JP4492956B2 - アセロラ発酵物 - Google Patents
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Description
本発明のアセロラ発酵物は、アセロラ果実またはその破砕物を発酵することによって、あるいは酵素処理および中和処理のうちの少なくとも1種で処理した後に発酵することによって得られる。アセロラ発酵物はそのままか、あるいは濾過して用いられる。本発明においては、濾過物が好ましく用いられる。好ましいアセロラ発酵物は、発酵後に得られる可溶成分である。
アセロラは、熱帯に生息するキントラオ科に属する果樹であり、その果実部には、アスコルビン酸およびその誘導体が豊富に含まれる。本発明においては、このアセロラの果実が用いられる。
次いで、アセロラ果実またはその破砕物の発酵を促進する目的で、酵素による細胞壁分解処理および中和処理のうちの少なくとも1種で処理し得る。
上記アセロラ果実またはその破砕物を発酵する、あるいは酵素処理および中和処理のうちの少なくとも1種で処理した後に発酵してアセロラ発酵物を得る。発酵としては、乳酸発酵、クエン酸発酵、アルコール発酵、酢酸発酵などが挙げられる。これらの中でも、乳酸発酵が好ましい。発酵はこれらを組み合わせてもよい。発酵は、例えば、24時間〜72時間で終了することが、アスコルビン酸またはその誘導体の損失を防ぐ点から好ましい。発酵の種類に応じて、乳酸菌、酵母菌、酢酸菌などが用いられる。酵母や酢酸菌は、耐酸性が強いため、中和処理を行わずとも、効率的な発酵が可能であり、アセロラ果実の風味を十分維持することができる。
このようにして得られたアセロラ発酵物は、そのまま使用してもよいし、必要に応じて、その後当業者が通常用いる処理方法によって種々の態様にして使用することもできる。このような態様としては、例えば、上記のように発酵物を固液分離して上清を回収することにより得られた発酵エキス、該発酵物または該発酵エキスを濃縮処理した発酵ペースト、該発酵物または該発酵エキスを乾燥・粉末化処理した発酵粉末または発酵エキス末などが挙げられる。これらは、すべてアセロラ発酵物の一態様である。
本発明のアセロラ発酵物含有組成物は、アセロラ発酵物を含有し、必要に応じて、その他の成分を含有し得る。この組成物は、食品、医薬部外品、化粧品、トイレタリー用品などに広く適用し得る。
アセロラピューレ(株式会社ニチレイ)を、以下のような処理方法(試験1〜5)によって発酵した。
アセロラピューレ1kgにイオン交換水1kgを加えて攪拌してアセロラ分散液を調製した。この分散液を固液分離せずに、2gの乳酸菌(ラクトバチルス・プランタラム・ヴィニフローラ、クリスチャンハンセン社製)を添加し、35℃にて24時間発酵した。なお、発酵前後の乳酸値をF−キットL−乳酸(J.K.インターナショナル社製)を用いて測定した。得られたアセロラ発酵物をろ過し、アセロラ発酵液を得た。このアセロラ発酵液を95℃にて8秒間殺菌した後に、これを凍結乾燥し、アセロラ発酵液の乾燥粉末(アセロラ発酵エキス末)70gを得た。アセロラピューレおよびアセロラ発酵エキス末中に含まれるアスコルビン酸の量を以下の方法で測定し、発酵前後におけるアスコルビン酸の残存率(%)を求めた。発酵前後の乳酸量およびアスコルビン酸量、ならびに発酵前後におけるアスコルビン酸残存率の結果を表1に示す。なお、後述の試験2〜5の結果についても同様に表1に示す。
アセロラピューレまたはアセロラ発酵エキス末をサンプルとして、サンプル0.4gを10mLの水に溶解した。この溶液と、10mLのブタノールとを分液ロート中で攪拌混合した後、水層を回収する操作を2回行って試験液を調製した。得られた試験液をHPLCに供し、以下の条件で測定した。なお、標準物質として、アスコルビン酸(和光純薬株式会社製)の0.01質量/容量%水溶液、0.05質量/容量%水溶液、および0.1質量/容量%水溶液を調製した。
移動相:25mM KH2PO4(pH2.5)
カラム:Unison UK−C18 150×4.6mm(Imtakt社製)
流速:1mL/min
カラム温度:40℃
使用サンプル量:10μL
検出波長:205nm
試験1において、乳酸菌を添加する前に、アセロラ含有溶液をセルラーゼA(天野エンザイム社製)で酵素処理したこと以外は、試験1と同様に行い、アセロラ発酵エキス末を得た。なお、酵素処理は、アセロラ分散液にセルラーゼA(ペクチナーゼ、エンドβ−グルカナーゼ、エキソβ−グルカナーゼ、キシラナーゼ、およびβ−グルコシダーゼを含有)を最終濃度が0.1質量/容量%となるように添加し、55℃、24時間保持して行った。
セルラーゼAの代わりに、ペクチナーゼA(ペクチナーゼおよびアミラーゼを含有、天野エンザイム社製)を用いて酵素処理したこと以外は、試験2と同様にして、アセロラ発酵エキス末を得た。
セルラーゼAの代わりに、スミチームPX(ペクチナーゼおよびエンドアラバナーゼを含有、新日本化学社製)を用いて酵素処理したこと以外は、試験2と同様にして、アセロラ発酵エキス末を得た。
試験1において、乳酸菌を添加する前に、中和処理を行ったこと以外は、試験1と同様に行い、アセロラ発酵エキス末を得た。なお、中和処理は、1NのNaOHを用いてアセロラ分散液のpHを5.0に調節して行った。
実施例1の乳酸菌をラクトバチルス・カゼイ(クリスチャンハンセン社製)にしたこと以外は、実施例1と同様に行い(試験1〜5)、アセロラ発酵エキス末(75g)を得た。発酵前後の乳酸量およびアスコルビン酸量、ならびに発酵前後におけるアスコルビン酸残存率の結果を表1に併せて示す。
実施例1の乳酸菌をラクトバチルス・プランタラム・LP115株(協和ハイフーヅ社製)にしたこと以外は、実施例1と同様に行い(試験1〜5)、アセロラ発酵エキス末(72g)を得た。発酵前後の乳酸量およびアスコルビン酸量、ならびに発酵前後におけるアスコルビン酸残存率の結果を表1に併せて示す。
実施例1の乳酸菌をビフィドバクテリウム・ロンガム(クリスチャンハンセン社製)にしたこと以外は、実施例1と同様に行い(試験1〜5)、アセロラ発酵エキス末(70g)を得た。発酵前後の乳酸量およびアスコルビン酸量、ならびに発酵前後におけるアスコルビン酸残存率の結果を表1に併せて示す。
実施例1の乳酸菌をラクトバチルス・アシドフィルス(クリスチャンハンセン社製)にしたこと以外は、実施例1と同様に行い、アセロラ発酵エキス末(73g)を得た。発酵前後の乳酸量およびアスコルビン酸量、ならびに発酵前後におけるアスコルビン酸残存率の結果を表1に併せて示す。
実施例1の乳酸菌をバチルス・メセンテリカス(東亜薬品工業社製)にしたこと以外は、実施例1と同様に行い(試験1〜5)、アセロラ発酵エキス末(69g)を得た。発酵前後の乳酸量およびアスコルビン酸量、ならびに発酵前後におけるアスコルビン酸残存率の結果を表1に併せて示す。
実施例1の試験1において、乳酸菌を用いなかったこと以外は、実施例1の試験1と同様に行い、アセロラ搾汁末(81g)を得た。発酵前後の乳酸量およびアスコルビン酸量、ならびに発酵前後におけるアスコルビン酸残存率の結果を表1に併せて示す。
実施例1〜6で得られたアセロラ発酵エキス末の中から、表2に示される8種類のアセロラ発酵エキス末を用いて、チロシナーゼ阻害作用、リパーゼ阻害作用、および嗜好性について評価した。結果を表2に示す。
チロシナーゼ阻害作用を以下のように評価した。まず、各発酵エキス末0.4gを精製水10mLに溶解し、さらに100倍希釈して希釈液を調製した(アスコルビン酸濃度0.08〜0.11mg/mL)。この希釈液100μLに、10μL(110Units)のチロシナーゼ(フナコシ株式会社製)および90μLの1/15Mリン酸緩衝液(pH6.8)を添加し、37℃にて10分間保持した。その後、0.03質量/容量%のDOPA(和光純薬株式会社)を100μL加えて、さらに37℃にて5分間保持した。得られた溶液を試験液として480nmの吸光度を測定した(測定値Aとする)。対照として、上記希釈液の代わりに、精製水を用いたこと以外は上記と同様に行って得た試験液(対照試験液)の吸光度を測定した(測定値Bとする)。さらに、試験液および対照試験液の各ブランクとして、上記チロシナーゼの代わりに1/15Mリン酸緩衝液を用いたこと以外は上記と同様に行って得た各溶液(ブランク)の吸光度を測定した(試験液のブランクの測定値を測定値C、対照試験液のブランクの測定値を測定値Dとする)。上記の測定値A〜Dを用いて、以下の式からチロシナーゼ阻害率(%)を求めた。なお、表2の値は、三重測定して得られた値である。
チロシナーゼ阻害率(%)=[1−{(A−C)/(B−D)}]×100
上記希釈液1mLを、10質量/容量%の炭酸ナトリウム(和光純薬株式会社)でpH8.5に調整し、蒸留水で全量を2mLに調整した。この溶液に、4mLの基質液(牛乳を蒸留水で3倍希釈し、炭酸ナトリウムでpH8.5に調整した溶液)および0.04質量/容量%の豚膵臓由来のリパーゼ(和光純薬株式会社)を添加した。この溶液のpHを直ちに測定し、さらに37℃にて20分間反応させた後に再度pHを測定し、このpHの差(ΔAとする)を求めた。対照として、上記希釈液の代わりに、蒸留水を用いたこと以外は上記と同様に行い、pHの差(ΔBとする)を求めた。ΔAおよびΔBを用いて、以下の式よりリパーゼ阻害率(%)を求めた。
リパーゼ阻害率(%)={1−(ΔA)/ΔB}}×100
上記希釈液1mLを、50mLの蒸留水に溶解した(アセロラ発酵エキス末溶液とする)。これとは別に、アセロラピューレをろ過し、凍結乾燥して得られた乾燥粉末1gを蒸留水50mLに溶解した(アセロラ搾汁末溶液とする)。6人のパネラーに、アセロラ発酵エキス末溶液とアセロラ搾汁末溶液とについて以下の評価基準で評価してもらった。なお、表2中の数値は、それぞれ回答した人数を示す。
評価基準:
アセロラ発酵エキス末溶液のほうが明らかに香りおよび風味がよい :○
アセロラ発酵エキス末溶液のほうが香りおよび風味がよいと思われる:△
特に差はない :×
アセロラ発酵エキス末の代わりに、アセロラピューレの濾過液を凍結乾燥して得られた乾燥粉末(アセロラ搾汁末)を用いたこと以外は、実施例7と同様にして、チロシナーゼ阻害率およびリパーゼ阻害率を求めた。結果を表2に併せて示す。
希釈液の代わりに、アスコルビン酸を0.11mg/mL含有する水溶液を用いたこと以外は、実施例7と同様にして、チロシナーゼ阻害率を求めた。結果を表2に併せて示す。
実施例1の試験1(LPV、前処理なし)および実施例2の試験1(LC、前処理なし)で得られた2種類のアセロラ発酵エキス末0.4gをそれぞれ精製水10mLに溶解し、さらに100倍希釈して希釈液を調製した。この希釈液100μLに、終濃度140unit/mLに調製したヒアルロニダーゼ(シグマアルドリッチジャパン社製)および0.1Mの酢酸緩衝溶液(pH4.0)50μLを加えて37℃にて20分間保持した。さらに、0.1Mの酢酸緩衝溶液(pH4.0)で0.1mg/mLに調製されたCompound48/80(シグマアルドリッチジャパン社製)溶液を100μL加えて37℃にて20分間保持した。そして、さらに0.1Mの酢酸緩衝溶液(pH4.0)で0.64mg/mLに調製されたヒアルロン酸ナトリウム(和光純薬工業株式会社製)溶液を250μL加えて37℃にて40分間反応させた。反応後、0.4Mの水酸化ナトリウム水溶液を100μL加え、氷冷した。この反応液に、49.5mg/mLのホウ酸緩衝液(pH9.1)を100μL加えて3分間煮沸し、再度氷冷した。氷冷後、10mg/mLに調製したp−ジメチルベンズアルデヒド(p−DBA)(和光純薬工業株式会社)を3mL加えて37℃にて20分間反応後、650nmの吸光度を測定した(測定値(a)とする)。対照として、上記希釈液の代わりに、蒸留水を用いたこと以外は上記と同様に行い、吸光度を測定した(測定値(b)とする)。なお、測定値(a)および(b)は、ブランクとして、上記ヒアルロニダーゼの代わりに1/15Mリン酸緩衝液を用いたこと以外は上記と同様に行って得た各溶液の吸光度の各値を予め差し引いた値である。上記測定値(a)および(b)を用いて、以下の式からヒアルロニダーゼ阻害率(%)を求めた。結果を表3に示す。
ヒアルロニダーゼ阻害率(%)={1−(a/b)}×100
アセロラ発酵エキス末の代わりに、アセロラピューレの濾過液を凍結乾燥して得られた乾燥粉末(アセロラ搾汁末)を用いたこと以外は、実施例13と同様にして、ヒアルロニダーゼ阻害率を求めた。結果を表3に併せて示す。
アセロラ発酵エキス末を用いて、血中の中性脂肪上昇抑制作用を以下のように評価した。まず、4週齢雄性SDラット30匹を標準飼料(MF,オリエンタル酵母工業株式会社製)を用いて1週間馴化した。SDラットを16時間絶食させ、眼窩静脈より採血し、血清中のトリグリセリド(以下、血中TGという)をTG測定キット(商品名:トリグリセライドG−テストワコー、和光純薬工業株式会社)を用いて測定した。血中TGの平均値(投与前の血中TG値とする)がほぼ均一となるように1群6匹の計5群(ラット群1〜5)に分けた。
アセロラ発酵エキス末を用いて、血中のコレステロール改善作用を以下のように評価した。まず、4週齢雄性SDラット30匹を標準飼料(MF,オリエンタル酵母工業株式会社製)を用いて1週間馴化した。SDラットを16時間絶食させ、眼窩静脈より採血し、血清中の総コレステロール量(以下、血中T−Choという)を測定キット(商品名:コレステロールE−ワコー、和光純薬工業株式会社)を用いて測定した。血中T−Choの平均値(投与前の血中T−Cho値とする)がほぼ均一となるように1群6匹の計5群に分けた。
6週齢の雄性マウス(DBA/2N)20匹を標準飼料(MF飼料、オリエンタル酵母工業株式会社)を用いて1週間馴化した。これらのマウスを平均体重がほぼ均一となるようにすること以外はランダムに1群4匹の5群にわけた。
アセロラピューレ1kgと精製水1kgとを混合した後、気流式殺菌装置(株式会社奈良製作所)に入れ、110℃にて1分間加熱した。室温になるまで放置した後、この混合物をジャケットつきタンクに投入した。これにグルコースを最終濃度が5質量%となるように添加した。次いで、湿質量で4gのパン酵母(オリエンタル酵母工業株式会社)を添加して、30℃にて48時間発酵した。発酵終了後に濾過し、デキストリンを240g添加し、噴霧乾燥によりアセロラ発酵エキス末を280g得た。
実施例1の試験1(LPV、前処理なし)で得られたアセロラ発酵エキス末を用いて以下の食品(錠剤:100mg)を製造した。配合成分および配合量を以下に示す。
<錠剤の配合成分> 配合量(質量%)
アセロラ発酵エキス末 20
ビタミンミックス(日本香料薬品社製) 5
結晶セルロース 10
ショ糖エステル 4
還元麦芽糖 30
二酸化ケイ素 1
卵殻カルシウム 30
実施例2の試験1(LC、前処理なし)で得られたアセロラ発酵エキス末を用いて、以下の食品(顆粒品)を製造した。配合成分および配合量を以下に示す。
<顆粒品の配合成分> 配合量(質量%)
アセロラ発酵エキス末 30
還元麦芽糖 30
難消化性デキストリン 20
トレハロース 20
実施例4の試験2(BL、酵素処理(セルラーゼA))で得られたアセロラ発酵エキス末を用いて、以下の食品(飲料)を製造した。配合成分および配合量を以下に示す。この飲料は、嗜好性もよく、美容効果も期待される。
<飲料の配合成分> 配合量(1Lあたり)
アセロラ発酵エキス末 2g
果糖ブドウ糖液糖 10g
レモン果汁 10g
クエン酸 2g
香料 150mg
グリシン 100mg
プロリン 100mg
アラニン 80mg
純水 残量
実施例6の試験1(BM、前処理なし)で得られたアセロラ発酵エキス末を用いて、以下の食品(カプセル剤)を製造した。配合成分および配合量を以下に示す。
<カプセル剤の配合成分> 配合量(質量%)
アセロラ発酵エキス末 98
ビタミンE 2
実施例5の試験5(LA、中和処理)で得られたアセロラ発酵エキス末を用いて、以下の化粧品(化粧水)を製造した。配合成分および配合量を以下に示す。この化粧水は、アセロラ発酵エキス末を含有することで、新陳代謝促進、美白効果が期待される。
<化粧水の配合成分> 配合量
アセロラ発酵エキス末 0.01g
グリセリン 8g
プロピレングリコール 5g
オレイルアルコール 0.1g
ポリオキシエチレンラウリルエーテル 1g
エタノール 5g
フェノキシエタノール 0.1g
クエン酸ナトリウム 0.5g
精製水 80.3g
実施例1の試験1(LPV、前処理なし)および実施例4の試験5(BL、中和処理)で得られたアセロラ発酵エキス末を用いて、以下の化粧品(クリーム)を製造した。配合成分および配合量を以下に示す。
<クリームの配合成分> 配合量
アセロラ発酵エキス末(実施例1の試験1) 0.2g
アセロラ発酵エキス末(実施例4の試験5) 0.1g
マイクロクリスタリンワックス 3g
ラノリン 3g
ワセリン 5g
スクワラン 9g
オリーブ油 12g
セスキオレイン酸ソルビタン 3g
トリオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20E.O.) 1g
ソルビトール 9g
クエン酸ナトリウム 0.3g
精製水 54.8g
香料 適量
Claims (3)
- アセロラ果実またはその破砕物を乳酸発酵することによって得られるアセロラ乳酸発酵物を有効成分として含む脂質代謝調整剤であって、該アセロラ果実に含まれるアスコルビン酸またはその誘導体が、該アセロラ乳酸発酵物中に乾燥質量換算で2質量%以上含有される、脂質代謝調整剤。
- 前記アセロラ果実に含まれるアスコルビン酸またはその誘導体が、乳酸発酵前の50%以上保持される、請求項1に記載の脂質代謝調整剤。
- 前記アセロラ乳酸発酵物の乾燥質量に対して乳酸を0.0001質量%以上含有する、請求項1または2に記載の脂質代謝調整剤。
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