JPS6357591A - 新規化合物、その製法及びそれを含む医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は微生物から得ることができる新規な殺虫的に活
性な物質に関し、それらの製造方法に関し、これらを含
有する製薬配合物に関しそしてヒト医薬または獣医薬に
おいてのそれらの使用に関する。

従来の技術 特に土壌サンプルから、多数の微生物が単離され、これ
らの微生物の成る揮のものは、単離されることが出来る
種々の代謝物質を生じ、−ｆ：の物質へ の戚るものは有用な生物学的活性を有することが分かっ
た。七のような代謝物質の一つのグループはミルベマイ
７７類でらり、これらはストレプトミセス属（ｇｅｎｕ
ｓ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｅｅｓ）　　の微生物の培養に
よりつくられヤして取シ分け、ＧＢ−Ａ−１，３９０゜
３３６、Ｊ、　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃａ　２９（３）、
　７６−１４〜７６−１６及び２９（６）、７６−３５
〜７６−４２　ＵＳ−Ａ−４，１４４，３５２及びＧＢ
−Ａ−２０５６９８６に匹己載てれている。

α７リーズのミルベヤ４ンンは式囚 （式中、ｇａはメチル、エチルまたはイソプロピルであ
る）の化合物を包含する。ＩＪ　Ｓ　−Ａ−４，１４４
，３５２においてこれらの及び関連の化合物が殺虫活性
を有することを開示している。

種々のミルベマイシン誘導体り（ＵＳ−Ａ−４，０９３
゜６２９及びＵＳ−Ａ−４，１３４，９７３ｖｃｍ示さ
れている。

ＥＰ−人−０１７０００６及びＧＢ−Ａ−２１６６４３
６は式Ｂ ＲＤ （式中、１２ｂはヒドロキシまたはメトキシであシそし
てＲｃはメチル、エチルまたはイソプロピルである）の
６種の別の化合物を開示している。これらの化合物はま
たストレプトミセス属の微生物の培養につくられそして
駆虫活性を有することが記載されている。

本発明の記載 ストレプトミセス属微生物の培養により得ることが出来
る新しいグループの化合物を本発明者は見出した。これ
らの化合物は駆虫的性質を有しそしてしたがってヒト及
び動物における寄生虫病の治療において有用である。

したがって本発明は式（り ａ （式中Ｒ１は水素またはメチルであシ、Ｒ２は水素また
はＲ２−メチル２−ブテノイルオキシであシそしてＲ３
は水素またはヒドロキシであり、但し１ｍが水素である
場合８１及びＲ２は両方とも水素であシそしてＲ３がＲ
２−メチル　２−ブテノイルオキシである場合８１はメ
チルであることを条件とする）の化合物を提供する。

式（１）の化合物は下記表■において列挙される。

表Ｉ 別の面の本発明は式（ＩＩ） の化合物であるＶＭ４４８６７　　を提供する。

さらに別の面の本発明は式（１） の化合物であるＶＭ４４８６Ｂ　　を提供する。

本発明の化合物を特徴づけるデータは下記の実施例にお
いて挙げられている。

本発明はまた、生産性微生物を培養しそして次にカルチ
ャから本化合物またはその誘導体を単離することを特徴
とする本発明の化合物またはその誘導体の製造方法を提
供する。

さらに本発明は他の物質との混合状態にある本化合物ま
たはその誘導体の溶液から本化合物またはその誘導体を
、本化合物またはその誘導体を含む分画と他の分画とに
クロマトグラフィ処理により分離することを特徴とする
本発明の化合物またはその誘導体を製造する方法を提供
する。

本明細書において用いられるものとして用語“培養（ｃ
ｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ）　　”　（及びその用語の誘導
語）とは炭素、窒素、硫黄及びミネラル塩同化可能な源
の存在下生物の好気性増殖を意味する。そのような好気
性増殖は固体または半固体栄養培地中においてま之に栄
文分が浴ｍ烙れているかまたは懸濁されている液体培地
中において起こる可能性がめる。用務は好気性表面上で
または浸漬されたカルチャにより起る可能性がある。栄
養培地は複合栄養素からｇ成でれてもよいしまたは化学
的に規定されてもよい。

本発明による培養方法において使用するためのｉ！ろな
微生物は本発明による化合物をつく９出すことが出来る
ストレプトミセス属に属する細菌株を包含することが汁
かった。さらにそのような田株の例は土１から単離され
たストレプトミセスＥ２２５、そしてまた七の突然変異
体及び自然変異体、例えばストレプトミセスＥ２２５Ｂ
を包含する。

本明細書において用いられるものとして用語１突然変異
体（ｒｎｕＬａｎｔ）”は、突然ｌこ生ずるあるいは外
部薬剤が慎重に適用されるまだは他のようにされるその
外部薬剤の作用により生ずるすべての突然変異体株を包
含する。突然変異体株を生産する適当な方法は１９７３
年ウィーンで開かれたンンボジウムのインターナショナ
ルアトミックエナージーオーソリティ（Ｉｎｔｅｒｎａ
ｔｉｏｎａｌ　ＡｔｏｍｉｃＥｎｓｒｇｅｒｇｙ　Ａｕ
ｔｈｏｒｉｔｙ）　の議事録第２４１頁の１ラジエーシ
ヨンアンドラジオアイソトープスフオーインダストリア
ルミクロオルガニズム（Ｒａｄｉａｔｌｏｎ　ａｎｄ　
Ｒａｄｉｏｉｓｏｔｏｐｅｓ　　ｆｏｒ　　Ｉｎｄｕｓ
ｔｒｉａｌＭｉｅｒｏｏｒｇａｎｉａｍｓ）　”におけ
る”テクニクスフオーザデベロップメントオブミクロオ
ルガニズム（Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　
Ｄ＠ｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆＭｉ　ｃｒｏｏｒｇａｎ
ｉ　ａｍ）　”’においてエッチ、アイ、アドラ−（Ｈ
，１，Ａｄｌｅｒ）により略述された方法を包貧しそし
てこれらの方法は下記の方法を包含する：（１）　　イ
オン化照射線（例えばＸ線及びγ丙）。

紫外光線、紫外光線プラス増感剤（例えば、８−メトキ
シブソラレン）、亜硝酸、ヒドロキシルアミン、ピリミ
ジン塩基類似体（例えば５−ブロモウラシル）、アクリ
ジン、アルキル化剤（例えばマスタードガス。

メタンスルホン酸エチル）、過酸化水素、フェノール、
ホルムアルデヒド、ニトロソグアニジン、熱及び （１１）例えば、組み換え、形質転換、形質導入、浴原
化、浴原変換、原形黄体融合及び突然変異体の選択技術
を包含する遺伝学技術。

ストレプトミセスＥ２２５及びストレプトミセスＥ２２
５Ｂはストレプトミセス属において今までに報告てれて
いない菌株を包含すると信じられそしてしたがって、ざ
らに特定的には生物学的に純粋な形で本発明の１部分を
形成する。それらの薗ハスコツトランドアペルゾーン（
Ａｂｅｒｄｅｅｎ）　（Ｄサーナ／ヨナル・コレクショ
ン・オブ・インダストリアル・アンド・マリン・バクテ
リア（ｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌ　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ
　ｏｆ　Ｉｎｄｕａｔｒｉａｌ　ａｎｄ　Ｍａｒｉｎｅ
Ｂａｅｔｅｒｉａ）において寄託され、その寄託（ＮＣ
ＩＢ１２３１０：寄託日１９８６年７月２３日及びＮＣ
Ｉ　Ｂ１２５０９：寄託日１９８７年７月２０日）は特
許手続の目的のための微生物の寄託の国際的承認につい
てのブダペスト条約の名の元になされた。

ストレプトミセスＥ２２５の特徴は下記のとおりである
： ２７℃で７〜１４日間でんぷんカゼイン寒てん培地上で
増殖した後、ストレプトミセスＥ２２５は菌糸が球状ま
たは桿状エレメントに破片分離しない黄褐色の栄養園糸
体、及び培養醒が熟成きれるにつれて灰色に変わる黄色
または白色気性菌糸体を生じた。培養菌は黄色可溶性着
色体を生じセして成るコロニーは黄色しずくをＶこじみ
だすことが観察された。担胞子体は真直なまたは屈曲性
の王な気性菌糸に沿って単一的にまたは対になって配列
されておシＸ性の輪生枝分かれの形跡はなくそして４〜
６巻きのうす巻きに終っている。若干の担胞子体はいぼ
状の外貌を表わし、一方では汁、゛すを経たｆ＠養陥は
胞子が集合した湿った黒色愼域を表わした。

ストレプトミセスＥ２５５はイースト−麦芽寒天培地上
では非胞子形成性であった＠ 生産性生物を培養するための発酵培地は適当には無機塩
と一緒に同化性炭素及び同化性窒素の源を含有する。窒
素の適当な源はイーストエ牟ス、大豆粉、肉エキス、綿
実粉、麦芽、蒸留乾燥可溶体、アミノ酸、蛋白質加水分
解物そしてアンモニウム及び硝酸塩窒素を包含する。適
当な炭素源はグルコース、ラクトース、マルトース、で
んぷん及びグリセロールを包含する。適当には培養菌培
地はまたアルカリ金属イオン（例えばナトリウム）、ア
ルカリ土類金属イオン（例えばカルシウム及びマクネシ
ウム）、ハロゲンイオン（例えば塩素イオン）、及び微
量元素（例えば鉄、亜鉛、銅、マンガン及びコバルト）
を包含する・ 培養は約２０〜３５℃、有利には２７〜２８℃の温度で
行なわれそして本発明の所望の化合物の最適な収量を得
るために培養菌は発酵の開始後の２〜３５日、有利には
約５〜２０日後に適当には回収される。

所望の化合物またはその誘導体は次に培養培地から単離
され処理されそして従来の技術を用いて精製されること
が出来る。

所望の生成物は菌糸体増殖からまたは培養液ｐ液から得
ることが出来る。したがって第１の単離工程については
例えば濾過または遠心分離により浦 発酵プロスから固体物質を分離して務澄な培養液ヂ液及
び固体物質を得ることを包含させるのが都（ス 合がよい０別法として発酵プロスｆ直接に抽出されるこ
とが出来る。

適当にはアセトンまたはヘキサンのような溶媒を用いて
、単離または精製処理において有機溶媒抽出工程を包含
させるのが都合がよい。

所望の化合物の追加の単離はクロマトグラフィーの技術
により都合よく行なわれることが出来る。

抽出液は追加の物質を含有してもよくそしてしたがって
クロマトグラフィー分離は複数の分画を生じ、そのうち
所望の分画（単数または複数）が所望の化合物またはそ
の誘導体を含む分画（単数または複数）であってもよい
。

所望の分画は駆虫的活性について試験することによりそ
して（または）各々の分画をクロマトグラフィ的に監視
することにより慣例的方法で容易に同定されることがで
きる。所望の分画（単数または複数）はそのよう表刃法
により所望の化合物またはその誘導体を含有するものと
して同定された分画でおる。

もし必要ならば繰り返えされたクロマトグラフィ分離は
慣例的方法で行なわれることが出来る。

分離処理の各々の段階で所望の化合物またはその誘導体
を含有する分画は合併されそして次に追加の精製工程に
付されてもよい。初期の分離工程において％駆虫的活性
を有する分画として所望の分画を同定しヤしてナベての
そのような分画を合併することが都合がよい。分離の後
の段階において存在する可能性があるすべての他の物質
から所望の化合物またはその誘導体分離するために所望
の分画（単数または複数）をさらに正確に同定すること
が必要である可能性がある。有利には所望の化合物また
はその誘導体から本質的になる一つまたはそれ以上の分
画を得るために分離を続けてもよい。

１所望の化合物またはその誘導体から本質的になる”と
いう表現はその分画に存在する唯一の成分としであるい
はその分画に存在する主要成分（他の成分が活性でろろ
うとまたは不活性不純物であろうと）として所望の化合
物またはその誘導体を含有する分画を意味する。“主要
成分”という表現は（溶媒を除いて）他の各成分に対し
て最も大きな量で存在する成分を意味する。適当には主
要成分は（溶媒を除いて）すべての他の成分の量の合計
よシ大きな量で存在する。さらに適当には活性物質の合
計量に対しであるいは活性であれまたは不活性であれそ
の分画に事情により存在する（溶媒を除いて）物質の合
計量に対して重量により、少なくとも６０チ、有利には
少なくとも７０％、好ましくは少なくとも８０％、特定
的には９０％〜１００チの量で主要成分は存在する。

代表的には本発明の化合物は本発明の２ねまたはそれ以
上の化合物の混合物から本質的になる分画が得られるよ
うにおたがいに混合状態で生成される口 （例えばンリカゲル６０カラムを用いて）シリカゲル上
でクロマトグラフィ分離を行なうことが都合よいことが
分かった。二回またはそれ以上のクロマトグラフィ分離
が続けて行なわれてもよい。

クロマトグラフィカラムの浴離は単独かまたはおたがい
に混合状態の有機溶媒、例えばヘキサン／アセト／、ジ
エチルエーテル／石油エーテルまた１、はメタノール／
クロロホルムを用いて行なわれるのが都合がよい。

本発明による化合物または化合物の混合物は、すべての
パーセンテージを重量／重量として計算して実質的に純
粋な形で、例えば少なくとも５０チの純度、適当には少
なくとも６０％の純度、有利には少なくとも７５チの純
度、好ましくは少なくとも８５チの純度、１らに好まし
くは少なくとも９５％の純度、特定的には少なくとも９
８％純度である。本発明による不純なまたはより純粋性
の少ない形の化合物は製薬的用途に適当であるより純粋
な形の同じ化合物またはよシ純粋な形の関連化合物（例
えば対応する誘導体の製造において使用されることが出
来る。

発明の効果 性質を有しそしてヒト及び農場動物を包含する）家畜化
され九動物を包含する哺乳動物のような動物における寄
生虫病の治療のために有用である。

したがって本発明はまた特に内部−及び外部−寄生虫感
染の治療のためにセして特に家畜及び農場動物を治療す
るためにヒトまたは動物体の治療において使用するため
に本発明による化合物を提供する。

用飴寄生虫病とは円虫、回虫、鉤虫、肺線虫フィラリア
、及びべん虫のような寄生性鴫虫類での感染により起む
されたヒトまたは動物のこれらの病気を包含する。本化
合物はまた土壌中に生ずるまた社植物に寄生する線虫に
対して使用されることができる。

本発明の化合物はまた節足動物に対して活性でう める。節足動物はパイティングばえ、し６み％雨きん虫
、ごきぶり及びのみのような虫、セしてダニ及びマダニ
のようなりモ型動物を包含する。

したがって、広い面の本発明は節足動物または線虫にあ
るいはそれらの周囲に本発明による化合物またはその誘
導体を適用することを特徴とする節足動物または口上感
染を撲滅する方法を提供する。

したがって本発明はエーロゾル配合物のような適当な担
体または賦形剤と一緒に本発明による化合物またはその
誘導体を含む殺虫′削組成物を提供する。

不発明はまた製薬的にまたは獣医薬的に許容できる担体
または賦形剤と−ｇに本発明による化合物または製薬的
に許容できるその誘導体を言む製薬または獣医薬組成物
を提供する。

本発明はまた必要とする患者に、有効な非口性量の、不
発明による化合物または製薬的に許容できるその誘導体
あるいは本発明による組成物を投与するととを特徴とす
る。動物、特にヒト及び家畜化哺乳動物の内部−及び外
部−寄生虫感染、特に寄生虫病の治療または予防方法を
提供する。

本発明による組成物は他の駆虫薬と同様な方法により、
ヒト医薬または獣医薬において使用するための任意の都
合のよい方法で配合されることが出来る。

適当な配合物でその薬は、（ペースト、水薬、丸薬、カ
プセルまたは錠剤として）経口的に、非経口的に経皮的
に、食物添加剤（例えば顆粒、ペレットまたは粉末）と
して動物に投与されてもよくめるいはエーロゾルスプレ
ー配合物としてつくられてもよい。

本発明の化合物はおたがい同志の混合物としてそして（
または）他の駆虫薬、殺虫剤、だに駆除薬または他の薬
理学的に活性な物質との混合物として配合されてもよい
。

適当には本組成物は１投与当シ動物の体重のｔ当υ０．
０１〜１００１１ＩＩ　の活性成分の投与量、さらに適
当には１投与当り０．１〜１０Ｍ１／に１Ｆの投与量を
与えるのに十分な物質からなる。

本発明による組成物は投与の方法に依存して（，１１１
１成物の全重量に基づいて）０．１重量％から、好まし
くは１．０〜６０重ｆ［−の本発明による化合物を含有
してもよい。

成る事情において、例えば動物の飼料に凍結乾燥発酵ブ
ロスを入れることにより粗製発酵プロスが投与されても
よい。

成る場合において駆虫薬とともに使用される従来の投与
規定に従って本発明の化合物を用いて感染されたまたは
潜在的に感染されたヒトまたは動物への投与を繰シ返す
ことが得策であることが認識されよう。

実施例 以下の実施例は本発明を例示する。

ａ）発酵 でんぷんカゼインの固体寒天プレート上で２７℃でスト
レプトミセスＥ２２５を増殖させた。寒天プレートから
取り出された増殖物の一部分を、２５０−エレンマイヤ
ーフラスコ中に含有する種培地（５０ｄ）を接種するの
に用いた。

４８時間２４０ｒ、ｐ、ｍで旋回振りまぜ器上で２７℃
でｎ段階を培養した。種培地は次の組成を有した。

成　　分　　　　　　　　　　　　　　　　　　量（ｇ
／ｌ）大豆粉　　　　　　　　　　　　　１０．０グリ
セロール　　　　　　　　　２０．０マルトース　　　
　　　　　　　　２，０微量元素混合物　　　　　　　
１０−ストック／リットル脱イオン水　　　　　　　　
　　　　１リツトルにする拾（大豆粉は英国マンチェス
ター、オルトトラフオード（Ｏｌｄ　Ｔｒａｆｆｏｒｄ
）のＢｒ１ｔｉｓｈ　Ａｒｋａｄｙ　Ｃｏ、　Ｌｔｄ。

によυ供給されたＡｒｋａｇｏｙ　５０であった）。

微量元素混合物は下記のものを含んだ：成　　分　　　
　　　　　　　　　　量（ｒ／ｌ　）ＣａＣ１ｔ２Ｈｔ
　Ｏ１０，０ ＭｇＣ１，６Ｈ，０１０，０ ＮａＣ１１０，０ ＦｅＣ１３３，０ ＺｎＣ１，０，５ ＣｕＣ１２２ＨｔＯＯ，５ Ｍｎ５Ｏ４４Ｈ２００，５ ＣＯＣＩ、　６Ｈ，ＯＯ，５ 媒地は減園化するまえにｐＨ６−５に調節された。

種段階の１部分（２ｄ）を、２５０ｍエレンマイヤーフ
ラスコ中に含有する発酵培地（５０ｄ）を接種するため
に用いた。発酵培地は下記の成分を含有した： 成　　分　　　　　　　　　　　　　−震−（Ｌｚｌシ
。

可溶性でんぷん　　　　　　　　　１０カゼイン（シグ
マＣ５８９０）　　　　　　１．０燐酸水素二カリウム
　　　　　　　　０．５硫酸マグネシウム　　　　　　
　　　０．５（フグ−ｆｃ５８９０は英国ドルセット（
Ｄｏｒｓｅｔ）、プーレ（Ｐｏｏｌｓ）のＳｉｇｍａ　
Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ、　Ｌｔｄ、により供給された
。シグマは商標である）。

培地は滅菌化のまえにｐＨ７，０に調節された。

発酵は１９日間２７℃で２４Ｏｒ、ｐ、ｍ、で旋回振り
まぜ器上で培養された。

例えばＨａ＊ｍｏｎｃｈｕｓ　Ｃｏｎ１ｏｒｔｕｓ　Ｌ
３幼虫に対するインビトロ駆虫活性につき試験すること
により発酵サンプルを評価した０ １９日後１００個の発酵フラスコからの全プロスを合併
し、遠心分離しそして上澄みを捨てた。

ｂ）実質的に純粋なＶＭ４４８５７の単離＆）において
得られたセルペレットを水（０，７５７＝）でスラリ化
し、アセトン（１，５ｔ）と混合しそして４℃で４８時
間放置した。次にスラリを濾過（英国ハンプシャ、イー
ストレイにあるＢＤＨＣｈｅｍｉｃａｌｓ　Ｌｔｄ、　
　のハイフロ（Ｈｙｆ　１　ｏ　）スーパーセル、′ハ
イフロ”は商標である）し、残留物をアセトン（３Ｘ２
５０ｍ／）　　で洗浄しそして合併した涙液を蒸発でせ
てアセトンを除去した。

水性残留液（６０Ｍ）をメタノール（５００ｍ）と混合
しそして全体をヘキサン（３ｘ　ｓ　００　ｒｎｔ　）
で抽出した。合併したヘキサン抽出液を蒸発させ、残留
物（４１２〜）をメタノール（４１，２ｍ）中に浴解し
そして一２０℃で一夜放置した。形成した沈殿物を除去
するための濾過後、涙液を蒸発させそして残留物（２９
５〜）をヘキサ７９０〜２０％アセトンで溶離してシリ
カ（７５Ｆ）上でクロマトグラフィにかけた。ｔ、　１
．　ｅ、により検出されたＶＭ４４８５７、ＶＭ４４８
６４及びＶＦｖｉ４４８６６を含有する分画を集めた。

合併したＶＭ４４８５７分画を蒸発きせると油状物とし
て生成物（２５〜）を得た。ジエチルエーテル／石油エ
ーテル７０／３０で溶離してシリカゲルテーパープレー
ト（英国ベントホルドンヤイヤ（Ｂｓｄｆｏｒｄｓｈ［
ｒｅ）　、ルー）ン（Ｌｕｔｏｎ）のＡｎａｌｔｅｅｈ
、　Ａｎａｃｈｅｒｎ　Ｈｏｕｓｅ売り渡し）を用いて
プレバレーチグ薄層クロマトグラフィにかけることによ
υ最終精製を行なってＶλ１４４８５７（６ｎ？）を得
り、ジエチルエーテル／石油エーテル（７０：３０）　
溶媒システムを用いてシリカゲル支持体上のｔ、　１．
　ｃ、　ＫおけるこれのＲｆ値は０．３でおった。

くシ 特徴アーク λｍａｘ　（ＣＨ３０Ｈ）２４４ｎｒｎ；　　ｍ／ｚ（
ＦＡＢ　Ｎａ”／Ｎｏｂａ）１２３．０．１２０．８．
１１９．７．１１７．７．９７．４．８２．０゜７９．
８．７９．０．６８．４．６８．１．６７．３．６７．
３．４８．１゜４５．４．４０．８．３６．１．３５．
７．３５．３．３４．３．３１．２゜２７．２．２１．
８．１９．２．１７．１．１４．９．１２．５．及び１
０．４ｐｐｍ。

それは次の条件下ｈｐｌｅに付したとき１７．４５）の
滞留時間を有した： １ｒｘｔ／分の流速でメタノール／水（９０：１０）で
ウルトラスフェア（Ｕｌｔｒａａｐｈｅｒｅ）　ＣＤ８
５　ｕｍカラム（アルテックス（Ａｌｔｅｘ）２５０Ｘ
４−６ｓａ＋）を溶離しそして２４６腸　でのＵＶ吸収
により観察する。

〔α）Ｄ２５（アセトン）＋１１１°（Ｃ＝０．２５）
実施例２ ＶＭ４４８６４　の製造及び単離 実施例ＩＶｃ記載された方法はさらにＶＭ４４８６４（
４■）を生成した。ジエチルエーテル／石油エーテル（
８０：２０）溶媒システムを用いるシリカゲル支持体上
のｔ、　１．　ｅ、におけるこれのＲｆ値は０．４でめ
った。

特徴つけデータ λｍａＸ（ＣＨ，ＯＨ）　２４４　ｎｍ及び２３７　ｎ
ｍ　：　ｍ／ｚ　（ＦＡＢＮａ７Ｎｏｂａ）（相対強度
）６２１（１００％）（ＭＮａ）”：〔α〕Ｄ２５（ア
セトン）＋９６．８（ｃ　＝０．２５　）　：δＣ（Ｃ
ＤＣＩ、）　１７３．８．１４２．３．１３９．８．１
３７．２．１３５．９゜１３４．１．１２３．６．１２
３．５．１２０．５．１１９．５．１１８．５゜９８．
６．８１．９．８０．３．７７．５．７６．９．７１．
５．６８．６゜６８．２．６８．０．５７．７．４８．
５．４５−６．３６−６、３６．４゜３６．３．３５．
９．３４．６．３２．１．２２．３．１９．９．１７．
５゜１５．６．１３．１及び１０．９ｐｐｍ。

それは実施例１において記載された条件下ｈｐｌｅ　Ｋ
付されたとき７．０分の滞留時間を有した。

実施例３ ＶＭ４４８６６の製造及び単離 実施例１１Ｃおいて記載された方法はさらに７Ｍ４４８
６６（３〜）を生成した。ジエチルエーテル／石油エー
テル（８０：２０）溶媒／ステムを用いるシリカゲル支
持体上のｔ、　１．　ｃ、に２・けるこれのＲｆλｍａ
ｗ（ＣＨ”　０Ｈ）２４４　ｎｍ及び２３６ｎｍ：ｍ／
ｚ（ＦＡＢＮａ”／Ｎｏｂａ）（相対強度）６０７（１
００％）（ＭＮａ）”：〔α）Ｄ２５　（アセトン）＋
　８１．９　（ｅ＝０．１６　）　；δ１３Ｃ（ＣＤＣ
Ｉ、）　１７３．７．　１４２．７．１３９．５．１３
７．８．　１３７．２゜１３４．１．１２３．６．１２
３．４．１２０．６．１２０．２．１１８．０゜９８．
８．８１．９．８０．１．７９．１．７１．６．６８．
６．６８．４゜６８．０．６７．７．４Ｂ、５．４５．
７．３６．９．３６．５．３６．４゜３６．０．３４．
６．３２．１．２２．３．１’１９．１７．５．１５．
５゜ｉ　３．１．１０．９　ｐｐｍ。

之れは実施例１ｖｃ記Ｑ石れた条件下ｈｐｌｃに付され
たとき５．８分の滞留時間を有した口実施例４ ＶＭ４４８６５の製造及び単離 実施例１において記載されたとおりにして得られた種段
階の１部分（２−）を、２５０−エレンマイヤーフラス
コ中に含有する発酵培地を接種するのに用いた。発酵培
地は下記の成分を含有した。

カゼイン加水分解物　　　　　　　　２．０グルコース
　　　　　　　　　　　２０．０町浴性でんぷん　　　
　　　　　　２０．０カゼイン（シグマＣ５８９０）　
　　　　２．０燐酸水素二カリウム　　　　　　　　０
．５硫酸マグネシウム　　　　　　　　　　０．５炭酸
カルシウム　　　　　　　　　　５．０（シグマ０５８
９０は英国ドルセットプーレのＳｉｇｍａ　Ｃｈｅｍｉ
ｃａｌ　Ｃｏ、　Ｌｔｄ、により供給され丸。シグマは
商標である）。

滅菌化のまえに培地をｐＨ７，０に調節した。

１３日間２７℃で２４Ｏｒ、　ｐ、　ｍ、で旋回振りま
ぜ器上で発酵は培養された。

例えばＨａｅｍｏｎｅｈｕｓ　Ｃｏｎｔｏｒｔｕｓ　Ｌ
　３幼虫に対するインビトロ駆虫活性につき試験するこ
とにより発酵サンプルを評価した。

１３日後１００個の発酵フラスコからの全ブロスを合併
し、遠心分離しそして上澄みを捨てた。

ｂ）実質的に純粋なＶＭ４４８６５の単離ａ）において
得られたセルベレットを水（０，７５ｔ）でスラリ化し
、アセトン（１，０ｔ）と混合し、３０分間かきまぜセ
して戸遇した。アセトン抽出を３回線シ返しそして合併
した涙液を蒸発させてアセトンを除去した。

水ａ残留物（６００＋ｄ）をクロロホルム（４×５００
ｄ）で抽出した。合併したクロロホルム抽出液を（Ｍｇ
Ｓ０４上で）乾燥しそして蒸発させた。

残留物（６２）を７リカ（１００ｆ）上でクロマトグラ
フィにかけそしてヘキサン中θ〜１００％エーテルで勾
配をつけて溶離した。ｔ、ｌ、、ｅ、により検出された
ＶＭ４４８６５　　を含有する分画を合併しセして蒸発
させると油状物として粗生成物（５２０１！ｑ）を得た
。ヘキサ７９０〜１００％エーテルで溶離してシリカ（
７５１を用いてさらにカラムクロマトグラフィにかける
ことにより最終精製を行ない７Ｍ４４８６５（１１岬）
を得た。ジクロロメタン／メタノール（９５：５）　溶
媒システムを用いる７リ力ゲル支持体上のｔ、　１．ｃ
においてのこれのＰ、　ｆ値は０．４であった。

特徴づけデータ λＩＨＩＬ　Ｘ　（ＣＨ３０Ｈ）　２４４　ｎ　ｍ　：
　ｍ／ｚ　（Ｆ　Ａ　Ｂ　Ｎ　ａ　＋／Ｎｏ　ｂ　ａ　
）（相対強ｆｌｆｔ）７１９（１００％）（ＭＮａ）”
：δ１３Ｃ（ＣＤＣｌ５　）δ１３Ｃ１７３，３，１６
７，５，１４２，６，１３９，４，１３７，６゜１３７
．２．１３４．９．１３４．１．１２８．４．１２３．
６．１２３．４゜１２１．０．１２０．５．１１９．８
．９８．８．８１．９．８０．４゜７７．３．７４．２
．７１．５．　６８．９．　６８．３．　６８．０．　
６４．３゜５７．８．　４８．５．　４５．５．　３６
．９．　３６．４．　３６．３．３５．９゜３４．６．
３２．１．２２．３．１７．５．１５．６．１４．４．
１３．１゜１２．１．１１．０　ｐｐｍ、） 七れは実施例１において記載された条件下ｈｐｌｃに付
されたとき８．０分の滞留時間を有した。

実施例５ ＶＭ４４８６７の製造及び単離 （無）発酵 でんぷんカゼイン培地の寒天プレート上で２７℃でスト
レプトミセスＥ２２５を培養した。各々が滅菌化種培地
の１００４を含有する６個の５００−エレンマイヤーフ
ラスコを接種するために培養菌の一部分を用いた。４８
時間２４０ｒｐｍで旋回振シまぜ器上で２７℃でフラス
コを培養した。

実施例１において記載されたとおシにしてね培地をつく
った。

２０１ステンレススチ一ル発＃器中の１５を種培地を接
種するためにフラスコの内容物を用いた。

その培地は脱イオン水の代りに水道水を用いた以外は同
じ組成のものであった。滅菌化のまえに培地はｐＨ６，
３であシ七して調節はれなかった。種段階カルチャを２
０Ｏｒｐｍでかきまぜセして１５ｔ／分の速度で空気を
供給した。温度を２８℃に＝ｒ　７　）　ａ　−Ａ／し
た。（Ｉ（ａｒｔｓｌＷａｔｔｈａｍ　、　Ｃｒｏｓｓ
　。

Ｅｌｓａｎｏｒ　、　Ｃｒｏａｍ　、　３３−３５のＥ
ｌｅａｎｏｒ　ＨｏｕＪのＫＷＲＣｈｅｍｉｅａｌａ　
Ｌｔｄ　　により供給された）ポリプロビレ／グリコー
ルｐ２０００を自動的に加え発泡をコントロールした。

培養を４８時間つづけこの時に４ｔのカルチャを使用し
て１５０ｔステンレススチ一ル発酵器中に含有する１０
０を生産培地を接種した。生産培地は次の組成を有した
二成分　　　　　量＜？／１） じゃがいもでんぷん　　　　　　　２０カゼイン　　　
　　　　　　　　　　２グルコース　　　　　　　　　
　　２０力ゼイン加水分解物　　　　　　　　２に、　
ＨＰｏ、　　　　　　　　　　　　　０．５Ｍｇ５０．
　　　　　　　　　　　　　０．５ＣａＣＯ，０，５ 水道水　　　　　　　　　　　　１ｔにする童楓飽化の
まえ培地はｐＨ７，０であった。

じゃがいもでんぷん及びカゼインは英国ドルセットグー
レバージストーンプルームロードのＢｒ１ｔｌａｈ　Ｄ
ｒｕｇ　Ｈｏｕｓｅ　Ｌｔｄより供給さ扛た０カゼづン
加水分解物は英１ハンプシャー、ベジングストーク（Ｂ
ａｓｉｎｇｓｔｏｋｅ　）ウエードロード（Ｗａｄ＠Ｒ
ｏａｄ）の０ｘｏＬｄ　Ｌｔｄにより供給された。

生産段階カルチャを１６Ｏｒｐｍでかきまぜそして５０
ｔ／ｍｉｎ　　の速度で空気を供給した。温度を２８０
℃に維持した。ポリプロビレ／グリコールｐ２０００を
自動的に加えて発泡をコントロールした。１５日後発醇
物を回収しそして遠心分離して菌糸体塊を回収した。

（ｂ）　　ＶＭ４４８６７の単離 （、）において得られた陥糸体塊をアセトン（２×４０
Ｌ）で抽出しそして濃縮してアセトンを除去した。次に
残留液（Ｘ＋ｔ）をジクロロメタン（２×６ｔ）で抽出
し、そして合併した抽出物を（４１ｇ５０４上で）乾燥
しそして蒸発させて油状物（４０？）を得た。

残留物をシリカ上でクロマトグラフィにかけそして０〜
６０％ジエチルエーテル／ヘキサンで順次溶離した。ｈ
ｐｌｅにより検出されたＶＭ４４８６７を含有する分画
を合併しそして蒸発させると油状物（６６η）として半
１製生成物を得た。メタノール／′）クロロメタン３：
９７で溶離して（英国のペッドフォードシャイヤ（Ｂｅ
ｄｆｏｒｄｓｈｉｒｅ）　、ルートン（Ｌｕｔｏｎ）の
Ａｎａｌｔｅｅｈ　、　Ａｎａｃｈｅｍ　Ｈｏｕｓｅ　
　販売の）シリカゲルテーパープレートを用いてプレバ
レチプ薄層クロマトグラフィにかけることにより最終梢
製を行なって実質的に純粋なＶＭ４４８６７（４，７〜
）ヲ得た。メタノール／ジクロロメタン（３：９７）溶
媒システムを用いるシリカゲル支持体上のｔ、　ｉ、　
ｅ、　Ｋ−おけるこれのＲｆ値は０．３でおった。

特徴づけデータ λｍａＸ（ＣＨｘＯＨン２４４　ｎｍ：ｈｊ／Ｚ　（Ｆ
ＡＢＮａ”／Ｎｏｂａ　）（相対強度）６２３（１００
％）（ＭＮ為］＋、　Ｅ、　Ｉ、実測′ｈｆｉ　６００
．３６５９゜Ｃｓｓ　Ｈｓ＊　Ｏｓとして理論値６００
゜３６６２　。δ１３Ｃ（ＣＤＣＩ、）　１７４．７．
１４０．４．１３７．４゜１３６．１．１３４．７．１
３４．０．１２５．５．１２４．７．１２３．７゜１２
０．６．　１１８．８．　９８．８．　８１．８．　７
９．８．　７７’、　　７１．６゜６９．５．　６８．
１．　６８．０．　５７．４．　４８．６．　４４．４
．　３６．９゜３６．２．　３５．５．　３４．５．　
３２．１．　２１．４．　１９．３．　１７．５゜１６
．１．１３．８．１３．１及び１０．９ｐｐｍ。

来このシグナルは溶媒シグナルにより不明瞭にされた。

実施例１において記載された条件下ｈｐｌｃに付された
ときそれは９．５分の滞留時間を有した。

〔α）Ｉ（’＝５１°（７セ）　７．　　ｅ　＝０．２
１　）実施例６ ＶＭ４４８６８の製造及び単離 （、）　　発酵 でんぷんカゼイン媒体の寒天プレート上で２７℃でスト
レプトミセスＥ２２５を増殖した。各々が１００−〇減
陥株培地を含■する５個の５００耐エレンマイヤフラス
コを接ねするために店養函の一部分を用いた。７２時間
２４０ｒｐｍ　　で旋１」ふシまぜ器上で２８℃でそれ
らのフラスコを培養した。

棟培地は次の組成を有した： 成分　　　　　＊（ｆＩを オキンイド（Ｏｘｏｉｄ）スペシャル　　　　２．５ペ
プトン来 オキンイドトリプトン米　　　　　　２．５オキソイド
中和大豆ヘフトン来２．５ 町浴性でんぷん　　　　　　　　　　２．５グルコース
−水和物　　　　　　　　２．５オキンイド麦芽エキス
＄　　　　　　　２．５グリセロール　　　　　　　　
　　　２．５実施例１と同じ微量元素混合物　　　　１
０−ストックＺｔｐＨ未ｔ４堅脱イオン水　　　　　　
１リツトルにする量米英国ハンプシャベーシングストー
ク９ニードロードの０ｘｏｉｄ　Ｌｔｄにより供給され
た。

２０ｔステインレススチ一ル発酵器中Ｑ）　１５　を棟
場地を接種するためにフラスコ内容物を用いた。

脱イオン水の代りに水道水を用いた以外は培地は同じ組
成のものを用いた。独段階カルチャを２０Ｏｒｐｍ　で
かきまぜセして１５ｔ／分の速度で空気を供給した。温
度を２８℃にコントロールした。

（Ｈｅｒｔｓ、　ＩＩＷａｌｔｈａｍ　Ｃｒｏｓｓ　、
　ｌｌ：１ｅａｎｏｒ　Ｃｒｏｓｓ　、３３−３５、　
Ｅｌｓａｎｏｒ　ＨｏｕｓｅのＫＷＲＣｈｅｍｉｅａｌ
ａ　Ｌｔｄにょシ供給されたボ、プ。ビＬ／　７　Ｚ　
Ｕ　：ｆｆζｐ２０００を自動的に加えて発泡をコント
ロールした。培養を４８時間つづけ、この時間で４６の
カルチャを用いて、下記の生産培地の１００ｔを含有す
る２個の１５ＯＡステンレススチ一ル発酵器の各々を接
種した。

発酵層端は次の組成を含有した： 成　　分　　　　　　　　　　　　　　　　ｆＩ（Ｐ／
４）デキストリン（１）２５ ＣａＣＯ４１，２５ グルコース−水和物　　　　　　　　　２．５ｐ２００
０　　　　　　　　　　　　　　１．ＯｐＨ６，５に調
整された水道水　　　１リツトルＶＣする量（１）マン
チェスターのＣｏｒｎ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ（ＵＫ）　Ｌ
ｔｄにより供給された０７００５スノーフレーク（Ｓｎ
ｏｗｆｌａｋｅ）。

（２）　　英国サレー（Ｓｕｒｒ＠ｙ）　、クロイドン
（Ｃｒｏｙｄｏｎ）Ｆｏｗｌｅｒ！Ｉ、　Ｔａｔｅ　ａ
ｎｄ　Ｌｙｌｅ　Ｌｔｄ、により供給された。

（３）　　英国マンテエスターオルドトラフホルド（Ｏ
ｌｄ　Ｔｒａｆｆｏｒｄ）のＢｒ１ｔｉｓｈ　Ａｒｋａ
ｄｙ　Ｃｏ、　Ｌｔｄ。

により供給された。

１つの発酵器はまた０、０１２５俤のに、Ｉ（ＰＯ，と
−緒に２．１％のＭｏｐｓ緩衝剤を含有した。他の発酵
器は０．０５％のに、　ＨＰ　Ｏ４を含有した。

ヘッドスペース中に維持された０、５パールの圧力で５
０リットル／分で各々の容器に滅菌化空気を提供した。

初期に１６０ｒｐｍ、　　これを増大させて、２０％の
飽和以下に俗解酸素水準が低下するのを防いで、カルチ
ャーをかきまぜた。発酵温度２８℃でめった。

ＭＯＰＳ緩衝剤を含有する容器を７．０±０．１の一定
のｐＨに維持した。

塩酸（１０％）及び水酸化す）　ＩＪウム溶ｇ（１０１
ｓ）の自動添加を用いて％ＭＯＰＳ緩衝剤を加えること
なしに容器を、６．８〜７．２の範囲にｐＨをコントロ
ールするように適合させた。

１６８時間後、各々の容器の壁のまわりの液体水準上に
蓄積した固体と一緒に両方の発酵器から発酵プロスを回
収した。プロスを遠心分離して菌糸体重を回収した。

（ｂ）　　ＶＭ４４８６８（Ｄ単離 −）において得られた菌糸体重をアセトン（７５ｔ、３
ｏｔ及び２５ｔ）で３回抽出しそして合併した抽出液を
濃縮してアセトンを除去した。残留液（２７／、）をジ
クロロメタン（１６を及びＳＺ）で２回抽出し、抽出液
を合併しそして蒸発させて油状物（２２０ｆ）を得た。

残留物をシリカ上でクロマトグラフィにかけそしてヘキ
サ７９０〜１００％ジエチルエーテルを用いて順次溶離
した。ｈｐｌｅにより検出され７とＶＭ４４８６８　　
を含有する分画を合併しセして蒸発させて油状物（９０
０１Ｆ）として半梢製生成物を碍た。ジクロロメタン中
のＯ〜１チメタノールを用いて順次溶離してシリカ上で
クロマトグラフィにかけることによりこれをさらに精製
して油状物（６８■）を得た。

ジエチルエーテル／ヘキサン（４：１）で溶離して（英
国のベッドフォードシャイヤ、ルートンのＡｎａｌｔｓ
ｅｈ　、　Ａｎａｅｈｅｍ　Ｈｏｕｓｅ販光の）シリカ
ゲルテーパープレートを用いてプレバレーチブＮＭクロ
ブトグラフィにかけることにより最終精製を行ない実質
的に純粋のＶＭ４４８６８（２６１１？）’（ｒ得た。

メタノール／ジクロロメタン（７，５：　９２．５　）
’ＭｆＪシステムを用いてシリカゲル支持体上でのｔ、
　１ａＣ０におけるこれのＲｆ値は０．４５であった。

特徴づけデータ λｍ＠ｚ　２３７ｎｍ（ＣＨｓＯＨ）；Ｍ／Ｚ（ＦＡＢ
　Ｎａ”／Ｎ０ＢＡ）（相対強度）５９１（１００％）
（ＭＮａ）雪（α：］Ｄ”＋１０８゜（ｅ、（１２９ア
セトン）、６１３Ｃ（ＣＤＣ１ｇ　）　１９６．５゜１
７２．３．１４４．８．１３７．６．１３６．８．１３
６．３．１３６．０゜１３４．８．１３０．４．１２３
．５．１２３．０．１２１．０．９７．６゜８２．４．
７８．０．６９．５．６７．４．５８．０．４９．９．
４８．３゜４８．０．　４１．０．　３６．６．　３６
．３．　３５．６．　３４．５，３１．５゜２７．６．
　２］、、７．　１７．７．　１６．０．　１５．６．
　１３．０．　１１．０．　ｐｐｍ、ｊそれは実施例１
において記載された条件下ｈｐＬｅｖこ付されたと＠１
１．７分の滞留時間を有する。

実施例７ ｖＭ４４ｓｓ７の生物”　　　性 雌雄混合の３０匹の４週令のは古荒地ねずみのそれぞれ
を強制飼養によｐ　７５０　Ｔｒｉｃｈｏａｔｒｏｎｇ
ｙｌｕｓｅｏｌｕｂｒｉｆｏｒｍｉｓ感染性幼虫（ひつ
じ菌株）で感染させた。感染後２００日目これらの動物
を６つのグループ（肌ち４ひきのグループ２つ、５ひき
のグループ３つ及び７ひきのグループ１つ）にラン々 ダムに配合した。同じ日に各々のグループからの集めた
糞試料について塙虫卵の数をかぞえることを行ない感染
が確立てれたことを確認した。

２１日後−感染で動物を次のとおシに処Ｐｔシた。

グループ１　：　　１！／に９でＶＭ４４８５７グルー
プ２　：　　０．２　ｓｑ／ＫｒテｖＭ４４８　ｓ　７
グループ３：０．１〜／ＫｆでＶＭ４４８５７グループ
４　：　　０．０２　ＳＩＰ／ＫｆテＶＭ４４８５７グ
ループ５：０．２５■／ＫＩＩでアルベンダゾールグル
ープ６　：　　０．５ｄ／荒地ねずみでＤＭＳＯ／ＰＥ
Ｇ４００の５０１５０混合物すべての処理は強制飼養に
より経口的に投与された。

ＶＭ４４８５７はＤＭＳＯ及びＰＥＧ４００　（７）　
５０１５０混合物中の０．０１チ溶液としてつくられた
。適当な投与量を提供するために次にこの溶液の希釈液
をつくった。使用されたアルベンダゾールは専売のバル
バゼン（Ｖａｌｂａｚｅｎ）　（メルク）の希釈液でお
った。

処理後３日目に各々のグループからの糞サンプルについ
て嶋虫の卵の計数を行ない、処理の効未を決定した。す
べての動物は鴫虫の回収及び計数のため次に死体解剖さ
れた。次の方法が採用ざｎた。

各々の小腸を別口に取り出し、腸用はさみでは方向に切
シ開きそして１５０ミクロンテストふるい上ではげしく
水で噴射した。ふるい上に保持でれた洗浄液をａ縮しそ
して次に低力立体顕微鏡下ガラス皿中のムち虫について
調べた。処理及び未処理動物の一九虫計数の比較により
沼性の評価を決定した。結果を表ＩＨＣ観約する。

表　　■ 実施例８ ＶＭ４４８６４の生物学的活性 雌雄混合の１５ひきの４週令蒙古荒地ねずみのそれぞれ
を強制飼饗により７５０　Ｔｒｉｃｈｏｓｔｒｏｎ　　
ｌｕｓｅｏｌｕｂｒｉｆｏｒｍｉｓ感染性幼虫（ひつじ
菌株）で感染させた。感染後２００日目これらの動物を
５ひき弁 のグループの３つにランダムに配合した。同じ日に各々
のグループからの集められた糞試料について端上の卵の
数をかぞえることを行なって感染が確立したことを確認
した。

２１日後−感染で動物を下記のとおシにして処理した。

グループｌ：ＩＮ１／−でＶＭ４４８６４強制飼養によ
り経ロ的にすべての処理は投与された。

ＶＭ４４８６４ｕ　ＤＭＳＯとＰＥＧ４００　　との５
０１５０混合物中の０．０１１溶液としてつくられそし
て次にこの溶液は追補な投与量を提供するために希釈さ
れた。使用きれたイベルメクチンは専売のイボメク（エ
マＯｍｌ！ｌｅＸメルク）の希釈液であった。

処理後３日目に各々のグループからの糞サンプルについ
て吠虫の卵の数かぞえを行なって処理の効果を決定し友
。

次に実施例７において記載したとおりにして端上の回収
及び計数のためにすべての動物を死体解剖した。結果を
表■に要約する。

代理人　弁理士　秋沢政光　　他１名 四発手続補正豐 昭和６２年？月３１日

Claims (12)

【特許請求の範囲】
1. （１）式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ｒ＾１は水素またはメチルであり、Ｒ＾２は水
   素またはＥ２−メチル２−ブテノイルオキシでありそし
   てＲ＾３は水素またはヒドロキシであり、ただしＲ＾３
   が水素である場合はＲ＾１及びＲ＾２は両方とも水素で
   ありそしてＲ＾２がＥ２−メチル２−ブテノイルオキシ
   である場合はＲ＾１はメチルであることを条件とする）
   の化合物、あるいは式（II）▲数式、化学式、表等があ
   ります▼（II） の化合物、あるいは式（III） ▲数式、化学式、表等があります▼（III） の化合物。
2. （２）ストレプトミセスＥ２２５ＮＣＩＢ１２３１０ま
   たはストレプトミセスＥ２２５ＢＮＣＩＢ１２５０９の
   発酵により得ることができる特許請求の範囲第１項に記
   載の化合物。
3. （３）実施例１〜６のいずれか１つの実施例に記載され
   た特徴データを有する化合物。
4. （４）実質的に純粋な形での、特許請求の範囲第１項〜
   第３項のいずれか１項に記載の化合物。
5. （５）ストレプトミセス属の微生物を培養することを特
   徴とする特許請求の範囲第１項〜第４項のいずれか１項
   に記載の化合物を製造する方法。
6. （６）微生物がストレプトミセスＥ２２５ＮＣＩＢ１２
   ３１０またはストレプトミセスＥ２２５ＢＮＣＩＢ１２
   ５０９あるいはそれらの突然変異体である特許請求の範
   囲第５項に記載の方法。
7. （７）微生物により直接に製造する、Ｒ＾１、Ｒ＾２及
   びＲ＾３がすベて水素である式（ I ）の化合物を製造
   するための特許請求の範囲第５項または第６項に記載の
   方法。
8. （８）ストレプトミセスＥ２２５ＮＣＩＢ１２３１０ま
   たはストレプトミセスＥ２２５ＮＣＩＢ１２５０９ある
   いはそれらの突然変異体。
9. （９）ヒトまたは動物体の内部寄生虫及び外部寄生虫感
   染の治療または予防において使用するための特許請求の
   範囲１項〜第４項のいずれか１項に記載の化合物。
10. （１０）節足動物または線虫類にあるいはそれらの周囲
    に特許請求の範囲第１項〜第４項のいずれか１項に記載
    の化合物またはその誘導体を適用することを特徴とする
    節足動物または線虫類の浸入を撲滅する方法。
11. （１１）不活性担体または賦形剤と一緒に特許請求の範
    囲第１項〜第４項のいずれか１項に記載の化合物または
    その誘導体を含む殺虫剤組成物。
12. （１２）製薬的にまたは獣医薬的に許容できる担体また
    は賦形剤と一緒に特許請求の範囲第１項〜第４項のいず
    れか１項に記載の化合物あるいは製薬的にまたは獣医薬
    的に許容できるその誘導体を含む製薬または獣医薬組成
    物。