KR20110110349A - Ｉｌ-1 결합 단백질 - Google Patents

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antibody
ser
syndrome
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충-밍 셰
청빈 우
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Abstract

본 발명은 IL-1α 결합 단백질을 포함한다. 구체적으로, 본 발명은 키메라 항체, CDR 이식 항체 및 사람화된 항체인 항체에 관한 것이다. 본 발명의 항체는 IL-1α에 높은 친화성을 나타내고 IL-1α 활성을 중화시킨다. 본 발명의 항체는 전체 길이의 항체 또는 이의 항원결합부일 수 있다. 본 발명의 항체를 제조하는 방법 및 사용하는 방법도 제공된다. 본 발명의 항체 또는 항체부는, 예컨대 IL-1α 활성이 유해한 장애를 앓고 있는 사람 피검체에서, IL-1α를 검출하고 IL-1α 활성을 억제하는데 유용하다.

Description

ＩＬ-1 결합 단백질{IL-1 binding proteins}
관련 출원에 대한 상호참조
본 출원은 2009년 1월 29일자로 출원된 미국 임시출원 제61/206,250호에 대해 우선권을 주장한다.
발명의 분야
본 발명은 IL-1 결합 단백질, 및 구체적으로 IL-1 매개 질환의 예방 및/또는 치료에 있어서 이의 용도에 관한 것이다.
인터류킨-1(IL-1) 및 종양괴사인자(TNF)와 같은 사이토킨은 염증 과정의 매개인자로서 확인된 단핵구 및 대식세포와 같은 다양한 세포에 의해 생산되는 분자이다. 인터류킨-1은 열, 프로스타글란딘 합성(예: 섬유아세포, 근육 세포 및 내피세포에서), T-림프구 활성화 및 인터류킨 2 생산을 비롯한 광범위한 생물학적 및 생리학적 효과가 있는 사이토킨이다.
인터류킨-1 슈퍼패밀리: IL-1 슈퍼패밀리의 본래 구성원은 IL-1α, IL-1β 및 IL-1 수용체 길항제(IL-1RA)이다. IL-1α 및 -β는 감염에 대한 면역 방어에 연관된 염증촉진성(pro-inflammatory) 사이토킨이다. IL-1Rα는 IL-1α 및 IL-1β와 수용체 결합에 대해 경쟁하는 분자로서, 이들의 면역 활성화에서의 역할을 차단하다. 최근에는 IL-1 슈퍼패밀리에 IL-18(Dinarello CA (1994) FASEB J. 8 (15): 1314-25; Huising, MO, et. al., (2004) Dev. Comp. Immunol. 28 (5): 395-413) 및 IL-1α, IL-1β 또는 IL-1RA와 구조적 상동성이 있는 6개 이상의 유전자를 비롯한 다른 분자들의 추가가 관찰되었다. 상기 후자의 6 구성원들은 IL1F5, IL1F6, IL1F7, IL1F8, IL1F9 및 IL1F10이라 명명된다. 따라서, IL-1α, IL-1β 및 IL-1RA는 각각 IL-1F1, IL-1F2 및 IL-1F3으로 재명명되었다(Sims JE, et al., (2001) Trends Immunol. 22 (10): 536-7; Dunn E et al.,(2001) Trends Immunol. 22 (10): 533-6 참조). IL-1 패밀리의 또 다른 추정상의 구성원으로서, 최근에 IL-33 또는 IL-1F11로 불리는 구성원이 기술되었지만, 이 명칭은 HGNC 유전자 패밀리 명명 데이터베이스에 공식적인 인정을 받지 못했다.
IL-1α 및 IL-1β: IL-1α 및 IL-1β는 대식세포, 단핵구 및 수지상 세포에 의해 생산된다. 이들은 감염에 대한 신체의 염증 반응에서 중요한 부분을 구성한다. 이 사이토킨들은 내피 세포에서 부착 인자의 발현을 증가시켜 병원체와 싸우는 세포인 백혈구의 감염 부위로의 이주를 가능하게 하고 시상하부의 열조절 중심을 재설정하여, 열로서 발현되는 체온 증가를 초래한다. 따라서, IL-1은 내인성 발현원이라 불린다. 체온 증가는 감염과 싸우는 신체의 면역계를 돕는다, IL-1은 또한 조혈작용의 조절에도 중요하다. 또한, 말초 조직에서 IL-1β 생산은 열과 연관된 통각과민(통증에 대한 증가된 감수성)과도 연관이 있다(Morgan MM, et al., (2004) Brain Res. 1022 (1-2): 96-100). 대부분, 이러한 IL-1의 두 형태는 동일한 세포 수용체에 결합한다. 이 수용체는 다른 특정 수용체와 대부분 공유하는 경로를 통해 세포내 시그널을 전달하는 2개의 관련된, 하지만 동일하지는 않은 서브유닛으로 구성된다. 이들은 선천 면역 수용체의 Toll 패밀리 및 IL-18의 수용체를 포함한다. 또한, IL-1의 두 형태는 생물학적 성질이 유사한데, 그 예로는 열 유도, 서파수면 및 호중구증가, T- 및 B-림프구 활성화, 섬유아세포 증식, 특정 세포의 세포독성, 콜라게나제의 유도, 간의 급성기 단백질의 합성 및 콜로니 자극 인자 및 콜라겐의 생산 증가를 포함한다.
IL-1의 다른 두 형태를 암호화하는 cDNA는 분리 및 발현되었고; 이러한 cDNA는 IL-1β(Auron et al . (1984) Proc . Natl . Acad . Sci . USA 81:7909) 및 IL-1α(Lomedico et al . (1984) Nature 312:458)라는 2가지 다른 유전자 산물을 나타낸다. IL-1β는 mRNA 및 단백질 수준 모두에서 사람 단핵구에 의해 생산되는 주요 형태이다. 사람 IL-1의 2가지 형태는 26% 아미노산 상동성만을 공유한다. 이들의 상이한 폴리펩타이드 서열에도 불구하고, IL-1의 두 형태는 IL-1 분자의 독특한 영역에 아미노산 상동성이 국한된다는 점에서 구조적 유사성이 있다(Auron et al . (1985) J. Mol . Cell Immunol . 2:169).
IL-1α 및 IL-1β는 전구체 펩타이드로서 생산된다. 환언하면, 이들은 긴 단백질로서 제조되고, 그 다음 성숙 단백질이라 불리는 짧은 활성 분자로 프로세싱된다. 예컨대, 성숙 IL-1β는 카스파제-1 또는 인터류킨-1 전환 효소(ICE)라 불리는 카스파제 패밀리 단백질의 특정 구성원에 의해 절단된 후 전구-IL-1β로부터 방출된다. 사람 IL-1 슈퍼패밀리의 각 구성원은 성숙 형태의 3차원 구조가 배럴형 단백질을 생산하는 12-14 β-쇄로 구성되어 있다.
IL-1α는 다양한 면역 반응, 염증 과정 및 조혈에 연관되어 있는 다면발현성 사이토킨이다. IL-1α는 활성화된 대식세포에 의해 생산되고, IL-2 방출, B-세포 성숙 및 증식, 및 섬유아세포 성장인자 활성을 유도하여 흉선세포 증식을 자극한다. IL-1α 단백질은 염증 반응에 관여하여, 내인성 발열원으로 확인되어 있고, 활막 세포로부터 프로스타글란딘 및 콜라게나제의 방출을 자극하는 것으로 보고되어 있다. 이것은 전구단백질로서 생산되어 칼파인에 의해 단백분해적 프로세싱되어, 아직 충분한 연구가 되어 있지 않은 기전으로 방출된다. 이 유전자와 8개의 다른 인터류킨 1 패밀리 유전자는 염색체 2에서 사이토킨 유전자 클러스터(cluster)를 형성한다. IL-1α 및 이의 질병-유발 효과는 문헌[Ibelgaufts, Lexikon Zytokine(Cytokine Dictionary), Medikon Verlag, Munich 1992] 및 여기에 인용된 문헌에 상세하게 기술되어 있다. 또한, 문헌[예컨대, Oppenheimet al., Immunology Today 7 (1986) 45-56, Durum et al., Ann. Rev. Immunol. 3 (1985) 263-287 및 Synnons et al., Lymphokine Research 8 (1989) 365-372]에는 IL-1α의 바람직하지 않은 효과에 대해 언급되어 있다. IL-1α는 본래 연골 재흡수를 증가시키는 효과로 인하여 "카타볼린(catabolin)"이라 불렸고, 활막 세포에서 콜라게나제 및 프로스타글란딘에 미치는 자극 효과로 인해 "단핵구 세포 인자"(MCF)라 불렸으며, 급성기 반응에 자극 효과가 있는 "백혈구 내인성 인자"(LEM)로서 불렸다. 이 외에도, IL-1α는 많은 여러 세포, 예컨대 단핵구, 대식세포, 섬유아세포, 내피세포 및 림프구에서 합성될 수 있고, 이 외에도 많은 세포들이 IL-1α에 대한 특이적 수용체를 보유하기 때문에, 광범위한 생물학적 활성 스펙트럼을 보유한다. 따라서, IL-1α가 특히 다양한 장애 및 장애의 증상들에서 유발인자로서 중심 위치를 차지하고 있다는 것을 이해할 수 있다. 이러한 장애들은 종종 현재 치료할 수 없거나 부적절한 치료만 할 수 있는 주로 중증 장애이다. 이러한 유전자들의 다형성은 류마티스성 관절염 및 알쯔하이머병과 연관이 있는 것으로 제안되었다. IL-1은 일반적으로 많은 사람 질환, 예컨대 관절염, 폐섬유증, 중추신경계 질환, 진성당뇨병 및 특정 심혈관 질환에 연관되어 있다.
이에, 당업계에는 IL-1α에 결합할 수 있는 향상된 항체가 필요한 실정이다. 항체는 IL-1α에 결합하는 것이 바람직하다. 항체는 IL-1α를 중화시킬 수 있는 것이 바람직하다. 본 발명은 IL-1α에 결합할 수 있고 높은 친화성으로 결합할 수 있으며, IL-1α에 결합하여 중화시킬 수 있는, 결합 단백질, CDR 이식 항체, 사람화된 항체 및 이의 단편의 신규 패밀리를 제공한다. 본 발명은 IL-1α를 억제하는 치료 수단을 제공하고, IL-1α의 증가된 수준과 연관된 질환, 특히 염증 장애를 치료하는 조성물 및 방법을 제공한다.
본 발명은 IL-1α에 결합할 수 있고 높은 친화성으로 결합할 수 있으며, IL-1α에 결합하여 중화시킬 수 있는, 결합 단백질, CDR 이식 항체, 사람화된 항체 및 이의 단편의 신규 패밀리를 제공한다. 본 발명은 IL-1α를 억제하는 치료 수단을 제공하고, IL-1α의 증가된 수준과 연관된 질환, 특히 염증 장애를 치료하는 조성물 및 방법을 제공한다. 한 관점에서, 본 발명은 사람 IL-1α에 결합할 수 있는, 서열번호 37, 서열번호 38, 서열번호 39, 서열번호 40, 서열번호 48, 서열번호 50, 서열번호 52 및 서열번호 54로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 아미노산 서열을 보유하는 가변 중쇄 폴리펩타이드를 포함하는 결합 단백질을 제공한다. 다른 관점에서, 본 발명은 사람 IL-1α에 결합할 수 있는, 서열번호 41, 서열번호 42, 서열번호 43, 서열번호 44, 서열번호 45, 서열번호 46, 서열번호 47, 서열번호 49, 서열번호 51, 서열번호 53 및 서열번호 55로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 아미노산 서열을 포함하는 가변 경쇄 폴리펩타이드를 포함하는 결합 단백질을 제공한다.
한 관점에서, 본 발명은 가변 중쇄 폴리펩타이드가 서열번호 37, 서열번호 38, 서열번호 39, 서열번호 40, 서열번호 48, 서열번호 50, 서열번호 52 및 서열번호 54로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 아미노산 서열을 보유하고 가변 경쇄 폴리펩타이드가 서열번호 41, 서열번호 42, 서열번호 43, 서열번호 44, 서열번호 45, 서열번호 46, 서열번호 47, 서열번호 49, 서열번호 51, 서열번호 53 및 서열번호 55로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 아미노산 서열을 포함하며, 사람 IL-1α에 결합할 수 있는 결합 단백질을 제공한다. 다른 관점에서, 결합 단백질은 서열번호 38 및 서열번호 44, 서열번호 40 및 서열번호 44, 서열번호 48 및 서열번호 49, 서열번호 50 및 서열번호 51, 서열번호 52 및 서열번호 53, 및 서열번호 54 및 서열번호 55로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 가변 중쇄 폴리펩타이드 및 가변 경쇄 폴리펩타이드를 포함한다. 전술한 결합 단백질은, 이 결합 단백질이 면역글로불린 분자, 디설파이드 결합된 Fv, 모노클로날 항체, scFv, 키메라 항체, 단일 도메인 항체, CDR-이식 항체, 디아바디, 사람화된 항체, 다특이성 항체, Fab, 이중 특이성 항체, DVD, Fab', 이특이성 항체, F(ab')2 또는 Fv이다. 다른 관점에서, 전술한 결합 단백질은 사람 IgM 불변 도메인, 사람 IgG4 불변 도메인, 사람 IgG1 불변 도메인, 사람 IgE 불변 도메인, 사람 IgG2 불변 도메인, 사람 IgG3 불변 도메인 및 사람 IgA 불변 도메인으로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 중쇄 면역글로불린 불변 도메인을 포함한다. 다른 관점에서, 본 발명의 결합 단백질은 서열번호 2 및 서열번호 3으로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 아미노산 서열을 보유하는 중쇄 불변 영역 및 서열번호 4 및 서열번호 5로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 아미노산 서열을 보유하는 경쇄 불변 영역을 추가로 포함한다.
본 발명의 결합 단백질은 사람 IL-1α의 생물학적 기능을 조절할 수 있고, 또한 사람 IL-1α를 중화시킬 수 있다. 한 관점에서, 상기 결합 단백질은 표면 플라즈몬 공명으로 측정시, 적어도 약 102M-1s-1; 적어도 약 103M-1s-1; 적어도 약 104M-1s-1; 적어도 약 105M-1s-1; 및 적어도 약 106M-1s-1로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 상기 표적에 대한 온 속도 상수(on rate constant: Kon)를 갖는다. 다른 관점에서, 상기 결합 단백질은 표면 플라즈몬 공명으로 측정시, 최대 약 10-3s-1; 최대 약 10-4s-1; 최대 약 10-5s-1; 및 최대 약 10-6s-1로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 상기 표적에 대한 오프 속도 상수(off rate constant: Koff)를 갖는다. 다른 관점에서, 상기 결합 단백질은 최대 약 10-7 M; 최대 약 10-8 M; 최대 약 10-9 M; 최대 약 10-10 M; 최대 약 10-11 M; 최대 약 10-12 M; 및 최대 약 10-13 M로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 상기 표적에 대한 해리 상수(KD)를 갖는다. 또한, 상기 결합 단백질은 1.34x10-9 M; 1.35x10-9 M; 2.09x10-9 M; 2.8x10-11 M; 1x10-11 M; 3.1x10-11 M; 3.2x 10-11 M; 및 3.3x10-11 M로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 IL-1α에 대한 해리 상수(KD)를 갖는다.
본 발명의 결합 단백질은 면역부착 분자, 영상화제, 치료제 및 세포독성제로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 제제를 추가로 포함한다. 영상화제는 3H, 14C, 35S, 90Y, 99Tc, 111In, 125I, 131I, 177Lu, 166Ho 및 153Sm을 포함하되, 이에 국한되지 않는 방사능표지, 효소, 형광 표지, 발광 표지, 생물발광 표지, 자성 표지 또는 비오틴일 수 있다. 치료제 또는 세포독성제는 항대사산물, 알킬화제, 항생제, 성장 인자, 사이토킨, 항혈관형성제, 항유사분열제, 안트라사이클린, 독소 및 아폽토시스제일 수 있다.
다른 양태에서, 항체 작제물은 글리코실화되어 있다. 글리코실화는 사람 글리코실화 패턴인 것이 바람직하다.
다른 양태에서, 앞에 개시된 결합 단백질은 결정으로서 존재한다. 결정은 무담체 약제학적 제어 방출형 결정인 것이 바람직하다. 한 양태에서, 결정화된 결합 단백질은 이 결합 단백질의 가용성 대응물보다 긴 생체내 반감기를 갖는다. 다른 양태에서, 결정화된 결합 단백질은 결정화 후 생물학적 활성을 유지한다.
본 발명의 한 관점은 본 명세서에 개시된 어느 하나의 결합 단백질을 암호화하는 분리된 핵산에 관한 것이다. 추가 양태는 본 명세서에 개시된 분리된 핵산을 포함하는 벡터를 제공하며, 이 벡터는 pcDNA; pTT(Durocher et al., Nucleic Acids Research 2002, Vol 30, No.2); pTT3(추가 다중 클로닝 부위를 보유하는 pTT); pEFBOS(Mizushima, S. and Nagata, S.,(1990) Nucleic Acids Research Vol 18, No. 17); pBV; pJV; 및 pBJ로 이루어진 그룹 중에서 선택된다.
다른 관점에서, 숙주 세포는 본 명세서에 개시된 벡터로 형질전환된다. 한 양태에서, 숙주 세포는 원핵생물 세포이며, 예컨대 이.콜라이(E.Coli)가 포함되나, 이에 국한되는 것은 아니다. 관련 양태에서, 숙주 세포는 진핵 세포로서, 원생생물 세포, 동물 세포, 식물 세포 및 진균 세포가 포함되나, 이에 국한되는 것은 아니다. 한 관점에서, 숙주 세포는 CHO 및 COS를 포함하지만 이에 제한되지 않는 포유동물 세포; 또는 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)와 같은 진균 세포; 또는 Sf9과 같은 곤충 세포이다.
본 발명의 다른 관점은 상기된 숙주 세포 중 임의의 하나를 IL-1α에 결합하는 결합 단백질을 생산하기에 충분한 조건하에 배양 배지에서 배양하는 단계를 포함하여, IL-1α에 결합하는 결합 단백질을 생산하는 방법을 제공한다. 다른 양태는 전술한 방법에 따라 생산되는 결합 단백질을 제공한다.
하나의 양태는 결합 단백질 방출용 조성물을 제공하고 이때 당해 조성물은 상기된 바와 같은 결정화된 결합 단백질, 결정화된 항체 작제물 또는 결정화된 항체 접합체 및 성분; 및 적어도 하나의 중합체 담체를 포함하는 제형을 포함한다. 한 관점에서, 중합체 담체는 폴리(아크릴산), 폴리(시아노아크릴레이트), 폴리(아미노산), 폴리(무수물), 폴리(뎁시펩타이드), 폴리(에스테르), 폴리(락트산), 폴리(락틱-코-글리콜산) 또는 PLGA, 폴리(b-하이드록시부티레이트), 폴리(카프로락톤), 폴리(디옥사논); 폴리(에틸렌 글리콜), 폴리(하이드록시프로필) 메타크릴아미드, 폴리[(오르가노)포스파젠], 폴리(오르토 에스테르), 폴리(비닐 알콜), 폴리(비닐피롤리돈), 말레산 무수물-알킬 비닐 에테르 공중합체, 플루론산 폴리올, 알부민, 알기네이트, 셀룰로스 및 셀룰로스 유도체, 콜라겐, 피브린, 젤라틴, 히알루론산, 올리고사카라이드, 글리카미노글리칸, 황산화 폴리사카라이드, 이들의 블렌드 및 공중합체로 이루어진 그룹 중 하나 이상으로부터 선택된 중합체이다. 다른 관점에서, 상기 성분은 알부민, 수크로스, 트레할로스, 락티톨, 젤라틴, 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린, 메톡시폴리에틸렌 글리콜 및 폴리에틸렌 글리콜로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 또 다른 양태는 상기된 유효량의 조성물을 포유동물에게 투여하는 단계를 포함하여, 포유동물을 치료하는 방법을 제공한다.
본 발명은 또한 상기된 바와 같은 결합 단백질 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 추가의 양태에서, 약제학적 조성물은 IL-1α 활성이 유해한 장애를 치료하기 위한 하나 이상의 추가 치료제를 포함한다. 한 관점에서, 추가 제제는 치료제, 영상화제, 세포독성 제제, 혈관형성 억제제; 키나제 억제제; 공동 자극 분자 차단제; 부착 분자 차단제; 항-사이토킨 항체 또는 이의 기능성 단편; 메토트렉세이트; 사이클로스포린; 라파마이신; FK506; 검출가능한 표지 또는 리포터; TNF 길항제; 항류마티스제; 근육 이완제, 마약류, 비스테로이드 소염 약물(NSAID), 진통제, 마취제, 진정제, 국소 마취제, 신경근 차단제, 항미생물제, 건선치료제, 코르티코스테로이드, 동화작용 스테로이드, 에리트로포이에틴, 면역화제, 면역글로불린, 면역억제제, 성장 호르몬, 호르몬 대체 약물, 방사선 약제, 항우울증제, 항정신병제, 자극제, 천식 약물, 베타 작용제, 흡입 스테로이드, 경구 스테로이드, 에피네프린 또는 유사체, 사이토킨 및 사이토킨 길항제로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
다른 측면에서, 본 발명은 상기된 결합 단백질과 사람 IL-1α를 접촉시켜, 사람 IL-1α 활성이 억제되도록 함을 포함하여, 사람 IL-1α 활성을 억제하는 방법을 제공한다. 관련 관점으로, 본 발명은 상기한 결합 단백질을 사람 피검체에게 투여하여 사람 피검체의 사람 IL-1α 활성이 억제되고 치료가 달성되도록 함을 포함하여, IL-1α 활성이 유해한 장애를 앓고 있는 사람 피검체의 사람 IL-1α 활성을 억제하는 방법을 제공한다.
다른 관점에서, 본 발명은 피검체의 IL-1α 연관 장애를 치료하거나(예컨대, 치유, 억제, 경감, 지연시키거나 또는 개시를 차단하거나, 또는 재발을 차단하는) 또는 IL-1α 연관 장애를 예방하는 방법을 제공한다. 이 방법은 IL-1α 결합제(특히 길항제), 예컨대 본 명세서에 기술된 바와 같은 항-IL-1α 항체 또는 이의 단편을 IL-1α 연관 장애를 치료하거나 예방하기에 충분한 양으로 투여하는 것을 포함한다. IL-1α 길항제, 예컨대 항-IL-1α 항체 또는 이의 단편은 단독으로 또는 본 명세서에 기술된 바와 같은 다른 치료 방식과 함께 피검체에게 투여할 수 있다.
다른 관점에서, 본 발명은 시험관내(예컨대, 생물학적 샘플, 예컨대 혈청, 혈장, 조직, 생검)에서 샘플의 IL-1α의 존재를 검출하는 방법을 제공한다. 당해 방법은 장애, 예컨대 면역 세포-연관 장애를 진단하는데 사용될 수 있다. 이 방법은 (i) 샘플 또는 대조 샘플을 본 명세서에 기술된 바와 같은 항-IL-1α 항체 또는 이의 단편과 접촉시키는 단계; 및 (ii) 상기 항-IL-1α 항체 또는 이의 단편과 샘플 또는 대조 샘플 간에 복합체 형성을 검출하는 단계를 포함하며, 이때 대조 샘플과 비교하여 샘플에서 나타나는 복합체 형성의 통계학상 유의적인 변화가 샘플내 IL-1α의 존재를 시사한다.
또 다른 관점에서, 본 발명은 생체내(예컨대, 피검체의 생체내 조영술)에서 IL-1α의 존재를 검출하는 방법을 제공한다. 이 방법은 장애, 예컨대 IL-1α 연관 장애를 진단하는데 사용될 수 있다. 이 방법은 (i) 본 명세서에 기술된 바와 같은 항-IL-1α 항체 또는 이의 단편을, 이 항체 또는 단편과 IL-1α의 결합을 허용하는 조건 하에, 피검체 또는 대조 피검체에게 투여하는 단계; 및 (ii) 상기 항체 또는 단편과 IL-1α 간에 복합체 형성을 검출하는 단계를 포함하고, 이때 대조 피검체와 비교하여 피검체가 나타내는 복합체 형성의 통계학상 유의적인 변화가 IL-1α의 존재를 시사한다.
다른 관점에서, 본 발명의 결합 단백질은 류마티스성 관절염, 골관절염, 연소성 만성 관절염, 패혈성 관절염, 라임 관절염, 건선 관절염, 반응성 관절염, 척추관절증, 전신 홍반 루푸스, 크론 질환, 궤양 대장염, 염증성 장 질환, 인슐린 의존성 진성 당뇨병, 갑상선염, 천식, 알레르기성 질환, 건선, 피부경화증, 이식편 대 숙주 질환, 기관 이식 거부, 기관 이식과 관련된 급성 또는 만성 면역 질환, 유육종증, 동맥경화증, 파종성 혈관내 응고, 가와사키병, 그레이브스병, 신증후군, 만성 피로 증후군, 베게너 육아종증, 헤노흐-쇤라인 자반증, 신장의 현미경적 혈관염, 만성 활성 간염, 포도막염, 패혈성 쇼크, 독소 쇼크 증후군, 패혈증 증후군, 악액질, 감염성 질환, 기생충 질환, 후천성 면역결핍 증후군, 급성 횡단성 척수염, 헌팅톤 무도병, 파킨슨병, 알츠하이머병, 뇌졸중, 원발성 담즙성 간경변, 용혈성 빈혈, 악성 종양, 심부전증, 심근경색, 애디슨병, 산발성 질환, 다분비선 제I형 결핍증 및 다분비선 제II형 결핍증, 슈미트 증후군, 성인성(급성) 호흡 곤란 증후군, 탈모증, 원형 탈모증, 혈청음성 관절증, 관절증, 라이터병, 건선성 관절증, 궤양성 대장염성 관절증, 장병성 윤활막염, 클라미디아증, 예르시니아 및 살모넬라 관련 관절증, 척추관절증, 죽종 질환/동맥경화증, 아토피성 알레르기, 자가면역 수포성 질환, 심상성 천포창, 낙엽성 천포창, 유천포창, 선상 IgA 질환, 자가면역 용혈성 빈혈, 쿰즈 양성 용혈성 빈혈, 후천성 악성 빈혈, 연소성 악성 빈혈, 근통성 뇌염/로얄 프리(Royal Free) 질환, 만성 점막 피부 칸디다증, 거대세포 동맥염, 원발성 경화성 간염, 잠복성 자가면역 간염, 후천성 면역결핍 질환 증후군, 후천성 면역결핍 관련 질환, B형 간염, C형 간염, 공통 가변성 면역결핍증(공통 가변성 감마글로불린저혈증), 확장형 심근증, 여성 불임증, 난소 부전증, 조숙 난소부전, 섬유성 폐 질환, 잠복성 섬유조직 폐포염, 후-염증성 간질성 폐질환, 간질성 폐렴, 결합 조직 질환 관련 간질성 폐 질환, 조합성 결합 조직 질환 관련 폐 질환, 전신성 경화증 관련 간질성 폐 질환, 류마티스성 관절염 관련 간질성 폐 질환, 전신 홍반 루푸스 관련 폐 질환, 피부근염/다발성 근염 관련 폐 질환, 쇼그렌 질환 관련 폐 질환, 강직성 척추염 관련 폐 질환, 혈관염 범발성 폐 질환, 혈철증 관련 폐 질환, 약물-유도된 간질성 폐 질환, 섬유증, 방사선 섬유증, 폐색성 세기관지염, 만성 호산구성 폐렴, 림프구성 침윤성 폐 질환, 감염후 간질성 폐 질환, 통풍성 관절염, 자가면역 간염, 1형 자가면역 간염(전형적 자가면역 또는 루포이드 간염), 2형 자가면역 간염(항-LKM 항체 간염), 자가면역 매개된 저혈당증, 흑색 극세포증에 따른 B형 인슐린 내성, 부갑상선 기능저하증, 기관 이식과 관련된 급성 면역 질환, 기관 이식과 관련된 만성 면역 질환, 골관절증, 원발성 경화성 담관염, 1형 건선, 2형 건선, 특발성 백혈구감소증, 자가면역 호중구감소증, 신장 질환 NOS, 사구체신염, 신장의 현미경적 혈관염, 라임병, 원판양 홍반성 낭창, 남성 불임증 특발증 또는 NOS, 정자 자가면역, 다발성 경화증(모든 아형), 교감성 안염, 결합 조직 질환에 속발성인 폐 고혈압증, 굿패스튜어 증후군, 결절성 다발성 동맥염의 폐 징후, 급성 류마티스성 열, 류마티스성 척추염, 스틸씨 병, 전신성 경화증, 쇼그렌 증후군, 다카야스 병/동맥염, 자가면역 혈소판감소증, 특발성 혈소판감소증, 자가면역 갑상선 질환, 갑상선 기능항진증, 갑상선종증 자가면역 갑상선 기능저하증(하시모토 병), 위축성 자가 면역 갑상선 기능저하증, 원발성 점액수종, 수정체성 포도막염, 원발성 혈관염, 백반증 급성 간 질환, 만성 간질환, 알콜성 경변, 알콜 유도 간 손상, 콜레오사타티스(choleosatatis), 특이체질성 간 질환, 약물 유도 간염, 비알콜성 지방간염, 알레르기 및 천식, B 그룹 스트렙토코커스 (GBS) 감염, 정신 장애(예를 들어, 우울증 및 정신분열증), Th2형 및 Th1형 매개 질환, 급성 및 만성 통증(상이한 형태의 통증), 및 폐암, 유방암, 위암, 방광암, 결장암, 췌장암, 난소암, 전립선암 및 직장암과 같은 암종 및 조혈 악성종양(백혈병 및 림프종), 아베타지방단백질혈증, 말초청색증, 급성 및 만성 기생충성 또는 감염성 과정, 급성 백혈병, 급성 림프성 모구성 백혈병 (ALL), 급성 골수 백혈병(AML), 급성 또는 만성 세균 감염, 급성 췌장염, 급성 신부전증, 선암종, 공기 이소성 심방박동, AIDS 치매 합병증, 알콜 유도 간염, 알레르기성 결막염, 알레르기성 접촉 피부염, 알레르기성 비염, 동종이식 거부, 알파-1-안티트립신 결핍, 근위축성 측삭 경화증, 빈혈, 앙기나 협심증, 전각 세포 변성, 항 cd3 치료, 항 인지질 증후군, 항-수용체 과민성 반응, 대동맥 및 말초 동맥류, 대동맥 해부, 동맥 고혈압, 동맥경화증, 확인맥 누공, 운동실조증, 심방세동 (지연 또는 발작성), 심방조동, 확인맥 막힘, B 세포 림프종, 골 이식 거부, 골수 이식 (BMT) 거부, 좌각차단, 버키트 림프종, 화상, 심장성 부정맥, 심장성 기절 증후군, 심장 종양, 심근증, 심폐 우회 염증 반응, 연골 이식 거부, 소뇌피질 변성, 소뇌 장애, 혼란 또는 다초점 심방 빈맥, 화학치료 관련 장애, 만성 골수성 백혈병(CML), 만성 알콜증, 만성 염증 병리, 만성 림프성 백혈병(CLL), 만성 폐쇄 폐 질환(COPD), 만성 살리실레이트 중독, 결장직장 암종, 울혈성 심부전, 결막염, 접촉성 피부염, 폐 심장, 관상 동맥 질환, 크로이츠펠트-야콥(Creutzfeldt-Jakob) 질환, 배양 음성 패혈증, 낭섬유증, 사이토킨 치료 관련 장애, 권투선수치매(Dementia pugilistica), 탈수초성 질환, 댕기 출혈열, 피부염, 피부학적 증상, 당뇨병, 진성 당뇨병, 당뇨병성 동맥경화 질환, 미만성 루이체 질환, 확장성 울혈성 심근증, 기저핵 장애, 중년 다운 증후군, CNS 도파민 수용체 차단 약물에 의해 유도된 약물 유도 운동 장애, 약물 과민증, 습진, 뇌척수염, 심내막염, 내분비질환, 후두개염, 엡스타인-바르 바이러스 감염, 피부홍통증, 추체외로 및 소뇌 장애, 가족성 적혈구잠식성 림프조직구증, 태아 흉선 이식 거부, 프리드리히 운동실조증, 기능성 말초 동맥 장애, 진균 패혈증, 가스괴저, 위궤양, 사구체신염, 임의의 기관 또는 조직 이식 거부, 그람 음성 패혈증, 그람 양성 패혈증, 세포내 유기체로 인한 육아종, 모발 세포 백혈병, 할레로르덴-스파츠 질환(Hallerrorden-Spatz disease), 하시모토 갑상선염, 고초열, 심장 이식 거부, 혈색소증, 혈액투석, 용혈성 요독증후군/혈전성 혈소판감소성 자반증, 출혈, 간염(A), 히스 다발 부정맥, HIV 감염/HIV 신경병증, 호지킨 질환, 과운동성 장애, 과민성 반응, 과민성 폐렴, 고혈압, 운동 부족 장애, 시상하부-뇌하수체-부신피질계 평가, 특발성 애디슨 질환, 특발성 폐 섬유증, 항체 매개 세포독성, 무력증, 유아 척추 근육 위축증, 대동맥 염증, 인플루엔자 a, 이온화 방사선 노출, 홍채섬모체염/자궁염/광학적 신경근염, 허혈 관류 손상, 허혈 뇌졸중, 연소성 류마티스 관절염, 연소성 척추 근육 위축증, 카포시 육종, 신장 이식 거부, 레지오넬라, 리슈마니아증, 나병, 피질척수계 병변, 지방부종, 간 이식 거부, 림프피부종, 말라리아, 악성 림프종, 악성 조직구증, 악성 흑색종, 수막염, 수막염 균혈증, 대사/특발성 질환, 편두통, 미토콘드리아 다중 시스템 장애, 복합 연결 조직 질환, 모노클로날 감마글로불린혈증, 다발성 골수종, 다발성 시스템 변성(만셀 데제린-토마스 쉬-드라거 및 마차도-조셉), 중증 근무력증, 마이코박테리움 아비움 인트라셀룰라레, 마이코박테리움 결핵, 골수이형성증후군, 심근 경색, 심근 허혈 장애, 비인두 암종, 신생아 만성 폐 질환, 신염, 신증, 신경퇴행성 질환, 신경성 I 근육 위축증, 호중구감소성 발열, 비-호지킨 림프종, 복부 대동맥 및 이의 지류 폐색, 폐색성 동맥 질환, okt3 치료, 고환염/부고환염, 고환염/혈관절제술 반전 과정, 기비대, 골다공증, 췌장 이식 거부, 췌장 암종, 부수종양성 증후군/악성 고칼슘혈증, 부갑상선 이식 거부, 골반 염증 질환, 다년성 비염, 심막 질환, 말초 동맥경화 질환, 말초 혈관 장애, 복막염, 악성빈혈, 폐포자충 폐렴, 폐렴, POEMS 증후군 (다발신경병증, 장기비대, 내분비질환, 모노클로날 감마글로불린혈증, 및 피부 변화 증후군), 관류후 증후군, 펌프후 증후군, MI 후 심장절개 증후군, 자간전증, 전진적 상핵 마비, 원발성 폐 고혈압, 방사선 치료, 레이노드 현상 및 질환, 레이노드 질환, 레프섬 질환, 일반 협소 QRS 심근증, 신혈관성고혈압, 재관류 손상, 제한성 심근병증, 육종, 피부경화증, 노인 무도병, 루이체형 노인성 치매, 혈청음성 관절병증, 쇼크, 겸상적혈구 빈혈증, 피부 동종이식 거부, 피부 변화 증후군, 소장 이식 거부, 고형 종양, 특이적 부정맥, 척수운동실조, 척수소뇌 변성, 스트렙토코커스 근염, 소뇌 구조적 병변, 아급성 경화성 범뇌염, 실신, 심혈관계 매독, 전신 아나팔락시스, 전신 염증 반응 증후군, 전신 개시 연소성 류마티스 관절염, T-세포 또는 FAB ALL, 말초혈관 확장증, 폐색성 혈전 혈관염 , 혈소판감소증, 독성, 이식, 외상/출혈, III형 과민성 반응, IV형 과민성, 불안정 앙기나, 요독증, 요로패혈증, 두드러기, 승모판 심장 질환, 하지 정맥, 혈관염, 정맥동 질환, 정맥종 혈전증, 심실 세동, 바이러스 및 진균 감염, 바이탈 뇌염/무균성 수막염, 바이탈-연관 적혈구식작용 증후군, 베르니케-코르사코프 증후군, 윌슨 질환, 임의의 기관 또는 조직의 이종이식 거부, 급성 관상동맥 증후군, 급성 특발성 다발신경염, 급성 염증성 탈수초성 다발성신경병증, 급성 허혈, 성인 스틸씨병, 원형 탈모증, 아나필락시스, 항-인지질 항체 증후군, 재생불량성 빈혈, 동맥경화증, 아토피성 습진, 아토피성 피부염, 자가면역 피부염, 스트렙토코커스 감염과 관련된 자가면역 장애, 자가면역 장병증, 자가면역 청각 상실, 자가면역 림프증식 증후군(ALPS), 자가면역 심근염, 자가면역 조숙 난소 부전, 안검염, 기관지확장증, 수포성 유천포창, 심혈관 질환, 격변성 항인지질 증후군, 셀리악병, 경부척추증, 만성 허혈, 흉터성 유천포창, 다발경화증의 위험이 있는 임상 분리 증후군(CIS), 결막염, 유년기 개시 정신병, 만성 폐색성 폐질환(COPD), 누낭염, 피부근염, 당뇨 신장병, 진성 당뇨병, 추간판 헤르니아, 추간판 탈출증, 약물 유도 면역 용혈성 빈혈, 심내막염, 자궁내막증, 안구내염, 상공막염, 다형홍반, 주요 다형홍반, 임신성 유천포창, 길랑-바레 증후군(GBS), 건초열, 휴즈 증후군, 특발성 파킨슨병, 특발성 간질성 폐렴, IgE-매개 알레르기, 면역 용혈성 빈혈, 봉입체 근염, 감염성 눈 염증, 염증성 탈수초성 질환, 염증성 심장 질환, 염증성 신장 질환, IPF/UIP, 홍채염, 각막염, 건성각막결막염, 쿠스마울 질환 또는 쿠스마울-마이어 질환, 랜드리 마비, 랑게르한스 세포 조직구증, 망상피반, 황반변성, 현미경적 다발혈관염, 베크테레브병, 운동 신경 장애, 점막 유천포창, 다발 기관 손상, 중증근무력증, 골수형성이상 증후군, 심근염, 신경근 장애, 신경병, 비-A 비-B 간염, 시각신경염, 골용해, 소수관절 JRA, 말초 동맥 폐색 질환(PAOD), 말초 혈관 질환(PVD), 말초 동맥 질환(PAD), 정맥염, 결절성 다발동맥염(또는 결절성 동맥주위염), 다발연골염, 류마티스성 다발근육통, 백모증, 다관절 JRA, 다중내분비 결핍 증후군, 다발근육염, 류마티스성 다발근육통(PMR), 펌프 후 증후군, 원발성 파킨슨증, 전립선염, 진정적혈구계 무형성, 부신피질부전, 재발 시신경척수염, 재협착증, 류마티스성 심장 질환, SAPHO(윤활막염, 여드름, 농포증, 골과다증 및 골염), 피부경화증, 2차 아밀로이드증, 쇼크 폐, 공막염, 좌골신경통, 2차 부신부전, 실리콘 관련 결합조직 질환, 스네던-윌킨슨 피부병, 강직 척추염, 스티븐스-존슨 증후군(SJS), 전신 염증 반응 증후군, 관자동맥염, 톡소플라스마성 비염, 독소 표피 괴사용해, 횡단성 골수염, TRAPS(종양 괴사 인자 수용체, 1형 알레르기 반응, II형 당뇨병, 두드러기, 일반 간질성 폐렴(UIP), 혈관염, 봄철 결막염, 바이러스 비염, 보그트-고야나기-하라다 증후군(VKH 증후군), 습성 황반 변성 및 상처 치유로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 장애를 치료하는데 유용하다.
한 관점에서, 본 발명의 결합 단백질은 류마티스성 관절염, 골관절염, 크론병, 다발성 경화증, 인슐린 의존 진성당뇨병 및 건선을 치료하는데 사용된다. 다른 관점에서, 본 발명의 결합 단백질은 자가면역 질환을 앓고 있는 사람, 특히 염증과 연관된 질환, 예컨대 강직척추염, 알레르기, 자가면역 당뇨병, 자가면역 포도막염을 앓고 있는 사람을 치료하는 데에도 사용된다.
다른 관점에서, 본 발명은 앞에서 개시한 결합 단백질 중 어느 하나를 앞에서 논한 제2 제제의 투여 전, 제2 제제의 투여와 동시에 또는 제2 제제의 투여 후에 투여하는 단계를 포함하여, 사람 IL-1α가 유해한 장애를 앓고 있는 환자를 치료하는 방법을 제공한다. 다른 양태에서, 하나 이상의 IL-1α 길항제(예: 항-IL-1α 항체 또는 이의 단편)와 공동투여 및/또는 공동제형화될 수 있는 추가 치료제로는 TNF 길항제; TNF 수용체의 가용성 단편; ENBREL; TNF 효소 길항제; TNF 전환 효소(TACE) 억제제; 무스카린성 수용체 길항제; TGF-베타 길항제; 인터페론 감마; 퍼페니돈; 화학치료제, 메토트렉세이트; 레플루노마이드; 시롤리무스(라파마이신) 또는 이의 유사체, CCI-779; COX2 또는 cPLA2 억제제; NSAID; 면역조절제; p38 억제제; TPL-2, MK-2 및 NFkB 억제제; 부데노사이드; 표피 성장 인자; 코르티코스테로이드; 사이클로스포린; 설파살라진; 아미노살리실레이트; 6-머캅토퓨린; 아자티오프린; 메트로니다졸; 리폭시게나제 억제제; 메살라민; 올살라진; 발살라자이드; 항산화제; 트롬복산 억제제; IL-1 수용체 길항제; 항-IL-1β 항체; 항-IL-6-항체; 성장인자; 엘라스타제 억제제; 피리디닐-이미다졸 화합물; TNF, LT, IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-14, IL-15, IL-16, IL-17, IL-18, IL-19, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, IL-24, IL-25, IL-26, IL-27, IL-28, IL-29, IL-30, IL-31, IL-32, IL-33, EMAP-II, GM-CSF, FGF, 또는 PDGF의 항체 또는 작용제; CD2, CD3, CD4, CD8, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD90의 항체 또는 이들의 리간드; FK506; 라파마이신; 마이코페놀레이트 모페틸; 이부프로펜; 프레드니솔론; 포스포디에스테라제 억제제; 아데노신 작용제; 항혈전제; 보체 억제제; 아드레날린성 제제; IRAK, NIK, IKK, p38 또는 MAP 키나제 억제제; IL-1β 전환효소 억제제; TNFα 전환효소 억제제; T-세포 시그널링 억제제; 메탈로프로테이나제 억제제; 6-머캅토퓨린; 안지오텐신 전환효소 억제제; 가용성 사이토킨 수용체; 가용성 p55 TNF 수용체; 가용성 p75 TNF 수용체; sIL-1RI; sIL-1RII; sIL-6R; 항염증성 사이토킨; IL-4; IL-10; IL-11; 및 TGFβ를 포함하지만, 이에 국한되는 것은 아니다.
한 양태에서, 앞에 개시된 약제학적 조성물은 비경구, 피하, 근육내, 정맥내, 관절내, 기관지내, 복강내, 관절낭내, 연골내, 강내, 체강내, 소뇌내, 뇌실내, 결장내, 경부내, 위내, 간내, 심근내, 골내, 골반내, 심장주위내, 복막내, 흉막내, 전립선내, 폐내, 직장내, 신장내, 망막내, 척추내, 활막내, 흉부내, 자궁내, 방광내, 일시주사, 질내, 직장, 협측, 설하, 비내 및 경피 투여로부터 선택되는 하나 이상의 방식으로 환자에게 투여된다.
본 발명의 한 측면은 본 발명의 하나 이상의 IL-1α 결합 단백질에 대한 하나 이상의 IL-1α 항-이디오타입(idiotype) 항체를 제공한다. 항-이디오타입 항체는 본 발명의 결합 단백질에 도입될 수 있는, 면역글로불린의 적어도 일부, 예컨대 비제한적으로 중쇄 또는 경쇄 또는 이들의 리간드 결합부의 하나 이상의 상보성 결정 영역(CDR), 중쇄 또는 경쇄 가변 영역, 중쇄 또는 경쇄 불변 영역, 골격 영역 또는 이의 일부를 포함하는 임의의 단백질 또는 펩타이드 함유 분자를 포함한다.
본 발명은 IL-1α에 결합하는 IL-1α 결합 단백질, 특히 항-IL-1α 항체 또는 이의 항원결합부에 관한 것이다. 본 발명의 다양한 관점은 항체 및 항체 단편, 및 이의 약제학적 조성물, 뿐만 아니라 이러한 항체 및 단편을 제조하기 위한 핵산, 재조합 발현 벡터 및 숙주 세포에 관한 것이다. 또한, 시험관내 또는 생체내에서, 사람 IL-1α를 검출하고, 사람 IL-1α 활성을 억제하고; 유전자 발현을 조절하기 위해 본 발명의 항체를 사용하는 방법도 본 발명에 포함된다.
본 명세서에서 다른 표시가 없는 한, 본 발명과 관련하여 사용된 과학 및 기술적 용어들은 당업자가 일반적으로 알고 있는 의미를 나타낸다. 하지만, 용어들의 의미 및 범위는 어떠한 잠재적인 모호함이 있는 경우, 어떤 사전적 정의 또는 외적 정의보다 본 명세서에 제공된 정의가 우선되어야 한다. 또한, 정황상 다른 필요가 없는 한, 용어의 단수적 표현은 복수도 포함하며, 복수적 표현은 단수도 포함하는 것이다. 본 명세서에서, "또는"은 다른 표시가 없는 한 "및/또는"을 의미한다. 또한, "포함하는" 및 이러한 유형어, 예컨대 "포함한다" 및 "포함한" 등은 제한적 의미가 아니다. 또한, "요소" 또는 "성분" 등의 용어도 다른 구체적 표현이 없는 한, 하나의 유니트를 포함하는 요소 및 성분은 물론 하나 이상의 서브유니트를 포함하는 요소 및 성분들도 포함한다.
일반적으로, 본 명세서에 기술된 세포 및 조직 배양, 분자 생물학, 면역학, 미생물학, 유전학 및 단백질과 핵산 화학 및 하이브리드화 등과 관련하여 사용된 용어 및 기술들은 당업계에 공지되어 있고 공통적으로 사용되는 것이다. 본 발명의 방법 및 기술은 당업계에 공지되어 있고, 다른 표시가 없는 한 본 명세서 전체에서 인용되고 논의된 각종 일반 서적 및 구체적인 문헌들에 기술된 바와 같은 통상의 방법에 따라 일반적으로 수행된다. 효소 반응 및 정제 기술은 당업계에서 공통적으로 수행되거나 본 명세서에 기술된 바와 같이 제조자의 지침에 따라 수행한다. 본 명세서에 기술된 분석 화학, 합성 유기 화학 및 의학 및 약제 화학과 관련하여 사용된 용어 및 그 실험 절차 및 기술은 당업계에 공지되어 일반적으로 사용되는 것이다. 화학 합성, 화학 분석, 약제, 제형, 전달 및 환자 치료에 대해서도 표준 기술을 사용한다.
본 발명을 더 용이하게 이해할 수 있도록 이하에 사용된 용어들의 정의를 정리했다.
본 명세서에 사용된 "폴리펩타이드"란 용어는 아미노산의 임의의 중합체 쇄를 의미한다. "펩타이드" 및 "단백질"이란 용어는 폴리펩타이드란 용어와 혼용할 수 있는 것으로서, 이 역시 아미노산의 중합체 쇄를 의미한다. "폴리펩타이드"란 용어는 천연 또는 인공 단백질, 단백질 단편 및 단백질 서열의 폴리펩타이드 유사체를 포함한다. 폴리펩타이드는 단량체 또는 중합체일 수 있다.
"분리된 단백질" 또는 "분리된 폴리펩타이드"란 용어는 그 기원이나 파생급원에 따라서 자연 상태일 때 동반되던 본래 관련 성분과 관련되어 있지 않은 단백질 또는 폴리펩타이드로서, 동일한 종 유래의 다른 단백질이 실질적으로 없고; 다른 종 유래의 세포에 의해서 발현되거나; 자연에서 발생되지 않는 것이다. 즉, 자연적으로 생성하는 세포와 다른 세포 시스템에서 합성되거나 화학적으로 합성된 폴리펩타이드는 이의 자연 관련 성분에서 "분리된" 것이다. 또한, 단백질은 당업계에 공지된 단백질 정제 기술을 사용하여 분리를 통해 자연 관련 성분이 실질적으로 없게 만들 수도 있다.
본 명세서에 사용된 "회수하는"이란 용어는 당업계에 공지된 단백질 정제 기술 등을 사용하여 분리에 의해 자연 관련 성분이 실질적으로 제거된 폴리펩타이드와 같은 화학종을 제공하는 과정을 의미한다.
본 명세서에 사용된 "사람 IL-1α"(hIL-1α 또는 IL-1α로도 약칭됨)란 용어는 다양한 면역 반응, 염증 과정 및 조혈에 연관된 다면발현성 사이토킨을 포함한다. 예를 들어, IL-1α는 활성화된 대식세포에 의해 생산된 사람 사이토킨을 포함하고, IL-2 방출, B-세포 성숙 및 증식, 및 섬유아세포 성장인자 활성을 유도하여 흉선세포 증식을 자극한다. 사람 IL-1α란 용어는 표준 재조합 발현 방법에 의해 제조될 수 있는 재조합 사람 IL-1α(rh IL-1α)를 포함하는 것으로 간주한다.
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본원에 사용된 "생물학적 활성"은 사이토킨의 모든 고유 생물학적 성질을 의미한다. IL-1α의 생물학적 성질은 IL-1α 수용체 결합을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다(다른 예로는 IL-2 방출 유도에 의한 흉선세포의 자극, B 세포 성숙 및 증식, 섬유아세포 성장인자 활성을 포함한다).
항체, 단백질 또는 펩타이드의 제2 화학종과의 상호작용과 관련하여 본 명세서에 사용된 "특이적 결합" 또는 "특이적으로 결합하는"이란 용어는 그 상호작용이 화학종 상의 특정 구조(예컨대, 항원 결정인자 또는 에피토프)의 존재에 따라 이루어진다는 것을 의미한다. 예컨대, 항체는 일반적으로 단백질보다는 특정 단백질 구조를 인식하여 여기에 결합한다. 항체가 에피토프 "A"에 특이적이라면, 표지된 "A"와 항체를 포함하는 반응에서 에피토프 A(또는 유리된 미표지 A)를 포함하는 분자의 존재는 항체에 결합된 표지된 A의 양을 감소시킬 것이다.
본 명세서에 사용된 "항체"란 용어는 광범위하게 4개의 폴리펩타이드 쇄, 즉 2개의 중쇄(H)와 2개의 경쇄(L)로 구성된 임의의 면역글로불린(Ig) 분자 또는 이러한 Ig 분자의 필수적인 에피토프 결합 특징을 갖는 임의의 기능성 단편, 돌연변이체, 변이체 또는 유도체를 의미한다. 이러한 돌연변이체, 변이체 또는 유도체의 항체형은 당업계에 공지되어 있다. 이의 구체예에 대해서는 이하에 논의되나, 이에 국한되지는 않는다.
전체 길이 항체에서, 각 중쇄는 중쇄 가변 영역(본 명세서에서 약어로 HCVR 또는 VH로 표시됨)과 중쇄 불변 영역으로 구성된다. 중쇄 불변 영역은 3개의 도메인, CH1, CH2 및 CH3으로 구성된다. 각 경쇄는 경쇄 가변 영역(본 명세서에서 약어로 LCVR 또는 VL로 표시됨)과 경쇄 불변 영역으로 구성된다. 경쇄 불변 영역은 1개 도메인, CL로 구성된다. VH 및 VL 영역은 다시 상보성 결정 영역(CDR)이라 불리는 초가변성 영역들로 나뉠 수 있고, 여기에는 골격 영역(FR)이라는 더 보존적인 영역들이 산재되어 있다. 각 VH 및 VL은 3개의 CDR 및 4개의 FR로 구성되며, 이들은 아미노 말단에서 카복시 말단으로 다음과 같은 순서에 따라 배열된다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. 면역글로불린 분자는 임의의 유형(예를 들어, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA 및 IgY), 클래스(예를 들어, IgG 1, IgG2, IgG 3, IgG4, IgA1 및 IgA2) 또는 서브클래스일 수 있다.
본 명세서에 사용된 항체의 "항원 결합부"(또는 간단히 "항체부")란 용어는 항원(예: hIL-1α)에 대한 특이적 결합능을 갖는 하나 이상의 항체 단편을 의미한다. 항체의 항원 결합 기능은 전체 길이 항체의 단편에 의해 수행될 수 있는 것으로 밝혀져 있다. 이러한 항체 양태들은 또한 이특이적, 이중특이 또는 다중특이 형일 수 있으며, 즉 2개 이상의 다른 항원에 특이적으로 결합할 수 있다. 항체의 "항원 결합부"라는 용어에 포함되는 결합 단편의 예에는 (i) VL, VH, CL 및 CH1 도메인으로 이루어진 일가 단편인 Fab 단편; (ii) 2개의 Fab 단편이 힌지(hinge) 영역에서 이황화 가교에 의해 결합되어 있는 이가 단편인 F(ab')2 단편; (iii) VH 및 CH1 도메인으로 이루어진 Fd 단편; (iv) 항체의 단일 암(arm)의 VL 및 VH 도메인으로 이루어진 Fv 단편; (v) 하나의 가변 도메인을 포함하는 dAb 단편(본원에 참조로서 인용되는, Ward et al.,(1989) Nature 341: 544-546; Winter et al., PCT 공보 WO90/05144 A1); 및 (vi) 분리된 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 또한, Fv 단편의 두 도메인, VL 및 VH는 다른 유전자에 의해 암호화되지만, VL 및 VH 영역이 쌍을 이루어 일가 분자(단일 쇄 Fv(scFv)로 알려진 것; 예컨대 Bird et al.(1998) Science 242: 423-426; 및 Huston et al.(1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883)를 형성하고 있는 단일 단백질 쇄로서 제조될 수 있게 하는 합성 링커를 이용하여 VL 및 VH 영역은 재조합법으로 결합될 수 있다. 이러한 단일 쇄 항체는 항체의 "항원 결합부"라는 용어에도 포함되는 것으로 간주된다. 단일 쇄 항체의 다른 형태, 예컨대 디아바디(diabody)도 포함된다. 디아바디는 단일 폴리펩타이드 쇄에서 VH 및 VL 도메인이 발현되지만, 동일 쇄 상의 두 도메인 사이에 쌍 형성을 허용하기에는 너무 짧은 링커를 사용하여 상기 도메인들이 다른 쇄의 상보성 도메인과 쌍을 이루어 2개의 항원 결합 부위를 생성하는 2가의 이특이적 항체이다(예컨대, Holliger, P., et al.(1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448; Poljak, R.J., et al.(1994) Structure 2: 1121-1123). 이러한 항체 결합부는 당업계에 공지되어 있다(Kontermann and Dubel eds., Antibody Engineering (2001) Springer-Verlag. New York. 790 pp. (ISBN 3-540-41354-5)).
본 명세서에 사용된 "항체 작제물"이란 용어는 링커 폴리펩타이드 또는 면역글로불린 불변 도메인에 결합된 본 발명의 하나 이상의 항원 결합부를 포함하는 폴리펩타이드를 의미한다. 링커 폴리펩타이드는 펩타이드 결합에 의해 연합된 2 이상의 아미노산 잔기를 포함하고 하나 이상의 항원결합부를 연결하는데 사용된다. 이러한 링커 폴리펩타이드는 당업계에 공지되어 있다(예컨대, Holliger, P., et al.(1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448; Poljak, R.J., et al.(1994) Structure 2: 1121-1123). 면역글로불린 불변 도메인은 중쇄 또는 경쇄 불변 도메인을 의미한다. 사람 IgG 중쇄 및 경쇄 불변 도메인 아미노산 서열은 당업계에 공지되어 있고 표 2에 제시한다.
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또한, 항체 또는 이의 항원결합부는 이 항체 또는 항체부와 하나 이상의 다른 단백질 또는 펩타이드의 공유 또는 비공유 회합에 의해 형성된 더 큰 면역부착 분자의 일부일 수 있다. 이러한 면역부착 분자의 예는 사량체 scFv 분자를 제조하는 스트렙타비딘 코어 영역의 사용(Kipriyanov, S.M., et al . (1995) Human Antibodies and Hybridomas 6:93-101) 및 이가의 비오틴화된 scFv 분자를 제조하는 시스테인 잔기, 마커 펩타이드 및 C-말단 폴리히스티딘 태그의 사용 (Kipriyanov, S.M., et al . (1994) Mol . Immunol. 31:1047-1058)을 포함한다. 항체부, 예컨대 Fab 및 F(ab')2 단편은 전체 항체로부터 통상의 기술에 의해, 예컨대 전체 항체의 파파인 또는 펩신 분해에 의해 각각 제조할 수 있다. 또한, 항체, 항체부 및 면역부착 분자는 본 명세서에 기술된 바와 같이 표준 재조합 DNA 기술을 이용해 수득할 수 있다.
본 명세서에 사용된 "분리된 항체"는 다른 항원 특이성을 가진 다른 항체가 실질적으로 없는 항체를 의미하는 것이다(예컨대, hIL-1α 외에 다른 항원에 특이적으로 결합하는 항체가 실질적으로 없는, hIL-1α에 특이적으로 결합하는 분리된 항체). 하지만, hIL-1α에 특이적으로 결합하는 분리된 항체는 다른 종의 IL-1α 분자 등과 같은 다른 항원과 교차반응성이 있을 수도 있다. 더욱이, 분리된 항체는 다른 세포 물질 및/또는 화학물질이 실질적으로 없는 것일 수 있다.
본원에 사용된 용어 "사람 항체"는 사람 생식계열 면역글로불린 서열로부터 유래하는 가변 및 불변 영역을 보유하는 항체를 포함하는 것으로 의도된다. 본 발명의 사람 항체는 예를 들어, CDR 및 특히 CDR3에서 사람 생식계열 면역글로불린 서열에 의해 암호화되지 않은 아미노산 잔기(예를 들어, 시험관내 무작위 또는 부위 특이적 돌연변이유발에 의해 또는 생체내 체세포 돌연변이에 의해 도입된 돌연변이)를 포함할 수 있다. 그러나, 본원에 사용된 용어 "사람 항체"는 마우스와 같은 또 다른 포유동물 종의 생식계열로부터 유래하는 CDR 서열이 사람 골격 서열상에 이식된 항체를 포함하려는 의도는 아니다.
본원에 사용된 용어 "재조합 사람 항체"는 재조합 수단에 의해 제조되거나, 발현되거나, 생성되거나 분리된 모든 사람 항체, 예를 들어, 숙주 세포내로 형질감염된 재조합 발현 벡터를 사용하여 발현된 항체(하기 섹션 II C에서 추가로 기재됨), 재조합, 조합된 사람 항체 라이브러리로부터 유래된 항체 (Hoogenboom H.R., (1997) TIB Tech. 15:62-70; Azzazy H., and Highsmith W.E., (2002) Clin. Biochem. 35:425-445; Gavilondo J.V., and Larrick J.W. (2002) BioTechniques 29:128-145; Hoogenboom H., and Chames P. (2000) Immunology Today 21:371-378 ), 사람 면역글로불린 유전자로 유전자전이된 동물(예를 들어, 마우스)로부터 분리된 항체(Taylor, L. D., et al. (1992) Nucl. Acids Res. 20:6287-6295; Kellermann S-A., and Green L.L. (2002) Current Opinion in Biotechnology 13:593-597; Little M. et al (2000) Immunology Today 21:364-370) 또는 사람 면역글로불린 유전자 서열을 기타 DNA 서열에 스플라이싱함을 포함하는 임의의 기타 수단에 의해 제조되거나 발현되거나 생성되거나 분리된 항체를 포함하는 것으로 의도된다. 당해 재조합 사람 항체는 사람 생식계열 면역 글로불린 서열로부터 유래된 가변 및 불변 영역을 갖는다. 그러나 특정 양태에서, 당해 재조합 사람 항체는 시험관내 돌연변이유발(또는, 사람 Ig 서열로 유전자전이된 동물이 사용되는 경우, 생체내 체세포 돌연변이유발)로 처리되고, 따라서 재조합 항체의 VH 및 VL 영역의 아미노산 서열은 사람 생식계열 VH 및 VL 서열로부터 유래하고 이와 관련된 것이지만 생체내 사람 항체 생식계열 레퍼토리내에 천연적으로 존재하지 않을 수 있는 서열이다.
"키메라 항체"란 용어는 한 종 유래의 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열과 다른 종 유래의 불변 영역 서열을 포함하는 항체, 예컨대 쥐의 중쇄 및 경쇄 가변 영역이 사람 불변 영역에 결합된 항체를 의미한다.
"CDR 이식된 항체"란 용어는 한 종에서 유래되는 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열을 포함하지만, VH 및/또는 VL의 하나 이상의 CDR 영역의 서열들이 다른 종의 CDR 서열로 교체된 항체를 의미하는 것으로서, 예컨대 쥐의 CDR의 하나 이상(예컨대, CDR3)이 사람 CDR 서열로 교체된 쥐의 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 보유한 항체가 있다.
"사람화된 항체"란 용어는 사람을 제외한 종(예컨대, 마우스) 유래의 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열을 포함하지만 VH 및/또는 VL 서열의 적어도 일부가 더 "사람과 유사한", 즉 사람 생식계열 가변 서열과 더 유사한 서열로 변경된 항체를 의미한다. 사람화된 항체의 한 형태는 사람 CDR 서열이 대응하는 비-사람 CDR 서열을 대신하기 위하여 비-사람 VH 및 VL 서열에 도입된 CDR 이식된 항체이다.
용어 "캐뱃(Kabat) 번호", "캐뱃 정의" 및 "캐뱃 표지"는 상호교환적으로 본원에서 사용된다. 당해 분야에 알려져 있는 이러한 용어는 항체 또는 이의 항원 결합부의 중쇄 및 경쇄 가변 영역에서 다른 아미노산 잔기보다 더 가변적인(즉, 초가변성) 아미노산 잔기의 번호를 매기는 시스템을 의미한다[Kabat et al. (1971) Ann. NY Acad. Sci. 190: 382-391 및, kabat, E.A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242]. 중쇄 가변 영역에 있어서, 초가변 영역은 CDR1에 있어서 아미노산 31 내지 35 위치, CDR2에 있어서 아미노산 50 내지 65 위치, 및 CDR3에 있어서 아미노산 95 내지 102 위치의 범위이다. 경쇄 가변 영역에 있어서, 초가변 영역은 CDR1에 있어서 아미노산 24 내지 34 위치, CDR2에 있어서 아미노산 50 내지 56 위치, 및 CDR3에 있어서 아미노산 89 내지 97 위치의 범위이다.
본 명세서에 사용된 "억셉터(acceptor)" 및 "억셉터 항체"란 용어는 하나 이상의 골격 영역의 아미노산 서열 중 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 100%를 제공하거나 암호화하는 항체 또는 핵산 서열을 의미한다. 일부 양태에서, "억셉터"란 용어는 불변 영역(들)을 제공하거나 암호화하는 항체 아미노산 또는 핵산 서열을 의미한다. 또 다른 양태에서, "억셉터"란 용어는 하나 이상의 골격 영역 및 불변 영역(들)을 제공하거나 암호화하는 항체 아미노산 또는 핵산 서열을 의미한다. 특정 양태에서, "억셉터"란 용어는 하나 이상의 골격 영역의 아미노산 서열 중 적어도 80%, 바람직하게는 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 100%를 제공하거나 암호화하는 사람 항체 아미노산 또는 핵산 서열을 의미한다. 이러한 양태에 따라, 억셉터는 사람 항체의 하나 이상의 특정 위치에서 생기지 않는 적어도 1개, 적어도 2개, 적어도 3개, 적어도 4개, 적어도 5개 또는 적어도 10개의 아미노산 잔기를 함유할 수 있다. 억셉터 골격 영역 및/또는 억셉터 불변 영역(들)은 예컨대 생식계열 항체 유전자, 성숙 항체 유전자, 기능성 항체(예: 당업계에 공지된 항체, 개발 중인 항체 또는 시판 항체)로부터 유래되거나 또는 수득될 수 있다.
본 명세서에 사용된 용어 "CDR"은 항체 가변 서열내 상보성 결정 영역을 언급한다. 중쇄 및 경쇄 각각의 가변 영역에는 3개의 CDR이 있고 가변 영역 각각에 대해 CDR1, CDR2 및 CDR3으로서 명명된다. 본원에 사용된 용어 "CDR 세트"는 항원에 결합할 수 있는 단일 가변 영역내 존재하는 3개의 CDR 그룹을 언급한다. 이들 CDR의 정확한 경계선은 상이한 시스템에 따라 상이하게 정의되었다. 문헌[Kabat (Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest (National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1987) 및 (1991))]에 기재된 시스템은 항체의 임의의 가변 영역에 적용될 수 있는 명확한 잔기 번호매김 시스템을 제공할 뿐만 아니라 3개의 CDR을 한정하는 정확한 잔기 경계선을 제공한다. 이들 CDR은 캐뱃 CDR로서 언급될 수 있다. 문헌[Chothia&Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987) 및 Chothia et al., Nature 342:877-883 (1989)]에서는, 아미노산 서열 수준에서 다양성이 크다 할지라도 캐뱃 CDR내에 특정 하위부위는 거의 동일한 펩타이드 골격 형태를 취하고 있음을 밝혔다. 이들 하위부위는 L1, L2 및 L3 또는 H1, H2 및 H3로서 명명되었고 여기서, "L" 및 "H"는 각각 경쇄 및 중쇄 영역을 지칭한다. 이들 영역은 초티아 CDR로서 언급될 수 있고 이는 캐뱃 CDR과 중복되는 경계선을 갖는다. 캐뱃 CDR과 중복하는 CDR을 한정하는 또 다른 경계선은 문헌[Padlan (FASEB J. 9:133-139 (1995)) 및 MacCallum (J Mol Biol 262(5):732-45 (1996)]에 기재되어 있다. 또 다른 CDR 경계선 한정은 상기 시스템 중 하나를 엄격하게 따르지는 않지만, 특정 잔기 또는 잔기 그룹 또는 심지어 전체 CDR이 항원 결합에 영향주지 않는다는 예측 또는 실험적 발견의 측면에서 이들이 단축되거나 연장될 수 있다 하더라도 캐뱃 CDR과 중복된다. 본원에 사용된 방법은 당해 시스템 중 어느 하나에 따라 정의된 CDR을 사용할 수 있지만 바람직한 양태는 캐뱃 또는 초티아에 의해 정의된 CDR을 사용하는 것이다.
본 명세서에 사용된 "정준(canonical)" 잔기란 용어는 초티아 등(J. Mol. Biol. 196:901-907(1987); Chothia et al., J.Mol.Biol. 227: 799(1992), 둘 모두 참고인용됨)에 의해 정의된 바와 같은 특정 정준 CDR 구조를 한정하는 CDR 또는 골격의 잔기를 의미한다. 초티아 등에 따르면, 많은 항체의 CDR의 중요 부위는 아미노산 서열 수준에서의 큰 다양성에도 불구하고 거의 동일한 펩타이드 백본 입체형태를 보유한다. 각 정준 구조는 루프를 형성하는 아미노산 잔기의 인접 분절에 대해 무엇보다도 펩타이드 백본 비틀림각 세트를 규정한다.
본 명세서에 사용된 "공여체" 및 "공여 항체"란 용어는 하나 이상의 CDR을 제공하는 항체를 의미한다. 한 양태에서, 공여 항체는 골격 영역이 수득되거나 유래되는 항체와 다른 종 유래의 항체이다. 사람화된 항체의 상황에서, "공여 항체"란 용어는 하나 이상의 CDR을 제공하는 비-사람 항체를 의미한다.
본 명세서에 사용된 용어 "골격" 또는 "골격 서열"은 CDR을 제외한 가변 영역의 나머지 서열을 의미한다. CDR 서열의 정확한 정의는 상이한 시스템에 의해 결정될 수 있기 때문에, 골격 서열의 의미는 이에 따라 상이하게 해석된다. 6개의 CDR (경쇄의 CDR-L1, -L2, 및 -L3 및 중쇄의 CDR-H1, -H2, 및 -H3)은 또한 경쇄 또는 중쇄상의 골격 영역을 각 쇄상에 4개의 서브-영역(FR1, FR2, FR3 및 FR4)으로 나누고, 여기서 CDR1은 FR1과 FR2 사이에 위치되고, CDR2는 FR2와 FR3 사이에 위치되고 CDR3은 FR3과 FR4 사이에 위치된다. FR1, FR2, FR3 또는 FR4로서 특정 서브-영역으로 특정화하는 것 없이 다르게 언급된 골격 영역은 단일의 천연 면역글로불린 쇄의 가변 영역 내의 조합 FR을 나타낸다. 본원에 사용된 FR은 4개의 서브-영역중 하나를 나타내고 FR들은 골격 영역을 구성하는 4개의 서브-영역중 2개 이상을 나타낸다.
사람 중쇄 및 경쇄 억셉터 서열은 당업계에 공지되어 있다. 본 발명의 한 양태에서, 사람 중쇄 및 경쇄 억셉터 서열은 표 3 및 표 4에 기술된 서열 중에서 선택된다.
Figure pct00003
Figure pct00004
본 명세서에 사용된 "생식계열 항체 유전자" 또는 "유전자 단편"은 특정 면역글로불린의 발현을 위해 유전학적 재배열 및 돌연변이를 유발하는 성숙 과정을 거치지 않는 비-림프성 세포에 의해 암호화된 면역글로불린 서열을 언급한다[Shapiro et al., Crit. Rev. Immunol. 22(3): 183-200 (2002); Marchalonis et al., Adv Exp Med Biol. 484:13-30 (2001)]. 본 발명의 다양한 양태에 의해 제공되는 이점 중 하나는 생식계열 항체 유전자가 성숙 항체 유전자보다 종에서 개체에 특징적인 필수 아미노산 서열을 보존할 가능성이 높음에 따라 당해 종에서 치료학적으로 사용되는 경우 이종 급원으로서 인지될 가능성이 적다는 사실에 기인한다.
본 명세서에 사용된 "열쇠(key)"란 용어는 항체, 특히 사람화된 항체의 결합 특이성 및/또는 친화성에 큰 영향을 미치는 가변 영역 내의 특정 잔기를 의미한다. 열쇠 잔기로는 다음 중 하나 이상을 포함하되, 이에 국한되는 것은 아니다: CDR에 인접한 잔기, 잠재적 글리코실화 부위(N- 또는 O-글리코실화 부위일 수 있다), 희귀 잔기, 항원과 상호작용할 수 있는 잔기, CDR과 상호작용할 수 있는 잔기, 정준 잔기, 중쇄 가변 영역과 경쇄 가변 영역 사이의 접촉 잔기, 버니어(Vernier) 구역 내의 잔기 및 가변 중쇄 CDR1의 초티아 정의와 제1 중쇄 골격의 캐뱃 정의 간에 중첩하는 영역 내의 잔기.
본 명세서에 사용된 "사람화된 항체"란 용어는 목적하는 항원과 면역특이적으로 결합하고 실질적으로 사람 항체의 아미노산 서열을 갖는 골격(FR) 영역 및 실질적으로 비-사람 항체의 아미노산 서열을 갖는 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 항체 또는 변이체, 유도체, 유사체 또는 이의 단편이다. CDR과 관련하여 본원에 사용된 용어 "실질적으로"는 비-사람 항체 CDR의 아미노산 서열과 80% 이상, 바람직하게는 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 98% 이상 또는 99% 이상 동일한 아미노산 서열을 갖는 CDR을 의미한다. 사람화된 항체는 적어도 하나, 전형적으로 2개의 가변 도메인(Fab, Fab', F(ab') 2, FabC, Fv)를 실질적으로 전부 포함하고, 여기서 CDR 영역 전부 또는 실질적으로 전부는 비-사람 면역글로불린(즉, 공여 항체)의 CDR에 상응하고 골격 영역 전부 또는 실질적으로 전부는 사람 면역글로불린 컨센서스 서열이다. 바람직하게는, 사람화된 항체는 또한 면역글로불린 불변 영역(Fc)의 적어도 일부, 전형적으로 사람 면역글로불린의 불변 영역의 적어도 일부를 포함한다. 몇몇 양태에서, 사람화된 항체는 적어도 중쇄의 가변 도메인뿐만 아니라 경쇄를 모두 함유한다. 또한, 당해 항체는 중쇄의 CH1, 힌지, CH2, CH3 및 CH4 영역을 포함할 수 있다. 몇몇 양태에서, 사람화된 항체는 사람화된 경쇄만을 함유한다. 몇몇 양태에서, 사람화된 항체는 사람화된 경쇄만을 함유한다. 몇몇 양태에서, 사람화된 항체는 사람화된 중쇄만을 함유한다. 특정 양태에서, 사람화된 항체는 경쇄의 사람화된 가변 도메인 및/또는 사람화된 중쇄만을 함유한다.
사람화된 항체는 면역글로불린의 임의의 클래스, 예컨대 IgM, IgG, IgD, IgA 및 IgE 및 임의의 이소타입, 예컨대 비제한적으로 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4 중에서 선택될 수 있다. 사람화된 항체는 1보다 많은 클래스 또는 이소타입 유래의 서열을 포함할 수 있고, 특정 불변 도메인은 당업계에 공지된 기술을 이용해 바람직한 작동인자(effector) 기능을 최적화하도록 선택할 수 있다.
사람화된 항체의 골격 및 CDR 영역은 모 서열에 정확하게 대응할 필요는 없으며, 예컨대 공여 항체 CDR 또는 컨센서스 골격은 적어도 하나의 아미노산 잔기의 치환, 삽입 및/또는 결실에 의해 돌연변이유발되어, 그 부위의 CDR 또는 골격 잔기가 공여 항체 또는 컨센서스 골격에 대응하지 않을 수 있다. 하지만, 한 양태에 따르면, 이러한 돌연변이는 광범위한 것이 아니다. 일반적으로, 사람화된 항체 잔기의 적어도 80%, 바람직하게는 적어도 85%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 가장 바람직하게는 적어도 95%는 모 FR 및 CDR 서열에 대응할 것이다. 본 명세서에 사용된 "컨센서스 골격"이란 용어는 컨센서스 면역글로불린 서열 내의 골격 영역을 의미한다. 본 명세서에 사용된 "컨센서스 면역글로불린 서열"이란 용어는 관련된 면역글로불린 서열의 패밀리 중에서 가장 빈번하게 나타나는 아미노산(또는 뉴클레오타이드)로 구성된 서열을 의미한다(예컨대, Winnaker, From Genes to Clones(Verlagsgesellschaft, Weinheim, Germany 1987). 면역글로불린 패밀리 중에서, 컨센서스 서열의 각 위치는 패밀리의 해당 위치에서 가장 빈번하게 나타나는 아미노산이 차지한다. 2개의 아미노산이 동일한 빈도로 나타나면, 둘 중 어느 하나가 컨센서스 서열에 포함될 수 있다.
본 명세서에 사용된 "버니어" 구역은 문헌[Foote and Winter, 1992, J.Mol.Biol. 224: 487-499]에 기술된 바와 같이 CDR 구조를 조정하고 항원과의 적합도를 미세조정할 수 있는 골격 잔기의 서브세트를 의미한다. 버니어 구역 잔기는 CDR의 기반 층을 형성하고 CDR의 구조 및 항체의 친화성에 영향을 미칠 수 있다.
"다가 결합 단백질"이란 용어는 2 이상의 항원 결합 부위를 함유하는 결합 단백질을 나타내기 위해 본 명세서에 사용되고 있다. 다가 결합단백질은 3개 이상의 항원 결합 부위를 보유하도록 조작된 것으로, 일반적으로 자연 발생의 항체가 아니다. "다특이적 결합 단백질"이란 용어는 2 이상의 관련 또는 비관련 표적에 결합할 수 있는 결합 단백질을 의미한다. 본 명세서에 사용된 이원 가변 도메인(DVD) 결합 단백질은 2 이상의 항원 결합 부위를 함유하는 결합 단백질이고, 4가 또는 다가 결합 단백질이다. 이러한 DVD는 일특이성, 즉 하나의 항원에 결합할 수 있고, 또는 다특이성, 즉 2 이상의 항원에 결합할 수 있다. 2개의 중쇄 DVD 폴리펩타이드와 2개의 경쇄 DVD 폴리펩타이드를 함유하는 DVD 결합 단백질은 DVD Ig이라 부른다. DVD Ig의 절반은 각각 중쇄 DVD 폴리펩타이드와 경쇄 DVD 폴리펩타이드, 및 2개의 항원 결합 부위를 포함한다. 각 결합 부위는 항원 결합 부위마다 항원 결합에 연관된 총 6개의 CDR을 보유하는 경쇄 가변 도메인과 중쇄 가변 도메인을 포함한다. DVD 결합 단백질 및 DVD 결합 단백질을 제조하는 방법은 미국 특허출원 제11/507,050호에 개시되어 있고, 이는 본 발명에 참고 인용된 것이다.
본 발명의 한 관점은 IL-1α에 결합할 수 있는 결합 단백질을 포함하는 DVD 결합 단백질에 관한 것이다. 다른 관점에서, DVD 결합 단백질은 IL-1α 및 제2 표적에 결합할 수 있다. 한 양태에서, DVD 단백질은 IL-1α 및 IL-1β를 인식할 수 있다.
본원에 사용된 용어 "중화하는"은 결합 단백질이 사이토킨에 특이적으로 결합할 때, 사이토킨의 생물학적 활성의 중화를 의미한다. 바람직하게, 중화 결합 단백질은 hIL-1α에 대한 결합이 hIL-1α의 생물학적 활성 억제를 초래하는 중화 항체이다. 중화 결합 단백질은 hIL-1α에 결합하여 hIL-1α의 생물학적 활성을 적어도 약 20%, 40%, 60%, 80%, 85% 또는 그 이상 감소시키는 것이 바람직하다. 중화 결합 단백질에 의한 hIL-1α의 생물학적 활성의 억제는 당업계에 공지된 hIL-1α 생물학적 활성의 하나 이상의 지표인자를 측정하여 평가할 수 있다.
"에피토프"란 용어는 면역글로불린 또는 T-세포 수용체에 특이적 결합을 할 수 있는 임의의 폴리펩타이드 결정인자(determinant)를 포함한다. 특정 양태에서, 에피토프 결정인자는 아미노산, 당 측쇄, 포스포릴 또는 설포닐과 같은 분자의 화학적 활성 표면 그룹류를 포함하고, 특정 양태에서는 특이적인 입체 구조 특징, 및/또는 특이적 하전 특징을 보유할 수 있다. 에피토프는 항체에 의해 결합되는 항원의 일 영역이다. 특정 양태에서, 항체는 단백질 및/또는 거대분자의 복합 혼합물에서 자신의 표적 항원을 우선적으로 인식할 때 항원에 특이적으로 결합한다고 말한다.
본 명세서에 사용된 "표면 플라스몬 공명"이란 용어는, 예컨대 BIAcore 시스템(Pharmacia Biosensor AB, Uppsala, Sweden and Piscataway, NJ) 등을 이용하여 바이오센서 매트릭스 내의 단백질 농도의 변경을 검출하여 생체특이적 상호작용을 실시간 분석할 수 있는 광학 현상을 의미한다. 이에 대한 상세한 설명은 문헌[Jonsson, U., et al. (1993) Ann . Biol . Clin . 51: 19-26; Jonsson, U., et al. (1991) Biotechniques 11: 620-627; Johnsson, B., et al.(1995) J. Mol. Recognit. 8: 125-131; 및 Johnnson, B., et al. (1991) Anal . Biochem . 198: 268-277]에 기술되어 있다.
본 명세서에 사용된 "Kon"이란 용어는 당업계에 공지된 바와 같이 항체/항원 복합체를 형성하기 위한 항원에 대한 항체의 결합을 나타내는 온 속도 상수(on rate constant)를 의미하는 것으로 간주한다.
본 명세서에 사용된 "Koff"란 용어는 당업계에 공지된 바와 같이 항체/항원 복합체로부터 항체의 해리를 나타내는 오프 속도 상수(off rate constant)를 의미하는 것으로 간주한다.
본 명세서에 사용된 "Kd"란 용어는 당업계에 공지된 바와 같이 특정 항체-항원 상호작용의 해리 상수를 의미하는 것이다.
본 명세서에 사용된 "표지된 결합 단백질"이란 용어는 결합 단백질을 식별할 수 있게 하는 표지(label)가 혼입되어 있는 단백질을 의미한다. 한 관점에서, 표지는 검출가능한 마커이며, 예컨대 방사능표지된 아미노산의 혼입 또는 표식된 아비딘에 의해 검출될 수 있는 비오틴 부분의 폴리펩타이드에 대한 부착이다(예컨대, 형광 마커 또는 효소 활성을 함유하는 스트렙타비딘은 광학법 또는 비색법에 의해 검출될 수 있다). 폴리펩타이드에 대한 표지의 예에는 다음과 같은 것이 있으나, 이에 국한되지 않는다: 방사성동위원소 또는 방사성핵종(예: 3H, 14C, 35S, 90Y, 99Tc, 111In, 125I, 131I, 177Lu, 166Ho, 또는 153Sm); 형광 표지(예를 들어, FITC, 로다민, 란타니드 포스포르), 효소 표지(예: 양고추냉이 퍼옥시다제, 루시퍼라제, 알칼리성 포스파타제); 화학발광 마커; 비오티닐 그룹; 2차 리포터(예컨대, 류신 지퍼 쌍 서열, 2차 항체에 대한 결합 부위, 금속 결합 도메인, 에피토프 태그)에 의해 인식되는 소정의 폴리펩타이드 에피토프; 및 자성 제제, 예컨대 가돌리늄 킬레이트.
"항체 접합체"란 용어는 결합 단백질, 예컨대 항체가 제2 화학 잔기, 예컨대 치료제 또는 세포독성제에 화학적으로 결합된 것을 의미한다. 본 명세서에 사용된 "제제"라는 용어는 화학적 화합물, 화학적 화합물의 혼합물, 생물학적 거대분자 또는 생물학적 물질로부터 제조된 추출물을 의미한다. 한 양태에서, 치료제 또는 세포독성제는 백일해 독소, 탁솔, 시토칼라신 B, 그라미시딘 D, 에티디움 브로마이드, 에메틴, 미토마이신, 에토포사이드, 테노포사이드, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 콜히친, 독소루비신, 다우노루비신, 디하이드록시 안트라신 디온, 미토크산트론, 미트라마이신, 액티노마이신 D, 1-데하이드로테스토스테론, 글루코코르티코이드, 프로카인, 테트라카인, 리도카인, 프로프라놀롤 및 퓨로마이신 및 이들의 유사체 또는 동족체가 포함되나, 이에 국한되지 않는다.
본원에 사용된 용어 "결정" 또는 "결정화된"은 결정 형태로 존재하는 항체 또는 이의 항원 결합부를 의미한다. 결정은 고체 상태의 물질의 한 형태로서, 무정형 고체 상태 또는 액정 상태와 같은 다른 형태와 상이하다. 결정은 원자, 이온, 분자(예: 항체와 같은 단백질) 또는 분자 어셈블리(예: 항원/항체 복합체)의 규칙적이고 반복적인 입체 배열로 구성된다. 이러한 입체 배열은 당업계에 공지된 특이적인 수학적 관계에 따라 배열된다. 결정 중에서 반복되는 기본 유닛 또는 빌딩 블록은 비대칭 유닛이라 한다. 배열내 비대칭 유닛의 반복은 분명한 소정의 결정학적 대칭과 일치하게 하여 결정의 "유닛 셀"을 제공한다. 3차원 전체에서 규칙적인 해독에 의한 유닛 셀의 반복은 결정을 제공한다[Giege, R. and Ducruix, A. Barrett, Crystallization of Nucleic Acids and Proteins, a Practical Approach, 2nd ea., pp. 20 1-16, Oxford University Press, New York, New York (1999)].
본 명세서에 사용된 "폴리뉴클레오타이드"란 용어는 리보뉴클레오타이드이거나 데옥시뉴클레오타이드인 2개 이상의 뉴클레오타이드의 중합체 형태 또는 어느 한 뉴클레오타이드의 변형된 형태를 의미한다. 이 용어에는 일본쇄 및 이본쇄 형태의 DNA가 포함되나, 이본쇄 DNA가 바람직하다.
본 명세서에 사용된 "분리된 폴리뉴클레오타이드"란 용어는 그 기원에 따라서, "분리된 폴리뉴클레오타이드"가 자연에서 발견되는 "분리된 폴리뉴클레오타이드"의 폴리뉴클레오타이드 전부 또는 일부와 연관되어 있지 않은 폴리뉴클레오타이드(예컨대, 게놈, cDNA 또는 합성 기원 또는 이의 일부 조합); 자연에서는 결합되어 있지 않은 폴리뉴클레오타이드에 작동가능하게 결합된 폴리뉴클레오타이드(예컨대, 게놈, cDNA 또는 합성 기원 또는 이의 일부 조합); 또는 더 큰 서열의 일부로서 자연에서 나타나지 않는 폴리뉴클레오타이드(예컨대, 게놈, cDNA 또는 합성 기원 또는 이의 일부 조합)를 의미한다.
본 명세서에 사용된 "벡터"라는 용어는 결합된 다른 핵산을 수송할 수 있는 핵산 분자를 의미하는 것으로 간주한다. 벡터의 한가지 형태는 추가 DNA 분절이 연결될 수 있는 원형의 이본쇄 DNA 루프를 의미하는 "플라스미드"이다. 다른 형태의 벡터는 추가 DNA 분절이 바이러스 게놈에 연결될 수 있는 바이러스 벡터이다. 특정 벡터는 도입된 숙주 세포에서 자가 복제할 수 있다(예컨대, 세균 복제 오리진을 보유한 세균 벡터 및 에피솜성 포유동물 벡터). 다른 벡터(예컨대, 비에피솜성 포유동물 벡터)는 숙주 세포에 도입 시 숙주 세포의 게놈으로 통합될 수 있고, 이로써 숙주 게놈에 따라 복제된다. 더욱이, 특정 벡터는 작동가능하게 결합된 유전자의 발현을 유도할 수 있다. 이러한 벡터는 본 명세서에서 "재조합 발현 벡터"(또는 간단히 "발현 벡터")라 한다. 일반적으로 재조합 DNA법에 유용한 발현 벡터는 흔히 플라스미드 형태이다. 따라서, 본 명세서에 사용된 "플라스미드" 및 "벡터"는 플라스미드가 벡터의 가장 일반적으로 사용되는 형태이기 때문에 호환해서 사용할 수 있다. 하지만, 본 발명은 등가 기능을 하는 바이러스 벡터(예: 복제 결손성 레트로바이러스, 아데노바이러스 및 아데노-관련 바이러스)와 같은 다른 형태의 발현 벡터도 포함하는 것으로 간주한다.
"작동가능하게 결합된"이란 용어는 기술된 성분이 의도한 방식대로 기능할 수 있는 관계에 있는 병치 상태를 의미한다. 암호화 서열에 "작동가능하게 결합된" 조절 서열은 암호화 서열의 발현이 조절 서열에 적합한 조건 하에서 수행되도록 연결된다. "작동가능하게 결합된" 서열에는 당해 유전자에 근접한 발현 조절 서열 및 당해 유전자를 조절하기 위하여 트랜스로 작용하거나 일정 거리에 있는 발현 조절 서열이 포함된다. 본 명세서에 사용된 "발현 조절 서열"이란 용어는 이들이 연결된 암호화 서열의 발현과 프로세싱을 수행하는데 필요한 폴리뉴클레오타이드 서열을 의미한다. 발현 조절 서열에는 적당한 전사 개시, 종결, 프로모터 및 인핸서 서열; 이식된 및 폴리아데닐화 시그널과 같은 효과적인 RNA 프로세싱 시그널; 세포질 mRNA를 안정화시키는 서열; 해독 효율을 증강시키는 서열(즉, 코작(Kozak) 컨센서스 서열); 단백질 안정성을 증강시키는 서열; 필요한 경우 단백질 분비를 증강시키는 서열 등이 포함된다. 이러한 조절 서열의 성질은 숙주 유기체에 따라 다르며, 원핵생물인 경우, 이러한 조절 서열에는 일반적으로 프로모터, 리보솜 결합 부위 및 전사 종결 서열이 있고; 진핵생물인 경우, 이러한 조절 서열에는 프로모터 및 전사 종결 서열이 있다. "조절 서열"이란 용어는 그 존재가 발현 및 프로세싱에 필수적인 성분을 포함하는 것으로 간주하고, 리더 서열 번호 및 융합 파트너 서열과 같이 그 존재가 유리한 추가 성분을 포함할 수도 있다.
본 명세서에 정의된 "형질전환"은 외인성 DNA가 숙주 세포로 유입되는 임의의 과정을 의미한다. 형질전환은 당업계에 공지된 다양한 방법을 사용하여 자연 또는 인공 조건 하에서 실시될 수 있다. 형질전환은 이종 핵산 서열을 원핵생물 또는 진핵생물 숙주 세포로 삽입하기 위한 임의의 공지된 방법에 따라 달라질 수 있다. 이러한 방법은 형질전환되는 숙주 세포에 따라 선택되는데, 그 예로는 바이러스 감염, 전기천공, 리포펙션 및 입자 충격이 있으나, 이에 국한되지는 않는다. 이러한 "형질감염된" 세포는 삽입된 DNA가 자가 복제성 플라스미드로서 또는 숙주 염색체의 일부로서 복제할 수 있는 안정적으로 형질전환된 세포를 포함한다. 또한, 이들 세포는 삽입된 DNA 또는 RNA를 한정된 시간 동안 일시적으로 발현하는 세포도 포함한다.
본 명세서에 사용된 "재조합 숙주 세포"(또는 간단히 "숙주 세포")란 용어는 외인성 DNA가 도입된 세포를 의미하는 것으로 간주한다. 이러한 용어는 특정 피검체 세포뿐만 아니라 이 세포의 자손도 의미하는 것으로 간주되어야 한다. 후속 세대에는 돌연변이 또는 환경적 영향으로 인해 특정 변형이 일어날 수 있기 때문에, 상기 자손은 사실상 모세포와 동일하지 않지만 본 명세서에 사용된 "숙주 세포"란 용어의 범위에는 포함되는 것으로 간주한다. 한 관점에서, 숙주 세포는 임의의 생물계에서 선택되는 원핵생물 및 진핵생물 세포를 포함하는 것이 바람직하다. 진핵생물 세포에는 원생생물, 진균, 식물 및 동물 세포가 포함된다. 다른 관점에서, 숙주 세포는 원핵생물 세포주 이.콜라이; 포유동물 세포주 CHO, HEK 293 및 COS; 곤충 세포주 Sf9; 및 진균 세포 사카로마이세스 세레비지애를 포함하지만, 이에 국한되지는 않는다.
재조합 DNA, 올리고뉴클레오타이드 합성 및 조직 배양과 형질전환(예: 전기천공, 리포펙션)에는 표준 기술을 사용할 수 있다. 효소 반응과 정제 기술은 제조업자의 지침에 따라 수행하거나 당업계에서 일반적으로 수행하는 바와 같이 또는 본 명세서에 기술된 바와 같이 수행할 수 있다. 상기 기술 및 절차들은 당업계에 공지된 통상의 방법에 따라 또는 본 명세서에서 인용되고 논의된 각종 일반 문헌 및 특정 문헌들에 기술된 바와 같이 일반적으로 수행할 수 있다[예컨대, Sambrook et al. Molecular Cloning: A Laboratory Manual(2d ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.(1989) 참조].
당업계에 공지되고 본 명세서에 사용된 "유전자전이 유기체"란 용어는 전이유전자(transgene)를 포함하는 세포를 가진 유기체를 의미하는 것으로서, 유기체(또는 이 유기체의 선조)에 도입된 전이유전자는 유기체에서 자연 발현되지 않는 폴리펩타이드를 발현한다. "전이유전자"는 유전자전이 유기체가 발생하는 세포의 게놈으로 안정적이고 작동가능하게 통합되어, 유전자전이 유기체의 하나 이상의 세포 형태 또는 조직에서 암호화된 유전자 산물의 발현을 유도하는 DNA 작제물이다.
본 명세서에 사용된 "조절하다" 및 "조정하다"란 용어는 호환 가능하며, 본 명세서에 사용된 바와 같이 당해 분자의 활성(예: hIL-1A의 생물학적 활성)에 있어서 변화 또는 변경을 의미한다. 조정은 당해 분자의 특정 활성 또는 기능의 정도(magnitude)를 증가 또는 감소시킬 수 있다. 분자 활성 및 기능의 예에는 결합 특징, 효소 활성, 세포 수용체 활성화 및 시그널 전달 등이 있으나, 이에 국한되지는 않는다.
이와 마찬가지로, 본 명세서에 사용된 "조정제(modulator)"란 용어는 당해 분자의 활성 또는 기능(예: hIL-1α의 생물학적 활성)을 변화 또는 변경시킬 수 있는 화합물이다. 예를 들어, 조정제는 이 조정제의 부재 시 관찰되는 활성 또는 기능의 정도와 비교했을 때 분자의 특정 활성 또는 기능의 정도를 증가 또는 감소시킬 수 있다. 특정 양태에서, 조정제는 분자의 하나 이상의 활성 또는 기능의 정도를 감소시키는 억제제이다. 억제제의 예에는 단백질, 펩타이드, 항체, 펩티바디(peptibody), 탄수화물 또는 유기 소분자가 있으나, 이에 국한되지 않는다. 펩티바디는 WO 01/83525 등에 기술되어 있다.
본 명세서에 사용된 "작용제(agonist)"란 용어는 당해의 분자와 접촉했을 때 작용제의 부재 시 관찰되는 활성 또는 기능의 정도에 비해 당해 분자의 특정 활성 또는 기능의 정도를 증가시키는 조정제를 의미한다. 당해의 작용제의 구체예에는 IL-1α에 결합하는 IL-1α 폴리펩타이드 또는 폴리펩타이드, 핵산, 탄수화물 또는 임의의 다른 분자가 포함될 수 있으나, 이에 국한되는 것은 아니다.
본 명세서에 사용된 "길항제" 또는 "억제제"란 용어는 당해의 분자와 접촉했을 때, 길항제의 부재 시 관찰되는 활성이나 기능의 정도에 비해 당해 분자의 특정 활성이나 기능의 정도를 감소시키는 조정제를 의미한다. 당해의 길항제의 구체예에는 IL-1α의 생물학적 또는 면역학적 활성을 차단 또는 조정하는 물질이 포함된다. IL-1α의 길항제 및 억제제는 IL-1α에 결합하는 단백질, 핵산, 탄수화물 또는 임의의 다른 분자를 포함할 수 있으나, 이에 국한되지는 않는다.
본원에 사용된 용어 "유효량"은 장애 또는 이의 하나 이상의 증상의 중증도 및/또는 기간을 감소 또는 호전시키거나 장애의 진행을 차단하거나, 장애를 역행시키거나, 장애와 연관된 하나 이상의 증상의 재발, 발달, 개시 또는 진행을 차단하거나, 장애를 검출하거나 또 다른 치료법(예를 들어, 예방학적 또는 치료학적 제제)의 예방학적 또는 치료학적 효과를 증진시키거나 개선시키는데 충분한 치료량을 의미한다.
본 명세서에 사용된 "시료"란 용어는 가장 광범위한 의미로 사용되고 있다. 본 명세서에 사용된 "생물학적 시료"는 생물체 또는 이전 생물체에서 유래하는 임의의 양의 물질을 포함하나, 이에 국한되는 것은 아니다. 이러한 생물체에는 사람, 마우스, 래트, 원숭이, 개, 토끼 및 다른 동물이 있으나, 이에 국한되는 것은 아니다. 상기 물질에는 혈액, 혈청, 소변, 윤활액, 세포, 기관, 조직, 골수, 림프절 및 비장이 있으나, 이에 국한되지 않는다.
I. 사람 IL -1α에 결합하는 항체
본 발명의 제1 관점은 IL-1α에 높은 친화성, 느린 오프 속도 및 높은 중화능으로 결합하는 쥐 모노클로날 항체 또는 이의 항원결합부를 제공한다. 본 발명의 제2 관점은 IL-1α에 결합하는 키메라 항체를 제공한다. 본 발명의 제3 관점은 IL-1α에 결합하는 CDR 이식 항체 또는 이의 항원결합부를 제공한다. 본 발명의 제4 관점은 IL-1α에 결합하는 사람화된 항체 또는 이의 항원결합부를 제공한다. 상기 항체 또는 이의 일부는 분리된 항체인 것이 바람직하다. 본 발명의 항체는 사람 항-IL-1α 항체를 중화시킨다.
A. 항 IL -1α 항체의 제조방법
본 발명의 항체는 당업계에 공지된 다양한 기술 중 임의의 기술로 제조할 수 있다.
1. 하이브리도마 기술을 이용한 항- IL -1α 모노클로날 항체
모노클로날 항체는 하이브리도마, 재조합 및 파아지 디스플레이 기술 또는 이의 조합의 이용을 포함하는 당업계에 공지된 매우 다양한 기술을 사용하여 제조할 수 있다. 예를 들어, 모노클로날 항체는 당업계에 공지되고, 예컨대 문헌[Harlow et al., Antibodies: A Laboratory Manual, (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2nd ed. 1988); Hammerling, et al., in: Monoclonal Antibodies and T-Cell Hybridomas 563-681 (Elsevier, N.Y., 1981) (본 문헌은 이의 전반전인 내용이 본원에 참고 인용된다)]에 교시된 것을 비롯한 하이브리도마 기술을 사용하여 제조할 수 있다. 본원에 사용된 용어 "모노클로날 항체"는 하이브리도마 기술을 통해 생산된 항체에 제한되지 않는다. 용어 "모노클로날 항체"는 이를 생성하는 방법이 아니라, 임의의 진핵, 원핵 또는 파아지 클론을 포함하여 단일 클론으로부터 유래되는 항체를 의미한다.
하이브리도마 기술을 이용하여 특정 항체를 생산 및 선별하는 방법은 통상적이며 당업계에 공지되어 있다. 한 양태에서, 본 발명은 모노클로날 항체를 생산하는 방법뿐 아니라 본 발명의 항체를 분비하는 하이브리도마 세포를 배양하는 단계를 포함하는 방법에 의해 생산된 항체를 제공하며, 이때 하이브리도마는 본 발명의 항원으로 면역화된 마우스에서 분리한 비장세포를 골수종 세포와 융합시킨 뒤, 이 융합으로부터 산출되는 하이브리도마를 본 발명의 폴리펩타이드에 결합할 수 있는 항체를 분비하는 하이브리도마 클론에 대해 선별하여 상기 하이브리도마를 생산하는 것이 바람직하다. 간략히 설명하면, 마우스는 Il-1α 항원으로 면역화시킬 수 있다. 바람직한 양태에서, IL-1α 항원은 면역 반응을 자극하기 위해 보강제와 함께 투여한다. 이러한 보강제로는 완전 또는 불완전 프로인트 보강제, RIBI(뮤라밀 디펩타이드) 또는 ISCOM(면역자극 복합체)을 포함한다. 이러한 보강제는 폴리펩타이드를 국소 침전물에 격리시켜 빠른 분산으로부터 폴리펩타이드를 보호할 수 있고, 또는 대식세포 및 면역계의 다른 성분에 대해 화학주성인 인자를 분비하도록 숙주를 자극하는 물질을 함유할 수 있다. 폴리펩타이드가 투여된다면, 면역화 계획은 수주 동안에 걸쳐서 폴리펩타이드의 2회 이상의 투여를 수반하는 것이 바람직하다.
IL-1α 항원으로 동물을 면역화한 후, 이 동물로부터 항체 및/또는 항체-생산 세포를 수득할 수 있다. 이 동물로부터 채혈하거나 희생시켜 동물로부터 항-IL-1α 항체-함유 혈청을 수득한다. 혈청은 동물로부터 수득된 그대로 사용할 수 있고, 이 혈청으로부터 면역글로불린 분획을 수득할 수도 있으며, 또는 혈청으로부터 항-IL-1α 항체를 정제할 수도 있다. 이러한 방식으로 수득한 혈청 또는 면역글로불린은 폴리클로날이어서, 불균질 어레이 성질을 보유한다.
면역반응이 검출되면, 예컨대 항원 IL-1α에 특이적인 항체가 마우스 혈청에서 검출되면, 마우스 비장을 수거하여 비장세포를 분리한다. 그 다음, 비장세포는 공지된 기술로 임의의 적당한 골수종 세포, 예컨대 ATCC에서 입수용이한 세포주 SP20의 세포와 융합시킨다. 하이브리도마를 선택하고 한계희석으로 클로닝한다. 그 다음, 하이브리도마 클론은 IL-1α에 결합할 수 있는 항체를 분비하는 세포에 대해 당업계에 공지된 방법으로 분석한다. 양성 하이브리도마 클론으로 마우스를 면역화시켜 일반적으로 높은 수준의 항체를 함유하는 복수액을 생산할 수 있다.
다른 양태에서, 항체-생산성 무한증식화된 하이브리도마는 면역화된 동물로부터 제조할 수 있다. 면역화 후, 동물은 희생시키고 비장 B 세포를 당업계에 공지된 바와 같이 무한증식화된 골수종 세포와 융합시킨다(예컨대, Harlow and Lane, 상기 문헌 참조). 바람직한 양태에서, 골수종 세포는 면역글로불린 폴리펩타이드를 분비하지 않는다(비-분비성 세포주). 융합 및 항생제 선택 후, 하이브리도마는 IL-1α 또는 이의 일부 또는 IL-1α를 발현하는 세포를 사용하여 선별한다. 바람직한 양태에서, 초기 선별은 효소면역분석법(ELSIA) 또는 방사성면역분석(RIA), 바람직하게는 ELISA로 수행한다. ELISA 선별의 한 예는 본 발명에 참고인용된 WO 00/37504에 제시되어 있다.
항-IL-1α 항체 생산 하이브리도마는 선택하고, 클로닝한 뒤, 추가로 바람직한 특성, 예컨대 왕성한 하이브리도마 성장, 높은 항체 생산 및 바람직한 항체 특성 등에 대해 선별하고, 이는 이하에 논의되는 바와 같다. 하이브리도마는 동계 동물에서, 면역계가 부족한 동물, 예컨대 누드 마우스에서 또는 시험관내 세포 배양물에서 배양 및 증대시킬 수 있다. 하이브리도마를 선택, 클로닝 및 증대시키는 방법은 당업자에게 공지되어 있다.
바람직한 양태에서, 하이브리도마는 전술한 바와 같이 마우스 하이브리도마이다. 다른 바람직한 양태에서, 하이브리도마는 래트, 양, 돼지, 염소, 소 또는 말과 같은 비-사람, 비-마우스 종에서 생산한다. 다른 양태에서, 하이브리도마는 사람 하이브리도마이고, 이때에는 사람 비-분비성 골수종을 항-IL-1α 항체를 발현하는 사람 세포와 융합시킨다.
특정 에피토프를 인식하는 항체 단편은 공지의 기술로 수득할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 Fab 및 F(ab')2 단편은 파파인(Fab 단편을 생산함) 또는 펩신(F(ab')2 단편을 생산함)과 같은 효소를 이용한 면역글로불린 분자의 단백분해적 절단에 의해 생산될 수 있다. F(ab')2 단편은 가변 영역, 경쇄 불변 영역 및 중쇄 CHI 도메인을 함유한다.
2. SLAM 을 이용한 항- IL -1α 모노클로날 항체
본 발명의 다른 관점에서, 재조합 항체는 문헌[미국특허 5,627,052, PCT 공보 WO 92/02551 및 Babcock, J.S. et al. (1996) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:7843-7848]에 기재된 바와 같이, 선택된 림프구 항체 방법(SLAM)으로서 당업계에 언급된 절차를 사용하여 단일의 분리된 림프구로부터 수득한다. 본 방법에서, 당해의 항체를 분비하는 단일 세포, 예를 들어, 섹션 1에 기술된 면역화된 동물 중 어느 하나로부터 유래된 림프구는, 항원 IL-1α 또는 이의 단편을 비오틴과 같은 링커를 사용해 양 적혈구 세포에 커플링시킨 뒤 IL-1α에 특이성이 있는 항체를 분비하는 단세포를 확인하는데 사용하는, 항원-특이적 용혈 플라크 분석으로 선별한다. 당해의 항체-분비 세포를 확인한 후, 중쇄 및 경쇄 가변 영역 cDNA를 역전사효소 PCR에 의해 세포로부터 수득하고 이어서 이들 가변 영역을 적절한 면역글로불린 불변 영역(예를 들어, 사람 불변 영역)과 관련하여 COS 또는 CHO 세포와 같은 포유동물 숙주 세포에서 발현시킬 수 있다. 생체내 선별된 림프구로부터 유래된 증폭된 면역글로불린 서열로 형질감염된 숙주 세포를 이어서 추가 분석하고, 예컨대 형질감염된 세포를 선별하여 IL-1α에 대한 항체를 발현하는 세포를 분리함으로써 시험관내 선택할 수 있다. 증폭된 면역글로불린 서열은 추가로 예를 들어, 문헌[PCT 공개번호 WO 97/29131 및 PCT 공개번호 WO 00/56772]에 기재된 바와 같은 시험관내 친화성 성숙화 방법에 의해 추가로 시험관내 조작할 수 있다.
3. 유전자전이 동물을 이용한 항- IL -1α 모노클로날 항체
본 발명의 다른 양태에서, 항체는 사람 면역글로불린 유전자좌의 일부 또는 전부를 포함하는 비-사람 동물을 IL-1α 항원으로 면역화시켜 제조한다. 바람직한 양태에서, 비-사람 동물은 사람 면역글로불린 유전자좌의 대형 단편을 포함하고 마우스 항체 생산이 결손성인 유전자 조작된 마우스 계통인 XENOMOUSE 유전자전이 마우스이다. 문헌[Green et al. Nature Genetics 7: 13-21 (1994) 및 미국 특허 5,916,771, 5,939,598, 5,985,615, 5,998,209, 6,075,181, 6,091,001, 6,114,598 및 6,130,364]을 참조한다. 1991년 7월 25일에 공개된 WO 91/10741, 1994년 2월 3일에 공개된 WO94/02602, 1996년 10월 31일에 공개된 WO 96/34096 및 WO 96/33735, 1998년 4월 23일에 공개된 WO98/16654, 1998년 6월 11일에 공개된 WO 98/24893, 1998년 11월 12일에 공개된 WO 98/50433, 1999년 9월 10일에 공개된 WO 99/45031, 1999년 10월 21일에 공개된 WO 99/53049, 2000년 2월 24일에 공개된 WO 00 09560 및 2000년 6월 29일에 공개된 WO 00/037504도 참조한다. XENOMOUSE 유전자전이 마우스는 완전한 사람 항체의 성인계 사람 목록을 생산하고, 항원 특이적인 사람 Mab를 생성한다. XENOMOUSE 유전자전이 마우스는 사람 중쇄 유전자좌 및 x 경쇄 유전자좌의 메가염기 크기의 생식계열 형태 YAC 단편의 도입을 통해 사람 항체 목록의 약 80%를 포함한다[본원에 참고인용된 Mendez et al., Nature Genetics 15: 146-156 (1997), Green and Jakobovits J. Exp. Med. 188: 483-495(1998) 참조].
4. 재조합 항체 라이브러리를 이용한 항- IL -1α 모노클로날 항체
또한, 본 발명의 항체 제조에는 시험관내 방법도 사용할 수 있는데, 여기서 항체 라이브러리를 스크리닝하여 목적하는 결합 특이성을 갖는 항체를 확인한다. 재조합 항체 라이브러리를 선별하는 방법은 당업계에 공지되어 있고, 예컨대 문헌[Ladner et al. 미국 특허 5,223,409; Kang et al. PCT 공개 WO 92/18619; Dower et al. PCT 공개 WO 91/17271; Winter et al. PCT 공개 WO 92/20791; Markland et al. PCT 공개 WO 92/15679; Breitling et al. PCT 공개 WO 93/01288; McCafferty et al. PCT 공개 WO 92/01047; Garrard et al. PCT 공개 WO 92/09690; Fuchs et al. (1991) Bio/Technology 9: 1370-1372; Hay et al. (1992) Hum Antibod Hybridomas 3: 81-85 ; Huse et al. (1989) Science 246: 1275-1281; McCafferty et al., Nature (1990) 348:552-554; Griffiths et al. (1993) EMBO J. 12: 725-734; Hawkins et al. (1992) J. Mol.Biol. 226: 889-896; Clackson et al. (1991) Nature 352: 624-628; Gram et al. (1992) PNAS 89: 3576-3580; Garrad et al.(1991) Bio/Technology 9: 1373-1377; Hoogenboom et al. (1991) Nuc Acid Res 19: 4133-4137; 및 Barbas et al. (1991) PNAS 88: 7978-7982, 미국 출원 공개 20030186374, 및 PCT 공개 WO 97/29131(각각 본원에 참고인용됨)]등에 설명된 방법을 포함한다.
재조합 항체 라이브러리는 IL-1α 또는 IL-1α의 일부로 면역화된 피검체 유래일 수 있다. 대안적으로, 재조합 항체 라이브러리는 순수 피검체, 즉 IL-1α로 면역화된 적이 없는 피검체 유래일 수 있고, 예를 들어 사람 IL-1α로 면역화된 적이 없는 사람 피검체 유래의 사람 항체 라이브러리가 있다. 본 발명의 항체는 재조합 항체 라이브러리를 사람 IL-1α를 포함하는 펩타이드로 선별하여 IL-1α를 인식하는 항체를 선택함으로써 수득한다. 이러한 선별과 선택을 수행하는 방법은 당업계에 공지되어 있고, 예컨대 이전 문단의 참고문헌에 기술된 바와 같다. hIL-1α에 대해 특별한 결합 친화성이 있는 본 발명의 항체, 예컨대 특별한 koff 속도 상수로 사람 IL-1α로부터 해리하는 항체를 선택하기 위해, 당업계에 공지된 표면 플라즈몬 공명 방법은 바람직한 koff 속도 상수를 가진 항체를 선택하는데 사용할 수 있다. hIL-1α에 대해 특별한 중화 활성이 있는 본 발명의 항체, 예컨대 특정 IC50을 가진 항체를 선택하기 위해, hIL-1α 활성의 억제를 평가하는 당업계에 공지된 표준 방법을 사용할 수 있다.
한 관점에서, 본 발명은 사람 IL-1α에 결합하는 분리된 항체 또는 이의 항원결합부에 관한 것이다. 바람직하게는, 항체는 중화 항체이다. 다양한 양태에서, 항체는 재조합 항체 또는 모노클로날 항체이다.
예를 들어, 본 발명의 항체는 또한 당업계에 공지된 다양한 파아지 디스플레이 방법을 사용하여 제조할 수 있다. 파아지 디스플레이 방법에서, 기능성 항체 도메인은 파아지 입자를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 갖는 파아지 입자 표면상에 디스플레이된다. 특히, 당해 파아지는 레퍼토리 또는 조합 항체 라이브러리(예를 들어, 사람 또는 쥐)로부터 발현된 항원-결합 도메인을 디스플레이하는데 사용될 수 있다. 당해의 항원에 결합하는 항원 결합 도메인을 발현하는 파아지는, 예를 들어 표지된 항원 또는 고형 표면 또는 비드에 결합되거나 포획된 항원을 사용하여 선별하거나 확인할 수 있다. 이들 방법에 사용되는 파아지는 전형적으로 파아지 유전자 III 또는 유전자 VIII 단백질에 재조합적으로 융합된 Fab, Fv 또는 이황화 안정화된 Fv 항체 도메인을 갖는 파아지로부터 발현된 fd 및 M13 결합 도메인을 포함하는 필라멘트형 파아지이다. 본 발명의 항체를 제조하는데 사용될 수 있는 파아지 디스플레이 방법의 예는 문헌[Brinkman et al., J. Immunol. Methods 182:41-50 (1995); Ames et al., J. Immunol. Methods 184:177-186 (1995); Kettleborough et al., Eur. J. Immunol. 24:952-958 (1994); Persicet al., Gene 187 9-18 (1997); Burton et al., Advances in Immunology 57:191-280 (1994); PCT 출원번호 PCT/GB91/01134; PCT 공개번호 WO 90/02809; WO 91/10737; WO 92/01047; WO 92/18619; WO 93/11236; WO 95/15982; WO 95/20401; 및 미국 특허 5,698,426; 5,223,409; 5,403,484; 5,580,717; 5,427,908; 5,750,753; 5,821,047; 5,571,698; 5,427,908; 5,516,637; 5,780, 225; 5,658,727; 5,733,743 및 5,969,108; 이의 각각의 전반적인 내용은 본원에 참조 인용된다]에 기재된 것들을 포함한다.
상기 문헌에 기재된 바와 같이, 파아지 선택 후, 파아지로부터 항체 암호화 영역은 분리할 수 있고, 사람 항체를 비롯한 전 항체 또는 임의의 다른 바람직한 항원 결합 단편을 생산하는데 사용할 수 있으며, 하기에 상세히 기재되는 바와 같이, 포유동물 세포, 곤충 세포, 식물 세포, 효모 및 세균을 포함하는 임의의 바람직한 숙주에서 발현시킬 수 있다. 예를 들어, Fab, Fab' 및 F(ab')2 단편을 재조합으로 생산하기 위한 기술은 또한 문헌[PCT 공개번호 WO 92/22324; Mullinax et al., BioTechniques 12(6):864-869 (1992); 및 Sawai et al., AJRI 34:26-34 (1995); 및 Better et al., Science 240:1041-1043 (1988) (당해 문헌은 이의 전반적인 내용이 본원에 참조로서 인용된다)]에 기재된 것들과 같은 방법을 당업계에 공지된 방법을 사용하여 사용될 수 있다. 단일 쇄 Fv 및 항체를 생산하기 위해 사용할 수 있는 기술의 예는 문헌[미국 특허 4,946,778 및 5,258, 498; Huston et al., Methods in Enzymology 203:46-88 (1991); Shu et al., PNAS 90:7995-7999 (1993); 및 Skerra et al., Science 240:1038-1040 (1988)]에 기재된 것들을 포함한다.
파아지 디스플레이에 의한 재조합 항체 라이브러리의 스크리닝에 대한 대안으로, 대형 조합 라이브러리의 스크리닝에 대해 당업계에 공지된 기타 방법을 적용하여 본 발명의 이중 특이성 항체를 확인할 수 있다. 한가지 유형의 또 다른 발현 시스템은 문헌[PCT Publication No. WO 98/31700 by Szostak and Roberts, 및 Roberts, R.W. and Szostak, J.W. (1997) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94:12297-12302]에 기재된 바와 같이 재조합 항체 라이브러리가 RNA 단백질 융합체로서 발현되는 것이다. 당해 시스템에서, 공유 융합체는 mRNA 및 3' 말단에 펩티딜 억셉터 항생제인 퓨로마이신을 운반하는, 합성 mRNA의 시험관내 해독에 의해 암호화하는 펩타이드 또는 단백질 사이에서 형성된다. 따라서, 특이적 mRNA는 암호화된 펩타이드 또는 단백질, 예를 들어, 항체 또는 이의 일부(예를 들어, 항체 결합부 또는 이의 일부)의 이중 특이성 항원에 대한 성질을 기반으로 하여 mRNA의 복합 혼합물(예를 들어, 조합 라이브러리)로부터 집적될 수 있다. 이러한 라이브러리의 스크리닝으로부터 회수된 항체 또는 이의 일부를 암호화하는 핵산 서열은 상기된 바와 같이(예를 들어, 포유동물 숙주 세포에서) 재조합 수단에 의해 발현될 수 있고 특히, 본래 선택된 서열(들)에 돌연변이가 도입된 mRNA-펩타이드 융합체를 추가로 스크리닝함에 의해 또는 상기된 바와 같은 재조합 항체의 시험관내 친화성 성숙화에 대한 기타 방법에 의해 추가 친화성 성숙으로 처리될 수 있다.
또 다른 시도로서, 본 발명의 항체는 또한 당업계에 공지된 효모 디스플레이 방법을 사용하여 제조될 수 있다. 효모 디스플레이 방법에서, 유전학적 방법은 항체 도메인을 효소 세포벽에 부착시키고 이들을 효모의 표면상에서 디스플레이하는데 사용한다. 특히, 당해 효모를 사용하여 레퍼토리 또는 조합 항체 라이브러리(예를 들어, 사람 또는 쥐)로부터 발현되는 항원 결합 도메인을 디스플레이할 수 있다. 본 발명의 항체를 제조하는데 사용될 수 있는 효모 디스플레이 방법의 예는 문헌[본원에 참조로서 인용된 Wittrup, et al. U.S. 특허번호 6,699,658]에 기재된 것들을 포함한다.
B. 재조합 IL -1α 항체의 생산
본 발명의 항체는 당업계에 공지된 임의의 다수의 기술로 생산할 수 있다. 예를 들어, 숙주 세포로부터의 발현, 여기서 중쇄 및 경쇄를 암호화하는 발현 벡터(들)는 표준 기술로 숙주 세포에 형질감염시킨다. "형질감염"이란 용어의 다양한 형태는 외인성 DNA를 원핵생물 또는 진핵생물 숙주 세포에 도입시키는데 통용되는 다양한 기술을 포함하는 것으로 간주하며, 예컨대 전기침투, 인산칼슘 침전, DEAE-덱스트란 형질감염 등이 있다. 원핵생물 또는 진핵생물 숙주 세포에서 본 발명의 항체를 발현시키는 것이 가능하지만, 진핵생물 세포에서 항체의 발현이 바람직하고, 포유동물 숙주 세포에서 가장 바람직한데, 그 이유는 상기 진핵생물 세포(특히 포유동물 세포)가 원핵생물 세포보다 적당하게 폴딩되고 면역학적 활성인 항체를 어셈블리하고 분비하도록 할 가능성이 더 많기 때문이다.
본 발명의 재조합 항체를 발현시키기에 바람직한 포유동물 숙주 세포는 중국 햄스터 난소(CHO 세포)(예컨대, R.J.Kaufman and P.A. Sharp(1982) Mol . Biol. 159: 601-621에 기술된 바와 같이 DHFR 선택성 마커와 함께 사용된, Urlaub and Chasin, (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 4216-4220에 기술된 dhfr- CHO 세포), NS0 골수종 세포, COS 세포 및 SP2 세포를 포함한다. 항체 유전자를 암호화하는 재조합 발현 벡터가 포유동물 숙주 세포에 도입될 때, 항체는 상기 숙주 세포를 이 숙주 세포에서 항체의 발현, 또는 더욱 바람직하게는 숙주 세포가 증식되는 배양 배지로 항체의 분비를 허용하기에 충분한 시간 동안 배양하여 생산한다. 항체는 표준 단백질 정제 방법을 이용하여 배양 배지로부터 회수할 수 있다.
또한, 숙주 세포는 기능성 항체 단편, 예컨대 Fab 단편 또는 scFv 분자를 생산하는 데에도 사용할 수 있다. 상기 절차의 변형도 본 발명의 범위에 속하는 것으로 이해되어야 한다. 예를 들어, 본 발명의 항체의 경쇄 및/또는 중쇄 중 어느 하나의 기능성 단편을 암호화하는 DNA로 숙주 세포를 형질감염시키는 것이 바람직할 수 있다. 또한, 재조합 DNA 기술은 당해의 항원에 결합하는데 필요하지 않은 경쇄 및 중쇄 중 어느 하나 또는 둘 모두를 암호화하는 DNA 일부 또는 전부를 제거하는 데에도 사용할 수 있다. 이러한 절두형 DNA 분자로부터 발현된 분자는 또한 본 발명의 항체에 포함된다. 또한, 하나의 중쇄 및 하나의 경쇄가 본 발명의 항체이고 다른 중쇄 및 경쇄가 당해의 항원 외에 다른 항원에 특이적인 이작용기성 항체는 당해의 항체를 제2 항체에 표준 화학적 가교 방법에 의해 가교결합시켜 생산할 수 있다.
본 발명의 항체 또는 이의 항원결합부를 재조합 발현시키기에 바람직한 시스템에서, 항체 중쇄 및 항체 경쇄를 암호화하는 재조합 발현 벡터는 인산칼슘 매개의 형질감염에 의해 dhfr- CHO 세포 내로 도입된다. 재조합 발현 벡터 내에서, 항체 중쇄 및 경쇄 유전자는 유전자의 높은 전사 수준을 유도하기 위해 CMV 인핸서/AdMLP 프로모터 조절 인자에 각각 작동가능하게 결합된다. 재조합 발현 벡터는 또한 DHFR 유전자를 운반하고, 이는 메토트렉세이트 선택/증폭에 의해 벡터로 형질감염된 CHO 세포를 선택할 수 있게 해준다. 선택된 형질감염 숙주 세포는 항체 중쇄 및 경쇄가 발현되도록 배양하고, 이 배양 배지로부터 완전한 항체를 회수한다. 재조합 발현 벡터를 제조하고, 숙주 세포를 형질감염시키고, 형질전환체를 선택하고 숙주 세포를 배양하고 배양 배지로부터 항체를 회수하기 위해, 표준 분자생물학 기술을 사용한다. 또한, 본 발명은 본 발명의 재조합 항체가 합성될 때까지 본 발명의 숙주 세포를 적당한 배양 배지에서 배양함으로써 본 발명의 재조합 항체를 합성하는 방법을 제공한다. 또한, 이 방법은 추가로 배양 배지로부터 재조합 항체를 분리하는 단계를 포함할 수도 있다.
1. 항 IL -1α 항체
표 5는 본 발명의 바람직한 항-hIL-1α 항체의 VH 및 VL 영역의 아미노산 서열의 목록이다.
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2. 항 IL -1α 키메라 항체
키메라 항체는 항체의 다른 부위가 다른 동물 종에서 유래하는 분자, 예컨대 쥐의 모노클로날 항체 유래의 가변 영역과 사람의 면역글로불린 불변 영역을 보유하는 항체이다. 키메라 항체를 생산하는 방법은 당업계에 공지되어 있고, 실시예 2.1에 상세하게 논의되어 있다. 예컨대, 전문이 참고인용되는 문헌[Morrison, Science 229:1202 (1985); Oi et al., BioTechniques 4:214 (1986); Gillies et al., (1989) J. Immunol. Methods 125:191-202; 미국 특허 5,807,715; 4,816,567; 및 4,816,397]을 참조한다. 또한, 적당한 생물학적 활성의 사람 항체 분자 유래의 유전자와 함께 적당한 항원 특이성의 마우스 항체 분자 유래의 유전자를 스플라이싱시켜 "키메라 항체"의 생산을 위해 개발된 기술(전문이 참고인용된, 문헌 Morrison et al., 1984, Proc. Natl. Acad. Sci. 81:851-855; Neuberger et al., 1984, Nature 312:604-608; Takeda et al., 1985, Nature 314:452-454 참조)을 사용할 수도 있다.
3. 항 IL -1α CDR 이식 항체
본 발명의 CDR-이식 항체는 VH 및/또는 VL의 하나 이상의 CDR 영역은 본 발명의 쥐 항체의 CDR 서열로 대체된 사람 항체 유래의 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열을 포함한다. 임의의 사람 항체 기원의 골격 서열은 CDR 이식을 위한 주형으로서 작용할 수 있다. 그러나, 당해 골격 상으로의 직쇄 대체는 흔히 항원에 대한 결합 친화성을 약간 손상시킨다. 사람 항체가 최초의 쥐 항체와 더욱 상동성일수록 쥐 CDR과 사람 골격의 조합이 CDR내에서 뒤틀림을 유발하여 친화성을 감소시킬 가능성이 보다 적어진다. 따라서, CDR을 제외한 쥐 가변 골격을 대체하도록 선택된 사람 가변 골격은 쥐 항체 가변 영역 골격과 65% 이상의 서열 동일성을 갖는 것이 바람직하다. CDR을 제외한 사람 및 쥐 가변 영역은 70% 이상의 서열 동일성을 갖는 것이 보다 바람직할 수 있다. CDR을 제외한 사람 및 쥐 가변 영역은 75% 이상의 서열 동일성을 갖는 것이 보다 더 바람직하다. CDR을 제외한 사람 및 쥐 가변 영역은 80% 이상의 서열 동일성을 갖는 것이 가장 바람직하다. 키메라 항체를 제조하는 방법은 당업계에 공지되어 있고, 실시예 2.2에 상세하게 논의된다[또한, EP 239,400; PCT 공개번호 WO 91/09967; 미국 특허 5,225,539; 5,530,101; 및 5,585,089 참조, 베니어링 또는 재표면화(문헌 참조: EP 592,106; EP 519,596; Padlan, Molecular Immunology 28(4/5):489-498 (1991); Studnicka et al., Protein Engineering 7(6):805-814 (1994); Roguska et al., PNAS 91:969-973 (1994)), 및 쇄 셔플링(미국 특허 제5,565,352호) 참조).
4. 항 IL -1α 사람화된 항체
사람화된 항체는 비-사람 종 기원의 하나 이상의 상보성 결정 영역(CDR) 및 사람 면역글로불린 분자 기원의 골격 영역을 갖는, 목적하는 항원에 결합하는 비-사람 종 항체 기원의 항체 분자이다. 공지된 사람 Ig 서열은 예를 들어, 본원에 전반적인 내용이 참조로서 인용되는 하기 인터넷 주소 및 문헌에 기재되어 있다: www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez-/query.fcgi; www.atcc.org/phage/hdb.html; www.sciquest.com/; www.abcam.com/; www.antibodyresource.com/onlinecomp.html; www.public.iastate.edu/.about.pedro/research_tools.html; www.mgen.uni-heidelberg.de/SD/IT/IT.html; www.whfreeman.com/immunology/CH- 05/kuby05.htm; www.library.thinkquest.org/12429/Immune/Antibody.html; www.hhmi.org/grants/lectures/1996/vlab/; www.path.cam.ac.uk/.about.mrc7/m- ikeimages.html; www.antibodyresource.com/; mcb.harvard.edu/BioLinks/Immunology.html.www.immunologylink.com/; pathbox.wustl.edu/.about.hcenter/index.html; www.biotech.ufl.edu/.about.hcl/; www.pebio.com/pa/340913/340913.html-; www.nal.usda.gov/awic/pubs/antibody/; www.m.ehimeu.acjp/.about.yasuhito- /Elisa.html; www.biodesign.com/table.asp; www.icnet.uk/axp/facs/davies/links.html; www.biotech.ufl.edu/.about.fccl/protocol.html; www.isac-net.org/sites_geo.html; aximtl.imt.uni-marburg.de/.about.rek/AEP- Start.html; baserv.uci.kun.nl/.about.jraats/linksl.html; www.recab.uni-hd.de/immuno.bme.nwu.edu/; www.mrc-cpe.cam.ac.uk/imt-doc/pu- blic/INTRO.html; www.ibt.unam.mx/vir/V_mice.html; imgt.cnusc.fr:8104/; www.biochem.ucl.ac.uk/.about.martin/abs/index.html; antibody.bath.ac.uk/; abgen.cvm.tamu.edu/lab/wwwabgen.html; www.unizh.ch/.about.honegger/AHOsem- inar/Slide01.html; www.cryst.bbk.ac.uk/.about.ubcg07s/; www.nimr.mrc.ac.uk/CC/ccaewg/ccaewg.htm; www.path.cam.ac.uk/.about.mrc7/h- umanisation/TAHHP.html; www.ibt.unam.mx/vir/structure/stat_aim.html; www.biosci.missouri.edu/smithgp/index.html; www.cryst.bioc.cam.ac.uk/.abo- ut.fmolina/Webpages/Pept/spottech.html; www.jerini.de/fr roducts.htm; www.patents.ibm.com/ibm.html.Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, U.S. Dept. Health (1983). 이러한 입수된 서열을 사용하여 당업계에 공지된 바와 같이 면역원성을 감소시키거나 결합, 친화성, 온(on) 속도, 오프(off) 속도, 결합도(avidity), 특이성, 반감기 또는 임의의 기타 적합한 특징을 감소시키거나 증진시키거나 변형시킬 수 있다.
사람 골격 영역내 골격 잔기는 상응하는 CDR 공여자 항체로 대체하여 항원 결합을 변경, 바람직하게는 향상시킬 수 있다. 이들 골격 대체는 예를 들어, CDR 및 골격 잔기의 상호작용에 대해 모델링하여 항원 결합과 서열 비교에 중요한 골격 잔기를 확인하여 특정 위치에서의 특정 골격 잔기를 확인함에 의해 당업계에 널리 공지된 방법에 의해 확인된다(Queen et al., U.S. Pat. No. 5,585,089; Riechmann et al., Nature 332:323 (1988), 이의 전반적인 내용이 본원에 참조로서 인용된다). 3차원 면역글로불린 모델은 통상적으로 유용하고 당업자에게 익숙하다. 선택된 후보 면역글로불린 서열의 가능한 3차원 형태 구조를 설명하고 나타내는 컴퓨터 프로그램은 유용하다. 이들 디스플레이의 조사는 후보 면역글로불린 서열의 기능에 있어서 가능한 잔기의 역할에 대한 분석, 즉, 항원에 결합하는 후보 면역글로불린의 능력에 영향을 주는 잔기의 분석을 가능하게 한다. 이러한 방식으로, 표적 항원에 대한 증가된 친화성과 같은 바람직한 항체 특성이 달성되도록 FR 잔기가 선별될 수 있고 컨센서스 및 입수 서열로부터 조합될 수 있다. 일반적으로, CDR 잔기는 직접적으로 및 가장 실질적으로 항원 결합에 영향을 주는데 관여한다. 항체는 문헌[Jones et al., Nature 321:522 (1986); Verhoeyen et al., Science 239:1534 (1988)), Sims et al., J. Immunol. 151: 2296 (1993); Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901 (1987), Carter et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 89:4285 (1992); Presta et al., J. Immunol. 151:2623 (1993), Padlan, Molecular Immunology 28(4/5):489-498 (1991); Studnicka et al., Protein Engineering 7(6):805-814 (1994); Roguska. et al., PNAS 91:969-973 (1994); PCT publication WO 91/09967, PCT/: US98/16280, US96/18978, US91/09630, US91/05939, US94/01234, GB89/01334, GB91/01134, GB92/01755; WO90/14443, WO90/14424, WO90/14430, EP 229246, EP 592,106; EP 519,596, EP 239,400, 미국 특허 5,565,332, 5,723,323, 5,976,862, 5,824,514, 5,817,483, 5814476, 5763192, 5723323, 5,766886, 5,714,352, 6,204,023, 6,180,370, 5,693,762, 5,530,101, 5,585,089, 5,225,539; 4,816,567, 이의 각각의 전반적인 내용은 본원에 참조로서 인용된다]에 기재된 것들을 제한 없이 포함하는 당업계에 공지된 다양한 기술을 사용하여 사람화될 수 있다.
C. 항체 및 항체-생산 세포주의 생산
본 발명의 항-IL-1α 항체는 당업계에 공지된 여러 시험관내 및 생체내 분석법 중 어느 한 분석법에 의해 평가되는 바와 같이, IL-1α 활성을 감소시키거나 중화시키는 높은 역량을 나타낸다. 또한, 본 발명의 항-IL-1α 항체는 IL-1α 활성을 감소 또는 중화시키는 높은 역량을 나타내는 것이 바람직하다.
바람직한 양태에서, 분리된 항체 또는 이의 항원결합부는 이 항체 또는 이의 항원결합부가 표준 플라즈몬 공명으로 측정시, 약 0.1s-1 이하의 koff 속도 상수로 사람 IL-1α로부터 해리하거나, 또는 약 1 x 10-6 M 이하의 IC50으로 사람 IL-1α 활성을 억제할 정도로, 사람 IL-1α에 결합한다. 대안적으로, 항체 또는 이의 항원결합부는 표면 플라즈몬 공명으로 측정시, 약 1x10-2s-1 이하의 koff 속도 상수로 사람 IL-1α로부터 해리할 수 있고, 또는 약 1x10-7M 이하의 IC50으로 사람 IL-1α 활성을 억제할 수 있다. 대안적으로, 항체 또는 이의 항원결합부는 표면 플라즈몬 공명으로 측정시, 약 1x10-3s-1 이하의 koff 속도 상수로 사람 IL-1α로부터 해리할 수 있고, 또는 약 1x10-8M 이하의 IC50으로 사람 IL-1α를 억제할 수 있다. 대안적으로, 항체 또는 이의 항원결합부는 표면 플라즈몬 공명으로 측정시, 약 1x10-4s-1 이하의 koff 속도 상수로 사람 IL-1α로부터 해리할 수 있고, 또는 약 1x10-9M 이하의 IC50으로 IL-1α 활성을 억제할 수 있다. 대안적으로, 항체 또는 이의 항원결합부는 표면 플라즈몬 공명으로 측정시, 약 1x10-5s-1 이하의 koff 속도 상수로 사람 IL-1α로부터 해리할 수 있고, 또는 약 1x10-10M 이하의 IC50으로 사람 IL-1α 활성을 억제할 수 있다. 대안적으로, 항체 또는 이의 항원결합부는 표면 플라즈몬 공명으로 측정시, 약 1x10-5s-1 이하의 koff 속도 상수로 사람 IL-1α로부터 해리할 수 있고, 또는 약 1x10-11M 이하의 IC50으로 사람 IL-1α 활성을 억제할 수 있다.
특정 양태에서, 항체는 중쇄 불변 영역, 예컨대 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM 또는 IgD 불변 영역을 포함한다. 중쇄 불변 영역은 IgG1 중쇄 불변 영역 또는 IgG4 중쇄 불변 영역인 것이 바람직하다. 또한, 항체는 경쇄 불변 영역, 즉 카파 경쇄 불변 영역 또는 람다 경쇄 불변 영역 중 어느 하나를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 항체는 카파 경쇄 불변 영역을 포함한다. 대안적으로, 항체 부는 예컨대 Fab 단편 또는 단일쇄 Fv 단편일 수 있다.
항체 이펙터 기능을 변경시키기 위한 Fc 부에 존재하는 아미노산 잔기의 치환은 당업계에 공지되어 있다(Winter, et al., 미국 특허 5,648,260; 5,624,821). 항체의 Fc 부는 여러 중요한 이펙터 기능, 예컨대 사이토킨 유도, ADCC, 식세포작용, 보체 의존적 세포독성(CDC) 및 항체와 항원-항체 복합체의 반감기/제거율 등을 매개한다. 몇몇 경우에는 이러한 이펙터 기능이 치료 항체에 바람직하지만, 어떤 다른 경우에는 치료 목적에 따라서 불필요하거나 심지어 유해할 수도 있다. 특정 사람 IgG 이소타입, 구체적으로 IgG1 및 IgG3은 각각 FcγR 및 보체 C1q에 대한 결합을 통해 ADCC 및 CDC를 매개한다. 신생 Fc 수용체(FcRn)는 항체의 혈행 반감기를 결정하는 중요한 성분이다. 또 다른 양태에서는, 항체의 불변 영역, 예컨대 항체의 Fc 영역에 존재하는 적어도 하나의 아미노산 잔기가 치환되어 이펙터 기능이 변경된 항체가 제공된다.
일 양태는 본 발명의 항체 또는 항체부가 유도체화되거나 또는 다른 기능성 분자(예컨대, 다른 펩타이드 또는 단백질)에 결합된 표지된 결합 단백질을 제공한다. 예를 들어, 본 발명의 표지된 결합 단백질은 본 발명의 항체 또는 항체부를(화학적 커플링, 유전자 융합, 비공유 연합 등에 의해) 하나 이상의 다른 분자 실체, 예컨대 다른 항체(예: 이특이적 항체 또는 디아바디), 검출성 제제, 세포독성제, 약제 및/또는 다른 분자와 항체 또는 항체부의 연합을 매개할 수 있는 단백질이나 펩타이드(예컨대, 스트렙타비딘 코어 영역 또는 폴리히스티딘 태그) 등에 기능적으로 연결시켜 수득할 수 있다.
본 발명의 항체 또는 항체부가 유도체화될 수 있는 유용한 검출성 제제에는 형광 화합물이 포함된다. 검출성 형광 제제의 예에는 플루오레세인, 플루오레세인 이소티오시아네이트, 로다민, 5-디메틸아민-1-나프탈렌설포닐 클로라이드, 피코에리트린 등이 있다. 또한, 항체는 검출성 효소, 예컨대 알칼리성 포스파타제, 서양고추냉이 퍼옥시다제, 글루코스 옥시다제 등에 의해 유도체화될 수 있다. 항체가 검출성 효소로 유도체화된 경우에는, 효소가 검출성 반응 산물을 생산하기 위해 사용하는 추가 시약을 첨가하여 검출한다. 예를 들어, 검출성 제제 서양고추냉이 퍼옥시다제가 존재하는 경우, 과산화수소 및 디아미노벤지딘의 첨가는 검출가능한 발색 반응 생성물을 유도한다. 항체는 또한 비오틴으로 유도체화될 수 있고, 이 경우 아비딘이나 스트렙타비딘 결합의 간접 측정을 통해 검출한다.
본 발명의 다른 양태는 결정화된 결합 단백질을 제공한다. 바람직하게는, 본 발명은 본 명세서에 개시된 바와 같은 전체 항-IL-1α 항체 및 이의 단편의 결정, 및 이러한 결정을 함유하는 제형 및 조성물에 관한 것이다. 한 양태에서, 결정화된 결합 단백질은 이에 대응하는 가용성 결합 단백질보다 생체내 반감기가 더 길다. 다른 양태에서, 결합 단백질은 결정화 후 생물학적 활성을 보유한다.
본 발명의 결정화된 결합 단백질은 당업계에 공지되어 있고 본원에 참고인용된 WO 02072636에 개시된 바와 같이 생산할 수 있다.
본 발명의 다른 양태는 항체 또는 이의 항원 결합부가 하나 이상의 탄수화물 잔기를 포함하는 글리코실화된 결합 단백질을 제공한다. 생체내 생산된 초기 단백질은 해독후 변형으로 알려진 추가 프로세싱으로 처리될 수 있다. 구체적으로, 당(글리코실) 잔기는 글리코실화로 알려진 방법에 의해 효소적으로 첨가될 수 있다. 그 결과 수득되는 공유 결합된 올리고사카라이드 측쇄를 보유한 단백질은 글리코실화된 단백질 또는 당단백질로서 공지되어 있다. 단백질 글리코실화는 당해의 단백질의 아미노산 서열, 뿐만 아니라 이 단백질이 발현되는 숙주 세포에 의존적이다. 다른 유기체는 다른 글리코실화 효소를 생산할 수 있고(예컨대, 글리코실트랜스퍼라제 및 글리코시다제), 이용할 수 있는 기질(뉴클레오타이드 당)이 다를 수 있다. 이러한 요인으로 인해, 단백질 글리코실화 패턴 및 글리코실 잔기의 조성은 특정 단백질이 발현되는 숙주계에 따라 다를 수 있다. 본 발명에 유용한 글리코실 잔기는 글루코스, 갈락토스, 만노스, 퓨코스, n-아세틸글루코사민 및 시알산 등을 이에 국한됨이 없이 포함할 수 있다. 이러한 글리코실화된 결합 단백질은 글리코실화 패턴이 사람이도록 글리코실 잔기를 포함하는 것이 바람직하다.
당업자에게 공지된 바와 같이, 상이한 단백질 글리코실화는 상이한 단백질 특징을 제공할 수 있다. 예를 들어, 효모와 같은 미생물 숙주에서 생산되고 효모 내인성 경로를 이용하여 글리코실화된 치료 단백질의 효능은 CHO 세포주와 같은 포유동물 세포에서 발현된 동일 단백질 효능에 비해 저하될 수 있다. 이러한 당단백질은 또한 사람 중에서 면역원성일 수 있고 투여 후 생체내 반감기가 감소될 수 있다. 사람 및 다른 동물에 존재하는 특정 수용체는 특정 글리코실화 잔기를 인식하고 혈류로부터 그 단백질의 신속 제거를 촉진할 수 있다. 다른 부작용으로, 단백질 폴딩, 가용성, 프로테아제에 대한 민감성, 트래피킹(trafficking), 수송, 구획화, 분비, 다른 단백질이나 인자에 의해 인식, 항원성 또는 알레르기원성 등의 변화를 포함할 수 있다. 따라서, 당업자는 특정 조성과 글리코실화 패턴을 가진 치료 단백질, 예컨대 사람 세포 또는 의도된 피검체 동물의 종 특이적 세포에서 생산되는 것과 동일하거나 적어도 유사한 글리코실화 조성 및 패턴을 가진 치료 단백질을 선호할 수 있다.
숙주 세포와 상이한 글리코실화된 단백질의 발현은 숙주 세포의 유전자 변형을 통해 이종 글리코실화 효소를 발현하도록 함으로써 수득될 수 있다. 사람 단백질 글리코실화를 나타내는 항체 또는 항원 결합부는 당업계에 공지된 기술을 사용하여 당업자라면 제조할 수 있다. 예를 들어, 효모 균주는 비자연발생의 글리코실화 효소를 발현하도록 유전자변형되어, 이 효모 균주에서 생산된 글리코실화된 단백질(당단백질)이 동물 세포, 특히 사람 세포에서 생산된 것과 동일한 단백질 글리코실화가 수득된 바 있다(미국 특허 출원 20040018590 및 20020137134).
또한, 당업자라면 당해의 단백질이 다양한 글리코실화 효소를 발현하도록 유전자 조작된 숙주 세포의 라이브러리를 이용하여, 이 라이브러리의 구성원 숙주 세포가 변형 글리코실화 패턴을 가진 당해의 단백질을 생산하도록 함으로써 발현시킬 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그 후, 숙련자는 특정 신규 글리코실화 패턴을 가진 당해의 단백질을 선택 및 분리할 수 있다. 특별하게 선택된 신규 글리코실화 패턴을 가진 단백질은 향상되거나 또는 변경된 생물학적 성질을 나타내는 것이 바람직하다.
D. 항- IL -1α 항체의 용도
사람 IL-1α에 결합하는 능력이 있다면, 본 발명의 항-사람 IL-1α 항체 또는 이의 일부는 통상의 면역분석법, 예컨대 효소 결합된 면역흡착분석법(ELISA), 방사선면역분석법(RIA) 또는 조직 면역조직화학법을 통해 IL-1α(예컨대 혈청이나 혈장과 같은 생물학적 시료에서)를 검출하는데 사용할 수 있다. 본 발명은 생물학적 샘플을 본 발명의 항체 또는 항체부와 접촉시키는 단계 및 IL-1α에 결합된 항체(또는 항체부) 또는 미결합된 항체(또는 항체부)를 검출하여 생물학적 샘플 내의 IL-1α를 검출하는 단계를 포함하는, 생물학적 샘플 중의 IL-1α의 검출 방법을 제공한다. 항체는 결합 또는 미결합된 항체의 검출을 용이하게 하기 위해 검출성 물질로 직간접적으로 표지화한다. 적당한 검출성 물질에는 각종 효소, 보결분자단, 형광 물질, 발광 물질 및 방사능 물질이 있다. 적당한 효소의 예에는 양고추냉이 퍼옥시다제, 알칼리성 포스파타제, β-갈락토시다제 또는 아세틸콜린에스테라제가 있고; 적당한 보결분자단 복합체의 예에는 스트렙타비딘/비오틴 및 아비딘/비오틴이 있으며; 적당한 형광 물질의 예에는 움벨리페론, 플루오레세인, 플루오레세인 이소티오시아네이트, 로다민, 디클로로트리아지닐아민 플루오레세인, 단실 클로라이드 또는 피코에리트린이 있고; 발광 물질의 예에는 루미놀이 있으며; 적당한 방사능 물질의 예에는 3H, 14C, 35S, 90Y, 99Tc, 111In, 125I, 131I, 177Lu, 166Ho, 및 153Sm이 있다.
항체의 표지화 대안으로, 사람 IL-1α는 검출성 물질로 표지된 rh IL-1α 표준물질과 미표지된 항-사람 IL-1α 항체를 이용하는 경쟁 면역분석에 의해 생물학적 유체 중에서 분석할 수 있다. 이 분석에서, 생물학적 시료, 표지된 rh IL-1α 표준물질 및 항-사람 IL-1α 항체는 배합되고, 미표지된 항체에 결합된 표지된 rh IL-1α 표준물질의 양이 측정된다. 생물학적 시료 중에서 사람 IL-1α의 양은 항-IL-1α 항체에 결합된 표지된 rh IL-1α 표준물질의 양에 반비례한다. 마찬가지로, 사람 IL-1α는 또한 검출성 물질로 표지된 rh IL-1α 표준물질과 미표지된 항-사람 IL-1α 항체를 이용하여 경쟁 면역분석으로 생물학적 유체 중에서 분석할 수도 있다.
본 발명의 항체 및 항체부는 시험관내 및 생체내 모두에서 IL-1α 활성을 중화시킬 수 있다. 따라서, 본 발명의 상기 항체 및 항체부는 예컨대 IL-1α 함유 세포 배양물에서, 본 발명의 항체가 교차반응하는 IL-1α를 보유한 사람 피검체 또는 다른 포유동물 피검체에서 IL-1α 활성을 억제하는데 사용할 수 있다. 한 양태에서, 본 발명은 IL-1α 활성이 억제되도록 본 발명의 항체 또는 항체부와 IL-1α를 접촉시키는 단계를 포함하여 IL-1α 활성을 억제하는 방법을 제공한다. 예를 들어, IL-1α를 함유하는 세포 배양물에서 또는 IL-1α를 함유하는 것으로 의심되는 세포 배양물에서, 본 발명의 항체 또는 항체부는 배양물의 IL-1α 활성을 억제하기 위해 배양 배지에 첨가할 수 있다.
다른 양태에서, 본 발명은 피검체, 유리하게는 IL-1α 활성이 유해한 질환 또는 장애를 앓고 있는 피검체의 IL-1α 활성을 감소시키는 방법을 제공한다. 본 발명은 상기 질환 또는 장애를 앓고 있는 피검체에게 본 발명의 항체 또는 항체부를 투여하여 피검체의 IL-1α 활성이 감소되도록 하는 단계를 포함하여, 상기 피검체의 IL-1α 활성을 감소시키는 방법을 제공한다. IL-1α는 사람 IL-1α이고, 피검체는 사람 피검체인 것이 바람직하다. 대안적으로, 피검체는 본 발명의 항체가 결합할 수 있는 IL-1α를 발현하는 포유동물일 수 있다. 또 다른 피검체는 IL-1α가 도입된(예컨대, IL-1α의 투여에 의해 또는 IL-1α 전이유전자의 발현에 의해) 포유동물일 수 있다. 본 발명의 항체는 치료 목적으로 사람 피검체에게 투여할 수 있다. 더욱이, 본 발명의 항체는 수의학적 목적으로 또는 사람 질환의 동물 모델로서 상기 항체가 결합할 수 있는 IL-1α를 발현하는 비-사람 포유동물에게 투여할 수 있다. 후자와 관련하여, 이러한 동물 모델은 본 발명의 항체의 치료 효능을 평가하는데 유용할 수 있다(예컨대, 투약량 및 투여 시간 과정의 검사).
본 명세서에 사용된 용어 "IL-1α 활성이 해로운 장애"는 장애를 앓는 피검체에서 IL-1α의 존재가 장애의 병태생리에 책임이 있거나 장애의 악화에 기여하는 인자인 것으로 밝혀져 있거나 의심되는 질환 및 기타 장애를 포함하는 것으로 간주한다. 따라서, IL-1α 활성이 해로운 장애는 IL-1α 활성의 감소가 장애의 증상 및/또는 진행을 완화시킬 것으로 예상되는 장애이다. 이러한 장애는 예를 들어, 장애를 앓는 피검체의 생물학적 유체에 존재하는 IL-1α 농도의 증가(예를 들어, 피검체의 혈청, 혈장, 윤활액 등 중의 IL-1α 농도의 증가)에 의해 입증될 수 있고, 이는 예컨대 전술한 바와 같은 항-IL-1A 항체를 이용하여 검출할 수 있다. 본 발명의 항체로 치료할 수 있는 장애의 비제한적인 예는 하기 본 발명의 항체의 약제학적 조성물에 관한 부분에서 논의되는 장애를 포함한다.
D. 약제학적 조성물
또한, 본 발명은 본 발명의 항체 또는 이의 항원결합부와 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 본 발명의 항체를 포함하는 약제학적 조성물은 장애를 진단, 검출 또는 모니터링하거나 장애 또는 이의 하나 이상의 증상을 예방, 치료, 처리 또는 완화시키고/시키거나 연구에 사용하기 위한 것이다. 특정 양태에서, 조성물은 본 발명의 하나 이상의 항체를 포함한다. 또 다른 양태에서, 약제학적 조성물은 본 발명의 하나 이상의 항체 및 본 발명의 항체 외에 IL-1α 및/또는 IL-1α 활성이 유해한 장애를 치료하기 위한 다른 하나 이상의 예방제 또는 치료제를 포함한다. 바람직하게, 예방제 또는 치료제는 장애 또는 이의 하나 이상의 증상을 예방, 치료, 처리 또는 완화시키기에 유용한 것으로 공지되거나 이에 사용되었거나 현재 사용중인 것들이다. 이들 양태에 따라, 당해 조성물은 담체, 희석제 또는 부형제를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 항체 및 항체부는 피검체에 투여하기에 적합한 약제학적 조성물에 혼입될 수 있다. 일반적으로, 약제학적 조성물은 본 발명의 항체 또는 항체부와 약제학적으로 허용되는 담체를 포함한다. 본 명세서에 사용된 "약제학적으로 허용되는 담체"란 용어에는 생리학적으로 적합성인 임의의 모든 용매, 분산 매질, 피복제, 항균제 및 항진균제, 등장제 및 흡수 지연제 등이 포함된다. 약제학적으로 허용되는 담체의 예에는 물, 식염수, 인산염 완충 식염수, 덱스트로스, 글리세롤, 에탄올 등 중의 하나 이상 또는 이의 배합물이 포함된다. 대부분의 경우에는 조성물에 당과 같은 등장제, 만니톨, 소르비톨과 같은 폴리알콜 또는 염화나트륨이 포함되는 것이 바람직하다. 약제학적으로 허용되는 담체는 추가로 항체 또는 항체 일부의 유효 수명이나 효과를 증강시키는 습윤화제 또는 유화제, 방부제 또는 완충액과 같은 보조 물질을 소량 포함할 수도 있다.
다양한 전달 시스템이 공지되어 있고 장애 또는 이의 하나 이상의 증상을 예방하거나 처리하거나 치료하거나 호전시키는데 유용한 본 발명의 하나 이상의 항체 또는 본 발명의 하나 이상의 항체와 예방제 또는 치료제의 배합물을, 예컨대 리포좀내 캅셀화제, 미세입자, 미세캅셀제, 항체 또는 항체 단편을 발현할 수 있는 재조합 세포, 수용체 매개된 세포내이입[Wu and Wu, J. Biol. Chem. 262:4429-4432 (1987)], 레트로바이러스 또는 기타 벡터 등의 일부로서 핵산의 작제 등으로 투여하는데 사용될 수 있다. 본 발명의 예방제 또는 치료제를 투여하는 방법은 비경구 투여(예를 들어, 피부내, 근육내, 복강내, 정맥내 및 피하), 뇌척수 경막외 투여, 종양내 투여 및 점막 투여(예를 들어, 비내 및 경구 경로)를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 또한, 흡입기 또는 분무기의 사용 등에 의해, 및 분무제를 갖는 제형에 의해 폐 투여가 사용될 수 있다[미국 특허 6,019,968, 5,985,320, 5,985,309, 5,934,272, 5,874,064, 5,855,913, 5,290,540, 및 4,880,078; 및 PCT 공개번호 WO 92/19244, WO 97/32572, WO 97/44013, WO 98/31346, 및 WO 99/66903, 각각의 문헌의 전체 내용은 본원에 참조로서 인용된다]. 하나의 양태에서, 본 발명의 항체, 병용 요법 또는 본 발명의 조성물은 Alkermes AIR® 폐 약물 전달 기술(Alkermes, Inc., Cambridge, Mass.)을 사용하여 투여한다. 특정 양태에서, 본 발명의 예방제 또는 치료제는 근육내, 정맥내, 종양내, 경구적으로, 비내, 폐 또는 피하로 투여된다. 예방제 또는 치료제는 임의의 간편한 경로, 예를 들어, 주입 또는 일시 주사, 상피 또는 점막 내층(예를 들어, 경구 점막, 직장 및 장내 점막등)을 통한 흡수에 의해 투여될 수 있고 기타 생물학적 활성제와 함께 투여될 수 있다. 투여는 전신적 또는 국소적일 수 있다.
특정 양태에서, 치료를 필요로 하는 영역에 본 발명의 예방제 또는 치료제를 국소적으로 투여하는 것이 요구될 수 있다. 이것은 예를 들어, 비제한적으로, 국소 주입, 주사 또는 임플란트에 의해 달성될 수 있고 당해 임플란트는 막 및 매트릭스, 예를 들어, 시알라스틱 막, 중합체, 섬유성 매트릭스(예를 들어, Tissuel®) 또는 콜라겐 매트릭스를 포함하는 다공성 또는 비-다공성 물질로 이루어진다. 한 양태에서, 본 발명의 길항제인 유효량의 하나 이상의 항체는 장애 또는 이의 증상을 예방, 치료, 처리 및/또는 호전시키기 위해 피검체의 환부에 국소적으로 투여된다. 또 다른 양태에서, 본 발명의 유효량의 하나 이상의 항체는 장애 또는 이의 하나 이상의 증상을 예방, 치료, 처리 및/또는 호전시키기 위해 본 발명의 항체 외에도 유효량의 하나 이상의 치료제(예를 들어, 하나 이상의 예방제 또는 치료제)와 병용하여 피검체의 환부에 국소적으로 투여된다.
또 다른 양태에서, 예방제 또는 치료제는 제어 방출 또는 지연 방출 시스템으로 전달될 수 있다. 한 양태에서, 펌프를 사용하여 제어 또는 지연 방출을 달성할 수 있다(Langer, 상기 문헌 설명 참조; Sefton, 1987, CRC Crit. Ref. Biomed. Eng. 14:20; Buchwald et al., 1980, Surgery 88:507; Saudek et al., 1989, N. Engl. J. Med. 321:574 참조). 또 다른 양태에서, 중합재를 사용하여 본 발명의 치료제의 제어 또는 지연 방출을 달성할 수 있다[예컨대, Medical Applications of Controlled Release, Langer and Wise (eds.), CRC Pres., Boca Raton, Fla. (1974); Controlled Drug Bioavailability, Drug Product Design and Performance, Smolen and Ball (eds.), Wiley, New York (1984); Ranger and Peppas, 1983, J., Macromol. Sci. Rev. Macromol. Chem. 23:61; 및 Levy et al., 1985, Science 228:190; During et al., 1989, Ann. Neurol. 25:351; Howard et al., 1989, J. Neurosurg. 7 1:105); 미국 특허 5,679,377; 미국 특허 5,916,597; 미국 특허 5,912,015; 미국 특허 5,989,463; 미국 특허 5,128,326; PCT 공개번호 WO 99/15154; 및 PCT 공개 번호 WO 99/20253 참조]. 지연 방출 제형에 사용되는 중합체의 예는 폴리(2-하이드록시 에틸 메타크릴레이트), 폴리(메틸 메타크릴레이트), 폴리(아크릴산), 폴리(에틸렌-코-비닐 아세테이트), 폴리(메타크릴산), 폴리글리콜리드(PLG), 폴리안하이드라이드, 폴리(N- 비닐 피롤리돈), 폴리(비닐 알콜), 폴리아크릴아미드, 폴리(에틸렌 글리콜), 폴리락티드(PLA), 폴리(락티드-코-글리콜리드) (PLGA) 및 폴리오르토에스테르를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 바람직한 양태에서, 지연 방출 제형에 사용되는 중합체는 불활성이고, 침출성 불순물이 없고, 저장시 안정하고 생분해성이다. 또 다른 양태에서, 제어 또는 지연 방출 시스템은 예방제 또는 치료제와 근접하게 위치됨에 따라서 전신 투여량의 일부만을 필요로 한다(Goodson, Medical Applications of Controlled Release, 상기 문헌 설명 참조, vol. 2, pp. 115-138 (1984)).
제어 방출 시스템은 문헌[Langer (1990, Science 249:1527-1533)]에 논의되어 있다. 당업자에게 공지된 임의의 기술을 사용하여 본 발명의 하나 이상의 치료제를 포함하는 지연 방출 제형을 제조할 수 있다[미국 특허 4,526, 938, PCT 공개 WO 91/05548, PCT 공개 WO 96/20698, Ning et al., 1996, "Intratumoral Radioimmunotheraphy of a Human Colon Cancer Xenograft Using a Sustained-Release Gel," Radiotherapy &Oncology 39:179-189, Song et al., 1995, "Antibody Mediated Lung Targeting of Long-Circulating Emulsions," PDA Journal of Pharmaceutical Science &Technology 50:372-397, Cleek et al., 1997, "Biodegradable Polymeric Carriers for a bFGF Antibody for Cardiovascular Application," Pro. Int'l. Symp. Control. Rel. Bioact. Mater. 24:853-854, 및 Lam et al., 1997, "Microencapsulation of Recombinant Humanized Monoclonal Antibody for Local Delivery," Proc. Int'l. Symp. Control Rel. Bioact. Mater. 24:759-760, 이의 각각의 전반적인 내용은 본원에 참조로서 인용된다].
본 발명의 조성물이 예방제 또는 치료제를 암호화하는 핵산인 특정 양태에서, 핵산은 생체내 투여되어 암호화된 예방제 또는 치료제의 발현을 촉진시킬 수 있는데, 이는 당해 핵산을 적당한 핵산 발현 벡터의 일부로서 작제하여 이것이 세포내로 유입되도록, 예를 들어, 레트로바이러스 벡터(미국 특허 4,980,286) 또는 직접 주사 또는 미세입자 충격(예를 들어, 유전자 총; Biolistic, Dupont) 또는 지질 또는 세포 표면 수용체 또는 형질감염제로 피복하여, 또는 핵으로 진입하는 것으로 공지된 호메오박스형 펩타이드에 연결시켜 투여함으로써 이루어진다(Joliot et al., 1991, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:1864-1868). 대안적으로, 핵산은 세포 내로 도입시키고 발현을 위해 상동 재조합에 의해 숙주 세포 DNA 내로 통합시킬 수도 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 이의 의도된 투여 경로에 적합하도록 제형화된다. 투여 경로의 예는 비경구, 예를 들어, 정맥내, 피내, 피하, 경구, 비내(예를 들어, 흡입), 경피(예를 들어, 국소), 경점막 및 직장 투여를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 특정 양태에서, 당해 조성물은 사람에게 정맥내, 피하, 근육내, 경구, 비내 또는 경구 투여용으로 채택된 약제학적 조성물로서 통상적인 과정에 따라 제형화된다. 전형적으로, 정맥내 투여용 조성물은 멸균 등장 수성 완충액 중의 용액이다. 필요한 경우, 당해 조성물은 또한 가용화제 및 주사 부위에서 통증을 완화하기 위한 리그노캠과 같은 국소 마취제를 함유할 수 있다.
본 발명의 조성물이 국소적으로 투여되어야만 하는 경우, 당해 조성물은 연고, 크림, 경피 패취, 로션, 젤, 샴푸, 분무제, 에어로졸, 용액, 에멀젼 또는 당업자에게 널리 공지된 기타 형태로 제형화될 수 있다[Remington's Pharmaceutical Sciences and Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, 19th ed., Mack Pub. Co., Easton, Pa. (1995)]. 분무 불가능한 국소 투여 형태를 위해, 통상적으로 국소 적용에 적합한 담체 또는 하나 이상의 부형제를 포함하고 동점도가 바람직하게는 물보다 큰 점성 내지 반고체 또는 고체 제형이 사용된다. 적합한 제형은 제한없이 용액제, 현탁제, 유제, 크림, 연고, 산제, 도찰제, 고약 등을 포함하고, 필요하다면 이들은 예를 들어, 삼투압과 같은 다양한 성질에 영향을 미치기 위해 보조제(예를 들어, 방부제, 안정제, 습윤화제, 완충제 또는 염)와 함께 멸균하거나 혼합한다. 기타 적합한 국소 투여 형태는 바람직하게 고체 또는 액체 불활성 담체와 배합된 활성 성분이 가압된 휘발성 물질(예를 들어, 가스 분사제, 예를 들어, 프레온)과의 혼합물로 포장되거나 또는 압착병에 포장된 분무 가능한 에어로졸 제제를 포함한다. 습윤화제 또는 보습제가 또한 필요하다면 약제학적 조성물 및 투여 형태에 첨가될 수 있다. 이러한 추가 성분의 예는 당업계에 널리 공지되어 있다.
본 발명의 방법이 조성물의 비내 투여를 포함하는 경우, 당해 조성물은 에어로졸 형태, 분무, 연무 또는 점적액 형태로 제형화될 수 있다. 특히, 본 발명에 따라 사용되는 예방제 또는 치료제는 간편하게 가압된 팩 또는 분무기로부터 에어로졸 분무 제공 형태로 적합한 분사제(예를 들어, 디클로로디플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 또는 기타 적합한 가스)의 사용과 함께 전달될 수 있다. 가압된 에어로졸의 경우에, 용량 단위는 계량된 양이 전달되도록 밸브를 설치하여 측정될 수 있다. 흡입기 또는 취입기에 사용하기 위한 캅셀제 및 카트리지(예를 들어, 젤라틴으로 구성된)는 화합물 및 락토스 또는 전분과 같은 적합한 분말 기제의 분말 혼합물을 함유하도록 제형화될 수 있다.
본 발명의 방법이 경구 투여를 포함하는 경우, 당해 조성물은 정제, 캅셀제, 카쉐제, 젤캡, 용액제, 현탁제 등의 형태로 경구적으로 제형화될 수 있다. 정제 또는 캅셀제는 결합제(예를 들어, 예비젤화된 옥수수 전분, 폴리비닐피롤리돈 또는 하이드록시프로필 메틸셀룰로스); 충전제(예를 들어, 락토스, 미세결정 셀룰로스 또는 인산수소칼슘); 윤활제(예를 들어, 마그네슘 스테아레이트, 탈크 또는 실리카); 붕해제(예를 들어, 감자 전분 또는 나트륨 전분 글리콜레이트) 또는 습윤화제(예를 들어, 나트륨 라우릴 설페이트)와 같은 약제학적으로 허용되는 부형제와 함께 통상적인 수단으로 제조될 수 있다. 정제는 당업자에게 널리 공지된 방법으로 피복될 수 있다. 경구 투여용 액상 제제는 제한 없이 용액제, 시럽 또는 현탁제 형태를 취할 수 있거나 이들은 사용전에 물 또는 기타 적합한 비히클과의 구성을 위해 무수 생성물로서 제공될 수 있다. 당해 액상 제제는 현탁화제(예를 들어, 소르비톨 시럽, 셀룰로스 유도체 또는 수소화된 식용 지방); 유화제(예를 들어, 레시틴 또는 아카시아); 비-수성 비히클(예를 들어, 아몬드유, 오일 에스테르, 에틸 알콜 또는 분획화된 식물성 오일) 및 방부제(예를 들어, 메틸 또는 프로필-p-하이드록시벤조에이트 또는 소르브산)와 같은 약제학적으로 허용되는 첨가제를 사용한 통상적인 수단에 의해 제조될 수 있다. 당해 제제는 또한 적절하게 완충염, 향제, 착색제 및 감미제를 함유할 수 있다. 경구 투여용 제제는 적합하게 예방제 또는 치료제의 서방출, 제어 방출 또는 지연 방출용으로 제형화될 수 있다.
본 발명의 방법은 예를 들어, 흡입기 또는 분무기를 사용함에 의해 분무화제로 제형화된 조성물을 폐 투여함을 포함할 수 있다[미국 특허 6,019, 968, 5,985, 320, 5, 985,309, 5,934,272, 5,874,064, 5,855,913, 5,290,540 및 4,880,078; 및 PCT 공개번호 WO 92/19244, WO 97/32572, WO 97/44013, WO 98/31346, 및 WO 99/66903, 이의 각각의 전반적인 내용은 본원에 참조로서 인용된다]. 특정 양태에서, 본 발명의 항체, 병용 치료제 및/또는 본 발명의 조성물은 Alkermes AIR® 폐 약물 전달 기술(Alkermes, Inc., Cambridge, Mass.)을 사용하여 투여한다.
본 발명의 방법은 주사(예를 들어, 일시 주사 또는 연속 주입)에 의해 비경구 투여용으로 제형화된 조성물의 투여를 포함할 수 있다. 주사용 제형은 방부제 첨가와 함께 단위 용량 형태(예를 들어, 앰플 또는 다용량 용기)로 제공될 수 있다. 당해 조성물은 오일계 또는 수성 비히클 중의 현탁제, 용액제 또는 유제와 같은 형태를 취할 수 있고 현탁화제, 안정제 및/또는 분산제와 같은 제형화제를 함유할 수 있다. 또는, 활성 성분은 사용전에 적합한 비히클(예를 들어, 멸균 발연원 부재 물)로 복원시키는 분말 형태일 수 있다.
본 발명의 방법은 추가로 데포 제제로서 제형화된 조성물의 투여를 포함할 수 있다. 당해 지속성 제제는 이식(예를 들어, 피하 또는 근육내)에 의해 또는 근육내 주사에 의해 투여될 수 있다. 따라서, 예를 들어, 당해 조성물은 적합한 중합재 또는 소수성 물질(예를 들어, 허용되는 오일중 유제로서) 또는 이온 교환 수지, 또는 난용성 유도체 (예를 들어, 난용성 염으로서)로 제형화될 수 있다.
본 발명의 방법은 중성 형태 또는 염 형태로 제형화된 조성물의 투여를 포함한다. 약제학적으로 허용되는 염으로는 염산, 인산, 아세트산, 옥살산, 타르타르산 등에서 유래되는 것과 같은 음이온에 의해 형성된 염; 및 나트륨, 칼륨, 암모늄, 칼슘, 수산화제2철, 이소프로필아민, 트리에틸아민, 2-에틸아미노 에탄올, 히스티딘, 프로카인 등에서 유래되는 것과 같은 양이온에 의해 형성된 염을 포함한다.
일반적으로, 조성물의 성분은 별도로 또는 함께 혼합되어 단위 투약 형태, 예컨대 건조 동결건조된 분말 또는 무수 농축물 형태로, 활성제의 양을 나타내는 앰플 또는 사세트와 같은 용봉 용기에 공급된다. 투여 방식이 주입인 경우, 조성물은 멸균 약제학적 등급 수 또는 식염수를 함유하는 주입병에 분배될 수 있다. 투여 방식이 주입에 의한 경우, 주사용 멸균수 또는 식염수의 앰플이 제공되어 투여 전에 성분이 혼합될 수 있다.
구체적으로, 본 발명은 제제의 함량을 나타내는 앰플 또는 사세트와 같은 용봉된 용기에 포장된 하나 이상의 예방요법제 또는 치료요법제, 또는 본 발명의 약제학적 조성물을 제공한다. 한 양태에서, 본 발명의 하나 이상의 예방요법제 또는 치료요법제, 또는 약제학적 조성물은 건식멸균된 동결건조 분말로 제공되거나, 용봉된 용기에 무수 농축물로 제공되며, 피검체에게 투여하기에 적당한 농도로 복원(예: 물 또는 식염수에 의해)될 수 있다. 한 양태에서, 본 발명의 하나 이상의 예방요법제 또는 치료요법제 또는 약제학적 조성물은 용봉된 용기에 건식멸균된 동결건조 분말로서 적어도 5mg, 더욱 바람직하게는 적어도 10mg, 적어도 15mg, 적어도 25mg, 적어도 35mg, 적어도 45mg, 적어도 50mg, 적어도 75mg, 또는 적어도 100mg의 단위 투약량으로 공급된다. 본 발명의 동결건조된 예방요법제 또는 치료요법제 또는 약제학적 조성물은 2℃ 내지 8℃ 사이에서 본래 용기에 보관되어야 하며, 본 발명의 예방요법제, 치료요법제, 또는 약제학적 조성물은 복원 후 1주 이내, 바람직하게는 5일 이내, 72시간 이내, 48시간 이내, 24시간 이내, 12시간 이내, 6시간 이내, 5시간 이내, 3시간 이내 또는 1시간 이내에 투여되어야 한다. 대안적 양태에서, 본 발명의 하나 이상의 예방요법적 또는 치료요법적 제제 또는 약제학적 조성물은 제제의 양 및 농도를 나타내는 용봉된 용기에 액체 형태로 공급된다. 바람직하게는, 투여된 조성물의 액체 형태는 용봉된 용기에 적어도 0.25mg/ml, 적어도 0.5mg/ml, 적어도 1mg/ml, 적어도 2.5mg/ml, 적어도 5mg/ml, 적어도 8mg/ml, 적어도 10mg/ml, 적어도 15mg/ml, 적어도 25mg/ml, 적어도 50mg/ml, 적어도 75mg/ml, 또는 적어도 100mg/ml로 공급된다. 액체 형태는 본래 용기에서 2 내지 8℃에서 보관되어야 한다.
본 발명의 결합 단백질은 비경구 투여에 적합한 약제학적 조성물에 혼입될 수 있다. 한 양태에서, 결합 단백질은 0.1 내지 250mg/ml의 항체를 함유하는 주사용 용액으로 제조될 것이다. 주사용 용액은 플린트 또는 호박색 바이엘, 앰플 또는 사전충전된 주사기에 액체 또는 동결건조 투약 형태로 구성될 수 있다. 완충액은 L-히스티딘(1 내지 50mM), 최적으로는 5 내지 10mM(pH 5.0 내지 7.0(최적은 pH 6.0))일 수 있다. 다른 적당한 완충액으로는, 석신산나트륨, 시트르산나트륨, 인산나트륨 또는 인산칼륨을 포함하나, 이에 국한되는 것은 아니다. 염화나트륨은 0 내지 300mM(액체 투약 형태에는 최적은 150mM)의 농도로, 용액의 독성을 완화시키는데 사용될 수 있다. 동결건조된 투약 형태에는 동결방지제가 포함될 수 있고, 원칙적으로 0 내지 10% 수크로스(최적은 0.5 내지 1.0%)가 포함될 수 있다. 다른 적당한 동결보호제로는 트레할로스 및 락토스가 있다. 팽창제는 동결건조된 투약 형태에 포함될 수 있고, 주로 1 내지 10%(최적은 2 내지 4%) 만니톨이 사용된다. 안정제는 액체 및 동결건조된 투약 형태 모두에 사용될 수 있고, 주로 1 내지 50mM L-메티오닌(최적은 5 내지 10mM)이 사용된다. 다른 적당한 팽창제로는 글리신, 아르기닌이 있고, 계면활성제는 0 내지 0.05% 폴리소르베이트-80(최적은 0.005 내지 0.01%)으로 포함될 수 있다. 추가 계면활성제로는 폴리소르베이트 20 및 BRIJ 계면활성제가 포함되나, 이에 국한되는 것은 아니다.
본 발명의 조성물은 다양한 형태일 수 있다. 그 예로는 액체, 반고체 및 고체 투약 형태, 예컨대 액체 용액(예: 주사 용액 및 주입 용액), 분산액 또는 현탁액, 정제, 환제, 분말, 리포좀 및 좌약을 포함한다. 바람직한 형태는 의도한 투여 방식 및 치료 적용에 따라 달라진다. 전형적인 바람직한 조성물은 주사 용액 또는 주입 용액 형태로, 예컨대 다른 항체에 의한 사람의 수동 면역화에 사용된 것과 유사한 조성물이다. 바람직한 투여 방식은 비경구(예: 정맥내, 피하, 복강내, 근육내) 방식이다. 바람직한 한 양태에서, 항체는 정맥내 주입 또는 주사에 의해 투여된다. 다른 바람직한 양태에서, 항체는 근육내 또는 피하 주사에 의해 투여된다.
치료 조성물은 일반적으로 멸균되고 제조 및 보관 조건 하에서 안정해야 한다. 조성물은 용액, 마이크로에멀젼, 분산액, 리포좀, 또는 고농도의 약물에 적합한 다른 규정된 구조로 제형화될 수 있다. 멸균 주사 용액은 활성 화합물(즉, 항체 또는 항체부)을 필요한 경우 본 명세서에 열거된 하나 또는 여러 성분들과 함께 적당한 용매에 필요한 양으로 첨가하는 단계, 및 그 다음 여과 멸균하는 단계에 의해 제조될 수 있다. 일반적으로, 분산액은 본 명세서에 열거된 다른 필요 성분 및 염기성 분산 매질을 함유하는 멸균 비히클에 활성 화합물을 첨가하여 제조한다. 멸균된 주사 용액을 제조하기 위한 멸균된 동결건조 분말의 경우, 바람직한 제조 방법은 앞서 멸균 여과 용액으로부터 활성 성분과 임의의 추가 필요 성분의 분말을 생산하는 진공건조 및 분무건조이다. 용액의 적당한 유동성은, 예컨대 레시틴과 같은 코팅의 사용, 분산액의 경우에는 필요한 입자 크기 유지, 및 계면활성제의 사용 등에 의해 유지될 수 있다. 주사용 조성물의 지속적인 흡수는 조성물에 흡수를 지연시키는 제제, 예컨대 모노스테아레이트 염 및 젤라틴을 첨가함으로써 초래될 수 있다.
본 발명의 결합 단백질은 당업계에 공지된 다양한 방법에 의해 투여될 수 있지만, 많은 치료요법적 적용에서 바람직한 투여 경로/방식은 피하 주사, 정맥내 주사 또는 주입이다. 당업자라면 이해할 수 있는 것처럼, 투여 경로 및/또는 방식은 원하는 결과에 따라 달라질 것이다. 특정 양태에서, 활성 화합물은 빠른 방출에 대해 화합물을 보호하는 담체와 함께 제조될 수 있고, 그 예로는 이식, 경피 패치 및 마이크로캡슐화된 전달 시스템과 같은 제어 방출형 제형이 있다. 생체분해성, 생체적합성 중합체가 사용될 수 있고, 그 예로는 에틸렌 비닐 아세테이트, 폴리안하이드라이드, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르토에스테르 및 폴리락트산이 있다. 이러한 제형을 제조하는 다수의 방법은 특허되어 있거나 당업자에게 공지되어 있다[예컨대, Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J.R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978].
특정 양태에서, 본 발명의 항체 또는 항체부는 예컨대 불활성 희석제 또는 동화성 식용 담체와 함께 경구 투여될 수 있다. 화합물(및 필요한 경우 다른 성분)은 또한 경질 또는 연질 외피 젤라틴 캡슐에 동봉되거나, 정제로 압축되거나, 또는 피검체의 식이에 직접 혼입될 수 있다. 경구 치료적 투여인 경우, 화합물은 부형제와 혼합될 수 있고 섭취가능한 정제, 협측 정제, 트로키, 캡슐, 엘리시르, 현탁액, 시럽, 웨이퍼 등의 형태로 사용될 수 있다. 비경구 투여 외에 다른 방식으로 본 발명의 화합물을 투여하기 위해, 당해 화합물은 실활 방지제로 코팅하거나, 실활 방지제와 함께 공동투여할 필요가 있을 수 있다.
또한, 보충 활성 화합물도 조성물에 혼입될 수 있다. 특정 양태에서, 본 발명의 항체 또는 항체부는 IL-1α 활성이 유해한 장애를 치료하는데 유용한 하나 이상의 추가 치료제와 함께 공동제형화 및/또는 공동투여된다. 예를 들어, 본 발명의 항-hIL-1α 항체 또는 항체부는 다른 표적에 결합하는 하나 이상의 추가 항체(예: 다른 사이토킨에 결합하거나 세포 표면 분자에 결합하는 항체)와 함께 공동제형화 및/또는 공동투여될 수 있다. 또한, 본 발명의 하나 이상의 항체는 전술한 치료제 2종 이상과 함께 사용될 수 있다. 이러한 병용 요법은 투여된 치료제의 낮은 투약량을 이용할 수 있게 하여 다양한 단독요법과 관련이 있는 가능한 독성 또는 합병증을 피할 수 있어 유리할 수 있다.
특정 양태에서, IL-1α에 대한 항체 또는 이의 단편은 당업계에 공지된 반감기 연장 비히클에 결합된다. 이러한 비히클로는 Fc 도메인, 폴리에틸렌 글리콜 및 덱스트란을 포함하나, 이에 국한되는 것은 아니다. 이러한 비히클은 모든 목적에서 참고 인용된 미국 특허출원 일련번호 09/428,082 및 PCT 출원 공개번호 WO 99/25044에 기술되어 있다.
특정 양태에서, 본 발명의 항체 또는 본 발명의 다른 예방요법적 또는 치료요법적 제제를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 핵산 서열은 유전자 요법에 의해 장애 또는 이의 하나 이상의 증상을 치료, 예방, 관리 또는 호전시키기 위해 투여한다. 유전자 요법은 발현된 핵산 또는 발현가능한 핵산을 피검체에게 투여하여 수행되는 치료법을 의미한다. 본 발명의 이러한 양태에서, 핵산은 본 발명의 암호화된 항체 또는 예방요법적 또는 치료요법적 효과를 매개하는 본 발명의 예방요법적 제제 또는 치료요법적 제제를 생산한다.
당업계에서 이용할 수 있는 유전자 요법의 임의의 방법은 본 발명에 따라 사용될 수 있다. 유전자 요법의 방법에 관한 일반적인 검토에 대해서는 문헌[Goldspiel et al., 1993, Clinical Pharmacy 12:488-505; Wu and Wu, 1991, Biotherapy 3:87-95; Tolstoshev, 1993, Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 32:573-596; Mulligan, Science 260:926- 932 (1993); 및 Morgan and Anderson, 1993, Ann. Rev. Biochem. 62:191-217; May, 1993, TIBTECH 11(5):155-215]을 참조한다. 사용될 수 있는 재조합 DNA 기술 분야에 널리 공지된 방법은 문헌[Ausubel et al. (eds.), Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley &Sons, NY (1993); 및 Kriegler, Gene Transfer and Expression, A Laboratory Manual, Stockton Press, NY (1990)]을 참조한다. 유전자요법의 다양한 방법에 대한 상세한 설명은 본원에 참고인용된 US2005042664 A1에 개시되어 있다.
IL-1α는 면역 및 염증 인자를 수반하는 다양한 질환과 연관이 있는 병리에 중요한 역할을 한다. 이러한 질환으로는, 비제한적으로 후천성 면역결핍 질환 증후군; 후천성 면역결핍 관련 질환; 후천성 악성 빈혈; 급성 심장 증후군; 급성 및 만성 통증(여러 형태의 통증); 급성 특발성 다발신경염; 기관 이식과 연관된 급성 면역 질환; 기관 이식과 연관된 급성 또는 만성 면역 질환; 급성 염증성 탈수초 다발신경병증; 급성 허혈; 급성 간 질환; 급성 류마티스열; 급성 횡단척수염; 애디슨병; 성인성(급성) 호흡 곤란 증후군; 성인 스틸씨병; 알콜성 경변; 알콜 유도 간 손상, 알레르기성 질환; 알레르기; 탈모; 원형 탈모; 알쯔하이머 질환; 과민증; 강직척추염; 폐질환 연관된 강직척추염; 항-인지질 항체 증후군; 재생불량빈혈; 동맥경화증; 관절병증; 천식; 죽종질환/동맥경화증; 죽상동맥경화증; 아토피성 알레르기; 아토피성 발작; 아토피성 피부염; 위축성 자가면역 갑상선기능저하증; 자가면역 수포성 질환; 자가면역 피부염; 자가면역 당뇨병; 스트렙토코커스 감염과 연관된 자가면역 장애; 자가면역 장병증; 자가면역 용혈성 빈혈; 자가면역 간염; 자가면역 청각상실; 자가면역 림프증식성 증후군(ALPS); 자가면역 매개된 저혈당증; 자가면역 심근염; 자가면역 호중구감소증; 자가면역 조숙 난소 부전; 자가면역 혈소판감소증(AITP); 자가면역 갑상선 질환; 자가면역 포도막염; 폐쇄세기관지염; 베체트병; 안검염; 기관지확장증; 수포성 유천포창; 악액질; 심혈관 질환; 파국적 항인지질 증후군; 복강 질환; 경추증; 클라미디아; 콜레오사타티스(choleosatatis); 만성 활성 간염; 만성 호산구 폐렴; 만성 피로 증후군; 기관 이식과 연관된 만성 면역 질환; 만성 허혈; 만성 간 질환; 만성 점막피부 칸디다증; 흉터유사천포창; 다발성 경화증 위험이 있는 임상적 독립 증후군(CIS); 공통 가변 면역결핍증(공통 가변 저감마글로불린혈증); 결합조직 질환 연관된 간질성 폐 질환; 결막염; 쿰즈 양성 용혈성 빈혈; 소아기 발병 정신질환; 만성 폐쇄 폐질환(COPD); 크론병; 잠복 자가면역 간염; 잠복 섬유화 폐포염; 누낭염; 우울; 피부염 공피증; 피부근육염; 피부근육염/다발근육염 연관 폐질환; 당뇨 망막병증; 진성당뇨병; 확장심근병증; 원반상 홍반 루푸스; 요추간판 헤르니아증; 요추간판 탈출증; 파종 혈관내 응고; 약물-유도 간염; 약물-유도 간질성 폐질환; 약물 유도 면역 용혈 빈혈; 심내막염; 자궁내막증; 안구내염; 장병성 윤활막염; 상공막염; 다형홍반; 주요다형홍반; 여성 불임증; 섬유증; 섬유성 폐 질환; 임신 유사천포창; 거대세포 동맥염(GCA); 사구체신염; 갑상선종성 자가면역 갑상선기능저하증(하시모토병); 굿파스처 증후군; 통풍성 관절염; 이식편대숙주 질환(GVHD); 그레이브스병; B 그룹 연쇄구균(GBS) 감염; 길랑-바레 증후군(Guillain-Barre Syndrome(GBS)); 혈철증 연관 폐질환; 건초열(Hay Fever); 심부전; 용혈빈혈; 헤노흐-쇤라인 자반증; B형 간염; C형 간염; 휴즈(Hughes) 증후군; 헌팅톤 무도병; 갑상선기능항진증; 부갑상선기능저하증; 특발성 백혈구감소증; 특발성 혈소판감소증; 특발성 파킨슨병; 특발성 간질성 폐렴; 특발성 간 질환; IgE-매개 알레르기; 면역 용혈빈혈; 봉입체 근염; 감염성 질환; 감염성 안구 염증성 질환; 염증성 장 질환; 염증성 탈수초 질환; 염증성 심장 질환; 염증성 신장 질환; 인슐린 의존 진성당뇨병; 간질성 폐렴; IPF/UIP; 홍채염; 연소성 만성 관절염; 연소성 악성 빈혈; 연소성 류마티스성 관절염; 가와사키병; 각막염; 건조각막결막염; 쿠스마울 질환 또는 쿠스마울-마이어 질환; 랜드리 마비; 랑게르한스 세포 조직구증; 선형 IgA 질환; 망상피반; 라임 관절염; 림프구성 침윤 폐 질환; 황반변성; 특발성 남성 불임 또는 NOS; 악성종양; 신장의 현미경적 혈관염; 현미경적 다발혈관염; 복합 결합조직 질환 연관 폐 질환; 모부스 베크테레브병; 운동 신경 장애; 점막 유천포창; 다발성경화증(모든 아형: 1차 진행성, 2차 진행성, 재발-이장성 등); 다발 기관 손상; 근통성 뇌염/로얄 프리(Royal Free) 질환; 중증근무력증; 골수형성이상 증후군; 심근경색; 심근염; 신증후군; 신경근 장애; 신경병; 비알콜성 지방간염; 비-A 비-B 간염; 시각신경염; 기관 이식 거부; 골관절염; 골용해; 난소암; 난소 부전; 췌장염; 기생충병; 파킨슨병; 소수관절 JRA; 유천포창; 낙엽천포창; 보통천포창; 말초 동맥 폐색 질환(PAOD); 말초 혈관 질환(PVD); 말초 동맥 질환(PAD); 수정체성 포도막염; 정맥염; 결절성 다발동맥염(또는 결절성 동맥주위염); 다발연골염; 류마티스성 다발근육통; 백모증; 다관절 JRA; 다내분기결핍증후군; 다발근육염; 다분비선결핍 I형 및 다분비선결핍 II형: 류마티스성 다발성근육통(PMR); 감염후 간질성 폐 질환; 염증후 간질성 폐 질환; 펌프후 증후군; 조기난소 부전; 원발성 담즙성 간경변; 원발성 점액수종; 원발성 파킨슨증; 원발성 경화성 간염; 원발성 혈관염; 전립선 및 직장 암 및 조혈성 악성종양(백혈병 및 림프종); 전립선염; 건선; 건선 I형; 건선 2형; 건선성 관절염; 건선성 관절병; 결합 조직 질환에 속발성인 폐 고혈압증; 결절성 다발성 동맥염의 폐 징후; 진정적혈구계 무형성; 원발성 부신기능 저하증; 방사성 섬유증; 반응성 관절염; 라이터 질환; 재발시신경척수염; 신장 질환 NOS; 재협착증; 류마티스성 절염; 류마티스성 관절염 연관 간질성 폐 질환; 류마티스성 심장 질환; SAPHO(윤활막염, 여드름, 농포증, 골과다증 및 골염); 사르코이드증; 정신분열증; 슈미트 증후군; 공피증; 속발성 아밀로이드증; 쇼크 폐; 공막염; 좌골신경통; 2차 부신부전; 패혈증; 패혈성 관절염; 패혈성 쇼크; 혈청음성 관절병; 실리콘 관련 결합조직 질환; 쇼그렌 질환 관련 폐 질환; 쇼그렌 증후군; 스네던-윌킨슨 피부병; 정자 자가면역; 척추관절병증; 강직 척추염; 스티븐스-존슨 증후군(SJS); 스틸병; 발작; 교감눈염증; 전신 염증 반응 증후군; 전신 홍반성 루푸스; 전신 홍반성 루푸스 관련 폐 질환; 전신 경화증; 전신 경화증 관련 간질성 폐 질환; 다카야스병/동맥염; 일시 동맥염; Th2형 및 Th1형 매개 질환; 갑상선염; 독성 쇼크 증후군; 톡소플라스마성 비염; 독소 표피 괴사용해; 횡단성 골수염; TRAPS(종양 괴사 인자 수용체 1형(TNFR)-관련 주기적 증후군; 흑색극세포증 보유 B형 인슐린 내성; I형 알레르기 반응; 1형 자가면역 간염(고전적 자가면역 또는 루푸스성 간염); 2형 자가면역 간염(항-LKM 항체 간염); II형 당뇨병; 궤양성 결장 관절병증; 궤양성 결장염; 두드러기; 일반 간질성 폐렴(UIP); 포도막염; 혈관염성 미만성 폐 질환; 혈관염; 봄철 결막염; 바이러스 비염; 백반증; 보그트-고야나기-하라다 증후군(VKH 증후군); 베게너 육아종증; 습성 황반 변성; 상처 치유; 예르시니아 및 살모넬라 관련 관절병을 포함한다.
한 관점에서, 본 발명의 항체 또는 이의 항원결합부는 류마티스성 관절염, 골관절염, 크론병, 다발경화증, 인슐린 의존 진성당뇨병 및 건선을 치료하는데 사용된다.
또한, 본 발명의 항체 및 항체부는 자가면역 질환, 특히 염증 관련 질환, 예컨대 강직척추염, 알레르기, 자가면역 당뇨병, 자가면역 포도막염을 앓고 있는 사람을 치료하는데 사용할 수 있다.
또한, 본 발명의 항체 또는 항체부는 자가면역 및 염증 질환을 치료하는데 유용한 하나 이상의 추가 치료제와 함께 투여될 수 있다.
본 발명의 항체 또는 이의 항원결합부는 상기 질환들을 치료하는데 단독 사용할 수도 있고, 또는 배합하여 사용할 수도 있다. 본 발명의 항체 또는 이의 항원결합부는 단독 사용하거나 또는 추가 제제, 예컨대 치료제와 함께 사용될 수 있고, 이러한 추가 제제는 목적에 따라 당업자라면 선택할 수 있다. 예를 들어, 추가 제제는 본 발명의 항체에 의해 치료되는 질환 또는 상태를 치료하는데 유용한 것으로 당해 기술분야에서 인식된 치료제일 수 있다. 또한, 추가 제제는 치료 조성물에 유익한 속성을 부여하는 제제, 예컨대 조성물의 점도에 영향을 미치는 제제일 수 있다.
또한, 본 발명에 포함되어야 하는 배합물은 이의 의도 목적에 유용한 배합물인 것으로 이해되어야 한다. 이하에 제시되는 제제는 예시적인 목적이지, 제한하려는 것이 아니다. 본 발명의 일부인 배합물은 본 발명의 항체와 이하의 목록 중에서 선택되는 적어도 하나의 추가 제제일 수 있다. 또한, 배합물은 하나보다 많은 추가 제제, 예컨대 2종 또는 3종의 추가 제제을 포함할 수도 있는데, 단 형성된 조성물이 의도한 기능을 수행할 수 있어야 한다.
바람직한 배합물은 이부프로펜과 같은 약물을 포함하는 NSAID로도 지칭되는 비스테로이드성 소염 약물(들)이다. 다른 바람직한 배합물은 프레드니솔론을 비롯한 코르티코스테로이드이며, 스테로이드 사용 시의 공지된 부작용은 본 발명의 항-IL-1α 항체와 배합하여 환자를 치료할 때 필요한 스테로이드 용량을 점차 줄여서 감소시키거나 심지어 제거할 수도 있다. 본 발명의 항체 또는 항체부와 배합될 수 있는 류마티스성 관절염용 치료제의 비제한적 예로는 다음과 같은 것이 포함된다: 사이토킨 억제성 소염 약물(들)(CSAID); 다른 사람 사이토킨 또는 성장인자, 예컨대 TNF, LT, IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-15, IL-16, IL-18, IL-21, 인터페론, EMAP-II, GM-CSF, FGF 및 PDGF에 대한 항체 또는 길항제. 본 발명의 항체 또는 이의 항원결합부는 CD2, CD3, CD4, CD8, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD80(B7.1), CD86(B7.2), CD90, CTLA와 같은 세포 표면 분자에 대한 항체 또는 이들의 리간드, 예컨대 CD154(gp39 또는 CD40L)와 배합될 수 있다.
치료제의 바람직한 배합물은 자가면역 및 후속 염증 캐스캐이드의 여러 지점에서 간섭할 수 있다; 바람직한 예로는 TNF 길항제, 예컨대 키메라, 사람화된 또는 사람 TNF 항체, D2E7(PCT 공개번호 WO 97/29131), CA2(Remicade™), CDP571 및 가용성 p55 또는 p75 TNF 수용체, 이의 유도체(p75TNFR1gG (Enbrel™)) 또는 p55TNFR1gG (Lenercept) 및 또한 TNFα 전환 효소(TACE) 억제제가 있고, 유사하게 IL-1 억제제(인터류킨-1-전환 효소 억제제, IL-1RA 등)는 동일 이유로 인해 효과적일 수 있다. 다른 바람직한 배합물에는 인터류킨 11이 포함된다. 또 다른 바람직한 배합물은 IL-1α 기능과 병행하거나, IL-1α 기능에 의존적이거나 IL-1α 기능과 협동적인 작용을 할 수 있는 자가면역 반응의 다른 주요 작용인자이다; 특히 IL-18 항체 또는 가용성 IL-18 수용체를 포함하는 IL-18 길항제 또는 IL-18 결합 단백질이 바람직하다. 또 다른 바람직한 배합물은 비고갈성 항-CD4 억제제이다. 또 다른 바람직한 배합물은 공동자극 경로의 길항제 CD80(B7.1) 또는 CD86(B7.2), 예컨대 항체, 가용성 수용체 또는 길항제성 리간드를 포함한다.
본 발명의 항체 또는 이의 항원결합부는 또한 메토트렉세이트, 6-MP, 아자티오프린 설파살라진, 메살라진, 올살라진 클로로퀴닌/하이드록시클로로퀸, 펜실라민, 오로티오말레이트(근육내 및 경구), 아자티오프린, 콜히친, 코르티코스테로이드(경구, 흡입 및 국소 주사), 베타-2 아드레날린수용체 작용제(살부타몰, 터부탈린, 살메테랄), 크산틴(테오필린, 아미노필린), 크로모글리케이트, 네도크로밀, 케토티펜, 이프라트로퓸 및 옥시트로퓸, 사이클로스포린, FK506, 라파마이신, 미코페놀레이트 모페틸, 레플루노미드, NSAID, 예컨대 이부프로펜, 코르티코스테로이드, 예컨대 프레드니솔론, 포스포디에스테라제 억제제, 아데노신 작용제, 항혈전제, 보체 억제제, 아드레날린작용제, 염증촉진성 사이토킨, 예컨대 TNFα 또는 IL-1에 의한 시그널 전달을 방해하는 제제(예: IRAK, NIK, IKK, p38 또는 MAP 키나제 억제제), IL-1β 전환효소 억제제, TNFα 전환효소(TACE) 억제제, T-세포 시그널 전달 억제제, 예컨대 키나제 억제제, 메탈로프로테이나제 억제제, 설파살라진, 아자티오프린, 6-머캅토퓨린, 안지오텐신 전환 효소 억제제, 가용성 사이토킨 수용체 및 이의 유도체(예: 가용성 p55 또는 p75 TNF 수용체 및 유도체 p75TNFRIgG(Enbrel™ 및 p55TNFRIgG(Lenercept)), sIL-1RI, sIL-1RII, sIL-6R), 소염성 사이토킨(예: IL-4, IL-10, IL-11, IL-13 및 TGFβ), 셀레콕시브, 엽산, 하이드록시클로로퀸 설페이트, 로페콕시브, 에타너셉트, 인플릭시마브, 나프록센, 발데콕시브, 설파살라진, 메틸프레드니솔론, 멜록시캄, 메틸프레드니솔론 아세테이트, 골드 나트륨 티오말레이트, 아스피린, 트리암시놀론 아세토나이드, 프로폭시펜 나프실레이트/apap, 폴레이트, 나부메톤, 디클로페낙, 피록시캄, 에토돌락, 디클로페낙 나트륨, 옥사프로진, 옥시코돈 hcl, 하이드로코돈 비타르트레이트/apap, 디클로페낙 나트륨/미소프로스톨, 펜타닐, 아나킨라, 사람 재조합체, 트라마돌 hcl, 살살레이트, 설린닥, 시아노코발라민/fa/피리독신, 아세트아미노펜, 알렌드로네이트 나트륨, 프레드니솔론, 몰핀 설페이트, 리도카인 하이드로클로라이드, 인도메타신, 글루코사민 설프/콘드로이틴, 아미트립틸린 hcl, 설파디아진, 옥시코돈 hcl/아세트아미노펜, 올로파타딘 hcl, 미소프로스톨, 나프록센 나트륨, 오메프라졸, 사이클로포스파미드, 리툭시마브, IL-1 TRAP, MRA, CTLA4-IG, IL-18BP, 항-IL-12, 항-IL15, BIRB-796, SCIO-469, VX-702, AMG-548, VX-740, 로플루밀라스트, IC-485, CDC-801 및 메소프람 등의 제제와도 배합될 수 있다. 바람직한 배합물은 메토트렉세이트 또는 레플루노미드를 포함하며, 보통 또는 중증 류마티스성 관절염 증례에는 사이클로스포린이 포함된다.
본 발명의 항체 또는 항체부가 배합될 수 있는 염증장병에 유용한 치료제의 비제한적 예에는 다음과 같은 것이 있다: 부데노사이드; 표피 성장 인자; 코르티코스테로이드; 사이클로스포린, 설파살라진; 아미노살리실레이트; 6-머캅토퓨린; 아자티오프린; 메트로니다졸; 리폭시게나제 억제제; 메살라민; 올살라진; 발살라지드; 항산화제; 트롬복산 억제제; IL-1 수용체 길항제; 항-IL-1β 모노클로날 항체; 항-IL-6 모노클로날 항체; 성장 인자; 엘라스타제 억제제; 피리디닐-이미다졸 화합물; 다른 사람 사이토킨 또는 성장 인자, 예컨대 TNF, LT, IL-1β, IL-2, IL-6, IL-7, IL-8, IL-15, IL-16, IL-17, IL-18, EMAP-II, GM-CSF, FGF 및 PDGF에 대한 항체 또는 길항제. 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합부는 세포 표면 분자, 예컨대 CD2, CD3, CD4, CD8, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD90 또는 이들의 리간드에 대한 항체와 배합될 수도 있다. 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합부는 또한 제제, 예컨대 메토트렉세이트, 사이클로스포린, FK506, 라파마이신, 마이코페놀레이트 모페틸, 레플루노마이드, NSAID, 예컨대 이부프로펜, 코르티코스테로이드, 예컨대 프레드니솔론, 포스포디에스테라제 억제제, 아데노신 작용제, 항혈전제, 보체 억제제, 아드레날린작용제, TNFα 또는 IL-1과 같은 염증촉진성 사이토킨에 의한 시그널 전달을 방해하는 제제(예: IRAK, NIK, IKK, p38 또는 MAP 키나제 억제제), IL-1β 전환효소 억제제, TNFα 전환 효소 억제제, T-세포 시그널 전달 억제제, 예컨대 키나제 억제제, 메탈로프로테이나제 억제제, 설파살라진, 아자티오프린, 6-머캅토퓨린, 안지오텐신 전환 효소 억제제, 가용성 사이토킨 수용체 및 이의 유도체(예: 가용성 p55 또는 p75 TNF 수용체, sIL-1RI, sIL-1RII, sIL-6R) 및 소염성 사이토킨(예: IL-4, IL-10, IL-11, IL-13 및 TGFβ)와 배합될 수 있다.
항체 또는 항원결합부가 배합될 수 있는 크론병 치료제의 바람직한 예에는 다음과 같은 것이 있다: TNF 길항제, 예컨대 항-TNF 항체, D2E7(PCT 공개 WO 97/29131; HUMIRA), CA2(REMICADE), CDP 571, TNFR-Ig 작제물, (p75TNFR1gG(ENBREL) 또는 p55TNFR1gG(LENERCEPT)) 억제제 및 PDE4 억제제. 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합부는 코르티코스테로이드, 예컨대 부데노사이드 및 덱사메타손과 배합될 수 있다. 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합부는 또한 설파살라진, 5-아미노살리실산 및 올살라진과 같은 제제, 및 염증촉진성 사이토킨, 예컨대 IL-1, 예를 들어 IL-1β 전환효소 억제제 및 IL-1ra의 합성 또는 작용을 방해하는 제제와 배합될 수 있다. 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합부는 또한 T 세포 시그널 전달 억제제, 예컨대 타이로신 키나제 억제제 6-머캅토퓨린과 함께 사용될 수 있다. 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합부는 IL-11과 배합될 수 있다. 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합부는 메살라민, 프레드니손, 아자티오프린, 머캅토퓨린, 인플릭시마브, 메틸프레드니솔론 나트륨 석시네이트, 디페녹실레이트/아트로프 설페이트, 로퍼아미드 하이드로클로라이드, 메토트렉세이트, 오메프라졸, 폴레이트, 시프로플록사신/덱스트로스-물, 하이드로코돈 비타르트레이트/apap, 테트라사이클린 하이드로클로라이드, 플루오시노나이드, 메트로니다졸, 티메로살/붕산, 콜레스티라민/슈크로스, 시프로플록사신 하이드로클로라이드, 하이오시아민 설페이트, 메페리딘 하이드로클로라이드, 미다졸람 하이드로클로라이드, 옥시코돈 hcl/아세트아미노펜, 프로메타진 하이드로클로라이드, 인산나트륨, 설파메톡사졸/트리메토프림, 셀레콕시브, 폴리카르보필, 프로폭시펜 나프실레이트, 하이드로코르티손, 멀티비타민, 발살라지드 이나트륨, 코데인 포스페이트/apap, 콜레세벨람 hcl, 시아노코발라민, 엽산, 레보플록사신, 메틸프레드니솔론, 나탈리주마브 및 인터페론-감마와 배합될 수 있다.
본 발명의 항체 또는 항체부와 배합될 수 있는 다발성 경화증 치료제의 비제한적 예에는 다음과 같은 것이 있다: 코르티코스테로이드; 프레드니솔론; 메틸프레드니솔론; 아자티오프린; 사이클로포스파미드; 사이클로스포린; 메토트렉세이트; 4-아미노피리딘; 티자니딘; 인터페론-β1a(AVONEX; Biogen); 인터페론-β1b(BETASERON; Chiron/Berlex); 인터페론 α-n3(Interferon Sciences/Fujimoto), 인터페론-α(Alfa Wassermann/J&J), 인터페론 β1A-IF(Serono/Inhale Therapeutics), 페그인터페론 α2b(Enzon/Schering-Plough), 공중합체 1(Cop-1; COPAXONE; Teva Pharmaceutical Industries, Inc.); 고압 산소; 정맥내 면역글로불린; 클라브리빈; 다른 사람 사이토킨 또는 성장인자 및 이의 수용체, 예컨대 TNF, LT, IL-1β, IL-2, IL-6, IL-7, IL-8, IL-1A, IL-15, IL-16, IL-18, EMAP-II, GM-CSF, FGF 및 PDGF에 대한 항체 또는 길항제. 본 발명의 항체 또는 이의 항원결합부는 CD2, CD3, CD4, CD8, CD19, CD20, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD80, CD86, CD90과 같은 세포 표면 분자 또는 이들의 리간드에 대한 항체와 배합될 수 있다. 본 발명의 항체 또는 이의 항원결합부는 또한 제제, 예컨대 메토트렉세이트, 사이클로스포린, FK506, 라파마이신, 마이코페놀레이트 모페틸, 레플루노마이드, NSAID, 예컨대 이부프로펜, 코르티코스테로이드, 예컨대 프레드니솔론, 포스포디에스테라제 억제제, 아데노신 작용제, 항혈전제, 보체 억제제, 아드레날린작용제, TNFα 또는 IL-1과 같은 염증촉진성 사이토킨에 의한 시그널 전달을 방해하는 제제(예: IRAK, NIK, IKK, p38 또는 MAP 키나제 억제제), IL-1β 전환효소 억제제, TACE 억제제, T-세포 시그널 전달 억제제, 예컨대 키나제 억제제, 메탈로프로테이나제 억제제, 설파살라진, 아자티오프린, 6-머캅토퓨린, 안지오텐신 전환 효소 억제제, 가용성 사이토킨 수용체 및 이의 유도체(예: 가용성 p55 또는 p75 TNF 수용체, sIL-1RI, sIL-1RII, sIL-6R) 및 소염성 사이토킨(예: IL-4, IL-10, IL-13 및 TGFβ)과 배합될 수 있다.
본 발명의 항체 또는 이의 항원결합부와 배합될 수 있는 다발성 경화증 치료제의 바람직한 예에는 인터페론 β, 예컨대 IFNβ1a 및 IFNβ1b; 코팍손, 코르티코스테로이드, 카스파제 억제제, 예컨대 카스파제-1 억제제, IL-1 억제제, TNF 억제제 및 CD40 리간드 및 CD80에 대한 항체가 포함된다.
본 발명의 항체 또는 이의 항원결합부는 또한 제제, 예컨대 알렘투주마브, 드로나비놀, 유니메드, 다클리주마브, 미토크산트론, 크살리프로덴 하이드로클로라이드, 팜프리딘, 글라티라머 아세테이트, 나탈리주마브, 신나비돌, a-이뮤노킨 NNSO3, ABR-215062, AnergiX.MS, 케모킨 수용체 길항제, BBR-2778, 칼라구알린, CPI-1189, LEM(리포좀 캡슐화된 미토크산트론), THC.CBD(칸나비노이드 작용제) MBP-8298, 메소프람(PDE4 억제제), MNA-715, 항-IL-6 수용체 항체, 뉴로박스, 피르페니돈, 알로트랩 1258(RDP-1258), sTNF-R1, 탈람파넬, 테리플루노마이드, TGF-베타2, 티플리모타이드, VLA-4 길항제(예컨대, TR-14035, VLA4 Ultrahaler, Antegran-ELAN/Biogen), 인터페론 감마 길항제, IL-4 작용제와 배합될 수 있다.
본 발명의 항체 또는 항체부와 배합될 수 있는 협심증 치료제의 비제한적 예에는 다음과 같은 것이 있다: 아스피린, 니트로글리세린, 이소소르비드 모노니트레이트, 메토프롤롤 석시네이트, 아테놀로, 메토프롤롤 타르트레이트, 암로디핀 베실레이트, 딜티아젬 하이드로클로라이드, 이소소르비드 디니트레이트, 클로피도그렐 비설페이트, 니페디핀, 아토바스타틴 칼슘, 염화칼륨, 후로세미드, 심바스타틴, 베라파밀 hcl, 디곡신, 프로프라놀롤 하이드로클로라이드, 카베딜롤, 리시노프릴, 스피로노락톤, 하이드로클로로티아지드, 에나라프릴 말레이트, 나돌롤, 라미프릴, 에녹사파린 나트륨, 헤라핀 나트륨, 발사르탄, 소탈롤 하이드로클로라이드, 페노피브레이트, 에제티미브, 부메타니드, 로사탄 포타슘, 리시노프릴/하이드로클로로티아지드, 펠로디핀, 캅토프릴, 비소프롤롤 푸마레이트.
본 발명의 항체 또는 항체부와 배합될 수 있는 강직 척추염 치료제의 비제한적 예에는 다음과 같은 것이 있다: 이부프로펜, 디클로페낙 및 미소프로스톨, 나프록센, 멜록시캄, 인도메타신, 디클로페낙, 셀레콕시브, 로페콕시브, 설파살라진, 메토트렉세이트, 아자티오프린, 미노사이클린, 프레드니손, 에타너셉트, 인플릭시마브.
본 발명의 항체 또는 항체부와 배합될 수 있는 천식 치료제의 비제한적 예에는 다음과 같은 것이 있다: 알부테롤, 살메테롤/플루티카손, 몬텔루카스트 나트륨, 플루티카손 프로피오네이트, 부데소니드, 프레드니손, 살메테롤 크시나포에이트, 레발부테롤 hcl, 알부테롤 설페이트/이프라트로퓸, 프레드니솔론 나트륨 포스페이트, 트리암시놀론 아세토나이드, 베클로메타손 디프로피오네이트, 이프라트로퓸 브로마이드, 아지트로마이신, 피르부테롤 아세테이트, 프레드니솔론, 무수 테오필린, 메틸프레드니솔론 나트륨 석시네이트, 클라리트로마이신, 자피르루카스트, 포르모테롤 푸마레이트, 인플루엔자 바이러스 백신, 메틸프레드니솔론, 아목시실린 트리하이드레이트, 플루니솔라이드, 알레르기 주사, 크로몰린 나트륨, 펙소페나딘 하이드로클로라이드, 플루니솔라이드/멘톨, 아목시실린/클라불라네이트, 레보플록사신, 흡입기 보조 장치, 구아이페네신, 덱사메타손 나트륨 포스페이트, 목시플록사신 hcl, 독시사이클린 하이클레이트, 구아이페네신/d-메토판, p-에페드린/cod/클로페니르, 가티플록사신, 세티리진 하이드로클로라이드, 모메타손 퓨로에이트, 살메테롤 신나포에이트, 벤조나테이트, 세팔렉신, pe/하이드로코돈/클로르페니르, 세티리진 hcl/슈도에페드, 페닐에프린/cod/프로메타진, 코데인/프로메타진, 세프프로질, 덱사메타손, 구아이페네신/슈도에페드린, 클로페니라민/하이드로코돈, 네도크로밀 나트륨, 테르부탈린 설페이트, 에피네프린, 메틸프레드니솔론, 메타프로테레놀 설페이트.
본 발명의 항체 또는 항체부와 배합될 수 있는 COPD 치료제의 비제한적 예에는 다음과 같은 것이 있다: 알부테롤 설페이트/이프라트로퓸, 이프라트로퓸 브로마이드, 살메테롤/플루티카손, 알부테롤, 살메테롤 크시나포에이트, 플루티카손 프로피오네이트, 프레드니손, 무수 테오필린, 메틸프레드니솔론 나트륨 석시네이트, 몬텔루카스트 나트륨, 부데소니드, 포르모테롤 푸마레이트, 트리암시놀론 아세토나이드, 레보플록사신, 구아이페네신, 아지트로마이신, 베클로메타손 디프로피오네이트, 레발부테롤 hcl, 플루니솔라이드, 세프트리악손 나트륨, 아목시실린 트리하이드레이트, 가티플록사신, 자피르루카스트, 아목시실린/클라불라네이트, 플루니솔라이드/멘톨, 클로르페니라민/하이드로코돈, 메타프로테레놀 설페이트, 메틸프레드니솔론, 모메타손 푸로에이트, p-에페드린/cod/클로르페니르, 피르부테롤 아세테이트, p-에페드린/로라타딘, 테르부탈린 설페이트, 티오트로퓸 브로마이드, (R,R)-포르모테롤, TgAAT, 실로밀라스트, 로플루밀라스트.
본 발명의 항체 또는 항체부와 배합될 수 있는 HCV 치료제의 비제한적 예에는 다음과 같은 것이 있다: 인터페론-알파-2a, 인터페론-알파-2b, 인터페론-알파 con1, 인터페론-알파-n1, 페길화된 인터페론-알파-2a, 페길화된 인터페론-알파-2b, 리바비린, 페그인터페론 알파-2b + 리바비린, 우르소데옥시콜린산, 글리시리진산, 티말파신, 막사민, VX-497 및 표적, 즉 HCV 폴리머라제, HCV 프로테아제, HCV 헬리카제, HCV IRES(내부 리보솜 진입 부위)의 간섭을 통해 HCV를 치료하는데 사용되는 임의의 화합물.
본 발명의 항체 또는 항체부와 배합될 수 있는 특발폐섬유증 치료제의 비제한적 예에는 다음과 같은 것이 있다: 프레드니손, 아자티오프린, 알부테롤, 콜히친, 알부테롤 설페이트, 디곡신, 감마 인터페론, 메틸프레드니솔론 sod succ, 로라제팜, 후로세미드, 리시노프릴, 니트로글리세린, 스피로놀락톤, 사이클로포스파미드, 이프라트로퓸 브로마이드, 악티노마이신 d, 알테플라스, 플루티카손 프로피오네이트, 레보플록사신, 메타프로테레놀 설페이트, 몰핀 설페이트, 옥시코돈 hcl, 염화칼륨, 트리암시놀론 아세토나이드, 무수 태크롤리무스, 칼슘, 인터페론-α, 메토트렉세이트, 마이코페놀레이트 모페틸, 인터페론-감마-1β.
본 발명의 항체 또는 항체부와 배합될 수 있는 심근경색 치료제의 비제한적 예에는 다음과 같은 것이 있다: 아스피린, 니트로글리세린, 메토프롤롤 타르트레이트, 에녹사파린 나트륨, 헤파린 나트륨, 클로피도그렐 비설페이트, 카베딜롤, 아테놀롤, 몰핀 설페이트, 메토프롤롤 석시네이트, 워파린 나트륨, 리시노프릴, 이소소르비드 모노니트레이트, 디곡신, 후로세미드, 심바스타틴, 라미프릴, 테넥테플라스, 에나라프릴 말레이트, 토르세미드, 레타바스, 로사탄 포타슘, 퀴나프릴 hcl/mag carb, 부메타니드, 알테플라스, 에날라프릴라트, 아미오다론 하이드로클로라이드, 티로피반 hcl m-하이드레이트, 딜티아젬 하이드로클로라이드, 캡토프릴, 이르베사탄, 발사탄, 프로프라놀롤 하이드로클로라이드, 호시노프릴 나트륨, 리도카인 하이드로클로라이드, 엡티피바타이드, 세파졸린 나트륨, 아트로핀 설페이트, 아미노카프린산, 스피로노락톤, 인터페론, 소탈롤 하이드로클로라이드, 염화칼륨, 도큐세이트 나트륨, 도부타민 hcl, 알프라졸람, 프라바스타틴 나트륨, 아토바스타틴 칼슘, 미다졸람 염산염, 메페리딘 하이드로클로라이드, 이소소르비드 디니트레이트, 에피네프린, 도파민 하이드로클로라이드, 비파리루딘, 로수바스타틴, 엑제티미브/심바스타틴, 아바시미브, 카리포라이드.
본 발명의 항체 또는 항체부와 배합될 수 있는 건선 치료제의 비제한적 예에는 다음과 같은 것이 있다: 칼시포트리엔, 클로베타솔 프로피오네이트, 트리암시놀론 아세토나이드, 할로베타솔 프로피오네이트, 타자로텐, 메토트렉세이트, 플루오시노나이드, 베타메타손 디프로프 보강형, 플루오시놀론 아세토나이드, 아시트레틴, 타르 샴푸, 베타메타손 발레레이트, 모메타손 후로에이트, 케토코나졸, 프라목신/플루오시놀론, 하이드로코르티손 발레레이트, 플루안드레놀라이드, 우레아, 베타메타손, 클로베타솔 프로피오네이트/에몰, 플루티카손 프로피오네이트, 아지트로마이신, 하이드로코르티손, 보습 포뮬라, 엽산, 데소니드, 피메크롤리무스, 콜타르, 디플로라손 디아세테이트, 에타너셉트 폴레이트, 젖산, 메톡살렌, hc/비스무스 subgal/znox/resor, 메틸프레드니솔론 아세테이트, 프레드니손, 선스크린, 할시노나이드, 살리실산, 안트랄린, 클로코르톨론 피발레이트, 석탄 추출물, 콜타르/살리실산, 콜타르/살리실산/황, 데속시메타손, 디아제팜, 피부연화제, 플루오시노나이드/피부연화제, 광유/피마자유/na lact, 광유/땅콩유, 석유/이소프로필 미리스테이트, 소랄렌, 살리실산, 비누/트리브롬살란, 티메로살/붕산, 셀레콕시브, 인플릭시마브, 사이클로스포린, 알레파셉트, 에팔리주마브, 태크롤리무스, 피메크롤리무스, PUVA, UVB, 설파살라진.
본 발명의 항체 또는 항체부와 배합될 수 있는 건선 관절염 치료제의 비제한적 예에는 다음과 같은 것이 있다: 메토트렉세이트, 에타너셉트, 로페콕시브, 셀레콕시브, 엽산, 설파살라진, 나프록센, 레플루노미드, 메틸프레드니솔론 아세테이트, 인도메타신, 하이드록시클로로퀸 설페이트, 프레드니손, 설린닥, 베타메타손 디프로프 보강형, 인플릭시마브, 메토트렉세이트, 폴레이트, 트리암시놀론 아세토나이드, 디클로페낙, 디메틸설폭사이드, 피록시캄, 디클로페낙 나트륨, 케토프로펜, 멜록시캄, 메틸프레드니솔론, 나부메톤, 톨메틴 나트륨, 칼시포트리엔, 사이클로스포린, 디클로페낙 나트륨/미소프로스톨, 플루오시노나이드, 글루코사민 설페이트, 골드 나트륨 티오말레이트, 하이드로코돈 비타르트레이트/apap, 이부프로펜, 리세드로네이트 나트륨, 설파디아진, 티오구아닌, 발데콕시브, 알레파셉트, 에팔리주마브.
본 발명의 항체 또는 항체부와 배합될 수 있는 재협착증 치료제의 비제한적 예에는 다음과 같은 것이 있다: 시롤리무스, 파클리탁셀, 에버롤리무스, 태크롤리무스, ABT-578, 아세트아미노펜.
본 발명의 항체 또는 항체부와 배합될 수 있는 좌골신경통 치료제의 비제한적 예에는 다음과 같은 것이 있다: 하이드로코돈 비타르트레이트/apap, 로페콕시브, 사이클로벤자프린 hcl, 메틸프레드니솔론, 나프록센, 이부프로펜, 옥시코돈 hcl/아세트아미노펜, 셀렉콕시브, 발데콕시브, 메틸프레드니솔론 아세테이트, 프레드니손, 코데인 포스페이트/apap, 트라마돌 hcl/아세트아미노펜, 메탁사론, 멜록시캄, 메토카르바몰, 리도카인 하이드로클로라, 디플로페낙 나트륨, 가바펜틴, 덱사메타손, 카리소프로돌, 케토롤락 트로메타민, 인도메타신, 아세트아미노펜, 디아제팜, 나부메톤, 옥시코돈 hcl, 티자니딘 hcl, 디클로페낙 나트륨/미소프로스톨, 프로폭시펜 냅실레이트/apap, asa/oxycod/옥시코돈 ter, 이부프로펜/하이드로코돈 bit, 트라마돌 hcl, 에토돌락, 프로폭시펜 hcl, 아미트립틸린 hcl, 카리소프로돌/코데인 phos/asa, 몰핀 설페이트, 멀티비타민, 나프록센 나트륨, 오르페나드린 시트레이트, 테마제팜.
본 발명의 항체 또는 항원결합부와 배합될 수 있는 SLE(루푸스) 치료제의 바람직한 예에는 다음과 같은 것이 있다: NSAID, 예컨대 디클로페낙, 나프록센, 이부프로펜, 피록시캄, 인도메타신; COX2 억제제, 예컨대 셀레콕시브, 로페콕시브, 발데콕시브; 항말라리아제, 예컨대 하이드록시클로로퀸; 스테로이드, 예컨대 프레드니손, 프레드니솔론, 부데노사이드, 덱사메타손; 세포독성제, 예컨대 아자티오프린, 사이클로포스파미드, 미코페놀레이트 모페틸, 메토트렉세이트; PDE4 억제제 또는 퓨린 합성 억제제, 예컨대 셀셉트. 본 발명의 항체 또는 항원결합부는 또한 설파살라진, 5-아미노살리실산, 올살라진, 이뮤란 및 IL-1과 같은 염증촉진성 사이토킨의 합성, 생산 또는 작용을 방해하는 제제, 예컨대 IL-1β 전환효소 억제제 및 IL-1ra와 같은 카스파제 억제제와 배합될 수 있다. 본 발명의 항체 또는 이의 항원결합부는 또한 T 세포 시그널 전달 억제제, 예컨대 티로신 키나제 억제제; 또는 T 세포 활성화 분자를 표적으로 하는 분자, 예컨대 CTLA-4-IgG 또는 항-B7계 항체, 항-PD-1계 항체 등과 함께 사용될 수 있다. 본 발명의 항체 또는 이의 항원결합부는 IL-11 또는 항사이토킨 항체, 예컨대 포노토리주마브(항-IFNg 항체) 또는 항수용체 수용체 항체, 예컨대 항-IL-6 수용체 항체 및 B-세포 표면 분자에 대한 항체와 조합될 수 있다. 또한, 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합부는 LJP 394(아베티무스), B-세포를 불활성화시키거나 고갈시키는 제제, 예컨대 리툭시마브(항-CD20 항체), 림포스태트-B(항-BlyS 항체), TNF 길항제, 예컨대 항-TNF 항체, D2E7(PCT 공개 WO 97/29131; HUMIRA), CA2(REMICADE), CDP571, TNFR-Ig 작제물(p75TNFRIgG(ENBREL) 및 p55TNFRIgG(LENERCEPT))와 함께 사용할 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 본 발명의 항체 또는 항체부의 "치료학적 유효량" 또는 "예방학적 유효량"을 포함할 수 있다. "치료학적 유효량"이란 용어는 원하는 치료 결과를 수득하기 위한 투여량과 필요 기간 동안의 유효한 양을 의미한다. 상기 항체 또는 항체부의 치료학적 유효량은 당업자라면 결정할 수 있는 것으로서, 질병 상태, 연령, 성별 및 개체의 체중과 개체 내에서 원하는 반응을 유도해내는 항체 또는 항체부의 능력과 같은 요인에 따라 달라질 수 있다. 또한, 치료학적 유효량은 치료학적 유익 효과가 항체 또는 항체 일부의 임의의 독성 또는 유해 효과를 능가하는 양이다. "예방학적 유효량"은 원하는 예방학적 결과를 수득하기 위한 투여량 및 필요 기간 동안의 유효한 양을 의미한다. 일반적으로, 예방학적 용량은 질병의 초기 단계전이나 초기 단계에서 피검체에 사용되기 때문에 예방학적 유효량은 치료학적 유효량보다 적은 양일 것이다.
투여 계획은 원하는 최적 반응(예컨대, 치료학적 또는 예방학적 반응)을 제공하도록 조정될 수 있다. 예를 들어, 1회의 일시주사를 투여할 수도 있고, 여러 분할 용량을 경시적으로 투여할 수도 있으며 또는 치료 상황의 위급성에 따라 비례하여 감소 또는 증가된 용량을 투여할 수도 있다. 특히, 투여 용이성과 투여량의 균일성을 위해 비경구 조성물을 투여 단위 형태로 제형화하는 것이 유리하다. 본 명세서에 사용된 투여 단위 형태는 치료하는 포유동물 피검체에 대하여 단일 투여량으로서 적당한 물리적으로 분리된 단위를 의미한다. 따라서, 각 단위는 필요한 약제학적 담체와 관련하여 원하는 치료 효과를 제공하도록 계산된 소정 양의 활성 화합물을 포함한다. 본 발명의 투여 단위 형태에 대한 세부사항은 (a) 활성 화합물의 독특한 특징 및 수득하고자 하는 특정 치료 또는 예방학적 효과, 및 (b) 개체의 감응도 치료에 있어서 상기 활성 화합물을 배합하는 기술 고유의 제한에 따라 결정되고 직접 좌우된다.
본 발명의 항체 또는 항체부의 치료학적 또는 예방학적 유효량에 대한 비제한적 예시 범위는 0.1 내지 20mg/kg, 더 바람직하게는 1 내지 10mg/kg 이다. 또한, 투여량 값은 경감되어야 하는 상태의 종류 및 중증도에 따라 달라질 수 있음을 유의해야 한다. 또한, 임의의 특정 피검체인 경우, 특정 투여 계획은 개체의 필요 및 조성물 투여를 관리하거나 감독하는 자의 전문가적 판단에 따라 경시적으로 조정되어야 하며, 본 명세서에 제시된 투여량 범위는 예시적일 뿐이며 청구된 조성물의 범위 또는 실시를 제한하고자 하는 것이 아님을 명심해야 한다.
본원에 기재된 본 발명의 방법이 기타 적합하게 변형되고 적용될 수 있고 본 발명의 범위 또는 본원에 기재된 양태로부터 벗어나지 않고서도 적합한 등가물을 사용하여 변형되고 적용될 수 있다는 것은 당업자에게 자명하다. 현재 본 발명을 상세하게 설명했고 이와 동일하게 하기의 실시예를 참조로 보다 명백하게 이해될 수 있을 것이고 당해 실시예는 설명을 목적으로 포함된 것이지 본 발명을 제한하고자 한 것은 아니다.
실시예
실시예 1: 항 사람 IL 1α 모노클로날 항체의 생성 및 분리
실시예 1.1: 항 사람 IL 1α 항체를 확인하는 분석
실시예 1 전체에서 다른 언급이 없는 한 항 사람 IL 1α 항체를 확인 및 특성화하기 위해 다음과 같은 분석을 사용했다.
실시예 1.1.A: ELISA
사람 IL 1α에 결합하는 항체를 선별하기 위한 효소면역분석법은 다음과 같이 수행했다.
ELISA 플레이트(Corning Costar, Acton, MA)는 인산염 완충 식염수(PBS) 중의 5㎍/ml 염소 항-마우스 IgG Fc 특이적 항체(Pierce #31170, Rockford, IL.) 50㎕/웰로 4℃에서 밤새 코팅했다. 플레이트는 0.05% Tween-20을 함유하는 PBS로 1회 세척했다. 플레이트는 PBS에 2%로 희석된 200㎕/웰 차단 용액(BioRad #170-6404, Hercules, CA.)을 첨가하여 실온에서 1시간 동안 차단시켰다. 플레이트는 0.05% Tween-20을 함유하는 PBS로 차단한 후 1회 세척했다.
이와 같이 준비한 ELISA 플레이트에 0.1% 소혈청알부민(BSA)(Sigma, St. Louis, MO.) 함유 PBS에 희석된 마우스 혈청 또는 하이브리도마 상청액을 웰당 50㎕씩 첨가하고 실온에서 1시간 동안 항온처리했다. 웰은 0.05% Tween-20을 함유하는 PBS로 3회 세척했다. 0.1% BSA 함유 PBS에 100 ng/ml로 희석된 비오틴화된 재조합 정제된 사람 IL 1α 변이체(R110Q) 50㎕를 각 웰에 첨가하고 실온에서 1시간 동안 항온처리했다. 플레이트는 0.05% Tween-20 함유 PBS로 3회 세척했다. 스트렙타비딘 HRP(Pierce #21126, Rockland, IL.)는 0.1% BSA 함유 PBS에 1:20000으로 희석하고; 50㎕/웰을 첨가하고 플레이트를 실온에서 1시간 동안 항온처리했다. 플레이트는 0.05% Tween-20 함유 PBS로 3회 세척했다. 각 웰에 TMB 용액(Sigma # T0440, St. Louis, MO.) 50㎕를 첨가하고 실온에서 10분 동안 항온처리했다. 반응은 1N 황산을 첨가하여 정지시켰다. 플레이트는 450nm 파장에서 분광광도법으로 판독했다.
실시예 1.1.B: BIACORE 기술을 이용한 친화성 측정
BIACORE 분석(Biacore, Inc., Piscataway, NJ)은 결합속도(on-rate) 및 해리속도(off-rate) 상수의 반응속도론적 측정에 의해 항체의 친화성을 측정한다. 항체의 재조합 정제된 사람 IL 1α 또는 재조합 정제된 사람 IL 1α 변이체(R110Q)에 대한 결합은 25℃에서 전개 HBS-EP(10mM HEPES[pH 7.4], 150mM NaCl, 3mM EDTA, 및 0.005% 계면활성제 P20)를 이용하는 Biacore® 3000 기구(Biacore® AB, Uppsala, Sweden)를 이용한 표면 플라스몬 공명 기반 측정에 의해 결정된다. 모든 화학약품은 Biacore® AB(Uppsala, Sweden) 또는 교재에 설명된 다른 급원에서 입수했다. 10mM 아세트산나트륨(pH 4.5)으로 희석한 약 5000 RU 염소 항-마우스 IgG, (Fcγ), 단편 특이적 폴리클로날 항체(Pierce Biotechnology Inc, Rockford, IL)는 25㎍/ml로 제조업체의 지시 및 절차에 따라 표준 아민 커플링 키트를 이용해 CM5 연구용 바이오센서 칩을 따라 직접 고정시켰다. 바이오센서 표면의 미반응 모이어티는 에탄올아민으로 차단시켰다. 플로우셀 2 및 4의 변형 카르복시메틸 덱스트란 표면은 반응 표면으로서 이용했다. 플로우셀 1 및 3에서 염소 항-마우스 IgG 없는 미변형 카르복시메틸 덱스트란은 참조 표면으로서 이용했다. 반응속도론적 분석을 위해 Biaevaluation 4.0.1 소프트웨어를 이용해 총 8개 주입물의 결합 및 해리 상에 1:1 랭뮤어 결합 모델 유래의 속도 방정식을 동시에 적합시켰다(글로벌 피트 분석을 이용하여). 정제된 항체는 염소 항-마우스 IgG 특이적 반응 표면을 따라 포획을 조사하기 위해 HEPES-완충 식염수에 희석한다. 리간드(25㎍/ml)로서 포획될 마우스 항체는 5 ㎕/분의 유속으로 반응 매트릭스 위에 주입했다. 25 ㎕/분의 연속 유속 하에 결합 속도 상수 Kon(단위 M-1s-1) 및 해리 속도 상수 koff(단위 s-1)를 측정했다. 속도 상수는 10 내지 200 nM 범위의 10가지 다른 항원 농도에서 반응속도론적 결합을 측정하여 수득한다. 마우스 항체 및 재조합 정제된 사람 IL 1α 또는 재조합 정제된 사람 IL 1α 간에 반응의 평형 해리 상수(단위 M)는 KD = koff/kon 식에 의해 반응속도론적 속도 상수로부터 계산했다. 결합은 시간의 함수로 기록하고 반응속도론적 속도 상수를 계산한다. 이 분석에서 106 M-1s-1만큼 빠른 온 속도와 10-6s-1만큼 느린 오프 속도가 측정될 수 있다.
실시예 1.1.C: 항 사람 IL 1α 항체의 기능 활성
본 발명의 항-사람 IL 1α 항체의 기능 활성을 조사하기 위해, IL 1α 활성을 억제하는 항체의 능력을 측정하는 다음 분석에 항체를 사용했다.
실시예 1.1.C 1 MRC -5 생물분석
MRC-5 세포주는 용량 의존적 방식으로 사람 IL-1α에 반응하여 IL-8을 생산하는 사람 폐 섬유아세포 세포주이다. MRC-5 세포는 처음에는 ATCC로부터 입수했고, 10% FBS 완전 MEM에서 계대배양하고, 5% CO2 항온배양기에서 37℃에서 증식시켰다. IL-1α에 대한 항체의 중화능을 측정하기 위해, 항체(50㎕)를 96 웰 플레이트(1E-7 내지 1E-15 M 최종 농도)에 첨가하고 IL-1α(50pg/ml 최종 농도) 50㎕와 37℃, 5% CO2에서 1시간 동안 예비항온처리했다. 그 다음, 1E5/ml 농도의 MRC-5 세포는 모든 웰에 첨가하고(100㎕), 플레이트를 5% CO2 항온배양기에서 37℃에서 밤새 항온처리했다. 항체능은 IL-8 생산을 억제하는 능력으로 측정했다. 사람 IL-8 생산은 ELISA로 측정했다.
실시예 1.2: 항 사람 IL 1α 모노클로날 항체의 생성
항 사람 IL 1α 마우스 모노클로날 항체는 다음과 같이 수득했다:
실시예 1.2.A: 사람 IL 1α 항원을 이용한 마우스의 면역화
완전 프로인트 보강제 또는 Immunoeasy 보강제(Qiagen, Valencia, CA)와 혼합된 재조합 정제된 사람 IL 1α(R&D Systems, Minneapolis, MN, USA) 20㎍을 5마리의 6 내지 8주령 Balb/C, 5마리 C57B/6 마우스 및 5마리 AJ 마우스에게 1일째 피하 주사했다. 24일, 38일 및 49일째, 20㎍의 재조합 정제된 사람 IL 1α 변이체와 불완전 프로인트 보강제 또는 Immunoeasy 보강제 혼합물을 동일한 마우스에게 피하 주사했다. 84일, 112일 또는 144일에, 1㎍ 재조합 정제된 사람 IL 1α 변이체를 정맥내 주사했다.
실시예 1.2.B: 하이브리도마의 생성
실시예 1.2.A에 기술된 면역화된 마우스로부터 수득한 비장세포를 SP2/O-Ag-14 세포와 5:1의 비율로 문헌[Kohler, G. and Milstein 1975, Nature, 256: 495]에 기술된 확립된 방법에 따라 융합시켜 하이브리도마를 수득했다. 융합 산물은 96웰 플레이트의 아자세린 및 하이포크산틴 함유 선택 배지에서 웰당 2.5x106 비장 세포의 밀도로 평판배양했다. 융합 후 7일 내지 10일 동안 하이브리도마 콜로니를 육안 관찰했다. 하이브리도마 콜로니를 함유하는 각 웰의 상청액을 IL 1α에 대한 항체의 존재에 대해 ELISA로 검사했다(실시예 1.1.A.에 기술된 바와 같이). 그 다음, IL 1α 특이적 활성을 나타내는 상청액은 IL-8의 MRC-5 생물분석에서 IL 1α를 중화시키는 능력에 대해 검사했다(실시예 1.1.C.에 기술된 바와 같이).
실시예 1.2.C: 항 사람 IL 1α 모노클로날 항체의 확인 및 특성화
IL 1α에 결합하고 실시예 1.2.B 및 1.2.C에 따라 생산하고 IL 1α에 특이적으로 결합할 수 있고 특히 MRC-5 생물분석에서 IC50 값이 5nM 또는 5nM 이하인 항체를 생산하는 하이브리도마는 한계희석법으로 증량하고 클로닝했다.
하이브리도마 세포는 10% 저 IgG 소 태아 혈청을 함유하는 배지(Hyclone #SH30151, Logan, UT.)에서 증대시켰다. 평균적으로, 각 하이브리도마 상청액(클론 집단 유래) 250ml를 수거하고 농축한 뒤, 문헌[Harlow, E. and Lane, D. 1988 "Antibodies: A Laboratory Manual"]에 기술된 바와 같이 단백질 A 친화성 크로마토그래피로 정제했다. IL 1α 활성을 억제하는 정제된 mAb의 능력은 실시예 1.1.C에 기술된 바와 같이 MRC-5 생물분석으로 측정했다. 표 7은 항-IL 1α mAb 3D12에 대한 MRC-5 생물분석의 IC50 값을 나타낸다.
실시예 1.2.D 각 쥐의 항-사람 IL 1α mAb 에 대한 가변 영역의 아미노산 서열의 결정
각 아미노산 서열 결정을 위해, 약 10x106 하이브리도마 세포를 원심분리하고 Trizol(Giboc BRL/Invitrogen, Carlsbad, CA)로 제조업자의 지침에 따라 처리하여 총 RNA를 분리했다. 총 RNA는 SuperScript First-Strand Synthesis System(Invitrogen, Carlsbad, CA)을 제조업체의 지시에 따라 이용하여 제1 쇄 DNA 합성 처리했다. 올리고(dT)는 폴리(A)+ RNA의 선택을 위해 제1 쇄 합성을 개시하는데 사용했다. 그 다음, 제1 쇄 cDNA 산물은, 쥐의 면역글로불린 가변 영역의 증폭을 위해 설계한 프라이머(Ig-프라이머 세트, Novagen, Madison, WI)를 이용하여 PCR로 증폭시켰다. PCR 산물은 아가로스 겔에서 분리하고, 절제하여, 정제한 뒤, TOPO 클로닝 키트로 pCR2.1-TOPO 벡터(Invitrogen, Carlsbad, CA)에 서브클로닝하고, TOP10 화학적 컴피턴트 이.콜라이(Invitrogen, Carlsbad, CA)에 형질전환시켰다. 이 형질전환체에 콜로니 PCR을 수행하여 삽입체 함유 클론을 확인했다. 플라스미드 DNA는 QIAprep Miniprep 키트(Qiagen, Valencia, CA)를 이용하여 삽입체 함유 클론으로부터 분리했다. 플라스미드 중의 삽입체는 양 쇄를 서열분석하여, M13 정방향 및 M13 역방향 프라이머(Fermentas Life Sciences, Hanover MD)를 이용해 가변 중쇄 또는 가변 경쇄 DNA 서열을 결정했다. 실시예 1.2.C에 기술된 항-IL-1α 모노클로날 항체의 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열은 표 5에 제시했다.
실시예 2: 재조합 항 사람 IL 1α 항체
실시예 2.1: 재조합 키메라 항 사람 IL 1α 항체의 작제 및 발현
쥐의 항-사람 IL 1α 모노클로날 항체 3D12의 중쇄 불변 영역을 암호화하는 DNA는 세균에서 상동 재조합에 의해 2 힌지(hinge) 영역 아미노산 돌연변이를 함유하는 사람 IgG1 불변 영역을 암호화하는 cDNA 단편으로 교체했다. 이 돌연변이는 위치 234(EU 넘버링)에서 류신의 알라닌으로의 변화 및 위치 235에서 류신의 알라닌으로의 변화이다(Lund et al., 1991, J. Immunol., 147: 2657). 이 항체들 각각의 경쇄 불변 영역은 사람 카파 불변 영역으로 교체했다. pBOS 발현 플라스미드에 연결된 키메라 중쇄 및 경쇄 cDNA의 공동형질감염으로 전체 길이 키메라 항체를 COS 세포에서 일시적으로 발현시킨다(Mizushima and Nagata, Nucleic Acids, Research 1990, Vol 18, pg 5322). 재조합 키메라 항체를 함유하는 세포 상청액은 단백질 A 세파로스 크로마토그래피로 정제하고 결합된 항체는 산 완충액을 첨가하여 용출시켰다. 항체는 중화시키고 PBS에 투석했다.
키메라 3D12(전술함)를 암호화하는 중쇄 cDNA는 3D12 키메라 경쇄 cDNA(둘다 pBOS 벡터에 연결됨)와 함께 COS 세포에 공동형질감염시켰다. 재조합 키메라 항체를 함유하는 세포 상청액은 단백질 A 세파로스 크로마토그래피로 정제하고 결합된 항체는 산 완충액을 첨가하여 용출시켰다. 항체는 중화시키고 PBS에 투석했다. 그 다음, 정제된 키메라 항-사람 IL 1α 모노클로날 항체는 실시예 1.1.C2 및 1.1.C3에 기술된 바와 같이 MRC-5 세포에 의한 IL-8의 IL 1α 유도 생산을 억제하는 능력에 대해 검사했다.
실시예 2.2: 사람화된 항 사람 IL 1α 항체의 작제 및 발현
실시예 2.2.1: 사람 항체 골격 의 선택
각 쥐의 가변 중쇄 및 가변 경쇄 유전자 서열(표 5에 기술됨)은 44가지 사람 면역글로불린 생식계열 가변 중쇄 또는 46가지 생식계열 가변 경쇄 서열(NCBI Ig Blast 웹사이트 유래, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/igblast/retrieveig.html.)에 대해 Vector NTI 소프트웨어를 이용해 각각 정렬시켰다.
사람화는 아미노산 서열 상동성, CDR 클러스터 분석, 발현된 사람 항체 중의 사용 빈도 및 사람 항체의 결정 구조에 대한 이용가능한 정보를 기반으로 한다. 항체 결합, VH-VL 짝형성 및 다른 요인들에 미치는 가능한 영향을 고려하여, 몇 개는 제외하고 쥐와 사람 골격 잔기가 상이한 경우, 쥐 잔기를 사람 잔기로 돌연변이시켰다. 추가 사람화 전략은 쥐의 항체 가변 영역의 실제 아미노산 서열과 고도의 상동성, 즉 서열 유사성을 보유하는 사람 생식계열 항체 서열 또는 이의 서브그룹에 대한 분석을 기초로 하여 설계했다.
상동성 모델링은 항체 결합 부위(CDR)의 구조에 중요한 것으로 생각되는 쥐 항체 서열에 독특한 잔기를 확인하는데 사용했다. 상동성 모델링은 단백질에 대한 대략적인 3차원 좌표가 수득되는 계산적 방법이다. 초기 좌표의 급원 및 이들의 추가 개선을 위한 안내자는 3차원 좌표가 알려져 있고 서열이 제1 단백질 서열과 관련이 있는 참조 단백질인 제2 단백질이다. 두 단백질의 서열 간에 관계는 참조 단백질과 좌표가 필요한 단백질, 즉 표적 단백질 사이에 상응성을 만들어내는데 사용된다. 참조 단백질과 표적 단백질의 1차 서열은 참조 단백질로부터 표적 단백질로 직접 전이된 두 단백질의 동일 부의 좌표를 이용하여 정렬한다. 잔기 돌연변이, 삽입 또는 결실로부터 두 단백질의 부정합된 부위의 좌표는 이미 전이된 모델 좌표와 일치하도록 개선된 일반적인 구조 주형과 에너지로부터 작제한다. 이 계산적 단백질 구조는 추가 개선되거나 또는 모델링 연구에 직접 이용될 수 있다. 모델 구조의 성질은 참조 단백질과 표적 단백질이 관련이 있다는 주장의 정확성 및 서열 정렬이 구축되는 정밀성에 의해 결정된다는 것은 본 명세서로부터 명백하다.
쥐 항체 서열 3D12에 대해 적당한 참조 구조를 확인하고자 BLAST 검색 및 육안 검사의 조합을 이용했다. 참조 아미노산 서열과 표적 아미노산 서열 간에 25%의 서열 동일성은 상동성 모델링 실행을 시도하는데 필요한 최소값인 것으로 생각된다. 서열 정렬은 수작업으로 구축하고 모델 좌표는 프로그램 Jackal(Petrey, D., Xiang, Z., Tang, C.L., Xie, L., Gimpelev, M., Mitros, T., Soto, C.S., Goldsmith-Fischman, S., Kernytsky, A., Schlessinger, A., et al. 2003. Using multiple structure alignments, fast model building, and energetic analysis in fold recognition and homology modeling. Proteins 53 (Suppl. 6): 430-435)로 수득한다.
선택된 항체의 쥐 및 사람 골격 영역의 1차 서열은 상당한 동일성을 공유한다. 상이한 잔기 위치는 쥐 항체의 관찰된 결합능을 유지시키기 위해 사람화된 서열에 포함시켜야 할 쥐 잔기의 후보이다. 사람 및 쥐 서열 간에 상이한 골격 잔기의 목록은 수작업으로 구축했다.
제공된 골격 잔기가 항체의 결합 성질에 영향을 미칠 가능성은 CDR 잔기에 대한 근접성에 따라 달라진다. 따라서, 모델 구조를 사용해, 쥐 서열과 사람 서열 간에 다른 잔기를 CDR 내의 임의의 원자로부터 떨어진 거리에 따라 등급을 매겼다. 임의의 CDR 원자에 대한 4.5Å 이내에 있는 잔기는 가장 중요한 잔기로 확인되었고, 사람화된 항체에서 쥐 잔기를 유지시키는 후보로서 권장되었다(즉, 역돌연변이).
실시예 2.2.2: 항-사람 IL -1α mAb 3 D12 의 사람화
표 5에 제시된 항-IL-1α 항체 3D12 유래의 중쇄 CDR 서열은 사람 VH7-4.1 및 JH6 위에 다음과 같이 컴퓨터 모의실험으로(in silico) 이식시켰다: (1) 첫 번째 위치의 Q는 N-말단 파이로글루타메이트 형성을 방지하기 위해 E로 변이시켰다. (2) 제안된 작제물에 N-결합 글리코실화 패턴(N-{P}-S/T)은 확인되지 않았다. (3) 대부분 사람 h3D12VH.1 서열에 5개의 역돌연변이(V2I, G44D, W47R, G49A 및 Y91F)가 도입되어 h3D12VH.1a 서열을 만들었다. (4) 전술한 역돌연변이 1, 2, 3, 4 또는 5개 전부는 사람화 후 사람 IL 1α에 대한 3D12 MAb의 친화성을 유지하기 위해 h3D12VH.1에 도입시킬 수 있다. (5) 상기 5개 역돌연변이 중 일부는 h3D12VH.1a로부터 후속 친화성 성숙 동안 제거될 수 있다.
대안적으로, 표 5에 제시된 항-IL-1α 항체 3D12 유래의 중쇄 CDR 서열은 사람 VH7-4.1 및 JH6 위에 다음과 같이 컴퓨터 모의실험으로 이식시켰다: (1) 첫번째 위치의 Q는 E로 변이시켜 N-말단 파이로글루타메이트 형성을 방지했다. (2) 3개의 VH1 컨센서스 잔기 I75T, R82bS 및 D85E를 도입시켰다. 또한, 3D12 VH에 대한 동일성은 D85E 변화의 결과로서 증가했다. (3) VH1-2의 다형태성 위치 69 및 88은 각각 M과 S로 유지시켜 VH1 컨센서스 서열과 일치시켰다. (4) 이러한 제안된 작제물에서 N-결합 글리코실화 패턴(N-{P}-S/T)은 확인되지 않았다. (5) 8개의 역돌연변이(V2I, G44D, W47R, G49A, V67F, M69F, R71L 및 Y91F)를 대부분 사람 h3D12VH.2 서열에 도입시켜 h3D12VH.2a 서열을 만들었다. (6) 이러한 8개 역돌연변이는 사람화 후 사람 IL 1α에 대한 3D12 MAb의 친화성을 유지하는데 전부 필요하지는 않을 수 있다. (7) 8개 역돌연변이 일부는 h3D12VH.2a로부터 후속 친화성 성숙 동안 제거될 수 있다.
표 5에 제시된 항-IL-1α 항체 3D12의 경쇄 CDR 서열은 추가적인 F73L Vk1 컨센서스 변화와 함께 사람 1-33/O18 및 Jk2 또는 사람 1-33/O18 및 Jk4 위에 컴퓨터 모의실험으로 이식시켰다. 이와 같이 제안된 작제물에서 N-결합 글리코실화 패턴(N-{P}-S/T)은 확인되지 않았다. 3D12 경쇄의 CDR1에는 특이한 시스테인이 존재한다. 이 시스테인은 사람화된 서열에도 존재했다. CDR 중의 이 시스테인은 필요하다면 h3D12Vk.1, 1a, 1b, 2, 2a 또는 2b로부터 후속 친화성 성숙 동안 제거될 수 있다. 대부분 사람 h3D12Vk.1 서열에 도입될 수 있는 6개의 역돌연변이(D1N, S7T, A43T, P44V, F71Y 및 Y87F)가 존재했다. 따라서, h3D12Vk.1a 및 2a는 처음 2개의 역돌연변이를 보유하지 않았다. 하지만, h3D12Vk.1b 및 2b는 모두 6개의 역돌연변이를 보유했다. 이러한 역돌연변이 중 일부는 h3D12VH.1a, 1b, 2a 또는 2b의 후속 친화성 성숙 동안 제거될 수 있다.
표 6은 본 발명의 사람화된 항-hIL 1α 항체의 VH 및 VL 영역의 아미노산 서열의 목록이다.
Figure pct00006
실시예 2.2.3: 사람화된 항체의 작제
컴퓨터 모의실험으로 작제한 전술한 사람화된 항체는 올리고뉴클레오타이드를 이용해 새로이(de novo) 작제했다. 각 가변 영역 cDNA를 위해, 60 내지 80개 뉴클레오타이드의 6개 올리고뉴클레오타이드를 각 올리고뉴클레오타이드의 5' 말단 및/또는 3' 말단의 20개 뉴클레오타이드가 서로 중첩하도록 각각 설계했다. 어닐링 반응 동안, 6개 올리고는 모두 배합하고 비등가열한 후 dNTP의 존재 하에 어닐링했다. 그 다음, DNA 폴리머라제 I, 큰(Klenow) 단편(New England Biolabs #M0210, Beverley, MA.)은 중첩성 올리고뉴클레오타이드 간에 약 40bp 갭을 채우기 위해 첨가했다. 그 다음, 변형된 pBOS 벡터(Mizushima, S. and Nagata, S.,(1990) Nucleic acids Research Vol 18, No. 17))의 다중 클로닝 부위에 상보적인 오버행 서열을 포함하는 2개의 최외각 프라이머를 이용하여 전체 가변 영역 유전자를 증폭시키기 위해 PCR을 수행했다. 각 cDNA 어셈블리로부터 유래되는 PCR 산물은 아가로스 겔로 분리하고 예상 가변 영역 cDNA 크기에 해당하는 밴드를 잘라 정제했다. 세균에서 상동 재조합으로, 2개의 힌지 영역 아미노산 돌연변이를 함유하는 사람 IgG1 불변 영역 암호화 cDNA 단편 위에 가변 중쇄 영역을 프레임에 맞게 삽입했다. 상기 돌연변이는 위치 234(EU 넘버링)의 류신에서 알라닌으로의 변화 및 위치 235의 류신에서 알라닌으로의 변화이다(Lund et al., 1991, J. Immunol., 147: 2657). 가변 경쇄 영역은 상동 재조합에 의해 사람 카파 불변 영역과 프레임에 맞게 삽입되었다. 세균 콜로니를 분리하고 플라스미드 DNA를 추출했고; cDNA 삽입체 전체를 서열분석했다. 전체 길이의 사람화된 항-사람 IL 1α 항체를 일시적으로 생산하도록, 각 항체에 대응하는 정확한 사람화된 중쇄 및 경쇄를 COS 세포에 공동형질감염시켰다. 13C5의 경우, 13C5 중쇄 이식된 cDNA와 13C5 경쇄 이식된 cDNA를 함유하는 pBOS 벡터로 COS 세포를 공동형질감염시켰다. 재조합 키메라 항체를 함유하는 세포 상청액은 단백질 A 세파로스 크로마토그래피로 정제하고, 결합된 항체는 산 완충액을 첨가하여 용출시켰다. 항체는 중화시키고 PBS 내로 투석했다. 사람화된 항체는 표 7에 제시한다.
Figure pct00007
실시예 2.2.3: 사람화된 IL -1α 항체의 특성화
정제된 사람화된 항체의 IL 1α 활성을 억제하는 능력은 실시예 1.1.C에 기술된 바와 같이 MRC-5 생물분석으로 측정했다. 재조합 사람 IL 1α에 대한 사람화된 항체의 결합 친화성은 실시예 1.1.B에 기술된 바와 같이 표면 플라스몬 공명(Biacore®) 측정으로 계측했다. 표 8은 MRC-5 생물분석 유래의 IC50 값 및 사람 IL 1α에 대한 표 5에 기술된 사람화된 항체의 친화성을 보여준다.
Figure pct00008
본 발명은 분자생물학 분야에 널리 공지된 기술 전체를 참고인용한다. 이러한 기술로는 다음 공개문헌들에 기술된 기술을 포함하지만, 이에 국한되는 것은 아니다:
Figure pct00009
이상으로 다수의 양태와 특징을 설명했지만, 기술된 양태 및 특징의 변경과 변형이, 첨부된 특허청구범위에 정의된 본 발명 또는 본 명세서에서 벗어남 없이 이루어질 수 있다는 것을 당업자는 잘 알고 있을 것이다.
<110> Abbott Laboratories <120> IL-1 binding proteins <130> 9775USO1 <150> US 61/206,250 <151> 2009-01-29 <160> 59 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 271 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Met Ala Lys Val Pro Asp Met Phe Glu Asp Leu Lys Asn Cys Tyr Ser 1 5 10 15 Glu Asn Glu Glu Asp Ser Ser Ser Ile Asp His Leu Ser Leu Asn Gln 20 25 30 Lys Ser Phe Tyr His Val Ser Tyr Gly Pro Leu His Glu Gly Cys Met 35 40 45 Asp Gln Ser Val Ser Leu Ser Ile Ser Glu Thr Ser Lys Thr Ser Lys 50 55 60 Leu Thr Phe Lys Glu Ser Met Val Val Val Ala Thr Asn Gly Lys Val 65 70 75 80 Leu Lys Lys Arg Arg Leu Ser Leu Ser Gln Ser Ile Thr Asp Asp Asp 85 90 95 Leu Glu Ala Ile Ala Asn Asp Ser Glu Glu Glu Ile Ile Lys Pro Arg 100 105 110 Ser Ala Pro Phe Ser Phe Leu Ser Asn Val Lys Tyr Asn Phe Met Arg 115 120 125 Ile Ile Lys Tyr Glu Phe Ile Leu Asn Asp Ala Leu Asn Gln Ser Ile 130 135 140 Ile Arg Ala Asn Asp Gln Tyr Leu Thr Ala Ala Ala Leu His Asn Leu 145 150 155 160 Asp Glu Ala Val Lys Phe Asp Met Gly Ala Tyr Lys Ser Ser Lys Asp 165 170 175 Asp Ala Lys Ile Thr Val Ile Leu Arg Ile Ser Lys Thr Gln Leu Tyr 180 185 190 Val Thr Ala Gln Asp Glu Asp Gln Pro Val Leu Leu Lys Glu Met Pro 195 200 205 Glu Ile Pro Lys Thr Ile Thr Gly Ser Glu Thr Asn Leu Leu Phe Phe 210 215 220 Trp Glu Thr His Gly Thr Lys Asn Tyr Phe Thr Ser Val Ala His Pro 225 230 235 240 Asn Leu Phe Ile Ala Thr Lys Gln Asp Tyr Trp Val Cys Leu Ala Gly 245 250 255 Gly Pro Pro Ser Ile Thr Asp Phe Gln Ile Leu Glu Asn Gln Ala 260 265 270 <210> 2 <211> 330 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Phe Leu Ala Pro Ser Ser Lys 1 5 10 15 Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 100 105 110 Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 115 120 125 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 130 135 140 Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 145 150 155 160 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 165 170 175 Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 180 185 190 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 195 200 205 Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 210 215 220 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu 225 230 235 240 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 245 250 255 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 260 265 270 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 275 280 285 Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 290 295 300 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 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Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 50 55 60 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 65 70 75 80 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 85 90 95 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 100 105 <210> 5 <211> 105 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 5 Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu 1 5 10 15 Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe 20 25 30 Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val 35 40 45 Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys 50 55 60 Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser 65 70 75 80 His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu 85 90 95 Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 100 105 <210> 6 <211> 30 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 6 Glu Val Thr Leu Arg Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gln 1 5 10 15 Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser 20 25 30 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Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser 20 25 30 <210> 19 <211> 14 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 19 Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly 1 5 10 <210> 20 <211> 32 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 20 Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu 1 5 10 15 Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg 20 25 30 <210> 21 <211> 30 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 21 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr 20 25 30 <210> 22 <211> 32 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 22 Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu 1 5 10 15 Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg 20 25 30 <210> 23 <211> 23 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 23 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys 20 <210> 24 <211> 15 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 24 Trp Tyr 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Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Ile Tyr Tyr Tyr Gly Ser Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 36 <211> 107 <212> PRT <213> Mus sp. <400> 36 Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly Asp 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Cys Leu 20 25 30 Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr 35 40 45 Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln Glu 65 70 75 80 Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Lys Thr Leu Pro Tyr Ala 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Asn Arg 100 105 <210> 37 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 37 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Ser Thr Tyr Ala Asp Asp Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Ile Tyr Tyr Tyr Gly Ser Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 38 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 38 Glu Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Asp Leu Glu Arg Met 35 40 45 Ala Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Ser Thr Tyr Ala Asp Asp Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Ile Tyr Tyr Tyr Gly Ser Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 39 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 39 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Ser Thr Tyr Ala Asp Asp Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Ile Tyr Tyr Tyr Gly Ser Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 40 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 40 Glu Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Asp Leu Glu Arg Met 35 40 45 Ala Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Ser Thr Tyr Ala Asp Asp Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Phe Thr Leu Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Ile Tyr Tyr Tyr Gly Ser Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 41 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 41 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Cys 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Lys Thr Leu Pro Tyr 85 90 95 Ala Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 42 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 42 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Cys 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Thr Val Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Lys Thr Leu Pro Tyr 85 90 95 Ala Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 43 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 43 Asn Ile Gln Met Thr Gln Thr Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Cys 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Thr Val Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Lys Thr Leu Pro Tyr 85 90 95 Ala Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 44 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 44 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Cys 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Thr Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Lys Thr Leu Pro Tyr 85 90 95 Ala Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 45 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 45 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Cys 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Lys Thr Leu Pro Tyr 85 90 95 Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 46 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 46 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Cys 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Thr Val Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Lys Thr Leu Pro Tyr 85 90 95 Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 47 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 47 Asn Ile Gln Met Thr Gln Thr Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Cys 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Thr Val Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Lys Thr Leu Pro Tyr 85 90 95 Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 48 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 48 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Val 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Ser Thr Tyr Ala Asp Asp Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Phe Thr Leu Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Ile Tyr Tyr Tyr Gly Ser Ser Tyr Ala Met Asn Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 49 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 49 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Met 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Thr Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu Tyr Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Lys Thr Leu Pro Tyr 85 90 95 Ala Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 50 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 50 Glu Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Lys Tyr Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Arg Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Ser Arg Tyr Ala Asp Asp Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Leu Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Ile Tyr Tyr Phe Gly Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 51 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 51 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Arg 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Arg Leu Lys Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Pro Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 52 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 52 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Lys Tyr Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Arg Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Gln Ser Thr Tyr Ala Asp Asp Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Leu Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Ile Tyr Tyr Tyr Gly Ser Asp Phe Ala Met Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 53 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 53 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Met 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu Lys Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Lys Thr Ala Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 54 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 54 Glu Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ala His Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Gln Ser Thr Tyr Ala Asp Asp Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Phe Thr Leu Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Ile Tyr Tyr Phe Gly Ser Asn Tyr Ala Met Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 55 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 55 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Met 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Thr Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu Arg Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Lys Lys Pro Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 56 <211> 30 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 56 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr 20 25 30 <210> 57 <211> 32 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 57 Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr Leu Gln 1 5 10 15 Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg 20 25 30 <210> 58 <211> 32 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 58 Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 1 5 10 15 Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys 20 25 30 <210> 59 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 59 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 1 5 10

Claims (52)

  1. 서열번호 37, 서열번호 38, 서열번호 39, 서열번호 40, 서열번호 48, 서열번호 50, 서열번호 52 및 서열번호 54로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 아미노산 서열을 보유하는 가변 중쇄 폴리펩타이드; 및 서열번호 41, 서열번호 42, 서열번호 43, 서열번호 44, 서열번호 45, 서열번호 46, 서열번호 47, 서열번호 49, 서열번호 51, 서열번호 53 및 서열번호 55로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 아미노산 서열을 포함하는 가변 경쇄 폴리펩타이드를 포함하고, 사람 IL-1α에 결합할 수 있는, 결합 단백질.
  2. 제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이, 서열번호 38 및 서열번호 44, 서열번호 40 및 서열번호 44, 서열번호 48 및 서열번호 49, 서열번호 50 및 서열번호 51, 서열번호 52 및 서열번호 53, 및 서열번호 54 및 서열번호 55로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 가변 중쇄 폴리펩타이드 및 가변 경쇄 폴리펩타이드를 포함하는, 결합 단백질.
  3. 제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이, 면역글로불린 분자, 디설파이드 결합된 Fv, 모노클로날 항체, scFv, 키메라 항체, 단일 도메인 항체, CDR-이식 항체, 디아바디, 사람화된 항체, 다특이성 항체, Fab, 이중 특이성 항체, DVD, Fab', 이특이성 항체, F(ab')2 및 Fv로 이루어진 그룹 중에서 선택되는, 결합 단백질.
  4. 제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이, 사람 IgM 불변 도메인, 사람 IgG4 불변 도메인, 사람 IgG1 불변 도메인, 사람 IgE 불변 도메인, 사람 IgG2 불변 도메인, 사람 IgG3 불변 도메인 및 사람 IgA 불변 도메인으로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 중쇄 면역글로불린 불변 도메인을 포함하는, 결합 단백질.
  5. 제1항에 있어서, 서열번호 2 및 서열번호 3으로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 아미노산 서열을 보유하는 중쇄 불변 영역을 추가로 포함하는, 결합 단백질.
  6. 제1항에 있어서, 서열번호 4 및 서열번호 5로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 아미노산 서열을 보유하는 경쇄 불변 영역을 추가로 포함하는, 결합 단백질.
  7. 제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이 사람 IL-1α의 생물학적 기능을 조절할 수 있는, 결합 단백질.
  8. 제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이 사람 IL-1α를 중화시킬 수 있는, 결합 단백질.
  9. 제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이, 표면 플라즈몬 공명으로 측정시, 적어도 약 102M-1s-1; 적어도 약 103M-1s-1; 적어도 약 104M-1s-1; 적어도 약 105M-1s-1; 및 적어도 약 106M-1s-1로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 상기 표적에 대한 온 속도 상수(on rate constant: Kon)를 갖는, 결합 단백질.
  10. 제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이, 표면 플라즈몬 공명으로 측정시, 최대 약 10-3s-1; 최대 약 10-4s-1; 최대 약 10-5s-1; 및 최대 약 10-6s-1로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 상기 표적에 대한 오프 속도 상수(off rate constant: Koff)를 갖는, 결합 단백질.
  11. 제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이, 최대 약 10-7 M; 최대 약 10-8 M; 최대 약 10-9 M; 최대 약 10-10 M; 최대 약 10-11 M; 최대 약 10-12 M; 및 최대 약 10-13 M로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 상기 표적에 대한 해리 상수(KD)를 갖는, 결합 단백질.
  12. 제11항에 있어서, 상기 결합 단백질이, 1.34x10-9 M; 1.35x10-9 M; 2.09x10-9 M; 2.8x10-11 M; 1x10-11 M; 3.1x10-11 M; 3.2x 10-11 M; 및 3.3x10-11 M로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 IL-1α에 대한 해리 상수(KD)를 갖는, 결합 단백질.
  13. 제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이, 면역부착 분자, 영상화제, 치료제 및 세포독성제로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 제제를 추가로 포함하는, 결합 단백질.
  14. 제13항에 있어서, 상기 제제가 방사능표지, 효소, 형광 표지, 발광 표지, 생물발광 표지, 자성 표지 및 비오틴으로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 영상화제인, 결합 단백질.
  15. 제13항에 있어서, 상기 영상화제가 3H, 14C, 35S, 90Y, 99Tc, 111In, 125I, 131I, 177Lu, 166Ho 및 153Sm으로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 방사능표지인, 결합 단백질.
  16. 제13항에 있어서, 상기 제제가 항대사산물, 알킬화제, 항생제, 성장 인자, 사이토킨, 항혈관형성제, 항유사분열제, 안트라사이클린, 독소 및 아폽토시스제로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 치료제 또는 세포독성제인, 결합 단백질.
  17. 제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이 사람 글리코실화 패턴을 보유하는, 결합 단백질.
  18. 제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이, 결정화된 결합 단백질인, 결합 단백질.
  19. 제18항에 있어서, 상기 결정화된 결합 단백질이, 무담체 약제학적 제어 방출형 결정화된 결합 단백질인, 결합 단백질.
  20. 제19항에 있어서, 상기 결합 단백질이 상기 항체 작제물의 가용성 대응물보다 긴 생체내 반감기를 갖는, 결합 단백질.
  21. 제19항에 있어서, 상기 결합 단백질이 생물학적 활성을 유지하는, 결합 단백질.
  22. 제1항에 기술된 결합 단백질 아미노산 서열을 암호화하는 분리된 핵산.
  23. 제1항에 기술된 결합 단백질 아미노산 서열을 암호화하는 분리된 핵산을 포함하는 벡터.
  24. 제23항에 있어서, 상기 벡터가, pcDNA, pTT, pTT3, pEFBOS, pBV, pJV, 및 pBJ로 이루어진 그룹 중에서 선택되는, 벡터.
  25. 제23항에 기술된 벡터를 포함하는 숙주 세포.
  26. 제25항에 있어서, 상기 숙주 세포가 원핵생물 세포인, 숙주 세포.
  27. 제26항에 있어서, 상기 숙주 세포가 이.콜라이인, 숙주 세포.
  28. 제25항에 있어서, 상기 숙주 세포가 진핵생물 세포인, 숙주 세포.
  29. 제28항에 있어서, 상기 진핵생물 세포가, 원생생물 세포, 동물 세포, 식물 세포 및 진균 세포로 이루어진 그룹 중에서 선택되는, 숙주 세포.
  30. 제28항에 있어서, 상기 진핵생물 세포가, 포유동물 세포, 조류 세포 및 곤충 세포로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 동물 세포인, 숙주 세포.
  31. 제28항에 있어서, 상기 숙주 세포가 CHO 세포인, 숙주 세포.
  32. 제28항에 있어서, 상기 숙주 세포가 COS인, 숙주 세포.
  33. 제28항에 있어서, 상기 숙주 세포가 효모 세포인, 숙주 세포.
  34. 제33항에 있어서, 상기 효모 세포가 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)인, 숙주 세포.
  35. 제28항에 있어서, 상기 숙주 세포가 곤충 Sf9 세포인, 숙주 세포.
  36. 제25항에 기술된 숙주 세포를, IL-1α에 결합할 수 있는 결합 단백질을 생산하기에 충분한 조건 하에 배양 배지에서 배양함을 포함하여, IL-1α에 결합할 수 있는 단백질을 생산하는 방법.
  37. 제36항의 방법에 따라 생산된 단백질.
  38. (a) 제16항에 기술된 제형(여기서, 상기 제형은 결정화된 결합 단백질을 포함한다) 및 성분(an ingredient); 및
    (b) 적어도 하나의 중합체 담체
    를 포함하는, 결합 단백질의 방출용 조성물.
  39. 제38항에 있어서, 상기 중합체 담체가 폴리(아크릴산), 폴리(시아노아크릴레이트), 폴리(아미노산), 폴리(무수물), 폴리(뎁시펩타이드), 폴리(에스테르), 폴리(락트산), 폴리(락틱-코-글리콜산) 또는 PLGA, 폴리(b-하이드록시부티레이트), 폴리(카프로락톤), 폴리(디옥사논); 폴리(에틸렌 글리콜), 폴리(하이드록시프로필) 메타크릴아미드, 폴리[(오르가노)포스파젠], 폴리(오르토 에스테르), 폴리(비닐 알콜), 폴리(비닐피롤리돈), 말레산 무수물-알킬 비닐 에테르 공중합체, 플루론산 폴리올, 알부민, 알기네이트, 셀룰로스 및 셀룰로스 유도체, 콜라겐, 피브린, 젤라틴, 히알루론산, 올리고사카라이드, 글리카미노글리칸, 황산화 폴리사카라이드, 이들의 블렌드 및 공중합체로 이루어진 그룹 중 하나 이상으로부터 선택된 중합체인, 조성물.
  40. 제38항에 있어서, 상기 성분이 알부민, 수크로스, 트레할로스, 락티톨, 젤라틴, 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린, 메톡시폴리에틸렌 글리콜 및 폴리에틸렌 글리콜로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 조성물.
  41. 제38항에 기술된 유효량의 조성물을 포유동물에게 투여하는 단계를 포함하는, 포유동물을 치료하는 방법.
  42. 제1항의 결합 단백질 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물.
  43. 제42항에 있어서, 상기 약제학적으로 허용되는 담체가 상기 결합 단백질의 흡수 또는 분산을 증가시키는데 유용한 보강제로서 기능을 하는, 약제학적 조성물.
  44. 제43항에 있어서, 상기 보강제가 히알루로니다제인, 약제학적 조성물.
  45. 제42항에 있어서, IL-1α 활성이 유해한 장애를 치료하기 위한 하나 이상의 추가 치료제를 추가로 포함하는, 약제학적 조성물.
  46. 제45항에 있어서, 상기 추가 제제가 치료제, 영상화제, 세포독성 제제, 혈관형성 억제제; 키나제 억제제; 공동 자극 분자 차단제; 부착 분자 차단제; 항-사이토킨 항체 또는 이의 기능성 단편; 메토트렉세이트; 사이클로스포린; 라파마이신; FK506; 검출가능한 표지 또는 리포터; TNF 길항제; 항류마티스제; 근육 이완제, 마약류, 비스테로이드 소염 약물(NSAID), 진통제, 마취제, 진정제, 국소 마취제, 신경근 차단제, 항미생물제, 건선치료제, 코르티코스테로이드, 동화작용 스테로이드, 에리트로포이에틴, 면역화제, 면역글로불린, 면역억제제, 성장 호르몬, 호르몬 대체 약물, 방사능약제, 항우울증제, 항정신병제, 자극제, 천식 약물, 베타 작용제, 흡입 스테로이드, 경구 스테로이드, 에피네프린 또는 유사체, 사이토킨 및 사이토킨 길항제로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 약제학적 조성물.
  47. 사람 IL-1α 활성을 감소시키는 방법으로서, 사람 IL-1α 활성이 감소하도록 사람 IL-1α를 제1항의 결합 단백질과 접촉시킴을 포함하는, 방법.
  48. IL-1α 활성이 유해한 장애를 앓고 있는 사람 피검체의 사람 IL-1α 활성을 감소시키는 방법으로서, 상기 사람 피검체의 사람 IL-1α 활성이 감소하도록 제1항의 결합 단백질을 상기 사람 피검체에게 투여함을 포함하는, 방법.
  49. IL-1α 활성이 유해한 질환 또는 장애에 대해 피검체를 치료하는 방법으로서, 치료가 달성되도록 제1항의 결합 단백질을 상기 피검체에게 투여하는, 방법.
  50. 제49항에 있어서, 상기 장애가 류마티스성 관절염, 골관절염, 연소성 만성 관절염, 패혈성 관절염, 라임 관절염, 건선 관절염, 반응성 관절염, 척추관절증, 전신 홍반 루푸스, 크론 질환, 궤양 대장염, 염증성 장 질환, 인슐린 의존성 진성 당뇨병, 갑상선염, 천식, 알레르기성 질환, 건선, 피부경화증, 이식편 대 숙주 질환, 기관 이식 거부, 기관 이식과 관련된 급성 또는 만성 면역 질환, 유육종증, 동맥경화증, 파종성 혈관내 응고, 가와사키병, 그레이브스병, 신증후군, 만성 피로 증후군, 베게너 육아종증, 헤노흐-쇤라인 자반증, 신장의 현미경적 혈관염, 만성 활성 간염, 포도막염, 패혈성 쇼크, 독소 쇼크 증후군, 패혈증 증후군, 악액질, 감염성 질환, 기생충 질환, 후천성 면역결핍 증후군, 급성 횡단성 척수염, 헌팅톤 무도병, 파킨슨병, 알츠하이머병, 뇌졸중, 원발성 담즙성 간경변, 용혈성 빈혈, 악성 종양, 심부전증, 심근경색, 애디슨병, 산발성 다분비선 제I형 결핍증 및 다분비선 제II형 결핍증, 슈미트 증후군, 성인성(급성) 호흡 곤란 증후군, 탈모증, 원형 탈모증, 혈청음성 관절증, 관절증, 라이터병, 건선성 관절증, 궤양성 대장염성 관절증, 장병성 윤활막염, 클라미디아증, 예르시니아 및 살모넬라 관련 관절증, 척추관절증, 죽종 질환/동맥경화증, 아토피성 알레르기, 자가면역 수포성 질환, 심상성 천포창, 낙엽성 천포창, 유천포창, 선상 IgA 질환, 자가면역 용혈성 빈혈, 쿰즈 양성 용혈성 빈혈, 후천성 악성 빈혈, 연소성 악성 빈혈, 근통성 뇌염/로얄 프리(Royal Free) 질환, 만성 점막 피부 칸디다증, 거대세포 동맥염, 원발성 경화성 간염, 잠복성 자가면역 간염, 후천성 면역결핍 질환 증후군, 후천성 면역결핍 관련 질환, B형 간염, C형 간염, 공통 가변성 면역결핍증(공통 가변성 감마글로불린저혈증), 확장형 심근증, 여성 불임증, 난소 부전증, 조숙 난소부전, 섬유성 폐 질환, 잠복성 섬유조직 폐포염, 후-염증성 간질성 폐질환, 간질성 폐렴, 결합 조직 질환 관련 간질성 폐 질환, 조합성 결합 조직 질환 관련 폐 질환, 전신성 경화증 관련 간질성 폐 질환, 류마티스성 관절염 관련 간질성 폐 질환, 전신 홍반 루푸스 관련 폐 질환, 피부근염/다발성 근염 관련 폐 질환, 쇼그렌 질환 관련 폐 질환, 강직성 척추염 관련 폐 질환, 혈관염 범발성 폐 질환, 혈철증 관련 폐 질환, 약물-유도된 간질성 폐 질환, 섬유증, 방사선 섬유증, 폐색성 세기관지염, 만성 호산구성 폐렴, 림프구성 침윤성 폐 질환, 감염후 간질성 폐 질환, 통풍성 관절염, 자가면역 간염, 1형 자가면역 간염(전형적 자가면역 또는 루포이드 간염), 2형 자가면역 간염(항-LKM 항체 간염), 자가면역 매개된 저혈당증, 흑색 극세포증에 따른 B형 인슐린 내성, 부갑상선 기능저하증, 기관 이식과 관련된 급성 면역 질환, 기관 이식과 관련된 만성 면역 질환, 골관절증, 원발성 경화성 담관염, 1형 건선, 2형 건선, 특발성 백혈구감소증, 자가면역 호중구감소증, 신장 질환 NOS, 사구체신염, 신장의 현미경적 혈관염, 라임병, 원판양 홍반성 낭창, 남성 불임증 특발증 또는 NOS, 정자 자가면역, 다발성 경화증(모든 아형), 교감성 안염, 결합 조직 질환에 속발성인 폐 고혈압증, 굿패스튜어 증후군, 결절성 다발성 동맥염의 폐 징후, 급성 류마티스성 열, 류마티스성 척추염, 스틸씨 병, 전신성 경화증, 쇼그렌 증후군, 다카야스 병/동맥염, 자가면역 혈소판감소증, 특발성 혈소판감소증, 자가면역 갑상선 질환, 갑상선 기능항진증, 갑상선종증 자가면역 갑상선 기능저하증(하시모토 병), 위축성 자가 면역 갑상선 기능저하증, 원발성 점액수종, 수정체성 포도막염, 원발성 혈관염, 백반증 급성 간 질환, 만성 간질환, 알콜성 경변, 알콜 유도 간 손상, 콜레오사타티스(choleosatatis), 특이체질성 간 질환, 약물 유도 간염, 비알콜성 지방간염, 알레르기 및 천식, B 그룹 스트렙토코커스 (GBS) 감염, 정신 장애(예를 들어, 우울증 및 정신분열증), Th2형 및 Th1형 매개 질환, 급성 및 만성 통증(상이한 형태의 통증), 및 폐암, 유방암, 위암, 방광암, 결장암, 췌장암, 난소암, 전립선암 및 직장암과 같은 암종 및 조혈 악성종양(백혈병 및 림프종), 아베타지방단백질혈증, 말초청색증, 급성 및 만성 기생충성 또는 감염성 과정, 급성 백혈병, 급성 림프성 모구성 백혈병 (ALL), 급성 골수 백혈병(AML), 급성 또는 만성 세균 감염, 급성 췌장염, 급성 신부전증, 선암종, 공기 이소성 심방박동, AIDS 치매 합병증, 알콜 유도 간염, 알레르기성 결막염, 알레르기성 접촉 피부염, 알레르기성 비염, 동종이식 거부, 알파-1-안티트립신 결핍, 근위축성 측삭 경화증, 빈혈, 앙기나 협심증, 전각 세포 변성, 항 cd3 치료, 항 인지질 증후군, 항-수용체 과민성 반응, 대동맥 및 말초 동맥류, 대동맥 해부, 동맥 고혈압, 동맥경화증, 확인맥 누공, 운동실조증, 심방세동 (지연 또는 발작성), 심방조동, 확인맥 막힘, B 세포 림프종, 골 이식 거부, 골수 이식 (BMT) 거부, 좌각차단, 버키트 림프종, 화상, 심장성 부정맥, 심장성 기절 증후군, 심장 종양, 심근증, 심폐 우회 염증 반응, 연골 이식 거부, 소뇌피질 변성, 소뇌 장애, 혼란 또는 다초점 심방 빈맥, 화학치료 관련 장애, 만성 골수성 백혈병(CML), 만성 알콜증, 만성 염증 병리, 만성 림프성 백혈병(CLL), 만성 폐쇄 폐 질환(COPD), 만성 살리실레이트 중독, 결장직장 암종, 울혈성 심부전, 결막염, 접촉성 피부염, 폐 심장, 관상 동맥 질환, 크로이츠펠트-야콥(Creutzfeldt-Jakob) 질환, 배양 음성 패혈증, 낭섬유증, 사이토킨 치료 관련 장애, 권투선수치매(Dementia pugilistica), 탈수초성 질환, 댕기 출혈열, 피부염, 피부학적 증상, 당뇨병, 진성 당뇨병, 당뇨병성 동맥경화 질환, 미만성 루이체 질환, 확장성 울혈성 심근증, 기저핵 장애, 중년 다운 증후군, CNS 도파민 수용체 차단 약물에 의해 유도된 약물 유도 운동 장애, 약물 과민증, 습진, 뇌척수염, 심내막염, 내분비질환, 후두개염, 엡스타인-바르 바이러스 감염, 피부홍통증, 추체외로 및 소뇌 장애, 가족성 적혈구잠식성 림프조직구증, 태아 흉선 이식 거부, 프리드리히 운동실조증, 기능성 말초 동맥 장애, 진균 패혈증, 가스괴저, 위궤양, 사구체신염, 임의의 기관 또는 조직 이식 거부, 그람 음성 패혈증, 그람 양성 패혈증, 세포내 유기체로 인한 육아종, 모발 세포 백혈병, 할레로르덴-스파츠 질환(Hallerrorden-Spatz disease), 하시모토 갑상선염, 고초열, 심장 이식 거부, 혈색소증, 혈액투석, 용혈성 요독증후군/혈전성 혈소판감소성 자반증, 출혈, 간염(A), 히스 다발 부정맥, HIV 감염/HIV 신경병증, 호지킨 질환, 과운동성 장애, 과민성 반응, 과민성 폐렴, 고혈압, 운동 부족 장애, 시상하부-뇌하수체-부신피질계 평가, 특발성 애디슨 질환, 특발성 폐 섬유증, 항체 매개 세포독성, 무력증, 유아 척추 근육 위축증, 대동맥 염증, 인플루엔자 a, 이온화 방사선 노출, 홍채섬모체염/자궁염/광학적 신경근염, 허혈 관류 손상, 허혈 뇌졸중, 연소성 류마티스 관절염, 연소성 척추 근육 위축증, 카포시 육종, 신장 이식 거부, 레지오넬라, 리슈마니아증, 나병, 피질척수계 병변, 지방부종, 간 이식 거부, 림프피부종, 말라리아, 악성 림프종, 악성 조직구증, 악성 흑색종, 수막염, 수막염 균혈증, 대사/특발성 질환, 편두통, 미토콘드리아 다중 시스템 장애, 복합 연결 조직 질환, 모노클로날 감마글로불린혈증, 다발성 골수종, 다발성 시스템 변성(만셀 데제린-토마스 쉬-드라거 및 마차도-조셉), 중증 근무력증, 마이코박테리움 아비움 인트라셀룰라레, 마이코박테리움 결핵, 골수이형성증후군, 심근 경색, 심근 허혈 장애, 비인두 암종, 신생아 만성 폐 질환, 신염, 신증, 신경퇴행성 질환, 신경성 I 근육 위축증, 호중구감소성 발열, 비-호지킨 림프종, 복부 대동맥 및 이의 지류 폐색, 폐색성 동맥 질환, okt3 치료, 고환염/부고환염, 고환염/혈관절제술 반전 과정, 기비대, 골다공증, 췌장 이식 거부, 췌장 암종, 부수종양성 증후군/악성 고칼슘혈증, 부갑상선 이식 거부, 골반 염증 질환, 다년성 비염, 심막 질환, 말초 동맥경화 질환, 말초 혈관 장애, 복막염, 악성빈혈, 폐포자충 폐렴, 폐렴, POEMS 증후군 (다발신경병증, 장기비대, 내분비질환, 모노클로날 감마글로불린혈증, 및 피부 변화 증후군), 관류후 증후군, 펌프후 증후군, MI 후 심장절개 증후군, 자간전증, 전진적 상핵 마비, 원발성 폐 고혈압, 방사선 치료, 레이노드 현상 및 질환, 레이노드 질환, 레프섬 질환, 일반 협소 QRS 심근증, 신혈관성고혈압, 재관류 손상, 제한성 심근병증, 육종, 피부경화증, 노인 무도병, 루이체형 노인성 치매, 혈청음성 관절병증, 쇼크, 겸상적혈구 빈혈증, 피부 동종이식 거부, 피부 변화 증후군, 소장 이식 거부, 고형 종양, 특이적 부정맥, 척수운동실조, 척수소뇌 변성, 스트렙토코커스 근염, 소뇌 구조적 병변, 아급성 경화성 범뇌염, 실신, 심혈관계 매독, 전신 아나팔락시스, 전신 염증 반응 증후군, 전신 개시 연소성 류마티스 관절염, T-세포 또는 FAB ALL, 말초혈관 확장증, 폐색성 혈전 혈관염 , 혈소판감소증, 독성, 이식, 외상/출혈, III형 과민성 반응, IV형 과민성, 불안정 앙기나, 요독증, 요로패혈증, 두드러기, 승모판 심장 질환, 하지 정맥, 혈관염, 정맥동 질환, 정맥종 혈전증, 심실 세동, 바이러스 및 진균 감염, 바이탈 뇌염/무균성 수막염, 바이탈-연관 적혈구식작용 증후군, 베르니케-코르사코프 증후군, 윌슨 질환, 임의의 기관 또는 조직의 이종이식 거부, 급성 관상동맥 증후군, 급성 특발성 다발신경염, 급성 염증성 탈수초성 다발성신경병증, 급성 허혈, 성인 스틸씨병, 원형 탈모증, 아나필락시스, 항-인지질 항체 증후군, 재생불량성 빈혈, 동맥경화증, 아토피성 습진, 아토피성 피부염, 자가면역 피부염, 스트렙토코커스 감염과 관련된 자가면역 장애, 자가면역 장병증, 자가면역 청각 상실, 자가면역 림프증식 증후군(ALPS), 자가면역 심근염, 자가면역 조숙 난소 부전, 안검염, 기관지확장증, 수포성 유천포창, 심혈관 질환, 격변성 항인지질 증후군, 셀리악병, 경부척추증, 만성 허혈, 흉터성 유천포창, 다발경화증의 위험이 있는 임상 분리 증후군(CIS), 결막염, 유년기 개시 정신병, 만성 폐색성 폐질환(COPD), 누낭염, 피부근염, 당뇨 신장병, 진성 당뇨병, 추간판 헤르니아, 추간판 탈출증, 약물 유도 면역 용혈성 빈혈, 심내막염, 자궁내막증, 안구내염, 상공막염, 다형홍반, 주요 다형홍반, 임신성 유천포창, 길랑-바레 증후군(GBS), 건초열, 휴즈 증후군, 특발성 파킨슨병, 특발성 간질성 폐렴, IgE-매개 알레르기, 면역 용혈성 빈혈, 봉입체 근염, 감염성 눈 염증, 염증성 탈수초성 질환, 염증성 심장 질환, 염증성 신장 질환, IPF/UIP, 홍채염, 각막염, 건성각막결막염, 쿠스마울 질환 또는 쿠스마울-마이어 질환, 랜드리 마비, 랑게르한스 세포 조직구증, 망상피반, 황반변성, 현미경적 다발혈관염, 베크테레브병, 운동 신경 장애, 점막 유천포창, 다발 기관 손상, 중증근무력증, 골수형성이상 증후군, 심근염, 신경근 장애, 신경병, 비-A 비-B 간염, 시각신경염, 골용해, 소수관절 JRA, 말초 동맥 폐색 질환(PAOD), 말초 혈관 질환(PVD), 말초 동맥 질환(PAD), 정맥염, 결절성 다발동맥염(또는 결절성 동맥주위염), 다발연골염, 류마티스성 다발근육통, 백모증, 다관절 JRA, 다중내분비 결핍 증후군, 다발근육염, 류마티스성 다발근육통(PMR), 펌프 후 증후군, 원발성 파킨슨증, 전립선염, 진정적혈구계 무형성, 부신피질부전, 재발 시신경척수염, 재협착증, 류마티스성 심장 질환, SAPHO(윤활막염, 여드름, 농포증, 골과다증 및 골염), 피부경화증, 2차 아밀로이드증, 쇼크 폐, 공막염, 좌골신경통, 2차 부신부전, 실리콘 관련 결합조직 질환, 스네던-윌킨슨 피부병, 강직 척추염, 스티븐스-존슨 증후군(SJS), 전신 염증 반응 증후군, 관자동맥염, 톡소플라스마성 비염, 독소 표피 괴사용해, 횡단성 골수염, TRAPS(종양 괴사 인자 수용체, 1형 알레르기 반응, II형 당뇨병, 두드러기, 일반 간질성 폐렴(UIP), 혈관염, 봄철 결막염, 바이러스 비염, 보그트-고야나기-하라다 증후군(VKH 증후군), 습성 황반 변성 및 상처 치유로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 방법.
  51. 제1항의 결합 단백질을 제2 제제의 투여 전, 제2 제제의 투여와 동시에 또는 제2 제제의 투여 후에 투여하는 단계를 포함하여, IL-1α가 유해한 장애를 앓고 있는 환자를 치료하는 방법으로서, 상기 제2 제제가 TNF 길항제; TNF 수용체의 가용성 단편; ENBREL; TNF 효소 길항제; TNF 전환 효소(TACE) 억제제; 무스카린성 수용체 길항제; TGF-베타 길항제; 인터페론 감마; 퍼페니돈; 화학치료제, 메토트렉세이트; 레플루노마이드; 시롤리무스(라파마이신) 또는 이의 유사체, CCI-779; COX2 또는 cPLA2 억제제; NSAID; 면역조절제; p38 억제제; TPL-2, MK-2 및 NFkB 억제제; 부데노사이드; 표피 성장 인자; 코르티코스테로이드; 사이클로스포린; 설파살라진; 아미노살리실레이트; 6-머캅토퓨린; 아자티오프린; 메트로니다졸; 리폭시게나제 억제제; 메살라민; 올살라진; 발살라자이드; 항산화제; 트롬복산 억제제; IL-1 수용체 길항제; 항-IL-1β 항체; 항-IL-6-항체; 성장인자; 엘라스타제 억제제; 피리디닐-이미다졸 화합물; TNF, LT, IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-14, IL-15, IL-16, IL-17, IL-18, IL-19, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, IL-24, IL-25, IL-26, IL-27, IL-28, IL-29, IL-30, IL-31, IL-32, IL-33, EMAP-II, GM-CSF, FGF, 또는 PDGF의 항체 또는 작용제; CD2, CD3, CD4, CD8, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD90의 항체 또는 이들의 리간드; FK506; 라파마이신; 마이코페놀레이트 모페틸; 이부프로펜; 프레드니솔론; 포스포디에스테라제 억제제; 아데노신 작용제; 항혈전제; 보체 억제제; 아드레날린성 제제; IRAK, NIK, IKK, p38 또는 MAP 키나제 억제제; IL-1β 전환효소 억제제; TNFα 전환효소 억제제; T-세포 시그널링 억제제; 메탈로프로테이나제 억제제; 6-머캅토퓨린; 안지오텐신 전환효소 억제제; 가용성 사이토킨 수용체; 가용성 p55 TNF 수용체; 가용성 p75 TNF 수용체; sIL-1RI; sIL-1RII; sIL-6R; 항염증성 사이토킨; IL-4; IL-10; IL-11; 및 TGFβ로 이루어진 그룹 중에서 선택되는, 방법.
  52. 제49항에 있어서, 상기 피검체에 대한 상기 투여가 비경구, 피하, 근육내, 정맥내, 관절내, 기관지내, 복강내, 관절낭내, 연골내, 강내, 체강내, 소뇌내, 뇌실내, 결장내, 경부내, 위내, 간내, 심근내, 골내, 골반내, 심장주위내, 복막내, 흉막내, 전립선내, 폐내, 직장내, 신장내, 망막내, 척추내, 활막내, 흉부내, 자궁내, 방광내, 일시주사, 질내, 직장, 협측, 설하, 비내 및 경피 투여로부터 선택되는 하나 이상의 방식으로 이루어지는, 방법.
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Families Citing this family (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2216653A1 (en) 2005-08-02 2010-08-11 XBiotech, Inc Diagnosis, treatment and prevention of vascular disorders using il-1alpha autoantibodies
WO2009148575A1 (en) 2008-05-30 2009-12-10 Xbiotech, Inc. Interleukin-1 alpha abs and methods of use
JP5976319B2 (ja) 2008-09-12 2016-08-23 エックスバイオテク，インコーポレイテッドＸｂｉｏｔｅｃｈ，Ｉｎｃ． 病原性単球の標的化
TW201031421A (en) 2009-01-29 2010-09-01 Abbott Lab IL-1 binding proteins
AR078650A1 (es) * 2009-10-15 2011-11-23 Abbott Lab Anticuerpo de union a il-1 beta
EP2582391B1 (en) 2010-06-18 2018-10-03 XBiotech, Inc Arthritis treatment
AU2015201228B2 (en) * 2010-08-23 2016-02-11 Xbiotech Inc. Treatment for neoplastic diseases
DK2608808T3 (en) 2010-08-23 2017-04-24 Xbiotech Inc TREATMENT OF NEOPLASTIC DISEASES
AU2015271978B2 (en) * 2010-08-23 2017-10-26 Xbiotech Inc. Treatment for neoplastic diseases
AU2011361720B2 (en) 2010-12-21 2017-04-27 Abbvie Inc. IL-1 -alpha and -beta bispecific dual variable domain immunoglobulins and their use
US20120275996A1 (en) * 2010-12-21 2012-11-01 Abbott Laboratories IL-1 Binding Proteins
PL3604339T3 (pl) 2011-01-14 2021-12-27 The Regents Of The University Of California Terapeutyczne przeciwciała przeciwko białku ror-1 i sposoby ich zastosowania
EP2672997A4 (en) 2011-02-08 2015-05-06 Abbvie Inc TREATMENT OF ARTHROSIS AND PAIN
KR101263563B1 (ko) 2011-03-15 2013-05-13 호서대학교 산학협력단 인터루킨―３２ 억제제를 유효성분으로 함유하는 알레르기 비염의 치료 또는 개선용 약학 조성물
ES2697056T3 (es) * 2011-04-01 2019-01-21 Xbiotech Inc Tratamiento para patologías dermatológicas
US9724409B2 (en) 2011-04-01 2017-08-08 Xbiotech, Inc. Treatment of inflammatory skin disease
KR102039198B1 (ko) * 2011-09-23 2019-10-31 엑스바이오테크, 인크. 악액질 치료법
EP2666786A1 (en) 2012-05-21 2013-11-27 PAION Deutschland GmbH Immunotherapy for intracranial hemorrhage
RU2667634C2 (ru) * 2012-06-05 2018-09-21 Нестек Са Способы диагностики хронического заболевания клапанов
US9670276B2 (en) 2012-07-12 2017-06-06 Abbvie Inc. IL-1 binding proteins
US9545441B2 (en) * 2012-09-18 2017-01-17 Xbiotech, Inc. Treatment of diabetes
CA2886757C (en) * 2012-10-04 2022-04-05 Xbiotech Inc. Treatment of anxiety with il1.alpha. antagonist
JP2016502526A (ja) 2012-11-16 2016-01-28 ノバルティス アーゲー 末梢動脈疾患を処置するためのＩＬ−１β結合抗体の使用
KR102353885B1 (ko) * 2013-03-13 2022-01-20 이미지냅 인코포레이티드 Cd８에의 항원 결합 구조체들
UY35468A (es) * 2013-03-16 2014-10-31 Novartis Ag Tratamiento de cáncer utilizando un receptor quimérico de antígeno anti-cd19
RU2693084C2 (ru) 2014-01-10 2019-07-01 Анаптисбайо, Инк. Антитела, направленные против интерлейкина-33 (il-33)
ES2792682T3 (es) 2014-02-10 2020-11-11 Respivant Sciences Gmbh Métodos para el tratamiento de enfermedades pulmonares con estabilizadores de mastocitos
PT3104853T (pt) 2014-02-10 2020-01-14 Respivant Sciences Gmbh Tratamento com estabilizadores de mastócitos para distúrbios sistémicos
EP3129470B1 (en) 2014-04-07 2021-04-07 Novartis Ag Treatment of cancer using anti-cd19 chimeric antigen receptor
US9616114B1 (en) 2014-09-18 2017-04-11 David Gordon Bermudes Modified bacteria having improved pharmacokinetics and tumor colonization enhancing antitumor activity
KR20170081253A (ko) * 2014-11-10 2017-07-11 에프. 호프만-라 로슈 아게 항-il-1베타 항체 및 이의 사용 방법
WO2016075037A1 (en) 2014-11-10 2016-05-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antibodies and methods of use in ophthalmology
EP3218515B1 (en) 2014-11-10 2023-04-26 F. Hoffmann-La Roche AG Therapeutic and diagnostic methods for il-33-mediated disorders
EP3218403B1 (en) 2014-11-10 2020-05-13 F.Hoffmann-La Roche Ag Anti-interleukin-33 antibodies and uses thereof
CA2978449A1 (en) 2015-03-02 2016-09-09 180 Therapeutics Lp Method of treating a localized fibrotic disorder using an il-33 antagonist
PL3280729T3 (pl) 2015-04-08 2022-08-22 Novartis Ag Terapie cd20, terapie cd22 i terapie skojarzone komórką eksprymującą chimeryczny receptor antygenowy (car) cd19
US11254744B2 (en) 2015-08-07 2022-02-22 Imaginab, Inc. Antigen binding constructs to target molecules
US10265296B2 (en) 2015-08-07 2019-04-23 Respivant Sciences Gmbh Methods for the treatment of systemic disorders treatable with mast cell stabilizers, including mast cell related disorders
WO2017027387A1 (en) 2015-08-07 2017-02-16 Patara Pharma, LLC Methods for the treatment of mast cell related disorders with mast cell stabilizers
ES2862425T3 (es) 2015-11-03 2021-10-07 Janssen Biotech Inc Formulaciones subcutáneas de anticuerpos anti-CD38 y sus usos
JP2019521981A (ja) * 2016-06-15 2019-08-08 アムジエン・インコーポレーテツド セリアック病、非セリアックグルテン過敏症及び難治性セリアック病を治療するための方法及び組成物
AU2017321495A1 (en) 2016-08-31 2019-03-21 Respivant Sciences Gmbh Cromolyn compositions for treatment of chronic cough due to idiopathic pulmonary fibrosis
JP2019531308A (ja) 2016-10-07 2019-10-31 レシュピファント サイエンシス ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクター ハフトゥングＲｅｓｐｉｖａｎｔ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｇｍｂｈ 肺線維症の治療のためのクロモリン組成物
SG10201913823VA (en) 2016-10-07 2020-03-30 Novartis Ag Chimeric antigen receptors for the treatment of cancer
US11180535B1 (en) 2016-12-07 2021-11-23 David Gordon Bermudes Saccharide binding, tumor penetration, and cytotoxic antitumor chimeric peptides from therapeutic bacteria
US11129906B1 (en) 2016-12-07 2021-09-28 David Gordon Bermudes Chimeric protein toxins for expression by therapeutic bacteria
US11266745B2 (en) 2017-02-08 2022-03-08 Imaginab, Inc. Extension sequences for diabodies
MX2019009798A (es) 2017-02-16 2020-01-30 Xbiotech Inc Tratamiento de la hidradenitis supurativa.
CN111108121A (zh) * 2017-04-25 2020-05-05 永福生物科技股份有限公司 Il-20拮抗剂治疗眼病的用途
CA3098148A1 (en) * 2018-04-24 2019-10-31 Janssen Biotech, Inc. Treatment of atopic dermatitis
CA3130676A1 (en) * 2019-02-20 2020-08-27 Ksl Biomedical Inc. A method for predicting and monitoring the efficacy of low-dose il-2 and hydroxychloroquine therapy in autoimmune diseases and its long-term use in autoimmune-related conditions
PE20230252A1 (es) 2020-03-13 2023-02-07 Genentech Inc Anticuerpos anti-interleucina-33 y sus usos de estos
CN114134111B (zh) * 2021-12-07 2023-08-18 珠海贝索细胞科学技术有限公司 一种免疫细胞活化剂及其制备方法和应用

Family Cites Families (81)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3378250D1 (en) * 1982-04-22 1988-11-24 Ici Plc Continuous release formulations
GB8308235D0 (en) * 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US4816567A (en) * 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US5807715A (en) * 1984-08-27 1998-09-15 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and transformed mammalian lymphocyte cells for producing functional antigen-binding protein including chimeric immunoglobulin
US5128326A (en) * 1984-12-06 1992-07-07 Biomatrix, Inc. Drug delivery systems based on hyaluronans derivatives thereof and their salts and methods of producing same
US6492107B1 (en) * 1986-11-20 2002-12-10 Stuart Kauffman Process for obtaining DNA, RNA, peptides, polypeptides, or protein, by recombinant DNA technique
GB2183661B (en) * 1985-03-30 1989-06-28 Marc Ballivet Method for obtaining dna, rna, peptides, polypeptides or proteins by means of a dna recombinant technique
US4980286A (en) * 1985-07-05 1990-12-25 Whitehead Institute For Biomedical Research In vivo introduction and expression of foreign genetic material in epithelial cells
US5618920A (en) * 1985-11-01 1997-04-08 Xoma Corporation Modular assembly of antibody genes, antibodies prepared thereby and use
US5225539A (en) * 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
US4946778A (en) * 1987-09-21 1990-08-07 Genex Corporation Single polypeptide chain binding molecules
JPH0720438B2 (ja) * 1986-11-13 1995-03-08 大塚製薬株式会社 インターロイキン−１に対する抗体
JP3101690B2 (ja) * 1987-03-18 2000-10-23 エス・ビィ・２・インコーポレイテッド 変性抗体の、または変性抗体に関する改良
US5258498A (en) * 1987-05-21 1993-11-02 Creative Biomolecules, Inc. Polypeptide linkers for production of biosynthetic proteins
US5223409A (en) * 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
IL91501A (en) 1988-09-02 1998-03-10 Dyax Corp Generation of a variegated library of mutant potential binding proteins and screening of said library for proteins with a desired binding activity
US5750373A (en) * 1990-12-03 1998-05-12 Genentech, Inc. Enrichment method for variant proteins having altered binding properties, M13 phagemids, and growth hormone variants
AU634186B2 (en) 1988-11-11 1993-02-18 Medical Research Council Single domain ligands, receptors comprising said ligands, methods for their production, and use of said ligands and receptors
US5530101A (en) * 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
CA2016841C (en) 1989-05-16 1999-09-21 William D. Huse A method for producing polymers having a preselected activity
CA2016842A1 (en) 1989-05-16 1990-11-16 Richard A. Lerner Method for tapping the immunological repertoire
EP0478627A4 (en) 1989-05-16 1992-08-19 William D. Huse Co-expression of heteromeric receptors
AU6430190A (en) 1989-10-10 1991-05-16 Pitman-Moore, Inc. Sustained release composition for macromolecular proteins
CA2071867A1 (en) * 1989-11-06 1991-05-07 Edith Mathiowitz Method for producing protein microspheres
GB8928874D0 (en) 1989-12-21 1990-02-28 Celltech Ltd Humanised antibodies
US5780225A (en) * 1990-01-12 1998-07-14 Stratagene Method for generating libaries of antibody genes comprising amplification of diverse antibody DNAs and methods for using these libraries for the production of diverse antigen combining molecules
AU7247191A (en) 1990-01-11 1991-08-05 Molecular Affinities Corporation Production of antibodies using gene libraries
US6075181A (en) * 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
DK0463151T3 (da) 1990-01-12 1996-07-01 Cell Genesys Inc Frembringelse af xenogene antistoffer
US5427908A (en) * 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
WO1992002551A1 (en) 1990-08-02 1992-02-20 B.R. Centre Limited Methods for the production of proteins with a desired function
WO1992003461A1 (en) 1990-08-24 1992-03-05 Ixsys, Inc. Methods of synthesizing oligonucleotides with random codons
US5698426A (en) * 1990-09-28 1997-12-16 Ixsys, Incorporated Surface expression libraries of heteromeric receptors
EP0563296B1 (en) 1990-12-20 1999-03-17 Ixsys, Inc. Optimization of binding proteins
ES2287206T3 (es) 1991-03-01 2007-12-16 Dyax Corporation Proceso para el desarrollo de mini-proteinas de union.
AU662148B2 (en) 1991-04-10 1995-08-24 Scripps Research Institute, The Heterodimeric receptor libraries using phagemids
AU666852B2 (en) 1991-05-01 1996-02-29 Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine A method for treating infectious respiratory diseases
DE69233482T2 (de) 1991-05-17 2006-01-12 Merck & Co., Inc. Verfahren zur Verminderung der Immunogenität der variablen Antikörperdomänen
CA2119930C (en) 1991-09-23 2002-10-01 Hendricus R. J. M. Hoogenboom Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach
ES2136092T3 (es) * 1991-09-23 1999-11-16 Medical Res Council Procedimientos para la produccion de anticuerpos humanizados.
ES2202310T3 (es) * 1991-12-13 2004-04-01 Xoma Corporation Metodos y materiales para la preparacion de dominios variables de anticuerpos modificados y sus usos terapeuticos.
US5912015A (en) * 1992-03-12 1999-06-15 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Modulated release from biocompatible polymers
US5733743A (en) * 1992-03-24 1998-03-31 Cambridge Antibody Technology Limited Methods for producing members of specific binding pairs
US5639641A (en) 1992-09-09 1997-06-17 Immunogen Inc. Resurfacing of rodent antibodies
US5934272A (en) * 1993-01-29 1999-08-10 Aradigm Corporation Device and method of creating aerosolized mist of respiratory drug
US5565352A (en) * 1993-11-24 1996-10-15 Arch Development Corporation Deubiquitinating enzyme: compositions and methods
US5516637A (en) * 1994-06-10 1996-05-14 Dade International Inc. Method involving display of protein binding pairs on the surface of bacterial pili and bacteriophage
US6091001A (en) * 1995-03-29 2000-07-18 Abgenix, Inc. Production of antibodies using Cre-mediated site-specific recombination
US6130364A (en) * 1995-03-29 2000-10-10 Abgenix, Inc. Production of antibodies using Cre-mediated site-specific recombination
US6019968A (en) * 1995-04-14 2000-02-01 Inhale Therapeutic Systems, Inc. Dispersible antibody compositions and methods for their preparation and use
KR100479146B1 (ko) * 1995-04-21 2005-05-16 셀 제네시스, 인코포레이티드 큰게놈dna결실유발법
EP0850051A2 (en) * 1995-08-31 1998-07-01 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Composition for sustained release of an agent
PT885002E (pt) * 1996-03-04 2011-07-14 Massachusetts Inst Technology Materiais e métodos para aumento da internalização celular
US5714352A (en) * 1996-03-20 1998-02-03 Xenotech Incorporated Directed switch-mediated DNA recombination
US5985309A (en) * 1996-05-24 1999-11-16 Massachusetts Institute Of Technology Preparation of particles for inhalation
US5874064A (en) * 1996-05-24 1999-02-23 Massachusetts Institute Of Technology Aerodynamically light particles for pulmonary drug delivery
US5855913A (en) * 1997-01-16 1999-01-05 Massachusetts Instite Of Technology Particles incorporating surfactants for pulmonary drug delivery
US6699658B1 (en) * 1996-05-31 2004-03-02 Board Of Trustees Of The University Of Illinois Yeast cell surface display of proteins and uses thereof
US5916771A (en) * 1996-10-11 1999-06-29 Abgenix, Inc. Production of a multimeric protein by cell fusion method
US5989463A (en) * 1997-09-24 1999-11-23 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Methods for fabricating polymer-based controlled release devices
US6660843B1 (en) * 1998-10-23 2003-12-09 Amgen Inc. Modified peptides as therapeutic agents
GB0013810D0 (en) * 2000-06-06 2000-07-26 Celltech Chiroscience Ltd Biological products
CA2412701A1 (en) * 2000-06-28 2002-01-03 Glycofi, Inc. Methods for producing modified glycoproteins
US7449308B2 (en) * 2000-06-28 2008-11-11 Glycofi, Inc. Combinatorial DNA library for producing modified N-glycans in lower eukaryotes
CN101525384A (zh) * 2000-06-29 2009-09-09 艾博特公司 双特异性抗体及其制备方法和用途
ATE434040T1 (de) * 2001-10-01 2009-07-15 Dyax Corp Mehrkettige eukaryontische display-vektoren und deren verwendungen
TWI323265B (en) * 2002-08-06 2010-04-11 Glaxo Group Ltd Antibodies
JP4538461B2 (ja) * 2003-01-24 2010-09-08 アプライド モレキュラー エボリューション，インコーポレイテッド ヒトＩＬ−１βアンタゴニスト
WO2005035575A2 (en) * 2003-08-22 2005-04-21 Medimmune, Inc. Humanization of antibodies
ES2477765T3 (es) * 2005-04-19 2014-07-17 Seattle Genetics, Inc. Agentes de unión al anti-cd70 humanizado y usos de los mismos
KR101502920B1 (ko) * 2005-06-21 2015-03-17 조마 (유에스) 엘엘씨 ＩＬ-１β 결합성 항체 및 그의 단편
KR20140053410A (ko) * 2005-08-19 2014-05-07 아보트 러보러터리즈 이원 가변 도메인 면역글로불린 및 이의 용도
US20090215992A1 (en) * 2005-08-19 2009-08-27 Chengbin Wu Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
US7612181B2 (en) * 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
CA2666599A1 (en) * 2006-08-18 2008-02-21 Ablynx N.V. Amino acid sequences directed against il-6r and polypeptides comprising the same for the treatment of diseases and disorders associated with il-6-mediated signalling
CA2667997C (en) 2006-11-02 2016-10-11 Genentech, Inc. Humanized anti-factor d antibodies and uses thereof
TW201031421A (en) 2009-01-29 2010-09-01 Abbott Lab IL-1 binding proteins
US20110016506A1 (en) * 2009-07-15 2011-01-20 Yung-Yu Lu Set-Top Box
KR101848225B1 (ko) * 2010-05-14 2018-04-12 애브비 인코포레이티드 Ｉｌ－１ 결합 단백질

Also Published As

Publication number Publication date
WO2010087972A3 (en) 2010-09-16
EP2391652A2 (en) 2011-12-07
IL214341A0 (en) 2011-09-27
TW201031421A (en) 2010-09-01
US20130280253A1 (en) 2013-10-24
CR20110577A (es) 2012-02-24
ECSP11011239A (es) 2011-08-31
BRPI1007371A2 (pt) 2018-03-27
AU2010208637A1 (en) 2011-08-04
SG172855A1 (en) 2011-08-29
JP2012516153A (ja) 2012-07-19
EP2391652A4 (en) 2013-01-02
US8383778B2 (en) 2013-02-26
WO2010087972A2 (en) 2010-08-05
MX2011007987A (es) 2011-08-17
CN102369217A (zh) 2012-03-07
CA2749966A1 (en) 2010-08-05
PE20120586A1 (es) 2012-06-17
CL2011001834A1 (es) 2012-03-09
UA102722C2 (en) 2013-08-12
NZ593905A (en) 2013-03-28
CO6400231A2 (es) 2012-03-15
ZA201105177B (en) 2012-03-28
DOP2011000232A (es) 2011-09-15
US20100221179A1 (en) 2010-09-02
RU2011135768A (ru) 2013-03-10

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US20110165063A1 (en) Il-1 binding proteins

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