JP2005306848A - 新規デセン酸誘導体 - Google Patents

Abstract

【課題】本発明は、ローヤルゼリーに含まれる有用な新規化合物を単離同定することを目的とする。
【解決手段】一般式（１）：
【化１】

（式中、Ｒは、ＳＯ₃Ｈ、ＰＯ₃Ｈ₂、ＨＯ（ＣＨ₂）₉ＣＯＯ（ＣＨ₂）₉ＣＯ−、ＨＯ（ＣＨ₂）₇ＣＯ−、ＨＯＯＣ（ＣＨ₂）₈ＣＯ−、ＨＯ（ＣＨ₂）₉ＣＯ−、ＣＨ₃（ＣＨ₂）₆Ｃ（ＯＨ）Ｃ
Ｈ₂ＣＯ−で表される化合物である。）
で示される新規デセン酸誘導体又はその塩を提供する。該デセン酸誘導体又はその塩は、化学的構造から抗腫瘍作用、抗菌作用、血圧降下作用、インスリン様作用等に関連した効果を得る目的で用いることができる。

Description

本発明は、新規デセン酸誘導体又はその塩に関する。

ミツバチの生産物であるローヤルゼリーは、タンパク質、糖質、脂質をはじめ、アミノ酸、ビタミン、ミネラルを豊富に含む食品として注目されている。ローヤルゼリーの生理活性としては、血清コレステロールおよび脂質低下作用、成長促進作用、血圧降下作用、インスリン様作用等が知られており、抗菌作用および抗腫瘍作用を示すことも報告されている（例えば、非特許文献１、２及び３）。ローヤルゼリーは、これらの効果に基づき、疾病の予防、改善又は治療を目的とした健康食品及び機能性食品等の原料として実用化されつつある。
Ｔｏｗｎｓｅｎｄ， Ｇ．Ｆ． ｅｔ ａｌ．， １９５９． Ｎａｔｕｒｅ， １８３，１２７０ Ｔｏｗｎｓｅｎｄ， Ｇ．Ｆ． ｅｔ ａｌ．， １９５９． Ｐｒｏｃ． Ａｍ． Ａｓｓｏｃ． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．， ３， ６９ Ｔｏｗｎｓｅｎｄ， Ｇ．Ｆ． ｅｔ ａｌ．， １９６０． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．， ２０， ５０３

しかしながら、ローヤルゼリーに含まれる物質の多くは、未だ単離同定されておらず、有用な新規化合物が含まれている可能性があると考えられている。

従って、本発明は、ローヤルゼリーに含まれる有用な新規化合物を単離同定することを目的とする。

本発明者は、上記課題を解決すべく鋭意検討を重ねた結果、ローヤルゼリーからの抽出液中に新規デセン酸誘導体が含まれることを見出し、本発明を完成するに至った。

本発明は、以下の新規ヒドロキシデセン酸誘導体を提供する。

項１．一般式（１）：

（式中、Ｒは、ＳＯ₃Ｈ、ＰＯ₃Ｈ₂、或いは下記式（２）〜（６）のいずれかで表される基：

を示す。）
で表されるデセン酸誘導体又はその塩。

本発明のデセン酸誘導体は、上記一般式（１）で示される構造を有し、下記表１に示されるような化合物Ａ〜Ｇの７種の化合物を包含する。

本発明のデセン酸誘導体は、化学的に合成する方法、天然ローヤルゼリーから物理的又は化学的性質を利用して単離する方法のいずれによっても得ることができる。これらの方法は、特に限定的ではなく、従来公知の方法を用いることができるが、例えば天然ローヤルゼリーから単離する場合には、以下のパーコレーション法を用いることができる。

パーコレーション法には、ローヤルゼリーの凍結乾燥粉末をクロマト管につめ、ＣＨＣｌ₃を徐々に加えて抽出する工程、この抽出残渣にＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨを加えてＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨエキスを得、化合物Ｂ〜Ｆで表される化合物を得る工程、さらにこの抽出残渣にＭｅＯＨを加えてＭｅＯＨエキスを得、化合物Ａと化合物Ｇを得る工程が含まれる。

本発明のデセン酸誘導体の塩として、デセン酸由来のＣＯＯＨ又はＲがＳＯ₃Ｈ、ＰＯ₃Ｈ₂またはカルボン酸基（ＣＯＯＨ）を含む一般式（４）の基の場合には、これらの塩も含まれる。該塩としては、生理的に許容されるものであれば特に限定されないが、例えば、ナトリウム、カリウム、リチウム等のアルカリ金属塩；カルシウム、マグネシウム、バリウム等のアルカリ土類金属塩；アンモニウム塩；トリエチルアミン、トリエタノールアミン等の有機アミン塩；リジン、アルギニン等の塩基性アミノ酸塩等が好ましく例示できる。また、これらの塩を１種又は２種以上、組み合わせて用いても良い。これらの塩は、常法により当該デセン酸誘導体から容易に製造することができる。

本発明のデセン酸誘導体及びその塩を合成又は単離した後、当業者によって通常用いられる方法に従って、精製することができる。精製方法は、特に限定されるものではないが、例えば、抽出、クロマトグラフ、蒸留等が例示される。これらの精製工程を、複数回行っても良い。

さらに、本発明のデセン酸誘導体は、当業者によって通常使用される方法を用いて、化学的に合成することができ、必要であれば上記の精製工程を通して精製することができる。例えば、化合物Ａを得るためには、クロルスルホン酸等と反応させる方法があげられ、化合物Ｂ〜Ｆを得るためには、スズ触媒等を用いた脱水による方法等があげられる。化合物Ｇは、例えば、デセン酸に三塩化リンを反応させ、炭酸水素トリエチルアンモニウム水溶液で処理した後、ビストリエチルシリルペルオキシド等で酸化する方法（B.C.Froeler, P.G.Ng, M.D.Matteucci, Nucl. Acid. Res., 14, 5399 (1986)）に記載の方法に準じて製造可能である。
なお、一般式（１）で表される化合物は、２位にトランスの二重結合を有するデセン酸誘導体として表されているが、二重結合はシスであってもよく、シス、トランスの混合物であってもよい。また、二重結合の位置としては２位が好ましいがこれに限定されず、２〜９位のいずれかの位置に二重結合を有する異性体及びその任意の混合物も、本発明の一般式（１）の化合物に包含される。

化合物Ａ〜Ｇについては、第２位がＥ体であることが好ましい。

また、本発明のデセン酸誘導体を、例えば、α−ヒドロキシデセン酸又はα−ヒドロキシデカン酸の産生能を有する微生物による発酵から得ることもできる。該微生物としては、天然に存在するものを用いてもよく、又は公知の遺伝子操作技術によって目的の化合物の産生が可能になった微生物を用いてもよい。微生物による発酵を利用した場合、該微生物を培養後、培養液を活性炭処理、ろ過等を行って除菌し、アルコール等の有機溶剤による析出、限外濾過による脱塩等の公知の精製方法によって精製することで本発明のデセン酸誘導体を得ることができる。

本発明の一般式（１）に示される化合物は、その化学的構造から天然ローヤルゼリーに含まれる１０−ハイドロキシ−δ−２デセン酸と類似の効果が期待できる。すなわち、本発明の化合物を、不定愁訴の改善、自律神経失調症の改善、更年期障害の改善、滋養強壮作用、抗腫瘍作用、抗菌作用、血圧降下作用、インスリン用作用等に関連した効果を期待して使用することができる。また、該デセン酸誘導体の塩についても、その化学的構造から上記の効果を期待して用いることができる。

本発明のデセン酸誘導体及びその塩は、前述の効果を目的として、様々な用途に適用することができる。用途としては、例えば、健康食品、機能性食品、サプリメント、特定保健用食品、ペットフード、ペット用サプリメント等の食品組成物、化粧品及び浴用化粧品等のトイレタリー、医薬組成物等があげられる。

食品組成物としては、酸化防止剤、矯味矯臭剤、増粘剤、乳化安定剤、防腐剤、呈味剤、甘味剤、酸味剤等の任意成分と本発明のデセン酸誘導体を常法に従って処理することにより、本発明の食品組成物を製造することができる。

食品組成物に配合される該デセン酸誘導体又はその塩の配合割合は、該デセン酸誘導体又はその塩の期待される効果が得られるのであれば、特に制限されないが、通常、一回あたりの摂取量が０．０００１〜２０ｍｇ程度である。

該デセン酸誘導体を配合した食品組成物を製造する場合、ローヤルゼリーからの抽出過程で得られる、一般式（１）に示される化合物又は該化合物を含む画分を、それぞれ単独で、又は組み合わせて食品組成物の原料に加えることができる。

化合物Ａ又はＧを含む画分を食品組成物中に配合する場合、該画分を得る方法は、本発明の新規デセン酸誘導体としての所期の効果が得られれば特に限定されないが、例えば、ローヤルゼリー粉末をクロロホルム抽出した後、その残渣をクロロホルム−メタノールで抽出して残渣を得、さらにメタノールで抽出して得られたエキスからＯＤＳカラム等で脂溶性物質を除去し、濃縮する方法があげられる。

また、化合物をＢ〜Ｆ含む画分を得る方法としては、例えば、ローヤルゼリー粉末からクロロホルム抽出によってエキスを得、次にクロロホルム−メタノール抽出を行い、ヘキサン、トルエン等の溶媒で抽出し、濃縮する方法があげられる。濃縮の方法としては、エバポレーター等の常法を用いることができる。

トイレタリーとしては、化粧料成分として一般に使用されている界面活性剤、油分、保湿剤、皮膜形成剤、色素、香料等の成分と任意に組み合わせて配合することにより、種々の形態、例えばクリーム、化粧乳液、化粧水、スキンコンディショナー、下地化粧料、口紅、リップクリーム、コンシーラー、アイカラー、ファンデーション、ネイルエナメル、洗顔剤、パック剤、マッサージ剤、クレンジング剤、美容液、ボディーソープ等とすることができる。また、毛髪化粧料成分として一般に使用されている界面活性剤、増粘剤、油ゲル化剤、金属酸化物、色素、香料等の成分と任意に組み合わせて配合することにより、毛髪化粧料一般、すなわちシャンプー、ヘアリンス、ヘアトリートメント、ヘアコンディショナー、パック剤等とすることもできる。

トイレタリーに配合される該デセン酸誘導体又はその塩の配合割合は、該デセン酸誘導体又はその塩の期待される効果が得られるのであれば特に制限されないが、通常、０．０００１〜１０重量％程度である。また、本発明の化合物Ａ〜Ｇをそれぞれ単独で、又は組み合わせてトイレタリーの原料に加えることができる。

本発明のデセン酸誘導体又はその塩を医薬組成物として用いる場合、該デセン酸誘導体の塩は、薬学的に許容される塩であることが好ましい。このような塩としては、該デセン酸誘導体のナトリウム、カリウム等のアルカリ金属塩、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、トリエチルアミンやトリエタノールアミン等の有機アミン塩、リジンやアルギニン等の塩基性アミノ酸塩等が好ましく例示できる。また、これらの塩を１種又は２種以上、組み合わせて用いても良い。

該医薬組成物として用いる場合の摂取量は、通常、成人１人１日あたり０．０００１〜１０ｍｇ／ｋｇ程度である。

本発明のデセン酸誘導体又はその塩を含む医薬組成物は、賦形剤、担体または添加剤を含んでいても良い。賦形剤、担体および添加剤としては、通常使用され、かつ薬学的に許容されるものであれば特に限定されず、その種類および組成は、適宜変更が可能である。

賦形剤としては、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム等があげられ、担体としては、滅菌水、生理食塩水、および各種緩衝溶液等があげられる。添加剤としては、粘稠剤、緩衝剤、保存剤または防腐剤等があげられる。

本発明のデセン酸誘導体は、天然ローヤルゼリーに含有される経口的に安全な物質であり、上記範囲を超えて摂取されても特に身体に悪影響を及ぼすものではない。

本発明によれば、不定愁訴の改善、自律神経失調症の改善、更年期障害の改善、滋養強壮作用、抗腫瘍作用、抗菌作用、血圧降下作用、インスリン用作用等に関連した効果を有する新規デセン酸誘導体及びその塩を提供することができる。

以下、実施例をあげて本発明をさらに詳しく説明するが、本発明は、これらの実施例によって限定されないことは言うまでもない。

以下、ローヤルゼリー化合物Ａ〜化合物Ｇを抽出する方法を示す。実施例１〜４を通して、減圧濃縮は、ロータリーエバポレーターを用いた。
［ローヤルゼリーからの化合物Ａ〜Ｇの抽出］
ローヤルゼリー（１．５ｋｇ）をパーコレーション法によりＣＨＣｌ₃（３Ｌ）、次い
でＣＨＣ１₃−ＭｅＯＨ（２：１，３Ｌ）、ＭｅＯＨ（５Ｌ）で順次抽出し、抽出液をそ
れぞれ減圧濃縮し、ＣＨＣｌ₃エキス（１２１．７ｇ）、ＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨ エキス（４５．４ｇ）、ＭｅＯＨエキス（１９２．３ｇ）を得た。

ＭｅＯＨエキス（１９２．３ｇ）からは化合物Ａ及びＧを、ＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨエキス（４５．４ｇ）からは化合物Ｂ〜化合物Ｆをそれぞれ下記の手順で単離した。

操作方法：ローヤルゼリー（１．５ｋｇ）をクロマト管（内径８．０×４５．０ｃｍ）に詰め、コックを開いたままローヤルゼリー全体が覆われるまで徐々に上方からＣＨＣ１₃を加えた。抽出液が滴下し始めたときコックを閉じ、室温下にて１日放置した後、毎分３ｍＬの速度で抽出液を流出させた。さらに、ＣＨＣｌ₃（計３Ｌ）を適時加えて流出を続け、得られた抽出液を減圧濃縮し、ＣＨＣｌ₃エキス（１２１．７ｇ）を得た。次に、
抽出残渣に上方からＣＨＣ１₃−ＭｅＯＨ（２：１）を徐々に加え、抽出残渣全体がＣＨ
Ｃｌ₃−ＭｅＯＨ（２：１）に覆われて抽出液が滴下し始めたときコックを閉じた。その
まま室温下にて１日放置し、毎分３ｍＬの速度で抽出液を流出させた。その後、ＣＨＣ１₃−ＭｅＯＨ（２：１）計３Ｌを適時加えて流出を続け、得られた抽出液を減圧濃縮し、
ＣＨＣ１₃−ＭｅＯＨエキス（４５．４ｇ）を得た。最後にＭｅＯＨ（５Ｌ）を用いて同
様の方法で抽出し、抽出液を減圧濃縮してＭｅＯＨエキス（１９２．３ｇ）を得た。

ローヤルゼリーからの抽出方法を図１に示す。

［化合物Ａの単離方法］
このＭｅＯＨエキス（１９２．３ｇ）をｌＬのＨ₂Ｏに溶解してＤＩＡＩＯＮ ＨＰ−
２０（記分離条件１参照）に付し、Ｈ₂Ｏ（２０Ｌ）を流した後、ＭｅＯＨ（１０Ｌ）に
て溶出した。ここで得られたＭｅＯＨ溶出フラクションを減圧濃縮し、ＭｅＯＨ溶出部乾燥重量（７．３７ｇ）を得た。Ｈ₂Ｏ溶出部は飴状をしており、湿重量で（１８０．３９ｇ）を得た。

以下、順相薄層クロマトグラフ（以下、順相ＴＬＣ）におけるスポットの溶出パターンを指標にカラム分画を進めた。ＭｅＯＨ溶出部（７．３７ｇ）を図２に記した操作に従い、４０ｍＬのＭｅＯＨに溶解してｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ−２０（分離条件２参照）に付し、順相ＴＬＣの溶出パターンをモニターしながらフラクション（以下ｆｒ．）１からｆｒ．４に分画した。

その内ｆｒ．２（５０ｍＬずつ分取したｆｒ．７からｆｒ．１０の画分；５．１６ｇ、褐色のメインスポット）を２０ｍＬのＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨ（２０：１）に溶解してシリ
カゲルクロマトグラフィー（分離条件３参照）に付し、ｆｒ．５からｆｒ．７を得た。この内ｆｒ．６（３６２．７ｍｇ、Ｒｆ値；〜０．５のテーリングバンド）を５ｍＬのＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ（１：１）に溶解してＯＤＳ（分離条件４参照）に付し、得られたフラクションの内ｆｒ．９（４４．１ｍｇ、Ｒｆ値；０．１〜０．５、茶色から黒色のスポットを含むテーリングバンドを持ち、ＵＶ吸収性がある）を２ｍＬのＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ（７：３：０．５）に溶解してシリカゲルクロマトグラフィー（分離条件５参照）で精製し、化合物Ａ（８．３ｍｇ、Ｒｆ値；０．３８、こげ茶色のスポット、ＵＶ吸収性がある。収率；５．５３×１０^-4％）を単離した。

単離した化合物Ａについての測定結果は以下の通りである。

−（１）淡黄色、無臭，ｍｐ１０６．０−１０８．０℃
−（２）同定条件
Ｎｅｇａｔｉｖｅ ｉｏｎ ＨＲ−ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ：２６５．０７５１
［Ｍ−Ｈ］^-（Ｃａｌｃｄ． ｆｏｒ Ｃ₁₀Ｈ₇Ｏ₆Ｓ： ２６５．０７４６）
¹Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ＋ＣＤ₃ＯＤ， ２：１）δ：
１．２５〜１．４９（８Ｈ，ｍ，ＣＨ₂×４）
１．６２（２Ｈ，ｍ，Ｈ−９）
２．２３（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４）
３．８６（２Ｈ，ｍ，Ｈ−１０）
５．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，Ｈ−２）
６．９４（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．０，１５．０Ｈｚ，Ｈ−３）

¹³Ｃ−ＮＭＲ （Ｄ₂Ｏ＋ＣＤ₃ＯＤ，２：１）δ：
２６．１，２８．４，２９．４，３１．１，３２．７，６６．６（Ｃ−１０），１２１．６（Ｃ−２），１５２．６（Ｃ−３），１７１．５（Ｃ−１）

ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：
３４２８，２９２７，２８５４，１６９８，１６５４，１３８４，１１２９，１０７７，９８０

［化合物Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆの単離方法］
化合物Ａと同様に、順相ＴＬＣ及び逆相薄層クロマトグラフ（以下、逆相ＴＬＣ）におけるスポットの溶出パターンを指標にカラム分画を進めた。ｆｒ．１〜ｆｒ．４は、順相ＴＬＣにおけるスポットの溶出パターンを指標とし、ｆｒ．５〜ｆｒ．１５は、逆相ＴＬＣにおけるスポットの溶出パターンを指標としてカラム分画を進めた。また、化合物Ｂ及びｆｒ．１６〜２１の分画は、順相ＴＬＣで行った。

このＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨエキス（４５．４ｇ）のうち３ｇを図３に記した操作に従い
、２０ｍＬのＣＨＣ１₃ＭｅＯＨ（２：１）に溶解してＯＤＳカラム（分離条件６参照）
に付し、得られたｆｒ．３（４４６．５ｍｇ、順相ＴＬＣ上でテーリングバンドを示すフラクションが溶出した後、次に流出してくるフラクションを指す）を８ｍＬのヘキサン：酢酸エチル（２：１）に溶解してシリカゲルクロマトグラフィー（分離条件７参照）でｆｒ．５からｆｒ．１５に分画した。この内ｆｒ．５（２４．８ｍｇ、逆相ＴＬＣのＲｆ値；０．４〜０．６、茶色のテーリングバンド部分）を２ｍＬのＭｅＯＨに溶解してＯＤＳカラム（分離条件８参照）で精製し、化合物Ｂ（１．９ｍｇ、Ｒｆ値；０４〜０．５黒色。収率；１．２７×１０^-4％）を得た。

ｆｒ．６（２２１．５ｍｇ、逆相ＴＬＣのＲｆ値；〜０．４まで、茶色のテーリングバンド部分）を２ｍＬのＭｅＯＨに溶解してＯＤＳカラム（分離条件９参照）に対し、ｆｒ．２２（５０％メタノール溶出画分）及びｆｒ．２３（８０％メタノール溶出画分）に分画した。この内、Ｆｒ．２３（３３．６ｍｇ）を高速液体クロマトグラフィー（分離条件１０参照）で精製し、化合物Ｃ（２．６ｍｇ、保持時間２分、収率；１．７４×１０^-4％）、化合物Ｄ（４．７ｍｇ、保持時間３２分、収率；３．１４×１０^-4％）、化合物Ｅ（４．５ｍｇ、保持時間３７分、収率；３．０１×１０^-4％）、化合物Ｆ（３．２ｍｇ、保持時間２８分、収率；２．１４×１０^-4％）を単離した。

化合物Ｂの測定結果は以下の通りである。
−（１）白色粉末、無臭，ｍｐ４３．０−４５．０℃
−（２）同定条件
Ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｉｏｎ ＥＳＩ−ＭＳｍ／ｚ：５２７［Ｍ＋Ｈ］⁺
Ｎｅｇａｔｉｖｅ ｉｏｎ ＥＳＩ−ＭＳｍ／ｚ：５２５［Ｍ−Ｈ］<sup>-

l</sup>Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：
１．６２〜１．１８（３８Ｈ，ｍ）
２．２２（２Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１．２，７．２，８．４Ｈｚ，Ｈ−４）
２．２８（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）
３．６４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）
４．０５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）
４．０６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）
５．８２（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝１．２，１６．０Ｈｚ）
７．０５（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．０，１６．０Ｈｚ）

^l3Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣ１₃）δ：
２４．９，２５．６，２５．８，２５．９，２７．７，２８．６，２８．９，２９．０，２９．１，２９．１，２９．３，２９．３，３２．２，３２．７，３４．３，４４．７，６３．０，６４．２，６４．４，１２０．４（Ｃ−２），１５１．９（Ｃ−３），１７０．０（Ｃ−１），１７３．９，１７４．０
単離した化合物Ｃの測定結果は以下の通りである。
−（１）無定形、無臭
−（２）同定条件
Ｎｅｇａｔｉｖｅ ｉｏｎ ＨＲ−ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ：３２７．２１７１
［Ｍ−Ｈ］^-（Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ₁₈Ｈ₃₁Ｏ₅：３２７．２１７２）

¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：
１．１８〜１．６３（２０Ｈ，ｍ）
２．２３（２Ｈ，ｄｄｔ，Ｊ＝１．８，６．９，７．１Ｈｚ，Ｈ−４）
２．３０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ−１’）
３．６４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，Ｈ−８’）
４．０６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，Ｈ−１０）
５．８２（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝１．５，１５．６Ｈｚ，Ｈ−２）
７．０６（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．１，１５．６Ｈｚ，Ｈ−３）

¹³Ｃ−ＮＭＲ
２４．９，２５．６，２５．８，２７．８，２８．６，２９．０，２９．０，２９．０，２９．１，３２．２，３２．６，３４．４，６３．０（Ｃ−８’）， ６４．３（Ｃ−１０），１２０．７（Ｃ−２），１５２．１（Ｃ−３），１７１．２（Ｃ−１），１７４．０（Ｃ−１’）
単離した化合物Ｄの測定結果は以下の通りである。
−（１）白色粉末、無臭、ｍｐ５５．５−５８．０℃
−（２）同定条件
Ｎａｇａｔｉｖｅ ｉｏｎ ＨＲ−ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ：３６９．２２７９
［Ｍ−Ｈ］^-（Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ₂₀Ｈ₃₃Ｏ₆：３６９．２２７７）

¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：
１．１９〜１．６３（２２Ｈ，ｍ）
２．２３（２Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝６．９，７．０ Ｈｚ，Ｈ−４）
２．２９（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）
２．３４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）
４．０６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，Ｈ−１０）
５．８２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，Ｈ−２）
７．０７（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝６．９，１５．６Ｈｚ，Ｈ−３）

¹³Ｃ−ＮＭＲ
２４．６，２４．９．２５．８，２７．７，２８．５，２８．９，２９．０，２９．１，３２．２，３４．０，３４．３，６４．２，１２０．４，１５２．０，１７１．５，１７３．７，１７９．６
単離した化合物Ｅの測定結果は以下の通りである。
−（１）白色粉末、無臭、ｍｐ３５．５−３７．０℃
−（２）同定条件
Ｎｅｇａｔｉｖｅ ｉｏｎ ＨＲ−ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ：３５５．２４８２
［Ｍ−Ｈ］^-（Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ₂₀Ｈ₃₅Ｏ₅：３５５．２４８４）

¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：
１．１９〜１．６３（２２Ｈ，ｍ）
２．２３（２Ｈ，ｄｄｔ，Ｊ＝１．５，７．３，７．１Ｈｚ，Ｈ−４）
２．３０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，Ｈ−１’）
３．６４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，Ｈ−１０’）
４．０６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，Ｈ−１０）
５．８２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，Ｈ−２）
７．０６（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．１，１５．６Ｈｚ，Ｈ−３）

¹³Ｃ−ＮＭＲ
２５．０，２５．７，２５．８，２７．８，２８．６，２９．０，２９．０，２９．１，２９．２，２９．３，２９．４，３２．２，３２．７，３４．４，６３．０（Ｃ−１０’），６４．３（Ｃ−１０），１２０．７（Ｃ−２），１５２．０（Ｃ−３），１７１．３（Ｃ−１），１７４．１（Ｃ−１’）
単離した化合物Ｆの測定結果は以下の通りである。
−（１）白色粉末、無臭、ｍｐ３３．０−３５．０℃
−（２）同定条件
Ｎｅｇａｔｉｖｅ ｉｏｎ ＨＲ−ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ：３５５．２４８６
［Ｍ−Ｈ］^-（Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ₂₀Ｈ₃₅Ｏ₅：３５５．２４８４）

¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：
０．８８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，Ｈ−１０’）
１．２７〜１．６５（２２Ｈ，ｍ）
２．２３（２Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝６．５，７．２Ｈｚ，Ｈ−４）
２．４１（１Ｈ，Ｊ＝９．０，１６．５Ｈｚ，Ｈ−２’）
２．５１（１Ｈ，Ｊ＝３．６，１６．５Ｈｚ，Ｈ−２’）
４．００（１Ｈ，ｍ，Ｈ−３’）
４．１１（２Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝２．４，４．４Ｈｚ，Ｈ−１０）
５．８２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，Ｈ−２）
７．０６（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．２，１５．６Ｈｚ，Ｈ−３）

¹³Ｃ−ＮＭＲ
１４．１（Ｈ−１０’），２２．７，２５．５，２５．８，２７．８，２８．５，２９．０，２９．０，２９．２，２９．５，３１．８，３２．２，３６．５，４１．３，６４．８（Ｃ−１０），６８．１（Ｃ−３’），１２０．８（Ｃ−２），１５２．０（Ｃ−３），１７１．５（Ｃ−１），１７３．２（Ｃ−１’）

［化合物Ｇの単離方法］
このＭｅＯＨエキス（１９２．３ｇ）をｌＬのＨ₂Ｏに溶解してＤＩＡＩＯＮ ＨＰ−
２０（記分離条件１参照）に付し、Ｈ₂Ｏ（２０Ｌ）を流した後、ＭｅＯＨ（１０Ｌ）に
て溶出した。ここで得られたＭｅＯＨ溶出フラクションを減圧濃縮し、ＭｅＯＨ溶出部乾燥重量（７．３７ｇ）を得た。Ｈ₂Ｏ溶出部は飴状をしており、湿重量で（１８０．３９ｇ）を得た。

以下、順相薄層クロマトグラフ（以下、順相ＴＬＣ）におけるスポットの溶出パターンを指標にカラム分画を進めた。ＭｅＯＨ溶出部（７．３７ｇ）を図４に記した操作に従い、４０ｍＬのＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ（７：３：０．５）に溶解してシリカゲルクロマトグラフィー（分離条件１１参照）に付し、順相ＴＬＣの溶出パターンをモニターしながらフラクション（以下Ｆｒ．）１から４に分画した。

その内ｆｒ．４（１００ｍＬずつ分取したｆｒ．６８からｆｒ．８８の画分； １．１８ｇ、Ｒｆ値；０．７〜０．５、青色のテーリングバンド）を１０ｍＬのＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ（７：３：０．５）に溶解してシリカゲルクロマト（分離条件１２参照）に付し、ｆｒ．５からｆｒ．８を得た。この内ｆｒ．７（５０ｍＬずつ分取したｆｒ．１９からｆｒ．３３の画分；２５０．８ｍｇ、Ｒｆ値；０．５ 、青色スポット）を５ｍＬのＭｅＯＨに溶解してｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ−２０ （分離条件１３参照）で精製し、化合物Ｇ（５３．０ｍｇ、Ｒｆ値；０．５０、青色のスポット、収率；３．５３×１０^-4％）を単離した。

単離した化合物Ｇの測定結果は以下の通りである。
−（１）淡黄色、無臭、ｍｐ２６０．０−２９０．０℃（ｄｅｃ．）
−（２）同定条件
Ｎｅｇａｔｉｖｅ ｉｏｎ ＨＲ−ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ：２６５．０８４３［Ｍ−Ｈ］^-（Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ₁₀Ｈ₁₈Ｏ₆Ｐ：２６５．０８４１）
¹Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ：
１．３２〜１．４９（８Ｈ，ｍ，ＣＨ₂×４）
１．６２（２Ｈ，ｍ，Ｈ₂−９）
２．３２（２Ｈ，ｍ，Ｈ₂−４）
３．８７（２Ｈ，ｍ，Ｈ−１０）
５．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．８Ｈｚ，Ｈ−２）
６．９５（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．２，１２．８Ｈｚ，Ｈ−３）

¹³Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ：
２６．８， ２９．２， ３０．２， ３０．２， ３１．８（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，Ｃ−９）， ３３．１， ６６．３（ｄ，Ｊ＝４．９Ｈｚ，Ｃ−１０）， １２２．３（Ｃ−２）， １５１．０（Ｃ−３）， １７０．１（Ｃ−１）

³¹Ｐ−ＮＭＲ（２４０ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ：２５．６

ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：
３４６７，２９２４，２８５３，１６５４，１５５８，１４２８，１０７７，９１５，８３５，７４９，６６３，５２５，４８６，４７６

本実施例において、化合物Ａ及び化合物Ｂの物性の測定に使用した機器及び試薬類は以下の通りである。

［融点の測定］
ＹＡＮＡＫＯ ＭＰ−Ｓ３型ミクロ融点測定装置（株式会社ヤナコ機器開発研究所製）を用いて測定し，測定値は未補正である．なお、化合物Ｃ〜Ｇについてもこの測定法に従い測定した。

［核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルの測定］
ＪＥＯＬ ＪＮＭ ＧＸ４００（日本電子株式会社製）およびＧＥ ＯＭＥＧＡ ６００（ジェネラル・エレクトリック社製）核磁気共鳴装置を用いて測定した。ケミカルシフトの値は、ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｓｉｌａｎｅ （ＴＭＳ）を内部標準としたδ値（ｐｐｍ）で表示し、結合定数（Ｊ）はヘルツ（Ｈｚ）で表した。またシグナルの表示は、次の略語を用いた。（ｓ：ｓｉｎｇｌｅｔ，ｄ：ｄｏｕｂｌｅｔ，ｔ：ｔｒｉｐｌｅｔ，ｄｄ：ｄｏｕｂｌｅ ｄｏｕｂｌｅｔ，ｄｔ：ｄｏｕｂｌｅ ｔｒｉｐｌｅｔ，ｔｄ：ｔｒｉｐｌｅ ｄｏｕｂｌｅｔ，ｍ：ｍｕｌｔｉｐｌｅｔ）．
［質量分析（ＭＳ）の測定］
ＪＥＯＬ ＪＭＳ−ＤＸ３００／ＪＭＡ３５００システム（日本電子株式会社製）を用い、ＥＳＩ−ＭＳを、加速電圧：３０ｅＶ、チャンバー温度：２２０℃の条件で測定した。

［赤外吸収（ＩＲ）スペクトルの測定］
ＪＡＳＣＯ ＦＴ／ＩＲ−４１０型赤外分光光度計（日本分光株式会社製）を用い、測定法はＫＢｒ錠剤法を用いた。

［薄層クロマトグラフ（ＴＬＣ）の測定］
順相薄層クロマトグラフ（順相ＴＬＣ）の条件は、以下の通りである。
薄層種：ＤＣ−Ａｌｕｆｏ１ｉｅｎ Ｋｉｓｅｌｇｅｌ ６０Ｆ₂₅₄（ＭＥＲＣＫ Ａｒ
ｔ．５５５４）
展開溶媒：ＣＨＣ１₃：ＭｅＯＨ：Ｈ₂Ｏ＝７：３：０．５
検出法：５％ Ｈ₂ＳＯ₄／ＭｅＯＨを噴霧後加熱し発色させた。

逆相薄層クロマトグラフ（逆相ＴＬＣ）の条件は以下の通りである。
薄層種：２０ＤＣ−Ａｕｆｏｌｉｅｎ ２０×２０ｃｍ ＲＰ−１８Ｆ₂₅₄Ｓ
展開溶媒：８０％メタノール
検出法：５％ Ｈ₂ＳＯ₄／ＭｅＯＨを噴霧後加熱し発色させた。

本実施例において、化合物Ｃ〜Ｆの物性の測定については、以下の機器及び試薬を用いた。
［質量分析（ＭＳ）］
ＪＥＯＬ ＪＭＳ−ＤＸ３００／ＪＭＡ３５００システム（日本電子株式会社製）を用い、ＦＡＢ−ＭＳを、加速電圧：３ｋＶ、マトリックス：トリエタノールアミン、コリジョンガス：Ｘｅの条件で測定した。
［高速液体クロマトグラフ（ＨＰＬＣ）］
ポンプにＪＡＳＣＯ ＰＵ−９８０リサイクルシステム（日本分光株式会社製）を用い、検出器としてＧＬ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ５０４Ｒ型示差屈折計を用いた。

本実施例において、化合物Ｇの物性の測定については、以下の機器及び試薬を用いた。

［核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルの測定］
ＪＥＯＬ ＪＮＭ ＧＸ４００およびＪＥＯＬ ＥＣＡ６００ＳＮ（日本電子株式会社製）核磁気共鳴装置を用いて測定した。ケミカルシフトの値は、ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｓｉｌａｎｅ （ＴＭＳ）を内部標準としたδ値（ｐｐｍ）で表示し、³¹Ｐ−ＮＭＲのケミカルシフトの値は８５％リン酸を外部標準としたδ値（ｐｐｍ）で表示し、結合定数（Ｊ）はヘルツ（Ｈｚ）で表した。またシグナルの表示は、次の略語を用いた。（ｓ：ｓｉｎｇｌｅｔ，ｄ：ｄｏｕｂｌｅｔ，ｔ：ｔｒｉｐｌｅｔ，ｄｄ：ｄｏｕｂｌｅ ｄｏｕｂｌｅｔ，ｄｔ：ｄｏｕｂｌｅ ｔｒｉｐｌｅｔ，ｔｄ：ｔｒｉｐｌｅ ｄｏｕｂｌｅｔ，ｍ：ｍｕｌｔｉｐｌｅｔ）．
［質量分析（ＭＳ）の測定］
ＪＥＯＬ ＪＭＳ−ＤＸ３００／ＪＭＡ３５００システム（日本電子株式会社製）を用い、ＦＡＢ−ＭＳを、加速電圧：３ｋＶ、マトリックス：トリエタノールアミン、コリジョンガス：Ｘｅの条件で測定した。

［赤外吸収（ＩＲ）スペクトルの測定］
ＪＡＳＣＯ ＦＴ／ＩＲ−４１０型赤外分光光度計（日本分光株式会社製）を用い、測定法はＫＢｒ錠剤法を用いた。

［薄層クロマトグラフ（ＴＬＣ）の測定］
順相薄層クロマトグラフ（順相ＴＬＣ）の条件は、以下の通りである。
薄層種：ＤＣ−Ａｌｕｆｏ１ｉｅｎ Ｋｉｓｅｌｇｅｌ ６０Ｆ₂₅₄（ＭＥＲＣＫ Ａｒ
ｔ．５５５４）
展開溶媒：ＣＨＣ１₃：ＭｅＯＨ：Ｈ₂Ｏ＝６：４：１
検出法：Ｄｉｔｔｍｅｒ−Ｌｅｓｔｅｒ試薬を噴霧後ＭｅＯＨで洗浄した。

化合物Ａ〜Ｇの単離条件は、以下の通りである。
［単離条件］
条件１
カラム種類：ＤＩＡＩＯＮ−ＨＰ２０（Ｍｉｔｓｕｂｉｓｈｉ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ／三菱化学株式会社）
カラム寸法：内径５．５×４０．０ｃｍ （１５０ｇ）
カラム温度：２５℃（室温）
溶媒：Ｈ₂Ｏ→ＭｅＯＨ
流速：２００ｍＬ／ｍｉｎ

条件２
カラム種類：Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ−２０（ファルマシア社）
カラム寸法：内径４．０×６０ｃｍ （１６０ｇ）
カラム温度：２５℃（室温）
溶媒：１００％ ＭｅＯＨ
流速：１５ｍＬ／ｍｉｎ

条件３
カラム種類：ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ＃９３８５（メルク社）
カラム寸法：内径４．０×９．０ｃｍ （５４ｇ）
カラム温度：２５℃（室温）
溶媒：ＣＨＣ１₃−ＭｅＯＨ ２０：１→１０：１→８：２
→ＣＨＣ１₃−ＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ ８：２：１
→ＭｅＯＨ
流速：２０ｍＬ／ｍｉｎ

条件４
カラム種類：ＯＤＳ（ナカライテスク、カラムクロマトグラフ用，Ｃｏｓｍｏｓｉｌ ７５Ｃ１８−Ｏｐｅｎ）
カラム寸法：内径２×７ ｃｍ （９ｇ）
カラム温度：２５℃（室温）
溶媒：ＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ １：１→４：ｌ
→ＭｅＯＨ
流速：１０ｍＬ／ｍｉｎ

条件５
カラム種類：ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ ＃９３８５（メルク社）
カラム寸法：内径２．０×９．５ｃｍ （１０ｇ）
カラム温度：２５℃（室温）
溶媒：ＣＨＣ１₃−ＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ ７：３：０．５→６：４：１
流速：２０ｍＬ／ｍｉｎ

条件６
カラム種類：ＯＤＳ（ナカライテスク、カラムクロマトグラフ用，Ｃｏｓｍｏｓｉｌ ７５Ｃ１８−Ｏｐｅｎ）
カラム寸法：内径４．０×９．０ｃｍ （２４ｇ）
カラム温度：２５℃（室温）
溶媒：ＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ １：１→４：１
→ＭｅＯＨ流速：１０ｍＬ／ｍｉｎ

条件７
カラム種類：ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ ＃９３８５（メルク社）
カラム寸法：内径４．０×ｌ３．０ｃｍ （４３ｇ）
カラム温度：２５℃（室温）
溶媒：ｎ−ヘキサン−酢酸エチル ２：１→１：１
→ＣＨＣ１₃→ ＭｅＯＨ
流速：２０ｍＬ／ｍｉｎ

条件８
カラム種類：ＯＤＳ（ナカライテスク、カラムクロマトグラフ用，Ｃｏｓｍｏｓｉｌ ７５Ｃ１８−Ｏｐｅｎ）
カラム寸法：内径２．０×６．０ｃｍ （８ｇ）
カラム温度：２５℃（室温）
溶媒：ＭｅＯＨ‐Ｈ₂Ｏ １：１→４：１
→ＭｅＯＨ
流速：１０ｍＬ／ｍｉｎ

条件９
カラム種類：ＯＤＳ（ナカライテスク、カラムクロマトグラフ用，Ｃｏｓｍｏｓｉｌ ７５Ｃ１８−Ｏｐｅｎ）
カラム寸法：内径２．０ｃｍ×７．５ｃｍ（９．３ｇ）
カラム温度：２５℃（室温）
溶媒：ＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ ４：１→ＭｅＯＨ
流速：１０ｍＬ／ｍｉｎ

条件１０
カラム種類：ＣａＬ Ｎｏ．２５４７８−９６ Ｍｉｇｈｔｙｓｉｌ ＲＰ−１８ＧＰ２５０−１０（５μｍ）Ｃｉｃａ−Ｒｅａｇｅｎｔ（関東化学株式会社製）
カラム温度：２５℃（室温）
溶媒：ＣＨ₃ＣＮ−Ｈ₂Ｏ ７：３
流速：１．８ｍＬ／ｍｉｎ
検出器：示差屈折計
条件 １１
カラム種類：Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ−２０ （ファルマシア社）
カラム寸法：内径 ５．５ ｘ ５０．０ ｃｍ （２００ｇ）
カラム温度：２５℃（室温）
溶媒：ＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨ ８：２ →
ＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ ８：２：０．１
→７：３：０．５ →６：４：１→５：５：１→
ＭｅＯＨ
流速：３０ｍＬ／ｍｉｎ

条件 １２
カラム種類：ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ ＃９３８５ （メルク社）
カラム寸法：内径４．０ ｘ １５．０ ｃｍ （４２ ｇ）
カラム温度：２５℃（室温）
溶媒：ＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ ７：３：０．５ →６：４：１→ＭｅＯＨ
流速：２０ｍＬ／ｍｉｎ

条件 １３
カラム種類：Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ−２０ （ファルマシア社）
カラム寸法：内径２．０ ｘ ２０．０ ｃｍ （１５ ｇ）
カラム温度：２５℃（室温）
溶媒：ＭｅＯＨ
流速：５ｍＬ／ｍｉｎ

ローヤルゼリーからの抽出方法を示す。 化合物Ａの単離方法を示す。 化合物Ｂ〜Ｆの単離方法を示す。 化合物Ｇの単離方法を示す。

Claims (1)

1. 一般式（１）：
   

   

   （式中、Ｒは、ＳＯ₃Ｈ、ＰＯ₃Ｈ₂、或いは下記式（２）〜（６）のいずれかで表される基：
   

   

   を示す。）
   で表されるデセン酸誘導体又はその塩。
   

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