JP4397142B2

JP4397142B2 - 活性酸素消去能低減抑制剤

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Publication number: JP4397142B2
Application number: JP2001355273A
Authority: JP
Inventors: 和之奥; 倫夫久保田; 恵温福田; 俊雄三宅
Original assignee: Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo KK
Current assignee: Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo KK
Priority date: 2001-11-20
Filing date: 2001-11-20
Publication date: 2010-01-13
Anticipated expiration: 2021-11-20
Also published as: DE60211632T2; EP1321148A1; TWI256292B; KR100943559B1; EP1321148B1; DE60211632D1; KR20030041813A; TW200300331A; US20030108593A1; JP2003160495A; US20050123671A1

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、活性酸素消去能低減抑制剤とその用途に関し、詳細には、化学式１で表される環状四糖を有効成分とする活性酸素消去能低減抑制剤と、化学式１で表される環状四糖又は該低減抑制剤を水性媒体存在下で含有せしめることを特徴とする植物由来の活性酸素消去能の低減抑制方法、並びに該方法により活性酸素消去能の低減を抑制した植物性可食物及び／又は植物性抗酸化物質含有組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
野菜、きのこ、海藻等の可食性植物は、生体にとって、ビタミンはもとより、ミネラル、食物繊維等の機能性成分の給源として重要であり、発育、成長に欠くべからざる食材であることはよく知られている。これに加えて、近年、これら可食性植物には、健康の維持増進、老化防止、成人病の予防、発癌抑制等に深く関係している活性酸素消去能の存在が注目されるようになってきた。生体の老化及びこの老化に伴う各種疾患、例えば、癌、動脈硬化、肝硬変、心筋梗塞、脳卒中、白内障、パーキンソン病、リューマチ、アルツハイマー性痴呆等、いわゆる難病といわれる疾患の発生機構に関しては未だ不明な点が多い。しかしながら、近年、これら難病の発生機構として、不対電子を持つ酸素で反応性に富んだスーパーオキシド、これから生じるヒドロキシラジカル、過酸化水素等の活性酸素が、細胞内の標的分子、例えば、膜脂質、蛋白質、ＤＮＡ等を酸化し、酸素傷害を引き起こし、結果として、生体の老化や老化に伴う各種疾患を招くと考えられるようになってきた。
【０００３】
細胞内には、本来、活性酸素を消去する酵素、例えば、スーパーオキシド・ジスムターゼ（ＥＣ１．１５．１．１）、カタラーゼ（ＥＣ１．１１．１．６）等の酵素や、Ｌ−アスコルビン酸、α−トロフェロール等の抗酸化物質が存在していて、その活性酸素の濃度は、通常、きわめて低い状態に保たれている。しかしながら、大量の紫外線、放射線、電磁波等をあびたり、過激な運動をしたり、精神的に強烈なストレスを受けたり、これらに加えて、加齢が進んだりすると、活性酸素の生成量に活性酸素消去能が追いつかず、結果として過剰な活性酸素により酸化された化合物が蓄積することとなり、前記の酸素傷害を引き起こすものと考えられている。これを改善するために、例えば、特開平５−１６８４３５号公報、特開平８−１４３４６６号公報等に開示されているように、可食性植物に含まれる高い活性酸素消去能を利用して、生体に不足しがちな活性酸素消去能を補って、健康の維持増進を計ろうとする提案がなされている。しかしながら、これら活性酸素消去能の比較的高い可食性植物を使用する場合であっても、これに搾汁、抽出、加熱、乾燥等の加工処理を施したり、その後の保存条件によっては、それが持つ本来の活性酸素消去能を著しく低減させるか、ひどい場合には、全く無くしてしまう欠点のあることが判明した。この欠点を解消するために、活性酸素消去能の低減を抑制する全く新しい方法の確立が強く望まれる。しかも、生体にとって、毒性を懸念することのない方法の確立が望まれる。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、新規な活性酸素消去能低減抑制剤と新規な活性酸素消去能の低減抑制方法を確立するとともに、該方法を採用して活性酸素消去能の低減を抑制した植物性可食物及び／又は植物性抗酸化物質含有組成物を提供することを課題とするものである。
【０００５】
本発明の主な目的は、第一として、環状四糖を有効成分とする活性酸素消去能の低減抑制剤を提供することであり、第二として、植物由来の活性酸素消去能を有する物質に環状四糖又は該低減抑制剤を含有せしめることを特徴とする植物由来の活性酸素消去能低減抑制方法を提供することであり、第三として、該方法により活性酸素消去能の低減を抑制した組成物を提供することである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者等は、上記課題を解決するために、糖質の利用に着目し、鋭意研究を続けてきた。即ち、植物性可食物や植物性抗酸化物質等の植物由来の活性酸素消去能を有する物質に各種糖質を含有させ、その活性酸素消去能の低減抑制効果に与える糖質の影響を調べた。その結果、化学式１で表される環状四糖が、他の糖質に比較して著効を示し、植物由来の活性酸素消去能の低減を著しく抑制することを見いだし、本発明を完成した。
【０００７】
【化２】

【０００８】
【発明の実施の形態】
化学式１で表される環状四糖は、ゲイル・エム・ブラッドブルク等によって『カーボハイドレートリサーチ』、第３２９巻、６５５乃至６６５頁（２０００年）に記載されているように、グルコースが４個、α−１，３とα−１，６結合で、環状構造を形成した、即ち、サイクロ｛→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→｝の構造を有する非還元性の糖質である（以後、本明細書においては単に「環状四糖」と記載する。）。本糖質は、例えば、本出願人が国際特許出願ＰＣＴ／ＪＰ０１／０４２７６号明細書（国際公開番号ＷＯ０１／９０３３８号）、国際特許出願ＰＣＴ／ＪＰ０１／０６４１２号明細書（国際公開番号ＷＯ０２／１０３６１号）などで示した方法に準じて、澱粉からα−イソマルトシルグルコ糖質生成酵素とα−イソマルトシル転移酵素とを利用する酵素糖化法を用いて得ることができる。また、その形状としては、シラップ、含蜜結晶粉末、含水結晶、無水結晶、非晶質固体等適宜採用できる。本発明の活性酸素消去能低減抑制剤中の環状四糖の含量は、植物性可食物等に含有せしめて、植物性可食物等が持つ活性酸素消去能の低減の抑制効果を発揮できればよく、通常、無水物換算で、約１０ｗ／ｗ％（以下、本明細書では、特に断らない限り、ｗ／ｗ％を単に％で示す。）以上、望ましくは、約２０％以上、更に望ましくは約５０％以上が好適である。また、本発明の植物性可食物及び／又は植物性抗酸化物質含有組成物に対して、環状四糖として、無水物換算で、通常約１％以上、望ましくは、約５％以上、更に好ましくは約２０％以上含有せしめるのが好適である。一般に、環状四糖が、無水物換算で約１％未満では活性酸素消去能の低減抑制作用が不充分なきらいがある。なお、本発明でいう無水物換算とは、本発明の植物性可食物及び／又は植物性抗酸化物質含有組成物において、水分を全く含有しないという理想的な乾燥状態下における固形物重量に換算することであって、例えば、通常行われる乾燥工程では除去できない水分をカール・フィッシャー法などの手法により測定し、乾燥重量からその水分量を差し引くことによって算出することができる。
【０００９】
本発明でいう含有せしめるとは、共存させることをいい、植物由来の活性酸素消去能を有する物質に本発明の活性酸素消去能低減抑制剤若しくはその有効成分である環状四糖を含有せしめる場合には、それによって、植物由来の活性酸素消去能の低減を抑制させる効果が発揮できればよく、含有せしめる方法は特に問うものではない。望ましくは、植物性可食物及び／又は植物性抗酸化物質と環状四糖を、水性媒体存在下でできるだけ均一に接触させて含有せしめるのがよい。具体的に述べれば、例えば、植物性可食物等が、液状乃至懸濁状物のような多汁状態である場合には、これに粉末、結晶等の固状の環状四糖をできるだけ均一に混合溶解させて含有せしめるか、又はシラップ状の環状四糖をできるだけ均一に混合して含有せしめればよい。また、植物性可食物等が固状である場合には、これに適量の水性媒体を添加して液状乃至懸濁状物のような多汁状態にした後、前述のように処理して含有せしめるか、又は、適量の水性媒体によってシラップ状となった環状四糖を用意し、これに固状の植物性可食物等を分散、溶解乃至懸濁し、できるだけ均一に接触させて、植物性可食物及び／又は植物性抗酸化物質に環状四糖を含有せしめればよい。水性媒体としては、通常水が用いられ、場合によっては、海水、海洋深層水、牛乳、血清、スープなどに例示される、酸、塩基、ミネラル、糖質、アルコール、アミノ酸、蛋白質などの物質を本発明の効果を損ねない範囲内で含有する水を用いることもできる。また、植物性可食物が、生の植物組織を細断、千切り又はスライス等切断したもののような場合には、これに固状環状四糖をふりかけ、混合して溶解含有させるか又はシラップ状環状四糖溶液に浸漬する等して、該植物の組織内部にできるだけ均一に環状四糖を含有せしめればよい。植物性可食物等に環状四糖を接触含有せしめる際の温度、時間等の条件は、必要に応じて適宜選択できる。
【００１０】
本発明でいう植物由来の活性酸素消去能を有する物質とは、可食性植物の器官及び／又は組織そのものや、可食性植物のそれら可食部の切断物、破砕物、粉砕物、乾燥物、漬物、該可食部の抽出物及び／又は植物性抗酸化物質等を意味する。可食性植物としては、例えば、人参、れんこん、玉ねぎ、ごぼう、大根、里芋、やまいも、さつまいも、じゃがいも等の根菜、レタス、チコリ、白菜、キャベツ、ケール、モロヘイヤ、あしたば、ほうれん草、つるむらさき、小松菜、野沢菜、春菊、チンゲンサイ、かぶ等の葉菜、オクラ、カリフラワー、ブロッコリー、なす、トマト、きゅうり、かぼちゃ、ズッキーニ、ピーマン、さやえんどう、さやいんげん等果菜、アルファルファ、大豆もやし、緑豆もやし等もやし類等の野菜類、椎茸、えのき、しめじ等の茸類、ひじき、わかめ、こんぶ等の海草類、レモン、柚、すだち、ざぼん、きんかん等の柑橘、バナナ、パイナップル、キーウィフルーツ、いちご、サンザシ、ブルーベリー、ぶどう、もも、りんご、なし、くり等の果物類、にんにく、生姜、わさび、からし、パセリ、中国パセリ、青じそ、赤じそ、にら、ねぎ、セロリ、せり、クレソン、とうがらし、さんしょう、ペパー、ローズマリー、はっか等のハーブ類、よもぎ、おおばこ、どくだみ、毒消し、せんぶり、アロエ、甘草、うこん、藍、ブラジル人参（パフィア）、ビワの葉、杉菜、松葉、笹葉、梅実、茶、大麦若葉、そば葉、イチョウ葉、杜仲茶、バナバ、ルイボス、ギムネマ等の薬草、生薬類、その他、はとむぎ、そば、ごま、米、麦、とうもろこし、空豆、大豆、落花生、クルミ、松の実、種実胚芽、ピスタチオ、アーモンド、カシューナッツ、マカデミアナッツ等の種実類等の可食部が適宜用いられる。また、可食性植物の漬物としては、前述の根菜、葉菜、果菜等の野菜類の塩漬、糠漬、麹漬、粕漬、たまり漬、酢漬、キムチ等各種の漬物が適宜用いられる。
【００１１】
植物性抗酸化物質としては、例えば、スーパーオキシド・ジスムターゼ、カタラーゼ、パーオキシダーゼ等活性酸素消去能を有する植物由来の酵素等の他、ルチン、α−グルコシルルチン、ヘスペリジン、α−グルコシルヘスペリジン、ナリンジン、α−グルコシルナリンジン、クロロフィル、カロチン、アントシアニン等の植物由来の色素、没食子酸、カテキン、α−グルコシルカテキン、タンニン酸、エンゾジノール（松の皮抽出物）、グレープシード抽出物等の植物由来のポリフェノール、α−トコフェロール、Ｌ−アスコルビン酸、リボフラビン等の植物由来のビタミン等の植物由来の低分子抗酸化物質の１種又は２種以上が適宜選ばれ、これらは、可食性植物に元々含まれていてもよいし、必要に応じて、可食性植物の可食部を加工処理する際に新たに加えられたものであってもよく、更に、可食性植物とは、別に、単独で存在するものであってもよい。また、これら植物性抗酸化物質は、必ずしも実際に植物から抽出されたものである必要はなく、人為的に合成、製造されたものであってもよい。
【００１２】
本発明の活性酸素消去能の低減を抑制した組成物の製造方法について、より具体的に述べれば、例えば、可食性植物の可食部を、必要に応じて加熱殺菌した後、ミキサー、ジューサー、細断機、切断機、スライサー等で破砕又は切断してペースト状乃至懸濁状物又は切断物とし、これに環状四糖を混合溶解させて含有せしめるか、又は、可食性植物の可食部を熱水、アルコール等の溶媒で抽出し、濾過し、必要に応じて、濃縮して液状乃至ペースト状物とし、これに環状四糖を混合溶解させて含有せしめればよい。このようにして得られた組成物は、通常、シラップ状乃至ペースト状組成物又は切断物含有多汁組成物であって、水分含量が高く、安定に維持するのに低温貯蔵を必要とする難点がある。これらシラップ状乃至ペースト状組成物又は切断物含有多汁組成物を、そのまま乾燥するか若しくは乾燥後に粉末化するか、又は加熱殺菌の後、乾燥するか若しくは乾燥・粉末化する等して、粉末状又は細片状の固状組成物を得る。乾燥・粉末化の方法は公知の方法が適宜採用できる。例えば、真空乾燥、通風乾燥、ドラム乾燥の後、粉砕、篩別するか、噴霧乾燥、流動乾燥の後、篩別するか、更には、無水マルトース、無水トレハロース、無水環状四糖等の無水糖質を混合し、脱水、乾燥させた後、篩別する等して粉末製品とし、これを、必要に応じて、更に、顆粒、錠剤、カプセル等適宜な形状にして利用することも有利に実施できる。このような固状組成物まで加工度を高めることによって、保存安定性が向上し、活性酸素消去能低減抑制効果が更に高まるだけでなく、取り扱いも容易となる。また、このようにして得た固状の植物性可食物含有組成物は、環状四糖を非晶質状態で、又は含水結晶状態で含有するとともに、原料の可食性植物が本来持っている、例えば、クロロフィル、カロチン、アントシアニン、フラボノイド等の色素の劣化は抑制されており、本来の色調をよく保持する特徴がある。また、苦味、渋味等の嫌味をマスクする特徴もある。
【００１３】
本発明の活性酸素消去能の低減を抑制した組成物には、活性酸素消去能を有する植物性可食物、植物性抗酸化物質及び環状四糖に加えて、必要に応じて、更に、他の糖質、必須ミネラル、食物繊維、ビフィズス菌増殖促進糖質、ビタミン、生理活性物質及び保存料等から選ばれる１種又は２種以上の適宜の物質を固状又は溶液状で含有せしめることも有利に実施できる。
【００１４】
糖質としては、例えば、トレハロース、マルチトール、マンニトール等が有利に利用できる。必須ミネラルとしては、例えば、カルシウム、マグネシウム、リン、鉄、銅、亜鉛、コバルト等から選ばれるミネラルを適量使用すればよい。食物繊維としては、例えば、ペクチン、アルギン酸、カラゲナン、アラビアガム、グルコマンナン、シクロデキストリン、プルラン等が有利に利用できる。とりわけ、トレハロース及び／又はプルラン及び／又はシクロデキストリンが好ましく、活性酸素消去能の低減を抑制した組成物の製造に環状四糖とともに有利に利用できる。
【００１５】
ビフィズス菌増殖糖質としては、例えば、ラクトスクロース、フラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、イソマルトオリゴ糖等が、必要に応じて適宜用いられる。
【００１６】
ビタミンとしては、例えば、チアミン、リボフラビン、Ｌ−アスコルビン酸、ルチン、ヘスペリジン、ナリンジン、ナイアシン、ピリドキシン、シアノコバラミン等の水溶性ビタミン若しくはこれらの誘導体や、ビタミンＡ、ビタミンＤ、α−トコフェロール、ビタミンＫ等の脂溶性ビタミン若しくはこれらの誘導体等が有利に用いられる。
【００１７】
生理活性物質としては、例えば、ホルモン、抗菌物質、サイトカイン、プロポリス等の１種又は２種以上を、必要に応じて利用することも随意である。保存料としては、例えば、エタノール、酢酸、乳酸、食塩等の適量を、必要に応じて利用することも随意である。
【００１８】
更に、本発明の組成物や本発明の組成物を含有せしめた製品の品質を向上させるために、必要に応じて、適宜な着香料、着色料、呈味料、安定剤、増量剤等を併用することも有利に実施できる。
【００１９】
また、本発明によれば、環状四糖を有効成分とする活性酸素消去能低減抑制剤を、植物由来の活性酸素消去能を有する物質に含有せしめて該活性酸素消去能の低減を抑制することも有利に実施できる。活性酸素消去能低減抑制剤としての環状四糖の含量は、植物由来の活性酸素消去能の低減を抑制させる効果が発揮できればよく、通常、該抑制剤に対して、無水物換算で、約１０％以上、望ましくは約２０％以上、更に望ましくは約５０％以上が好適である。本発明の活性酸素消去能低減抑制剤は、有効成分である環状四糖のみから構成されてもよいし、必要に応じて、前述の必須ミネラル、食物繊維、ビフィズス菌増殖促進糖質、ビタミン、生理活性物質及び保存料等他の物質から選ばれる１種又は２種以上を併用することも随意である。
【００２０】
このようにして得られる活性酸素消去能低減抑制剤は、その形状を問わず、例えば、シラップ、粉末、結晶、顆粒、錠剤等いずれの形状であってもよい。また、本発明の活性酸素消去能低減抑制剤は、植物性可食物等が持つ活性酸素消去能の低減抑制効果が発揮できればよく、その使用方法は問わない。例えば、前述の環状四糖を含有せしめる植物由来の活性酸素消去能低減抑制方法に準じて使用すればよい。具体的には、植物性可食物及び／又は植物性抗酸化物質に対する有効成分である環状四糖の使用量も、また使用方法、使用条件等についても、前述の環状四糖を含有せしめる活性酸素消去能低減抑制方法と同様に行えば、植物由来の活性酸素消去能の低減抑制効果を有利に発揮でき、活性酸素消去能低減を抑制した各種組成物を容易に調製することができる。
【００２１】
以上述べてきたようにして得られた本発明の組成物は、後述の実験２で説明するニトロブルーテトラゾリウム法で、１ｇ当たり５単位以上、望ましくは１０単位以上の活性酸素消去能を有し、経時変化も少なく、安定した活性酸素消去能を経口、経管、経皮、経粘膜等適宜の経路により容易に利用することができる。本発明の植物性可食物含有組成物の摂取は、生体にとって、植物性可食物が本来有するビタミン、ミネラル、食物繊維等の機能性成分に加えて、新たに、活性酸素消去能を強化することとなり、健康の維持増進、老化防止、成人病の予防、難病の治療促進、発癌の抑制等に好都合であり、飲食物、化粧品、医薬品、それらの原材料又は加工中間物等として有利に利用できる。
【００２２】
本発明の組成物の用途については、各種健康飲食物への利用はもとより、一般的飲食物としても、例えば、ふりかけ、ソース、ケチャップ、焼肉のタレ、カレールウ、スープの素等の調味料、もち、だんご、キャンディー、チューインガム、焼菓子、スナック菓子、ワッフル、スポンジ菓子、パン等の各種和洋菓子類、アイスクリーム、アイスキャンディー等氷菓、フルーツペースト、フルーツソース、ピーナッツペースト、生ジャム類、漬物、ソーセージ、ハム等畜肉製品、かまぼこ、ちくわ、はんぺん、ソーセージ等魚肉製品、珍味、佃煮、惣菜、酒類、青汁、豆乳、ジュース、炭酸飲料等清涼飲料、おかゆ、雑炊、炊込御飯等米飯類、ひやむぎ、スパゲティー、マカロニ、パスタ等麺類、スナック食品、プリンミックス、ホットケーキミックス、即席ジュース、即席スープ、冷凍食品等の飲食物、それらの原材料又は加工中間物等として品質改良、呈味改良、嗜好性改善、栄養強化等の目的で有利に利用される。また、化粧品としては、美肌剤、パック剤、クリーム、シャンプー、リンス、育毛剤、浴用剤、酵素剤、練歯磨等に、例えば、液剤、ペースト剤、粉剤、顆粒剤、それらの原材料又は加工中間物等として有利に利用される。更に、医薬品としては、経口及び／又は経管栄養剤、治療剤、インターフェロン誘導剤等に、例えば、液剤、ペースト剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤又はそれらの原材料等として有利に利用され、また、経皮、経粘膜栄養剤、治療剤等に、例えば点眼剤、点鼻剤、消化剤、健胃剤、酵素剤、軟膏、パップ剤、それらの原材料又は加工中間物等として前述の老化に伴う各種疾患の治療、予防等に有利に利用される。
【００２３】
本発明の活性酸素消去能の低減を抑制した組成物は、基本的には、食品材料から構成され、毒性を懸念することなく利用でき、これを経口摂取する場合、通常、大人、一日当たり、無水物換算で、約０．１乃至１０００ｇ、望ましくは約０．２乃至５００ｇ、更に望ましくは約１乃至１００ｇの範囲で利用するのが好適である。経管、経皮、経粘膜等の他の経路による利用の場合も、経口摂取の場合の量に準じて利用すればよい。
【００２４】
以下、本発明を実験で詳細に説明する。
【００２５】
【実験１】
＜α−イソマルトシルグルコ糖質生成酵素とα−イソマルトシル転移酵素の調製＞
澱粉部分分解物（商品名『パインデックス＃４』、松谷化学株式会社製）４．０ｗ／ｖ％、酵母抽出物（商品名『アサヒミースト』（アサヒビール株式会社製）１．８ｗ／ｖ％、リン酸二カリウム０．１ｗ／ｖ％、リン酸一ナトリウム・１２水塩０．０６ｗ／ｖ％、硫酸マグネシウム・７水塩０．０５ｗ／ｖ％、および水からなる液体培地を、５００ｍｌ容三角フラスコに１００ｍｌずつ入れ、オートクレーブで１２１℃、２０分間滅菌し、冷却して、バチルスグロビスポルスＣ９（ＦＥＲＭＢＰ−７１４３）を接種し、２７℃、２３０ｒｐｍで４８時間回転振盪培養したものを種培養とした。
【００２６】
容量３０Ｌのファーメンターに種培養の場合と同組成の培地を約２０Ｌ入れて、加熱滅菌、冷却して温度２７℃とした後、種培養液１ｖ／ｖ％を接種し、温度２７℃、ｐＨ６．０乃至８．０に保ちつつ、４８時間通気攪拌培養した。培養後、培養液中のα−イソマルトシルグルコ糖質生成酵素活性は約０．４５単位／ｍｌで、α−イソマルトシル転移酵素活性は約１．５単位／ｍｌで、環状四糖生成活性は約０．９５単位／ｍｌであり、遠心分離（１０，０００ｒｐｍ、３０分間）して回収した上清約１８Ｌの酵素活性を測定したところ、当該上清は、α−イソマルトシルグルコ糖質生成酵素は約０．４５単位／ｍｌの活性（総活性約８，１１０単位）で、α−イソマルトシル転移酵素は約１．５単位／ｍｌの活性（総活性約２６，９００単位）を有していた。この培養上清を８０％飽和硫安液で塩析して４℃、２４時間放置した後、その塩析沈殿物を遠心分離（１０，０００ｒｐｍ、３０分間）して回収し１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．５）に溶解後、同緩衝液に対して透析して粗酵素液約４００ｍｌを得た。この粗酵素液は、α−イソマルトシルグルコ糖質生成酵素活性を８，１１０単位と、α−イソマルトシル転移酵素活性を２４，７００単位と、環状四糖生成活性を約１５，６００単位有していた。
【００２７】
尚、前記酵素活性は次のようにして測定した。即ち、α−イソマルトシルグルコ糖質生成酵素活性は、マルトトリオースを濃度２ｗ／ｖ％となるよう１００ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６．０）に溶解させて基質液とし、その基質液０．５ｍｌに酵素液０．５ｍｌ加えて、３５℃で６０分間酵素反応し、その反応液を１０分間煮沸して反応を停止させた後、その反応液中に主に生成するイソマルトシルマルトースとマルトースのうち、このマルトース量を、高速液体クロマトグラフィー（以下、『ＨＰＬＣ法』と略記する。）で定量して行った。ＨＰＬＣ法は、『ＹＭＣＰａｃｋＯＤＳ−ＡＱ３０３』カラム（株式会社ワイ・エム・シー製）を用いカラム温度４０℃、流速０．５ｍｌ／ｍｉｎ水の条件で行い、検出は示差屈折計『ＲＩ−８０１２』（東ソー株式会社製）を用いて行なった。α−イソマルトシルグルコ糖質生成酵素の活性１単位は、上記の条件下で１分間に１μモルのマルトースを生成する酵素量と定義した。
【００２８】
又、α−イソマルトシル転移酵素活性は、パノースを濃度２ｗ／ｖ％となるよう１００ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６．０）に溶解させ基質液とし、その基質液０．５ｍｌに酵素液０．５ｍｌ加えて、３５℃で３０分間酵素反応し、その反応液を１０分間煮沸して反応を停止させた後、その反応液中に主に生成する環状四糖とグルコースのうち、このグルコース量をグルコースオキシダーゼ法で定量して行った。α−イソマルトシル転移酵素の活性１単位は、上記の条件下で１分間に１μモルのグルコースを生成する酵素量と定義した。
【００２９】
更に、環状四糖生成活性は、澱粉部分分解物（商品名『パインデックス＃１００』、松谷化学株式会社製）を濃度２ｗ／ｖ％となるよう５０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６．０）に溶解させ基質液とし、その基質液０．５ｍｌに酵素液０．５ｍｌ加えて、３５℃で６０分間酵素反応し、その反応液を１００℃で１０分間熱処理して反応を停止させた後、更に、α−グルコシダーゼ（商品名『トランスグルコシダーゼＬ「アマノ」』、天野製薬製）７０単位／ｍｌとグルコアミラーゼ（ナガセ生化学工業株式会社販売）２７単位／ｍｌとを含む５０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ５．０）１ｍｌを加えて、５０℃で６０分間処理し、その液を１００℃で１０分間熱処理して酵素を失活させた後、環状四糖量を上記ＨＰＬＣ法で定量した。環状四糖生成活性１単位は、上記条件下で１分間に１μモルの環状四糖を生成する酵素量と定義した。
【００３０】
【実験２】
＜環状四糖の調製＞
トウモロコシ由来フィトグリコーゲン（キューピー株式会社製）の水溶液（約１００Ｌ）を濃度４ｗ／ｖ％、ｐＨ６．０、温度３０℃に調整した後、実験１の方法で得たバチルスグロビスポルスＣ９由来のα−イソマルトシルグルコ糖質生成酵素とα−イソマルトシル転移酵素とを含む酵素液を澱粉グラム当り０．１５ｍｌ加えて４８時間反応させた後、１００℃で１０分間熱処理して酵素を失活させた。この酵素反応液の一部をとり、ＨＰＬＣ法により環状四糖の生成量を調べたところ、糖組成で約８４％であった。尚、ＨＰＬＣ法は、『ショウデックス（Ｓｈｏｄｅｘ）ＫＳ−８０１カラム』（昭和電工株式会社製）を用いカラム温度６０℃、流速０．５ｍｌ／ｍｉｎ水の条件で行い、検出は示唆屈折計『ＲＩ−８０１２』（東ソー株式会社製）を用いて行なった。この酵素反応液をｐＨ５．０、温度４５℃に調整した後、α−グルコシダーゼ（商品名『トランスグルコシダーゼ・アマノ』、天野エンザイム株式会社製）を澱粉グラム当たり１５００単位と、グルコアミラーゼ（商品名『ＸＬ−４』、ナガセ生化学工業株式会社製）を澱粉グラム当たり７５単位とを加えて２４時間反応させて残存する還元性オリゴ糖等を加水分解し、更に、水酸化ナトリウムでｐＨを５．８に調整し、温度９０℃で１時間保持して酵素を失活させ、次いで、不溶物を濾別した。この濾液を逆浸透膜（商品名『ホロセップＨＲ５１５５ＰＩ』、東洋紡績株式会社製）を用いて固形分濃度約１６％まで濃縮した後、常法に従って、脱色、脱塩、濾過、濃縮することにより、固形分約３，７００ｇを含む糖液約６．２ｋｇを得た。本糖液を、イオン交換樹脂（商品名『アンバーライトＣＲ−１３１０（Ｎａ+形）型』、オルガノ社製）を充填したカラム（ゲル量約２２５Ｌ）に供し、カラム温度６０℃で流速約４５Ｌ／ｈの条件でクロマト分離を行った。溶出液の糖組成を前記ＨＰＬＣ法でモニターして、環状四糖の純度が９８％以上の画分を回収し、これを常法に従って、脱塩、脱色、濾過、濃縮して、固形分約２，５００ｇを含む糖液約７．５ｋｇを得た。本糖液の糖組成をＨＰＬＣ法で測定したところ、環状四糖の純度は約９９．５％であった。得られた環状四糖含有糖液をエバポレーターで濃度約５０％にまで濃縮した後、この濃縮液約５ｋｇを円筒状プラスチック容器に入れ、緩やかに回転させながら約２０時間で温度を６５℃から２０℃まで降下させて環状四糖を晶析させた。続いて、遠心濾過器を用いて分蜜し、環状四糖結晶を湿重量として１，３６０ｇ回収し、更に、６０℃で３時間乾燥して、環状四糖結晶粉末を１，１７０ｇ得た。本結晶粉末の糖組成をＨＰＬＣ法で測定したところ、環状四糖結晶粉末の純度は９９．９％以上と極めて高純度であった。
【００３１】
【実験３】
〈活性酸素消去能の低減抑制に与える各種糖質の影響〉
生の人参をミキサーにかけて破砕し、この破砕物に対して、各種糖質を無水糖質重量に換算して１０％混合溶解し、４０℃で２日間減圧乾燥の後、同じ温度で２４時間真空乾燥し、ミキサーで粉砕し粉末状人参含有組成物を調製した。使用した糖質は、実験２の方法で得た環状四糖、市販の試薬のグルコース、マンニトール、ソルビトール、マルトース、スクロース、トレハロース、及びプルランを使用した。調製した粉末状組成物約１００ｇを、５００ｍｌ容のポリスチレン製容器に入れ密封して、４０℃で７日間保存したときの活性酸素消去能を保存開始時のそれと比較した。活性酸素消去能の測定は、ニトロブルーテトラゾリウム（ＮＢＴ）法［今成登志男ら，医学のあゆみ，１０１，４９６−４９７（１９７７）］に従い、キサンチン−キサンチンオキシダーゼ系で生成するスーパーオキシド量を、ＮＢＴを還元して生ずるホルマザン量を比色定量して測定する方法により行った。対照として精製水を試験液とした。対照と比較してホルマザン生成量を５０％阻害する活性を活性酸素消去能の活性１単位と定義した。調製した粉末状組成物の組成と保存開始前後の組成物１ｇ当りの活性酸素消去能を表１にまとめた。表１より明らかなように、試験した糖質の中で、環状四糖及びトレハロースを使用したものが最も活性酸素消去能の残存率が高く、環状四糖が活性酸素消去能の低減抑制に著効を示すことが判明し、その抑制効果はトレハロースと同等程度に強いことがわかった。従って、環状四糖は活性酸素消去能低減抑制剤の有効成分として好適である。また、環状四糖やトレハロースに次いで、プルランも活性酸素消去能の低減抑制効果が高かった。
【００３２】
【表１】

【００３３】
【実験４】
〈活性酸素消去能の低減抑制に与える各種糖質の影響〉
実験３と同様に生の人参を破砕し、この破砕物に対して糖質を無水糖質重量に換算して１０％混合溶解し、４０℃で１日間減圧乾燥の後、同じ温度で１７時間真空乾燥し、ミキサーで粉砕し粉末状人参含有組成物を調製した。使用した糖質は、実験２の方法で得た環状四糖、市販の試薬のグルコース、マルトース、及びトレハロースを使用した。調製した粉末状組成物約１００ｇを、５００ｍｌ容のポリスチレン製容器に入れ密封して、４０℃で７日間及び１４日間保存したときの活性酸素消去能を保存開始時のそれと比較した。活性酸素消去能の測定は、電子スピン共鳴法（ＥＳＲ）法［小澤俊彦，ぶんせき，２，６８−７４（２０００）］に従い、ヒポキシキサンチン−キサンチンオキシダーゼ系で生成するスーパーオキシドを５，５−ジメチル−１−ピロリン−Ｎ−オキシドでスピントラップし、ＥＳＲで測定する方法により行った。市販スーパーオキシド・ジスムターゼ（シグマ社製）を０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）で０．５−１３．５単位／ｍｌになるように希釈し標準とした。この標準酵素液と比較して活性酸素消去能の活性を定義した。調製した粉末状組成物の組成と保存開始前後の組成物１ｇ当りの活性酸素消去能を表２にまとめた。表２より明らかなように、試験した糖質の中で、環状四糖及びトレハロースを使用したものが最も活性酸素消去能の残存率が高く、環状四糖が活性酸素消去能の低減抑制に著効を示すことが判明し、その抑制効果はトレハロースと同等程度に強いことがわかった。従って、環状四糖は活性酸素消去能低減抑制剤の有効成分として好適である。
【００３４】
【表２】

【００３５】
【実験５】
〈活性酸素消去能の低減抑制に与える環状四糖濃度の影響〉
実験３と同様に、人参破砕物に対して、環状四糖を無水糖質重量に換算して０乃至２０％量混合溶解し、４０℃で２４時間真空乾燥、粉砕を行い、粉末状人参含有組成物を調製した。これら粉末状組成物を、実験３と同様に、ポリスチレン製容器に入れ密封し、４０℃で７日間保存し、活性酸素消去能の低減抑制効果を調べた。調製した粉末状組成物の組成と保存前後の組成物１ｇ当りの活性酸素消去能を実験３の方法にしたがって測定した。その結果を表３に示す。環状四糖共存量が、無水物換算で約１％以上、望ましくは約５％以上が、更に望ましくは２０％以上が活性酸素消去能の低減抑制効果に優れていた。
【００３６】
【表３】

【００３７】
【実験６】
〈各種野菜の活性酸素消去能の低減抑制に与える環状四糖の影響〉
各種野菜について、実験３と同様に処理し、野菜破砕物に対して、環状四糖を無水糖質重量に換算して１０％添加し、４５℃で２０時間真空乾燥、粉砕して粉末状野菜含有組成物を調製し、これらを実験３と同様に容器に入れ、４０℃で６日間保存した。保存前後の組成物１ｇ当りの活性酸素消去能を、環状四糖不使用のものと比較した。調製した粉末状組成物の組成と活性酸素消去能を表４に示す。人参、玉ねぎ、大根、キャベツ、ほうれん草、きゅうり、かぼちゃ等多くの野菜において、環状四糖を含有せしめることで活性酸素消去能の低減抑制効果が認められた。
【００３８】
【表４】

【００３９】
【実験７】
〈環状四糖によるスーパーオキシド・ジスムターゼ及び各種抗酸化物質に対する活性酸素消去能の低減抑制効果〉
実験２の方法により得た環状四糖を濃度３０％の水溶液とし、この水溶液１ｍｌ当たりに、西洋わさび由来スーパーオキシド・ジスムターゼ（シグマ社製）を５μｇ，α−グルコシルヘスペリジン（（株）林原生物化学研究所製）を１０ｍｇ，α−グルコシルルチン（（株）林原生物化学研究所製）を１０ｍｇ，没食子酸（和光純薬工業製）を２５０μｇ及びカテキン（和光純薬工業製）を５０μｇをそれぞれ溶解して液状組成物を得、これらをそれぞれガラス製試験管に入れゴム栓で密封し、遮光下で保存した。対照として、前記環状四糖水溶液の代わりに水を用いた。それらの保存条件と保存前後の活性酸素消去能を表５に示す。表５に示すごとく、スーパーオキシド・ジスムターゼの他、α−グルコシルヘスペリジン，α−グルコシルルチン，没食子酸及びカテキン等植物由来の抗酸化物質の有する活性酸素消去能についても、環状四糖が著しい低減抑制効果を発揮することが認められた。また、別に、環状四糖含水結晶粉末と各抗酸化物質粉末とをそれぞれ混合粉末とし、これらを同様に保存試験したが、いずれも活性酸素消去能についてほとんど変化が見られなかった。このことから、環状四糖は、粉末状で混合しただけではその効果を発揮しにくく、環状四糖が溶けた状態で接触含有、換言すれば水性媒体存在下で含有せしめることによりその効果を発揮することが判明した。
【００４０】
【表５】

【００４１】
以下、若干の実施例によって本発明を説明する。実施例Ａで本発明の活性酸素消去能低減抑制剤を、実施例Ｂで、活性酸素消去能の低減を抑制した組成物を説明する。
【００４２】
【実施例Ａ−１】
〈活性酸素消去能低減抑制剤〉
とうもろこし澱粉を濃度約２０％の澱粉乳とし、これに炭酸カルシウム０．１％加え、ｐＨ６．５に調整し、α−アミラーゼ（商品名『ターマミール６０Ｌ』、ノボ社製）を澱粉グラム当たり０．３％加え、９５℃で１５分間反応させ、次いで１２０℃に２０分間オートクレーブし、次いで、約３５℃に急冷してＤＥ約４の液化溶液を得、これに実験１の方法で得たバチルスグロビスポルスＣ９由来のα−イソマルトシルグルコ糖質生成酵素とα−イソマルトシル転移酵素とを含む酵素液を澱粉グラム当り０．２ｍｌ加え、更にシクロマルトデキストリン・グルカノトランスフェラーゼ（株式会社林原生物化学研究所製造）を澱粉固形物グラム当り１０単位となるように加え、ｐＨ６．０、温度３５℃で４８時間反応させた。その反応液を９５℃で３０分間保った後、ｐＨ５．０、温度５０℃に調整した後、α−グルコシダーゼ剤（商品名『トランスグルコシダーゼＬ「アマノ』、天野製薬株式会社製造）を固形物グラム当たり３００単位加え、２４時間反応させ、更にグルコアミラーゼ剤（商品名『グルコチーム』、ナガセ生化学工業（株）製）を固形物グラム当たり３０単位加え、１７時間反応させ、その反応液を９５℃に加熱し３０分間保った後、冷却し、濾過し、得られる濾液を常法に従って活性炭で脱色し、Ｈ形及びＯＨ形イオン交換樹脂により脱塩し、精製し、更に濃縮して、固形物当り、グルコース３４．２％、環状四糖６２．７％、その他の糖質を３．１％含有する濃度６０％の環状四糖含有シラップを得た。
【００４３】
この環状四糖含有シラップを、強酸性カチオン交換樹脂（商品名『アンバ−ライトＣＲ−１３１０（Ｎａ型）』、オルガノ（株）製）を用いてカラム分画を行なった。樹脂を内径５．４ｃｍのジャケット付きステンレス製カラム４本に充填し、直列につなぎ樹脂層全長２０ｍ（各カラムの樹脂層長は５ｍ）とした。カラム内温度６０℃に維持しつつ、糖液を樹脂に対して５ｖ／ｖ％加え、これに６０℃の温水をＳＶ０．１３で流して分画し、溶出液の糖組成をＨＰＬＣ法でモニターし、環状四糖高含有画分を採取し、精製して、固形物当たり約９８％の環状四糖を含有する環状四糖高含有液を得た。
【００４４】
本溶液を濃度約７０％に濃縮した後、助晶缶にとり、種晶として環状四糖含水結晶を固形物当たり約２％加えて徐冷し、晶出率約４５％のマスキットを得た。本マスキットを乾燥搭上のノズルより１５０ｋｇ／ｃｍ^２高圧にて噴霧した。これと同時に８５℃の熱風を乾燥搭の上部より送風し、底部に設けた移送用金網コンベア上に結晶粉末を捕集し、コンベアの下より４５℃の温風を送りつつ、該粉末を乾燥搭外に徐々に移動させて、取り出した。この結晶粉末を熟成搭に充填して温風を送りつつ、１０時間熟成させ、結晶化と乾燥を完了し、原料澱粉固形物当たり収率約２０％で環状四糖含水結晶粉末を得た。本品は、純度の高い環状四糖含水結晶であって、本発明の活性酸素消去能低減抑制剤として好適であり、植物性可食物等の活性酸素消去能の低減抑制に有利に利用できる。
【００４５】
【実施例Ａ−２】
〈活性酸素消去能低減抑制剤〉
実施例Ａ−１の方法で得た高純度環状四糖含水結晶１００重量部に、プルラン１重量部を均一に混合して、固状の活性酸素消去能低減抑制剤を製造した。本品は、植物性可食物等の活性酸素消去能の低減抑制に有利に利用できる。
【００４６】
【実施例Ａ−３】
〈活性酸素消去能低減抑制剤〉
実施例Ａ−１の方法で得た濃度６０％の環状四糖含有シラップ１００重量部に、プルラン０．５重量部及び易水溶性シクロデキストリン０．５重量部を均一に混合溶解して、シラップ状の活性酸素消去能低減抑制剤を製造した。本品は、植物性可食物等の活性酸素消去能の低減抑制に有利に利用できる。
【００４７】
【実施例Ａ−４】
〈活性酸素消去能低減抑制剤〉
実施例Ａ−１の方法で得た高純度環状四糖含水結晶１００重量部に、トレハロース含水結晶１００重量部、プルラン１重量部及び易水溶性シクロデキストリン１重量部を均一に混合して、粉末状の活性酸素消去能低減抑制剤を製造した。本品は、植物性可食物等の活性酸素消去能の低減抑制に有利に利用できる。
【００４８】
【実施例Ｂ−１】
〈ほうれん草含有組成物〉
ほうれん草をミキサーにかけて破砕し、この破砕物１０重量部に対して、実施例Ａ−４の方法で得た活性酸素消去能低減抑制剤を１重量部及びα−グルコシルルチンを０．１重量部を適量の水に溶解した後混合し、１００℃で１０分間加熱処理し、４０℃で２時間通風乾燥の後、４０℃で１６時間真空乾燥を行い、粉砕機で粉砕し、活性酸素消去能が１ｇ当たり約１，２００単位の粉末状ほうれん草含有組成物を得た。本品は、ほうれん草本来の色調をよく保っており、食欲をそそるものであった。本品を摂取することは、生体にとって、ほうれん草が本来有するビタミン、ミネラル、食物繊維等の機能性成分に加えて、活性酸素消去能を強化することとなり、健康の維持増進、老化防止、成人病の予防、難病の治療促進、発癌の抑制等に好都合である。従って、飲食物、化粧品、医薬品、それらの原材料又は加工中間物等として有利に利用できる。
【００４９】
【実施例Ｂ−２】
〈キャベツ含有組成物〉
キャベツを切断しブランチングした後、細断機にかけて約５ｍｍ幅に千切りし、この千切りキャベツ１０重量部に対して実施例Ａ−３の方法で得た活性酸素消去能低減抑制剤１重量部及びα−グルコシルルチン０．０５重量部を混合し室温で２時間なじませ、次いで、４０℃で２時間通風乾燥し、更に４０℃で１６時間真空乾燥を行い、活性酸素消去能が、１ｇ当たり約１，３００単位の細片状キャベツ含有組成物を得た。本品は、キャベツ本来の色調をよく保っており、食欲をそそるものであった。本品を摂取することは、生体にとって、キャベツが本来有するビタミン、ミネラル、食物繊維等の機能性成分に加えて、活性酸素消去能を強化することとなり、健康の維持増進、老化防止、成人病の予防、難病の治療促進、発癌の抑制等に好都合である。従って、飲食物、化粧品、医薬品、それらの原材料又は加工中間物等として有利に利用できる。
【００５０】
【実施例Ｂ−３】
〈なす含有組成物〉
なすをスライサーにかけ水洗いし、このスライス１０重量部に対して、実施例Ａ−１の方法で得た活性酸素消去能低減抑制剤１重量部を適量の水に溶解した後混合し、７０℃で２日間通風乾燥し、活性酸素消去能が１ｇ当たり約１１，０００単位の細片状なす含有組成物を得た。本品は、なすの皮部が本来の色調をよく保っており、食欲をそそるものであった。本品を摂取することは、生体にとって、なすが本来有するビタミン、ミネラル、食物繊維等の機能性成分に加えて、活性酸素消去能を強化することとなり、健康の維持増進、老化防止、成人病の予防、難病の治療促進、発癌の抑制等に好都合である。従って、飲食物、化粧品、医薬品、それらの原材料又は加工中間物等として有利に利用できる。
【００５１】
【実施例Ｂ−４】
〈人参含有組成物〉
人参をブランチングした後、スライサーにかけてスライスし、このスライス１０重量部に対して、実施例Ａ−４の方法で得た活性酸素消去能低減抑制剤１重量部を適量の水に溶解した後混合し、５０℃で１６時間通風乾燥し活性酸素消去能が１ｇ当り約４５０単位の細片状人参含有組成物を得た。本品は、人参本来の色調をよく保っており、食欲をそそるものであった。また、本品は吸湿性が低く、保存安定性に優れ、取扱い容易であった。本品を摂取することは、生体にとって、人参が本来有するビタミン、ミネラル、食物繊維等の機能性成分に加えて、活性酸素消去能を強化することとなり、健康の維持増進、老化防止、成人病の予防、難病の治療促進、発癌の抑制等に好都合である。従って、飲食物、化粧品、医薬品、それらの原材料又は加工中間物等として有利に利用できる。
【００５２】
【実施例Ｂ−５】
〈ひじき含有組成物〉
乾燥ひじきを水で戻した後、破砕機で破砕し、この破砕物１０重量部に対して、実施例Ａ−２の方法で得た活性酸素消去能低減抑制剤５重量部を混合溶解し、５０℃で８時間通風乾燥した後、４０℃で真空乾燥し、粉砕して活性酸素消去能が、１ｇ当たり約２４単位の粉末状ひじき含有組成物を得た。本品を摂取することは、生体にとって、ひじきが本来有するビタミン、ミネラル、食物繊維等の機能性成分に加えて、活性酸素消去能を強化することとなり、健康の維持増進、老化防止、成人病の予防、難病の治療促進、発癌の抑制等に好都合である。従って、飲食物、化粧品、医薬品、それらの原材料又は加工中間物等として有利に利用できる。
【００５３】
【実施例Ｂ−６】
〈椎茸含有組成物〉
干し椎茸を水で戻して、１００℃で１５分間加熱した後、破砕機で破砕しこの破砕物１００重量部に対して、実施例Ａ−３の方法で得た活性酸素消去能低減抑制剤１０重量部とともに茶抽出物０．１重量部を混合溶解し、５０℃で８時間通風乾燥した後、４０℃で真空乾燥し、粉砕して、活性酸素消去能が、１ｇ当たり約５６０単位の粉末状椎茸含有組成物を得た。本品を摂取することは、生体にとって、椎茸が本来有するビタミン、ミネラル、食物繊維等の機能性成分に加えて、活性酸素消去能を強化することとなり、健康の維持増進、老化防止、成人病の予防、難病の治療促進、発癌の抑制等に好都合である。従って、飲食物、化粧品、医薬品、それらの原材料又は加工中間物等として有利に利用できる。
【００５４】
【実施例Ｂ−７】
〈柚含有組成物〉
柚の皮を破砕機にかけて破砕し、この破砕物を５重量部に対して、実施例Ａ−１の方法で得た活性酸素消去能低減抑制剤１重量部を適量の水に溶解した後混合し、予備凍結の後、３日間凍結乾燥し、粉砕して、活性酸素消去能が、１ｇ当たり約１２単位の粉末状柚含有組成物を得た。本品は、柚本来の香り、色調をよく保っていた。本品を摂取することは、生体にとって、柚が本来有するビタミン、ミネラル、食物繊維等の栄養成分に加えて、活性酸素消去能を強化することとなり、健康の維持増進、老化防止、成人病の予防、難病の治療促進、発癌の抑制等に好都合である。従って、飲食物、化粧品、医薬品、それらの原材料又は加工中間物等として有利に利用できる。
【００５５】
【実施例Ｂ−８】
〈生姜含有組成物〉
生姜をミキサーにかけて破砕し、この破砕物５重量部に対して、実施例Ａ−２の方法で得た活性酸素消去能低減抑制剤を１重量部を適量の水に溶解した後混合し、予備凍結の後、３日間凍結乾燥し、破砕機で粉砕し活性酸素消去能が、１ｇ当たり約１２０単位の粉末状生姜含有組成物を得た。本品を摂取することは、生体にとって、生姜が本来有するビタミン、ミネラル、食物繊維等の機能性成分に加えて、活性酸素消去能を強化することとなり、健康の維持増進、老化防止、成人病の予防、難病の治療促進、発癌の抑制等に好都合である。従って、飲食物、化粧品、医薬品、それらの原材料又は加工中間物等として有利に利用できる。
【００５６】
【実施例Ｂ−９】
〈青じそ含有組成物〉
青じその葉をブランチングした後、ミキサーにかけて破砕し、この破砕物５重量部に対して、実施例Ａ−１の方法で得た活性酸素消去能低減抑制剤を１重量部及びα−グルコシルルチンを０．５重量部を適量の水に溶解した後混合し、次いで、脱水剤として環状四糖無水結晶を３５重量部を混合し、室温に１日放置し、粉砕機で粉砕し、活性酸素消去能が、１ｇ当たり約２３０単位の粉末状青じそ含有組成物を得た。本品は、青じそ本来の色調や風味をよく保っており、食欲をそそるものであった。本品を摂取することは、生体にとって、青じそが本来有するビタミン、ミネラル、食物繊維等の機能性成分に加えて、活性酸素消去能を強化することとなり、健康の維持増進、老化防止、成人病の予防、難病の治療促進、発癌の抑制等に好都合である。従って、飲食物、化粧品、医薬品、それらの原材料又は加工中間物等として有利に利用できる。
【００５７】
【実施例Ｂ−１０】
〈よもぎ含有組成物〉
よもぎを、常法に従って、適量の食塩を加えた沸騰水に入れてアク抜きし、これをかるく脱水した後、破砕機にかけて破砕し、この破砕物５重量部に実施例Ａ−４の方法で得た活性酸素消去能低減抑制剤を１．３重量部及びαグルコシルルチンを０．０５重量部を適量の水に溶解後混合し、５０℃で４時間通風乾燥し、４０℃で１６時間真空乾燥し、粉砕して、活性酸素消去能が、１ｇ当たり約７８０単位の粉末状よもぎ含有組成物を得た。本品は、よもぎ本来の色調、風味をよく保っており、食欲をそそるものであった。本品を摂取することは、生体にとって、よもぎが本来有するビタミン、ミネラル、食物繊維等の機能性成分に加えて、活性酸素消去能を強化することとなり、健康の維持増進、老化防止、成人病の予防、難病の治療促進、発癌の抑制等に好都合である。従って、飲食物、化粧品、医薬品、それらの原材料又は加工中間物等として有利に利用できる。
【００５８】
【実施例Ｂ−１１】
〈どくだみ含有組成物〉
どくだみ乾燥物（十薬、局方、大同製薬製）０．５重量部に１０重量部の水を加え、加熱沸騰させ９０分間煎じた。バスケット型遠心機で煎液を回収した。煎液を更に煮詰めて濃度約５％液４重量部を得た。この煮詰め液２重量部に対して実施例Ａ−３の方法で得た活性酸素消去能低減抑制剤を０．５重量部を混合し、この溶液を常法により噴霧乾燥し、活性酸素消去能が、１ｇ当たり約１，４００単位の粉末状どくだみ抽出物含有組成物を得た。本品はどくだみ特有の嫌な臭いや味を低減していて、従来と比べて口にしやすいものであった。本品を摂取することは、生体にとって、どくだみが本来有するビタミン、ミネラル、食物繊維等の機能性成分に加えて、活性酸素消去能を強化することとなり、健康の維持増進、老化防止、成人病の予防、難病の治療促進、発癌の抑制等に好都合である。従って、飲食物、化粧品、医薬品、それらの原材料又は加工中間物等として有利に利用できる。
【００５９】
【実施例Ｂ−１２】
〈アロエ含有組成物〉
アロエをミキサーにかけて破砕し、この破砕物１０重量部に対して、茶抽出物０．１重量部を加え、さらに、実施例Ａ−１の方法で得た活性酸素消去能低減抑制剤１重量部を適量の水に溶解した後混合し、７０℃で２日間通風乾燥し、粉砕機で粉砕し、活性酸素消去能が、１ｇ当たり約５，８００単位の粉末状アロエ含有組成物を得た。本品は、アロエの苦味が低減し、従来品に比べて口にしやすいものであった。本品を摂取することは、生体にとって、アロエが本来有するビタミン、ミネラル、食物繊維等の機能性成分に加えて、活性酸素消去能を強化することとなり、健康の維持増進、老化防止、成人病の予防、難病の治療促進、発癌の抑制等に好都合である。従って、飲食物、化粧品、医薬品、それらの原材料又は加工中間物等として有利に利用できる。
【００６０】
【実施例Ｂ−１３】
〈白菜浅漬含有組成物〉
白菜浅漬を細断機にかけ、この細断物１０重量部に対して、実施例Ａ−１の方法で得た活性酸素消去能低減抑制剤１重量部を適量の水に溶解した後混合し、５５℃で１６時間通風乾燥し、活性酸素消去能が１ｇ当り約５，４００単位の細片状の白菜浅漬含有組成物を得た。本品は、白菜浅漬の色調をよく保っており、口に含むとその漬物の風味が広がり食欲をそそるものであった。本品を摂取することは、生体にとって、白菜浅漬が本来有するビタミン、ミネラル、食物繊維等の機能性成分に加えて、活性酸素消去能を強化することとなり、健康の維持増進、老化防止、成人病の予防、難病の治療促進、発癌の抑制等に好都合である。従って、飲食物、化粧品、医薬品、それらの原材料又は加工中間物等として有利に利用できる。従って、ふりかけ、おにぎりの素、ラーメンスープの具等の飲食物のみならず、健康食品、その他化粧品、医薬品、それらの原料又は中間物等として有利に利用できる。
【００６１】
【実施例Ｂ−１４】
〈野沢菜漬含有組成物〉
野沢菜漬を細断機にかけ、この細断物１０重量部に対して、実施例Ａ−１の方法で得た活性酸素消去能低減抑制剤１重量部を適量の水に溶解した後混合し、５５℃で１６時間通風乾燥し、活性酸素消去能が１ｇ当り約２，６００単位の細片状の野沢菜漬含有組成物を得た。本品は、野沢菜漬の色調をよく保っており、口に含むとその漬物の風味が広がり、食欲をそそるものであった。本品を摂取することは、生体にとって、野沢菜漬が本来有するビタミン、ミネラル、食物繊維等の機能性成分に加えて、活性酸素消去能を強化することとなり、健康の維持増進、老化防止、成人病の予防、難病の治療促進、発癌の抑制等に好都合である。従って、飲食物、化粧品、医薬品、それらの原材料又は加工中間物等として有利に利用できる。
【００６２】
【実施例Ｂ−１５】
〈白菜キムチ含有組成物〉
白菜キムチを細断機にかけ、この細断物１０重量部に対して、実施例Ａ−４の方法で得た活性酸素消去能低減抑制剤１重量部を適量の水に溶解した後混合し、５５℃で１６時間通風乾燥し、活性酸素消去能が１ｇ当り約１６００単位の細片状の白菜キムチ含有組成物を得た。本品は、白菜キムチの色調をよく保っており、口に含むとその漬物の風味が広がり、食欲をそそるものであった。本品を摂取することは、生体にとって、白菜キムチが本来有するビタミン、ミネラル、食物繊維等の機能性成分に加えて、活性酸素消去能を強化することとなり、健康の維持増進、老化防止、成人病の予防、難病の治療促進、発癌の抑制等に好都合である。従って、飲食物、化粧品、医薬品、それらの原材料又は加工中間物等として有利に利用できる。
【００６３】
【実施例Ｂ−１６】
〈チューインガム〉
ガムベース３重量部を柔らかくなる程度に加熱溶解し、これに環状四糖含水結晶３重量部、トレハロース含水結晶３重量部、及び実施例Ｂ−９の方法で得た青じそ含有組成物１重量部及び茶抽出物０．０１重量部とを加え、更に適量の香料と着色料とを混合し、常法に従って、ロールにより練り合わせ、成形、包装して活性酸素消去能が、１ｇ当たり約１２０単位の製品を得た。本品は、テクスチャー、風味とも良好なチューインガムである。また、本品は、使われている糖質が環状四糖及びトレハロースであることから、虫歯誘発菌に利用されにくく、虫歯になりにくい特徴も有している。
【００６４】
【実施例Ｂ−１７】
〈だんご〉
モチ種澱粉１０重量部に水１２重量部を混合し、加熱糊化しつつ、これに実施例Ｂ−１０の方法で得た、よもぎ含有組成物０．５重量部を混和し、以後、常法に従って、成形、包装して活性酸素消去能が、１ｇ当たり約１２単位のだんごを製造した。本品は、よもぎの色調、風味に優れ、口当たりも良好なよもぎだんごである。
【００６５】
【実施例Ｂ−１８】
〈栄養剤〉
結晶性α−マルトース２０重量部、グリシン１．１重量部、グルタミン酸ナトリウム０．１８重量部、食塩１．２重量部、クエン酸１重量部、乳酸カルシウム０．４重量部、実施例Ｂ−１の方法で得たほうれん草含有組成物０．３重量部、チアミン０．０１重量部及びリボフラビン０．０１重量部からなる配合物を調製する。この配合物２４ｇずつをラミネートアルミ製小袋に充填し、ヒートシールして活性酸素消去能が、１ｇ当たり、約１２単位の経管栄養剤を調製した。本栄養剤は、一袋を約３００乃至５００ｍＬの水に溶解し、経口的摂取することも、また経管方法により鼻腔、胃、腸等への非経口的栄養補給液としても有利に利用できる。
【００６６】
【実施例Ｂ−１９】
〈化粧用クリーム〉
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリコール２重量部、自己乳化型モノステアリン酸グリセリン５重量部、実施例Ｂ−１２の方法で得たアロエ含有組成物２．８重量部、α−グルコシルルチン０．２重量部、流動パラフィン１重量部、トリオクタン酸グリセリル１０重量部及び防腐剤の適量を、常法に従って加熱溶解し、これにＬ−乳酸２重量部、１，３−ブチレングリコール５重量部及び精製水６６重量部を加え、ホモゲナイザーにかけ乳化し、更に香料の適量を加えて撹拌混合して、活性酸素消去能が、１ｇ当たり、約４６単位の化粧用クリームを製造した。本品は、日焼けによる火傷肌の治療、日焼けの予防、美肌剤、色白剤等として、更には、しみ、そばかす、あざ、しわ等皮膚の老化現象の発生抑制剤等として有利に利用できる。
【００６７】
【実施例Ｂ−２０】
〈浴用剤〉
ＤＬ−乳酸ナトリウム２１重量部、ピルビン酸ナトリウム８重量部、実施例Ｂ−７の方法で得た柚含有組成物５重量部、α−グルコシルルチン１重量部及びエタノール４０重量部を、精製水２６重量部及び着色料、香料の適量と混合し、活性酸素消去能が、１ｇ当たり約２２０単位の浴用剤を製造した。本品は、美肌剤、色白剤として好適であり、入浴用の湯に１００乃至１０，０００倍に希釈して利用すればよい。本品は、入浴用の湯の場合と同様に、洗顔用水、化粧水等に希釈して利用することも有利に実施できる。
【００６８】
【実施例Ｂ−２１】
〈軟膏〉
酢酸ナトリウム・三水塩１重量部、ＤＬ−乳酸カルシウム４重量部をグリセリン１０重量部と均一に混合し、この混合物を、ワセリン５０重量部、木ロウ１０重量部、ラノリン５重量部、ゴマ油１４．５重量部、実施例Ｂ−１１の方法で得たどくだみ含有組成物６重量部及びはっか油０．５重量部の混合物に加えて、更に均一に混和して活性酸素消去能が、１ｇ当たり約５４単位の軟膏を製造した。本品は、化膿止め、美肌剤、色白剤等として、更には外傷、火傷の治療促進剤等として有利に利用できる。
【００６９】
【発明の効果】
上記したように、本発明は、環状四糖を有効成分とする活性酸素消去能低減抑制剤と、環状四糖又は該低減抑制剤を含有せしめることを特徴とする活性酸素消去能の低減抑制方法を提供するものであり、併せて該方法により活性酸素消去能の低減を抑制した植物性可食物及び／又は植物性抗酸化物質含有組成物を提供するものである。本組成物の摂取は、生体にとっては、植物性可食物等のもつビタミン、ミネラル、食物繊維等の機能性成分に加えて、新たに活性酸素消去能の低減が少なく、より安定した活性酸素消去能を容易に強化、補給できることとなり、健康の維持増進、老化防止、成人病の予防、難病の治療促進、発癌の抑制等に大きく寄与できることになる。従って、本発明の確立は、植物性可食物等の加工、利用分野に第四の機能性成分とも言うべき新たな健康資源を開拓することとなり、これが与える影響は広く、とりわけ、飲食物、化粧品、医薬品等の産業界に与える工業的意義はきわめて高い。

Claims

化学式１で表される環状四糖を有効成分とする、スーパーオキシド・ジスムターゼ、α−グルコシルヘスペリジン、α−グルコシルルチン、没食子酸、及びカテキンから選ばれる植物性抗酸化物質、又は該植物性抗酸化物質を含有する可食性植物の活性酸素消去能低減抑制剤。
化学式１で表される環状四糖以外の糖質を含む請求項１記載の活性酸素消去能低減抑制剤。
トレハロース及び／又はプルラン及び／又はシクロデキストリンを含む請求項１又は２記載の活性酸素消去能低減抑制剤。
化学式１で表される環状四糖を無水物換算で約１０ｗ／ｗ％以上含有する請求項１乃至３のいずれかに記載の活性酸素消去能低減抑制剤。
スーパーオキシド・ジスムターゼ、α−グルコシルヘスペリジン、α−グルコシルルチン、没食子酸、及びカテキンから選ばれる植物性抗酸化物質、又は該植物性抗酸化物質を含有する可食性植物に、化学式１で表される環状四糖、又は、請求項１乃至４のいずれかに記載の活性酸素消去能低減抑制剤を水性媒体存在下で含有せしめることを特徴とする活性酸素消去能の低減抑制方法。
有効成分としての化学式１で表される環状四糖を、スーパーオキシド・ジスムターゼ、α−グルコシルヘスペリジン、α−グルコシルルチン、没食子酸、及びカテキンから選ばれる植物性抗酸化物質、又は該植物性抗酸化物質を含有する可食性植物に対して、無水物換算で約１ｗ／ｗ％以上含有せしめる請求項５記載の活性酸素消去能の低減抑制方法。
殺菌及び／又は乾燥工程を含む請求項５又は６記載の活性酸素消去能の低減抑制方法。
スーパーオキシド・ジスムターゼ、α−グルコシルヘスペリジン、α−グルコシルルチン、没食子酸、及びカテキンから選ばれる植物性抗酸化物質、又は該植物性抗酸化物質を含有する可食性植物に、化学式１で表される環状四糖、又は請求項１乃至４のいずれかに記載の活性酸素消去能低減抑制剤を含有せしめ、活性酸素消去能の低減を抑制した組成物。
有効成分としての環状四糖の含量が、無水物換算で約１ｗ／ｗ％以上である請求項８記載の組成物。
必須ミネラル、食物繊維、ビフィズス菌増殖促進糖質、ビタミン及び生理活性物質から選ばれる１種又は２種以上を含有せしめた請求項８又は９記載の組成物。
組成物が、飲食物、化粧品、医薬品、又はこれらの原材料もしくは中間加工物である請求項８乃至１０のいずれかに記載の組成物。