JPWO2018047929A1 - 血液浄化用の材料 - Google Patents
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Abstract
Description
(1)
基材にアミド基とアミノ基とを有するリガンドが結合した水不溶性材料を含み、上記アミド基の含量は、上記水不溶性材料の乾燥重量1g当たり3.0〜7.0mmolであり、上記アミノ基の含量は、上記水不溶性材料の乾燥重量1g当たり1.0〜7.0mmolである、血液浄化用の材料。
(2)
上記リガンドが、以下の一般式(I)で示される構造で上記基材に結合している、(1)記載の血液浄化用の材料。
(3)
上記リガンドは、フェニル基を有し、以下の一般式(II)で示される構造で上記基材に結合しており、上記フェニル基の含量は、上記水不溶性材料の乾燥重量1g当たり0mmol超〜7.0mmolである、(1)又は(2)記載の血液浄化用の材料。
(4)
上記基材は、ポリスチレン若しくはポリスルホン又はそれらの誘導体である、(1)〜(3)のいずれか一項記載の血液浄化用の材料。
(5)
繊維形状又は粒子形状である、(1)〜(4)のいずれか一項記載の血液浄化用の材料。
(6)
編地形状であり、開孔率が0.1〜30.0%である、(1)〜(5)のいずれか一項記載の血液浄化用の材料。
(7)
サイトカイン及び活性化白血球−活性化血小板複合体の除去用である、(1)〜(6)のいずれか一項記載の血液浄化用の材料。
(8)
(1)〜(7)のいずれか一項記載の血液浄化用の材料を備える、血液浄化器。
2. 画像編集ソフト(例:アドビシステムズ株式会社“Photoshop Elements14”)を立ち上げ、以下の操作を順に行う。
(1)光学顕微鏡で撮影した画像ファイルを開く。
(2)開孔率を求めたい部分を512ピクセル×512ピクセル(262144ピクセル)で切り取る。
(3)画像調整のライティングにより、画像の開孔部分と非開孔部分である編地形状の血液浄化用の材料部分を補正する(シャドウ・ハイライトの‘シャドウを明るく’と‘中間調のコントラスト’を100%にする→明るさ・コントラストの‘コントラスト’を100、‘明るさ’を10にする)。
(4)開孔部分や編地形状の血液浄化用の材料部分(非開孔部分)の一部が補正できていない場合、描画のブラシツールにより開孔部分は黒、編地形状の血液浄化用の材料部分は白で塗りつぶす。
(5)フィルターの色調補正の2階調化により、二値化する。数値は2階調前の画像と比較しながら行う。黒い部分は開孔部分、白い部分は編地形状の血液浄化用の材料部分(非開孔部分)とする。
(6)ウィンドウのヒストグラムを開き、全体における黒い部分の比率を開孔率(%)とする。
特許文献1(特許第4591974号)の明細書に記載の16島海島複合繊維(以下、繊維A)を、以下の成分を用いて得た。
島成分:ポリプロピレン
海成分(重量比率):ポリスチレン:ポリプロピレン=92:8
複合比率(重量比率):島成分:海成分=50:50
総繊度:160dtex
単糸径:20μm
特許文献3(特許第5293599号)の明細書に記載の32島の海島複合繊維であって、当該島がさらに芯鞘複合である繊維(以下、繊維B)を、以下の成分を用いて、紡糸速度800m/分の製糸条件で得た。
島の芯成分:ポリプロピレン
島の鞘成分:ポリスチレン90wt%、ポリプロピレン10wt%の比率で混練したもの
海成分;「エチレンテレフタレート単位を主たる繰り返し単位とし、共重合成分として5−ナトリウムスルホイソフタル酸3wt%含む共重合ポリエステル」(以下、PETIFA)
複合比率(重量比率);島の芯成分:島の鞘成分:海成分=41.5:33.5:25
総繊度:200dtex
繊維Aを用いて、特許文献1の明細書の記載に従い、乾燥重量が0.0081g/cm2、嵩密度が0.37g/cm3の筒編み編地A(以下、編地A)を作製した。
繊維Bを筒編み機(機種名:丸編み機 MR−1、丸善産業株式会社)により筒編み状にし、さらに95℃、3wt%の水酸化ナトリウム水溶液に8時間含浸することで、海成分のPETIFAを加水分解した。次に中性になるまで水洗し、続いて乾燥することで、芯鞘繊維の単糸径が4.5μmで、乾燥重量が0.0046g/cm2、嵩密度が0.4g/cm3の筒編み編地B(以下、編地B)を作製した。
繊維Aを用いて、筒編み機(機種名:丸編み機 MR−1、丸善産業株式会社)の度目調整目盛りを調整し、1cm2当たりの重量が0.0210g/cm2、嵩密度が0.51g/cm3の筒編み編地C(以下、編地C)を作製した。
繊維Aを用いて、筒編み機(機種名:丸編み機 MR−1、丸善産業株式会社)の度目調整目盛りを調整し、1cm2当たりの重量が0.0153g/cm2、嵩密度が0.42g/cm3の筒編み編地D(以下、編地D)を作製した。
繊維Aを用いて、筒編み機(機種名:丸編み機 MR−1、丸善産業株式会社)の度目調整目盛りを調整し、1cm2当たりの重量が0.0063g/cm2、嵩密度が0.28g/cm3の筒編み編地E(以下、編地E)を作製した。
繊維Aを用いて、筒編み機(機種名:丸編み機 MR−1、丸善産業株式会社)の度目調整目盛りを調整し、1cm2当たりの重量が0.0039g/cm2、嵩密度が0.22g/cm3の筒編み編地F(以下、編地F)を作製した。
特許文献1(特許第4591974号)の明細書の記載に従い、編地A50gを、50gのN−メチロール−α−クロロアセトアミド(以下、NMCA)、400gのニトロベンゼン、400gの98重量%硫酸及び0.85gのパラホルムアルデヒド(以下、PFA)からなる混合溶液中に浸し、4℃で1時間反応させた。反応後の繊維を0℃の氷水5L中に浸して反応を停止させた後、水で洗浄し、さらに繊維に付着しているニトロベンゼンをメタノールで抽出除去することで、クロロアセトアミドメチル化架橋ポリスチレン編地1(以下、AMPSt編地1)を得た。
血液浄化用の材料1に含まれる水不溶性材料1のアミノ基の含量は、当該水不溶性材料1中のアミノ基量を、酸塩基逆滴定することより決定した。200mLナスフラスコに血液浄化用の材料1を5.0g、100mLのトルエンを添加し、150℃で24時間還流し、補強材として添加されているポリプロピレンを除去した。還流後の溶液を、100℃に加温した2Lのトルエンにすみやかに添加、洗浄し、不溶成分のみ濾紙でそのままろ別、メタノールで洗浄して乾燥機にて80℃で48時間静置することで水不溶性材料1を得た。次に、ポリプロピレン製容器に対し、水不溶性材料1を1.0g、6M水酸化ナトリウム水溶液50mLを添加して30分攪拌し、濾紙を用いて水不溶性材料1をろ別した。次にイオン交換水50mLにろ別した水不溶性材料1を添加して30分間攪拌し、濾紙を用いてろ別した。水不溶性材料1を添加したイオン交換水のpHが7になるまでイオン交換水に添加、ろ別を繰り返すことで脱塩後の水不溶性材料1を得た。脱塩後の水不溶性材料1を80℃常圧条件で48時間静置した後、ポリプロピレン製容器に当該水不溶性材料1を1.0gと0.1M塩酸を30mL添加し、10分間攪拌した。攪拌後、溶液のみを5mL抜き取って、ポリプロピレン製容器に移した。次に、得られた溶液に対して、0.1Mの水酸化ナトリウム水溶液を0.1mL滴下した。滴下後10分間攪拌し、溶液のpHを測定した。滴下後10分間の攪拌、pHの測定を同様に100回繰り返した。溶液のpHが8.5を越えた際の水酸化ナトリウム水溶液滴下量を1g当たりの滴定量とした。1g当たりの滴定量と以下の式1を用いて、水不溶性材料1の乾燥重量1g当たりのアミノ基の含量を算出した。
血液浄化用の材料1に含まれる水不溶性材料1のアミド基の含量は、当該水不溶性材料1中のアミド基を加水分解することで生成したアミノ基量を、酸塩基逆滴定により測定することで決定した。水不溶性材料1のアミノ基の含量測定と同様の操作で、血液浄化用の材料1から水不溶性材料1を得た。次に、当該水不溶性材料1を1.0gと6Mの塩酸100mLを200mLナスフラスコに添加し、24時間130℃で還流した。還流後、濾紙でろ別することで水不溶性材料1を回収し、分解後の水不溶性材料1を得た。次に、ポリプロピレン製容器に対し、得られた分解後の水不溶性材料1を全量、6M水酸化ナトリウム水溶液50mLを添加して30分攪拌し、濾紙を用いてろ別した。次にイオン交換水50mLにろ別した分解後の水不溶性材料1を添加して30分間攪拌し、濾紙を用いてろ別した。当該水不溶性材料1を添加したイオン交換水のpHが7になるまでイオン交換水に添加、ろ別を繰り返し、80℃常圧条件で48時間静置した。次に、ポリプロピレン製容器に当該水不溶性材料1を全量と0.1M塩酸を60mL添加し、10分間攪拌した。攪拌後、溶液のみを5mL抜き取って、ポリプロピレン製容器に移した。次に、得られた溶液に対して、0.1Mの水酸化ナトリウム水溶液を0.1mL滴下した。滴下後10分間攪拌し、溶液のpHを測定した。滴下後10分間の攪拌、pHの測定を同様に100回繰り返した。溶液のpHが8.5を越えた際の水酸化ナトリウム水溶液滴下量を1g当たりの滴定量とした。1g当たりの滴定量と以下の式2を用いて、水不溶性材料1の乾燥重量1g当たりのアミド基の含量を算出した。
特許文献2(特許第5824873号)の明細書の記載に従い、編地A50gを50gのNMCA、400gのニトロベンゼン、400gの98重量%硫酸、0.85gのPFAの混合溶液と20℃で1時間反応させた。そして、繊維をニトロベンゼンで洗浄し、水中に入れて反応を停止させた。その後、繊維を温水で再び洗浄することによって、クロロアセトアミドメチル化架橋ポリスチレン編地2(以下、AMPSt編地2)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料2に含まれる水不溶性材料2のアミノ基の含量を測定した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料2に含まれる水不溶性材料2のアミド基の含量を測定した。結果を表5に示す。
NMCA2.3gをニトロベンゼン31gと98重量%硫酸31gの混合溶液に添加、NMCAが溶解するまで10℃で攪拌して、NMCA溶液とした。次に、ニトロベンゼン2.0g、98重量%硫酸2.0gにPFA0.2gを添加し、PFAが溶解するまで20℃で攪拌し、PFA溶液とした。PFA溶液4.2gを5℃に冷却し、NMCA溶液64.3gに混合、5分間攪拌し、編地B1gを添加して2時間含浸した。含浸後の編地Bを0℃のニトロベンゼン200mL中に浸して反応を停止させた後、当該編地に付着しているニトロベンゼンをメタノールで抽出除去した。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料3に含まれる水不溶性材料3のアミノ基の含量を測定した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料3に含まれる水不溶性材料3のアミド基の含量を測定した。結果を表5に示す。
添加するTEPAの量を0.25gに変更した以外は血液浄化用の材料3と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地4(以下、血液浄化用の材料4)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料4に含まれる水不溶性材料4のアミノ基の含量を測定した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料4に含まれる水不溶性材料4のアミド基の含量を測定した。結果を表5に示す。
添加するTEPAの量を0.82gに変更した以外は血液浄化用の材料3と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地5(以下、血液浄化用の材料5)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料5に含まれる水不溶性材料5のアミノ基の含量を測定した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料5に含まれる水不溶性材料5のアミド基の含量を測定した。結果を表5に示す。
添加するTEPAの量を3.28gに変更した以外は血液浄化用の材料3と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地6(以下、血液浄化用の材料6)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料6に含まれる水不溶性材料6のアミノ基の含量を測定した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料6に含まれる水不溶性材料6のアミド基の含量を測定した。結果を表5に示す。
添加するTEPAの量を8.2gに変更した以外は血液浄化用の材料3と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地7(以下、血液浄化用の材料7)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料7に含まれる水不溶性材料7のアミノ基の含量を測定した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料7に含まれる水不溶性材料7のアミド基の含量を測定した。結果を表5に示す。
添加するNMCAの量を4.6gに変更した以外は血液浄化用の材料3と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地8(以下、血液浄化用の材料8)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料8に含まれる水不溶性材料8のアミノ基の含量を測定した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料8に含まれる水不溶性材料8のアミド基の含量を測定した。結果を表5に示す。
添加するTEPAの量を0.25gに変更した以外は血液浄化用の材料8と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地9(以下、血液浄化用の材料9)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料9に含まれる水不溶性材料9のアミノ基の含量を測定した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料9に含まれる水不溶性材料9のアミド基の含量を測定した。結果を表5に示す。
添加するTEPAの量を0.82gに変更した以外は血液浄化用の材料8と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地10(以下、血液浄化用の材料10)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料10に含まれる水不溶性材料10のアミノ基の含量を測定した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料10に含まれる水不溶性材料10のアミド基の含量を測定した。結果を表5に示す。
添加するTEPAの量を3.3gに変更した以外は血液浄化用の材料8と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地11(以下、血液浄化用の材料11)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料11に含まれる水不溶性材料11のアミノ基の含量を測定した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料11に含まれる水不溶性材料11のアミド基の含量を測定した。結果を表5に示す。
添加するTEPAの量を8.2gに変更した以外は血液浄化用の材料8と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地12(以下、血液浄化用の材料12)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料12に含まれる水不溶性材料12のアミノ基の含量を測定した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料12に含まれる水不溶性材料12のアミド基の含量を測定した。結果を表5に示す。
編地BをNMCA液とPFA液の混合溶液に含浸する時間を4時間に変更し、添加するTEPAの量を0.08gに変更した以外は血液浄化用の材料8と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地13(以下、血液浄化用の材料13)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料13に含まれる水不溶性材料13のアミノ基の含量を測定した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料13に含まれる水不溶性材料13のアミド基の含量を測定した。結果を表5に示す。
添加するTEPAの量を0.12gに変更した以外は血液浄化用の材料13と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地14(以下、血液浄化用の材料14)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料14に含まれる水不溶性材料14のアミノ基の含量を測定した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料14に含まれる水不溶性材料14のアミド基の含量を測定した。結果を表5に示す。
添加するTEPAの量を0.41gに変更した以外は血液浄化用の材料13と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地15(以下、血液浄化用の材料15)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料15に含まれる水不溶性材料15のアミノ基の含量を測定した。結果を表5、表6及び表10に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料15に含まれる水不溶性材料15のアミド基の含量を測定した。結果を表5、表6及び表10に示す。
血液浄化用の材料15に含まれる水不溶性材料15はフェニル基の導入反応を行っていないため0mmol/gであるとみなした。
血液浄化用の材料15の開孔率を、下記の方法に従って算出した。結果を表10に示す。
1. 光学顕微鏡により、倍率10倍で血液浄化用の材料15を撮影した。
2. 画像編集ソフト(例:アドビシステムズ株式会社“Photoshop Elements14”)を立ち上げ、以下の操作を順に行った。
(1)光学顕微鏡で撮影した画像ファイルを開いた。
(2)開孔率を求めたい部分を512ピクセル×512ピクセル(262144ピクセル)で切り取った。
(3)画像調整のライティングにより、画像の開孔部分と血液浄化用の材料15部分を補正した(シャドウ・ハイライトの‘シャドウを明るく’と‘中間調のコントラスト’を100%にした→明るさ・コントラストの‘コントラスト’を100、‘明るさ’を10にした)。
(4)開孔部分や血液浄化用の材料15部分の補正できていない部分は、描画のブラシツールにより開孔部分は黒、血液浄化用の材料15部分は白で塗りつぶした。
(5)フィルターの色調補正の2階調化により、二値化した。数値は2階調前の画像と比較しながら行う。黒い部分は開孔部分、白い部分は血液浄化用の材料15部分とした。
(6)ウィンドウのヒストグラムを開き、全体における黒い部分の比率を開孔率(%)とした。
添加するTEPAの量を0.82gに変更した以外は血液浄化用の材料13と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地16(以下、血液浄化用の材料16)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料16に含まれる水不溶性材料16のアミノ基の含量を測定した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料16に含まれる水不溶性材料16のアミド基の含量を測定した。結果を表5に示す。
添加するTEPAを1.64gに変更した以外は血液浄化用の材料13と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地17(以下、血液浄化用の材料17)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料17に含まれる水不溶性材料17のアミノ基の含量を測定した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料17に含まれる水不溶性材料17のアミド基の含量を測定した。結果を表5に示す。
編地BをNMCA液とPFA液の混合溶液に含浸する時間を24時間に変更し、添加するTEPAの量を0.04gに変更した以外は血液浄化用の材料8と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地18(以下、血液浄化用の材料18)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料18に含まれる水不溶性材料18のアミノ基の含量を測定した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料18に含まれる水不溶性材料18のアミド基の含量を測定した。結果を表5に示す。
添加するTEPAの量を0.12gに変更した以外は血液浄化用の材料18と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地19(以下、血液浄化用の材料19)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料19に含まれる水不溶性材料19のアミノ基の含量を測定した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料19に含まれる水不溶性材料19のアミド基の含量を測定した。結果を表5に示す。
添加するTEPAの量を0.41gに変更した以外は血液浄化用の材料18と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地20(以下、血液浄化用の材料20)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料20に含まれる水不溶性材料20のアミノ基の含量を測定した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料20に含まれる水不溶性材料20のアミド基の含量を測定した。結果を表5に示す。
添加するTEPAの量を0.82gに変更した以外は血液浄化用の材料18と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地21(以下、血液浄化用の材料21)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料21に含まれる水不溶性材料21のアミノ基の含量を測定した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料21に含まれる水不溶性材料21のアミド基の含量を測定した。結果を表5に示す。
添加するTEPAの量を1.64gに変更した以外は血液浄化用の材料18と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地22(以下、血液浄化用の材料22)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料22に含まれる水不溶性材料22のアミノ基の含量を測定した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料22に含まれる水不溶性材料22のアミド基の含量を測定した。結果を表5に示す。
NMCA4.6gをニトロベンゼン31gと98重量%硫酸31gの混合溶液に添加、NMCAが溶解するまで10℃で攪拌して、NMCA溶液とした。次に、ニトロベンゼン2.0g、98重量%硫酸2.0gにPFA0.2gを添加し、PFAが溶解するまで20℃で攪拌し、PFA溶液とした。PFA溶液4.2gを5℃に冷却し、NMCA溶液64.3gに混合、5分間攪拌し、編地B1gを添加して4時間含浸した。含浸後の編地Bを0℃のニトロベンゼン200mL中に浸して反応を停止させた後、当該編地に付着しているニトロベンゼンをメタノールで抽出除去した。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料23に含まれる水不溶性材料23のアミノ基の含量を測定した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料23に含まれる水不溶性材料23のアミド基の含量を測定した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料23に含まれる水不溶性材料23のパラクロロフェニル基の含量は、水不溶性材料23に含まれるリンカーを加水分解し、溶出したパラクロロアニリンを定量することで測定した。以下に詳細を記載する。
パラクロロフェニル基の含量(mmol/g)=加水分解溶液中のパラクロロアニリン濃度(mmol/mL)×加水分解溶液量(4mL)×測定溶液希釈倍率(37倍)/添加した水不溶性材料の乾燥重量(g)・・・式3
添加するTEPAの量を0.24gから0.36g、パラクロロフェニルイソシアネートの量を0.075gから1.5gに変更した以外は血液浄化用の材料23と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地24(以下、血液浄化用の材料24)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料24に含まれる水不溶性材料24のアミノ基の含量を測定した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料24に含まれる水不溶性材料24のアミド基の含量を測定した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料23と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料24に含まれる水不溶性材料24のパラクロロフェニル基の含量を測定した。結果を表6に示す。
添加するパラクロロフェニルイソシアネートをパラクロロベンゾイルクロリドに変更した以外は血液浄化用の材料24と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地25(以下、血液浄化用の材料25)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料25に含まれる水不溶性材料25のアミノ基の含量を測定した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料25に含まれる水不溶性材料25のアミド基の含量を測定した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料25に含まれる水不溶性材料25のパラクロロフェニル基の含量は、水不溶性材料25に含まれるリンカーを加水分解し、溶出したパラクロロ安息香酸を定量することで測定した。以下に詳細を記載する。
パラクロロフェニル基の含量(mmol/g)=クロロホルム濃度(5mM)×(パラクロロ安息香酸由来のピークの積分値/クロロホルム由来のピークの積分値)×パラクロロ安息香酸の芳香環由来プロトン数(4)×ジメチルスルホキシド−d6の液量(1mL)/水不溶性材料25の重量(g)・・・式4
添加するパラクロロフェニルイソシアネートの量を1.5gから0.02gに変更した以外は血液浄化用の材料23と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地26(以下、血液浄化用の材料26)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料26に含まれる水不溶性材料26のアミノ基の含量を測定した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料26に含まれる水不溶性材料26のアミド基の含量を測定した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料23と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料26に含まれる水不溶性材料26のパラクロロフェニル基の含量を測定した。結果を表6に示す。
添加するパラクロロフェニルイソシアネートの量を1.5gから0.1gに変更した以外は血液浄化用の材料23と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地27(以下、血液浄化用の材料27)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料27に含まれる水不溶性材料27のアミノ基の含量を測定した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料27に含まれる水不溶性材料27のアミド基の含量を測定した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料23と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料27に含まれる水不溶性材料27のパラクロロフェニル基の含量を測定した。結果を表6に示す。
添加するパラクロロフェニルイソシアネートの量を1.5gから0.5gに変更した以外は血液浄化用の材料24と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地28(以下、血液浄化用の材料28)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料28に含まれる水不溶性材料28のアミノ基の含量を測定した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料28に含まれる水不溶性材料28のアミド基の含量を測定した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料23と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料28に含まれる水不溶性材料28のパラクロロフェニル基の含量を測定した。結果を表6に示す。
添加するTEPAの量を0.24gから0.56g、パラクロロフェニルイソシアネートの量を0.075gから2.5gに変更した以外は血液浄化用の材料23と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地29(以下、血液浄化用の材料29)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料29に含まれる水不溶性材料29のアミノ基の含量を測定した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料29に含まれる水不溶性材料29のアミド基の含量を測定した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料23と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料29に含まれる水不溶性材料29のパラクロロフェニル基の含量を測定した。結果を表6に示す。
添加するTEPAを6Mアンモニア水溶液0.82mLに変更した以外は血液浄化用の材料13と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地30(以下、血液浄化用の材料30)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料30に含まれる水不溶性材料30のアミノ基の含量を測定した。結果を表7に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料30に含まれる水不溶性材料30のアミド基の含量を測定した。結果を表7に示す。
添加するTEPAをジエチレントリアミン0.44gに変更した以外は血液浄化用の材料13と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地31(以下、血液浄化用の材料31)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料31に含まれる水不溶性材料31のアミノ基の含量を測定した。結果を表7に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料31に含まれる水不溶性材料31のアミド基の含量を測定した。結果を表7に示す。
添加するTEPAをポリエチレンイミン(重量平均分子量600)0.50gに変更した以外は血液浄化用の材料13と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地32(以下、血液浄化用の材料32)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料32に含まれる水不溶性材料32のアミノ基の含量を測定した。結果を表7に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料32に含まれる水不溶性材料32のアミド基の含量を測定した。結果を表7に示す。
用いる編地を編地Aから編地Cに変更した以外は血液浄化用の材料15と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地33(以下、血液浄化用の材料33)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料33に含まれる水不溶性材料33のアミノ基の含量を測定した。結果を表10に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料33に含まれる水不溶性材料33のアミド基の含量を測定した。結果を表10に示す。
血液浄化用の材料15と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料33の開孔率を算出した。結果を表10に示す。
用いる編地を編地Aから編地Dに変更した以外は血液浄化用の材料15と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地34(以下、血液浄化用の材料34)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料34に含まれる水不溶性材料34のアミノ基の含量を測定した。結果を表10に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料34に含まれる水不溶性材料34のアミド基の含量を測定した。結果を表10に示す。
血液浄化用の材料33と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料34の開孔率を算出した。結果を表10に示す。
用いる編地を編地Aから編地Eに変更した以外は血液浄化用の材料15と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地35(以下、血液浄化用の材料35)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料35に含まれる水不溶性材料35のアミノ基の含量を測定した。結果を表10に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料35に含まれる水不溶性材料35のアミド基の含量を測定した。結果を表10に示す。
血液浄化用の材料33と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料35の開孔率を算出した。結果を表10に示す。
用いる編地を編地Aから編地Fに変更した以外は血液浄化用の材料15と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料である編地36(以下、血液浄化用の材料36)を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料36に含まれる水不溶性材料36のアミノ基の含量を測定した。結果を表10に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料36に含まれる水不溶性材料36のアミド基の含量を測定した。結果を表10に示す。
血液浄化用の材料33と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料36の開孔率を算出した。結果を表10に示す。
ニトロベンゼン21mLと98重量%硫酸42mLの混合溶液を5℃に冷却後、5.7gのNMCAを加えて溶解し、これに1Lの冷ニトロベンゼンを加えた後、これに、2gのユーデルポリスルホンP3500(ポリマー重量平均分子量30000)を1Lのニトロベンゼンに溶かした溶液を、よく撹拌しながら加えた。そして、これをさらに5℃で3h撹拌した。その後、反応混合物を大過剰の冷メタノール中に入れ、沈殿物をメタノールでよく洗浄した後、乾燥して、2gのアミドメチル化ポリスルホンを得た。
アミドメチル化ポリスルホン1gを50mLのDMFに溶かした溶液に、単糸径1μm、総繊度97dtexのポリプロピレン繊維からなる、乾燥重量が0.0095g/cm2、嵩密度が0.33g/cm3の編地6gを4時間浸した。その後、遠心脱水し、コーティング編地を得た。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料37に含まれる水不溶性材料37のアミノ基の含量を測定した。結果を表11に示す。
血液浄化用の材料1と同様の操作を行うことで、血液浄化用の材料37に含まれる水不溶性材料37のアミド基の含量を測定した。結果を表11に示す。
血液浄化用の材料9の血液浄化の性能を確認するため、サイトカイン溶液に血液浄化用の材料9を所定時間含浸して取り出し、含浸前後の溶液中のサイトカイン減少量を測定した。以下に測定方法を示す。
血液浄化用の材料1のIL−6吸着率(%)=100×{転倒混和前のIL−6濃度(pg/mL)/転倒混和後のIL−6濃度(pg/mL)}・・・式5
血液浄化用の材料1のIL−8吸着率(%)=100×{転倒混和前のIL−8濃度(pg/mL)/転倒混和後のIL−8濃度(pg/mL)}・・・式6
血液浄化用の材料10について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料11について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料14について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料15について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料16について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料19について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料20について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料21について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料15については、血小板付着率を確認するため、健常者ボランティアから血液50mLをヘパリン採血(ヘパリン濃度:30U/mL)し、以下の測定を実施した。
血小板付着率(%)=(血小板吸着試験後の血液中血小板)/(血小板吸着試験前の血液中血小板)・・・式7
血液浄化用の材料23について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。さらに、血液浄化用の材料23について、実施例10と同様の操作を行い、血小板付着率を算出した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料24について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。さらに、血液浄化用の材料24について、実施例10と同様の操作を行い、血小板付着率を算出した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料25について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。さらに、血液浄化用の材料25について、実施例10と同様の操作を行い、血小板付着率を算出した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料26について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。さらに、血液浄化用の材料26について、実施例10と同様の操作を行い、血小板付着率を算出した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料27について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。さらに、血液浄化用の材料27について、実施例10と同様の操作を行い、血小板付着率を算出した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料28について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。さらに、血液浄化用の材料28について、実施例10と同様の操作を行い、血小板付着率を算出した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料29について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。さらに、血液浄化用の材料29について、実施例10と同様の操作を行い、血小板付着率を算出した。結果を表6に示す。
血液浄化用の材料30について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表7に示す。
血液浄化用の材料31について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表7に示す。
血液浄化用の材料32について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表7に示す。
血液浄化用の材料14の血液浄化の性能をより詳しく確認するため、活性化顆粒球−活性化血小板複合体、活性化単球−活性化血小板複合体、活性化顆粒球及び活性化単球の除去率を測定した。以下に測定方法を示す。
上下に溶液の出入り口のある円筒状カラム(内径1cm×高さ1.2cm、容積0.94cm3、外径2cm、ポリカーボネート製)に、直径1cmの円板状に切り抜いた実施例21用の血液浄化用の材料14を積層して充填することで、実施例21用の血液浄化用の材料14を備えるカラムを作製した。LPSを70EU/mLになるよう添加した健常ヒトボランティア血液を37℃、30分間、65rpmで振とうし、活性化させて血液を、当該カラムに流量0.63mL/minで通液し、カラム入口及び出口で血液のサンプル採取を行った。カラム出口のサンプルはカラム内に血液が流入した時点を0分とし、3.5分から6.5分間通液したものを採取した。通液後得られたサンプルを細胞の表面抗原を表8に示した蛍光標識抗体にて染色後にVersaLyseを用いて溶血処理をして、静置後は氷冷、暗所に保管し、速やかに各サンプルに含まれる細胞数を測定した。なお、生細胞の判定には、7−AAD Viability Staining Solution(BioLegend)を、細胞数のカウントには、Flow Count(BECKMAN COULTER)を用いた。測定にはフローサイトメトリー(BD Cytometer Setup and Tracking Beads(Becton, Dickinson and Company))を用いた。解析には、BD FACS Divaソフトウェア Version 6.1.3(Becton, Dickinson and Company)又は、FLOWJO(トミーデジタルバイオロジー株式会社)を使用した。活性化顆粒球−活性化血小板複合体、活性化単球−活性化血小板複合体、活性化顆粒球及び活性化単球の濃度を算出し、以下の式8〜式11によりカラム入出前後での除去率をそれぞれ算出した。結果を表9に示す。
活性化顆粒球除去率(%)={(カラム入口側の活性化顆粒球濃度)−(カラム出口側の活性化顆粒球濃度)}/(カラム入口側の活性化顆粒球濃度)×100・・・・・・式8
活性化顆粒球−活性化血小板複合体除去率(%)={(カラム入口側の活性化顆粒球−活性化血小板複合体濃度)−(カラム出口側の活性化顆粒球−活性化血小板複合体濃度)}/(カラム入口側の活性化顆粒球−活性化血小板複合体濃度)×100・・・・・・式9
活性化単球除去率(%)={(カラム入口側の活性化単球濃度)−(カラム出口側の活性化単球濃度)}/(カラム入口側の活性化単球濃度)×100・・・・・・式10
活性化単球−活性化血小板複合体除去率(%)={(カラム入口側の活性化単球−活性化血小板複合体濃度)−(カラム出口側の活性化単球−活性化血小板複合体濃度)}/(カラム入口側の活性化単球−活性化血小板複合体濃度)×100・・・・・・式11
血液浄化用の材料15について、実施例21と同様の操作を行い、活性化顆粒球、活性化顆粒球−活性化血小板複合体、活性化単球及び活性化単球−活性化血小板複合体の除去率をそれぞれ算出した。結果を表9に示す。
血液浄化用の材料16について、実施例21と同様の操作を行い、活性化顆粒球、活性化顆粒球−活性化血小板複合体、活性化単球及び活性化単球−活性化血小板複合体の除去率をそれぞれ算出した。結果を表9に示す。
血液浄化用の材料23について、実施例21と同様の操作を行い、活性化顆粒球、活性化顆粒球−活性化血小板複合体、活性化単球及び活性化単球−活性化血小板複合体の除去率をそれぞれ算出した。結果を表9に示す。
血液浄化用の材料24について、実施例21と同様の操作を行い、活性化顆粒球、活性化顆粒球−活性化血小板複合体、活性化単球及び活性化単球−活性化血小板複合体の除去率をそれぞれ算出した。結果を表9に示す。
血液浄化用の材料25について、実施例21と同様の操作を行い、活性化顆粒球、活性化顆粒球−活性化血小板複合体、活性化単球及び活性化単球−活性化血小板複合体の除去率をそれぞれ算出した。結果を表9に示す。
血液浄化用の材料26について、実施例21と同様の操作を行い、活性化顆粒球、活性化顆粒球−活性化血小板複合体、活性化単球及び活性化単球−活性化血小板複合体の除去率をそれぞれ算出した。結果を表9に示す。
血液浄化用の材料27について、実施例21と同様の操作を行い、活性化顆粒球、活性化顆粒球−活性化血小板複合体、活性化単球及び活性化単球−活性化血小板複合体の除去率をそれぞれ算出した。結果を表9に示す。
血液浄化用の材料28について、実施例21と同様の操作を行い、活性化顆粒球、活性化顆粒球−活性化血小板複合体、活性化単球及び活性化単球−活性化血小板複合体の除去率をそれぞれ算出した。結果を表9に示す。
血液浄化用の材料29について、実施例21と同様の操作を行い、活性化顆粒球、活性化顆粒球−活性化血小板複合体、活性化単球及び活性化単球−活性化血小板複合体の除去率をそれぞれ算出した。結果を表9に示す。
血液浄化用の材料33について、疑似血液を用いた圧力損失を測定した。上下に溶液の出入り口のある円筒状カラム(内径1cm×高さ1.2cm、容積0.94cm3、外径2cm、ポリカーボネート製)に、直径1cmの円板状に切り抜いた血液浄化用の材料33を積層して0.30g/cm3の嵩密度になるよう充填したカラムを作製した。各カラムに、37℃(外温)で保温した擬似血液(50wt%グリセリン水溶液)を、流量0.65mL/minで通液し、カラムの入口圧力と出口圧力を各々測定した。なお流量は、100mL/min÷145cm3×0.94cm3=0.65mL/minと計算し、設定した。通液開始後10分の時点の入口圧力の値から通液開始後10分の時点の出口圧力の値を引いた値を、擬似血液圧力損失として算出した。結果を表10に示す。
血液浄化用の材料34について、実施例31と同様の操作を行い、疑似血液を用いた圧力損失を測定し、擬似血液圧力損失として算出した。結果を表10に示す。
血液浄化用の材料15について、実施例31と同様の操作を行い、疑似血液を用いた圧力損失を測定し、擬似血液圧力損失として算出した。結果を表10に示す。
血液浄化用の材料35について、実施例31と同様の操作を行い、疑似血液を用いた圧力損失を測定し、擬似血液圧力損失として算出した。結果を表10に示す。
血液浄化用の材料36について、実施例31と同様の操作を行い、疑似血液を用いた圧力損失を測定し、擬似血液圧力損失として算出した。結果を表10に示す。
血液浄化用の材料37について、実施例1及び実施例21と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率、活性化顆粒球−活性化血小板複合体、活性化単球−活性化血小板複合体、活性化顆粒球及び活性化単球の除去率をそれぞれ算出した。結果を表11に示す。
血液浄化用の材料1について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料2について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料3について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料4について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料5について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料6について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料7について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料8について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料12について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料13について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料17について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料18について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料22について、実施例1と同様の操作を行い、IL−6吸着率及びIL−8吸着率を算出した。結果を表5に示す。
血液浄化用の材料17について、実施例21と同様の操作を行い、活性化顆粒球−活性化血小板複合体、活性化単球−活性化血小板複合体、活性化顆粒球及び活性化単球の除去率をそれぞれ算出した。結果を表9に示す。
2.繊維(黒色部分)
3.開孔部(白色部分)
4.カラム
5.通液前の疑似血液又はヒト血液
6.通液後の疑似血液又はヒト血液
7.回路
8.入口圧測定装置
9.出口圧測定装置
10.ポンプ
11.恒温水槽
12.ヒーター
Claims (8)
- 基材にアミド基とアミノ基とを有するリガンドが結合した水不溶性材料を含み、
前記アミド基の含量は、前記水不溶性材料の乾燥重量1g当たり3.0〜7.0mmolであり、
前記アミノ基の含量は、前記水不溶性材料の乾燥重量1g当たり1.0〜7.0mmolである、血液浄化用の材料。 - 前記リガンドは、以下の一般式(I)で示される構造で前記基材に結合している、請求項1記載の血液浄化用の材料。
- 前記リガンドは、フェニル基を有し、以下の一般式(II)で示される構造で前記基材に結合しており、
前記フェニル基の含量は、前記水不溶性材料の乾燥重量1g当たり0mmol超〜7.0mmolである、請求項1又は2記載の血液浄化用の材料。
- 前記基材は、ポリスチレン若しくはポリスルホン又はそれらの誘導体である、請求項1〜3のいずれか一項記載の血液浄化用の材料。
- 繊維形状又は粒子形状である、請求項1〜4のいずれか一項記載の血液浄化用の材料。
- 編地形状であり、開孔率が0.1〜30.0%である、請求項1〜5のいずれか一項記載の血液浄化用の材料。
- サイトカイン及び活性化白血球−活性化血小板複合体の除去用である、請求項1〜6のいずれか一項記載の血液浄化用の材料。
- 請求項1〜7のいずれか一項記載の血液浄化用の材料を備える、血液浄化器。
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