JP2023051961A

JP2023051961A - ヒドロキシ安息香酸誘導体、その方法および使用

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Publication number: JP2023051961A
Application number: JP2022200267A
Authority: JP
Inventors: フェルナンダマルティンスボルヘスマリア; Fernanda Martins Borges Maria; ジョルジグーベアシモエスダシルバオリビエラパウロ; Jorge Gouveia Simoes Da Silva Oliveira Paulo; カルロスサントステイクセラホセ; Carlos Santos Teixeira Jose; カギデフェイギンフェルナンド; Cagide Fagin Fernando; カタリーナゴメスオリベイラアナ; Catarina Gomes Oliveira Ana
Original assignee: Universidade do Porto; Centro de Neurociencias e Biologia Celular
Current assignee: Universidade do Porto; Centro de Neurociencias e Biologia Celular
Priority date: 2016-12-29
Filing date: 2022-12-15
Publication date: 2023-04-11
Also published as: BR112019011303B1; US11078222B2; BR112019011303A2; EP3562830C0; CA3048966A1; CN110114365A; EP3562830A1; EP3562830B1; JP2020503280A; KR20190132622A; CN110114365B; US20190330249A1; WO2018122789A1

Abstract

【課題】ヒトおよび動物の疾患の分野における、例えばミトコンドリア機能障害またはミトコンドリア欠乏症を治療するためのヒドロキシ安息香酸ベースの誘導体および類似体を提供する。【解決手段】例えば、下式の化合物である。JPEG2023051961000017.jpg4981（Ｒ１～Ｒ５は、Ｈ、ハロゲン、ヒドロキシル、メチル等；Ｒ７は、アルキル鎖、アルケニル鎖等；Ｚ－は、許容されるアニオンである。）【選択図】図１Ａ

Description

本開示は、ヒドロキシ安息香酸および類似体に基づく新しいミトコンドリア向性抗酸化
化合物の設計および合成に関する。さらに、本開示は、例えば、ヒトおよび動物の疾患の
分野における、例えばミトコンドリア機能障害またはミトコンドリア欠乏症を治療するた
めの、ヒドロキシ安息香酸ベースの誘導体および類似体の方法および使用、ならびに例え
ば肌の老化を予防するまたは遅らせるための化粧品に関する。

ミトコンドリアは、エネルギー代謝、サイトゾルカルシウム濃度、ＲＯＳ産生、および
細胞死経路の調節において極めて重要な役割を果たす。過剰なＲＯＳ産生は、固有の防御
機構によって妨げられない場合、脂質、タンパク質および核酸などの細胞成分に酸化的損
傷を引き起こす可能性があり、それはその後の壊死またはアポトーシスによる細胞死につ
ながる。

増強された酸化ストレスから生じるミトコンドリア変化は、癌、卒中、心不全、肥満お
よび神経変性疾患などの酸化ストレス関連疾患において重要な役割を果たす^１。オルガネ
ラ特異的薬物によるミトコンドリアの標的化は有効な治療戦略であると考えられている。
より具体的には、ミトコンドリアへの抗酸化剤の選択的送達を介して細胞のＲＯＳバラン
スを制御することは、酸化ストレス関連疾患の予防および／または治療のための効果的か
つ有望な治療戦略として記載されている^２。

ＲＯＳ産生は内因性抗酸化ネットワークによって厳密に調節されるが、その過剰産生は
ミトコンドリアの酸化的損傷および機能不全をもたらし得る。ミトコンドリアの酸化的機
能障害は、複数の代謝経路およびシグナル伝達経路を損ない、アポトーシスまたは壊死を
介して細胞死を引き起こす可能性がある。

酸化ストレスおよびミトコンドリア機能不全は、加齢およびいくつかの酸化ストレス関
連病状、例えば糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患、心血管疾患、急性膵炎およびアルツ
ハイマー病またはパーキンソン病を含む神経変性疾患、ならびに筋萎縮性側索硬化症に関
連している。したがって、ミトコンドリアの酸化的損傷の防止は、今日、疾患の進行を遅
らせるための認められた薬理学的戦略である。

病理学的事象において、内因性抗酸化剤防御のプールは、増加した酸化剤産生に対処す
るのに十分ではないかもしれず、外因性抗酸化剤が内因性防御システムの不十分さを補う
だけでなく、全体的な抗酸化反応も改善することを考慮すると、外因性抗酸化剤の投与が
、細胞傷害を減少させるのに有益であり得ることが示唆されている。外因性抗酸化剤は、
理論的には、異なるレベルで酸化的損傷経路の複雑なネットワークを遮断し、治療効果を
もたらし得る。結果として、食事から外因的に獲得される抗酸化剤は、酸化還元細胞恒常
性において重要な機能を有し得、そして細胞機能および疾患予防にとって重要であり得る
。

疾患の病因におけるミトコンドリアの役割はかなり一致しているが、破壊を防ぐために
その細胞小器官を標的にすることは必ずしも簡単ではない。酸化的損傷の予防／最小化に
よるミトコンドリア機能の改善は、有効かつ有望な治療戦略である。ＲＯＳ／酸化防止剤
比および酸化還元維持を維持することは細胞シグナル伝達にとって重要であるので、機能
不全ミトコンドリアへの酸化防止剤の標的化は薬理学的に興味深い。

多数のミトコンドリア標的抗酸化剤、特に担体としてトリフェニルホスホニウム（ＴＰ
Ｐ）を使用する抗酸化剤が開発されている。このタイプの親油性カチオンは、内膜電位勾
配を利用してミトコンドリア膜を通過し、ミトコンドリアマトリックス内に蓄積すること
ができる^３～５。

最も研究されているミトコンドリア標的化抗酸化剤の一つは、ミトキノン（ＭｉｔｏＱ
、ＭｉｔｏＱ１０、［１０－（４，５－ジメトキシ－２－メチル－３，６－ジオキソ－１
，４－シクロヘキサジエン－１－イル）デシル］トリフェニルホスホニウムメタンスルホ
ネート）である。ＭｉｔｏＱは、１０炭素アルキル鎖（ｄＴＰＰ）スペーサーとトリフェ
ニルホスホニウム（ＴＰＰ）カチオンとに共有結合した内因性抗酸化剤部分（コエンザイ
ムＱ）によって構成されている。ＭｉｔｏＱはさまざまな病理学的事象、すなわちＣ型肝
炎について臨床試験中である。しかし、ＭｉｔｏＱを神経変性疾患の治療薬として使用す
る臨床試験では残念な結果が得られている^４，５。

他の関連するミトコンドリア標的化抗酸化剤は、ＳＫＱ１［１０－（４，５－ジメチル
－３，６－ジオキソシクロヘキサ－１，４－ジエン－１－イル）デシル）トリフェニルホ
スホニウムブロミド）］であり、これはプラストキノン、葉緑体の電子伝達連鎖に関与す
るキノンに基づく。ＳｋＱ１は、ミトコンドリア内の酸化ストレスを減少させ、ドライア
イ状態に対して有意な保護効果を提供することが示された。

それにもかかわらず、治療において、ならびにサプリメントまたは栄養補助食品などの
他の用途において、ならびに化粧品分野において使用される、より効果的で安全なミトコ
ンドリアモジュレーターが依然として必要とされている。

ポリフェノールは、ヒトの食事を構成する果物、野菜、穀物および飲料に広く見出され
る、酸化的ストレスに対する防御に一般に関与する植物の二次代謝産物である。従来の西
洋式食事におけるそれらの毎日の食事摂取量は約１ｇと推定された。疫学的研究および関
連するメタアナリシスは、ポリフェノールに富む食事の摂取と、癌、糖尿病、心血管疾患
および神経変性疾患などの酸化ストレス関連疾患の予防との間の関連を強く示唆した。

フェノール酸サブクラスであるヒドロキシ安息香酸（ＨＢＡ）は、少なくとも１個のヒ
ドロキシル基に結合した７個の炭素原子（Ｃ６－Ｃ１）を含む。いくつかのＨＢＡ誘導体
は現在、栄養素の酸化を防止するまたは最小限に抑え、食品の栄養価を維持または向上さ
せるための食品抗酸化添加剤として使用されている。ヒドロキシ安息香酸およびその誘導
体は、それらの抗酸化特性のために化粧品および製薬産業において賦形剤としても使用さ
れている。しかしながら、主にそれらの有効性に関連していくつかの欠点が指摘されてい
る。

ＨＢＡの抗酸化活性は、それらのキレート化特性およびフリーラジカル捕捉特性と、す
なわち脂質過酸化プロセスを阻害することによって関連している。ＨＢＡ誘導体は、活性
酸素種（ＲＯＳ）産生に関与するいくつかの酸化促進酵素の阻害において役割を果たすこ
とができることも現在認識されている。科学的証拠によると、ＨＢＡの抗酸化効果は芳香
環上のヒドロキシル基の数と位置に関係している。これらの異なる作用機序は、ＲＯＳ形
成の阻害または低減、フリーラジカル連鎖反応の伝播の妨害、またはそれらの開始もしく
は反応速度の遅延をもたらし得る。

治療における単独またはアジュバントでのＨＢＡおよびそれらの誘導体の有用性は、生
物学的利用能および薬効の限界のために主に制限されている。それらの推定健康増進特性
にもかかわらず、経口投与されたポリフェノールの生物学的利用能は、全身療法のために
十分な濃度、主にそれらの物理化学的特性（例えば親油性）および広範かつ急速な代謝に
関連する問題を許容するには不十分である。ＨＢＡの親油性および安定性を高め、より優
れた生物学的利用能を可能にし、ミトコンドリアなどの細胞内標的へのそれらの送達を改
善するために、これまでに様々な戦略が開発されてきた。

これらの事実は、本開示によって対処される技術的問題を説明するために開示されてい
る。

一般的な説明
ミトコンドリアは多くの分子にとって魅力的な標的であり、それは異なる病理学の状況
においてオルガネラの損傷を最小にすることができる。

増加する証拠は、様々な病理学および老化プロセスにおいて決定的な役割を果たす酸化
的ストレス事象をミトコンドリア機能不全が増幅することを示唆している。ミトコンドリ
ア鉄硫黄中心、膜多価不飽和脂肪酸、タンパク質およびミトコンドリアＤＮＡは酸化的損
傷を受けやすく、しばしばオルガネラおよび細胞破壊を引き起こす。

本開示は、食事のヒドロキシ安息香酸および類似体（ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ）に基づく新
しいミトコンドリア向性抗酸化剤の設計および合成を報告する。

天然モデルに基づく有効な抗酸化剤の開発に関連する本開示の一部として、本明細書で
は、低い細胞毒性プロファイルを維持しながら、強力な抗酸化および鉄キレート化特性を
有する、天然食事性ＨＢＡに基づく新規なミトコンドリア指向抗酸化剤の開発を報告する
。

本開示は、医薬における使用のための、式Ｉの化合物、または塩、溶媒和物、水和物、
互変異性体、立体異性体；好ましくは薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、互変異
性体、立体異性体に関する：

式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７は、互いに独立して選択され；
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４およびＲ^５は、Ｈ、ハロゲン、ヒドロキシル、メチル、メトキ
シル、アミノ、カルボン酸、またはニトロ基から選択され；
Ｒ^６は、２級アミドまたは３級アミドであり；
Ｒ^７は、アルキル鎖、アルケニル鎖、アルキニル鎖、置換アリールまたは２級アミドで
あり；
Ｚ^－は、許容されるアニオン、好ましくは許容される医薬アニオン、特にハロゲン、さ
らに特にＣｌである。

本開示は、式Ｉの化合物、または塩、溶媒和物、水和物、互変異性体、立体異性体；好
ましくは薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、互変異性体、立体異性体に関する：

式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７は、互いに独立して選択され；
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４およびＲ^５は、Ｈ、ハロゲン、ヒドロキシル、メチル、メトキ
シル、アミノ、カルボン酸、またはニトロ基から選択され；
Ｒ^６は、２級アミドまたは３級アミドであり；
Ｒ^７は、アルキル鎖、アルケニル鎖、アルキニル鎖、置換アリールまたは２級アミドで
あり；
Ｚ^－は、許容されるアニオン、好ましくは許容される医薬アニオン、特にハロゲン、さ
らに特にＣｌであり；
ただし、以下を除く。

国際純正応用化学連合（ＩＵＰＡＣ）の定義に基づいて、アルキル基は、任意の炭素原
子から水素原子を除去することによってアルカンから誘導される一価の基－Ｃ_ｎＨ_２ｎ＋
_１として定義される。非分岐アルカンの末端炭素原子から水素原子を除去することによっ
て誘導される基は、直鎖アルキル（ｎ－アルキル）基Ｈ（ＣＨ_２）_ｎのサブクラスを形成
する。基ＲＣＨ_２、Ｒ_２ＣＨ（ＲはＨでない）、およびＲ_３Ｃ（ＲはＨでない）は、それ
ぞれ一級、二級および三級アルキル基である。アリール基は、環炭素原子から水素原子を
除去することによってアレーン（単環式および多環式芳香族炭化水素）から誘導される。

「アルキル」は「低級アルキル」を含み、３０個以下の炭素原子を有する炭素フラグメ
ントを網羅するように拡大する。アルキル基の例には、オクチル、ノニル、ノルボルニル
、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、エイコシル、３，
７－ジエチル－２，２－ジメチル－４－プロピルノニル、２－（シクロドデシル）エチル
、アダマンチルなどが挙げられる。

「低級アルキル」は、１～７個の炭素原子のアルキル基を意味する。低級アルキル基の
例には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ－ブチルおよびｔｅ
ｒｔ－ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロ
ペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、２－メチルシクロプロピル、シクロプロピ
ルメチルなどが含まれる。

一実施形態では、式Ｉの化合物は、以下である：

一実施形態では、式Ｉの化合物は、以下である：

一実施形態では、
Ｒ^７は、Ｒ^８－（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ－Ｒ^９アミドの２級アミドであり；
Ｒ^８およびＲ^９は、互いに独立して選択され；
Ｒ^８およびＲ^９は、アルキル鎖、アルケニル鎖、アルキニル鎖または置換アリールであ
る。

一実施形態では、置換アリールは、アルカン－アリール置換、アルケン－アリール置換
、またはアルキン－アリール置換である。

一実施形態では、アルカン－アリール置換、アルケン－アリール置換、またはアルキン
－アリール置換は、以下である。
Ｃ_１～Ｃ_６－アルキル、Ｃ_３～Ｃ_８－シクロアルキル、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリール、Ｃ_６
～Ｃ_１０－アリール－Ｃ_１～Ｃ_８－アルキル、Ｃ_１～Ｃ_６－アルコキシ、Ｃ_６～Ｃ_１０－
アリールオキシ、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリール－Ｃ_１～Ｃ_８－アルコキシ、ヒドロキシル、Ｃ
Ｏ_２Ｈ、Ｃ_１～Ｃ_６－アルコキシカルボニル、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリールオキシカルボニル
、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリール－Ｃ_１～Ｃ_８－アルコキシカルボニル、Ｃ_１～Ｃ_６－アルキル
カルボニル、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリールカルボニル、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリール－Ｃ_１～Ｃ_８
－アルキルカルボニル、Ｃ_１～Ｃ_６－アルキルカルボキシ、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリールカル
ボキシ、Ｃ_１～Ｃ_６－アルキルメルカプチル、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリールメルカプチル、Ｃ
_１～Ｃ_６－アルキルメルカプトカルボニル、Ｃ_３～Ｃ_８－シクロアルキルメルカプトカル
ボニル、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリールメルカプトカルボニル、Ｃ_１～Ｃ_６－アルキルメルカプ
トカルボキシ、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリールメルカプトカルボキシ、Ｃ_１～Ｃ_６－アルキルス
ルホニル、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリールスルホニル、Ｃ_１～Ｃ_６－アルキルスルホキシ、Ｃ_６
～Ｃ_１０－アリールスルホキシ；
これらのそれぞれがＣ_１～Ｃ_６－アルキル、Ｃ_１～Ｃ_６－アルコキシ、ＣＯＯＨで１回
または数回置換されており；ＣＯＮＨ_２、Ｃ_１～Ｃ_６－アルキルで１回または２回置換さ
れており；ＳＯ_３Ｈ、アミノ、チオール、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、フルオロ、ク
ロロ、ブロモ、ヨード、ＣＦ_３またはＯＣＦ_３；
ここで、これらの任意選択の置換基のいくつかは組み合わされて、anellated飽和、不
飽和または芳香族のホモ環系またはヘテロ環系を形成し；または
Ｃ_１～Ｃ_６－アルキル、Ｃ_１～Ｃ_６－アルコキシ、ＣＯＯＨで１回または数回置換され
ている飽和、不飽和または芳香族複素環；ＣＯＮＨ_２、１回または２回置換された。

一実施形態では、アルキル鎖、アルケニル鎖またはアルキニル鎖は、Ｃ_１～Ｃ_３０鎖、
好ましくはＣ_１～Ｃ_１８鎖である。

一実施形態では、アルキル鎖、アルケニル鎖またはアルキニル鎖は、Ｃ_２～Ｃ_１６鎖、
好ましくはＣ_３～Ｃ_１６鎖、より好ましくはＣ_５～Ｃ_１４鎖、さらにより好ましくはＣ_６
～Ｃ_１４鎖である。

一実施形態では、アルキル鎖は、Ｃ_５アルキル鎖、Ｃ_６アルキル鎖、Ｃ_７アルキル鎖、
Ｃ_８アルキル鎖、Ｃ_９アルキル鎖、Ｃ_１０アルキル鎖、Ｃ_１１アルキル鎖、Ｃ_１２アルキ
ル鎖、Ｃ_１３アルキル鎖、またはＣ_１４アルキル鎖である。

一実施形態では、Ｒ^１およびＲ^５は、Ｈである。

一実施形態では、Ｒ^２およびＲ^３は、ＯＨである。

一実施形態では、Ｒ^４は、ＨまたはＯＨである。

一実施形態では、Ｒ^７は、Ｃ_６アルキル鎖である。

一実施形態では、Ｒ^８およびＲ^９は、互いに独立してＣ_５アルキル鎖またはＣ_６アルキ
ル鎖である。

一実施形態では、ハロゲンは、Ｆ，Ｃｌ，Ｂｒ，ＩまたはＡｔである。

一実施形態では、化合物は、６－（３，４－ジヒドロキシベンズアミド）ヘキシルトリ
フェニルホスホニウムブロミドである。

一実施形態では、化合物は、６－（３，４，５－トリヒドロキシベンズアミド）ヘキシ
ルトリフェニルホスホニウムブロミドである。

一実施形態では、化合物は、５－（６－（３，４，５－トリヒドロキシベンズアミド）
ヘキシルアミノ）カルボニルペンチル］トリフェニルホスホニウムブロミドである。

本開示はまた、医学、獣医学または化粧品における使用のためにここで開示されている
任意の化合物、または関連化合物に関する。

一実施形態において、開示された化合物、または関連化合物は、ミトコンドリアの形態
および／またはＯＸＰＨＯＳ酵素の発現のうちの少なくとも１つを調節するために使用さ
れてもよい。

一実施形態では、開示された化合物、または関連化合物は、ミトコンドリア障害に関連
する症状、またはミトコンドリア機能不全に関連する症状全般（ミトコンドリア呼吸鎖欠
陥に起因する疾患を含む）の治療または予防または抑制に使用できる。

一実施形態では、ミトコンドリア障害は、ミオクローヌスてんかん；赤色ぼろ線維ミオ
クローヌスてんかん；レーベル遺伝性視神経症；神経障害性運動失調症および網膜色素変
性症；ミトコンドリアミオパチー、脳症、乳酸アシドーシス、脳卒中；リー症候群；リー
様症候群；優性視神経萎縮症；カーンズ－セイヤー症候群；母性遺伝性糖尿病と難聴；Ａ
ｌｐｅｒｓ－Ｈｕｔｔｅｎｌｏｃｈｅｒ症候群；運動失調症ニューロパチースペクトル；
慢性進行性外眼筋麻痺；ピアソン症候群；ミトコンドリア神経胃腸脳症；センガース症候
群；３－メチルグルタコン酸尿症、感音難聴、脳症およびリー様症候群の神経放射線学的
所見；ミオパチー；ミトコンドリアミオパチー；心筋症；脳ミオパチー、複合体ＩＶのサ
ーフェイトタンパク質欠乏によるリー症候群の欠如；ピルビン酸の酸化の乱れやＡＴＰ＋
ＰＣＲ産生率を含む、これまでのところ解決されていない遺伝的欠陥を伴う、単離された
、または組み合わされたＯＸＰＨＯＳ欠乏症からなる群から選択される障害である。

一実施形態では、ミトコンドリア機能障害に関連する状態は、フリードライヒ失調症；
尿細管性アシドーシス；パーキンソン病；アルツハイマー病；筋萎縮性側索硬化症；ハン
チントン病；発達性広汎性疾患；難聴；聾；糖尿病；老化；ミトコンドリア機能を阻害す
ると薬の副作用からなる群から選択される状態である。

一実施形態では、本開示の化合物、または関連化合物は、神経変性疾患、非アルコール
性脂肪性肝疾患、腫瘍、癌、腎臓病、強皮症、肝鉄過剰症、肝銅過剰症、脱毛症、ヒト不
妊症、急性膵炎、線維筋痛症、ミトコンドリア障害、またはミトコンドリア機能障害また
はミトコンドリア疾患に関連する状態の治療または予防または抑制に使用することができ
る。

一実施形態では、本開示の化合物、または関連化合物は、神経変性疾患、特に筋萎縮性
側索硬化症の治療または予防に使用することができる。

一実施形態では、本開示の化合物、または関連化合物は、癌の治療または予防に使用す
ることができ、その癌は、肝臓癌、膵臓癌または胆道癌である。

一実施形態では、本開示の化合物、または関連化合物は、非アルコール性脂肪性肝疾患
の治療または予防に使用することができ、その非アルコール性脂肪性肝疾患は、非アルコ
ール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、または肝硬変である。

一実施形態では、本開示の化合物、または関連化合物は、腎臓病の治療または予防に使
用することができ、その腎臓病は、腎臓癌または腎不全である。

一実施形態では、腫瘍疾患は、癌、特に基底細胞癌、骨癌、腸癌、脳腫瘍、乳癌、子宮
頸癌、白血病、肝臓癌、肺癌、リンパ腫、黒色腫、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、甲状腺癌ま
たは胆道癌であり得る。

一実施形態では、本開示の化合物、または関連化合物は、抗菌剤として、特に消毒剤と
して使用するためのものであり得る。

一実施形態では、本開示の化合物、または関連化合物は、多能性細胞培養物の維持にお
いて、特に細胞培養物の補足として、特に増殖培地化合物として使用するためのものであ
り得る。

本開示はまた、本開示の化合物のいずれか、または関連化合物を含む、多能性幹細胞を
未分化状態に維持するための細胞培養培地に関する。

一実施形態では、本開示の化合物、または関連化合物は、筋肉プロテクターまたは身体
運動後の筋肉回復としての使用のためのものであり得る。

一実施形態では、本開示の化合物、または関連化合物は、化粧品、サプリメント、また
は栄養補助食品、すなわち老化防止剤として、または抗シワスキンケア製品として使用す
るためのものであり得る。

一実施形態では、本開示の化合物、または関連化合物は、特にミトコンドリアイメージ
ング研究を監視するためのイメージング研究におけるプローブとして使用するためのもの
であり得る。

本開示はまた、本開示の化合物または関連化合物のいずれかと、１つ以上の薬学的に許
容される担体、アジュバント、賦形剤、希釈剤、またはそれらの組合せとを含む組成物、
好ましくは医薬組成物または化粧品組成物に関する。

一実施形態では、許容される担体は、以下のリストから選択され得る：とりわけ、食塩
水、アラビアゴム、ゼラチン、デンプンペースト、タルク、ケラチン、コロイドシリカ、
尿素、またはそれらの組合せ。

一実施形態では、アジュバントは、以下のリストから選択され得る：とりわけ、水中油
型エマルションアジュバント、アルミニウムアジュバント、ＴＬＲ－４リガンド、サポニ
ン、およびそれらの組合せ。

一実施形態では、賦形剤は以下のリストから選択され得る：とりわけ、グルコース、ラ
クトース、スクロース、モノステアリン酸グリセロール、塩化ナトリウム、グリセロール
、プロピレン、グリコール、水、エタノール、またはそれらの組合せ。

一実施形態では、医薬組成物は、一例として、経口、非経口、吸入または局所を介して
投与することができる。非医薬組成物、すなわち化粧品組成物の場合、好ましい経路は局
所的である。

一実施形態では、好ましい医薬投与経路は、経口、非経口、筋肉内、静脈内、ｉｎｓ
ｉｔｕ注射、鼻腔内、舌下、気管内、および吸入または局所投与を含むが、これらに限定
されない。

一実施形態では、医薬組成物は、例えば、神経変性疾患、非アルコール性脂肪性肝疾患
、腫瘍、腎臓病、強皮症、肝鉄過剰症、肝銅過剰症、脱毛症、ヒト不妊症、急性膵炎また
は線維筋痛症の治療または予防のための方法において使用することができ、ここで、医薬
組成物は、１日量で投与される。

一実施形態では、医薬組成物の１日量は、とりわけ、２０ｍｇ／日または１０ｍｇ／日
であり得る。

いくつかの実施形態では、投与量または剤形は、例えば、１日に１回、１日に２回、ま
たは１日に３回、被験体に投与することができる。他の態様では、用量は、週に１回、月
に１回、２ヶ月に１回、年に４回、年に３回、年に２回、または年に１回投与される。

一実施形態では、組成物は、本主題において、免疫療法または任意の薬理学的アプロー
チを含む他の療法の有効性を改善するのに有効な量で、１つ以上の、本開示の化合物また
は関連化合物を、主題の少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なく
とも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０
％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少な
くとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９５．７％、少なくとも９８％、または少
なくとも９９％含み得る。

いくつかの実施形態では、組成物は、０．１～１０００ｍｇの用量を含む。例えば、い
くつかの実施形態では、製剤は、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋ
ｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．７ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、０．
９ｍｇ、１ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、６
ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１１ｍｇ／
ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、１３ｍｇ／ｋｇ、１４ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、１６ｍｇ／
ｋｇ、１７ｍｇ／ｋｇ、１８ｍｇ／ｋｇ、１９ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／
ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ、７０ｍｇ／
ｋｇ、８０ｍｇ／ｋｇ、９０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、２００ｍｇ／ｋｇ、２５０
ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ、４００ｍｇ／ｋｇ、５００ｍｇ／ｋｇ、６００ｍｇ／ｋ
ｇ、７００ｍｇ／ｋｇ、７５０ｍｇ／ｋｇ、８００ｍｇ／ｋｇ、９００ｍｇ／ｋｇ、また
は１０００ｍｇ／ｋｇの用量を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、０．１～１０
ｍｇ／ｋｇ、０．１～１００ｍｇ／ｋｇ、１～１０ｍｇ／ｋｇ、１～１００ｍｇ／ｋｇ、
１～１０００ｍｇ／ｋｇ、１０～１００ｍｇ／ｋｇ、１０～１０００ｍｇ／ｋｇ、１００
～１０００ｍｇ／ｋｇ、１０～５０ｍｇ／ｋｇ、１０～２５ｍｇ／ｋｇ、１０～２０ｍｇ
／ｋｇ、５０～１００ｍｇ／ｋｇ、または１００～２５０ｍｇ／ｋｇの用量を含む。

本開示はまた、ナノキャリア、例えばリポソームを提供し、ここでナノキャリアは、本
開示の化合物、または関連化合物、または組成物を含む。

詳細な説明および特許請求の範囲を通して、「含む」という語およびその語の変形は、
他の技術的特徴、付加物、構成要素、またはステップを除外することを意図していない。

ここに開示された解決策のさらなる目的、利点および特徴は、詳細な説明を検討するこ
とにより当業者に明らかになるであろうし、または解決策の実施により習得されてもよい
。

詳細な説明および特許請求の範囲を通して、「含む」という語およびその語の変形は、
他の技術的特徴、付加物、構成要素、またはステップを除外することを意図していない。
ここに開示された解決策のさらなる目的、利点および特徴は、詳細な説明を検討すること
により当業者に明らかになるであろうし、または解決策の実施により習得されてもよい。

以下の図は、詳細な説明を説明するための好ましい実施形態を提供しており、本開示の
範囲を限定するものとして見なされるべきではない。

いくつかのミトコンドリア向性抗酸化剤Ａ－ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_１およびＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_２；Ｂ－ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_３の開発のために追求された合成戦略。安息香酸とその誘導体（ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_１、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_２、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_３）とＭｉｔｏＱの鉄キレート特性の評価。参照としてＥＤＴＡ（キレート剤）を使用した。一元配置分散分析を用いて、対照群と比較して統計的に有意であった（Ｐ＜０．０００１、ｎ．ｓ．、有意ではない）。（Ａ）ＴＰＰ選択的電極を使用して測定した活性化ラット肝臓ミトコンドリアによるＡｎｔｉＯｘＢＥＮ取り込み。（Ｂ）ラット肝臓ミトコンドリアによるＡｎｔｉＯｘＢＥＮ蓄積比。ＭＩＴ、ミトコンドリア；ＳＵＣ、コハク酸；ＶＡＬ、バリノミシン。異なる酸化条件下でのミトコンドリア脂質過酸化に対する安息香酸、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮおよびＭｉｔｏＱの効果：（Ａ）ＴＢＡＲＳレベルおよび（Ｂ）酸素消費量に対する変化。対照とＡｎｔｉＯｘＣＩＮ（５μＭ）プレインキュベーション間の比較は、一元配置分散分析を使用することによって実施した。ＡＤＰおよびＦｅ^２＋によって誘発され、次いで酸素消費された、ＲＬＭ膜の脂質過酸化に対する、（Ａ）カテコール（プロトカテク酸およびＡｎｔｉＯｘＢＥＮ１）または（Ｂ）ピロガロール（ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ２およびＡｎｔｉＯｘＢＥＮ３）コアおよび（Ｃ）ｄＴＰＰおよびＭｉｔｏＱを含む、安息香酸およびＡｎｔｉＯｘＢＥＮ誘導体の効果の典型的な記録。ミトコンドリア透過性遷移孔（ｍＰＴＰ）の誘導時のミトコンドリア膨潤に対するＡｎｔｉＯｘＢＥＮおよびＭｉｔｏＱの効果。カルシウム添加前に、（Ａ）２．５μＭ、（Ｂ）５μＭおよび（Ｃ）１０μＭのＡｎｔｉＯｘＢＥＮおよびＭｉｔｏＱをＲＬＭと共に５分間プレインキュベートした。対照（Ｃａ^２＋のみ）とアッセイ間で一元配置分散分析を用いて比較を行い、そこでＡｎｔｉＯｘＢＥＮ誘導体をＣａ^２＋の前にプレインキュベートした。ＣｓＡ－シクロスポリンＡ。（Ａ）１０ｍＭグルタミン酸＋５ｍＭリンゴ酸または（Ｂ）５ｍＭコハク酸によって支持されたＲＬＭ呼吸に対するＡｎｔｉＯｘＢＥＮおよびＭｉｔｏＱの効果。白い棒、対照；水平パターンの棒、２．５μＭ、垂直パターンの棒、５μＭ、チェックパターンの棒、１０μＭ。異なる呼吸数／状態に対する統計的有意性は、Ｓｔｕｄｅｎｔの両側ｔ検定を使用して決定した。ヒト肝細胞癌細胞（ＨｅｐＧ２）増殖に対するＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_１（□）、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_２（●）、およびＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_３（〇）の細胞毒性プロファイル。一元配置分散分析を用いて対照群と比較して統計的に有意。

詳細な説明

一実施形態において、そして一例として、多数のヒドロキシ安息香酸誘導体（Ａｎｔｉ
ＯｘＢＥＮ）の開発のために追求された合成戦略が図１に示される。

一実施形態では、そして一例として、ミトコンドリア向性抗酸化剤ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ
_１およびＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_２を、図１Ａに示す４段階合成戦略に従って得た。この実施
例では、出発物質のジメトキシ安息香酸（１）またはトリメトキシ安息香酸（２）酸を、
カップリング剤としてエチルクロロホルメートを使用するアミド化反応によって、二官能
化アルキルスペーサー（６－アミノヘキサン－１－オール）に結合させた。第２段階反応
は、アルコール官能基（化合物３または４）を良好な脱離基であるハロゲン化物に変換す
ることを目的とした。１，２－ビス（ジフェニルホスフィノ）エタン（ジホス）を用いる
Ａｐｐｅｌ変性反応により、所望の化合物（５または６）を高収率、特に７０～９０％で
得た。第３段階では、トリフェニルホスフィン（ＰＰｈ_３）で置き換えられたＳＮ_２反応
によりトリフェニルホスホニウム塩（化合物７または８）を得た。ヒドロキシル化類似体
（ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_１およびＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_２）の合成は、三臭化ホウ素（ＢＢｒ
_３）を用いた脱メチル化法によって行った。

一実施形態では、そして一例として、ミトコンドリア向性抗酸化剤ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ
_３を、図１Ｂに示す４段階合成戦略に従って得た。ここでは、トリメトキシ安息香酸（２
）をモノ保護ジアミンスペーサーに結合させて誘導体９を得て、次いで、それを酸性媒体
中で脱保護して、化合物１０を得た。アミン１０をアミド化反応によってトリフェニルホ
スホニウムカチオン性化合物１１に結合させた。そこでは、アシル化剤がその場で発生し
た。次いで、化合物１２をトリブロミド（ＢＢｒ_３）溶液を用いて脱メチル化して、Ａｎ
ｔｉＯｘＢＥＮ_３を得た。包括的に、中程度の収量が得られている。

一実施形態では、そして一例として、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ抗酸化および酸化還元特性が
報告された。プロトカテク酸および没食子酸もまた検討した。ビタミンＥとｔｒｏｌｏｘ
を標準として使用した。

一実施形態では、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ抗酸化剤ランク付け活性階層を、インビトロ非細
胞法によって確立した。選択された全抗酸化剤能力（ＴＡＣ）アッセイ（ＤＰＰＨ、ＡＢ
ＴＳおよびＧＯ）は、抗酸化剤によるｉｎｓｉｔｕラジカル失活の結果としてのラジカ
ル吸光度の減少の分光光度測定を行った。より高い抗酸化活性を有する化合物は、より低
いＩＣ_５０値を示す。その結果を表１に示す。

抗酸化剤データは、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮが有効な抗酸化剤であり、そして達成されたＩ
Ｃ_５０値が３つの異なるアッセイにおいて同じ傾向をたどったと結論付けることを可能に
する。得られたデータから、ピロガロール部分を有する化合物、特にＡｎｔｉＯｘＢＥＮ
_２およびＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_３は、カテコール系、特にＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_１よりも優れ
た抗酸化活性を示したと結論付けることが可能である。一般に、トリフェニルホスホニウ
ム（ＴＰＰ）脂肪族側鎖の導入は、プロトカテク酸および没食子酸と比較した場合、抗酸
化活性のわずかな減少となった。

一実施形態では、そして一例として、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ酸化還元特性を評価した（表
１）。酸化還元電位は、酸化防止剤が水素原子および／または電子をフリーラジカルに供
与する能力と相関している。一般に、低い酸化電位（Ｅｐ）は優れた酸化防止性能と関連
している。

一実施形態では、ガラス状炭素作用電極を使用して、示差パルスおよびサイクリックボ
ルタンメトリーにより、生理学的ｐＨ７．４で、親酸化防止剤（プロトカテク酸および没
食子酸）およびＡｎｔｉＯｘＢＥＮの酸化挙動を評価した。酸化還元データは、プロトカ
テク酸およびＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_１がカテコール基の存在に特徴的な酸化還元電位（Ｅｐ
）を示した（それぞれＥｐ＝０．２５７および０．２２４Ｖ）と結論付けることを可能に
する（表１）。ピロガロール誘導体（没食子酸、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_２、ＡｎｔｉＯｘＢ
ＥＮ_３）について、酸化還元電位の有意な減少が観察された（Ｅｐ＝０．１６３～０．１
６８Ｖ）（表１）。

一実施形態では、ミトコンドリア向性抗酸化剤ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_１の示差パルスボル
タンメトリー調査では、ただ１つの陽極波が観察された。単一のボルタンメトリー波の発
生は、親の酸と比較したときに、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_１が電極表面に吸着する傾向が低い
ことを示していると思われる。没食子酸とその誘導体（ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_２とＡｎｔｉ
ＯｘＢＥＮ_３）の示差パルスボルタンメトリー調査は、生理学的ｐＨで明確に定義された
２つの陽極波の存在を明らかにした。酸化ピークは、それらの構造中に存在するピロガロ
ール単位の酸化に関連している。

一実施形態では、プロトカテク酸およびＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_１の両方について得られた
サイクリックボルタモグラムは、１つの陽極ピークおよび対応する陰極ピークを示す。陽
極ピーク電位値と陰極ピーク電位値の差は、不可逆的電子移動過程を示している。サイク
リックボルタンメトリー実験は、単一の酸化ピークを示し、逆方向の掃引で明確な還元波
は見られず、没食子酸とＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_２およびＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_３も不可逆的に
酸化されたことを示している。

一実施形態では、得られた結果は、没食子酸、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_２およびＡｎｔｉＯ
ｘＢＥＮ_３が、プロトカテク酸およびＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_１について観察されたものより
も低い酸化還元電位を示したと結論付けることを可能にする。酸化電位の低下は、没食子
酸およびその誘導体（ピロガロール単位）中に追加のフェノール基が存在するためである
と思われる。余分なヒドロキシル基は酸化によって生成したラジカル中間体の安定化を促
進し、それは得られた酸化還元電位の実質的な減少に変換された。

一実施形態では、トリフェニルホスホニウムカチオン側鎖の導入は、ＡｎｔｉＯｘＢＥ
Ｎについて得られた酸化還元電位に注目に値する影響を及ぼさない。得られたデータは、
実施された構造的修飾がカテコールまたはピロガロール環の電子密度に中程度の効果をも
たらすか、あるいは全く影響を及ぼさないことを示唆している。

一実施形態では、ＴＡＣアッセイで得られたデータは、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ酸化還元概
要と一致している。全体的な結果は、安息香酸芳香環上に存在するヒドロキシル置換基の
数が酸化防止特性および電気化学的特性と直接関係しているという仮定を強化する。

一実施形態では、そして一例として、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_１およびＡｎｔｉＯｘＢＥＮ
_２の親油特性を、生理学的ｐＨで示差パルスボルタンメトリー（ＤＰＶ）を使用して評価
した。生体膜を通るイオン性薬剤の移動を模倣するため、使用した技術はしばしば使用さ
れ、これは、そのプロセスが２つの不混和性電解質溶液（ＩＴＩＥＳ）の間の界面で起こ
るためである。最初に水相中に存在していたイオン性薬物（Ｃ＝０．３２ｍＭ）が、１，
６－ジクロロヘキサン（ＤＣＨ）相に転移する転移電位（Ｅ_ｔｒ）は、示差パルスボルタ
ンメトリー（ＤＰＶ）によって測定される。ＩＴＩＥＳモデルでは、薬物の親油性が増す
につれて、転移電位（Ｅ_ｔｒ）は陽性が低下する。

一実施形態では、そして一例として、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_１およびＡｎｔｉＯｘＢＥＮ
_２の伝達電位（Ｅ_ｔｒ）は、それぞれ０．４０５Ｖおよび０．４９５Ｖであった。データ
から、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_２（没食子酸に基づくミトコンドリア標的化抗酸化剤）中の追
加のＯＨ官能基の存在は、転移電位の増加において翻訳されたＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_１（プ
ロトカテク酸に基づくミトコンドリア標的化抗酸化剤）と比較して、親水性を増加させた
と結論づけられた。予想通り、それらの親水性のためにヒドロキシ安息香酸は浸透しない
。

一実施形態では、そして一例として、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮキレート特性、すなわち鉄を
キレートするそれらの能力が決定された。鉄は、ヒドロキシルラジカル（・ＯＨ）を生成
するＦｅｎｔｏｎおよびＨａｂｅｒ－Ｗｅｉｓｓ反応を触媒することができる酸化還元活
性金属であり、それは人間の健康と病気に深刻な影響を与える酸化的損傷事象と結びつい
ている強力な酸化剤種である。ミトコンドリアの鉄恒常性の喪失およびその結果としての
鉄の過負荷は、ミトコンドリアの機能不全、ひいては異なる病理に寄与し得ることに注目
すること。そのため、金属キレート剤、またはこの機構または複数の機構によって作用す
る抗酸化剤の使用は、金属誘発毒性を防ぐための治療的アプローチとして機能することが
できる。異なる作用機序の組み合わせによって、すなわち有害な反応性種の除去によって
、水素供与および／または電子移動によって、および／または酸化促進剤遷移金属（すな
わちＣｕおよびＦｅ）のキレート化によって作用することができるフェノール系酸化防止
剤は、最大の意義であり得る。

一実施形態では、新規のＡｎｔｉＯｘＢＥＮの鉄（ＩＩ）キレート化能力は、参照とし
てＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）を使用するフェロジンアッセイによって評価した
。プロトカテク酸、没食子酸およびミトコンドリア向性抗酸化剤であるＭｉｔｏＱの鉄キ
レート特性も評価した（図２）。それは着色フェロジン－ｆｅ（ＩＩ）錯体の形成を完全
に抑制することができるので、ＥＤＴＡは、溶液中で利用可能な全ての鉄をキレート化す
ることができた。

一実施形態では、ＭｉｔｏＱとは対照的に、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ（カテコールまたはピ
ロガロール系）およびヒドロキシ安息香酸は、第一鉄をキレート化することができた（図
２）。ヒドロキシ安息香酸（プロトカテク酸および没食子酸）は、鉄を効率的にキレート
化することができたが、ピロガロール部分を有するものはより効果的であった。Ａｎｔｉ
ＯｘＢＥＮ（カテコールまたはピロガロール系）もまた、第一鉄をキレート化することが
でき、ピロガロール部分を有するものはより効果的であった。ＡｎｔｉＯｘＢＥＮのキレ
ート特性は、それぞれの前駆体と比較した場合、ＴＰＰカチオンスペーサーの導入によっ
てある程度影響を受けるように思われる。それでも、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_２とＡｎｔｉＯ
ｘＢＥＮ_３は、溶液中に存在する全ての鉄の８０％超えをキレート化することができた。

一実施形態では、そしてＡｎｔｉＯｘＢＥＮの強力な抗酸化能力および鉄キレート化特
性に直面して、創薬最適化プログラムの後に、これらの革新的抗酸化剤は、酸化ストレス
関連の疾患および状態におけるミトコンドリア鉄過負荷の効果の抑制および／またはミト
コンドリア鉄貯蔵の減少に適用され得る薬物候補を導き得ると予測される。

一実施形態では、そして一例として、いくつかのＡｎｔｉＯｘＢＥＮのミトコンドリア
取り込みを、膜電位に応答して単離ラット肝臓ミトコンドリア（ＲＬＭ）において評価し
た。ＡｎｔｉＯｘＢＥＮは、ΔΨによって駆動されるミトコンドリアの内側に蓄積するこ
とができる（図３Ａ）。ミトコンドリアマトリックス内の異なるＡｎｔｉＯｘＢＥＮ蓄積
の概要を測定した。このプロセスは、スペーサー長の増加および芳香族置換パターンと関
連していることがわかった（図３Ｂ）。ピロガロール誘導体ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_２につい
て観察された小さな蓄積比は、スペーサー長の増加によって有意に改善された。次の順位
付けが達成された：ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_２＜ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_１＜ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ
_３。すべてのＡｎｔｉＯｘＢＥＮは、ＭｉｔｏＱと同等の蓄積率を示す（図３Ｂ）。

ミトコンドリア膜は、特に酸化されやすい高濃度の多価不飽和脂肪酸を有し、これはそ
れらがＲＯＳ生成部位の近くに位置しているためである。

一実施形態では、そして一例として、ＲＬＭ膜の脂質過酸化の保護に対するＡｎｔｉＯ
ｘＢＥＮ抗酸化性能を決定した。２つの異なる酸化ストレス剤、ＦｅＳＯ_４／Ｈ_２Ｏ_２／
アスコルベートおよびＡＤＰ／ＦｅＳＯ_４、ならびに２つのエンドポイント、それぞれＴ
ＢＡＲＳ生成および酸素消費を使用した。ＭｉｔｏＱを参照として使用した（図４および
５）。

一実施形態において、ＦｅＳＯ_４／Ｈ_２Ｏ_２／アスコルベートアッセイにおける没食子
酸、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_２およびＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_３は、ミトコンドリア脂質過酸化の
防止において最も有効なミトコンドリア向性安息香酸誘導体であった（図４Ａ）。Ａｎｔ
ｉＯｘＢＥＮ_１およびプロトカテク酸は、ＲＬＭにおけるＴＢＡＲＳ形成を防止するのに
有効ではなかった（図４Ａ）。ＡＤＰ／ＦｅＳＯ_４アッセイでは、どのＡｎｔｉＯｘＢＥ
Ｎも脂質過酸化を効果的に防止しなかった（図４Ｂおよび５）。ＲＬＭにおける脂質過酸
化を抑制するＡｎｔｉＯｘＢＥＮ対ＭｉｔｏＱの能力は、以下の順で減少した：Ｍｉｔｏ
Ｑ＞＞ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_３と没食子酸とＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_２はほぼ等しい＞Ａｎｔｉ
ＯｘＢＥＮ_１とプロトカテク酸はほぼ等しい。一般に、ピロガロールベースのＡｎｔｉＯ
ｘＢＥＮ（図４および５）は、脂質過酸化膜プロセスを遅らせるのにさらに効果的であっ
た。

一実施形態では、そして一例として、いくつかのＡｎｔｉＯｘＢＥＮがミトコンドリア
透過性遷移細孔（ｍＰＴＰ）開口部に及ぼす影響を評価した。一般に、試験したＡｎｔｉ
ＯｘＢＥＮは、試験した全ての濃度について、ｍＰＴＰ開口にそれ自体効果がなかった。

一実施形態では、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_３が、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_１、ＡｎｔｉＯｘＢＥ
Ｎ_２およびＭｉｔｏＱではなく、カルシウム依存性ｍＰＴＰ開口の濃度依存性阻害を引き
起こすことが見出された（図６Ａ～Ｃ）。この効果は、古典的なｍＰＴＰ減感剤であるシ
クロスポリンＡ（１μＭ）の効果に匹敵し、そしてその抗酸化活性またはカルシウムイオ
ンの可能性のあるキレート化に関連している可能性がある。この性質は、例えば移植にお
ける移植片対宿主拒絶反応を防止および治療するために治療上重要であり得、これは通常
移植片におけるミトコンドリア破壊を含む。

細胞代謝は最適なミトコンドリア機能に依存するので、ミトコンドリア機能パラメータ
に対する化合物の効果はそれらの毒性プロファイルについての情報を与え得る。そこで、
ミトコンドリア内膜を損傷することによって、または呼吸鎖、ＡＴＰ合成、ミトコンドリ
ア透過性移行孔（ｍＰＴＰ）プロセスまたは輸出機構を阻害することによってミトコンド
リア機能不全を誘発するそれらの能力を評価した。

一実施形態では、そして一例として、いくつかのＡｎｔｉＯｘＢＥＮおよびＭｉｔｏＱ
のミトコンドリア生体エネルギー、すなわちＲＬＭΔΨおよび呼吸パラメータに対する毒
性効果を測定した。ΔΨは、ミトコンドリア呼吸によって生じる電気化学的勾配の主成分
を表し、そして利用可能な全エネルギーの９０％超を占める。ミトコンドリア呼吸アッセ
イのために、グルタミン酸塩／リンゴ酸塩（錯体Ｉの場合）およびコハク酸塩（錯体ＩＩ
の場合）を基質として使用した。さらに、呼吸制御比（ＲＣＲ、状態３／状態４呼吸）と
して知られるミトコンドリア酸化的リン酸化カップリング指数およびＡＤＰ／Ｏ指数（Ａ
ＴＰ合成と酸素消費との間のカップリング）も計算した。ＡｎｔｉＯｘＢＥＮおよびＭｉ
ｔｏＱを抗酸化剤関連濃度で試験し、１０μＭが最高濃度であった。

一実施形態では、ＭｉｔｏＱについて得られたミトコンドリアの生物エネルギーデータ
を表２に示した。得られた結果は比較分析に用いた。

一実施形態では、ＭｉｔｏＱが、試験したすべての濃度で、ＲＣＲおよびＡＤＰ／Ｏパ
ラメータの有意な減少を引き起こしたことが観察された（表２）。さらに、ＲＬＭを２．
５μＭまでのＭｉｔｏＱ濃度でインキュベートした場合、基質としてグルタミン酸塩／リ
ンゴ酸塩を用いて、状態２、状態４およびオリゴマイシン阻害呼吸の増大ならびに状態３
およびＦＣＣＰ非結合呼吸の減少が観察された（図７Ａ）。コハク酸塩を使用した場合、
試験した最高濃度のＭｉｔｏＱの存在下でＲＬＭは、完全に切り離されていた（図７Ｂ）
。ＭｉｔｏＱの増加した濃度のインキュベーションは、通電時に得られた最大ΔΨの漸進
的な減少をもたらした（表２）。ＡＤＰ誘発脱分極後に再分極は生じなかったので、ＡＤ
Ｐ添加後のΔΨ崩壊が１０μＭＭｉｔｏＱで観察された（表２）。

一実施形態では、そして一例として、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮの毒性試験で使用した最高濃
度は、ＭｉｔｏＱがミトコンドリアの生物エネルギーを完全に破壊したものであった。Ａ
ｎｔｉＯｘＢＥＮ毒性試験のデータを表３～５に示す。

一実施形態では、一例として、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮは、グルタミン酸塩／リンゴ酸塩活
性化の後、わずかなΔΨ用量依存性脱分極（１０～２０ｍＶ）を引き起こし、一方、コハ
ク酸塩活性化の下で５～２０ｍＶのわずかな過分極を促進した。それでも、ＡｎｔｉＯｘ
ＢＥＮはＲＬＭΔΨに大きな影響を与えないことに注意することが重要である。

一実施形態では、そして例として、状態２、状態３、状態４、オリゴマイシン阻害呼吸
およびミトコンドリア呼吸アッセイ、ならびにコハク酸塩（基質ＦＣＣＰ刺激呼吸として
使用した）についてのＡｎｔｉＯｘＢＥＮおよびＭｉｔｏＱ速度を図７ＡおよびＢに示す
。

一実施形態では、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮが用量依存的に呼吸鎖の変化を誘導することが判
明した。一般に、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮは、主にそれらの親油性に依存しそしてそれらの芳
香族パターン（カテコール対ピロガロール）に頼らないプロセスにおいて、２．５μＭよ
り高い濃度で状態２、状態４およびオリゴマイシン－抑制呼吸を増加させた。しかしなが
ら、観察された効果は錯体Ｉ基質を用いることによってより明白であったことを強調しな
ければならない。（図７ＡおよびＢ）。

一実施形態では、そして一例として、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮが、単離されたＲＬＭの呼吸
プロファイルにおける用量依存的変化を誘導することが示された。観察された効果のいく
つかは、おそらく膜透過化効果またはプロトン往復活性から生じ得る。この効果は、非リ
ン酸化呼吸の刺激および小さなΔΨ脱分極をもたらし得る。その結果、すべての試験濃度
で、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮは、ＲＣＲの有意な減少を引き起こした。さらに、ＡＤＰ／Ｏ比
の変化によって評価されるように、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ（１０μＭ）もミトコンドリアの
リン酸化系に影響を及ぼした。

一実施形態では、そして一例として、より高い濃度で観察されたＡｎｔｉＯｘＢＥＮミ
トコンドリア毒性は、スペーサーの親油性および／またはＴＰＰ部分の存在と関連し得、
そして、たとえあるとしても、それら（カテコール対ピロガロール）とほとんど関係がな
い。それでもなお、ＴＰＰカチオンおよび親油性スペーサーの存在は、効率的で時には広
範なミトコンドリア蓄積に不可欠である。

一実施形態では、そして一例として、ミトコンドリア標的抗酸化剤、ＡｎｔｉＯｘＢＥ
ＮおよびＭｉｔｏＱは、より高い濃度で、ミトコンドリア内膜に損傷を引き起こすことに
よって、または呼吸鎖、ＡＴＰ合成もしくは輸出機構を阻害することによってミトコンド
リア呼吸を妨害し得ることが見出された。

一実施形態では、ＭｉｔｏＱは、５μＭのＲＬＭにおける脂質過酸化を効果的に阻害し
たが（図４および５）、２．５μＭのＲＬＭのミトコンドリア生体エネルギー装置に毒性
を引き起こしたことを強調しなければならない（図７ＡおよびＢおよび表２）。

一実施形態では、研究中のＡｎｔｉＯｘＢＥＮについて、ＲＬＭ毒性は、それらの機序
とは無関係に、抗酸化効果を発揮するのに必要な濃度よりも高い濃度で検出されたと結論
付けられた。

一実施形態では、そして一例として、一般に、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮは、ＭｉｔｏＱより
も良好な安全プロファイルを示したと結論付けられた。

一実施形態では、そして一例として、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮの細胞傷害性は、肝細胞癌由
来のヒト肝細胞（ＨｅｐＧ２）の単層培養物およびＳＲＢ法を用いて評価した（図８）。
データから、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮはＨｅｐＧ２細胞に対して低い毒性を示したと結論づけ
られた（図８）。ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_１は、より低い濃度で細胞増殖のわずかな阻害を促
進するが、１００μＭより高い濃度では細胞増殖を刺激した。注目すべきことに、２５０
μＭより低い濃度では、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_２は、細胞増殖を有意に刺激したが、２５０
μＭより高い濃度では細胞増殖を有意に阻害した。ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_３は、２５０μＭ
より高い濃度で、細胞増殖を有意に阻害した。

一実施形態では、そして一例として、その特性（表１）およびＲＬＭ蓄積率（図３）に
基づくＡｎｔｉＯｘＢＥＮ毒性は、化合物の親油性によって媒介され得ると結論付けられ
た。一般に、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮにはＨｅｐＧ２細胞に対する安全域がある。

一実施形態では、そして一例として、安息香酸（プロトカテク酸および没食子酸）の構
造的修飾は、それらのミトコンドリア向性特性の有意な改善をもたらすと結論付けられた
。ＡｎｔｉＯｘＢＥＮは、抗酸化活性が高く、ミトコンドリアの蓄積が高く、そして毒性
が低い。

一実施形態では、全体的な結果は、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮがオルガネラ膜貫通電位によっ
て駆動されるミトコンドリア内に蓄積され、脂質過酸化を防止し、低い固有毒性を呈する
ことを示した。ＡｎｔｉＯｘＢＥＮは、それらの親化合物、例えばプロトカテク酸および
没食子酸よりも高い親油性と、類似の抗酸化および鉄キレート化特性を示す。

一実施形態では、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮは、加齢およびいくつかの病状、例えば糖尿病、
非アルコール性脂肪性肝疾患、心血管疾患、急性膵炎およびアルツハイマー病またはパー
キンソン病および筋萎縮性側索硬化症を含む神経変性疾患に関連するミトコンドリア酸化
ストレスを予防または遅延することを目的とするミトコンドリア向性抗酸化剤である。

一実施形態では、および例として使用されるＡｎｔｉＯｘＢＥＮシリーズから、ピロガ
ロールベースの類似体は、ミトコンドリア酸化関連障害における治療的用途を有するファ
ーストクラスの薬物の開発のための潜在的な候補であると予測される。

得るために従った合成手順の例、ならびにいくつかの中間体およびＡｎｔｉＯｘＢＥＮ
を提供する。

一実施形態では、化合物の構造的キャラクタリゼーションは、分光分析法によって達成
した。^１Ｈおよび^１３ＣスペクトルＮＭＲスペクトルは室温で取得し、それぞれ４００お
よび１００ＭＨｚで動作するＢｒｕｋｅｒＡｖａｎｃｅＩＩＩで記録した。化学シフ
トは、内部標準としてのテトラメチルシラン（ＴＭＳ）に対するδ（ｐｐｍ）値で表され
、カップリング定数（Ｊ）はＨｚで与えられる。割り当てはＤＥＰＴ（distortionless e
nhancement by polarization transfer）からも行った（下線付きの値）。質量スペクト
ル（ＭＳ）は、ＢｒｕｋｅｒＭｉｃｒｏｔｏｆ（ＥＳＩ）またはＶａｒｉａｎ３２０
－ＭＳ（ＥＩ）装置で記録し、重要なフラグメントのｍ／ｚ（％相対）で表した。

一実施形態では、反応の進行は、いくつかの比率での、ジクロロメタン、酢酸エチルお
よびジクロロメタン／メタノール中のアルミニウムシリカゲルシート６０Ｆ２５４プレ
ート（Ｍｅｒｃｋ、Ｄａｒｍｓｔａｄｔ、Ｇｅｒｍａｎｙ）上での薄層クロマトグラフィ
ー（ＴＬＣ）分析によって評価した。スポットはＵＶ検出（２５４および３６６ｎｍ）を
用いて検出した。フラッシュカラムクロマトグラフィーは、シリカゲル６０（０．０４０
～０．０６３ｍｍ）（ＣａｒｌｏＥｒｂａＲｅａｃｔｉｆｓ－ＳＤＳ、フランス
）を使用して実施した。

一実施形態では、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_１およびＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_２獲得は、図１Ａに
示す４段階合成戦略に従って行った。最初に、中間体化合物３および４を以下のように合
成した：３，４－ジメトキシ安息香酸（１）または３，４，５－トリメトキシ安息香酸（
２）、特に１ｍｍｏｌを、ジクロロメタン、特に４０ｍＬのジクロロメタンに溶解し、ト
リエチルアミン、特に２ｍｍоｌのトリエチルアミンを添加した。氷浴中に保ったまま、
エチルクロロホルメート、特に２ｍｍоｌのエチルクロロホルメートをその撹拌した溶液
に滴加した。特に室温で２時間撹拌した後、その混合物を再度冷却し、６－アミノヘキサ
ン－１－オール、特に２ｍｍｏｌの６－アミノヘキサン－１－オールを加えた。その反応
物を、特に室温で１０時間撹拌した。その混合物をジクロロメタン、特に３×２０ｍＬで
抽出した。有機相を合わせ、水、５％ＮａＨＣＯ_３、特に２０ｍＬの５％ＮａＨＣＯ_３お
よび１ＭのＨＣｌ、特に２０ｍＬの１ＭのＨＣｌで洗浄した。その有機相を合わせ、乾燥
し、そして濾過後、その溶媒を蒸発させて白色の残渣を得た。その反応をＴＬＣ、特にシ
リカゲル、酢酸エチルで追跡した。

一実施形態では、Ｎ－（６－ヒドロキシヘキシル）－３，４－ジメトキシベンズアミド
（３）のキャラクタリゼーションは以下の通りである。収率７４％。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ = 1.39-1.41 (4H, m, (CH₂)₂(CH₂)₂OH), 1.55-1.63 (4H,
m, NCH₂CH₂(CH₂)₂CH₂), 1.99 (1H, s, OH), 3.40-3.45 (2H, m, NCH₂), 3.63 (2H, t, J
= 6.5 Hz, CH₂OH), 3.91 (6H, s, 2×OCH₃), 6.38 (1H, t, J = 5.2 Hz, CONH), 6.85 (1
H, d, J = 8.4 Hz, H(5)), 7.29 (1H, dd, J = 8.4 Hz, J = 2.0 Hz, H(6)), 7.43 (1H,
d, J = 2.0 Hz, H(2)). ¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃): δ = 25.4 (CH₂(CH₂)₂OH), 26.7 (N
(CH₂)₂CH₂), 29.8 (NCH₂CH₂), 32.6 (CH₂CH₂OH), 40.0 (NCH₂), 56.1 (2×OCH₃), 62.7 (
CH₂OH), 110.4 (C(5)), 110.7 (C(2)), 119.4 (C(6)), 127.5 (C(1)), 149.0 (C(3)), 15
1.7 (C(4)), 167.3 (CONH). EI-MS m/z (%): 281 (M・＋), 208 (16), 195 (21), 194 (1
00), 180 (16), 165 (75), 164 (55), 121 (15).

一実施形態において、Ｎ－（６－ヒドロキシヘキシル）－３，４，５－トリメトキシベ
ンズアミド（４）のキャラクタリゼーションは以下の通りである。収率８２％。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ = 1.40-1.43 (4H, m, (CH₂)₂(CH₂)₂OH), 1.54-1.66 (4H,
m, NCH₂CH₂(CH₂)₂CH₂), 1.81 (1H, s, OH), 3.41-3.46 (2H, m, NCH₂), 3.64 (2H, t, J
= 6.4 Hz, CH₂OH), 3.87 (3H, s, OCH₃), 3.89 (6H, s, 2×OCH₃), 6.28 (1H, t, J = 5.
1 Hz, CONH), 7.00 (2H, s, H(2)およびH(6)); ¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃): δ = 25.4 (
CH₂(CH₂)₂OH), 26.7 (NCH₂CH₂CH₂), 29.8 (NCH₂CH₂), 32.6 (CH₂CH₂OH), 40.1 (NCH₂), 5
6.4 (2×OCH₃), 61.0 (OCH₃), 62.8 (CH₂OH), 104.5 (C(2) および C(6)), 130.4 (C(1))
, 140.9 (C(4)), 153.3 (C(3) および C(5)), 167.5 (CONH) および EI-MS m/z (%): 312
(M・＋), 225 (38), 224 (34), 211 (59), 196 (49), 195 (100).

一実施形態では、ブロモヘキシルベンズアミド化合物５および６を得るための一般的合
成手順は以下の通りである：Ｎ－（６－ヒドロキシヘキシル）－３，４－ジメトキシベン
ズアミド（３）、またはＮ－（６－ヒドロキシヘキシル）－３，４，５－トリメトキシベ
ンズアミド（４）、特に１ｍｍｏｌのヒドロキシヘキシルベンズアミド３、またはヒドロ
キシヘキシルベンズアミド４、および１，２－ジブロモテトラクロロエタン、特に１ｍｍ
ｏｌの１，２－ジブロモテトラクロロエタンを、ＴＨＦ、特に２０ｍＬのＴＨＦに溶解し
た。１，２－ビス（ジフェニルホスフィン）エタン（ジホス）、特に０．５ｍｍｏｌを添
加した後、その反応を特に室温で２０時間撹拌した。次いで、その反応混合物を、特にセ
ライトパッドを通して濾過した。濾液を蒸発させた後、油状残渣を得た。特に溶出系とし
て酢酸エチルを用いるシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによりその油状物を精製
した。その目的化合物を含む画分を集め、溶媒を蒸発させ、そして生成物をｎ－ヘキサン
から再結晶させた。その反応をＴＬＣ、特にシリカゲル、酢酸エチルで追跡した。

一実施形態では、Ｎ－（６－ブロモヘキシル）－３，４－ジメトキシベンズアミド（５
）のキャラクタリゼーションは以下の通りである。収率６６％。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ = 1.38-1.53 (4H, m, (CH₂)₂(CH₂)₂Br), 1.59-1.67 (2H,
m, NCH₂CH₂), 1.83-1.90 (2H, m, CH₂CH₂Br), 3.39-3.46 (4H, m, NCH₂(CH₂)₄CH₂Br), 3.
92 (6H, s, 2×OCH₃), 6.25 (1H, t, J = 5.4 Hz, CONH), 6.85 (1H, d, J = 8.4 Hz, H(
5)), 7.27 (1H, dd, J = 8.4 Hz , J = 2.0 Hz, , H(6)), 7.43 (1H, d, J = 2.0 Hz, H(
2)); ¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃): δ = 26.2 (NCH₂CH₂CH₂), 28.0 (CH₂(CH₂)₂Br), 29.7
(NCH₂CH₂), 32.7 (CH₂CH₂Br), 33.9 (CH₂Br), 40.0 (NCH₂), 56.1 (OCH₃×2), 110.3 (C(
5)), 110.7 (C(2)), 119.2 (C(6)), 127.5 (C(1)), 149.1 (C(3)), 151.7 (C(4)), 167.2
(CONH) および EI-MS m/z (%): 345 (M・＋), 343 (24), 264 (36), 195 (34), 194 (19
), 181 (40), 166 (24), 165 (100).

一実施形態では、Ｎ－（６－ブロモヘキシル）－３，４，５－トリメトキシベンズアミ
ド（６）のキャラクタリゼーションは以下の通りである。収率７５％。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ = 1.37-1.52 (4H, m, (CH₂)₂(CH₂)₂Br), 1.59-1.66 (2H,
m, NCH₂CH₂), 1.83-1.90 (2H, m, CH₂CH₂Br), 3.39-3.45 (4H, m, NCH₂(CH₂)₄CH₂Br), 3.
87 (3H, s, OCH₃), 3.88 (6H, s, 2×OCH₃), 6.40 (1H, t, J = 5.3 Hz, CONH), 7.01 (2
H, s, H(2) および H(6)); ¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃): δ = 26.2 (NCH₂CH₂CH₂), 27.9
(CH₂(CH₂)₂Br), 29.6 (NCH₂CH₂), 32.6 (CH₂CH₂Br), 33.9 (CH₂Br), 40.1 (NCH₂), 56.4
(2×OCH₃), 61.0 (OCH₃), 104.4 (C(2)およびC(6)), 130.3 (C(1)), 140.8 (C(4)), 153.
2 (C(3)およびC(5)), 167.3 (CONH) および EM/EI m/z (%): 374 (M・＋), 372 (15), 22
5 (18), 224 (100), 210 (18), 195 (32), 194 (48).

一実施形態では、丸底フラスコ内でブロモヘキシルベンズアミド５または６（１ｍｍｏ
ｌ）をトリフェニルホスフィン（ＰＰｈ３）（１ｍｍｏｌ）と混合し、４８時間、約１２
０℃の温度に加熱した。その残留物を勾配溶離（酢酸エチル：メタノール）を用いるシリ
カゲルフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。所望の化合物を含有する画分を集
めた後、溶媒を蒸発乾固させた。その反応をＴＬＣ（シリカゲル、酢酸エチル：メタノー
ル（９：１）およびジクロロメタン：メタノール（９：１））で追跡した。

一実施形態では、６－（３，４－ジメトキシベンズアミド）ヘキシルトリフェニルホス
ホニウムブロミド（７）のキャラクタリゼーションは以下の通りである。収率６５％。
¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ = 1.40-1.72 (8H, m, NCH₂(CH₂)₄), 3.33-3.37 (2H, m, C
H₂P^＋Ph₃), 3.42-3.49 (2H, m, NCH₂), 3.83 (6H, s, 2×OCH₃), 6.98 (1H, d, J = 8.5
Hz, H(5)), 7.46 (1H, d, J = 2.1 Hz, H(2)), 7.49 (1H, dd, J = 8.5, J = 2.1 Hz, Hz
, H(6)), 7.73-7.89 (15H, m, PPh₃); ¹³C NMR (100 MHz, CD₃OD): δ = 22.7 (d, J_CP =
51.0 Hz, CH₂P^＋Ph₃), 23.5 (d, J_CP = 4.3 Hz, CH₂(CH₂)₂P^＋Ph₃), 27.2 (CH₂(CH₂)₃P
^＋Ph₃), 30.3 (NCH₂CH₂), 31.2 (d, J_CP = 16.3 Hz, CH₂CH₂P^＋Ph₃), 40.8 (NCH₂), 56.7
(2×OCH₃), 112.0 (C(5)), 112.2 (C(2)), 120.0 (d, J_CP= 86.2 Hz, C(1’)), 122.0 (
C(6)), 128.1 (C(1)), 131.6 (d, J_CP = 12.6 Hz, C(3’) および C(5’)), 134.9 (d, J
_CP = 10.0 Hz, C(2’) および C(6’)), 136.3 (d, J_CP = 3.0 Hz, C(4’)), 150.2 (C(3
)), 153.4 (C(4)), 169.5 (CONH) および EI-MS m/z (%): 511 (M・＋), 277 (37), 263
(40), 262 (100), 183 (87), 165 (47), 151 (35), 108 (44), 107 (29), 77 (26), 52 (
26).

一実施形態では、６－（３，４，５－トリメトキシベンズアミド）ヘキシルトリフェニ
ルホスホニウムブロミド（８）のキャラクタリゼーションは以下の通りである。収率７９
％。
¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ = 1.41-1.73 (8H, m, NCH₂(CH₂)₄), 3.37-3.40 (2H, m, C
H₂P^＋Ph3), 3.50-3.56 (2H, m, NCH₂), 3.94 (3H, s, OCH₃), 3.95 (9H, s, 2×OCH₃), 7
.28 (2H, s, H(2) および H(6)), 7.75-7.90 (15H, m, PPh₃); ¹³C NMR (100 MHz, CD₃OD
): δ = 22.5 (d, J_CP = 50.8 Hz, CH₂P^＋Ph₃), 23.3 (d, J_CP = 4.0 Hz, CH₂(CH₂)₂P^＋P
h₃), 27.1 (CH₂(CH₂)₃P^＋Ph₃), 30.0 (NCH₂CH₂), 30.9 (d, J_CP = 16.2 Hz, CH₂CH₂P^＋Ph
₃), 40.6 (NCH₂), 57.0 (2×OCH₃), 61.1 (OCH₃), 106.0 (C(2) およびC(6)), 119.7 (d,
J_CP= 86.1 Hz, C(1’)), 130.8 (C(1)), 131.4 (d, J_CP = 12.5 Hz, C(3’) および C(5
’)), 134.7 (d, J_CP = 10.0 Hz, C(2’) および C(6’)), 136.1 (d, J_CP= 2.8 Hz, C(4
’)), 141.6 (C(4)), 154.1 (C(3) および C(5)), 168.7 (CONH) および EI-MS m/z (%):
448 (M・＋), 446 (41), 278 (35), 277 (81), 276 (27), 275 (58), 263 (29), 262 (1
00), 185 (31), 184 (25), 183 (94), 152 (21), 108 (36), 96 (53), 94 (54), 77 (24)
, 58 (41).

一実施形態では、トリフェニルホスホニウム塩７または８、特に１ｍｍｏｌのトリフェ
ニルホスホニウム塩７、または１ｍｍｏｌのトリフェニルホスホニウム塩８を無水ジクロ
ロメタン、特に１５ｍＬの無水ジクロロメタンに溶解した。その反応混合物をアルゴン下
で撹拌し、－７０℃より低い温度に冷却した。ジクロロメタン中の三臭化ホウ素、特に５
～７ｍｍｏｌの三臭化ホウ素１Ｍ溶液をその溶液に添加し、その反応を特に－７０℃で１
０分間維持した。室温に達した後、その反応を１２時間続けた。その後、水、特に４０ｍ
Ｌの水を慎重に添加することにより反応を終了させた。水を除去した後、得られた生成物
をメタノールに溶解し、乾燥し、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。その残渣を、特に、
勾配溶離を用いるシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー、特にジクロロメタン：メタ
ノールにより精製した。所望の化合物を含有する画分を集めた後、溶媒を蒸発乾固させた
。その反応をＴＬＣ、特にシリカゲル、ジクロロメタン：メタノール（９：１）で追跡し
た。得られた残渣をエチルエーテル／メタノールから結晶化して、対応するトリフェニル
ホスホニウムブロミド塩を得た。

一実施形態では、６－（３，４－ジヒドロキシベンズアミド）ヘキシルトリフェニルホ
スホニウムブロミド（ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_１）の構造的キャラクタリゼーションは以下の
通りである。収率６０％。
¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ = 1.35-1.47 (2H, m, N(CH₂)₄CH₂), 1.50-1.75 (6H, m, N
CH₂(CH₂)₃), 3.33-3.47 (4H, m, NCH₂(CH₂)₄CH₂P^＋Ph3), 6.79 (1H, d, J = 8.3 Hz, H(5
)), 7.18 (1H, dd, J = 8.3 Hz, J = 2.2 Hz, H(6)), 7.26 (1H, d, J = 2.2 Hz, H(2)),
7.69-7.92 (15H, m, PPh₃); ¹³C NMR (100 MHz, CD₃OD): δ = 22.7 (d, J_CP = 51.2 Hz
, CH₂P^＋Ph₃), 23.4 (d, J_CP = 4.5 Hz, CH₂(CH₂)₂P^＋Ph₃), 27.0 (CH₂(CH₂)₃P^＋Ph₃), 3
0.1 (NCH₂CH₂), 31.0 (d, J_CP = 16.2 Hz, CH₂CH₂P^＋Ph₃), 40.0 (NCH₂), 115.7 (C(5)),
115.8 (C(2)), 120.0 (d, J_CP = 86.4 Hz, C(1’)), 120.5 (C(6)), 126.9 (C(1)), 131
.5 (d, J_CP = 12.5 Hz, C(3’) および C(5’)), 134.8 (d, J_CP = 9.9 Hz, C(2’) およ
び C(6’)), 136.3 (d, J_CP= 3.0 Hz, C(4’)), 146.3 (C(3)), 150.1 (C(4)), 170.3 (C
ONH) および ME/ESI m/z (%): 499 (M＋＋H－ Br, 51), 498 (M＋－Br, 98), 399 (31),
397 (31), 291 (100), 277 (67).

一実施形態では、６－（３，４，５－トリヒドロキシベンズアミド）ヘキシルトリフェ
ニルホスホニウムブロミド（ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_２）の構造的キャラクタリゼーションは
以下の通りである：収率５０％。
¹H NMR (400 MHz, DMSO): δ = 1.23-1.50 (8H, m, NCH₂(CH₂)₄), 3.11-3.16 (2H, m, CH
₂P^＋Ph3), 3.54-3.59 (2H, m, NCH₂), 6.81 (2H, s, H(2) および H(6)), 7.74-7.91 (15
H, m, PPh₃), 8.00 (1H, t, J = 5.1 Hz, CONH); ¹³C NMR (100 MHz, DMSO): δ = 20.2
(d, J_CP = 49.8 Hz, CH₂P^＋Ph₃), 21.8 (d, J_CP = 4.1 Hz, CH₂(CH₂)₂P^＋Ph₃), 25.6 (CH
₂(CH₂)₃P^＋Ph₃), 28.9 (NCH₂CH₂), 29.6 (d, J_CP = 16.6 Hz, CH₂CH₂P^＋Ph₃), 38.9 (NCH
₂), 106.7 (C(2) および C(6)), 118.6 (d, J_CP= 85.6 Hz, C(1’)), 125.1 (C(1)), 130
.3 (d, J_CP = 12.4 Hz, C(3’) および C(5’)), 133.6 (d, J_CP = 10.1 Hz, C(2’) お
よび C(6’)), 134.9 (d, J_CP= 2.7 Hz, C(4’)), 136.1 (C(4)), 145.4 (C(3) および C
(5)), 166.3 (CONH) および ME/ESI m/z (%): 526 (M＋＋Na－Br, 62), 515 (M＋＋H－Br
, 30), 514 (M＋－Br, 100), 277 (24).

一実施形態では、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ_３は、図１Ｂに示す４段階合成戦略に従って行っ
た。最初に、３，４，５－トリメトキシ安息香酸（２）（５００ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）
を４℃でＤＭＦ（３．９ｍＬ）に溶解し、次いでＣＨ_２Ｃｌ_２（３．９ｍＬ）中の、Ｎ，
Ｎ－ジエチルプロパン－２－アミン（０．４２１ｍｌ、２．３ｍＬ）およびＰｙＢＯＰ（
１６６８ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を氷浴中に保ち、０．５時間撹
拌した。この後、ｔｅｒｔ－ブチル（６－アミノヘキシル）カルバメート（０．５２９ｍ
ｌ、２．３ｍｍｏｌ）を加え、その混合物を室温まで温めた。その反応を１８時間撹拌し
ながら続けた。次にその混合物をジクロロメタン（２０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ
_３溶液（２×１０ｍＬ）で洗浄した。その有機相をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過し、そし
て減圧下で濃縮した。その残渣をフラッシュクロマトグラフィー（５０％ＡｃＯＥｔ／石
油エーテル）によって精製し、７３％の収率を得た。

一実施形態では、化合物ｔｅｒｔ－ブチル（６－（３，４，５－トリメトキシベンズア
ミド）ヘキシル）カルバメート）（９）の構造的キャラクタリゼーションは以下の通りで
ある。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ = 7.07 (2H, s, H5, H6), 6.55 (1H, s, H1’), 4.59 (1H
, s, H8’), 3.91 (6H, s, 2×OCH₃), 3.88 (3H, s, OCH₃), 3.43 (2H, dd, J = 13.0, 6
.9 Hz, H2’), 3.13 (1H, dd, J = 12.6, 6.2 Hz, H7’), 1.67-1.58 (2H, m, H3’), 1.
53-1.32 (15H, m, H4’, H5’, H6’, NHCOOC(CH₃)); および ¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃)
: δ = 167.3 (CONH), 156.3 (NHCOOC(CH₃)), 153.3 (C3, C5), 140.9 (C4), 130.4 (C1)
, 104.5 (C2, C6), 79.3 (NHCOOC(CH₃)), 61.0 (OCH₃), 56.4 (2×OCH₃), 40.0 (C7’),
39.7 (C1’), 30.2 (C2’), 29.5 (C6’), 28.5 (NHCOOC(CH₃)), 26.1 (C3’), 25.8 (C4
’).

一実施形態では、Ｎ－（６－アミノヘキシル）－３，４，５－トリメトキシベンズアミ
ド（１０）の合成は以下の通りであった：脱保護工程は、ＣＨ_２Ｃｌ_２（８ｍｌ）中の９
（１ｇ、２．４ｍｍｏｌ）の溶液にＴＦＡ（４ｍｌ）を添加して実施した。その反応を室
温で１時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ_３溶液で中和した後、その有機相を分離した。その
有機相をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。その残渣をフラッシ
ュクロマトグラフィー（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨ_２Ｃｌ_２）により９８％の収率で精製した
。

一実施形態では、化合物Ｎ－（６－アミノヘキシル）－３，４，５－トリメトキシベン
ズアミド（１０）の構造的キャラクタリゼーションは以下の通りである。
¹H NMR (400 MHz, MeOD): δ = 7.19 (2H, s, H2, H6), 3.89 (6H, s, 2×OCH₃), 3.80 (
3H, s, OCH₃), 3.39 (1H, t, J = 7.1 Hz, H2), 2.99-2.90 (2H, m, H7), 1.77-1.55 (4H
, m, H3, H6), 1.50-1.36 (4H, m, H4, H5); および¹³C NMR (100 MHz, MeOD): δ = 169
.4 (CONH), 154.3 (C3, C5), 141.8 (C4’), 131.1 (C1), 105.9 (C2, C6), 61.2 (OCH₃)
, 56.7 (2×OCH₃), 40.8 (C7’), 40.6 (C1’), 30.2 (C6’, 28.4 (C3’), 27.4 (C4’)
, 27.0 (C5’).

一実施形態では、［５－（６－（３，４，５－トリメトキシベンズアミド）ヘキシルア
ミノ）カルボニルペンチル］トリフェニルホスホニウムブロミド（１２）の合成は以下の
通りであった：４℃のＤＭＦ（７．４ｍＬ）中の１０（６８９ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）の
溶液に、ＣＨ_２Ｃｌ_２（７．４ｍＬ）中の、Ｎ，Ｎ－ジエチルプロパン－２－アミン（０
．４７６ｍＬ、２．７ｍｍｏｌ）およびＰｙＢＯＰ（１５７２ｍｇ、２．７ｍｍｏｌ）を
添加した。その混合物を氷浴中に保ち、０．５時間撹拌した。この後、化合物１１（１２
１８、２．７ｍｍｏｌ）を添加し、次いでその反応を室温まで加熱した。その反応を２０
時間撹拌し続けた。次にその混合物をＡｃＯＥｔ（４０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ
_３溶液（２×１０ｍＬ）で洗浄した。その有機相をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過し、そし
て減圧下で濃縮した。その残渣をフラッシュクロマトグラフィー（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨ
_２Ｃｌ_２）で精製した。収率：６３％。

一実施形態では、化合物［５－（６－（３，４，５－トリメトキシベンズアミド）ヘキ
シルアミノ）カルボニルペンチル］トリフェニルホスホニウムブロミド（１２）の構造的
キャラクタリゼーションは以下の通りである。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ = 7.85-7.76 (3H, m, H4”), 7.73-7.59 (12H, m, H2”,
H3”, H5”, H6”), 7.12 (2H, s, H2, H6), 6.93 (1H, t, J= 5.7 Hz, H1’), 6.26 (1H
, t, J = 5.7 Hz, H8’), 3.88 (6H, s, 2×OCH₃), 3.85 (1H, s, OCH₃), 3.39 (dd, J =
13.2, 6.7 Hz, 1H), 3.19-3.05 (4H, m, H7’, H14’), 2.14 (1H, t, J = 7.1 Hz, H10
’), 1.69-1.26 (14H, m, H3’, H4’, H5’, H6’ H11’, H12’, H13’ );および ¹³C
NMR (100 MHz, CDCl₃): δ = 173.3 (C9’), 167.2 (PhCONH), 153.1 (C3, C5), 140.4 (
C4), 135.4 (d, J_CP = 2.9 Hz, C4”), 133.4 (d, J_CP = 9.9 Hz, C2”,C6”), 130.7 (d
, J_CP = 12.6 Hz, C3”,C5”), 130.4 (C1), 117.9 (d, J_CP = 86.2 Hz, C1”), 104.5 (
C2, C6), 60.9 (OCH₃), 56.4 (2×OCH₃), 39.7 (C2’), 39.0 (C7’), 36.3 (C10’), 30
.0 (C3’), 29.8 (C6’), 28.9 (d, J = 5.0 Hz, C12’), 26.6 (C4’), 25.9 (C5’), 2
4.9 (C11’), 22.3 (d, J = 43.5 Hz, C14’), 22.1 (d, J = 12.5 Hz, C13’).

一実施形態では、［５－（６－（３，４，５－トリヒドロキシベンズアミド）ヘキシル
アミノ）カルボニルペンチル］トリフェニルホスホニウムブロミド（ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ
_３）を以下のように合成した。１．０ｇ、１．４ｍｍｏｌを７．６ｍｌの無水ジクロロメ
タンに溶解した。その反応混合物をアルゴン下で撹拌しそして－７５℃より低い温度に冷
却した。三臭化ホウ素（ジクロロメタン中の１Ｍ溶液４．３ｍｌ；４．３ｍｍｏｌ）溶液
を滴加し、その反応を－７５℃で１０分間維持した。添加が完了したら、その反応を－７
０℃で１０分間保持し、次いで１２時間連続で撹拌しながら室温まで温めた。その後、水
（２０ｍＬ）を慎重に添加することにより反応を終了させた。水を除去した後、得られた
生成物をメタノールに溶解し、そして無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過し、そして溶媒を
蒸発させた。その残渣をフラッシュクロマトグラフィー（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨ_２Ｃｌ_２
）によって精製し、５５％の収率が得られた。

一実施形態では、化合物［５－（６－（３，４，５－トリヒドロキシベンズアミド）ヘ
キシルアミノ）カルボニルペンチル］トリフェニルホスホニウムブロミド（ＡｎｔｉＯｘ
ＢＥＮ_３）の構造的キャラクタリゼーションは以下の通りである。
¹H NMR (400 MHz, MeOD): δ = 7.92 - 7.83 (3H, m, H4”), 7.82-7.70 (12H, m, 12H,
m, H2”, H3”, H5”, H6”), 6.83 (2H, s, H2, H6), 3.43-3.34 (2H, m, H14’), 3.33
-3.25 (2H, m, H2’), 3.14 (1H, t, J = 6.9 Hz, H7’), 2.15 (1H, t, J = 7.0 Hz, H1
0’), 1.72-1.28 (14H, m, H3’, H4’, H5’, H6’ H11’, H12’, H13’); ¹³C NMR (1
00 MHz, MeOD): δ = 176.3 (C9), 170.5 (PhCOONH), 146.5 (C3, C5), 138.1(C4), 136.
1 (d, J= 2.9 Hz, C4”), 134.7 (d, J_CP = 10.0 Hz, C2”, C6”), 131.5 (d, J_CP = 12
.6 Hz, C3”, C4”), 125.4 (C1), 119.7 (d, J_CP = 86.3 Hz, C1”), 107.8 (C2, C6),
40.8 (C2’), 40.5 (C7’), 36.2 (C10’), 30.9 (C3’), 30.8 (C6’), 30.2 (C4’), 2
9.9 (C5’), 27.4 (d, J_CP = 2.5 Hz, C12’), 26.1 (C11’), 23.1 (d, J_CP = 4.2 Hz,
C13’), 22.6 (d, J_CP = 51.3 Hz, C14’); ESI /MS m/z (%): 628 (M^＋＋H－Br^－, 38),
627 (M^＋－Br, 100), 556 (35), 547 (46);および ESI /HRMS m/z 計算値 C₃₇H₄₄N₂O₅P
^＋ (M^＋－Br^－): 627.2982;実測値 627.2970.

ＡｎｔｉＯｘＣＩＮのラジカル捕捉活性は、ＤＰＰＨ^・、ＡＢＴＳ^・＋およびＧＯ^・ラ
ジカルに基づく総抗酸化能アッセイによって評価した。これらすべての方法は、抗酸化剤
によるラジカル（ＤＰＰＨ^・、ＡＢＴＳ^・＋またはＧＯ^・）の失活に起因する吸光度の減
少の分光光度測定を含む。結果はＩＣ_５０で表され、これはラジカルの量を５０％減少さ
せるのに必要な最小抗酸化剤濃度として定義される。抗酸化アッセイは、ＢｉｏＴｅｃ
ｈＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ製のマルチプレートリーダー（ＰｏｗｅｒｗａｖｅＸＳ
ＭｉｃｒｏｐｌａｔｅＲｅａｄｅｒ）で行った。

一実施形態では、ＤＰＰＨラジカル捕捉活性を以下のようにして行った：濃度が増加す
る（０μＭ～５００μＭの範囲）試験化合物の溶液をエタノール中で調製した。ＤＰＰＨ
エタノール溶液（６．８５ｍＭ）も調製し、次いで５１５ｎｍで０．７２±０．０２の吸
光度に達するように希釈した。各化合物溶液（２０μＬ）を１８０μＬのＤＰＰＨ・溶液
に３連で添加し、５１５ｎｍの吸光度を４５分かけて１分ごとに記録した。ラジカルの阻
害率は、１００％のラジカルに相当するブランク（２０μＬのエタノールと１８０μＬの
ＤＰＰＨ・溶液）と試験化合物溶液との比較を基にした。ＩＣ_５０値の決定のために用量
反応曲線を確立した。データは３回の独立した実験の平均値±ＳＥＭである。

一実施形態では、ＡＢＴＳ^・＋捕捉活性を以下のように評価した：増加する濃度（１０
μＭ～５００μＭの範囲）の試験化合物のエタノール溶液を調製した。１５０ｍＭの過硫
酸カリウム水溶液（１６３μＬ）を１０ｍＬの７ｍＭのＡＢＴＳ水溶液に添加し、続いて
１６時間室温で暗所に保存することにより、ＡＢＴＳ^・ラジカルカチオン溶液（２．４５
ｍＭの最終濃度）を得た。次いで、その溶液をエタノールで希釈して吸光度０．７２±０
．０２に到達させた。化合物（２０μＬ）を三連でＡＢＴＳ^・＋溶液（１８０μＬ）に添
加した後、分光光度測定を１５分かけて毎分行った。ラジカルの阻害率は、１００％のラ
ジカルに相当するブランク（２０μＬのエタノールおよび１８０μＬのＡＢＴＳ^・＋溶液
）と試験化合物溶液との間の比較を基にした。ＩＣ_５０値の決定のために用量反応曲線を
確立した。データは３回の独立した実験の平均値±ＳＥＭである。

一実施形態では、ＧＯ^・捕捉活性を以下のように評価した：１０μＭ～１００μＭの濃
度の試験化合物の溶液をエタノール中で調製した。５ｍＭＧＯ^・のエタノール溶液を調
製し、４２８ｎｍで１．００±０．０２の吸光度に達するように希釈した。ＧＯ・溶液（
１８０μＬ）への３連の化合物溶液の添加（２０μＬ）に続いて、暗所で、室温で３０分
間にわたって４２８ｎｍでの吸光度測定を行った。ラジカルの阻害率は、１００％のラジ
カルに相当するブランク（２０μＬのエタノールと１８０μＬのＧＯ^・溶液）と試験化合
物溶液との間の比較を基にした。ＩＣ_５０値の決定のために用量反応曲線を確立した。デ
ータは３回の独立した実験の平均値±ＳＥＭである。

一実施形態では、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮの酸化還元特性および親油性特性は、電気化学的
技術によって評価した。

一実施形態では、電気化学分析データは、コンピュータ制御ポテンショスタットＡｕｔ
ｏｌａｂＰＧＳＴＡＴ３０２Ｎ（ＭｅｔｒｏｈｍＡｕｔｏｌａｂ、ユトレヒト、オラ
ンダ）を使用して得た。一般に、サイクリックボルタンメトリー（ＣＶ）データは、５０
ｍＶｓ^－１の走査速度で取得した。示差パルスボルタンメトリー（ＤＰＶ）の結果は、４
ｍＶのステップ電位、５０ｍＶのパルス振幅および８ｍＶｓ^－１の走査速度で得た。電気
化学信号は、汎用電気化学システム（ＧＰＥＳ）バージョン４．９、ソフトウェアパッケ
ージによってモニターした。分析信号に対するバックグラウンドノイズの寄与を最小限に
するために、すべての電気化学実験は、室温でファラデー箱内に配置された電気化学セル
内で行った。

一実施形態では、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ酸化還元特性の評価プロセスを以下のように実施
した：各化合物の原液（１０ｍＭ）を、適切な量をエタノールに溶解することによって調
製した。ボルタンメトリー作業溶液は、０．１ｍＭの最終濃度で電気化学セル内で調製し
た。ｐＨ７．４の支持電解質は、６．２ｍＬの０．２Ｍリン酸水素二カリウムおよび４３
．８ｍＬの０．２Ｍリン酸二水素カリウムを１００ｍＬに希釈することによって調製した
。ボルタンメトリーデータは、作用電極としてのガラス状炭素電極（ＧＣＥ、ｄ＝２ｍｍ
）、白金線の対電極、および飽和Ａｇ／ＡｇＣｌ参照電極からなる３電極システムにおい
て得られた。一実施形態では、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮの親油特性の評価は以下のようにして
行った。電気化学セルは、各相に、２つのＡｇ／ＡｇＣｌ参照電極および２つのＰｔ対電
極を含む微小液液界面（μＩＴＩＥＳ）のアレイを有する４電極システムであった。その
微孔性膜を４．０ｍＬの水相で満たされたガラスシリンダー上にフルオロシリコーンシー
ラント（ＤｏｗＣｏｒｎｉｎｇ７３０）で密封し、そこにＡｎｔｉＯｘＢＥＮ溶液の
アリコートを加えた。次いで、膜をセルに含まれる有機相に浸した。その有機相参照溶液
（２ｍＭのＢＴＰＰＡＣ１＋２ｍＭのＮａＣｌ水溶液）を機械的に安定化した。水性支持
電解質溶液は１０ｍＭのｐＨ７．０のＴｒｉｓ－ＨＣｌ緩衝液であった。

一実施形態では、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ鉄キレート化特性は、Ｂｉｏ－Ｔｅｃｈｉｎｓ
ｔｒｕｍｅｎｔｓのマルチプレートリーダー（ＰｏｗｅｒｗａｖｅＸＳＭｉｃｒｏｐ
ｌａｔｅＲｅａｄｅｒ）で行われる分光光度法フェロジン法によって評価した。

一実施形態では、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ鉄キレート化特性を以下のように評価した：各ウ
ェルに、酢酸アンモニウム（２０μＭ）中の試験化合物（１００μＭ）および硫酸アンモ
ニウム鉄（ＩＩ）の溶液を添加し、１０分間インキュベートし、その吸光度を５６２ｎｍ
で読み取った。次に、新しく調製したフェロジン溶液（５ｍＭ）を各ウェルに加えた（９
６μＭの最終濃度）。３７℃で１０分間の新しいインキュベーションの後、［Ｆｅ（フェ
ロジン）３］^２＋錯体の吸光度を５６２ｎｍで測定した。試験化合物の代わりにＤＭＳＯ
を用いてブランクウェルを試験した。参照としてＥＤＴＡを使用した。全ての化合物を１
００μＭの最終濃度で試験した。最初の測定値の吸光度を試験化合物による吸光度をなく
すために最終値まで差し引いた。データは３回の独立した実験の平均±ＳＥＭであり、そ
してＦｅ（ＩＩ）キレート化の％として表される（ＥＤＴＡ＝１００％）。

一実施形態では、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ機能性ミトコンドリア毒性プロファイルの評価を
、ラット肝臓ミトコンドリア（ＲＬＭ）で行った。ＲＬＭは、組織ホモジナイズし、続い
て２５０ｍＭスクロース、１０ｍＭＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１ｍＭＥＧＴＡ、お
よび０．１％無脂肪ウシ血清アルブミンを含有する氷冷緩衝液中で分画遠心分離すること
によって調製した。粗ミトコンドリア調製物を得た後、ペレットを２回洗浄し、洗浄緩衝
液（２５０ｍＭスクロースおよび１０ｍＭＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４）に再懸濁した。タ
ンパク質濃度は、標準としてＢＳＡを使用してビウレットアッセイにより決定した。

一実施形態では、ミトコンドリアのＡｎｔｉＯｘＢＥＮ取り込みを評価した。

一実施形態では、活性化ＲＬＭによるＡｎｔｉＯｘＢＥＮミトコンドリアの取り込みを
以下のように評価した：ＲＬＭ（０．５ｍｇタンパク質／ｍＬ）を、１ｍＬのＫＣｌ培地
（１２０ｍＭＫＣｌ、１０μＬＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．２および１ｍＭＥＧＴＡ）
中、３７℃でＡｎｔｉＯｘＢＥＮと共にインキュベートした。ロテノン（１．５μＭ）の
存在下で電極応答を較正するために、各ＡｎｔｉＯｘＢＥＮの５回の連続１μＭ添加を実
施した。その後、コハク酸塩（１０ｍＭ）を添加してΔΨを生成した。アッセイの終わり
にバリノミシン（０．２μｇ／ｍＬ）を加えてΔΨを消散させた。測定は、テトラフェニ
ルホスホニウムカチオン（ＴＰＰ^＋）の分布を測定するイオン選択電極、および参照とし
てＡｇ／ＡｇＣｌ_２電極を用いて行った。ミトコンドリア内蓄積量は、ミトコンドリア内
容量が０．５μＬ／ｍｇタンパク質であると仮定した場合のミトコンドリア外培地からミ
トコンドリア内培地へのＡｎｔｉＯｘＢＥＮの消失およびＴＰＰ化合物のミトコンドリア
取り込みについての結合補正によって計算した。

ＲＬＭ脂質過酸化に対するＡｎｔｉＯｘＢＥＮの結果を評価した。２つの異なる方法を
使用した。

一実施形態では、ＲＬＭ脂質過酸化に対するＡｎｔｉＯｘＢＥＮの効果を、以下のよう
にチオバルビツール酸反応性種（ＴＢＡＲＳ）アッセイによって測定した：ＲＬＭ（２ｍ
ｇタンパク質／ｍｌ）を、３７℃で、基質として５ｍＭグルタミン酸塩／２．５ｍＭリン
ゴ酸塩を補充した、１００ｍＭＫＣｌ、１０ｍＭＴｒｉｓ－ＨＣｌおよびｐＨ７．６
を含む０．８ｍＬの培地中でインキュベートした。ＲＬＭを各ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ（５μ
Ｍ）と共に５分間インキュベートした後、１００μＭのＦｅＳＯ_４／５００μＭのＨ_２Ｏ
_２／５ｍＭのアスコルベートを３７℃で１５分間添加することによってミトコンドリアを
酸化ストレス条件に曝した。酸化ストレスにさらした後、ＤＭＳＯ中の２％（ｖ／ｖ）ブ
チル化ヒドロキシトルエン６０μＬを添加し、続いて過塩素酸３５％（ｖ／ｖ）２００μ
Ｌおよび１％（ｗ／ｖ）チオバルビツール酸２００μＬを添加した。次にサンプルを１０
０℃で１５分間インキュベートし、冷却し、その上清をガラス管に移した。２ｍＬのＭｉ
ｌｉＱ水および２ｍＬのブタン１－オールを加えた後、サンプルを数秒間激しくボルテッ
クスした。二相を分離させた。有機層のアリコート（２５０μＬ）の蛍光をＴＢＡＲＳに
ついてプレートリーダー（λＥｘ＝５１５ｎｍ；λＥｍ＝５５３ｎｍ）で分析した。グル
タミン酸塩／リンゴ酸塩で活性化したＲＬＭでのＴＢＡＲＳバックグラウンド産生は無視
できるほどであることがわかった。データは、３回の独立した実験の平均値±ＳＥＭであ
り、そして対照の％として表す（対照＝１００％）。

一実施形態では、ＲＬＭ脂質過酸化に対するＡｎｔｉＯｘＢＥＮの効果は、以下のよう
に第２の方法論によって測定した：呼吸基質としてグルタミン酸塩／リンゴ酸塩（５ｍＭ
／２．５ｍＭ）を使用した、１００ｍＭＫＣｌ、１０ｍＭＴｒｉｓ－ＨＣｌおよびｐＨ
７．６からなる反応培地１ｍＬの総容量中の２ｍｇＲＬＭの酸素消費量を、クラーク酸素
電極を用いて３７℃でモニターした。ＲＬＭを各ＡｎｔｉＯｘＢＥＮ（５μＭ）と共に５
分間インキュベートした後、１ｍＭのＡＤＰおよび０．１ｍＭのＦｅＳＯ_４（最終濃度）
を添加することによって脂質過酸化プロセスを開始した。インキュベーション培地中のＯ
_２の飽和濃度は、３７℃で２１７μＭであると推定された。酸化促進剤対（１ｍＭＡＤ
Ｐ／０．１ｍＭＦｅＳＯ_４）によるＲＬＭ膜の過酸化から生じる酸素消費量の経時変化
を記録した。トレースは、６回の独立した実験からの平均値±ＳＥＭ記録である。ＡＤＰ
／Ｆｅ^２＋の添加に続くより遅い酸素消費に関連するタイムラグ相を使用して、脂質過酸
化を防止するためのＡｎｔｉＯｘＢＥＮの有効性を測定した。データは、６回の独立した
実験からの平均値±ＳＥＭであり、そして対照の％として表す（対照＝１００％）。

一実施形態では、ミトコンドリア透過性遷移細孔開口に対するＡｎｔｉＯｘＢＥＮの効
果を評価した。

一実施形態では、ミトコンドリア透過性遷移細孔開口に対するＡｎｔｉＯｘＢＥＮの効
果を以下のように測定した。ミトコンドリア膨潤は、５４０ｎｍで分光光度的にモニター
したときに、ミトコンドリア懸濁液から散乱した光の変化を測定することによって推定し
た。漸増濃度のＡｎｔｉＯｘＢＥＮ（２．５～１０μＭ）を、ＲＬＭ（１ｍｇ）存在下で
、反応培地（２００ｍＭスクロース、１ｍＭＫＨ_２ＰＯ_４、１０ｍＭＴｒｉｓ（ｐＨ７
．４）、５ｍＭコハク酸塩、および１．５μＭロテノンを添加した１０μＭＥＧＴＡ）
に添加し、アッセイ前に５分間インキュベートした。その実験を、毎日滴定される適切な
濃度のＣａ^２＋（１５～５０μＭ）を添加することによって開始した。ＰＴＰ脱感作剤で
あるシクロスポリンＡ（ＣｓＡ）を添加して、ｍＰＴＰ開口を実証した。反応を連続的に
撹拌し、そして温度を３７℃に維持した。データは３回の独立した実験の平均値±ＳＥＭ
であり、５４０ｎｍでのΔ吸光度として表される。

一実施形態では、ミトコンドリア呼吸に対するＡｎｔｉＯｘＣＩＮの効果を評価した。

一実施形態では、ミトコンドリア呼吸に対するＡｎｔｉＯｘＢＥＮ効果の評価を以下の
ように実施した：単離したＲＬＭの呼吸を、３７℃で磁気撹拌しながら、１ｍＬの恒温水
ジャケット付きチャンバ内の適切な記録計に接続したＣｌａｒｋ型酸素電極を用いてポー
ラログラフで評価した。標準呼吸媒体は、１３０ｍＭスクロース、５０ｍＭＫＣｌ、５
ｍＭＫＨ_２ＰＯ_４、５ｍＭＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３）および１０μＭＥＧＴＡから
なる。漸増濃度のＡｎｔｉＯｘＢＥＮ（２．５～１０μＭ）を呼吸基質グルタミン酸塩／
リンゴ酸塩（それぞれ１０ｍＭおよび５ｍＭ）またはコハク酸塩（５ｍＭ）およびＲＬＭ
（１ｍｇ）を含有する反応培地に添加し、アッセイ前に５分間インキュベートした。状態
２は、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮとの５分間のインキュベーション時間中の呼吸として考えられ
た。状態３呼吸を誘発するために、１２５ｎｍｏｌのＡＤＰ（グルタミン酸塩／リンゴ酸
塩を使用）または７５ｎｍｏｌのＡＤＰ（コハク酸塩を使用）を加えた。状態４を、ＡＤ
Ｐリン酸化が終了した後に決定した。その後のオリゴマイシン（２μｇ／ｍｌ）の添加は
、ＡＴＰシンターゼを阻害し、そしてオリゴマイシン阻害呼吸状態に由来した。最後に、
１μＭのＦＣＣＰを加えて、脱共役呼吸を誘導した。ＲＣＲは、呼吸基質としてグルタミ
ン酸塩－リンゴ酸塩またはコハク酸塩をそれぞれ用いて、対照実験について７．３±０．
６および４．１±０．３であった。同じ呼吸基質でＡＤＰ／Ｏ指数は、それぞれ２．６±
０．１および１．５±０．１であった。データは、７回の独立した実験の平均±ＳＥＭで
ある。

一実施形態において、膜貫通電位（ΔΨ）に対するＡｎｔｉＯｘＢＥＮの効果を評価し
た。

一実施形態では、ミトコンドリア膜貫通電位（ΔΨ）に対するＡｎｔｉＯｘＢＥＮ効果
の評価は、以下のように実施した：ミトコンドリア膜貫通電位（ΔΨ）は、サフラニン（
５μＭ）の蛍光変化の評価を通じて推定し、５ｎｍのスリット幅で、４９５および５８６
ｎｍの励起および発光波長で作動する分光蛍光計で記録した。漸増濃度のＡｎｔｉＯｘＢ
ＥＮ（２．５～１０μＭ）を呼吸基質グルタミン酸塩／リンゴ酸塩（それぞれ５ｍＭおよ
び２．５ｍＭ）またはコハク酸塩（５ｍＭ）およびＲＬＭ（最終体積２ｍＬ中０．５ｍｇ
）を含有する反応培地（２００ｍＭスクロース、１ｍＭＫＨ_２ＰＯ_４、１０ｍＭＴｒｉ
ｓ（ｐＨ７．４）および１０μＭＥＧＴＡ）に添加し、アッセイ前に２５℃で５分間イ
ンキュベートした。このアッセイでは、サフラニン（５μＭ）およびＡＤＰ（２５ｎｍｏ
ｌ）をそれぞれアッセイの開始および脱分極の誘発に使用した。その後、ミトコンドリア
を脱分極させるために１μＭのＦＣＣＰを全ての実験の最後に加えた。０．４μｇのバリ
ノマイシンを補充した２００ｍＭのスクロース、１ｍＭのＮａＨ_２ＰＯ_４、１０ｍＭのＴ
ｒｉｓ（ｐＨ７．４）および１０μＭのＥＧＴＡを含有するＫ^＋フリーの反応培地中でＲ
ＬＭをインキュベートしたときに得られた較正曲線を用いて、ΔΨを計算した。ΔΨによ
って誘導されたサフラニンの蛍光変化の拡大は、標準培地およびＫ^＋フリー培地において
類似していることが見出された。「再分極」は、添加したＡＤＰの完全リン酸化後の膜電
位の回復に対応した。遅延相は、添加されたＡＤＰをリン酸化するのに必要な時間を反映
していた。グルタミン酸塩／リンゴ酸塩またはコハク酸塩をそれぞれ使用した場合、単離
ＲＬＭは、２２６ｍＶとほぼ等しいΔΨおよび２０２ｍＶとほぼ等しいΔΨ（負の内側）
を発生した。データは５回の独立した実験の平均値±ＳＥＭである。

一実施形態では、ＡｎｔｉＯｘＢＥＮの細胞傷害性プロファイルは、ヒト肝細胞癌Ｈｅ
ｐＧ２細胞において評価した。ヒト肝細胞癌ＨｅｐＧ２細胞を、ピルビン酸ナトリウム（
０．１１ｇ／Ｌ）、炭酸水素ナトリウム（１．８ｇ／Ｌ）および１０％ウシ胎児血清（Ｆ
ＢＳ）および１％の抗生物質ペニシリン－ストレプトマイシン１００×溶液を添加したダ
ルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ；Ｄ５６４８）からなる高グルコース培地中で培養
した。細胞を５％ＣＯ_２の加湿インキュベーター中で３７℃に維持した。ＨｅｐＧ２細胞
を４×１０^４細胞／ｍＬの密度で播種し、処理前に２４時間増殖させた。

一実施形態では、細胞傷害性スクリーニングを以下のように実施した：細胞を４８ウェ
ルプレート（２×１０^４細胞／５００μＬ）に配置し、次いで２５μＭ～５００μＭの範
囲の濃度のＡｎｔｉＯｘＢＥＮと共に４８時間インキュベートした。インキュベーション
後、スルホローダミンＢ（ＳＲＢ）アッセイを細胞タンパク質含有量の測定に基づく細胞
密度決定に使用した。簡単に説明すると、インキュベーション後、培地を除去し、ウェル
をＰＢＳ（１×）ですすいだ。細胞を、－２０℃で少なくとも２時間１００％メタノール
中の１％酢酸を添加することによって固定した。その後、固定液を捨て、プレートを３７
℃のオーブンで乾燥した。１％酢酸溶液中の２５０マイクロリットルの０．５％ＳＲＢを
添加し、そして３７℃で１時間インキュベートした。次いでウェルを水中の１％酢酸で洗
浄しそして乾燥した。その後、５００μｌのＴｒｉｓ（ｐＨ１０）を添加し、プレートを
１５分間撹拌した。最後に、各上清２００μｌを９６ウェルプレートに移し、光学濃度を
５４０ｎｍで測定した。データは４つの独立した実験の平均値±ＳＥＭであり、結果は対
照の百分率（対照＝１００％）として表され、これはそれぞれの時点で何の処理もしてい
ない細胞密度を表す。

一実施形態では、すべての生物学的データを以下のように分析した：ＧｒａｐｈＰａｄ
Ｐｒｉｓｍ５．０ソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄＳｏｆｔｗａｒｅ、Ｉｎｃ．）
において、すべての結果を示された実験の数に対する平均値±ＳＥＭとして表す。データ
は、２つの平均値の比較のためのＳｔｕｄｅｎｔのｔ検定、およびＤｕｎｎｅｔの多重比
較事後検定による一元配置分散分析によって分析した。最後の検定は、２つより多いグル
ープを１つの独立変数と比較するために使用した。有意性は、^＊Ｐ＜０．０５、^＊＊Ｐ＜
０．０１、^＊＊＊Ｐ＜０．０００５、^＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１で認められた。

本開示は、記載された実施形態に決して限定されるものと見なされるべきではなく、当
業者はその修正に対する多くの可能性を予見するであろう。

上述の実施形態は組み合わせることができる。添付の特許請求の範囲は、本開示の特定
の実施形態をさらに説明する。

Pagano, G., Talamanca, A. A., Castello, G., Cordero, M. D., d’Ischia, M., Gadaleta, M. N., Pallardo, F. V., Petrovic, S., Tiano, L., and Zatterale, A. (2014) Oxidative stress and mitochondrial dysfunction across broad-ranging pathologies: toward mitochondria-targeted clinical strategies. Oxidative medicine and cellular longevity, 2014, 541230. Smith, R. A., Hartley, R. C., Cocheme, H. M., and Murphy, M. P. (2012) Mitochondrial pharmacology. Trends in pharmacological sciences, 33, 341-352. Teixeira, J., Soares, P., Benfeito, S., Gaspar, A., Garrido, J., Murphy, M. P., and Borges, F. (2012) Rational discovery and development of a mitochondria-targeted antioxidant based on cinnamic acid scaffold. Free radical research, 46, 600-611. Reily, C., Mitchell, T., Chacko, B. K., Benavides, G., Murphy, M. P., and Darley-Usmar, V. (2013) Mitochondrially targeted compounds and their impact on cellular bioenergetics. Redox biology, 1, 86-93. Trnka, J., Elkalaf, M., and Andel, M. (2015) Lipophilic triphenylphosphonium cations inhibit mitochondrial electron transport chain and induce mitochondrial proton leak. PloS one, 10, e0121837.

Claims

医薬における使用のための、式Ｉの化合物：

または塩、溶媒和物、水和物、互変異性体、立体異性体。
（式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７は、互いに独立して選択され
；
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４およびＲ^５は、Ｈ、ハロゲン、ヒドロキシル、メチル、メトキ
シル、アミノ、カルボン酸、またはニトロ基から選択され；
Ｒ^６は、２級アミドまたは３級アミドであり；
Ｒ^７は、アルキル鎖、アルケニル鎖、アルキニル鎖、置換アリールまたは２級アミドで
あり；
Ｚ^－は、許容されるアニオンである。）
式Ｉの化合物：

または塩、溶媒和物、水和物、互変異性体、立体異性体であり、
式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７は、互いに独立して選択され；
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４およびＲ^５は、Ｈ、ハロゲン、ヒドロキシル、メチル、メトキ
シル、アミノ、カルボン酸、またはニトロ基から選択され；
Ｒ^６は、２級アミドまたは３級アミドであり；
Ｒ^７は、アルキル鎖、アルケニル鎖、アルキニル鎖、置換アリールまたは２級アミドで
あり；
Ｚ^－は、許容されるアニオンであり；
ただし、以下の化合物を除く。
以下の化合物である、請求項１または２に記載の化合物。
以下の化合物である、請求項１または２に記載の化合物。
Ｒ^７が、Ｒ^８－（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ－Ｒ^９アミドの２級アミドであり；
Ｒ^８およびＲ^９が、互いに独立して選択され；
Ｒ^８およびＲ^９は、アルキル鎖、アルケニル鎖、アルキニル鎖または置換アリールであ
る、前請求項のいずれかに記載の化合物。
前記置換アリールが、アルカン－アリール置換、アルケン－アリール置換、またはアル
キン－アリール置換である、前請求項のいずれかに記載の化合物。
前記アルカン－アリール置換、前記アルケン－アリール置換、または前記アルキン－ア
リール置換が、以下である、前請求項のいずれかに記載の化合物。
Ｃ_１～Ｃ_６－アルキル、Ｃ_３～Ｃ_８－シクロアルキル、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリール、Ｃ_６
～Ｃ_１０－アリール－Ｃ_１～Ｃ_８－アルキル、Ｃ_１～Ｃ_６－アルコキシ、Ｃ_６～Ｃ_１０－
アリールオキシ、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリール－Ｃ_１～Ｃ_８－アルコキシ、ヒドロキシル、Ｃ
Ｏ_２Ｈ、Ｃ_１～Ｃ_６－アルコキシカルボニル、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリールオキシカルボニル
、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリール－Ｃ_１～Ｃ_８－アルコキシカルボニル、Ｃ_１～Ｃ_６－アルキル
カルボニル、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリールカルボニル、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリール－Ｃ_１～Ｃ_８
－アルキルカルボニル、Ｃ_１～Ｃ_６－アルキルカルボキシ、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリールカル
ボキシ、Ｃ_１～Ｃ_６－アルキルメルカプチル、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリールメルカプチル、Ｃ
_１～Ｃ_６－アルキルメルカプトカルボニル、Ｃ_３～Ｃ_８－シクロアルキルメルカプトカル
ボニル、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリールメルカプトカルボニル、Ｃ_１～Ｃ_６－アルキルメルカプ
トカルボキシ、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリールメルカプトカルボキシ、Ｃ_１～Ｃ_６－アルキルス
ルホニル、Ｃ_６～Ｃ_１０－アリールスルホニル、Ｃ_１～Ｃ_６－アルキルスルホキシ、Ｃ_６
～Ｃ_１０－アリールスルホキシ；
これらのそれぞれがＣ_１～Ｃ_６－アルキル、Ｃ_１～Ｃ_６－アルコキシ、ＣＯＯＨで１回
または数回置換されており；ＣＯＮＨ_２、Ｃ_１～Ｃ_６－アルキルで１回または２回置換さ
れており；ＳＯ_３Ｈ、アミノ、チオール、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、フルオロ、ク
ロロ、ブロモ、ヨード、ＣＦ_３またはＯＣＦ_３；
ここで、これらの任意選択の置換基のいくつかは組み合わされて、anellated飽和、不
飽和または芳香族のホモ環系またはヘテロ環系を形成し；または
Ｃ_１～Ｃ_６－アルキル、Ｃ_１～Ｃ_６－アルコキシ、ＣＯＯＨで１回または数回置換され
ている飽和、不飽和または芳香族複素環；ＣＯＮＨ_２、１回または２回置換されている。
前記アルキル鎖、前記アルケニル鎖または前記アルキニル鎖が、Ｃ_１～Ｃ_３０鎖、好ま
しくはＣ_１～Ｃ_１８鎖である、前請求項のいずれかに記載の化合物。
前記アルキル鎖、前記アルケニル鎖または前記アルキニル鎖が、Ｃ_２～Ｃ_１６鎖、好ま
しくはＣ_３～Ｃ_１６鎖、より好ましくはＣ_５～Ｃ_１４鎖、さらにより好ましくはＣ_６～Ｃ
_１４鎖である、前請求項のいずれかに記載の化合物。
前記アルキル鎖が、Ｃ_５アルキル鎖、Ｃ_６アルキル鎖、Ｃ_７アルキル鎖、Ｃ_８アルキル
鎖、Ｃ_９アルキル鎖、Ｃ_１０アルキル鎖、Ｃ_１１アルキル鎖、Ｃ_１２アルキル鎖、Ｃ_１３
アルキル鎖、またはＣ_１４アルキル鎖である、前請求項のいずれかに記載の化合物。
Ｒ^１およびＲ^５が、Ｈである、前請求項のいずれかに記載の化合物。
Ｒ^２およびＲ^３が、ＯＨである、前請求項のいずれかに記載の化合物。
Ｒ^４が、ＨまたはＯＨである、前請求項のいずれかに記載の化合物。
Ｒ^７が、Ｃ_６アルキル鎖である、前請求項のいずれかに記載の化合物。
Ｒ^８およびＲ^９が、互いに独立してＣ_５アルキル鎖またはＣ_６アルキル鎖である、前請
求項のいずれかに記載の化合物。
前記ハロゲンが、Ｆ，Ｃｌ，Ｂｒ，Ｉ，Ａｔである、前請求項のいずれかに記載の化合
物。
前記化合物が、６－（３，４－ジヒドロキシベンズアミド）ヘキシルトリフェニルホス
ホニウムブロミドである、前請求項のいずれかに記載の化合物。
前記化合物が、６－（３，４，５－トリヒドロキシベンズアミド）ヘキシルトリフェニ
ルホスホニウムブロミドである、請求項１～１６のいずれか一項に記載の化合物。
前記化合物が、５－（６－（３，４，５－トリヒドロキシベンズアミド）ヘキシルアミ
ノ）カルボニルペンチル］トリフェニルホスホニウムブロミドである、請求項１～１６の
いずれか一項に記載の化合物。
ミトコンドリアの形態およびＯＸＰＨＯＳ酵素の発現の少なくとも１つの調節における
使用のための、前請求項のいずれかに記載の化合物。
ミトコンドリア障害に関連する症状またはミトコンドリア機能不全またはミトコンドリ
ア疾患に関連する状態に関連する症状の、治療または予防または抑制のための使用のため
の、前請求項のいずれかに記載の化合物。
前記ミトコンドリア障害が、ミオクローヌスてんかん；赤色ぼろ線維ミオクローヌスて
んかん；レーベル遺伝性視神経症；神経障害性運動失調症および網膜色素変性症；ミトコ
ンドリアミオパチー、脳症、乳酸アシドーシス、脳卒中；リー症候群；リー様症候群；優
性視神経萎縮症；カーンズ－セイヤー症候群；母性遺伝性糖尿病と難聴；Ａｌｐｅｒｓ－
Ｈｕｔｔｅｎｌｏｃｈｅｒ症候群；運動失調症ニューロパチースペクトル；慢性進行性外
眼筋麻痺；ピアソン症候群；ミトコンドリア神経胃腸脳症；センガース症候群；３－メチ
ルグルタコン酸尿症、感音難聴、脳症およびリー様症候群の神経放射線学的所見；ミオパ
チー；ミトコンドリアミオパチー；心筋症；複合体ＩＶのサーフェイトタンパク質欠乏に
よるリー症候群の欠如；ピルビン酸の酸化の乱れとＡＴＰ＋ＰＣＲ産生率を含む、これま
でのところ解決されていない遺伝的欠陥を伴う、単離された、または組み合わされたＯＸ
ＰＨＯＳ欠乏症からなる群から選択される障害である、前請求項のいずれかに記載の化合
物。
前記ミトコンドリア機能障害に関連する状態が、フリードライヒ失調症；尿細管性アシ
ドーシス；パーキンソン病；アルツハイマー病；筋萎縮性側索硬化症；ハンチントン病；
発達性広汎性疾患；難聴；聾；糖尿病；老化；ミトコンドリア機能を阻害する薬の副作用
からなる群から選択される状態である、前請求項のいずれかに記載の化合物。
神経変性疾患、非アルコール性脂肪性肝疾患、腫瘍、癌、腎臓病、強皮症、肝鉄過剰症
、肝銅過剰症、脱毛症、ヒト不妊症、急性膵炎、線維筋痛症、ミトコンドリア障害、また
はミトコンドリア機能障害またはミトコンドリア疾患に関連する状態の治療または予防ま
たは抑制における使用のための、前請求項のいずれかに記載の化合物。
神経変性疾患、前記神経変性疾患が、特に筋萎縮性側索硬化症である、の治療または予
防における使用のための、前請求項のいずれかに記載の化合物。
肝臓癌、膵臓癌または胆道癌である、癌の治療または予防における使用のための、前請
求項のいずれかに記載の化合物。
非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎または肝硬変である、非アル
コール性脂肪性肝疾患の治療または予防における使用のための、前請求項のいずれかに記
載の化合物。
腎臓癌または腎不全である、腎臓病の治療または予防における使用のための、前請求項
のいずれかに記載の化合物。
前記腫瘍疾患が、癌、特に基底細胞癌、骨癌、腸癌、脳腫瘍、乳癌、子宮頸癌、白血病
、肝臓癌、肺癌、リンパ腫、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、甲状腺癌または胆道癌
である、前請求項のいずれかに記載の化合物。
抗菌剤として、特に消毒剤として使用するための、前請求項のいずれかに記載の化合物
。
多能性細胞培養物の維持、細胞培養物の補足として、特に増殖培地化合物として使用す
るための、前請求項のいずれかに記載の化合物。
筋肉プロテクターまたは身体運動後の筋肉回復としての使用のための、前請求項のいず
れかに記載の化合物。
化粧品、またはサプリメント、または栄養補助食品、すなわち老化防止剤として、また
は抗シワスキンケア製品として使用するための、前請求項のいずれかに記載の化合物。
イメージング研究、特にミトコンドリアイメージング研究を監視するためのプローブと
して使用するための、前請求項のいずれかに記載の化合物。
前請求項に記載の化合物のいずれかを含む、多能性幹細胞を未分化状態に維持するため
の細胞培養培地。
請求項１～３５の化合物のいずれかと、薬学的に許容される担体、アジュバント、賦形
剤、希釈剤、またはそれらの組合せとを含む組成物、好ましくは医薬組成物または化粧品
組成物。
前記薬学的に許容される担体が、以下のリスト：食塩水、アラビアゴム、ゼラチン、デ
ンプンペースト、タルク、ケラチン、コロイドシリカ、尿素、またはそれらの組合せから
選択される、請求項３６に記載の組成物。
前記アジュバントが、以下のリスト：水中油型エマルションアジュバント、アルミニウ
ムアジュバント、ＴＬＲ－４リガンド、サポニン、およびそれらの組合せから選択される
、請求項３６または３７に記載の組成物。
前記賦形剤が、以下のリスト：グルコース、ラクトース、スクロース、モノステアリン
酸グリセロール、塩化ナトリウム、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノ
ール、またはそれらの組合せから選択される、請求項３６～３８のいずれかに記載の組成
物。
前記医薬組成物が、局所投与、経口投与、非経口投与または注射可能な投与により投与
される、請求項３６～３９のいずれかに記載の組成物。
神経変性疾患、非アルコール性脂肪性肝疾患、腫瘍、腎臓病、強皮症、肝鉄過剰症、肝
銅過剰症、脱毛症、ヒト不妊症、急性膵炎または線維筋痛症の治療または予防のための方
法における使用のための組成物であって、前記医薬組成物は一日量で投与される、請求項
３１～４０のいずれかに記載の組成物。
前記一日量が、２０ｍｇ／日または１０ｍｇ／日である、請求項４１に記載の組成物。
請求項１～３４の化合物または請求項３６～４２の組成物を含む、ナノキャリア。
請求項１～３４の化合物または請求項３６～４２の組成物を含む、リポソーム。