JP6173440B2 - 新規美白剤 - Google Patents
新規美白剤 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6173440B2 JP6173440B2 JP2015513390A JP2015513390A JP6173440B2 JP 6173440 B2 JP6173440 B2 JP 6173440B2 JP 2015513390 A JP2015513390 A JP 2015513390A JP 2015513390 A JP2015513390 A JP 2015513390A JP 6173440 B2 JP6173440 B2 JP 6173440B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- formula
- salt
- compound represented
- skin
- compound
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 title claims description 36
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 112
- LIPRKYKMVQPYPG-UHFFFAOYSA-N 3-Hydroxy-2H-pyran-2-one Chemical compound OC1=CC=COC1=O LIPRKYKMVQPYPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 86
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 50
- 230000008099 melanin synthesis Effects 0.000 claims description 24
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 20
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 14
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 claims description 14
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 13
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 claims description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 11
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 7
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 7
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 40
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 38
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 34
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 30
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 30
- 238000000034 method Methods 0.000 description 29
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 28
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 27
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 23
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 23
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 22
- -1 pyrone compound Chemical class 0.000 description 22
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 21
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 20
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 20
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 19
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 17
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 17
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical class CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 16
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 16
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 15
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 12
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 12
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 12
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 11
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 11
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 10
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 10
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 10
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 9
- AFQIYTIJXGTIEY-UHFFFAOYSA-N hydrogen carbonate;triethylazanium Chemical compound OC(O)=O.CCN(CC)CC AFQIYTIJXGTIEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 9
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 7
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 6
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000012641 Pigmentation disease Diseases 0.000 description 6
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 6
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 6
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 150000000996 L-ascorbic acids Chemical class 0.000 description 5
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 5
- 230000003061 melanogenesis Effects 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VDLYUARSZNREJS-UHFFFAOYSA-N OP(O)(O)=O.Oc1cccoc1=O Chemical compound OP(O)(O)=O.Oc1cccoc1=O VDLYUARSZNREJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 4
- 239000007854 depigmenting agent Substances 0.000 description 4
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- BJRNKVDFDLYUGJ-RMPHRYRLSA-N hydroquinone O-beta-D-glucopyranoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=C(O)C=C1 BJRNKVDFDLYUGJ-RMPHRYRLSA-N 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- BEJNERDRQOWKJM-UHFFFAOYSA-N kojic acid Chemical compound OCC1=CC(=O)C(O)=CO1 BEJNERDRQOWKJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960004705 kojic acid Drugs 0.000 description 4
- WZNJWVWKTVETCG-UHFFFAOYSA-N kojic acid Natural products OC(=O)C(N)CN1C=CC(=O)C(O)=C1 WZNJWVWKTVETCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- RLOWWWKZYUNIDI-UHFFFAOYSA-N phosphinic chloride Chemical compound ClP=O RLOWWWKZYUNIDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000219051 Fagopyrum Species 0.000 description 3
- 235000009419 Fagopyrum esculentum Nutrition 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 3
- 125000000687 hydroquinonyl group Chemical class C1(O)=C(C=C(O)C=C1)* 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000000968 medical method and process Methods 0.000 description 3
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 3
- WVLBCYQITXONBZ-UHFFFAOYSA-N trimethyl phosphate Chemical compound COP(=O)(OC)OC WVLBCYQITXONBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZPSJGADGUYYRKE-UHFFFAOYSA-N 2H-pyran-2-one Chemical class O=C1C=CC=CO1 ZPSJGADGUYYRKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 229960000271 arbutin Drugs 0.000 description 2
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000002892 organic cations Chemical class 0.000 description 2
- BJRNKVDFDLYUGJ-UHFFFAOYSA-N p-hydroxyphenyl beta-D-alloside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=C(O)C=C1 BJRNKVDFDLYUGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 2
- XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N phosphoryl trichloride Chemical compound ClP(Cl)(Cl)=O XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L sodium carbonate Substances [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GJFNRSDCSTVPCJ-UHFFFAOYSA-N 1,8-bis(dimethylamino)naphthalene Chemical compound C1=CC(N(C)C)=C2C(N(C)C)=CC=CC2=C1 GJFNRSDCSTVPCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UUUICOMMFFTCHS-UHFFFAOYSA-N 5-hydroxy-4-oxopyran-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(=O)C(O)=CO1 UUUICOMMFFTCHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 208000001382 Experimental Melanoma Diseases 0.000 description 1
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N Formic acid Chemical compound OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N L-DOPA Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N L-Dopa Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 239000004909 Moisturizer Substances 0.000 description 1
- RCVWRTRDZMDLQU-UHFFFAOYSA-N NOC1=CC=COC1=O Chemical compound NOC1=CC=COC1=O RCVWRTRDZMDLQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NPYPAHLBTDXSSS-UHFFFAOYSA-N Potassium ion Chemical compound [K+] NPYPAHLBTDXSSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FKNQFGJONOIPTF-UHFFFAOYSA-N Sodium cation Chemical compound [Na+] FKNQFGJONOIPTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 206010042496 Sunburn Diseases 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 238000011481 absorbance measurement Methods 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 239000006096 absorbing agent Substances 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 230000001668 ameliorated effect Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003466 anti-cipated effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000007844 bleaching agent Substances 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940023913 cation exchange resins Drugs 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 239000003241 dermatological agent Substances 0.000 description 1
- 229940000033 dermatological agent Drugs 0.000 description 1
- UNXNGGMLCSMSLH-UHFFFAOYSA-N dihydrogen phosphate;triethylazanium Chemical compound OP(O)(O)=O.CCN(CC)CC UNXNGGMLCSMSLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000004210 ether based solvent Substances 0.000 description 1
- 125000005313 fatty acid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000004503 fine granule Substances 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229930182478 glucoside Natural products 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 210000002752 melanocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001333 moisturizer Effects 0.000 description 1
- WZKJANWNNBJHRS-UBEDBUPSSA-N n-[9-[(2r,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-6-oxo-3h-purin-2-yl]benzamide Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(NC(NC(=O)C=2C=CC=CC=2)=NC2=O)=C2N=C1 WZKJANWNNBJHRS-UBEDBUPSSA-N 0.000 description 1
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 230000037311 normal skin Effects 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006864 oxidative decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 210000004694 pigment cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229910001414 potassium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 238000002731 protein assay Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 239000012925 reference material Substances 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000037380 skin damage Effects 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N tetramethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)C CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/55—Phosphorus compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/16—Emollients or protectives, e.g. against radiation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/02—Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
- C07F9/655—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms
- C07F9/6552—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms the oxygen atom being part of a six-membered ring
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Birds (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
本発明は、3-ヒドロキシ-2-ピロン誘導体である新規化合物、並びに該化合物を有効成分として含有する美白剤及びメラニン生成阻害剤に関する。
シミのような皮膚における色素沈着は、一般に、紫外線による刺激等によりメラノサイトが活性化され、メラニン色素の生合成が亢進されることによって発生すると考えられている。このため、皮膚美白剤の有効成分として、メラニン色素の生合成阻害活性（以下、「メラニン生成阻害活性」とも記載する）を有する多くの化合物が開発されている。
アスコルビン酸は、チロシナーゼ活性阻害作用等を介して細胞のメラニン生成を阻害する。このメラニン生成阻害活性により、アスコルビン酸は、美白作用を発現し得ることが広く知られている。しかしながら、アスコルビン酸は、水溶液中で分解し、褐色等に着色する。このため、水溶液中でより安定な、アスコルビン酸の誘導体が多く開発されている。
前記のようなアスコルビン酸の誘導体としては、例えば、アスコルビン酸の2位、3位、5位又は6位の水酸基に、リン酸基又はステアリン酸のような脂肪酸基をエステル結合させたエステル化誘導体、或いはグルコースのような糖をグリコシド結合させた誘導体を挙げることができる。例えば、特許文献1は、リン酸化アスコルビン酸又はその塩を含有させることを特徴とする化粧品の製造法を記載する。これらの誘導体は、生体内に吸収された後、酵素によって加水分解されて、アスコルビン酸を生成すると考えられる。このため、前記誘導体は、生体内で美白作用を発現することが期待される。
皮膚美白剤の有効成分として使用し得るその他の化合物としては、ハイドロキノン誘導体、コウジ酸及びその誘導体、並びにピロン化合物及びその誘導体等が知られている（特許文献2及び3）。例えば、特許文献2は、ピロン化合物を含有せしめたことを特徴とする色白化粧料を記載する。当該文献は、ピロン化合物として、コウジ酸及びコメニン酸を記載する。
ピロン化合物の一種である3-ヒドロキシ-2-ピロン（以下、「3H2P」とも記載する）は、アスコルビン酸の酸化分解物である。特許文献4は、アスコルビン酸を出発原料として、酸化反応によって3H2Pを合成する方法を記載する。近年、3H2Pの生物活性及び化学的特徴が明らかにされ、当該化合物の様々な用途が開発されている。例えば、特許文献4は、3H2Pが両親媒性抗酸化物質であること、並びに、血小板凝集抑制作用及び肝障害改善作用に優れ、医薬用組成物及び機能性飲食品として利用可能であることを記載する。特許文献5は、3H2Pを含有することを特徴とする香料組成物を記載する。
本発明者らは、3H2Pが高いチロシナーゼ活性阻害作用及びメラニン生成阻害作用を有しており、美白成分として有用であることを見出した（特許文献6）。当該文献は、3H2Pを含有する美白剤、チロシナーゼ活性阻害剤及びメラニン生成阻害剤を記載する。
前記のような皮膚美白剤の有効成分として使用し得る公知の化合物には、いくつかの問題が存在した。例えば、アスコルビン酸の誘導体は、各種溶媒に対する溶解性が低く、且つ生体内で分解されなければ所望の美白作用を発現することができない。また、ハイドロキノン誘導体、並びにコウジ酸及びその誘導体は、各種溶媒に対する溶解性が低いだけでなく、美白作用が十分な水準ではない。
本発明者らが開発した皮膚美白剤の有効成分である3H2Pは、各種溶媒に対する溶解性が高く、美白作用も高い。しかしながら、3H2Pは、水溶液中での安定性が低いという問題が存在した。
それ故、本発明は、水に対する溶解性及び美白作用を維持しつつ、水溶液中での安定性を向上させた3H2Pの新規誘導体を提供することを目的とする。
本発明者らは、前記課題を解決するための手段を種々検討した結果、3H2Pの3-位ヒドロキシル基にリン酸基をエステル結合させることにより、水溶液中での安定性を向上できることを見いだし、本発明を完成した。
すなわち、本発明の要旨は以下の通りである。
（1） 式（I）：
R1は、ヒドロキシル又は以下の基：
である。］
で表される化合物又はその塩。
（2） 前記（1）に記載の化合物又はその塩を有効成分として含有する美白剤。
（3） 前記（1）に記載の化合物又はその塩を有効成分として含有するメラニン生成阻害剤。
（4） 前記（1）に記載の化合物又はその塩、及び皮膚への適用が許容される成分を含有する、皮膚外用剤組成物。
（5） 3-ヒドロキシ-2-ピロンをリン酸化して、式（I）で表される化合物又はその塩を形成させる、リン酸化工程を含む、前記（1）に記載の化合物又はその塩の製造方法。
本発明により、水に対する溶解性及び美白作用を維持しつつ、水溶液中での安定性を向上させた3H2Pの新規誘導体を提供することが可能となる。
＜1. 新規化合物＞
本発明は、式（I）：
本発明は、式（I）：
本発明者らは、3-ヒドロキシ-2-ピロン（3H2P）の誘導体群から、水溶液中での安定性が高い該化合物の誘導体を探索した。その結果、水に対する高い溶解性及び高い美白作用だけでなく、水溶液中での高い安定性を有する3H2Pの誘導体として、式（I）で表される新規化合物を見出した。
式（I）で表される化合物において、R1は、ヒドロキシル又は以下の基：
であることが必要である。本明細書において、後者の基を、2-ピロン-3-イルオキシと記載する場合がある。
式（I）で表される化合物において、R1がヒドロキシルの場合、該化合物は、以下の式（I-i）：
式（I）で表される化合物において、R1が2-ピロン-3-イルオキシの場合、該化合物は、以下の式（I-ii）：
本明細書において、式（I-i）及び（I-ii）で表される化合物を、それぞれ3H2Pリン酸モノエステル及び3H2Pリン酸ビスエステルと記載する場合がある。前記の構造を有することにより、本発明の式（I）で表される化合物は、水溶液中において、3H2Pと比較してより安定に存在することができる。
本発明の式（I）で表される化合物は、該化合物自体だけでなく、その塩も包含する。本発明の化合物の塩の対イオンとしては、限定するものではないが、例えば、1価、2価若しくは3価の金属カチオン又は有機カチオンが好ましく、ナトリウムイオン、カリウムイオン、カルシウムイオン若しくはマグネシウムイオンのような金属カチオン、又はトリアルキルアミンイオン（トリアルキルアンモニウムイオン）（例えばトリエチルアミンイオン（トリエチルアンモニウムイオン））、ピリジニウムイオン、ピロリジウムイオン、ホスホニウムイオン若しくはスルホニウムイオンのような有機カチオンが好ましい。本発明の化合物が前記の対イオンとの塩の形態である場合、水溶液中での安定性及び水に対する溶解性だけでなく、メラニン生成阻害活性のような皮膚美白作用を実質的に低下させることなく該化合物を使用することができる。
本発明の式（I）で表される化合物は、該化合物自体だけでなく、その溶媒和物も包含する。本発明の化合物と溶媒和物を形成し得る溶媒としては、限定するものではないが、例えば、水、又はメタノール、エタノール、2-プロパノール（イソプロピルアルコール）若しくはジメチルスルホキシド（DMSO）のような有機溶媒が好ましく、水がより好ましい。本発明の化合物が前記の溶媒との溶媒和物（例えば、水和物）の形態である場合、水溶液中での安定性及び水に対する溶解性だけでなく、メラニン生成阻害活性のような皮膚美白作用を実質的に低下させることなく該化合物を使用することができる。
前記特徴を有することにより、式（I）で表される化合物は、高い皮膚美白作用を発現することができる。
＜2. 新規化合物の製造方法＞
本発明はまた、式（I）で表される化合物又はその塩の製造方法に関する。以下、本発明の方法の好ましい実施形態について詳細に説明する。
本発明はまた、式（I）で表される化合物又はその塩の製造方法に関する。以下、本発明の方法の好ましい実施形態について詳細に説明する。
［2-1. リン酸化工程］
本発明の方法は、3-ヒドロキシ-2-ピロン（3H2P）をリン酸化して、式（I）で表される化合物又はその塩を形成させる、リン酸化工程を含むことが必要である。
本発明の方法は、3-ヒドロキシ-2-ピロン（3H2P）をリン酸化して、式（I）で表される化合物又はその塩を形成させる、リン酸化工程を含むことが必要である。
本工程において、出発原料として使用される3H2Pは、例えば特許文献4〜6に記載のような公知の方法を実施することによって自ら調製してもよく、予め調製されたものを購入等して準備してもよい。いずれの実施形態も本発明の方法に包含される。
本工程において、3H2Pのリン酸化は、当該技術分野でアルコール化合物のリン酸化に通常使用される反応剤又は反応試薬を用いることにより、実施することができる。前記反応剤としては、例えば、塩化ホスホリル（POCl3）を挙げることができる。POCl3を反応剤として用いる場合、反応に伴って生成するHClを中和するために、N,N,N’,N’-テトラメチル-1,8-ナフタレンジアミン（プロトンスポンジ（登録商標））のようなプロトン捕捉剤存在下で本工程を実施することが好ましい。前記の反応剤を用いて本工程を実施することにより、3H2Pを効率的にリン酸化して式（I）で表される化合物を得ることができる。
本工程において、3H2P及び反応剤を、適切な溶媒中で反応させることが好ましい。この場合、3H2P、反応剤及び溶媒を含む反応系中で本工程が進行する。前記溶媒としては、例えば、リン酸トリメチル、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン（THF）若しくは1,4-ジオキサンのようなエーテル系溶媒、及びトルエンを挙げることができる。前記の溶媒中で本工程を実施することにより、式（I）で表される化合物の収量を向上させることができる。
本工程において、3H2Pのリン酸化は、-20〜40℃の範囲の反応温度で実施することが好ましく、室温（例えば20〜30℃）の反応温度で実施することがより好ましい。また、3H2Pのリン酸化は、10分〜24時間の範囲の反応時間で実施することが好ましく、約2時間（例えば1〜3時間）の反応時間で実施することがより好ましい。前記の条件で本工程を実施することにより、式（I）で表される化合物の収量を向上させることができる。
本工程により、式（I-i）で表される化合物（3H2Pリン酸モノエステル）及び／又は式（I-ii）で表される化合物（3H2Pリン酸ビスエステル）が形成される。3H2Pリン酸モノエステル又は3H2Pリン酸ビスエステルは、1分子にそれぞれ2又は1個の解離基を有する。このため、式（I）で表される化合物は、自らの解離基に由来する酸によって加水分解され得る。それ故、本工程は、3H2P及び反応剤に加えて、適切な塩基存在下で実施することが好ましい。塩基存在下で本工程を実施する場合、式（I）で表される化合物と該塩基との塩が形成される。前記塩基としては、有機塩基及び無機塩基、例えば、重炭酸トリエチルアンモニウム（TEAB）、炭酸水素ナトリウム及び炭酸ナトリウムを挙げることができる。前記塩基は、本工程におけるリン酸化反応の開始時に、3H2P、反応剤及び場合により溶媒を含む反応系中に加えてもよく、リン酸化反応が完全に又は部分的に進行した後で、該反応系に加えてもよい。前記塩基存在下で本工程を実施することにより、酸加水分解による式（I）で表される化合物の収量の低下を実質的に抑制することができる。
［2-2. 精製工程］
本発明の方法は、場合により、リン酸化工程で得られた式（I）で表される化合物又はその塩を精製する、精製工程を含むことができる。前記リン酸化工程により、式（I-i）で表される化合物及び／又は式（I-ii）で表される化合物が形成される。本工程は、リン酸化工程で得られた反応混合物から、式（I）で表される化合物又はその塩として、式（I-i）で表される化合物及び式（I-ii）で表される化合物並びにそれらの塩の少なくともいずれかを精製することを目的とする。
本発明の方法は、場合により、リン酸化工程で得られた式（I）で表される化合物又はその塩を精製する、精製工程を含むことができる。前記リン酸化工程により、式（I-i）で表される化合物及び／又は式（I-ii）で表される化合物が形成される。本工程は、リン酸化工程で得られた反応混合物から、式（I）で表される化合物又はその塩として、式（I-i）で表される化合物及び式（I-ii）で表される化合物並びにそれらの塩の少なくともいずれかを精製することを目的とする。
本工程において、式（I）で表される化合物又はその塩を精製する手段は特に限定されない。吸着、イオン交換、ゲル濾過若しくは逆相のような各種クロマトグラフィー若しくは高速液体クロマトグラフィー（HPLC）、溶媒分画、又は再結晶のような当該技術分野で通常使用される各種の分離精製手段を適用することができる。前記の分離精製手段を適用することにより、式（I）で表される化合物又はその塩として、式（I-i）で表される化合物及び式（I-ii）で表される化合物並びにそれらの塩の少なくともいずれかを精製することができる。
前記リン酸化工程において、塩基を用いた場合、式（I）で表される化合物と該塩基との塩が形成される。この場合、式（I）で表される化合物の塩を適切な陽イオン交換手段で処理することにより、遊離酸の形態にイオン交換することができる。前記陽イオン交換手段は、当該技術分野で通常使用される強酸性陽イオン交換樹脂であれば特に限定されない。前記陽イオン交換手段としては、例えば、スルホン酸型の強酸性陽イオン交換樹脂（例えばDowex（登録商標） 88）を挙げることができる。前記陽イオン交換手段を用いることにより、遊離酸の形態の式（I）で表される化合物を得ることができる。
＜3. 新規化合物の用途＞
本発明はまた、式（I）で表される化合物又はその塩を有効成分として含有する美白剤又はメラニン生成阻害剤に関する。
本発明はまた、式（I）で表される化合物又はその塩を有効成分として含有する美白剤又はメラニン生成阻害剤に関する。
本発明の式（I）で表される化合物は、メラニン生成を阻害し、且つ／又はチロシナーゼ活性を阻害することができる。前記特徴を有することにより、式（I）で表される化合物は、高い皮膚美白作用を発現することができる。
本発明の美白剤又はメラニン生成阻害剤において、有効成分として含有される式（I）で表される化合物は、該化合物の塩又は溶媒和物の形態であってもよい。式（I）で表される化合物の塩としては、前記で説明した塩のような、生理学的に許容される塩（例えば、医薬品、化粧品又は飲食品等として許容される塩）であることが好ましい。式（I）で表される化合物の溶媒和物としては、前記で説明した溶媒和物のような、生理学的に許容される溶媒和物（例えば、医薬品、化粧品又は飲食品等として許容される溶媒和物）であることが好ましい。式（I）で表される化合物が前記の塩又は溶媒和物の形態である場合、水溶液中での高い安定性及び水に対する高い溶解性を維持しつつ、高い皮膚美白作用を発現することができる。
本発明の式（I）で表される化合物は、皮膚美白作用、メラニン生成阻害作用又はチロシナーゼ活性阻害作用を提供する有効成分として、皮膚への適用が許容される成分（美白作用を有するさらなる成分、その他の作用を有する有効成分又は製剤化のための成分等）とともに、化粧品、医薬部外品又は医薬品のような皮膚外用剤に配合して用いることができる。それ故、本発明はまた、式（I）で表される化合物又はその塩、及び皮膚への適用が許容される成分を含有する、皮膚外用剤組成物に関する。皮膚外用剤組成物中での式（I）で表される化合物の含有量は、皮膚美白作用、メラニン生成阻害作用、及び／又はチロシナーゼ活性阻害作用を提供することができる有効量であれば特に限定されない。例えば、下記使用例III-3での結果と、通常の皮膚外用剤に配合できる有効成分の量とを鑑みて、皮膚外用剤組成物の総重量に対して、0.0001〜5重量％の範囲の含有量であることが好ましい。式（I）で表される化合物を前記含有量で配合することにより、本発明の皮膚外用剤組成物は、所望の皮膚美白作用、メラニン生成阻害作用、及び／又はチロシナーゼ活性阻害作用を発現することができる。
本発明の皮膚外用剤組成物に配合することができる美白作用を有するさらなる成分としては、アスコルビン酸、アスコルビン酸誘導体（アスコルビン酸リン酸エステル塩、アスコルビン酸硫酸エステル塩、アスコルビン酸グルコシド及びアスコルビン酸エチル等）、γ-ピロン配糖体、γ-ピロン類であるコウジ酸及びその誘導体、並びにアルブチン等のハイドロキノン誘導体等を挙げることができる。
本発明の皮膚外用剤組成物に配合することができる製剤化のための成分としては、化粧品、医薬部外品又は医薬品等の製剤化のために通常使用される成分、例えば、精製水、アルコール類、油性物質、保湿剤、増粘剤、防腐剤、乳化剤、生薬成分、紫外線吸収剤、色素、香料、乳化安定剤、及びpH調整剤等を挙げることができる。
本発明の皮膚外用剤組成物の剤形は特に限定されない。当該技術分野で通常使用される、クリーム状、軟膏状、乳液状、ローション状、溶液状、ゲル状、パック状又はスティック状のような任意の剤形を適宜選択することができる。
前記の特徴を備えることにより、本発明の皮膚外用剤組成物は、所望の皮膚美白作用、メラニン生成阻害作用、及び／又はチロシナーゼ活性阻害作用を発現することができる。
美白化を望むヒト等の対象に、本発明の式（I）で表される化合物又は皮膚外用剤組成物を投与することにより、皮膚を美白化する（例えば、シミ若しくはソバカス等の、色素沈着に伴う皮膚の障害を実質的に抑制又は改善する）ことができる。それ故、本発明は、皮膚の美白化を望むヒト等の対象に式（I）で表される化合物又はその塩を投与する工程を含む、皮膚を美白化する方法に関する。或いは、本発明はまた、皮膚美白用の皮膚外用剤又は皮膚を美白化するための医薬の製造のための、式（I）で表される化合物又はその塩の使用に関する。さらに、本発明は、皮膚を美白化する用途のための、式（I）で表される化合物又はその塩に関する。前記方法は、例えば、日焼け等により皮膚の色素沈着が生じる前に、ヒト等の対象に、式（I）で表される化合物又は皮膚外用剤組成物を投与して、皮膚の色素沈着を予防するか又はその進行を抑制する方法だけでなく、色素沈着が既に生じている対象に、式（I）で表される化合物又は皮膚外用剤組成物を投与して、色素沈着に伴う皮膚の障害を改善する方法も包含する。この方法は、美容のための方法であってもよく、医師等により行われる医療のための方法であってもよい。
本発明の式（I）で表される化合物は、in vivo又はin vitroにおいてメラニンの生成を阻害する方法に用いることができる。それ故、本発明は、in vivo又はin vitroにおいてヒト等の動物の細胞に式（I）で表される化合物又はその塩を適用する工程を含む、in vivo又はin vitroにおいてメラニン色素の生成を阻害する方法に関する。本明細書において、「in vivoにおけるメラニン色素の生成の阻害（又はメラニン生成の阻害）」は、ヒト等の生体内でのメラニン色素の生成の阻害（例えば、皮膚の色素細胞におけるメラニン色素の生成の阻害）を意味する。この方法は、美容のための方法であってもよく、医師等により行われる医療のための方法であってもよい。
本発明の式（I）で表される化合物又は皮膚外用剤組成物は、メラニン生成の阻害により改善される疾患若しくは症状の予防又は治療のために用いることができる。それ故、本発明は、メラニン色素の生成の阻害により改善される疾患若しくは症状の予防又は治療を必要とするヒト等の対象に、式（I）で表される化合物又はその塩を投与する工程を含む、該疾患若しくは症状の予防又は治療方法に関する。或いは、本発明はまた、メラニン生成阻害用皮膚外用剤、又は細胞におけるメラニン色素の生成の阻害により改善される疾患若しくは症状の予防若しくは治療のための医薬の製造のための、式（I）で表される化合物又はその塩の使用に関する。さらに、本発明は、in vivo又はin vitroにおいて細胞によるメラニン色素の生成を阻害する用途のための、式（I）で表される化合物又はその塩に関する。このような疾患又は症状としては、シミ又はソバカスを挙げることができる。
チロシナーゼは、アミノ酸であるチロシンからメラニン色素が生成する過程で作用する重要な酵素である。皮膚美白作用を有する多くの公知化合物は、チロシナーゼ阻害活性を有する。本発明の式（I）で表される化合物は、in vivo又はin vitroにおいてチロシナーゼ活性を阻害する方法に用いることができる。それ故、本発明はまた、in vivo又はin vitroにおいてチロシナーゼに式（I）で表される化合物又はその塩を適用する工程を含む、in vivo又はin vitroにおいてチロシナーゼ活性を阻害する方法に関する。本明細書において、「in vivoにおけるチロシナーゼ活性の阻害（又はチロシナーゼ阻害）」は、ヒト等の生体内でのチロシナーゼ活性の阻害（例えば、皮膚の細胞におけるチロシナーゼ活性の阻害）を意味する。この方法は、美容のための方法であってもよく、医師等により行われる医療のための方法であってもよい。
本発明の式（I）で表される化合物又は皮膚外用剤組成物は、チロシナーゼ活性の阻害により改善される疾患若しくは症状の予防又は治療のために用いることができる。それ故、本発明は、チロシナーゼ活性の阻害により改善される疾患若しくは症状の予防又は治療を必要とするヒト等の対象に、式（I）で表される化合物又はその塩を投与する工程を含む、該疾患若しくは症状の予防又は治療方法に関する。或いは、本発明はまた、チロシナーゼ活性阻害用皮膚外用剤、又はチロシナーゼ活性の阻害により改善される疾患若しくは症状の予防若しくは治療のための医薬の製造のための、式（I）で表される化合物又はその塩の使用に関する。さらに、本発明は、in vivo又はin vitroにおいてチロシナーゼ活性を阻害する用途のための、式（I）で表される化合物又はその塩に関する。このような疾患又は症状としては、シミ又はソバカスを挙げることができる。
前記で説明した美白化の用途、並びに、生体内でのメラニン生成又はチロシナーゼ活性を阻害する用途のために、ヒト等の対象に式（I）で表される化合物を投与する形態は特に限定されない。例えば、式（I）で表される化合物を、前記対象の皮膚に適用する経皮投与（例えば、皮膚外用剤の形態での投与）であってもよく、経口投与（例えば散剤、錠剤、顆粒剤、細粒剤、液剤、カプセル剤、丸剤、トローチ、内用液剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤又はエリキシル剤等の形態での投与）であってもよい。或いは、経皮投与以外の非経口投与（注射剤、点滴剤、坐剤、吸入剤又は経粘膜吸収剤等の形態での投与）により、該対象に式（I）で表される化合物を投与する形態を挙げることもできる。
以下、実施例を用いて本発明をさらに具体的に説明する。但し、本発明の技術的範囲はこれら実施例に限定されるものではない。
＜I：3H2Pリン酸エステルの合成＞
［I-1：合成］
100mgの3-ヒドロキシ-2-ピロン（3H2P）と、287 mgのプロトンスポンジ（登録商標）（アルドリッチ社）と、3 mlのリン酸トリメチルとを、窒素気流下で50 ml すり付き試験管に加えて溶解させた。得られた溶液を0℃に冷却し、該溶液に、63μlのPOCl3を、氷冷下（0℃）で少量ずつ加えた。得られた反応溶液を、ゆっくりと室温に戻した後、終夜撹拌した。前記反応溶液に、4 mlの0.1 M 重炭酸トリエチルアンモニウム（TEAB）水溶液を加えて、室温で2時間撹拌した。前記の手順において、各原料の使用量及び反応条件（反応温度及び／又は時間等）を変更して、5回の反応を行った。全ての反応によって得られた反応溶液を一つの溶液にまとめた。得られた溶液を、DEAE カラム（DEAE TOYOPEARL（登録商標） 650M、約150 mlのゲル量、東ソー製）にマウントして、未反応の3H2P及びプロトンスポンジを含む非吸着画分を水で溶出させた。その後、A: 水からB: 0.35 M TEAB水溶液のグラジエント溶出条件（0〜300分間で0〜100％のB液濃度勾配）で、DEAEカラムから吸着画分を溶出させた。溶出液のUV吸収をモニターして、UV吸収を有する生成物の画分を分取し、濃縮した。得られた生成物の画分を、強酸性陽イオン交換樹脂カラム（Dowex（登録商標） 88、約100 mlのゲル量、ダウケミカル製）にマウントして、水で溶出させた。溶出液のUV吸収をモニターして、UV吸収を有する生成物の画分を分取した。得られた画分を凍結乾燥して、遊離酸の形態の3H2Pリン酸モノエステル（1）（864 mg）及び遊離酸の形態の3H2Pリン酸ビスエステル（2）（1118.4 mg）を得た。
［I-1：合成］
100mgの3-ヒドロキシ-2-ピロン（3H2P）と、287 mgのプロトンスポンジ（登録商標）（アルドリッチ社）と、3 mlのリン酸トリメチルとを、窒素気流下で50 ml すり付き試験管に加えて溶解させた。得られた溶液を0℃に冷却し、該溶液に、63μlのPOCl3を、氷冷下（0℃）で少量ずつ加えた。得られた反応溶液を、ゆっくりと室温に戻した後、終夜撹拌した。前記反応溶液に、4 mlの0.1 M 重炭酸トリエチルアンモニウム（TEAB）水溶液を加えて、室温で2時間撹拌した。前記の手順において、各原料の使用量及び反応条件（反応温度及び／又は時間等）を変更して、5回の反応を行った。全ての反応によって得られた反応溶液を一つの溶液にまとめた。得られた溶液を、DEAE カラム（DEAE TOYOPEARL（登録商標） 650M、約150 mlのゲル量、東ソー製）にマウントして、未反応の3H2P及びプロトンスポンジを含む非吸着画分を水で溶出させた。その後、A: 水からB: 0.35 M TEAB水溶液のグラジエント溶出条件（0〜300分間で0〜100％のB液濃度勾配）で、DEAEカラムから吸着画分を溶出させた。溶出液のUV吸収をモニターして、UV吸収を有する生成物の画分を分取し、濃縮した。得られた生成物の画分を、強酸性陽イオン交換樹脂カラム（Dowex（登録商標） 88、約100 mlのゲル量、ダウケミカル製）にマウントして、水で溶出させた。溶出液のUV吸収をモニターして、UV吸収を有する生成物の画分を分取した。得られた画分を凍結乾燥して、遊離酸の形態の3H2Pリン酸モノエステル（1）（864 mg）及び遊離酸の形態の3H2Pリン酸ビスエステル（2）（1118.4 mg）を得た。
［I-2：生成物の機器分析］
以下の条件で、生成物の機器分析を行った。
以下の条件で、生成物の機器分析を行った。
〔LC-MS分析〕
・MS条件
装置 ：micro TOF Focus型（ブルカー・ダルトニクス製）
イオン化 ：ESI（正イオン -low mode；負イオン -low mode）
・LC条件
装置 ：Agilent 1100シリーズ
カラム ：Agilent Zorbax SB-C18（Agilent Technologies社製）
2.1 mm（内径）×150 mm（カラム長）（粒径3.5μm）
溶出液 ：（A）アセトニトリル
（B）10 mM NH4HCO3水溶液
グラジエント ：0〜15分間で0〜100％のA液濃度勾配
流速 ：0.2 ml/分
試料 ：1000 ppm（10 mM NH4HCO3水溶液で希釈）
インジェクト量：2μl
カラム温度 ：40℃
検出器 ：マルチチャンネル検出器（UV：293, 295 nm）
〔1H-NMR分析〕
装置 ：JEOL AL-400（日本電子社製）
共鳴周波数 ：395.75 MHz
溶媒 ：D2O
内部標準物質：水（4.81 ppm）
〔13C-NMR分析〕
装置 ：JEOL AL-400（日本電子社製）
共鳴周波数 ：99.45 MHz
溶媒 ：D2O
外部標準物質：テトラメチルシラン（CDCl3溶液）（0 ppm）
〔31P-NMR分析〕
装置 ：JEOL AL-400（日本電子社製）
共鳴周波数 ：160.10 MHz
溶媒 ：D2O
外部標準物質：85％ H3PO4（0 ppm）
〔分析結果〕
3H2Pリン酸モノエステル（1）（遊離酸）：
HRMS 計算値：C5H6O6P 192.9897; 測定値：192.9886 (M+H)+, 計算値：C5H4O6P 190.9751; 測定値：190.9743 (M-H)-；1H-NMR (D2O, 395.75 MHz) δppm:7.40（ddd, JHH=5.1 Hz, JHH=1.7 Hz, JHP=1.0 Hz, 1H）, 7.28（ddd, JHH=7.3-7.5 Hz, JHH=1.7-1.9 Hz, JHP=1.7-1.9 Hz, 1H）, 6.36（dd, JHH=7.3 Hz, JHH=5.1 Hz, 1H）；13C-NMR (D2O, 99.45 MHz) δppm:162.4（JCP=6.6 Hz）, 147.5（JCP=1.6 Hz）, 138.1（JCP=6.6 Hz）, 128.9（JCP=4.1 Hz）, 107.2（JCP=1.6 Hz）；31P-NMR (D2O, 160.10 MHz) δppm:-3.5.
3H2Pリン酸ビスエステル（2）（遊離酸）：
HRMS (MALDI-TOF) 計算値：C10H8O8P 286.9951; 測定値：286.9947 (M+H)+, 計算値：C10H6O8P 284.9806; 測定値：284.9805 (M-H)-；1H-NMR (D2O, 395.75 MHz) δppm: 7.55（ddd, JHH=5.1 Hz, JHH=1.5-1.7 Hz, JHP=1.0-1.2 Hz, 1H）, 7.48（ddd, JHH=7.3-7.5 Hz, JHH=1.7-1.9 Hz, JHP=1.7-1.9 Hz, 1H）, 6.50（dd, JHH=7.3 Hz, JHH=5.1 Hz, 1H）；13C-NMR (D2O, 99.45 MHz) δppm:162.0（JCP=6.6 Hz）, 147.8（JCP=1.6 Hz）, 137.9（JCP=7.4 Hz）, 129.5（JCP=4.1 Hz）, 107.0（JCP=1.6 Hz）；31P-NMR (D2O, 160.10 MHz) δppm:-8.4.
・MS条件
装置 ：micro TOF Focus型（ブルカー・ダルトニクス製）
イオン化 ：ESI（正イオン -low mode；負イオン -low mode）
・LC条件
装置 ：Agilent 1100シリーズ
カラム ：Agilent Zorbax SB-C18（Agilent Technologies社製）
2.1 mm（内径）×150 mm（カラム長）（粒径3.5μm）
溶出液 ：（A）アセトニトリル
（B）10 mM NH4HCO3水溶液
グラジエント ：0〜15分間で0〜100％のA液濃度勾配
流速 ：0.2 ml/分
試料 ：1000 ppm（10 mM NH4HCO3水溶液で希釈）
インジェクト量：2μl
カラム温度 ：40℃
検出器 ：マルチチャンネル検出器（UV：293, 295 nm）
〔1H-NMR分析〕
装置 ：JEOL AL-400（日本電子社製）
共鳴周波数 ：395.75 MHz
溶媒 ：D2O
内部標準物質：水（4.81 ppm）
〔13C-NMR分析〕
装置 ：JEOL AL-400（日本電子社製）
共鳴周波数 ：99.45 MHz
溶媒 ：D2O
外部標準物質：テトラメチルシラン（CDCl3溶液）（0 ppm）
〔31P-NMR分析〕
装置 ：JEOL AL-400（日本電子社製）
共鳴周波数 ：160.10 MHz
溶媒 ：D2O
外部標準物質：85％ H3PO4（0 ppm）
〔分析結果〕
3H2Pリン酸モノエステル（1）（遊離酸）：
HRMS 計算値：C5H6O6P 192.9897; 測定値：192.9886 (M+H)+, 計算値：C5H4O6P 190.9751; 測定値：190.9743 (M-H)-；1H-NMR (D2O, 395.75 MHz) δppm:7.40（ddd, JHH=5.1 Hz, JHH=1.7 Hz, JHP=1.0 Hz, 1H）, 7.28（ddd, JHH=7.3-7.5 Hz, JHH=1.7-1.9 Hz, JHP=1.7-1.9 Hz, 1H）, 6.36（dd, JHH=7.3 Hz, JHH=5.1 Hz, 1H）；13C-NMR (D2O, 99.45 MHz) δppm:162.4（JCP=6.6 Hz）, 147.5（JCP=1.6 Hz）, 138.1（JCP=6.6 Hz）, 128.9（JCP=4.1 Hz）, 107.2（JCP=1.6 Hz）；31P-NMR (D2O, 160.10 MHz) δppm:-3.5.
3H2Pリン酸ビスエステル（2）（遊離酸）：
HRMS (MALDI-TOF) 計算値：C10H8O8P 286.9951; 測定値：286.9947 (M+H)+, 計算値：C10H6O8P 284.9806; 測定値：284.9805 (M-H)-；1H-NMR (D2O, 395.75 MHz) δppm: 7.55（ddd, JHH=5.1 Hz, JHH=1.5-1.7 Hz, JHP=1.0-1.2 Hz, 1H）, 7.48（ddd, JHH=7.3-7.5 Hz, JHH=1.7-1.9 Hz, JHP=1.7-1.9 Hz, 1H）, 6.50（dd, JHH=7.3 Hz, JHH=5.1 Hz, 1H）；13C-NMR (D2O, 99.45 MHz) δppm:162.0（JCP=6.6 Hz）, 147.8（JCP=1.6 Hz）, 137.9（JCP=7.4 Hz）, 129.5（JCP=4.1 Hz）, 107.0（JCP=1.6 Hz）；31P-NMR (D2O, 160.10 MHz) δppm:-8.4.
＜II：3H2Pリン酸エステル塩の合成＞
［II-1：合成］
500mg（4.46 mmol）の3-ヒドロキシ-2-ピロン（3H2P）と、1.14 ｇ（5.31 mmol）のプロトンスポンジ（登録商標）（アルドリッチ社）と、5 mlのリン酸トリメチルとを、窒素気流下で50 ml すり付き試験管に加えて溶解させた。得られた溶液を0℃に冷却し、該溶液に、499μl（5.35 mmol）のPOCl3を、氷冷下（0℃）で少量ずつ加えた。得られた反応溶液を、前記と同じ温度で2時間撹拌した。前記反応溶液に、0.1 M 重炭酸トリエチルアンモニウム（TEAB）水溶液を加えて、室温で2時間撹拌した。得られた反応溶液を、100 mlの水で希釈した。この溶液を、DEAE カラム（DEAE TOYOPEARL（登録商標） 650M、約150 mlのゲル量、東ソー製）にマウントして、A: 水からB: 0.3 M TEAB水溶液のグラジエント溶出条件（0〜40分間で0〜100％のB液濃度勾配）で、生成物の画分を分取した。得られた生成物の画分を、HPLCカラム（Phenomenex Luna（登録商標） 10μ C18(2)、10μm、21.2×250 mm、Phenomenex社製）にマウントして、A: 0.1 M TEAB水溶液からB: アセトニトリルのグラジエント溶出条件（0〜30分間で0〜40％のB液濃度勾配）で、生成物の画分を分取した。得られた画分を凍結乾燥して、3H2Pリン酸モノエステル（1）の1.5トリエチルアミン塩（138.6 mg、10.6％）及び3H2Pリン酸ビスエステル（2）の1トリエチルアミン塩（549.6 mg、31.8％）を得た（収率はモノトリエチルアミン塩として計算した）。
［II-1：合成］
500mg（4.46 mmol）の3-ヒドロキシ-2-ピロン（3H2P）と、1.14 ｇ（5.31 mmol）のプロトンスポンジ（登録商標）（アルドリッチ社）と、5 mlのリン酸トリメチルとを、窒素気流下で50 ml すり付き試験管に加えて溶解させた。得られた溶液を0℃に冷却し、該溶液に、499μl（5.35 mmol）のPOCl3を、氷冷下（0℃）で少量ずつ加えた。得られた反応溶液を、前記と同じ温度で2時間撹拌した。前記反応溶液に、0.1 M 重炭酸トリエチルアンモニウム（TEAB）水溶液を加えて、室温で2時間撹拌した。得られた反応溶液を、100 mlの水で希釈した。この溶液を、DEAE カラム（DEAE TOYOPEARL（登録商標） 650M、約150 mlのゲル量、東ソー製）にマウントして、A: 水からB: 0.3 M TEAB水溶液のグラジエント溶出条件（0〜40分間で0〜100％のB液濃度勾配）で、生成物の画分を分取した。得られた生成物の画分を、HPLCカラム（Phenomenex Luna（登録商標） 10μ C18(2)、10μm、21.2×250 mm、Phenomenex社製）にマウントして、A: 0.1 M TEAB水溶液からB: アセトニトリルのグラジエント溶出条件（0〜30分間で0〜40％のB液濃度勾配）で、生成物の画分を分取した。得られた画分を凍結乾燥して、3H2Pリン酸モノエステル（1）の1.5トリエチルアミン塩（138.6 mg、10.6％）及び3H2Pリン酸ビスエステル（2）の1トリエチルアミン塩（549.6 mg、31.8％）を得た（収率はモノトリエチルアミン塩として計算した）。
［II-2：生成物の機器分析］
以下の条件で、生成物の機器分析を行った。
以下の条件で、生成物の機器分析を行った。
〔LC-MS分析〕
装置 ：Shimadzu LCMS-2010A EV（島津製作所製）
カラム ：Agilent Zorbax SB-C18（Agilent Technologies社製）
2.1 mm（内径）×150 mm（カラム長）（粒径3.5μm）
溶出液 ：（A）10 mM NH4HCO3（3H2Pリン酸モノエステルの場合）
10 mM NH4HCO3 + 0.1% HCOOH/H2O
（3H2Pリン酸ビスエステルの場合）
（B）アセトニトリル
グラジエント ：0〜15分間で0〜100％のB液濃度勾配
流速 ：0.2 ml/分
希釈液（濃度）：水（1 mg/ml）
インジェクト量：2μl
カラム温度 ：40℃
検出器１ ：ESI
プローブ電圧 ：+1.6 kV（ESI−正イオンモード）
：-1.6 kV（ESI−負イオンモード）
CDL温度 ：250℃
ブロックヒーター温度：200℃
ネブライザーガス流量：1.5 ml/分
乾燥ガス圧力 ：0.02 MPa
検出器２ ：PDA（190〜800 nm）
〔1H-NMR分析〕
装置 ：JEOL JNM-ECS400（日本電子社製）
共鳴周波数 ：400 MHz
溶媒 ：D2O
内部標準物質：3-(トリメチルシリル)-1-プロパンスルホン酸ナトリウム塩
〔分析結果〕
3H2Pリン酸モノエステル（1）（1.5トリエチルアミン塩）：
ESI-MS m/z: 193 (M+H)+, 191 (M-H)-；1H-NMR (D2O, 400 MHz) δppm: 7.48 (d, JHH = 4.4 Hz, 1H), 7.37 (m, 1H), 6.47 (dd, JHH = 7.4 Hz, JHH = 5.1-5.2 Hz, 1H), 3.2 (q, JHH = 7.4 Hz, 9H), 1.27 (t, JHH = 7.4 Hz, 13.5H).
3H2Pリン酸ビスエステル（2）（1トリエチルアミン塩）：
ESI-MS m/z: 287 (M+H)+, 285 (M-H)-；1H-NMR (D2O, 400 MHz) δppm: 7.53 (d, JHH = 5.1 Hz, 2H), 7.47 (d, JHH = 7.4 Hz, 2H), 6.48 (dd, JHH = 7.3 Hz, JHH = 5.2-5.3 Hz, 2H), 3.19 (q, JHH = 7.4 Hz, 6H), 1.27 (t, JHH =7.4 Hz, 9H).
装置 ：Shimadzu LCMS-2010A EV（島津製作所製）
カラム ：Agilent Zorbax SB-C18（Agilent Technologies社製）
2.1 mm（内径）×150 mm（カラム長）（粒径3.5μm）
溶出液 ：（A）10 mM NH4HCO3（3H2Pリン酸モノエステルの場合）
10 mM NH4HCO3 + 0.1% HCOOH/H2O
（3H2Pリン酸ビスエステルの場合）
（B）アセトニトリル
グラジエント ：0〜15分間で0〜100％のB液濃度勾配
流速 ：0.2 ml/分
希釈液（濃度）：水（1 mg/ml）
インジェクト量：2μl
カラム温度 ：40℃
検出器１ ：ESI
プローブ電圧 ：+1.6 kV（ESI−正イオンモード）
：-1.6 kV（ESI−負イオンモード）
CDL温度 ：250℃
ブロックヒーター温度：200℃
ネブライザーガス流量：1.5 ml/分
乾燥ガス圧力 ：0.02 MPa
検出器２ ：PDA（190〜800 nm）
〔1H-NMR分析〕
装置 ：JEOL JNM-ECS400（日本電子社製）
共鳴周波数 ：400 MHz
溶媒 ：D2O
内部標準物質：3-(トリメチルシリル)-1-プロパンスルホン酸ナトリウム塩
〔分析結果〕
3H2Pリン酸モノエステル（1）（1.5トリエチルアミン塩）：
ESI-MS m/z: 193 (M+H)+, 191 (M-H)-；1H-NMR (D2O, 400 MHz) δppm: 7.48 (d, JHH = 4.4 Hz, 1H), 7.37 (m, 1H), 6.47 (dd, JHH = 7.4 Hz, JHH = 5.1-5.2 Hz, 1H), 3.2 (q, JHH = 7.4 Hz, 9H), 1.27 (t, JHH = 7.4 Hz, 13.5H).
3H2Pリン酸ビスエステル（2）（1トリエチルアミン塩）：
ESI-MS m/z: 287 (M+H)+, 285 (M-H)-；1H-NMR (D2O, 400 MHz) δppm: 7.53 (d, JHH = 5.1 Hz, 2H), 7.47 (d, JHH = 7.4 Hz, 2H), 6.48 (dd, JHH = 7.3 Hz, JHH = 5.2-5.3 Hz, 2H), 3.19 (q, JHH = 7.4 Hz, 6H), 1.27 (t, JHH =7.4 Hz, 9H).
＜III：使用例＞
［III-1：安定性試験］
遊離酸の形態の3H2Pリン酸モノエステル（1）及び3H2Pリン酸ビスエステル（2）を、0.1％（重量／体積）の濃度となるように、20 mMクエン酸緩衝溶液（pH6.0）に溶解させた。各試験溶液を、4℃、25℃又は40℃で3週間保存した。保存後の各試験溶液に含まれる3H2Pリン酸モノエステル（1）又は3H2Pリン酸ビスエステル（2）を、逆相HPLC（Inertsil（登録商標） ODS-3、5μm、4.6×250 mm、ジーエルサイエンス社製））を用いて定量分析した。比較例として、3H2Pを用いて前記の手順で同様の試験を行った。各保存温度で保存した後の各試験溶液に含まれる化合物の残存率（試験開始時の化合物量に基づく百分率）を表1に示す。
［III-1：安定性試験］
遊離酸の形態の3H2Pリン酸モノエステル（1）及び3H2Pリン酸ビスエステル（2）を、0.1％（重量／体積）の濃度となるように、20 mMクエン酸緩衝溶液（pH6.0）に溶解させた。各試験溶液を、4℃、25℃又は40℃で3週間保存した。保存後の各試験溶液に含まれる3H2Pリン酸モノエステル（1）又は3H2Pリン酸ビスエステル（2）を、逆相HPLC（Inertsil（登録商標） ODS-3、5μm、4.6×250 mm、ジーエルサイエンス社製））を用いて定量分析した。比較例として、3H2Pを用いて前記の手順で同様の試験を行った。各保存温度で保存した後の各試験溶液に含まれる化合物の残存率（試験開始時の化合物量に基づく百分率）を表1に示す。
表1に示すように、3H2Pリン酸モノエステル（1）及び3H2Pリン酸ビスエステル（2）は、リン酸エステル化されていない3H2Pと比較して、弱酸性〜中性の水中における安定性が大きく向上したことが確認された。
［III-2：メラニン生成阻害試験］
マウス由来B16メラノーマ細胞4A5（理研）を、5.0×104個/ウェルの細胞密度となるように10%FBSを含むDMEM培地を用いて6ウェルプレートに播種し（培養0日）、37℃、5％の二酸化炭素濃度の条件下で、24時間培養した。翌日、播種した培地から、所定の濃度の試験化合物を添加した培地に交換した（培養1日目）。2日目以降は、一日おきに培地交換を行った。培養6日目に細胞をトリプシン処理により回収し、1 N水酸化ナトリウム水溶液を用いてメラニンを抽出した。得られたメラニン抽出液の405 nmの吸光度を測定し、メラニン標品を用いて作成した検量線に基づき、メラニン量を算出した。また、DCプロテインアッセイキット(BIO-RAD社製)を用いて、前記の手順で回収した細胞のタンパク質量を算出し、細胞数の指標とした。前記の測定値に基づき、試験化合物の濃度と、メラノーマ細胞のメラニン量及び細胞数との関係を図1に示す。図1Aは、遊離酸の形態の3H2Pリン酸モノエステル（1）及び3H2Pリン酸ビスエステル（2）を試験化合物として用いた試験結果を、図1Bは、3H2Pリン酸モノエステル（1）のトリエチルアミン塩及び3H2Pリン酸ビスエステル（2）のトリエチルアミン塩を試験化合物として用いた試験結果を、それぞれ示す。図中、試験化合物を添加した各試験区のメラニン量及び細胞数は、試験化合物を添加しない対照区（濃度0）のメラニン量及び細胞数の測定値を100とした相対値である。
マウス由来B16メラノーマ細胞4A5（理研）を、5.0×104個/ウェルの細胞密度となるように10%FBSを含むDMEM培地を用いて6ウェルプレートに播種し（培養0日）、37℃、5％の二酸化炭素濃度の条件下で、24時間培養した。翌日、播種した培地から、所定の濃度の試験化合物を添加した培地に交換した（培養1日目）。2日目以降は、一日おきに培地交換を行った。培養6日目に細胞をトリプシン処理により回収し、1 N水酸化ナトリウム水溶液を用いてメラニンを抽出した。得られたメラニン抽出液の405 nmの吸光度を測定し、メラニン標品を用いて作成した検量線に基づき、メラニン量を算出した。また、DCプロテインアッセイキット(BIO-RAD社製)を用いて、前記の手順で回収した細胞のタンパク質量を算出し、細胞数の指標とした。前記の測定値に基づき、試験化合物の濃度と、メラノーマ細胞のメラニン量及び細胞数との関係を図1に示す。図1Aは、遊離酸の形態の3H2Pリン酸モノエステル（1）及び3H2Pリン酸ビスエステル（2）を試験化合物として用いた試験結果を、図1Bは、3H2Pリン酸モノエステル（1）のトリエチルアミン塩及び3H2Pリン酸ビスエステル（2）のトリエチルアミン塩を試験化合物として用いた試験結果を、それぞれ示す。図中、試験化合物を添加した各試験区のメラニン量及び細胞数は、試験化合物を添加しない対照区（濃度0）のメラニン量及び細胞数の測定値を100とした相対値である。
図1に示すように、1、5及び10μg/mlの濃度の3H2Pリン酸モノエステル（1）並びに3H2Pリン酸ビスエステル（2）は、3H2Pよりやや低いものの、公知の美白剤であるアルブチンと同程度のメラニン生成阻害活性を示した。3H2Pリン酸モノエステル（1）及び3H2Pリン酸ビスエステル（2）は、5μg/mlの濃度で、対照区のメラニン量に対し約50％までメラニン生成を阻害した。また、3H2Pリン酸モノエステル（1）及び3H2Pリン酸ビスエステル（2）は、それぞれ遊離酸又はトリエチルアミン塩のいずれの形態であっても略同程度のメラニン生成阻害活性を示した。
［III-3：チロシナーゼ活性阻害試験］
6 mM L-DOPA溶液と、所定の濃度に調製した試験化合物の水溶液と、リン酸緩衝溶液（pH6.8）とを、2：2：1の体積比で混合した。1.0 mlの得られた基質混合液と0.2 mlの0.017 mg/ml チロシナーゼ酵素（シグマ社製）溶液とを混合して、37℃で酵素反応を開始させた。反応開始0分及び3分後における酵素反応溶液の475 nmの吸光度を測定した。前記の手順において、試験化合物を含まない他は前記と同様の方法で酵素反応を行った試験区を、ブランクの試験区とした。得られた吸光度の測定値から、下記の計算式に基づき、チロシナーゼ活性阻害率を算出した。結果を図2に示す。
6 mM L-DOPA溶液と、所定の濃度に調製した試験化合物の水溶液と、リン酸緩衝溶液（pH6.8）とを、2：2：1の体積比で混合した。1.0 mlの得られた基質混合液と0.2 mlの0.017 mg/ml チロシナーゼ酵素（シグマ社製）溶液とを混合して、37℃で酵素反応を開始させた。反応開始0分及び3分後における酵素反応溶液の475 nmの吸光度を測定した。前記の手順において、試験化合物を含まない他は前記と同様の方法で酵素反応を行った試験区を、ブランクの試験区とした。得られた吸光度の測定値から、下記の計算式に基づき、チロシナーゼ活性阻害率を算出した。結果を図2に示す。
図2に示すように、遊離酸の形態の3H2Pリン酸モノエステル（1）及び3H2Pリン酸ビスエステル（2）は、0.1〜0.5 mg/mlの濃度範囲で低いチロシナーゼ阻害活性を示した。3H2Pリン酸モノエステル（1）及び3H2Pリン酸ビスエステル（2）のチロシナーゼ阻害活性は、同一の濃度範囲の3H2Pのチロシナーゼ阻害活性と比較して低い値であった。
本明細書で引用した全ての刊行物、特許及び特許出願をそのまま参考として本明細書にとり入れるものとする。
Claims (5)
- 式（I-ii）：
- 請求項1に記載の化合物又はその塩を有効成分として含有する美白剤。
- 請求項1に記載の化合物又はその塩を有効成分として含有するメラニン生成阻害剤。
- 請求項1に記載の化合物又はその塩、及び皮膚への適用が許容される成分を含有する、皮膚外用剤組成物。
- 3-ヒドロキシ-2-ピロンをリン酸化して、式（I-ii）で表される化合物又はその塩を形成させる、リン酸化工程を含む、請求項1に記載の化合物又はその塩の製造方法。
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PCT/JP2013/061848 WO2014174583A1 (ja) | 2013-04-23 | 2013-04-23 | 新規美白剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPWO2014174583A1 JPWO2014174583A1 (ja) | 2017-02-23 |
| JP6173440B2 true JP6173440B2 (ja) | 2017-08-02 |
Family
ID=51791194
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2015513390A Expired - Fee Related JP6173440B2 (ja) | 2013-04-23 | 2013-04-23 | 新規美白剤 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP2990408B1 (ja) |
| JP (1) | JP6173440B2 (ja) |
| CN (1) | CN105121451B (ja) |
| HK (1) | HK1213898A1 (ja) |
| WO (1) | WO2014174583A1 (ja) |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS533538A (en) * | 1976-06-28 | 1978-01-13 | Sansho Seiyaku Kk | Skin bleach cosmetics |
| JPS59157009A (ja) | 1983-02-25 | 1984-09-06 | Yakurigaku Chuo Kenkyusho:Kk | メラニン生成抑制外用剤 |
| JP2747001B2 (ja) * | 1989-04-18 | 1998-05-06 | 昭和電工株式会社 | Ｌ―アスコルビン酸―２―リン酸エステル類の製造法 |
| JPH0347899A (ja) | 1989-07-17 | 1991-02-28 | Ogawa Koryo Kk | ３―ヒドロキシピラン―２―オンを含有する香料組成物 |
| JP4111856B2 (ja) * | 2002-04-12 | 2008-07-02 | 昭和電工株式会社 | 安定化されたアスコルビン酸誘導体 |
| JP2007246475A (ja) | 2006-03-17 | 2007-09-27 | Univ Nihon | 血小板凝集抑制剤及び肝障害改善剤、並びに医薬用組成物及び機能性飲食品 |
| JP5703313B2 (ja) * | 2011-01-20 | 2015-04-15 | 株式会社ニチレイバイオサイエンス | ３−ヒドロキシ−２−ピロンを含有する美白剤 |
-
2013
- 2013-04-23 JP JP2015513390A patent/JP6173440B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2013-04-23 CN CN201380075891.0A patent/CN105121451B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2013-04-23 WO PCT/JP2013/061848 patent/WO2014174583A1/ja active Application Filing
- 2013-04-23 EP EP13882795.1A patent/EP2990408B1/en active Active
-
2016
- 2016-02-18 HK HK16101716.3A patent/HK1213898A1/zh not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| HK1213898A1 (zh) | 2016-07-15 |
| EP2990408B1 (en) | 2019-09-18 |
| JPWO2014174583A1 (ja) | 2017-02-23 |
| WO2014174583A1 (ja) | 2014-10-30 |
| CN105121451B (zh) | 2017-05-31 |
| EP2990408A4 (en) | 2016-09-14 |
| EP2990408A1 (en) | 2016-03-02 |
| CN105121451A (zh) | 2015-12-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR101604053B1 (ko) | 신규 벤조산아미드 화합물 | |
| HU197735B (en) | Process for producing ascorbinic acid derivatives and pharmaceutical compositions containing them | |
| EP3562830B1 (en) | Hydroxybenzoic acid derivatives, methods and uses thereof | |
| CN110475474B (zh) | 化合物和使用方法 | |
| JP2018184414A (ja) | 新規フラボノイド化合物およびその使用 | |
| JP6173440B2 (ja) | 新規美白剤 | |
| WO2011030727A1 (ja) | パンテチンリン酸エステルを含む外用剤 | |
| CN115353501A (zh) | 一种l-抗坏血酸酯孪药及其制备方法 | |
| JP5703313B2 (ja) | ３−ヒドロキシ−２−ピロンを含有する美白剤 | |
| JP2012006895A (ja) | メラニン産生促進剤 | |
| JP6272463B2 (ja) | 新規な化合物、これを含有する化粧料及び皮膚外用剤 | |
| KR101451401B1 (ko) | 비타민 c와 비타민 e의 컨쥬게이트 및 그를 포함하는 항산화제 | |
| EP3092220A1 (en) | Vitamin c prodrugs and uses thereof | |
| WO2012116577A1 (zh) | 绿原酸类似物及其制备方法和应用 | |
| KR101511279B1 (ko) | 사이클로헥산디올 유도체 및 이를 포함하는 미백용 화장료조성물 | |
| KR101491728B1 (ko) | 비타민 c와 비타민 b3의 컨쥬게이트 및 그를 포함하는 항산화제 | |
| EP4101839A1 (en) | Compound and use thereof | |
| JP2018162237A (ja) | チロシナーゼ阻害剤 | |
| US20220110962A1 (en) | Analogues of oleuropein and oleacein and uses thereof | |
| KR101873884B1 (ko) | 에스쿨린 유도체를 포함하는 피부 미백용 조성물 | |
| WO2010090234A1 (ja) | 12-デオキシフシコクシン糖鎖改変誘導体およびその用途 | |
| JP4307784B2 (ja) | グリコシル−ｌ−アスコルビン酸のアシル化誘導体及びその用途 | |
| KR101574561B1 (ko) | 새로운 사이클로헥산디아민 유도체 및 이를 이용한 화장료 조성물 | |
| JP3754653B2 (ja) | 皮膚外用剤 | |
| JP2011231057A (ja) | セラミド産生促進剤 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20170404 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170525 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20170613 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20170704 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6173440 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |