JPH11508769A

JPH11508769A - Ｃ型肝炎に対するワクチン

Info

Publication number: JPH11508769A
Application number: JP9504167A
Authority: JP
Inventors: シルバ，テレサカベゾン; マリーモミン，パトリシア; マリー−ジョセフィクロードギャルソン，ナタリー
Original assignee: スミスクラインビーチャムバイオロジカルズソシエテアノニム
Priority date: 1995-06-29
Filing date: 1996-06-20
Publication date: 1999-08-03
Also published as: CZ422397A3; WO1997001640A3; NO976060L; KR19990028505A; IL122589A0; MX9710523A; EP0835318A2; HUP9901901A2; CA2222456A1; PL324906A1; ZA965459B; AU6304996A; NO976060D0; BR9609258A; GB9513261D0; TR199701713T1; HUP9901901A3; WO1997001640A2

Abstract

(57)【要約】ワクチン組成物は、QS21；３デ−Ｏ−アシル化モノホスホリルリピドＡ（3D-MPL）；次の組成：代謝性油、例えばスクアレン、α−トコフェロール及びトウィーン80を有する水中油乳剤；並びに（ａ）Ｃ型肝炎ウイルスコアー蛋白質又はその免疫原性誘導体、及び（ｂ）Ｃ型肝炎ウイルスエンベロープ蛋白質又はその免疫原性誘導体から成る群から選択された少なくとも１種の免疫原、を含んで成る。

Description

【発明の詳細な説明】Ｃ型肝炎に対するワクチン本発明は新規なワクチン製剤、その製造方法、及び医療におけるその使用に関する。３デ−Ｏ−アシル化モノホスホリルリピドＡ（3de-O acylated monophosphory l lipid A）は英国特許2220,211（Ribi）から知られている。化学的には、これは、４，５又は６個のアシル化鎖を有する３デ−Ｏ−アシル化モノホスホリルリピドＡの混合物であり、リビ・イムノケム・モンタナ(Ribi Immunochem Montana )により製造される。３デ−Ｏ−アシル化モノホスホリルリピドＡの好ましい形は国際出願No.92／116556に記載されている。 QS21は南米の本クアラジャ・サポナリア・モリナ(Quillaja Saponaria Molina )の樹皮からのサポニンのHplcで精製した非毒性画分であり、そしてその製造方法は米国特許No.5,057,540に（QA21）として記載されている。水中油乳剤自体は従来技術において知られており、そしてアジュバント組成物として有用であることが示唆されている（EPO 399843）。Ｃ型肝炎ウイルスはEP-A-0318216において知られている。Ｃ型肝炎ウイルスの特定の抗原蛋白質はコアー蛋白質として帰属されており、そして例えば、Deliss eら、J.Hepatology，1991，13(Suppl．4)：S20-S23(遺伝子型１ｂについて)により記載されている。Ｃ型肝炎ウイルスの特定のエンベロープ蛋白質はＥ１及びＥ２と命名されており、そして例えばGrakouiら、1993，J.Virolgy 67，1385-1395 ；Spacteら，1992，Virology 188，819-830；Matsumiaら、J. Virology 66，1425-1431、及びKoharaら、1992，J.Gen.Virol．73，2313-2318により記載されている。今日同定されているCHV遺伝子型の多くはOkamoto Hiroaki 及びMishiro Shunji，Intervirology，1994，37：68により記載されている。本発明は、QS21、３デ−Ｏ−アシル化モノホスホリルリピドＡ（3D-MPL）、水中油乳剤を含んで成るワクチン組成物を提供し、ここで、水中油乳剤は次の組成を有する：代謝性油、例えばスクアレン、α−トコフェロール及びトウィーン80 、並びに（ａ）Ｃ型肝炎ウイルスコアー蛋白質又はその免疫原性誘導体、及び（ｂ）Ｃ型肝炎ウイルスエンベロープ蛋白質又はその免疫原性誘導体から成る群から選択された少なくとも１種の免疫原。「免疫原性誘導体」なる用語、ヒトへの内的投与に続き蛋白質に対する免疫応答を誘導する能力を維持している蛋白質の短縮形誘導体又は他の誘導体のごとき、任意の分子を包含する。このような他の誘導体はアミノ酸の付加、除去もしくは置換、又は化学的修飾により製造することができる。サブユニットワクチンの調製において有用な蛋白質の免疫原性断片は、例えば適当な遺伝子の発現により、又は、例えばMerrifield合成（The Peptides，Vol. 2，Academic Press，NY，3頁）を用いるペプチド合成により製造することができる。本発明の免疫原性誘導体は、ハイブリド、すなわち他の免疫原の１又は複数のエピトープを担持することができる追加の配列を含んで成る融合ペプチドであることができる。あるいは、本発明の免疫原性誘導体は、キャリヤーポリペプチドに、あるいは、アジュバントの場合のごとく免疫刺激性を有するか、又は蛋白質もしくはその誘導体に対する免疫応答を増強するか又は蛋白質もしくはその誘導体の発現、精製もしくは製剤化のために有用である他のキャリヤーであることができる。本発明はまた、グルタルアルデヒドのごとき常用の連結剤を用いて巨大分子に連結された場合に、HCV蛋白質又はその免疫原性誘導体に拡張される(Geerlings ら(1988)，J.Immunol.Methods，106 ，239-244)。本発明での使用のために適当な蛋白質及びその免疫原性誘導体は、該蛋白質又はその誘導体をコードするDNAを組換え宿主細胞中で発現せしめ、そして生成物を回収し、そしてその後、場合によってはその誘導体を調製する。このようなコード配列を含んで成るDNA分子は、標準的DNA合成法、例えばD.M. Robertsら，in Biochemstry 1985，24により記載されるように酵素的連結により、化学合成により、生体外酵素重合により、あるいはこれらの技法の組合せにより合成することができる。 DNAの酵素的合成は、DNAポリメラーゼ、例えばDNAポリメラーゼＩ（Klenow断片）を用いて、ヌクレオシドトリホスフェートdATP，dCTP，dGTP及びdTTPを含有する適当な緩衝液中で、必要に応じて10℃〜37℃の温度において、一般に50ml以下の体積中で行うことができる。DNA断片の酵素的連結はDNAリガーゼ、例えばT4 DNAリガーゼを用いて、適当な緩衝液、例えば0.05Ｍ Tris(pH 7.4)、0.01Ｍ Mg Cl₂、0.01Ｍジチオスレイトール、１mMスペルミジン、１mM ATP及び0.1mg／mlウシ血清アルブミン中で、４℃〜周囲温度において、一般に50ml以下の体積中で行うことができる。DNAポリマー又は断片の化学合成は、常用のホスホトリエステル法、ホスファイト法又はホスホラミダイト法により、固相法、例えば、Chemic al and Enzymatic Synthesis of Gene Frayments-A Laboratory Manual(H.G.Gas sen及びA.Lang編)，Verlay Chemie，Wlinheim（1982）に記載されている方法により、又は他の科学刊行物、例えばM.J.Gait，H.W.D.Matthe s，M.Singh，B.S.Sprout、及びR.C.Titmas，Nucleic Acids Research，1982，10 ，6243；B.S.Spraat及びW.Bannwarth，Tetrahedron Letters，1983，24，5771； M.D.Matteucci及びM.H.Caruthers，Tetrahedron Letters，1980，21，719；M.D. Matteucci及びM.H.Caruthers，Journal of the American Chemical Society，19 81，103，8185；S.P.Adamsら、Journal of the American Chemical Society，19 83，105，661；N.D.Sinha，J.Biormat，J.McMannus及びH.Koesher，Nucleic Aci ds Research，1984，12，4539；並びにH.W.D.Matthesら、EMBO Journal，1984， 3，801に記載されている方法により行うことができる。変異体をコードするDNAポリマーは、常法、例えばG.Winterら、Nature 1982，299 ，756-758により、又はZoher及びSmith，1982；Nucl.Acids.Res．10，6487- 6500により記載されている方法により部位特定変異誘発により、あるいは例えば Chan及びSmith，Nucl.Acids.Res．1984，12，2407-2419により、又はG.Winterら、Biochem.Soc.Trans，1984，12，224-225に記載されている欠失変異誘発により製造することができる。組換え技法は、Maniatisら、Molecular Cloning-A Laboratory Manual；Cold Spring Harbor，1982-1989に記載されている。特に、本発明において使用するための蛋白質又は免疫原性誘導体は次の段階を用いて製造することができる。ｉ）前記蛋白質又はその免疫原性誘導体をコードするヌクレオチド配列を含んでなるDNAポリマーを宿主細胞中で発現することができる複製可能な又は一体化する(integrating)発現ベクターを調製し； ii）該ベクターにより宿主細胞を形質転換し； iii）該形質転換された宿主細胞を、前記DNAポリマーを発現させて前記蛋白質を生産することを許容する条件下で培養し；そして iv）前記蛋白質を回収する。この明細書において、「形質転換する」なる用語は、Genetic Engineering；S .M.Kingsman及びA.J.Kingsman編、Blackwell Scientific Publications：Oxford ，英国，1988に記載されているような常法を用いて適当なプラスミド又はウイルスベクターを用いるトランスホーメーション（transformation）、トランスフェクション（tramsfection）又はインフェクション(infection)により、外来DNAを宿主細胞に導入することを意味する。「形質転換された」又は「形質転換体」なる用語は、注目の外来遺伝子を含有しそしてそれを発現する、得られた宿主細胞に適用されるであろう。複製可能な発現ベクターは、宿主細胞に適合性のベクターを開裂せしめて無傷のレプリコンを有する線状のDNAセグメントを得、そしてこの線状セグメントを、該線状セグメントと相まって所望の生成物をコードする１又は複数のDNA分子と、連結条件下で結合させることにより調製することができる。すなわち、DNAポリマーは、所望により、ベクターの作製の間に前形成(prefor m)又は形成（form）することができる。ベクターの選択は、部分的に、原核性又は真核性である宿主細胞により決定される。適当なベクターには、プラスミド、バクテリオファージ、コスミッド及び組換ウイルスが含まれる。複製可能な発現ベクターの調製は、従来から、DNAの切断、重合及び連結のための適当な酵素を用いて、例えばManiatisら、前掲、に記載の方法により行うことができる。組換え宿主細胞は、形質転換条件下で、宿主細胞を複製可能な発現ベクターにより形質転換することにより調製される。適当な形質転換条件は、例えば、Maniatisら、前掲、又は「DNA Cloning」Vol II，D.M.Glo ver編、IRL Press Ltd，1985に記載されている。形質転換条件の選択は、宿主細胞により決定される。すなわち、細菌宿主、例えば大腸菌は、CaCl₂の溶液を用いて(Cohenら、Proc.Nat.Acad.Sci.，1973，69 ，2110)、あるいはRbCl，MnCl₂、酢酸カリウム及びグリセロールの混合物を含有する溶液を用い、次に３−〔Ｎ−モルホリノ〕−プロパン−スルホン酸、RbCl及びグリセロールを用いて処理することができる。培養した哺乳類細胞は細胞上へのベクターDNAのカルシウム共沈澱により形質転換することができる。 DNAポリマーの発現を許容する条件下での形質転換された宿主細胞の培養は、常法により、例えばManiatisら及び「DNA Cloning」、前掲、に記載されているようにして行われる。すなわち、好ましくは、細胞に栄養を与え、そして45℃より低温において培養する。生成物は、宿主細胞に従って常法により回収される。すなわち、宿主細胞が細菌、例えば大腸菌である場合、物理的、化学的又は酵素的に細胞溶解され、そして得られた細胞溶解物から蛋白質生成物が単離される。宿主細胞が哺乳類細胞である場合、生成物は一般に培地又は無細胞抽出液から単離される。常用の蛋白質単離方法には選択的沈澱法、吸着クロマトグラフィー、及びモノクローナル抗体アフィニティーカラムを含めてのアフィニティークロマトグラフィーが含まれる。好ましくは、宿主細胞は大腸菌である。本発明の特定の観点は、外来エピトープを含むポリペプチドに融合されたCHV コアー蛋白質又はその免疫原性誘導体を含んで成る新規な化合物を提供する。このポリペプチドは好ましくはイフルエンザ蛋白質、例えばNS１蛋白質、又はその免疫原性誘導体である。このような新規な化合物をコードするDNA、該DNAを含有するベクター、該ベクターにより形質転換された宿主細胞、及び前記新規化合物の製造におけるその使用は、本発明のさらなる観点を構成する。本発明のワクチンは、IgG2a生産又はTH１細胞応答の優先的な刺激剤である。細胞性応答におけるTH１応答の既知の関与のため、これは有利である。確かに、マウスにおいて、IgG2aの誘導はこのような免疫応答と関連する。本発明のワクチンは、細胞溶解性Ｔリンパ球応答の誘導を増強する。CTLの誘導は、標的抗原が細胞内で合成されるとき、すなわちウイルスによる感染の間に容易に見られる。なぜなら、抗原の蛋白質分解により生成したペプチドは適切なプロセシング経路に入り、クラスＩ分子と協力して細胞膜上の提示を導くからである。しかしながら、一般に、前形成された可溶性抗原はこのプロセシング及び提示経路に達せず、そしてクラスＩにより制限されたCTL(class lrestricted CT L)を惹起しない。従って、従来の非−生ワクチンは、抗体及びＴヘルパー応答を惹起するが、一般にCTL性免疫を誘導しない。水中油乳剤と共に２種類のアジュバントQS21及び3D-MPLは、組換蛋白質に基くワクチンのこの深刻な限界を克服し、そしてより広いスペクトルの免疫応答を誘導する。ある系においては、水中油乳剤と共に3D-MPL及びQS21の組合せは、インターフェロンβの生産を相乗的に増強することができていた。さらに、水中油乳剤は、スパン85及び／又はレシチンを含有することができる。３デ−Ｏ−アシル化モノホスホリルリピドＡの好ましい形態は、スミス・クライン・ビーチャム・バイオロジカルスs.a.の、No.92116556として公開された国際出願に開示されている。水中油乳剤は、それ自体として、又は他のアジュバントもしくは免疫刺激剤と共に使用することができる。本発明のさらなる観点において、医療において使用するためのワクチンが提供される。 QS21：3D-MPLの比率は典型的には１：10〜10：１のオーダーであり、好ましくは１：５〜５：１であり、そしてしばしば実質的に１：１である。最適相剰性のための好ましい範囲は2.5：１〜１：１の3D MPL：QS21である。典型的には、ヒトの投与のためには、QS21及び3D MPLはワクチン中に投与当り１μｇ〜100μｇ、好ましくは10μｇ〜50μｇの範囲で存在する。典型的には、水中油乳剤は、２〜10％のスクアレン、２〜10％のα−トコフェロール及び0.3〜３％のトウィーン80を含む。好ましくは、スクアレン：α−トコフェロールの比率は１以下であり、これにより一層安定なエマルジョンが得られる。幾つかのケースにおいて、本発明のワクチンはさらに安定剤を含有するのが好ましい。ワクチンの製造は一般にNew Trends and Developments in Vaccines，Voller ら編、Uneversity Park Press，バルチモア，メリーランド，米国に記載されている。蛋白質と巨大分子との接合は、例えば、Likehite、米国特許No．4,372,94 5、及びArmorら、米国特許No．4,474,757に記載されている。各ワクチン投与中の蛋白質の量は、典型的なワクチンにおいて有意な不都合な副作用を伴わないで免疫保護応答を誘導する量として選択される。一般に、各投与が１〜1000μｇの蛋白質、好ましくは２〜200μｇを含有すると予想される。特定のワクチンのための最適量は、対象者における適切な免疫応答の観察を含む標準的研究により確認される。最初のワクチン投与に続き、対象者は適当な間隔をおいて１回〜複数回の補助免疫投与を受けるであろう。本発明の製剤は、予防及び治療の両目的のために用いることができる。１つの観点によれば、本発明は本発明のワクチンを患者に投与することを含んで成る処置の方法を提供する。次の実施例により本発明を説明する。実施例１． 1.1. 組換えHCVコアー融合蛋白質の作製及び発現 pMG27（Grossら、1985，Mol.Cell.Biol，５：1015）の誘導体であるプラスミドpMG81を用いて融合蛋白質NS1-Coreを発現させた。このプラスミドにおいては、（ｉ）プラスミドpASIEH／801（Youngら、1983，Proc．Natl.Acad.Sci．80：6 105）から切り出されたインフルエンザＡ／PR／８／34株からのNS１コード領域の最初の81コドンがpLプロモーターの下流に挿入されており、そして（ii）アンピシリン耐性遺伝子がトランスポゾンTn902からのカナマイシン耐性遺伝子により置換されている。Ｃ型肝炎ウイルス遺伝子型１ｂ(Delisseら、1991，J.Hepathology 13，Suppl ．４：S20-23)のHCVゲノム配列をPCR増幅し、そしてpUC12プラスミドにクローニングして、プラスミドTCMI28-2を得た。コアー蛋白質のアミノ酸２−166に対応するヌクレオチド配列をTCMI28-2から増幅した。ポリメラーゼ連鎖反応の間、NcoＩ及びXbaＩ制限部位をコアー配列の５′及び３′未満に生じさせてプラスミドpMG81の同じ部位への挿入を可能にし、pRIT14129を行った。 pRIT14129は融合蛋白質NS1(flu)−コアー(HCV)のコード配列を含有し、そして配列番号：１に記載のポリペプチドを発現する。融合蛋白質NS1(flu)−コアー(H CV)のコード配列は配列番号：２に含まれる。配列番号：３はHCVゲノムタイプ１ａ（Ｈ）のアミノ酸配列１−1006を示す。プラスミドpRIT14129を、λpLプロモーターの熱感受性レプレッサーを含有する大腸菌AR58（Mottら、1985，Proc.Natl.Acad.Sci．82：88）に導入した。組換え細菌を20リットルの発酵槽中で30℃にてフェド−バッチ(fed-batch)条件下で増殖させた。温度を38〜40℃に上げることにより、NS１−コアー蛋白質の発現を誘導した。次に、細胞を収得し、そして機械的に破砕した。 1.2. NS １−コアー蛋白質の精製抗原を、調製用電気泳動により、変性した形で調製した。段階１：細菌細胞を、プロテアーゼ阻害剤（１mMペファブロック（pefabloc）、0.5mg／ロイペプチン、0.1％アプロチニン）を含有する20mMリン酸緩衝液pH７中で破砕した（Rannie ２×14,500pi）。段階２：細胞溶解物を17,000ｇにて25分間遠心分離した。この段階で、組換蛋白質は不溶性であり、そしてペレット中に回収された。ペレットを10mMリン酸塩、pH6.8、２Ｍ NaCl、４Ｍ尿素により２回；10mMリン酸塩、pH6.8、0.15Ｍ NaCl にて３回洗浄し、そして各洗浄段階の後に17,000ｇにて25分間遠心分離した。これらの段階は、精製された生成物のエンドトキシン含量を低下させるために導入した。段階３：洗浄したペレットを、SDS-PAGE還元サンプル緩衝液中に再懸濁し、５分間煮沸し、27,000ｇにて25分間再度遠心分離し、そして次に残った蛋白質を分離するために12％ポリアクリルアミドゲルに適用した(Prep Cell装置、Biorad) 。段階４：蛋白質を25mM Tris、pH８、200mMグリシン、0.1％SDS中でゲルから電気溶出し、０℃にて10％TCAにより沈澱せしめ、そして最後に10mMリン酸塩、pH6 .8、150mM NaCl、50mMサルコシル中に再懸濁した。精製された抗原は27〜30kDの範囲でダブレットのようであり、両バンドは抗− NS１モノクローナル抗体、並びに抗−コアー特異的ヒトモノクローナル抗体及びラビットポリクローナル抗体により認識される。 1.3. NS １−コアー蛋白質のアジュバント化それぞれが水中油乳剤成分を含んで成る２種類のアジュバント製剤を作った。 SB26：５％スクアレン、５％トコフェロール、0.4％トウィーン 80；粒子サイズは500nmであった。 SB62：５％スクアレン、５％トコフェロール、2.0％トウィーン 80；粒子サイズは180nmであった。１（ａ）乳剤SB62（２倍濃度）の調製トウィーン80をリン酸緩衝液(PBS)中に溶解してPBS中２％溶液を得る。100ml の２倍濃度の乳剤を得るため、５ｇのDLα−トコフェロール及び５mlのスクアレンを十分にボルテックス撹拌する。90mlのPBS／トウィーン溶液を加え、そして十分に混合する。次に、得られた乳剤をシリンジに通し、そして最後はMllosミクロ流動化機を用いてミクロ流動化(microfluidize)する。得られる油滴は約180 nmのサイズを有する。１（ｂ）乳剤SB26の調製この乳剤は同様にして、0.4％トウィーン80を用いて調製される。１（ｃ）表に示す他の乳剤は他の方法で作られる。１（ｄ）融合蛋白質の水中油乳剤製剤の調製１（ａ），１（ｂ）又は１（ｃ）の乳剤に同体積の２倍濃度の融合蛋白質（20 μｇ又は100μｇ）を加え、そして混合した。これを 50μｇ／mlの3D-MPL及び20μｇ／mlのQS21と混合して最終製剤を得た。塩濃度及びpHに従って緩衝液をセットした。実施例２． 2.1. 組換えE1E2オリゴマー蛋白質の調製 E1-E2HCVエンベロープ蛋白質のオリゴマー形は、ポリプロテインとしてHCVエンベロープ配列を発現する組換えワクシニアウイルスにより感染された哺乳類細胞から調製することができる。タイプ１ａ（Ｈ）のHCVゲノムのアミノ酸167−10 06を含むポリ蛋白質のコード配列を、当業界で知られている方法を用いてワクチニアウイルスベクターに挿入し、そして得られたプラスミドを用いて、感染された細胞においてポリ蛋白質の発現をもたらすであろうワクチニア組換えウイルスを調製することができる。発現されたポリ蛋白質は細胞内でプロセシングされそして残る。E1-E2オリゴマー形は細胞抽出物から精製することができ、この場合、E1／E2蛋白質複合体が特定の洗剤を用いて可溶化されている(Ralstonら、1993 ，J.Virology 67：6753)(Dubuissonら、1994，J.Virology 68：6147)。 2.2. ワクチン製剤の調製オリゴマーE1E2の製剤は実施例１の製剤と同様にして調製される。実施例３．実施例１の融合蛋白質及び実施例２のE1E2オリゴマーの両方を含有する製剤を、実施例の製剤と同様にして調製する。各製剤は50及び100μｇの各蛋白質を含有する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＣ０７Ｋ 19/00 Ｃ０７Ｋ 19/00 Ｃ１２Ｎ 1/21 Ｃ１２Ｎ 1/21 Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ //(Ｃ１２Ｎ 1/21 Ｃ１２Ｒ 1:19） (Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ１２Ｒ 1:19） (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者モミン，パトリシアマリーベルギー国，ベー−1330 リクセンサート，リュドゥリンスティテュート 89，スミスクラインビーチャムバイオロジカルズソシエテアノニム (72)発明者ギャルソン，ナタリーマリー−ジョセフィクロードベルギー国，ベー−1330 リクセンサート，リュドゥリンスティテュート 89，スミスクラインビーチャムバイオロジカルズソシエテアノニム

Claims

【特許請求の範囲】１．QS21；３デ−Ｏ−アシル化モノホスホリルリピドＡ（3D-MPL）；次の組成：代謝性油、α−トコフェロール及びトウィーン80を有する水中油乳剤；並びに（ａ）Ｃ型肝炎ウイルスコアー蛋白質又はその免疫原性誘導体、及び（ｂ）Ｃ型肝炎ウイルスエンベロープ蛋白質又はその免疫原性誘導体から成る群から選択された少なくとも１種の免疫原、を含んで成るワクチン組成物。２．HCV蛋白質又はその免疫原性誘導体がキャリヤー分子に化学的に結合している、請求項１に記載のワクチン組成物。３．前記免疫原性誘導体が融合ポリペプチドである、請求項１又は２に記載のワクチン組成物。４．前記融合ポリペプチドが、インフルエンザ蛋白質又はその免疫原性誘導体に融合したHCVコアー蛋白質又はその免疫原性誘導体を含んで成る、請求項３に記載のワクチン組成物。５．前記インフルエンザ蛋白質がNS１蛋白質である、請求項４に記載のワクチン組成物。６．外来エピトープを含有するポリペプチドに融合したHCVコアー蛋白質又はその免疫原性誘導体を含んで成る化合物。７．外来エピトープを含有するポリペプチドがインフルエンザ蛋白質又はその免疫原性誘導体である、請求項６に記載の化合物。８．前記インフルエンザ蛋白質がNS１蛋白質である、請求項７に記載の化合物。９．請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物又は請求項６〜８のいずれか１項に記載の化合物の有効量を患者に投与することを含んで成る、HCV感染の治療又は予防方法。 10．HCV感染の予防又は治療における使用のための医薬の製造における、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物又は請求項６〜８のいずれか１項に記載の化合物の使用。 11．要求される比率で成分を混合することを含んで成る、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物の製造方法。 12．請求項６〜８のいずれか１項に記載の化合物の製造方法であって、該化合物をコードするDNAを組換え宿主細胞中で発現せしめ、そして生成物を採取する、ことを含んで成る方法。 13．請求項６〜８のいずれか１項に記載の化合物をコードするDNA分子。 14．請求項13のDNAを含んで成る組換えベクター。 15．請求項14の組換えベクターにより形質転換された宿主細胞。