KR102165591B1

KR102165591B1 - 발모제

Info

Publication number: KR102165591B1
Application number: KR1020147032100A
Authority: KR
Inventors: 키미코 무로후시; 토시로 모로호시; 시게유키 이마무라; 타츠로 후지와라; 요시히코 노가타
Original assignee: 산쇼가부시키가이샤
Priority date: 2012-04-27
Filing date: 2013-04-26
Publication date: 2020-10-14
Also published as: CN104254317A; WO2013161978A1; SG11201406911RA; JPWO2013161978A1; HK1204935A1; KR20150006852A; CN104254317B; JP6074411B2

Abstract

본 발명의 목적은 우수한 양모·발모 효과를 나타내는 발모제를 제공하는 것이다. 본 발명에 따르면 환상 포스파티딘산 또는 카바환상 포스파티딘산을 유효성분으로 포함하는 발모제가 제공된다.

Description

발모제{Hair Growth Agent}

본 발명은 환상 포스파티딘산(cyclic phosphatidic acid) 또는 카바환상 포스파티딘산(carbacyclic phosphatidic acid)을 유효성분으로 포함하는 발모제에 관한 것이다.

탈모증에는 선천성인 것, 후천성인 것이 있고, 그 발병 원인, 발생 기작과 함께 많은 연구가 이루어지고 있다. 그러나, 오늘날 양모·발모제는 매우 많이 시판되고는 있지만, 불분명한 점이 많은 것이 사실이다.

종래에는, 탈모증의 예방 및 치료에 이용되고 있는 많은 양모·발모제의 약효성분으로 쓴풀(Swertia japonica Makino) 추출물, 비타민 E 아세테이트 등의 혈관 확장제(vasodilators), 고추 틴크제(capsicum tincture) 등의 자극제(stimulants), 판토텐산, 비오틴 등의 비타민류(vitamines), 나아가 호르몬제(hormones), 항염증제(anti-inflammatory agents), 살균제(microbicides) 등이 사용되고 있다. 또한, 리소 포스파티딘산(lysophosphatidic acid) 또는 포스파티딘산 유도체가 양모·발모 작용을 가지는 것도 알려져 있다(특허문헌 1,2). 그 외에도, 히알루론산 합성촉진 성분을 함유한 양모·발모제가 알려져 있다(특허문헌 3).

그러나, 이들 양모·발모제의 효과는 반드시 높지는 않아, 사용자에게 만족하는 결과를 주지 못한다는 문제점이 있었으므로, 최근 기술의 진보에 따라 보다 양모·발모 효과가 우수한 양모·발모제가 요구되고 있다.

특허문헌 1: 특공소 63-41363호 공보 특허문헌 2: 국제공개 WO2001/012141 특허문헌 3: 특개 2003-81778호 공보

본 발명은 상술한 종래 기술의 문제점을 해소하고, 우수한 양모·발모 효과를 나타내는 발모제를 제공하는 것을 해결해야 할 과제로 한다.

본 발명자들은 환상 포스파티딘산 및 그의 유도체가 우수한 양모·발모 효과를 나타내는 것을 알아내고, 본 발명을 완성하기에 이르렀다.

즉, 본 발명에 따르면, 하기 일반식(1)로 나타내는 화합물을 유효성분으로 포함하는 발모제가 제공된다.

상기 식에서,

R은 탄소수 1 내지 30개의 직쇄 또는 분지상 알킬기, 탄소수 2 내지 30개의 직쇄 또는 분지상 알케닐기, 또는 탄소수 2 내지 30개의 직쇄 또는 분지상 알키닐기이고, 이들 기는 시클로알칸 고리 또는 방향족 고리를 함유하여도 무방하다. X 및 Y는 각각 독립적으로 산소원자 또는 메틸렌기를 나타내나, X와 Y가 동시에 메틸렌기가 될 수는 없다. M는 수소원자 또는 알칼리 금속원자이다.

바람직하게는, 상기 일반식(1)에 있어서 X 및 Y는 산소원자이다.　

　 바람직하게는, 상기 일반식(1)에 있어서 X 또는 Y의 어느 하나가 산소원자이고, 다른 것은 메틸렌기이다.

바람직하게는, 상기 일반식(1)으로 나타내는 화합물은 대두 레시틴(soybean lecithin) 유래의 지방산을 포함하는 아실기를 가진다.

아울러, 본 발명에 따르면, 상기 일반식(1)로 나타내는 화합물을 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 발모방법이 제공된다.

또한, 본 발명에 따르면, 발모제의 제조를 위한 상기 일반식(1)로 나타내는 화합물의 용도가 제공된다.

본 발명에 따르면, 우수한 양모·발모 효과를 나타내는 발모제가 제공된다.

도 1은 대조군 및 NcPA 투여군의 육모 스코어(hair growth score)의 변화를 나타낸다.
도 2는 대조군의 투여 25일째 발모상태를 나타낸다.
도 3은 NcPA 투여군의 투여 25일째 발모상태를 나타낸다.

이하에서는, 본 발명에 대해 보다 구체적으로 설명한다.

본 발명의 발모제는 남성형 탈모증 치료 등에 사용할 수 있으며, 환상 포스파티딘산 또는 카바환상 포스파티딘산 또는 그의 염을 유효성분으로 포함한다. 환상 포스파티딘산 또는 카바환상 포스파티딘산 또는 그의 염은 본 발명의 효과를 나타내는 것이라면 특별히 한정되는 것은 아니나, 바람직하게는 하기 일반식(1)로 나타내는 화합물을 사용할 수 있다.

상기 식에서,

상기 일반식(1)에 있어서, 치환기 R로 표시되는 탄소수 1 내지 30개의 직쇄 또는 분지상 알킬기의 구체적인 예로서는, 메틸기, 에틸기, 프로필기, 부틸기, 벤질기, 헥실기, 헵틸기, 옥틸기, 노닐기, 데실기, 운데실기, 도데실기, 트리데실기, 테트라데실기, 펜타데실기, 헥사데실기, 헵타데실기, 옥타데실기, 노나데실기, 에이코실기 등을 들 수 있다.

치환기 R로 표시되는 탄소수 2 내지 30개의 직쇄 또는 분지상 알케닐기의 구체적인 예로서는, 아릴기, 부테닐기, 옥테닐기, 데세닐기, 도데카디에닐기, 헥사데카트리에닐기 등이 있으며, 보다 구체적으로는 8-데세닐기, 8-운데세닐기, 8-도데세닐기, 8-트리데세닐기, 8-테트라데세닐기, 8-펜타데세닐기, 8-헥사데세닐기, 8-헵타데세닐기, 8-옥타데세닐기, 8-이코세닐기, 8-도코세닐기, 헵타데카-8,11-디에닐기, 헵타데카-8,11,14-트리에닐기, 노나데카-4,7,10,13-테트라에닐기, 노나데카-4,7,10,13,16-펜타에닐기, 헤니코사-3,6,9,12,15,18-헥사에닐기 등을 들 수 있다.

치환기 R로 표시되는 탄소수 2 내지 30개의 직쇄 또는 분지상 알키닐기의 구체적인 예로서는, 8-데시닐기. 8-운데시닐기, 8-도데시닐기, 8-트리데시닐기, 8-테트라데시닐기, 8-펜타데시닐기, 8-헥사데시닐기, 8-헵타데시닐기, 8-옥타데시닐기, 8-이코시닐기, 8-도코시닐기, 헵타데카-8,11-디이닐기 등을 들 수 있다.

상기 알킬기, 알케닐기 또는 알키닐기에 함유되는 시클로알칸 고리의 구체적인 예로서는, 시클로프로판환, 시클로부탄환, 시클로펜탄환, 시클로헥산환, 시클로옥탄환 등을 들 수 있다. 시클로알칸 고리는 1개 이상의 헤테로 원자를 함유하여도 좋고, 이러한 예로서는 옥시란환, 옥세탄환, 테트라히드로푸란환, N-메틸프롤리딘환 등을 들 수 있다.

상기 알킬기, 알케닐기 또는 알키닐기에 함유되는 시클로알칸 고리에 함유되는 방향족 고리의 구체적인 예로서는, 벤젠환, 나프탈렌환, 피리딘환, 푸란환, 티오펜환 등을 들 수 있다.

따라서, 치환기 R이 시클로알칸환에 의해 치환되는 알킬기인 경우의 구체적인 예로서는, 시클로프로필메틸기, 시클로헥실에틸기, 8,9-메타노펜타데실기 등을 들 수 있다.　

치환기 R이 방향족 고리에 의해 치환되는 알킬기인 경우의 구체적인 예로서는, 벤질기, 페네틸기, p-펜틸페닐옥틸기 등을 들 수 있다.　

바람직하게는, R은 탄소수 9 내지 17개의 직쇄상 또는 분지상 알킬기, 탄소수 9 내지 17개의 직쇄상 또는 분지상 알케닐기, 또는 탄소수 9 내지 17개의 직쇄상 또는 분지상 알키닐기이다. 보다 바람직하게는, R은 탄소수 9 내지 17개의 직쇄상 또는 분지상 알킬기 또는 탄소수 9, 11, 13, 15 또는 17개의 직쇄상 또는 분지상 알케닐기이다. 특히 바람직하게는, R은 탄소수 9, 11, 13, 15 또는 17개의 직쇄상 또는 분지상 알케닐기이다.

일반식(1)로 나타내는 화합물 중의 X 및 Y는 각각 독립적으로 산소원자(-O-) 또는 메틸렌기(-CH₂-)를 나타내나, X와 Y가 동시에 메틸렌기가 될 수는 없다. 즉, X 및 Y는 조합하면 이하의 3가지와 같다:

(1) X가 산소원자이고, Y가 산소원자이다.

(2) X가 산소원자이고, Y가 메틸렌기이다.

(3) X가 메틸렌기이고, Y가 산소원자이다.

일반식(1)로 나타내는 환상 포스파티딘산 유도체 중의 M는 수소원자 또는 알칼리 금속원자이다. 알칼리 금속원자로서는 리튬, 나트륨, 칼륨 등을 예로 들 수 있고, 나트륨이 특히 바람직하다.

본 발명에 이용되는 일반식(1)로 나타내는 화합물의 구체적인 예로서는, 1번 위치 알킬기로서 R이 탄소수 17개의 스테아로일기, 오레오일기, 리노레오일기, 리노레노일기, R이 탄소수 15개의 팔미토일기, 팔미토오레오일기, 또는 이들 지방산을 2종 이상 함유하고, 혼합 지방산 잔기를 가지는 환상 포스파티딘산 유도체가 바람직하다. 이중에서도, 대두 레시틴 유래의 지방산을 포함하는 아실기를 가지는 환상 포스파디딘산 유도체가 특히 바람직하다.

일반식(1)의 화합물은 그 치환기의 종류에 따라, 위치이성질체(positional isomer), 기하이성질체(geometric isomer), 호변이성질체(tautomer), 또는 광학이성질체(optical isomer)와 같은 이성질체가 존재하는 경우가 있으나, 모든 가능한 이성질체, 아울러 2종류 이상의 상기 이성질체를 임의의 비율로 포함하는 혼합물도 본 발명의 범위 내에 포함된다.

또한, 일반식(1)의 화합물은 물 또는 각종 용매와의 부가물(수화물 또는 용매화물)의 형태로 존재하는 경우도 있으나, 이들 부가물도 본 발명의 범위 내에 포함된다. 아울러, 일반식(1)의 화합물 및 그의 염의 임의의 결정형도 본 발명의 범위 내에 포함된다.

일반식(1)로 나타내는 화합물 중 X 및 Y가 산소원자인 화합물은, 예를 들면 특개평 5-230088호 공보, 특개평 7-149772호 공보, 특개평 7-258278호 공보, 특개평 9-25235호 공보에 기재된 방법 등에 준하여 화학적으로 합성할 수 있다.

또한, 일반식(1)로 나타내는 화합물 중 X 및 Y가 산소원자인 화합물은, 특개2001-178489호 공보에 기재된 방법 등에 준하여, 리조형 인지질에 포스포리파제 D를 작용시켜 합성할 수 있다. 이때 이용되는 리조형 인지질은 포스포리파제 D를 작용시키는 리조형 인지질이라면 특별히 한정되는 것은 아니다. 리조형 인지질은 다수가 알려져 있는데, 지방산종이 서로 다른 것, 에테르 또는 비닐에테르 결합을 가지는 분자종 등이 알려져 있고, 이들은 상업적으로 입수가능하다. 포스포리파제 D로서는, 양배추나 낙화생 등의 고등식물 유래의 것이나 Streptomyces chromofuscus, Actinomadula sp. 등 미생물 유래의 것이 시판 시약으로서 입수가능하나, Actinomadula sp. No. 362 유래의 효소에 의해 극히 선택적으로 환상 포스파디딘산이 합성된다(참조: 특개평 11-367032호 명세서). 리조형 인지질과 포스포리파제 D의 반응은 효소가 활성을 나타낼 수 있는 조건이라면 특별히 한정되지 않으나, 예를 들면, 염화칼슘을 함유하는 초산 완충액(pH 5~6 정도) 중에서 실온으로부터 가온하(바람직하게는 37℃ 정도)에서 1 내지 5시간 정도 반응시킨다. 생성된 환상 포스파디딘산 유도체는 표준방법에 준하여, 추출, 컬럼 크로마토그라피, 박층 크로마토그라피(TLC) 등에 의해 정제할 수 있다.

또한, 일반식(1)로 나타내는 화합물 중 X가 산소원자이고, Y가 메틸렌기인 화합물은 문헌에 기재된 방법(Kobayashi, S. 등, Tetrahedron Letters 34, 4047-4050(1993))에 준하여 합성할 수 있으며, 국제공개 WO2002/094286호 공보에 기재된 방법에 의해 합성할 수 있다. 구체적인 합성경로의 한가지 예는 다음과 같다.

상기에서, 우선 시판되는 (R)-벤질글리시딜에테르(1)을 BF₃ _·Et₂O로 활성화시키고, 메틸포스폰산디메틸에스테르에 n-BuLi를 작용시켜 수득되는 리티오체(lithiated form)를 반응시켜 알코올(2)를 수득한다.

수득된 알코올을 톨루엔 중에서 과잉의 p-톨루엔술폰산의 피리디늄염을 이용하여 80℃에서 반응시켜 환화체(cyclized form, 3)를 수득한다. 상기 환화체를 수소분위기 하에서 20% Pd(OH)₂-C를 이용하여 가수분해하고, 탈벤질화시킨다(4). 축합제로서 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드염산염을 이용하여 지방산과 반응시켜 커플링체(5)를 수득한다. 다음으로, 구핵제(nucleophile)로서 브로모트리메틸실란을 이용하여, 메틸기 만을 위치선택적으로 제거하고, 환상 포스폰산(cyclic phosphonic acid, 6)을 수득한다. 이것을 에테르를 이용하여 분액 깔대기(separatory funnel)로 이동시키고, 소량의 0.02N 수산화나트륨 수용액을 적하시켜 분액조작을 행하여, 나트륨염(7)으로서 목적 화합물을 추출, 정제한다.

또한, 일반식(1)로 나타내는 화합물 중 X가 메틸렌기이고 Y가 산소원자인 화합물은, 특개 2004-010582호 공보 또는 국제공개 WO2003/104246호 공보에 기재된 방법에 의해 합성할 수 있다.

본 발명의 발모제의 제형으로는 하기 일반식(1)로 나타내는 화합물을 배합할 수 있고 외피에 적용 가능한 제형이면 특별히 한정되는 것은 아니고, 예를 들면, 적절한 화장품 기제(cosmetic vehicle) 또는 의약 기제(pharmaceutical vehicle)와 배합하여 액상(liquid), 유액상(emulsion), 반고형상(semisolid) 또는 고형상(solid)의 발모제로서 사용할 수 있다. 더 흡수율을 높이기 위해 마이크로 캡슐이나, 리포솜에 포함해도 좋다.

또한, 본 발명의 발모제의 형태는 임의적이며, 헤어리퀴드, 헤어토닉, 헤어로션, 연고, 헤어크림, 무스, 젤, 샴푸, 린스 등을 예로 들 수 있으며, 각각 알맞은 기제에 본 발명에 이용되는 환상 포스파티딘산 유도체를 첨가하여 당업계의 통상적인 방법에 의하여 제조할 수 있다.

본 발명의 발모제 중의 환상 포스파티딘산 유도체의 함유량은 환상 포스파티딘산 유도체의 종류에 따라 다르나, 통상 0.01~5.0 중량%, 바람직하게는 0.01~3.0중량%, 보다 바람직하게는 0.1~1.0 중량%이다.

액상 제형에 알맞은 기제는 발모제에 통상 사용되고 있는 것, 예를 들면 정제수, 에탄올, 다가 알코올류를 들 수 있으며, 필요에 따라 첨가제를 첨가해도 좋다.

다가 알코올은 글리세롤, 1,3-부틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜 등을 예로 들 수 있다.

첨가제는 계면 활성제, 비타민류, 소염제, 살균제, 호르몬제, 생약 엑기스, 정기류(tincture), 청량제(refrigerant), 보습제, 각질 용해제(keratolytic), 산화 방지제, 금속이온 봉쇄제(sequestering agent), 향료 등을 예로 들 수 있다.

계면 활성제는 특히 국한되지 않고, 비이온성, 음이온성, 양이온성, 양쪽성 계면 활성제를 적절히 사용할 수 있다.

비타민류로는 니코틴산 벤질, 니코틴산 아미드, D-판토테닐 알코올, 판토테닐에틸에테르, 비오틴, 염산 피리독신, 리보플라빈 등을 예로 들 수 있다.

소염제로는 디포타슘 글리시리진산(dipotassium glycyrrhizinate), β-글리시레틴산(β-glycyrrhizinate), 알란토인, 염산 디펜히드라민, 구아이아즐렌(guaiazulene), 1-멘톨 등을 예로 들 수 있다.

살균제로는 트리클로로히드록시디페닐 에테르, 히노키티올(hinokitiol), 트리클로산(triclosan), 클로로헥시딘(chlorohexidine), 글루코산(gluconate), 페녹시에탄올, 레조르신(resorcin), 이소프로필 메틸페놀, 아즐렌(azulene), 살리실산, 징크 피리티온(zinc pyrithione), 염화 벤잘코니움(benzalkonium chloride), 감광 색소 301호, 모노니트로구아야콜 나트륨(sodium mononitroguayacol) 등을 예로 들 수 있다.

호르몬제로는 에티닐에스트라디올(ethynylestradiol), 에스트론(estrone), 에스트라디올 등을 예로 들 수 있다.

생약 엑기스로서는 쓴풀(Swertia japonica Makino) 추출물, 마늘 추출물, 당근 추출물, 알로에 추출물, 키나 엑기스(cinchona extract) 등을 예로 들 수 있다.

틴크류(tincures)로서, 고추 틴크(capsicum tincture), 생강 틴크, 칸타 리스 틴크(cantharis tincture) 등을 예로 들 수 있다.

청량제로는 고추 틴크제, 1-멘톨, 캠퍼(camphor) 등을 예로 들 수 있다.

보습제로는 L-피롤리돈 카르복실산, 히알루론산 나트륨, 콘드로이틴 황산, 동충하초 추출물, 사프란 추출물(saffron extract) 등을 예로 들 수 있다.

산화 방지제로는, 부틸히드록시아니솔, 이소프로필 갈레이트(isopropyl gallate), 프로필 갈레이트(propyl gallate), 에리소르브산(erythorbic acid) 등을 예로 들 수 있다.

금속 이온 봉쇄제로는 에틸렌디아민 테트라아세트 또는 그의 염 등을 예로 들 수 있다.

향료로는 오렌지 기름, 레몬 기름, 베르가모트 기름(bergamot oil), 라임 기름, 레몬그라스 기름(lemongrass oil), 라벤더 기름(lavender oil) 등의 천연 향료 및 멘톨, 로즈 옥사이드(rose oxide), 리날로올(linanool), 시트랄(citral), 초산 리나릴(linalyl acetate) 등의 합성향료를 예로 들 수 있다.

위의 액상 제형을 분무제로 사용할 때에는, 가연 가스(combustible gas), 불연 가스(incombustible gas) 등을 이용할 수 있다. 가연 가스로는 LPG(액화 석유 가스), 디메틸 에테르 등을 예로 들 수 있으며, 불연 가스로는 질소 가스, 탄산 가스 등을 예로 들 수 있다.

반고형상 또는 고체상 제형의 기제로는 바셀린, 고체 파라핀, 식물성 기름, 광물유(mineral oil), 라놀린(lanolin), 왁스(wax), 마크로골(macrogol) 등을 예로 들 수 있으며, 필요에 따라 상기 첨가제, 레시틴 등의 유화제, 에틸 알코올, 이소 프로필 알코올 등의 저급 알코올 등을 첨가해도 좋다.

본 발명의 발모제 투여량은 환자의 증상 및 투여방법 등에 의해 다라 다르나, 성인 1인당 한번에, 일반식(1)로 나타내는 화합물로 0.1~250mg, 바람직하게는 1mg~100mg을 1일 1회 내지 수회 경피투여한다.

이하의 실시예에 의해 본 발명을 구체적으로 설명하지만, 본 발명은 이들 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

제조예 1:

본 실시예에 사용한 native cPA(이하에서는, "NcPA"라고도 함)은 다음과 같이 조제한 것이다(특허출원 2011-126901의 실시예 1, 3 및 5를 참조).

콩 인지질(레시틴 함유량: 70%) 10g을 0.3M 염화칼슘을 함유하는 100ml의 1M 초산 완충용액(pH 6.5)에 용해시킨 다음, 6,000 단위의 스트렙토마이세스 속으로부터 유래한 포스포리파제 A2를 첨가하고, 40℃에서 18시간 혼합하여 반응시켰다. 반응액을 pH 2.5로 조정하여 효소를 불활성화시킨 다음, 100ml 클로로포름, 50ml 메탄올을 첨가하고, 충분히 교반 혼합하여 지질성분을 추출하였다. 클로로포름층을 모아 회전 증발기에서 감압 건고시켰다. 고형분에 100ml 아세톤을 가한 인지질을 침전시켜 유리 지방산을 제거하였다. 침전물 5g을 40ml 클로로포름에 용해시키고 1M 초산 완충용액(pH 5.5) 10ml를 가한 다음, 다시 1,500 단위의 액티노마듀라(Actinomadura) 속에서 유래한 포스포리파제 D를 첨가하고, 40℃에서 18시간 교반하여 반응시켰다. 반응액에 20ml의 3M 염화 나트륨, 20ml의 0.1M EDTA 용액을 첨가하고, 40℃에서 1시간 교반하였다. 이어, 20ml의 메탄올을 첨가하여 충분히 혼합한 다음, 3,000회전, 5분간 원심분리하여 클로로포름층을 모았다. 이 용액을 회전 증발기에서 감압 건고하여, 환상 포스파티딘산 나트륨 염 3.8g을 얻었다. 수율은 레시틴 함유량 70%(10g 중 7g)에서 환상 포스파티딘산 Na를 3.8g을 얻었으므로 54.3%였다. 환상 포스파티딘산 나트륨 염의 순도분석은 실리카 겔 플레이트를 이용하여, 클로로포름:메탄올:아세트산:5% 이아황산 나트륨(100:40:12:5, V/V)으로 전개한 후, 5% 아세트산 구리:8% 인산:2% 황산 혼합액에 단시간 침지시키고 풍건하여 180℃에서 약 10분 가열한 다음, 생성된 스팟을 스캐너(아토사제)로 분석하였다. 구체적으로, 표준품(97% 순도)을 대조구로 박막 크로마토그래피 스팟을 덴시토메터에 의해 측정하고 면적비로 정량하였다. 상기에서 얻어진 생성물 중 환상 포스파티딘산 나트륨 염의 순도는 54%였다.

상기 환상 포스파티딘산 나트륨 염 500mg을 5ml의 10% 메탄올을 포함하는 클로로포름에 용해시키고 실리카겔 칼럼에 걸어 동일 용매로 전개한 다음, 다시 20% 메탄올을 포함하는 클로로포름으로 전개하여 10ml의 분획으로 분취하였다. 상기 TLC법에 의해 환상 포스파티딘산 나트륨염을 함유하는 분획을 확인하고 모아, 회전 증발기에서 감압 건고시켜 환상 포스파티딘산 나트륨염의 분말 320mg을 얻었다. 본 시료의 환상 포스파티딘산 나트륨염의 순도는 95%였다.

상기에서 수득한 고순도 환상 포스파티딘산 나트륨의 지방산 조성을 가스 크로마토그램법으로 분석하였다. 시료 20mg/ml가 되도록 염산 메탄올에 용해시키고, 65℃에서 30분간 온도를 가하였다. 실온으로 냉각시키고 동량의 물, 이어 동량의 헥산을 가하여 충분히 교반 혼합하고, 3,000회전, 5분간 원심분리를 행하였다, 헥산층 2μl을 캐필러리 컬럼에 주입하고, 구성 지방산을 분석하였다. 분석결과는 다음과 같았다.

지방산 함량(%)

팔미트산 23.9

스테아린산 5.4

올레인산 8.6

리놀레산 53.4

리놀렌산 4.9

기타 지방산 3.8

시험예 1:

제조예 1에서 제조한 NcPA을 이용하여, 마우스의 발모효과 시험을 실시하였다.

(1) 투여검사 대상물질

대조구: 50% 에탄올(에탄올과 생리식염수를 동량으로 조제한 것)

피실험 물질: 생리식염수로 NcPA의 1% 수용액을 조제하고, 이 NcPA의 1% 수용액을 에탄올로 희석하여 0.5% 농도로 조제한 것을 사용하였다.

(2) 시험동물 및 사육조건

수컷 C3H/HeNCrlCrlj(이하, C3H, SPF, 일본찰스리버주식회사)(18.8g~23.6g)을 사용하여 시험하였다. 동물은 군 분류(grouping) 3일 전(47-48주령)에 마우스의 경부에서 꼬리까지 등(측 배는 제외)을 면도거품을 이용하여 면도칼로 면도하였다. 동물은 온도 23℃, 설정 습도 55%, 명암 각 12시간, 환기 횟수(12회/시)로 유지되는 동물 사육실에서 사육하였다. 사료는 고형사료(MF, 로트번호: 111206, 오리엔탈 효모공업주식회사)를 자유롭게 섭취시키고, 음료수는 수돗물을 자유롭게 섭취시켰다.

(3) 투여

투여경로는 경피투여로 하였다. 투여 검사물질(대조군 또는 피실험 물질)을 마이크로피펫을 이용하여 마우스의 등 피부에 투여하고 손가락으로 살짝 도포하였다(대조군: 10마리, 및 NcPA 투여군 10마리). 투여 액량은 100μl/부위로 하였으며, 투여 횟수는 하루 1회로 하였다. 투여 기간은 투여 시작일을 투여 1일자로 하고, 24일간 투여하였다.

(4) 판정

제모부(shaved area)의 육안관찰은 군 분류(grouping) 날(투여 1일), 투여 5, 7, 10, 13, 16, 19, 22 및 25일, 하기 표 1에 나타낸 판정기준을 토대로 점수로 채점하며, 군마다 평균치±표준편차를 산출하였다. 또한, 스코어 관찰 날에 군마다 사진 촬영을 하였다. 사진촬영 및 점수관찰은 투여 전에 행하였다.

판정

증상	스코어
피부가 핑크 빛을 띠다	1
피부가 회색으로 변색(제모부의 30% 미만)	2
피부가 회색으로 변색(제모부의 60% 미만) 또는 털의 신장이 인정되는 것(제모부의 30% 미만)	3
피부가 회색으로 변색(제모부의 60% 이상) 또는 털의 신장이 인정되는 것(제모부의 60% 미만)	4
털의 신장이 인정되는 것(제모부의 60%이상)	5

(5) 결과

발모상태의 스코어 관찰결과를 표 2 및 도 1에 나타내었다. 또한, 마우스의 사진촬영 결과를 도 2 및 도 3에 나타내었다.

표 안의 수치는 평균치±표준편차를 나타낸다.

*:P<0.1

표 2 및 도 1에 나타낸 바와 같이, 1,100μl/부위/일에 NcPA를 24일 동안 경피투여한 NcPA 투여군은 대조군과 비교할 때, 투여 19일과 25일째에 높은 값(P<0.1)이 인정되어 NcPA의 발모촉진 작용이 확인됐다.

Claims

하기 일반식(1)로 나타내는 화합물을 유효성분으로서 0.1 내지 0.5 중량%의 함유량으로 포함하는 발모제:

(1)

상기 식에서,
R은 탄소수 9 내지 17개의 직쇄 또는 분지상 알킬기, 또는 탄소수 9 내지 17개의 직쇄 또는 분지상 알케닐기이고,
X 및 Y는 각각 독립적으로 산소원자 또는 메틸렌기를 나타내나, X와 Y가 동시에 메틸렌기가 될 수는 없으며,
M는 수소원자 또는 알칼리 금속원자이다.
제1항에 있어서,
X 및 Y가 산소 원자인 것을 특징으로 하는
발모제.
제1항에 있어서,
X 또는 Y의 어느 하나가 산소 원자이고, 다른 하나는 메틸렌기인 것을 특징으로 하는
발모제.
제1항 내지 제3항의 어느 한 항에 있어서,
상기 일반식(1)로 나타내는 화합물은 대두 레시틴 유래의 지방산을 포함하는 아실기를 가지는 화합물인 것을 특징으로 하는
발모제.