KR20030014288A - 이중 특이성 항체 및 이의 제조 및 사용 방법 - Google Patents
이중 특이성 항체 및 이의 제조 및 사용 방법 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20030014288A KR20030014288A KR1020027017916A KR20027017916A KR20030014288A KR 20030014288 A KR20030014288 A KR 20030014288A KR 1020027017916 A KR1020027017916 A KR 1020027017916A KR 20027017916 A KR20027017916 A KR 20027017916A KR 20030014288 A KR20030014288 A KR 20030014288A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- antibody
- antigen
- library
- binding portion
- recombinant
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 166
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 title claims abstract description 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 395
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 395
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 395
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 138
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims abstract description 43
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims abstract description 43
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 41
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 41
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 32
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 140
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 99
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 97
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 80
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 57
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 claims description 39
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 38
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims description 30
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 claims description 29
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 claims description 29
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 28
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims description 24
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims description 23
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 19
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims description 17
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 17
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 15
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 15
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 claims description 14
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 14
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims description 13
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims description 12
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 claims description 11
- 230000009824 affinity maturation Effects 0.000 claims description 11
- 238000002649 immunization Methods 0.000 claims description 11
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 claims description 9
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 claims description 9
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 9
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 9
- 241000283707 Capra Species 0.000 claims description 8
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 claims description 7
- 241000700159 Rattus Species 0.000 claims description 7
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 7
- LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N (2s,3r)-2-[[(2r)-1-[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-hydroxybutanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCCCN LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N 0.000 claims description 6
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 claims description 6
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 claims description 6
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 claims description 6
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 claims description 6
- 102000004125 Interleukin-1alpha Human genes 0.000 claims description 6
- 108010082786 Interleukin-1alpha Proteins 0.000 claims description 6
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 claims description 6
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims description 6
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 claims description 6
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 claims description 5
- 102400000792 Endothelial monocyte-activating polypeptide 2 Human genes 0.000 claims description 5
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 claims description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 5
- 108010000525 member 1 small inducible cytokine subfamily E Proteins 0.000 claims description 5
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 claims description 5
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 5
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 claims description 5
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 claims description 4
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 4
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 claims description 4
- 238000011503 in vivo imaging Methods 0.000 claims description 4
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 claims description 4
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 claims description 4
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims description 4
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 claims description 4
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 claims description 4
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 claims description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 3
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims description 3
- 206010010099 Combined immunodeficiency Diseases 0.000 claims description 3
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 claims description 3
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 3
- 208000035408 type 1 diabetes mellitus 1 Diseases 0.000 claims description 3
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 claims description 2
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 claims description 2
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 claims 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 claims 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 7
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 84
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 24
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 22
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 21
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 20
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 19
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 19
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 17
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 17
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 16
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 15
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 15
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 15
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 14
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 13
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 13
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 13
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 12
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 12
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 12
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 11
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 11
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 11
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 11
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 10
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 10
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 9
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 9
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 9
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 9
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 9
- 238000013461 design Methods 0.000 description 9
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 9
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 239000005541 ACE inhibitor Substances 0.000 description 8
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 8
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 8
- -1 coatings Substances 0.000 description 8
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 8
- 108010045069 keyhole-limpet hemocyanin Proteins 0.000 description 8
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 8
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 8
- 241000894007 species Species 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 7
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 7
- 102100026878 Interleukin-2 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 7
- 208000029523 Interstitial Lung disease Diseases 0.000 description 7
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 description 7
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 7
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 7
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 7
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 7
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 description 7
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 6
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 description 6
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 6
- 102000003810 Interleukin-18 Human genes 0.000 description 6
- 108090000171 Interleukin-18 Proteins 0.000 description 6
- UETNIIAIRMUTSM-UHFFFAOYSA-N Jacareubin Natural products CC1(C)OC2=CC3Oc4c(O)c(O)ccc4C(=O)C3C(=C2C=C1)O UETNIIAIRMUTSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 6
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 description 6
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 6
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 6
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 6
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 6
- 230000006870 function Effects 0.000 description 6
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 6
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 6
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 6
- NCEXYHBECQHGNR-QZQOTICOSA-N sulfasalazine Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(\N=N\C=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-QZQOTICOSA-N 0.000 description 6
- 229960001940 sulfasalazine Drugs 0.000 description 6
- NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N sulfasalazine Natural products C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(N=NC=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 5
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 5
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 5
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 5
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 5
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 5
- 101150021185 FGF gene Proteins 0.000 description 5
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 5
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 5
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 5
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 5
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 5
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 5
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 5
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 5
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 5
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 description 5
- 239000000041 non-steroidal anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 5
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 5
- 229960005205 prednisolone Drugs 0.000 description 5
- OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N prednisolone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- 206010003827 Autoimmune hepatitis Diseases 0.000 description 4
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 description 4
- 108090000426 Caspase-1 Proteins 0.000 description 4
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 4
- 101150074155 DHFR gene Proteins 0.000 description 4
- 102100031111 Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 17 Human genes 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 4
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 4
- 102000003815 Interleukin-11 Human genes 0.000 description 4
- 108090000177 Interleukin-11 Proteins 0.000 description 4
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 4
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 4
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 description 4
- 230000007503 antigenic stimulation Effects 0.000 description 4
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 4
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 4
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 4
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 description 4
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 description 4
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 4
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 4
- 230000036541 health Effects 0.000 description 4
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 4
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 4
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 4
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 4
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 4
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 4
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 4
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 4
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 description 3
- 102000017420 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Human genes 0.000 description 3
- 108050005493 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Proteins 0.000 description 3
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 description 3
- 102100035904 Caspase-1 Human genes 0.000 description 3
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 3
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 3
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 3
- 102100025137 Early activation antigen CD69 Human genes 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 108010008165 Etanercept Proteins 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 3
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 3
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 3
- 101000934374 Homo sapiens Early activation antigen CD69 Proteins 0.000 description 3
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 description 3
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 3
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 3
- 101000934346 Homo sapiens T-cell surface antigen CD2 Proteins 0.000 description 3
- 101000716102 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD4 Proteins 0.000 description 3
- 101000946843 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Proteins 0.000 description 3
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 3
- 101000800116 Homo sapiens Thy-1 membrane glycoprotein Proteins 0.000 description 3
- 101000851376 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Proteins 0.000 description 3
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 3
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 3
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 3
- 102000003816 Interleukin-13 Human genes 0.000 description 3
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 description 3
- 102000049772 Interleukin-16 Human genes 0.000 description 3
- 101800003050 Interleukin-16 Proteins 0.000 description 3
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 3
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 3
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 3
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 3
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 3
- 102100025237 T-cell surface antigen CD2 Human genes 0.000 description 3
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 description 3
- 102100034922 T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Human genes 0.000 description 3
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 3
- QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N Tacrolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1\C=C(/C)[C@@H]1[C@H](C)[C@@H](O)CC(=O)[C@H](CC=C)/C=C(C)/C[C@H](C)C[C@H](OC)[C@H]([C@H](C[C@H]2C)OC)O[C@@]2(O)C(=O)C(=O)N2CCCC[C@H]2C(=O)O1 QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N 0.000 description 3
- 102100033523 Thy-1 membrane glycoprotein Human genes 0.000 description 3
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 3
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 3
- 102100036857 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Human genes 0.000 description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 3
- 239000000464 adrenergic agent Substances 0.000 description 3
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 3
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 3
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 3
- 229940044094 angiotensin-converting-enzyme inhibitor Drugs 0.000 description 3
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 3
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 3
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000004074 complement inhibitor Substances 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 3
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 3
- 229940073621 enbrel Drugs 0.000 description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 3
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 3
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 3
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 3
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 3
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 3
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 229940043355 kinase inhibitor Drugs 0.000 description 3
- VHOGYURTWQBHIL-UHFFFAOYSA-N leflunomide Chemical compound O1N=CC(C(=O)NC=2C=CC(=CC=2)C(F)(F)F)=C1C VHOGYURTWQBHIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960000681 leflunomide Drugs 0.000 description 3
- 229950007278 lenercept Drugs 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 239000003475 metalloproteinase inhibitor Substances 0.000 description 3
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 3
- 238000001823 molecular biology technique Methods 0.000 description 3
- RTGDFNSFWBGLEC-SYZQJQIISA-N mycophenolate mofetil Chemical compound COC1=C(C)C=2COC(=O)C=2C(O)=C1C\C=C(/C)CCC(=O)OCCN1CCOCC1 RTGDFNSFWBGLEC-SYZQJQIISA-N 0.000 description 3
- 229960004866 mycophenolate mofetil Drugs 0.000 description 3
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000003757 phosphotransferase inhibitor Substances 0.000 description 3
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 3
- 239000000296 purinergic P1 receptor antagonist Substances 0.000 description 3
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 3
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- QJJXYPPXXYFBGM-SHYZHZOCSA-N tacrolimus Natural products CO[C@H]1C[C@H](CC[C@@H]1O)C=C(C)[C@H]2OC(=O)[C@H]3CCCCN3C(=O)C(=O)[C@@]4(O)O[C@@H]([C@H](C[C@H]4C)OC)[C@@H](C[C@H](C)CC(=C[C@@H](CC=C)C(=O)C[C@H](O)[C@H]2C)C)OC QJJXYPPXXYFBGM-SHYZHZOCSA-N 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 3
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 3
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 3
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 3
- LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthine Chemical compound O=C1NC(=O)NC2=C1NC=N2 LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091007505 ADAM17 Proteins 0.000 description 2
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 2
- 206010069754 Acquired gene mutation Diseases 0.000 description 2
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 2
- 102000009840 Angiopoietins Human genes 0.000 description 2
- 108010009906 Angiopoietins Proteins 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 206010008874 Chronic Fatigue Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 2
- 102100024746 Dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 2
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 2
- 239000004606 Fillers/Extenders Substances 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 101000690301 Homo sapiens Aldo-keto reductase family 1 member C4 Proteins 0.000 description 2
- 101000868215 Homo sapiens CD40 ligand Proteins 0.000 description 2
- 101001116548 Homo sapiens Protein CBFA2T1 Proteins 0.000 description 2
- 239000003458 I kappa b kinase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 2
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 2
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 2
- 108010005716 Interferon beta-1a Proteins 0.000 description 2
- 102000019223 Interleukin-1 receptor Human genes 0.000 description 2
- 108050006617 Interleukin-1 receptor Proteins 0.000 description 2
- 101800001003 Interleukin-1 receptor type 2, soluble form Proteins 0.000 description 2
- 102400000027 Interleukin-1 receptor type 2, soluble form Human genes 0.000 description 2
- 102000003812 Interleukin-15 Human genes 0.000 description 2
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 description 2
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 239000012826 P38 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 2
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 2
- 208000031845 Pernicious anaemia Diseases 0.000 description 2
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 2
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 208000006045 Spondylarthropathies Diseases 0.000 description 2
- 201000009594 Systemic Scleroderma Diseases 0.000 description 2
- 206010042953 Systemic sclerosis Diseases 0.000 description 2
- 208000001106 Takayasu Arteritis Diseases 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 2
- 206010046851 Uveitis Diseases 0.000 description 2
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 229940127218 antiplatelet drug Drugs 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 2
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 2
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 2
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229960001714 calcium phosphate Drugs 0.000 description 2
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 229940082638 cardiac stimulant phosphodiesterase inhibitors Drugs 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- BFPSDSIWYFKGBC-UHFFFAOYSA-N chlorotrianisene Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C(Cl)=C(C=1C=CC(OC)=CC=1)C1=CC=C(OC)C=C1 BFPSDSIWYFKGBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 2
- 229940111134 coxibs Drugs 0.000 description 2
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000003255 cyclooxygenase 2 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 108020001096 dihydrofolate reductase Proteins 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 2
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 2
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 2
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000007475 hemolytic anemia Diseases 0.000 description 2
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 2
- 102000054751 human RUNX1T1 Human genes 0.000 description 2
- 102000057041 human TNF Human genes 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 description 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- KBOPZPXVLCULAV-UHFFFAOYSA-N mesalamine Chemical compound NC1=CC=C(O)C(C(O)=O)=C1 KBOPZPXVLCULAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004963 mesalazine Drugs 0.000 description 2
- 239000002829 mitogen activated protein kinase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000004001 molecular interaction Effects 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- QQBDLJCYGRGAKP-FOCLMDBBSA-N olsalazine Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(\N=N\C=2C=C(C(O)=CC=2)C(O)=O)=C1 QQBDLJCYGRGAKP-FOCLMDBBSA-N 0.000 description 2
- 229960004110 olsalazine Drugs 0.000 description 2
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 239000002571 phosphodiesterase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 239000000106 platelet aggregation inhibitor Substances 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 239000012857 radioactive material Substances 0.000 description 2
- ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N rapamycin Natural products COCC(O)C(=C/C(C)C(=O)CC(OC(=O)C1CCCCN1C(=O)C(=O)C2(O)OC(CC(OC)C(=CC=CC=CC(C)CC(C)C(=O)C)C)CCC2C)C(C)CC3CCC(O)C(C3)OC)C ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000002574 reactive arthritis Diseases 0.000 description 2
- 229940116176 remicade Drugs 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N sirolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@](O)(O2)[C@H](C)CC[C@H]2C[C@H](OC)/C(C)=C/C=C/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)C(=O)[C@H](OC)[C@H](O)/C(C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1 QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N 0.000 description 2
- 229960002930 sirolimus Drugs 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000037439 somatic mutation Effects 0.000 description 2
- 201000005671 spondyloarthropathy Diseases 0.000 description 2
- 238000012409 standard PCR amplification Methods 0.000 description 2
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 2
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 2
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 2
- ZFXYFBGIUFBOJW-UHFFFAOYSA-N theophylline Chemical compound O=C1N(C)C(=O)N(C)C2=C1NC=N2 ZFXYFBGIUFBOJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 2
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000002447 tumor necrosis factor alpha converting enzyme inhibitor Substances 0.000 description 2
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XWTYSIMOBUGWOL-UHFFFAOYSA-N (+-)-Terbutaline Chemical compound CC(C)(C)NCC(O)C1=CC(O)=CC(O)=C1 XWTYSIMOBUGWOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- SZXUTTGMFUSMCE-UHFFFAOYSA-N 2-(1h-imidazol-2-yl)pyridine Chemical class C1=CNC(C=2N=CC=CC=2)=N1 SZXUTTGMFUSMCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1H-isoindole-1,3(2H)-dione Chemical compound O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGHDLJAZIIFENW-UHFFFAOYSA-N 4-[1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-(4-hydroxy-3-prop-2-enylphenyl)propan-2-yl]-2-prop-2-enylphenol Chemical group C1=C(CC=C)C(O)=CC=C1C(C(F)(F)F)(C(F)(F)F)C1=CC=C(O)C(CC=C)=C1 QGHDLJAZIIFENW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 4-aminofolic acid Chemical compound C1=NC2=NC(N)=NC(N)=C2N=C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- NUKYPUAOHBNCPY-UHFFFAOYSA-N 4-aminopyridine Chemical compound NC1=CC=NC=C1 NUKYPUAOHBNCPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WUBBRNOQWQTFEX-UHFFFAOYSA-N 4-aminosalicylic acid Chemical compound NC1=CC=C(C(O)=O)C(O)=C1 WUBBRNOQWQTFEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CJIJXIFQYOPWTF-UHFFFAOYSA-N 7-hydroxycoumarin Natural products O1C(=O)C=CC2=CC(O)=CC=C21 CJIJXIFQYOPWTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NVOYVOBDTVTBDX-AGUVMIOSSA-N 8g15t83e6i Chemical compound C1([C@@H](CO)C(=O)OC2C[C@@H]3[N+]([C@H](C2)[C@@H]2[C@H]3O2)(C)CC)=CC=CC=C1 NVOYVOBDTVTBDX-AGUVMIOSSA-N 0.000 description 1
- 102000012440 Acetylcholinesterase Human genes 0.000 description 1
- 108010022752 Acetylcholinesterase Proteins 0.000 description 1
- 208000029483 Acquired immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000026872 Addison Disease Diseases 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 206010001889 Alveolitis Diseases 0.000 description 1
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 206010003267 Arthritis reactive Diseases 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 206010003645 Atopy Diseases 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 206010055128 Autoimmune neutropenia Diseases 0.000 description 1
- 208000031212 Autoimmune polyendocrinopathy Diseases 0.000 description 1
- 208000022106 Autoimmune polyendocrinopathy type 2 Diseases 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 235000000832 Ayote Nutrition 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 description 1
- 206010006895 Cachexia Diseases 0.000 description 1
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 1
- 206010007134 Candida infections Diseases 0.000 description 1
- 241000282461 Canis lupus Species 0.000 description 1
- 208000031229 Cardiomyopathies Diseases 0.000 description 1
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 description 1
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 241001227713 Chiron Species 0.000 description 1
- 241000606161 Chlamydia Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010008609 Cholangitis sclerosing Diseases 0.000 description 1
- 206010008909 Chronic Hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000000094 Chronic Pain Diseases 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- 240000004244 Cucurbita moschata Species 0.000 description 1
- 235000009854 Cucurbita moschata Nutrition 0.000 description 1
- 235000009804 Cucurbita pepo subsp pepo Nutrition 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 1
- 241001136239 Cymbidium hybrid cultivar Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 206010012335 Dependence Diseases 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 1
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 102400001368 Epidermal growth factor Human genes 0.000 description 1
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 1
- 101000759376 Escherichia phage Mu Tail sheath protein Proteins 0.000 description 1
- 108091029865 Exogenous DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010015943 Eye inflammation Diseases 0.000 description 1
- 108091008794 FGF receptors Proteins 0.000 description 1
- 208000007984 Female Infertility Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 208000007465 Giant cell arteritis Diseases 0.000 description 1
- 108010072051 Glatiramer Acetate Proteins 0.000 description 1
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 206010018498 Goitre Diseases 0.000 description 1
- 208000024869 Goodpasture syndrome Diseases 0.000 description 1
- 201000005569 Gout Diseases 0.000 description 1
- 206010018634 Gouty Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010072579 Granulomatosis with polyangiitis Diseases 0.000 description 1
- 208000003807 Graves Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 description 1
- 208000001204 Hashimoto Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 208000035186 Hemolytic Autoimmune Anemia Diseases 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 206010019755 Hepatitis chronic active Diseases 0.000 description 1
- 101000662009 Homo sapiens UDP-N-acetylglucosamine pyrophosphorylase Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 208000023105 Huntington disease Diseases 0.000 description 1
- 201000002980 Hyperparathyroidism Diseases 0.000 description 1
- 206010020850 Hyperthyroidism Diseases 0.000 description 1
- 208000013016 Hypoglycemia Diseases 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091069196 IL-1 family Proteins 0.000 description 1
- 102000039996 IL-1 family Human genes 0.000 description 1
- 206010021245 Idiopathic thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 1
- 108010009817 Immunoglobulin Constant Regions Proteins 0.000 description 1
- 102000009786 Immunoglobulin Constant Regions Human genes 0.000 description 1
- 206010021928 Infertility female Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 108010005714 Interferon beta-1b Proteins 0.000 description 1
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 1
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 102400000025 Interleukin-1 receptor type 1, soluble form Human genes 0.000 description 1
- 101800000542 Interleukin-1 receptor type 1, soluble form Proteins 0.000 description 1
- 108010017515 Interleukin-12 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000004557 Interleukin-18 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010017537 Interleukin-18 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 206010059176 Juvenile idiopathic arthritis Diseases 0.000 description 1
- 208000011200 Kawasaki disease Diseases 0.000 description 1
- ZCVMWBYGMWKGHF-UHFFFAOYSA-N Ketotifene Chemical compound C1CN(C)CCC1=C1C2=CC=CC=C2CC(=O)C2=C1C=CS2 ZCVMWBYGMWKGHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N L-Methionine Natural products CSCCC(N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930195722 L-methionine Natural products 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 208000012309 Linear IgA disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000867 Lipoxygenase Inhibitor Substances 0.000 description 1
- 208000016604 Lyme disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 1
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 1
- 208000007466 Male Infertility Diseases 0.000 description 1
- 102000005741 Metalloproteases Human genes 0.000 description 1
- 108010006035 Metalloproteases Proteins 0.000 description 1
- FQISKWAFAHGMGT-SGJOWKDISA-M Methylprednisolone sodium succinate Chemical compound [Na+].C([C@@]12C)=CC(=O)C=C1[C@@H](C)C[C@@H]1[C@@H]2[C@@H](O)C[C@]2(C)[C@@](O)(C(=O)COC(=O)CCC([O-])=O)CC[C@H]21 FQISKWAFAHGMGT-SGJOWKDISA-M 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 241000238367 Mya arenaria Species 0.000 description 1
- 241001045988 Neogene Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 108091008606 PDGF receptors Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 208000030852 Parasitic disease Diseases 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 229940123932 Phosphodiesterase 4 inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 description 1
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 description 1
- 102000011653 Platelet-Derived Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 229920001710 Polyorthoester Polymers 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 206010057244 Post viral fatigue syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102100033237 Pro-epidermal growth factor Human genes 0.000 description 1
- 201000001263 Psoriatic Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 description 1
- 206010064911 Pulmonary arterial hypertension Diseases 0.000 description 1
- 206010037549 Purpura Diseases 0.000 description 1
- 241001672981 Purpura Species 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 238000010240 RT-PCR analysis Methods 0.000 description 1
- 208000032056 Radiation Fibrosis Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010067953 Radiation fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 230000010799 Receptor Interactions Effects 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000033464 Reiter syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108020005091 Replication Origin Proteins 0.000 description 1
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 206010053879 Sepsis syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 206010051379 Systemic Inflammatory Response Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102000043168 TGF-beta family Human genes 0.000 description 1
- 108091085018 TGF-beta family Proteins 0.000 description 1
- 108091005735 TGF-beta receptors Proteins 0.000 description 1
- 206010044248 Toxic shock syndrome Diseases 0.000 description 1
- 231100000650 Toxic shock syndrome Toxicity 0.000 description 1
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 1
- 102100037921 UDP-N-acetylglucosamine pyrophosphorylase Human genes 0.000 description 1
- 108091008605 VEGF receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 206010047642 Vitiligo Diseases 0.000 description 1
- 241000607734 Yersinia <bacteria> Species 0.000 description 1
- 239000003070 absorption delaying agent Substances 0.000 description 1
- 229940022698 acetylcholinesterase Drugs 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 208000005298 acute pain Diseases 0.000 description 1
- 208000018254 acute transverse myelitis Diseases 0.000 description 1
- NDAUXUAQIAJITI-UHFFFAOYSA-N albuterol Chemical compound CC(C)(C)NCC(O)C1=CC=C(O)C(CO)=C1 NDAUXUAQIAJITI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000360 alopecia Toxicity 0.000 description 1
- 208000004631 alopecia areata Diseases 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 229960003556 aminophylline Drugs 0.000 description 1
- FQPFAHBPWDRTLU-UHFFFAOYSA-N aminophylline Chemical compound NCCN.O=C1N(C)C(=O)N(C)C2=C1NC=N2.O=C1N(C)C(=O)N(C)C2=C1NC=N2 FQPFAHBPWDRTLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003896 aminopterin Drugs 0.000 description 1
- 229940113720 aminosalicylate Drugs 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000702 anti-platelet effect Effects 0.000 description 1
- 230000009830 antibody antigen interaction Effects 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 201000000448 autoimmune hemolytic anemia Diseases 0.000 description 1
- 201000009780 autoimmune polyendocrine syndrome type 2 Diseases 0.000 description 1
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 description 1
- 201000003710 autoimmune thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 1
- 208000010928 autoimmune thyroid disease Diseases 0.000 description 1
- 201000004982 autoimmune uveitis Diseases 0.000 description 1
- 229940003504 avonex Drugs 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- WGNZRLMOMHJUSP-UHFFFAOYSA-N benzotriazol-1-yloxy(tripyrrolidin-1-yl)phosphanium Chemical compound C1CCCN1[P+](N1CCCC1)(N1CCCC1)ON1C2=CC=CC=C2N=N1 WGNZRLMOMHJUSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000014974 beta2-adrenergic receptor activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040006828 beta2-adrenergic receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 229940021459 betaseron Drugs 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 229920000249 biocompatible polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 1
- DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N but-3-enoic acid;ethene Chemical compound C=C.OC(=O)CC=C DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000003984 candidiasis Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 208000015114 central nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 229960003115 certolizumab pegol Drugs 0.000 description 1
- 238000010382 chemical cross-linking Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 208000025302 chronic primary adrenal insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 1
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012411 cloning technique Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 208000018631 connective tissue disease Diseases 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229940038717 copaxone Drugs 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- IMZMKUWMOSJXDT-UHFFFAOYSA-N cromoglycic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)=CC(=O)C2=C1C=CC=C2OCC(O)COC1=CC=CC2=C1C(=O)C=C(C(O)=O)O2 IMZMKUWMOSJXDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000012926 crystallographic analysis Methods 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 230000000779 depleting effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 239000003602 elastase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 1
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 1
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000005038 ethylene vinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000001400 expression cloning Methods 0.000 description 1
- 201000001155 extrinsic allergic alveolitis Diseases 0.000 description 1
- 229960004979 fampridine Drugs 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 230000003176 fibrotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N furosemide Chemical compound C1=C(Cl)C(S(=O)(=O)N)=CC(C(O)=O)=C1NCC1=CC=CO1 ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000001476 gene delivery Methods 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 201000003872 goiter Diseases 0.000 description 1
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 229940040731 human interleukin-12 Drugs 0.000 description 1
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 208000022098 hypersensitivity pneumonitis Diseases 0.000 description 1
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 229940124452 immunizing agent Drugs 0.000 description 1
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000005462 in vivo assay Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 229960004461 interferon beta-1a Drugs 0.000 description 1
- 229960001388 interferon-beta Drugs 0.000 description 1
- 102000009634 interleukin-1 receptor antagonist activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040001669 interleukin-1 receptor antagonist activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 229940074383 interleukin-11 Drugs 0.000 description 1
- 102000044166 interleukin-18 binding protein Human genes 0.000 description 1
- 108010070145 interleukin-18 binding protein Proteins 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 229940008228 intravenous immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- OEXHQOGQTVQTAT-JRNQLAHRSA-N ipratropium Chemical compound O([C@H]1C[C@H]2CC[C@@H](C1)[N@@+]2(C)C(C)C)C(=O)C(CO)C1=CC=CC=C1 OEXHQOGQTVQTAT-JRNQLAHRSA-N 0.000 description 1
- 229960001888 ipratropium Drugs 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 201000002215 juvenile rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 229960004958 ketotifen Drugs 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 201000002364 leukopenia Diseases 0.000 description 1
- 231100001022 leukopenia Toxicity 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000001638 lipofection Methods 0.000 description 1
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N luminol Chemical compound O=C1NNC(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 1
- 229960004584 methylprednisolone Drugs 0.000 description 1
- VAOCPAMSLUNLGC-UHFFFAOYSA-N metronidazole Chemical compound CC1=NC=C([N+]([O-])=O)N1CCO VAOCPAMSLUNLGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000282 metronidazole Drugs 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 238000000302 molecular modelling Methods 0.000 description 1
- 230000000921 morphogenic effect Effects 0.000 description 1
- 208000001725 mucocutaneous lymph node syndrome Diseases 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 230000003387 muscular Effects 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 208000029766 myalgic encephalomeyelitis/chronic fatigue syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- ZTLGJPIZUOVDMT-UHFFFAOYSA-N n,n-dichlorotriazin-4-amine Chemical compound ClN(Cl)C1=CC=NN=N1 ZTLGJPIZUOVDMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 101150091879 neo gene Proteins 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 239000007935 oral tablet Substances 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000007310 pathophysiology Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 102000007863 pattern recognition receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010089193 pattern recognition receptors Proteins 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000001151 peptidyl group Chemical group 0.000 description 1
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 239000002587 phosphodiesterase IV inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 description 1
- 229920002704 polyhistidine Polymers 0.000 description 1
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 208000005987 polymyositis Diseases 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 1
- 231100000683 possible toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 201000000742 primary sclerosing cholangitis Diseases 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 230000001185 psoriatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001147 pulmonary artery Anatomy 0.000 description 1
- 235000015136 pumpkin Nutrition 0.000 description 1
- 230000001950 radioprotection Effects 0.000 description 1
- 238000002708 random mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000012340 reverse transcriptase PCR Methods 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 229960002052 salbutamol Drugs 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 201000000980 schizophrenia Diseases 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 208000010157 sclerosing cholangitis Diseases 0.000 description 1
- 230000002784 sclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940074404 sodium succinate Drugs 0.000 description 1
- ZDQYSKICYIVCPN-UHFFFAOYSA-L sodium succinate (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)CCC([O-])=O ZDQYSKICYIVCPN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- VIDRYROWYFWGSY-UHFFFAOYSA-N sotalol hydrochloride Chemical compound Cl.CC(C)NCC(O)C1=CC=C(NS(C)(=O)=O)C=C1 VIDRYROWYFWGSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 230000002889 sympathetic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 description 1
- 201000004595 synovitis Diseases 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 206010043207 temporal arteritis Diseases 0.000 description 1
- 229960000195 terbutaline Drugs 0.000 description 1
- 229960003433 thalidomide Drugs 0.000 description 1
- 229960000278 theophylline Drugs 0.000 description 1
- RZWIIPASKMUIAC-VQTJNVASSA-N thromboxane Chemical compound CCCCCCCC[C@H]1OCCC[C@@H]1CCCCCCC RZWIIPASKMUIAC-VQTJNVASSA-N 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 206010043778 thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- XFYDIVBRZNQMJC-UHFFFAOYSA-N tizanidine Chemical compound ClC=1C=CC2=NSN=C2C=1NC1=NCCN1 XFYDIVBRZNQMJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000488 tizanidine Drugs 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 208000009174 transverse myelitis Diseases 0.000 description 1
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940046728 tumor necrosis factor alpha inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000002451 tumor necrosis factor inhibitor Substances 0.000 description 1
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 1
- 229940121358 tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000005483 tyrosine kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 150000004917 tyrosine kinase inhibitor derivatives Chemical class 0.000 description 1
- ORHBXUUXSCNDEV-UHFFFAOYSA-N umbelliferone Chemical compound C1=CC(=O)OC2=CC(O)=CC=C21 ORHBXUUXSCNDEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HFTAFOQKODTIJY-UHFFFAOYSA-N umbelliferone Natural products Cc1cc2C=CC(=O)Oc2cc1OCC=CC(C)(C)O HFTAFOQKODTIJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 235000012431 wafers Nutrition 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
- 229940075420 xanthine Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
- C07K16/244—Interleukins [IL]
- C07K16/245—IL-1
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6845—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a cytokine, e.g. growth factors, VEGF, TNF, a lymphokine or an interferon
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/54—Interleukins [IL]
- C07K14/545—IL-1
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
- C07K16/468—Immunoglobulins having two or more different antigen binding sites, e.g. multifunctional antibodies
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6863—Cytokines, i.e. immune system proteins modifying a biological response such as cell growth proliferation or differentiation, e.g. TNF, CNF, GM-CSF, lymphotoxin, MIF or their receptors
- G01N33/6869—Interleukin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
Abstract
본 발명은 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 항원에 대한 이중 특이성을 갖는 항체를 제공한다. 항체는 예를 들면, 전체 사람 항체, 재조합 항체, 또는 모노클로날 항체일 수 있다. 바람직한 항체는 IL-1α 및 IL-1β에 대한 이중 특이성을 가지며, 시험관내 및 생체내에서 IL-1α 및 IL-1β 활성을 중화시킨다. 본 발명의 항체는 전체 길이 항체 또는 이의 항원-결합 부분일 수 있다. 본 발명의 항체를 제조하는 방법 및 이를 사용하는 방법이 또한 제공된다. 본 발명의 항체, 또는 항체 일부분은 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 항원(예를 들면, IL-1α 및 IL-1β)을 검출하고, (예를 들면, IL-1α 및/또는 IL-1β 활성이 유해한 질병으로 고통받는 사람 환자에서) 상기 항원의 활성을 억제하는데 유용하다.
Description
포유동물 면역계는 전체적으로, 수천억개의 상이한 항체 특이성으로 이루어진 항체 레퍼토리를 발현하는 B 임파구를 포함한다. 특정 항원에 대한 정상적인 면역 반응은 상기 항원에 특이적으로 결합하는 하나 이상의 항체의 상기 레퍼토리로부터의 선택과 관련되며, 면역 반응의 성공은 적어도 부분적으로는, 항체 환경내 자극성 항원을 특이적으로 인식(및 궁극적으로는 제거)하고 다른 분자들은 "무시"하는 이러한 항체들의 능력에 기초한다.
하나의 특정 표적 항원을 특이적으로 인식하는 항체의 유용성은 모노클로날 항체 기술의 개발을 초래하였다. 표준 하이브리도마 기술은 현재, 관심 대상의 항원에 대한 단일 특이성을 갖는 항체의 제조를 가능하게 한다. 보다 최근에, 재조합 항체 기술, 예를 들면, 시험관내 항체 라이브러리의 스크리닝 기술이 개발되었다. 이들 기술들은 또한 관심 대상의 항원에 대한 단일 특이성을 갖는 항체의 제조를 가능하게 한다.
단일 표적 항원에 대한 특이성을 갖는 항체는 적어도 특정 환경하에서는, 바람직하지 않은 교차-반응성 또는 다른 항원에 대한 배경값 결합을 나타낸다. 그러나, 이러한 교차-반응성 또는 배경값 결합은 일반적으로 예견할 수 없는 것(즉, 항체가 어떤 항원과 교차-반응할 것인지를 예측하는 것은 불가능하다)이다. 또한, 이는 전형적으로 항체의 결합 능력의 극히 일부분(예를 들면, 전체 항체 결합의 1% 이하)만을 나타내며 전형적으로 고농도 항체(예를 들면, 특이적인 항원 결합을 관찰하는데 필요한 것 보다 1000배 이상의 농도)에서만 관찰되기 때문에, 이는 일반적으로 특이적 항원 결합과는 구분된다. 단백질의 구조적으로 관련된 패밀리에 속할 수 있는 수 개의 항원들이 존재하지만, 특정 패밀리 구성원에 대한 항체 반응은 매우 특이적이다. 또한, 동일한 수용체, 수용체 성분 또는 구조적으로 관련된 수용체에 결합하는 단백질 패밀리 구성원(예를 들면, IL-1 및 TNF 패밀리의 구성원들)의 수 개의 예들이 존재하지만, 상기 패밀리의 하나의 구성원에 대해서 생성된 모노클로날 항체는 다른 패밀리 구성원들에 대해서 높은 교차 반응성을 나타내지 않는다. 다양한 패밀리 구성원에 대한 MAb의 교차 반응성의 이러한 결여에는 두 가지 이유가 존재할 수 있다. 첫번째, 표준 하이브리도마 생산에서, 표적 항원에 대한 고특이성/고친화도의 단지 소수의 항체만을 찾아낸 후, 수 개의 선택된 항체의 교차 반응성 또는 배경값 결합을 체크한다는 것이다. 두번째, 패밀리내 단백질들이 구조적으로 관련된다 할지라도, 이들은 배제적이고, 비중복성의 면역우세 에피토프를 가질 수 있다는 것이다. 따라서, 전체 길이 단백질을 사용하여 생성된 MAb는 다른 구조적으로 관련된 단백질과 교차 반응하지 않을 수 있다.
또한, 다른 종내 동일한 기능성 항원에 특이적으로 결합하는 특정 종의 항원에 대해 생성된 모노클로날 항체의 예가 있다. 예를 들면, 항-마우스 X 항체는 사람으로부터의 항원 X에 용이하게 결합할 수 있다. 이는, 이들이 동일하지는 않더라도 상당한 서열 및 구조적 유사성을 공유하기 때문이다. 그러나, 상기 종-교차 반응성 항체는 "이중 특이성" 항체를 구성하지는 않으며, 이들이 상이한 종으로부터의 동일한 항원에 대해서 특이성을 갖기 때문이다.
따라서, 예견가능한 이중 또는 다중 특이성을 갖는 모노클로날 항체, 즉 두 개 이상의 상이한 항원에 대한 진정한 특이성을 갖는 항체가 여전히 요구된다.
본 발명의 요약
본 발명은 두 개 이상의 구조적으로 관련되지만 상이한 항원들에 대한 이중 특이성을 갖는 항체를 제조하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 일반적으로, 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자들의 공통적인 구조 특성을 포함하는 항원을 제공하는 단계; 항체 레퍼토리를 상기 항원에 노출시키는 단계; 및 상기 항체 레퍼토리로부터 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자에 특이적으로 결합하는 항체를 선택하여 이중 특이성 항체를 수득하는 단계와 관련된다. 임상적 환경에서, 동일한 단백질 패밀리의 수 개의 구성원들이 질환 진행의 다양한 징후에 관여할 수 있다. 따라서, 동일한 단백질 패밀리의 구성원들에 결합하는 본 발명의 이중 특이성 항체를 사용하여 단백질 패밀리의 하나 이상의 구성원들의 기능을 차단하는 것은 질환 징후를 경감시키거나 상기 질환 진행 자체를 방해하는데 유익할 수 있다. 또한, 본 발명의 이중 특이성 항체는 구조적으로 관련된 항원을 검출하고, 구조적으로 관련된 항원을 정제하며, 구조적으로 관련된 항원과 관련된 진단 분석법에서유용하다.
바람직한 구체적인 양태에서, 항원은 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자 사이에서 동일성의 연속적인 위상학적 영역에 기초하여 디자인된다. 예를 들면, 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자는 단백질일 수 있으며 항원은 두 개의 단백질 사이에서 동일성의 연속적인 위상학적 영역의 아미노산 서열을 포함하는 펩타이드일 수 있다.
또 다른 구체적인 양태에서, 항원은 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자의 공통적인 폴드(fold)의 루프를 구조적으로 모사하는데 기초하여 디자인된다. 예를 들면, 항원은 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 단백질의 공통적인 폴드의 루프를 구조적으로 모사하는 사이클릭 펩타이드일 수 있다.
또 다른 구체적인 양태에서, 항원은 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자의 교호성 및/또는 중복성 부분을 함께 스플라이싱하는데 기초하여 디자인된다. 예를 들면, 항원은 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 단백질의 교호성 및/또는 중복성 아미노산 서열을 함께 스플라이싱시켜 제조된 하이브리드 펩타이드일 수 있다.
또 다른 구체적인 양태에서, 항원은 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자 중 하나를 포함할 수 있으며, 상기 방법은 관련된 분자 둘 모두를 특이적으로 인식하는 항체를 선택하는 것과 관련된다.
본 발명의 방법에서, 항체 레퍼토리는 생체내에서 또는 시험관내에서 관심 대상의 항원에 노출시킬 수 있다. 예를 들면, 한 가지 구체적인 양태에서, 항원에대한 상기 레퍼토리들의 노출은 항원으로 동물을 생체내 면역화시키는 것과 관련된다. 이러한 생체내 접근법은 추가로, 동물의 임파구로부터 일단의 하이브리도마를 제조하고, 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자에 특이적으로 결합하는 항체를 분비하는 하이브리도마를 선택하는 것과 관련될 수 있다. 면역화되는 동물은 예를 들면, 마우스, 랫트, 토끼, 또는 염소, 또는 전술한 동물 중 하나의 유전자이식된(trangenic) 형태, 예를 들면, 사람 면역글로불린 유전자를 유전자이식시킨 마우스일 수 있으며, 결과적으로 상기 마우스는 항원성 자극이 있는 경우 사람 항체를 제조하게 된다. 면역화시킬 수 있는 또 다른 유형의 동물은 사람 말초 혈액 단핵구 세포(hu-PBMC-SCID 키메라 마우스) 또는 림프계 세포, 또는 이의 전구 세포로 재구성된 중증 복합 면역결핍성(SCID)을 갖는 마우스, 및 치명적인 전신 조사로 처리하고, 중증 복합 면역결핍성(SCID) 마우스의 골수 세포로 방사능보호시킨 후, 기능성 사람 임파구를 생착시킨 마우스(트라이머라 시스템(trimera system))를 포함한다. 면역화시킬 수 있는 또 다른 유형의 동물은 이의 게놈이 관심 대상의 항원(들)을 암호화하는 내인성 유전자(들)에 대해서 "녹-아웃"되어, 관심 대상의 항원(들)로 면역화되는 경우, KO 동물이 상기 항원(들)을 외인성으로 인식하게 되는 동물(예를 들면, 마우스)이다.
또 다른 구체적인 양태에서, 항체 레퍼토리는 항원을 사용하여 재조합 항체 라이브러리를 스크리닝함으로써 시험관내에서 항원에 노출시킨다. 재조합 항체 라이브러리는 예를 들면, 박테리오파아지의 표면, 효모 세포의 표면, 또는 세균 세포의 표면 상에서 발현될 수 있다. 다양한 구체적인 양태에서, 재조합 항체 라이브러리는 예를 들면, scFv 라이브러리 또는 Fab 라이브러리이다. 또 다른 구체적인 양태에서, 항체 레퍼토리는 RNA-단백질 융합체로서 발현된다.
이중 특이성 항체를 제조하는 또 다른 접근법은 항원으로 동물을 생체내 면역화시켜 항원에 대해 항체 레퍼토리를 노출시킨 후, 항원으로 동물의 림프계 세포로부터 제조된 재조합 항체 라이브러리를 시험관내 스크리닝시키는 것과 같은 생체내 및 시험관내 접근법의 병용과 관련된다. 또 다른 접근법은 항원으로 동물을 생체내 면역화시켜 항원에 대해 항체 레퍼토리를 노출시킨 후, 동물의 림프계 세포로부터 제조된 재조합 항체 라이브러리를 시험관내 친화도 성숙시키는 것과 관련된다. 또 다른 접근법은 항원으로 동물을 생체내 면역화시켜 항원에 대해 항체 레퍼토리를 노출시킨 후, 관심 대상의 항체를 분비하는 단일 항체 생산 세포를 선택하고 이러한 선택된 세포로부터 중쇄 및 경쇄 가변 영역 cDNA를 (예를 들면, PCR에 의해) 회수하며, 시험관내에서 포유동물 숙주 세포내에서 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 발현시켜(선택된 임파구 항체 방법, SLAM으로 인용됨), 선택 항체 유전자 서열의 추가의 선택 및 조작을 가능하게 하는 것과 관련된다. 또한, 추가로, 모노클로날 항체는 포유동물에서 중쇄 및 경쇄 항체 유전자를 발현시키고 필수적인 결합 특이성을 갖는 항체를 분비하는 포유동물 세포를 선택함으로써 발현 클로닝으로 선택할 수 있다.
본 발명의 방법은 전체 사람 항체, 키메라 항체 및 CDR-이식된 항체, 및 이의 항원-결합 부분을 포함하는, 다양한 상이한 유형의 이중 특이성 항체를 제조하는 것을 가능하게 한다. 본 발명의 방법에 따라서 제조된 이중 특이성 항체가 또한 제공된다. 본 발명의 바람직한 이중 특이성 항체는 인터류킨-1α 및 인터류킨-1β에 특이적으로 결합하는 것들이다. 상기 이중 특이성 항체는 IL-1α 또는 IL-1β를 이중-특이성 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 접촉시켜, IL-1α 또는 IL-1β를 검출함을 포함하여, IL-1α 또는 IL-1β를 검출하는 방법에서 사용할 수 있다. 중화 이중 특이성 항체는 또한, IL-1α 또는 IL-1β를 이중-특이성 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 접촉시켜, IL-1α 또는 IL-1β의 활성을 억제시킴을 포함하여, IL-1α 또는 IL-1β 활성을 억제하는 방법에서 사용할 수 있다. 상기 이중 특이성 항체는 또한, 인터류킨-1-관련된 질병으로 고통받는 환자에게 이중-특이성 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 투여함을 포함하여, 인터류킨-1-관련된 질병을 치료하는 방법에서 사용할 수 있다.
또 다른 구체적인 양태에서, 본 발명은, a) 제1 항원에 노출시켜 생성된 항체 레퍼토리로부터 재조합 중쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 A를 수득하는 단계; b) 제1 항원에 노출시켜 생성된 항체 레퍼토리로부터 재조합 경쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 B를 수득하는 단계; c) 제2 항원에 노출시켜 생성된 항체 레퍼토리로부터 재조합 중쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 C를 수득하는 단계; d) 제2 항원에 노출시켜 생성된 항체 레퍼토리로부터 재조합 경쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 D를 수득하는 단계; 및 e) 재조합 중쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 A를 재조합 경쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 D와 혼합하여 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 X를 수득하고/하거나 재조합 중쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 C를 재조합 경쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 B와 혼합하여 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 Y를 수득하는 단계를 수행함으로써, 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리를 제조하는 방법을 제공한다.
본 발명의 또 다른 구체적인 양태에서, 본 발명의 바로 위에서 전술한 방법은, 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 X를 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 Y와 혼합하여 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 Z를 수득하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
추가의 구체적인 양태에서, 본 발명은 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 X, Y 및 Z에 대한 것이다.
또 다른 구체적인 양태에서, 본 발명의 방법은 라이브러리 X, Y 및/또는 Z로부터 제1 및 제2 항원 모두에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 선택함으로써 이중 특이성 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 확인하는 것이 가능하다.
추가의 구체적인 양태에서, 본 발명은 본 발명의 방법 중 하나로 제조되고/되거나 선택된 이중 특이적 항체에 관한 것이다.
또 다른 구체적인 양태에서, 본 발명은 또한, 라이브러리 X, Y 및 Z의 항체 또는 이의 항원 결합 부분의 각각의 구성원을 암호화하는 뉴클레오타이드 서열, 항체 또는 이의 항원 결합 부분, 전술한 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 벡터, 및 전술한 벡터로 형질감염된 숙주 세포에 관한 것이다.
바람직한 구체적인 양태에서, 제1 및 제2 항원은 단백질, 폴리펩타이드 및 펩타이드로 이루어진 그룹으로부터 각각 독립적으로 선택되며, 단, 제1 및 제2 항원은 동일하지는 않다. 추가의 구체적인 양태에서, 단백질, 폴리펩타이드 및 펩타이드는 분비된 단백질 또는 표면 수용체이며, 분비된 단백질은 IFN, TNF, 인터류킨, IP-10, PF4, GRO, 9E3, EMAP-II, CSF, FGF 및 PDGF로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구체적인 양태에서, 제1 항원은 IL-1α이고 제2 항원은 IL-1β이다.
본 발명은 이중 특이성 항체, 즉 두 개 이상의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자에 대한 특이성을 갖는 항체 생산을 위한 항원의 디자인 및 사용, 뿐만 아니라 상기 이중 특이성 항체의 선택, 제조 및 사용에 관한 것이다. 본 발명의 항원의 구조적 관련성은 전체 항원(예를 들면, 단백질)에 대해서 또는 특정 구조적으로 관련된 영역에 대해서만 존재할 수 있다. 본 발명은 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자에 특이적으로 결합하는 이중-특이성 항체를 수득하는 방법을 제공하며, 이때, 상기 방법은 두 개 이상의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자의 공통적인 구조 특성을 포함하는 항원을 제공하는 단계, 상기 항원에 항체 레퍼토리를 노출시키는 단계, 및 상기 항체 레퍼토리로부터 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자에 특이적으로 결합하는 항체를 선택하여 이중 특이성 항체를 수득하는 단계와 관련된다.
본 발명은 본원에서 두 개의 상이하지만 관련된 항원의 인식 측면에서 기술되지만, 용어 "이중 특이성 항체"는 세 개, 네 개, 다섯 개 이상의 구조적으로 관련되지만 상이한 항원을 인식하는 항체 같은 두 개 이상의 상이하지만 관련된 항원을 특이적으로 인식하는 항체를 포함하는 것으로 의도된다는 것을 주지해야만 한다. 추가로, 용어 "상이하지만 구조적으로 관련된 항원"은, 전체 구조가 관련된 항원(예를 들면, 단백질) 뿐만 아니라 하나 이상의 구조적으로 관련된 영역을 공유하지만 그밖에는 비관련된 항원(예를 들면, 단백질)을 포함하는 것으로 의도된다. 따라서, "상이하지만 구조적으로 관련된" 항원은 예를 들면, 공통적인 전체 구조를 갖는 동일 단백질 패밀리의 구성원인 두 개의 단백질일 수 있거나, 예를 들면, 전체 구조가 유사하지 않지만(비관련되지만) 구조적으로 관련된 도메인을 각각 함유하는 두 개의 단백질일 수 있다.
하기 소부분에서 추가로 상세히 논의되는 바와 같이, 다양한 유형의 항원을 사용하여 본 발명의 항체를 유도할 수 있으며, 항체를 제조하는 다양한 방법을 사용하여 본 발명의 이중 특이성 항체를 수득할 수 있다.
I. 이중 특이성 항원
본 발명의 이중 특이성 항체를 제조하기 위해서, 항체는 이중 특이성 항체를 유도할 수 있는 항원에 대해서 생성된다. 상기 항원은 일반적으로 본원에서 이중 특이성 항원으로 인용된다. 다양한 상이한 유형의 이중 특이성 항원이 본 발명에서 사용될 수 있으며 다양한 유형의 이중 특이성 항원의 디자인은 하기 소부분에서 추가로 기술된다.
A. 연속적인 위상학적 영역
한 가지 구체적인 양태에서, 본 발명의 이중 특이성 항원은 이중 특이성 항체가 생성되는, 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자 사이에서 동일성 및/또는 유사성의 연속적인 위상학적 영역을 포함한다. 바람직하게는, 항원은 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자 사이에서 동일성 및/또는 유사성의 최대의(예를 들면, 최장의) 연속적인 위상학적 영역을 포함한다. 바람직하게는, 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자는 단백질이며, 이중 특이성 항원은 두 개의 단백질 사이에서 동일성 및/또는 유사성의 최대의(예를 들면, 최장의) 연속적인 위상학적 영역에 상응하는 선형 펩타이드를 포함한다. 선택되는 동일성/유사성의 적합한 영역은 바람직하게는 수용체 또는 리간드 결합 영역이지만, 동일성/유사성의 다른 영역이 또한 사용될 수 있다.
두 개의 분자(예를 들면, 단백질) 사이에서 동일성의 연속적인 위상학적 영역을 측정하기 위해서, 두 개의 분자(예를 들면, 단백질)를 비교(예를 들면, 상동성 모델링, 구조적 정보) 또는 배열하고, 동일한 또는 유사한 영역을 확인한다. 단백질의 경우, 배열 알고리듬을 사용하여 최적 배열을 생성시키고 두 개의 단백질 사이에서 동일성 및/또는 유사성의 최대의(예를 들면, 최장의) 연속적인 위상학적 영역을 확인할 수 있다. 두 개의 서열의 비교를 위해 사용되는 수학적 알고리듬의 바람직한, 비제한적인 예는 문헌[Karlin and Altschul (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 5873-77]에서와 같이 변형된, 문헌[Karlin and Altschul (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87: 2264-68]의 알고리듬이다. 상기 알고리듬은문헌[Altschul, et al. (1990) J. Mol. Biol. 215: 403-10]의 NBLAST 및 XBLAST 프로그램에 도입된다. 비교를 위한 갭화된 배열을 수득하기 위해서, 갭화된(Gapped) BLAST를 문헌[Altschul et al., (1997) Nucleic Acids Research 25(17): 3389-3402]에 기술된 바와 같이 사용할 수 있다. BLAST 및 갭화된 BLAST 프로그램을 사용하는 경우, 각각의 프로그램(예를 들면, XBLAST 및 NBLAST)의 디폴트 변수를 사용할 수 있다. 인터넷 사이트(http://www.ncbi.nlm.nih.gov)를 참조한다. 사용할 수 있는 대안적인 수학적 알고리듬은 문헌[Myers and Miller (1988) Comput. Appl. Biosci. 4: 11-17]에 기술된 ALIGN 프로그램에서 사용되는 것이다.
동일성/유사성의 적합한 영역이 선택되는 경우, 상기 영역에 상응하는 이중 특이성 항원은 화학적으로 합성할 수 있다. 예를 들면, 펩타이드 항원의 경우, 펩타이드는 표준 펩타이드 합성 방법에 의해 합성할 수 있다. 한 가지 구체적인 양태에서, 펩타이드 항원은 L-아미노산을 포함한다. 또 다른 구체적인 양태에서, 펩타이드 항원은 부분적으로 또는 전체적으로 D-아미노산으로 이루어질 수 있다. 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 단백질 사이에서 동일성 및/또는 유사성의 연속적인 위상학적 영역에 기초하는 이중 특이성 항원의 디자인 예는 실시예 1에서 상세히 기술된다.
B. 구조적 루프를 모사하는 사이클릭 펩타이드
또 다른 구체적인 양태에서, 본 발명의 이중 특이성 항원은 이중 특이성 항체가 생성되는, 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자(예를 들면, 단백질)의공통적인 폴드(fold)의 주요 루프를 구조적으로 모사하는 사이클릭 분자, 바람직하게는 사이클릭 펩타이드를 포함한다. 이러한 유형의 항원을 제조하기 위해서, 두 개의 관련된 분자의 구조를 비교하고 두 분자내에서 발견된 공통적인 폴드의 루프를 확인한다. 표준 분자 모델링 및 결정학적 분석을 사용하여 상기 루프 및 공통 폴드의 확인을 보조할 수 있다. 동일한 및 유사한 영역(예를 들면, 두 개의 단백질 사이의 아미노산 서열)을 확인하고 컨센서스 서열을 유사하지만 동일하지는 않은 영역에 대해서 디자인할 수 있다. 선형 분자, 예를 들면, 선형 펩타이드는 이들의 유사하고 동일한 영역에 기초하여 디자인하며, 이러한 선형 분자는 공지된 화학적 수단으로 폐환시켜 주요 루프를 모사하는 항원을 생성시킬 수 있다. 예를 들면, 프롤린 및 글리신을 선형 펩타이드의 말단에 부가하여 펩타이드의 폐환화를 가능하게 할 수 있다. 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 단백질에 의해 공유되는 구조적 루프를 모사하는 사이클릭 펩타이드에 기초한 이중 특이성 항원의 디자인 예는 실시예 2에서 상세히 기술된다.
C. 하이브리드 분자
또 다른 구체적인 양태에서, 본 발명의 이중 특이성 항원은 이중 특이성 항체가 생성되는, 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자(예를 들면, 단백질)의 교호성 및/또는 중복성 영역을 포함하는 하이브리드 분자, 바람직하게는 하이브리드 펩타이드를 포함한다. 이러한 유형의 항원을 제조하기 위해서, 두 개의 분자의 구조를 비교하고, 두 개의 분자 사이에서 중복성 영역(즉, 동일성 영역) 뿐만 아니라 비동일성 영역을 확인한다. 바람직하게는, 두 개의 분자 각각으로부터의 교호성 영역(예를 들면, 아미노산 서열) 뿐만 아니라 두 분자 모두에서 공통적인 중복성 영역을 포함하는 하이브리드 분자(예를 들면, 두 개의 관련된 분자가 단백질인 경우, 하이브리드 펩타이드)를 제조한다. 도식적으로, 상기 하이브리드 분자는 X-Y-Z(이때, Y는 두 개의 관련된 분자 사이에서 동일한 또는 매우 유사한 영역(즉, 중복성 영역)을 나타내고, X는 관련된 분자 중 하나로부터의 영역을 나타내며, Z는 관련된 분자의 다른 하나로부터의 영역을 나타낸다)로서 기술될 수 있다. 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 단백질의 서열들로 이루어진 하이브리드 펩타이드에 기초한 이중 특이성 항원의 디자인 예는 실시예 3에서 상세히 기술된다.
또 다른 유형의 하이브리드 분자는 펩타이드가 전체 길이 단백질("표적" 단백질로 인용됨)내로 도입되는 분자이다. 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 단백질의 기능성 영역, 예를 들면, 수용체 상호작용 영역을 나타내는 펩타이드를 선택한다. 상기 펩타이드는 본원에서 기능성 펩타이드로 인용된다. 이후, 관련된 단백질 중 하나로부터의 기능성 펩타이드를 다른 관련된 단백질 또는 선택적으로, 비관련된 단백질의 전체 단백질 내로 도입시킨다. 예를 들면, IL-1α의 수용체 상호작용 영역에 상응하는 IL-1α의 펩타이드를 확인하고 IL-1α의 이러한 기능성 펩타이드를 전체 길이 IL-1β 단백질내로 도입하여 하이브리드 IL-1α/IL-1β 분자를 생성시킨다. 유사하게, IL-1β의 수용체 상호작용 영역에 상응하는 IL-1β의 펩타이드를 확인하고 IL-1β의 이러한 기능성 펩타이드를 전체 길이 IL-1α 단백질내로 도입하여 하이브리드 IL-1α/IL-1β 분자를 생성시킨다. 기능성 펩타이드의 관련된 전체 길이 단백질내로의 이러한 도입은 양 말단에서 기능성 펩타이드를 도입하여 기능성 펩타이드의 폴드-구조를 유지하게 한다.
IL-1α/IL-1β 하이브리드의 경우, 기능성 펩타이드는 바람직하게는, IL-1α및 IL-1β의 공통적인 폴드 구조를 나타내는 표적 영역내로 삽입된다(천연 아미노산을 대체한다). 상기 영역은 단백질의 전체 길이 상에서 확인될 수 있다(예를 들면, N-말단 영역에서, 단백질의 중간 영역에서, C 말단 영역에서). 추가로, 공통적인 IL-1α/IL-1β폴드 구조를 나타내는 기능성 펩타이드는 또한, 알부민 또는 특정 다른 천연 단백질 같은 무관한 단백질내로 삽입시킬 수 있다. 이러한 예에서, 펩타이드에 대한 바람직한 삽입 부위는 펩타이드가 목적하는 폴드 구조를 유지하게 하는 영역이다. 따라서, 삽입 부위는 단백질의 N-말단, 중간, C-말단 중 하나일 수 있다. 임의의 천연 표적 단백질내 펩타이드의 위치화는 유도된 천연 단백질에 의해 펩타이드 상에 위치된 구조적 제한을 모사하도록 선택된다. 기능성 펩타이드는 표적 단백질에 단순히 삽입되어 기능성 펩타이드의 아미노산이 표적 단백질에 부가될 수 있는 반면, 바람직하게는 기능성 펩타이드의 아미노산은 이를 삽입시키는 표적 단백질의 일부를 대체한다.
비제한적인 예로서, 하이브리드 분자는 IL-1α및 IL-1β에 대한 이중 특이성 항체를 생산하기 위한 이중 특이성 항원으로 사용하기 위해서 작제되며, 이때, IL-1α또는 IL-1β중 하나의 특정 구조적 요소에 상응하는 기능성 펩타이드는 등가의 구조적 위치내에서 전체 길이 IL-1β또는 IL-1α내로 도입된다. 선택된 하이브리드 분자는 IL-1β의 잔기 160 내지 176번을 IL-1α의 잔기 168 내지 184번으로 대체한다. 수득되는 분자는 하기 아미노산 서열을 가지며, 이때 치환된 IL-1α 서열(잔기 168 내지 184번)은 밑줄 표시한다:
APVRSLNCTLRDSQQKSLVMSGPYELKALHLQGQDMEQQVVFS MGAYKSSKDDAKITVIL GLKEKNLYLSCVLKDDKPTLQLESVDPKNYPKKKMEKRFVFNKIEINNKLEFESAQFPNWYISTSQAENMPVFLGGTKGGQDITDFTMQFVSS (서열 번호 4).
상기 분자는 공개적으로 이용가능한 IL-1α및 IL-1βcDNA 서열을 사용한 표준 분자생물학 기술(예를 들면, 클로닝, 폴리머라제 연쇄 반응) 및 재조합 단백질 발현 기술을 사용하여 제조할 수 있다. 하이브리드 cDNA를 제조하고, 적합한 발현 벡터내로 도입할 수 있으며, 폴리펩타이드는 적합한 숙주 세포내로 발현 벡터를 도입시킴으로써 발현시킬 수 있다.
D. 소수성 플롯에 기초한 펩타이드
또 다른 구체적인 양태에서, 본 발명의 이중 특이성 항원은 고도로 항원성인 것으로 예견되는 펩타이드를 선택하기 위한 소수성 플롯에 기초하여 선택된다. 예를 들면, 펩타이드의 항원 지수는 문헌[Jameson and Wolf, CABIOS, 4(1), 181-186 (1988)]에 기술된 바와 같은 컴퓨터 소프트웨어를 사용하여 계산할 수 있다. 항체 결합을 위한 관심 대상 영역을 선택하여 항원성의 가능성을 최대화시킬 수 있다.
E. 항원-형질감염된 세포를 사용한 면역화
또 다른 구체적인 양태에서, 본 발명의 이중 특이성 항체는 항원-형질감염된세포(즉, 본 발명의 이중 특이성 항원이 항원-형질감염된 세포일 수 있다)를 사용한 면역화에 의해 제조된다. 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 항원 또는 이의 하이브리드 분자를 안정하게 발현하는 세포주를 생성시킬 수 있다. 예를 들면, IL-1α또는 IL-1β, 또는 IL-1α/IL-1β 하이브리드 분자(예를 들면, 서열 번호 4)를 안정하게 발현하는 세포주를 생성시킬 수 있다. 관심 대상의 분자를 세포로부터 분비시킬 수 있거나(가용성 단백질의 경우), 세포 표면 상에서 발현시킬 수 있다(수용체, 효소의 경우). 숙주 세포에 의한 항원의 발현을 가능하게 하는 숙주 세포내로의 유전자 전달은 형질감염법, 전기천공법, 세포 융합법, 리포펙션법, 입자 충격법, 미세주입법 또는 바이러스 감염을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는 수 많은 통상적인 방법으로 달성할 수 있다. 이후, 관심 대상의 항원을 발현하는 세포주는 항체 생산을 위해서 관심 대상의 동물에게 하나 이상의 다양한 경로(복막내, 경피, 근육내 등)를 통해서 이식될 수 있다. 이후, 상기 세포는 관심 대상의 항원의 서방성 공급원으로서 작용한다. 바람직하게는, 상기 세포는 전체 길이 단백질을 발현한다. 그러나, 항원성 단편이 또한 발현될 수 있다. 가용성 단백질의 경우, 상기 단백질은 바람직하게는 세포에 의해서 분비된다. 두 개의 밀접하게 관련된 수용체의 세포외 도메인에 대한 이중 특이성 항체를 생산하기 위해서, 상기 수용체들을 바람직하게는 세포 표면 상에서 발현시킨다.
F. 구조적으로 관련된 분자 중 하나를 사용한 면역화
또 다른 구체적인 양태에서, 이중 특이성 항원은 단순히, 이중 특이성 항체가 생성되는, 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자들 중 하나일 수 있다. 두 개의 관련된 분자 중 하나를 면역화제로 사용하고 수득된 항체 레퍼토리를 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자 둘 모두에 결합하고, 보다 바람직하게는 이를 중화시키는 항체에 대하여 스크리닝한다. 예를 들면, IL-1α또는 IL-1β를 사용하여 면역화시킨 후, α/β 결합제에 대해, 보다 바람직하게는 중화제에 대해서 스크리닝할 수 있다. 상기 구체적인 양태에서 사용되는 바와 같이, 용어 "면역화하다"는 생체내 또는 시험관내에서 IL-1α또는 IL-1β 같은 항원에 항체 레퍼토리를 노출시키는 것을 포괄적으로 포함하는 것을 의미한다. 따라서, 상기 구체적인 양태는 IL-1α또는 IL-1β로 동물을 면역화시키고, 수득되는 항체들을 IL-1α 및 IL-1β 모두에 결합하는 항체를 선택하기 위해서 스크리닝하는 것을 포함할 뿐만 아니라, IL-1α 또는 IL-1β중 하나를 사용하여 시험관내에서 재조합 항체 라이브러리를 스크리닝한 후 IL-1α및 IL-1β 모두에 결합하는 재조합 항체를 선택하는 것을 포함한다.
II. 이중 특이성 항체의 제조 방법
본 발명의 이중 특이성 항체를 제조하기 위해서, 항체 레퍼토리(생체내 또는시험관내에서)를 이전 부분 I에서 기술된 바와 같이, 이중 특이성 항원에 노출시키고 적합한 이중 특이성 항체를 레퍼토리로부터 선택한다. 항원에 대한 항체 인식의 두 가지 요소는 구조적 인식 및 특정 분자 상호작용에 기초하는 친화도 성숙이다. 천연 면역 반응 동안, 구조적 모티프를 인식(예를 들면, 특정 패턴 인식 수용체에 의한 항원의 인식)하는 낮은 친화도 항체는 용이하게 생성되며, 천연 면역 반응의 초기에, 수 개의 클론에 대한 친화도를 증가시키기 위한 체세포 변이가 뒤따른다. 다양한 생체내 및 시험관내 과정이 이러한 천연 현상을 모사하기 위해서 개발되어져 왔다. 낮은 친화도 이중 특이성 항체는 본원에 기술된 생체내 및 시험관내 방법 중 하나에 의해서 생성될 수 있으며, 보다 높은 친화도의 이중 특이성 MAb는 본원에 기술된 체세포 돌연변이유발 방법으로 제조할 수 있다. 또한, 높은 친화도의 이중 특이성 Mab를 최적화하기 위해서, 낮은 친화도 MAb와 목적하는 항원의 공-결정 구조를 제조할 수 있다. 수득된 구조적 정보는 본원에 기술된 바와 같이, 특정 분자 상호작용을 증강시키기 위하여 MAb의 특정 접촉 잔기를 변형(변이)시킴으로써 추가의 친화도 증강을 유도할 수 있다.
생체내 접근법, 시험관내 접근법 또는 이 둘의 배합 방법을 사용한 이중 특이성 항체의 제조 방법은 하기 부분 I에서 추가로 상세히 기술된다.
A. 생체내 접근법
항체를 제조하기 위한 표준 생체내 접근법은 적합한 동물 환자를 항원으로 면역화시켜 생체내 항체 레퍼토리를 항원에 노출시킨 후, 동물로부터 관심 대상의 항체 또는 항체들을 회수하는 것이다. 상기 접근법은 이중 특이성 항원을 사용한 이중 특이성 항체의 제조 및 관심 대상의 두 개의 구조적으로 관련된 분자를 특이적으로 인식하는 항체의 선택에 적용시킬 수 있다. 이중 특이성 항체는 적합한 환자(예를 들면, 토끼, 염소, 마우스 또는 다른 포유동물, 및 상기 포유동물의 유전자이식된 형태 및 녹아웃 형태를 포함)를 이중 특이성 항원의 면역원성 제제로 면역화시킴으로써 제조할 수 있다. 적합한 면역원성 제제는 예를 들면, 화학적으로 합성되거나 재조합적으로 발현된 이중 특이성 항원을 함유할 수 있다. 상기 제제는 프로인트 완전 또는 불완전 보조제, 또는 유사한 면역자극성 화합물 같은 애주번트를 추가로 포함할 수 있다. 또한, 항체를 생성하기 위해서 사용하는 경우, 특히 생체내 면역화에 의해서 항체를 생성하는 경우, 본 발명의 이중 특이성 항원은 단독으로 사용될 수 있으며, 보다 바람직하게는 담체 단백질과의 접합체로서 사용될 수 있다. 항체 반응을 증강시키기 위한 상기 접근법은 당해 분야에 잘 공지되어져 있다. 이중 특이성 항원이 접합될 수 있는 적합한 담체 단백질의 예는 키홀 림펫 헤모시아닌(KLH) 및 알부민을 포함한다.
항체 생산 세포는 환자로부터 수득하여 문헌[Kohler and Milstein (1975, Nature 256: 495-497), 또한 참조: Brown et al. (1981) J. Immunol 127: 539-46; Brown et al. (1980) J Biol Chem 255: 4980-83; Yeh et al. (1976) PNAS 76: 2927-31; and Yeh et al. (1982) Int J. Cancer 29: 269-75]에 최초로 기술된 하이브리도마 기술 같은 표준 기술로 모노클로날 항체를 제조하는데 사용할 수 있다. 모노클로날 항체 하이브리도마를 생산하는 기술은 잘 공지되어져 있다[일반적으로 참조: R.H. Kenneth, Monoclonal Antibodies: A New Dimension In Biological Analyses, Plenum Publishing Corp., New York, New York (1980); E.A. Lerner (1981) Yale J. Biol. Med., 54: 387-402; M.L. Gefter et al. (1977) Somatic Cell Genet., 3: 231-36]. 간략하면, 불멸 세포주(전형적으로는 골수종)를 상기기술된 바와 같은 이중 특이성 면역원으로 면역화시킨 포유동물로부터의 임파구(전형적으로 비장세포 또는 림프절 세포 또는 말초 혈액 임파구)에 융합시키고, 수득된 하이브리도마 세포의 배양 상등액을 스크리닝하여 관심 대상의 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자에 대한 이중 특이성을 갖는 모노클로날 항체를 생산하는 하이브리도마를 확인한다. 임파구 및 불멸화된 세포주를 융합시키는데 사용되는 수 많은 잘 공지된 프로토콜 중 하나를 이중 특이성 모노클로날 항체를 생산하는데 적용시킬 수 있다[예를 들면, 참조: G. Galfre et al. (1977) Nature 266: 550-52; Gefter et al. Somatic Cell Genet., 상기 인용됨; Lerner, Yale J. Biol. Med., 상기 인용됨; Kenneth, Monoclonal Antibodies, 상기 인용됨]. 또한, 통상적인 숙련자는 또한 유용할 수 있는 상기 방법들의 수 많은 변형들이 존재한다는 것을 이해할 것이다. 전형적으로, 불멸 세포주(예를 들면, 골수종 세포주)를 임파구와 동일한 포유동물 종으로부터 유도한다. 예를 들면, 쥐의 하이브리도마는 본 발명의 면역원성 제제로 면역화시킨 마우스로부터의 임파구를 불멸화된 마우스 세포주와 융합시켜 제조할 수 있다. 바람직한 불멸화 세포주는 하이포크산틴, 아미노프테린 및 티미딘을 함유하는 배양 배지("HAT 배지")에 감수성인 마우스 골수종 세포주이다. 수 많은 골수종 세포주, 예를 들면, P3-NS1/1-Ag4-1, P3-x63-Ag8.653 또는 Sp2/O-Ag14 골수종 세포주 중 하나를 표준 기술에 따라서 융합 상대로 사용할 수 있다. 이러한 골수종 세포주는 ATCC(American Type Culture Collection, Rockville, MD)로부터 이용가능하다. 전형적으로, HAT-감수성 마우스 골수종 세포를 폴리에틸렌 글리콜("PEG")을 사용하여 마우스 비장 세포에 융합시킨다. 이후,융합으로부터 수득되는 하이브리도마 세포는 융합되지 않고 비생산적으로 융합된 골수종 세포를 사멸시키는(비융합된 비장 세포는 이들이 형질전환되지 않았기 때문에 수 일내에 사멸한다) HAT 배지를 사용하여 선택한다. 관심 대상의 두 개의 구조적으로 관련된 분자를 특이적으로 인식하는 모노클로날 항체를 생산하는 하이브리도마 세포는 예를 들면, 표준 ELISA 분석법을 사용하여 상기 항체에 대해여 하이브리도마 배양 상등액을 스크리닝하여, 두 개의 관련된 분자에 특이적으로 결합할 수 있는 항체를 선택함으로써 확인한다.
목적하는 항체 유형에 따라서, 다양한 동물 숙주를 생체내 면역화에 사용할 수 있다. 관심 대상의 항원(들)의 내인성 형태(version)를 스스로 발현하는 숙주를 사용할 수 있거나, 대안으로, 관심 대상의 항원(들)의 내인성 형태에 결함에 생긴 숙주를 사용할 수 있다. 예를 들면, 상응하는 내인성 유전자에서 상동성 재조합을 통해 특정 내인성 단백질에 대해 결함성인 마우스(즉, "녹아웃" 마우스)는 이를 사용하여 면역화시키는 경우 상기 단백질에 대해서 체액성 반응을 나타내며 따라서, 상기 단백질에 대한 고친화도 모노클로날 항체의 생산에 사용할 수 있는 것으로 나타났다[예를 들면, 참조: Roes, J. et al. (1995) J. Immunol. Methods 183: 231-237; Lunn, M.P. et al. (2000) J. Neurochem. 75: 404-412].
비-사람 항체(예를 들면, 사람 이중 특이성 항원에 대한)의 제조를 위해서, 다양한 비-사람 포유동물이 항체 생산을 위한 숙주로서 적합하며, 이는 마우스, 랫트, 토끼 및 염소(및 이의 녹아웃 형태)를 포함하지만 이에 제한되지는 않으며, 마우스가 하이브리도마 생산에 바람직하다. 추가로, 사람 이중 특이성 항원에 대한전체 사람 항체의 생산을 위해서, 사람 항체 레퍼토리를 발현하는 숙주 비-사람 동물을 사용할 수 있다. 상기 비-사람 동물은 사람 면역글로불린 이식 유전자를 갖는 유전자이식된 동물(예를 들면, 마우스), hu-PBMC-SCID 키메라 마우스, 및 사람/마우스 조사 키메라를 포함하며, 이들 각각은 하기에 추가로 논의된다.
따라서, 한 가지 구체적인 양태에서, 이중 특이성 항원으로 면역화시킨 동물은 사람 면역글로불린 유전자로 이식되어 비-사람 포유동물(예를 들면, 마우스)이 항원성 자극시 사람 항체를 생산하는 비-사람 포유동물, 바람직하게는 마우스이다. 상기 동물에서, 전형적으로, 사람 배주 형태의 중쇄 및 경쇄 면역글로불린 이식 유전자가 유전자조작된 동물내로 도입되어, 이의 내인성 중쇄 및 경쇄 좌위가 불활성화된다. 상기 동물에 대한 항원성 자극시(예를 들면, 사람 항원을 사용한), 사람 면역글로불린 서열로부터 유도된 항체(즉,사람 항체)가 생산되며, 사람 모노클로날 항체가 표준 하이브리도마 기술에 의해서 상기 동물의 임파구로부터 제조될 수 있다. 사람 면역글로불린 유전자이식된 마우스 및 사람 항체의 생산에서의 이의 사용에 대한 추가의 기술은 예를 들면, 문헌[미국 특허 제5,939,598호, PCT 공개공보 WO 제96/33735호, PCT 공개공보 WO 제96/34096호, PCT 공개공보 WO 제98/24893호 및 PCT 공개공보 WO 제99/53049호(Abgenix Inc.에 허여됨), 및 미국 특허 제5,545,806호, 제5,569,825호, 제5,625,126호, 제5,633,425호, 제5,661,016호, 제5,770,429호, 제5,814,318호, 제5,877,397호, 및 PCT 공개공보 WO 제99/45962호(Genpharm Inc.에 허여됨); 또한 문헌 참조: MacQuitty, J.J. and Kay, R.M. (1992) Sciences 257: 1188; Taylor, L.D. et al. (1992) Nucleic AcidsRes. 20: 6287-6295; Lonberg, N. et al. (1994) Nature 368: 856-859; Lonberg, N. and Huszar, D. (1995) Int. Rev. Immunol. 13: 65-93; Harding, F.A. and Lonberg, N. (1995) Ann. N.Y. Acad. Sci. 764: 536-546; Fishwild, D.M. et al. (1996) Nature Biotechnology 14: 845-851; Mendez, M.J. et al. (1997) Nature Genetics 15: 146-156; Green, L.L. and Jakobovits, A. (1998) J. Exp. Med. 188: 483-495; Green, L.L. (1999) J. Immunol. Methods 231: 11-23; Yang, X.D. et al. (1999) J. Leukoc. Biol. 66: 401-410; Galo, M.L. et al. (2000) Eur. J. Immunol. 30: 534-540]을 참조한다.
또 다른 구체적인 양태에서, 이중 특이성 항원으로 면역화시킨 동물은 사람 말초 혈액 단핵구 세포 또는 림프계 세포 또는 이의 전구 세포로 재구성한 중증 복합 면역결핍증(SCID)을 갖는 마우스이다. hu-PBMC-SCID 키메라 마우스로 명명된 상기 마우스는 항원성 자극시 사람 면역글로불린 반응을 생성하는 것으로 입증되었다. 상기 마우스 및 항체 생산에서의 이의 사용에 대한 추가의 기술에 대해서는 문헌[예를 들면, 참조: Leader, K.A. et al. (1992) Immunology 76: 229-234; Bombil, F. et al. (1996) Immunobiol. 195: 360-375; Murphy, W.J. et a. (1996) Semin. Immunol. 8: 233-241; Herz, U. et al. (1997) Int. Arch. Allergy Immunol. 113: 150-152; Albert, S.E. et al. (1997) J. Immunol. 159: 1393-1403; Nguyen, H. et al. (1997) Microbiol. Immunol. 41: 901-907; Arai, K. et al. (1998) J. Immunol. Methods 217: 79-85; Yoshinari, K. and Arai, K. (1998) Hybridoma 17: 41-45; Hutchins, W.A. et al. (1999) Hybridoma 18: 121-129;Murphy, W.J. et al. (1999) Clin. Immunol. 90: 22-27; Smithson, S.L. et al. (1999) Mol. Immunol. 36: 113-124; Chamat, S. et al. (1999) J. Infect. Diseases 180: 268-277; and Heard, C. et al. (1999) Molec. Med. 5: 35-45]을 참조한다.
또 다른 구체적인 양태에서, 이중 특이성 항원으로 면역화시킨 동물은 치명적인 전신 조사로 처리한 후 중증 복합 면역결핍증(SCID) 마우스의 골수 세포로 방사선보호시킨 후, 기능성 사람 임파구를 생착시킨 마우스이다. 트라이머라 시스템으로 명명된 이러한 유형의 키메라를 사용하여, 마우스를 관심 대상의 항원으로 면역화시킨 후 표준 하이브리도마 기술을 사용하여 모노클로날 항체를 제조함으로써, 사람 모노클로날 항체를 생산해 왔다. 상기 마우스 및 항체 생산에서 이의 사용에 대한 추가의 기술을 위해서는, 예를 들면, 문헌[Eren, R. et al. (1998) Immunology 93: 154-161; Reisner, Y and Dagan, S. (1998) Trends Biotechnol. 16: 242-246; Ilan, E. et al. (1999) Hepatology 29: 553-562; and Bocher, W.O. et al. (1999) Immunology 96: 634-641]을 참조한다.
B. 시험관내 접근법
생체내 면역화 및 선택에 의해 이중 특이성 항체를 제조하는 대안으로, 본 발명의 이중 특이성 항체는 이중 특이성 항원으로 재조합 조합 면역글로불린 라이브러리(예를 들면, 항체 파아지 디스플레이 라이브러리)를 스크리닝하여 관심 대상의 두 개의 구조적으로 관련되지만 상이한 분자에 특이적으로 결합하는 면역글로불린 라이브러리 구성원을 분리함으로써 동정하고 분리할 수 있다. 파아지 디스플레이 라이브러리를 생성하고 스크리닝하기 위한 키트는 시판중이다(예를 들면, Pharmacia Recombinant Phage Antibody System, Catalog No. 27-9400-01; Stratagene SurfZAPTMPhage Display Kit, Catalog No. 240612). 다양한 구체적인 양태에서, 파아지 디스플레이 라이브러리는 scFv 라이브러리 또는 Fab 라이브러리이다. 재조합 항체 라이브러리를 스크리닝하기 위한 파아지 디스플레이 기술은 당해 분야에 광범위하게 기술되어져 있다. 항체 디스플레이 라이브러리를 생성하고 스크리닝하는데 특히 유용한 방법 및 화합물의 예는 예를 들면, 문헌[McCafferty et al., 국제공개공보 WO 제92/01047호, 미국 특허 제5,969,108호 및 EP 제589,877호(특히, scFv의 디스플레이에 대해서 기술함); Ladner et al., 미국 특허 제5,223,409호, 제5,403,484호, 제5,571,698호, 제5,837,500호 및 EP 제436,597호(예를 들면, pIII 융합을 기술함); Doweret al., 국제공개공보 WO 제91/17271호, 미국 특허 제5,427,908호, 미국 특허 제5,580,717호 및 EP 제527,839호(특히, Fab의 디스플레이에 대해서 기술함); Winter et al., 국제공개공보 WO 제92/20791호 및 EP 제368,684호(특히, 면역글로불린 가변 도메인 서열의 클로닝을 기술함); Griffiths et al., 미국 특허 제5,885,793호 및 EP 제589,877호(특히, 재조합 라이브러리를 사용한 사람 항원에 대한 사람 항체의 분리를 기술함); Garrard et al., 국제공개공보 WO 제92/09690호(특히, 파아지 발현 기술을 기술함); Knappik et al., 국제공개공보 WO 제97/08320호(사람 재조합 항체 라이브러리 Hucal을기술함); Salfeld et al., 국제공개공보 WO 제97/29131호(사람 항원(사람 종양 괴사 인자 알파)에 대한 재조합 사람 항체의 제조 뿐만 아니라 재조합 항체의 시험관내 친화도 성숙을 기술함); 및 Salfeld et al., 미국 가출원 제60/126,603호(또한, 사람 항원(사람 인터류킨-12)에 대한 재조합 사람 항체의 제조 뿐만 아니라 재조합 항체의 시험관내 친화도 성숙을 기술함]에서 확인할 수 있다.
재조합 항체 라이브러리 스크리닝에 대한 다른 기술은 문헌[Fuchs et al. (1991) Bio/Technology 9: 1370-1372; Hay et al. (1992) Hum Antibod Hybridomas 3: 81-85; Huse et al. (1989) Science 246: 1275-1281; Griffiths et al. (1993) EMBO J 12: 725-734; Hawkins et al. (1992) J Mol Biol 226: 889-896; Clarkson et al. (1991) Nature 352: 624-628; Gram et al. (1992) PNAS 89: 3576-3580; Garrad et al. (1991) Bio/Technology 9: 1373-1377; Hoogenboom et al. (1991) Nuc Acid Res 19: 4133-4137; Barbas et al. (1991) PNAS 88: 7978-7982; McCafferty et al. Nature (1990) 348: 552-554; and Knappik et al. (2000) J. Mol. Biol. 296: 57-86] 같은 과학 간행물에서 확인할 수 있다.
박테리오파아지 디스플레이 시스템의 사용에 대한 대안으로, 재조합 항체 라이브러리를 효모 세포 또는 세균 세포의 표면 상에서 발현시킬 수 있다. 효모 세포의 표면 상에서 발현된 라이브러리의 제조 및 스크리닝 방법은 추가로 문헌[PCT 공개공보 WO 제99/36569호]에 기술되어져 있다. 세균 세포 표면 상에서 발현된 라이브러리의 제조 및 스크리닝 방법은 문헌[PCT 공개공보 WO 제98/49286호]에 추가로 기술되어져 있다.
일단, 관심 대상의 항체가 조합 라이브러리로부터 확인되는 경우, 항체의 경쇄 및 중쇄를 암호화하는 DNA를 라이브러리 스크리닝 과정 동안 분리된 디스플레이 팩키지(예를 들면, 파아지)로부터의 DNA의 PCR 증폭에 의한 것과 같은, 표준 분자생물학 기술로 분리한다. 이로부터 PCR 프라이머를 제조할 수 있는 항체 경쇄 및 중쇄 유전자의 뉴클레오타이드 서열은 당해 분야에 공지되어져 있다. 예를 들면, 수 많은 상기 서열들이 문헌[Kabat, E.A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242] 및 "Vbase" 사람 배주 서열 데이터베이스에서 기술되어져 있다.
본 발명의 항체 또는 항체 일부분은 숙주 세포에서 면역글로불린 경쇄 및 중쇄 유전자의 재조합 발현에 의해서 제조할 수 있다. 항체를 재조합적으로 발현시키기 위해서, 숙주 세포를 항체의 면역글로불린 경쇄 및 중쇄를 암호화하는 DNA 단편을 갖는 하나 이상의 재조합 발현 벡터로 형질감염시켜, 경쇄 및 중쇄가 숙주 세포에서 발현되게 하고, 바람직하게는 숙주 세포를 배양하는 배지내로 분비되게 하며, 배지로부터 항체를 회수할 수 있다. 문헌[Sambrook, Fritsch and Maniatis (eds), Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Second Edition, Cold Spring Harbor, N.Y., (1989), Ausubel, F.M. et al. (eds) Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates, (1989) and U.S. Patent No. 4,816,397 by Boss et al.]에 기술된 바와 같이, 표준 재조합 DNA 방법을 사용하여 항체 중쇄 및 경쇄 유전자를 수득하고, 이들 유전자를 재조합 발현 벡터내로 도입한 후 상기 벡터를 숙주 세포내로 도입시킬 수 있다.
일단 관심 대상의 항체의 VH 및 VL 절편을 암호화하는 DNA 단편이 수득되면, 이러한 DNA 단편들은 추가로, 표준 재조합 DNA 기술에 의해 추가로 조작되어 다양한 가변 영역 유전자들이 전체 길이 항체 쇄 유전자, Fab 단편 유전자 또는 scFv 유전자로 전환될 수 있다. 이러한 조작에서, VL- 또는 VH-암호화 DNA 단편을 항체 불변 영역 또는 유연한 링커 같은 또 다른 단백질을 암호화하는 또 다른 DNA 단편에 작동적으로 결합된다. 본원 내용에서 사용되는 바와 같이, 용어 "작동적으로 결합된"은 두 개의 DNA 단편이 결합되어 상기 두 개의 DNA 단편에 의해 암호화되는 아미노산 서열이 프레임내에 유지되는 것을 의미한다.
VH 영역을 암호화하는 분리된 DNA는 VH-암호화 DNA를 중쇄 불변 영역(CH1, CH2 및 CH3)을 암호화하는 또 다른 DNA 분자에 작동적으로 결합시켜 전체 길이 중쇄 유전자로 전환시킬 수 있다. 사람 중쇄 불변 영역 유전자의 서열은 당해 분야에 공지되어져 있으며[예를 들면, 참조: Kabat, E.A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242], 상기 영역을 포함하는 DNA 단편은 표준 PCR 증폭에 의해서 수득할 수 있다. 중쇄 불변 영역은 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM 또는 IgD 불변 영역일 수 있으며, 가장 바람직하게는 IgG1 또는 IgG4 불변 영역이다. Fab 단편 중쇄 유전자의 경우, VH-암호화 DNA는 중쇄 CH1 불변 영역만을 암호화하는 또 다른 DNA 분자에 작동적으로 결합될 수 있다.
VL 영역을 암호화하는 분리된 DNA는 VL-암호화 DNA를 경쇄 불변 영역 CL을 암호화하는 또 다른 DNA 분자에 작동적으로 결합시켜 전체 경쇄 유전자(뿐만 아니라 Fab 경쇄 유전자)로 전환시킬 수 있다. 사람 경쇄 불변 영역 유전자의 서열은 당해 분야에 공지되어져 있으며[예를 들면, 참조: Kabat, E.A. et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242], 이러한 영역을 포함하는 DNA 단편들은 표준 PCR 증폭에 의해서 수득할 수 있다. 경쇄 불변 영역은 카파 또는 람다 불변 영역일 수 있지만, 가장 바람직하게는 카파 불변 영역이다.
scFv 유전자를 생성시키기 위해서, VH- 및 VL-암호화 DNA 단편들은 유연한 링커를 암호화하는, 예를 들면, 아미노산 서열(Gly4-Ser)3을 암호화하는 또 다른 단편에 작동적으로 결합시켜, VH 및 VL 서열은 유연한 링커에 의해 결합된 VL 및 VH 영역을 갖는, 연속적인 일본쇄 단백질로서 발현시킬 수 있다[예를 들면, 참조: Bird et al. (1988) Science 242: 423-426; Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 5879-5883; McCafferty et al., Nature (1990) 348: 552-554].
본 발명의 재조합 항체 또는 항체 일부분을 발현시키기 위해서, 상기 기술된 바와 같이 수득된, 부분적인 또는 전체 경쇄 및 중쇄를 암호화하는 DNA를 발현 벡터내로 삽입시켜, 유전자가 전사 또는 해독 조절 서열에 작동적으로 결합되도록 한다. 이러한 내용에서, 용어 "작동적으로 결합된"은 항체 유전자가 벡터에 결합되어, 벡터내 전사 및 해독 조절 서열이 항체 유전자의 전사 및 해독을 조절하는 이의 의도된 기능을 수행하는 것을 의미한다. 발현 벡터 및 발현 조절 서열은 사용되는 발현 숙주 세포와 화합성인 것을 선택한다. 항체 경쇄 유전자 및 항체 중쇄 유전자를 개별적인 벡터에 삽입시킬 수 있거나, 보다 전형적으로는, 두 개의 유전자 모두를 동일한 발현 벡터내로 삽입시킨다. 항체 유전자를 표준 방법으로 발현 벡터내로 삽입시킨다(예를 들면, 항체 유전자 단편 및 벡터 상의 상보적인 제한 부위의 결합, 또는 제한 부위가 존재하지 않는 경우 평활말단 결합). 경쇄 또는 중쇄 서열의 삽입에 앞서, 발현 벡터는 이미 항체 불변 영역 서열을 가질 수 있다. 예를 들면, VH 및 VL 서열을 전체 길이 항체 유전자로 전환시키는 한 가지 접근법은 이들을 이미 중쇄 불변 및 경쇄 불변 영역을 각각 암호화하는 발현 벡터내로 삽입하여, VH 절편이 벡터내에서 CH 절편에 작동적으로 결합되게 하고 VL 절편이 벡터내에서 CL 절편에 작동적으로 결합되게 하는 것이다. 부가적으로 또는 선택적으로, 재조합 발현 벡터는 숙주 세포로부터 항체 쇄의 분비를 촉진시키는 시그날 펩타이드를 암호화할 수 있다. 항체 쇄 유전자는 벡터내로 클로닝하여 시그날 펩타이드가 항체 쇄 유전자의 아미노 말단에 프레임내에서 결합되게 할 수 있다. 시그날 펩타이드는 면역글로불린 시그날 펩타이드 또는 이종성 시그날 펩타이드(즉, 비-면역글로불린 단백질로부터의 시그날 펩타이드)일 수 있다.
항체 쇄 유전자 이외에, 본 발명의 재조합 발현 벡터는 숙주 세포내에서 항체 쇄 유전자의 발현을 조절하는 조절성 서열을 갖는다. 용어 "조절성 서열"은 항체 쇄 유전자의 전사 또는 해독을 조절하는 프로모터, 인핸서 및 다른 발현 조절요소(예를 들면, 폴리아데닐화 시그날)을 포함하는 것으로 의도된다. 상기 조절성 서열은 예를 들면, 문헌[Goeddel; Gene Expression Technology: Methods in Enzymology 185, Academic Press, San Diego, CA (1990)]에 기술되어져 있다. 조절성 서열의 선택을 포함하는 발현 벡터의 디자인은 형질전환시키고자 하는 숙주 세포의 선택, 목적하는 단백질의 발현 수준 등과 같은 인자들에 따라 결정될 수 있음을 당업자는 숙지할 것이다. 포유동물 숙주 세포 발현을 위한 바람직한 조절성 서열은 포유동물에서 고수준의 단백질 발현을 지시하는 바이러스 인자들, 예를 들면, 사이토메갈로바이러스(CMV)(CMV 프로모터/인핸서), 원숭이 바이러스 40(SV40)(SV40프로모터/인핸서), 아데노바이러스(예를 들면, 아데노바이러스 주요 후기 프로모터(AdMLP)) 및 폴리오마로부터 유도된 프로모터/인핸서를 포함한다. 바이러스성 조절 요소 및 이의 서열에 대한 추가의 기술에 대해서는, 예를 들면, 문헌[미국 특허 제5,168,062호, Stinski에 허여됨; 미국 특허 제4,510,245호, Bell 등에게 허여됨; 및 미국 특허 제4,968,615호, Schaffner 등에게 허여됨]을 참조한다.
항체 쇄 유전자 및 조절성 서열 이외에, 본 발명의 재조합 발현 벡터는 숙주 세포에서 복제를 조절하는 서열(예를 들면, 복제 오리진) 및 선택가능한 마커 유전자 같은 부가적인 서열을 가질 수 있다. 선택가능한 마커 유전자는 벡터가 도입되는 숙주 세포의 선택을 촉진시킨다[예를 들면, 참조: 미국 특허 제4,399,216호, 제4,634,665호 및 제5,179,017호, 모두 Axel 등에 허여됨]. 예를 들면, 전형적으로, 선택가능한 마커 유전자는 벡터를 도입시킨 숙주 세포 상에서 G418, 하이그로마이신 또는 메토트렉세이트 같은 약제에 대한 내성을 부여한다. 바람직한 선택가능한 마커 유전자는 디하이드로폴레이트 리덕타제(DHFR) 유전자(메토트렉세이트 선택/증폭으로 dhfr-숙주 세포에서 사용함) 및 neo 유전자(G418 선택용)를 포함한다.
경쇄 및 중쇄의 발현을 위해서, 중쇄 및 경쇄를 암호화하는 발현 벡터(들)을 표준 기술로 숙주 세포내로 형질감염시킨다. 다양한 형태의 용어 "형질감염"은 외인성 DNA를 원핵생물 또는 진핵생물 숙주 세포내로 도입하기 위해 사용된 광범위하게 다양한 기술, 예를 들면, 전기천공법, 칼슘-포스페이트 침전법, DEAE-덱스트란 형질감엽법 등을 포함하는 것으로 의도된다. 이론적으로, 원핵생물 또는 진핵생물 숙주 세포에서 본 발명의 항체를 발현시키기는 것이 가능하지만, 진핵생물 세포에서의 항체 발현, 및 가장 바람직하게는 포유동물 숙주 세포에서의 항체 발현이 가장 바람직하며, 상기 진핵생물 세포, 및 특히 포유동물 세포는 원핵생물 세포에 비해 적합하게 폴딩되고 면역학적으로 활성인 항체를 보다 더 잘 조립하고 분비하기 때문이다. 항체 유전자의 원핵생물 분비는 활성 항체의 고수율 생산에 비효과적인 것으로 보고되어져 왔다[Boss, M.A. and Wood, C.R. (1985) Immunology Today 6: 12-13].
본 발명의 재조합 항체를 발현하는 바람직한 포유동물 숙주 세포는 중국산 햄스터 난소(CHO 세포)[문헌(Urlaub and Chasin, (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 4216-4220)에 기술되고, 예를 들면, 다음 문헌(R.J. Kaufman and P.A. Sharp (1982) Mol. Biol. 159: 601-621)에 기술된 바와 같은 DHFR 선택가능한 마커를 사용하는, dhfr-CHO 세포 포함], NSO 골수종 세포, COS 세포 및 SP2 세포를 포함한다. 항체 유전자를 암호화하는 재조합 발현 벡터가 포유동물 숙주 세포내로 도입되는 경우, 항체는, 숙주 세포내에서 항체가 발현되거나 보다 바람직하게는 숙주 세포가 성장하는 배양 배지내로 항체가 분비되기에 충분한 시간 동안 숙주 세포를 배양시킴으로써 생산된다. 항체는 표준 단백질 정제 방법을 사용하여 배양 배지로부터 회수할 수 있다.
숙주 세포는 또한, Fab 단편 또는 scFv 분자 같은 완전한 항체의 일부를 생산하는데 사용할 수 있다. 상기 과정상의 변형들이 본 발명의 범위내에 속한다는 것을 이해할 것이다. 예를 들면, 본 발명의 항체의 경쇄 또는 중쇄(둘 모두는 아님)를 암호화하는 DNA로 숙주 세포를 형질감염시키는 것이 바람직할 것이다. 재조합 DNA 기술을 또한 사용하여, 관심 대상의 항원에 대한 결합에 불필요한 경쇄 및 중쇄 중 하나 또는 둘 모두를 암호화하는 DNA 중 일부 또는 모두를 제거할 수 있다. 상기 말단절단된 DNA 분자로부터 발현된 분자는 또한, 본 발명의 항체에 포함된다. 또한, 본 발명의 항체를 표준 화학적 교차결합 방법으로 제2 항체에 교차결합시킴으로써, 하나의 중쇄 및 하나의 경쇄는 본 발명의 항체이고 다른 중쇄 및 경쇄는 관심 대상의 항원이 아닌 다른 항원에 특이적인 이기능성 항체가 생산될 수 있다.
본 발명의 항체, 또는 이의 항원 결합 부분의 재조합 발현을 위한 바람직한 시스템에서, 항체 중쇄 및 항체 경쇄 모두를 암호화하는 재조합 발현 벡터를 칼슘포스페이트-매개된 형질감염법으로 dhfr-CHO 세포내로 도입시킨다. 재조합 발현 벡터내에서, 항체 중쇄 및 경쇄 유전자 각각을 CMV 인핸서/AdMLP 프로모터 조절 요소에 작동적으로 결합시켜 유전자의 고 수준 전사를 구동시킨다. 재조합 발현 벡터는 또한 DHFR 유전자를 가지며, 이는 메토트렉세이트 선택/증폭을 사용하여 상기 벡터로 형질감염된 CHO 세포의 선택을 가능하게 한다. 선택된 형질전환체 숙주 세포를 배양하여 항체 중쇄 및 경쇄의 발현을 가능하게 하며, 완전한 항체를 배양 배지로부터 회수한다. 표준 분자생물학 기술을 사용하여 재조합 발현 벡터를 제조하고, 숙주 세포를 형질감염시키고 형질전환체를 선택하고 숙주 세포를 배양하여 배양 배지로부터 항체를 회수한다. 또한 추가로, 본 발명은 본 발명의 재조합 항체가 합성될 때까지 적합한 배양 배지에서 본 발명의 숙주 세포를 배양함으로써 본 발명의 재조합 항체를 합성하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 추가로 배양 배지로부터 재조합체를 분리하는 것을 포함할 수 있다.
파아지 디스플레이에 의한 재조합 항체 라이브러리의 스크리닝에 대한 대안으로, 거대 조합 라이브러리를 스크리닝하는 당해 분야에 공지된 다른 방법을 사용하여 본 발명의 이중 특이성 항체를 확인할 수 있다. 한 가지 유형의 대안의 발현 시스템은 재조합 항체 라이브러리가 문헌[PCT 공개공보 WO 제98/31700호(Szostak and Roberts), 및 문헌: R.W. and Szostak, J.W. (1997) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94: 12297-12302]에 기술된 바와 같이, RNA-단백질 융합체로서 발현되는 것이다. 상기 시스템에서, 공유결합 융합체가 mRNA 및 펩타이드 또는 단백질 사이에서생성되며, 이는 3' 말단에서 펩티딜 수용체 항생제인 푸로마이신을 갖는 합성 mRNA의 시험관내 해독에 의해 암호화된다. 따라서, 특정 mRNA는 암호화된 펩타이드 또는 단백질, 예를 들면, 항체 또는 이의 일부분의 특성, 예를 들면, 항체 또는 이의 일부분의 이중 특이성 항원에 대한 결합에 기초하여, mRNA의 복합 혼합물(예를 들면, 복합 라이브러리)로부터 농축될 수 있다. 상기 라이브러리의 스크리닝으로부터 회수되는 항체, 또는 이의 일부분을 암호화하는 핵산 서열은 상기 기술된 바와 같은 재조합 방법으로 발현될 수 있으며(예를 들면, 포유동물 숙주 세포에서), 또한, 돌연변이가 최초 선택된 서열(들)에 도입된 mRNA-펩타이드 융합체의 스크리닝의 추가적인 반복에 의해서, 또는 상기 기술된 바와 같이, 재조합 항체의 시험관내 친화도 성숙의 또 다른 방법에 의해서 추가의 친화도 성숙에 적용될 수 있다.
C. 배합 접근법
본 발명의 이중 특이성 항체는, 이중 특이성 항원이 숙주 동물내에서 생체내 항체 레퍼토리에 최초 노출되어 이중 특이성 항원에 결합하는 항체의 생산을 자극하는 방법 같은 생체내 및 시험관내 접근법의 혼용으로 제조할 수 있으며, 이때, 추가의 항체 선택 및/또는 성숙(즉, 개선)은 하나 이상의 시험관내 기술을 사용하여 달성된다.
한 가지 구체적인 양태에서, 상기 배합 방법은 우선, 비-사람 동물(예를 들면, 마우스, 랫트, 토끼, 염소, 또는 이의 유전자이식 형태, 또는 키메라 마우스)을 이중 특이성 항원으로 면역화시켜 항원에 대한 항체 반응을 자극한 후, 이중 특이성 항원에 노출시켜 생체내에서 자극된 임파구로부터 면역글로불린 서열을 사용하여 파아지 디스플레이 항체 라이브러리를 제조 및 스크리닝하는 것과 관련된다. 상기 배합 과정의 첫 번째 단계는 상기 소부분 IIA에서와 같이 수행될 수 있는 반면, 상기 과정의 두 번째 단계는 상기 소부분 IIB에서와 같이 수행될 수 있다. 비사람 동물의 과면역화 이후 자극된 임파구로부터 제조된 파아지 디스플레이 라이브러리의 시험관내 스크리닝을 위한 바람직한 방법은 제조원(BioSite Inc.)에 의해 기술된 것과 같은 방법을 포함하며, 예를 들면, 문헌[PCT 공개공보 WO 제98/47343호, PCT 공개공보 WO 제91/17271호, 미국 특허 제5,427,908호 및 미국 특허 제5,580,717호]을 참조한다.
또 다른 구체적인 양태에서, 배합 방법은 우선, 비-사람 동물(예를 들면, 마우스, 랫트, 토끼, 염소, 또는 이의 녹아웃 및/또는 유전자이식 형태, 또는 키메라 마우스)을 이중 특이성 항원으로 면역화시켜 항원에 대한 항체 반응을 자극하고 목적하는 이중 특이성을 갖는 항체를 생산하는 임파구를 선택(예를 들면, 면역화된 동물로부터 제조된 하이브리도마를 스크리닝하여)하는 것과 관련된다. 이후, 선택된 클론으로부터 재배열된 항체 유전자를 분리하고(역 전사효소-폴리머라제 연쇄 반응 같은 표준 클로닝 기술에 의해), 시험관내 친화도 성숙에 적용하여 이로써, 선택된 항체 또는 항체들의 결합 특성을 증강시킨다. 상기 과정의 제1 단계는 상기 소부분 IIA에 기술된 바와 같이 수행할 수 있는 반면, 상기 과정의 제2 단계는 상기 소부분 IIB에 기술된 바와 같이 수행할 수 있으며, 특히 문헌[PCT 공개공보 WO 제97/29131호 및 PCT 공개공보 WO 제00/56772호]에 기술된 바와 같은 시험관내친화도 성숙을 사용하여 수행할 수 있다.
또 다른 배합 방법에서, 재조합 항체는 문헌[미국 특허 제5,627,052호, PCT 공개공보 WO 제92/02551호 및 문헌: Babcock, J.S. et al. (1996) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 7843-7848]에 기술된 바와 같이, 선택된 임파구 항체 방법(SLAM) 같은 당해 분야에서 인용되는 방법을 사용하여 단일의 분리된 임파구로부터 생성된다. 상기 방법에서, 본 발명의 이중 특이성 항체에 적용되는 바와 같이, 비-사람 동물(예를 들면, 마우스, 랫트, 토끼, 염소, 또는 이의 유전자이식 형태, 또는 키메라 마우스)을 우선 생체내에서 이중 특이성 항원으로 면역화시켜 항원에 대한 항체 반응을 자극시킨 후, 관심 대상의 항체를 분비하는, 예를 들면, 이중 특이성 항원에 특이적인 항체를 분비하는 단일 세포를 항원-특이적 용혈성 플라크 분석(예를 들면, 이중 특이성 항원 그 자체, 또는 관심 대상의 구조적으로 관련된 분자를 바이오틴 같은 링커를 사용하여 양의 적혈구에 커플링시켜 용혈 플라크 분석법을 사용하여 적합한 특이성을 갖는 항체를 분비하는 단일 세포를 동정한다)으로 선택한다. 관심 대상의 항체 분비 세포를 확인한 후, 중쇄 및 경쇄 가변 영역 cDNA를 역전사효소-PCR로 상기 세포로부터 수득하고 이러한 가변 영역을 COS 또는 CHO 세포 같은 포유동물 숙주 세포에서 적합한 면역글로불린 불변 영역(예를 들면, 사람 불변 영역)과 관련하여 발현시킬 수 있다. 이후, 생체내 선택된 임파구로부터 유도된, 증폭된 면역글로불린 서열로 형질감염시킨 숙주 세포는 추가로 분석하거나, 예를 들면, 목적하는 이중 특이성을 갖는 항체를 발현하는 세포를 분리하기 위해 형질감염된 세포를 조사함으로써, 시험관내에서 선택할 수 있다. 증폭된 면역글로불린 서열은 상기 기술된 바와 같이 시험관내 친화도 성숙에 의해서, 추가로 시험관내에서 조작할 수 있다.
또 다른 구체적인 양태에서, 이중 특이성 항체를 생산하는 배합 방법은 하기 단계들과 관련된다. 제1 비-사람 동물을 제1 항원으로 면역화시키고 제2 비-사람 동물을 제2의 상이한 항원으로 면역화시키며, 이때, 바람직하게는, 제2 항원은 제1 항원과 구조적으로 유사하여, 생체내에서 항체 반응을 자극시킬 수 있다. 소부분 IIB에서 각각 기술된 바와 같이, 재조합 중쇄 라이브러리 및 재조합 경쇄 라이브러리를 제1 비-사람 동물 및 제2 비-사람 동물로부터 유도된 항체 유전자로부터 작제한다. 제1 항원으로 면역화시킨 동물로부터의 중쇄 라이브러리를 제2 항원으로 면역화시킨 동물로부터의 경쇄 라이브러리와 혼합하여 항체 라이브러리 X를 생성시킨다. 유사하게, 제2 항원으로 면역화시킨 동물로부터의 중쇄 라이브러리를 제1 항원으로 면역화시킨 동물로부터의 경쇄 라이브러리와 혼합하여 항체 라이브러리 Y를 생성시킨다. 부가적으로, 라이브러리 X 및 Y를 혼합하여 라이브러리 XY를 생성시킬 수 있다. 제1 및 제2 항원 모두에 결합하는 이중 특이성 항체를 확인하고 X, Y 및/또는 XY 라이브러리로부터 분리한다.
III. 이중 특이성 항체의 특성
본 발명은 이중 특이성 항체 뿐만 아니라, 본 발명의 방법에 따라 제조할 수 있는 이의 항체 일부분을 제공한다. 바람직하게는, 항체, 또는 이의 일부분은 분리된 항체이다. 바람직하게는, 항체, 또는 이의 일부분은 중화 항체이다. 본 발명의 항체는 모노클로날 및 재조합 항체, 및 이의 일부분을 포함한다. 다양한 구체적인 양태에서, 항체, 또는 이의 일부분은 전체 사람 또는 전체 마우스 항체, 또는 이의 일부분 같은 전적으로 단일 종으로부터 유도된 아미노산 서열을 포함할 수 있다. 다른 구체적인 양태에서, 항체, 또는 이의 일부분은 키메라 항체 또는 CDR-이식된 항체 또는 사람화된 항체의 다른 형태일 수 있다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "항체"는 네 개의 폴리펩타이드 쇄, 이황화 결합에 의해 상호간에 연결된 두 개의 중쇄(H) 및 두 개의 경쇄(L)로 이루어진 면역글로불린 분자를 의미한다. 각각의 중쇄는 중쇄 가변 영역(HCVR 또는 VH로 약칭됨) 및 중쇄 불변 영역으로 이루어진다. 중쇄 불변 영역은 세 개의 도메인, CH1, CH2 및 CH3으로 이루어진다. 각각의 경쇄는 경쇄 가변 영역(LCVR 또는 VL로 약칭됨) 및 경쇄 불변 영역으로 이루어진다. 경쇄 불변 영역은 하나의 도메인, CL로 이루어진다. VH 및 VL 영역은 추가로 골격 영역(FR)로 명명된 보다 보존된 영역이 산재하는, 상보성 결정 영역(CDR)으로 명명된 초가변성 영역으로 세분된다. 각각의 VH 및 VL은 세 개의 CDR 및 네 개의 FR로 이루어지며, 다음 순서로 아미노 말단에서 카복시 말단으로 배열된다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 항체의 "항원-결합 부분"(또는 단순히 "항체 일부분")은 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 항원에 특이적으로 결합하는 능력을 갖는 이중 특이성 항체의 하나 이상의 단편에 관한 것이다. 항체의 항원-결합 기능은 전체 길이 항체의 단편들에 의해서 달성될 수 있는 것으로 나타났다. 용어 항체의 "항원-결합 부분"내에 포함되는 결합 단편들의 예는 (i) VL, VH,CL 및 CH1 도메인으로 이루어진 일가 단편인 Fab 단편, (ii) 힌지 영역에서 이황화 결합에 의해 결합된 두 개의 Fab 단편을 포함하는 이가 단편인 F(ab')2단편, (iii) VH 및 CH1 도메인으로 이루어진 Fd 단편, (iv) 항체의 단일 암(arm)의 VL 및 VH 도메인으로 이루어진 Fv 단편, (v) VH 도메인으로 이루어진 dAb 단편[Ward et al., (1989) Nature 341: 544-546], 및 (vi) 분리된 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 추가로, Fv 단편의 두 개의 도메인, VL 및 VH가 개별적인 유전자에 의해 암호화되지만, 이들은 재조합 방법을 사용하여 이들을 단일 단백질 쇄로서 제조할 수 있게 하는 합성 링커에 의해 결합시켜, VL 및 VH 영역이 쌍을 이루어 일가 분자를 형성하도록 할 수 있다[일본쇄 Fv(scFv)로 공지됨; 예를 들면, 문헌 참조: Bird et al. (1988) Science 242: 423-426; and Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 5879-5883]. 상기 일본쇄 항체는 또한 용어 항체의 "항원-결합 부분"내에 포함되는 것으로 의도된다. 이항체(diabody) 같은 일본쇄 항체의 다른 형태가 또한 포함된다. 이항체는 이가의 이특이성 항체이며, 이때, VH 및 VL 도메인은 단일 폴리펩타이드 쇄 상에서 발현되지만, 동일 쇄 상에서 두 개의 도메인 사이에서 쌍을 형성하기에는 짧은 링커를 사용함으로써 상기 도메인들이 또 다른 쇄의 상보적인 도메인과 쌍을 형성하도록 하여 두 개의 항원 결합 부위를 생성하게 한다[예를 들면, 참조: Holliger, P., et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448; Poljak, R.J. et al. (1994) Structure 2: 1121-1123].
또한 추가로, 항체 또는 이의 항원-결합 부분은 항체 또는 항체 일부분이 하나 이상의 다른 단백질 또는 펩타이드와 공유결합 또는 비공유결합에 의해 형성한 보다 큰 면역부착 분자의 일부일 수 있다. 상기 면역부착 분자의 예는 스트렙트아비딘 코어 영역을 사용하여 테트라머성 scFv 분자를 제조하는 것[Kipriyanov, S.M., et al. (1995) Human Antibodies and Hybridoma 6: 93-101] 및 시스테인 잔기, 마커 펩타이드 및 C-말단 폴리히스티딘 태그를 사용하여 이가성 바이오티닐화된 scFv 분자를 제조하는 것[Kipriyanov, S.M., et al. (1994) Mol. Immunol. 31: 1047-1058]을 포함한다. Fab 및 F(ab')2단편 같은 항체 일부분은 각각, 전체 항체의 파파인 또는 펩신 절단 같은 통상적인 기술을 사용하여 전체 항체로부터 제조할 수 있다. 또한, 항체, 항체 일부분 및 면역부착 분자는 표준 재조합 DNA 기술을 사용하여 수득할 수 있다.
본원에서 사용되는 바와 같이, "분리된 이중 특이성 항체"는 상이한 항원성 특이성을 갖는 다른 항체가 실질적으로 비함유된 이중 특이성 항체(예를 들면, 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 항원 또는 그밖에 비관련된 항원의 구조적으로 관련된 영역에 특이적으로 결합하지만, 다른 비관련된 항원에 특이적으로 결합하는 항체가 실질적으로 비함유된 분리된 항체)를 의미한다. 또한, 분리된 이중 특이성 항체는 다른 세포성 물질 및/또는 화학물질을 실질적으로 비함유할 수 있다.
사용되는 바와 같이, "중화 항체"는 이의 특정 항원에 대한 결합이 항원의 생물학적 활성의 억제를 초래하는 항체를 의미한다. 항원의 생물학적 활성에 대한 이러한 억제는 적합한 시험관내 또는 생체내 분석법을 사용하여 항원의 생물학적활성의 지표 하나 이상을 측정함으로써 평가할 수 있다.
본원에서 사용되는 바와 같은 "모노클로날 항체"는 하이브리도마-유도된 항체(예를 들면, 표준 코흘러(Kohler) 및 밀스타인(Milstein) 하이브리도마 방법 같은 하이브리도마 기술로 제조된 하이브리도마로부터 분비된 항체)를 의미한다. 따라서, 본 발명의 하이브리도마-유도된 이중 특이성 항체는, 또한 단일 항원 이상에 대해서 항원성 특이성을 갖을 수 있지만, 여전히 모노클로날 항체로서 인용된다.
구절 "재조합 항체"는 숙주 세포에 형질감염된 재조합 발현 벡터를 사용하여 발현된 항체, 재조합 조합 항체 라이브러리로부터 분리된 항체, 사람 면역글로불린 유전자를 유전자이식시킨[예를 들면, 참조: Taylor, L.D., et al. (1992) Nucl. Acids Res. 20: 6287-6295] 동물(예를 들면, 마우스)로부터 분리된 항체 같은 재조합 방법으로 제조, 발현, 생성 또는 분리된 항체, 또는 특정 면역글로불린 유전자 서열(예를 들면, 사람 면역글로불린 유전자 서열)의 다른 DNA 서열로의 스플라이싱과 관련된 다른 임의의 방법에 의해 제조, 발현, 생성 또는 분리된 항체를 의미한다. 재조합 항체의 예는 키메라, CDR-이식된 및 사람화된 항체를 포함한다.
용어 "사람 항체"는 예를 들면, 문헌[참조: Kabat et al., (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242]에 의해 기술된 바와 같은 사람 배주 면역글로불린 서열에 상응하거나 이로부터 유도된 가변 및 불변 영역을 갖는 항체를 의미한다. 그러나, 본 발명의 사람 항체는 예를 들면, CDR 및 특정 CDR3에서, 사람 배주 면역글로불린 서열에 의해 암호화되지 않는 아미노산잔기(예를 들면, 시험관내 랜덤 또는 부위-특이적인 돌연변이유발에 의해 또는 생체내에서 체세포 돌연변이에 의해서 도입된 돌연변이)를 포함할 수 있다.
본 발명의 재조합 사람 항체는 가변 영역을 가지며, 또한 사람 배주 면역글로불린 서열로부터 유도된 불변 영역을 포함할 수 있다[참조: Kabat, E.A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242]. 그러나, 특정 구체적인 양태에서, 상기 재조합 사람 항체는 시험관내 돌연변이유발(또는, 사람 Ig 서열을 유전자이식한 동물을 사용하는 경우, 생체내 체세포 돌연변이유발)에 적용하며, 결과적으로, 재조합 항체의 VH 및 VL 영역의 아미노산 서열은 사람 배주 VH 및 VL 서열로부터 유도되거나 이와 관련되지만, 생체내에서 사람 항체 배주 레퍼토리내에 천연적으로 존재할 수 없는 서열이다. 그러나, 특정 구체적인 양태에서, 상기 재조합 항체는 선택적인 돌연변이유발 또는 역돌연변이 또는 이 둘 모두의 결과이다.
용어 "역돌연변이"는 사람 항체의 체세포적으로 돌연변이된 아미노산 서열 일부 또는 전부를 상동성 배주 항체 서열로부터 상응하는 배주 잔기로 교체하는 방법을 의미한다. 본 발명의 사람 항체의 중쇄 및 경쇄 서열을 VBASE 데이터베이스내 배주 서열과 개별적으로 배열하여 최고의 상동성을 갖는 서열을 확인한다. 본 발명의 사람 항체내 차이점은 상기 상이한 아미노산을 암호화하는 정의된 뉴클레오타이드 위치를 돌연변이시킴으로써 배주 서열로 복귀시킨다. 역돌연변이를 위한 후보로서 이렇게 확인된 각각의 아미노산의 역할을 항원 결합에서의 직접적인 또는간접적인 역할에 대해서 조사해야 하며, 사람 항체의 임의의 바람직한 특성에 영향을 미치는 돌연변이 후에 발견되는 임의의 아미노산은 최종 사람 항체내에 포함되지 않아야 한다. 역돌연변이시키는 아미노산 수를 최소화하기 위해서, 가장 밀접한 배주 서열과 상이하지만 제2 배주 서열내 아미노산과 동일하거나 상응하는 것으로 확인된 아미노산 위치들은 유지시킬 수 있지만, 단 제2 배주 서열은 당해 아미노산의 양쪽에서 10개 이상, 바람직하게는 12개의 아미노산에 대해서 본 발명의 사람 항체의 서열과 동일하거나 동일 선상에 있어야 한다. 역돌연변이는 항체 최적화의 모든 단계에서 일어날 수 있다.
용어 "키메라 항체"는 한 종으로부터의 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열 및 다른 종으로부터의 불변 영역 서열을 포함하는 항체, 예를 들면, 사람 불변 영역에 결합된 쥐의 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 갖는 항체를 의미한다.
용어 "CDR-이식된 항체"는 한 종으로부터의 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열을 포함하지만, VH 및/또는 VL의 CDR 영역 하나 이상의 서열이 또 다른 종의 CDR 서열로 교체된 항체, 예를 들면, 쥐의 CDR 하나 이상(예를 들면, CDR3)이 사람 CDR 서열로 교체된, 쥐의 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 갖는 항체를 의미한다.
용어 "사람화된 항체"는 비-사람 종(예를 들면, 마우스)로부터의 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열을 포함하지만, 이때, VH 및/또는 VL 서열의 적어도 일부는 보다 "사람-유형"으로 변형된, 즉 사람 배주 가변 서열과 보다 유사한 항체를 의미한다. 한 가지 유형의 사람화된 항체는 사람 CDR 서열이 비-사람 VH 및 VL 서열내로 도입되어 상응하는 비사람 CDR 서열이 교체된 CDR-이식된 항체이다.
항체의 결합 역학을 측정하는 한 가지 방법은 표면 플라스몬 공명(surface plasmon resonance)에 의한 것이다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "표면 플라스몬 공명"은 예를 들면, BIAcore 시스템(제조원: Pharmacia Biosensor AB, Uppsala, Sweden and Piscataway, NJ, USA)을 사용하여 바이오센서 매트릭스내 단백질 농도의 변화를 검출함으로써 실시간 생체특이적인 상호작용을 분석하는 것을 가능하게 하는 광학 현상을 의미한다. 추가의 기술에 대해서는, 문헌[Jonsson, U., et al. (1993) Ann. Biol. Clin. 51: 19-26; Jonsson, U., et al. (1991) Biotechniques 11: 620-627; Johnsson, B, et al. (1995) J. Mol. Recognit. 8: 125-131; and Johnson, B., et al. (1991) Anal. Biochem. 198: 268-277]을 참조한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "Koff"는 항체/항원 복합체로부터의 항체의 해리에 대한 오프율 상수(off rate constant)를 의미한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "Kd"는 특정 항체-항원 상호작용의 해리 상수를 의미한다.
본 발명의 이중 특이성 항체는 상기 소부분 II에서 기술된 항체를 제조하기 위한 다양한 방법 중 하나를 사용하여 제조된다. 본 발명의 이중 특이성 항체는 필수적으로 임의의 구조적으로 관련된 항원에 대해서 지시될 수 있지만, 본 발명의 바람직한 이중 특이성 항체는 IL-1α 및 IL-1β에 특이적으로 결합하는 항체이며, 이는 실시예 1 내지 4에서 기술된 바와 같은 이중 특이성 항원을 사용하여 제조할수 있다. 본 발명에 적용될 수 있는 다른 구조적으로 관련된 항원은 카스파제 패밀리 구성원, 사이토킨 패밀리, 예를 들면, IL-1 패밀리 구성원(예를 들면, IL-1/IL-18), TNF 패밀리 구성원(예를 들면, TNFα/TNFβ), IL-6 패밀리 구성원, 인터페론, TGFβ 패밀리 구성원, EGF 패밀리 구성원, FGF 패밀리 구성원, PDGF 패밀리 구성원, VEGF 패밀리 구성원, 안지오포이에틴 패밀리 구성원, 골 형태형성 단백질, 분비된 프로테아제(메탈로-프로테이나제), 및 사이토킨 수용체 패밀리, 예를 들면, IL-1-수용체 패밀리 구성원, TNF-수용체 패밀리 구성원, TGFβ수용체 패밀리 구성원, EGF 수용체 패밀리 구성원, FGF 수용체 패밀리 구성원, PDGF 수용체 패밀리 구성원, VEGF 수용체 패밀리 구성원 및 안지오포이에틴 수용체 패밀리 구성원을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 이중 특이성 항체는 상기 항체가 결합하는 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 항원에 대한 동등한 결합 활성을 나타낼 수 있거나, 이중 특이성 항체는 두 개의 항원 중 하나에 보다 우선적으로 결합할 수 있으며, 또한 비관련된 항원과 비교하여 여전히 두 개의 관련된 항원에 대한 특이성을 갖는다. 이중 특이성 항체의 구조적으로 관련된 항원 뿐만 아니라 비관련된 항원에 대한 결합 활성은 ELISA 또는 BIAcore 분석 같은 표준 시험관내 면역분석법을 사용하여 평가할 수 있다. 바람직하게는, 구조적으로 비관련된 항원에 대한 항체의 Kd대 구조적으로 관련된 항원에 대한 항체의 Kd의 비율은 3 이상이어야 하며, 보다 바람직하게는 상기 비율은 5이상, 보다 더 바람직하게는 10 이상, 보다 더 바람직하게는 상기 비율은50, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900 또는 1000 이상이어야 한다.
정량적 측면에서, 배경값 결합 및 이중 특이성 사이의 차이점은 1 등급 또는 1도이다. 예를 들면, 배경값 결합은 예를 들면, 5% 미만, 보다 바람직하게는 3% 미만, 및 가장 바람직하게는 약 0.1 내지 1% 정도로 낮은 반면, 특정 교차-반응성 또는 이중 특이성 결합은 1% 초과, 보다 바람직하게는 3% 초과, 보다 더 바람직하게는 5% 초과 및 보다 더욱더 바람직하게는 10% 초과 정도로 보다 더 높다. 부가적으로, 바람직하게는, 표적 항원에 대한 이중 특이성 항체의 IC50은 제시된 생물 검정법에서 항원의 ED50과 밀접하다.
본 발명의 이중 특이성 항체, 또는 이의 항원-결합 부분은 바람직하게는, 항체가 특이적으로 결합하는 항원 중 하나, 및 보다 바람직하게는 항원 둘 모두에 대하여 바람직한 결합 역학(예를 들면, 높은 친화도, 낮은 해리, 느린 해리 속도, 강한 중화 활성)을 갖도록 선택된다. 예를 들면, 이중 특이성 항체, 또는 이의 일부분은 표면 플라스몬 공명으로 측정한 바와 같이, 0.1s-1이하의 Koff율 상수, 보다 바람직하게는 1 x 10-2s-1이하의 Koff율 상수, 보다 더 바람직하게는 1 x 10-3s-1이하의 Koff율 상수, 보다 더 바람직하게는 1 x 10-4s-1이하의 Koff율 상수, 또는 보다 더 바람직하게는 1 x 10-5s-1이하의 Koff율 상수로, 구조적으로 관련된 항원 중 하나 및 보다 바람직하게는 항원 둘 모두에 결합할 수 있다. 선택적으로 또는 부가적으로,이중 특이성 항체 또는, 이의 일부분은 1 x 10-6M 이하의 IC50, 보다 바람직하게는 1 x 10-7M 이하의 IC50, 보다 더 바람직하게는 1 x 10-8M 이하의 IC50, 보다 더 바람직하게는 1 x 10-9M 이하의 IC50, 보다 더 바람직하게는 1 x 10-10M 이하의 IC50, 또는 보다 더욱더 바람직하게는 1 x 10-11M 이하의 IC50으로, 구조적으로 관련된 항원 중 하나 및 보다 바람직하게는 항원 둘 모두의 활성을 억제할 수 있다. 바람직하게는 IC50은 민감한 생물 검정법을 사용하여 측정되어야 하며, 이때, IC50값은 상기 검정법에서 항원의 ED50값에 밀접해야 한다.
본 발명은 또한, 본 발명의 이중 특이성 항체, 또는 이의 항원-결합 부분 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 본 발명의 약제학적 조성물은 추가로 하나 이상의 부가적인 치료제, 예를 들면, 이중 특이성 항체의 사용이 질병의 경감에 유익한 질병을 치료하기 위한 하나 이상의 부가적인 치료제를 포함할 수 있다. 예를 들면, 이중 특이성 항체가 IL-1α 및 IL-1β에 특이적으로 결합하는 경우, 약제학적 조성물은 IL-1 활성이 유해한 질병을 치료하기 위한 하나 이상의 부가적인 치료제를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 항체들 및 항체-일부분은 환자에게 투여하기에 적합한 약제학적 조성물내로 도입시킬 수 있다. 전형적으로, 약제학적 조성물은 본 발명의 항체 또는 항체 일부분 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함한다. 본원에서 사용되는바와 같이, "약제학적으로 허용되는 담체"는 용매, 분산 매질, 피복제, 항미생물제 및 항진균제, 등장성 및 흡수 지연제, 및 생리학적으로 적합한 것 등의 일부 및 전부를 포함한다. 약제학적으로 허용되는 담체의 예는 하나 이상의 물, 염수, 인산염 완충된 염수, 덱트로오스, 글리세롤, 에탄올 등 뿐만 아니라 이의 혼합물을 포함한다. 수 많은 경우에, 조성물내에 등장성 제제, 예를 들면, 당, 다가 알콜, 예를 들면, 만니톨, 솔비톨, 또는 염화나트륨을 포함하는 것이 바람직할 것이다. 약제학적으로 허용되는 담체는 습윤제 또는 유화제, 보존제 또는 완충제 같은 보조 물질 최소량을 추가로 포함할 수 있으며, 이는 항체 또는 항체 일부분의 보존 수명 또는 효능을 증강시킨다.
본 발명의 항체 또는 항체 일부분은 비경구적 투여에 적합한 약제학적 조성물내로 도입시킬 수 있다. 바람직하게는, 항체 또는 항체 일부분은 0.1 내지 250㎎/㎖ 항체를 함유하는 주사가능한 용액으로 제조될 것이다. 주사가능한 용액은 플린트 또는 호박 바이알, 앰풀 또는 예비-충전된 주사기내 액체 또는 동결건조된 형태 중 하나로 구성될 수 있다. 완충액은 pH 5.0 내지 7.0(최적으로는 pH 6.0)에서 L-히스티딘(1 내지 50mM), 최적으로는 5 내지 10mM일 수 있다. 다른 적합한 완충액은 나트륨 석시네이트, 나트륨 시트레이트, 나트륨 포스페이트 또는 칼륨 포스페이트를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 염화나트륨은 0 내지 300mM(액체 투여형의 경우 최적으로 150mM)의 농도에서 용액의 중독성을 변형시키는데 사용할 수 있다. 동결보호제(Cryoprotectant)가 동결건조된 투여형에 포함될 수 있으며, 주로 0 내지 10% 슈크로오스(최적으로는 0.5 내지 1.0%)이다. 다른 적합한 동결보호제는 트레할로오스 및 락토오스를 포함한다. 증량제가 동결건조된 투여형에 포함될 수 있으며, 주로 1 내지 10% 만니톨(최적으로는 2 내지 4%)이다. 안정화제가 액체 및 동결건조된 투여형에 사용될 수 있으며, 주로 1 내지 50mM L-메티오닌(최적으로는 5 내지 10mM)이다. 다른 적합한 증량제는 글리신, 아르기닌을 포함하며, 0 내지 0.05% 폴리솔베이트-80(최적으로는 0.005 내지 0.01%)으로 포함될 수 있다. 부가적인 계면활성제는 폴리솔베이트 20 및 BRIJ 계면활성제를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 조성물은 다양한 형태로 존재할 수 있다. 이들은 예를 들면, 액체 용액(예를 들면, 주사가능한 및 주입가능한 용액), 분산액 또는 현탁액, 정제, 환제, 산제, 리포좀 및 좌제 같은 액체, 반-고체, 및 고체 투여형을 포함한다. 바람직한 형태는 의도된 투여 형식 및 치료학적 적용에 따라 결정된다. 전형적인 바람직한 조성물은 다른 항체를 사용한 사람의 수동 면역에서 사용되는 것과 유사한 조성물 같은, 주사가능한 또는 주입가능한 용액의 형태이다. 바람직한 투여 형식은 비경구적(예를 들면, 정맥내, 피하내, 복강내, 근육내)이다. 바람직한 구체적인 양태에서, 항체는 정맥내 주입 또는 주사로 투여된다. 또 다른 바람직한 구체적인 양태에서, 항체는 근육내 또는 피하내 주사로 투여된다.
치료학적 조성물은 전형적으로 제조 및 저장 조건하에서 멸균 및 안정해야 한다. 조성물은 용액, 미세유액, 분산제, 리포좀 또는 고농도의 약제에 적합한 다른 정연한 구조로서 제형화될 수 있다. 멸균 주사가능한 용액은 필요한 양으로 활성 화합물(즉, 항체 또는 항체 일부분)을 적합한 용매 중에서 상기 무수히 언급된성분들 중 하나 또는 이의 배합물과 함께 도입하고, 경우에 따라서 여과 멸균시킴으로써 제조할 수 있다. 일반적으로, 분산액은 기본적인 분산 매질 및 경우에 따라 상기 무수히 언급된 것들로부터의 다른 성분을 함유하는 멸균 비히클내로 활성 화합물을 도입시킴으로써 제조된다. 멸균 주사가능한 용액의 제조를 위한 멸균, 동결건조된 산제의 경우에, 바람직한 제조 방법은 활성 성분 + 이전에 멸균-여과된 이의 용액으로부터 부가적인 바람직한 성분들의 산제를 생산하는 진공 건조 및 분무-건조법이다. 용액의 적합한 유동성은 예를 들면, 레시틴 같은 피복물을 사용함으로써, 분산제의 경우 필요한 입자 크기를 유지시킴으로써, 및 계면활성제를 사용함으로써 유지시킬 수 있다. 주사가능한 조성물의 지연된 흡수는 조성물내에 흡수를 지연시키는 제제, 예를 들면, 모노스테아레이트 염 및 젤라틴을 포함시킴으로써 야기시킬 수 있다.
본 발명의 항체 및 항체 일부분은 당해 분야에 공지된 다양한 방법으로 투여할 수 있지만, 수 많은 치료학적 적용에 있어서, 바람직한 투여 경로/형식은 피하 주사, 정맥내 주사 또는 주입이다. 당해 분야의 숙련자가 이해할 수 있는 바와 같이, 투여 경로 및/또는 투여 형식은 목적하는 결과에 따라서 결정될 것이다. 특정 구체적인 양태에서, 활성 화합물은 화합물이 신속하게 방출되는 것을 예방하는 담체와 함께 제조될 수 있으며, 예를 들면, 임플란트, 경피 패치, 및 미세캡슐화된 전달 시스템을 포함하는 조절된 방출 제형으로 제조될 수 있다. 생분해가능한, 생체적합성 중합체, 예를 들면, 에틸렌 비닐 아세테이트, 다가무수물, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르토에스테르 및 폴리락트산이 사용될 수 있다. 상기 제형을 제조하는 수 많은 방법들이 특허되어져 있거나 일반적으로 당해 분야의 숙련자에게 공지되어져 있다. 예를 들면, 문헌[Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J.R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978]을 참조한다.
특정 구체적인 양태에서, 본 발명의 항체 또는 항체 일부분은 예를 들면, 불활성 희석제 또는 동화가능한 섭취가능한 담체와 함께 경구적으로 투여될 수 있다. 화합물(및 경우에 따라, 다른 성분)은 또한, 경질 또는 연질 쉘 젤라틴 캡슐내에 포함되거나, 정제로 압축되거나, 환자의 음식내로 직접적으로 도입될 수 있다. 경구 치료학적 투여에 있어서, 화합물은 부형제와 함께 도입되어 소화가능한 정제, 구강 정제, 트로키제, 캡슐제, 엘릭서제, 현탁제, 시럽제, 웨이퍼제 등의 형태로 사용될 수 있다. 비경구적 투여 이외의 방법으로 본 발명의 화합물을 투여하기 위해서, 화합물을 화합물의 불활성화를 예방하는 물질로 피복하거나, 이러한 물질과 공투여하는 것이 필요하다.
보충적 활성 화합물이 또한 조성물내로 도입될 수 있다. 특정 구체적인 양태에서, 본 발명의 항체 또는 항체 일부분은 IL-1 활성이 유해한 질병을 치료하는데 유용한 하나 이상의 부가적인 치료학적 제제와 공제형화 및/또는 공투여된다. 예를 들면, 본 발명의 항-IL-1α/IL-1β 이중 특이성 항체, 또는 항체 일부분을 다른 표적에 결합하는 하나 이상의 부가적인 항체(예를 들면, 다른 사이토킨에 결합하거나 세포 표면 분자에 결합하는 항체)와 공제형화 및/또는 공투여할 수 있다. 추가로, 본 발명의 하나 이상의 항체는 전술한 치료제 하나 이상과 병용하여 사용할 수 있다. 상기 배합 치료법은 유리하게는 보다 낮은 투여량의 투여되는 치료제를 사용할 수 있으며, 결과적으로 다양한 단일치료법과 관련된 가능한 독성 또는 합병증을 피할 수 있다.
IV. 이중 특이성 항체의 사용
두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 항원에 결합하는 능력을 고려할 때, 본 발명의 이중 특이성 항체 또는 이의 일부분은, 효소 결합된 면역흡착 분석법(ELISA), 방사면역분석법(RIA) 또는 조직 면역조직화학법 같은 통상적인 면역분석법을 사용하여, 이들 항원(예를 들면, 혈청 또는 혈장 같은 생물학적 샘플에서) 중 하나 또는 이들 모두를 검출하는데 사용할 수 있다. 본 발명은 생물학적 샘플을 상기 항원을 특이적으로 인식하는 본 발명의 이중 특이성 항체 또는 항체 일부분과 접촉시키고, 항원에 결합한 항체 또는 비결합된 항체(또는 항체 일부분)을 검출함으로써 생물학적 샘플내에서 항원을 검출함을 포함하여, 생물학적 샘플에서 항원을 검출하는 방법을 제공한다. 항체는 결합된 또는 비결합된 항체의 검출을 촉진시키기 위하여 검출가능한 기질로 직접적으로 또는 간접적으로 표지시킨다. 적합한 검출가능한 물질은 다양한 효소, 보철 그룹, 형광 물질, 냉광 물질 및 방사성 물질을 포함한다. 적합한 효소의 예는 서양고추냉이 퍼옥시다제, 알칼리 포스파타제, β-갈락토시다제, 또는 아세틸콜린에스터라제를 포함하고, 적합한 보철 그룹 복합체의 예는 스트렙토아비딘/바이오틴 및 아비딘/바이오틴을 포함하며, 적합한 형광 물질의 예는 움벨리페론, 플루오레세인, 플루오레세인 이소티오시아네이트, 로다민, 디클로로트리아지닐아민, 플루오레세인, 단실 클로라이드 또는 파미코에리트린을 포함하고, 냉광 물질의 예는 루미놀을 포함하며, 적합한 방사성 물질의 예는125I,131I,35S 및3H를 포함한다.
항체를 표지하는 대안으로, 항원(들)을, 검출가능한 물질로 표지된 항원 표준 및 항원(들)에 특이적인 비표지된 이중 특이성 항체를 사용하는 경쟁 방사면역분석법으로 생물학적 유체에서 분석할 수 있다. 상기 분석법에서, 생물학적 샘플, 표지된 항원 표준 및 이중 특이성 항체를 혼합하고 비표지된 항체에 결합된 표지된 항원 표준의 양을 측정한다. 생물학적 샘플내에서 항원의 양은 비표지된 항체에 결합된 표지된 항원 표준의 양과 반비례한다.
바람직한 구체적인 양태에서, 이중 특이성 항체는 IL-1α 및 IL-1β를 특이적으로 인식하며 전술한 검출 방법을 사용하여 IL-1α 및/또는 IL-1β를 검출한다. 따라서, 본 발명은 IL-1α 또는 IL-1β를 함유하는 것으로 생각되는 생물학적 샘플 또는 조직을 본 발명의 이중 특이성 항체 또는 이의 항원-결합 부분과 접촉시키고 생물학적 샘플 또는 조직에서 IL-1α 또는 IL-1β를 검출함을 포함하여, 생물학적 샘플 또는 조직에서 IL-1α 또는 IL-1β를 검출하는 방법을 제공한다. 생물학적 샘플은 예를 들면, 세포, 조직 또는 체액(예를 들면, 혈액, 혈장, 뇨, 타액 등)의 샘플 같은 시험관내 샘플일 수 있다. 또한, 검출된 조직은 환자에서 생체내에 위치하는 조직, 예를 들면, 조직의 생체내 영상화(예를 들면, 표지된 항체)에 의해 가시화된 조직일 수 있다.
본 발명의 이중 특이성 항체는 또한 진단 목적으로 사용할 수 있다. 한 가지 구체적인 양태에서, 본 발명의 항체는 관심 대상의 항원(들)을 검출하기 위한 실험실 시험 또는 관심 대상의 항원(들)을 검출하기 위한 치료 시험 측면과 같이, 시험관내 진단 분석법에서 사용된다. 항체를 사용하는 잘-확립된 시험관내 분석법의 예는 ELISA, RIA, 웨스턴 블롯 등을 포함한다. 또 다른 구체적인 양태에서, 본 발명의 항체는 생체내 영상화 시험 같은 생체내 진단 분석법에서 사용된다. 예를 들면, 항체는 생체내 검출될 수 있는 검출가능한 물질로 표지될 수 있고, 표지된 항체는 환자에게 투여될 수 있으며, 표지된 항체는 생체내에서 검출되어 생체내 영상화를 가능하게 한다.
IL-1α 및 IL-1β를 특이적으로 인식하는 본 발명의 이중 특이성 항체는 진단적 목적으로, 예를 들면, 다양한 염증 질환 및 질병에서 뿐만 아니라 태아의 자연발생적 재흡수에서 IL-1α 및/또는 IL-1β를 검출하기 위한 진단 분석법에서 사용할 수 있다. 특정 유형의 질환 및 질병과 관련하여, 본 발명의 이중 특이성 항IL-1α/IL-1β 항체를 상기 항체의 치료학적 사용(하기 참조)와 관련하여 하기 추가로 논의되는 IL-1 활성이 유해한 질병 같은, 본원에서 기술된 질환/질병 중 하나에서 진단 목적으로 사용할 수 있다.
본 발명의 이중 특이성 항체 및 항체 일부분은 바람직하게는, 이들이 결합되는 항원의 시험관내 및 생체내 활성 모두를 중화시킬 수 있다. 따라서, 본 발명의 상기 항체 및 항체 일부분은 예를 들면, 항원을 함유하는 세포 배양물, 또는 본 발명의 이중 특이성 항체가 반응하는 항원을 갖는 사람 환자 또는 다른 포유동물 환자에서, 항원의 활성을 억제하는데 사용할 수 있다. 한 가지 구체적인 양태에서, 본 발명은 항원을 본 발명의 이중 특이성 항체 또는 항체 일부분과 접촉시켜 항원 활성을 억제함을 포함하는 항원 억제 방법을 제공한다. 바람직한 구체적인 양태에서, 이중 특이성 항체는 IL-1α 및 IL-1β에 결합하고 상기 방법은 IL-1α 및/또는 IL-1β를 이중 특이성 항체 또는 이의 일부분과 접촉시킴으로써 IL-1α 및/또는 IL-1β 활성을 억제하는 방법이다. IL-1α 및/또는 IL-1β 활성은 예를 들면, 시험관내에서 억제시킬 수 있다. 예를 들면, IL-1α 및/또는 IL-1β를 함유하거나 함유하는 것으로 생각되는 세포 배양물에서, 본 발명의 항체 또는 항체 일부분을 상기 배양 배지에 부가하여 배양물에서 IL-1α 및/또는 IL-1β 활성을 억제할 수 있다. 대안으로, IL-1α 및/또는 IL-1β 활성은 환자에서 생체내에서 억제할 수 있다.
또 다른 구체적인 양태에서, 본 발명은 항원 활성이 유해한 질병으로부터 고통받는 환자에서 항원 활성을 억제하는 방법을 제공한다. 본 발명은 환자에게 본 발명의 이중 특이성 항체 또는 항체 일부분을 투여하여 환자에서 항원 활성을 억제시킴을 포함하여, 상기 질환으로부터 고통받는 환자에서 항원 활성을 억제하는 방법을 제공한다. 바람직하게는, 항원은 사람 항원이며 환자는 사람 환자이다. 본 발명의 항체는 치료학적 목적으로 사람 환자에게 투여될 수 있다. 또한, 본 발명의 항체는 항체가 수의학적 목적으로 결합하는 항원을 발현하는 비-사람 포유동물에게 또는 사람 질환의 동물 모델로서 투여될 수 있다. 후자와 관련하여, 상기 동물 모델은 본 발명의 항체의 치료학적 효능을 평가하는데 유용할 수 있다(예를 들면, 투여량 시험 및 투여 경과 시간).
바람직하게는, 이중 특이성 항체는 IL-1α 및 IL-1β에 결합하며 환자에서 항원 활성을 억제하는 방법은 환자에서, 예를 들면, IL-1 활성이 유해한 질병으로부터 고통받는 환자에서 IL-1 활성을 억제하는 방법이다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "IL-1 활성이 유해한 질병"은 상기 질병으로 고통받는 환자에서 IL-1의 존재(이는 IL-1α 및 IL-1β 모두를 포함한다)가 상기 질병의 병리생리학에 관여하거나 상기 질병을 악화시키는 인자인 것으로 나타나거나 의심되는 질환 및 다른 질병을 포함하는 것으로 의도된다. 따라서, IL-1 활성이 유해한 질병은 IL-1 활성(즉, IL-1α 및 IL-1β 중 하나 또는 모두)의 억제가 상기 증후군 및/또는 질병의 진행을 경감시킬 것으로 예견되는 질병이다. 상기 질병은 예를 들면, 상기 질병으로 고통받는 환자의 생물학적 유체에서 IL-1의 농도 증가(예를 들면, 환자의 혈청, 혈장, 활액 등에서 IL-1의 농도 증가)에 의해서 입증될 수 있으며, 이는 예를 들면, 상기 기술된 바와 같은 항-IL-1 항체를 사용하여 검출될 수 있다.
인터류킨 1은 면역 및 염증성 요소들과 관련된 다양한 질환과 관련된 병리에서 결정적인 역할을 수행한다. 이러한 질병은 류마티스성 관절염, 골관절염, 유년기 만성 관절염, 림프 관절염, 건선성 관절염, 반응성 관절염, 척추관절증, 전신성 낭창성 홍반, 크론씨병, 궤양성 결장염, 염증성 장 질환, 인슐린 의존성 진성 당뇨병, 갑상선염, 천식, 알레르기 질환, 건선, 피부염, 피부경화증, 이식물 대 숙주 질환, 기관 이식 거부, 기관 이식과 관련된 급성 또는 만성 면역 질환, 사르코이드증, 동맥경화증, 산재된 혈관내 응고, 가와사키 질환, 그레이브 질환, 신장증후군,만성피로증후군, 베게너 육아종증, 헤노흐-쇼엔라인 자반증, 신장의 미세혈관염, 만성 활성 간염, 포도막염, 패혈성 쇼크, 독성 쇼크 증후군, 패혈증 증후군, 악액질, 감염성 질환, 기생충 질환, 후천성 면역결핍 증후군, 급성 횡축 척수염, 헌팅톤 무도병, 파킨슨 질환, 알츠하이머 질환, 졸중, 1차 담즙성 간경변, 용혈성 빈혈, 악성 종양, 심부전, 심근경색, 애디슨병, 산발성 다선성 결함 제I형 및 다선성 결함 제II형, 슈미트 증후군, 성인성(급성) 호흡 곤란 증후군, 탈모증, 원형탈모증, 혈청음성 관절증, 관절증, 라이터 증후군, 건선성 관절증, 궤양성 결장염 관절증, 장질환성 활액막염, 클라미디아증, 예르시니아 및 살모넬라 관련된 관절증, 척추관절증, 죽종성 질환/동맥경화증, 아토피성 알레르기, 자가면역 수포성 질환, 심상성 천포창, 낙엽 천포창, 유사 천포창, 선형 IgA 질환, 자가면역 용혈성 빈혈, 쿰브스 양성 용혈성 빈혈, 후천성 악성 빈혈, 유년기 악성 빈혈, 근육성 뇌염/로얄 프리 질환, 만성 점막피부 칸디다증, 거대세포 동맥염, 1차 경화성 간염, 특발성 자가면역성 간염, 후천성 면역결핍 질환 증후군, 후천성 면역결핍 관련 질환, C형 간염, 통상적인 다양한 면역결핍증(통상 다양한 저감마글로불린혈증), 팽창성 심근증, 여성 불임, 난소 이상, 조기성숙 난소 이상, 섬유성 폐 질환, 특발성 섬유증 폐포염, 염증후 간질성 폐 질환, 간질성 폐염, 결합조직병 관련된 간질성 폐 질환, 혼합 결합조직병 관련 폐 질환, 전신계 경화 관련된 간질성 폐 질환, 류마티스성 관절염 관련된 간질성 폐 질환, 전신계 홍반성 낭창 관련된 폐 질환, 피부근육염/다발근육염 관련된 폐 질환, 스조그렌 질환(Sjogren's disease) 관련된 폐 질환, 강직척추염 관련된 폐 질환, 맥관염 확산 폐 질환, 혈철소증 관련된 폐 질환,약제-유도된 간질성 폐 질환, 방사선 섬유증, 폐쇄기관지염, 만성 호산성 폐렴, 이파구 침투 폐 질환, 감염후 간질성 폐 질환, 통풍성 관절염, 자가면역성 간염, 1형 자가면역성 간염(전통적인 자가면역 또는 루프성 간염), 2형 자가면역성 간염(항-LKM 항체 간염), 자가면역 매개된 저혈당증, 흑색가시세포증과 관련된 B형 인슐린 내성, 부갑상선항진증, 기관 이식과 관련된 급성 면역 질환, 기관 이식과 관련된 만성 면역 질환, 골관절염, 1차 경화성 담관염, 1형 건선, 2형 건선, 특발성 백혈구감소증, 자가면역성 호중구감소증, 신장 질환 NOS, 사구체신염, 신장의 미세 맥관염, 림(lyme) 질환, 원반형 낭창성 홍반, 남성 불임 특발성 또는 NOS, 장자 자가면역, 다발성 경화증(모든 아형), 교감눈염증, 결합조직 질환에 속발성 폐동맥고혈압, 굿페스처 질환(Goodpasture's disease), 결절다발동맥염에 속발성 폐동맥 소견, 급성 류마티스열, 류마티스성 척추염, 스틸 질환(Still's disease), 전신피부 경화증, 스조르그렌 증후군, 타카야스 질환/동맥염, 자가면역 저혈소판증, 특발성 저혈소판증, 자가면역 갑상선 질환, 갑상선과다증, 갑상선종 자가면역 갑상선저하증(하시모토 질환), 위축 자가면역 갑상선저하증, 1차 점액부종, 수정체성 포도막염, 1차 맥관염, 백반증, 중추신경계 질환(예를 들면, 우울증, 정신분열증, 알츠하이머 질환, 파킨슨 질환 등), 급성 및 만성 통증, 및 지질 불균형을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 본 발명의 사람 항체, 및 항체 일부분을 사용하여 자가면역 질환, 특히 류마티스성 척추염, 알레르기, 자가면역 당뇨, 자가면역 포도막염을 포함하는 염증과 관련된 질환으로부터 고통받는 사람을 치료할 수 있다.
바람직하게는, 본 발명의 IL-1α/IL-1β 이중 특이성 항체 또는 이의 항원-결합 부분을 사용하여, 류마티스성 관절염, 크론씨병, 다발성 경화증, 인슐린 의존성 진성 당뇨병 및 건선을 치료한다.
본 발명의 IL-1α/IL-1β 이중 특이성 항체 또는 항체 일부분은 또한, 자가면역 및 염증성 질환의 치료에서 유용한 하나 이상의 부가적인 치료제와 함께 투여할 수 있다.
본 발명의 항체, 또는 이의 항원 결합 부분은 상기 질환을 치료하기 위해서 단독으로 또는 병용하여 사용할 수 있다. 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 단독으로, 또는 이의 의도된 목적에 따라 숙련자에 의해 선택되는 부가적인 제제, 예를 들면, 치료제와 병용하여 사용할 수 있다는 것을 이해해야만 한다. 예를 들면, 부가제는 본 발명의 항체로 치료되는 질환 또는 상태를 치료하는데 유용한 것으로 당해 분야에 인식되어져 있는 치료제일 수 있다. 부가제는 또한, 치료학적 조성물에 유익한 특성을 부여하는 제제, 예를 들면, 조성물의 점도에 영향을 미치는 제제일 수 있다.
본 발명내에 포함되는 배합물은 이의 의도된 목적에 유용한 배합물임을 추가로 이해해야만 한다. 하기 나타낸 제제들은 예시를 위한 것으로 이로써 제한하고자 하는 것은 아니다. 본 발명의 일부분인 배합물은 본 발명의 항체 및 하기 목록으로부터 선택되는 하나 이상의 부가제일 수 있다. 배합물은 또한, 배합물이 형성된 조성물이 이의 의도된 기능을 수행할 수 있게 하는 한, 하나 이상의 부가제, 예를 들면, 두 개 또는 세 개의 부가제를 포함할 수 있다.
바람직한 배합물은 이부프로펜 및 COX-2 억제제 같은 약제를 포함하는 NSAID로 또한 인용되는 비-스테로이드성 소염제(들)이다. 다른 바람직한 배합물은 프레드니솔론을 포함하는 코르티코스테로이드이며, 스테로이드 사용의 잘 공지된 부작용들은 본 발명의 항-IL-1 항체와 병용하여 환자를 치료하는 경우, 필요한 스테로이드 투여량을 줄임으로써 감소시키거나 보다 더 제거시킬 수 있다. 본 발명의 항체 또는 항체 일부분과 병용할 수 있는 류마티스성 관절염 치료제의 비제한적인 예는 다음을 포함한다: 사이토킨 억제성 소염제(들)(CSAID); 다른 사람 사이토킨 또는 성장 인자, 예를 들면, TNF, LT, IL-2, IL-6, IL-7, IL-8, IL-12, IL-15, IL-16, IL-18, EMAP-II, GM-CSF, FGF 및 PDGF에 대한 항체 또는 길항제. 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 세포 표면 분자, 예를 들면, CD2, CD3, CD4, CD8, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD80(B7.1), CD86(B7.2), CD90, 또는 CD154(gp39 또는 CD40L)를 포함하는 이의 리간드에 대한 항체들과 병용할 수 있다.
치료제의 바람직한 배합물은 상이한 지점에서 자가면역 및 후속적인 염증성 증폭반응을 방해할 수 있으며, 바람직한 예는 키메라, 사람화된 또는 사람 TNF 항체 같은 TNF 길항제, D2E7[PCT 공개공보 WO 제97/29131호], CA2(RemicadeTM), CDP 571, CDP 870, 탈리다마이드 및 가용성 p55 또는 p75 TNF 수용체, 이의 유도체 (p75TNFRIgG(EnbrelTM) 또는 p55TNFRIgG(Lenercept)), 및 또한, TNFα전환 효소(TACE) 억제제를 포함하며, 유사한 IL-1 억제제(인터류킨-1-전환 효소 억제제, IL-1RA 등)가 동일한 이유로 효과적일 수 있다. 다른 바람직한 배합물은 인터류킨 11을 포함한다. 또 다른 바람직한 배합물은 IL-1 기능에 의존적이거나 이와 협력하여 유사하게 작용할 수 있는 자가면역 반응의 주요 작용인자들이며, 특히 바람직한 것은 IL-12 및/또는 IL-18 항체 또는 가용성 IL-12 및 IL-18 수용체, 또는 IL-12 및/또는 IL-18 결합 단백질을 포함하는 IL-12 및/또는 IL-18 길항제이다. IL-12 및 IL-18은 중복성이지만 독특한 기능을 가지며 이 둘 모두에 대한 길항제 배합물이 가장 효과적일 수 있는 것으로 나타났다. 또 다른 바람직한 배합물은 비-고갈성 항-CD4 억제제이다. 다른 바람직한 배합물은 항체, 가용성 수용체 또는 길항제 리간드를 포함하는 공-자극 경로 CD80(B7.1) 또는 CD86(B7.2)의 길항제를 포함한다.
본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 또한, 메토트렉세이트, 6-MP, 아자티오프린 설파살라진, 메살라진, 올살라진, 클로로퀴닌/하이드록시클로로퀴닌, 펜실라민, 오로티오말레이트(근육내 및 경구), 아자티오프린, 코치신, 코르티코스테로이드(경구, 흡입 및 국부 주사), 베타-2-아드레노수용체 길항제(살부타몰, 테르부탈린, 살메테랄), 크산틴(테오필린, 아미노필린), 크로모글리케이트, 네도크로밀, 케토티펜, 이프라트로퓸 및 옥시트로퓸, 사이클로스포린, FK506, 라파미신, 미코페놀레이트 모페틸, 레플루노마이드, NSAID, 예를 들면, 이부프로펜, 프레드니솔론 같은 코르티코스테로이드, 포스포디에스터라제 억제제, 아데노신 길항제, 항혈소판제, 보체 억제제, 아드레날린작용제, TNFα또는 IL-1 같은 염증성 사이토킨에 의한 신호전달을 방해하는 제제(예를 들면, IRAK, NIK, IKK, p38 또는 MAP 키나제 억제제), IL-1β전환 효소 억제제, TNFα전환 효소(TACE) 억제제, 키나제 억제제 같은 T-세포 신호전달 억제제, 메탈로프로테이나제 억제제, 설파살라진, 아자티오프린, 6-머캅토퓨린, 안지오텐신 전환 효소 억제제, 가용성 사이토킨 수용체 및 이의 유도체[예를 들면, 가용성 p55 또는 p75 TNF 수용체 및 유도체 (p75TNFRIgG(EnbrelTM) 및 p55TNFRIgG(Lenercept)), sIL-RI, sIL-1RII, sIL-6R] 및 소염성 사이토킨(예를 들면, IL-4, IL-10, IL-11, IL-13 및 TGFβ)와 배합될 수 있다. 바람직한 배합물은 메토트렉세이트 또는 레플루노마이드를 포함하며, 온건하거나 심각한 류마티스성 관절염의 경우에는 사이클로스포린이 바람직하다.
본 발명의 항체, 또는 항체 일부분과 함께 병용할 수 있는 염증성 장 질환 치료제의 비제한적인 예는 다음을 포함한다: 부데노사이드, 표피 성장 인자, 코르티코스테로이드, 사이클로스포린, 설파살라진, 아미노살리실레이트, 6-머캅토퓨린, 아자티오프린, 메트로니다졸, 리폭시게나제 억제제, 메살라민, 올살라진, 발살라진, 항산화제, 트롬복산 억제제, IL-1 수용체 길항제, 항-IL-1β 모노클로날 항체, 항-IL-6 모노클로날 항체, 성장 인자, 엘라스타제 억제제, 피리디닐-이미다졸 화합물, 다른 사람 사이토킨 또는 성장 인자, 예를 들면, TNF, LT, IL-2, IL-6, IL-7, IL-8, IL-12, IL-15, IL-16, IL-18, EMAP-II, GM-CSF, FGF, 및 PDGF에 대한 항체 또는 길항제. 본 발명의 항체는 CD2, CD3, CD4, CD8, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD90 같은 세포 표면 분자 또는 이의 리간드에 대한 항체와 병용할 수 있다. 본 발명의 항체, 또는 이의 항원 결합 부분은 또한, 메토트렉세이트, 사이클로스포린, FK506, 라파마이신, 마이코페놀레이트 모페틸, 레플루노마이드, NSAID, 예를 들면, 이부프로펜, 프레드니솔론 같은 코르티코스테로이드, 포스포디에스터라제 억제제, 아데노신 길항제, 항혈소판제, 보체 억제제, 아드레날린작용제, TNFα 또는 IL-1 같은 염증성 사이토킨에 의한 신호전달을 방해하는 제제(예를 들면, IRAK, NIK, IKK, p38 또는 MAP 키나제 억제제), IL-1β전환 효소 억제제, TNFα 전환 효소 억제제, 키나제 억제제 같은 T-세포 신호전달 억제제, 메탈로프로테이나제 억제제, 설파살라진, 아자티오프린, 6-머캅토퓨린, 안지오텐신 전환 효소 억제제, 가용성 사이토킨 수용체 및 이의 유도체(예를 들면, 가용성 p55 또는 p75 TNF 수용체, sIL-RI, sIL-RII, sIL-6R) 및 소염성 사이토킨(예를 들면, IL-4, IL-10, IL-11, IL-13 및 TGFβ) 같은 제제와 병용할 수 있다.
항체 또는 이의 항원 결합 부분과 병용할 수 있는 크론씨병 치료제의 바람직한 예는 다음을 포함한다: TNF 길항제, 예를 들면, 항-TNF 항체, D2E7[PCT 공개공보 WO 제97/29131호], CA2(RemicadeTM), CDP 571, TNFR-Ig 작제물[p75TNFRIgG(EnbrelTM) 및 p55TNFRIgG(Lenercept)] 억제제 및 PDE4 억제제. 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 코르티코스테로이드, 예를 들면, 부데노사이드 및 덱사메타손과 병용할 수 있다. 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 또한 설파살라진, 5-아미노살리실산 및 올살라진 같은 제제, 및 IL-1 같은 염증성 사이토킨의 합성 또는 작용을 방해하는 제제, 예를 들면, IL-1β 전환 효소 억제제 및 IL-1ra와 병용할 수 있다. 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 또한 T 세포 신호전달 억제제, 예를 들면, 티로신 키나제 억제제 6-머캅토퓨린과 함께 사용할 수 있다. 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 IL-11과 병용할 수 있다.
본 발명의 항체 또는 항체 일부분과 병용할 수 있는 다발성 경화증 치료제의 비제한적인 예는 다음을 포함한다: 코르티코스테로이드, 프레드니솔론, 메틸프레드니솔론, 아자티오프린, 사이클로포스파미드, 사이클로포린, 메토트렉세이트, 4-아미노피리딘, 티자니딘, 인터페론-β1a(Avonex, 제조원: Biogen), 인터페론-1βb(Betaseron; 제조원: Chiron/Berlex), 공중합체 1(Cop-1, Copaxone, 제조원: Teva Pharmaceutical Industries, Inc.), 고비중 산소, 정맥내 면역글로불린, 콜라브리빈, 다른 사람 사이토킨 또는 성장 인자, 예를 들면, TNF, LT, IL-2, IL-6, IL-7, IL-8, IL-12, IL-15, IL-16, IL-18, EMAP-II, GM-CSF, FGF, 및 PDGF에 대한 항체 또는 길항제. 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 CD2, CD3, CD4, CD8, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD80, CD86, CD90 같은 세포 표면 분자 또는 이의 리간드에 대한 항체와 병용할 수 있다. 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 또한, 메토트렉세이트, 사이클로스포린, FK506, 라파마이신, 마이코페놀레이트 모페틸, 레플루노마이드, NSAID, 예를 들면, 이부프로펜, COX-2 억제제, 프레드니솔론 같은 코르티코스테로이드, 포스포디에스터라제 억제제, 아데노신 길항제, 항혈소판제, 보체 억제제, 아드레날린작용제, TNFα또는 IL-1 같은 염증성 사이토킨에 의한 신호전달을 방해하는 제제(예를 들면, IRAK, NIK, IKK, p38 또는 MAP 키나제 억제제), IL-1β전환 효소 억제제, TACE 억제제, 키나제 억제제 같은 T-세포 신호전달 억제제, 메탈로프로테이나제 억제제, 설파살라진, 아자티오프린, 6-머캅토퓨린, 안지오텐신 전환 효소 억제제, 가용성 사이토킨 수용체 및 이의 유도체(예를 들면, 가용성 p55 또는 p75 TNF 수용체, sIL-1RI, sIL-1RII, sIL-6R) 및 소염성 사이토킨(예를 들면, IL-4, IL-10, IL-13 및 TGFβ) 같은 제제와 병용할 수 있다.
항체 또는 이의 항원 결합 부분과 병용할 수 있는 다발성 경화증 치료제의 바람직한 예는 인터페론-β, 예를 들면, IFNβ1a 및 IFNβ1b, 코팍손, 코르티코스테로이드, IL-1 억제제, TNF 억제제, 및 CD40 리간드 및 CD80에 대한 항체를 포함한다.
본 발명의 약제학적 조성물은 "치료학적 유효량" 또는 "예방학적 유효량"의 본 발명의 항체 또는 항체 일부분을 포함할 수 있다. "치료학적 유효량"은 필요한 투여량 및 시간 동안, 목적하는 치료 결과를 달성하기 위한 양을 의미한다. 항체 또는 항체 일부분의 치료학적 유효량은 질환 상태, 연령, 성별, 및 개개인의 체중 및 개인에서 목적하는 반응을 나타내는 항체 또는 항체 일부분의 능력 같은 인자들에 따라서 다양할 수 있다. 치료학적 유효량은 또한, 항체 또는 항체 일부분의 독성 효과 또는 유해한 효과 보다 치료학적으로 유익한 효과가 더 뛰어난 효과이다. "예방학적 유효량"은 필요한 투여량 및 시간 동안, 목적하는 예방 결과를 달성하기 위한 양을 의미한다. 전형적으로, 예방학적 투여량은 질환의 초기 단계에서 또는 이에 앞서서 환자에서 사용되기 때문에, 예방학적 유효량은 치료학적 유효량 보다 더 적을 것이다.
투여 섭생은 최적의 목적하는 반응(예를 들면, 치료학적 또는 예방학적 반응)을 제공하도록 조정될 수 있다. 예를 들면, 단일 1회 주사로 투여될 수 있거나, 수회의 분할된 투여량이 시간 경과에 따라서 투여될 수 있거나, 투여량은 치료학적 상황의 필요성에 따라서 지시되는 바와 같이 비율적으로 감소 또는 증가될 수 있다. 투여량의 투여 및 균일화가 용이한 투여 단위 형태로 비경구적 조성물을 제형화하는 것이 특히 바람직하다. 본원에서 사용되는 바와 같은 투여 단위 형태는 치료하고자 하는 포유동물 환자에 대한 단일 투여형으로서 적합한 물리적으로 분리된 단위를 의미하며, 각각의 단위는 필요한 약제학적 담체와 함께 목적하는 치료학적 효과를 생성하도록 계산된 예정된 양의 활성 화합물을 함유한다. 본 발명의 투여 단위 형태에 대한 세부 사항은 (a) 활성 화합물의 독특한 특성 및 달성하고자 하는 치료학적 또는 예방학적 효과, 및 (b) 개개인에서 치료 감수성을 위해서 상기 활성 화합물을 혼합하는 분야의 내재하는 제한에 의해서 및 직접적으로 이들에 따라서 지시된다.
본 발명의 항체 또는 항체 일부분의 치료학적 또는 예방학적 유효량에 대한 예시적인 비제한적인 범위는 0.1 내지 20㎎/㎏, 보다 바람직하게는 1 내지 10㎎/㎏이다. 투여량 값은 경감시키고자 하는 상태의 유형 및 중증도에 따라서 다양할 것이라는 것을 주지해야 한다. 추가로, 임의의 특정 환자에 있어서, 특정 투여 섭생은 개인적인 필요성 및 조성물을 투여하는 사람 또는 투여를 감독하는 사람의 전문가적 판단에 따라서 시간 경과에 따라서 조절되어야 하며, 본원에서 나타낸 투여량 범위는 단지 예시적인 것으로 청구된 조성물의 범위 또는 실시를 제한하고자 하는 것은 아니라는 것을 이해해야 한다.
본 발명은 어떠한 방식으로도 제한하고자 하는 것은 아닌 하기 실시예로서추가로 예시된다. 본원 전반에 걸쳐 인용되는 바와 같은, 학문적 참조 문헌, 허여된 특허 및 공개된 특허원을 포함하는 모든 인용된 참조 문헌은 이로써 본원에 참조 문헌으로써 명백히 도입되는 것이다.
실시예 1
동일성의 연속적인 위상학적 영역에 기초한 이중 특이성 항원의 디자인
본 실시예에서, 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 단백질, IL-1α 및 IL-1β 사이에서 동일성의 최대 연속적인 위상학적 영역을 IL-1α 및 IL-1β에 대한 이중 특이성 항체를 생성시키기 위한 이중 특이성 항원을 디자인하기 위한 기초로서 결정하였다. BLAST 알고리듬을 사용하여 상기 두 단백질을 비교하여, 하나의 잔기가 유사한 구조적 또는 기능적 영역에서 다른 잔기를 대체하는 경향을 측정하는 것이 가능하게 되었다. 이러한 분석법은 IL-1α 및 IL-1β사이에서 동일성의 최대 연속적인 위상학적 영역을 확인하고, 상기 영역을 이중 특이성 항원으로 작용하는 선형 펩타이드를 제조하기 위한 임의의 합리적인 유사성의 신장물로 신장시키는 것을 가능하게 하였다. 상기 기준에 가장 부합하는 펩타이드는 하기 아미노산 서열을 갖는다.
(서열 번호 1)
표(*)는 BLAST 알고리듬에 따른 두 개의 단백질 모두에서의 동일한 잔기를나타내며 다른 잔기들은 매우 유사하다. 예를 들면, 라이신은 종종 상동성 단백질에서 아르기닌을 대체하지만, 페닐알라닌을 대체하지는 않는다. 서열 번호 1의 이러한 펩타이드는 반대 방향으로 향하는 구조의 두 개의 상이한 부분으로부터 취해진 하이브리드이며, 따라서, 이러한 에피토프의 또 다른 적합한 대표는
dNdEdAdQNITDF(이때, "d"는 아미노산 잔기가 D 아미노산 잔기임을 나타내는접두사이다)이다. 펩타이드의 L 아미노산 형태 및 D 아미노산 형태로 부분적으로 치환된 형태 모두는 표준 화학 방법으로 합성된다. 이후, 상기 펩타이드는 담체 단백질(예를 들면, KLH 또는 알부민)에 접합되어 접합된 펩타이드가 시험관내 및 생체내 방법에서 항체를 선택하는데 사용된다.
실시예 2
공통적인 폴드의 루프를 모사하는 사이클릭 펩타이드 상에 기초한 이중 특이성 항원의 디자인
본 실시예에서, 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 단백질, IL-1α 및 IL-1β 사이에서 공통적인 폴드의 주요 루프를 구조적으로 모사하는 사이클릭 펩타이드를 IL-1α 및 IL-1β에 대한 이중 특이성 항체를 생성시키기 위한 이중 특이성 항원으로서 사용하기 위해 작제하였다. 선택된 루프는 IL-1α의 잔기 168 내지 184번 및 IL-1β의 잔기 160 내지 176번을 나타낸다. 컨센서스 서열은 다음과 같다.
(서열 번호 2)
표(*)는 IL-1α 및 IL-1β사이의 동일한 잔기를 나타내며, c는 컨센서스 잔기, 즉 IL-1α 및 IL-1β에 유사하지만 각각의 단백질에서 상기 부위에서 실질적으로 존재하지는 않는 잔기를 나타내며, b는 어떠한 명백한 컨센서스 서열도 존재하지 않는다는 것을 나타내며 따라서, IL-1β 서열 동일성이 유지되었다. 선형 펩타이드는 표준 화학 합성 방법으로 합성된다. 상기 펩타이드를 폐환시키기 위해서, 프롤린 및 글리신 잔기를 부가한다. 사이클릭 펩타이드를 N,N-디메틸포름아미드내에서 고 희석물(1㎎/㎖)로서 표준 커플링 조건을 사용하여 합성할 수 있다. 표준 반응을 실온에서 과량의 커플링화제, 예를 들면, 벤조트리아졸-1-일-옥시-트리스-피롤리디노-포스포늄 헥사플루오로 포스페이트(PyBOP; 2당량) 및 중탄산나트륨(10당량)을 사용하여 수행한다. 이후, 상기 펩타이드를 담체 단백질(예를 들면, KLH 또는 알부민)에 접합시키고 접합된 펩타이드를 사용하여 시험관내 또는 생체내 방법으로 항체를 선택하는데 사용한다.
실시예 3
하이브리드 펩타이드에 기초한 이중 특이성 항원의 디자인
본 실시예에서, 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 단백질, IL-1α 및 IL-1β의 교호성 또는 중복성 서열을 포함하는 하이브리드 펩타이드를 IL-1α 및IL-1β에 대한 이중 특이성 항체를 생성시키기 위한 이중 특이성 항원으로서 사용하기 위하여 작제하였다. 하이브리드 펩타이드를 제조하기 위해서, IL-1α 및 IL-1β의 교호성 및 중복성 아미노산 서열을 확인하고 함께 스플라이싱시켜 하기 펩타이드를 제조하였다:
(서열 번호 3)
a 및 b는 어떠한 단백질이 잔기(a=IL-1α; b=IL-1β)의 공급원인지를 나타낸다. 두 단백질 모두에 공통적인 ITDF(서열 번호 4) 모티프가 하이브리드 펩타이드내에 포함되었다. 또한, 상기 하이브리드 펩타이드는 두 단백질 모두의 카복시 말단으로부터의 서열에 집중되며, 이는 또한, 두 단백질 모두에서 항체를 중화시키기 위한 항원성인 것으로 공지되어져 있다. 하이브리드 펩타이드는 표준 화학 합성 방법으로 합성된다. 이후, 상기 펩타이드는 담체 단백질(예를 들면, KLH 또는 알부민)에 접합시키고, 접합된 펩타이드를 시험관내 또는 생체내 방법에 의해 항체를 선택하는데 사용한다.
실시예 4
IL-1α 및 IL-1β에 대한 이중 특이성 항체의 생산
NEAQNITDF (서열 번호 1)
사이클로-MAFLRANQNNGKISVAL(PG) (서열 번호 2)
TKGGQDITDFQILENQ (서열 번호 3)
서열 번호 1, 2 및 3의 펩타이드를 KLH에 접합시키고 개개의 토끼를 면역화시킨다. 각각의 상기 세 개의 펩타이드로 면역화시킨 토끼로부터의 항혈청은 항원으로 사용된 펩타이드에 대한 우수한 항체 반응을 나타냈다. 그러나, 서열 번호 3의 펩타이드로 면역화시킨 토끼로부터의 항혈청만이 IL-1α 단백질 및 IL-1β단백질 모두에 결합할 수 있었다.
5마리의 마우스(BA119 내지 BA123)를 KLH와 함께 접합시킨 서열 번호 3의 펩타이드 + 프로인트 불완전 보조제(FIA)로 매 3주 마다 한번씩 전체 3회 피하로 면역화시키고, KLH와 함께 접합시킨 서열 번호 3의 펩타이드로 2회 정맥내 부스팅시켰다. 각각의 마우스를 각각의 면역화 10일 후에 채혈하고 항체 역가를 ELISA로 측정하였다. 마우스 BA119 및 BA123 각각으로부터의 비장 세포를 부분 IIA에 기술된 바와 같은 골수종 세포주 P3X36Ag8.653에 융합시키고, 수득된 융합 세포를 제한 희석을 사용하여 수 개의 96-웰 플레이트내 각각의 웰 당 1개 세포로 접종하였다. 성장하는 하이브리도마 클론을 우선 표준 ELISA에 의해 IgG 및 IgM 생산에 대해서 분석하여 항체-생산 클론을 확인하였다. 마우스 # BA123 융합체로부터 전체 945개 클론이 확인되었다. ELISA에서 시험된 355개 클론으로부터의 상등액은 IL-1α, IL-1β, 또는 IL-1α 및 IL-1β둘 모두에 대해서 항원 결합 활성을 나타내었다.
클론 수 | 항원 특이성(전체 길이 IL-1α 및/또는 IL-1β에 대한) | 동형 |
249 | IL-1α 단독 | IgG |
19 | IL-1α 단독 | IgM |
15 | IL-1β 단독 | IgG |
2 | IL-1β 단독 | IgM |
57 | IL-1α 및 IL-1β | IgG |
13 | IL-1α 및 IL-1β | IgM |
등가물
당해 분야의 숙련자는 일상적인 실험법만을 사용하여, 본원에 기술된 본 발명의 특정 구체적인 양태들에 대한 수 많은 등가물을 인식하고 확인할 수 있을 것이다. 상기 등가물들은 하기 특허청구범위에 의해 포함되는 것으로 의도된다.
Claims (88)
- 인터류킨-1α 및 인터류킨-1β에 특이적으로 결합하는 이중-특이성 항체, 또는 이의 항원-결합 부분.
- 제1항에 있어서, 표면 플라스몬 공명으로 측정한 바와 같이, 0.1s-1이하의 Koff율 상수로 인터류킨-1α에 결합하거나, 1 x 10-5M 이하의 IC50으로 인터류킨-1α의 활성을 억제하는 이중-특이성 항체, 또는 이의 항원-결합 부분.
- 제1항에 있어서, 표면 플라스몬 공명으로 측정한 바와 같이, 0.1s-1이하의 Koff율 상수로 인터류킨-1β에 결합하거나, 1 x 10-5M 이하의 IC50으로 인터류킨-1β의 활성을 억제하는 이중-특이성 항체, 또는 이의 항원-결합 부분.
- IL-1α 및 IL-1β의 공통적인 구조 특성을 포함하는 항원을 제공하는 단계, 상기 항원에 항체 레퍼토리를 노출시키는 단계, 및 항체 레퍼토리로부터 IL-1α 및 IL-1β에 특이적으로 결합하는 항체를 선택하여 이중 특이성 항체를 수득하는 단계를 포함하는, 인터류킨-1α 및 인터류킨-1β에 특이적으로 결합하는 이중-특이성 항체를 수득하는 방법.
- 제4항에 있어서, 항원이 IL-1α 및 IL-1β 사이의 동일성의 연속적인 위상학적 영역에 기초하여 디자인되는 방법.
- 제5항에 있어서, 항원이 아미노산 서열 NEAQNITDF(서열 번호 1) 또는 dNdEdAdQNITDF를 포함하는 방법.
- 제4항에 있어서, 항원이 IL-1α 및 IL-1β의 공통적인 폴드(fold)의 루프를 구조적으로 모사하는 것에 기초하여 디자인되는 방법.
- 제7항에 있어서, 항원이 아미노산 서열 사이클로-MAFLRANQNNGKISVAL(PG)(서열 번호 2)을 포함하는 사이클릭 펩타이드인 방법.
- 제4항에 있어서, 항원이 IL-1α 및 IL-1β의 중복성 부분을 함께 스플라이싱하여 하이브리드 분자를 생성시키는데 기초하여 디자인되는 방법.
- 제9항에 있어서, 항원이 아미노산 서열 TKGGQDITDFQILENQ(서열 번호 3)를 포함하는 방법.
- 제4항에 있어서, 항원이 아미노산 서열APVRSLNCTLRDSQQKSLVMSGPYELKALHLQGQDMEQQVVFS MGAYKSSKDDAKITVIL GLKEKNLYLSCVLKDDKPTLQLESVDPKNYPKKKMEKRFVFNKIEINNKLEFESAQFPNWYISTSQAENMPVFLGGTKGGQDITDFTMQFVSS (서열 번호 4)를 포함하는 방법.
- 제4항에 있어서, 항체 레퍼토리를, 항원으로 동물을 면역화시킴으로써, 생체내에서 항원에 노출시키는 방법.
- 제12항에 있어서, 동물의 임파구로부터 일단의 하이브리도마를 제조하는 단계 및 IL-1α및 IL-1β에 특이적으로 결합하는 항체를 분비하는 하이브리도마를 선택하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
- 제12항에 있어서, 동물이 마우스, 랫트, 토끼 및 염소로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 방법.
- 제12항에 있어서, 동물이 IL-1α, IL-1β, 또는 IL-1α및 IL-1β 둘 모두가 결핍된 녹아웃 마우스(knockout mouse)인 방법.
- 제12항에 있어서, 동물이 사람 면역글로불린 유전자로 유전자이식된(transgenic) 마우스로서, 항원 자극시 당해 마우스가 사람 항체를 생산하게 되는 방법.
- 제12항에 있어서, 동물이 사람 말초 혈액 단핵구 세포 또는 림프계 세포, 또는 이의 전구 세포로 재구성된 중증 복합 면역결핍증(SCID)에 걸린 마우스인 방법.
- 제12항에 있어서, 동물이, 치명적인 전신 조사로 처리하고 중증 복합 면역결핍증(SCID) 마우스의 골수 세포로 방사선보호시킨 후 기능성 사람 임파구 또는 이의 전구 세포로 생착시킨 마우스인 방법.
- 제4항에 있어서, 항체 레퍼토리를, 항원으로 재조합 항체 라이브러리를 스크리닝함으로써, 시험관내에서 항원에 노출시키는 방법.
- 제19항에 있어서, 재조합 항체 라이브러리가 박테리오파아지의 표면 상에서 발현되는 방법.
- 제19항에 있어서, 재조합 항체 라이브러리가 효모 세포의 표면 상에서 발현되는 방법.
- 제19항에 있어서, 재조합 항체 라이브러리가 세균 세포의 표면 상에서 발현되는 방법.
- 제19항에 있어서, 재조합 항체 라이브러리가 RNA-단백질 융합체로서 발현되는 방법.
- 제19항에 있어서, 재조합 항체 라이브러리가 scFv 라이브러리 또는 Fab 라이브러리인 방법.
- 제4항에 있어서, 항체 레퍼토리를 항원으로 동물을 생체내 면역화시켜 항원에 노출시킨 후, 동물의 림프계 세포로부터 제조된 재조합 항체 라이브러리를 항원으로 스크리닝하는 방법.
- 제4항에 있어서, 항체 레퍼토리를 항원으로 동물을 생체내 면역화시켜 항원에 노출시킨 후, 동물의 림프계 세포로부터 제조된 재조합 항체 라이브러리를 시험관내 친화도 성숙시키는 방법.
- 제4항에 있어서, 항체 레퍼토리를 항원으로 동물을 생체내 면역화시켜 항원에 노출시킨 후, 항원에 결합하는 항체를 분비하는 단일 세포를 선택하고 상기 단일 세포로부터 중쇄 및 경쇄 가변 영역 cDNA를 회수하는 방법.
- 제4항에 있어서, 이중-특이성 항체가 전체 사람 항체인 방법.
- 제4항에 있어서, 이중-특이성 항체가 키메라 항체인 방법.
- 제4항에 있어서, 이중-특이성 항체가 CDR-이식된 항체인 방법.
- 제4항의 방법에 의해 수득가능한, 인터류킨-1α 및 인터류킨-1β에 특이적으로 결합하는 이중-특이성 항체, 또는 이의 항원-결합 부분.
- 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자의 공통적인 구조 특성을 포함하는 항원을 제공하는 단계, 상기 항원에 항체 레퍼토리를 노출시키는 단계, 및 상기 레퍼토리로부터 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자에 특이적으로 결합하는 항체를 선택하여 이중 특이성 항체를 수득하는 단계를 포함하는, 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자에 특이적으로 결합하는 이중-특이성 항체를 수득하는 방법.
- 제32항에 있어서, 항원이 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자 사이에서 동일성의 연속적인 위상학적 영역에 기초하여 디자인되는 방법.
- 제33항에 있어서, 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자가 단백질이고 항원이 두 개의 단백질 사이에서 동일성의 연속적인 위상학적 영역의 아미노산 서열을 포함하는 펩타이드인 방법.
- 제32항에 있어서, 항원이 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자의 공통적인 폴드의 루프를 구조적으로 모사하는 것을 기초하여 디자인되는 방법.
- 제35항에 있어서, 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자가 단백질이고 항원이 두 개의 단백질의 공통적인 폴드의 루프를 구조적으로 모사하는 사이클릭 펩타이드인 방법.
- 제32항에 있어서, 항원이 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자의 중복성 부분을 함께 스플라이싱하여 하이브리드 분자를 제조하는데 기초하여 디자인되는 방법.
- 제37항에 있어서, 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자가 단백질이고 항원이 두 개의 단백질의 중복성 아미노산 서열을 함께 스플라이싱하여 제조된 하이브리드 펩타이드인 방법.
- 제32항에 있어서, 항원이 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자 중 하나인 방법.
- 제32항에 있어서, 항체 레퍼토리를, 항원으로 동물을 면역화시킴으로써, 생체내에서 항원에 노출시키는 방법.
- 제40항에 있어서, 동물의 임파구로부터 일단의 하이브리도마를 제조하는 단계 및 두 개의 상이하지만 구조적으로 관련된 분자에 특이적으로 결합하는 항체를 분비하는 하이브리도마를 선택하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
- 제40항에 있어서, 동물이 마우스, 랫트, 토끼 및 염소로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 방법.
- 제40항에 있어서, 동물이 항원의 내인성 형태가 결핍된 녹아웃 마우스인 방법.
- 제40항에 있어서, 동물이 사람 면역글로불린 유전자로 유전자이식된 마우스로서, 항원 자극시 당해 마우스가 사람 항체를 생산하게 되는 방법.
- 제40항에 있어서, 동물이 사람 말초 혈액 단핵구 세포 또는 림프계 세포, 또는 이의 전구 세포로 재구성된 중증 복합 면역결핍증(SCID)에 걸린 마우스인 방법.
- 제40항에 있어서, 동물이, 치명적인 전신 조사로 처리하고 중증 복합 면역결핍증(SCID) 마우스의 골수 세포로 방사선보호시킨 후 기능성 사람 임파구로 생착시킨 마우스인 방법.
- 제32항에 있어서, 항체 레퍼토리를, 항원으로 재조합 항체 라이브러리를 스크리닝함으로써, 시험관내에서 항원에 노출시키는 방법.
- 제47항에 있어서, 재조합 항체 라이브러리가 박테리오파아지의 표면 상에서 발현되는 방법.
- 제47항에 있어서, 재조합 항체 라이브러리가 효모 세포의 표면 상에서 발현되는 방법.
- 제47항에 있어서, 재조합 항체 라이브러리가 세균 세포의 표면 상에서 발현되는 방법.
- 제47항에 있어서, 재조합 항체 라이브러리가 RNA-단백질 융합체로서 발현되는 방법.
- 제47항에 있어서, 재조합 항체 라이브러리가 scFv 라이브러리 또는 Fab 라이브러리인 방법.
- 제32항에 있어서, 항체 레퍼토리를 항원으로 동물을 생체내 면역화시켜 항원에 노출시킨 후, 동물의 림프계 세포로부터 제조된 재조합 항체 라이브러리를 상기 항원으로 시험관내 스크리닝하는 방법.
- 제32항에 있어서, 항체 레퍼토리를 항원으로 동물을 생체내 면역화시켜 항원에 노출시킨 후, 동물의 림프계 세포로부터 제조된 재조합 항체 라이브러리를 시험관내 친화도 성숙시키는 방법.
- 제32항에 있어서, 항체 레퍼토리를 항원으로 동물을 생체내 면역화시켜 항원에 노출시킨 후, 항원에 결합하는 항체를 분비하는 단일 세포를 선택하고 상기 단일 세포로부터 중쇄 및 경쇄 가변 영역 cDNA를 회수하는 방법.
- 제32항에 있어서, 이중-특이성 항체가 전체 사람 항체인 방법.
- 제32항에 있어서, 이중-특이성 항체가 키메라 항체인 방법.
- 제32항에 있어서, 이중-특이성 항체가 CDR-이식된 항체인 방법.
- 제32항의 방법으로 수득가능한 이중-특이성 항체, 또는 이의 항원-결합 부분.
- IL-1α 또는 IL-1β를 함유하는 것으로 의심되는 생물학적 샘플 또는 조직을 제1항의 이중-특이성 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 접촉시키고, 생물학적 샘플 또는 조직에서 IL-1α및 IL-1β를 검출하는 것을 포함하는, 생물학적 샘플 또는 조직에서 IL-1α 또는 IL-1β를 검출하는 방법.
- 제60항에 있어서, IL-1α 또는 IL-1β가 진단학적 목적으로 검출되는 방법.
- 제60항에 있어서, 생물학적 샘플이 시험관내 샘플인 방법.
- 제60항에 있어서, 조직이 환자의 생체내에 위치하고 방법이 조직의 생체내 영상화를 포함하는 방법.
- IL-1α 또는 IL-1β를 제1항의 이중-특이성 항체, 또는 이의 항원-결합 부분과 접촉시켜, IL-1α 또는 IL-1β의 활성을 억제하는 것을 포함하는, IL-1α 또는 IL-1β활성을 억제하는 방법.
- 제64항에 있어서, IL-1α 또는 IL-1β 활성이 시험관내에서 억제되는 방법.
- 인터류킨-1-관련된 질병으로 고통받는 환자에게 제1항의 이중-특이성 항체,또는 이의 항원-결합 부분을 투여하여, 인터류킨-1-관련 질병에 대해서 환자를 치료하는 것을 포함하는, 인터류킨-1-관련된 질병의 치료 방법.
- 제66항에 있어서, IL-1-관련된 질병이 염증성 질병인 방법.
- 제66항에 있어서, IL-1-관련된 질병이 자가면역 질병인 방법.
- 제66항에 있어서, IL-1-관련된 질병이 류마티스성 관절염, 크론씨병, 다발성 경화증, 인슐린 의존성 진성 당뇨병 및 건선으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 방법.
- a) 제1 항원에 노출시켜 생성된 항체 레퍼토리로부터 재조합 중쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 A를 수득하는 단계; b) 제1 항원에 노출시켜 생성된 항체 레퍼토리로부터 재조합 경쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 B를 수득하는 단계; c) 제2 항원에 노출시켜 생성된 항체 레퍼토리로부터 재조합 중쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 C를 수득하는 단계; d) 제2 항원에 노출시켜 생성된 항체 레퍼토리로부터 재조합 경쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 D를 수득하는 단계; 및 e) 재조합 중쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 A를 재조합 경쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 D와 혼합하여 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 X를 수득하고/하거나 재조합 중쇄 또는 이의 항원 결합 부분라이브러리 C를 재조합 경쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 B와 혼합하여 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 Y를 수득하는 단계를 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리를 제조하는 방법.
- 제70항에 있어서, 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 X를 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 Y와 혼합하여 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 Z를 수득하는 단계를 추가로 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리를 제조하는 방법.
- 제70항의 방법에 따라 제조된 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 X.
- 제70항의 방법에 따라 제조된 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 Y.
- 제71항의 방법에 따라 제조된 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 Z.
- a) 제1 항원에 노출시켜 생성된 항체 레퍼토리로부터 재조합 중쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 A를 수득하는 단계; b) 제1 항원에 노출시켜 생성된 항체 레퍼토리로부터 재조합 경쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 B를 수득하는 단계; c) 제2 항원에 노출시켜 생성된 항체 레퍼토리로부터 재조합 중쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 C를 수득하는 단계; d) 제2 항원에 노출시켜 생성된 항체 레퍼토리로부터 재조합 경쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 D를 수득하는 단계; e) 재조합 중쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 A를 재조합 경쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 D와 혼합하여 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 X를 수득하고/하거나 재조합 중쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 C를 재조합 경쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 B와 혼합하여 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 Y를 수득하는 단계; 및 f) 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 X 및/또는 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 Y로부터 제1 및 제2 항원 모두에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 선택하는 단계를 포함하는, 이중 특이성 항체 또는 이의 항원 결합 부분의 제조 방법.
- 제75항의 방법으로 제조된 이중 특이성 항체.
- a) 제1 항원에 노출시켜 생성된 항체 레퍼토리로부터 재조합 중쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 A를 수득하는 단계; b) 제1 항원에 노출시켜 생성된 항체 레퍼토리로부터 재조합 경쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 B를 수득하는 단계; c) 제2 항원에 노출시켜 생성된 항체 레퍼토리로부터 재조합 중쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 C를 수득하는 단계; d) 제2 항원에 노출시켜 생성된 항체 레퍼토리로부터 재조합 경쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 D를 수득하는 단계; e) 재조합 중쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 A를 재조합 경쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 D와 혼합하여 항체 또는 이의 항원 결합부분 라이브러리 X를 수득하고/하거나 재조합 중쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 C를 재조합 경쇄 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 B와 혼합하여 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 Y를 수득하는 단계; f) 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 X를 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 Y와 혼합하여 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 Z를 수득하는 단계; 및 g) 항체 또는 이의 항원 결합 부분 Z로부터 제1 및 제2 항원 모두에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 선택하는 단계를 포함하는, 이중 특이성 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 제조하는 방법.
- 제77항에 따른 방법으로 제조된 이중 특이성 항체 또는 이의 항원 결합 부분.
- 제70항, 제75항 및 제77항 중 어느 한 항에 있어서, 제1 및 제2 항원이 각각, 단백질, 폴리펩타이드 및 펩타이드로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되며, 단 제1 및 제2 항원이 동일하지 않은 방법.
- 제79항에 있어서, 단백질, 폴리펩타이드 및 펩타이드가 분비된 단백질 또는 표면 수용체인 방법.
- 제80항에 있어서, 분비된 단백질이 IFN, TNF, 인터류킨, IP-10, PF4, GRO,9E3, EMAP-II, CSF, FGF 및 PDGF로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 방법.
- 제81항에 있어서, 제1 항원이 IL-1α이고, 제2 항원이 IL-1β인 방법.
- 제72항 내지 제74항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 또는 라이브러리들의 각각의 구성원을 암호화하는 뉴클레오타이드 서열.
- 제76항 또는 제78항에 따른 이중 특이성 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 암호화하는 뉴클레오타이드 서열.
- 제72항 내지 제74항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 이의 항원 결합 부분 라이브러리 또는 라이브러리들의 구성원을 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 벡터.
- 제76항 또는 제78항에 따른 이중 특이성 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 벡터.
- 제85항의 벡터로 형질감염된 숙주 세포.
- 제86항의 벡터로 형질감염된 숙주 세포.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US21537900P | 2000-06-29 | 2000-06-29 | |
US60/215,379 | 2000-06-29 | ||
PCT/US2001/020755 WO2002002773A2 (en) | 2000-06-29 | 2001-06-28 | Dual specificity antibodies and methods of making and using |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020087018593A Division KR20080074231A (ko) | 2000-06-29 | 2001-06-28 | 이중 특이성 항체 및 이의 제조 및 사용 방법 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR20030014288A true KR20030014288A (ko) | 2003-02-15 |
KR100919593B1 KR100919593B1 (ko) | 2009-09-29 |
Family
ID=22802758
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020087018593A KR20080074231A (ko) | 2000-06-29 | 2001-06-28 | 이중 특이성 항체 및 이의 제조 및 사용 방법 |
KR1020027017916A KR100919593B1 (ko) | 2000-06-29 | 2001-06-28 | 이중 특이성 항체 및 이의 제조 방법 및 이를 포함하는 조성물 |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020087018593A KR20080074231A (ko) | 2000-06-29 | 2001-06-28 | 이중 특이성 항체 및 이의 제조 및 사용 방법 |
Country Status (27)
Country | Link |
---|---|
US (5) | US7491516B2 (ko) |
EP (4) | EP2386575A3 (ko) |
JP (2) | JP4955185B2 (ko) |
KR (2) | KR20080074231A (ko) |
CN (3) | CN102120773B (ko) |
AT (1) | ATE420958T1 (ko) |
AU (1) | AU2001271636A1 (ko) |
BG (1) | BG66209B1 (ko) |
BR (1) | BR0112026A (ko) |
CA (1) | CA2411374C (ko) |
CZ (1) | CZ2003291A3 (ko) |
DE (1) | DE60137421D1 (ko) |
EC (1) | ECSP024409A (ko) |
ES (1) | ES2319866T3 (ko) |
HK (1) | HK1055316A1 (ko) |
HU (1) | HUP0301002A3 (ko) |
IL (3) | IL153567A0 (ko) |
MX (1) | MXPA02012867A (ko) |
NO (1) | NO20026239L (ko) |
NZ (1) | NZ523080A (ko) |
PE (1) | PE20020132A1 (ko) |
PL (1) | PL208069B1 (ko) |
SK (1) | SK1152003A3 (ko) |
TW (2) | TWI307716B (ko) |
UY (1) | UY26807A1 (ko) |
WO (1) | WO2002002773A2 (ko) |
ZA (1) | ZA200210109B (ko) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR100675791B1 (ko) * | 2005-02-04 | 2007-02-02 | 제주대학교 산학협력단 | 육상어류양식장용 자동먹이공급시스템 |
Families Citing this family (171)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0996725A1 (en) * | 1997-06-27 | 2000-05-03 | Human Genome Sciences, Inc. | Human nk-3 related prostate specific gene-1 |
DE60137421D1 (de) * | 2000-06-29 | 2009-03-05 | Abbott Lab | Antikörper mit zwei spezifizitäten und verfahren zur deren herstellung und verwendung |
US7754208B2 (en) | 2001-01-17 | 2010-07-13 | Trubion Pharmaceuticals, Inc. | Binding domain-immunoglobulin fusion proteins |
DE60237282D1 (de) * | 2001-06-28 | 2010-09-23 | Domantis Ltd | Doppelspezifischer ligand und dessen verwendung |
GB0115841D0 (en) | 2001-06-28 | 2001-08-22 | Medical Res Council | Ligand |
US9028822B2 (en) | 2002-06-28 | 2015-05-12 | Domantis Limited | Antagonists against TNFR1 and methods of use therefor |
US9321832B2 (en) | 2002-06-28 | 2016-04-26 | Domantis Limited | Ligand |
US7696320B2 (en) | 2004-08-24 | 2010-04-13 | Domantis Limited | Ligands that have binding specificity for VEGF and/or EGFR and methods of use therefor |
US20070104710A1 (en) * | 2002-06-28 | 2007-05-10 | Domants Limited | Ligand that has binding specificity for IL-4 and/or IL-13 |
US20060002935A1 (en) | 2002-06-28 | 2006-01-05 | Domantis Limited | Tumor Necrosis Factor Receptor 1 antagonists and methods of use therefor |
ES2368733T3 (es) | 2002-07-18 | 2011-11-21 | Merus B.V. | Producción recombinante de mezclas de anticuerpos. |
USRE47770E1 (en) | 2002-07-18 | 2019-12-17 | Merus N.V. | Recombinant production of mixtures of antibodies |
US20050271660A1 (en) * | 2002-09-06 | 2005-12-08 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Nebulization of monoclonal antibodies for treating pulmonary diseases |
GB0230201D0 (en) * | 2002-12-27 | 2003-02-05 | Domantis Ltd | Retargeting |
US20110223168A1 (en) * | 2002-12-27 | 2011-09-15 | Greg Winter | Ligand that has binding specificity for il-4 and/or il-13 |
US20100069614A1 (en) | 2008-06-27 | 2010-03-18 | Merus B.V. | Antibody producing non-human mammals |
CA2527694C (en) | 2003-05-30 | 2015-07-14 | Hendricus Renerus Jacobus Mattheus Hoogenboom | Fab library for the preparation of anti vegf and anti rabies virus fabs |
AU2005207003C1 (en) * | 2004-01-20 | 2013-06-13 | Humanigen, Inc. | Antibody specificity transfer using minimal essential binding determinants |
EP1737971B1 (en) * | 2004-01-20 | 2017-08-16 | Merus N.V. | Mixtures of binding proteins |
TWI439284B (zh) * | 2004-04-09 | 2014-06-01 | Abbvie Biotechnology Ltd | 用於治療TNFα相關失調症之多重可變劑量療法 |
US7790405B2 (en) | 2004-04-26 | 2010-09-07 | Centocor, Inc. | Solution phase biopanning method using engineered decoy proteins |
US7514539B2 (en) | 2004-04-26 | 2009-04-07 | Centocor, Inc. | Epitope directed selection of antibodies to murine tissue factor |
SI1747015T1 (sl) * | 2004-04-26 | 2012-11-30 | Janssen Biotech Inc | Postopek biopanninga raztopinske faze z uporabo genetsko proizvedenih vabnih proteinov |
CA2569240A1 (en) | 2004-06-01 | 2005-12-15 | Domantis Limited | Drug fusion comprising a polypeptide drug and an immunoglobulin heavy chain variable domain specific for serum albumin |
EP1851245B1 (en) | 2005-01-26 | 2012-10-10 | Amgen Fremont Inc. | Antibodies against interleukin-1 beta |
WO2006120230A2 (en) | 2005-05-12 | 2006-11-16 | Crucell Holland B.V. | Host cell specific binding molecules capable of neutralizing viruses and uses thereof |
EP1893645A1 (en) * | 2005-06-23 | 2008-03-05 | Crucell Holland B.V. | Optimization of west nile virus antibodies |
DK1912675T3 (en) | 2005-07-25 | 2014-03-24 | Emergent Product Dev Seattle | B-cell reduction using specific and cd37-cd20-specific binding molecules |
US7612181B2 (en) * | 2005-08-19 | 2009-11-03 | Abbott Laboratories | Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof |
EP2500356A3 (en) | 2005-08-19 | 2012-10-24 | Abbott Laboratories | Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof |
RU2515108C2 (ru) | 2005-08-19 | 2014-05-10 | Эббви Инк | Иммуноглобулин с двойными вариабельными доменами и его применения |
US8906864B2 (en) | 2005-09-30 | 2014-12-09 | AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG | Binding domains of proteins of the repulsive guidance molecule (RGM) protein family and functional fragments thereof, and their use |
EP1940880A2 (en) * | 2005-10-14 | 2008-07-09 | Novo Nordisk A/S | Treating diabetes using inhibitors of il-1 |
AU2007238677B2 (en) * | 2006-04-14 | 2011-03-10 | Novartis Ag | Use of IL-I antibodies for treating ophthalmic disorders |
KR101508390B1 (ko) | 2006-06-06 | 2015-04-08 | 크루셀 홀란드 비.브이. | 포도상구균에 대한 사멸활성을 갖는 인간결합분자 및 그것의 용도 |
JP2009539413A (ja) | 2006-06-12 | 2009-11-19 | トゥルビオン・ファーマシューティカルズ・インコーポレーテッド | エフェクター機能を有する単鎖多価結合タンパク質 |
CA2659745A1 (en) * | 2006-08-02 | 2008-02-07 | California Institute Of Technology | Methods and systems for detecting and/or sorting targets |
EP2471816A1 (en) * | 2006-08-30 | 2012-07-04 | Genentech, Inc. | Multispecific antibodies |
RU2554747C9 (ru) * | 2006-12-20 | 2015-10-20 | Ксома (Сша) Ллс | Способы лечения il-1бета-зависимых заболеваний |
EP2114443A4 (en) * | 2006-12-29 | 2011-08-10 | Abbott Lab | IL-1A / IL-1B ANTIBODY WITH DOUBLE SPECIFICITY |
EP2679996A1 (en) | 2007-05-31 | 2014-01-01 | AbbVie Inc. | Biomarkers predictive of the responsiveness to TNF-alfa inhibitors in autoimmune disorders |
EP2195341B1 (en) | 2007-09-26 | 2017-03-22 | UCB Biopharma SPRL | Dual specificity antibody fusions |
JP2011506614A (ja) | 2007-12-17 | 2011-03-03 | ダイアックス コーポレーション | Mmp−14結合タンパク質を含む、骨溶解性障害を処置するための組成物および方法 |
US8962803B2 (en) | 2008-02-29 | 2015-02-24 | AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG | Antibodies against the RGM A protein and uses thereof |
US8008445B2 (en) | 2008-03-03 | 2011-08-30 | Dyax Corp. | Metalloproteinase 9 binding proteins |
US8013125B2 (en) * | 2008-03-03 | 2011-09-06 | Dyax Corp. | Metalloproteinase 9 and metalloproteinase 2 binding proteins |
ES2368700T3 (es) | 2008-04-11 | 2011-11-21 | Emergent Product Development Seattle, Llc | Agente inmunoterapéutico para cd37 y combinación con un agente quimioterapéutico bifuncional del mismo. |
US20100260668A1 (en) * | 2008-04-29 | 2010-10-14 | Abbott Laboratories | Dual Variable Domain Immunoglobulins and Uses Thereof |
SG190572A1 (en) | 2008-04-29 | 2013-06-28 | Abbott Lab | Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof |
CA2726087A1 (en) | 2008-06-03 | 2009-12-10 | Tariq Ghayur | Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof |
RU2010153578A (ru) | 2008-06-03 | 2012-07-20 | Эбботт Лэборетриз (Us) | Иммуноглобулины с двойными вариабельными доменами и их применение |
RU2011104348A (ru) | 2008-07-08 | 2012-08-20 | Эбботт Лэборетриз (Us) | Иммуноглобулины с двойным вариабельным доменом против простагландина е2 и их применение |
KR101705911B1 (ko) | 2008-09-03 | 2017-02-10 | 제넨테크, 인크. | 다중특이적 항체 |
US8377429B2 (en) * | 2008-09-05 | 2013-02-19 | Xoma Technology Ltd. | Methods for improvement of beta cell function with anti-IL-1β antibodies or fragments thereof |
EP2326347A4 (en) * | 2008-09-12 | 2013-03-06 | Xbiotech Inc | TARGETING PATHOGENIC MONOCYTES |
HUE033438T2 (en) | 2008-09-26 | 2017-11-28 | Ucb Biopharma Sprl | Biological products |
EP2196476A1 (en) | 2008-12-10 | 2010-06-16 | Novartis Ag | Antibody formulation |
KR20110110349A (ko) * | 2009-01-29 | 2011-10-06 | 아보트 러보러터리즈 | Il-1 결합 단백질 |
EP2810652A3 (en) | 2009-03-05 | 2015-03-11 | AbbVie Inc. | IL-17 binding proteins |
CA2756244A1 (en) * | 2009-04-02 | 2010-10-07 | Roche Glycart Ag | Multispecific antibodies comprising full length antibodies and single chain fab fragments |
CN101957365B (zh) * | 2009-07-21 | 2013-08-07 | 卫生部北京医院 | 检测抗环瓜氨酸肽和抗免疫球蛋白g双特异性抗体的试剂盒 |
UY32808A (es) * | 2009-07-29 | 2011-02-28 | Abbott Lab | Inmunoglobulinas como dominio variable dual y usos de las mismas |
EP3029070A1 (en) | 2009-08-29 | 2016-06-08 | AbbVie Inc. | Therapeutic dll4 binding proteins |
KR20120060877A (ko) * | 2009-09-01 | 2012-06-12 | 아보트 러보러터리즈 | 이원 가변 도메인 면역글로불린 및 이의 용도 |
GB201005063D0 (en) | 2010-03-25 | 2010-05-12 | Ucb Pharma Sa | Biological products |
US8398966B2 (en) * | 2009-10-15 | 2013-03-19 | Abbvie Inc. | IL-1 binding proteins |
AU2010306677B2 (en) | 2009-10-15 | 2013-05-23 | Abbvie Inc. | Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof |
UY32979A (es) | 2009-10-28 | 2011-02-28 | Abbott Lab | Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas |
SG181563A1 (en) | 2009-12-08 | 2012-07-30 | Abbott Gmbh & Co Kg | Monoclonal antibodies against the rgm a protein for use in the treatment of retinal nerve fiber layer degeneration |
EP2523974A4 (en) * | 2010-01-12 | 2013-11-06 | Oncomed Pharm Inc | WNT BINDING AGENTS AND USES THEREOF |
EP2542582A4 (en) | 2010-03-02 | 2013-12-04 | Abbvie Inc | THERAPEUTIC PROTEINS LINKING TO DLL4 |
ES2617777T5 (es) * | 2010-04-23 | 2022-10-13 | Hoffmann La Roche | Producción de proteínas heteromultiméricas |
SI2571532T1 (sl) | 2010-05-14 | 2017-10-30 | Abbvie Inc. | Proteini, ki vežejo IL-1 |
WO2012006500A2 (en) | 2010-07-08 | 2012-01-12 | Abbott Laboratories | Monoclonal antibodies against hepatitis c virus core protein |
UY33492A (es) | 2010-07-09 | 2012-01-31 | Abbott Lab | Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas |
KR20130100118A (ko) | 2010-08-03 | 2013-09-09 | 아비에 인코포레이티드 | 이원 가변 도메인 면역글로불린 및 이의 용도 |
BR112013003279A2 (pt) * | 2010-08-13 | 2016-06-14 | Genentech In | “métodos para tratar uma doença, método para neutralizar ou bloquear a atividade de il-1ß e/ou il-18, anticorpo, usos de um anticorpo e usos de um anticorpo monoclonal” |
CA2809433A1 (en) | 2010-08-26 | 2012-03-01 | Abbvie Inc. | Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof |
KR20130133247A (ko) | 2010-12-21 | 2013-12-06 | 애브비 인코포레이티드 | Il-1-알파 및 -베타 이특이적 이원 가변 도메인 면역글로불린 및 이의 용도 |
CN103596591B (zh) * | 2011-02-08 | 2016-08-24 | Abbvie公司 | 骨关节炎和疼痛的治疗 |
WO2012163521A1 (en) | 2011-05-27 | 2012-12-06 | Dutalys | Removal of monomeric targets |
EP2726510B1 (en) | 2011-05-27 | 2023-03-08 | F. Hoffmann-La Roche AG | Dual targeting |
AU2012274461A1 (en) | 2011-06-20 | 2014-01-16 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Anti-erbB3 antibody |
WO2013059439A2 (en) | 2011-10-21 | 2013-04-25 | Dyax Corp. | Combination therapy comprising an mmp-14 binding protein |
RU2014121043A (ru) | 2011-10-24 | 2015-12-10 | Эббви Инк. | Биспецифические иммуносвязывающие средства, направленные против tnf и il-17 |
MX2014004977A (es) | 2011-10-24 | 2014-09-11 | Abbvie Inc | Inmunoaglutinantes dirigidos contra esclerostina. |
WO2013078135A2 (en) * | 2011-11-21 | 2013-05-30 | Abbott Laboratories | Il-1 binding proteins |
RU2482181C1 (ru) * | 2011-12-07 | 2013-05-20 | Учреждение Российской академии медицинских наук Российский онкологический научный центр имени Н.Н. Блохина РАМН | Клеточная линия d11 множественной миеломы человека, используемая для гибридомной технологии |
CA2855570A1 (en) | 2011-12-14 | 2013-06-20 | AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG | Composition and method for the diagnosis and treatment of iron-related disorders |
US10118958B2 (en) | 2011-12-14 | 2018-11-06 | AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG | Composition and method for the diagnosis and treatment of iron-related disorders |
KR101963230B1 (ko) | 2011-12-26 | 2019-03-29 | 삼성전자주식회사 | 복수개의 단일 항체를 포함하는 단백질 복합체 |
TW201333033A (zh) | 2011-12-30 | 2013-08-16 | Abbvie Inc | 雙可變域免疫球蛋白及其用途 |
TW201333035A (zh) | 2011-12-30 | 2013-08-16 | Abbvie Inc | 針對il-13及/或il-17之雙特異性結合蛋白 |
MY176695A (en) | 2012-01-27 | 2020-08-19 | Abbvie Inc | Composition and method for the diagnosis and treatment of diseases associated with neurite degeneration |
GB2502127A (en) | 2012-05-17 | 2013-11-20 | Kymab Ltd | Multivalent antibodies and in vivo methods for their production |
MX360109B (es) | 2012-04-20 | 2018-10-23 | Merus Nv | Metodos y medios para la produccion de moleculas de tipo ig. |
WO2014011955A2 (en) | 2012-07-12 | 2014-01-16 | Abbvie, Inc. | Il-1 binding proteins |
KR101911438B1 (ko) | 2012-10-31 | 2018-10-24 | 삼성전자주식회사 | 이중 특이 항원 결합 단백질 복합체 및 이중 특이 항체의 제조 방법 |
CA2890263C (en) | 2012-11-01 | 2020-03-10 | Abbvie Inc. | Anti-vegf/dll4 dual variable domain immunoglobulins and uses thereof |
SG10201802044RA (en) * | 2012-11-01 | 2018-05-30 | Abbvie Inc | Stable dual variable domain immunoglobulin protein formulations |
JP2016501881A (ja) | 2012-12-04 | 2016-01-21 | アッヴィ・インコーポレイテッド | 血液脳関門(bbb)を透過する二重特異性結合タンパク質 |
EP2938634A2 (en) | 2012-12-28 | 2015-11-04 | AbbVie Inc. | Dual specific binding proteins having a receptor sequence |
US9856319B2 (en) | 2012-12-28 | 2018-01-02 | Abbvie Inc. | Monovalent binding proteins |
US9915665B2 (en) | 2012-12-28 | 2018-03-13 | Abbvie Inc. | High-throughput system and method for identifying antibodies having specific antigen binding activities |
EP2948475A2 (en) | 2013-01-23 | 2015-12-02 | AbbVie Inc. | Methods and compositions for modulating an immune response |
WO2014144280A2 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Abbvie Inc. | DUAL SPECIFIC BINDING PROTEINS DIRECTED AGAINST IL-1β AND / OR IL-17 |
US9469686B2 (en) | 2013-03-15 | 2016-10-18 | Abbott Laboratories | Anti-GP73 monoclonal antibodies and methods of obtaining the same |
EP2970457A2 (en) | 2013-03-15 | 2016-01-20 | AbbVie Inc. | Dual specific binding proteins directed against tnf |
ES2753419T3 (es) | 2013-06-07 | 2020-04-08 | Univ Duke | Inhibidores del factor H del complemento |
CN103308697B (zh) * | 2013-06-09 | 2014-11-26 | 卫生部北京医院 | 检测抗丙型肝炎病毒编码的非结构蛋白ns3和ns5的天然双特异性抗体的试剂盒 |
US9879081B2 (en) | 2013-06-25 | 2018-01-30 | Samsung Electronics Co., Ltd. | Protein complex, bispecific antibody including the protein complex, and method of preparation thereof |
KR20160055275A (ko) | 2013-09-17 | 2016-05-17 | 유니버시티 헬스 네트워크 | 시스 rgma/네오제닌 상호작용 또는 지질 래프트에 대해 지시되는 제제 및 치료 방법에서의 이의 용도 |
BR112016006502A2 (pt) * | 2013-09-30 | 2017-09-19 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Método para a produção de molécula de ligação de antígeno usando-se fago auxiliar modificado |
CN105849124B (zh) | 2013-12-20 | 2022-04-12 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 双重特异性抗体 |
WO2015191783A2 (en) | 2014-06-10 | 2015-12-17 | Abbvie Inc. | Biomarkers for inflammatory disease and methods of using same |
WO2015191934A2 (en) | 2014-06-11 | 2015-12-17 | Abbvie Inc. | Blood-brain barrier (bbb) penetrating dual specific binding proteins for treating brain and neurological diseases |
EP2985294A1 (en) | 2014-08-14 | 2016-02-17 | Deutsches Krebsforschungszentrum | Recombinant antibody molecule and its use for target cell restricted T cell activation |
US10093733B2 (en) | 2014-12-11 | 2018-10-09 | Abbvie Inc. | LRP-8 binding dual variable domain immunoglobulin proteins |
JP6655302B2 (ja) * | 2015-05-29 | 2020-02-26 | デンカ生研株式会社 | 被検対象の検出方法並びにそのための免疫測定器具及びモノクローナル抗体 |
TW201710286A (zh) | 2015-06-15 | 2017-03-16 | 艾伯維有限公司 | 抗vegf、pdgf及/或其受體之結合蛋白 |
US20170073420A1 (en) | 2015-09-11 | 2017-03-16 | Abbvie Inc. | Methods for treating relapsing forms of multiple sclerosis |
EP3352760A4 (en) | 2015-09-21 | 2019-03-06 | Aptevo Research and Development LLC | CD3 BINDING POLYPEPTIDES |
KR102146319B1 (ko) | 2015-10-02 | 2020-08-25 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | Pd1 및 tim3에 특이적인 이중특이성 항체 |
JP6734919B2 (ja) | 2015-10-02 | 2020-08-05 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲーF. Hoffmann−La Roche Aktiengesellschaft | 同時結合を測定するための細胞ベースのfretアッセイ法 |
US11219645B2 (en) | 2015-11-18 | 2022-01-11 | Duke University | Tumor infiltrating lymphocytes for treatment of cancer |
PL3365368T3 (pl) | 2016-03-11 | 2023-08-21 | Scholar Rock, Inc. | Immunoglobuliny wiążące tgfbeta1 i ich zastosowanie |
JP2019517480A (ja) | 2016-06-01 | 2019-06-24 | アッヴィ・インコーポレイテッド | 脊髄損傷及び疼痛を処置するための抗RGMa(Repulsive Guidance Molecule A)アンタゴニスト抗体 |
EP3519824A1 (en) | 2016-10-03 | 2019-08-07 | Abbott Laboratories | Improved methods of assessing uch-l1 status in patient samples |
WO2018129329A1 (en) | 2017-01-06 | 2018-07-12 | Scholar Rock, Inc. | ISOFORM-SPECIFIC, CONTEXT-PERMISSIVE TGFβ1 INHIBITORS AND USE THEREOF |
US11016092B2 (en) | 2017-03-23 | 2021-05-25 | Abbott Laboratories | Methods for aiding in the diagnosis and determination of the extent of traumatic brain injury in a human subject using the early biomarker ubiquitin carboxy-terminal hydrolase L1 |
LT3606946T (lt) | 2017-04-03 | 2022-10-25 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Anti-pd-1 antikūno imunokonjugatai su mutantiniu il-2 arba su il-15 |
KR102346336B1 (ko) | 2017-04-05 | 2022-01-04 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | Pd1 및 lag3에 특이적으로 결합하는 이중특이적 항체 |
US10877048B2 (en) | 2017-04-15 | 2020-12-29 | Abbott Laboratories | Methods for aiding in the hyperacute diagnosis and determination of traumatic brain injury in a human subject using early biomarkers |
US10877038B2 (en) | 2017-04-28 | 2020-12-29 | Abbott Laboratories | Methods for aiding in the hyperacute diagnosis and determination of traumatic brain injury using early biomarkers on at least two samples from the same human subject |
US10865238B1 (en) | 2017-05-05 | 2020-12-15 | Duke University | Complement factor H antibodies |
AU2018272054A1 (en) | 2017-05-25 | 2019-09-26 | Abbott Laboratories | Methods for aiding in the determination of whether to perform imaging on a human subject who has sustained or may have sustained an injury to the head using early biomarkers |
JP7269183B2 (ja) | 2017-05-30 | 2023-05-08 | アボット・ラボラトリーズ | 心臓トロポニンiを使用する、ヒト対象における軽度外傷性脳損傷を診断及び査定する一助となるための方法 |
WO2019010131A1 (en) | 2017-07-03 | 2019-01-10 | Abbott Laboratories | IMPROVED METHODS FOR MEASURING CARBOXY TERMINATION HYDROLASE LEVELS OF UBIQUITIN L1 IN BLOOD |
GB201711208D0 (en) | 2017-07-12 | 2017-08-23 | Iontas Ltd | Ion channel inhibitors |
AU2018363922A1 (en) | 2017-11-08 | 2020-05-28 | Kyowa Kirin Co., Ltd. | Bispecific antibody which binds to CD40 and EpCAM |
BR112020010085A2 (pt) | 2017-12-09 | 2020-10-13 | Abbott Laboratories | métodos para auxiliar no diagnóstico e avaliar uma lesão cerebral traumática em um indivíduo humano usando uma combinação de gfap e uch-l1 |
US11022617B2 (en) | 2017-12-09 | 2021-06-01 | Abbott Laboratories | Methods for aiding in the diagnosis and evaluation of a subject who has sustained an orthopedic injury and that has or may have sustained an injury to the head, such as mild traumatic brain injury (TBI), using glial fibrillary acidic protein (GFAP) and/or ubiquitin carboxy-terminal hydrolase L1 (UCH-L1) |
JP7437303B2 (ja) | 2017-12-29 | 2024-02-22 | アボット・ラボラトリーズ | 外傷性脳損傷を診断及び査定するための、新規のバイオマーカー及び方法 |
WO2020014473A1 (en) | 2018-07-11 | 2020-01-16 | Scholar Rock, Inc. | TGFβ1 INHIBITORS AND USE THEREOF |
PL3677278T3 (pl) | 2018-07-11 | 2022-02-28 | Scholar Rock, Inc. | Selektywne względem izoformy inhibitory tgfbeta1 i ich zastosowanie |
MX2021000347A (es) | 2018-07-11 | 2021-04-19 | Scholar Rock Inc | Inhibidores de tgf?1 selectivos de isoforma, de alta afinidad y usos de los mismos. |
MX2021007797A (es) | 2018-12-28 | 2021-10-26 | Kyowa Kirin Co Ltd | Anticuerpo biespecifico que se une al receptor de transferrina (tfr). |
EP3931573A1 (en) | 2019-03-01 | 2022-01-05 | Abbott Laboratories | Methods for predicting major adverse cardiovascular events in subjects with coronary artery disease |
JPWO2020230901A1 (ko) | 2019-05-15 | 2020-11-19 | ||
JPWO2020230899A1 (ko) | 2019-05-15 | 2020-11-19 | ||
AU2021205440A1 (en) | 2020-01-11 | 2022-09-01 | Scholar Rock,Inc. | TGF-beta inhibitors and use thereof |
WO2021142427A1 (en) | 2020-01-11 | 2021-07-15 | Scholar Rock, Inc. | TGFβ INHIBITORS AND USE THEREOF |
WO2021211331A1 (en) | 2020-04-13 | 2021-10-21 | Abbott Point Of Care Inc. | METHODS, COMPLEXES AND KITS FOR DETECTING OR DETERMINING AN AMOUNT OF A ß-CORONAVIRUS ANTIBODY IN A SAMPLE |
CN111793131A (zh) * | 2020-05-11 | 2020-10-20 | 廊坊天光生物技术有限公司 | 一种用于检测血清中pf4含量的抗体对及其用途 |
US20220043000A1 (en) | 2020-08-04 | 2022-02-10 | Abbott Laboratories | Methods and kits for detecting sars-cov-2 protein in a sample |
CA3198161A1 (en) | 2020-12-01 | 2022-06-09 | Beth MCQUISTON | Use of one or more biomarkers to determine traumatic brain injury (tbi) in a subject having received a head computerized tomography scan that is negative for a tbi |
WO2023102384A1 (en) | 2021-11-30 | 2023-06-08 | Abbott Laboratories | Use of one or more biomarkers to determine traumatic brain injury (tbi) in a subject having received a head computerized tomography scan that is negative for a tbi |
WO2022147147A1 (en) | 2020-12-30 | 2022-07-07 | Abbott Laboratories | Methods for determining sars-cov-2 antigen and anti-sars-cov-2 antibody in a sample |
WO2022204581A2 (en) | 2021-03-26 | 2022-09-29 | Scholar Rock, Inc. | Tgf-beta inhibitors and use thereof |
AU2022279156A1 (en) | 2021-05-18 | 2023-11-02 | Abbott Laboratories | Methods of evaluating brain injury in a pediatric subject |
WO2022256723A2 (en) | 2021-06-03 | 2022-12-08 | Scholar Rock, Inc. | Tgf-beta inhibitors and therapeutic use thereof |
CA3222291A1 (en) | 2021-06-14 | 2022-12-22 | Jaime MARINO | Methods of diagnosing or aiding in diagnosis of brain injury caused by acoustic energy, electromagnetic energy, an over pressurization wave, and/or blast wind |
WO2023288277A1 (en) | 2021-07-14 | 2023-01-19 | Scholar Rock, Inc. | Ltbp complex-specific inhibitors of tgfb1 and uses thereof |
WO2023019019A2 (en) * | 2021-08-13 | 2023-02-16 | Abwiz Bio, Inc. | Humanization, affinity maturation, and optimization methods for proteins and antibodies |
WO2023034777A1 (en) | 2021-08-31 | 2023-03-09 | Abbott Laboratories | Methods and systems of diagnosing brain injury |
AU2022354059A1 (en) | 2021-09-30 | 2024-03-28 | Abbott Laboratories | Methods and systems of diagnosing brain injury |
WO2023114978A1 (en) | 2021-12-17 | 2023-06-22 | Abbott Laboratories | Systems and methods for determining uch-l1, gfap, and other biomarkers in blood samples |
WO2023129942A1 (en) | 2021-12-28 | 2023-07-06 | Abbott Laboratories | Use of biomarkers to determine sub-acute traumatic brain injury (tbi) in a subject having received a head computerized tomography (ct) scan that is negative for a tbi or no head ct scan |
WO2023150652A1 (en) | 2022-02-04 | 2023-08-10 | Abbott Laboratories | Lateral flow methods, assays, and devices for detecting the presence or measuring the amount of ubiquitin carboxy-terminal hydrolase l1 and/or glial fibrillary acidic protein in a sample |
WO2024006876A1 (en) | 2022-06-29 | 2024-01-04 | Abbott Laboratories | Magnetic point-of-care systems and assays for determining gfap in biological samples |
WO2024059708A1 (en) | 2022-09-15 | 2024-03-21 | Abbott Laboratories | Biomarkers and methods for differentiating between mild and supermild traumatic brain injury |
Family Cites Families (51)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US126603A (en) | 1872-05-07 | Improvement in machines for sawing staves | ||
US4399216A (en) | 1980-02-25 | 1983-08-16 | The Trustees Of Columbia University | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
US4634665A (en) | 1980-02-25 | 1987-01-06 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
US5179017A (en) | 1980-02-25 | 1993-01-12 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
US4510245A (en) | 1982-11-18 | 1985-04-09 | Chiron Corporation | Adenovirus promoter system |
GB8308235D0 (en) | 1983-03-25 | 1983-05-05 | Celltech Ltd | Polypeptides |
US5168062A (en) | 1985-01-30 | 1992-12-01 | University Of Iowa Research Foundation | Transfer vectors and microorganisms containing human cytomegalovirus immediate-early promoter-regulatory DNA sequence |
FR2577377B1 (fr) * | 1985-02-21 | 1989-06-16 | Albaret Sa | Procede pour eviter le patinage d'un tracteur equipe d'un relevage hydraulique avec un outil enfoui dans le sol, et equipement de tracteur pour mettre en oeuvre ce procede |
US4772685A (en) * | 1985-10-02 | 1988-09-20 | Merck & Co., Inc. | Immunogenic peptides of human interleukin-1 and the corresponding anti-peptide antibodies |
US4968615A (en) | 1985-12-18 | 1990-11-06 | Ciba-Geigy Corporation | Deoxyribonucleic acid segment from a virus |
DE768377T1 (de) | 1988-09-02 | 1998-01-02 | Dyax Corp | Herstellung und Auswahl von Rekombinantproteinen mit verschiedenen Bindestellen |
US5223409A (en) | 1988-09-02 | 1993-06-29 | Protein Engineering Corp. | Directed evolution of novel binding proteins |
KR0184860B1 (ko) | 1988-11-11 | 1999-04-01 | 메디칼 리써어치 카운실 | 단일영역 리간드와 이를 포함하는 수용체 및 이들의 제조방법과 이용(법) |
DE69120146T2 (de) | 1990-01-12 | 1996-12-12 | Cell Genesys Inc | Erzeugung xenogener antikörper |
US5427908A (en) | 1990-05-01 | 1995-06-27 | Affymax Technologies N.V. | Recombinant library screening methods |
GB9015198D0 (en) | 1990-07-10 | 1990-08-29 | Brien Caroline J O | Binding substance |
DK0585287T3 (da) | 1990-07-10 | 2000-04-17 | Cambridge Antibody Tech | Fremgangsmåde til fremstilling af specifikke bindingsparelementer |
CA2090126C (en) | 1990-08-02 | 2002-10-22 | John W. Schrader | Methods for the production of proteins with a desired function |
US5633425A (en) | 1990-08-29 | 1997-05-27 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US6255458B1 (en) | 1990-08-29 | 2001-07-03 | Genpharm International | High affinity human antibodies and human antibodies against digoxin |
ES2246502T3 (es) | 1990-08-29 | 2006-02-16 | Genpharm International, Inc. | Animales no humanos transgenicos capaces de producir anticuerpos heterologos. |
US5661016A (en) | 1990-08-29 | 1997-08-26 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
US5625126A (en) | 1990-08-29 | 1997-04-29 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5877397A (en) | 1990-08-29 | 1999-03-02 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
US5545806A (en) | 1990-08-29 | 1996-08-13 | Genpharm International, Inc. | Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5770429A (en) | 1990-08-29 | 1998-06-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5814318A (en) | 1990-08-29 | 1998-09-29 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
ES2113940T3 (es) | 1990-12-03 | 1998-05-16 | Genentech Inc | Metodo de enriquecimiento para variantes de proteinas con propiedades de union alteradas. |
DK1024191T3 (da) | 1991-12-02 | 2008-12-08 | Medical Res Council | Fremstilling af autoantistoffer fremvist på fag-overflader ud fra antistofsegmentbiblioteker |
ATE261493T1 (de) * | 1992-05-22 | 2004-03-15 | Univ Montana State | Antikörper mit spezifikäten gegen mehrere adhäsionsmoleküle |
US5622701A (en) * | 1994-06-14 | 1997-04-22 | Protein Design Labs, Inc. | Cross-reacting monoclonal antibodies specific for E- and P-selectin |
NZ288997A (en) * | 1994-06-24 | 1999-01-28 | Immunex Corp | Controlled release pharmaceutical formulation comprising polypeptide encapsulated in alginate |
ES2304786T3 (es) | 1995-04-27 | 2008-10-16 | Amgen Fremont Inc. | Anticuerpos anti-il-8 humanos, derivados a partir de xenoratones inmunizados. |
EP0823941A4 (en) | 1995-04-28 | 2001-09-19 | Abgenix Inc | HUMAN ANTIBODIES DERIVED FROM IMMUNIZED XENO MOUSES |
EP0859841B1 (en) | 1995-08-18 | 2002-06-19 | MorphoSys AG | Protein/(poly)peptide libraries |
RU2270030C2 (ru) | 1996-02-09 | 2006-02-20 | Абботт Байотекнолоджи эЛтиди. | СПОСОБ ИНГИБИРОВАНИЯ АКТИВНОСТИ ЧЕЛОВЕЧЕСКОГО TNFα (ВАРИАНТЫ), ПРИМЕНЕНИЕ ВЫДЕЛЕННОГО АНТИТЕЛА ЧЕЛОВЕКА ИЛИ ЕГО АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩЕГО ФРАГМЕНТА В КАЧЕСТВЕ КОМПОНЕНТА ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА (ВАРИАНТЫ) И ВЫДЕЛЕННОЕ ЧЕЛОВЕЧЕСКОЕ АНТИТЕЛО ИЛИ ЕГО АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЙ ФРАГМЕНТ |
US6300065B1 (en) | 1996-05-31 | 2001-10-09 | Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Yeast cell surface display of proteins and uses thereof |
IL119587A (en) | 1996-11-07 | 2000-12-06 | Univ Ramot | Method of preparing and for obtaining bimolecular interactions |
DK1500329T3 (da) | 1996-12-03 | 2012-07-09 | Amgen Fremont Inc | Humane antistoffer, der specifikt binder TNF-alfa |
WO1998031700A1 (en) | 1997-01-21 | 1998-07-23 | The General Hospital Corporation | Selection of proteins using rna-protein fusions |
WO1998047343A2 (en) | 1997-04-04 | 1998-10-29 | Biosite Diagnostics, Inc. | Antibodies or binding protein libraries displayed on phage, cells, or other replicatable genetic packages |
AU7171098A (en) | 1997-05-01 | 1998-11-24 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Directed evolution of enzymes and antibodies |
US20020029391A1 (en) | 1998-04-15 | 2002-03-07 | Claude Geoffrey Davis | Epitope-driven human antibody production and gene expression profiling |
US6680380B1 (en) | 1998-09-18 | 2004-01-20 | Schering Corporation | Nucleic acids encoding mammalian interleukin-1ζ, related reagents and methods |
KR101222450B1 (ko) | 1999-03-25 | 2013-01-16 | 애보트 게엠베하 운트 콤파니 카게 | 사람 il-12에 결합하는 사람 항체 및 이의 제조방법 |
GB0001448D0 (en) | 2000-01-21 | 2000-03-08 | Novartis Ag | Organic compounds |
DE60137421D1 (de) | 2000-06-29 | 2009-03-05 | Abbott Lab | Antikörper mit zwei spezifizitäten und verfahren zur deren herstellung und verwendung |
DE60237282D1 (de) | 2001-06-28 | 2010-09-23 | Domantis Ltd | Doppelspezifischer ligand und dessen verwendung |
PT1517921E (pt) | 2002-06-28 | 2006-09-29 | Domantis Ltd | Ligandos duplamente especificos com semi-vida no soro aumentada |
TW200730539A (en) | 2005-12-01 | 2007-08-16 | Domantis Ltd | Noncompetitive domain antibody formats that bind interleukin 1 receptor type 1 |
EP2114443A4 (en) | 2006-12-29 | 2011-08-10 | Abbott Lab | IL-1A / IL-1B ANTIBODY WITH DOUBLE SPECIFICITY |
-
2001
- 2001-06-28 DE DE60137421T patent/DE60137421D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-28 PL PL359995A patent/PL208069B1/pl not_active IP Right Cessation
- 2001-06-28 EP EP10182393A patent/EP2386575A3/en not_active Withdrawn
- 2001-06-28 CN CN2010105838125A patent/CN102120773B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-28 AT AT01950668T patent/ATE420958T1/de not_active IP Right Cessation
- 2001-06-28 EP EP15154039.0A patent/EP2899210A3/en not_active Withdrawn
- 2001-06-28 NZ NZ523080A patent/NZ523080A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-06-28 MX MXPA02012867A patent/MXPA02012867A/es active IP Right Grant
- 2001-06-28 BR BR0112026-3A patent/BR0112026A/pt not_active IP Right Cessation
- 2001-06-28 CZ CZ2003291A patent/CZ2003291A3/cs unknown
- 2001-06-28 AU AU2001271636A patent/AU2001271636A1/en not_active Abandoned
- 2001-06-28 CN CN01814818A patent/CN1451043A/zh active Pending
- 2001-06-28 IL IL15356701A patent/IL153567A0/xx unknown
- 2001-06-28 SK SK115-2003A patent/SK1152003A3/sk not_active Application Discontinuation
- 2001-06-28 EP EP01950668A patent/EP1297142B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-28 WO PCT/US2001/020755 patent/WO2002002773A2/en active Application Filing
- 2001-06-28 US US09/894,550 patent/US7491516B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-28 KR KR1020087018593A patent/KR20080074231A/ko not_active Application Discontinuation
- 2001-06-28 PE PE2001000641A patent/PE20020132A1/es not_active Application Discontinuation
- 2001-06-28 HU HU0301002A patent/HUP0301002A3/hu unknown
- 2001-06-28 CN CNA2009101351381A patent/CN101525384A/zh active Pending
- 2001-06-28 UY UY26807A patent/UY26807A1/es not_active Application Discontinuation
- 2001-06-28 KR KR1020027017916A patent/KR100919593B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2001-06-28 JP JP2002508013A patent/JP4955185B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-28 EP EP09150437A patent/EP2042518A3/en not_active Withdrawn
- 2001-06-28 CA CA2411374A patent/CA2411374C/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-28 ES ES01950668T patent/ES2319866T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-29 TW TW090115948A patent/TWI307716B/zh not_active IP Right Cessation
- 2001-06-29 TW TW094102248A patent/TW200516083A/zh unknown
-
2002
- 2002-12-12 ZA ZA200210109A patent/ZA200210109B/en unknown
- 2002-12-20 IL IL153567A patent/IL153567A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-12-27 NO NO20026239A patent/NO20026239L/no not_active Application Discontinuation
- 2002-12-27 EC EC2002004409A patent/ECSP024409A/es unknown
-
2003
- 2003-01-21 BG BG107483A patent/BG66209B1/bg unknown
- 2003-08-27 HK HK03106152.8A patent/HK1055316A1/xx unknown
-
2008
- 2008-12-11 US US12/316,340 patent/US8475766B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2010
- 2010-02-14 IL IL203955A patent/IL203955A/en not_active IP Right Cessation
-
2011
- 2011-08-31 JP JP2011188635A patent/JP2012031178A/ja active Pending
-
2013
- 2013-05-23 US US13/900,841 patent/US20140155579A1/en not_active Abandoned
-
2014
- 2014-08-26 US US14/469,122 patent/US20140378666A1/en not_active Abandoned
-
2015
- 2015-03-05 US US14/639,985 patent/US20150175694A1/en not_active Abandoned
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR100675791B1 (ko) * | 2005-02-04 | 2007-02-02 | 제주대학교 산학협력단 | 육상어류양식장용 자동먹이공급시스템 |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR100919593B1 (ko) | 이중 특이성 항체 및 이의 제조 방법 및 이를 포함하는 조성물 | |
KR100951067B1 (ko) | 사람 인터류킨-18에 결합하는 항체 및 이를 제조하고사용하는 방법 | |
AU2007202323C1 (en) | Dual specificity antibodies and methods of making and using | |
AU2013203432A1 (en) | Dual specificity antibodies and methods of making and using | |
AU2012200225A1 (en) | Dual specificity antibodies and methods of making and using |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A201 | Request for examination | ||
E902 | Notification of reason for refusal | ||
E902 | Notification of reason for refusal | ||
A107 | Divisional application of patent | ||
E902 | Notification of reason for refusal | ||
E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
GRNT | Written decision to grant | ||
FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20120830 Year of fee payment: 4 |
|
FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20130830 Year of fee payment: 5 |
|
LAPS | Lapse due to unpaid annual fee |