JP5307620B2 - 新規白血球除去フィルター。 - Google Patents

Description

本発明は、血液製剤等の白血球含有液から白血球を除去するための白血球除去フィルター材及び白血球除去フィルターに関する。

輸血に用いられる血液製剤としては、供給者から採血した血液に抗凝固剤を添加した全血製剤、全血製剤から受血者の必要とする血液成分を分離した赤血球製剤、血小板製剤、血漿製剤などがある。ところが、これらの血液製剤に含まれる白血球は、発熱反応、輸血関連急性肺障害などの副作用、サイトメガロウイルス感染の原因となるほか、同種抗原として受血者に抗白血球抗体を産生させ、血小板不応状態を誘導することが知られている。

これらの事故を防止するために、血液製剤中に含まれている白血球を除去してから血液製剤を輸血する、いわゆる白血球除去輸血が普及してきた。血液製剤から白血球を除去する方法には、血液成分の比重差を利用した遠心分離法と、多孔質体を濾材とするフィルター法の２種類があるが、白血球除去能力が高く、操作が簡便で、コストが安いフィルター法が広く用いられている。

一方、血液製剤の保管期間が長くなると、保管中に白血球が発熱性のサイトカインを産生したり、さらにウイルスや細菌を保持している白血球が死滅し破砕され、病原媒体が輸血用血液中に拡散する。そして、これらを白血球除去フィルターによって除去できなくなると感染にいたるケースが発生する。

そこで、２００３年に厚生労働省は、輸血関連の副作用防止に向け、全ての輸血用製剤の保存前白血球除去に関する基準案（残存白血球数１×１０⁶個／製剤以下）を日本赤十字社に対し通知している。これにより２００４年に成分献血からの血小板製剤、２００５年に成分献血からの血漿製剤、２００６年に全血からの赤血球製剤に白血球除去フィルターが使用されることになった。

現行の白血球除去フィルターは残存白血球数が１×１０⁵／製剤以下の白血球除去性能（−Ｌｏｇ４）を有しているが（非特許文献１）、患者に輸注された白血球が原因で起こる重篤な副作用を完全に予防するために、現行のフィルターよりも更に高い白血球除去性能を有するフィルターに対する市場要求がある。

しかしながら、従来技術を用いた白血球除去フィルターでは、この様な副作用を完全に予防できるほどの高い白血球除去性能を、単なる多孔質体の増量で達成することは困難であった。

この問題点を解決しようとする試みとして、特許文献１には、平均孔径が１μｍ以上１００μｍ未満の多孔質素子と該多孔質素子に保持された平均繊維径が０．０３μｍ以上１μｍ未満の繊維構造体からなるフィルター材であって、繊維構造体のフィルター材に対する保持量が０．０１ｗｔ％以上３０ｗｔ％未満、多孔質素子の平均孔径と平均繊維径の比が２以上２０００未満であり、繊維構造体が網目状構造を形成している白血球除去フィルター材が開示されている。このフィルター材を含む白血球除去フィルターは残存白血球数が１×１０³／製剤以下の白血球除去性能（−Ｌｏｇ６）を有しているが、このフィルター材を製造するためには煩雑な操作が必要となる。また、濾過時に圧力を加える問題がある。

以上のことから、現在では簡便な操作で製造できる高性能白血球除去フィルターの開発が望まれている。

国際公開公報ＷＯ９７／２３２６６

「日本輸血学会雑誌」４６（６）：５２１−５３１,２０００

本発明の目的は、白血球除去性能が従来のフィルターに比べて高く、かつ簡便な方法で製造できる白血球除去フィルターを提供することにある。

上記課題を解決するために、本発明者らは簡便な方法で製造できる高白血球除去フィルターについて鋭意検討した結果、アミノ基修飾オリゴ糖含有ポリウレタンを少なくとも表面に有する平均繊維直径が１．０〜２．５μｍのフィルター材を含む白血球除去フィルターが優れた白血球除去性能を発現することを見出し本発明に至った。即ち本発明は以下を提供する。
（１）下記一般式［１］で表されるアミノ基修飾オリゴ糖含有ポリウレタンを少なくとも表面に有する平均繊維直径が１．０〜２．５μｍの白血球除去フィルター材。
下記一般式［１］：

［式中、Ｒ¹は、置換基を有していてもよい炭素数１〜１６の２価の炭化水素基を表し、
Ｒ²は、炭素数２〜１２のオキシアルキレン単位および置換基を有していてもよい炭素数２〜１２の２価の炭化水素単位から選ばれる同一または異なる単位を合計１〜１００単位含有する２価の基を表し、Ｒ³は、炭素数２〜４のアルキレン基を表し、Ｒ⁴は、炭素数２〜４のアルキレン基を表し、
Ｒ⁵は、炭素数１〜３の１価の炭化水素基または炭素数４〜６の複素環残基を表し、
ＯＬＳは、一級水酸基を２個有するオリゴ糖の骨格を表し、
ｒはオリゴ糖の二級水酸基の総数を表し、
ｐおよびｑはそれぞれ１≦ｐ≦ｒ、０≦ｑ≦ｒ−１の範囲の整数を表し、
ｍ、ｎはそれぞれ繰り返し単位数であり、ｍは０〜１０００、ｎは１〜１０００の整数を表し、ｎ／（ｍ＋ｎ）は０．０１〜１．００の範囲の数である。］
（２）Ｒ³が、エチレン基である、（１）記載の白血球除去フィルター材。
（３）Ｒ⁴が、エチレン基、プロピレン基である、（１）または（２）記載の白血球除去フィルター材。
（４）Ｒ⁵が、エチレン基、プロピレン基、ブチル基、ピロリジン残基、ピペリジン残基、ピペラジン残基、モルホリン残基、ピリジン残基、イミダゾール残基である、（１）〜（３）記載の白血球除去フィルター材。
（５）オリゴ糖が、トレハロース、マルトースまたはラクトースである、（１）〜（４）記載の白血球除去フィルター材。
（６）オリゴ糖が、サイクロ｛→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→｝である、（１）〜（５）記載の白血球除去フィルター材。
（７）（１）〜（６）記載のフィルター材を、液の導入口及び導出口を持つ容器内に充填したことを特徴とする、白血球除去フィルター。
（８）前記フィルター材が流れ方向に複数個積層されている（７）記載の白血球除去フィルター。
（９）前記フィルター材の上流側及び／又は下流側に他のフィルター材をさらに含む（７）または（８）記載の白血球除去フィルター。
（１０）前記フィルター材の上流側に微小凝集物除去のためのプレフィルター材を含む（７）〜（９）記載の白血球除去フィルター。

アミノ基修飾オリゴ糖含有ポリウレタンを表面に有する平均繊維直径が１．０〜２．５μｍのフィルター材を含む白血球除去フィルターが従来のフィルターに比べて高い白血球除去性能を達成できることが分かった。

本発明について、以下具体的に説明する。本発明の白血球除去用フィルター材とは、血液中の白血球は捕捉するが他の血液成分、即ち赤血球、血漿は捕捉しないフィルター材である。

白血球除去フィルター材の形状は、液層で血液との接触を行うために接触頻度の観点から表面積が大きいことが望ましい。例えば、不織布、繊維状、綿状、などの繊維状構造体、スポンジ等の高分子多孔質体、あるいはビーズ状、ゲル状等の構造が挙げられる。特に白血球の吸着性、分離材としての取り扱い性からみて、織布、不織布が好ましく、中でも白血球との多点的な接触が可能である点で不織布が最も好ましい。 なおここで不織布とは、編織によらずに繊維或いは繊維の集合体が、化学的、熱的、または機械的に結合された布状のものをいう。繊維と繊維とが互いに接触することによる摩擦により、或いは互いにもつれ合うことなどにより一定の形状を保っている場合、機械的に結合されたことに含める。

白血球選択除去フィルター材を構成するフィルター支持基材は、血球にダメージを与えにくいものであれば特に制限はなく、例えば、ポリエステル、ポリオレフィン、ポリアクリロニトリル、ポリアミド、ポリスチレン、ポリアルキル（メタ）アクリレート、ポリ塩化ビニル、ポリクロロプレン、ポリウレタン、ポリビニルアルコール、ポリビニルアセテート、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリブタジエン、ブタジエン−アクリロニトリル共重合体、スチレン−ブタジエン共重合体、エチレン−ビニルアルコール共重合体、セルロースジアセテート、エチルセルロース等が挙げられる。好ましくはポリエステル、ポリオレフィンで、特に好ましくはポリエステルである。

本発明のフィルター材は、平均繊維直径が１．０〜２．５μｍであることを特徴とする。白血球除去能力の観点から、平均繊維直径は、２．０μｍ以下であることが好ましく、更に好ましくは１．７μｍ以下である。しかしながら、１．０μｍ未満のものは、安定して不織布を製造することが難しく、血液の粘性抵抗も高くなりすぎるために不適である。一方、２．５μｍを超えるものは、本発明のフィルターに用いる主フィルター要素として用いるには、白血球除去能力が低いため不適である。

なお、本発明における平均繊維直径とは、以下の手順に従って求められる値をいう。即ちフィルター要素の一部をサンプリングし、走査電子顕微鏡写真を撮り、無作為に選択した１００本以上の繊維の直径を測定し、それらを数平均して得られた値である。

ポリマーのフィルター支持基材へのコーティング方法はフィルター支持基材の細孔を著しく閉塞することなく、かつフィルター支持基材表面がある程度の範囲にて均一にコーティングできるものであれば特に制限はなく各種の方法を用いることができる。例えば、ポリマーを溶かした溶液にフィルター支持基材を含浸させる方法、ポリマーを溶かした溶液をフィルター支持基材に吹き付ける方法、ポリマーを溶かした溶液をグラビアロール等を用いフィルター支持基材に塗布・転写する方法、などが挙げられるが、本発明のコーティング方法は上記例示に限定されるものではない。この中でもポリマーを溶かした溶液にフィルター支持基材を含浸させる方法が連続生産性に優れ、コストも低いことから好ましい方法である。

コーティングの際のポリマーを溶解する溶剤としては、フィルター支持基材を著しく溶解させないものであれば特に限定はなく、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類、ジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなどのアルコール類、アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン類、酢酸メチル、酢酸エチルなどのエステル類、トルエン、シクロヘキサンなどの炭化水素類、クロロホルム、ジクロロメタンなどのハロゲン化炭化水素類、水、及び上記の複数の溶剤の可溶な範囲での混合物などが挙げられるが、本発明のポリマーを溶解する溶剤は上記例示に限定されるものではない。

コーティングポリマーは、下記一般式［１］：

で表されるアミノ基修飾オリゴ糖含有ポリウレタンが好ましい。

上記一般式［１］において、Ｒ¹は、置換基を有していてもよい炭素数１〜１６の２価の炭化水素基である。

上記「置換基を有していてもよい炭素数１〜１６の２価の炭化水素基」の「炭素数１〜１６の２価の炭化水素基」としては、
（１）直鎖または分岐鎖の炭素数１〜１６の２価の脂肪族炭化水素基［例、直鎖または分岐鎖の炭素数１〜１６のアルキレン基（例、メチレン、エチレン、テトラメチレン、ペンタメチレン、ヘキサメチレン、オクタメチレン、ヘキサデカメチレンなど）、直鎖または分岐鎖の炭素数２〜１６のアルケニレン基（例、ビニレン、プロペニレンなど）、炭素数３〜１６のシクロアルキレン（例、シクロヘキシレン）など］、および
（２）炭素数６〜１４の２価の芳香族炭化水素基［例、炭素数６〜１４のアリーレン基（例、フェニレン、ナフチレン、ビフェニレンなど）など］、ならびに
（３）前記直鎖または分岐鎖の炭素数１〜１６の２価の脂肪族炭化水素基から選ばれる少なくとも１つの基および炭素数６〜１４の２価の芳香族炭化水素基から選ばれる少なくとも１つの基を含み、炭素数の合計が７〜１６の範囲内である炭化水素基（例、式

で表される基など）
などが挙げられる。

上記「置換基を有していてもよい炭素数１〜１６の２価の炭化水素基」の「置換基」としては、例えば、
（１）炭素数１〜６のアルキル基（例、メチルなど）；
（２）炭素数３〜８のシクロアルキル基（例、シクロヘキシルなど）；
（３）炭素数６〜１４のアリール基（例、フェニルなど）；
などが挙げられる。これらの置換基は、上記「炭素数１〜１６の２価の炭化水素基」の置換可能な位置に、同一または異なって、１〜８個、好ましくは１〜４個置換することができる。

Ｒ¹の具体例としては、例えば、テトラメチレン基、ペンタメチレン基、ヘキサメチレン基、オクタメチレン基、ヘキサデカメチレン基、ビニレン基、プロペニレン基、フェニレン基、ナフチレン基、フェニルメチレン基、フェニルエチレン基、ビフェニル基、ビスフェニルメチレン基、ビスフェニルエチレン基、フェニレン基（例、パラフェニレン基）、キシリレン基、テトラメチルキシリレン基、トリレン基、ジシクロヘキシルメチレン基、
式

で表される基などが挙げられ、ビスフェニルメチレン基、フェニルメチレン基およびヘキサメチレン基が好ましい。

一般式［１］において、Ｒ²は、炭素数２〜１２のオキシアルキレン基および置換基を有していてもよい炭素数２〜１２の２価の炭化水素単位から選ばれる同一または異なる単位を合計１〜１００単位含有する２価の基である。

このようなものとしては、例えば、炭素数２〜１２のオキシアルキレンから選ばれる同一または異なる単位を合計１〜１００単位含有する２価の基、置換基を有していてもよい炭素数２〜１２の２価の炭化水素単位から選ばれる同一または異なる単位を合計１〜１００単位含有する２価の基、または炭素数２〜１２のオキシアルキレン単位および置換基を有していてもよい炭素数２〜１２の２価の炭化水素単位から選ばれる同一または異なる単位を合計１〜１００単位含有する２価の基であってよい。

上記「炭素数２〜１２のオキシアルキレン単位および置換基を有していてもよい炭素数２〜１２の２価の炭化水素単位から選ばれる同一または異なる単位を合計１〜１００単位含有する２価の基」は、例えば、式−（ＢＯ）_h-1−Ｂ−で表される単位および式−（Ｅ）_i−で表される単位（式中、Ｂは、少なくとも１種の炭素数２〜１２のアルキレン単位を表し、Ｅは、少なくとも１種の、置換基を有していてもよい炭素数２〜１２の２価の炭化水素単位から選ばれる同一または異なる単位を表し、ｈおよびｉは、それぞれ１≦ｈ≦１００、１≦ｉ≦１００の整数である。）から選ばれる同一または異なる単位を合計１〜１００単位含有する２価の基である。

上記式−（ＢＯ）_h-1−Ｂ−で表される単位におけるＢの「炭素数２〜１２のアルキレン基」は直鎖であっても分岐していてもよく、また、当該単位中にＢが複数存在する（２≦ｈ≦１００の場合）、Ｂは１種でもよいし、２種以上でもよい。ＢＯの具体的なものとしては、例えば、エチレンオキシ基、プロピレンオキシ基、トリメチレンオキシ基、ブチレンオキシ基、テトラメチレンオキシ基などのアルキレンオキシ基を挙げることができ、式−（ＢＯ）_h-1−Ｂ−で表される単位の具体例としては、例えば、式−ＣＨ₂−ＣＨ₂−Ｏ−ＣＨ₂−ＣＨ₂−ＣＨ₂−で表される単位などが挙げられる。

上記式−（Ｅ）_i−で表される単位において、Ｅで表される「置換基を有していてもよい炭素数２〜１２の２価の炭化水素単位」における２価の炭化水素単位は直鎖であっても分岐していてもよく、また飽和基であっても不飽和基であってもよく、例えば、炭素数２〜１２のアルキレン（例、エチレン、トリメチレン、テトラメチレン、ヘキサメチレン、ノナメチレンなど）、炭素数２〜１２のアルケニレン（例、ブタジエニレン、ブテニレンなど）などが挙げられる。また、当該「炭素数２〜１２の２価の炭化水素単位」が有していてもよい「置換基」としては、例えば、ハロゲン原子（例、フッ素原子など）、炭素数１〜６のアルキル基（例、メチルなど）などが挙げられる。当該単位中にＥが複数存在する（２≦ｉ≦１００の場合）、Ｅは１種でも、２種以上でもよい。

このような式−（Ｅ）_i−で表される単位の具体的なものとしては、例えば、エチレン基、トリメチレン基、テトラメチレン基、ヘキサメチレン基、ノナメチレン基、−ＣＨ₂−ＣＦ₂−ＣＦ₂−ＣＦ₂−ＣＦ₂−ＣＨ₂−基、ブタジエニレン基、水添ブタジエニレン基、水添イソプレンの両鎖端の炭素原子から水素原子を１個ずつ除いて誘導される基などの２価の基などが挙げられる。

また、Ｒ²は、上記式−（ＢＯ）_h-1−Ｂ−（式中、Ｂおよびｈは上記のとおりである）で表される単位および／または式−（Ｅ）_i−（式中、Ｅおよびｉは上記のとおりである）で表される単位から選ばれる単位に加えて、さらに他の繰り返し単位［例えば、エチレンアジペート基、プロピレンアジペート基、ブチレンアジペート基、ヘキサメチレンアジペート基、ネオペンチルアジペート基などのアルキレンエステル基、ヘキサメチレンカーボネート基などのアルキレンカーボネート基、開環カプロラクトン基、ポリ（ジメチルシロキシ）ジメチルシリル基などの繰り返し単位］を含有していてもよい。

このような単位を含有するＲ²の具体例としては、ポリエチレンアジペートジオールなどから両端のＯＨを除いた２価の基、ポリ（ジメチルシロキシ）ジメチルシリル−ｎ−プロピルビスエトキシ基などが挙げられる。

Ｒ²の具体例としては、エチレンオキシ基、プロピレンオキシ基、エチレンアジペート基、プロピレンアジペート基、ヘキサメチレンカーボネート基、開環カプロラクトン基などの繰り返し単位を有する２価の基、トリメチレン基、テトラメチレン基、−ＣＨ₂−ＣＦ₂−ＣＦ₂−ＣＦ₂−ＣＦ₂−ＣＨ₂−基、水添ブタジエニレン基、水添イソプレンの両鎖端の炭素原子から水素原子を１個ずつ除いて誘導される２価の基、ポリジメチルシロキシジメチルシリル−ｎ−プロピルビスエトキシ基などが好ましい。

一般式［１］におけるＲ³は、炭素数２〜４のアルキレン基である。具体的には、例えば、エチレン基、トリメチレン基、テトラメチレン基などを挙げる事ができる。これらのうち、エチレン基、トリメチレン基が好ましく、エチレン基がより好ましい。

一般式[１]におけるＲ⁴は、炭素数２〜４のアルキレン基である。具体的には、例えば、エチレン基、トリメチレン基、テトラメチレン基などを挙げる事ができる。これらのうち、エチレン基、トリメチレン基が好ましく、エチレン基がより好ましい。

一般式[１]におけるＯＬＳは、オリゴ糖の骨格を表す。オリゴ糖の骨格とは、オリゴ糖より全ての水酸基部分を除いた残基である。本発明で用いられるオリゴ糖としては、一級水酸基を２個有するオリゴ糖であれば特に限定されず、二糖、三糖、四糖のいずれであってもよく、例えば、具体的には、トレハロース、マルトース、ラクトース、セロビオースなどの二糖や、特開２００３−１６０５９５公報等に記載されている、サイクロ｛→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→｝などの環状四糖などが挙げられる。そのなかでも、環状四糖が白血球除去率の点から好ましい。
一般式[１]におけるｒは、オリゴ糖の二級水酸基の総数を表し、例えば、ＯＬＳが二糖、三糖、四糖の場合は、ｒはそれぞれ６、９、１２となり、ＯＬＳが環状四糖の場合は、ｒは１０となる。

一般式[１]において、ｐは、二塩基酸とジアミンで修飾された、オリゴ糖の二級水酸基（式−Ｏ₂Ｃ−Ｒ³−ＣＯ−ＮＨ−Ｒ⁴−ＮＲ⁵ ₂で表される基；Ｒ³およびＲ⁴は上記で定義したとおりである）の数を表し、１≦ｐ≦ｒの範囲の整数である。

一般式[１]において、ｑは、二塩基酸で修飾されたオリゴ糖の二級水酸基（式ＨＯ₂Ｃ−Ｒ³−ＣＯ₂−で表される基；Ｒ³は上記で定義したとおりである）の数を表し、０≦ｑ≦ｒ−１の範囲の整数を表す。

一般式[１]における、ｍ、ｎは繰り返し単位数であり、ｍは０〜１０００、ｎは１〜１０００の整数を表し、ｎ／（ｍ＋ｎ）は０．０１〜１．００の範囲であり、親水性、ポリマー強度、ポリマー成形性のバランスの観点から好ましくは０．０２〜０．８０の範囲の数である。なお、一般式[１]における繰り返し単位の配列は、規則的であっても不規則的であってもよい。

本発明で用いる一般式[１]で表されるアミノ基修飾オリゴ糖含有ポリウレタンは、例えば合成例１〜３の方法によって製造することができる。

本発明の白血球除去フィルターは、本発明のフィルター材を含むフィルター材を、少なくとも、液の導入口及び導出口を持つ容器内に適切に充填した装置である。前記容器は、球、コンテナ、カセット、バッグ、チューブ、カラム等、任意の形態をとりうるが、好ましい具体例としては、例えば、容量約０．１〜１０００ｍｌ程度、直径約０．１〜１５ｃｍ程度の透明または半透明の円柱状容器、あるいは一片の長さ０．１ｃｍ〜２０ｃｍ程度の正方形あるいは長方形で、厚みが０．１ｃｍ〜５ｃｍ程度の四角柱状の形態等が挙げられる。フィルター材は、白血球含有液の流れ方向に１個又は複数個積層して容器内に充填してもよい。本発明の白血球除去フィルター装置は、そのフィルター材の上流側及び／又は下流側に他のフィルター材をさらに含んでいてもよい。

一般に、白血球含有液には微小凝集物が含まれている場合が多い。このような微小凝集物が多く含まれている白血球含有液から白血球を除去するために、プレフィルターを使用することが好ましい。プレフィルターとしては、平均繊維径が３μｍ〜５０μｍの繊維の集合体や平均孔径２０μｍ〜２００μｍの細孔を有する連続多孔質体などが好ましく用いられる。

以下、実施例に基づいて、本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。

＜アミノ基修飾オリゴ糖含有ポリウレタンの合成＞
以下、実施例に使用するモノマー化合物を次のように略称する。

ＣＴＳ＝環状四糖サイクロ｛→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→｝
ＭＤＩ＝メタンジフェニルジイソシアネート
ＰＰＧ７＝ポリプロピレングリコール（分子量７００）
ＳＵＣ＝コハク酸無水物
ＩＰＡ＝３−イミダゾールプロピルアミン

（合成例１）
ＭＤＩ−ＰＰＧ７−ＣＴＳ（モル比２／１／１）ポリウレタンの合成
メカニカルスターラーを装着した４口フラスコ（窒素ガス置換済み）にメタンジフェニルジイソシアネート(７．７ｇ) とジメチルアセトアミド(１７５ｍｌ)を入れ、攪拌しながら、室温においてポリプロピレングリコール（平均分子量７００、１０．８０ｇ）を加え、１時間反応させた。次にこの反応液に特開２００３−１６０５９５公報等に記載の方法によって得られた、ＣＴＳ(１０．００ｇ)を加え、この温度で６時間反応させた。反応溶液を濃縮後、水（１０００ｍｌ）に投入し、生成物を析出させ、濾過、水で洗浄後、真空乾燥して生成物を得た（収率７３％）。

そのプロトンＮＭＲにより目的物であることを確認した。
プロトンＮＭＲプロトン（溶媒：重ジメチルスルホキシド）
１．０５、１．２０； ＣＨ₃−
３．２０−３．８０； −Ｏ−ＣＨ−ＣＨ₂−Ｏ−、−ＣＨ₂−、−ＣＨ−
３．８６ ； −ＣＨ₂−
４．３０−５．００； −Ｏ−ＣＨ−Ｏ−、−ＯＨ
７．１６、７．４３； −Ｃ₆Ｈ₄−
８．６５、９．６０； −ＮＨ−ＣＯ−

（合成例２）
ＭＤＩ−ＰＰＧ７−ＣＴＳ（モル比２／１／１）−５ＳＵＣポリウレタンの合成
メカニカルスターラーを装着した４口フラスコ（窒素ガス置換済み）に合成例１にて得られたＭＤＩ−ＰＰＧ７−ＣＴＳポリウレタン(０．８０ｇ) をジメチルホルムアミド(２５ｍｌ)に室温において溶解させた。次にこの反応液にジメチルアミノピリジン (０．０２５ｇ)を加え、攪拌しながら、コハク酸無水物（０．２３ｇ）を加え、７０℃で５時間反応させた。反応溶液を濃縮後、水(７５ｍｌ)に投入し、生成物を析出させ、１Ｍ−塩酸を３滴加えた。沈殿を濾過、水で洗浄後、８０℃で真空乾燥して生成物を得た（収率６０％）。
そのプロトンＮＭＲにより目的物であることを確認した。

（合成例３）
ＭＤＩ−ＰＰＧ７−ＣＴＳ（モル比２／１／１）−５ＳＵＣ−５ＩＰＡポリウレタンの合成
メカニカルスターラーを装着した１口フラスコ（窒素ガス置換済み）に合成例２にて得られたＭＤＩ−ＰＰＧ７−ＣＴＳ−５ＳＵＣポリウレタン(１．００ｇ)とジメチルホルムアミド(８ｍｌ)を入れ、室温において攪拌しながら完全に溶解させた。次にこの溶液にメタノール（２７ｍｌ）、を加えた後、４（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロリド（ＤＭＴ−ＭＭ）（１．５６ｇ）のメタノール（２７ｍｌ）溶液を滴下した。次に３−イミダゾールプロピルアミン（０．７１ｇ）を加え、１２時間反応させた。反応溶液を濃縮後、エタノールを１２５ｍｌ投入し、生成物を析出させ、上澄みをデカンテーションで除去後、さらにエタノールを５０ｍｌ添加し沈殿を粉砕線状後、濾過、真空乾燥して生成物を得た０．６２ｇ（収率５６％）。

そのプロトンＮＭＲにより目的物であることを確認した。

プロトンＮＭＲ（溶媒：重ジメチルスルホキシド）
１．０５、１．２０； ＣＨ₃−
２．５０−２．６０； −ＯＣＯ−ＣＨ₂−ＣＨ₂−ＣＯＯ−
３．２０−３．８０； −Ｏ−ＣＨ−ＣＨ₂−Ｏ−、−ＣＨ₂−、−ＣＨ−
３．８６ ； −ＣＨ₂−
４．３０−５．００； −Ｏ−ＣＨ−Ｏ−、−ＯＨ
６．５０ ； −ＮＨ−ＣＯ−
７．１６、７．４３； −Ｃ₆Ｈ₄−
８．６５、９．６０； −ＮＨ−ＣＯ−

＜不織布＞
メルトブロー法で作製した以下のポリエチレンテレフタレート（以下ＰＥＴと略す）不織布を使用した。
プレフィルター材：平均繊維直径１５μｍ、目付け３０ｍ²／ｇのＰＥＴ不織布
主フィルター材Ａ：平均繊維直径１．７μｍ、目付け７０ｍ²／ｇのＰＥＴ不織布
平均繊維直径１．２μｍ、目付け７０ｍ²／ｇのＰＥＴ不織布
主フィルター材Ｂ：平均繊維直径１．７μｍ、目付け３０ｍ²／ｇのＰＥＴ不織布
平均繊維直径１．２μｍ、目付け３０ｍ²／ｇのＰＥＴ不織布

＜コーティング溶液調製＞
・ＭＤＩ−ＰＰＧ７−ＣＴＳ（モル比２／１／１）−５ＳＵＣ−５ＩＰＡポリウレタン（以下ＰＵと略す）を濃度が０．１重量/容量％になるようにエタノール／水（容量比９／１）に溶解し、ＰＵコーティング溶液を調製した。
・２−ヒドロキシエチルメタアクリレートとＮ，Ｎ−ジエチルアミノエチルメタアクリレートから成る共重合体（以下ＰＭＡと略す）を濃度が０．１重量/容量％になるようにエタノールに溶解し、ＰＭＡコーティング溶液を調製した。

＜不織布コーティング＞
各不織布を各コーティング溶液に２０℃にて５分間浸漬した後、ステンレス製バスケットに入れ、５０℃にて１．５時間乾燥した。続いて、各不織布を水洗した後、ステンレス製バスケットに入れ、５０℃にて３時間乾燥した。

＜不織布ディスク作製＞
ポンチを用いてコーティング処理された各不織布を直径９ｍｍの円形に打抜き、ディスク状のプレフィルター材、主フィルター材Ａ、主フィルター材Ｂを作製した。

＜パッキン作製＞
シリコンチューブ（外径１０ｍｍ、内径７ｍｍ）を巾５ｍｍにカットしてシリコンパッキンを作製した。

（実施例１）
樹脂製注射器（テルモ製、ＳＳ−０２ＳＺ、容量２．５ｍｌ）シリンダ部にパッキンを1個先端まで挿入し、次に導入口側から導出口側へ順に、ＰＵコーティングを施したプレフィルター材、主フィルター材Ａ、主フィルター材Ｂを各々表１に示す枚数挿入し、最後にパッキン1個を挿入してピストンでしっかり押し込んだ後、ピストンを抜いてフィルターを作製した。

（実施例２〜４）
ＰＵコーティングを施したプレフィルター材、主フィルター材Ａ、主フィルター材Ｂを各々表１に示す枚数用いた以外は、実施例１と同様にして、フィルターを作製した。

＜フィルター評価＞
ヒト血液１００ｍＬを採血して、抗凝固剤として１０ｍＬのＡＣＤ−Ａ液（テルモ製、組成：クエン酸ナトリウム２２ｇ／Ｌ、クエン酸８ｇ／Ｌ、ブドウ糖２２ｇ／Ｌ）を入れた血液容器に加え血液試料を調製した。
その血液試料３．５ｍＬを樹脂製注射器で採取し、空気を抜いた後、実施例１〜４にて得られたフィルターとシリコンチューブ（外径４ｍｍ、内径４ｍｍ）で連結し、シリンジポンプにセットした。室温にて０．５ｍＬ／ｍｉｎの一定流速で試料を流し、受器で濾過血液を３ｍＬ回収した。

濾過前の白血球濃度、濾過前後の赤血球濃度、血小板濃度は血球カウンター（シスメックス（株）製、Ｋ−４５００）を用いて測定し、濾過後の白血球濃度はＬｅｕｃｏＣＯＵＮＴキットおよびＦＡＣＳＣａｎｔｏ（共にベクトン・ディッキンソン社）を用いて、フローサイトメトリー法にて測定した。

白血球除去率（−Ｌｏｇ）、赤血球回収率（％）、及び血小板除去率（％）は、
ａ＝濾過前血液の白血球濃度、ｂ＝濾過後血液の白血球濃度、ｃ＝濾過前血液の赤血球濃度、ｄ＝濾過後血液の赤血球濃度、ｅ＝濾過前血液の血小板濃度、ｆ＝濾過後血液の血小板濃度とするとき、それぞれ、
白血球除去率＝−Ｌｏｇ(ｂ／ａ)
赤血球回収率＝ｄ／ｃ×１００（％）
血小板除去率＝ｆ／ｅ×１００（％）
で表される式によって求めた。結果を表１に示した。

（比較例１）
ＰＭＡコーティングを施したプレフィルター、主フィルターＡ、主フィルターＢを各々表１に示す枚数用いた以外は、実施例１と同様にしてフィルターを作製した。作製したフィルターについて評価を行い、結果を表１に示した。

（比較例２）
市販されている旭化成メディカル社の白血球除去フィルター（セパセルＲＺ−１０００）の不織布を表１に示す枚数用いた以外は、実施例１と同様にして、フィルターを作製した。作製したフィルターについて評価を行い、結果を表１に示した。

（比較例３）
コーティングを施していないプレフィルター、主フィルターＡ、主フィルターＢを各々表１に示す枚数用いた以外は、実施例１と同様にして、フィルターを作製した。作製したフィルターについて評価を行い、結果を表１に示した。

表１の結果から、ＰＵ（アミノ基修飾オリゴ糖含有ポリウレタン）をコーティングしたフィルターは現行品（比較例２）よりも高い白血球除去率、赤血球回収率を有していることが分かる。また、ＰＭＡをコーティングしたフィルター(比較例１)やコーティング無しのフィルター（比較例３）と比較しても高い白血球除去率が得られ、アミノ基修飾オリゴ糖含有ポリウレタンが、優れた選択的白血球除去性能（−Ｌｏｇ５．３８）を有していることが示された。

Claims (10)

1. 下記一般式［１］で表されるアミノ基修飾オリゴ糖含有ポリウレタンを少なくとも表面に有する平均繊維直径が１．０〜２．５μｍの白血球除去フィルター材。
   一般式［１］：
   

   

   ［式中、Ｒ¹は、置換基を有していてもよい炭素数１〜１６の２価の炭化水素基を表し、
   Ｒ²は、炭素数２〜１２のオキシアルキレン単位および置換基を有していてもよい炭素数２〜１２の２価の炭化水素単位から選ばれる同一または異なる単位を合計１〜１００単位含有する２価の基を表し、Ｒ³は、炭素数２〜４のアルキレン基を表し、Ｒ⁴は、炭素数２〜４のアルキレン基を表し、
   Ｒ⁵は、炭素数１〜３の１価の炭化水素基または炭素数４〜６の複素環残基を表し、
   ＯＬＳは、一級水酸基を２個有するオリゴ糖の骨格を表し、
   ｒはオリゴ糖の二級水酸基の総数を表し、
   ｐおよびｑはそれぞれ１≦ｐ≦ｒ、０≦ｑ≦ｒ−１の範囲の整数を表し、
   ｍ、ｎはそれぞれ繰り返し単位数であり、ｍは０〜１０００、ｎは１〜１０００の整数を表し、ｎ／（ｍ＋ｎ）は０．０１〜１．００の範囲の数である。］
2. Ｒ³が、エチレン基である、請求項１記載の白血球除去フィルター材。
3. Ｒ⁴が、エチレン基、プロピレン基である、請求項１または２記載の白血球除去フィルター材。
4. Ｒ⁵が、エチレン基、プロピレン基、ブチル基、ピロリジン残基、ピペリジン残基、ピペラジン残基、モルホリン残基、ピリジン残基、イミダゾール残基である、請求項１〜３記載の白血球除去フィルター材。
5. オリゴ糖が、トレハロース、マルトースまたはラクトースである、請求項１〜４記載の白血球除去フィルター材。
6. オリゴ糖が、サイクロ｛→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→｝である、請求項１〜５記載の白血球除去フィルター材。
7. 請求項１〜６記載のフィルター材を、液の導入口及び導出口を持つ容器内に充填したことを特徴とする、白血球除去フィルター。
8. 前記フィルター材が流れ方向に複数個積層されている請求項７記載の白血球除去フィルター。
9. 前記フィルター材の上流側及び／又は下流側に他のフィルター材をさらに含む請求項７または８記載の白血球除去フィルター。
10. 前記フィルター材の上流側に微小凝集物除去のためのプレフィルター材を含む請求項７〜９記載の白血球除去フィルター。