CZ422397A3 - Vakcina - Google Patents
Vakcina Download PDFInfo
- Publication number
- CZ422397A3 CZ422397A3 CZ974223A CZ422397A CZ422397A3 CZ 422397 A3 CZ422397 A3 CZ 422397A3 CZ 974223 A CZ974223 A CZ 974223A CZ 422397 A CZ422397 A CZ 422397A CZ 422397 A3 CZ422397 A3 CZ 422397A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- protein
- vaccine
- immunogenic derivative
- compound
- dna
- Prior art date
Links
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 25
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims abstract description 26
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 claims abstract description 14
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 claims abstract description 13
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 claims abstract description 8
- 108700039791 Hepatitis C virus nucleocapsid Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims abstract description 8
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 claims abstract description 6
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 claims abstract description 6
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 claims abstract description 5
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 108010003533 Viral Envelope Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 38
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 34
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 16
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 14
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims description 12
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 12
- 101710128560 Initiator protein NS1 Proteins 0.000 claims description 10
- 101710144127 Non-structural protein 1 Proteins 0.000 claims description 10
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 10
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 9
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 7
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 claims description 6
- 108700010900 influenza virus proteins Proteins 0.000 claims description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 3
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 claims 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 claims 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 13
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 8
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 abstract description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 30
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 14
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 5
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N d-alpha-tocopherol Natural products OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- FGDZQCVHDSGLHJ-UHFFFAOYSA-M rubidium chloride Chemical compound [Cl-].[Rb+] FGDZQCVHDSGLHJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 201000006082 Chickenpox Diseases 0.000 description 3
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 3
- 108010076039 Polyproteins Proteins 0.000 description 3
- 206010046980 Varicella Diseases 0.000 description 3
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 3
- 230000000899 immune system response Effects 0.000 description 3
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 239000011732 tocopherol Substances 0.000 description 3
- 229930003799 tocopherol Natural products 0.000 description 3
- 235000010384 tocopherol Nutrition 0.000 description 3
- 229960001295 tocopherol Drugs 0.000 description 3
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 3
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- 102000012410 DNA Ligases Human genes 0.000 description 2
- 108010061982 DNA Ligases Proteins 0.000 description 2
- 102000004594 DNA Polymerase I Human genes 0.000 description 2
- 108010017826 DNA Polymerase I Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 101100525628 Picea mariana SB62 gene Proteins 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 2
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 2
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 2
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 2
- SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M potassium acetate Chemical compound [K+].CC([O-])=O SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- ATHGHQPFGPMSJY-UHFFFAOYSA-N spermidine Chemical compound NCCCCNCCCN ATHGHQPFGPMSJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- DVLFYONBTKHTER-UHFFFAOYSA-N 3-(N-morpholino)propanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCCN1CCOCC1 DVLFYONBTKHTER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WRDABNWSWOHGMS-UHFFFAOYSA-N AEBSF hydrochloride Chemical compound Cl.NCCC1=CC=C(S(F)(=O)=O)C=C1 WRDABNWSWOHGMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 101710094648 Coat protein Proteins 0.000 description 1
- 108091033380 Coding strand Proteins 0.000 description 1
- 235000001815 DL-alpha-tocopherol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011627 DL-alpha-tocopherol Substances 0.000 description 1
- 230000004568 DNA-binding Effects 0.000 description 1
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 1
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102100021181 Golgi phosphoprotein 3 Human genes 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 108700008783 Hepatitis C virus E1 Proteins 0.000 description 1
- 101710125507 Integrase/recombinase Proteins 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- GDBQQVLCIARPGH-UHFFFAOYSA-N Leupeptin Natural products CC(C)CC(NC(C)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(C=O)CCCN=C(N)N GDBQQVLCIARPGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 1
- -1 MnClg Chemical compound 0.000 description 1
- 241001092142 Molina Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 101710141454 Nucleoprotein Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 101710083689 Probable capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 101710185720 Putative ethidium bromide resistance protein Proteins 0.000 description 1
- 241001454523 Quillaja saponaria Species 0.000 description 1
- 235000009001 Quillaja saponaria Nutrition 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010015780 Viral Core Proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- SUYVUBYJARFZHO-RRKCRQDMSA-N dATP Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 SUYVUBYJARFZHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- SUYVUBYJARFZHO-UHFFFAOYSA-N dATP Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1CC(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 SUYVUBYJARFZHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGWHQCVHVJXOKC-SHYZEUOFSA-J dCTP(4-) Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)C1 RGWHQCVHVJXOKC-SHYZEUOFSA-J 0.000 description 1
- HAAZLUGHYHWQIW-KVQBGUIXSA-N dGTP Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 HAAZLUGHYHWQIW-KVQBGUIXSA-N 0.000 description 1
- NHVNXKFIZYSCEB-XLPZGREQSA-N dTTP Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)C1 NHVNXKFIZYSCEB-XLPZGREQSA-N 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 238000006872 enzymatic polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 1
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 1
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 1
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 1
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 1
- GDBQQVLCIARPGH-ULQDDVLXSA-N leupeptin Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(C)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C=O)CCCN=C(N)N GDBQQVLCIARPGH-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- 108010052968 leupeptin Proteins 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 235000011056 potassium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000000164 protein isolation Methods 0.000 description 1
- 229940023143 protein vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 229940126583 recombinant protein vaccine Drugs 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 229940063673 spermidine Drugs 0.000 description 1
- YYGNTYWPHWGJRM-AAJYLUCBSA-N squalene Chemical compound CC(C)=CCC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-AAJYLUCBSA-N 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 125000002264 triphosphate group Chemical class [H]OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])O* 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/29—Hepatitis virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
- C07K14/08—RNA viruses
- C07K14/18—Togaviridae; Flaviviridae
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55572—Lipopolysaccharides; Lipid A; Monophosphoryl lipid A
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55577—Saponins; Quil A; QS21; ISCOMS
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
- A61K2039/6031—Proteins
- A61K2039/6075—Viral proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/24011—Flaviviridae
- C12N2770/24211—Hepacivirus, e.g. hepatitis C virus, hepatitis G virus
- C12N2770/24222—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Zoology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
Vakcína
Oblast techniky
Vynález se týká vakcíny proti viru hepatitidy C. Vynález se rovněž týká způsobu výroby této vakcíny.
Dosavadní stav techniky
Sloučenina, označovaná jako 3-de-0-acylovaný monofosforyllipid A je známa z patentového spisu GB 2 220 211 (Ribi). Chemicky jde o směs 3-de-0-acylovaného monofosforyllipidu A se 4-, 5- nebo 6-acylovanými řetězci, která se běžně dodává (Ribi Immunochem Montana). Výhodná forma této látky byla popsána v mezinárodní patentové přihlášce PCT č. 92/116556.
QS21 je čištěná netoxická frakce saponinu z kůry jihoamerického stromu Quillaja Saponaria Molina, způsob výroby této látky čištěním pomocí HPLC byl popsán v US patentovém spisu č. 5 057 540, kde je látka označována jako QA21.
Emulze typu olej ve vodě jsou samy o sobě známé a byly již navrhovány jako pomocné prostředky, například podle EP 399 843.
Virus hepatitidy C byl popsán v EP-A-0 318 216. Jako zvláštní antigenní bílkovina hepatitidy C byl označen protein jádra viru, který byl popsán například v publikaci Dellisse a další, J. Hepatology, 1991, 13, doplněk 4, str. S20 až S23 (pro genotyp lb). Specifické bílkoviny obalu viru hepatitidy C byly označeny El a E2 a byly popsány například v publikaci Grakoui a další, 1993, J. Virology, 67, 1385 až 1395, Spacte a další, 1992, Virology, 188, 819 až 830, Matsumia a další, J. Virology, 66, 1425 až 1431 a Kohara ·· ···· ·· ···· ·· ·· • · · ·· · ··»· • · · · « ···» • · · · · · « ··>· · • · · ···· · · · ···· φ· · · ·· ·· ··
- 2 a další, 1992, J. Gen. Virol., 73, 2312 až 2318.Většina genotypů HCL, které byly až dosud identifikovány, byla popsána v publikaci Okamoto Hiroaki a Mishiro Shunji, Intervirology, 1994, 37, str. 68 a následující.
Podstata vynálezu
Podstatu vynálezu tvoří vakcína proti viru hepatitidy C, která obsahuje QS21, 3-de-0-acylovaný monofosforylolipid A (3D-MPL), emulzi typu olej ve vodě, přičemž tato emulze typu olej ve vodě má složení: metabolisovatelný olej, například squalen, alfa-tokoferol a Tween 80, a alespoň jeden imunogen ze skupiny a) protein jádra viru hepatitidy C nebo jeho imunogenní derivát a b) protein obalu viru hepatitidy C nebo jeho imunogenní derivát.
Pod pojmem imunogenní derivát se rozumí jakákoliv molekula, například zkrácený protein nebo jiný derivát, který si uchovává svou schopnost vyvolat odpověď imunitního systému po vnitřním podání u člověka. Další deriváty je možno připravit přidáním, vypuštěním, náhradou nebo přeskupením aminokyselin nebo jejich chemickou modifikací.
Imunogenní fragmenty bílkoviny, které je možno použít při přípravě podjednotek vakcíny je možno připravit expresí příslušného fragmentu genu nebo syntézou peptidu, například při využití Merrifieldovy syntézy, která byla popsána v publikaci The Peptides, sv. 2., Academie Press., NY, str. 3.
Imunogenním derivátem podle vynálezu může být také hybrid, to znamená složená bílkovina, obsahující přídatné řetězce, které mohou obsahovat jeden nebo větší počet epitopů pro jiné imunogenní látky. Imunogenní derivát podle vynálezu je také možno spojit s nosným polypeptidem nebo jiným · · · · ···· • ··· · ·· · · · * · • »4 ···· · · · • · · · · d · · · · « « ··
- 3 nosičem s imunostimulačními vlastnostmi, jako je tomu v případě pomocného prostředku, nebo může nosič jiným způsobem podporovat vznik odpovědi imunitního systému na bílkovinu nebo její derivát nebo může mít příznivý vliv na expresi, čištění nebo zpracování bílkoviny nebo jejího derivátu.
Součást podstaty vynálezu tvoří také bílkovina HCV nebo její imunogenní derivát, konjugovaný na makromolekulu při použití běžných vazných činidel, například glutaraldehydu (Geerlings a další, 1988, J. Immunol, Methods, 106, str. 239 až 244).
Bílkoviny a jejich imunogenní deriváty, vhodné pro použití podle vynálezu je možno připravit tak, že se dosáhne exprese kódové DNA pro tuto bílkovinu nebo její derivát v rekombinantní hostitelské buňce, produkt se izoluje a pak se popřípadě připraví jeho derivát.
Molekulu DNA, obsahující takový kódový řetězec je možno syntetizovat běžnými postupy, obvykle užívanými pro výrobu DNA, například pomocí enzymatické vazby podle publikace D. M. Roberts a další, Biochemistry, 1985, 24, 5090-5098, dále chemickou syntézou, enzymatickou polymerací in vitro nebo kombinací těchto postupů.
Enzymatickou polymerací DNA je možno uskutečnit in vitro při použití DNA polymerázy, například DNA polymerázy I (Klenowův fragment) v příslušném pufru, obsahujícím nukleosidtrifosfáty dATP, dCTP, dGTP a dTTP podle potřeby při teplotě 10 až 37 °C, obvykle v objemu 50 ml nebo nižší. Enzymatickou vazbu fragmentů DNA je možno uskutečnit při použití DNA ligázy, například T4 DNA ligázy v příslušném pufru, například 0,05 M tris o pH 7,4, který obsahuje 0,01 M chloridu horečnatého, 0,01 M dithiothreitolu, 1 mM spermidinu, • · · · · · ······«····· • · · · · · · · · · ······ · · · · · · · · _ 4 1 mM ATP a 0,1 mg/ml sérového albuminu skotu, při teplotě °C až teplotě místnosti, obvykle v objemu 50 ml nebo nižším. Chemickou syntézu DNA ve formě polymeru nebo fragmentů je možno uskutečnit běžným způsobem při použití fosfotriesteru, fosfidu nebo fosfoamiditu na pevné fázi, například podle publikace Chemical and Enzymatic Synthesis of Gene Fragments, A Laboratory Manual, ed. H. G. Gassen a A. Lang, Verlag Chemie, 1982, Weinheim, nebo v jiných vědeckých publikacích, například M. J. Gait, H. W. D. Matthes, M. Singh, B. S.
Sproat a R. C. Titmas, Nucleic Acids Research, 1982, 10, 6243, B. S. Sproat a W. Bannwarth, Tetrahedron Letters, 1983, 24, 5771, M. D. Matteuccí a Μ. H. Caruthers, Tetrahedron Letters, 1980, 21, 719, M. D. Matteucci a Μ. H. Caruthers, Journal of the Američan Chemical Society, 1981, 103, 3185, S. P. Adams a další, Journal of the Američan Chemical Society, 1983, 105, 661, N. D. Sinha, J. Biernat, J. McMannus a H. Koester, Nucleic Acids Research, 1984, 12, 4539 a W. D. Matthes a další, EMBO Journal , 1984, 3, 801.
DNA polymery s kódovými řetězci pro mutanty je možno připravit řízenou mutagenesí běžnými postupy, například podle publikace G. Winter a další, Nátuře, 1982, 299, 756 až 758 nebo Zoller a Smith, 1982, Nzcl. Acids Res., 10, 6487 až 6500, použít je možno také tvorbu mutací vypuštěním kodonů, například podle publikace Chán a Smith, Nucl. Acids Res., 1984, 12, 2407 až 2419 nebo G. Winter a další, Biochem. Soc. Trans., 1984, 12, 224 až 225.
Rekombinační postupy jsou souhrnně popsány v publikaci Maniatis a další, Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor, 1982 až 1989.
Zvláště je možno bílkovinu nebo její imunogenní derivát pro účely vynálezu připravit při použití následujícího postupu:
·« · · · · • · · · · · ·· ··· ···· ············ • · · · · · · ··· ····*· ·· ·· ·· «·
i) připraví se replikovatelný nebo integrovatelný vektor pro expresi, který je v hostitelské buňce schopný exprese DNA polymeru, obsahujícího nukleotidovou sekvenci, která je kódovou sekvencí pro požadovanou bílkovinu nebo její imunogenní derivát, ii) uvedeným vektorem se transformuje hostitelská buňka, iii) transformovaná hostitelská buňka se pěstuje za podmínek, při nichž může dojít k expresi uvedeného DNA polymeru za vzniku požadované bílkoviny a iv) produkovaná bílkovina se izoluje.
Pod pojmem transformovat se v průběhu přihlášky rozumí zavedení cizorodé DNA do hostitelských buněk transformací, transfekcí nebo infekcí příslušným plasmidem nebo vektorem virového původu, například při použití běžných postupů, tak jak byly popsány v publikaci Genetic Engineering, Eds. S. M. Kingsman a A. J. Kingsman, Blackwell Scientific Publications, Oxford, GB, 1988. Transformovaná hostitelská buňka tedy bude obsahovat cizorodý gen, přičemž bude docházet k expresi tohoto genu.
Replikovatelný vektor pro expresi je možno připravit tak, že se rozštěpí vektor, kompatibilní s hostitelskou buňkou za vzniku lineárního segmentu DNA s neporušeným replikonem, tento lineární segment se naváže na jednu nebo větší počet molekul DNA, které tvoří spolu s lineárním segmentem kódovou sekvenci pro požadovaný produkt.
To znamená, že DNA polymer může být vytvořen předem nebo může být vytvářen podle potřeby i v průběhu konstrukce příslušného vektoru pro transformaci.
• 4 φ ·
Φ Φ · · · · • · e · · ···· • ··· · ·· · · · · · φ φ · · · φ · φφφ ·»»· φ· - φφ ·· «φ φφ
- 6 Volba vektoru bude z části určována volbou typu hostitelských buněk, které mohou být prokaryotické nebo eukaryotické. Vhodnými vektory jsou například plasmidy, bakteriofágy, kosmidy a rekombinantní viry.
Přípravu replikovatelného vektoru pro expresi je možno uskutečnit běžnými postupy při použití příslušných restrikčních enzymů a enzymů pro polymeraci a vazbu DNA, tyto postupy byly souhrnně popsány například ve svrchu uvedené Maniatisově publikaci.
Rekombinantní hostitelské buňky je možno připravit transformací při použití replikovatelného vektoru pro expresi za podmínek, vhodných pro transformaci. Vhodné podmínky pro transformaci jsou obecně známé a byly popsány například ve svrchu uvedené Maniatisově publikaci nebo v publikaci DNA Cloning, sv. II, D. M. Glover ed., IRL Press Ltd., 1985.
Volba transformačních podmínek je určována použitým typem hostitelských buněk. Například v případě bakteriálních buněk, jako E. coli je možno tyto buňky zpracovávat působením roztoku chloridu vápenatého podle publikace Cohen a další, Proč. Nati. Acad. Sci., 1973, 69, 2110 nebo roztoku, obsahujícího směs RbCl, MnClg, octanu draselného a glycerolu a pak se na materiál působí kyselinou 3-(N-morfolino)propansulfonovou ve směsi s RbCl a glycerolem. Buňky savčího původu v kultuře je možno transformovat srážením DNA vektoru na buněčném materiálu působením vápníku.
Kultury transformovaných hostitelských buněk se pak pěstují za podmínek, při nichž může dojít k expresi DNA polymeru, je možno použít běžných postupů, například uvedených ve svrchu zmíněné Maniatisově publikaci. S výhodou se buněčný materiál v příslušném živném prostředí pěstuje při teplotě nižší než 45 °C.
Tato získaný produkt se izoluje běžnými postupy podle použitého typu hostitelských buněk. V případě, že běží o bakteriální buňky, například E. coli, je možno tento buněčný materiál fyzikálně, chemicky nebo enzymaticky rozrušit a bílkovinný produkt izolovat z výsledné směsi. V případě, že běží o savčí buňky, je obecně možno produkt izolovat z živného prostředí nebo z bezbzněčných extraktů. Běžné postupy pro izolaci bílkovinzahrnují selektivní srážení, absorpční chromatografii a afinitní chromatografii včetně afinitní chromatografie na sloupci s monoklonální protilátkou.
Výhodnými hostitelskými buňkami jsou zejména bakteriální buňky E. coli.
V jedno z provedení tvoří součást podstaty vynálezu také nové sloučeniny, které obsahují bílkovinu jádra HCV nebo její imunogenní derivát, vázaný na polypeptid, obsahující cizorodé epitopy. Polypeptidem je s výhodou bílkovina chřipkového viru, například bílkovina NS1 nebo její imunogenní derivát. Kódová DNA pro tyto nové sloučeniny, vektory s obsahem této DNA, hostitelské buňky, transformované takovým vektorem a jejich použití k získání nových sloučenin rovněž tvoří součást podstaty vynálezu.
Vakcíny podle vynálezu jsou výhodnými stimulátory produkce IgG2a a odpovědi buněk TH1. Tato skutečnost je velmi výhodná vzhledem k důležitosti odpovědi buněk TH1 v celkové odpovědi organismu, zprostředkované buňkami. U myší je indukce tvorby IgG2a v souladu s imunitní odpovědí.
Vakcíny podle vynálezu podporují vznik odpovědi cytolytických T-lymfocytů, CTL. Indukci CTL je možno snadno pozorovat v případě, že antigen je syntetizován uvnitř buněk, to znamená v průběhu infekce virem, protože peptidy, vzniklé proteolytickým odštěpením antigenu mohou vstupovat do
- 8 příslušných cest pro zpracování, což vede k jejích presentaci na buněčné membráně spolu s molekulami skupiny I.Obecně však nedojde v případě předem vytvořeného rozpustného antigenu k takovému zpracování a tím ani k vyvolání CTL ve spojení s molekulami skupiny I. Z tohoto důvodu také běžné neživé vakcíny vyvolávají tvorbu protilátek a odpověď T-pomocných buněk, nikoliv však obecně imunitu, zprostředkovanou CTL. Kombinací dvou pomocných prostředků QS21 a 3D-MPL spolu s emulzí typu olej ve vodě je možno překonat toto závažné omezení vakcín na bázi rekombinantních bílkovin a vyvolat tak širší spektrum imunitních odpovědí.
V některých systémech bylo možno kombinací 3D-MPL a QS21 spolu s emulzí typu olej ve vodě dosáhnout zvýšené produkce interferonu gamma.
Emulze typu olej ve vodě může obsahovat také spán 85 a/nebo lecithin. Výhodná forma 3-de-0-acylovaného monofosforyllipidu A byla popsána v mezinárodní patentové přihlášce WO 92/116556 (SmithKline Beecham Biological s.a.).
Emulzi typu olej ve vodě je možno použít jako takovou nebo spolu s dalšími pomocnými látkami nebo imunostimulačními látkami.
Součást podstaty vynálezu tvoří vakcína, určená pro použití v lékařství.
Poměr QS21 : 3D-MPL se v typických případech bude pohybovat v rozmezí 1 : 10 až 10 : 1, s výhodou 1 : 5 až 5 : 1 a často 1:1. Výhodné rozmezí pro optimální synergní účinek je 2,5 : 1 až 1 : 1 (3D MPL : QS21). V případě podání QS21 a 3D MPL budou tyto látky ve vakcíně obsaženy v množství 1 až 100, s výhodou 10 až 50 mikrogramů na jednu dávku. Emulze typu olej ve vodě bude v typických případech obsahovat 2 až • « · · « · · · · · ···· · • · · · · · · ··· ···· ·· ·« i» - ·· ··
- 9 10 % squalenu, 2 až 10 % alfa-tokoferolu a 0,3 až 3 % Tween 80. Poměr množství squalenu k množství alfa-tokoferolu je s výhodou rovný nebo nižší než 1 z toho důvodu, že za těchto podmínek vzniká stálejší emulze. Spán 85 může být přítomen v množství 1 %. V některých případech může být výhodné přidat do vakcíny podle vynálezu stabilizátor.
Příprava vakcín je obecně popsána v publikaci New Trends and Developments in Vaccines, ed. Voliér a další, University Park Press, Baltimore, Maryland, USA 1978. Zapouzdření do liposomů bylo popsáno například v US patentovém spisu č. 4 235 877 (Fullerton). Konjugace bílkovin a makromolekul byla popsána například v US patentových spisech č. 4 372 945 (Likhite) a 4 474 757 (Armor a další).
Množství bílkovin v každé dávce vakcíny se volí tak, aby došlo k vyvolání ochranné odpovědi imunitního systému bez značnějších nepříznivých vedlejších účinků. Obvykle se předpokládá, že každá dávka bude obsahovat 1 až 1000, s výhodou 2 až 100 mikrogramů bílkoviny. Optimální množství pro určitou vakcínu je možno ověřit běžnými zkouškami, do nichž je zahrnuto zjištění příslušné odpovědi imunitního systému u zkoumaných subjektů. Po prvním očkování je možno uskutečnit ještě jedno nebo větší počet přídatných očkování ve vhodných časových odstupech.
Prostředky podle vynálezu je možno využít jak k preventivním, tak k léčebným účelům.
Praktické provedení vynálezu bude osvětleno následujícími příklady, které však nemají sloužit k omezení rozsahu vynálezu.
• · · · · · • ·
- 10 Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
1.1 Konstrukce a exprese rekombinantní složené bílkoviny jádra HCV
Plasůnid pMG81, derivát plasmidu pMG27, popsaného v Gross a další, 1985, Mol. Cell. Biol., 5, 1015, v němž
i) prvních 81 kodonů kódové oblasti pro NS1 chřipkového viru kmene A/PR/8/34, vyštěpeného z plasmidu pASlEH/801 (Young a další, 1983, Proč. Nati. Acad. Sci., 80, 6105) bylo uloženo po směru exprese od promotoru pL a ii) gen pro odolnost proti ampicilinu byl nahrazen genem pro odolnost proti kanamycinu z transposonu Tn902 byl užit pro dosažení exprese složené bílkoviny, obsahující bílkovinu NS1 jádra.
Sekvence genomu HCV genotypu 1b viru hepatítidy C (Delisse a další, 1991, J. Hepathology, 13. suppl. 4, str. 20 až 23) byla podrobena PCR amplifikaci a pak klonována v plasmidu pUC12 za vzniku plasmidu TCM128-2.
Nukleotidové sekvence, odpovídající aminokyselinám až 166 bílkovin jádra byly amplifikovány z plasmidu TCM128-2. V průběhu PCR byla vytvořena místa působení Ncol a Xbal na 5' a 3'-koncích sekvence tak, aby bylo možno tyto úseky uložit do týchž míst plasmidu pMG81, čímž byl získán plasmid pRIT 14129.
Plasmid pRIT 14129 obsahuje kódovou sekvenci pro složenou bílkovinu NS1 (flu) jádra HCV a při jeho použití dochází k expresi polypeptidu, dále popsaného v řetězci č. 1. Kódová sekvence pro složenou bílkovinu NS1 (flu) je • · · · · · • · • · · ···· · · · ···· ·· *· ·· «· ··
- 11 popsána v sekvenci č. 2. Řetězec č. 3 popisuje sekvenci aminokyselin 1 až 1006 genomu HCV typu la (H).
Plasmid pRIT 14129 byl uložen do E. coli AR 58 (Mott a další, 1985, Proč. Nati. Acad. Sci., 82 až 88), plasmid obsahuje na teplo citlivý represor promotoru pL.
Rekombinantní bakterie byly pěstovány ve fermentoru s objemem 20 litrů po vsázkách při teplotě 30 C. Exprese složené bílkoviny NS1 s další bílkovinou jádra byla vyvolána zvýšením teploty na 38 až 42 °C. Pak byl buněčný materiál oddělen a mechanicky rozrušen.
1.2 Čištění složené bílkoviny NS1 s bílkovinou jádra
Antigen byl čištěn v denaturované formě preparativní elektroforézou následujícím způsobem:
Stupeň 1
Bakteriální buňky byly rozrušeny (Rannie-2 x 14 500 pí) ve 20 mM fosfátovém pufru o pH 7 s obsahem inhibitorů proteázy (1 mM pefabloc, 0,5 mg leupeptinu, 0,1 % aprotininu).
Stupeň 2
Lyzát byl odstředěn 25 minut při 17 000 g. V tomto stadiu byla rekombinantní bílkovina nerozpustná a byla oddělena v usazenině. Usazenina byla dvakrát promyta 10 mM fosfátovým oufrem o pH 6,8 s 2 M NaCl a 4 M močoviny, pak třikrát při použití 10 mM fosfátového pufru o pH 6,8 s 0,15 M NaCl, pak byl materiál odstředěn po každém promytí 25 minut při 17 000 g. Toto promývání bylo zařazeno za účelem snížení obsahu endotoxinu v čištěném produktu.
• · · · • · · · · ·
Stupeň 3
Promytá usazenina byla znovu uvedena do suspenze v pufru pro provádění SDS-PAGE, materiál byl povařen 5 minut, pak znovu odstředěn 25 minut při 27 000 g a pak nanesen na 12% polyakrylamidový gel pro oddělení zbývajících bílkovin, použito bylo zařízení Prep Cell (BioRad).
Stupeň 4
Bílkovina byla podrobena z gelu elektroeluci při použití 25 mM Tris o pH 8 s 200 mM glycinu a 0,1 % SDS, pak byla vysrážena působením 10% TCA při teplotě 0 °C a nakonec znovu uvedena do suspenze v 10 mM fosfátovém pufru o pH 6,8 se 150 mM NaCl a 50 mM sarkosylu.
Čištěný antigen se získá ve formě dubletu s molekulovou hmotností 27 až 30 tisíc, oba pásy jsou rozpoznávány monoklonální protilátkou proti NS1 a současně specifickými lidskými i králičími polyklonálními protilátkami proti bílkovině jádra.
1.3 Přidávání pomocných prostředků ke složené bílkovině
Byly připraveny dva prostředky s obsahem pomocných prostředků, každý z nich obsahoval následující složku emulze typu olej ve vodě:
| SB26: | 5 % squalenu, | 5 % | tokoferolu, 0,4? | í Tween | 80, |
| rozměr částic | byl | 500 nm | |||
| SB62: | 5 % squalenu, | 5 % | tokoferolu, 2,0 9 | á Tween | 80, |
| rozměr částic | byl | 180 nm. |
• 4 4 4 · 4
9 99·4 • 4 4 ·· 4 9 9 4 4 • · 44 4 «444 • 444 4 44 444« 4 ♦ 9 9 9 9 9 9 9 9
9999 99 99 99 99 99
- 13 1(a) Příprava emulze SB62 (dvojnásobný koncentrát)
Tween 80 se rozpustí ve fyziologickém roztoku chloridu sodného s fosfátovým pufrem, PBS na 2% roztok v PBS. K přípravě 100 ml dvojnásobně koncentrované emulze bylo za energického míchání smíseno 5 g DL-alfa-tokoferolu a 5 ml squalenu. Pak bylo přidáno ještě 90 ml roztoku PBS/Tween a směs byla znovu promíchána. Výsledná emulze pak byla podrobena mikrofluidisaci při použití zařízení M110S. Výsledné olejové kapičky měly průměr přibližně 180 nm.
l(b) Příprava emulze SB26
Tato emulze byla připravena analogickým způsobem při použití 0,4 % prostředku Tween 80.
l(c) Další emulze, které jsou uvedeny v tabulce 1, byly připraveny analogickým způsobem.
l(d) Příprava prostředku, obsahujícího složenou bílkovinu, pomocné prostředky QS21 a 3D MPL a emulzi olej ve vodě
K emulzi z odstavce l(a) nebo l(b) nebo l(c) se přidá stejný objem 2x koncentrované složené bílkoviny, 20 nebo 100 mikrogramů a směs se důkladně promíchá. K emulzi se pak přidá 50 mikrogramů/ml 3D-MPL a 20 mikrogramů/ml QS21 za vzniku výsledného prostředku. Podle obsahu solí a podle hodnoty pH se pak přidá pufr.
Příklad 2
2.1 Příprava rekombinantní oligomerní bílkoviny E1E2 • · · · · ·
- 14 Oligomerní formy obalových bílkovin El a E2 HCV je možno připravit ze savčích buněk, infikovaných rekombinantním virem planých neštovic, u nichž dochází k expresí obalových sekvencí HCV ve formě polyproteinu. Kódové sekvence pro polyprotein, zahrnující aminokyseliny 167 až 1006 genomu HCV typu la(H) je možno uložit do vektorů pro virus planých neštovic známým způsobem a výsledný plasmid je pak možno použít k přípravě rekombinantního viru planých neštovic, který vyvolá u infikovaných buněk expresi polyproteinu. Tento materiál se pak zpracovává a udržuje uvnitř buňky. Oligomerní formu bílkovin El a E2 je možno čistit z buněčných extraktů, v nichž byl komplex těchto bílkovin solubilizován při použití specifického smáčedla podle publikací Ralston a další, 1993, J. Virology, 67, 6753 a Dubuisson a další, 1994, J. Virology, 68, 6147.
2.2 Příprava vakcíny
Příprava vakcíny s obsahem svrchu získané oligomerní bílkoviny je obdobná jako v příkladu 1.
Příklad 3
Prostředky, obsahující jak složenou bílkovinu z příkladu 1, tak oligomer E1E2 z příkladu 2 je možno připravit obdobným způsobem jako prostředek z příkladu 1, prostředky obsahují 50 až 100 mikrogramů každé z bílkovin.
• v · ··· • · 999 ·
Tabulka 1
Dvojnásobně koncentrované nosné prostředí
| emulze SB | tokoferol% | squalen % | Twecn 80 % | Soan 85 % | Lecithin % | průměr |
| 26 | - 5 | 5 | 0.4 | 0 | 0 | 500 nm 90-100% 800 nm 10-0% |
| 26.1 | 5 | 5 | 0.4 | 0 | 0.1 | 500 nm |
| 63 | 5 | 5 | 0.6 | 0 | 0 | 500 nm |
| 64 | 5 | 5 | 0.8 | 0 | 0 | 500 nm |
| 61 | 5 | 5 | 1 | 0 | 0 | 250-300 nm |
| 62 | 5 | 5 | 2 | 0 | 0 | 180 nm |
| 40 | 5 | 5 | 0.4 | 1 | 0 | 500 nm 80-100% 800 nm 20-0% |
| 40.1 | 5 | 5 | 0.4 | 1 | 0.1 | 500 nm |
| 60 | 5 | 5 | I | 1 | 0 | 300 nm |
| 65 | 5 | 5 | 0.4 | 1-5 | 0 | 500 nm |
| 66 | 5 | 5 | 0.4 | 2 | 0 | 500 nm |
• · • ·· · ·· ··· · • · — 16- ····· ·*- »·····
Oť I *z V-- ··«····
Retezec C· 1 ~ ···· ♦· ·· ··
MDPNTVSSFQ TOC7LWHVRK RVRDQELGDA PFLDRLRRDQ KSLRGRGSTL
GLDIZTAraA GKQIVERILK HSSDEALKMT MSTNPKPQRK TKRNTNRRPQ
101 DVXFPGGGQI VGGVYLLPRR GPRLGVRATR KTSZRSQPRG RRQPIPKARQ
151 PHGRAWAQPG YPWPLYGNEG MGWAGWLLSP RGSRPSWGPT DPRRRSRNLG
201 KVIDTLTCGF ADLMGYIPLV GAPPGGAARA LAHGVRVLZD GVNYAT
Řetězec č. 2
| 1 | GAATTCGTAC | CTAGATCTCT | CACCTACGAA | ACAATGCCCG | CCTGCAAAAA |
| 51- | ATAAATTCAT | ATAAAAAACA | TACAGATAAC | CATCTGCGGT | GATAAATTAT |
| 101 | CTCTGGGGGT | GTTGACATAA | ATACCACTGG | CGGTGATACT | GAGCACATCA |
| 151 | GCAGGACGCA | CTGACCACCA | TGAAGGTGAC | GCTCTTAAAA | ATTAAGCCCT |
| 201 | GAAGAAGGvui* | AGCATTCAAA | GCAGAAGGOT | TTGGGGTGTG | TGATACGAAA |
| 251 | CGAAGCATTG | GCCGTAAGTG | CGATTCCGGA | TTAGCTGCCA | ATGTGCCAAT |
| 301 | X | TTTCGTTCAG | GACTACAACT | GCGACACACC | ACCAAAGCTA |
| 351 | ACTGACAGGA | GAATCCAGAT | GGATGCACAA | ACACGCCGCC | GCGAACGTCG |
| 401 | CGCAGAGAAA | CAGGCTCAAT | GGAAAGCAGC | AAATCCCCTG | TTGGTTGGGG |
| 451 | TAAGCGCAAA | ACCAGTTCCG | AAAGATTTTT | TTAAC7ATAA | ACGCTGATGG |
| 501 | AAGCGTTTAT | GC GG AAGAGG | TAAAGCC-TT | CCCGAGTAAC | AAAAAAACAA |
| 551 | CAGCATAAAT | AACCCCGCrC | TTACACATTC | CAGCCCTGAA | AAAGGGCATC |
| 601 | AAATTAAACC | ACACCTTAAG | GAGGATATAA | CATATGGATC | CAAACACTGT |
| 651 | GTCAAGCTTT | CAGGTAGATT | GCTTTCTTTG | GCATGTCCGC | AAACGAGTTG |
| 701 | CAGACCAAGA | ACTAGGTGAT | GCCGCATTCC | TTGATCGCCT | TCGCCGAGAT |
| 751 | CAGAAATCCC | TAAGAGGAAG | GGGCAGCACT | CTTGGTCTGG | ACATCGAGAC |
| 301 | AGCCACACGT | GCTGGAAAGC | AGATAGTGGA | GCGGATTCTG | AAAGAAGAAT |
| 351 | CCGATGAGGC | ACTTAAAATG | AcCATGAGCA | CAAATCCTAA | ACCCCAAAGA |
| 901 | AAAACCAAAC | GTAACACCAA | CCGTCGCCCA | CAGGACGTTA | AGTTCGCGGG |
| 951 | CGGTGGTCAG | ATCGTtGGTG | GAGTTTACcT | AGGGGCCCCA | |
| 1001 | GGTTGGGTGT | GCGcGCGACT | AGGAAGACTT | CCGAGCGGTC | GCAACCTCGT |
| 1051 | GGAAGGCGAC | AgCCTATCCC | CAAGGCTCGC | CaGCCCGAGG | GtAGGgCCTG |
| 1101 | GGCaCAGCCc | GGGTATCCTT | GGCCCCTCTA | TGGCAATGAG | GGCaTGGGGT |
| 1151 | GGGCAGGATG | gctcctgtca | CCCCGCGGCT | CcCGGCCTAG | TTGGGGCCCC |
| 1201 | AcgGACCCCC | GGCGTAGGTC | GCGTAATTTG | GGTAAGGTCA | TCGATACCCT |
| 1251 | cACgTGCGGC | TTCGCCGACC | TCATGGGGTA | CATTCCGCTC | GTCGGCGCCC |
| 1301 | CGCCAGGGGG | CGCTGCCAGG | Ut· <· X | ATGGTGTCCG | GGTTCTGGAG |
• ·
4 4 4
| 1351 | GACGGCGTGA | ACTATGCAAC | - 17- - ACaaTCTAGA | • • • 4 4 4 4 4 4 ATCGATAAGC | 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 TTCGACCGAT |
| 1401 | GCCCTTGAGA | GCCTTCAACC | CAGTCAGCTC | CTTCCGGTGG | GCGCGGGGCA |
| 1451 | TGACTATCGT | CGCCGCACTT | ATGACTGTCT | TCTTTATCAT | GCAACTCGTA |
| 1501 | GGACAGGTGC | CGGCAGCGCT | CTGGGTCATT | TTCGGCGAGG | accgctttcg |
| 1551 | CTGGAGCGCG | ACGATGATCG | GCCTGTCGCT | TGCGGTATTC | GGAATCTTGC |
| 1601 | ACGCCCTCGC | TCAAGCCTTC | GTCACTGGTC | CCGCCACGAA | ACGTTTCGGC |
| 1651 | GAGAAGCAGG | CCATTATCGC | CGGCATGGCG | GCCGACGCGC | TGGGCTACGT |
| 1701 | CTTGCTGGCG | TTCGTCCAGT | AATGACCTCA | GAACTCCATC | TGGATTTGTT |
| 1751 | CAGAACGCTC | GGTTGCCGCC | TATTGGTGAG | AATCGCAGCA | |
| 1801 | ACTTGTCGCG | CCAATOGAGC | CATGTCGTCG | TCAACGACGC | CCCATTCAAG |
| 1851 | AACAGCAAGC | AGCATTGAGA | ACTTTGGAAT | CCAGTCCGTC | TTCCACCTGC |
| 1901 | TGACGACGCG | AGGCTGGATG | GCCTTCCCCA | T^ATGATTCT | TCTCGCTTCC |
| 1951 | GGCGGCATCG | GGATGCCCGC | GTTGCAGGCC | ATGCTGTCCA | GGCAGGTAGA |
| 2001 | TGACGACCAT | CAGGGACAGC | TTCAAGGATC | CTTACGAGCG | |
| 2051 | TAACTTCGAT | CACTGGACCG | CTGATCGTCA | CGGCGATTTA | TGCCGCCTCG |
| 2101 | GCGAGCACAT | GGAACGGGTT | GGCATGGATT | GTAGGCGCCG | CCCTATACCT |
| 2151 | TGTCTGCCTC | CCCGCGTTGC | <ww/*** **r**^*T»/*»* A A | ATGGAGCCGG | GCCACCTCGA |
| 2201 | CCTGAATGGA | ·» Λζ·*·ζ·*^*/*<^ζ*** | ACCTCGCTAA | CGGATTCACC | ACTCCAAGAA |
| 2251 | TTGGAGCCAA | TCAATTCTTG | CGGAGAACTG | TGAATGCGCA | AACCAACCCT |
| 2301 | TGGCAGAACA | TATCCATCGC | GTCCGCCATC | TCCAGCAGCC | GCACGCGGCG |
| 2351 | CATCTCGGGC | AGCGTTGGGT | CCTGGCCACG | GGTGCGCATG | ATCGTGCTCC |
| 2401 | TGTCGTTGAG | GACCCGGCTA | gttgccttac | TGGTTAGCAG | |
| 2451 | AATGAATCAC | CGATACGCGA | GCGAACGTGA | AGCGACTGCT | GCTGCXAAAC |
| 2501 | GTCTGCGACC | TGAGCAACAA | CATGAATGGT | CTTCGGTTTC | CGTGTTTCGT |
| 2551 | AAAGTCTGGA | AACGCGGAAG | TCAGCGCCCT | GCACCATTAT | GTTCCGGATC |
| 2601 | TGCATCGCAG | GATGCTGCTG | GCTACCCTGT | GGAACACCTA | CATCTGTATT |
| 2651 | AACGAAGCGC | TGGCATTGAC | CCTGAGTGAT | TTTTCTCTGG | TCCCGCCGCA |
| 2701 | TCCATACCGC | 'CAGTTGTTTA | CCCTCACAAC | GTrCCAGTAA | CCGGGCATGT |
| 2751 | TCATCATCAG | TAACCCGTAT | CGTGAGCATC | CTCTCTCGTT | TCATCGGTAT |
| 2801 | CATTACCCCC | ATGAACAGAA | ATTCCCCCTT | ACACGGAGGC | ATCAAGTGAC |
| 2851 | CAAACAGGAA | AAAACCGCCC | TTAACATGGC | CCGCTTTATC | AGAAGCCAGA |
| 2901 | CATTAACGCT | TCTGGAGAAA | CTCAACGAGC | TGGACGCGGA | TGAACAGGCA |
| 2951 | GACATCTGTG | AATCGCTTCA | CGACCACGCT | GATGAGCTTT | ACCGCAGCTG |
| 3001 | CCTCGCGCGT | TTCGGTGATG | ACGGTGAAAA | CCTCTGACAC | ATGCAGCTGC |
- 18 ·· ····
Λ ·
| 3051 | CGGAGACGGT | CACAGCTTGT | CTGTAAGCGG | ATGCCGGGAG | CAGACAAGCC |
| 3101 | CGTCAGGGCG | CGTCAGCGGG | TGTTGGCGGG | TGTCGGGGCG | CAGCCATGAC |
| 3151 | CCAGTCACGT | AGCGATAGCG | GAGTGTATAC | TGGCTTAACT | atgcggcatc |
| 3201 | AGAGCAGATT | GTACTGAGAG | TGCACCATAT | ATGCGGTGTG | AAATACCGCA |
| 3251 | CAGATGCGTA | AGGAGAAAAT | ACCGCATCAG | GCGCTCTTCC | GCTTCCTCGC |
| 3301 | TCACTGACTC | GCTGCGCTCG | GTCGTTCGGC | TGCGGCGAGC | GGTATCAGCT |
| 3351 | CACTCAAAGG | CGGTAATACG | GTTATCCACA | GAATCAGGGG | ATAACGCAGG |
| 3401 | AAAGAACATG | TGAGCAAAAG | GCCAGCAAAA | GGCCAGGAAC | CGTAAAAAGG |
| 3451 | CCGCGTTGCT | GGCGTTTTTC | CATAGGCTCC | GCCCCCCTGA | CGAGCATCAC |
| 3501 | AÁAAATCGAC | GCTCAAGTCA | GAGGTGGCGA | AACCZGACAG | GACTATAAAG |
| 3551 | ATACCAGGCG | TTTCCCCCTG | GAAGCTCCCT | CGTGCGCTCT | CGTGTTCCGA |
| 3 601 | CCCTGCCGCT | TACGGGATAC | CTGTCCGCCT | TTCTCCCTTC | GGGAAGCGTG |
| 3651 | GCGCTTTCTC | AATGCTCACG | CTGTAGGTAT | CTCAGTTCGG | TGTAGGTCGT |
| 3701 | TCGCTCCAAG | CTGGGCTGTG | TGCACGAACC | CCCCGTTCAG | CCGGACCGCT |
| 3751 | GCGCCTTATC | CGGTAACTAT | CGTCTTGAGT | CCAAC-GGGT | AAGACACGAC |
| 3301 | TTATCGCCAC | TGGCAGCAGC | CACTGGTAAC | AGGATTAGCA | GAGCGAGGTA |
| 3351 | TGTAGGCGGT | GCTACAGAGT | TCTTGAAGTG | GTGGCCTAAC | TACGGCTACA |
| 3901 | CTAGAAGGAC | AGTATTTGGT | ATCTGCGCTC | TGCTGAAGCC | AGTTACCTTC |
| 3951 | GGAAAAAGAG | TTGGTAGCTC | TTGATCCGGC | AAACAAACCA | CCGCTGGTAG |
| 4001 | CGGTGGTTTT | TTTGTTTGCA | AGCAGCAGAT | TACGCGCAGA | AAAAAAGGAT |
| 4051 | CTCAAGAAGA | TCCTTTGATC | TTTTCTACGG | GGTCTGACGC | TCAGTGGAAC |
| 4101 | GAAAACTCAC | GTTAAGGGAT | TTTGGTCATG | AGATTATCAA | AAAGGATCTT |
| 4151 | CACCTAGA7C | CTTTTAAATT | AAAAATGAAG | TTTTAAATCA | ATCTAAAGTA |
| 4201 | TATATGAGTA | AACTTGGTCT | GACAGTTACC | AATGCTTAAT | CAGTGAGGCA |
| 4251 | CCTATCTCAG | CGATCTGTCT | ATTTCGTTCA | TCCATAGTTG | CCTGACTCGC |
| 4301 | CGTCGTGTAG | ATAACTACGA | TACGGGAGGG | CTTACCATCT | GGCGCGAGTG |
| 4351 | CTGCAATGAT | ACCGCGAGAC | CCACGCTCAC | CGGCTCCAGA | TTTATCAGCA |
| 4401 | ATAAACCAGC | CAGCCGGAAG | GGCCGAGCGC | AGAAGTGGTC | CTGCAACTTT |
| 4451 | ATCCGCCTCC | ATCCAGTCTA | TTAATTGTTG | CCGGGAAGCT | AGAGTAAGTA |
| 4501 | GTTCGCCAGT | TAATAGTTTG | CGCAACGTTG | TTGCCATTGC | TGCAGGTCGA |
| 4551 | CGGATCAGCC | TCGAGGTGAG | GTČTGCCTCG | TGAAGAAGGT | GTTGCTGACT |
| 4601 | CATACCAGGC. CTGAATCGCC | CCATCATCCA | GCCAGAAAGT | GAGGGAGCCA | |
| 4551 | CGGTTGATGA GAGCTTTGTT | GTAGGTGGAC | CAGTTGGTGA | TTTTGAACTT | |
| 4701 | CTGCGTTGTC | GGGAAGATGC | GTGATCTGAT |
| 4751 | CCTTCAACTC | AGCAAAAGTT | CGATTTATTC | • · • · · · · · AACAAAGCCA | • · · · · • · · · CGTTGTGTCT |
| 4801 | CAAAATCTCT | GATGTTAOAT TGCACAAGAT | ΑΑΑΑΑΓΑΤΑΤ | CATCATGAAC | |
| 48S1 | AATAAAACTG | TCTGCTTACA TAAACAGTAA | TACAAGGGGT | GTTATGAGCG | |
| 4901 | ATATTCAACG | GGAAACGTCT | TGCTCGAGGC | CGCGATTAAA TTCCAACATG | |
| 4951 | GATGCTGATT | TATATGGGTA | TAAATGGGCT | CGCGATAATG | TCGGGCAATC |
| 5001 | AGGTGCGACA | ATCTATCGAT | TGTATGGGAA | GCCCGATGCG | CCAGAGTTGT |
| SOSL | TTCTGAAACA | TGGCAAAGGT | AGCGTTGCGA | ATGATGTTAC | AGATGAGATG |
| 5101 | GTCAGACTAA | ACTGGCTGAC | GGAATTTATG | CCTCTTCCGA | CCATCAAGCA |
| 5151' | TTTTATCCGT | ACTCCTGATG | ATGCATGGTT | ACTCACCACT | GCGATCOCCG |
| 5201 | GGAAAACAGC | ATTCCAGGTA | TTAGAAGAAT | ATCCTGATTC | AGGTGAAAAT |
| 5251 | ATTGTTGATG | CGCTGGCAGT | GTTCCTGCGC | CGGTTGCATT | CGATTCCTGT |
| 5301 | TTGTAATxGT | CCTTTTAACA | GCGATCGCGT | ATTTCGTCTC | |
| 5351 | AATCACGAAT | GAATAACGGT | TTGGTTGATG | CGAGTGATTT | TGATGACGAG |
| 5401 | CGTAATGGCT | GGCCTGTTGA | ACAAGTCTGG | AAAGAAATGC | ATAAGCTTTT |
| 5451 | GCCATTCTCA | CCGGATTCAG | TCGTCACTCA | TGGTGATTTC | TCACTTGATA |
| 5501 | ACCTTATTTT | TGACGAGGGG | AAATTAATAG | GTTGTATTGA | TGTTGGACGA |
| 5551 | GTCGGAATCG | CAGACCGATA | CGAGGATCTT | GCCATCCTAT | GGAACTGCCT |
| 5601 | CGGTGAGTTT | TCTCCTTCAT | TACAGAAACG | GCTTTOCÍA | AAATATGGTA |
| 5631 | TTGATAATCC | TGATATGAAT | AAATTGCAGT | TTCATTTGAT | GCTCGATGAG |
| 5701 | TTTTTCTAAT | CAGAATTGGT | TAATTGGTTG | TAACACTGGC | AGAGCATTAC |
| 5751 | GCTGACTTGA | CGGGACGGCG | GCTTTGTTGA | ATAAATCGAA | CTTTTGCTGA |
| 5801 | GTTGAAGGAT | CAGATCACGC | ATCTTCCCGA | CAACGCAGAC | CGTTCGGTGG |
| 5851 | CAAAGCAAAA | GTTCAAAATC | ACCAACTGGT | CCACCTACAA | CAAAGCTCTC |
| 5901 | ATCAACCGTG | GCTCCCTCAC | TTTCTGGCTG | GATGATGGGG | CGATTCAGGC |
| 5951 | CTGGTATGAG | TCAGCAACAC | CTTCTTCACG | AGGCAGACCT | CACCTCGAGG |
6001 CTGATCCCCG
Řetězec ě. 3
| 1 | MSTNFKPQRK TKRNTNRRPQ DVKFPGGGQI VGGVYLLPRR GPRLGVRATR |
| 51 | KTSERSQPRG RRQPIPKARR PEGRTWAQPG YPWPLYGNEG CGWAGWLLS? |
| 101 | RGSRPSWGPT DPRRRSRNLG KVIDTLTCGF ADLMSYIPLV GAPLGGAARA |
| 151 | LAHGVRVLED GVNYATGNLP GCSFSIFLLA LLSCLTVPAS AYQVRNSSGL |
| 201 | YHVTNDCPNS SIVYEAADAI LHTPGCVPCV REGNASRCWV AVTPTVATRD |
·· ··· ·
| 251 | GKLPTTOLRR | HIDLLVGSAT | • LCSALYVGbfc | • · · · *OeŠvrfMGQB· | • · · · · · · •ÉTFSPí&fcwrf |
| 3 01 | TQDCNCSIYP | GHITGHRMAW | DMMMNWSPTA | ALWAQLLRI | PQAIMDMIAG |
| 351 | AHWGVLAGIA | YFSMVGNWAK | VLWLLLFAG | VDAETHVTGG | NAGRTTAGLV |
| 401 | GLLTPGAKQN | IQLIMNGSW | KNSTALNCN | ESLNTGWLAG | LFYQHKFNSS |
| 451 | GCPERLASCR | RLTDFAQGWG | PISYANGSGH | DERPYCWHYP | PRPCGIVPAK |
| 501 | SVCGPVYCFT | PSPVWGTTD | RSGAPTYSWG | ANDTDVFVLN | NTRPPLGNWF |
| 551 | GCTWMNSTGF | TKVCGAPPCV | IGGVGNNTLL | CPTDCFRKHP | EATYSRCGSG |
| 601 | PWITPRCMVD | YPYRLWHYPC | TINYTIFKVR | MYVGGVEHRL | EAACNWTRGE |
| '651 | RCTLEDRDRS | ELSPLLLSTT | QWQVLPCSFT | TLPALSTGLI | HLHQNIVDVQ |
| 701 | ylygvgssia | SWAIKWEYW | LLFLLLADAR | VCSCLWMMLL | ISQAEAALEN |
| 751 | LVTLNAASLA | GTHGLVSFLV | FFCFAWYLKG | RWVPGAVYAL | YGMWPLLLLL |
| 801 | LALPQRAYAL | □TEV3LASCGG | WLVGLMALT | LSPYYKRYIS | WCMWWLQYFL |
| 851 | TRVEAQLRVW | VPPLNVRGGR | DAVILLMCW | HPILVFDITK | LLLAIFGPLW |
| 901 | ILQASLLKVP | YFVRVQGLLR | ICALARKIAG | GHYVQMAIIK | LGALTGTYVY |
| 951 | NHLTPLRDWA | HNGLRDLAVA | VEPWFSRME | TKLITWGADT | AACGDIINGL |
| 1001 | PVSARR |
Zastupuje :
Claims (15)
1. Vakcína, vyznačující se tím, že obsahuje QS21, 3-de-0-acylovaný monofosforyllipid A, emulzi typu olej ve vodě, obsahující metabolizovatelný olej, alfa-tokoferol a Tween 80 a alespoň jeden imunogen ze skupiny
a) bílkoviny jádra viru hepatitidy C nebo jejího imunogenního derivátu a b) bílkoviny obalu viru hepatitidy C nebo jejího imunogenního derivátu.
2. Vakcína podle nároku 1,vyznačující se t í m , že bílkovina HOV nebo její imunogenní derivát je chemicky konjugována s nosnou molekulou.
3. Vakcína podle nároku 1 nebo 2, vyznačuj í cí se tím, že jako imunogenní derivát obsahuje složený polypeptid.
4. Vakcína podle nároku 3,vyznačující se tím, že složená bílkovina je tvořena bílkovinou jádra HCV nebo jejím imunogenním derivátem a bílkovinou chřipkového viru nebo jejím imunogenním derivátem.
5. Vakcína podle nároku 4, vyznačující se t í m , že Jako bílkovinu chřipkového viru obsahuje NS1.
6. Sloučenina, tvořená bílkovinou jádra HCV nebo jejím imunogenním derivátem, vázaným na polypeptid, obsahující cizorodé epitopy.
7. Sloučenina podle nároku 6, v níž polypeptidem s obsahem cizorodých epitopů je bílkovina chřipkového viru nebo její imunogenní derivát.
·· ·· • · · ·· * *··· ·· · · · ···· • ··· · · 4 · · · · · • · · ···· · · · • 4· · « · ·· · · · · ··
- 22
8. Sloučenina podle nároku 7, v níž bílkovinou chřip·· ···· ·· · ··* kového viru je bílkovina NS1.
9. Způsob léčení nebo prevence infekce HCV, vyznačující se tím, že se nemocným podává účinné množství vakcíny podle některého z nároků 1 až 5 nebo sloučeniny podle některého z nároků 6 až 8.
10. Použití vakcíny podle některého z nároků 1 až 5 nebo sloučeniny podle některéhoz nároků 6 až 8 pro výrobu farmaceutického prostředku pro použití při prevenci nebo léčení infekce HCV.
11. Způsob výroby vakcíny podle nároku 1 až 5, vyznačující se tím, že se složky smísí v požadovaných poměrech.
12. Způsob výroby sloučeniny podle některého z nároků 6 až 8,vyznačující se tím, že se dosáhne exprese kódové DNA pro tuto sloučeninu v rekombinantní hostitelské buňce a produkt exprese se izoluje.
13. Molekula DNA s kódovou sekvencí pro sloučeninu podle některého z nároků 6 až 8.
14. Rekombinantní vektor s obsahem DNA z nároku 13.
15. Hostitelská buňka, transformovaná rekombinantním vektorem podle nároku 14.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GBGB9513261.9A GB9513261D0 (en) | 1995-06-29 | 1995-06-29 | Vaccines |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ422397A3 true CZ422397A3 (cs) | 1998-06-17 |
Family
ID=10776867
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ974223A CZ422397A3 (cs) | 1995-06-29 | 1996-06-20 | Vakcina |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0835318A2 (cs) |
| JP (1) | JPH11508769A (cs) |
| KR (1) | KR19990028505A (cs) |
| AU (1) | AU6304996A (cs) |
| BR (1) | BR9609258A (cs) |
| CA (1) | CA2222456A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ422397A3 (cs) |
| GB (1) | GB9513261D0 (cs) |
| HU (1) | HUP9901901A3 (cs) |
| IL (1) | IL122589A0 (cs) |
| NO (1) | NO976060L (cs) |
| PL (1) | PL324906A1 (cs) |
| TR (1) | TR199701713T1 (cs) |
| WO (1) | WO1997001640A2 (cs) |
| ZA (1) | ZA965459B (cs) |
Families Citing this family (158)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DK0909323T3 (da) | 1996-01-04 | 2007-05-21 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Helicobacter pylori-bakterioferritin |
| US5858389A (en) * | 1996-08-28 | 1999-01-12 | Shaker H. Elsherbini | Squalene is an antiviral compound for treating hepatitis C virus carriers |
| AT405939B (de) * | 1997-02-24 | 1999-12-27 | Immuno Ag | Verfahren zur inaktivierung von lipidumhüllten viren |
| US6406705B1 (en) * | 1997-03-10 | 2002-06-18 | University Of Iowa Research Foundation | Use of nucleic acids containing unmethylated CpG dinucleotide as an adjuvant |
| GB9712347D0 (en) | 1997-06-14 | 1997-08-13 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
| GB9718901D0 (en) * | 1997-09-05 | 1997-11-12 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
| GB9727262D0 (en) * | 1997-12-24 | 1998-02-25 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
| ATE357526T1 (de) * | 1998-08-21 | 2007-04-15 | Us Gov Health & Human Serv | Modifizierte hcv peptid-impfstoffe |
| CA2773698C (en) | 1998-10-16 | 2015-05-19 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Adjuvant systems comprising an immunostimulant adsorbed to a metallic salt particle and vaccines thereof |
| GB9908885D0 (en) * | 1999-04-19 | 1999-06-16 | Smithkline Beecham Biolog | Vccine |
| AU772617B2 (en) * | 1999-11-19 | 2004-05-06 | Csl Limited | Vaccine compositions |
| EP1328543B1 (en) | 2000-10-27 | 2009-08-12 | Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. | Nucleic acids and proteins from streptococcus groups a & b |
| EP2336368A1 (en) | 2000-12-07 | 2011-06-22 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Endogenous retroviruses up-regulated in prostate cancer |
| GB0115176D0 (en) | 2001-06-20 | 2001-08-15 | Chiron Spa | Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines |
| US8481043B2 (en) | 2001-06-22 | 2013-07-09 | Cpex Pharmaceuticals, Inc. | Nasal immunization |
| GB0118249D0 (en) | 2001-07-26 | 2001-09-19 | Chiron Spa | Histidine vaccines |
| GB0121591D0 (en) | 2001-09-06 | 2001-10-24 | Chiron Spa | Hybrid and tandem expression of neisserial proteins |
| AR045702A1 (es) | 2001-10-03 | 2005-11-09 | Chiron Corp | Composiciones de adyuvantes. |
| CA2476626A1 (en) | 2002-02-20 | 2003-08-28 | Chiron Corporation | Microparticles with adsorbed polypeptide-containing molecules |
| AU2002249253A1 (en) * | 2002-03-04 | 2002-07-08 | Zagyansky, Yuly | Universal antimicrobial treatment |
| US8518694B2 (en) | 2002-06-13 | 2013-08-27 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Nucleic acid vector comprising a promoter and a sequence encoding a polypeptide from the endogenous retrovirus PCAV |
| GB0220194D0 (en) | 2002-08-30 | 2002-10-09 | Chiron Spa | Improved vesicles |
| CA2501812C (en) | 2002-10-11 | 2012-07-10 | Mariagrazia Pizza | Polypeptide-vaccines for broad protection against hypervirulent meningococcal lineages |
| ATE466875T1 (de) | 2002-11-15 | 2010-05-15 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Unerwartete oberflächenproteine in neisseria meningitidis |
| GB0227346D0 (en) | 2002-11-22 | 2002-12-31 | Chiron Spa | 741 |
| ES2411080T3 (es) | 2003-01-30 | 2013-07-04 | Novartis Ag | Vacunas inyectables contra múltiples serogrupos de meningococos |
| ES2423800T3 (es) | 2003-03-28 | 2013-09-24 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Uso de compuestos orgánicos para la inmunopotenciación |
| GB0308198D0 (en) | 2003-04-09 | 2003-05-14 | Chiron Srl | ADP-ribosylating bacterial toxin |
| ES2596553T3 (es) | 2003-06-02 | 2017-01-10 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Composiciones inmunogénicas a base de micropartículas que comprenden toxoide adsorbido y un antígeno que contiene un polisacárido |
| US20060035242A1 (en) | 2004-08-13 | 2006-02-16 | Michelitsch Melissa D | Prion-specific peptide reagents |
| RU2378010C2 (ru) | 2003-10-02 | 2010-01-10 | Новартис Вэксинес Энд Дайэгностикс С.Р.Л. | Жидкие вакцины для множественных серогрупп менингококков |
| GB0323103D0 (en) | 2003-10-02 | 2003-11-05 | Chiron Srl | De-acetylated saccharides |
| DE202005022108U1 (de) | 2004-03-09 | 2013-11-12 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Influenza-Virus-Impfstoffe |
| BRPI0510315A (pt) | 2004-04-30 | 2007-10-16 | Chiron Srl | integração de vacinação com conjugado meningocócico |
| GB0500787D0 (en) | 2005-01-14 | 2005-02-23 | Chiron Srl | Integration of meningococcal conjugate vaccination |
| GB0409745D0 (en) | 2004-04-30 | 2004-06-09 | Chiron Srl | Compositions including unconjugated carrier proteins |
| GB0410866D0 (en) | 2004-05-14 | 2004-06-16 | Chiron Srl | Haemophilius influenzae |
| WO2006078294A2 (en) | 2004-05-21 | 2006-07-27 | Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. | Alphavirus vectors for respiratory pathogen vaccines |
| US20110104186A1 (en) | 2004-06-24 | 2011-05-05 | Nicholas Valiante | Small molecule immunopotentiators and assays for their detection |
| CA2571421A1 (en) | 2004-06-24 | 2006-01-05 | Nicholas Valiante | Compounds for immunopotentiation |
| US20090317420A1 (en) | 2004-07-29 | 2009-12-24 | Chiron Corporation | Immunogenic compositions for gram positive bacteria such as streptococcus agalactiae |
| GB0424092D0 (en) | 2004-10-29 | 2004-12-01 | Chiron Srl | Immunogenic bacterial vesicles with outer membrane proteins |
| HUE033196T2 (en) | 2005-01-27 | 2017-11-28 | Children's Hospital & Res Center At Oakland | GNA1870-based vesicle vaccines for broad-spectrum protection against diseases caused by Neisseria meningitidis |
| GB0502095D0 (en) | 2005-02-01 | 2005-03-09 | Chiron Srl | Conjugation of streptococcal capsular saccharides |
| ES2385045T3 (es) | 2005-02-18 | 2012-07-17 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Inmunógenos de Escherichia coli uropatogénica |
| HUE027400T2 (en) | 2005-02-18 | 2016-10-28 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Proteins and nucleic acids from meningitis / sepsis with Escherichia coli |
| WO2007047749A1 (en) | 2005-10-18 | 2007-04-26 | Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. | Mucosal and systemic immunizations with alphavirus replicon particles |
| EP2360175B1 (en) | 2005-11-22 | 2014-07-16 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Norovirus and Sapovirus virus-like particles (VLPs) |
| GB0524066D0 (en) | 2005-11-25 | 2006-01-04 | Chiron Srl | 741 ii |
| EP2357184B1 (en) | 2006-03-23 | 2015-02-25 | Novartis AG | Imidazoquinoxaline compounds as immunomodulators |
| US20110206692A1 (en) | 2006-06-09 | 2011-08-25 | Novartis Ag | Conformers of bacterial adhesins |
| EP2586790A3 (en) | 2006-08-16 | 2013-08-14 | Novartis AG | Immunogens from uropathogenic Escherichia coli |
| GB0713880D0 (en) | 2007-07-17 | 2007-08-29 | Novartis Ag | Conjugate purification |
| GB0714963D0 (en) | 2007-08-01 | 2007-09-12 | Novartis Ag | Compositions comprising antigens |
| RU2471497C2 (ru) | 2007-09-12 | 2013-01-10 | Новартис Аг | Мутантные антигены gas57 и антитела против gas57 |
| GB0818453D0 (en) | 2008-10-08 | 2008-11-12 | Novartis Ag | Fermentation processes for cultivating streptococci and purification processes for obtaining cps therefrom |
| CN104292312A (zh) | 2007-12-21 | 2015-01-21 | 诺华股份有限公司 | 链球菌溶血素o的突变形式 |
| EP2245048B1 (en) | 2008-02-21 | 2014-12-31 | Novartis AG | Meningococcal fhbp polypeptides |
| EP2265640B1 (en) | 2008-03-10 | 2015-11-04 | Children's Hospital & Research Center at Oakland | Chimeric factor h binding proteins (fhbp) containing a heterologous b domain and methods of use |
| EP2376108B1 (en) | 2008-12-09 | 2017-02-22 | Pfizer Vaccines LLC | IgE CH3 PEPTIDE VACCINE |
| MX2011007456A (es) | 2009-01-12 | 2011-08-03 | Novartis Ag | Antigenos del dominio de proteina de superficie de union a colageno tipo b (can_b) en vacunas contra bacteria gram positiva. |
| US8568732B2 (en) | 2009-03-06 | 2013-10-29 | Novartis Ag | Chlamydia antigens |
| SG175092A1 (en) | 2009-04-14 | 2011-11-28 | Novartis Ag | Compositions for immunising against staphylococcus aerus |
| BRPI1014494A2 (pt) | 2009-04-30 | 2016-08-02 | Coley Pharm Group Inc | vacina pneumocócica e usos da mesma |
| DK2442826T3 (en) | 2009-06-15 | 2015-09-21 | Univ Singapore | Influenza vaccine, composition and methods of using |
| SG177533A1 (en) | 2009-07-07 | 2012-02-28 | Novartis Ag | Conserved escherichia coli immunogens |
| SG178035A1 (en) | 2009-07-16 | 2012-03-29 | Novartis Ag | Detoxified escherichia coli immunogens |
| PE20120817A1 (es) | 2009-07-30 | 2012-07-07 | Pfizer Vaccines Llc | Peptidos tau antigenicos y usos de los mismos |
| AU2010288240B2 (en) | 2009-08-27 | 2014-03-27 | Novartis Ag | Hybrid polypeptides including meningococcal fHBP sequences |
| PE20161560A1 (es) | 2009-09-03 | 2017-01-11 | Pfizer Vaccines Llc | Vacuna de pcsk9 |
| KR101746880B1 (ko) | 2009-09-10 | 2017-06-14 | 메리얼 인코포레이티드 | 사포닌-함유 면역보강제를 포함하는 신규 백신 제형 |
| US20120237536A1 (en) | 2009-09-10 | 2012-09-20 | Novartis | Combination vaccines against respiratory tract diseases |
| GB0917002D0 (en) | 2009-09-28 | 2009-11-11 | Novartis Vaccines Inst For Global Health Srl | Improved shigella blebs |
| GB0917003D0 (en) | 2009-09-28 | 2009-11-11 | Novartis Vaccines Inst For Global Health Srl | Purification of bacterial vesicles |
| WO2011039631A2 (en) | 2009-09-30 | 2011-04-07 | Novartis Ag | Expression of meningococcal fhbp polypeptides |
| JP2013506651A (ja) | 2009-09-30 | 2013-02-28 | ノバルティス アーゲー | Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ．ａｕｒｅｕｓ５型および８型莢膜多糖の結合体 |
| GB0918392D0 (en) | 2009-10-20 | 2009-12-02 | Novartis Ag | Diagnostic and therapeutic methods |
| AU2010310985B2 (en) | 2009-10-27 | 2014-11-06 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Modified meningococcal fHBP polypeptides |
| GB0919690D0 (en) | 2009-11-10 | 2009-12-23 | Guy S And St Thomas S Nhs Foun | compositions for immunising against staphylococcus aureus |
| EP3257525A3 (en) | 2009-12-22 | 2018-02-28 | Celldex Therapeutics, Inc. | Vaccine compositions |
| EP2519265B1 (en) | 2009-12-30 | 2018-11-14 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Polysaccharide immunogens conjugated to e. coli carrier proteins |
| GB201003333D0 (en) | 2010-02-26 | 2010-04-14 | Novartis Ag | Immunogenic proteins and compositions |
| CN102834410B (zh) | 2010-03-30 | 2016-10-05 | 奥克兰儿童医院及研究中心 | 改性的h因子结合蛋白（fhbp）及其使用方法 |
| GB201005625D0 (en) | 2010-04-01 | 2010-05-19 | Novartis Ag | Immunogenic proteins and compositions |
| WO2011127316A1 (en) | 2010-04-07 | 2011-10-13 | Novartis Ag | Method for generating a parvovirus b19 virus-like particle |
| JP2013532008A (ja) | 2010-05-28 | 2013-08-15 | テトリス オンライン インコーポレイテッド | 対話式ハイブリッド非同期コンピュータ・ゲーム・インフラストラクチャ |
| CA2798837A1 (en) | 2010-06-07 | 2011-12-15 | Pfizer Inc. | Her-2 peptides and vaccines |
| CA2800774A1 (en) | 2010-06-07 | 2011-12-15 | Pfizer Vaccines Llc | Ige ch3 peptide vaccine |
| GB201009861D0 (en) | 2010-06-11 | 2010-07-21 | Novartis Ag | OMV vaccines |
| US20130171185A1 (en) | 2010-07-06 | 2013-07-04 | Ethan Settembre | Norovirus derived immunogenic compositions and methods |
| US9192661B2 (en) | 2010-07-06 | 2015-11-24 | Novartis Ag | Delivery of self-replicating RNA using biodegradable polymer particles |
| GB201101665D0 (en) | 2011-01-31 | 2011-03-16 | Novartis Ag | Immunogenic compositions |
| GB201017519D0 (en) | 2010-10-15 | 2010-12-01 | Novartis Vaccines Inst For Global Health S R L | Vaccines |
| WO2012072769A1 (en) | 2010-12-01 | 2012-06-07 | Novartis Ag | Pneumococcal rrgb epitopes and clade combinations |
| NZ611176A (en) | 2010-12-02 | 2015-07-31 | Bionor Immuno As | Peptide scaffold design |
| CA2860331A1 (en) | 2010-12-24 | 2012-06-28 | Novartis Ag | Compounds |
| US9493514B2 (en) | 2011-01-06 | 2016-11-15 | Bionor Immuno As | Dimeric scaffold proteins comprising HIV-1 GP120 and GP41 epitopes |
| US20140004142A1 (en) | 2011-03-02 | 2014-01-02 | Pfizer Inc. | Pcsk9 vaccine |
| WO2013016460A1 (en) | 2011-07-25 | 2013-01-31 | Novartis Ag | Compositions and methods for assessing functional immunogenicity of parvovirus vaccines |
| GB201114923D0 (en) | 2011-08-30 | 2011-10-12 | Novartis Ag | Immunogenic proteins and compositions |
| JP2014531442A (ja) | 2011-09-14 | 2014-11-27 | ノバルティス アーゲー | Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉワクチンの組み合わせ |
| CN103917245B (zh) | 2011-09-14 | 2017-06-06 | 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 | 用于制备糖‑蛋白质糖缀合物的方法 |
| RU2014127714A (ru) | 2011-12-08 | 2016-01-27 | Новартис Аг | ВАКЦИНА НА ОСНОВЕ ТОКСИНОВ Clostridium difficile |
| WO2013108272A2 (en) | 2012-01-20 | 2013-07-25 | International Centre For Genetic Engineering And Biotechnology | Blood stage malaria vaccine |
| CN104321335A (zh) | 2012-02-24 | 2015-01-28 | 诺华股份有限公司 | 菌毛蛋白质和组合物 |
| CA2871520C (en) | 2012-04-26 | 2020-12-29 | Novartis Ag | Antigens from non-typeable h. influenzae |
| US10279026B2 (en) | 2012-04-26 | 2019-05-07 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Antigens and antigen combinations |
| EP2659908A1 (en) | 2012-05-01 | 2013-11-06 | Affiris AG | Compositions |
| EP2659907A1 (en) | 2012-05-01 | 2013-11-06 | Affiris AG | Compositions |
| EP2659906A1 (en) | 2012-05-01 | 2013-11-06 | Affiris AG | Compositions |
| MX359257B (es) | 2012-05-04 | 2018-09-19 | Pfizer | Antígenos asociados a próstata y regímenes de inmunoterapia basados en vacuna. |
| SG11201407440WA (en) | 2012-05-22 | 2014-12-30 | Novartis Ag | Meningococcus serogroup x conjugate |
| MX2014014683A (es) | 2012-06-06 | 2015-02-24 | Bionor Immuno As | Peptidos derivados de proteinas virales para usarse como inmunogenos y reactivos de dosificacion. |
| AU2013320313B2 (en) | 2012-09-18 | 2018-07-12 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Outer membrane vesicles |
| EA201590427A1 (ru) | 2012-10-02 | 2015-09-30 | Глаксосмитклайн Байолоджикалс С.А. | Нелинейные сахаридные конъюгаты |
| SG11201500979RA (en) | 2012-10-03 | 2015-07-30 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Immunogenic composition |
| US9987344B2 (en) | 2012-11-30 | 2018-06-05 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Pseudomonas antigens and antigen combinations |
| US20210145963A9 (en) | 2013-05-15 | 2021-05-20 | The Governors Of The University Of Alberta | E1e2 hcv vaccines and methods of use |
| EP3096785B1 (en) | 2014-01-21 | 2020-09-09 | Pfizer Inc | Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof |
| US11160855B2 (en) | 2014-01-21 | 2021-11-02 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof |
| WO2015123291A1 (en) | 2014-02-11 | 2015-08-20 | The Usa, As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services | Pcsk9 vaccine and methods of using the same |
| EP4074726A3 (en) | 2014-07-23 | 2022-11-23 | Children's Hospital & Research Center at Oakland | Factor h binding protein variants and methods of use thereof |
| DK3244917T5 (da) | 2015-01-15 | 2024-10-14 | Pfizer Inc | Immunogene sammensætninger til anvendelse i pneumokokvacciner |
| AU2016271857B2 (en) | 2015-06-03 | 2020-05-28 | Affiris Ag | IL-23-P19 vaccines |
| EP3319988A1 (en) | 2015-07-07 | 2018-05-16 | Affiris AG | Vaccines for the treatment and prevention of ige mediated diseases |
| PE20180657A1 (es) | 2015-07-21 | 2018-04-17 | Pfizer | Composiciones inmunogenas que comprenden antigenos de sacarido capsular conjugados, kits que las comprenden y sus usos |
| CA3005524C (en) | 2015-11-20 | 2023-10-10 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions for use in pneumococcal vaccines |
| JP6820935B2 (ja) | 2016-01-19 | 2021-01-27 | ファイザー・インク | がんワクチン |
| SI3570879T1 (sl) | 2017-01-20 | 2022-06-30 | Pfizer Inc. | Imunogenska kompozicija za uporabo v pnevmokoknih cepivih |
| WO2019173438A1 (en) | 2018-03-06 | 2019-09-12 | Stc. Unm | Compositions and methods for reducing serum triglycerides |
| CN112912097A (zh) | 2018-08-23 | 2021-06-04 | 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 | 免疫原性蛋白和组合物 |
| US11260119B2 (en) | 2018-08-24 | 2022-03-01 | Pfizer Inc. | Escherichia coli compositions and methods thereof |
| JP2022512345A (ja) | 2018-12-12 | 2022-02-03 | ファイザー・インク | 免疫原性多重ヘテロ抗原多糖－タンパク質コンジュゲートおよびその使用 |
| JP7239509B6 (ja) | 2019-02-22 | 2023-03-28 | ファイザー・インク | 細菌多糖類を精製するための方法 |
| US20220184199A1 (en) | 2019-04-10 | 2022-06-16 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens, kits comprising the same and uses thereof |
| IL292494A (en) | 2019-11-01 | 2022-06-01 | Pfizer | Preparations of Escherichia coli and their methods |
| NL2027383B1 (en) | 2020-01-24 | 2022-04-06 | Aim Immunotech Inc | Methods, compositions, and vaccines for treating a virus infection |
| WO2021160887A1 (en) | 2020-02-14 | 2021-08-19 | Immunor As | Corona virus vaccine |
| WO2021165847A1 (en) | 2020-02-21 | 2021-08-26 | Pfizer Inc. | Purification of saccharides |
| EP4107170A2 (en) | 2020-02-23 | 2022-12-28 | Pfizer Inc. | Escherichia coli compositions and methods thereof |
| EP4114848A4 (en) | 2020-02-26 | 2024-04-03 | Versitech Limited | PD-1-BASED VACCINES AGAINST CORONAVIRUS INFECTION |
| IL302362A (en) | 2020-10-27 | 2023-06-01 | Pfizer | ESCHERICHIA COLI preparations and their methods |
| CN116744965A (zh) | 2020-11-04 | 2023-09-12 | 辉瑞大药厂 | 用于肺炎球菌疫苗的免疫原性组合物 |
| EP4243863A2 (en) | 2020-11-10 | 2023-09-20 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof |
| US20220202923A1 (en) | 2020-12-23 | 2022-06-30 | Pfizer Inc. | E. coli fimh mutants and uses thereof |
| WO2022147373A1 (en) | 2020-12-31 | 2022-07-07 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Antibody-guided pcsk9-mimicking immunogens lacking 9-residue sequence overlap with human proteins |
| TW202245836A (zh) | 2021-02-19 | 2022-12-01 | 美商賽諾菲巴斯德公司 | 重組ｂ型腦膜炎球菌疫苗 |
| US20220387576A1 (en) | 2021-05-28 | 2022-12-08 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof |
| JP2024522395A (ja) | 2021-05-28 | 2024-06-19 | ファイザー・インク | コンジュゲートさせた莢膜糖抗原を含む免疫原性組成物およびその使用 |
| IL312890A (en) | 2021-11-18 | 2024-07-01 | Matrivax Inc | Immunogenic fusion protein preparations and methods of using them |
| AU2023207315A1 (en) | 2022-01-13 | 2024-06-27 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof |
| WO2023161817A1 (en) | 2022-02-25 | 2023-08-31 | Pfizer Inc. | Methods for incorporating azido groups in bacterial capsular polysaccharides |
| WO2023218322A1 (en) | 2022-05-11 | 2023-11-16 | Pfizer Inc. | Process for producing of vaccine formulations with preservatives |
| WO2024110827A1 (en) | 2022-11-21 | 2024-05-30 | Pfizer Inc. | Methods for preparing conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof |
| US20240181028A1 (en) | 2022-11-22 | 2024-06-06 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof |
| WO2024116096A1 (en) | 2022-12-01 | 2024-06-06 | Pfizer Inc. | Pneumococcal conjugate vaccine formulations |
| WO2024166008A1 (en) | 2023-02-10 | 2024-08-15 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof |
| WO2024201324A2 (en) | 2023-03-30 | 2024-10-03 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2049679C (en) * | 1990-08-24 | 2005-06-21 | Sushil G. Devare | Hepatitis c assay utilizing recombinant antigens |
| DE4041304A1 (de) * | 1990-12-21 | 1992-06-25 | Mikrogen Molekularbiol Entw | Von strukturproteinen des hepatitis c-virus abgeleitete polypeptide, testkits, die diese polypeptide enthalten und impfstoffe gegen infektionen von hepatitis c-viren |
| RO117329B1 (ro) * | 1991-06-24 | 2002-01-30 | Chiron Corp Emeryville | Polipeptide care contin o secventa a virusului hepatitei c |
| MY111880A (en) * | 1992-03-27 | 2001-02-28 | Smithkline Beecham Biologicals S A | Hepatitis vaccines containing 3-0 deacylated monophosphoryl lipid a |
| ES2143716T3 (es) * | 1992-06-25 | 2000-05-16 | Smithkline Beecham Biolog | Composicion de vacuna que contiene adyuvantes. |
| JPH06279500A (ja) * | 1992-09-30 | 1994-10-04 | Imuno Japan:Kk | ＨＢｃ融合蛋白粒子およびその製造方法 |
| GB9326253D0 (en) * | 1993-12-23 | 1994-02-23 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccines |
-
1995
- 1995-06-29 GB GBGB9513261.9A patent/GB9513261D0/en active Pending
-
1996
- 1996-06-20 BR BR9609258A patent/BR9609258A/pt unknown
- 1996-06-20 CA CA002222456A patent/CA2222456A1/en not_active Abandoned
- 1996-06-20 IL IL12258996A patent/IL122589A0/xx unknown
- 1996-06-20 KR KR1019970709823A patent/KR19990028505A/ko not_active Application Discontinuation
- 1996-06-20 PL PL96324906A patent/PL324906A1/xx unknown
- 1996-06-20 TR TR97/01713T patent/TR199701713T1/xx unknown
- 1996-06-20 HU HU9901901A patent/HUP9901901A3/hu unknown
- 1996-06-20 EP EP96922029A patent/EP0835318A2/en not_active Withdrawn
- 1996-06-20 CZ CZ974223A patent/CZ422397A3/cs unknown
- 1996-06-20 WO PCT/EP1996/002764 patent/WO1997001640A2/en not_active Application Discontinuation
- 1996-06-20 AU AU63049/96A patent/AU6304996A/en not_active Abandoned
- 1996-06-20 JP JP9504167A patent/JPH11508769A/ja active Pending
- 1996-06-27 ZA ZA965459A patent/ZA965459B/xx unknown
-
1997
- 1997-12-23 NO NO976060A patent/NO976060L/no unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ZA965459B (en) | 1997-04-01 |
| GB9513261D0 (en) | 1995-09-06 |
| WO1997001640A2 (en) | 1997-01-16 |
| KR19990028505A (ko) | 1999-04-15 |
| TR199701713T1 (xx) | 1998-05-21 |
| PL324906A1 (en) | 1998-06-22 |
| JPH11508769A (ja) | 1999-08-03 |
| WO1997001640A3 (en) | 1997-05-15 |
| CA2222456A1 (en) | 1997-01-16 |
| AU6304996A (en) | 1997-01-30 |
| NO976060D0 (no) | 1997-12-23 |
| HUP9901901A3 (en) | 2000-03-28 |
| NO976060L (no) | 1998-02-17 |
| MX9710523A (es) | 1998-09-30 |
| IL122589A0 (en) | 1998-06-15 |
| HUP9901901A2 (hu) | 1999-09-28 |
| BR9609258A (pt) | 1999-05-11 |
| EP0835318A2 (en) | 1998-04-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ422397A3 (cs) | Vakcina | |
| CA2483653C (en) | Dengue tetravalent vaccine containing a common 30 nucleotide deletion in the 3'-utr of dengue types 1,2,3, and 4, or antigenic chimeric dengue viruses 1,2,3, and 4 | |
| Heile et al. | Evaluation of hepatitis C virus glycoprotein E2 for vaccine design: an endoplasmic reticulum-retained recombinant protein is superior to secreted recombinant protein and DNA-based vaccine candidates | |
| AU2006291863B2 (en) | Dengue virus capsid protein which induces a protective response and pharmaceutical composition | |
| EP3681514A1 (en) | Zika virus rna vaccines | |
| EP1555270A1 (en) | HCV NS3 proteins and nucleic acids | |
| US20070128213A1 (en) | Novel plant virus particles and methods of inactivation thereof | |
| KR20070072597A (ko) | 일본 뇌염 바이러스 및 웨스트 나일 바이러스에 대한 백신 | |
| JPH06504431A (ja) | Ｃ型肝炎ウイルスアシアロ糖タンパク質 | |
| US10039820B2 (en) | West nile virus vaccine comprising WN-80E recombinant subunit protein | |
| KR20110084906A (ko) | 면역원-특이적 면역보강제로서의 재조합 단백질체들 | |
| JP2010521511A (ja) | ＨＣＶのポリタンパク質ＮＳ３／ＮＳ４及びポリペプチドＮＳ５ｂを含む組成物、対応する核酸配列を含む発現ベクター、及びそれらの治療的使用 | |
| JPS61181387A (ja) | マラリアワクチン用ポリペプチドのイー・コリにおけるクローニングおよび発現 | |
| DK2339011T3 (en) | Chimeric of West Nile virus and dengue-4 virus for use in a live virus vaccine for the prevention of disease caused by the West Nile Virus | |
| JPH09510102A (ja) | 犬糸状虫Ｇｐ２９タンパク質、核酸分子、およびそれらの用途 | |
| CN1189855A (zh) | 抗丙型肝炎病毒的疫苗 | |
| US8691234B2 (en) | Vaccine formulation potentiated by the combination of DNA and an antigen | |
| CN114195884B (zh) | 一种重组人源胶原蛋白及其制备方法 | |
| EP3463443A1 (en) | Hev vaccine | |
| MXPA97010523A (en) | Vaccines against hepatitis | |
| EP2495325B1 (en) | Dna vaccine against virus of yellow fever | |
| TWI272104B (en) | Immunization against flavivirus | |
| KR20220045154A (ko) | 치쿤구니야 백신 제형 | |
| CA2464795A1 (en) | Thymosin augmentation of genetic immunization | |
| Wayne | Patent Report |