CN108299178B - 愈创木烷型倍半萜b及其制备方法和作为制备预防肿瘤和抗肿瘤药物的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及天山假狼毒根部分离纯化技术领域，是一种愈创木烷型倍半萜B及其制备方法和作为制备预防肿瘤和抗肿瘤药物的应用。本发明首次公开了(+)‑Guaia‑l(10),ll‑dien‑9‑one‑4α,5α‑dyhydroxy，本发明所述的(+)‑Guaia‑l(10),ll‑dien‑9‑one‑4α,5α‑dyhydroxy对HepG‑2细胞和HeLa细胞具有较强的抑制作用，从而使得(+)‑Guaia‑l(10),ll‑dien‑9‑one‑4α,5α‑dyhydroxy能够作为制备预防肿瘤药物和抗肿瘤药物的应用。
Description
技术领域
本发明涉及天山假狼毒根部分离纯化技术领域，是一种愈创木烷型倍半萜B及其制备方法和作为制备预防肿瘤和抗肿瘤药物的应用,愈创木烷型倍半萜B为所述(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy的简称。
背景技术
天山假狼毒S.tianschanica为瑞香科(Thymelaeaceae)假狼毒属Stelleropsis植物，生于海拔1700～2000m的山坡草地，在我国仅新疆昭苏县有分布，国外在吉尔吉斯斯坦也有分布。天山假狼毒作为狼毒的混用品，由于其独特的地理环境使得有关该植物化学成分的研究报道较少，主要活性成分分别为瑞香烷型二萜和愈创木烷型倍半萜，具有抗菌消炎，抗肿瘤等多种功效，临床上主要用于治疗咳嗽、哮喘、支气管炎、结核等多种疾病。由于肿瘤的发展速度快、难于控制、治疗药物不良反应大,使得肿瘤一直是威胁人类生命、困扰医疗工作者的医学难题。天山假狼毒中的倍半萜类成分在抗肝癌和宫颈癌方面具有较好的抗肿瘤活性,且不良反应小、价格便宜、来源广泛,从而得到广大中外科研工作者的重视。
天山假狼毒的药效主要来源于其中的愈创木烷型倍半萜类化合物，因此，开发和利用天山假狼毒的的愈创木烷型单体化合物，进一步挖掘其潜在的药用价值，并对其单体化合物的结构和理化性质进行确定和表征，对于开发利用天山假狼毒具有重要意义。
发明内容
本发明提供了一种(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy及其制备方法和作为制备预防肿瘤和抗肿瘤药物的应用，克服了上述现有技术之不足，本发明首次公开了(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy，本发明所述的(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy对HepG-2细胞和HeLa细胞具有较强的抑制作用，从而使得本发明(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy能够作为制备预防肿瘤药物和抗肿瘤药物的应用。
本发明的技术方案之一是通过以下措施来实现的：一种(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy，化学结构式为
下面是对上述发明技术方案之一的进一步优化或/和改进：
上述(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy按照下述方法得到：第一步，将天山假狼毒根部粉碎过筛并加入甲醇，在室温下浸泡3小时至4小时后，在50℃至60℃条件下加热回流提取3次，每次1小时至3小时，合并每次回流提取液并减压回收、浓缩，得天山假狼毒总浸膏；第二步，将天山假狼毒总浸膏用水分散成混悬液后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，将萃取液浓缩得到石油醚部位浸膏；第三步，取石油醚部位浸膏用硅胶柱色谱梯度洗脱分离后得到8个馏分，其中，硅胶柱色谱梯度洗脱液包括氯仿和甲醇，氯仿和甲醇的体积比依次为1:0、100:1、80:1、50:1、40:1、30:1、10:1、4:1；第四步，将第4个馏分经高效液相色谱梯度洗脱后纯化分离，并收集洗脱物，在第18.8分钟处得到(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy。
上述第一步中，每1g天山假狼毒根部加入8mL至12mL甲醇。
上述第四步中，高效液相色谱梯度洗脱的洗脱液为甲醇和水的混合液，其中，甲醇和水的体积比为60：40。
本发明的技术方案之二是通过以下措施来实现的：一种(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy的制备方法，其特征在于按照下述步骤进行：第一步，将天山假狼毒根部粉碎过筛并加入甲醇，在室温下浸泡3小时至4小时后，在50℃至60℃条件下加热回流提取3次，每次1小时至3小时，合并每次回流提取液并减压回收、浓缩，得天山假狼毒总浸膏；第二步，将天山假狼毒总浸膏用水分散成混悬液后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，将萃取液浓缩得到石油醚部位浸膏；第三步，取石油醚部位浸膏用硅胶柱色谱梯度洗脱分离后得到8个馏分，其中，硅胶柱色谱梯度洗脱液包括氯仿和甲醇，氯仿和甲醇的体积比依次为1:0、100:1、80:1、50:1、40:1、30:1、10:1、4:1；第四步，将第4个馏分经高效液相色谱梯度洗脱后纯化分离，并收集洗脱物，在第18.8分钟处得到(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy。
下面是对上述发明技术方案之一的进一步优化或/和改进：
上述第一步中，每1g天山假狼毒根部加入8mL至12mL甲醇。
上述第四步中，高效液相色谱梯度洗脱的洗脱液为甲醇和水的混合液，其中，甲醇和水的体积比为60：40。
本发明的技术方案之三是通过以下措施来实现的：一种(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy作为制备预防肿瘤药物的应用。
本发明的技术方案之四是通过以下措施来实现的：一种(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy作为制备抗肿瘤药物的应用。
本发明的技术方案之五是通过以下措施来实现的：一种(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy作为制备防治肿瘤保健品的应用。
本发明首次公开了(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy，本发明所述的(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy对HepG-2细胞和HeLa细胞具有较强的抑制作用，从而使得本发明(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy能够作为制备预防肿瘤药物和抗肿瘤药物的应用。
附图说明
附图1为本发明所述的(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy的化学结构图。
附图2为本发明所述的(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy的1H-NMR谱图。
附图3为本发明所述的(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy的13C-APT谱图。
具体实施方式
本发明不受下述实施例的限制，可根据本发明的技术方案与实际情况来确定具体的实施方式。本发明中所提到各种化学试剂和化学用品如无特殊说明，均为现有技术中公知公用的化学试剂和化学用品；本发明中的百分数如没有特殊说明，均为质量重量百分数；本发明中的溶液若没有特殊说明，均为溶剂为水的水溶液，例如，盐酸溶液即为盐酸水溶液；本发明中的常温、室温一般指15℃到25℃的温度，一般定义为25℃。
下面结合实施例对本发明作进一步描述：
实施例1：该(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy，化学结构式为
将本实施例所述的(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy进行核磁共振氢谱(1H-NMR)和核磁共振碳谱(13C-APT)分析，本实施例所述的(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy的1H-NMR谱图如图2所示，实施例所述的(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy的13C-APT谱图如图3所示，对图2和图3进行图谱解析，将图2和图3各峰进行归属，图2和图3的峰归属如表2所示。通过图2、图3和表1的数据可知，本实施例所述的(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy的化学结构式如图1所示，本实施例所述的(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy为白色粉末，易溶于氯仿、甲醇。
实施例2：该(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy按照下述方法得到：第一步，将天山假狼毒根部粉碎过筛并加入甲醇，在室温下浸泡3小时至4小时后，在50℃至60℃条件下加热回流提取3次，每次1小时至3小时，合并每次回流提取液并减压回收、浓缩，得天山假狼毒总浸膏；第二步，将天山假狼毒总浸膏用水分散成混悬液后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，将萃取液浓缩得到石油醚部位浸膏；第三步，取石油醚部位浸膏用硅胶柱色谱梯度洗脱分离后得到8个馏分，其中，硅胶柱色谱梯度洗脱液包括氯仿和甲醇，氯仿和甲醇的体积比依次为1:0、100:1、80:1、50:1、40:1、30:1、10:1、4:1；第四步，将第4个馏分经高效液相色谱梯度洗脱后纯化分离，并收集洗脱物，在第18.8分钟处得到(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy。
实施例3：该(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy按照下述方法得到：第一步，将天山假狼毒根部粉碎过筛并加入甲醇，在室温下浸泡3小时或4小时后，在50℃或60℃条件下加热回流提取3次，每次1小时或3小时，合并每次回流提取液并减压回收、浓缩，得天山假狼毒总浸膏；第二步，将天山假狼毒总浸膏用水分散成混悬液后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，将萃取液浓缩得到石油醚部位浸膏；第三步，取石油醚部位浸膏用硅胶柱色谱梯度洗脱分离后得到8个馏分，其中，硅胶柱色谱梯度洗脱液包括氯仿和甲醇，氯仿和甲醇的体积比依次为1:0、100:1、80:1、50:1、40:1、30:1、10:1、4:1；第四步，将第4个馏分经高效液相色谱梯度洗脱后纯化分离，并收集洗脱物，在第18.8分钟处得到(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy。
实施例4：作为上述实施例的优化，第一步中，每1g天山假狼毒根部加入8mL至12mL甲醇。
实施例5：作为上述实施例的优化，第四步中，高效液相色谱梯度洗脱的洗脱液为甲醇和水的混合液，其中，甲醇和水的体积比为60：40。
实施例6：该(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy作为制备预防肿瘤药物的应用。
实施例7：该(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy作为制备抗肿瘤药物的应用。
实施例8：该(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy作为制备防治肿瘤保健品的应用。
实施例9：该(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy按照下述方法得到：第一步，将10kg天山假狼毒根部粉碎过筛并加入100mL甲醇，在室温下浸泡3小时后，在50℃条件下加热回流提取3次，每次2小时，合并每次回流提取液并减压回收、浓缩，得天山假狼毒总浸膏；第二步，将2.189kg天山假狼毒总浸膏用水分散成混悬液后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，将萃取液浓缩得到石油醚部位浸膏；第三步，取0.108kg石油醚部位浸膏用硅胶柱色谱梯度洗脱分离后得到8个馏分，其中，硅胶柱色谱梯度洗脱液包括氯仿和甲醇，氯仿和甲醇的体积比依次为1:0、100:1、80:1、50:1、40:1、30:1、10:1、4:1；第四步，将第4个馏分经凝胶色谱洗脱后再依次用体积比为60：40的甲醇和水作为洗脱液洗脱除去色素，然后经高效液相色谱纯化分离，在第18.8分钟处得到(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy。
将本发明所述的(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy进行体外抗肿瘤药效学实验，体外抗肿瘤药效学实验利用MTT比色法。
以(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy为实验组，以Paclitaxel(紫杉醇，抗肿瘤药物)为对照组，同时设立空白组，实验组、对照组和空白组选取HepG-2(人肝癌细胞)细胞和HeLa(人宫颈癌)细胞为实验对象，培养基稀释后，以6×104/mL的密度接种于96孔板，每孔100μl，培养箱中正常培养24小时后，各组加入相对应的药物，使各组药物的最终浓度分别为2.5μg/mL(1组)，5μg/mL(2组)，10μg/mL(3组)，20μg/mL(4组)，40μg/mL(5组)，共设5个浓度，每个浓度3个复孔；培养48小时后，于每孔加MTT 10μl染色；继续培养四小时后，吸弃原培养液，每孔加入DMSO 150μl，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解，并于酶联免疫检测仪570nm波长处检测光密度值，根据光密度值计算50％抑制浓度(IC50，μg/mL)，光密度值计算IC50的计算方法为现有公知技术。实验组、对照组对HepG-2细胞和HeLa细胞的IC50如表2所示。表2数据可以看出，本发明所述的(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy对HepG-2细胞和HeLa细胞均具有一定的抑制作用。
综上所述，本发明首次公开了(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy，本发明所述的(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy对HepG-2细胞和HeLa细胞具有较强的抑制作用，从而使得本发明(+)-Guaia-l(10),ll-dien-9-one-4α,5α-dyhydroxy能够作为制备预防肿瘤药物和抗肿瘤药物的应用。
以上技术特征构成了本发明的实施例，其具有较强的适应性和实施效果，可根据实际需要增减非必要的技术特征，来满足不同情况的需求。表1
表2
Claims (7)
1.一种愈创木烷型倍半萜B，其特征在于其化学结构式为
2.一种根据权利要求1所述的愈创木烷型倍半萜B的制备方法，其特征在于按照下述步骤进行：第一步，将天山假狼毒根部粉碎过筛并加入甲醇，在室温下浸泡3小时至4小时后，在50℃至60℃条件下加热回流提取3次，每次1小时至3小时，合并每次回流提取液并减压回收、浓缩，得天山假狼毒总浸膏；第二步，将天山假狼毒总浸膏用水分散成混悬液后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，将萃取液浓缩得到石油醚部位浸膏；第三步，取石油醚部位浸膏用硅胶柱色谱梯度洗脱分离后得到8个馏分，其中，硅胶柱色谱梯度洗脱液包括氯仿和甲醇，氯仿和甲醇的体积比依次为1:0、100:1、80:1、50:1、40:1、30:1、10:1、4:1；第四步，将第4个馏分经高效液相色谱梯度洗脱后纯化分离，并收集洗脱物，在第18.8分钟处得到愈创木烷型倍半萜B。
3.根据权利要求2所述的愈创木烷型倍半萜B的制备方法，其特征在于第一步中，每1g天山假狼毒根部加入8mL至12mL甲醇。
4.根据权利要求2或3所述的愈创木烷型倍半萜B的制备方法，其特征在于第四步中，高效液相色谱梯度洗脱的洗脱液为甲醇和水的混合液，其中，甲醇和水的体积比为60：40。
5.一种根据权利要求1所述的愈创木烷型倍半萜B作为制备预防肿瘤药物的应用。
6.一种根据权利要求1所述的愈创木烷型倍半萜B作为制备抗肿瘤药物的应用。
7.一种根据权利要求1所述的愈创木烷型倍半萜B作为制备防治肿瘤保健品的应用。
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| CN103242275A (zh) * | 2013-05-13 | 2013-08-14 | 沈阳药科大学 | 莪术中倍半萜类化合物及其制备方法和用途 |
| CN105669416A (zh) * | 2015-11-10 | 2016-06-15 | 海南师范大学 | 一种愈创木烷型倍半萜化合物及其制备方法与应用 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 天山假狼毒和瑞香狼毒叶中挥发性成分的分析研究;石磊岭等;《新疆医科大学学报》;20170115(第01期);全文 * |
| 天山假狼毒的化学成分研究(Ⅱ);石磊岭等;《中草药》;20170112(第01期);全文 * |
| 天山假狼毒的化学成分研究;石磊岭等;《中草药》;20160128(第02期);全文 * |
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