KR100858575B1 - 피부 외용제 및 그 제조 방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 미생물을 두류 추출물에 작용시켜 얻어지는 발효 생성물과 비타민 A 및/또는 그 유도체의 1종 또는 2종이상을 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 외용제이다. 본 발명의 피부 외용제는 표피 세포를 부활시키고, 히아루론산 산생을 항진시킴으로서 피부 거침의 방지, 개선 효과, 각질 개선 효과, 보습 효과, 피부 탄력의 소실이나 주름의 예방, 개선효과를 가지며, 피부의 노화의 예방에 유효한 것이다.
Description
본 발명은 피부 외용제로 관한 것으로, 더 상세히는 피부 거침의 방지 및 개선 작용을 나타내며, 피부의 노화를 예방할 수 있는 피부 외용제 및 그 제조 방법에 관한 것이다.
노화한 피부에서는 각층 턴·오버 속도의 저하, 피부의 히아루론산의 감소에 의해, 건조해지기 쉬워지거나 피부 거침, 주름, 늘어짐 등이 생기기 쉬워지고, 피부의 두께가 얇아져서 탄력성이 손상되는 현상이 나타나는 것이 알려져 있다. 이들 원인으로서는 나이가 드는 것 이외에 외적 요인, 즉 자외선 폭로, 건조, 산화 등에 의한 표피 세포나 진피 섬유아세포의 기능 저하, 히아루론산의 분해 등이 고려되고 있다.
이와 같이 노화한 피부의 개선방법으로서는 생약 등의 천연물로부터 추출한 원료나, 화학적으로 합성된 원료 등을 배합한 화장료가 사용되어 보습 효과, 피막 형성 등의 물리화학적 작용으로 피부에 윤택이나 유연성을 갖게 하는 방법이 알려 져 있었다(일본국 특개평 6-279227호 공보, 일본국 특개평 8-310934호 공보). 그러나, 이러한 방법으로 피부 표면의 건조는 개선되지만, 그 효과는 일시적이고, 본질적인 개선 효과를 얻을 수 없었다.
그리하여 피부 자체의 대사 기능을 향상시키고, 히아루론산의 산생을 높이는 시도도 되고 있다. 예를 들면 비타민 A의 대사물인 레티노인산은 비타민 A의 생리 활성체의 하나이고, 표피 세포나 섬유아세포의 증식 촉진작용(Tong PS등, J. Invest. Dermatol. 94, 126-131, 1990, Varani J 등, J. Investig. Dermatol. Symp. Proc. 3, 57-60, 1998), 히아루론산 산생 항진작용(Tammi R 등, J. Invest. Dermatol. 92, 326-332, 1989), 각화 개선 작용(Wanner R 등, Arch. Dermatol. Res. 291, 346-353, 1999), 항건선작용(Orfanos CE 등, Br. J. Dermatol. 88, 167-182, 1973), 항여드름 작용 (Chalker DK 등, J. Am. Acad. Dermatol. 17, 251-254, 1987), 항주름작용(Weiss JS 등, JAMA 259, 527-532, 1988, Tadaki T 등, Tohoku J. Exp. Med. 169, 131-139, 1993), 광노화 피부개선작용(Kligman AM 등, J. Am. Acad. Dermatol. 15, 836-859, 1986) 등의 다양한 피부 생리작용을 가지는 것이 알려져 있다. 그 때문에 이미 미국에서는 레티노인산배합 제제가 광노화 피부 개선제나 주름 개선제로서 사용되고 있다.
그런데 , 레티노인산에는 자극성이 강하다고 하는 문제가 있기 때문에, 이것보다 자극성, 생리작용이 모두 약한 레티놀을 사용하는 시도가 되고 있다. 그리고, 이 레티놀의 생리작용을 높이기 위해, 여러 가지의 화합물과의 병용이 시도되고 있으며, 레티놀과 지방산 아미드(일본국특개평 08-301748호 공보)의 병용이나, 디메 틸이미다졸린(일본국 특개평 9-100211호 공보)과의 병용에 의한 상승적인 표피 세포의 활력 작용이 알려져 있다.
그러나, 종래의 레티놀이나 레티노인산 등의 비타민 A 또는 그의 유도체의 배합에서는 충분한 표피 세포의 활력 작용이나 히아루론산 산생 항진작용을 얻을 수 있고 있다고는 말하기 어려웠다.
또 한편으로, 두유 등의 두류 추출물을 사용한 화장료가 알려져 있으며, 보습 효과, 세정효과가 있는 것이 보고되어 있다(일본국 특개소 62-36304호 공보 등). 더욱이, 두유에 리조푸스 속의 미생물을 작용시킨 것(일본국 특개평 1-102011호 공보), 유산균을 작용시킨 것(일본국 특개평 3-127713호 공보) 및 비피도박테리움 속의 미생물을 작용시킨 것(일본국 특개평 10-287540호 공보)등, 소위 두류 발효 생성물을 화장료 등에 사용하는 것이 알려져 있다.
그러나, 이것에 대해서, 타성분과의 조합에서 표피 세포의 부활작용이나, 히아르론산 산생 항진작용을 높이는 것에 대하여는 전혀 알려지지 않았다.
또한, 이들 두류 발효 생성물을 화장료 등에 사용했을 경우에는 대두취나 발효취, 자극취를 가지는 것도 있으며, 예를 들면 그의 발효취가 제품의 부패를 연상시키는 등, 사용자에 따라서는 불쾌하게 느끼는 것도 있지만, 이들 두류 발효 생성물의 냄새를 저감시키는 유효한 방법도 전혀 알려지지 않았다.
본 발명의 목적은 피부 세포를 부활하고, 히아루론산 산생을 항진시킴으로써, 피부 거침의 방지·개선 효과, 각질 개선 효과, 보습 효과, 탄력 소실이나 주름의 예방 및 개선 효과 등의 작용을 가지며, 피부의 노화의 예방에 유효한 피부 외용제 및 그의 제조방법을 제공하는 것에 있다.
본 발명자들은 이러한 실정을 감안하여 비타민 A 또는 그의 유도체가 가지는 표피세포의 부활작용이나 히아루론산 산생 항진작용을 향상시키는 수단에 대해서 예의 연구한 결과, 상기 성분과 두류 추출물에 미생물을 작용시켜 얻어지는 발효 생성물을 병용함으로써 비타민 A 및 그의 유도체의 세포 부활작용이 한층 높아지고, 또한, 피부 조직중의 히아루론산 산생도 현저하게 촉진되는 것, 더욱이 이 양자를 조합시킨 피부 외용제는 피부의 건조, 피부 거침, 주름, 피부 탄력성의 소실을 개선하여 피용의 노화를 예방할 수 있음을 발견했다. 또한, 본 발명자들은 상기 발효 생성물로서 발효 생성물에 탄산염 또는 탈크로부터 선택되는 1종 또는 2종이상을 접촉시키는 공정을 부가하여 얻어지는 탈취 발효 생성물을 이용함으로서, 발효 생성물 유래의 대두취나 발효취·자극취가 저감된, 기호성이 높은 피부 외용제가 얻어지는 것을 발견하고, 본 발명을 완성하였다.
즉, 본 발명은 미생물을 두류 추출물에 작용시켜 얻어지는 발효 생성물과 비타민 A 및/또는 그 유도체의 1종 또는 2종이상을 함유하는 피부 외용제를 제공하는 것이다.
또한, 본 발명은 상기 발효 생성물이, 다음 공정 (a) 및 (b)에 의해 얻어지는 탈취 발효 생성물인 전술한 피부 외용제를 제공하는 것이다.
(a) 1종 또는 2종이상의 미생물을 두류 추출물에 작용시키는 공정
(b) 공정(a)에 의해 얻어진 발효 생성물에 탄산염 또는 탈크로부터 선택된 1종 또는 2종이상을 접촉시키는 공정
더욱이, 본 발명은 공정(a) 다음에, 다시 공정(c)을 부가하는 것을 특징으로 하는 상기 피부 외용제를 제공하는 것이다.
(c) 유기산으로 pH를 조정하는 공정
또한, 본 발명은 공정(b) 다음에, 다시 공정(d)을 부가하는 것을 특징으로 하는 상기 피부 외용제를 제공하는 것이다.
(d) 20℃이하, 바람직하기로는 5℃이하에서 교반하면서 방치하는 공정
또한, 본 발명은 다음 공정(e) 및 (f)로부터 되는 피부 외용제의 제조방법을 제공하는 것이다.
(e) 1종 또는 2종이상의 미생물을 두류 추출물에 작용시키는 공정
(f) 공정(e)에 의해 얻어진 발효 생성물에 탄산염 또는 탈크로부터 선택된 1종 또는 2종이상을 접촉시키는 공정
도 1은 배양 사람 표피 세포의 대사 활성에 미치는 발효 생성물 1(SB) 및 올-trans-레티놀(ROH)의 병용에 의한 효과를 나타내는 도면이다.
도 2는 배양 사람 표피 세포의 대사 활성에 미치는 발효 생성물 1(SB)과 올- trans-레티노인산(RA)의 병용에 의한 효과를 나타내는 도면이다.
도 3은 배양 사람 표피 세포의 히아루론산 산생에 미치는 발효 생성물 1(S B)과 올-trans-레티놀(ROH)의 병용에 의한 효과를 나타내는 도면이다.
도 4는 배양 사람 표피 세포의 히아루론산 산생에 미치는 발효 생성물 1(SB)과 올-trans-레티노인산 (RA)의 병용에 의한 효과를 나타내는 도면이다.
도 5는 사람 안면의 주름에 미치는 발효 생성물 2와 레티닐 팔미테이트를 배합 한 미용액의 효과를 나타내는 도면이다.
도 6은 사람 안면의 피부 탄력성에 미치는 발효 생성물 2와 레티닐 팔미테이트를 배합한 미용액의 효과를 나타내는 도면이다.
도 7은 사람 안면의 각층 수분 함량에 미치는 발효 생성물 2와 레티닐 팔미테이트를 배합한 에센스의 효과를 나타내는 도면이다.
도 8은 배양 사람 표피 세포의 히아루론산 산생에 미치는 발효 생성물 5(SBZ)와 올-trans-레티놀(ROH)의 병용에 의한 효과를 나타내는 도면이다.
[발명의 실시의 형태]
본 발명에 이용되는 미생물을 두류 추출물에 작용시켜 얻어지는 발효 생성물 (이하, 단순히 "발효 생성물"이라 한다)라는 것은 일반적으로 발효 두유로 불리며, 식품용 소재로서 사용되고 있는 것이다.
상기의 발효 생성물을 제조하기 위해서 사용되는 미생물로서는 특히 한정되지 않지만, 두류 추출물 배지중에서 적어도 1×107cells/㎖까지 배양했을 경우에, 배지중의 아세트산 농도가 70mM 이하가 되는 성질을 가지는 미생물인 것이 바람직하다. 이러한 미생물로서는 예를 들면, 락토바실루스속, 스트렙토콕카스속, 락토콕카스속, 페디오콕카스속, 로이코노스톡속등의 젖산 산생균, 비피도박테리움속 미생물이 바람직하고, 특히 비피도박테리움속 미생물이 바람직하다. 전술한 미생물의 구체적인 예로서는 비피도박테리움·브레베, 비피도박테리움·롱 검, 비피도박테리움·인판티스, 비피도박테리움·아돌레센티스, 비피도박테리움·비피담, 비피도박테리움·안글라탐, 비피도박테리움·카테뉴라탐 등을 들 수 있다. 또, 두류 추출물의 발효는 균주를 복수종 조합한 혼합 발효이어도 좋고, 균주를 복수종 조합한 연속 발효이어도 좋다. 그 경우에는 상기 이외의 미생물로서 바실루스속, 아세토박터속, 글루코노박터속 등의 세균류, 또는 사카로마이세스속, 칸디다속, 로도트롤라속, 피치아속, 쉬조사카로마이세스속, 토룰라속, 지고사카로마이세스속 등의 효모류, 또는 아스페르길루스속, 유우로티움속, 모나스카스속, 무코르속, 뉴로스포라속, 페니실리움속, 리조푸스속 등의 사상균류를 들 수가 있다.
또, 상기 발효 생성물을 얻기 위해서 사용되는 두류 추출물로서는 상기 미생물을 작용시킬 수 있는 것이면 특히 한정되지 않고, 예를 들면 대두, 검은콩, 잠두콩, 팥, 강낭콩, 완두콩, 풋콩 등의 두류 추출물을 들 수 있지만, 특히 대두 추출물이 바람직하다. 이 두류 추출물의 원료가 되는 두류의 형상으로서는 특히 제한은 되지 않지만, 유지를 함유한 두류, 탈피 두류, 탄 두류 또는 플레이크 두류 등이 바람직하고, 특히 탈피 두류가 바람직하다. 더욱, 두류 추출물은 어떤 방법으로 제조된 것이어도 좋으나, 예를 들면, 원료가 되는 두류를 물에 담근 후, 열수 또는 0.5∼1.0 질량%의 탄산나트륨을 함유하는 열수를 첨가하여 마쇄한 후, 비지를 제거 하고, 다시 가열 살균하여 제조한 것을 이용하는 것이 바람직하다. 통상, 이 두류 추출물은 고형분 농도 10질량% 정도의 것을 이용한다.
또, 전술한 두류 추출물에는 필요에 따라, 발효 처리에 앞서, 자당, 포도당, 과당, 전화당 등의 식품에 이용되는 당류 등, 고기 엑기스, 펩톤, 효모 엑기스, 펩티드 등의 미생물의 증식에 필요한 영양소 등을 첨가하여도 좋다. 또, 두류 추출물의 액성을 미생물의 최적 pH로 조정하기 위해서 시트르산, 말산, 아스코르브산, 젖산, 아세트산 등의 식품에 이용되는 산을 첨가하여도 좋다.
이와 같이 조제한 두류 추출물에 상기 미생물을 작용시키는 방법은 특히 한정되지 않고, 예를 들면, 미리 배양한 미생물의 균액을 상기 두류 추출물에 접종한 후, 그 미생물에 적절한 온도, 시간, 교반을 행하면 좋고, 혐기성균이면 혐기성 등의 조건을 적당히 결정하여 발효를 행하면 좋다. 또한, 발효에는 배양에 적합한 조건, 예를 들면, 정치배양, 교반배양, 진탕배양, 통기배양 등의 조건으로 행할 수 있다.
이와 같이 하여 얻어진 발효 생성물은 에탄올 등의 저급 알코올이나, 1,3-부틸렌글리콜, 1,2-펜탄디올 등의 펜티렌글리콜류, 프로필렌글리콜, 글리세린, 이소프렌 글리콜 등의 다가 알코올을 첨가하교, 원심분리, 여과 등에 의해 고분자 물질을 제거한 후, 이용하는 것이 보다 바람직하다.
상기 발효 생성물은 그대로 비타민 A 및/또는 그 유도체와 조합하여 피부 외용제로 할 수가 있으나, 발효 생성물의 냄새를 저감시키기 위해서, 다시 다음의 탈취 공정을 부가하여 제조되는 발효 생성물(이하, "탈취 발효 생성물"이라 한다)을 이용하여도 좋다.
즉, 상기의 발효 생성물에 탄산마그네슘, 탄산칼슘, 탄산아연, 탄산니켈, 탄산바륨, 탄산프라세오디뮴(praseodymium carbonate), 탄산베릴륨, 탄산마그네슘칼슘, 탄산라듐, 탄산이트륨, 탄산카드뮴, 탄산은, 탄산크롬, 탄산코발트, 탄산디스프로슘(dysprosium carbonate), 탄산수은, 탄산세륨, 탄산철, 탄산강철, 탄산스트론튬, 탄산망간, 탄산납 등의 탄산염, 탈크로부터 선택되는 1종 또는 2종이상을 첨가함으로써, 탈취 발효 생성물을 얻을 수 있다. 발효 생성물에 대한 탄산염이나 탈크의 첨가량은 필요에 따라 결정하면 좋으나, 발효 생성물의 양에 대해서 0.005∼10질량%, 바람직하기로는 0.1∼2.0질량%, 보다 바람직하기로는 0.4∼1.2질량% 첨가하면 좋다.
또한, 상기 탈취 공정을 행한 후, 다시 일정시간 방치하면 보다 높은 냄새 저감 효과를 얻을 수 있다. 방치하는 시간은 발효 생성물의 냄새의 강함 등에 따라 적당히 선택하면 좋지만, 5시간 이상, 바람직하기로는 10∼100시간, 보다 바람직하기로는 15∼80시간, 특히 바람직하기로는 50∼70시간 방치하면 좋다. 또, 방치할 때, 동시에 교반하면 더욱 바람직하다. 더욱이, 20℃이하, 바람직하기로는 5℃이하의 온도에서 방치하거나 혹은 교반 방치 후, 상청을 회수하면 더욱 자극취가 저감되고, 또한 분해·불용물 석출 등이 억제된 영속적 안정성이 높은 탈취 발효 생성물을 얻을 수 있다.
또한, 상기 탈취 공정에 더하여 다른 탈취 공정을 조합해도 좋고, 예를 들면, 미생물을 두류 추출물에 작용시키는 공정에 있어서, 아세트산의 생성량을 풍미 적으로 허용될 수 있는 단계에서 정지시킨 후, 유기산으로 pH를 조정하는 공정을 조합함으로써 특히, 대두취, 발효취 및 자극취가 저감된 발효 생성물을 얻을 수 있다. 이 공정에 있어서, 아세트산의 함유량을 허용될 수 있는 단계는 필요에 따라 최종 제품까지 첨가되는 다른 풍미 소재를 고려하여 결정되는 것이지만, 발효 생성물중의 아세트산 농도가 70mM, 바람직하기로는 50mM, 더욱 바람직하기로는 30mM 이하로 되는 단계인 것이 바람직하다. 또한, 이 단계에서는 pH 4.5이상, 바람직하기로는 pH 4.5∼6.0 범위, 보다 바람직하기로는 pH 5.0∼6.0으로 되는 것으로 판단할 수 있다.
pH 조정에 이용되는 유기산으로서는 아세트산 이외의 피부 외용제로서 허용 할 수 있는 산이면 특히 한정되지 않지만, 바람직하기로는 시트르산, 젖산, 말산, 아스코르브산, 타르타르산, 굴루콘산, 숙신산, 글루타민산 등을 이용할 수 있으며, 특히 젖산이 바람직하다. pH 조정에 있어서는 이용하는 미생물에 안정한 범위에서 결정할 수 있다. 발효를 정지한 pH 값으로부터 0.1∼2.5, 바람직하기로는 1.0 정도 내리면 좋고, 최종적으로 본 발명품인 피부 외용제의 pH를 3.5∼5.0가 되도록 조정하는 것이 바람직하다.
또, 미생물을 두류 추출물에 작용시키는 공정 및/또는 탈취 공정 등의 각 공정은 질소 분위기중에서 행함으로써 더욱 대두취, 발효취 및 자극취가 저감된 발효생성물을 얻을 수 있다.
본 발명의 발효 생성물 내지 탈취 발효 생성물의 피부 외용제에의 배합량은 특히 한정되지 않고, 통상 피부 외용제에 사용되는 양이면 좋으나, 예를 들면 조성 물에 대해, 발효생성물 등으로서 0.0001∼50%, 바람직하기로는 0.01∼20%, 특히 바람직하기로는 0.5∼10% 배합하면 좋다.
한편, 본 발명에 사용되는 비타민 A는 식품에 많이 포함되는 일반적인 비타민류이고, 또한, 비타민 A 유도체는 상기 비타민 A로부터 유도된 것으로 모두 식품중에 배합되는 안전성이 높은 것이다. 본 발명에서 사용되는 비타민 A 및/또는 그의 유도체는 특히 한정되지 않고, 예를 들면, β-카로틴 및/또는 그의 유도체, 레티놀, 레티닐 팔미테이트, 레티닐 스테아레이트, 레티닐 아세테이트 등의 레티놀의 각종 지방산 에스테르, 레티닐 락테이트, 레티닐 글리콜레이트 등의 레티놀의 각종 유기산 에스테르, 레티놀의 인산, 피로인산, 황산 등의 각종 무기산 디에스테르 복합체 등을 이용할 수 있고, 올-trans-레티놀 및 그의 이성체, 올-trans-레티노인산 및 그의 이성체, 올-trans-레티날 및 그의 이성체, 이것들의 3-데히드로체, 3,4-디데히드로체가 바람직한 것으로 들 수 있다. 상술한 것 중, 특히 바람직한 것은 널리 시판되고 있으며, 안정성이 비교적 양호한 레티닐 팔미테이트이다. 이들의 비타민 A 및/또는 그의 유도체는 합성에 의해 얻어진 것이어도, 또는 천연 추출물로부터 얻어진 것이어도, 그것을 정제한 것이어도 좋다.
본 발명에서 사용하는 비타민 A 및/또는 그의 유도체도, 그의 배합량은 특히한정되지 않고, 통상 사용되는 양이면 좋지만, 예를 들면 레티놀이면 0.0001∼10%, 레티노인산이면 0.0001∼10%, 레티닐 팔미테이트이면 0.0001∼10% 정도가 바람직하다. 특히, 레티닐 팔미테이트를 0.01∼1%로 사용하는 것이 바람직하다.
본 발명의 피부 외용제의 제조에 있어서는 상기 성분 이외, 의약품류, 의약 부외품류, 화장품류, 목욕용제, 음식품류 등에서 통상 이용되고 있는 원료, 예를 들면, 계면활성제, 유분, 알코올류, 보습제, 증점제, 수용성 고분자, 방부제, 산화 방지제, 킬레이트제, pH 조정제, 발포제, 향료, 색소, 안료, 자외선 흡수·산란제, 분체, 비타민류, 아미노산류, 항균제, 식물 추출물, 동물 유래 성분, 해조 추출물, 각종 약제, 첨가제, 물 등을 배합할 수 있다.
이들 중, 계면활성제로서는 소르비탄 모노라우레이트, 소르비탄 모노팔미테이트, 소르비탄 세스퀴올레에이트, 소르비탄 트리올레에이트, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노스테아레이트 , 폴리에틸렌 글리콜 모노올레이트, 폴리에틸렌 글리콜 알킬레이트, 폴리옥시에틸렌 알킬에테르, 폴리글리콜 디에테르, 라우로일 디에탄올아마이드, 지방산 이소프로판올 아마이드, 말티톨 히드록시 지방산 에테르, 알킬화 폴리사카라이드, 알킬글루코시드, 슈가 에스테르, 친유형 글리세린 모노스테아레이트, 자기 유화형 글리세린 모노스테아레이트, 폴리글리세롤 모노스테아레이트, 폴리글리세린 알킬레이트, 소르비탄 모노올레이트, 폴리에틸렌글리콜 모노스테아레이트, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레이트, 폴리옥시에틸렌 세틸에테르, 폴리옥시에틸렌 스테롤, 폴리옥시에틸렌 라놀린, 폴리옥시에틸렌 밀납, 폴리옥시에틸렌 경화 피마자유 등의 비이온성 계면활성제; 스테아린산나트륨, 팔미틴산칼륨, 세틸 황산나트륨, 라우릴 인산나트륨, 폴리옥시에틸렌 라우릴 황산나트륨, 팔미틴산 트리에탄올아민, 폴리옥시에틸렌 라우릴 인산나트륨, N-아실글루타민산 나트륨 등의 음이온성 계면활성제, 염화 스테아릴 디메틸 벤질 암모늄, 염화 스테아릴 트리메틸 암모늄, 염화 벤자르코늄, 라우릴아민옥 사이드 등의 양이온성 계면활성제; 염화 알킬아미노에틸 글리신액 및 레시틴 등의 양성 계면활성제 등을 들 수 있다.
유분으로서는 마카데미아 넛트유, 피마자유, 올리브유, 카카오유, 동백 기름, 야자유, 목랍, 호호바유, 포도씨 오일, 아보카도 유 등의 식물유지류; 밍크유, 난황유 등의 동물유지류, 밀납, 경랍, 라놀린, 카르나우바 왁스, 칸델리라 왁스 등의 왁스류; 유동 파라핀, 스쿠알렌, 마이크로크리스털린 왁스, 세레신 왁스, 파라핀 왁스, 바셀린 등의 탄화수소류, 라우린산, 미리스틴산, 스테아린산, 올레인산, 이소스테아린산, 베에 닌산, 팔미틴산, 카프린산, 라놀린 지방산, 리놀산, 리노레인산 등의 천연 및 합성 지방산류; 세탄올, 스테아릴알코올, 헥실데칸올, 옥틸도데칸올, 라우릴알코올, 카프릴알코올, 미리스틸 알코올, 세틸알코올, 콜레스테롤, 피토스테롤 등의 천연 및 합성 고급 알코올류, 미리스틴산 이소프로필, 파르미틴산이소프로필, 미리스틴산 옥틸도데실, 올레인산 옥틸도데실, 콜레스테롤올레에이트 등의 에스테르류 등을 들 수 있다.
보습제로서는 글리세린, 에리스리톨, 크실리톨, 말티톨, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 소르비톨, 폴리글리세린, 폴리에틸렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 1,2-펜 탄디올 등의 펜틸렌글리콜류; 이소프렌글리콜 등의 다가 알코올류; 아미노산, 젖산 나트륨, 피롤리톤카르복실산나트륨 등의 천연 보습 성분(NMF); 크실로글루칸, 퀸시드, 카라기난, 펙틴, 매난, 카드란, 갈락탄, 데르마탄 황산, 글리코겐, 케라탄 황산, 콘도로이틴, 무코이틴 황산, 케라트 황산, 로커스트 빈 껌, 숙시노글루칸, 카로닌산, 헤파란 황산, 히아루론산나트륨, 히아루론산, 콜라겐, 무코다당 류, 콘도로이틴 황산 등의 수용성 고분자 물질 등을 들 수 있다.
증점제로서는 알긴산나트륨, 크산탄검, 규산알루미늄, 퀸스 추출물, 트라간트검, 전분, 아라비아 검, 히드록시에틸 구아검, 카르복시메틸 구아검, 구아검, 덱스트란, 키틴, 키토산, 카르복시메틸키틴, 한천 등의 천연 고분자 물질; 메틸셀룰로오스, 히드록시에틸 셀루로오스, 카복시메틸 셀룰로오스, 가용성 전분, 양이온화 셀룰로오스 등의 반합성 고분자 물질; 카르복시비닐 폴리어, 폴리비닐 알코올, 아크릴산 메타크릴산 알킬 공중합체 등의 합성 고분자 물질 등을 들 수 있다.
방부제로서는 벤조에이트, 살리실레이트, 소르베이트, 데히드로아세테이트, p-옥시벤조에이트, 2,4,4'-트리클로로-2'-히드록시디페닐 에테르, 3,4,4'-트리클로로카르보아닐리드, 염화 벤자르코늄, 히노키티올, 레조르신, 에탄올 등을 들 수 있다.
산화 방지제로서는 디부틸히드록시톨루엔, 부틸히드록시아니솔, 프로필 갈레이트, 아스코르브산 등을, 킬레이트제로서는 에데트산염, 피로포스페이트, 헥사메타포스페이트, 시트르산염, 타르타르산염, 글루콘산염 등을, pH 조정제로서는 수산화나트륨, 트리에탄올아민, 시트르산, 시트르산 나트륨, 붕산, 보락스, 인산수소칼륨 등을 각각 들 수 있다.
자외선 흡수·산란제로서는 p-아미노벤조산계 자외선 흡수제, 엔트라닐산계 자외선 흡수제, 살리실산계 자외선 흡수제, 신남산계 자외선 흡수제, 벤조페논계 자외선 흡수제, 당계 자외선 흡수제, 3-(4'-메틸벤질리덴)-d-켐퍼, 1,3-벤질리덴-d,ℓ-캠퍼, 우록사닌산(uroxanic acid), 에틸 우록산네이트, 2-페닐-5-메틸벤족사 졸, 2-(2'-히드록시-5'-t-옥틸페닐)벤조트리아졸, 2-(2'-히드록시-5'-메틸페닐)벤조트리아졸, 디벤잘라딘, 디아니솔 메탄, 4-메톡시-4'-t-부틸디벤조일메탄, 5-(3,3-디메틸-2-노르보르닐리덴)-3-펜탄-2-온, 2-히드록시-4-메톡시벤조페논, 옥틸디메틸 p-아미노벤조에이트, 에틸헥실 p-메톡시신나메이트, 산화티탄, 카올린, 탈크 등을 들 수 있다.
비타민류로서는 비타민 B6 염산염, 비타민 B6 트리팔르미테이트, 비타민 B6 디옥타노에이트, 비타민 B2 및 그의 유도체, 비타민 B12, 비타민 B15 및 그의 유도체 등의 비타민 B류, 아스코르브산, 아스코르브산 황산 에스테르 및 그의 염, 아스코르브산 인산 에스테르 및 그의 염, 아스코르브산 디팔미테이트, 아스코르브산 글루코시드, 아실 아스코르브산 굴루코시드, 아스코르브산 테트라이소팔미테이트 등의 비타민 C류, 비타민 D, α-토코페롤, β-토코페롤, γ-토코페롤, 비타민 E 아세테이트 등의 비타민 E류, 비타민 F, 비타민 K, 판토텐산, 판테틴, 비타민 H, 비타민 P, 비타민 U, 카르니틴, 페르린산(ferulic acid), γ-오리자놀, α-리포산, 오로틱산 및 이들의 유도체 등을 들 수 있다.
아미노산류로서는 글리신, 알라닌, 바린, 로이신, 이소로이신, 세린, 트레오닌, 페닐알라닌, 티로신, 아스파라긴, 글루타민, 타우린, 트립토판, 시스틴, 시스테인, 메티오닌, 프롤린, 히드록시프롤린, 아스파라긴산, 글루타민산, 아르기닌, 히스티딘, 리진 및 이들의 유도체 등을 들 수 있다.
항균제로서는 벤소산, 살리실산, 소르빈산, p-옥시벤조에이트, 헥사클로로펜 등을 들 수 있다.
식물 추출물로서는 울금, 참소리쟁이, 고삼, 개연꽃, 오렌지, 세이지, 톱풀, 전규, 용담과의 월년초, 타임, 안젤리카, 가문비나무, 자작나무, 쇠뜨기, 수세미, 마로니공, 범위귀, 아루니카, 백합, 쑥, 작약, 알로에, 치자나무, 화백나무, 복령, 산치자, 황금, 감초, 사철쑥, 고심, 의이인, 인동, 작약, 상백피, 산사자, 목단피, 세파란틴 등으로부터의 추출물을 들 수 있다.
해조 추출물로서는 다시마, 라미나리아 자포니카, 미역, 녹미채, 아스코피람, 푸칼레스(Fucales), 큰실말, 오키나와 큰실말, 히만탈리아 등의 갈조류, 우뭇가사리, 코랄리나세아에, 팔마리아, 촌드루스 오셀라투스(Chondrus ocellatus), 김 등의 홍조류, 파래 등의 녹조류, 남조류로부터의 추출물을 들 수 있다.
각종 약제로서는 니코틴아미드, 벤질 니코티네이트, γ-오리자졸, 알란토인, 글리시리틴산 및 그의 염, 글리시르레틴산 및 그의 유도체, 히노키티올, 비사보롤(bisabolol), 유칼립톨, 치몰, 이노시톨; 사이코사포닌, 인삼 사포닌, 수세미외 사포닌, 사핀다세아데 사포닌(Sapindaceae saponin) 등의 사포닌류; 판트테닐에틸에테르, 에티닐 에스트라디올, 트라넥삼산, 알부틴, 태반 추출물 등을 들 수 있다.
본 발명의 피부 외용제는 각종 제형으로 할 수 있다. 그 제형의 예로서는 화장품, 의약품, 의약 부외품 등을 들 수 있으며, 이들은 통상의 방법에 따라 제조할 수 있다. 구체적인 제품의 형태예로서는 화장수, 유액, 보습 크림, 클렌징 크림, 마사지 크림, 첩포제, 세안 크림, 팩, 에센스, 연고, 파운데이션, 립스틱, 마스카 라, 아이 쉐도우 등의 피니싱 화장품, 샴푸, 린스, 트리트먼트, 헤어토닉, 헤어 리퀴드, 헤어 크림, 헤어 밀크 등의 두발용 화장료, 애프터 쉐이브 로션, 바디 비누, 입욕제 등을 들 수 있다.
실시예
이하, 제조예, 시험예 및 실시예에 의해 본 발명을 더욱 상세하게 설명하나, 본 발명은 이들에 의해 하등 제약되는 것은 아니다.
제조예 1
발효 생성물의 제조 (1) :
대두를 수세한 후, 물에 하룻밤 침지하여 충분히 흡수시켰다. 이 대두에 4배량의 물을 가하고, 믹서로 페이스트상으로 분쇄했다. 이것을 100℃에서 30분간 가열하여 냉각한 후, 여과한 것을 100℃에서 90분간 증기 멸균하여 고형분 농도 약 10질량%을 갖는 두유를 제조했다.
전배양을 한 비피도박테리움·브레베 YIT4065 (FERM BP-6223)의 균액을 두유의 전량의 0.5%가 되도록 접종한 후, 37℃에서 24시간 정치 배양하여 발효 두유를 얻었다. 얻어진 발효 두유의 생균수는 1.3 X 109cells/㎖이었다. 이 발효 두유에 등량의 에탄올을 첨가하여 여지로 여과하여 발효 생성물(이하, "SB"라고 약칭하기도 한다.) 1을 제조했다.
제조예 2
발효 생성물의 제조 (2) :
제조예 1과 동일하게 제조한 두유에, 전배양한 비피도박테리움·브레베 YIT 4065 (FERM BP-6223)의 균액을 두유의 전량의 1.0%가 되도록 접종한 후, 질소 분위기중, 30℃에서 pH 5.5가 될 때까지 배양하고, 젖산을 첨가하여 pH 4.5로 조정한 후, 질소 분위기중, 37℃에서 26시간 교반 배양했다. 얻어진 발효 두유의 생균수는 4.2 X 108cells/㎖이었다. 배양 후, 이 발효 두유에 3배량의 1,3-부틸렌글리콜을 첨가하고, 여지로 여과하여 발효 생성물 2를 제조했다.
시험예 1
세포 배양에 의한 세포 부활 효과의 측정 (1) :
(세포 배양)
시험 세포로서 사람 표피 세포(Kurabo Industries, Ltd.)를 야스모토(Yasumoto) 등의 방법(S. Yasumoto, 분자생물학 연구를 위한 배양세포 실험법, T. Kuroki 등 편, Yodosa, Co., Ltd., 1995, pp 191-200)에 준해 SV40 바이러스 T 항원으로 형질 전환하여 얻어진 불사화 세포(immortalized cell)를 사용했다. 이 세포를 96 웰 플레이트에 파종(4×103개/0.1㎖/웰)하고, 증식용 무혈청 액체 배지 (HuMedia-KG2: Kurabo Industries, Ltd.)중, 37℃, CO2 농도 5%의 조건하에서 배양했다. 배양 1일 후에, 상기 제조예 1에서 제조한 발효 생성물 1과 비타민 A 및/또는 그 유도체로서 올-trans-레티놀(Sigma사제: 이하, "ROH"라 약칭하기도 한다)을 첨가한 배지로 교환하고, 다시 2일간 배양을 계속했다. 또 비교로서는 각각을 단독으로 첨가한 배지에서, 대조로서는 어느 쪽도 첨가하지 않는 배지를 이용하여 동일하게 배양을 실시했다.
(세포 부활 효과의 측정방법)
배양 3일 후에 환원 발색 시약(WST-1: Dojindo 제)의 10㎕를 각 웰에 첨가한 후, 37℃, CO2 농도 5%의 조건하에서 2시간 인큐베이트하고, 450nm-660nm의 흡광도를 측정했다. 얻어진 흡광도로부터 세포의 대사 활성 산출하고, 대조에 대한 대사 활성의 증가율로부터 세포 부활작용을 평가했다. 그 결과를 도 1에 나타냈다.
도 1로부터 단독으로는 대사 활성에 영향을 미치지 않는 농도인, 0.5%의 발효 생성물 1과 5×10-9M의 올-trans-레티놀을 동시에 작용시켰을 경우(SB+ROH), 사람 표피 세포의 대사 활성이, 각각을 단독에 첨가시킨 것(SB, ROH)에 대해서 유의한 증가가 측정되어, 양자는 상승적으로 세포 부활작용을 나타내는 것이 명백해졌다.
시험예 2
세포 배양에 의한 세포 부활 효과의 측정(2):
사람 표피 세포의 대사 활성에 미치는 발효 생성물 1과 올-trans-레티노인산 (Sigma사제: 이하, "RA"라고 약칭하기도 한다)의 병용 효과를, 시험예 1의 비타민 A 및/또는 그의 유도체를 올-trans-레티노인산으로 하는 이외는 시험례 1과 동일하게 검토했다. 그 결과를 도 2에 나타낸다.
도 2로부터, 단독으로는 대사 활성에 영향을 미치지 않는 농도인, 0.5%의 발효 생성물 1과 5×10-10M의 올-trans-레티노인산을 동시에 작용시켰을 경우 (SB+RA), 사람 표피 세포의 대사 활성은 단독에 첨가시킨 것(SB, RA)에 대해서 유의한 증가가 측정되어 양자는 상승적으로 세포 부활작용을 나타내는 것이 명백해졌다.
시험예 3
세포 배양에 의한 히아루론산 산생 촉진 효과의 측정 (1) :
시험예 1과 동일하게 세포를 배양하고, 배양 3일 후의 배양상청을 채취하고, 비오틴 표지 히아루론산 결합성 단백(Seikagakku Corp.)을 이용한 ELISA법 (Fosang A. J. 등, Matrix 10, 306-313, 1990)으로 히아루론산을 정량했다. 시료 미첨가의 대조의 정량값을 100으로 했을 경우의 히아루론산 상대값(%)을, 0.5%의 발효 생성물 1과 5×10-9M의 올-trans-레티놀을 동시에 작용시켰을 경우의 정량값 및 각각 단독에 첨가시킨 것의 정량값으로부터 구하여 사람 표피 세포의 히아루론산 산생에 미치는 발효 생성물 1과 올-trans-레티놀의 병용 작용을 검토했다. 이 결과를 도 3에 나타낸다.
도 3의 결과로부터, 발효 생성물 1과 올-trans-레티놀은 상가적으로 사람 표 피 세포의 히아루론산 산생을 항진하는 것이 명백해졌다.
시험예 4
세포 배양에 의한 히아루론산 산생 촉진 효과의 측정 (2):
사람 표피 세포의 히아루론산 산생에 미치는 발효 생성물 1과 올-trans-레티노인산의 병용의 영향을, 시험예 3의 비타민 A 및/또는 그의 유도체를 5×10-10M의 올-trans-레티노인산으로 하는 이외는 시험예 3과 동일하게 검토했다. 결과를 도 4에 나타낸다.
도 4의 결과로부터, 발효 생성물 1과 올-trans-레티노인산은 상가적으로 사람 표피 세포의 히아루론산 산생을 항진시키는 것이 명백해졌다.
시험예 5
주름 개선 시험:
주름을 가지는 여성 5명의 안면에 발효 생성물 2와 레티닐 팔미테이트를 배합 한 하기 조성의 에센스를 3 개월간 외용하였다. 주름의 정량적 평가는 하야시의 방법(Hayashi S., Fragrance Journal, 11, 55-61, 1992)를 개량하여 행했다. 즉, 외용 기간의 전후에 볼의 피부 레플리카를 불투명한 즉건성 실리콘 고무(Silflo: Flexico Developments 사제)를 이용하여 작성하고, 화상 해석 장치(ASPECT: Mitani Corp.제)를 이용한 화상 해석법으로 주름의 최대 깊이를 측정하고, 사용전의 주름 의 최대 깊이를 100%로 했을 경우의 상대값을 구했다. 결과를 도 5에 나타낸다.
(성분) (질량%)
에탄올 10.0
발효생성물 2* 5.0
1,3-부틸렌글리콜 3.0
트리메틸 글리신 1.0
정제수 잔부
카르복시비닐폴리머 0.1
카라기난 0.1
글리세린 5.0
스쿠알렌 1.0
메틸페닐 폴리실록산 1.0
폴리메타크릴로일옥시에틸 포스포릴 콜린액 2.0
베헤닐 알코올 0.1
폴리옥시에틸렌소르비탄 모노스테아레이트 0.2
글리세린 모노스테아레이트 0.1
레티닐 팔미테이트 0.01
글리시르리친산 스테아릴 0.1
메틸파라벤 0.1
향료 0.1
수산화나트륨 적당량
* 제조예 2에서 제조한 것.
도 5의 결과로부터 사람 안면 주름의 최대 깊이는 3개월간의 외용에 의해 약 35% 저하하고, 발효 생성물과 레티닐 팔미테이트 배합 에센스로 주름의 개선 작용이 관찰되었다.
시험예 6
피부 탄력성 개선 시험:
정상인 여성 10명에, 시험예 5의 에센스를 3 개월간, 안면에 외용하였다. 외용 기간의 전후에, 타케마 등(Takema Y et al, Br. J. Dermatol. 131, 641-648, 1994) 방법으로 준해 300mbar로 2초간 부하를 걸고, 부하 해제 2초후의 안면의 피부 탄력성 (탄성률, R2값)을 프로우브 직경 2mm의 큐토미터 SEM575(Courage and Khazaka 사제)로 측정하고, 외용전의 값을 100%로 한 상대값으로 나타냈다. 이 결과를 도 6에 나타낸다.
도 6으로부터 발효 생성물과 레티닐 팔미테이트 배합 에센스의 3 개월간의 외용에 의해, 사람 안면의 피부 탄력성은 약 15% 증가했다. 이 에센스는 나이를 먹을수록 저하하는 것으로 알려진 피부탄력성(Takema Y et al., Br. J. Dermatol. 131, 641-648, 1994)를 개선하는 것이 밝혀졌다.
시험예 7
각층 수분 함량 측정:
정상인 여성 10명, 시험예 4의 에센스를 3개월간, 안면에 외용하였다. 외용 기간의 전후에, 컨덕턴스 미터(SKICON 200: IBS Corp.)를 이용하여 통상의 방법에 따라, 안면의 각층 수분 함량(컨덕턴스)을 측정했다. 이 결과를 도 7에 나타낸다.
도 7로부터 발효 생성물과 레티닐 팔미테이트 배합 에센스의 3개월간의 외용에 의해, 사람 안면의 각층 수분 함량(컨덕턴스)은 약 2배로 증가했다. 따라서, 본 에센스에는 보습 작용도 있는 것이 밝혀졌다.
제조예 3
발효 생성물의 제조 (3):
제조예 1과 동일하게 제조한 두유에, 전배양한 비피도박테리움·브레베 YIT 4065(FERM BP-6223)의 균액을 두유의 전량의 0.5%가 되도록 접종한 후, 37℃에서 24시간 정치 배양하여 발효 두유를 얻었다. 얻어진 발효 두유의 생균수는 1.3×109 cells/㎖이었다. 이 발효 두유에 3배량의 1,3-부틸렌글리콜을 첨가 교반하고, 1일후 여지로 여과하여 발효 생성물 3을 제조했다.
제조예 4
발효 생성물의 제조 (4)
제조예 1과 동일하게 제조한 두유에, 전배양한 비피도박테리움·브레베 YIT 4065 (FERM BP-6223)의 균액을 두유의 전량의 1.0%가 되도록 접종한 후, 34℃에서 23시간 정치 배양했다. 배양물의 pH가 5.5가 된 시점에서, 배양액에 젖산을 첨가하여 pH 4.4로 조제한 후, 다시 34℃에서 22시간 정치 배양했다. 생균수는 7.3×108cell/㎖이었다. 배양 후, 이 발효 두유에 3배량의 1,3-부틸렌글리콩을 첨가 교반하고, 1일후 여지로 여과하여 발효 생성물 4를 제조했다.
시험예 8
발효 생성물의 수분 보유 효과 및 감취효과 (1):
상기 제조예 2에서 얻어진 발효 생성물 2에 탄산마그네슘, 탄산칼슘, 탈크, 활성탄, 규조토를 각각 전량의 0.8%가 되도록 첨가하고, 실온에서 68시간 교반 방치한 후, 여지로 여과했다. 얻어진 시료 각각에 대해서, 젖산량, 아세트산량, 자당량 및 이소플라본량을 정량하고, 무첨가의 것의 함량을 100으로서 산출했다. pH의 측정에는 물에 각 시료를 10%가 되도록 혼화한 것을 이용했다.
자극취의 저감 효과에 관해서는 성인 남녀 20명의 팔뚝 안쪽에 각 시료를 도포하고, 표 1의 판단 기준에 근거해 평가하여 그의 스코어 평균치를 구했다. 또한, 얻어진 시료 각각 대해, 사람 피부에 대한 보습 효과를 조사했다. 보습 효과는 시료를 10% 수용액으로 하고, 성인 5명의 청결하게 한 팔뚝 안쪽에 샘플을 도포하고, 30 분 후에, 그 수분 함량을 컨덕턴스 미터(SKICON 200: IBS Corp.)로 측정하고, 그의 평균을 산출하여 비교했다. 그 결과를 표 2에 나타낸다.
판단기준 | 스코어 |
극히 좋다(자극취가 느껴지지 않는다) 좋다(자극취가 불쾌하지 않다) 약간 불쾌한 냄새 불쾌한 냄새(자극취가 있음) 상당히 불쾌한 냄새가 난다(강한 자극취) | ±0 -1 -2 -3 -4 |
내용 | 젖산농도 | 아세트산농도 | 자당농도 | 이소플라본 농도 | 감취효과 | 수분량 (μS) | pH | |
시험품 1 | 무첨가 | 100.0 | 100.0 | 100.0 | 100.0 | -3.08 | 86 | 4.21 |
시험품 2 | 활성탄 | 91.7 | 100.0 | 96.8 | 96.9 | -3.02 | 84 | 4.23 |
시험품 3 | 규조토 | 91.7 | 100.0 | 96.8 | 100.0 | -3.04 | 85 | 4.78 |
시험품 4 | 탄산마그네슘 | 91.7 | 100.0 | 96.8 | 100.0 | -0.36 | 87 | 5.90 |
시험품 5 | 탄산칼슘 | 91.7 | 100.0 | 96.8 | 100.0 | -0.52 | 86 | 5.78 |
시험품 6 | 탈크 | 91.7 | 100.0 | 96.8 | 100.0 | -1.72 | 86 | 4.47 |
표 2의 결과로부터 탄산마그네슘, 탄산칼슘 및 탈크의 첨가에 의해, 감취효과가 얻어지며, 특히 탄산마그네슘의 효과가 높았다. 또한, 젖산량, 아세트산량, 자당량, 및 이소플라본량은 거의 변화하지 않았다. 더욱이, 각층 수분 함량도 거의 변화하지 않았다.
시험예 9
발효 생성물의 수분 보습 효과 및 감취효과 (2):
상기 제조예 2에서 얻어진 발효 생성물 2에 탄산마그네슘을, 각각 최종 농도 가 0, 0.005, 0.01, 0.1, 0.4, 0.8, 1.2, 2.0 및 10.0%가 되도록 첨가하고, 실온에서 24시간 교반 방치한 후, 여지로 여과했다.
얻어진 시료 각각에 대해, 젖산량, 아세트산량, 자당량, 이소플라본량 및 pH 를 정량했다. 또한, 성인 남녀 20명의 팔뚝 안쪽에 각 시료를 도포하고, 시험예 8과 동일하게 하여 감취효과 및 각층 수분 함량을 검토했다. 그 결과를 표 3에 나타낸다.
탄산마그네슘농도(%) | 젖산 농도(%) | 아세트산 농도(%) | 자당 농도(%) | 이소플라본 농도(%) | 감취효과 | 수분량 (μS) | pH | |
시험품 1 | 0 | 100.0 | 100.0 | 100.0 | 100.0 | -3.08 | 86 | 4.21 |
시험품 7 | 0.005 | 91.7 | 100.0 | 96.8 | 100.0 | -2.08 | 84 | 4.22 |
시험품 8 | 0.01 | 91.7 | 100.0 | 96.8 | 100.0 | -1.14 | 86 | 4.30 |
시험품 9 | 0.1 | 91.7 | 100.0 | 96.8 | 100.0 | -0.76 | 85 | 5.02 |
시험품 10 | 0.4 | 91.7 | 100.0 | 96.8 | 100.0 | -0.54 | 87 | 5.51 |
시험품 11 | 0.8 | 91.7 | 100.0 | 96.8 | 100.0 | -0.36 | 87 | 5.90 |
시험품 12 | 1.2 | 91.7 | 100.0 | 96.8 | 96.9 | -0.48 | 86 | 6.33 |
시험품 13 | 2.0 | 91.7 | 100.0 | 93.5 | 93.8 | -0.40 | 85 | 6.90 |
시험품 14 | 10.0 | 83.3 | 80.0 | 90.3 | 93.8 | -0.52 | 83 | 7.50 |
표 3의 결과로부터 0.01∼10.0%의 탄산마그네슘의 첨가에 의해, 젖산량, 아세트산량, 자당량, 이소플라본량 및 각층 수분함량은 거의 변화하지 않았지만, 감취효과가 얻어지는 것을 알았다. 또, 탄산마그네슘을 10%이상 첨가하면 pH가 7을 넘어 버려, 조성물중의 불용물의 석출 등 원료의 안정성이 저하하기 때문에 바람직하지 않다.
시험예 10
발효 생성물의 감취효과 :
상기 제조예 2∼4에서 얻어진 발효 생성물 2∼4에, 탄산마그네슘을 최종농도로 0 또는 0.6%으로 되도록 첨가했다. 18℃이하에서 68시간 교반 방치한 후, 여지로 여과했다. 얻어진 시료 각각에 대해, 젖산량, 아세트산량, 자당량 및 이소플라본량을 정량했다. 또 시험예 8과 동일하게 감취효과를 검토했다. 그 결과를 표 4에 나타낸다.
발효생성물 | 탄산마그네슘 농도(%) | 젖산 농도(%) | 아세트산 농도(%) | 자당 농도(%) | 이소플라본 농도(%) | 감취효과 | |
시험품 1 | 발효생성물 2 | 0 | 100.0 | 100.0 | 100.0 | 100.0 | -3.08 |
시험품 15 | 0.6 | 91.7 | 100.0 | 96.8 | 100.0 | -0.45 | |
시험품 16 | 발효생성물 3 | 0 | 52.5 | 158.0 | 101.9 | 99.4 | -3.88 |
시험품 17 | 0.6 | 52.3 | 158.0 | 96.8 | 99.2 | -1.92 | |
시험품 18 | 발효생성물 4 | 0 | 90.5 | 108.4 | 102.6 | 99.7 | -3.39 |
시험품 19 | 0.6 | 90.5 | 108.3 | 98.4 | 99.6 | -1.37 |
표 4의 결과로부터 어느 쪽의 공정으로 제작한 것도, 탄산마그네슘의 첨가에 의해 높은 감취효과가 얻어졌다. 또한, 제조예 3 기재의 공정을 제조예 4 기재의 공정으로 변경함으로써 보다 높은 감취효과가 얻어지는 것을 알았다. 더욱이, 제조예 2의공정으로 변경함으로써 감취효과가 강조되었다.
시험예 11
발효 생성물의 불안정화의 검토:
상기 제조예 2에서 얻어진 발효 생성물에 탄산마그네슘을 최종농도 0.6%가 되도록 첨가했다. 첨가 후, 25℃, 15℃, 10℃ 및 5℃에서 68시간 교반 방치한 후, 여지로 여과했다. 얻어진 시료 각각에 대해서, 시험예 8과 동일하게 젖산량, 아세트산량, 자당량, 이소플라본량 및 수분 함량을 정량했다. 또한, 얻어진 시료를 5℃에서 1개월 보존한 후, 분광 광도계에 의해 5℃의 시료의 400nm에서의 흡광도를 측정했다. 그 결과를 표 5에 나타낸다. 또, 불투명화의 정도로부터 불필요한 물질 석출의 불안정화를 비교했다.
탄산 마그네슘 농도(%) | 온도(℃) | 젖산 농도(%) | 아세트산농도(%) | 자당 농도(%) | 이소 플라본 농도(%) | 감취 효과 | 흡광도 (400nm) | 수분량 (μS) | |
시험품 1 | 0 | 25 | 100.0 | 100.0 | 100.0 | 100.0 | -3.08 | 1.0 | 86 |
시험품 20 | 0.6 | 25 | 91.7 | 100.0 | 96.8 | 100.0 | -0.45 | 1.0 | 87 |
시험품 21 | 0.6 | 15 | 91.6 | 100.0 | 96.8 | 99.9 | -0.47 | 0.7 | 85 |
시험품 22 | 0.6 | 10 | 91.6 | 100.0 | 96.7 | 99.9 | -0.46 | 0.6 | 86 |
시험품 23 | 0.6 | 5 | 91.5 | 100.0 | 96.6 | 99.8 | -0.42 | 0.4 | 87 |
표 5의 결과로부터 어느 쪽의 공정으로 제작해도, 높은 감취효과가 얻어졌다. 또한, 15℃이하로 교반 방치 등의 처리 함으로써 불용물의 석출 등도 억제되어 안정성이 향상하는 것을 알았다.
제조예 5
발효 생성물의 제조 (5):
제조예 1과 동일하게 제조한 두유에, 전배양한 비피도박테리움·브레베 YIT 4065 (FERM BP-6223)의 균액을 두유의 전량의 0.5%가 되도록 접종한 후, 37℃에서 24시간 정치 배양하여 발효 두유를 얻었다. 얻어진 발효 두유의 생균수는 1.3×109cells/㎖이었다. 얻어진 발효 두유에 3배량의 에탄올을 첨가 교반하고, 여지로 여과했다. 얻어진 용액에 탄산마그네슘을 전량의 0.6%가 되도록 첨가하고, 실온에서 24시간 방치한 후, 여지로 여과하여 발효 생성물 5를 제조했다.
시험예 12
세포 배양에 의한 히아루론산 산생 촉진 효과의 측정 (3):
발효 생성물 5(SBZ)와 올-trans-레티놀의 병용의 효과를 시험예 3과 동일하게 검토했다. 결과를 도 8에 나타낸다.
도 8의 결과로부터 발효 생성물과 올-trans-레티놀은 상승적으로 사람 표피 세포의 히아루론산 산생을 항진시키는 것이 명백해졌다.
실시예 1
화장수 (1):
하기 조성의 화장수를 통상의 방법에 의해 제조했다.
(성분) (질량 %)
발효 생성물 1* 10.0
레티닐 팔미테이트 0.01
에탄올 5.0
1,3-부틸렌글리콜 2.0
폴리옥시에틸렌 경화 피마자유(50 E.O.) 0.05
메틸 파라벤 0.1
향료 0.1
정제수 잔부
* 제조예 1에서 제조한 것.
얻어진 화장수는 피부 거침 방지·개선 작용이 우수하고, 또한 산뜻한 사용감의 것이었다. 또한, 보존 안정성도 양호했다.
실시예 2
유액:
하기 조성의 유액을 통상의 방법에 의해 제조했다.
(성분) (질량%)
발효 생성물 2* 10.0
레티닐 팔미테이트 0.02
스테아린산 2.0
유동 파라핀 6.0
스쿠알렌 2.0
소르비탄 모노스테아레이트 1.5
폴리옥시에틸렌소르비탄 모노스테아레이트(20 E.O.) 2.0
메틸 파라벤 0.05
글리세린 1.0
향료 0.15
정제수 잔부
* 제조예 2에서 제조한 것.
얻어진 유액은 각질 개선 작용, 피부 탄력성의 개선 작용, 보습 효과가 뛰어나고, 촉촉한 사용감의 것이었다. 또한, 보존 안정성에도 우수했다.
실시예 3
크림 :
하기 조성의 크림을 통상의 방법에 의해 제조했다.
(성분) (질량%)
발효 생성물 2* 10.0
레티닐 팔미테이트 0.05
유동 파라핀 23.0
바셀린 7.0
베헤닐알코올 1.0
스테아린산 2.0
밀랍 2.0
소르비탄 모노스테아레이트 1.5
폴리옥시에틸렌소르비탄 모노스테아레이트(20 E.O.) 2.5
부틸 파라벤 0.05
글리세린 2.0
메틸 파라벤 0.1
향료 0.15
정제수 잔부
* 제조예 2에서 제조한 것.
얻어진 크림은 피부 거침 방지·개선 작용, 주름개선 작용이 우수하고, 사용감도 양호하였다. 또한, 보존 안정성도 우수했다.
실시예 4
연고 :
하기 조성의 연고를 통상의 방법에 의해 제조했다.
(성분) (질량%)
발효 생성물 2* 10.0
레티닐 팔미테이트 0.05
일본약국방 친수 연고 89.95
* 제조예 2에서 제조한 것.
본 연고를 1일 2회 피부에 도포(5 mg/㎠)한 바, 우수한 피부 거침 방지·개선 작용, 주름개선 작용이 보이며, 또한, 보존 안정성도 양호했다.
실시예 5
화장수 (2):
하기 조성의 화장수를 통상의 방법에 의해 제조했다.
(성분) (질량%)
발효생성물5* 10.0
레티닐 팔미테이트 0.01
에탄올 5.0
1,3-부틸렌글리콜 2.0
폴리옥시에틸렌 경화 피마자유 (50 E.O.) 0.05
메틸 파라벤 0.1
향료 0.1
정제수 잔부
* 제조예 5에서 제조한 것.
얻어진 화장수는 피부 거침 방지·개선 작용이 우수하고, 산뜻한 사용감의 것이었다. 또한, 보존 안정성이나 향도 양호했다.
참고예 1
화장수 (1):
하기 성분의 화장수를 통상의 방법에 의해 제조했다.
(성분) (질량%)
발효 생성물* 10
에탄올 8
펜틸렌글리콜 2
메틸파라벤 0.05
폴리옥시에틸렌 경화 피마자유 0.5
카르복시비닐폴리머 0.1
향료 0.05
정제수 잔부
* 시험품 21
참고예 2
화장수 (2):
하기 성분의 화장수를 통상의 방법에 의해 제조했다.
(성분) (질량%)
유산균 배양액 30
발효 생성물* 1
수산화나트륨 적당량
에탄올 8
향료 0.1
정제수 잔부
탈크 0.1
폴리옥시에틸렌 (24) 콜레스테릴에테르 0.1
아세트산-dℓ-α-토코페롤 0.1
펜틸렌글리콜 30
메틸파라벤 0.1
EDTA-2Na 0.1
글리세린 5
상백피 엑기스 0.1
그리시르리친산 디칼륨 0.1
글리콜산 3
젖산 3
히아루론산나트륨 0.1
dℓ-말산 0.1
* 시험품 21
참고예 3
유액 (1) :
하기 성분의 유액을 통상의 방법에 의해 제조했다.
(성분) (질량%)
스테아린산 2
세탄올 1
미리스틴산 옥틸 도데실 5
유동 파라핀 10
아크릴산 메타크릴산 알킬 공중합체 0.5
폴리옥시에틸렌 모노스테아레이트 0.5
부킬파라벤 0.1
1,3-부틸렌글리콜 5
카그복시메틸셀룰로오스 0.1
수산화나트륨 적당량
메틸파라벤 0.1
발효 생성물* 1
향료 0.05
정제수 잔부
* 시험품 21
참고예 4
유액 (2) :
하기 성분의 유액을 통상의 방법에 의해 제조했다.
(성분) (질량%)
스쿠알렌 10
호호바유 2
우지 1
콜레스테릴 히드록시스테아레이트 0.1
바틸 스테아레이트 1
스테아린산 1
라우린산 1
친유형 모노스테아린산글리세린 2
모노스테아린산 폴리에틸렌글리콜 2
메틸 폴리실록산 0.1
아세트산 dℓ -α-토코페롤 0.1
천연 비타민 E 0.001
스테아릴 글리시르레티네이트 0.1
부틸파라벤 0.1
정제수 잔부
유산균 배양액 10
발효 생성물* 20
EDTA-2Na 0.1
수산화칼륨 적당량
1,3-부틸렌글리콜 5
카라기난 0.1
글리콜산 5
젖산 3
글리세린 3
메틸파라벤 0.1
히아루론산나트륨 0.5
향료 0.05
상백피 엑기스 0.1
클로로헥시딘 글루코네이트 0.01
*시험품 21
참고예 5
보습 크림 (1) :
하기 성분의 보습 크림을 통상의 방법에 의해 제조했다.
(성분) (질량%)
스테아린산 4
세탄올 2
호호바유 5
스쿠알렌 10
폴리옥시에틸렌소르비탄 모노스테아레이트 2
소르비탄 모노스테아레이트 3
부틸파라벤 0.1
1,2-펜탄디올 2
수산화나트륨 0.05
발효 생성물* 0.01
히아루론산나트륨 0.1
향료 0.05
정제수 잔부
* 시험품 21
참고예 6
보습 크림 (2) :
하기 성분의 보습 크림을 통상의 방법에 의해 제조했다.
(성분) (질량%)
스쿠알렌 10
호호바유 5
세틸 2-에틸헥사노에이트 5
콜레스테릴 히드록시스테아레이트 1
우지 1
밀랍 1
바틸 스테아레이트 2
베헤닐 알코올 1
스테아린산 0.3
베헤닌산 0.2
아크릴산 메타크릴산 알킬 공중합체 0.3
메틸폴리실록산 0.1
아세트산-dℓ-α-토코페롤 0.1
천연 비타민 E 0.001
스테아일 글리시르레티네이트 0.1
폴리옥시에틸렌 모노스테아레이트 0.5
정제수 잔부
유산균 배양액 10
발효 생성물* 15
수산화나트륨 적당량
글리세린 10
1,2-펜탄디올 5
카라기난 0.1
히아루론산나트륨 0.2
글리콜산 2
젖산 1
향료 0.1
상백피 엑기스 0.1
* 시험품 21
참고예 7
에센스 :
하기 성분의 에센스를 통상의 방법에 의해 제조했다.
(성분) (질량%)
펜틸렌글리콜 3
유산균 배양액 5
트리메틸 글리신 1
정제수 잔부
카르복시비닐폴리머 0.1
목단피 엑기스 0.1
해조 엑기스 0.1
마로니에 엑기스 0.1
카라기난 0.1
히아루론산나트륨 0.1
글리세린 5
스쿠알렌 1
메틸페닐폴리실록산 1
폴리메타크릴로일옥시에틸 포스포릴 콜린액 2
베헤닐알코올 0.1
폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노스테아레이트 0.2
글리세린 모노스테아레이트 0.1
레티닐 팔미테이트 0.1
스테아릴 글리시리티네이트 0.1
발효 생성물* 5
향료 0.1
수산화나트륨 적당량
* 시험품 21
참고예 8
클렌징 크림 :
하기 성분의 클렌징 크림을 통상의 방법에 의해 제조했다.
(성분) (질량%)
유동 파라핀 40
옥틸도데실 미리스테이트 10
이소스테아린산 1
바셀린 10
호호바유 1
베헤닐알코올 1
밀랍 2
스테아린산 1
아크릴산 메타크릴산 알킬 공중합체 0.5
폴리옥시에틸렌 모노스테아레이트 0.5
천연 비타민 E 0.001
부틸파라벤 0.1
스테아릴 그리시르레티네이트 0.1
정제수 잔부
발효 생성물* 5
1,3-부틸렌글리콜 5
메틸파라벤 0.1
유산균 배양액 10
히아루론산나트륨 0.1
글리콜산 0.1
젖산 0.1
향료 0.1
트리에탄올아민 적당량
상백피 엑기스 0.1
* 시험품 21
참고예 9
워싱 크림:
하기 성분의 워싱 크림을 통상의 방법에 의해 제조했다.
(성분) (질량%)
베헤닌산 1
라우린산 5
미리스틴산 10
스테아린산 5
팔미틴산 5
글리세린 20
정제수 잔부
발효 생성물* 1
EDTA-2Na 0.1
벤조산나트륨 0.1
수산화칼륨 적당량
라우린산 디에탄올 아미드 0.1
디스테아린산 폴리에틸렌 글리콜 0.1
폴리옥시에틸렌 (20) 야자유 지방산 소르비탄 2
베헤닐알코올 1
스테아릴 글리시르레티네이트 0.1
천연 비타민 E 0.001
젖산 1
글리콜산 1
히아루론산나트륨 0.1
유산균 배양액 5
향료 0.1
상백피 엑기스 0.1
* 시험품 21
참고예 10
마사지 크림 :
하기 성분의 마사지 크림을 통상의 방법에 의해 제조했다.
(성분) (질량%)
유동 파라핀 30
유동 이소파라핀 5
미리스틴산 옥틸 도데실 1.0
바셀린 10
우지 1
콜레스테릴 히드록시스테아레이트 1
밀랍 2
베헤닐알코올 1
바틸 알코올 1
친유형 모노스테아린산글리세린 4
메틸폴리실록산 0.1
아세트산-dℓ -α-토코페롤 0.1
천연 비타민 E 0.001
스테아릴 글리시르레티네이트 0.1
부틸파라벤 0.1
폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노스테아레이트 4
수산화나트륨 적당량
정제수 잔부
발효 생성물* 10
유산균 배양액 5
모노스테아린산 폴리에틸렌 글리콜 0.1
글리세린 4
메틸파라벤 0.1
1,3-부틸렌글리콜 5
히아루론산나트륨 0.1
글리콜산 1
젖산 1
향료 0.1
상백피 엑기스 0.1
클로로헥시딘 글루코네이트 0.01
* 시험품 21
참고예 11
팩:
하기 성분의 팩을 통상의 방법에 의해 제조했다.
(성분) (질량%)
유산균 배양액 10
정제수 잔부
발효 생성물* 20
dℓ -말산 0.1
수산화나트륨 적당량
글리세린 5
글리콜산 5
폴리비닐 알코올 15
에탄올 5
메틸파라벤 0.1
히아루론산나트륨 0.5
폴리옥시에틸렌 폴리옥시프로필렌글리콜 1
스테아릴 글리시르레티네이트 0.1
아세트산-dℓ-토코페롤 0.1
천연 비타민 E 0.1
상백피 엑시그 0.1
클로로헥시딘 글루코네이트 0.01
향료 0.1
* 시험품 21
본 발명의 피부 외용제는 비타민 A 또는 그의 유도체가 가지는 표피 세포의 부활작용을 발효 생성물이 상승적으로 높임과 동시에, 상기 화합물이 가지는 히아루론산 산생 항진작용에 발효 생성물이 가지는 동일한 작용이 어울어져 우수한 피부 거침 방지·개선 효과, 각질 개선 효과, 보습 효과, 피부 탄력의 소실 및 주름의 예방 효과를 나타내는 것으로 예를 들면 화장품이나 의약부외품 등의 피부 외용제로서 피부의 노화의 예방에 유효한 것이다.
또한, 본 발명의 피부 외용제는 상기에만 한정되지 않고, 예를 들면 의약품으로서 만성 관절 류마티스나 외상성 관절염 등의 조직중의 히아루론산 양의 감소에 의해 발병되는 질환의 개선 및 동통억제나, 화상 치료의 초기 단계에 있어 육아조직의 증생을 촉진하기 위한 치료약, 여드름의 치료약, 건선치료약, 주름치료약, 광노화 피부 치료약으로서도 사용할 수 있는 것이다.
Claims (15)
- 비피도박테리움·브레베 YIT 4065를 두유에 작용시켜 얻어지는 발효 생성물과, 하기 A 군으로부터 선택되는 1종 또는 2종 이상을 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 거침 방지·개선용 피부 외용제.A군) 레티놀, 레티노인산, 레티닐 팔미테이트
- 삭제
- 삭제
- 제 1항에 있어서, 두유가 대두를 원료로 하는 것인 피부 거침 방지·개선용 피부 외용제.
- 제 1항에 있어서, 비피도박테리움·브레베 YIT 4065를 두유에 작용시켜 얻어지는 발효 생성물이, 이하의 공정 (a) 및 (b)에 의해 얻어진 탈취 발효 생성물인 피부 거침 방지·개선용 피부 외용제.(a) 비피도박테리움·브레베 YIT 4065를 두유에 작용시키는 공정(b) 공정 (a)에 의해 얻어진 발효 생성물에, 탄산염 또는 탈크로부터 선택된 1종 또는 2종 이상을 접촉시키는 공정
- 제 5항에 있어서, 공정 (a) 및 공정 (b)를 질소 분위기 중에서 행함을 특징으로 하는 피부 거침 방지·개선용 피부 외용제.
- 제 5항에 있어서, 공정 (b)에서 이용하는 탄산염이 탄산마그네슘 또는 탄산칼슘인 피부 거침 방지·개선용 피부 외용제.
- 제 5항에 있어서, 공정 (a) 다음에, 다시 공정 (c)을 부가하는 것을 특징으로 하는 피부 거침 방지·개선용 피부 외용제.(c) 유기산으로 pH를 조정하는 공정
- 제 5항에 있어서, 공정 (b) 다음에 다시 공정 (d)을 부가하는 것을 특징으로 하는 피부 거침 방지·개선용 피부 외용제.(d) 20℃이하에서 교반하면서 방치하는 공정.
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 비피도박테리움·브레베 YIT 4065를 두유에 작용시켜 얻어지는 발효 생성물과, 레티놀, 레티노인산 및 레티닐 팔미테이트로부터 선택되는 1종 또는 2종 이상을 유효성분으로 함유하는 피부 거침 방지·개선용 조성물.
- 제 1항에 있어서, 화장료인 피부 거침 방지·개선용 피부 외용제.
- 다음 공정 (e) 및 (f)로부터 얻어지는 발효생성물과, 하기 A 군으로부터 선택되는 1종 또는 2종 이상을 배합함을 특징으로 하는 피부 거침 방지·개선용 피부 외용제의 제조방법.(e) 비피도박테리움·브레베 YIT 4065를 두유에 작용시키는 공정(f) 공정 (e)에 의해 얻어진 발효 생성물에 탄산염 또는 탈크로부터 선택된 1종 또는 2종 이상을 접촉시키는 공정.A군) 레티놀, 레티노인산, 레티닐 팔미테이트
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