CN102940687B - 一种川楝子提取物及其用途 - Google Patents
一种川楝子提取物及其用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102940687B CN102940687B CN201210524604.7A CN201210524604A CN102940687B CN 102940687 B CN102940687 B CN 102940687B CN 201210524604 A CN201210524604 A CN 201210524604A CN 102940687 B CN102940687 B CN 102940687B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fructus toosendan
- extract
- peaceful
- preparation
- pool
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了一种川楝子提取物及其制备方法,所述川楝子提取物含有川楝里宁、尼泊里宁A、尼泊里宁B、1-去乙酰基尼泊里宁B等四种柠檬苦素类成分的一种以上,其主要制备步骤如下:选取川楝子药材,采用水或醇-水混合溶剂提取,提取液合并,浓缩,得川楝子浸膏;所得川楝子浸膏分散于水中,用与水不混溶的有机溶剂萃取3-5次,萃取液合并浓缩,干燥,即得所述川楝子提取物。本发明同时公开了所述川楝子提取物在制备药品和农药方面的应用,特征在于所述川楝子提取物具有抗炎、抗肿瘤等药理作用。本发明有效成分明确、制备工艺简洁、易于实现产业化放大,具有较好的应用价值。
Description
技术领域
本发明涉及一种川楝子提取物,本发明同时涉及所述川楝子提取物的制备方法及其在医药领域和农药中的用途。
技术背景
川楝子为楝科植物川楝(MeliatoosendanSied.EtZucc.)的成熟果实,是一味传统中药,功能舒肝行气、止痛、驱虫,用于胸胁、脘腹胀痛,疝痛,虫积腹痛等证有近二千年的用药历史,为中国历版药典收载。现代研究结果表明,川楝子提取物具有抗菌、抗病毒、抗炎、镇痛、杀虫等多种药理活性。柠檬苦素类成分是楝属(Melia)植物中的主要药理活性成分,该类成分为多氧取代的复杂三萜类成分,母核结构多变,不同植物品种和同一植物不同部位之间均存在较大差别。近年来,通过对川楝子的化学成分进行了系列研究,从中发现了一些特征性的尼泊里宁(nimbolinin)型柠檬苦素类成分,参见通式(1)。其主要结构特征在于C环裂环、12-15位碳原子间形成新的氧环,同时12位碳为缩醛结构,常以互变异构体形式存在。该类成分除川楝子外,主要只在苦楝子和非洲同属植物Meliavolkensin果实中发现,具有较强的科属和部位特异性。2007年以前报道化合物总计13个,见表1。
表1尼泊里宁型柠檬苦素类化合物及其来源
注:1川楝子;2苦楝子;3Meliavolkensin果实。
[1]MunehiroNakatani,etal.Nimbolinins,C-secolimonoidsfromthefruitsofMeliatoosendan.Heterocycles2000,53(3):689-695;[2]ZhangQiong,etal.MinorlimonoidsfromMeliatoosendanandtheirantibacterialactivity.PlantaMedica2007,73(1):1298-1303;[3]WolfgangKraus,MichaelBokel.NeueTetranortriterpenoideausMeliaazedarachLinn.(Meliaceae).ChemischeBerichte1981,114(1):267-275;[4]MohammedS.Rajab,etal.AnewlimonoidinsectantifeedantfromthefruitofMeliavolkensin.J.Nat.Prod.1988,51(1):168-171.
近年来对尼泊里宁类等成分的新进展,拓宽了人们对川楝子中化学成分的认识。但对川楝子药理活性与化学成分的相关性,仍有待于进一步研究。
本发明通过对川楝子的三萜类化学成分和药理作用进行研究,在此基础上制定出成分基本明确可控的川楝子提取物,从而完成本发明。
发明内容
本发明的目的是提供一种有效成分可控的川楝子提取物。
本发明的又一目的是提供一种所述川楝子提取物的制备工艺,及其在医药领域和农药中的用途。
本发明提供的川楝子提取物含有通式(1)所示柠檬苦素类成分:
其中,R1和R2可为H或R3,R3为选自Ac、Bz、Cin、Tig的任意一种酯基。
本发明所述川楝子提取物中含有新化合物成分川楝里宁(R1=R2=Tig)。
又一方面,本发明所述川楝子提取物中含有尼泊里宁A(R1=Ac,R2=Bz,R3=H)、尼泊里宁B(R1=Ac,R2=Tig,R3=H)、1-去乙酰基尼泊里宁B(R1=H,R2=Tig,R3=H)中的任意一种以上。
本发明提供的制备所述川楝子提取物的方法包括以下步骤:
(1)选取川楝子药材,采用水或醇-水混合溶剂进行提取,提取液合并,浓缩,得川楝子浸膏;过滤,得粗提取液;
(2)由(1)所得川楝子浸膏分散于水中,用与水不混溶的有机溶剂萃取3-5次,萃取液合并浓缩,干燥,即得所述川楝子提取物。
所述工艺步骤(1)中,所述提取溶剂优选为乙醇-水混合溶剂,其中优选60-95%乙醇。牡丹科植物为白芍、赤芍、牡丹中的任意一种,所述提取方法可为回流提取、超声提取、微波辅助提取、逆流提取中的任意一种。
所述工艺步骤(2)中,所述有机溶剂为石油醚、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯中的任意一种或任意二种的混合溶剂,其中优选乙酸乙酯或石油醚-乙酸乙酯混合溶剂。
本发明同时对该提取物的抗肿瘤、抗炎作用进行了考察。研究结果:(1)采用MTT法,对川楝子提取物和四个尼泊里宁类化合物进行了抗肝癌肿瘤细胞活性筛选,结果显示川楝子提取物和四个化合物1-4对肝癌细胞(HepG-2)均有显著抑制作用;2)二甲苯致小鼠急性耳肿胀试验结果表明,所述川楝子提取物组灌药给药(50-200mg/kg)具有显著的抗炎作用。结果表明,所述川楝子提取物具有较好的抗肿瘤和抗炎活性,四个尼泊里宁类化合物是该提取物的主要有效成分之一,所述提取物可以根据使用需要应用于相关的药品和农药中。
本发明通过川楝子的化学成分研究,创新性地发现了其中的1个新尼泊里宁类化合物和其他主要的三个同类成分,并初步验证了该类成份在抗肿瘤、抗炎方面对川楝子药理作用的贡献;在此基础上建立了川楝子提取物的制备工艺,所述工艺路线经济合理、效率高、能耗低,溶剂便于回收和循环利用,容易实现工业化生产。
本发明内容是通过大量实验研究和工艺优化完成的,以下述具体实施例进行说明。
附图说明
图1为川楝里宁的+ESIMS谱图。
图2为川楝里宁的IR谱图。
图3为川楝里宁的1H-NMR谱图(CDCl3,600MHz)。
图4为川楝里宁的13C-NMR谱图(CDCl3,150MHz)。
具体实施方式
本发明所述的川楝子提取物是按以下实施例所表示的方法制造,所涉及到的方法是本领域的技术人员能够掌握和运用的技术手段。但以下实施例不得理解为任何意义上的对本领域发明权利要求的限制。
实施例1川楝子提取物的制备
取川楝子药材4kg,粉碎成粗粉,用50L75%乙醇回流提取3次,每次2小时,合并提取液,减压回收溶剂,得川楝子浸膏550g,用4L水分散,用乙酸乙酯振摇萃取4次,每次4L,乙酸乙酯萃取液合并,减压回收溶剂,得川楝子提取物(180g)。
实施例2川楝子提取物中化学成分的分离鉴定
取实施例1所得川楝子提取物(100g),经常压硅胶柱层析,石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯系统梯度洗脱,得到140个流份,经TLC检识,合并为10个组分(F1~10)。采用硅胶、反相硅胶、凝胶等多种吸附材料,通过常压柱层析、中压柱层析及高压液相制备技术等多种分离方法,从F6(Fr87~92)分离得到化合物1(51mg)和化合物2(14mg);从F5(Fr73~86)得到化合物3(22mg);从F8(Fr98~109)得到化合物4(300mg)。
化合物1、2和4的MS、NMR等数据,经与文献对照,分别确证为尼泊里宁A(NimbolininA)、尼泊里宁B(NimbolininB)和1-去乙酰基尼泊里宁B(1-DeacetylnimbolininB)。
化合物3,白色无定形粉末,(c0.11,CHCl3)。ESIMS(附图1)给出[M+Na]+峰为m/z689,[M+H-H2O]+峰为m/z649,[M+H-2H2O]+峰为m/z631,结合13C-NMR谱数据,推断其分子式为C38H50O10。IR中(附图2)给出3448(OH),2930(烯氢),1716(酯羰基),1652(C=C)cm-1处的特征吸收。化合物3的1H-(附图3)、13C-(附图4)NMR谱上在12,15,22位等处出现固定比例的12-α/β异构体系列信号峰。经1D和2D-NMR(1H-1HCOSY,HSQC,HMBC及ROESY)解析,并与已知化合物1、2、4和文献(ZhangQiongetal.,PlantaMedica2007,73:1298-1303.)对照,归属其中12α-异构体的波谱数据(表2)。化合物3为新化合物,命名为川楝里宁(Toosendalinin)。
表2化合物3(12α)的1H-和13C-NMR数据归属(δinppm,JinHz,inCD3Cl)
试验例1川楝子提取物和单体化合物的体外抗肿瘤活性筛选
取实施例1川楝子提取物,配制为200、100、50、25、12.5mg/L;另取实施例2的四个单体化合物,均配制为100、50、25、12.5、7.25μmol/L。取对数生长期人肝癌HepG-2细胞株细胞,用胰酶消化后配制成浓度为1×106个/mL的细胞悬液,接种于96孔酶标板中,每孔100μl。24h后加含不同药物及相应溶媒对照的新鲜培养液,对照组以等体积溶媒替代样品的培养液,空白组加等体积的不含细胞的培养液,每孔50μl,每组设5个平行孔。在上述条件下培养48h,其后每孔加入5mg/mLMTT10μl,继续培养4h后,每孔加50μlDMSO溶解,用微型振荡器振荡混匀后,于酶标仪上测定OD值,实验重复3次,取平均值,计算抑制率。
抑制率(%)=[(1-样品组OD值/对照组OD值)]×100%
结果:采用MTT法,对川楝子提取物和四个化合物进行了抗肝癌肿瘤细胞活性筛选,结果显示川楝子提取物和四个化合物1-4对肝癌细胞(HepG-2)均有显著抑制作用,其IC50依次为74mg/L;8.5、7.3、6.4、9.2μmol/L。
试验例2川楝子提取物的抗炎作用试验
采用实施例1川楝子提取物试药,取20-25g小鼠50只,随机分为川楝子提取物组1(50mg/kg)、川楝子提取物组2(100mg/kg)、川楝子提取物组3(200mg/kg)、齐墩果酸对照组和模型组四组,预灌药一周。最后一次灌药2小时后,用二甲苯25微升均匀涂于小鼠右耳,半小时后处死小鼠,用直径6mm打孔器,取小鼠的左右耳相同部位,用分析天平称重。取下的右耳减去左耳重量为肿胀度,计算对照组和给药组的均值与标准差,t检验比较组间差异显著性。按下式求出肿胀抑制率:
肿胀抑制率(%)=[1-给药组平均肿胀度/模型组平均肿胀度]×100%
结果:川楝子提取物组1-3、、齐墩果酸对照组(100mg/kg)对二甲苯所致小鼠耳廓急性炎症的肿胀抑制率分别为58、67、75、68(%),组间比较无明显差异(P<0.5),表明川楝子提取物(50-200mg/kg)均有一定的抑制作用。
Claims (8)
1.一种川楝子提取物,特征在于所述川楝子提取物含有通式(1)所示柠檬苦素类成分:
其中,R1和R2为H或R3,R3为选自Ac、Bz、Cin、Tig的任意一种酯基;其中含有川楝里宁:R1=R2=Tig。
2.根据权利要求1所述川楝子提取物,特征在于其中含有尼泊里宁A、尼泊里宁B、1-去乙酰基尼泊里宁B中的任意一种以上。
3.根据权利要求1所述川楝子提取物,特征在于所述川楝子提取物的制备方法步骤为:
(1)选取川楝子药材,采用水或醇-水混合溶剂提取,提取液合并,浓缩,得川楝子浸膏;
(2)由(1)所得川楝子浸膏分散于水中,用与水不混溶的有机溶剂萃取3-5次,萃取液合并浓缩,干燥,即得所述川楝子提取物。
4.根据权利要求3所述川楝子提取物的制备方法,特征在于步骤(1)中所述提取溶剂为乙醇-水混合溶剂,其中乙醇浓度为60-95%。
5.根据权利要求3所述川楝子提取物的制备方法,特征在于步骤(2)中所述有机溶剂为石油醚、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯中的任意一种或任意二种的混合溶剂。
6.根据权利要求5所述川楝子提取物的制备方法,特征在于步骤(2)中所述有机溶剂为乙酸乙酯或石油醚-乙酸乙酯混合溶剂。
7.根据权利要求1所述川楝子提取物在制备具有抗炎作用药品方面的应用。
8.根据权利要求1所述川楝子提取物在制备具有抗肿瘤作用药品方面的应用。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201210524604.7A CN102940687B (zh) | 2011-12-12 | 2012-12-10 | 一种川楝子提取物及其用途 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201110410051.8 | 2011-12-12 | ||
CN201110410051 | 2011-12-12 | ||
CN201210524604.7A CN102940687B (zh) | 2011-12-12 | 2012-12-10 | 一种川楝子提取物及其用途 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN102940687A CN102940687A (zh) | 2013-02-27 |
CN102940687B true CN102940687B (zh) | 2016-01-13 |
Family
ID=47723747
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201210524604.7A Active CN102940687B (zh) | 2011-12-12 | 2012-12-10 | 一种川楝子提取物及其用途 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN102940687B (zh) |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104447650B (zh) * | 2014-12-22 | 2016-03-09 | 湖南城市学院 | 一种柠檬苦素类化合物、制备方法与医药用途 |
CN104744558B (zh) * | 2015-03-23 | 2017-03-22 | 中国药科大学 | 柠檬苦素‑7‑氨基衍生物、其制法以及医药用途 |
CN104922214B (zh) * | 2015-06-08 | 2019-11-12 | 贵州大学 | 川楝子有效部位的应用及其制备方法 |
CN105294616A (zh) * | 2015-11-25 | 2016-02-03 | 杨飞杰 | 一种用于内皮细胞保护的新的柠檬苦素类化合物 |
CN105968079A (zh) * | 2016-05-16 | 2016-09-28 | 苏州毕诺佳医药技术有限公司 | 一种新的二苯乙烯类化合物及其制备方法和医药用途 |
CN110623886A (zh) * | 2019-10-31 | 2019-12-31 | 山东花物堂生物科技有限公司 | 一种苦楝树皮提取物的制备方法 |
CN115142260B (zh) * | 2022-07-01 | 2024-09-17 | 武汉纺织大学 | 一种抗菌莱赛尔面料及其制备方法 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1793821A (zh) * | 2005-11-14 | 2006-06-28 | 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所 | 一种检测柑橘皮、籽原料中柠檬苦素类化合物含量的样品前处理方法 |
-
2012
- 2012-12-10 CN CN201210524604.7A patent/CN102940687B/zh active Active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1793821A (zh) * | 2005-11-14 | 2006-06-28 | 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所 | 一种检测柑橘皮、籽原料中柠檬苦素类化合物含量的样品前处理方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
Limonoids from the fruits of Melia toosendan;Jin-Feng Hu等;《Phytochemistry Letters》;20110930;第4卷(第3期);第292-297页 * |
川楝子的化学成分研究;谢帆等;《中国药学杂志》;20080722;第43卷(第14期);1066-1069 * |
柠檬苦素的类型和结构;章洛汗等;《内蒙古中医药》;20091031(第20期);42-43 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN102940687A (zh) | 2013-02-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102940687B (zh) | 一种川楝子提取物及其用途 | |
AU2022352631B2 (en) | Azulene compound, and preparation method therefor and use thereof | |
CN105348192B (zh) | 一种翅荚决明中抗病毒活性的异喹啉生物碱类化合物及其制备方法 | |
CN105294623B (zh) | 一种倍半萜内酯类化合物、其制备方法以及应用 | |
CN104817432B (zh) | 一种二萜类化合物的抗肿瘤用途 | |
CN104311623B (zh) | 一种名为油茶皂苷c1和油茶皂苷c2的五环三萜类化合物及其制备方法与应用 | |
CN104497090B (zh) | 蕨藻烯酮及其制备方法和用途 | |
CN105153271B (zh) | 两个新的达玛烷型三萜类化合物及其制备方法和用途 | |
CN103599145A (zh) | 铁筷子提取物及其中有效成分的分离方法和所得化合物 | |
CN104387362B (zh) | 一种环烯醚萜酯类化合物、其制备方法以及应用 | |
CN102030813B (zh) | 一种具有高效抗癌活性的黄姜盾叶新苷的制备方法及其用途 | |
CN108912049B (zh) | 从高乌头中提取的二萜类生物碱化合物及制备方法和应用 | |
CN103610682B (zh) | 3α-羟基-30-齐墩果-12,20(29)-二烯-28-酸的制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
CN106317155B (zh) | 一种还原性葫芦烷型三萜及其制法和用途 | |
CN105418722B (zh) | 一种名为油茶皂苷c4和c5的五环三萜类化合物的制备方法 | |
CN109879921A (zh) | 从知母中分离的具有抗肿瘤活性的化合物及其制备方法 | |
CN105175252A (zh) | 一种二萜类化合物及其制备方法与应用 | |
CN101245089A (zh) | 一对新的人参皂苷元和其混合体的制备方法及其制剂 | |
CN105079011A (zh) | 一种具有抗肿瘤作用的药物的制备和应用 | |
CN109206392B (zh) | 一种香豆素类化合物及其制备方法与应用 | |
US20100168451A1 (en) | Preparative method of dihydrocucurbitacin f-25-o-acetate and the use thereof in the manufacture of medicaments for treating cancers | |
CN101851271A (zh) | 蓝萼丁素衍生物、制备方法及其用途 | |
CN101538259A (zh) | 蓬莪术环二烯的晶型a、其制备方法及其在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
CN102188502B (zh) | 一种具有抗肿瘤作用的黄三七总皂苷的提取方法及其组成 | |
CN113024551B (zh) | 一种从鸦胆子中提取分离的化合物及其制备方法和应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20170801 Address after: 201203, 421, Newton Road, Zhangjiang, Shanghai, Pudong New Area Patentee after: Shanghai Green Valley Pharmaceutical Co., Ltd. Address before: 215123 Jiangsu Province, Suzhou City Industrial Park Wenjing road Soochow University School of Medicine Patentee before: Soochow University |
|
TR01 | Transfer of patent right |