KR100264543B1

KR100264543B1 - 동맥경화성동맥내막비후억제제

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Publication number: KR100264543B1
Application number: KR1019920018157A
Authority: KR
Inventors: 시바자끼도시에; 도요다교미; 사까시따미쯔아끼; 기따하라마사끼
Original assignee: 도쿠시마 히데이치; 닛산 가가쿠 고교 가부시키 가이샤; 가노 고이찌로; 고오와 가부시키가이샤
Priority date: 1991-10-04
Filing date: 1992-10-02
Publication date: 2001-10-24
Also published as: MX9205659A; CA2079706C; SK279277B6; ATE209035T1; KR930007449A; JPH06329540A; RU2114620C1; NZ244555A; AU2601292A; CZ302792A3; SK302792A3; AU652669B2; UA39095C2; TW238300B; DK0535548T3; HUT62794A; JP3130342B2; US6162798A; DE69232217T2; CA2079706A1

Abstract

하기 일반식 (I)의 화합물을 유효량 함유하는 동맥경화성 동맥 내막 비후 억제제 :

식중, 고리 X 는 페닐, 치환 페닐 또는 5 - 나 6 - 원 헤테로시클릭 아릴이고;

서로 독립적인 각각의 R¹및 R²는 수소, C₁∼₈알킬, C₃∼₇시클로알킬, C₁∼₃알콕시, n - 부톡시, i - 부톡시, sec - 부톡시, t - 부톡시, R²⁰R²¹N - (상기에서 서로 독립적인 R²⁰및 R²¹은 각각 수소 또는 C₁∼₃알킬이다), 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 디플루오로메톡시, 플루오로, 클로로, 브로모, 페닐, 페녹시, 벤질옥시, 히드록시, 트리메틸실릴옥시, 디페닐 - t - 부틸실릴옥시, 히드록시메틸 또는 - O(CH₂)_ℓOR²²(상기에서 R²²는 수소 또는 C₁∼₃알킬, 및 ℓ 은 1, 2 또는 3) 이거나 ; R¹및 R²가 서로 0 - 위치에 있을때 R¹및 R²함께 - CH = CH - CH = CH - 또는 메틸렌 디옥시를 형성하며 :

R³는 수소, C₁∼₃시클로알킬, C₅∼₇시클로알케닐 또는(식중, R⁷은 수소, C₁∼₈알킬, C₁∼₈알콕시, C₁∼₃알킬티오, 클로로, 브로모, 플루오로, 클로로메틸, 트리클로로메틸, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 트리클로로메톡시, 디플루오로메톡시, 페녹시, 벤질옥시, 히드록시, 트리메틸실릴옥시, 디페닐 - t - 부틸실릴옥시 또는 히드록시메틸) ; 또는 1 개의(식중, R⁷은 상기 정의한 바와 같음) 및 0, 1 또는 2 개의 C₁∼₃알킬로 치환된 C₁∼₃알킬이고 ;

Y 는 -CH₂-, -CH₂CH₂-, -CH=CH₂, -CH₂-CH=CH-, -CH=CH-CH₂-, -C(CH₃)=CH- 또는 -CH=C(CH₃)- 이며 ;

Z 는 -Q-CH₂-W-CH₂-CO₂R¹²,

( 식중, Q 는 -C(0)-, -C(OR¹³)₂- 또는 -CH(OH)-,

W 는 -C(0), -C(OR¹³)₂- 또는 -C(R¹¹)(OH)-,

R¹¹은 수소 또는 C₁∼₃알킬,

R¹²는 수소, R¹⁴(R¹⁴는 화학적 또는 생리적으로 가수분해 가능한 알킬 에스테르 성분의 알킬, NHR²³R²⁴R²⁵(식중 R²³, R²⁴및 R²⁵는 각각 수소 또는 C₁∼₄알킬), 나트륨, 칼륨 또는 1/2 칼슘),

각 R¹³은 각각 1차나 2차 C₁∼₆알킬, 또는 2개의 R¹³가 함께 -(CH₂)₂- 또는 -(CH₂)₃- 를 생성하며,

서로 독립적인 각각의 R¹⁵및 R¹⁶은 수소원자나 C₁∼₃알킬, 또는 R¹⁵및 R¹⁶이 함께 -(CH₂)₂- 또는 -(CH₂)₃- 를 생성한다.

Description

동맥경화성 동맥 내막 비후 억제제

본 발명은, 강력한 HMG -CoA 환원효소 억제 효과를 가지며 또한 동맥경화성 동맥 내막 비후증에 있어서 대동맥 내막평활근 세포 (I-SMC: Intimal Smooth Muscle Cells) 의 증식, 대동맥 중간 평활근 세포 (M-SMC: Medial Smooth Muscle Cells) 의 이동 및 내피세포에 혈구세포 (예 : 임파구, 백혈구 및 대식세포) 의 유착에 대한 강력한 억제 효과를 갖는 피리딘 유도체를 함유하는 동맥경화성 동맥 내막 비후 억제제에 관한 것이다.

초기 메카니즘으로서, 관상동맥의 동맥경화성 동맥 내막비후가 심근 경색증 및 협심증의 주원인의 하나라고 생각된다. 이 동맥경화성 동맥 내막 비후는 평활근의 병리학적 활성 및 증식활성 또는 병리학적 변조 및 증식 변조에 기인하여 시토킨 분비 및 기질 축적과 함께 단핵세포나 혈소판이 내피세포에 유착됨으로써 개시되며, M-SMC 의 증막에서 내막으로의 이동, 동맥 내막에서의 평활근세포 증식 및 세포의 기질의 증가에 의해 진행된다. 이러한 세포의 활성은 과지혈증과 같은 위험인자에 의해 증진된다. 지금까지는, HMG-CoA 환원효소 억제제가 동물모델에서 혈청 콜레스테롤을 감소시키는 강력한 효과에 의해 동맥경화성 동맥 내막 비후를 억제하는 것으로 보고되었으나 (Biochim, Biophis, Acta, 960, 294 - 302, (1988)), 임상시험에서의 효과는 부적절한 것으로 밝혀졌다.

따라서, 동맥경화성 동맥 내막 비후의 보다 효과적인 억제제로서, 상기 동맥경화성 병변에 직접적으로 작용할 수 있는 약제가 요구된다. 지금까지는, 항혈소판으로 부터 유발된 성장인자 (PDGF) 약제 또는 항섬유아세포 성장인자 (FGF) 약제에 의한 평활근세포 억제효과 (Life Science, 28, 1641 - 1646, (1981); J. Pharm, Exp. Ther., 248, 1167 - 1174, (1989)), PGDF, 트롬복산 B₄및 인터루에킨 - 1 으로 인한 평활근 세포의 이동에 대한 칼슘 길항질 (antagonist) 의 억제효과 (Anterosclerosis, 72, 213 - 219, (1988)), RGD 펩티드의 세포유착 억제 효과 (J. Cell Biol., 112, 335 - 344, (1991)). PTCA (Percutaneous Transluminal Coronary Angioplasty) 후의 재협착증에 대한 트롬복산 합성 억제제의 효과 (Atherosclerosis, 18, 661 - 665, (1990)) 가 보고되었다. 그러나, 이들은 시토킨과 같은 자극인자 또는 혈소판에 대한 약제의 효과들이며, 동맥경화성 병변 평활근 세포에 직접 작용하는 약제는 발견되지 않았다.

평활근 세포로 부터 분비된 평활근 세포 유발 이동인자는 PDGF 보다 강한 이동자극을 나타내며 동맥경화의 개시 및 진행에 밀접히 관련된 것으로 보이지만 (Atherosclerosis, 72, 213 - 226, (1991)), 그러한 평활근세포의 이동을 억제하는 약제는 발견되지 않았다. 나아가, 프로스타글란딘 I₂로 억제할 수 없는 (Atherosclerosis, 73, 67 - 69, (1988)) I-SMC 의 증식 특성은 동맥경화성의 중요한 현상으로 고려된다. 하지만, 상기 증식 특성을 억제하는 약제는 발견되지 않았다.

HMG-CoA 환원효소 억제제가 섬유아세포, 평활근세포 및 임파구에서 세포증식 억제 효과를 가지며 (J. Biol. Chem., 259, 1546 - 1551 (1984); ibid 255, 5134 - 5140; Biochim. Biophys. Acta., 1051, 138 - 143, (1990)), 또한 임파구의 활성을 억제함이 (Int. J. Immunopharmac., 11, 863 - 869, (1989)) 보고되었다. 하지만, 상기 억제 효과들은 완전히 만족스럽지 못하고 목적 세포, 특히 I-SMC, 대식 세포 및 단핵세포에 대해 좀더 효과적이고 선택적인 약제가 요구된다.

본 발명은 하기 일반식 (I) 의 화합물을 유효량 함유하는 동맥경화성 동맥 내막 비후 억제제를 제공한다 :

식중, 고리 X 는 페닐, 치환페닐 또는 5 - 나 6 - 원 헤테로시클릭 아릴이고;

서로 독립적인 각각의 R¹및 R²는 수소, C₁∼₈알킬, C₃∼₇시클로알킬, C₁∼₃알콕시, n - 부톡시, i - 부톡시, sec - 부톡시, t - 부톡시, R²⁰R²¹N - (상기에서 서로 독립적인 R²⁰및 R²¹은 각각 수소 또는 C₁∼₃알킬이다), 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 디플루오로메톡시, 플루오로, 클로로, 브로모, 페닐, 페녹시, 벤질옥시, 히드록시, 트리메틸실릴옥시, 디페닐 - t - 부틸실릴옥시, 히드록시메틸 또는 - O(CH₂)_ℓOR²²(상기에서 R²²는 수소 또는 C₁∼₃알킬, 및 ℓ 은 1, 2 또는 3) 이거나 ; R¹및 R²가 서로 0 - 위치에 있을때 R¹및 R²함께 -CH=CH-CH=CH- 또는 메틸렌 디옥시를 형성하며 :

R³는 수소, C₁∼₈알킬, C₂∼₆알케닐 C₃∼₇시클로알킬, C₅∼₇시클로알케닐 또는(식중, R⁷은 수소, C₁∼₈알킬, C₁∼₈알콕시, C₁∼₃알킬티오, 클로로, 브로모, 플루오로, 클로로메틸, 트리클로로메틸, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 트리클로로메톡시, 디플루오로메톡시, 페녹시, 벤질옥시, 히드록시, 트리메틸실릴옥시, 디페닐 - t - 부틸실릴옥시 또는 히드록시메틸) ; 또는 1 개의(식중, R⁷은 상기 정의한 바와 같음) 및 0, 1 또는 2 개의 C₁∼₃알킬로 치환된 C₁∼₃알킬이고 ;

Y 는 -CH₂-, -CH₂CH₂-, -CH=CH-, -CH₂-CH=CH-, -CH=CH-CH₂-, -C(CH₃)=CH- 또는 -CH=C(CH₃)- 이며 ;

Z 는 -Q-CH₂-W-CH₂-CO₂R¹²,

( 식중, Q 는 -C(0)-, -C(OR¹³)₂- 또는 -CH(OH)-,

W 는 -C(0), -C(OR¹³)₂- 또는 -C(R¹¹)(OH)-,

R¹¹은 수소 또는 C₁∼₃알킬,

R¹²는 수소, R¹⁴(R¹⁴는 화학적 또는 생리적으로 가수분해 가능한 알킬에스테르 성분의 알킬, NHR²³R²⁴R²⁵(식중 R²³, R²⁴및 R²⁵는 각각 수소 또는 C₁∼₄알킬), 나트륨, 칼륨 또는 1/2 칼슘),

상기 화합물은 한 종류이상의 비대칭 탄소원자를 가질 수 있으므로 한 종류 이상의 광학 이성질체를 갖는다. 따라서, 상기 일반식 (I) 의 화합물에는 상기 광학 이성질체 모두 및 그 혼합물들이 포함된다.

나아가, 본 발명의 일반식 (I) 화합물의 치환체 Z 의 카르복실산 유도체 부분 (-CO₂R₁₂) 이, -CO₂R¹²로 정의된 것 이외의 카르복실산 유도체 부분인 화합물 가운데에서, 흡수후 생리적 가수분해에 의해 카르복실산으로 변환될 수 있는것 (-CO₂R¹²부분이 -CO₂H 인 화합물) 은 본 발명의 화합물과 동등한 것으로 간주한다.

본 발명의 화합물은 혈구 (예 : 단핵세포, 대식세포) 가 내피세포에 유착되는 것에 대한 잠재성 저해제일 수 있으며, 동맥경화성 동맥 내막 비후의 초기상의 반응을 억제할 수 있다. 나아가, PDGF 에 의한 대동맥 중간 평활근 세포의 이동 및 오토크린 (autocrine) 자극계의 평활근 세포 유발 이동인자를 함유하고 있을 수 있는 평활근 세포의 조건부 배지 (SMC-CM) 에 의한 대동맥 중간 평활근 세포의 이동을 억제할 수 있다. 나아가, 본 발명의 화합물은 평활근 세포에서의³H - 티미딘 흡수를 억제하여 DNA 복제를 억제하므로, 세포 증식이 효과적으로 억제되는 것으로 생각된다. 상기 효과들은 M-SMC 에서보다 I-SMC 에서 더 잠재적이다.

상술한 사실들로 부터, 본 발명의 화합물은, 동맥경화성 동맥 내막 비후에서 가장 중요한 단계인 대동맥 내막에서의 평활근 세포 증식을 억제하는 것으로 생각된다. 본 발명의 화합물이 동맥경화성 동맥 내막 비후에 대해 상기 억제 효과가 있다는 발견을 기초로 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 화합물, 즉 일반식 (I) 의 메발로노락톤은 하기 반응에 의해 제조할 수 있다.

반응식에서 R¹, R², R³, R¹², R¹⁴및 고리 X 는 일반식 (I) 과 관련하여 상기 정의한 바와 같으며, R¹⁷은 메틸, 에틸, n - 프로필, i - 프로필 또는 n - 부틸과 같은 C₁∼₄저급 알킬이다.

일반식 (I) 의 화합물 가운데, 일반식 (VIIa), (VIIb) 및 (VIIc)의 화합물은 일본국 특허 공개 제 279866/1989 호 (EP 304063, USP 5011930 및 대한민국 특허 공개 제 89-3745 호에 상응), 일본국 특허 공개 제 275878/1990 호 (EP 339358, USP 5024999 및 대한민국 특허 공개 제 90-700480 호에 상응), 및 일본국 특허 공개 제 7290/1991 호 (EP 367235, USP 5026698 및 대한민국 특허공개 제 90-7847 호에 상응)에 개시된 방법에 따라 제조할 수 있다.

단계 A 는 에스테르의 1차 알콜로의 환원이며, 이는 -20℃ ∼ 20℃ 의 온도에서, 바람직하게는 -10℃ ∼ 10℃ 의 온도에서 테트라히드로푸란, 톨루엔 또는 염화메틸렌과 같은 용매내에서 각종 금속수소화물, 바람직하게는 디이소부틸알루미늄 수소화물에 의해 수행될 수 있다.

단계 B 는 1차 알콜의 알데히드로의 산화이며, 이는 각종 산화제에 의해 수행될 수 있다. 바람직하게는, 0℃ ∼ 25℃ 의 온도로 염화메틸렌내에서 피리디늄 클로로크로메이트를 이용하여 반응을 수행하는 방법, 염화 옥살릴, 디메틸술폭시드 및 3차 아민 (예 : 트리에틸아민) 을 이용하여 반응 (스웨른 산화) 을 수행하는 방법, 및 삼산화황 - 피리딘 착물을 이용하여 반응을 수행하는 방법이 있다.

단계 C 는 3 - 에톡시 - 1 - 히드록시 - 2 - 프로펜 유도체의 합성이며, 이는 테트라히드로푸란내에서 부틸리튬으로 시스 - 1 - 에톡시 - 2 - (트리 - n - 부틸스타닐) 에틸렌을 예비 처리하여 생성된 리튬 화합물에 화합물 (V) 을 반응시킴으로써 수득할 수 있다. 반응 온도로는, -60℃ ∼ -78℃ 의 수준에서 낮은 온도를 도입하는 것이 바람직하다.

단계 D 는 산으로 가수분해하여 에날 (enal) 을 합성하는 단계이다. 산촉매로서 바람직하게는 p - 톨루엔술폰산, 염산 또는 황산을 이용하여, 10℃ ∼ 25℃ 의 온도로 물 및 테트라히드로푸란이나 물 및 에탄올의 용매 혼합물내에서 반응을 수행할 수 있다.

단계 C 에서 수득한 3 - 에톡시 - 1 - 히드록시 - 2 - 프로펜 유도체는 정제하지 않고 단지 동시에 생성된 테트라 - n - 부틸주석을 제거하기만 하여 단계 D 에 사용할 수 있다.

단계 E 는 에날 (III) 및 아세토아세트산 에스테르의 첨가 반응이다. 반응은 바람직하게는, -80℃ ∼ 0℃ 의 온도로, 바람직하게는 -30℃ ∼ -10℃ 의 온도로 테트라히드로푸란내에서 염기로서 수소화 나트륨 및 n - 부틸 리튬을 사용하여 수행된다.

단계 F 는 케토카르복실산 에스테르 (II) 가 각종 환원제로 환원되는 반응이다.

이는 카르보닐기를, 예를 들어 소듐 보로하이드리드, 소듐 시아노보로하이드리드, 아연 보로하이드리드, 디시아밀보란, 디보란, t - 부틸아미노보란, 피리딘 - 보란 착물, 디시클로헥실보란, 텍실보란, 9 - 보라비시클로 [3. 3. 1]노난, 디이소피노캄페닐 보란 또는 리튬 트리 - sec - 부틸 보로하이드리드를 이용하여 환원시켜 상응하는 디히드록시카르복실산 에스테르 (I-1) 를 수득하는 반응이다.

이 반응은 -100℃ ∼ 50℃ 의 온도로, 바람직하게는 -78℃ ∼ 30℃ 의 온도로 탄화수소, 할로겐화 탄화수소, C₁∼₄알콜, 에테르로 부터 선택된 용매 및 그 용매 혼합물내에서 수행된다.

그렇지 않을 경우, 문헌 [J. Amer. Chem. Soc., 105, 593, (1983)]에 개시되었듯이 트리 - n - 부틸보란 또는 트리에틸보란과 같은 트리알킬보란 및 소듐 보로하이드리드를 저온에서 사용할 수 있다.

나아가, 문헌 [Tetrahedron Letters, 28, 155, (1987)] 에 개시되었듯이 메톡시디에틸보란 또는 에톡시디에틸보란과 같은 알콕시디알킬보란을 이용하여 생물학적으로 보다 강한 활성을 갖는 에리트로 생성물을 우선적으로 수득하는 것이 가능하다.

상기 반응은 -80℃ ∼ -50℃ 의 온도에서, 바람직하게는 -72℃ ∼ -68℃ 의 온도에서 C₁∼₄알콜 및 테트라히드로푸란의 용매 혼합물을 이용하여 수행할 수 있다.

단계 G 는 에스테르를 가수분해하는 단계임, 반응은 10℃ ∼ 25℃ 의 온도로 물 및 메탄올이나 에탄올의 용매 혼합물내에서 동물량의 염기, 바람직하게는 수산화칼륨 또는 수산화나트륨을 이용하여 수행할 수 있다.

여기서 수득된 유리산은 적절한 염기와 반응하여 염을 형성할 수 있다.

단계 H 는 유리 히드록시산 (I-2) 에 탈수 반응을 행하여 메발로노락톤을 생성하는 공정이며, 반응은 생성된 물을 제거하면서 벤젠 또는 톨루엔내에서 환류시킴으로써 수행하거나, 분자체와 같은 적절한 탈수제를 첨가함으로써 수행할 수 있다.

그렇지 않으면, 반응은 10 ∼ 35℃ 의 온도로 바람직하게는 20 ∼ 25℃ 의 온도로 무수 염화메틸렌 내에서 카르보디이미드, 바람직하게는 N - 시클로헥실 - N' - [2' - (메틸모르폴리늄) 에틸] 카르보디이미드 p - 톨루엔술포네이트와 같은 수용성 카르보디이미드와 같은 락톤 생성제를 사용하여 수행할 수 있다.

단계 J 는 헤테로고리에서 메말로노락톤 부분을 연결시키는 이중결합의 수소화이며, 이는 0℃ ∼ 50℃ 의 온도로, 바람직하게는 10℃ ∼ 25℃ 의 온도로 메탄올, 에탄올, 테트라히드로푸란 또는 아세토니트릴과 같은 용매내에서 촉매량의 팔라듐 - 탄소 또는 로듐 - 탄소를 이용하여 수행할 수 있다.

단계 K 는 디히드록시카르복실산 에스테르를 선택적으로 산화시킴으로써α,β- 불포화케톤을 제조하기 위한 반응이며, 20 ∼ 80℃ 의 온도로 바람직하게는 40℃ ∼ 80℃ 의 온도로 에틸에테르, 테트라히드로푸란, 벤젠 또는 톨루엔과 같은 용매내에서 활성화된 이산화망간을 이용하여 수행된다.

그렇지 않으면, 일반식 (I-6) 의 화합물은 워즈워드 - 에몬스 (Wadsworth - Emmons) 커플링 반응에 의해 일반식 (V) 의 알데히드로 부터 합성될 수 있다 [문헌 (J. Amer. Chem. Soc., 107, 3731, (1985))].

나아가, 그것은 일반식 (III)의 에날로 부터 합성될 수 있다 [문헌 (Tetrahedron Letters, 26, 2951, (1985))]. 또한, 일반식 (I-7) 의 화합물은 연속적인 위티히 반응 (Wittig reaction) (WO-8402131) 에 의해 일반식 (V) 의 알데히드로 부터 합성된 알데히드 (VIII) 에 단계 E 에서와 같은 방법으로 아세토아세트산 에스테르의 이중 음이온을 첨가하여 케토카르복실산 에스테르 (IX) 를 수득한 다음, 단계 F 에서와 같은 방법으로 카르보닐기를 더 환원시킴으로써 수득될 수 있다. 부수적인 실시예에 개시된 것들을 포함하여 표 1 ∼ 4 에 기재된 화합물들은 단지 본 발명의 화합물의 특정예에 불과하다. 일반식에서, 치환체 -Y-Z 는 표 1 에 나타내며, 그외 치환체는 표 2 ∼ 4 에 나타낸다.

하기 치환체의 제시에서, 각종 부호는 하기 치환체를 나타낸다.

즉, n - 은 노말, i - 는 이소, Sec - 는 이차, tert - 는 삼차, c - 는 시클로, Me 는 메틸, Et 는 에틸, Pr 은 프로필, Bu 는 부틸, Pent 는 펜틸, Hex 는 헥실, 및 Ph 는 페닐을 나타낸다.

또한, 유사한 방법으로, 상기 화합물들의, 칼륨염 또는 1/2 칼슘염과 같은 약학적으로 허용가능한염, 메틸에스테르, n - 프로필에스테르, i - 프로필에스테르, c - 프로필에스테르, n - 부틸에스테르, i - 부틸에스테르, sec - 부틸에스테르, t - 부틸에스테르, n - 펜틸에스테르, i - 펜틸에스테르 또는 n - 헥실에스테르와 같은 에스테르, 및 암모늄염, 트리메틸아민염, 디에틸아민염, 피페라진염, 모르폴린염, 피페리딘염, 아우라민염, 디아우라민염 또는 트로메타민염을 제조하는 것이 가능하다.

본 발명의 화합물은 이후의 시험결과에서 보여지듯이, HMG-CoA 환원효소가 속도 제한 효소로 작용하여 콜레스테롤의 생합성에 대해 높은 억제 활성을 가질뿐만아니라 M-SMC 의 이동, I-SMC 의 증식 및 내피세포에 혈구가 세포유착되는 것에 대해 억제효과를 갖는다. 따라서, 본 발명의 화합물은 과지방혈증, 과지단백증 및 동맥경화증에 대한 치료제로 유용하다.

이들은 투여방법에 따라 각종 적당한 제제로 제제화 될 수 있다. 본 발명의 화합물은 유리산의 형태나 생리적으로 가수분해 가능하며 허용되는 에스테르나 락톤, 또는 약학적으로 허용되는 염의 형태로 투여될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 본 발명의 화합물 자체의 형태 또는 히드록시프로필 셀룰로오스, 시럽, 아라비아고무, 젤라틴, 소르비톨, 트라가칸트고무, 폴리비닐 피롤리돈 또는 CMC-Ca 와 같은 결합제, 락토오스, 당, 옥수수 전분, 칼슘 포스페이트, 소르비톨, 글리신 또는 결정 셀룰로오스 분말과 같은 부형제, 마그네슘 스테아레이트, 탈크, 폴리에틸렌 글리콜 또는 실리카와 같은 윤활제, 및 감자 전분과 같은 붕해제를 포함하는 적절한 약학적으로 허용되는 담체와 본 발명의 화합물을 혼합함으로써 제제화된 분말, 과립, 정제 또는 캡슐의 형태로 경구투여하는 것이 바람직하다.

하지만, 본 발명의 약학적 조성물은 상기 경구투여에만 제한되는 것은 아니며 비경구적 투여로도 사용할 수 있다. 예를 들어, 카카오버터, 폴리에틸렌 글리콜, 라놀린 또는 지방산 트리글리세리드와 같은 유성 기재물질을 이용하여 제제화된 좌약, 액체파라핀, 백색 와셀린, 고급알콜, 마크로골 연고, 친수성 연고 또는 히드로 - 겔 기재물질, 증류수, 주사용 증류수 및 락톤이나 옥수수전분과 같은 부형제로 구성된 군에서 선택된 한 종류이상의 물질을 이용하여 제제화한 주사제제, 또는 안점막, 비점막 및 경구점막과 같은 점막을 통한 투여용 제제의 형태로 투여할 수 있다.

또한, 본 발명의 화합물은, 담즙산을 붙들어 둘 수 있고 위장관에 의해 아직 흡수되지 않은 염기성 이온 교환수지와 조합할 수 있다.

일반식 I 화합물의 성인의 1일 복욕량은 0.05 ∼ 500mg, 바람직하게는 0.5 ∼ 50mg 이다. 하루 1 ∼ 3 회 투여한다. 복용량은 물론 환자의 연령, 병상태의 정도에 따라 변화한다.

이제, 본 발명을 동맥경화성 동맥 내막 비후에 대한 본 발명의 화합물의 억제 효과를 제시하는 실시예를 참고로 더 자세히 설명할 것이다. 시험되는 본 발명의 화합물 (시험 화합물 1 ∼ 3) 및 비교 화합물 (일본국 특허 공개 제 185275/1982 호 또는 EP 65835 에 개시된 프라바스타틴, 및 일본국 특허 공개 제 122373/1981 또는 EP 33536 에 개시된 삼바스타틴)의 화학구조는 하기와 같다 :

참고예

(E) - 트랜스 - 6 - (2' - [4" - (4"' (플루오로페닐) - 1", 3" - 디메틸 - 6" - (1"' - 메틸에틸) 피라졸로 [3, 4 - b] 피리딘 - 5" - 일) 에테닐) 4 - 히드록시 - 3, 4, 5, 6 - 테트라히드로 - 2H -피란 - 2 - 온 (화합물 I-3b - 1)

이 화합물은 출발물질로서 메틸 2 - 시클로프로필 - 5 - 에틸 - 3 - (4' - 플루오로페닐) - 6 - 메틸티에노 [2, 3, - b] 피리딘 - 3 - 일카르복실레이트 (화합물 VIIb-1)을 사용하여 단계 A ∼ H 를 거쳐 제조된다.

유사한 방법으로, 시험화합물 1, 2 및 3 을 하기 중간체 (VIIa-1, VIIb-2 및 VIIc-1) 로 부터 제조한다 :

화합물 VIIa-1

메틸 2-시클로프로필 -4- (4'-플루오로페닐) 퀴놀린 - 3 - 일카르복실레이트

화합물 VIIb-2

메틸 6 - 시클로프로필 - 1, 3 - 디메틸 - 4 - (4' - 플루오로페닐) 피라졸로 [3, 4, -b] 피리딘 - 5 - 일카르복실레이트

화합물 VIIc-1

메틸 6 - 시클로프로필 - 3 - 에틸 - 4 - [4' - 플루오로페닐] - 2 - 메틸티에노 [2, 3, - b] 피리딘 - 5 - 일카르복실레이트.

시험화합물 1 (I - 3a - 1)

(E) - 트랜스 - 6 - (2' - [2" - 시클로프로필 - 4" - (4"' - 플루오로페닐) 퀴놀린 - 3" - 일] 에테닐) - 4 - 히드록시 - 3, 4, 5, 6 - 테트라히드로 - 2H - 피란 - 2 - 온

시험화합물 2 (I - 3b - 2)

(E) - 트랜스 - 6 - (2' - [6" - 시클로프로필 - 1", 3" - 디메틸 - 4" - (4"' - 플루오로페닐) 피라졸로 [3, 4, - b] 피리딘 - 5" - 일] 에테닐) - 4 - 히드록시 - 3, 4, 5, 6 - 테트라히드로 - 2H - 피란 - 2 - 온

시험화합물 3 (I -3c - 1)

(E) - 트랜스 - 6 - (2' - [2" - 시클로프로필 - 5" - 에틸 - 3" - (4"' - 플루오로페닐) - 6" - 메틸티에노 [2, 3, - b] 피리딘 - 3" - 일] 에테닐) - 4 - 히드록시 - 3, 4, 5, 6 - 테트라히드로 - 2H - 피란 - 2 - 온

단계 A

4 - (4' - 플루오로페닐) - 5 - 히드록시메틸 - 1, 3 - 디메틸 - 6 - (1' - 메틸에틸) 피라졸로 [3, 4 - b] 피리딘 (화합물 VI - b - 1).

질소 대기하에서, 5.0g (0.014 몰) 의 화합물 VIIb-1 을 무수 톨루엔에 용해시키고 아이스 배드에서 0℃ 로 냉각시킨다. 이 용액에, 16 중량 % 의 디이소부틸알루미늄 하이드리드를 함유하는 톨루엔 용액 35ml 를 적가하고 그 혼합물을 0℃ 에서 2 시간 동안 교반한다. 얇은 막 크로마토그래피로 화합물 VIIb-1 이 완전히 없어졌음을 확인한후, 포화 암모늄 클로라이드 용액을 0℃ 에서 가하여 반응을 종료시킨다. 반응 혼합물에 에틸 에테르를 가하고, 유기층을 분리한다. 겔화된 물질에 수산화나트륨 수용액을 가하여 그것을 용해시키고, 그 용액을 에틸 에테르로 추출한다. 에틸 에테르 추출물을 함께 모아 무수 마그네슘 설페이트로 건조시키고 여과를 행한 다음, 용매를 증류 제거하여 3.9g 의 담황색 목적 생성물을 수득한다. 수율 : 88 %, 융점 : 174 ∼ 175℃.

유사한 방법으로 하기의 화합물을 제조한다.

단계 B

[4 - (4' - 플루오로페닐) - 1, 3 - 디메틸 - 6 - (1' - 메틸에틸) 피라졸로 [3, 4, - b] 피리딘 - 5 - 일] 카르복시알데히드 (화합물 Vb - 1).

4.2g (19mmol)의 피리디늄 클로로크로메이트, 0.69g 의 무수 소듐 아세테이트 및 3.8g (12mmol) 의 화합물 VIb-1 을 실온에서 50ml 의 무수 디클로로메탄에 현탁한다. 반응용액을 1 시간 동안 교반하고, 100ml 의 에틸 에테르를 거기에 가한 다음 완전히 혼합한다. 반응 혼합물을 세라이트층을 통해 흡입하 여과하고, 여액을 감압하 증발건조시킨다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (용리액 : 클로로포름) 로 정제하여 2.9g 의 목적하는 담황색 생성물을 수득한다. 수율 : 78 %, 융점 : 144 ∼ 146℃.

유사한 방법으로 하기의 화합물을 제조한다.

단계 C 및 D

(E) - 3 - [ 4'- (4"- 플루오로페닐) - 1', 3'- 디메틸 - 6' - (1"- 메틸에틸) 피라졸로 [3,4,-b] 피리딘 - 5'- 일 ] 프로펜알데히드 (화합물 IIIb-1)

단계 C

1.45g (40mmol) 의 시스 - 1 - 에톡시 - 2 - (트리 - n - 부틸스타닐) 에틸렌을 50ml 의 무수 테트라히드로푸란에 용해시키고, 그 용액을 질소흐름하에서 -78℃ 로 냉각시킨다. 이 용액에, n - 헥산 중의 15 중량 % n - 부틸리튬 용액 26ml (40mmol) 을 적가한다. 혼합물을 20 분간 교반한다. 다음, 20ml 의 무수 테트라히드로푸란에 2.5g (8mmol) 의 혼합물을 Vb-1 이 용해된 용액을 거기에 적가한다. 반응 혼합물을 -78℃ 에서 1 시간동안 교반한 다음, 26ml 의 포화 암모늄 클로라이드 용액을 가하여 반응을 종료시킨다. 유기층을 디에틸에테르로 추출하고, 에테르 추출물을 염화나트륨 포화 수용액으로 세척한 다음 무수 마그네슘 설페이트로 건조시킨다. 용매를 감압하 증류제거하고, 잔류물을 n - 헥산 및 아세토니트릴 간에 액체 분리를 행하여, 아세토니트릴 층을 감압하 증류시켜 용매를 증류제거하여 실질적으로 순수한 화합물 IVb-1 을 수득한다.

단계 D

단계 C 에서 수득된 화합물 IVb-1 을 70ml 의 테트라히드로푸란에 용해시키고 20ml 의 물 및 3g 의 p - 톨루엔 술폰산을 거기에 가한다. 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반한다. 반응액을 수산화 나트륨 수용액으로 조심스럽게 중화한 다음 디에틸에테르로 몇 회 추출한다. 추출물을 염화나트륨 포화 수용액으로 세척하고 무수 마그네슘 설페이트로 건조시킨다. 다음, 용매를 감압하 증류제거한다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (용리액 : 에틸 아세테이트 / n - 헥산 = 1/9 (v/v) ) 로 정제하여 담황색의 목적하는 생성물을 수득한다. 양 : 2.2g (수율 : 79%), 융점 : 133 ∼ 134℃.

같은 방법으로, 하기 화합물들을 제조한다.

단계 E

에틸 (E) - 7 - [ 4'- (4"- 플루오로페닐) - 1', 3'- 디메틸 - 6'- (1"- 메틸에틸) 피라졸로 [3,4-b] 피리딘 - 5 - 일 ] - 5 - 히드록시 - 3 - 옥소헵트 - 6 - 에노에이트 (화합물 IIb-1)

1.25g 의 60 % 소듐 히드리드를 무수 석유 에테르로 세척하고 질소흐름하에서 건조시킨 다음 200ml 의 무수 테트라히드로푸란에 현탁한다. 현탁액을 질소대기 내에서 15℃ 로 냉각시키고, 3.9ml (30mmol) 의 에틸 아세토아세토네이트를 거기에 적가한다. 혼합물을 15 분간 교반한다. 다음, n - 헥산 중의 n- 부틸 리튬 15 중량 % 용액 20ml (30mmol) 을 거기에 적가하고, 그 혼합물을 30 분간 교반한다. 나아가, 무수 테트라히드로푸란에 2.1g (6.1mmol) 의 화합물 IIIb-1 이 용해된 용액을 거기에 적가하고, 혼합물을 1시간동안 교반한다. 반응 혼합물에, 10ml 의 염화 암모늄 포화 수용액을 -15℃ 에서 가하고, 혼합물을 디에틸에테르로 3 회 추출한다. 에테르액을 염화 나트륨 포화 수용액으로 세척하고 무수 마그네슘 설페이트로 건조시킨 다음, 감압하에서 증발건조시킨다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (용리액 : 에틸 아세테이트 / 클로로포름 = 1/9 (v/v)) 로 정제하여 백색의 목적 생성물 2.5g (수율 : 89 %) 을 수득한다. 융점 : 95 ∼ 98℃.

같은 방법으로, 하기의 화합물들을 제조한다.

단계 F

에틸 (E) - 7 - [ 4'- (4"- 플루오로페닐) - 1',3'- 디메틸 - 6' - (1"- 메틸에틸) 피라졸로 [3,4-b] 피리딘 - 5' - 일 ] - 3,5 - 디히드록시헵트 - 6 - 에노에이트 (화합물 I-1b-1)

질소 대기하에, 2.32g (4.96mmol) 의 화합물 IIb-1 을 20ml 의 에탄올에 용해시키고, 용액을 0℃ 로 냉각시킨다. 다음, 740mg (20mmol) 의 소듐 보로하이드리드를 거기에 가하고, 혼합물을 1시간동안 교반한다. 거기에 10 % 염산 수용액을 가하여 혼합물을 조심스럽게 중화시킨다. 다음, 혼합물을 에틸 에테르로 3 회 추출한다. 에테르액을 염화 나트륨 포화 수용액으로 세척하고 무수 마그네슘 설페이트로 건조시킨 다음, 감압하에서 증발건조시킨다. 잔류 오일을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (용리액 : 에탄올 / 클로로포름 = 3/97 (v/v)) 로 정제하여 무색 점성 오일의 순수 목적 생성물을 수득한다.

양 : 1.81g (수율 : 78%)

NMR (δppm CDCl3)

1.28 (t, J=8Hz, 3H0, 1.32 (d, J=8Hz, 6H), 1.4 ∼ 1.8(m, 1H), 1.92 (s, 3H), 2.2 ∼ 2.6 (m, 3H), 2.9 ∼ 3.8 (m, 2H), 3.42 (7 heptalet, J=8Hz, 1H), 4.06 (s, 3H), 4.1 ∼ 4.6 (m, 4H), 5.1 ∼ 5.5 (m, 1H), 6.4 ∼ 6.7 (m, 1H), 6.9 ∼ 7.3 (m, 4H)

같은 방법으로, 하기의 화합물들을 제조한다.

단계 G

(E) - 7 - [ 4'- (4"- 플루오로페닐) - 1',3'- 디메틸 - 6'- (1" - 메틸에틸) 피라졸로 [3,4-b] 피리딘 - 5' - 일] 3,5 - 디히드록시헵트 - 6 - 엔산의 나트륨염 (화합물 I-5b-1)

200mg (0.43mmol) 의 화합물 I-1b-1 을 2ml 의 에탄올에 용해시키고, 거기에 0.5N 수산화 나트륨 수용액 0.85ml 를 적가한다. 혼합물을 실온에서 1 시간 더 교반한다. 다음, 에탄올을 감압하에서 증류제거하고, 잔류물에 2ml 의 물을 가한다. 다음, 혼합물을 에틸 에테르로 추출한다. 수성층을 동결건조시켜 담황색의 습윤 분말 180mg (91 %) 을 수득한다. 융점 : 285 ∼ 264℃ (분해됨).

같은 방법으로, 하기 혼합물들을 제조한다.

(E) - 7 - [ 4'- (4" - 플루오로페닐) - 1',3'- 디메틸 - 6'- (1"- 메틸에틸) 피라졸로 [3,4-b] 피리딘 - 5' - 일 ] 3,5 - 디히드록시헵트 - 6 - 엔산 (화 I-2b-1)

0.25g (0.53mmol) 의 화합물 I-1b-1 을 3ml 의 에탄올에 용해시키고, 거기에 0.5N 수산화 나트륨 수용액 1.06ml 를 적가한다. 에탄올을 감압하에서 증류제거한 다음, 3ml 의 증류수를 잔류물에 가한다. 그 혼합물을 에틸에테르로 추출한다. 수성층을 1 % 염산으로 조심스럽게 중화시킨 다음 에틸에테르로 추출한다. 에테르층을 무수 마그네슘 설페이트로 건조시킨 다음 감압하에서 증류시켜 목적 생성물을 수득한다. 양 : 0.21g (수율 : 90 %) P-NMR(DMSO-d⁶)δppm :

1.29 (d, J=7Hz, 6H), 1.83 (s, 3H), 2.1 ∼ 2.3 (m, 2H), 2.4 ∼ 2.6 (m, 1H), 3.0 ∼ 3.6 (m, 4H), 3.96 (s, 3H), 4.3 ∼ 4.8 (m, 2H), 5.2 ∼ 5.6 (m, 1H), 6.3 ∼ 6.6 (m, 1H), 7.2 ∼ 7.4 (m, 4H), 11.5 ∼ 12.0 (bs, 1H)

단계 H

(E) - 트랜스 - 6 - (2'- [ 4"- (4"'- 플루오로페닐)- 1",3"- 디메틸 - 6"- 1"'- 메틸에틸) 피라졸로 [3,4-b] 피리딘 -5"- 일 ] 에테닐) - 4 - 히드록시 - 3,4,5,6 - 테트라히드로 - 2H - 피란 - 2 - 온(화합물 I-3b-1)

130mg (0.29mmol) 의 화합물 I-2b-1 을 6ml 의 디클로로메탄에 용해시키고, 125mg (0.29mmol) 의 N - 시클로헥실 - N' - (2"- 메틸모르폴리노에틸) 카르보디이미드 p - 톨루엔술포네이트를 거기에 가한다. 혼합물을 실온에서 2 시간동안 교반하고, 용매를 감압하에서 증류제거하여 건조시킨다. 잔류 오일을 실리카겔 얇은 막 크로마토그래피 (용리액 : 헥산 / 에틸아세테이트 = 9/1 (v/v)) 로 정제하여 무색 점성오일의 순수 목적 생성물을 수득한다. 양 : 48mg (수율 : 39 %).

P-NMR(CDCl₃)δppm :

1.33 (d, J=6.8Hz, 6H), 1.4 ∼ 1.5 (m, 1H), 1.6 ∼ 1.7 (m, 2H), 1.93 (s, 3H), 2.5 ∼ 2.6 (m, 1H), 2.68 (dd, J=18Hz, J=5Hz, 1H), 3.39 (7 heptalet, J=6.8Hz, 1H), 4.07 (s, 3H), 4.1 ∼ 4.2 (m, 1H), 5.1 ∼ 5.2 (m, 1H), 5.31 (dd, J=16Hz, J=6Hz, 1H), 6.61 (dd, J=16Hz, J=1.5Hz, 1H), 7.1 ∼ 7.3 (m, 4H)

같은 방법으로, 하기의 화합물들을 제조한다.

실 시 예 1

대동맥 내막평활근 세포 (M-SMC) 의 이동에 대한 억제 효과.

M-SMC 의 이동에 대한 본 발명의 화합물의 억제효과는 하기 방법으로 측정한다.

스프라기 다울리 (Sprague Dawley) 수컷 쥐의 흉곽 대동맥의 동맥 중막 박편을, 10 % 송아지 혈청 (FBS) 를 함유하는 37℃ 의 둘 베코 변형 이글 (DME) 배지를 이용하여 공기 95 % 및 이산화탄소 5 % 를 함유하는 대기에서 3 ∼ 4 주 동안 배양한다. 동맥 중막 박편으로 부터 성장한 대동맥 중간 평활근 세포를, 안정한 2 차 배양을 위해 세포밀도 1 : 2 분할로 2 차 배양한다. 3 ∼ 4 회의 2 차 분할후에, 합류 상태의 세포의 항트립신성을 파괴한 다음, 상기 배지에서 1ml 당 500,000 세포의 세포밀도로 현탁시킨다. 상기 세포 현탁액에, 디메틸술폭시드 (DMSO) 에 용해된 시험 화합물을 가하여 최종 DMSO 농도가 0.2 % 가 되도록 하고, 세포 현탁액을 37℃ 에서 30 분간 사전 배양시킨다. 대조군으로서, 같은 농도에 DMSO 만을 가한다. 니트로셀룰로오스 막으로 구분된 보이덴실 (Boyden's Chameber) 의 하층 구간에, 이동인자로서, 10ng/ml 의 혈소판 유도성장인자 (PDGF) 또는 48 시간 콘디쇼닝하여 수득한 10 % SMC 조건의 DME 배지 (SMC-CM) 를 함유하는 DME 배지를 채운다. 그 상층구간에는 세포 현탁액 1ml 를 넣고 37℃ 에서 4 시간동안 배양조건에서 배양을 수행한다. 공시험으로, 이동인자가 없는 DME 배지를 하층 구간에 채운다. 4 시간 배양후, 니트로셀룰로오스 막의 위쪽에 부착된 세포를 제거하고, 막의 아래쪽으로 이동한 세포를 고정시키고 디프 퀵 (Diff Quik) 으로 착색한다. 10 필드 내의 이동 세포의 수를 400 x HPF 의 광현미경으로 센다.

수득된 생성물을 각 경우에 세 방의 평균 세포수로 나타내고, 억제율 (%) 을 하기 식에 따라 계산한다 :

억제율 (%) = 100 - {T-B) / (C-B) x 100}

( 상기에서 B : 공시험의 세포수, C : 대조군의 세포수, 및 T : 시험 화합물이 함유된 세포수 )

결과를 표 5 에 나타낸다. 본 발명의 화합물은 비교 화합물과 비교하여 M-SMC 의 이동에 대해 강력한 억제효과를 나타낸다.

실 시 예 2

대동맥 내막평활근 및 중간 평활근 세포 (I-SMC 및 M-SMC) 의 증식 억제 효과.

I-SMC 및 M-SMC 의 증식에 대한 본 발명의 화합물의 억제효과를 하기의 방법으로 측정한다.

10 % FBS 및 항생물질을 함유하는 DME 배지를 이용하여, 건강한 일본 흰 쥐에서 수득한 대동맥 증막 박편, 및 3 달 동안 1 % 콜레스테롤 식이요법을 행한 동맥경화증세의 일본 흰 쥐에서 수득한 대동맥 증막으로 부터 분리한 대동맥 내막 병변의 박편을 실시예 1 과 같은 방법으로 배양한다. 세포를 2 ∼ 3 회 2 차 배양한 후, 합류상태의 세포의 항트립신성을 파괴하고 상기 배지에 현탁시켜 세포밀도가 20,000 세포 / ml 가 되도록 한다. 다음, 10,000 개의 세포를 24 개 기공의 다공성판에 심고 배양한다. 6 시간동안 배양한 후, 배지를 0.5ml 의 대조 배지 또는 시험 화합물 함유 배지로 교체한다. 동시에, 판에 처음으로 부착된 세포수를 세고 초기 세포수 (I) 로 간주한다. 실시예 1 에 기재한 바와같이 시험 화합물을 배지에 가한다. 대조군으로서, DMSO 만을 가하여 최종 농도가 0.2 % 가 되도록 한다. 배지 변화는 매이틀마다 행하고, 첫째, 둘째, 세째, 다섯째 및 일곱째 날에 세포의 항트립신성을 파괴하고 이소톤에 현탁시켜 코울터 계산기로 세포수를 센다.

수득된 생성물은 각 경우에 세 기공의 평균 세포수로 나타내고, 둘째날 부터 다섯째 날까지의 세포수의 증가의 억제율 (%) 을 하기 식에 따라 계산한다.

억제율 (%) = 100 - { (T₅/T₂) / (C₅/C₂) x 100}

( 상기에서, T2 및 T5 는 각각, 시험 화합물을 함유하는 배지에서 둘쨋날 및 다섯째날의 세포수이고, C2 및 C5 는 각각, 대조 배지에서 둘째 및 다섯째날의 세포수이다. )

결과를 표 6 에 나타낸다. 본 발명의 화합물은 비교 화합물과 비교하여, I-SMC 및 M-SMC 모두의 증식에 대한 강한 억제 효과를 나타낸다. 나아가, I-SMC 증식에 대한 억제효과는 그 효과에 있어서, M-SMC 증식에 대한 억제효과 보다 더 크다.

실시예 3

대동맥 내막평활근 및 중간평활근 세포 (I-SMC 및 M-SMC) 에서의 3H - 티미딘 흡수에 대한 억제효과.

I-SMC 및 M-SMC 에서의³H - 티미딘 흡수에 대한 본 발명의 화합물의 억제효과는 하기 방법으로 측정한다.

실시예 2 에서 언급했듯이, M-SMC 및 I-SMC 는 건강한 일본 흰 토끼의 대동맥증막 및 동맥경화증의 일본 흰 토끼의 동맥 내막으로 부터 수득된다. 3 ∼ 4 회의 2 차 배양후에, 합류상태의 세포의 항트립신성을 파괴하고, 10 % FBS 및 항생물질을 함유하는 DME 배지에 현탁시켜서 세포밀도가 40,000 세포/ml 가 되도록 한다. 10,000 개의 세포를 48 개 기관의 다공성판에 심는다. 4 일간 배양후, 배지를 대조 배지 또는 실시예 2 에 사용한 시험 화합물을 함유하는 배지로 교체하고, 24 시간 동안 배양을 계속한다. 다음,μCi (37MBq) 의³H - 티미딘을 저기에 가하고, 3 시간 동안 배양을 계속한다. 세포를 포스페이트 완충 생리적 식염수 (PBS) 로 3 회 세척하고 냉각 5 % 트리클로로아세트산 (TCA) 으로 처리한다. 불용성분을 냉각 TCA 로 세척한 다음 0.5N 수산화칼륨 수용액에 용해시킨다.³H 방사능을 액체 섬광 계수기로 측정하고 단백질 함량을 측정한다.

수득된 결과를 단백질 1mg 당 방사능으로 계산하고 3 개 기공의 평균 값으로 나타낸다. 억제율은 하기 식에 따라 계산한다.

억제율 (%) = 100 - T/C x 100

결과를 표 7 에 나타낸다. 본 발명의 화합물은 비교 화합물과 비교 했을때, 내막평활근 및 중간평활근 세포에서³H - 티미딘이 DNA 분획으로 흡수되는 것에 대한 강한 억제효과를 나타낸다.

실 시 예 4

백혈병 세포 (HL-60) 의 유착에 대한 억제 효과

HL-60 의 유착에 대한 본 발명의 화합물의 억제 효과는 하기 방법으로 측정한다. HL-60 세포를 95 % 의 공기 및 5 % 의 이산화탄소를 함유하는 대기내에서 10 % FBS 및 항생물질을 함유하는 37℃ 의 RPMI 1640 배지에 배양시킨 다음, 기공당 2ml 의 양으로 세포 밀도가 1,000,000/ml 가 되도록 6 개 기공의 다공성 판에 심는다. DMSO 에 용해된 시험 화합물을 가하여 최종 DMSO 농도가 0.2 % 가 되도록 하고 전처리를 위해 배양을 48 시간동안 수행한다. 다음, 500,000 개의 세포를 24 개 기공의 다공성 판에 심고, 에탄올에 용해된 포르볼 미리스테이트 아세테이트 (TPA) 0.02mM 을 배양 배지의 1/250(v/v) 의 양으로 가한 다음, 배양을 12 시간동안 계속한다. 다음, 세포를 PBS 로 세척하고 기공판에 부착된 세포의 항트립신성을 파괴함으로써 세포를 폐기한 다음 이소톤에 현탁시키고, 세포수를 코울터 계산기로 센다. DMSO 만을 가하여 대조시험을 행한다.

수득된 결과는 전처리시 세 기공의 세포수의 평균값으로 나타내고, 억제율 (%) 은 하기 식에 따라 계산한다.

유착에 대한 억제율 (%) = 100 - T/C x 100

( 상기에서, T : 시험 화합물을 함유하는 배지에서의 세포수

C : 대조 배지에서의 세포수)

결과는 표 8 에 나타낸다. 본 발명의 화합물은 비교 화합물과 비교 했을때, TPA 에 의해 유발된 HL-60 의 세포 유착에 대해 명백히 강한 억제 효과를 나타낸다.

실 시 예 5

J 774 대식 세포 (J774-Mφ) 의 유착에 대한 억제효과

J774-Mφ의 세포 유착에 대한 본 발명의 화합물의 억제효과는 하기 방법으로 측정한다.

1,000,000 개 세포를 기공 6 개의 다공성 판에 심고, 95 % 의 공기 및 5 % 의 이산화탄소를 함유하는 대기내에서 10 % FBS 및 항생물질을 함유하는 37℃ 의 DME 배지 1ml 에 2 일간 배양시킨다. 다음, 전처리로서, 0.2 % 의 DMSO 를 함유하는 대조 배지 또는 시험 화합물을 함유하는 배지로 배양을 48 시간동안 계속한다. 다음, 세포를 고무 폴리세만으로 긁어내서 상기 배지에 현탁시킨다. 200,000 개 세포를 기공 24 개의 다공성 판에 심고 12 시간 동안 배양한다. 다음, 기공판에 부착된 세포를 고무 폴리세만으로 긁어내서 세포수를 코울터 계산기로 계산한다.

수득된 결과는 전처리시 각각의 경우, 세 기공의 세포수의 평균값으로 나타내고, 억제율 (%) 은 하기 식에 따라 계산한다 :

유착에 대한 억제율 (%) = 100 - T/C x 100

( 상기에서, T : 시험 화합물을 함유하는 배지에서의 세포수

C : 대조 배지에서의 세포수 )

결과는 표 9 에 나타낸다. 본 발명의 화합물은 J774-Mφ의 세포 유착에 대해 강한 억제효과를 나타낸다.

본 발명의 화합물은 대동맥 내막평활근 세포(I-SMC)의 증식의 억제, 대동맥 중간 평활근 세포(M-SMC)의 중막에서 내막으로의 이동의 억제 및 혈구 세포(임파구, 백혈구, 마크로파지)의 혈관 내피세포로의 세포 접착을 강력히 억제함으로써, PTCA 후의 재협착증, 지주막하 출혈후의 뇌혈관 수축증 또는 폐색 경화성 동맥염의 질병 예방약으로서 유용하다.

Claims

하기 일반식 (I) 의 화합물을 함유하는, PTCA 후의 재협착증, 지주막하 출혈후의 뇌혈관 수축증 또는 폐색 경화성 동맥염의 질병에 유용한 약제:

식중, 고리 X 는 페닐, 치환 페닐 또는 5 - 또는 6 - 원 헤테로시클릭 아릴이고 ;

서로 독립적인 각각의 R¹및 R²는 수소, C₁∼₈알킬, C₃∼₇시클로알킬, C₁∼₃알콕시, n - 부톡시, i - 부톡시, sec - 부톡시, t - 부톡시, R²⁰R²¹N - (상기에서 서로 독립적인 R²⁰및 R²¹은 각각 수소 또는 C₁∼₃알킬이다), 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 디플루오로메톡시, 플루오로, 클로로, 브로모, 페닐, 페녹시, 벤질옥시, 히드록시, 트리메틸실릴옥시, 디페닐 - t - 부틸실릴옥시, 히드록시메틸 또는 - O(CH₂)_ℓOR²²(상기에서 R²²는 수소 또는 C₁∼₃알킬, 및 ℓ 은 1, 2 또는 3) 이거나 ; R¹및 R²가 서로 0 - 위치에 있을때 R¹및 R²함께 - CH = CH - CH = CH - 또는 메틸렌디옥시를 형성하며 :

R³는 수소, C₁∼₈알킬, C₂∼₆알케닐 C₃∼₇시클로알킬, C₅∼₇시클로알케닐 또는(식중, R⁷은 수소, C₁∼₈알킬, C₁∼₈알콕시, C₁∼₃알킬티오, 클로로, 브로모, 플루오로, 클로로메틸, 트리클로로메틸, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 트리클로로메톡시, 디플루오로메톡시, 페녹시, 벤질옥시, 히드록시, 트리메틸실릴옥시, 디페닐 - t - 부틸실릴옥시 또는 히드록시메틸) ; 또는 1 개의(식중, R⁷은 상기 정의한 바와 같음) 및 0, 1 또는 2 개의 C₁∼₃알킬로 치환된 C₁∼₃알킬이고 ;

Y 는 -CH₂-, -CH₂CH₂-, -CH=CH-, -CH₂-CH=CH-, -CH=CH-CH₂-, -C(CH₃)=CH- 또는 -CH=C(CH₃)- 이며 ;

Z 는 -Q-CH₂-W-CH₂-CO₂R¹²,

( 식중, Q 는 -C(0)-, -C(OR¹³)₂- 또는 -CH(OH)-,

W 는 -C(0), -C(OR¹³)₂- 또는 -C(R¹¹)(OH)-,

R¹¹은 수소 또는 C₁∼₃알킬,

R¹²는 수소, R¹⁴(R¹⁴는 화학적 또는 생리적으로 가수분해 가능한 알킬 에스테르 성분의 알킬, NHR²³R²⁴R²⁵(식중 R²³, R²⁴및 R²⁵는 각각 수소 또는 C₁∼₄알킬), 나트륨, 칼륨 또는 1/2 칼슘),

각 R¹³은 각각 1차나 2차 C₁∼₆알킬, 또는 2개의 R¹³가 함께 -(CH₂)₂- 또는 -(CH₂)₃- 를 생성하며,

서로 독립적인 각각의 R¹⁵및 R¹⁶은 수소원자나 C₁∼₃알킬, 또는 R¹⁵및 R¹⁶이 함께 -(CH₂)₂- 또는 -(CH₂)₃- 를 생성한다.
제 1 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 일반식 (Ia) 의 화합물 :

(식중, 서로 독립적인 각각의 R^4a, R^5a및 R^6a는 수소, C_{1 ∼ 6}알킬, C_{3 ∼ 7}시클로알킬, C_{1 ∼ 3}알콕시, n - 부톡시, i - 부톡시, sec - 부톡시, R²⁶R²⁷N- (상기에서 서로 독립적인 R²⁶및 R²⁷은 수소 또는 C_{1 ∼ 3}알킬), 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 디플루오로메톡시, 플루오로, 클로로, 브로모, 페닐, 페녹시, 벤질옥시, 히드록시, 트리메틸실릴옥시, 디페닐 - t - 부틸실릴옥시, 히드록시메틸 또는 O(CH₂)mOR²⁸(상기에서 R²⁸은 수소 또는 C_{1 ∼ 3}알킬이며, m 은 1,2 또는 3 이다) ; 또는 R^4a및 R^5a가 함께 -CH=CH-CH=CH- 를 형성하거나 ; R^4a및 R^5a가 서로 0 - 위치일 경우 -OC(R²⁹)(R³⁰)O- (상기에서 서로 독립적인 R²⁹및 R³⁰은 각각 수소 또는 C_{1 ∼ 3}알킬이다) 를 형성하며 ;

R¹, R², R³, Y 및 Z 는 일반식 (I) 과 관련하여 정의된 바와 같다.)
제 1 항에 있어서, 상기 화합물이 하기 일반식 (Ib) 의 화합물 :

[ 식중, R^4b는 수소, C_{1 ∼ 8}알킬, C_{1 ∼ 6}알콕시, C_{3 ∼ 7}시클로알킬, C_{2 ∼ 6}알케닐,α- 또는β- 나프틸, 2 -, 3 - 또는 4- 피리딜, 2 - 또는 3 - 티에닐, 2 - 또는 3 - 푸릴, 플루오로, 클로로, 브로모,(식중, 서로 독립적인 R^6b, R^7b및 R^8b는 각각 수소, C_{1 ∼ 8}알킬, C_{1 ∼ 8}알콕시, C_{1 ∼ 3}알킬티오, 클로로, 브로모, 플루오로, -NR³¹R³²(상기에서 서로 독립적인 R³¹및 R³²각각은 C_{1 ∼ 3}알킬이다), 클로로메틸, 트리클로로메틸, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 트리클로로메톡시, 디플루오로메톡시, 페녹시, 벤질옥시, 히드록시, 트리메틸실릴옥시, 디페닐 - t - 부틸실릴옥시, 히드록시메틸 또는 -O(CH₂)_nOR³³(상기에서 R³³는 수소나 C_{1 ∼ 3}알킬이고, n 은 1,2 또는 3 이다) 이거나,

R^8b가 수소일경우, R⁶및 R^7b는 서로 0 - 위치일때 -OC(R³⁴)(R³⁵)O- (서로 독립적인 R³⁴및 R³⁵는 각각 수소나 C_{1 ∼ 3}알킬기이다) 를 형성하거나,

R^7b및 R^8b가 동시에 수소일 경우, R^6b는(식중, R³⁶은 수소, C_{1 ∼ 4}알킬, C_{1 ∼ 3}알콕시, 트리플루오로메틸, 클로로, 브로모 또는 플루오로이다), 페닐기가 C_{1 ∼ 4}알킬, C_{1 ∼ 3}알콕시, 플루오르, 염소 또는 브롬으로 치환될 수 있는 페닐 - C_{2 ∼ 3}알케닐, 또는 C_{1 ∼ 3}알콕시, 나프틸 및(식중, R^b, R^b및 R^8b는 상기 정의한 바와 같다.) 로 부터 선택된 하나에 의해 치환된 C_{1 ∼ 3}알킬 및 0, 1 또는 2 개의 C_{1 ∼ 8}알킬이다 ;

R^5b는 피라졸로피리딘 고리의 1 - 또는 2 - 위치의 질소원자에 결합되어 있으며, 상기 R^5b는 수소, C_{1 ∼ 8}알킬, 1 ∼ 3 개의 플루오르 원자로 치환된 C_{1 ∼ 3}알킬, C_{3 ∼ 7}시클로알킬,α- 또는β- 나프틸, 2 -, 3 -, 또는 4 - 피리딜, 2 - 또는 3 - 티에닐, 2 - 또는 3 - 푸릴 또는

(식중, R^6b, R^7b및 R^8b는 상기 정의한 바와 같다) ; 또는 C_{1 ∼ 3}알콕시, 히드록시, 나프틸 및

(식중, R^6b, R^7b및 R^8b는 상기정의한 바와 같다) 로부터 선택된 하나에 의해 치환된 C_{1 ∼ 3}알킬 및 0, 1 또는 2 개의 C_{1 ∼ 3}알킬 ; 및 R¹, R², R³, Y 및 Z 는 일반식 (I) 과 관련하여 정의된 바와 같다. ]
제 1 항에 있어서, 상기 화합물이 일반식 (Ic) 의 화합물 :

[ 식중, 서로 독립적인 R^4c및 R^5c는 각각 수소, C_{1 ∼ 8}알킬, C_{2 ∼ 6}알케닐, C_3∼7시클로알킬, C_1∼6알콕시, 플루오로, 클로로, 브로모,(식중, 서로 독립적인 R^6c, R^7c및 R^8c는 각각 수소, C_1∼4알킬, C_1∼3알콕시, C_3∼7시클로알킬, 트리플루오로메틸, 플루오로, 클로로 및 브로모이다 ), 2 -, 3 - 또는 4 - 피리딜, 2 - 또는 5 - 피리미딜, 2 - 또는 3 - 티에닐, 2 - 또는 3 - 푸릴,(식중 R^6c는 상기 정의한 바와같다), -NR³⁷R³⁸( 식중, 서로 독립적인 R³⁷및 R³⁸은 각각 수소, C_1∼4알킬,( 식중, j 는 1,2 또는 3 이며, R^6c는 상기 정의한 바와 같다 ), 또는 R³⁷및 R³⁸은 함께 -(CH₂)k- (식중, k 는 3,4 또는 5 )을 형성한다 ),( 식중 R^6c는 상기 정의한 바와 같다 ) 및 0,1 또는 2 개의 C_{1 ∼ 3}알킬로 치환된 C_{1 ∼ 3}알킬, 또는α- 나β- 나프틸 ; 또는 R^4c및 R^5c는 함께 C_{1 ∼ 4}알킬, C_{3 ∼ 7}시클로알킬, 플루오로, 클로로 및 브로모로 부터 선택된 0 ∼ 3 가지, 및(식중, R^6c는 상기 정의한 바와 같다) 또는 -(CHR³⁹)_p-A-(CHR⁴⁰)_q- (식중, p 및 q 는 각각 0, 1, 2 또는 3 이고, A 는 -C(R⁴¹)=C(R⁴²)- (식중, R⁴¹및 R⁴²는 각각 수소나 C_{1 ∼ 3}알킬), -O-, -S- 또는 -N(R⁴³)- (식중, R⁴³은 수소, C_{1 ∼ 4}알킬 또는(식중, R^6c및 j 는 상기 정의한 바와 같다) 이다) 이고, 서로 독립적인 R³⁹및 R⁴⁰은 각각 수소나 C_{1 ∼ 4}알킬이다) 로 부터 선택된 0 또는 1 가지로 치환된 C_{2 ∼ 6}알킬렌, 또는 -CH=CH-CH=CH- 를 형성하며 ;

R¹, R², R³, Y 및 Z 는 일반식 (I) 과 관련하여 정의된 것과 같다.
제 2 항의 일반식 (Ia)의 화합물에서,

R³는 수소, 메틸, 에틸, n - 프로필, i - 프로필, n - 부틸, i - 부틸, sec - 부틸, t - 부틸, n - 펜틸, i - 펜틸, 1,2 - 디메틸펜틸, n - 헥실, n - 헵틸, n - 옥틸, 비닐, n - 프로페닐, i - 프로페닐, 1 - 메틸 - 1 - 프로페닐, 2 - 메틸 - 1 - 프로페닐, 1,2 - 디메틸 - 1 - 프로페닐, c - 프로필, c - 부틸, c - 헥실, 1 - 메틸시클로프로필, 2 - 메틸시클로프로필, 페닐, 2 - 메틸페닐, 3 - 메틸페닐, 4 - 메틸페닐, 2 - 클로로페닐, 3 - 클로로페닐, 4 - 클로로페닐, 2 - 메톡시페닐, 3 - 메톡시페닐, 4 - 메톡시페닐, 3,4 - 디메틸페닐, 3,4 - 디클로로페닐, 3 - 트리플루오로메틸페닐, 벤질, 4 - 클로로벤질, 4 - 메틸벤질, 4 - 메톡시벤질, 2 - 펜에틸 또는 1 - 메틸벤질이고 ;

R^5a및 R^6a가 동시에 수소인 경우, R^4a는 수소, 5 - 플루오로, 6 - 플루오로, 7 - 플루오로, 8 - 플루오로, 5 - 클로로, 6 - 클로로, 7 - 클로로, 8 - 클로로, 5 - 브로모, 6 - 브로모, 7 - 브로모, 8 - 브로모, 5 - 메틸, 6 - 메틸, 7 - 메틸, 8 - 메틸, 5 - 메톡시, 6 - 메톡시, 7 - 메톡시, 8 - 메톡시, 5 - 트리플루오로메틸, 6 - 트리플루오로메틸, 7 - 트리플루오로메틸, 8 - 트리플루오로메틸, 6 - 트리플루오로메틸, 7 - 트리플루오로메틸, 8 - 트리플루오로메틸, 6 - 트리플루오로메틸, 7 - 트리플루오로메틸, 8 - 트리플루오로메틸, 6 - 트리플루오로메톡시, 6 - 디플루오로메톡시, 8 - 히드록시에틸, 5 - 히드록시, 6 - 히드록시, 7 - 히드록시, 8 - 히드록시, 6 - 에틸, 6 - n -부틸 또는 7 - 디메틸아미노이거나 ;

R^6a가 수소일 경우, R^4a및 R^5a는 함께 6 - 클로로 - 8 - 메틸, 6 - 브로모 - 7 - 메톡시, 6 - 메틸 - 7 - 클로로, 6 - 클로로 - 8 - 히드록시, 5 - 메틸 - 2 - 히드록시, 6 - 메톡시 - 7 - 클로로, 6 - 클로로 - 7 - 메톡시, 6 - 히드록시 - 7 - 클로로, 6 - 클로로 - 7 - 히드록시, 6 - 클로로 - 8 - 브로모, 5 - 클로로 - 6 - 히드록시, 6 - 브로모 - 8 - 클로로, 6 - 브로모 - 8 - 히드록시, 5 - 메틸 - 8 - 클로로, 7 - 히드록시 - 8 - 클로로, 6 - 브로모 - 8 - 히드록시, 6 - 메톡시 - 7 - 메틸, 6 - 클로로 - 8 - 브로모, 6 - 메틸 - 8 - 브로모, 6,7 - 디플루오로, 6,8 - 디플루오로, 6,7 - 메틸렌디옥시, 6,8 - 디클로로, 5,8 - 디메틸, 6,8 - 디메틸, 6,7 - 디메톡시, 6,7 - 디에톡시, 6,7 - 디브로모 또는 6,8 - 디브로모를 나타내거나 ;

R^4a, R^5a및 R^6a는 함께 5,7 - 디메톡시 - 8 - 히드록시, 5,8 - 디클로로 - 6 - 히드록시, 6,7,8 - 트리메톡시, 6,7,8 - 트리메틸, 6,7,8 - 트리클로로, 5 - 플루오로 - 6,8 - 디브로모 또는 5 - 클로로 - 6,8 - 디브로모인 화합물.
제 3 항의 일반식 (Ib)의 화합물에서,

R³는 수소, 메틸, 에틸, n - 프로필, i - 프로필, n - 부틸, i - 부틸, sec - 부틸, t - 부틸, n - 펜틸, i - 펜틸, 1,2 - 디메틸펜틸, n - 헥실, n - 헵틸, n - 옥틸, 비닐, n - 프로페닐, i - 프로페닐, 1 - 메틸 - 1 - 프로페닐, 2 - 메틸 - 1 - 프로페닐, 1,2 - 디메틸 - 1 - 프로페닐, c - 프로필, c - 부틸, c - 헥실, 1 - 메틸시클로프로필, 2 - 메틸시클로프로필, 페닐, 2 - 메틸페닐, 3 - 메틸페닐, 4 - 메틸페닐, 2 - 클로로페닐, 3 - 클로로페닐, 4 - 클로로페닐, 2 - 메톡시페닐, 3 - 메톡시페닐, 4 - 메톡시페닐, 3,4 - 디메틸페닐, 3,4 - 디클로로페닐, 3 - 트리플루오로메틸페닐, 벤질, 4 - 클로로벤질, 4 - 메틸벤질, 4 - 메톡시벤질, 2 - 펜에틸 또는 1 - 메틸벤질이고 ;

R^4b는 수소, 메틸, 에틸, n - 프로필, i - 프로필, n - 부틸, i - 부틸, sec - 부틸, t - 부틸, 시클로프로필, 시클로헥실, 페닐, 2 -, 3 - 또는 4 - 플루오로페닐, 2 -, 3 - 또는 4 - 클로로페닐, 2 -, 3 - 또는 4 - 브로모페닐, 2 -, 3 - 또는 4 - 톨릴, 2 -, 3 - 또는 4 - 메톡시페닐, 2 -, 3 - 또는 4 - 트리플루오로메틸페닐, 2 -, 3 - 또는 4 - 클로로메틸페닐, 3 또는 4 - 에톡시페닐, 4 - (2 - 메틸부틸) 페닐, 4 - n - 헵틸페닐, 4 - n - 옥틸페닐, 4 - n - 펜틸페닐, 4 - n - 헥실페닐, 4 - n - 프로필페닐, 4 - n - 부틸페닐, 4 - t - 부틸페닐, 4 - n - 부톡시페닐, 4 - n - 펜틸옥시페닐, 4 - n - 헥실옥시페닐, 4 - n - 헵틸옥시페닐, 4 - n - 옥틸옥시페닐, 4 - 페녹시페닐, 4 - 비페닐, 4 - 트리클로로메톡시페닐, 2,4 - 디플루오로페닐, 2,6 - 디플루오로페닐, 2,3 - 디플루오로페닐, 3,5 - 디플루오로페닐, 2,5 - 디플루오로페닐, 3,4 - 디플루오로페닐, 2,4 - 디클로로페닐, 2,6 - 디클로로페닐, 2,3 - 디클로로페닐, 2,5 - 디클로로페닐, 3,5 - 디클로로페닐, 3,4 - 디클로로페닐, 2,3 - 디메틸페닐, 2,5 - 디메틸페닐, 2,6 - 디메틸페닐, 3,4 - 디메틸페닐, 2,5 - 디메톡시페닐, 2,6 - 디메톡시페닐, 2,4 - 디메톡시페닐, 3,4 - 디메톡시페닐, 3,5 - 디메톡시페닐, 3,5 - 비스 (트리플루오로메틸) 페닐, 3,4 - 메틸렌디옥시페닐, 2,4,6 - 트리메톡시페닐, 3,4,5 - 트리메틸페닐 또는 2,4,6 - 트리이소프로필페닐이며 ;

R^5b는 피라졸로피리딘 고리의 1 - 위치에 있는 질소원자에 결합된 기이며, 메틸, 에틸, n - 프로필, i - 프로필, n - 부틸, sec - 부틸, t - 부틸, 2,2,2 - 트리플루오로에틸, 2 - 히드록시에틸, 시클로헥실, 벤질, 2 - 클로로벤질, 2 - 히드록시벤질, 3 - 트리플루오로메틸벤질, 2 - 페닐에틸, 페닐, 2 -, 3 - 또는 4 - 클로로페닐, 2 -, 3 - 또는 4 - 브로모페닐, 2 -, 3 - 또는 4 - 플루오로페닐, 2 -, 3 - 또는 4 - 톨릴, 2 -, 3 - 또는 4 - 트리플루오로메틸페닐, 3 - 또는 4 - 메톡시페닐, 2 - 히드록시페닐, 4 - 이소프로필페닐, 4 - t - 부틸페닐, 4 - 트리플루오로메톡시페닐, 2,3 - 디클로로페닐, 2,4 - 디클로로페닐, 2,5 - 디클로로페닐, 2,6 - 디클로로페닐, 3,4 - 디클로로페닐, 3,5 - 디클로로페닐, 2,4,6 - 트리클로로페닐, 2,3,4 - 트리클로로페닐, 2,4 - 디플루오로페닐, 3,5 - 비스 (트리플루오로메틸) 페닐, 3 - 클로로 - 4 - 톨릴, 3 - 클로로 - 6 - 톨릴, 4 - 클로로 - 2 - 톨릴, 2 - 클로로 - 6 - 톨릴, 2 - 클로로 - 6 - 플루오로페닐, 2 - 클로로 - 5 - 트리플루오로메틸페닐, 3 - 클로로 - 4 - 플루오로페닐, 4 - 브로모 - 3 - 클로로페닐, 2 - 클로로 - 4 - 트리플루오로메틸페닐, 3 - 플루오로 - 6 - 톨릴,α- 나프틸, 2 - 피리딜, 3 - 메틸 - 5 - 트리플루오로메틸 - 2 - 피리딜, 4 - 피리딜 또는 2,6 - 디클로로 - 4 - 피리딜인 화합물.
제 4 항의 일반식 (Ic)의 화합물에서,

R³는 수소, 메틸, 에틸, n - 프로필, i - 프로필, n - 부틸, i - 부틸, sec - 부틸, t - 부틸, n - 펜틸, i - 펜틸, 1,2 - 디메틸펜틸, n - 헥실, n - 헵틸, n - 옥틸, 비닐, n - 프로페닐, i - 프로페닐, 1 - 메틸 - 1 - 프로페닐, 2 - 메틸 - 1 - 프로페닐, 1,2 - 디메틸 - 1 - 프로페닐, c - 프로필, c - 부틸, c - 헥실, 1 - 메틸시클로프로필, 2 - 메틸시클로프로필, 페닐, 2 - 메틸페닐, 3 - 메틸페닐, 4 - 메틸페닐, 2 - 클로로페닐, 3 - 클로로페닐, 4 - 클로로페닐, 2 - 메톡시페닐, 3 - 메톡시페닐, 4 - 메톡시페닐, 3,4 - 디메틸페닐, 3,4 - 디클로로페닐, 3 - 트리플루오로메틸페닐, 벤질, 4 - 클로로벤질, 4 - 메틸벤질, 4 - 메톡시벤질, 2 - 펜에틸 또는 1 - 메틸벤질이고 ;

서로 독립적인 R^4c및 R^5c는 각각 수소, 메틸, 에틸, n - 프로필, i - 프로필, n - 부틸, i - 부틸, sec - 부틸, t - 부틸, n - 펜틸, 1,2 - 디메틸펜틸, n - 헥실, n - 헵틸, n - 옥틸, 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 2 - 메틸시클로헥실, 시클로헵틸, 시클로프로필메틸, 비닐, 1 - 메틸비닐, 1 - 프로페닐, 알릴, 1 - 메틸 - 1 - 프로페닐, 1 - 메틸 - 2 - 프로페닐, 2 - 메틸 - 2 - 프로페닐, 1 - 에틸 - 1 - 프로페닐, 1 - 에틸 - 2 - 프로페닐, 1 - 메틸 - 1 - 부테닐, 1 - 메틸 - 2 - 부테닐, 2 - 메틸 - 1 - 부테닐, 1 - i - 프로필비닐, 1 - 메틸 - 1 - 펜테닐 또는 페닐이거나 ;

R^4c및 R^5c는 함께 에틸렌, 트리메틸렌, 테트라메틸렌, 펜타메틸렌, 메틸테트라메틸렌, 클로로테트라메틸렌 또는 페닐테트라메틸렌인 화합물.
제 1 항에 있어서, 상기 화합물이 하기의 화합물 :

(E) - 3,5 - 디히드록시 - 7 - [ 4'- (4"- 플루오로페닐) - 2'- 시클로프로필 - 퀴놀린 - 3'- 일 ] 헵트 - 6 - 엔산, 5 - 위치에서 히드록시와 축합하여 락톤을 형성하는 상기 카르복실산을 갖는 화합물, 상기 카르복실산의 나트륨염이나 칼슘염, 또는 상기 카르복실산의 C_{1 ∼ 3}알킬에스테르 ;

(E) - 3,5 - 디히드록시 - 7 - [ 6'- 시클로프로필 - 4' - (4" - 플루오로페닐) - 1',3'- 디메틸피라졸로 [3,4-b] 피리딘 - 5'- 일 ] 헵트 - 6 - 엔산, 5 - 위치에서 히드록시와 축합하여 락톤을 형성하는 상기 카르복실산을 갖는 화합물, 상기 카르복실산의 나트륨염이나 칼슘염, 또는 상기 카르복실산의 C_{1 ∼ 3}알킬에스테르 ;

(E) - 3,5 - 디히드록시 - 7 - [ 6 - 시클로프로필 - 3' - 에틸 - 4'- (4"- 플루오로페닐) - 2'- 메틸티에노 [2,3-b] 피리딘 - 5'- 일 ] 헵트 - 6 - 엔산, 5 - 위치에서 히드록시와 축합하여 락톤을 형성하는 상기 카르복실산을 갖는 화합물, 상기 카르복실산의 나트륨염이나 칼슘염, 또는 상기 카르복실산의 C_{1 ∼ 3}알킬에스테르인 화합물.