CN104254317B - 生发剂 - Google Patents

Abstract

本发明的目的在于提供会显示优异的养发·生发效果的生发剂。根据本发明，提供一种以环状磷脂酸或卡巴环状磷脂酸作为有效成分的生发剂。

Description

生发剂

技术领域

本发明涉及以环状磷脂酸或卡巴环状磷脂酸(カルバ環状ホスファチジン酸)作为有效成分的生发剂。

背景技术

脱发症有先天性的，也有后天性的，对其发病原因、以及发生机理进行了大量研究。但是现状是：虽然现在市场上推出了种类繁多的养发·生发剂，但尚未明确的方面还很多。

以往，作为用于预防和治疗脱发症的多种养发生发剂中的药效成分，使用了日本獐牙菜提取物、维生素E醋酸盐等血管扩张剂；辣椒酊等刺激剂；泛酸、生物素等维生素类；以及，激素剂、抗炎剂、杀菌剂等。另外，还已知溶血磷脂酸或磷脂酸衍生物具有养发生发作用（专利文献1、2）。除此之外，还已知有含有透明质酸合成促进成分的养发生发剂（专利文献3）。

然而，存在这些养发生发剂的效果不一定高、无法对使用者一定赋予满意的结果这一问题。近年来，随着技术的进步，进一步期望养发生发效果优异的养发生发剂。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特公昭63-41363号公报

专利文献2：国际公开WO2001/012141

专利文献3：日本特开2003-81778号公报。

发明内容

发明要解决的课题

本发明要解决的课题在于，解决上述现有技术中的问题点，提供会显示优异养发·生发效果的生发剂。

用于解决问题的手段

本发明人等发现，环状磷脂酸及其衍生物会显示优异的养发·生发效果，从而完成了本发明。

即，根据本发明，提供含有下述式（1）所示的化合物作为有效成分的生发剂。

[化1]

（式中，R为碳原子数1~30的直链状或支链状烷基、碳原子数2~30的直链状或支链状烯基、或者碳原子数2~30的直链状或支链状炔基，这些基团也可以包含环烷烃环或芳香环。X和Y各自独立地表示氧原子或亚甲基，X和Y不同时为亚甲基。M为氢原子或碱金属原子）。

优选的是，式（1）中，X和Y为氧原子。

优选的是，式（1）中，X或Y中的一者为氧原子，另一者为亚甲基。

优选的是，式（1）所示的化合物为包含源自大豆卵磷脂的脂肪酸的具有酰基的化合物。

根据本发明，还提供生发方法，其包括将上述式（1）所示的化合物给药至对象者。

根据本发明，还提供用于制造生发剂的、上述式（1）所示的化合物的用途。

发明的效果

根据本发明，能够提供会显示优异养发·生发效果的生发剂。

附图说明

图1表示对照组和NcPA给药组的生发得分的变化。

图2表示对照组的给药25日的生发状态。

图3表示NcPA给药组的给药25日的生发状态。

具体实施方式

以下，针对本发明进一步具体地说明。

本发明的生发剂可用于男性型脱发症的治疗等，包含环状磷脂酸或卡巴环状磷脂酸或者它们的盐作为有效成分。作为环状磷脂酸或卡巴环状磷脂酸或其盐，只要表现出本发明的效果就没有特别限定，优选的是，可以使用下述式（I）所示的化合物。

[化2]

（式中，R为碳原子数1~30的直链状或支链状烷基、碳原子数2~30的直链状或支链状烯基、或者碳原子数2~30的直链状或支链状炔基，这些基团也可以包含环烷烃环或芳香环。X和Y各自独立地表示氧原子或亚甲基，X和Y不同时为亚甲基。M为氢原子或碱金属原子）。

式（I）中，作为取代基R表示的碳原子数1~30的直链状或支链状烷基的具体例，可列举出例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基、十六烷基、十七烷基、十八烷基、十九烷基、二十烷基等。

作为取代基R表示的碳原子数2~30的直链状或支链状烯基的具体例，可列举出例如烯丙基、丁烯基、辛烯基、癸烯基、十二碳二烯基、十六碳三烯基等，更具体而言，可列举出8-癸烯基、8-十一碳烯基、8-十二碳烯基、8-十三碳烯基、8-十四碳烯基、8-十五碳烯基、8-十六碳烯基、8-十七碳烯基、8-十八碳烯基、8-二十碳烯基、8-二十二碳烯基、十七碳-8,11-二烯基、十七碳-8,11,14-三烯基、十九碳-4,7,10,13-四烯基、十九碳-4,7,10,13,16-五烯基、二十一碳-3,6,9,12,15,18-六烯基等。

作为取代基R表示的碳原子数2~30的直链状或支链状炔基的具体例，可列举出例如8-癸炔基、8-十一炔基、8-十二炔基、8-十三炔基、8-十四炔基、8-十五炔基、8-十六炔基、8-十七炔基、8-十八炔基、8-二十炔基、8-二十二炔基、十七碳-8,11-二炔基等。

作为上述烷基、烯基或炔基中可含有的环烷烃环的具体例，可列举出例如环丙烷环、环丁烷环、环戊烷环、环己烷环、环辛烷环等。环烷烃环可以包含1个以上的杂原子，作为这样的例子，可列举出例如环氧乙烷环、氧杂环丁烷环、四氢呋喃环、N-甲基吡咯烷环（Ｎ－メチルプロリジン環）等。

作为上述烷基、烯基或炔基中可含有的芳香环的具体例，可列举出例如苯环、萘环、吡啶环、呋喃环、噻吩环等。

因此，作为取代基R为被环烷烃环取代而成的烷基时的具体例，可列举出例如环丙基甲基、环己基乙基、8,9-亚甲基十五烷基（８,９－メタノペンタデシル基）等。

作为取代基R为被芳香环取代而成的烷基时的具体例，可列举出苄基、苯乙基、对戊基苯基辛基等。

R优选为碳原子数9~17的直链状或支链状烷基、碳原子数9~17的直链状或支链状烯基、或者碳原子数9~17的直链状或支链状炔基。R进一步优选为碳原子数9、11、13、15或17的直链状或支链状烷基，或者碳原子数9、11、13、15或17的直链状或支链状烯基。R特别优选为碳原子数9、11、13、15或17的直链状或支链状烯基。

式（1）所示的化合物中的X和Y各自独立地表示氧原子（-O-）或亚甲基（-CH₂-），X和Y不同时为亚甲基。即，X和Y的组合为以下三种。

（1）X为氧原子，Y为氧原子。

（2）X为氧原子，Y为亚甲基。

（3）X为亚甲基，Y为氧原子。

式（I）所示的环状磷脂酸衍生物中的M为氢原子或碱金属原子。作为碱金属原子，可列举出例如锂、钠、钾等，特别优选为钠。

作为本发明中可使用的式（1）所示的化合物的具体例，优选的是，具有R为碳原子数17的硬脂酰基、油酰基、亚油酰基、亚麻酰基、R为碳原子数15的棕榈酰基、棕榈油酰基、或者含有两种以上这些脂肪酸的混合脂肪酸残基作为1位酰基的环状磷脂酸衍生物。其中，特别优选为包含源自大豆卵磷脂的脂肪酸的具有酰基的环状磷脂酸衍生物。

式（I）的化合物根据其取代基的种类有时存在位置异构体、几何异构体、互变异构体、或者光学异构体之类的异构体，以任意比率包含所有可能的异构体和该异构体中的两种以上的混合物均在本发明的范围内。

另外，式（I）的化合物有时也以与水或各种溶剂的加合物（水合物或溶剂合物）的形式存在，这些加合物也在本发明的范围内。进而，式（I）的化合物及其盐的任意结晶形式也在本发明的范围内。

式（1）所示的化合物之中，X和Y为氧原子的化合物例如可以按照日本特开平5-230088号公报、日本特开平7-149772号公报、日本特开平7-258278号公报、日本特开平9-25235号公报中记载的方法等进行化学合成。

另外，式（1）所示的化合物之中，X和Y为氧原子的化合物也可以按照日本特开2001-178489号公报中记载的方法使磷脂酶D作用于溶血型磷脂来合成。此处使用的溶血型磷脂只要是能够与磷脂酶D产生作用的溶血型磷脂，就没有特别限定。溶血型磷脂已知有多个种类，已知有脂肪酸种类不同的磷脂、具有醚或乙烯基醚键的分子种类等，它们可以作为市售品来获取。作为磷脂酶D，源自卷心菜或花生等高等植物的磷脂酶D、源自Streptomyceschromofuscus, Actinomadula sp.等微生物的磷脂酶D可以作为市售试剂来获取，利用源自Actinomadula sp. No.362的酶可极其选择性地合成环状磷脂酸（日本特开平11-367032号说明书）。溶血型磷脂与磷脂酶D的反应只要是在酶可表现出活性的条件下就没有特别限定，例如通过在含有氯化钙的醋酸缓冲液（pH5~6左右）中在室温~加温下（优选为37℃左右）反应1~5小时左右来进行。所生成的环状磷脂酸衍生物可以按照常规方法通过提取、柱色谱法、薄层色谱法（TLC）等进行纯化。

另外，式（1）所示的化合物之中，X为氧原子、Y为亚甲基的化合物可以按照文献记载的方法（Kobayashi，S.及其他，Tetrahedron Letters 34，4047-4050（1993））来合成，另外，可以利用国际公开WO2002/094286号公报记载的方法来合成。具体的合成路径的一例如下所示。

[化3]

如上所述，首先，用BF₃·Et₂O使市售的（R）-苄基缩水甘油醚（1）活化，使其与甲基膦酸二甲酯作用于n-BuLi而得到的锂体进行反应，从而得到醇（2）。

将所得醇在甲苯中使用过量的对甲苯磺酸的吡啶盐以80℃进行反应，从而得到环化体（3）。将该环化体在氢气气氛下使用20% Pd（OH）₂-C进行加氢分解，进行脱苄基化（4）。作为缩合剂，使用1-乙基-3-（3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐，与脂肪酸反应，从而得到偶联体（5）。接着，作为求核剂使用溴代三甲基硅烷，区域选择性地仅去除甲基，从而得到环状膦酸（6）。将其使用醚转移至分液漏斗中，滴加少量的0.02N的氢氧化钠水溶液，进行分液操作，作为钠盐（7）提取、纯化目标化合物。

另外，通式（1）所示的化合物之中，X为亚甲基、Y为氧原子的化合物可以通过日本特开2004-010582号公报或国际公开WO03/104246号公报记载的方法来合成。

作为本发明的生发剂的剂型，只要是可配混下述式（1）所示的化合物的且可适用于外皮的剂型，就没有特别限定，例如可以配混适当的化妆品基剂或药物基剂而制成液体状、乳液状、半固体状或固体状的生发剂来使用。进而为了提高吸收，也可以包括在微囊、脂质体中。

另外，本发明的生发剂的形态是任意的，可列举出发露（ヘヤーリキッド）、焗油膏（hair tonic）、润发露（hair lotion）、软膏、护发素（hair cream）、摩丝、啫喱、洗发水、染发剂（rinse）等，可以向各种适合的基剂中添加本发明可使用的环状磷脂酸衍生物并利用常规方法来制造。

本发明的生发剂中的环状磷脂酸衍生物的含量因环状磷脂酸衍生物的种类而异，通常为0.01~5.0重量%、优选为0.01~3.0重量%、更优选为0.1~1.0重量%。

作为适合于液体状剂型的基剂，可列举出生发剂中通常使用的基剂，例如纯化水、乙醇、多元醇类，根据需要可以添加添加剂。

作为多元醇，可列举出甘油、1,3-丁二醇、丙二醇等。

作为添加剂，可列举出表面活性剂、维生素类、消炎剂、杀菌剂、激素剂、生药提取物、酊剂类、清凉剂、保湿剂、角质溶解剂、抗氧化剂、金属离子掩蔽剂(金属イオン封鎖剤)、香料等。

作为表面活性剂，没有特别限定，可适当使用非离子性、阴离子性、阳离子性、两性表面活性剂。

作为维生素类，可列举出烟酸苄酯、烟酰胺、D-泛醇、泛醇乙醚、生物素、盐酸吡哆醇、核黄素等。

作为消炎剂，可列举出甘草酸二钾、β-甘草次酸、尿囊素、盐酸二苯海拉明、愈创蓝油烃(グアイアズレン)、1-薄荷醇等。

作为杀菌剂，可列举出三氯羟基二苯基醚、日柏醇、三氯生、葡萄糖酸氯己定盐、苯氧基乙醇、间苯二酚、异丙基甲基苯酚、薁(アズレン)、水杨酸、吡啶硫酮锌、苯扎氯铵、光敏剂301号、单硝基愈疮木酚钠(モノニトログアヤコールナトリウム)等。

作为激素剂，可列举出乙炔雌二醇、雌酮、雌二醇等。

作为生药提取物，可列举出日本獐牙菜提取物、大蒜提取物、人参提取物、芦荟提取物、金鸡纳树提取物等。

作为酊类，可列举出辣椒酊、生姜酊、斑蝥酊(カンタリスチンキ)等。

作为清凉剂，可列举出辣椒酊、1-薄荷醇、樟脑(カンフル)等。

作为保湿剂，可列举出L-吡咯烷酮羧酸、透明质酸钠、硫酸软骨素、冬虫夏草提取物、藏红花提取物等。

作为抗氧化剂，可列举出丁基羟基茴香醚、没食子酸异丙酯、没食子酸丙酯、异抗坏血酸等。

作为金属离子掩蔽剂，可列举出乙二胺四醋酸酯或其盐等。

作为香料，可列举出橙油、柠檬油、香柠檬油、酸橙油(ライム油)、柠檬草油、薰衣草油等天然香料和薄荷醇、玫瑰氧化物、芳樟醇(リナロール)、柠檬醛、乙酸芳樟酯等合成香料。

将上述液体状剂型用作喷雾剂时，可以使用可燃气体、不燃气体等。作为可燃气体，可列举出LPG（液化石油气体）、二甲醚等，作为不燃气体，可列举出氮气、二氧化碳等。

作为半固体状或固体状剂型的基剂，可列举出凡士林、固体石蜡、植物油、矿物油、羊毛脂(ラノリン)、蜡类、聚乙二醇等，根据需要可添加前述添加剂、卵磷脂等乳化剂；乙醇、异丙醇等低级醇等。

本发明的生发剂的给药量根据对象者的症状、给药方法等而异，成人一人一次以式（1）所示的化合物计经皮给药0.1~250mg、优选给药1mg~100mg，一日一次~数次。

通过以下的实施例来具体说明本发明，本发明不限定于实施例。

实施例

制造例1：

本实施例中使用的native cPA（以下也称为NcPA）如下那样地制备（参照日本特愿2011-126901的实施例1、3和5）。

将大豆磷脂（卵磷脂含量：70%）10g用含有0.3M氯化钙的100ml的1M醋酸缓冲液（pH6.5）溶解后，添加6000单位的源自链霉菌属的磷脂酶A2，以40℃搅拌18小时，使其反应。将反应液的pH调整至2.5而使酶失活后，添加100ml的氯仿、50ml的甲醇，充分地搅拌混合，提取出脂质成分。收集氯仿层，用旋转蒸发器进行减压干固。在固体成分中添加100ml的丙酮，使磷脂沉淀，从而去除游离脂肪酸。使沉淀物5g溶解在40ml的氯仿中，添加1M醋酸缓冲液（pH5.5）10ml，进而添加1500单位的源自马杜拉放线菌属(アクチノマジュラ属)的磷脂酶D，边以40℃搅拌18小时边进行反应。向反应液中添加20ml的3M氯化钠、20ml的0.1M EDTA溶液，以40℃进行1小时的搅拌。进而添加20ml的甲醇进行充分搅拌后，以3000转离心分离5分钟来收集氯仿层。将该溶液用旋转蒸发器进行减压干固，得到环状磷脂酸钠盐3.8g。关于收率，从卵磷脂含量70%（10g中7g）获得3.8g环状磷脂酸Na，因此为54.3%。环状磷脂酸钠盐的纯度分析使用硅胶板，用氯仿:甲醇:醋酸:5%二亚硫酸钠（100:40:12:5、V/V）展开后，短时间浸渍在5%醋酸铜:8%磷酸:2%硫酸混合液中进行风干后，以180℃加热约10分钟后，利用扫描器（アトー公司制）法对所生成的斑点进行分析。即。将标准品（97%纯度品）作为对照，利用光密度计(デンシトメーター)测定薄层色谱图的斑点，用面积比进行定量。通过上述工序而得到的产物中的环状磷脂酸钠盐的纯度为54%。

使上述环状磷脂酸钠盐500mg溶解于包含5ml的10%甲醇的氯仿中，施加于硅胶柱，用相同溶剂展开，进而用包含20%甲醇的氯仿展开，分取出10ml的级分。利用上述的TLC法确认并收集含有环状磷脂酸钠盐的级分，用旋转蒸发器进行减压干固，从而得到环状磷脂酸钠盐的粉末320mg。本试样的环状磷脂酸钠盐的纯度为95%。

利用气相色谱法来分析上述得到的高纯度环状磷脂酸钠的脂肪酸组成。以试样达到20mg/ml的方式溶解于盐酸甲醇，以65℃加热30分钟。恢复至室温后，添加等量的水、接着添加等量的己烷，充分地进行搅拌混合。以3000转进行5分钟的离心分离，将己烷层2μl注入毛细柱中，对构成脂肪酸进行分析。分析为以下。

脂肪酸 含量（%）

棕榈酸 23.9

硬脂酸 5.4

油酸 8.6

亚油酸 53.4

亚麻酸 4.9

其它脂肪酸 3.8。

试验例1：

使用制造例1中制造的NcPA，实施小鼠的生发效果试验。

（1）给药检体

对照：50%乙醇（由等量的乙醇与生理盐水配制而成）

被检物质：利用生理盐水配制NcPA的1%水溶液，将该NcPA的1%水溶液用乙醇进行稀释，制备成0.5%浓度后使用。

（2）试验动物和饲育条件

试验中使用了雄性C3H/HeNCrlCrlj（以下，C3H、SPF，日本チャールス・リバー株式会社）（18.8g~23.6g）。对于动物，在分组3日前（47-48周龄），使用泡沫剃须膏用刮刀对小鼠的颈部~尾部的背部（不含侧腹）进行剃毛。动物在维持为设定温度23℃、设定湿度55%、明暗各12小时、换气次数（12次/小时）的动物饲育室中饲育。关于饲料，使其自由地摄取固体饲料（MF、批号：111206、オリエンタル酵母工业株式会社），关于饮水，使其自由地摄取自来水。

（3）给药

给药途径为经皮给药。使用微管将给药检体（对照或被检物质）给药至小鼠的背部皮肤，用手指轻轻涂抹（对照组：10只；以及，NcPA给药组10只）。给药液量为100μl/部位。给药次数为1日1次。关于给药时间，将给药开始日作为给药1日，给药24天。

（4）判定

关于剃毛部的肉眼观察，在分组日（给药1日）、给药5、7、10、13、16、19、22和25日，以下表1所示的判定基准为基础用得分进行打分，每组算出平均值±标准偏差。另外，得分观察日对各组进行照片拍摄。照片拍摄和得分观察在给药前进行。

[表1]

表1：判定基准

症状	得分
		皮肤呈现粉色	1
皮肤变色为灰色（不足剃毛部的30%）	2
		皮肤变色为灰色（不足剃毛部的60%）或者观察到毛伸长（不足剃毛部的30%）	3
皮肤变色为灰色（剃毛部的60%以上）或者观察到毛伸长（不足剃毛部的60%）	4
		观察到毛伸长（剃毛部的60%以上）	5

（5）结果

将生发状态的得分观察结果示于表2和图1。另外，将小鼠的照片拍摄的结果示于图2和图3。

[表2]

表2：相对于NcPA的生发得分的效果

表中的数值表示平均值±标准偏差。

﹡：P＜0.1。

如表2和图1所示那样，与对照组比较，将1100μl/部位/日的NcPA经皮给药24天的NcPA给药组在给药19日和25日观察到高值倾向（P<0.1），可确认到NcPA的生发促进作用。

Claims (2)

1.下述式（1）所示的化合物在制造生发剂中的用途，生发剂含有0.1~0.5重量%的式（1）所示的化合物作为有效成分，

式（1）中，R为碳原子数1~30的直链状或支链状烷基或碳原子数2~30的直链状或支链状烯基，X和Y各自独立地表示氧原子；M为氢原子或碱金属原子。

2.根据权利要求1所述的用途，其中，式（1）所示的化合物为包含源自大豆卵磷脂的脂肪酸的具有酰基的化合物。