TWI546122B - 血液成分吸附用載體及血液成分吸附管柱 - Google Patents

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Description

血液成分吸附用載體及血液成分吸附管柱
本發明係有關血液成分吸附用載體及血液成分吸附管柱。
炎症性細胞激素等係與全身性紅斑狼瘡、風濕性關節炎、多發性硬化症、潰瘍性結腸炎、克隆氏症等炎症性疾病的病因息息相關，一般認為只要以低分子醫藥品、抗體等生物製劑將炎症性細胞激素去活化，便可治療此等炎症性疾病。然而，已知炎症性細胞激素並非單獨作用於炎症部位，而是多種類複合性地作用使炎症性疾病發病並惡化，因此近來係矚目於甚為有效的白血球去除法(leukopheresis)，其係由血中去除作為炎症性細胞激素供給源的活化白血球。
作為由血中去除活化白血球之方法，已知有利用以纖維、珠粒為填充劑之白血球去除管柱使伴有炎症性疾病的患者血液進行體外循環，藉以選擇性吸附去除活化白血球之方法。舉例而言，作為選擇性吸附顆粒球之載體，係報告有使用表面具有一定的凹凸的珠粒作為填充劑之實例(專利文獻1)，而作為可同時吸附活化白血球與細胞激素之載體，則報告有使用表面經胺基修飾之不織布、珠粒作為填充劑之實例(專利文獻2及3)。
先前技術文獻 專利文獻
專利文獻1 日本專利第2501500號說明書 專利文獻2 日本特開2006-312804號公報專利文獻3 日本特開平7-080062號公報
然而，用以選擇性吸附活化白血球的既有吸附載體，其現況在於未能斷言具有充分的吸附能力，而為使用於白血球去除法並提高炎症性疾病患者的治療效果，茲認為在白血球當中需特別提高對顆粒球及單核球的吸附能力。
因此，本發明之目的在於提供一種血液成分吸附載體，其可選擇性且高效率地吸附去除顆粒球及單核球，且對於炎症性細胞激素亦可同時吸附去除。
為解決上述課題而戮力進行多次研究的結果，本發明人等發現一種血液成分吸附載體，其除了顆粒球及單核球之外，還可高效率地吸附去除炎症性細胞激素，本發明即臻完成。
即，本發明係提供以下(1)~(10)之血液成分吸附用載體及血液成分吸附管柱。
(1)一種血液成分吸附用載體，其係於非水溶性載體的表面導入具有矽烷基與胺基的官能基而成。
(2)如上述(1)項之血液成分吸附用載體，其中上述非水溶性載體之質子吸附能力為1.5×10-5~3.0×10-3eq/g。
(3)如上述(1)或(2)項之血液成分吸附用載體，其中上述矽烷基之矽原子與上述胺基之氮原子係以烷基鏈鍵結。
(4)如上述(3)項之血液成分吸附用載體，其中上述烷基鏈係碳數6以下之烷基鏈。
(5)如上述(1)至(4)項中任一項之血液成分吸附用載體，其中上述矽烷基具有烷基及/或烷氧基。
(6)如上述(5)項之血液成分吸附用載體，其中上述烷基為甲基或乙基。
(7)如上述(5)或(6)項之血液成分吸附用載體，其中上述烷氧基為甲氧基或乙氧基。
(8)如上述(1)至(7)項中任一項之血液成分吸附用載體，其中上述非水溶性載體係包含纖維或粒子。
(9)如上述(8)項之血液成分吸附用載體，其中上述纖維之纖維徑或上述粒子之粒徑為0.5~20μm。
(10)一種血液成分吸附管柱，其填充有如上述(1)至(9)項中任一項之血液成分吸附用載體。
根據本發明血液成分吸附用載體，可由炎症性疾病患者的血液高效率地吸附去除顆粒球及單核球，且對於炎症性細胞激素亦可同時吸附去除。此外，填充有本發明血液成分吸附用載體之血液成分吸附管柱可使用於白血球去除法，並且在治療嚴重炎症性疾病方面可發揮較佳的治療效果。
本發明血液成分吸附用載體，其特徵為，於非水溶性載體的表面導入具有矽烷基與胺基的官能基而成。
「血液成分吸附用載體」係指可由血液吸附去除血液成分之材料。
血液成分係指構成血液之成分，可例舉如紅血球、白血球或血小板等血球成分或炎症性細胞激素等體液因子，而以炎症性疾病之治療為目的時，係以吸附去除白血球及炎症性細胞激素為佳。
炎症性細胞激素係指可將訊息傳遞至特定細胞之由細胞分泌的蛋白質，可例舉如介白素、腫瘤壞死因子-α、轉形生長因子-β、干擾素-γ、血管生成生長因子及免疫抑制酸性蛋白。
介白素係指可分泌白血球並發揮免疫系統調節功能之細胞激素，可例舉如介白素-1、介白素-6(以下為IL-6)、介白素-8(以下為IL-8)、介白素-10、介白素-17。
「吸附」係指血液成分附著於血液成分吸附用載體而不易剝離之狀態。
作為「非水溶性載體」之材質可例舉如聚乙烯或聚丙烯等聚烯烴、聚對苯二甲酸乙二酯或聚對苯二甲酸丁二酯等聚酯、Teflon(註冊商標)等氟化聚合物、聚對二苯醚碸等聚碸系聚合物、聚醚醯亞胺、聚醯亞胺、聚醯胺、聚醚、聚苯硫醚、聚苯乙烯或丙烯酸系聚合物、或者此等高分子化合物經摻合、合金化者；為易於導入官能基至非水溶性載體表面，較佳為聚苯乙烯，而由耐 熱性或加工時之形狀保持觀點而言則較佳為聚丙烯或聚丙烯-聚乙烯共聚物。
「具有矽烷基與胺基的官能基」係指，官能基之化學結構的一部分包含至少各一個矽烷基及胺基的官能基。
「矽烷基」係指以下所示之化學結構之官能基。
於此，R1、R2及R3之化學結構並未特別限定，惟R1、R2及R3較佳為烷基或烷氧基，更佳為甲基、乙基、甲氧基或乙氧基。作為R1、R2及R3為完全相同之烷基的矽烷基，可例舉如三甲基矽烷基或三乙基矽烷基。又作為R1、R2及R3為完全相同之烷氧基的矽烷基，可例舉如三甲氧基矽烷基或三乙氧基矽烷基。更者，作為R1、R2及R3屬多種烷基及/或烷氧基的矽烷基，則可例舉如甲基二甲氧矽烷基。
此外，上述矽烷基可含有一個以上矽氧烷鍵，惟矽氧烷鍵相連過多時官能基的自由振動會受到抑制，因此相連之矽氧烷鍵數較佳為5以下。
上述矽烷基中，若為R1、R2及R3完全由烷基及/或烷氧基取代之矽烷基時，為使矽烷基與血液成分可更容易互相作用，構成烷基及/或烷氧基的碳原子及氧原子數較佳為5以下。
「胺基」係指以下所示之結構之官能基。
於此，R4及R5之化學結構並未特別限定，而作為R4及R5可例舉如烷基。
R4及R5皆為氫之結構係稱為一級胺基，R4及R5任一者為氫以外之化學結構之結構稱為二級胺基，R4及R5皆由氫以外之化學結構取代之結構則稱為三級胺基。
另外，本發明中所謂「胺基」係包含以下所示之結構之官能基，即四級銨基。
於此，R6、R7及R8均表示氫以外之化學結構，彼等化學結構並未特別限定，作為R6、R7及R8可例舉如烷基。
當上述官能基之末端存在胺基時，即上述官能基之末端有反應性高的一級胺基時，此胺基不僅會提高與血液成分吸附用載體所具有的其他化學結構進行交聯等的可能性，亦有對生物體施予過度刺激的可能性，因此上述胺基較佳為二級或者三級胺基、或四級銨基。
上述官能基的化學結構內，存在於矽烷基與胺基之間的化學結構，即鍵結矽烷基之矽原子與胺基之氮原子的化學結構(以下為間距基(spacer))較佳由氫原子、碳原子、氧原子或硫原子構成，若間距基過大則矽烷基的密度會降低，因此構成間距基的原子數較佳為200以 下。又，間距基更佳為烷基鏈，再更佳為碳數6以下之烷基鏈。
於非水溶性載體的表面導入「具有矽烷基與胺基的官能基」之際，作為鍵結非水溶性載體與上述官能基之媒介的反應性官能基可例舉如鹵代甲基、鹵代乙醯基、鹵代乙醯胺甲基或鹵烷基等活性鹵素基團、環氧基、羧基、異氰酸基、硫代異氰酸基或酸酐基，而由具適當反應性觀點而言，較佳為活性鹵素基團，更佳為鹵代乙醯胺甲基。
矽烷基位於末端且間距基為烷基鏈的上述官能基可使例如市售試藥，即容易購得之矽烷基烷基胺與鹵代乙醯胺甲基反應而製得。例如間距基為碳數3以下之烷基鏈的上述官能基，可使3-胺基丙基三甲氧基矽烷或3-胺基丙基三乙氧基矽烷與鹵代乙醯胺甲基反應而製得。
就「非水溶性載體」之形狀，由白血球之吸附去除效率得以提升觀點而言，較佳為「纖維或粒子」。當非水溶性載體為纖維時，纖維之剖面可為正圓形以外之奇形剖面，纖維亦可為中空絲。又為了更穩定發揮白血球的吞噬活性，則「纖維或粒子」的「纖維之纖維徑」及「粒子之粒徑」較佳為0.5~20μm，更佳為4~10μm。其下限值之較佳值為0.5μm，更佳為4μm。上限值之較佳值為20μm，更佳為10μm。任一較佳下限值亦可與任一較佳上限值組合。此處白血球的吞噬活性係指，顆粒球及單核球擬捕捉侵入人類等的體內之微生物、細菌等並予以吞食之性質。
「纖維之纖維徑」係指隨機採取纖維的小片樣本10個，並使用掃描式電子顯微鏡分別拍攝2000倍照片時，每張照片中10處(共100處)之纖維直徑測定值的平均值。同樣「粒子之粒徑」係指隨機採取粒子的小片樣本10個，並使用掃描式電子顯微鏡分別拍攝2000倍照片時，每張照片中10處(共100處)之粒子直徑測定值的平均值。
上述纖維之纖維徑若小於10μm時，由確保血液成分吸附用載體的強度觀點而言亦可混合直徑較粗之纖維，而此種粗直徑纖維之纖維徑較佳為10~50μm。
作為包含纖維之非水溶性載體的形狀可例舉如織布、不織布、棉布或中空絲，當形狀為不織布時，為保持其形狀亦以加入聚丙烯等骨架材料纖維為佳。
當本發明血液成分吸附載體包含纖維時，係可藉由過濾原理去除血液成分，惟考量到抑制堵塞導致的壓力損失，而針對顆粒球及單核球利用其吞噬活性與「具有矽烷基與胺基的官能基」的交互作用、針對炎症性細胞激素利用與「具有矽烷基與胺基的官能基」的交互作用分別予以吸附去除為較佳。因此，將本發明血液成分吸附載體填充於管柱等容器而使用時，茲認為可增大其孔隙率。另一方面，若孔隙率過大時則不易維持吸附載體之形狀，因此上述非水溶性載體之孔隙率較佳為85~98%，更佳為90~95%。下限值之較佳值為85%，更佳為90%。上限值之較佳值為98%，更佳為95%。任一較佳下限值亦可與任一較佳上限值組合。
「孔隙率」係指血液成分吸附載體中的孔隙容積之比例，即血液成分吸附載體中的孔隙容積除以血液成分吸附載體之外表體積，以百分率表示之數值；更具體而言，係使用掃描式電子顯微鏡拍攝血液成分吸附載體剖面之200倍照片，利用其影像解析結果並依下式1所算出之值。
孔隙率(%)={(b-a)/b}×100………式1
a：於非水溶性載體中所占之部分的面積b：血液成分吸附載體剖面之總面積
可推知「具有矽烷基與胺基的官能基」所含之矽烷基極有助於顆粒球及單核球的選擇性吸附。另一方面，茲認為胺基若以高密度存在，官能基的自由振動會受到抑制，由此顆粒球及單核球間的交互作用便不充分。
又可推知「具有矽烷基與胺基的官能基」所含之胺基亦極有助於顆粒球及單核球的選擇性吸附。另一方面，可推知胺基若以高密度存在，則會與具有負電荷之蛋白質發生競爭性吸附，由此顆粒球及單核球之吸附率便減少。胺基之密度可由質子吸附能力來表示，本發明血液成分吸附載體之質子吸附能力較佳為1.5×10-5~3.0×10-3eq/g，更佳為1.0×10-4~2.0×10-3eq/g。下限值之較佳值為1.5×10-5eq/g，更佳為1.0×10-4eq/g。上限值之較佳值為3.0×10-3eq/g，更佳為2.0×10-3eq/g。任一較佳下限值亦可與任一較佳上限值組合。此處所謂1eq/g之質子吸附能力係表示1g的吸附載體可吸附1mol的質子。
可推知「具有矽烷基與胺基的官能基」所含之矽烷基某種程度上亦有助於炎症性細胞激素的吸附。詳細機制仍不明，惟炎症性細胞激素係1~數10kDa左右之蛋白質，且含有多種疏水性胺基酸，由此可推知其與例如三甲基矽烷基般之疏水性矽烷基可互相作用。
作為填充有上述血液成分吸附用載體之本發明血液成分吸附管柱的容器形狀，只要是具有血液的入口及出口之容器即可，可例舉如圓柱狀、三角柱狀、四角柱狀、六角柱狀、八角柱狀等角柱狀容器，較佳為可將血液成分吸附用載體以積層狀填充之容器、可將血液成分吸附用載體捲成圓筒狀而填充之容器、或血液由圓筒外周流入內側又流出容器外之容器。
[實施例]
以下對本發明血液成分吸附管柱依實驗例具體進行說明。此外，實施例中wt%係指重量%。
(PP製不織布的製作)
使用以下成分，以紡絲速度800m/分鐘、拉伸倍率3倍之製絲條件製得36島之海島型複合纖維，即島進一步包含芯鞘複合者。
島之芯成分：聚丙烯島之鞘成分：聚苯乙烯90wt%、聚丙烯10wt%海成分：以對苯二甲酸乙二酯單位為主要重複單位，含3wt%間苯二甲酸-5-磺酸鈉作為共聚合成分之共聚聚酯複合比例(重量比例)：芯：鞘：海=45：40：15
製作此包含纖維85wt%與直徑20μm之聚丙烯纖維15wt%的不織布後，將片狀聚丙烯製網(厚0.5mm，單絲徑0.3mm，開口部2mm見方)夾於此不織布2塊之間，並透過針軋法製得3層結構之不織布(以下為PP製不織布)。
(PSt+PP製不織布的製作)
對PP製不織布以95℃、3wt%的氫氧化鈉水溶液進行處理以將海成分溶解，由此製作芯鞘纖維之直徑為5μm、體積密度為0.02g/cm3之不織布(PSt+PP製不織布，以下為不織布A)。
(氯乙醯胺甲基化不織布的製作)
於10℃以下混合、攪拌溶解硝基苯46wt%、硫酸46wt%、三聚甲醛1wt%、N-羥甲基-α-氯乙醯胺(以下為NMCA)7wt%以調製NMCA化反應液。使該NMCA化反應液在5℃，以相對1g不織布A約40mL的固液比添加NMCA化反應液，並於水浴中將反應液保持於5℃下反應2小時。其後，由反應液取出不織布，將其浸漬於與NMCA反應液等量的硝基苯中並清洗之。接著取出不織布，浸漬於甲醇中進行清洗，即得氯乙醯胺甲基化不織布(以下為不織布B)。
(四伸乙五胺化不織布的製作)
將四伸乙五胺(以下為TEPA)、三乙胺溶於500mL二甲基亞碸(以下為DMSO)中，使四伸乙五胺、三乙胺之濃度分別達20mM、473mM，再將10g不織布B浸漬於此液中，於40℃下反應3小時。以DMSO及甲醇清 洗反應後之不織布並進一步進行水洗，即得TEPA化不織布(以下為不織布C)。導入至不織布C之官能基的結構式係示於表1-1。
(N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基三甲氧基矽烷化不織布的製作)
將0.22mL之N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基三甲氧基矽烷加至46.5mL之DMSO，進一步添加3.3mL之三乙胺並予以混合，再將1g不織布B浸漬於此液中，於40℃下反應2小時。以DMSO及甲醇清洗反應後之不織布並進一步進行水洗，即得N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基三甲氧基矽烷化不織布(以下為不織布D)。導入至不織布D之官能基的結構式係示於表1。
(N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基三乙氧基矽烷化不織布的製作)
將0.27mL之N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基三乙氧基矽烷加至46.5mL之DMSO，進一步添加3.3mL之三乙胺並予以混合，再將1g不織布B浸漬於此液中，於40℃下反應2小時。以DMSO及甲醇清洗反應後之不織布並進一步進行水洗，即得N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基三乙氧基矽烷化不織布(以下為不織布E)。導入至不織布E之官能基的結構式係示於表1。
(N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基甲基二甲氧基矽烷化不織布的製作)
將0.21mL之N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基甲基二甲氧基矽烷加至46.5mL之DMSO，進一步添加3.3mL 之三乙胺並予以混合，再將1g不織布B浸漬於此液中，於40℃下反應2小時。以DMSO及甲醇清洗反應後之不織布並進一步進行水洗，即得N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基甲基二甲氧基矽烷化不織布(以下為不織布F)。導入至不織布F之官能基的結構式係示於表1。
(3-胺基丙基三甲氧基矽烷化不織布的製作)
將0.18mL之3-胺基丙基三甲氧基矽烷加至46.5mL之DMSO，進一步添加3.3mL之三乙胺並予以混合，再將1g不織布B浸漬於此液中，於40℃下反應2小時。以DMSO及甲醇清洗反應後之不織布並進一步進行水洗，即得3-胺基丙基三甲氧基矽烷化不織布(以下為不織布G)。導入至不織布G之官能基的結構式係示於表1。
(3-胺基丙基三乙氧基矽烷化不織布的製作)
將0.18mL之3-胺基丙基三乙氧基矽烷加至46.5mL之DMSO，進一步添加3.3mL之三乙胺並予以混合，再將1g不織布B浸漬於此液中，於40℃下反應2小時。以DMSO及甲醇清洗反應後之不織布並進一步進行水洗，即得3-胺基丙基三乙氧基矽烷化不織布(以下為不織布H)。導入至不織布H之官能基的結構式係示於表1。
(3-乙氧基丙基胺化不織布的製作)
將0.12mL之3-乙氧基丙基胺加至46.5mL之DMSO，進一步添加3.3mL之三乙胺並予以混合，再將1g不織布B浸漬於此液中，於40℃下反應2小時。以DMSO及甲醇清洗反應後之不織布並進一步進行水洗，即得3-乙氧基丙基胺化不織布(以下為不織布I)。導入至不織布I之官能基的結構式係示於表1。
(4-胺基丁醛二甲縮醛化不織布的製作)
將0.14mL之4-胺基丁醛二甲縮醛加至46.5mL之DMSO，進一步添加3.3mL之三乙胺並予以混合，再將1g不織布B浸漬於此液中，於40℃下反應2小時。以DMSO及甲醇清洗反應後之不織布並進一步進行水洗，即得4-胺基丁醛二甲縮醛化不織布(以下為不織布J)。導入至不織布J之官能基的結構式係示於表1。
(3-胺基丙醛二乙縮醛化不織布的製作)
將0.16mL之3-胺基丙醛二乙縮醛加至46.5mL之DMSO，進一步添加3.3mL之三乙胺並予以混合，再將1g不織布B浸漬於此液中，於40℃下反應2小時。以DMSO及甲醇清洗反應後之不織布並進一步進行水洗，即得3-胺基丙醛二乙縮醛化不織布(以下為不織布K)。導入至不織布K之官能基的結構式係示於表1。
(氯乙醯胺甲基化聚碸的製作)
對32mL、5wt%聚碸/硝基苯溶液添加0℃下調製之2mL、2wt%NMCA/硫酸溶液，並攪拌1小時。對其添加冰冷卻之甲醇800mL使氯乙醯胺甲基化聚碸析出並予以回收。將回收之氯乙醯胺甲基化聚碸溶於20mL二甲基甲醯胺(以下為DMF)，對此液再度添加冰冷卻之甲醇400mL，即得氯乙醯胺甲基化聚碸。
(四伸乙五胺化聚碸不織布的製作)
將1g氯乙醯胺甲基化聚碸溶於30mL之DMF中，對其添加四伸乙五胺並攪拌17小時使濃度達20mM後，對其添加冰冷卻之甲醇600mL使四伸乙五胺化聚碸析出 並予以回收。將回收之四伸乙五胺化聚碸再度溶於20mL之DMF中，並將0.1g不織布A浸漬於此液後，立刻提起並進一步浸漬於甲醇中，即得四伸乙五胺化聚碸不織布(以下為不織布L)。導入至不織布L之官能基的結構式係示於表1。
(N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基三甲氧基矽烷化聚碸不織布的製作)
將1g氯乙醯胺甲基化聚碸溶於30mL之DMF中，對其添加N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基三甲氧基矽烷並攪拌17小時使濃度達20mM後，對其添加冰冷卻之甲醇600mL使N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基三甲氧基矽烷化聚碸析出並予以回收。將回收之N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基三甲氧基矽烷化聚碸再度溶於20mL之DMF中，並將0.1g不織布A浸漬於此液後，立刻提起並進一步浸漬於甲醇中，即得N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基三甲氧基矽烷化聚碸不織布(以下為不織布M)。導入至不織布M之官能基的結構式係示於表1。
(N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基三乙氧基矽烷化聚碸不織布的製作)
將1g氯乙醯胺甲基化聚碸溶於30mL之DMF中，對其添加N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基三乙氧基矽烷並攪拌17小時使濃度達20mM後，對其添加冰冷卻之甲醇600mL使N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基三乙氧基矽烷化聚碸析出並予以回收。將回收之N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基三乙氧基矽烷化聚碸再度溶於20mL之DMF中 ，並將0.1g不織布A浸漬於此液後，立刻提起並進一步浸漬於甲醇中，即得N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基三乙氧基矽烷化聚碸不織布(以下為不織布N)。導入至不織布N之官能基的結構式係示於表1。
(N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基甲基二甲氧基矽烷化聚碸不織布的製作)
將1g氯乙醯胺甲基化聚碸溶於30mL之DMF中，對其添加N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基甲基二甲氧基矽烷並攪拌17小時使濃度達20mM後，對其添加冰冷卻之甲醇600mL使N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基甲基二甲氧基矽烷化聚碸析出並予以回收。將回收之N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基甲基二甲氧基矽烷化聚碸再度溶於20mL之DMF中，並將0.1g不織布A浸漬於此液後，立刻提起並進一步浸漬於甲醇中，即得N-2-(胺基乙基)-3-胺基丙基甲基二甲氧基矽烷化聚碸不織布(以下為不織布O)。導入至不織布O之官能基的結構式係示於表1。
(3-胺基丙基三甲氧基矽烷化聚碸不織布的製作)
將1g氯乙醯胺甲基化聚碸溶於30mL之DMF中，對其添加3-胺基丙基三甲氧基矽烷並攪拌17小時使濃度達20mM後，對其添加冰冷卻之甲醇600mL使3-胺基丙基三甲氧基矽烷化聚碸析出並予以回收。將回收之3-胺基丙基三甲氧基矽烷化聚碸再度溶於20mL之DMF中，並將0.1g不織布A浸漬於此液後，立刻提起並進一步浸漬於甲醇中，即得3-胺基丙基三甲氧基矽烷化聚碸不 織布(以下為不織布P)。導入至不織布P之官能基的結構式係示於表1。
(3-胺基丙基三乙氧基矽烷化聚碸不織布的製作)
將1g氯乙醯胺甲基化聚碸溶於30mL之DMF中，對其添加3-胺基丙基三乙氧基矽烷並攪拌17小時使濃度達20mM後，對其添加冰冷卻之甲醇600mL使3-胺基丙基三乙氧基矽烷化聚碸析出並予以回收。將回收之3-胺基丙基三乙氧基矽烷化聚碸再度溶於20mL之DMF中，並將0.1g不織布A浸漬於此液後，立刻提起並進一步浸漬於甲醇中，即得3-胺基丙基三乙氧基矽烷化聚碸不織布(以下為不織布Q)。導入至不織布Q之官能基的結構式係示於表1。
(3-乙氧基丙基胺化聚碸不織布的製作)
將1g氯乙醯胺甲基化聚碸溶於30mL之DMF中，對其添加3-乙氧基丙基胺並攪拌17小時使濃度達20mM後，對其添加冰冷卻之甲醇600mL使3-乙氧基丙基胺化聚碸析出並予以回收。將回收之3-乙氧基丙基胺化聚碸再度溶於20mL之DMF中，並將0.1g不織布A浸漬於此液後，立刻提起並進一步浸漬於甲醇中，即得3-乙氧基丙基胺化聚碸不織布(以下為不織布R)。導入至不織布R之官能基的結構式係示於表1。
(4-胺基丁醛二甲縮醛化聚碸不織布的製作)
將1g氯乙醯胺甲基化聚碸溶於30mL之DMF中，對其添加4-胺基丁醛二甲縮醛並攪拌17小時使濃度達20mM後，對其添加冰冷卻之甲醇600mL使4-胺基丁醛 二甲縮醛化聚碸析出並予以回收。將回收之4-胺基丁醛二甲縮醛化聚碸再度溶於20mL之DMF中，並將0.1g不織布A浸漬於此液後，立刻提起並進一步浸漬於甲醇中，即得4-胺基丁醛二甲縮醛化聚碸不織布(以下為不織布S)。導入至不織布S之官能基的結構式係示於表1。
(3-胺基丙醛二乙縮醛化聚碸不織布的製作)
將1g氯乙醯胺甲基化聚碸溶於30mL之DMF中，對其添加3-胺基丙醛二乙縮醛並攪拌17小時使濃度達20mM後，對其添加冰冷卻之甲醇600mL使3-胺基丙醛二乙縮醛化聚碸析出並予以回收。將回收之3-胺基丙醛二乙縮醛化聚碸再度溶於20mL之DMF中，並將0.1g不織布A浸漬於此液後，立刻提起並進一步浸漬於甲醇中，即得3-胺基丙醛二乙縮醛化聚碸不織布(以下為不織布T)。導入至不織布T之官能基的結構式係示於表1。
(實施例1)
將不織布D剪成直徑8mm的圓板狀，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加人類血液(肝素濃度30U/mL)1mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合20分鐘後依下式2~4算出各血液成分的吸附率。此外，各血液成分數的測定係利用多通道自動血球分析儀XT-1800i(Sysmex股份有限公司)來進行。結果係示於表2。
顆粒球吸附率(%)={(循環前血液中的顆粒球數)-(循環後血液中的顆粒球數)}/(循環前血液中的顆粒球數)×100………式2 單核球吸附率(%)={(循環前血液中的單核球數)-(循環後血液中的單核球數)}/(循環前血液中的單核球數)×100………式3 淋巴球吸附率(%)={(循環前血液中的淋巴球數)-(循環後血液中的淋巴球數)}/(循環前血液中的淋巴球數)×100………式4
(實施例2)
將不織布E剪成直徑8mm的圓板狀，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加人類血液(肝素濃度30U/mL)1mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合20分鐘後，以與實施例1同樣的方式算出各血液成分的吸附率。結果係示於表2。
(實施例3)
將不織布F剪成直徑8mm的圓板狀，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加人類血液(肝素濃度30U/mL)1mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合20分鐘後，以與實施例1同樣的方式算出各血液成分的吸附率。結果係示於表2。
(實施例4)
將不織布G剪成直徑8mm的圓板狀，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加人類血液(肝素濃度30U/mL)1mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合20分鐘後，以與實施例1同樣的方式算出各血液成分的吸附率。結果係示於表2。
(實施例5)
將不織布H剪成直徑8mm的圓板狀，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加人類血液(肝素濃度30U/mL)1mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合20分鐘後，以與實施例1 同樣的方式算出各血液成分的吸附率。結果係示於表2。
(實施例6)
將不織布M剪成直徑8mm的圓板狀，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加人類血液(肝素濃度30U/mL)1mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合20分鐘後，以與實施例1同樣的方式算出各血液成分的吸附率。結果係示於表2。
(實施例7)
將不織布N剪成直徑8mm的圓板狀，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加人類血液(肝素濃度30U/mL)1mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合20分鐘後，以與實施例1同樣的方式算出各血液成分的吸附率。結果係示於表2。
(實施例8)
將不織布O剪成直徑8mm的圓板狀，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加人類血液(肝素濃度30U/mL)1mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合20分鐘後，以與實施例1同樣的方式算出各血液成分的吸附率。結果係示於表2。
(實施例9)
將不織布P剪成直徑8mm的圓板狀，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加人類血液(肝素濃度30U/mL)1mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合20分鐘後，以與實施例1同樣的方式算出各血液成分的吸附率。結果係示於表2。
(實施例10)
將不織布Q剪成直徑8mm的圓板狀，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加人類血液(肝素濃度30U/mL)1mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合20分鐘後，以與實施例1同樣的方式算出各血液成分的吸附率。結果係示於表2。
(比較例1)
將不織布C剪成直徑8mm的圓板狀，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加人類血液(肝素濃度30U/mL)1mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合20分鐘後，以與實施例1同樣的方式算出各血液成分的吸附率。結果係示於表2。
(比較例2)
將不織布I剪成直徑8mm的圓板狀，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加人類血液(肝素濃度30U/mL)1mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合20分鐘後，以與實施例1同樣的方式算出各血液成分的吸附率。結果係示於表2。
(比較例3)
將不織布J剪成直徑8mm的圓板狀，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加人類血液(肝素濃度30U/mL)1mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合20分鐘後，以與實施例1同樣的方式算出各血液成分的吸附率。結果係示於表2。
(比較例4)
將不織布K剪成直徑8mm的圓板狀，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加人類血液(肝素濃度30U/mL)1mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合20分鐘後，以與實施例1同樣的方式算出各血液成分的吸附率。結果係示於表2。
(比較例5)
將不織布L剪成直徑8mm的圓板狀，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加人類血液(肝素濃度30U/mL)1mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合20分鐘後，以與實施例1同樣的方式算出各血液成分的吸附率。結果係示於表2。
(比較例6)
將不織布R剪成直徑8mm的圓板狀，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加人類血液(肝素濃度30U/mL)1mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合20分鐘後，以與實施例1同樣的方式算出各血液成分的吸附率。結果係示於表2。
(比較例7)
將不織布S剪成直徑8mm的圓板狀，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加人類血液(肝素濃度30U/mL)1mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合20分鐘後，以與實施例1同樣的方式算出各血液成分的吸附率。結果係示於表2。
(比較例8)
將不織布T剪成直徑8mm的圓板狀，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加人類血液(肝素濃度30U/mL)1mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合20分鐘後，以與實施例1同樣的方式算出各血液成分的吸附率。結果係示於表2。
(實施例11)
將不織布D剪成直徑8mm的圓板狀(2片)，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加調製成IL-6及IL-8之濃度均達500pg/mL之胎牛血清(以下為FBS)0.8mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合1小時後以ELISA法分別測定IL-6及IL-8之殘餘濃度，並依下式5及6算出IL-6及IL-8吸附率。結果係示於表2。
IL-6吸附率(%)={(倒轉混合前的IL-6濃度)-(倒轉混合後的IL-6濃度)}/(倒轉混合前的IL-6濃度)×100………式5 IL-8吸附率(%)={(倒轉混合前的IL-8濃度)-(倒轉混合後的IL-8濃度)}/(倒轉混合前的IL-8濃度)×100………式6
(實施例12)
將不織布E剪成直徑8mm的圓板狀(2片)，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加調製成IL-6及IL-8之濃度均達500pg/mL之FBS 0.8mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合1小時後，以與實施例9同樣的方式算出IL-6及IL-8吸附率。結果係示於表2。
(實施例13)
將不織布F剪成直徑8mm的圓板狀(2片)，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加調製成IL-6及IL-8之濃度均達500pg/mL之FBS 0.8mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合1小時後，以與實施例9同樣的方式算出IL-6及IL-8吸附率。結果係示於表2。
(實施例14)
將不織布G剪成直徑8mm的圓板狀(2片)，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加調製成IL-6及IL-8之濃度均達500pg/mL之FBS 0.8mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合1小時後，以與實施例9同樣的方式算出IL-6及IL-8吸附率。結果係示於表2。
(實施例15)
將不織布H剪成直徑8mm的圓板狀(2片)，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加調製成IL-6及IL-8之濃度均達500pg/mL之FBS 0.8mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合1小時後，以與實施例9同樣的方式算出IL-6及IL-8吸附率。結果係示於表2。
(實施例16)
將不織布M剪成直徑8mm的圓板狀(2片)，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加調製成IL-6及IL-8之濃度均達500pg/mL之FBS 0.8mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合1小時後，以與實施例9同樣的方式算出IL-6及IL-8吸附率。結果係示於表2。
(實施例17)
將不織布N剪成直徑8mm的圓板狀(2片)，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加調製成IL-6及IL-8之濃度均達500pg/mL之FBS 0.8mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合1小時後，以與實施例9同樣的方式算出IL-6及IL-8吸附率。結果係示於表2。
(實施例18)
將不織布O剪成直徑8mm的圓板狀(2片)，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加調製成IL-6及IL-8之濃度均達500pg/mL之FBS 0.8mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合1小時後，以與實施例9同樣的方式算出IL-6及IL-8吸附率。結果係示於表2。
(實施例19)
將不織布P剪成直徑8mm的圓板狀(2片)，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加調製成IL-6及IL-8之濃度均達500pg/mL之FBS 0.8mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合1小時後，以與實施例9同樣的方式算出IL-6及IL-8吸附率。結果係示於表2。
(實施例20)
將不織布Q剪成直徑8mm的圓板狀(2片)，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加調製成IL-6及IL-8之濃度均達500pg/mL之FBS 0.8mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合1小時後，以與實施例9同樣的方式算出IL-6及IL-8吸附率。結果係示於表2。
(比較例9)
將不織布C剪成直徑8mm的圓板狀(2片)，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加調製成IL-6及IL-8之濃度均達500pg/mL之FBS 0.8mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合1小時後，以與實施例9同樣的方式算出IL-6及IL-8吸附率。結果係示於表2。
(比較例10)
將不織布I剪成直徑8mm的圓板狀(2片)，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加調製成IL-6及IL-8之濃度均達500pg/mL之FBS 0.8mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合1小時後，以與實施例9同樣的方式算出IL-6及IL-8吸附率。結果係示於表2。
(比較例11)
將不織布J剪成直徑8mm的圓板狀(2片)，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加調製成IL-6及IL-8之濃度均達500pg/mL之FBS 0.8mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合1小時後，以與實施例9同樣的方式算出IL-6及IL-8吸附率。結果係示於表2。
(比較例12)
將不織布K剪成直徑8mm的圓板狀(2片)，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加調製成IL-6及IL-8之濃度均達500pg/mL之FBS 0.8mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合1小時後，以與實施例9同樣的方式算出IL-6及IL-8吸附率。結果係示於表2。
(比較例13)
將不織布L剪成直徑8mm的圓板狀(2片)，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加調製成IL-6及IL-8之濃度均達500pg/mL之FBS 0.8mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合1小時後，以與實施例9同樣的方式算出IL-6及IL-8吸附率。結果係示於表2。
(比較例14)
將不織布R剪成直徑8mm的圓板狀(2片)，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加調製成IL-6及IL-8之濃度均達500pg/mL之FBS 0.8mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合1小時後，以與實施例9同樣的方式算出IL-6及IL-8吸附率。結果係示於表2。
(比較例15)
將不織布S剪成直徑8mm的圓板狀(2片)，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加調製成IL-6及IL-8之濃度均達500pg/mL之FBS 0.8mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合1小時後，以與實施例9同樣的方式算出IL-6及IL-8吸附率。結果係示於表2。
(比較例16)
將不織布T剪成直徑8mm的圓板狀(2片)，置入聚丙烯製容器中。對該容器添加調製成IL-6及IL-8之濃度均達500pg/mL之FBS 0.8mL，於37℃的保溫箱內倒轉混合1小時後，以與實施例9同樣的方式算出IL-6及IL-8吸附率。結果係示於表2。
由表2之結果，顯然非水溶性載體表面導入有具矽烷基之官能基的本發明血液成分吸附載體在與非水溶性載體表面之官能基不具有矽烷基的載體比較時，其顆粒球及單核球的吸附率高，且IL-6及IL-8吸附率亦高。
[產業上之可利用性]
本發明可用作醫療領域的血液成分吸附管柱。

Claims (10)

  1. 一種血液成分吸附用載體，其係於非水溶性載體的表面導入具有矽烷基與胺基的官能基而成。
  2. 如申請專利範圍第1項之血液成分吸附用載體，其中前述非水溶性載體之質子吸附能力為1.5×10-5~3.0×10-3eq/g。
  3. 如申請專利範圍第1或2項之血液成分吸附用載體，其中前述矽烷基之矽原子與上述胺基之氮原子係以烷基鏈鍵結。
  4. 如申請專利範圍第3項之血液成分吸附用載體，其中前述烷基鏈係碳數6以下之烷基鏈。
  5. 如申請專利範圍第1或2項之血液成分吸附用載體，其中前述矽烷基具有烷基及/或烷氧基。
  6. 如申請專利範圍第5項之血液成分吸附用載體，其中前述烷基為甲基或乙基。
  7. 如申請專利範圍第5項之血液成分吸附用載體，其中前述烷氧基為甲氧基或乙氧基。
  8. 如申請專利範圍第1或2項之血液成分吸附用載體，其中前述非水溶性載體係包含纖維或粒子。
  9. 如申請專利範圍第8項之血液成分吸附用載體，其中前述纖維之纖維徑或前述粒子之粒徑為0.5~20μm。
  10. 一種血液成分吸附管柱，其填充有如申請專利範圍第1至9項中任一項之血液成分吸附用載體。
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