색조, 풍미를 잘 유지하고 있어 식욕을 자극하는 것이었다. 이 조성물을 섭취하면, 생체에 있어서, 쑥이 본래 가진 비타민, 미네랄, 식물섬유 등의 기능성 성분 외에 활성산소 소거능을 강화하는 것이 되어, 건강의 유지 증진, 노화 방지, 성인병의 예방, 난치병의 치료 촉진, 발암의 억제 등에 만족스럽게 사용할 수 있다. 따라서, 음식물, 화장품, 의약품, 이들의 원재료 또는 가공 중간물 등으로서 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 B-11: 삼백초 함유 조성물
삼백초 건조물 0.5 중량부에 10 중량부의 물을 첨가하고, 90분간 가열 비등시켰다. 바스켓형 원심기에서 침출액을 회수하였다. 이 침출액을 다시 바짝 조려서 농도 약 5%의 용액 4 중량부를 얻었다. 이 농축액 2 중량부에 대하여 실시예 A-3의 방법으로 얻은 활성산소 소거능 저감 억제제를 0.5 중량부 혼합하고, 이 용액을 통상적인 방법에 의해 분무건조하여 활성산소 소거능이 1g당 약 1,400 단위인 분말상 삼백초 추출물 함유 조성물을 얻었다. 이 조성물은 삼백초 특유의 싫은 냄새나 싫은 맛이 적어서, 종래의 것과 비교해서 삼키기 쉬운 것이었다. 이 조성물을 섭취하면, 생체에 있어서, 삼백초가 본래 가진 비타민, 미네랄, 식물섬유 등의 기능성 성분 외에 활성산소 소거능을 강화하는 것이 되어, 건강의 유지 증진, 노화 방지, 성인병의 예방, 난치병의 치료 촉진, 발암의 억제 등에 만족스럽게 사용할 수 있다. 따라서, 음식물, 화장품, 의약품, 이들의 원재료 또는 가공 중간물 등으로서 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 B-12: 알로에 함유 조성물
알로에를 믹서에서 파쇄하고, 이 파쇄물 10 중량부에 대하여, 차 추출물 0.1 중량부를 첨가하고, 또한, 실시예 A-1의 방법으로 얻은 활성산소 소거능 저감 억제제 1 중량부를 적당량의 물에 용해한 후 혼합하고, 70℃에서 2일간 통풍 건조하고 분쇄기로 분쇄하여 활성산소 소거능이 1g당 약 5,800 단위인 분말상 알로에 함유조성물을 얻었다. 이 조성물은 알로에의 쓴 맛이 적고, 종래품에 비교해서 삼키기 쉬운 것이었다. 이 조성물을 섭취하면, 생체에 있어서, 알로에가 본래 가진 비타민, 미네랄, 식물섬유 등의 기능성 성분 외에 활성산소 소거능을 강화하는 것이 되어, 건강의 유지 증진, 노화 방지, 성인병의 예방, 난치병의 치료 촉진, 발암의 억제 등에 만족스럽게 사용할 수 있다. 따라서, 음식물, 화장품, 의약품, 이들의 원재료 또는 가공 중간물 등으로서 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 B-13: 양념이 된 배추 함유 조성물
양념이 된 배추를 세단기에서 세단하고, 이 세단물 10 중량부에 대하여, 실시예 A-1의 방법으로 얻은 활성산소 소거능 저감 억제제 1 중량부를 적당량의 물에 용해한 후 혼합하고, 55℃에서 16시간 통풍 건조하여 활성산소 소거능이 1g 당 약 5,400 단위인 세편상의 양념이 된 배추 함유 조성물을 얻었다. 이 조성물은, 양념이 된 배추의 색조를 잘 유지하고 있어, 입에 넣으면 그 절인 야채의 풍미가 퍼져 식욕을 자극하는 것이었다. 이 조성물을 섭취하면, 생체에 있어서, 양념이 된 배추가 본래 가진 비타민, 미네랄, 식물섬유 등의 기능성 성분 외에 활성산소 소거능을 강화하는 것이 되어, 건강의 유지 증진, 노화 방지, 성인병의 예방, 난치병의 치료 촉진, 발암의 억제 등에 만족스럽게 사용할 수 있다. 따라서, 음식물, 화장품, 의약품, 이들의 원재료 또는 가공 중간물 등으로서 유리하게 이용할 수 있다. 또한, 밥에 뿌려먹는 식품, 주먹밥의 프리믹스, 라면 수프 재료 등의 음식물 뿐만 아니라, 건강식품, 기타 화장품, 의약품, 이들의 원료 또는 중간물 등으로서 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 B-14: 습지 나물 절임 함유 조성물
습지 나물 절임을 세단기에서 세단하고, 이 세단물 10 중량부에 대하여, 실시예 A-1의 방법으로 얻은 활성산소 소거능 저감 억제제 1 중량부를 적당량의 물에 용해한 후 혼합하고, 55℃에서 16시간 통풍 건조하여 활성산소 소거능이 1g 당 약 2,600 단위인 세편상의 습지 나물 절임 함유 조성물을 얻었다. 이 조성물은, 습지 나물절임의 색조를 잘 유지하고 있어, 입에 넣으면 그 절인 야채의 풍미가 퍼져 식욕을 자극하는 것이었다. 이 조성물을 섭취하면, 생체에 있어서, 습지 나물 절임이 본래 가진 비타민, 미네랄, 식물섬유 등의 기능성 성분 외에 활성산소 소거능을 강화하는 것이 되어, 건강의 유지 증진, 노화 방지, 성인병의 예방, 난치병의 치료 촉진, 발암의 억제 등에 만족스럽게 사용할 수 있다. 따라서, 음식물, 화장품, 의약품, 이들의 원재료 또는 가공 중간물 등으로서 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 B-15: 배추 김치 함유 조성물
배추 김치를 세단기에서 세단하고, 이 세단물 10 중량부에 대하여, 실시예 A-4의 방법으로 얻은 활성산소 소거능 저감 억제제 1 중량부를 적당량의 물에 용해한 후 혼합하고, 55℃에서 16시간 통풍 건조하여 활성산소 소거능이 1g 당 약 1600 단위인 세편상의 배추 김치 함유 조성물을 얻었다. 이 조성물은, 배추 김치의 색조를 잘 유지하고 있어, 입에 넣으면 그 절인 야채의 풍미가 퍼져 식욕을 자극하는 것이었다. 이 조성물을 섭취하면, 생체에 있어서, 배추 김치가 본래 가진 비타민, 미네랄, 식물섬유 등의 기능성 성분 외에 활성산소 소거능을 강화하는 것이 되어, 건강의 유지 증진, 노화 방지, 성인병의 예방, 난치병의 치료 촉진, 발암의 억제등에 만족스럽게 사용할 수 있다. 따라서, 음식물, 화장품, 의약품, 이들의 원재료 또는 가공 중간물 등으로서 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 B-16: 츄잉 검
츄잉 검 베이스 3 중량부를 연해질 정도로 가열 용해하고, 여기에 환상 4당 함수결정 3 중량부, 트레할로오스 함수결정 3 중량부, 및 실시예 B-9의 방법으로 얻은 푸른 차조기 함유 조성물 1 중량부 및 차 추출물 0.01 중량부를 가하고, 또한 적당량의 향료와 착색료를 혼합하여, 통상적인 방법에 따라 로울러에 의해 혼련하고, 성형, 포장해서 활성산소 소거능이 1g당 약 120 단위인 제품을 얻었다. 이 제품은 텍스처, 풍미 모두 양호한 츄잉 검이다. 또한, 이 제품은, 사용되고 있는 당질이 환상 4당 및 트레할로오스이므로, 충치유발 균의 작용을 받기 어려워, 충치로 되기 어려운 특징도 가지고 있다.
실시예 B-17: 떡
찹쌀 전분 10 중량부에 물 12 중량부를 혼합하고, 가열 호화(糊化)하면서, 여기에 실시예 B-10의 방법에서 얻은 쑥 함유 조성물 0.5 중량부를 혼화하고, 이후, 통상적인 방법에 따라 성형, 포장해서 활성산소 소거능이 1g당 약 12 단위인 찹쌀떡을 제조하였다. 이 제품은, 쑥의 색조, 풍미가 뛰어나고, 입맛도 양호한 쑥떡이다.
실시예 B-18: 영양제
결정성 α-말토오스 20 중량부, 글라이신 1.1 중량부, 글루탐산 나트륨 0.18 중량부, 식염 1.2 중량부, 시트르산 1 중량부, 락트산 칼슘 0.4 중량부, 실시예 B-1의 방법으로 얻은 시금치 함유 조성물 0.3 중량부, 티아민 0.01 중량부 및 리보플라빈 0.01 중량부로 된 배합물을 조제한다. 이 배합물 24g씩을 라미네이트 알루미늄제 작은 백(bag)에 충전하고, 히이트 시일해서 활성산소 소거능이 1g당 약 12 단위인 경관 영양제를 조제하였다. 이 영양제는, 1자루를 약 300 내지 500mL의 물에 용해하여 경구적으로 섭취하는 것도, 또한 경관 방법에 의해 비강, 위, 장 등에의 비경구적 영양 보급액으로서도 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 B-19: 화장용 크림
모노스테아르산 폴리옥시에틸렌글리콜 2 중량부, 자기 유화형 모노스테아르산 글리세린 5 중량부, 실시예 B-12의 방법으로 얻은 알로에 함유 조성물 2.8 중량부, α-글루코실 루틴 0.2 중량부, 유동 파라핀 1 중량부, 트리옥탄산 글리세릴 10 중량부 및 방부제 적당량을, 통상적인 방법에 따라 가열 용해하고, 여기에 L-락트산 2 중량부, 1, 3-부틸렌글리콜 5 중량부 및 정제수 66 중량부를 첨가하여 호모게나이저에서 유화하고, 다시 향료 적당량을 가해서 교반혼합하여 활성산소 소거능이 1g당 약 46 단위인 화장용 크림을 제조하였다. 이 제품은, 햇볕에 탐에 의한 화상 피부의 치료, 햇볕에 탐의 예방, 피부 미화제, 색백제 등으로서, 더욱이, 기미, 주근깨, 멍, 주름살 등 피부의 노화현상의 발생 억제제 등으로서 유리하게 이용할 수 있다.
실시예 B-20: 욕(浴)용제
DL-락트산 나트륨 21 중량부, 비르브산 나트륨 8 중량부, 실시예 B-7의 방법으로 얻은 유자 함유 조성물 5 중량부, α-글루코실 루틴 1 중량부 및 에탄올 40중량부를, 정제수 26 중량부 및 착색료, 향료의 적당량과 혼합하여 활성산소 소거능이 1g당 약 220 단위인 욕용제를 제조하였다. 이 제품은, 피부 미화제, 색백제로서 바람직하며, 입욕용의 온수에 100 내지 10,000배로 희석해서 이용하면 좋다. 이 제품은 입욕용의 온수의 경우와 마찬가지로, 세수용 물, 화장수 등에 희석해서 이용하는 것도 유리하게 실시할 수 있다.
실시예 B-21: 연고
아세트산 나트륨 3수염 1 중량부, DL-락트산 칼슘 4 중량부를 글리세린 10 중량부와 균일하게 혼합하고, 이 혼합물을, 바셀린 50 중량부, 목랍의 10 중량부, 라놀린 5 중량부, 참깨 기름 14.5 중량부, 실시예 B-11의 방법으로 얻은 삼백초 함유 조성물 6 중량부 및 박하 기름 0.5 중량부의 혼합물에 가하고, 더욱 균일하게 혼화해서 활성산소 소거능이 1g당 약 54 단위인 연고를 제조하였다. 이 제품은, 화농방지, 피부 미화제, 색백제 등으로서, 더욱이는 외상, 화상의 치료 촉진제 등으로서 유리하게 이용할 수 있다.