CN107722094B - 一种甾体类天然药物及其在制备抗肿瘤药物中的用途 - Google Patents
一种甾体类天然药物及其在制备抗肿瘤药物中的用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107722094B CN107722094B CN201710940760.4A CN201710940760A CN107722094B CN 107722094 B CN107722094 B CN 107722094B CN 201710940760 A CN201710940760 A CN 201710940760A CN 107722094 B CN107722094 B CN 107722094B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- medicine
- undulata
- compound
- prepared
- dictyostatin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title abstract description 27
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 title description 3
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 title description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- OFPZNTXZCGKCMU-VXBOPZJTSA-N (3z,5e,7r,8s,10s,11z,13s,14r,15s,17s,20r,21s,22s)-22-[(2s,3z)-hexa-3,5-dien-2-yl]-8,10,14,20-tetrahydroxy-7,13,15,17,21-pentamethyl-1-oxacyclodocosa-3,5,11-trien-2-one Chemical compound C=C\C=C/[C@H](C)[C@@H]1OC(=O)\C=C/C=C/[C@@H](C)[C@@H](O)C[C@H](O)\C=C/[C@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)C[C@@H](C)CC[C@@H](O)[C@@H]1C OFPZNTXZCGKCMU-VXBOPZJTSA-N 0.000 claims description 17
- OFPZNTXZCGKCMU-QUQSCIKMSA-N Dictyostatin 1 Natural products CC(C=C/C=C)C1OC(=O)C=C/C=C/C(C)C(O)CC(O)C=C/C(C)C(O)C(C)CC(C)CCC(O)C1C OFPZNTXZCGKCMU-QUQSCIKMSA-N 0.000 claims description 17
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 9
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 11
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 abstract description 10
- -1 steroid compound Chemical class 0.000 abstract description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 7
- 241000024430 Dictyopteris undulata Species 0.000 abstract description 6
- 208000036762 Acute promyelocytic leukaemia Diseases 0.000 abstract description 5
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 abstract description 5
- 208000033826 Promyelocytic Acute Leukemia Diseases 0.000 abstract description 5
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 abstract description 5
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 abstract description 5
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 abstract description 3
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 abstract description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 abstract description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 abstract description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 abstract description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 abstract description 3
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 abstract description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 abstract description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 3
- 239000006187 pill Substances 0.000 abstract description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 abstract description 3
- 235000005807 Nelumbo Nutrition 0.000 abstract description 2
- 240000002853 Nelumbo nucifera Species 0.000 abstract description 2
- 230000005918 in vitro anti-tumor Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 abstract description 2
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 8
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 8
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 8
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 5
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 4
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 4
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 4
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- GJYVZUKSNFSLCL-UHFFFAOYSA-N dichloromethanol Chemical compound OC(Cl)Cl GJYVZUKSNFSLCL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 150000002611 lead compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 3
- 238000011894 semi-preparative HPLC Methods 0.000 description 3
- 229930004725 sesquiterpene Natural products 0.000 description 3
- VUDQSRFCCHQIIU-UHFFFAOYSA-N 1-(3,5-dichloro-2,6-dihydroxy-4-methoxyphenyl)hexan-1-one Chemical compound CCCCCC(=O)C1=C(O)C(Cl)=C(OC)C(Cl)=C1O VUDQSRFCCHQIIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000224495 Dictyostelium Species 0.000 description 2
- 241000199915 Dictyotaceae Species 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 239000012259 ether extract Substances 0.000 description 2
- 238000002114 high-resolution electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 150000004354 sesquiterpene derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- OFNXOACBUMGOPC-HZYVHMACSA-N 5'-hydroxystreptomycin Chemical group CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O OFNXOACBUMGOPC-HZYVHMACSA-N 0.000 description 1
- GKBHKNPLNHLYHT-UHFFFAOYSA-N 5beta-Stigmastan Natural products C1CC2CCCCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 GKBHKNPLNHLYHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000512259 Ascophyllum nodosum Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 210000003771 C cell Anatomy 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 241000199916 Dictyotales Species 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000028389 Nerve injury Diseases 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 241000199919 Phaeophyceae Species 0.000 description 1
- 241000206609 Porphyra Species 0.000 description 1
- 108010081750 Reticulin Proteins 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000002542 deteriorative effect Effects 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- OFNXOACBUMGOPC-UHFFFAOYSA-N hydroxystreptomycin Natural products CNC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(C=O)(O)C(CO)OC1OC1C(N=C(N)N)C(O)C(N=C(N)N)C(O)C1O OFNXOACBUMGOPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- OKPOKMCPHKVCPP-UHFFFAOYSA-N isoorientaline Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(CC2C3=CC(OC)=C(O)C=C3CCN2C)=C1 OKPOKMCPHKVCPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000008764 nerve damage Effects 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 229940056360 penicillin g Drugs 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- JTQHYPFKHZLTSH-UHFFFAOYSA-N reticulin Natural products COC1CC(OC2C(CO)OC(OC3C(O)CC(OC4C(C)OC(CC4OC)OC5CCC6(C)C7CCC8(C)C(CCC8(O)C7CC=C6C5)C(C)O)OC3C)C(O)C2OC)OC(C)C1O JTQHYPFKHZLTSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- GKBHKNPLNHLYHT-LWQAOISPSA-N stigmastane Chemical compound C1CC2CCCC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 GKBHKNPLNHLYHT-LWQAOISPSA-N 0.000 description 1
- LAGFCVRVICMFFF-UHFFFAOYSA-N stigmastane Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2C3CCC4CC(=O)CC(C)C4C3CCC12C)C(C)C LAGFCVRVICMFFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明涉及医药技术领域，涉及从中国波状网翼藻Dictyopteris undulata Holmes中提取分离得到的、具有抗肿瘤作用的新天然药物，该药物为甾体类化合物网翼藻素J(dictyopterisin J)。体外抗肿瘤活性试验表明，该化合物对人急性早幼粒白血病细胞(HL‑60)和人肺癌细胞(A‑549)的IC50值分别为1.17和1.60μM，因此可用于制备抗肿瘤药物，可与其他药物制成抗肿瘤药物组合物，可与药学可以接受的辅料制成注射剂、片剂、丸剂、胶囊剂、溶液、悬浮剂和乳剂等剂型；其给药途径可为经口服、静脉、肌肉或皮肤给药。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域，具体涉及从中国波状网翼藻Dictyopteris undulataHolmes中提取分离得到的、具有抗肿瘤作用的新天然药物，该药物为新甾体类化合物网翼藻素J(dictyopterisin J)。
背景技术
随着社会的进步，由此造成的工作压力不断加大以及全球环境不断恶化，恶性肿瘤的发病率呈逐年上升趋势，恶性肿瘤已成为危害人类健康的重大疾病之一。据世界卫生组织(WHO)最新公布数据表明，全球每年有880万人死于癌症，占全球每年死亡总人数近六分之一。每年有1400多万新发癌症病例，预计到2030年这一数字将增加到2100多万，癌症将超越心血管疾病成为人类的头号杀手。寻找和开发高效低毒的抗肿瘤药物已成为世界医药界最重大的研究课题之一。
海洋生物基于其特殊的生态环境，从而成为发现具有新颖结构、显著生物活性天然药物先导化合物的重要源泉。据Marilet数据库记载，目前已从种类繁多的海洋生物中发现了22000余种新的海洋天然产物，其中具有显著特殊生理活性和临床应用前景的海洋药物先导化合物就有数百种。我国拥有极其丰富的海洋生物资源，其中已查明的生物种类就达2万余种，这为我国海洋创新药物研究提供了丰富的物质基础。因此，从我国海洋生物资源中寻找创新药物先导化合物具有巨大的潜力。
网翼藻属(Dicyopteris)海藻为网地藻科(Dictyotaceae)海洋植物(褐藻门，网地藻目)，全球约有35余种，其中我国海域已查明的有5种，分布于从潮间带到深达数百米的海底，以及从炎热的热带海域到寒冷的两极海区。在过去的六十多年中，国内外科研工作者已对二十余种网翼藻属海藻进行了系统的化学成分及其生物活性研究，从中发现了倍半萜、降倍半萜、倍半萜酚类、C11碳水化合物、C11含硫化合物、甾体及脂肪酸等七种结构类型的化合物。其中倍半萜是该属海藻最主要的化学成分。现代药理活性研究表明，网翼藻属海藻中发现的部分化合物还具有抗炎、抗菌、拒食、杀虫、神经损伤保护及细胞毒等多样的生物活性。
波状网翼藻Dictyopteris undulata Holmes为网翼藻属海藻，主要分布于我国辽宁、福建、台湾及广东沿海，对其化学成分及药理作用研究报道较少。近年来我们一直致力于从我国海洋生物中寻找生物活性物质，网翼藻素J(dictyopterisin J)是从波状网翼藻中分离得到一种豆甾烷型甾体类化合物。网翼藻素J是新化合物，其抗肿瘤活性未见报道。
发明内容
本发明提供了一种从中国波状网翼藻(D.undulata)中提取分离得到的、具有抗肿瘤作用的新甾体类化合物——网翼藻素J(dictyopterisin J)。经药理试验研究表明，该化合物对人急性早幼粒白血病细胞(HL-60)和人肺癌细胞 (A-549)显示了明显的细胞毒活性，其IC50值分别为1.17和1.60μM。
本发明的目的之一是提供新的甾体类化合物网翼藻素J。
本发明的目的之二是提供所述网翼藻素J的制备方法。
本发明的目的之三是提供所述网翼藻素J的用途。具体地说，所述网翼藻素J可用于制备抗肿瘤药物，可与其他药物制成抗肿瘤药物组合物，可与药学可以接受的辅料制成注射剂、片剂、丸剂、胶囊剂、溶液、悬浮剂和乳剂等剂型；其给药途径可为经口服、静脉、肌肉或皮肤给药。
根据本发明的第一个目的，本发明首次从波状网翼藻中发现了网翼藻素J，其化学结构如下所示：
根据本发明的第二个目的，本发明提供所述网翼藻素J的制备方法，它是从波状网翼藻中分离得到的，具体步骤如下：
1)制备提取物浸膏
将冷冻的波状网翼藻(D.undulata)用乙醇按常规渗漉提取，得提取液，将提取液减压浓缩回收乙醇，得粗浸膏；
2)分离纯化
(1)将上述粗浸膏分散于水中成混悬液，将混悬液用乙醚萃取，所得萃取液浓缩得到乙醚提取浸膏；
(2)将乙醚浸膏进行硅胶柱层析，依次以石油醚/丙酮和二氯甲醇/甲醇梯度洗脱，根据TLC显色合并相似流份得到12个组分(A–L)；其中组分G即石油醚/丙酮体积比8:2洗脱部分经Sephadex LH-20凝胶柱层析，以二氯甲烷/甲醇体积比1:1洗脱；根据TLC显色合并相似流份得到4个组分(G1-G4)，组分G2 (即二氯甲烷/甲醇体积比1:1洗脱体积为75～90mL洗脱部分)再经硅胶柱层析，以石油醚/丙酮体积比8:2洗脱，最后经半制备型HPLC，以甲醇/水90:10体积比洗脱，得到本发明化合物网翼藻素J。
在上述制备方法中，在制备提取物浸膏步骤中，所述提取采用的乙醇为95％乙醇。
在上述制备方法中，在分离步骤中，石油醚/丙酮梯度洗脱的浓度依次为体积比100:0、90:10、80:20、70:30、50:50和40:60。二氯甲醇/甲醇梯度洗脱的浓度依次为体积比70:30、60:40和50:50。
在上述制备方法中，在分离步骤中，所述半制备型HPLC的色谱柱的填料为 RP-18。
根据本发明的第三个目的，本发明提供了所述网翼藻素J可用于制备抗肿瘤药物，可与其他药物制成抗肿瘤药物组合物。
为了达到应用目的，可以制成注射剂、片剂、丸剂、胶囊剂、溶液、悬浮剂和乳剂等形式。其给药途径可为经口服、静脉、肌肉或皮肤给药。
具体实施方式
在如下的实施例中所指的网翼藻素J的化学结构式(结构式中的阿拉伯数字是化学结构中碳原子的标位)：
实施例1：所述网翼藻素J的制备
1.制备波状网翼藻提取物浸膏
(1)制备提取液
将冷冻的中国波状网翼藻(D.undulata)(采自广东湛江沿海)1.8kg(湿重)分别用5L 95％乙醇渗漉提取三次，每次渗漉2天，合并提取液；
(2)制备提取物浸膏
将上述提取液在温度≤45℃减压浓缩回收乙醇，得粗浸膏174.5g；
2.分离纯化
1)将上述粗浸膏分散于2L水中成混悬液，将混悬液用乙醚(1.5L)萃取四次，所得萃取液减压浓缩得到乙醚提取浸膏(54.3g)；
2)将乙醚浸膏进行硅胶柱层析，依次以石油醚/丙酮和二氯甲醇/甲醇梯度洗脱；石油醚/丙酮梯度洗脱的浓度依次为体积比100:0、90:10、80:20、70:30、50:50 和40:60，二氯甲醇/甲醇梯度洗脱的浓度依次为体积比70:30、60:40和50:50。根据TLC显色合并相似流份得到12个组分(A–L)；
3)组分G即石油醚/丙酮体积比8:2洗脱部分经Sephadex LH-20凝胶柱层析【层析柱规格：3.1(直径)×120(长度)cm；Sephadex LH-20凝胶干重：150 g】，以二氯甲烷/甲醇体积比1:1洗脱，根据TLC显色合并相似流份得到4个组分(G1-G4)；
4)组份G2，即二氯甲烷/甲醇体积比1:1洗脱体积为75～90mL洗脱部分，再经硅胶柱层析，以石油醚/丙酮体积比8:2洗脱，最后经半制备型HPLC(色谱柱的填料为RP-18)，以甲醇/水体积比90:10洗脱，流速为3.5mL/min，保留时间为16.8min，得到本发明化合物网翼藻素J，经鉴定为新化合物。
3.结构鉴定
按常规经NMR、HRESIMS、UV及IR等多种现代光谱技术，确定了化合物网翼藻素J的化学结构，其理化性质如下：
白色粉末,分子式为C29H46O3；
比旋光度
(c 0.17,CHCl3)；
紫外光谱UV(MeOH)λmax(logε):234(3.88)nm；
红外光谱IR(KBr)νmax:3550,1687,1598,1512,1345,1202,1030,988cm–1；
高分辨质谱HR-ESI-MS m/z 465.3346[M+Na]+(calcd for C29H46O3Na,465.3345)；
核磁共振氢谱1H NMR(600MHz)及核磁共振碳谱13C NMR(150MHz)数据见表1。
表1所述网翼藻素J的1H和13C NMR(ppm in CDCl3)
实施例2：所述网翼藻素J的体外抗肿瘤活性试验
细胞株：人急性早幼粒白血病细胞(HL-60)和人肺癌细胞(A-549)。
试验方法：采用芬丹明B法(SRB)测定细胞生长抑制率。具体为取对数生长期的HL-60和A-549细胞株，用含50U/mL苄青霉素钠、50μg/mL链霉素和 10％FCS的DMEM/F12培养基配制成3.0×105/mL的细胞悬液，接种到96孔板中，每孔100μL。在37℃细胞培养箱中过夜培养后加入含抗生素无血清 DMEM/F12培养基稀释的不同浓度的待测样品溶液100μL，继续培养30分钟后，将细胞移入5％CO2/95％空气的培养箱中孵育48小时。将96孔板各孔接种细胞加100μL 20％TCA溶液，在4℃固定1小时，去除上清液，细胞水洗4遍，干燥后加100μL 0.4％SRB，室温下染色12分钟，1％醋酸洗涤4遍，干燥后加入 200μL Tris溶液(10Nm,PH 7.4)溶解，使细胞中的SRB全部溶出，室温下充分振摇5分钟后使用酶标仪在波长490nm下测定给药孔和空白孔OD值。细胞生长抑制率＝(1－用药组平均OD值/对照组孔OD值)×100％
试验结果的评判与解释：细胞半数生长抑制时的药物浓度IC50按照量效数据进行换算。每个实验重复三次，吸收值差异小于5％，IC50差异小于30％。以 IC50≤20μg/ml为有效标准。
试验结果：结果如表2所示，本发明化合物网翼藻素J对人急性早幼粒白血病细胞(HL-60)和人肺癌细胞(A-549)显示了明显的细胞毒活性，其IC50值分别为1.17和1.60μM。
试验结论：通过分子生物学试验，可以看出化合物网翼藻素J对人急性早幼粒白血病细胞(HL-60)和人肺癌细胞(A-549)显示了明显的细胞毒活性。因此，本发明的网翼藻素J可用于制备抗肿瘤药物，可与其他药物制成抗肿瘤药物组合物。
表2网翼藻素J的细胞毒试验结果(IC50值，μM)
*阳性对照药。
Claims (1)
1.一种抗肿瘤药物组合物，其特征在于：含有网翼藻素J，所述网翼藻素J的化学结构如下
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710940760.4A CN107722094B (zh) | 2017-10-11 | 2017-10-11 | 一种甾体类天然药物及其在制备抗肿瘤药物中的用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710940760.4A CN107722094B (zh) | 2017-10-11 | 2017-10-11 | 一种甾体类天然药物及其在制备抗肿瘤药物中的用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107722094A CN107722094A (zh) | 2018-02-23 |
| CN107722094B true CN107722094B (zh) | 2020-06-05 |
Family
ID=61210258
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201710940760.4A Expired - Fee Related CN107722094B (zh) | 2017-10-11 | 2017-10-11 | 一种甾体类天然药物及其在制备抗肿瘤药物中的用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107722094B (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104497090A (zh) * | 2014-11-03 | 2015-04-08 | 南昌大学 | 蕨藻烯酮及其制备方法和用途 |
| CN107674108A (zh) * | 2017-10-11 | 2018-02-09 | 南昌大学 | 豆甾烷型甾体类化合物在制备糖尿病或肥胖症药物中的应用 |
-
2017
- 2017-10-11 CN CN201710940760.4A patent/CN107722094B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104497090A (zh) * | 2014-11-03 | 2015-04-08 | 南昌大学 | 蕨藻烯酮及其制备方法和用途 |
| CN107674108A (zh) * | 2017-10-11 | 2018-02-09 | 南昌大学 | 豆甾烷型甾体类化合物在制备糖尿病或肥胖症药物中的应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN107722094A (zh) | 2018-02-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Podterob | Chemical composition of lichens and their medical applications | |
| CN110452249A (zh) | 新吉玛烷型倍半萜内酯类化合物及其制备和应用 | |
| CN102940687B (zh) | 一种川楝子提取物及其用途 | |
| CN107722096B (zh) | 一种具有抗肿瘤作用的甾体类天然药物及其制备方法和用途 | |
| CN107746421B (zh) | 化合物dictyopterisin f及其在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN107722094B (zh) | 一种甾体类天然药物及其在制备抗肿瘤药物中的用途 | |
| CN107722095B (zh) | 化合物Dictyopterisin I在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN107722097B (zh) | 抗肿瘤化合物dictyopterisinh及其制备方法和用途 | |
| CN101974060A (zh) | 一类具有抗肿瘤活性的半合成化合物及其用途 | |
| CN100434419C (zh) | 单环多取代饱和环已酮类化合物及其制备方法和用途 | |
| CN113402529B (zh) | 三聚愈创木烷型倍半萜类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN115785116B (zh) | 三个新颖骨架杜松烷型倍半萜氧桥二聚体的制备方法与应用 | |
| CN115974695B (zh) | 珊瑚树中降vibsane二萜类化合物的制备方法及其应用 | |
| CN118108727B (zh) | 一种咔唑生物碱类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN102618448B (zh) | 补身烷型倍半萜环己烯酮衍生物、其制备方法及用途 | |
| CN112920146B (zh) | 倍半萜类化合物及其制备方法和在制备抗炎药物中的应用 | |
| CN116120334B (zh) | 芫花花蕾中的二萜类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN113024551B (zh) | 一种从鸦胆子中提取分离的化合物及其制备方法和应用 | |
| CN108299178B (zh) | 愈创木烷型倍半萜b及其制备方法和作为制备预防肿瘤和抗肿瘤药物的应用 | |
| CN116375776A (zh) | 具有抗肿瘤活性的棒节石斛倍半萜苷化合物及其制备方法和应用 | |
| CN1872828B (zh) | 单环多取代环己烯醇和酮类化合物及其制备方法与用途 | |
| CN100422167C (zh) | 环己酮类饱和双环(桥环)化合物及其制备方法与用途 | |
| CN103724184B (zh) | 一种抗肿瘤化合物Chondrosterin J及其制备方法与应用 | |
| JPH0892118A (ja) | 狼毒に含まれる抗癌および抗ウィルス性成分の採取法および使用法 | |
| CN1133645C (zh) | 二色桌片参中新的抗肿瘤化合物Intercedenside A |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20200605 |