JPH08143466A - 天然抗酸化剤および活性酸素消去剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 食品、食品添加物、化粧品、医薬等の分野に
おいて利用可能であり、酸化による品質低下を防ぎ、さ
らに活性酵素を消去する作用を合わせ持つ天然物由来の
抗酸化剤および活性酵素消去剤を安価に提供することを
目的とする。 【構成】 桑の実、桑の葉由来の抗酸化剤および活性酸
素消去剤と桑の実および桑の葉を水若しくは親水性有機
溶媒で抽出して得られる有効成分を含有する抗酸化剤お
よび活性酸素消去剤。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、食品、食品添加物、化
粧品、医薬等の分野に於いて利用可能な天然物由来の抗
酸化剤および活性酸素消去剤に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】一般に酸素は、生命体にとって必須のも
のであるが、時には生体に害を及ぼすことがあり、また
代謝により生成されるス−パ−オキサイドと呼ばれる活
性酸素は、鉄や銅などの金属触媒により還元されて過酸
化水素となり、さらに活性酸素中で最も反応性が高く、
生体に害を及ぼすヒドロキシラジカルとなるが、この分
子はＤＮＡを切断し、また脂質を酸化し、老化促進因子
とされる過酸化脂質を生成するだけでなく、通常生体内
でＳＯＤ（ス−パ−オキシドディスムタ−ゼ）と呼ばれ
る酵素により消去されるものの、ストレス、高齢化など
によってこのＳＯＤが減少する結果、生体内でバランス
が崩れ、活性酸素によって過酸化脂質が増加して、心筋
梗塞、動脈硬化、糖尿病、癌、脳卒中、白内障、肩こ
り、冷え性、シミ、ソバかす、しわ等が生じる等の原因
となる不都合があった。

【０００３】このような不都合を解消するものとして、
化学合成品のＢＨＡ（ブチルヒドロキシアニソ−ル）、
ＢＨＴ（ブチルヒドロキシトルエン）等の抗酸化剤があ
る。また、活性酸素消去物質として、生体内の酵素であ
るス−パ−オキシドディスムタ−ゼ（ＳＯＤ）が開発さ
れている。

【０００４】一方漢方では、桑はクワ科（Ｍoraceae)の
植物でヤマ桑（Ｍorus bombycis ｋoidz.)、 カラ桑（Ｍ
orus albaL.)、チョウセン桑（Ｍorus mongorikaSchne
id.)等の種類があり、 桑の実は桑ジン、桑の葉は桑葉と
呼ばれて漢方薬として、また、桑の実、桑の葉を乾燥
し、煎じたり、煮詰めて軟膏としたり、桑の実をそのま
ま酒に浸して薬用酒としても飲用され、滋養強壮、抗糖
尿病、解熱、鎮咳、涼血薬として用いられ、また、糖分
とカロチンを含んだビタミンが含有していることから、
現在ジャム等の食品としての利用が広がってきている
が、この桑の実、桑の葉の抽出物の抗酸化およびＳＯＤ
様括性については未だ報告されていない。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】上記抗酸化剤は化学的
合成品であり、活性酸素消去剤は、その精製が困難であ
るため著しく高価なものとなるだけでなく、熱に不安定
で失活し易いため、近年、安全性、健康志向の面におい
て、また簡易で安価に得られる、ＳＯＤと同様に活性酸
素消去作用を示す、天然のＳＯＤの代用物質（ＳＯＤ様
活性物質）及び抗酸化物質の出現が望まれている。

【０００６】本発明は、酸化による品質低下を防ぎ、さ
らに活性酸素を消去する作用を合わせ持つ天然の抗酸化
剤および活性酸素消去剤を提供することを目的とする。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明は、上記状況に鑑
みて鋭意研究を重ねた結果得たものであって、天然の、
即ち、桑の実、桑の葉由来の抗酸化剤および活性酸素消
去剤、又は桑の実、桑の葉を水若しくは親水性有機溶媒
で抽出して得られる抗酸化剤および活性酸素消去剤を特
徴とする。

【０００８】

【作用】上記、天然の抗酸化剤は抗酸化活性を示し、得
られる物質は天然由来のものでありながら、α−トコフ
ェロ−ルより強く、化学合成品（ＢＨＴ）と同等の抗酸
化活性を示すものであり、また天然の活性酸素消去剤
は、化学合成品と同様の活性酸素消去作用を示し、しか
も、簡単な操作で安価にその物質を得ることができる。

【０００９】

【実施例】本発明に係る抗酸化剤および活性酸素消去剤
は、桑の実、桑の葉を水または親水性有機溶媒で抽出し
て得られる天然の抗酸化剤および活性酸素消去剤であっ
て、抽出物の抗酸化活性、活性酸素消去作用に関する実
施例および試験例を以下に具体的に示す。

【００１０】（乾燥した桑の実の水抽出物の調製） １．桑の実の乾燥したものを水で洗浄した後、細かく刻
み、この粉末２０ｇに沸騰水１０００ｍｌを加え弱火で
５分熱水抽出する。 ２．この抽出エキスを１２０メッシュの金網に通し夾雑
物を除去する。 ３．得られたエキスを５０℃減圧下で１／１０重量まで
濃縮する。 ４．この濃縮エキスを一晩凍結乾燥し、乾燥物を得る。 上記手段により原料に対し２３〜２８％の収率で乾燥物
が得られた（なお、桑の葉についても前記と同操作を行
いサンプルを調整した）。

【００１１】（乾燥桑の実の親水性有機溶媒抽出物の調
製） １．乾燥桑の実を水で洗浄した後、細かく刻み、この粉
末２０ｇにエタノ−ル（９９．５％）３００ｍｌを加
え、攪拌後１日間放置した。 ２．得られたエキスを減圧下で濃縮、乾固する。 上記手段により、原料に対し約４〜１６％の乾燥物が得
られた（なお、桑の葉についても上記と同様の操作でサ
ンプルを調整した）。

【００１２】（ＳＯＤ様活性測定）ＳＯＤ様活性測定に
はＮＢＴ法を用いた。これによって、キサンチンにキサ
ンチンオキシダ−ゼを作用させる事により、ス−パ−オ
キサイドが生成され、このス−パ−オキサイドがニトロ
ブル−テトラゾリウム（ＮＢＴ）を還元してホルマザン
を生成するので、このホルマザン生成量を５６０ｎｍの
吸光度で求めるとともに、ＳＯＤ様活性物質はス−パオ
キサイドを消去してホルマザンの生成を抑えるため、そ
の阻害率を求めることにより、ＳＯＤ様活性を測定し
た。

【００１３】Ａ：０．４％〜２％の桑の実または桑の葉
の、水またはエタノ−ル抽出物の水溶液０．１ｍｌに発
色液（０．１Ｍりん酸緩衝液ｐＨ８．０、キサンチン
０．４ｍｍｏｌ／１、ニトロプル−テトラゾリウム０．
２４ｍｍｏｌ／１）を１．０ｍｌ、酵素液（キサンチン
オキシダ−ゼ０．０４９ｕｎｉｔ／ｍｌ、０．１Ｍりん
酸緩衝液ｐＨ８．０）を１．０ｍｌ加え、３７℃水浴中
で２０分間正確に加温した後、ドデシル硫酸ナトリウム
溶液（６９ｍｍｏｌ／１）２．０ｍｌを加え、反応を停
止した後、分光光度計にてＯＤ５６０ｎｍの吸光値を測
定する。 Ｂ：Ａでの桑の実、または葉の水抽出物またはエタノ−
ル抽出物の水溶液の代わりに蒸留水を用いて行いＯＤ５
６０ｎｍの吸光値を測定する。 Ｃ：Ａでの酵素液の代わりに０．１Ｍりん酸緩衝液１．
０ｍｌを用いて行いＯＤ５６０ｎｍの吸光値を測定す
る。 Ｄ：Ａでの桑の実または桑の葉の、水またはエタノ−ル
抽出物の水溶液の代わりに蒸留水を用い、そして酵素溶
液の代わりに０．１Ｍりん酸緩衝液１．０ｍｌを用いて
行いＯＤ５６０ｎｍの吸光値を測定する。上記Ａ〜Ｄの
値を用いて以下の数式にしたがって、阻害率を求めた。

【００１４】

【数１】

【００１５】この結果、表１に示したように、反応液中
の桑の実の水抽出物の濃度が１０００ｐｐｍの時に阻害
率５４％、２００ｐｐｍの時に２３％、４０ｐｐｍの時
に５％となった。また、桑の葉の水抽出物の濃度が１０
００ｐｐｍの時に阻害率７７％、４００ｐｐｍの時に３
５％、４０ｐｐｍの時に１４％となった。更に、エタノ
−ル抽出物は、１０００ｐｐｍの時に７３％、２００ｐ
ｐｍの時に２１％、４０ｐｐｍの時に２％となり、ＳＯ
Ｄ様活性効果があることが示された。

【００１６】

【表１】

【００１７】抗酸化活性測定法（ロダン鉄法） 試料濃度０．０２％のエタノ−ル溶液２ｍｌと２．５１
％のリノ−ル酸エタノ−ル溶液２ｍｌ、０．０５Ｍりん
酸Ｂｕｆｆｅｒ（ｐＨ７．０）４ｍｌ、水２ｍｌをスク
リュウキャップ付きの褐色バイアル瓶（φ＝３５ｍｍ、
Ｈ＝７５ｍｍ）に入れ、混合し、４０℃のインキュベ−
タ−に保存し、一日毎に、この試料溶液を０．１ｍｌ採
集し、７５％エタノ−ルを９．７ｍｌ、ロダン鉄アンモ
ニウム水溶液０．１ｍｌをそれぞれ加え、さらに０．０
２Ｍ塩化第二鉄３．５％塩酸溶液を０．１ｍｌ添加し
て、正確に３分後のＯＤ５００ｎｍの吸光値を測定し
た。この操作を一週間行ない、リノ−ル酸の経時的な変
敗度を測定した。この結果、図１に示すように桑の実、
桑の葉の水、またはエタノ−ル抽出物は、α−トコフェ
ロ−ルより高く、ＢＨＴと同等の高い抗酸化活性がある
ことがわかった。

【００１８】次に桑の実、桑の葉の水抽出エキス乾燥物
を用いてＬ−アスコルビン酸の安定性試験を行なった。
この安定性試験は、０．０５Ｍりん酸Ｂｕｆｆｅｒ溶液
（ｐＨ７．０）にＬ−アスコルビン酸０．１重量％の濃
度で添加した試験液を作成し、その試験液５０ｍｌに桑
の実、桑の葉の水抽出エキス乾燥物を２００ｐｐｍ、５
００ｐｐｍとなるように添加し（試料添加によるｐＨの
変化はなかった。）、１００ｍｌのスクリュウキャップ
付きの透明バイアル瓶に入れ、５０℃で三日間保温した
後、これを１／１００に希釈し、ＯＤ２６５ｎｍの吸光
値を測定し、Ｌ−アスコルビン酸量を求め、Ｌ−アスコ
ルビン酸残存量（％）として表した。

【００１９】なお、対照は試験液のみを用い、また、エ
キス乾燥物由来のバックグラウンドを除くためブランク
として０．０５Ｍりん酸Ｂｕｆｆｅｒ溶液（ｐＨ７．
０）にエキス乾燥物を２００ｐｐｍ、５００ｐｐｍ添加
したものをそれぞれ作成し、ＯＤ２６５ｎｍの吸光値を
測定し、これをサンプル吸光値から差し引いた。

【００２０】図２に示す様に、Ｌ−アスコルビン酸残存
率は対照２４％に対し、桑の実の水抽出物エキス乾燥物
では２００ｐｐｍ添加の時３７％となり、５００ｐｐｍ
添加の時４３％となり、桑の葉の水抽出エキス乾燥物で
は、２００ｐｐｍ添加の時３０％、５００ｐｐｍ添加の
時４９％となり、桑の実および桑の葉の水抽出物はＬ−
アスコルビン酸の保存性を高める効果があることが判っ
た。

【００２１】更に桑の実の水抽出エキスを用いた色素褪
色防止効果の試験を行った。色素として市販のクチナシ
黄色素（理研ビタミン（株）のリケンカラ−シリ−ズ）
を用いて、０．０５Ｍりん酸Ｂｕｆｆｅｒ溶液（ｐＨ
７．０）に０．１％の濃度でクチナシ色素を添加した色
素試験液を作成し、その色素試験液５０ｍｌに桑の実の
水抽出エキス乾燥物を２００ｐｐｍとなるように添加し
（試料添加によるｐＨの変化はなかった。）、１００ｍ
ｌのスクリュウキャップ付きの透明バイアル瓶に入れ、
室内自然条件下にて６日間保存した。また、対照として
色素試験液のみを用いて、６日後、これらの５倍希釈液
のＯＤ４４０ｎｍ吸光値を測定し、イニシャルの吸光値
を１００％として、クチナシ黄色素の残存率（％）とし
て求めた。そして、ブランクとして０．０５Ｍりん酸Ｂ
ｕｆｆｅｒ溶液（ｐＨ７．０）にエキス乾燥物を２００
ｐｐｍを添加した試験液を作成し、ＯＤ４４０ｎｍの吸
光値を測定し、これをサンプル吸光値から差し引いた。

【００２２】

【表２】

【００２３】表２に示すようにクチナシ色素の残存率
（％）は対照の４９％に対し、桑の実エキス乾燥物添加
では７７％であった。この結果より桑の実抽出エキスは
色素分解を抑え、褪色防止に効果があることがわかっ
た。

【００２４】次に桑の実の水抽出エキスを用いたβ−カ
ロチン分解抑効果の試験を行った。β−カロチンは市販
の水溶液の天然β−カロチン粉末（タマ生化学株式会
社）を用いて、０．０５Ｍりん酸Ｂｕｆｆｅｒ溶液（ｐ
Ｈ７．０）に０．０５％濃度で天然β−カロチン粉末を
添加したβ−カロチン試験液を作成し、そのβ−カロチ
ン試験液５０ｍｌに桑の実の水抽出エキス乾燥物を２０
０ｐｐｍとなるように添加し（試料添加によるｐＨの変
化はなかった。）、１００ｍｌのスクリュウキャップ付
きの透明バイアル瓶に入れ、室内自然条件下にて６日間
保存した。また、対照としてβ−カロチン試験液のみを
用い、６日後、各試験液のＯＤ４６０ｎｍ吸光値を測定
し、イニシャルの吸光値を１００％として、β−カロチ
ンの残存率を（％）として求めた。更に、ブランクとし
て０．０５Ｍりん酸Ｂｕｆｆｅｒ溶液（ｐＨ７．０）に
エキス乾燥物を２００ｐｐｍを添加した試験液を作成
し、ＯＤ４６０ｎｍ吸光値を測定し、これをサンプル吸
光値から差し引いた。

【００２５】

【表３】

【００２６】表３に示すようにβ−カロチンの６日間室
内自然光条件下での残存率（％）は対照の４５％に対
し、桑の実の水抽出エキス乾燥物添加では９７％であっ
た。この結果より、桑の実の水抽出エキスはβ−カロチ
ンの分解を抑える効果があることがわかった。

【００２７】近年、β−カロチンは機能性健康食品素材
として注目されているが、２００ｐｐｍの桑の実の水抽
出エキスの添加で、安定化し、味、風味にも影響を与え
ないということは注目すべき点である。

【００２８】以下に本発明品を用いた化粧水及び、飴、
飲料、軟膏の処方の一例を示すが、この処方に限定され
るものではなく、食品類、各種化粧品類、医薬品等に配
合することができる。また製造法は公知の方法に従い作
成した。

【００２９】 （化粧水の処方例） 桑の葉の水抽出エキス乾燥物 ０．２０ ％ １．３．ブチレングリコ−ル ６．００ ％ グリセリン ４．００ ％ 香料 ０．１０ ％ 防腐剤 ０．１０ ％ クエン酸 ０．０１ ％ エタノ−ル ５．００ ％ 精製水 ８４．５９ ％ ───────── 計 １００．００ ％ （飴の処方例） 桑の実の水抽出エキス乾燥物 ０．５ ｇ グラニュ−糖 ７０．０ ｇ 水飴 ２９．０ ｇ クエン酸 ０．５ ｇ ──────── 計 １００．０ ｇ （飲料の処方） 桑の実の水抽出エキス乾燥粉末 ２５ ｍｇ 蜂蜜 ５０００ ｍｇ エルダ−ベリ−色素 ２００ ｍｇ ペクチン １５０ ｍｇ 香料 １００ ｍｇ クエン酸 １５０ ｍｇ 精製水 適量 ──────── 計 ５０ｍｌ （親水軟膏） 桑の葉の水抽出エキス乾燥粉末 ０．２ｇ 白色ワセリン ２５．０ｇ ステアリルアルコ−ル ２０．０ｇ プロピレングリコ−ル １２．０ｇ ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０ ４．０ｇ モノステアリン酸グリセリン １．０ｇ パラオキシ安息香酸メチル ０．１ｇ パラオキシ安息香酸プロピル ０．１ｇ 精製水 適量 ───────── 計 １００．０ｇ

【００３０】

【発明の効果】桑の実、桑の葉の水抽出物または親水性
有機溶媒で抽出した物質に高いＳＯＤ様活性と抗酸化活
性が示された。これは簡便な操作で安く得られるため、
食品、食品添加物、化粧品、医薬等の分野での抗酸化
剤、活性酸素消去剤としての利用価値があり、桑の実、
桑の葉を利用したものについては抗酸化物質、ＳＯＤ様
活性物質を含有するため老化防止、健康増進にすぐれた
効果があるものとして各分野に提供することが可能であ
る。

【図面の簡単な説明】

【図１】桑の実、桑の葉の水、及びエタノ−ル抽出物と
α−トコフェロ−ル、ＢＨＴとの抗酸化活性の比較図
で、縦軸は吸光値、横軸は各サンプル保存日数を表わ
す。

【図２】桑の実の水抽出物と桑の葉の水抽出物の０ｐｐ
ｍ、２００ｐｐｍ、５００ｐｐｍ濃度添加でのＬ−アス
コルビン酸の残存率比較図であって、縦軸は残存率、横
軸は各サンプルを表わす。

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【手続補正書】

【提出日】平成７年６月１９日

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００１７

【補正方法】変更

【補正内容】

【００１７】抗酸化活性測定法（ロダン鉄法） 試料濃度０．０２％のエタノ−ル溶液２ｍｌと２．５１
％のリノ−ル酸エタノ−ル溶液２ｍｌ、０．０５Ｍりん
酸Ｂｕｆｆｅｒ（ｐＨ７．０）４ｍｌ、水２ｍｌをスク
リュウキャップ付きの褐色バイアル瓶（φ＝３５ｍｍ、
Ｈ＝７５ｍｍ）に入れ、混合し、４０℃のインキュベ−
タ−に保存し、一日毎に、この試料溶液を０．１ｍｌ採
集し、７５％エタノ−ルを９．７ｍｌ、３０％チオシア
ン酸アンモニウム水溶液０．１ｍｌをそれぞれ加え、さ
らに０．０２Ｍ塩化第二鉄３．５％塩酸溶液を０．１ｍ
ｌ添加して、正確に３分後のＯＤ５００ｎｍの吸光値を
測定した。この操作を一週間行ない、リノ−ル酸の経時
的な変敗度を測定した。この結果、図１に示すように桑
の実、桑の葉の水、またはエタノ−ル抽出物は、α−ト
コフェロ−ルより高く、ＢＨＴと同等の高い抗酸化活性
があることがわかった。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 桑の実、桑の葉由来の抗酸化剤および活
   性酸素消去剤。
2. 【請求項２】 桑の実、桑の葉を水若しくは親水性有機
   溶媒で抽出して得られる抗酸化剤および活性酸素消去
   剤。