JPH05501866A - 自己免疫性ブドウ膜網膜炎の治療予防薬 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 自己免疫性ブドウ膜網膜炎の治療または予防のための方法本出願は、１９８９年 ６月１４日に出願された米国特許出願一連番号第３７９゜７７８号の部分継続出 願である。

本発明の分野 本発明は、哺乳類動物におけるブドウ膜網膜炎（ｕｖｅｏｒｅｔｉｎｉｔｓ）の 治療または予防のための方法を提供することである。特に、この発明は免疫ブド ウ膜網膜炎の症状を有する疾患の臨床的出現を治療また予防するための方法を提 供するもので、該方法は、（＋）ブドウ膜網膜炎に特異的な自己抗原、（１１） ブドウ膜網膜炎を抑制する活性を有する前記自己抗原のフラグメント、そして（ ｉ　ｉ　＋）前記疾患に関連した臨床的症状を抑制または弱めるための有効量か らなる前記自己抗原またはフラグメントの同一活性類似体からなる群から選択さ れた少なくとも一つのブドウ膜網膜炎抑制剤を前記治療のために哺乳類動物へ投 与することを含む。

本発明の背景 自己免疫によるものと考えられる器官特異的炎症性疾患の効果的な治療を行なう ためには、そのための治療薬が開発されることが必要である。現在に至るまで、 自己免疫に対して非特異的な作用を有する薬学的物質の投与に臨床的なアプロー チが向けられている。より最近になって、抗原に関して非特異的な免疫応答を抑 制するが、すぐれた抗Ｔ細胞様式の作用を有するウノデカンペプチドであるンク ロスボリン（Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｌｎｅ）　（ＮｕｓｓａｎｂｌａｌＬ、　１１ ．１１．、　＆＾Ｇ、　Ｐａ１ｅｓｔｉｎｅ、　５ｕｒｖ、@０ ｐｈｔａｌ■ｏ１．　Ｈ：　１５９．１９１Ｈ）が、自己免疫由来と思われるい くつかの疾患の治療１９８３）。しかし、７クロスボリンは副作用が強いことか ら使用が制限されるという間冠がある。さらに、現在の免疫抑制治療法と同様に 、／クロスポリンに関連した薬物療法の効果は非特異的である。

ブドウ膜炎（ｕｖｅｉｔｉｓ）を含む自己免疫疾患の抑制に対する実験的免疫治 療によるアプローチは、非薬剤学的手段、例えばモノクローン抗体を用いた治療 方法ことによる免疫トレランスの誘導による免疫応答の操作に焦点が合わさられ ている。最近、ミニリン基本タンパク質（ｓｙｅｌｉｎ　ｂｉｓｉｅ　ｐｒｏｔ ｅｉｎ；　ＭＯＰ）　、またはそのフラグメントが、ヒト脱ミニリン化疾患、多 発性硬化症のモデルとして利用されている実験的自己免疫脳を髄炎（ｅｘｐｅｒ ｉｍｅｎｔａｌ　ａｕｌｏｉｓｓｕｎｅ　ｅｎｃｅｐｈ畠１ｏｍｙｅｌｌｔｌｓ ；　ＥＡＥ）の組織学的および臨床学的発現を抑えることが示されている（旧Ｂ １ｎ５゜Ｐ、Ｊ、、　＆　［１，Ｌ、　Ｗｅ（ｎｅｔ、　Ｌ、Ｉｍｍｕｎｏｌ、 １４０＋４４０．　１９ＵＨＬｉｄｅｒ、　ｅｔ　ｍｌ、Ｊ、Ｉｓμ■ ｏ１．　１４２ニア４１１、　１９８９：　Ｂｉｔａｒ、Ｄ、Ｍ、、＆　Ｃ，Ｃ ，Ｗｈｉｔ＠ｅｒｅ、Ｃｅ１ｌ　１ｓｓｕｎｏ１．　＋１２F　３６４゜ １９１１８）。

網膜由来のいくつかの自己抗原によって実験的ブドウ膜網膜炎（ＥＡＵ）を誘導 することができる（Ｇｅｒｙ、１．、　ｅｔ　ａｌ、、　ｉｎ　Ｎ、　０ｓｂｏ ｒｎｅ　＆　Ｊ、　Ｃｈａｄｅｒ　（ｅｄｓ）：　Ｐｒ。

ｇｒａｓｓ　Ｉｎ　Ｒｅｔｌｎｉｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ、　０ｘｆｏｒｄ、　Ｐ ｅｒｚａｍｏｎ　Ｐｒｅｓｓ、　５．７５−１０９．１９８閨@ａ現 在に至るまで、評価された抗原およびモデル系は、網膜のＳ−抗原（Ｓ−＾ｇ） 由来のものである（Ｇｅｒｙ、　１．、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｉｎ　Ｐｒｏｇｒｅ ｓｓ　ｉｎ　Ｒｅｔｉｎａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ、　５ｕｐｒａj　。

ブドウ膜網膜炎に罹患した患者はＳ−抗原に過敏であることから、このＳ−抗原 はヒトにおけるブドウ膜網膜炎に実質的に関与しているものと考えられる。疾患 誘導能を有するＳ−抗原に特異的なＣＤ４＋Ｔ−細胞系を長期間投与によるＳ− 抗原モデルによって、ＥＡＵがＴ−細胞媒介の疾患であることが示される（Ｃａ ｓｐｉ　Ｒ，Ｒ，、ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、　１ｓｓｕｎｏ１．１３６：９２！ｌ 、　１９８６）　ａ　Ｓ−抗原・ＥＡυモデルは、い（つかの理由からたいへん 興味深いものであることが理解される。まず第一に、最近になって、Ｓ−抗原が 唯一の網膜自己抗原であり、内因性の中間および後区のブドウ膜炎症を有する実 質的に数人の患者は、その抗原に対してインビトロ系第二に、最近になってブド ウ膜炎を引き起こすＳ−抗原の全アミノ酸配列が報告されており、ＮおよびＭで それぞれ表わされる２つの７ラグメノトを有しているに試験されたしトにおける ／クロスボリノの臨床的有効性によ、）で示されるものとして、ヒトブドウ膜網 膜炎のためのすぐれた予セ値を有するようにされた（Ｎｕｓｇｅｉｂｌａｔｌ、 　Ｒ，Ｂ、、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、Ｃｌ１ｎ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　６７：　１ ２２８．１９８１）。

本発明の１１要な目的は、ブドウ膜炎に対して、より特異的に焦点が合わされた 、あるいは直接的な治療方法を提供することを目的とする。また、ブドウ膜炎特 異的抗原に対する免疫応答を減少させるための薬剤を経［コまたは非経口投与す ることによって、ブドウ膜網膜炎：：伴う症状を緩和させるための方法を提供す るものである。

本発明の概略 本発明は、経［］的または非経口的に投与されたブ１゛つ膜網膜炎特異的自己抗 原と、この疾もの臨床的発現を抑える関連物質とを用いるものである。また、本 発明は、特異的ｌレラノスの誘導を達成するものである。

特に、本発明者らは、自己免疫疾もであるブドウ膜網膜炎に関連ｌ、た症状が、 そのような治療または予防の必要性に応じて、ブドウ膜網膜炎に特異的な自己抗 原、そのような自己抗原のブドウｌ網膜炎抑制フラグメントまたはそのような自 己抗原またはそのフラグメントと同一活性を示す類似体の有効量を哺乳類動物に 経口的に投与することによって、抑制あるいは緩和されることを発見した。

また、本発明者らは、有効量からなる一種類以上の前記ブドウ膿網膜炎抑制剤を 念む薬剤学的製剤を開発した。そのような製剤は、前記治療または予防が必要ど される哺乳類動物に、治ｒＩＩＩＩまたは予防薬として投与されよう。

図の簡単な説明 第１図は、Ｓ−抗原によって免疫した後１４日経過したルイスラット（Ｌｅマｌ ５ｒａｔ）の眼の組織学的試験にもとづく炎症の度合いを表現したものである。

星印は、Ｓ−抗原またはフラグメントを経口投与されていないラットまたは無関 係な抗原（牛血清、ＢＳＡ）を投与されたうｙトと比較して、炎症性疾患（ＥＡ ＩＩ）について統計学的に顕著な違いが認められたことを示している。

第２図は、Ｓ−抗原のＭまたはＮのどちらか一方によって免疫されて１４日経過 後にＳ−抗原またはフラグメントを与えられたルイスラットの眼の組織学的に見 た炎症の程度を表わしたものである。

第３Ａ図は、Ｓ−抗原による免疫部分を徐々に使い果たすリンパ結節細胞におい て、Ｓ−抗原への増殖応答に対するＳ−抗原、Ｎフラグメント、Ｍフラグメント およびＢＳＡの経口投与の硬化を示すものである。結果は、少なくとも４匹の動 物から得られたもので、刺激イノデノクス±Ｓ、Ｅ　で表わした。ひとつだけの 星印は、ＢＳＡの経口投与と比較して統計的に見て顕著な差異（ｐ＝０．０１８ ）が認められたしのを示しており、一方星印二つはｐの値がｏ、ｏｏｓであるこ とを示している。

第３Ａ図は、Ｓ−抗原による免疫部分を徐々に使い果たすリンパ結節細胞におい て、関連性のない抗原であるＰＰＤ　（ソベルクリノからの精製タノバク質誘導 体）およびＣｏｎＡ　（コンカナバリノＡ）への増殖応答に対するＢＳＡおよび Ｓ−抗原の経口投与の効果を示すものである。

第４Ａ図は、Ｓ−抗原存在下でイノヴイトロ系で前培養された、Ｓ−抗原−（Ｔ ｍＳ＾ｇ）またはＢＳＡ−（Ｔ謹ＳＡｇ）のどちらか一方を投与された動物から えら得れた肺細胞へ、Ｓ−抗原特異的指示細胞、Ｖ＋　Ｔ　ｈ　Ｓ　（ＴｈＳ− Ａｇ）をさらした場合の効果について示したものである。Ｓ−抗原に応答するＴ ｈＳＡｇの抑制は、ＴｍＳＡｇに対するＴｈＳＡｇの全ての比において認められ 、またこの抑制の程度は、ＴｈＳＡｇおよびＴｍＢＳＡ同時培養に対する応答に 比べて、１：５とｌ：１０（ｐ−０，０４と０．００２）の比で統計学的に著し く高い。

第４Ｂ図は、ＴｍＳＡｇまたはＴ　ｍ　Ｂ　Ｓ　Ａとの同時培養において、Ｃｏ ｎＡ（丁−細胞分裂促進剤）へのＴｈＳＡｇの応答を示したものである。２個の 肺細胞に対してＴｈＳＡｇひとつの比では、抑制は顕著とはならいが、同程度の 抑制は両方がより高い比の場合に表わされる。

第４Ｃ図は、キーホールリノベノトヘモンｙ　＝　７（Ｋ　Ｌ　Ｈ；　ｋｅｙｈ ｏｌｅ　ｌｉｍｐｅｔ　ｈｅ■ｏｃｙａｎｉｎ）を投与された動物の肺細胞（そ のような肺細胞をＴ　ｍ　Ｋ　Ｌ　Ｈと表わす）または無（Ｔｍ対照群）をＴＳ −Ａｇと同時培養し、そしてインビトロでＳ−Ａｇとプレ・イ／キコベー／ｗノ することによって得られた応答を示すものである。

第５図は、イノビトロでＳ−Ａｇとブレ・イ／キュベー／ＩｌンされたＴｍＳ− Ａｇと、ＴｈＳ−ＡｇまたはＴｈＰＰＤ　（ＰＰＤに特異的な別のインディケー タ−細胞系）とを同時培養したものである。５−Ａｊｉに応答するＴｈＳ−Ａｇ の顕著な抑制が認められる一方で、ＰＰＤに対するエノヘノスされたＴｈＰＰＤ 増殖応答が認められた。

第６図は、２１日間におけるルイスラブドの発病パター７（Ｘ軸）を表わすもの である。Ｐ、Ｏは、０８目にＳ−Ａｇによって免疫された後に、７．９．１２お よび１５日８に１ｍｇのＳ−Ａｇを与えられた実験群である。

第７図は、０８目にＳ−Ａｇによって免疫された後に、７．９．１２および１５ 日８に１ｍｇの３−Ａｇを与えられたルイスラットの眼の炎症性疾患の度合いを 組織学的に表わしたものである。結果は、少なくとも６匹の動物から得たもので あって、平均上標準偏差（ＳＥＭ）で表わした。組織学的グレードの決定は、規 準範囲Ｏ（炎症性疾患が認められない）から４（網膜構造全体の破壊ンまでにも とづいて表わされた炎症１旨標によって行なった。

第８図は、ヒトＳ−抗原ポリベブチドのアミノ酸配列と、本発明のポリペプチド の相対的−３，６，１３，１８，３２，３５そして３６を表わすらのである。

発明の詳細な説明 本明細書において舎照されたすべての文献および特許は、それらの全体が参照さ れたものとして本明細書の内容をなす。

実験でき自己免疫ブドウ膜炎またはブドウ膜網膜炎（以下、”Ｉ！Ａυ°）は、 眼のブドウ膜系、網膜および前房（ａｎｔｅｒｉｏｒ　ｓｅＨ＋ｅｎ＋）の重い 炎症によって臨床的に特徴づけられる自己免疫疾患である。これらは、特徴的に 網膜の光受容体細胞が破壊されている。これらの知見は、すべてヒトのブドウ膜 炎において観察されたものである。また、ＥＡＵのヒト以外の霊長類や下等の動 物では、松果体不全症（ａｐｉｎｅａｌｌｔｉｓ）が同時に起こる。

本発明は、哺乳類動物（ヒト類などの霊長類を含む）におけるブドウ膜網膜炎の 臨床的症状を表わす疾患を治療または予防するための方法を提供するものであっ て、この方法は、哺乳類動物（ｍｌ実長類含む、たとえばヒト）におけるブドウ 膜網膜炎の臨床的症状を現わす疾患を治療または予防のための方法を提供するも ので、この方法はそのような疾患の治療または予防に必要とされる哺乳類動物に 、ブドウ驕網膜炎に特異的な自己抗原、そのような抗原のブドウ膜炎抑制フラグ メント、そのような抗原の類似体またはこの類似体のフラグメントでブドウ膜炎 抑制活性を有するものを経口的に投与することを含むもので、また投与量は前記 ブドウ膜網膜炎に関連した臨床的症状を弱めるか抑えるのに有効な量である。

この明細書では、「自己抗原」とは、哺乳類動物体内で通常見出されるいかなる 物質も含むもので、アブノーマルな状態では、リンパ球や抗体によってもはや自 己のものであるとは認識されなず、その結果外来物質として免疫調整システムに 攻撃される。この用語は、哺乳類動物に投与された際に、自己免疫疾患の症状を 有する状態を誘導する抗原性物質を含むものである。ブドウ膜炎に対して特異的 な自己抗原は、下記のように定義される物質である。すなわち、（ａ）ブドウ膜 炎の哺乳類動物の免疫系に攻撃される：そして（または）（ｂ〉哺乳類において 非経口的投与によってブドウ膜炎の症状を呈する疾患を誘導するものである。

ブドウ膜炎抑制剤という用語は、ブドウ膜炎に特異的な自己抗原、そのフラグメ ントや類似体を意味するもので、好ましくは抗原に対する免疫応答を上げるよう に処理された哺乳類動物の一般的能力に影響せずに、経口または腸経由で投与さ れることによってブドウ膜炎の症状を抑制する特性を有する。

本発明にもとづく自己抗原は、Ｓ−抗原（以下、Ｓ−Ａｇ）を含むもので、この 抗原は４８牛ロダルトノ（ｋＤａ）の分子量を有する可溶性先受容体細胞タンパ ク質である。Ｓ−Ａｇは既に知られている方法、例えばドレイらの方法（Ｄｏｒ ｅｙ、　Ｃ，、ａｔ　ａｌ、　Ｏｐｈｔａ１ｍｌｃシｒｓ、　１４＋２４９−２ ５５．１９８２）を用いて哺乳類動物の眼、例えば牛の眼から単離および精製さ れる。現在では、Ｓ−Ａｇは多くの哺乳類動物の銀において発見されているが、 しかし牛の眼が好ましい供給源である。なぜなら、ヒトＳ−Ａｇとの類似性およ び入手の容易さからである。

Ｓ−Ａｇは、イオノ交換クロマトグラフィまたは等電点フオーカノノグによって 牛の網膜から単離精製される。あるいは、Ｓ−Ａｇは、塩沈澱、例えば最初の５ ０％硫安沈澱と第二の５０％硫安沈澱によって精製する。ゲル１過、例えばセフ アゾ１クスＧ−２００（）１ルマ／ア、Ｐｈａｒｗａｃｉａ　Ｉｎｃ、、　Ｐｌ ｓｃａｔａｗａｙ、　Ｎ、Ｊ、）濾過、そしてヒドロ牛／ルアパタイトアガロー ス吸着クロマトグラフィー、例えば１（Ａ−ウルトラゲル（商標）（ファルムイ ／ダストリー（Ｐｈａｒｍｉｎｄｕｓｔｒｉｅ、　Ｆｒａｎｃｅ）から入手）ク ロマトグラフィーそして、それらのすべては前掲のドレイらの文献に記載されて いる。Ｓ−Ａｇは、粗ｗＡＨＩＩ！織抽出物に存在するタフｔ４り質の約３％を 示す。濾過および吸着クロマトグラフィーによる一連の沈澱による単離および精 製によりて、例えば、放射状免疫拡散試験によって測定されるように、約４０％ のＳ−Ａｇが最終的クロマトグラフィー分離の後に回収される。もし、必要なら ば、高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰ　Ｌ　Ｃ）によってマイナーなコノタミ が除去される。あるいは、Ｓ−Ａｇは、ワ、カーらの方法（Ｗａｅｋｅｒ、　Ｗ 、Ｂ、。

ｅｔ　ａｔ、、　Ｊ、ｌ＋ｖｕｎｏ１．　＋１９：　＋９４９−１９５８）によ って精製される。ドレイらの方法は、現在のところ、もっとも良好な結果を与え る。

牛、ヒトおよびマウスのＳ−Ａｇの完全な了、ノ酸配列は、７ノノーラらの文献 （Ｓｈｉｎｏｈａｒａ、　Ｔ、、　ｅｌ　ａｌ、、　Ｓ−＾ｎｔｉｇｅｎ：　５ ｔｒｕｃｔｕｒｅ、　Ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｅｘｐｅ窒奄高■獅狽≠■ ＾ｕｔｏｉｍｍｕｎｅ　Ｕｖｅｉｔｉｓ　（ＥＡＩＩ）　ｉｎ　Ｐｒｏｇｒｅｓ ｓ　ｉｎ　Ｒｅｔｉｎａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ、　０ｓｂｏ窒獅■Rｎｄ　Ｃ ｂａｄｅｒ　Ｅｄｓ、　Ｐｅｒｇａｍｏｎ　Ｐｒｅｓｓ、　５１−６６、Ｓ−Ａ ｇの部分的配列は、ド／７らの文献前ＩＩ）に開示されている。

さらに、「完全」または全自己抗原、例えばＳ−Ａｇ、ブドウ膜炎症状（完全な 自己抗原またはそのフラグメントによって誘導される症状を含む）を抑制する働 きを有するフラグメント、そしてそれらから誘導された類似の活性を有する類似 体もまた、本発明にもとづいて経口投与または腸から投与（例えば、管を用いて ）される。Ｓ−Ａｇフラグメントのなかで投与されるものは、ＮおよびＭ抗原で ある。他の適当なＳ−Ａｇフラグメントは、ドノソら（前掲、１９８７）に開示 された非誘導的なフラグメントである。内在光受容体レチノイド結合タンパク質 （ＩＲＢＰ）やロドブンンのような眼球の抗原もまた、ブドウｌｌＩ炎特異的自 己抗原として使われる。Ｉ　ＲＢＰは、猿の内在先受容体的マトリｌラス（ＩＰ Ｍ）から単離され、そして等電点フォーカン７グバノドパターン、炭化水素分析 、超遠心による濃度勾配、アミノ酸分析、アミノ末端分析、スペクトラル特性、 例えば、トリプトフアンおよびスルフヒドリル濃度および蛍光分析によって特徴 化される。

（Ｒｅｄ＠Ｏｎｄ、　１．Ｍ、、　ｅＬ　ｉｔ、、　Ｂｌｏｃｈｅｗ、　２４： 　７ｇ７．１９８５＞　６また、ロドブ７）は広く分布されており、／エールド らの文献（Ｓｈｉｅｌｄｓ　ｅｔ　ａｌ、　Ｂｉｏｃｈｅｓ、　ＢＩｏｐｈｙｓ 、Ａｅｔａ用語「類似体」は、周辺物質であって、ひとつ以上のアミノ酸の欠失 、添加または置換によって自己抗原またはフラグメントとは異なるものである。

しかし、経口または腸経由で投与された場合の同−型の抑制活性（同程度である 必要はない）を有するように、ブドウ膜炎抑制剤と構造的に関係している。フラ グメントと類似体は、従来の化学合成技術を用いて合成される。例えば、メリー フィールドのペプチド合成技術（Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ、、Ｒ，Ｂ、　Ｆｅｄ、 　Ｐｒｏｅ、　Ａ＋＋、　Ｓｏｅ、　ＥＸ、　Ｂｉｏｌ、　２することによって 構成される（Ｔａｍ、Ｊ、、　ｅｌ　ａｌｊ＾ｗ、　Ｃｈｅｓ、　Ｓｏｅ、　１ ０５：６４４２．１９８３）。あるいは、既に述べた方法または本明細書のどこ かで述べた方法にもとづく一般的なペプチド合成方法のひとつを祠用して前記類 似体が合成される。あるいは、Ｓ−Ａｇおよびフラグメントまたは類似体は、既 に知られている方法にもとづいて組換えＤＮＡ技術によって合成できる。

本発明の方法および薬剤学的製剤は、後者は短（記載されるが、天然および合成 の自己抗原、例えばＳ−Ａｇおよびそのフラグメントまたは類似体を含むものＥ ＾Ｕの病原性はＴ−細胞が媒介していることは広（知られていることである。

本発明者は、自己抗原性タンパク質、例えばブドウ膜網膜炎に特異的な自己抗原 およびそのフラグメントまたは類似体の経口投与またはフィーディングは、抗原 特異的抑制を、ＣＤ８＋Ｔ−細胞（サブレフサ−細胞）を通して誘導する。この ＣＤ　、８　＋　Ｔ−細胞（サブレｙＷ−細胞）は、前記フィーディングを通じ てエリサイト（ｅｌｉｃｌｔｅ）される。このダウンレギコレー７３ノは、自己 免疫疾患、例えばブドウ膜炎の症状を有するＥＡＵに関連した臨床的症状（例え ば、炎症）の抑制を許す。

本発明は、Ｓ−Ａｇ分子全体を経口または腸から投与することによって、免疫ト レランス、と、５７Ａ１ｉ誘導ＥＡＵを導く。さやに免疫応答の抗原！！累的抑 制＋１、インビトロにおいて示され、またＴ−サプレッサーの掛り金いは、抗Ｃ Ｄ８抗体（リンパ球様細胞表面におけるＣＤ８サプレツサー／細胞毒性マーカー に特異的）がこの免疫応答抑制を阻害する。

Ｔ−サブレブサー媒介免疫抑制は、下記実施例３に示した。この実施例で１よ、 わけて３回与えた。その後、肺細胞を採取して放射線を浴びせた。応答細胞（ｒ ｅｓｐｏｎｄｅｒ　ｃｅｌｌ）　、例えばＣＤ４＋、Ｓ−Ａｇ特特異的−ヘル／ ４一系統（ＴｈＳ−Ａｇ）またはＣＤ４＋ＰＰＤ−特異的Ｔ−へルｌで一系統（ ＴｈＰＰＤ）を、放射線を浴びた肺細胞の存在下で培養した。抗原誘導指示細胞 （ａｎＬｉｇｅｎ−ｄｒｉｖｅｎ　１ｎｄｉｅａＬｏｒ　ｃｅｌｌ）の増殖は、 ＣＤ８　（う１ト　サブレ、サー細胞のサブセットの表面に特異的に存在する糖 タンパクＩＩ）を認識する。ｘ−８抗体やＬｅｕ２　（ラフトＴ細胞サブセット に対する親和性が知られていない無関係な抗体）のような適当な抗体の存在また は非存在下において測定された。これらの抗体の一種類以上を前記培養のいくつ かに添加した。これらの培養での細胞増殖は、ＴｈＳ−Ａｇ系統の強い（統計学 的に顕著な）抑制が本発明にもとづ０てＳ−Ａｇのような自己抗原を経口的に与 えることによって特異的に得られることを示している。すなわひ、これは、Ｓ− Ａｇを与えられたう、）の胛細胞集団中に存在する抗原特異（Ｓ−Ａｇ）誘導Ｅ ＡＬＪは、ヒトの病気にとって考慮すべき推測的価値からなるヒトブドウ膜炎の 実験モデルである。ラットでは、ＥＡＵは、Ｓ−Ａｇによる直接的免疫または天 然の宿主へＣＤ４＋／ＣＤ９’−Ｔリンｔ４球系統を移すことによって誘導され る（Ｇｅｒｙ、　１．Ｍ、、　ｅｔ　ａｌ　前掲、Ｃａ５ｐｉ　Ｒ，Ｒ，、ｅｔ 　ａｌ、、前ｔｉｅ）。

このような疾患におけるＴ細胞のドミナントな役割は、／クロスボリン（すぐれ た抗Ｔ細胞作用を有する）は効果的にＥＡＵを阻害する（Ｎｕｓｓｅｎｂｌａｎ ｔ、　Ｒ，Ｂ、、　’ｅｔ　ａｔ、、’　１９ｇ＋、前掲）という観察によって 指示される。ここで開示される結果は、経口的に誘導された免疫トレランスは、 多（の器官特異的自己免疫モデルに適用可能であり、特にすぐれたＴ細胞的役割 を示す。しかし、このことは経口的なトレランスのアプローチは、盲目的に試み られるもの、あるいはそうするべきものとは言えない。例えば、ＥＡＵでの抗原 投与の効果は、ＥＡＥ／ＭＢＰモデルにおいて観察されるものと全体的に一致す るわけではない。一方、ＭＢＰの誘導または非誘導フラグメントは、ＥＡＥに対 して免疫トレランスの状態を誘導することができ、Ｓ−Ａｇの２種類の誘導フラ グメントはＳ−Ａｇ誘導ＥＡυに対してそのようにすることはできない。最近に なって、５−Ａｇ分子のＮおよびＭフラグメントがブドウ膜炎を引き起こすこと が可能なものとして報告されて（する（Ｄ。

ｎｏｓｏ、　ＬＡ、、ｅｔ　ａｌ、、前掲：　Ｓｉｎｇｂ、　Ｖｌ、、前掲）。

これらのフラグメント（−緒に投与した場合でも）は全Ｓ−Ａｇに対して免疫ト レランス状態を誘導することはできないが、ＥＡＵに対するＭ−７ラグメノト誘 導実質的免疫トレランスは、ＭフラグメントまたはＮフラグメントによって誘導 された。さらに、Ｓ−Ａｇの非誘導的フラグメントは、ＥＡＵ抑制活性を有する ものと考えられる。例えば、ドノソ（Ｄｏｎｏｓｏ）前掲によって言及されてい るものから選択されたフラグメントは合成可能であって、下記の方法二もとづい てトレランスを誘導する能力を試験することが可能で、また任官に、投与量を合 わせることは当業者にとって既知である。

ＭおよびＮノラグメ、！トによって誘導されたＥＡＵ疾虫は、天然の分子によっ −ｒ引き起こされるものではなく、また発病されるのに必要ｒｊ　′ｒ：、＋し 雪は、１．５μｇＳ−Ａｇからなる最小ＥＡＵ誘導量より０数倍高１−すでに述 べたように、Ｍ７ラグメントまたは全Ｓ−Ａｇのどちらか一方による経口投与は 、ＮまたはＭ誘導ＥＡｔＪのどちらか一方に対しで動物を防御する。１．たがっ て、この経口的に誘導されたトレランス状態は、無関係な自己抗原ＭＢＰにって 誘導された無関係な自己免疫疾患ＥＡＥの発現を妨害しな１１゜このような発見 から、Ｓ−Ａｇの別々のフラグメントを経口または腸を経由する薬剤学的製剤に 取り込ませることは、本発明にもとづ（Ｓ−Ａｇ治療の好適な補助剤（またはそ れにとってかわるもの）をなす。Ｓ−Ａｇ特異的Ｔ−サプレッサー細胞は、明ら かに利用性があり、また四−あるいは異なるＳ＝Ａｇフラグメツ！によるチャレ ンジに対して防御するＳ−Ａｇらまた、ブドウＩｌＩ炎の治療に好適な補助剤と なる。なぜなり、ブドウ膜炎の症状は、Ｓ−Ａｇフラグメ２・トと同一または相 同の自己抗原を含む一積類以上の自己抗原によって引き起こされる。

Ｓ−Ａ　ｇを：４丈た動物から得たリノ・（節細胞の増殖応答の統計学的に顕著 なく以下、しばしば［実質的に］という）によって、かつＳ　Ａｇを与えられた 動物から得た肺細胞による特にイー・テ冒ケーターＴＩ′ＩＳ−ＡｇＩＩｌｌ胞 （Ｓ　−Ａ　ｇ　＋：、特異的であるが、■−ヘルパー型のものには特異的では ない）の抑制によって明らかな免疫応答のイノ上１Ｃ月こヨフける抑制は、Ｔ− 細胞を倉も抗原特異的抑制が経口投与（ｏｒａｌ　ｆａｅｄｉｎｇ）におって誘 導されることを確証しでいる。ＣＩ）８（ら！）　Ｔ−１ブレノサーのサブセッ ト表面にある細胞Ｔ−→ｔブレ、サー特異的糖タンパクＸ＞を認識する０Ｘ−８ 抗体が抑制を逆転させるという、実施例３における発見は、Ｔ−サプレッサー細 胞が観察された抑制に関与するものであることを示唆している。

したがって、本発明は、哺乳類動物におけるブドウ膜網膜炎の症状を呈する自己 免疫疾患の臨床的発現を抑制するための方法を提供することを目的とする。そし て、この方法は、治療を必要とする哺乳類動物に、経口的に、あるいは腸経由で 、有効量からなるブドウ膜炎抑制剤を哺乳類に投与することを含む。このブドウ 膜炎抑制剤は、（１）自己抗原；（ｉｉ）！！’ｉｉ記自己抗原の７ラグメ／ト 、これは哺乳類動物に経口的に投与されるこ古によって前記自己抗原またはその フラグメントによフて誘導されたＥ　Ａ　Ｕの症状を抑える；（Ｉｉｉ）前記自 己抗原またはフラグメントの類似体、これはブドウ膜炎抑制活性を有する。そし て（ｌｖ）前記成分のいくつか、またはすべてを組み合わせたものからなる群か ら選択されるものである。

「抑制」という用語は、前記臨床的発現または症状を抑えることを意味し、また そのような臨床的発現または症状を完全に取り除くか、あるいは少なくとも測定 可能な程度に減らすことを意味するものである。［有効量」は、ブドウ膜炎に関 連］、た少なくともひとつの症状、例えば炎症、視力低下、細胞様水腫などを測 定可能なように、そして好ましくは統計学的に顕著に減らすべき前記ブドウ膜炎 抑制剤の置をいう。

一般的には、哺乳類動物のブドウ膜炎の臨床的症状を抑制または減衰させるため のブドウ膜炎抑制剤の有効量は、約０４から約１５ｍｇ、／ｋｇ／日である。

ヒトでは、ブドウ膜炎抑制剤の有効量は約０．１から約１５ｍｇ／ｋｇ／日、好 ましくは約４から約８．５ｍｇ／ｋｇＺ日である。別の言いかたをすれば、７０ ｋｇの成人では、その有効量は約３０から約１００ｍｇ／日、好ましくは約３０ ０から約６００ｍｇ／日である。げつし類（ｒｏｄｅｎｔｓ）では、ブドウ膜炎 抑制剤の有効量は、約１００μｇから約ｌｏｎｇ、／個体である。もちろん。年 齢、性別、健康状態、病気の程度、そして投与される薬剤の特異的抑制活性等を 考慮して有効量の範囲を変えることが必要である。しかし、そのようなｊ！１当 投与量の決定は、、当業者によって容易に実施可能である。例えば、最適投与量 は、下記の実施例に記載されたような適当な試験方法に関係した本発明の活性剤 の連続的希釈による１１％２によってなされよう。あるいは、投与量と投与頻度 とのマトリックスを作り、実験個体群をマトリ１クス上のそれぞれの点に割り当 てて、最適条件を決定する。

自己抗原の有効量（例えばフラグメント、または類似体）を本発明にもとづいて 経口的に、あるいは腸経由で投与する。自己抗原、例えばＳ−Ａｇおよびフラグ メントは、単独で、あるいはリノ酸ｍ＋液（ＰＢＳ）のような生理的に許容され る緩衝液に加えて投与されることが望ましい。

そのような有効量を哺乳類動物に投与する場合、治療の必要性に応じて一日一回 、あるいは−日２ないし３回の経口投与がなされるように分割して投与する。

ヒトの場合、自己抗原、フラグメントまたは類似体の十分な取り込みと吸収とを 保証するために、このましくは日に３回以上で約９０ないし約１２０日間、ある いはそれ以上行なう。症状が持続または再発した場合、治療を継続または再開す る。

また、本発明は薬剤学的製剤および有効１９与量の形懸を提供するもので、ブド ウ膜網膜炎に特異的な自己抗原および（または）ブドウ膜炎抑制フラグメントま ′たはそれらの類似体、そしてＳ剤学的に許容される担体または希釈体を経口ま たは直腸経由で投与する。

上記に定義された用語は、そのような薬剤学的製剤に等しく適用される。したが って、例えば、自己抗原はＳ抗Ｒ（Ｓ−Ａｇ）またはその生物学的に活性なフラ グメントを含むものである。

この発明によって提供される薬剤学的製剤は、固形、半固形または液状をなしも ので、さらに薬剤学的に許容される充填剤、担体または希釈体、そして味コ１＜ ントと同様に他の不活性成分を含む。そのような追加可能な成分は、例えば、リ ノ酸緩衝ｒ＆（ＰＢＳ）＝スターチ、糖、モしてぺ／トナイトおよびノリ力など が挙げられる。また、他の適当な食物状のもの、例えば香料などと混合してもよ い。

経口投与される製剤は、カプセル、錠剤、またはキャプレｙ　ト（ｃａｐｌｅｔ ｓ）で、これらは付加的に不活性被覆物（消化を助ける被覆用組成物も含まれる ）によって覆われる。あるいは製剤は、既知の薬剤デリバリ−／ステムによって 腸経由で投与される。前記の被覆用組成物をセルロース、寒天、またはそれらの 誘導体などであるが、それらに限定されるものではない。液状の製剤は、液状の ままで、あるいはカプセルに封じ込められて投与される。また、ゲル化された製 剤も可能である。

本発明の薬剤学的製剤は、ヒトなどの霊長類を念む哺乳類動物におけるブドウ膜 炎の症状を呈する自己免疫疾患の臨床的発現を予防または治療するのに好適なも のである。

本発明は、以下に詳しく記載されるが、これらに限定されるものではない。

材料と方法 体重が１８０〜２００ｇのメスのルイスラット（Ｌｅｗｌｓ　ｒａｇｓ）をチャ ールズリバーラボラトリーズ（Ｃｈａｒｌｅｓ　Ｒｉｖｅｒ　Ｌａｂｏｒａｔｏ ｒｉｅｓ、　Ｒａｌｅｌｇｂ、　ＮＣ）から入手して、すべての実験に用いた。

抗原および免疫スキーム 網膜抗原Ｓ−Ａｇを牛網膜から精製した（Ｄｏｅｒｅｙ、　Ｃ，、ａｔ　ａｌ、 、０ｐｔｈｉ１１ｅ　Ｒｅｓ、　＋４：２４９．　ＩＯ２）。２種類のブドウ膜 炎誘発Ｓ−Ａｇフラグメント、ＮおよびＭを用いた（Ｄｏｎｏｓｏ、　ＬＡ、、 ｅｔ　ｉｆ、、前掲；　Ｓｌｎｇｈ、　Ｌ［、、前掲）。これらのＳ−Ａｇフラ グメントは、３８０／３８１型ＤＮＡンンセサイザーを用いて製造元の指示書（ ユーザーマニュアル）にしたがってＩｉ製した。また、これらのＳ−Ａｇフラグ メントは、他の方法を用いても合成可能である（例えば、Ｄｏｎｏｓｏ、　Ｉｎ ２゜またはＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄまたは（および）　１ｌｌｉＬｃｈｅｌ、前掲 ）。各７ラグメントは１ｇ＋１のアミノ酸からなるもので、Ｍペプチドのアミノ 酸配列はＤＴＮＫＡＳＳＴＩＩＫＥＧＩＤＫＴ、Ｖで、ＮペプチドはＶＰＬＬＡ ＮＮＲＥＲＲＧＩＡＬＤＧＫＩＫＨＥである。これらの配列に示された略号は、 それぞれ以下のアミノ酸に対応する。

Ｅ−グルタミン酸、 Ｆ冨フェニルアラニン、 Ｉ＝インロイ／ン、 に−リッツ、 Ｍ−メチオニ／、 Ｎ−アスパラギン、 Ｐ寓プロリン、 Ｑ讃グルタミン、 Ｗ冨トリプトファン、そして Ｙ−チロシンである。

モルモットミニリンベーン１クタ／バク質（ｉｌＢＰ）をダイプラーらの方法（ Ｄｉｅｂｌｓｒ、　Ｇ、Ｅ、、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｐｒｅｐ、　Ｂｉｏｃｈｅｓ 、　ｉ：Ｉ３９．１９）２）を用いて脳組織から精製した。

すべての免疫は、完全フルイドγシュバフ）（ＣＦ４；　Ｆｉｒｃｏ、　Ｄｅｔ ｒｏ口Ｍｌ＞に乳ＩＩ（エマルノッン）化された５０マイクログラムの抗原を用 いて実施した。このの一本の脚のみに注射した。免疫した後、すべての動物を１ ４日間にわたって観察し、その時点で層殺した。層殺された動物から眼球を取り 、それを１０％ホルムアルデヒドで固定し、ヘマトキノリノおよびニオ／ノ染色 してスライドをａ製した。各スライドについて炎症の度合いを組織学的に評価し た。この評価は、ヌブセンブラフト　らの文献（Ｎｕｓｓｅｎｂｌｉｔｔ、　Ｒ ，Ｂ、、’　８１　ａｔ、、　Ａｒｃｈ、　Ｏｐｈｌｈａｌｍｏｌ、　１０３１ ５５９、１９８５）に開示された規準にもとづいて評価した。このような規準は 、７１カーらの文献（Ｗａｃｋｅｒ、　Ｗ、Ｂ、、　ｅｌ　ａｌ、、　Ｊ、１ｍ ｍｕｎｏ１．１１９：　１９４９．１９７７）に開示されたモルモット用グレー ド／ステムを修飾したものである。ラットにおける後区（ｐｏｓｔｅｒｉｏｒ　 ｓｅｇｍｅｎ＋）疾患の評価のための等級規ＩＪ！（グレーデイングクリテリア ）は、下記の通りである。

０：炎症性疾患の徴候が認められない：ｏ、５＋：痕跡程度、網膜の構造はほと んど変化していない；１＋：焦点領域の破壊； ２＋二先光受容の顕著な脱落をともなう焦点領域の破壊：より大きな破壊を伴う 網膜剥離による硝子体への細胞のわずかながらのしん出；３＋：網膜構造の消失 開始、網膜剥離の拡大による硝子体への細胞のしん出増大：そして、 ４＋：網膜構造の完全破壊。

ＭＢＰ、ＥＡＥによって免疫された動物は、四肢の麻痺によって特徴づけられ、 このような麻痺は以下のように評価される。

０：疾患認められず： ｌ：活動減少、りンブティル（ｌｉｍｐ　ｔａｌｌ）　；２：弱い麻痺状態、不 安定な足どり。

３：中程度の麻痺、四肢がそれぞれ外側に広がる；そして４：四肢麻痺。

なお、他の材料は、すべて商業的に入手可能である。

実施例１：オーラルトレラ／ス・経口投与によって誘導された防護ラットに以下 の量からなる２００ｍｇのＳＡｇ（合計６００ｍｇ）またはＩｍｇ（合計３ｍｇ ）のＳ−Ａｇ、または１ｍｇ（合計３ｍｇ）牛血清アルブミン（ＢＳＡ）、また はそれぞれ２００μｇ（合計６００μｇ）のＮおよび（または）Ｍフラグメント を、７日目（ｄａｙ−７）　、５日目（ｄａｙ−５）　、そして２日目（ｄａｙ −２）に、３回経口投与（フィーディング）する。なお、前記免疫を実施した日 を０日目（ｄｇ−０）とする。ＭＢＰをフィーディングされた動物に、９日目に 追加飼料供給として１ｍｇのタノバク質を４回与えた。すべての抗原は、プラス チックチ１−プによって覆われた２３ゲーノの注射針を用いて１ｍｌのＰＢＳに 懸濁して与えた。

ブドウ膜炎誘導タ／バク貿（Ｓ−Ａｇ）、およびそのＭおよびＮフラグメントで 免疫されたが前記フィーディング（ｆｅｅｄｉｎｇ）を実施されなかった対超群 の動物ハ、１１−１４４日目発病した。第１図および第２図をみれば明らかなよ うに、組織学的に示された眼の感染は、免疫に用いた抗原に依存して程度を異に し、特にＳ−Ａｇ全分子の場合がもっとも感染の度合いが高かった。第１図は、 Ｓ−Ａｇによって免疫され、かついろいろな抗原を与えられた動物から得た眼の 組織学的検査における免疫疾患を示すものである。いかなるフィーディングも′ 受けなかった動物の眼は、合計３ｍｇの牛血清をフィーディングされた動物と同 様に、激しい炎症性応答を示す。しかし、Ｓ−Ａｇをフィーディングされた動物 された動物は、炎症性疾患の度合いが統計的に顕著に（実質的に）減少された。

動物に、合計０．６ｍｇのＳ−Ａｇを３回に分けてフィーディングした場合でも 、０．６ｍｇのＢＳＡフィーデイノグ後に観察されたものと比較して炎症性応答 は統計学的に顕著に減少した（Ｈｌｅｏｙｏｎ　ｒａｎｋｅｄ　ｓｕｍ　ｔｅｓ ｔ　ｄｅｓｃｒｉｂｅｄ　Ｉｎ　Ｃｏ１ｏｎ、　Ｔ、、　Ｌｉｔｔｌｅ　Ｂｒｏ ｗｎ、　＋９７４．　ｐｐ、　２１９−２２１；　ｐ＝ｏ、ｏ０３）　、さらに 、感染症疾患における顕著な減少は、０．６ｍｇのＢＳＡによってフィーディン グした場合と比較して、動物が合計３ｍｇのＳ−Ａｇをフィーディングされた場 合において認められ、組織学的試験に対するいかなる炎症的応答も示さなかった ものは、１４個の眼のうち２つのみである。

また疾徹予防能を試験するために、動物にＳ−ＡｇのＮおよびＭフラグメントを フィーディングした。動物がＮおよびＭフラグメントをそれぞれ全体で０．６ｍ ｇ投与された場合（モルベースで２０倍過剰のＳ−Ａｇ）　、ＭおよびＮフラグ メントは、ＢＳＡをフィーディングした場合と比較して、統計学的に顕著にＳ− Ａｇに誘発された疾徹を減少させる能力を有さない。実際、動物が両方の７ラグ メントを同時にフィーディングされてそれぞれ合計０．６ｍｇ得た場合、非眼球 抗原、ＢＳＡをフィーディングれた場合と等しいか、あるいはそれよりもわずか ながら増大して眼の疾患が生ずる。

第２図は、Ｓ−Ａｇ　（自己誘発および経口抑制）によって誘発された実験的ブ ドウ膜炎に対して種々の抗原のフィーディング効果を示すものである。全Ｓ−Ａ ｇ（合計０．６ｍｇ）のフィーディングは、Ｎフラグメント（７／８眼）または Ｍフラグメツ）　（６／８眼）のどちらか一方に免疫された動物においてブドウ 膜炎を予防する能力を示す。Ｎフラグメント（全経口投与量０．６ｍｇ）は、Ｓ −Ａｇの場−合と同程度に７ラグメント誘発疾患を予防する効果を示すものでは ないが、同量の経口フィーディングで与えられたＭフラグメントは、効果的にＭ フラグメント誘発ブドウ膜炎を予防し、またある程度、Ｎフラグメント誘発疾患 も予防する。動物へのＮフラグメントのフィーディングは、Ｍフラグメントによ って誘発された疾患になんら効果を示さなかった。このような結果は、少なくと もＭフラグメントと、たぶんまたＮフラグメントとが経口的全Ｓ−Ａｇ治療に対 して補助剤として好適であることを示している。

実験のある別のセットでは、Ｓ−ＡｇのフィーディングをＭＢＰ誘導ＥＡＥの発 達に対する効果を決定するために試験した。３匹の動物に、合計３ｍｇのＳ−Ａ ｇを経口的に処理し、一方でその抗原にいおって免疫される前に経口的にＭＢＰ を与えられた動物は、ＥＡＥのいかなる徴候も現わさなかった（結果示さず）。

したがって、Ｓ−Ａｇを経口（または腸から）投与することによって特異的な防 御を与えるが、関係ない自己抗原に対するレンビエントの免疫応答増大能力を減 衰させることはない。

実施例２：イノビトロ増殖応答 免疫１４日後、動物を層殺して、排出膝こうり／パ節（ｄｒａｉ旧ｎｇ　ｐｏｐ １口ｅａｌ　Ｉｙ璽ｐｈ　ｎｏｄｅｓ）を除去し、細かく裂いて、そしてオノベ ンハイムの文献（０ｐｐｅｎｈｅｉ、　Ｅｄｓ、　Ａｃａｄ、　Ｐｒｅｓｓ、　 ＮＹ、　ｐｐ、５７３−５８５）にもとづく培養のために調製した。つｔす、１ ００μｇ／菖ｌのベニ／ノリン、１００μｇ／ｓｌのストレプトマイシン、５０ μｇ／會ｌグルタマインン、２−Ｍグルタミン、ｌ■賛のビルピノ酸・Ｎａ、０ ．１ｍＭの非必須アミノ酸、５ＸＩＯ−５Ｍの２−メルカプトエタノール（文献 ：　Ｃａ５ｐｉＲ，Ｒ，、前掲）および１．５％う、ト血清を含む０．２ｍｌＣ ＲＰＭＩ　（ＲＰＭＩ１６４０培地、、　Ｇｌｈｅｎ、　（ｉｒｉｎｄ　ｌ５ｌ ａｎｄ、ＮＹ）の入）た１ｖ底マイクロタイターウエルで＊鞄培讐涜度が１．５ Ｘ１０６細胞／　ｍ　＋　となるようにして細胞培養系を確立した。すべてのカ ルチャーは、３つ一組または６つ一組とした。、５−Ａ４と、トＸおよびＭフラ グメントとの濃度は、２５７１゛クログラ八／ｍｌで、一方Ｃｏｎ＾はｌＯマイ クログラム、’＋ｎｌで用いた。３７℃、５％二酸化炭素でＷｌを実施した。培 養終了（開始から４８目）Ｉｒｉｌの１４時間、ウェルあたりｌμＣ１のｓＨ− チミジンを添加したパルス処理した。そして、細胞をマアンユＩＩハーベスタ− （１，ａｍｂｒｌｄｇｅ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、　Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、　Ｍ Ａ）上に回収した。結果は、抗原含有ウェル中のカウノトとして決定して平均上 標準偏差（ＳＥＭ）で表わすことによって刺激指数とｌ、た。この群では、２５ 以上の刺激指数をイノビトロ［既住（ａｎａ日ｎｅｓｔｉｅ）　Ｊ　ＭＩ＃！ｇ 応答の証拠として兄な１な。２５以上の刺激指数は、通例の標準で、そしてｌ１ ｌｉ偏差の２倍（２ｘ）より多い。

Ｓ−Ａｇにって免疫された動物におけるＳ−Ａｇへ、の増殖応答に対するいろい ろな抗原をフィーディングする効果は、第３Ａ図に示されでいる。少なくとも４ 匹の動物の培養は、それぞれのカラムに表わした。見てもわかるように、Ｎまた Ｍフラグメントのどちらか一方によってフィーディングされた後のＳ−Ａｇに対 する増殖応答は、ＢＳＡによってフイーデノグされた後の場合と統計学的な違い が認められない（スチ１−プントテストによれば、それぞれ、ｐＩＩＱ、　２５ ９および０６０３、文献：　Ｔ、Ｃｏ１Ｌ’ｏｎ、　ｐｌｌｌ、　１２９−１３ １．前掲参照）。したがって、それらの動物では、フうグメントのフィーディン グによっては、全自己抗原誘発疾もに対する臨床的防御は得られない。Ｑ、２ｍ ｇのＳ−Ａｇを３回与えると、増殖応答の減少が認められ、これは統計学的に顕 著ｊＡものであり（ＢＳＡフイーデイノグの場名とは反幻（ｐ・０．０１８）） 　、モしてＥＡｔＪからそれらの動物を部分的に保護Ｊることに関係している。

しかし、インビトロ系減少（ｐ−ｏ、００ｓ）は、免疫に先立って３回にわたっ て１ｍｇのＳ−Ａｇをフィーディングした後に認められた。４−れは、Ｓ　−Ａ 　ｇ免疫にＪるＥＡＵ［導の臨床的発現に対して最良の防御を生ずるよ）な紅Ｅ Ｅ量（ｏｒａｌ　ｄ’ｏｓａｇｅ）であった。

第４Ｂ図は、完全フロインドア、゛ユバノド（Ｄｉｒｃｏ、　Ｄｅｔｒｎ口、− １）のインテグラルコンポーネントを免疫に用い、ＰＰＤそして分裂促進剤（マ イトジェ／）であるＣ　ｏ　ｎ　Ａ　（Ｓｉｚｍａ、　ＳＬ、　ＬｏｕｉＩｌ、 　ｋｌｏ）に対する増殖応答を示したものである。

結果が示すことは、自己抗原の経Ｏ投与によるブドウＩｌｌ炎の症状の臨床的遺 伝子発現に対する防御は、経口的に投与された抗原に対して特異的である。さら に、そのような防御は、′ｒ−細胞を媒介（少なくとも部分的に）で鳳依存的で ある。

実施例３６抗原およびマイ１）エンに対するイノビトロ抑鯉免疫されていないう ｙトに、ｌ　ｍ　ｇのＳ−Ａｇ、牛血清（ＢＳＡ）、またはアジコバ７）ＫＬＨ ，または塩類のいずれかを、２〜３日置装て、３回フィーディングし、４日後に 肺細胞を回収した。回収された肺細胞（２ＸＩ０６細胞／ｍ１）を１０％牛脂児 血清によって増量されたＣＲＰＭＩに静置し、５マイクログラム／ｍｌのＳ−Ａ ｇまたは２マイクログラム／ｍｌのＣｏｎＡによってパルス化し、４８時間イン キュベートした。これらの培養から得られた細胞を、モデュレータ細胞として用 い、そして塩類によってフィーディングされた細胞由来のものをＴｍ対照群とし 、にＬＨによってフィーディングされた細胞由来のものをＴｍＫＬＨ対照群とし 、ＢＳＡによってフィーディングされた細胞由来のものをＴｍＢＳＡとし、そし てＳ−Ａ　ｇによってフィーディングされた細胞由来のものをＴｍＳ−Ａｇとし た。

養子移入において誘導ＥＡＵとして知られてているＣＤ４＋、Ｓ−Ａｇ特特異Ｔ ヘルパ〜系統（Ｔ　ｈ　ｓ−Ａ　ｇ　）　（モノフタリア７　（Ｍｏｋｈｔａｒ ｉａｎ）の方法にもとづいて、Ｎａｔｕｒｅ、　３０９：　３５６．１９８４） をすべての実験において感応細胞（ｒｅｓｐｏｎｄｓｒ　ｃｅｌｌ）として用い た。平行実験では、ＣＤ４＋／ＰＰｒ）４ｆｒ異的Ｔ−ヘルパー系統（ＴｈＰＰ Ｄ）も用いた（文献：　Ｃａ５ｐｉ　ｃｌ　ａｌ、　、前掲）。２ＸＩＯ’個の 感応細胞を５Ｘ１０’個の放１４（＋５００うｙド）ルイスラット胸腺とともに 培養し、それを抗原表現細胞（ＡＰＣ）とした。いくつかの培養では、翼なる数 の放射（１５００うｙド）Ｔｍ対照群、ＴｍＢＳＡ＋ＴｍＫＬＨまたはＴＭＳ− Ａｇモデュレータｍ胞を添加した。すべての培養は、平底９６穴（ウェル）プレ ートで１゜５％ラブド血涜含有ＣＲＰＭＩ　（コスタ−）中で３つ一組として確 立し、いくつかのウェルには、培地のみ、ＣｏｎＡ　（２マイクログラム／ｍ＋ 最終濃度）またはＳ−Ａｇ　（２５マイクログラム／　ｍ　＋最終濃度）の一部 １０マイクロリブトルを加えた。培養を３日間実施し、培養終了１４時間前にｌ μＣＩ／ウェルの３Ｈ−チミジンでパルス処理した。細胞は、マｙ／ユ１！ハー ベスタ−で回収した。

Ｔｈｅ−Ａｇ、ＡＰＣ，おおびＴｍＳ−Ａｇを含むいくつかのウェルは、ＯＸ８ 抗体（特異的にサブレフサ−／う１トＴ細胞の細胞毒性サブセブトを認識する） （Ｓｅｒａ　Ｌａｂ、　Ｖｅ＊ｔｂｕｒｙ　ＭＹ）またはＬｅｕ２ｍ抗体（ラッ トＴ細胞サブセットに対して親和性があるかどうかは不明）　（Ｂｅｅｔｏｎ　 Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ、　Ｍｏｕｎｔａｉｎ　ｌ’ｉｅｖ　ＣＡ）を培養開始時に 添加する。Ｓ−Ａｇまたは（ｏｎＡのどちらか一方と、Ｓ−ＡｇまたはＢＳＡに よってフィーディングされた動物のどちらか一方から得た肺細胞の同時培５１　 （ｃｏ−ｃｕｌｔｕｒｅ）　、そして５−ＡｇＣＤ４＋Ｔ細胞系統（ＴｆｉＳ− Ａｇ）のインビトロ・ブレ・イノキーべ一７１ノを実施した。これらの実験の結 果は、第４図に示した。インディケータ−であるＴｈｅ−Ａｇの抗原誘発増殖の 抑制度合いが見られる。第４Ａ図は、Ｓ−Ａｇとの７ｍＳ−ＡｇまたはＴｍ−Ｂ ＳＡとのインビトロ系におけるブレ・インキュベーンシン後に得られる抑制を示 している。Ｓ−Ａｇに応答するＴｍＳ−Ａｇの十分な抑制は、牌細胞七丁−ヘル バー細胞との試験され′たいかなる組み合わせの比においても得ることができ、 ＴｈＳ−Ａｇが１に対して５またはｌＯの７ｍＳ−Ａｇを含む培養におけるバッ クグラウンドの抑制に接近する増殖応答抑制を伴う。Ｔｍ−ＢＳＡの添加による 抑制パターンは異なり、Ｔｈｓ−ＡｇとＴｍＢＳＡとの比が１・２では、抑制が 見られず、そしてＴｈＳ−ＡｇとＴｍＢＳＡとの比が１５および１０ではわずか ながらの抑制が見られる。ＴｍＳ−Ａｇが２に対してＴｈＳ−Ａｇが１では、は ぼ１５から５へ刺激指数が減少することが観察され、一方、Ｔｍ−ＢＳＡとの培 養では応答抑制は認められたなかった。Ｔｍｓ−ＡｇとＴｍ−ＢＳＡとの抑制効 果の違いは、インディケータ−とサプレッサー細胞との比が１：５と１・１０で 試験した場合に統計学的に顕著であった（ｐ＝０．０４．０．００２）。結果は 、自己抗原誘導抑制がＴ−細胞レベルで得意的であり、その抑制が少なくともサ プレッサー表現形からなるＴ細胞を少なくとも部分的に介してまたは依存してな される。

第４Ａ図での違いと比較して、第４Ｂ図はＴｍＳ−ＡｇまたはＴｍ−ＢＳＡとを ＣｏｎＡ（２μｇ／ｍ＋）とブレ・インキ１ベーン謬ンした後の抑制の度合いを 示している。抑制の必須的同一パターンは、ＴｍＳ−ＡｇおよびＴｍ−ＢＳＡと で認められる。このような発見は、Ｓ−Ａｇによってフィーディングされたルイ スラットの肺臓中に抗原特異的サプレッサー細胞が存在することを示している。

第４Ｃ図は、ＴｈＳ−ＡｇとＴｍＫＬＨまたは５μｇ／ｍｌのＳ−八ｇ（Ｌかし 、関係のない抗原ＫＬＨによって感作されたか、または感作されていないかのど ちらか一方である）と４８時間インキコベー７ｍンしたＴｍ対照群とを同時培養 することによって得られた応答を示すものである。明らかに、ＴｈＳ−Ａｇが１ に対してＴｍＫＬＨまたはＴｍ対照群が５または１０の比において、ＴｈＳ−Ａ ｇ増殖応答の抑制は認められなかった。

第５図は、ＴｍＳ−Ａｇが５−Ａｘ　（５μｇ／ｍｌ）とブレ・インキ１ベーン 謬ンされた後、Ｔｈｅ−ＡｇまたはＴｈＰＰＤのどちらか一方と同時培養（ｃｏ −ｃｕｌｔｕｒｅ）された時に得られた抗原特異的抑制を示している。ＴｈＳの 増殖応答の顕著な抑制は、添加した肺細胞のすべての比において見られる。はっ きりき興なるパターンがＰＰＤ系統の増殖応答において見られる。試験された肺 細胞同時培養に対するＴ−ヘルパーのすべての比において、抑制はないが、むし ろ増殖応答の増大が認められる。

インビトロでの抑制を逆転させるＴ−サブレ、サーＣＤ８＋サブセット（ＯＸ− ８）に対するモノクローン抗体の能力（したがってＴ−サプレッサーのかかわり 合いが確証される）をつぎに評価した。第１表は、そのような実験の結果を示す ものである。括弧内の数値は、刺激指数を表わす。それぞれの抗体の最終濃度１ ｇ１ｏｏを用い、２５　Ｂ　ｇ　／　ｍ　Ｉの５−Ａｇを添加した。この実験中 は、ＴｍＳ−Ａｇの＃度をを１に１０’とした。

（以下、余白） ＩＰＴ１表 十　〇Ｘ−８８７１ ＋　＋　１６７０ ＋　＋　＋　１８８８ （１，１３１ ＋　０Ｘ−８＋　＋　７２４７ （４，３４１ ＋　ＬＥυ　２Ａ　＋　＋　１９２５ ＊　Ｉ　：ＩＯ（ＴｈＳ−Ａｇ：ＴｍＳ−Ａｇ）で添加した。

細胞の比７ｈＳ−Ａｇ　：　ＴｍＳ−Ａｇが　１：ＩＯの場合、Ｓ−Ａｇ存在下 での増殖応答は、抗原を含まないウェルの場合の程度まで減少する。しかし、０ ｘ−８抗体の最終希釈濃度を１：１００とすると、増殖応答は４倍に増加する。

同一希釈でＬｅｕ２ｍ抗体を添加した場合は抑制を逆転させることはできなかっ た。

サイトフルオログラム（Ｂｅｅｔｉｏｎ　Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ、　Ｆｒａｎｋｌ ｉｎ　Ｌａｋｅｓ、旧）を用いた場合、Ｓ−Ａｇをフィーディングされた動物の 牌臓と、ＢＳＡをフィーディングされた動物の肺臓とを比較して、０Ｘ−８＋細 胞の全体数の違いは認められなかった。

本発明では、全Ｓ−Ａｇ分子の経口的投与（フイーデ／グ）が免疫寛容（免疫ト レランス）と、Ｓ−Ａｇ誘導ＥＡＵを阻害することが示されている。さらに、免 疫応答の抗原特異的抑制がインビトロにおいて示されている。また、リンｌく細 胞（ｌｙ■ｐｈｏｉｄ　ｃｅｌｌｓ）の表面にあるＣＤ８サプレサー／細胞毒性 マーカーに対する抗ＣＤ８抗体がこの抑制を阻害することを示している。

Ｓ−Ａｇ誘導ＥＡＵは、ヒトのブドウ膜炎の実験モデルであり、ラットでは、天 然の宿主にＣＤ４＋ＣＤ８−７９７１球系統を移すことによって誘導される（Ｃ ａｓｐｉ　Ｒ，Ｒ，、ａｔ　ａｔ、、前掲；　Ｇｒｅｇｏｒｓｏｎ、　Ｄ、Ｓ、 、ｅｔ　ａｔ、、　Ｓ−＾ｎｔｉｇｅｎ　５ｐｅｃｉｆ奄■ ｎ、　Ｍｉｌｉｎ、　ｐｐ、　２０”２Ｓ、　１９ｇ９）　にの疾患におけるＴ 細胞のドミナントな役割と、ヒトに関するＥＡＵモデルの予測される値は、さら に／クロスポリンがヒトのＥｔ　ａｔ、、　１９ｇ＋、　前掲）。

実施例４：臨床的ＥＡＵに対する網膜自己抗原のフィーディングによる効果この 実施例では、ＥＡ４の臨床的発現に対する網膜抗原、Ｓ−Ａｇのフィーディング による効果を調べた。チャールズリバー社（Ｃｈａｒｌｅｓ　Ｒｉｖｅｒ、Ｒａ ｌｅｉｇｈ、　ＮＣ）から入手した体重が１８０〜２００グラムのルイスラット （ｎ＝２４）（雌）を６匹ずつ６つのグループに分けた。これらのう、トを上記 材料と方法：抗原と免疫の欄にしたがって免疫し、免疫した日をθ日月とした。

７白目からフィーディングを開始し、７．９．１２および１５日日目で続けた。

実験（Ｐ、Ｏ）群には、経口的に１８ｇ投与した。すなわち、腸経由（チューブ フィーディング）で投与した。また、対照群には、塩類溶液を腸経由で投与した 。炎症の程度は、すでに述べたように組織学的に調べた。実験群および対照群の 結果は箪６図および箪７図に示した。

第６図から明らかなように、６匹の対照群のうち５匹が１１−１３日目刃発病し た。実験群は、１匹のみが発病したが、この場合、症状は対照群に比べて軽かっ た。

第７図は、各群の炎症の度合いを棒グラフで表わしたものである（組織学的度合 いの表わし方はすでに材料と方法の項で述べである）。治療を受けないラットの グレード（度合い）の平均値は、約２．４で、２＋（光受容体の顕著な脱落をと もなう焦点領域の破壊：より大きな破壊を伴うｗ４！ＩＩ剥離による硝子体への 細胞のわずかながらのしん出）と　３＋（網膜構造の消失開始、網膜剥離の拡大 による硝子体への細胞のしん出増大）との間である。実験群の個体の場合、グレ ードの平均値は、　０．５＋（痕跡程度、網膜の構造はほとんど変化していない ）と、１＋（焦点領域の破壊）との間である。

本発明は、上記した実施例によって明らかであり、当業者において適当な追加、 限定、修飾等が可能であるがこれらは本発明の範囲を外れるものではない。

下記のアミノ酸配列を有するポリペプチドは、本発明にもとづくブドウ膜網膜炎 の症状を有する疾患の臨床的発現を治療または予防するために哺乳類動物へ経口 的に、あるいは腸経由で投与される。このポリペプチドは、Ｓ−Ａｇポリペプチ ドのフラグメントである。このようなポリペプチドは、ブドウ膜網膜炎を治療ま たは予防するために選択させる。なぜなら、すでに述べたような方法（材料と方 法の項参照）を用いてこのようなポリペプチドをラットへ投与した場合にブドウ 膜網膜炎が誘導されるからである。さらに、予備実験（こよれ１ｆ、ブドウ膜網 膜炎を罹患したラットから単離したＴ細胞（全Ｓ−ＡｇポＩＪペプチド処理する と増殖する）は、すでに述べた系（材料と方法の項参％、）を用（１てインビト ロで細胞にそのようなフラグメントを投与しても増殖は認められなかった。

これらのポリペプチドのアミノ酸配列は、下記第２表に示した。それらのＳ−（ 以下、余白） 第２表 ポリペプチドの配列 Ｆｒａｇ　３：　５ｐｖＫｓｖ’ｒ工ＹＬＧＮＲＤＹＩＤＢＶＳ８−３ａｒ−Ａ ｒｇ−八ｓｐ−Ｌｙｇ−３ｅｒ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−１１ｅ−丁ｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇ ｌｙ−Ａｓｎ−ｍｇ−Ａｓｐ−Ｔｙ７ｒ−１１ｅ−Ａｓｐ−Ｈｌｓ−Ｖａｌ−５ ａｒ−ＯＢＡｓｐ−Ｌａｕ−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−５＠ｒ−ＯＲＦｒａｇ　Ｌ３：　 ＰＦＬＬＴＦＰＤＹＬＰＣ５■ＷＰＡＰ＋１−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ −Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−５ａｒ −Ｖａｌ−Ｎｅｔ−［！−Ｌｙｓ　−５ｅｒ−３ｅ　ｒ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｔｙ ｒ−Ｌｅｕ−Ｉ　ｌｅ−Ａｒｇ−５ｅｒ−Ｖａ　１−Ｇｉｎ−日ｉ、５−Ａｌａ |Ｐｒｏ　− Ｌｅｕ−ＧＬｕ−＋４ｅｔ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＯＲＧｌｙ−ｒｌ、ｅ−Ｌｅｕ− Ｖａｌ　−５ｅｒ−ＯＲＦｒａｑ　３６：　ＶＡＴＥＶＰＦ）ｕＪ４ＨＰＯＰＥ ＤＰＡＸＥＢ−Ｖａ　ｌ　−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ　−Ｖａ　ｌ−Ｐｒｏ−Ｐ ｈｅ−Ａｒｇ−Ｌ４′！ｕ　−Ｈｅｍ　−４１１ｓ−Ｐｒｏ−Ｇｉｎ　|Ｐ　ｒ ｏ−Ｇｌ　ｕ　− Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｌｙｌｌ−Ｇｌｕ−０８Ａ”７’４ｐ’　ＧＭ：　Ｔ ＳＳＥＶＡＴＥＶＰＦ［ＰＱＰＥＤＢ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−５ｅｒ−Ｇｌｕ−Ｖａ ｌ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ　−Ｖａ　１−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａｘｑ−Ｉ７ｅｕ −Ｈｅ　ｔ−Ｈ堰@ｓ　− Ｐｒｏ−ＧＸｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−ＯＥＲ−５ａｒ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ− Ｌｙ　５−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｖａ　１−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｌｅ ｕ−Ａｌａ　−Ａｓｎ−Ａｓ氏@− Ａｒｇ−Ｇｌｕ−ｋｘｑ−ｋｒｑ−Ｇｌｙ−ＯＢ　（ｋト）（’ｙ’７ｍ４５　 Ｇ３　：　ＫＥＧｒＤＫＴＶＭＧｒＬＶＳＹＱＩＫＶＫＬ　−午１ｕＧＩＤＲＴ ＶＬＧＩＬＶＳＹＱｆｌｌ：ＶＸＬ　−＋７トＨ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ　− Ｉ　ｌｌ！−７ｕ＋ｐ−１−ｙｓ　−Ｔｈｒ　−Ｖａ　ｌ−Ｍａｔ−Ｇｌ　ｙ　 −Ｘ　１ｅ−Ｌｅｕ　−Ｖ＝@１−５ｅ　ｒ−Ｔｙ　ｒ　− Ｇｌｎ−１１ｅ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｙｌｌ−Ｌｅｕ−ＯＢ　（午）Ｈ−Ｌｙｓ −Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｘ　ｌｅ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｖａ　１−Ｌｅｕ−Ｇ ｌｙ−Ｉ　ｌ　ｅ−Ｌｅｕ−Ｖａ　１−５ｅｒ−sｙｒ　− Ｇｌｎ−１１ｅ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｙｅ−Ｌｅｕ−ＯＢ　’　（←ト）第８図 は、ンノハラらの文献（Ｓｈｉｎｏｈａｒａ、　Ｔ、　ａｔ　ａｌ、　Ｐｒｏｅ 、　Ｎ：リー８凹貼ユＵＳＡ　８４：　６９７５−６９７９．　１９８７）に開 示されたし）Ｓ−抗原ポリペプチド配列と、本発明のポリペプチドＧ２、Ｇ３お よびＧＭの相対的位置とを示すものである。第９図は、牛、ヒトおよびマウスの Ｓ−抗原ポリペプチド配列であり、それぞれ下記の文献に開示されたものである 。牛：　Ｙａｍａｋｉ、　Ｌ　ｅｌａｌ’、、　ＦＥＢＳ　Ｌｅｔｔｅｒｓ　２ ３４３９−４３　＆　２３６＋　５０７１．１９８８、ヒト：　５ｈｉｎｏｈａ ｒｉ、　Ｔ、　ｅｔ　ｉｆ、、前掲、そして　マウス：　Ｙａｍａｋｉ、　Ｋ、 　ａｔ　ａｔ、、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｂｉｏｐｈｙｓ、　Ｒｅｓ、　Ｃｏｗｓ 、　＋４２：　９０４−９１０D１９８７ 第９図の上側の配列は、牛のＳ−抗原ポリペプチド配列、中間の配列はヒトｓ− 抗原ポリペプチド配列、そして下側の配列はマウスＳ−抗原ボソベブチド配列で ある。さらに、上記に開示されたＭおよびＮポリペプチドの相対的位置は、箪９ 図に示されている。ポリペプチドＧＭは、牛、マウスおよびヒトの配列が同一で あり、またポリペプチドＧ２およびＧ３は、牛起源である。これらのポリペプチ ドのヒトの配列のカウンターパーツ（ｅｏｕｎｔｅｒｐａｒｌｇ）は、第２表に 示した。ポリペプチドＧ２およびＧ３からなるヒトのカウンターパーツは、本発 明を実施するうで有用で、ブドウ膜網膜炎の症状を呈する疾患の患者の治療に好 適である。

第２表に示したペプチドは、既知の固相合成法（ｌｌｅｒｒｉｆｉｅｌｄ、　Ｒ ，Ｂ、、　Ｆｅｄ　独ｅ、ＡＩ　Ｓｏｃ、Ｅｘ、Ｂｉｏｌ、２１：　４１２．　 １９６２　＆　ｊ　Ａ＋＋、Ｃｈｅｓ、Ｓｏｃ、８５：　２１４９．　＋９６３ 　■ Ｍ４　Ｌｂｅｌ、　Ａ、　Ｒ，、）　Ａｍ、　Ｃｂｃ園、　Ｓｏｅ、　９８：　 ７３５７．１９７６）によって合成される。前記ポリペプチドの類似体は、すで に述べた材料と方法との項を参照して合成できる。

また、ポリペプチドとその類似体は、これらのポリペプチドをコードするスクレ オチド配列を既知の遺伝子工学的技術を用いて適当な真核または原核細胞からな る宿主にクローニングすることによって作ることができる。前記ポリペプチドは 、単独で、あるいは２つ以上が組合わさって、ブドウ謄網膜炎の症状を呈する疾 患を有する哺乳動物に投与される。ポリペプチドの投与は、本発明の方法にした がって経口または腸経由でなされる。ブドウＩＩ！＋！膜炎の治療または予防に 有効な前記ポリペプチドの有効量は、本明細書１２−１３頁に記載されたものと 同様である。

実施例６：　内在光受容体のポリペプチドフラグメノト本発明に用いられるレチ ノイド結合タノバク質下紀に示されたアミノ酸配列を有するポリペプチドは、ブ ドウ膜ｔＩ′ｊＩＩＩ炎の症状を呈する疾患を有する哺乳動物に、本発明の方法 にしｔ：かって経口または腸経由で投与される。下記のポリペプチドは、本明細 書８頁に記載された牛内在光受容体レチノイド結合タンパクｌｉｉ　（Ｂｏｖｉ ｎｅ　ＩｎｔｅｒｐｈｏｌｏｒｅｃｅｐＬｏｒ　Ｒｅｔｉｎｏｉｄ　Ｂｉｎｄｉ ｎｇ　Ｐｒｏｔａｉｎ；　ＩＲＢＰ）である。配列、ＨＶＤＤＴＤＬＹＬＴＩＰ ＴＡＲ５Ｖ（ＪＪＪ）ＧＳ　（あるいは、Ｒ４と表わされる）と−ＰＴＡＲＳＶ ＧＡＡＤＧＳＳＷＥＧＶＧＷＰＤＶ　（アロ　イ１１、Ｒｌ　４　ト表ｈすＩＬ ル）　（！：を有するポリペプチドは、それぞれアミノ酸配列が牛ＩＲＢＰから １１５８−１１８０と１１６９−１１９１である（Ｂｏｒｓｔ、　Ｄ、Ｅ、　ｅ ｔ　ａｌ、、　Ｌ　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅ＋＋、　２６４１１５、１９８９）。

これらのポリペプチドは、下記の方法および上記実施例５によって作られ、また 単独で、あるいは２つ以上が組合オフさって、あるいは有効量からなる実施例５ に開示されたポリペプチドとともに、ブドウｉｗ！ｍ炎の症状を呈する疾手を有 する哺乳動物に投与される。ポリペプチドの投与は、本発明の方法にしたがって 経口または腸旺由でなされる。

下記に示すように、種々の自己免疫性眼疾患の患者ら単離されたす７１球は、こ れらのポリペプチドに反応して増殖することから、これらのポリペプチドが選択 される。患者と、本発明のＩＲＢＦ−誘導ポリペプチドに対する患者から単離さ れたす７１球の反応とを下記に示す。

こノ研究に協力された患者は、ナ／ツナル・アイ・イ／ステイチュート（Ｎａｔ ｉｏｎｉｌ　Ｅｙｅ　Ｉｎ５ｔｉｔｕｔｅ、　Ｂｅｔｈｅｓｄａ、　ＵＳ＾）お よび東京大学病院のブドウ膜炎治療を受けている患者である。すべての生者は、 事前に研究の趣旨について了解を得ている。また、それぞれの場においてヒトを 研究材料とする倫理上の問題についての承認を受けている。すべての患者は、後 区（ｐｏｓｔｅｒｉｏｒ　ｓｅｇ曽ｅｎｄ）に活性ブドウ膜炎を有するか、もし くは網膜またはコロイド（ｃｈｏｒｏｉｄ）に前活性疾患（ｐｒｉｏｒ　ａｃｔ ｉｖｅ　ｄｉｓｅａｓｅ）の病歴を有するものである。試験された患者は以下の 診断のうちのひとつを有している。ベーチェＩト病、バード／ν、トレチノコロ イドパンイ、バースピアニチス、オキュラーサルフイド、／／パセチフクオフタ ルミア、モしてヂーグ・コヤナギ・７飄うダ症候群である。それぞれの診断の規 準は、他の文献に記載されている（Ｎｕｓｓｅｎｂｌａｔｔ　ｅＬ　ａｔ、、　 Ｕｖｅｉｔｉｓ：　Ｆｕｒｄｅ＋＋ｅｈｔａｌｓ　ａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＰｒ ａｃｔｉｃｅ、ＹｅａｒＢｏｏｋＭｅｄｉｃａｌＰｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、Ｃｈｉ ｃａｇｏ、ＩＬ、１９８９）ｏ明らかに、日本のバーチエツト病研究機関による 不完全なイーチェ１ト組み合わせ（Ｂｅｈｃｅ（’ｓ　５ｅＬ）の最小論断＊ｉ に少なくとも合うバーチエツト病の診断を存するものである（Ｊｐｎ、　Ｊ、　 Ｏｐｂｔｈａｌｍｏｌ、　Ｒｅ５ｅａｅｈ、　ＩＬ　２９１．１９７４）　ｅす べての患者は、眼病を有する。バード／フノトレチノコロイドバ／イの患者は、 班状水腸（ｍｉｃｕｌａｒ　ｅｄｅ＋＋ａ）および網膜胞状変化（ｒｅｔｉｎａ ｌ　ｖａｓｃｕｌａｒ　ｃｈａｎｇｅｓ）と同様に後区にクリーム色の病巣を有 している。これらの患者は、ＨＬＡ−Ａ−２９陽性である。ノンパセチノクオフ タルミア（ｓｙｍｐａｔｈｅｔｉｃ　ｏｐｈｔａｌｍｉａ）の患者は、貫通トラ ウマ（ｐｅｎｅｔｒａｔｉｎｇ　ｒｒａｕ■ａ）または多くの手術後に生じたビ ラテラルグラヌロマトウスブドウ膜炎（ｂＨａｔｅｒａｌ　ｇｒａｎｕｌｏｍａ ｔｏｕｓ　ｕｖｅ口ｉｓ）の病歴を有している。ボーグ・コヤナギ・ハラダ症候 群ＣＶｏｇ＋４ｏｙａｎａｚｉ−Ｈｓｒａｄｓ　ｓｙｎｄｒｏｍｅ）の患者は、 遺伝的に日本人またはアメリカ／インディアンであって、眼または全身の変化が 診断と一致する。オキニラ−号ルコイド（ｏｃｕｌａｒ　５ａｒｃｏｉｄ）の患 者は・多くの場合、ボッチイブガリウムスキ＋　７　（ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｇａ ｌｌｉｕ＋＋　５ｃａｎ）またはバイオフ／〜（ｂｉｏｐ＋＋ｙ）によって証明 される疾患のどちらか一方を有している。患者は、各患者が行なっている治療（ 通常は、シクロスポリンまたはプレレドニノンからなる）または患者の活動のレ ベルを無視して試験された。なぜなら、試験された抗原は、網膜由来であって、 前区炎症は、活性疾患（ａｃＬｉｖｅ　ｄＩｓｅａＩＩｅ）の部分をなすとは考 えられないからである。網膜侵潤、す／バ節の炎症、スノウバンキングまたは硝 子体の不透明化の存在は活性の証拠として許容される。また、フルオレフセンア ンギオグラフィーによって確証された場合の／ストイド班状水腫は、活性疾患の 徴候と見なされた。すべての診断カテゴリーは、臨床規準にもとづくものである が、オキュラーサルコイドとバード／ツブトレチノコロイドパ／イとは別の試験 によって確認する必要がある。対ＮＯは、網膜または脈絡膜の疾患が無い者で、 かつ研究に従事していないスタツグまたはブドウ膜炎ではない患者から選択した 。

このア１セイで使用される抗原は、レドモンドらの文献（Ｒｅｄｍｏｎｄ　ａｔ 　ａｌ、、　８１ｏｃｈａ＊、　２４＋　７１１．１１１８５）に記載されたよ うな均質性（ｈｏｍｏｇｅｎｅｉｔｙ）　を有するように精製された牛内在光受 容体しチノイド結合タンパク質と、ドレイらの方法（前掲）によって精製された 牛のＳ−抗原とを含むものである。内在光受容体レチノイド結合タンパク質由来 のペプチドは、商業的な研究所（＾ｐｐｋｌｅｄ　Ｂｌｏｓｙｓｔｅｗｓ　Ｉｎ ｅ、、　Ｆｏｓｔｅｒ　Ｃ１ｔｙ、　Ｃ＾）によって、ｔ−ＢＯＣケミストリー を用いて、ペプチドンンセサイザ−（４３０Ａ、＾ｐｐｋｉｅｄ　Ｂｉｏｓｙｓ ｔｅｍｓ　Ｉｎｃ、）で合成および精製された。ペプチド配列は、ポルストらの 報告（Ｂｏｒｎ　ｅＬ　ａｌ、、　前掲）にも七づいて、牛内在光受容体しチノ イド結合タンパク賃の配列から誘導された。これらはＲ４として配列１１５６− １１８０　（）（ＶＤＤＴＤＬＹＬＴＩＰＴＡＲ３ＶＧＡＡＤＧＳ）およびｒ１ ４として配列１１６９−１１９１　（ＰＴＡＲ３ＶＧＡＡＤＧＳＳＷＥＧＶＧＶ ＶＰＤＶ）からなる、Ｓ−抗原（ＭおよびＮ）ポリペプチド配列、ドノノら（前 １１りの方法にもとづいて、自動ペプチド合成装置（ＳＡＭ　ＩＩ。

Ｂｉｏｓｅａｒｃｈ、　Ｉｎｃ、、　Ｓａｎ　Ｒａｆａｅｌ、　Ｃ＾）を用いて ベンズヒドリルアミン樹脂上で、合成された。

ソノパ球増殖ア、セイ 増殖アッセイは、指摘したところは除いて、日本とアメリカとも同一の方法にし たがって実施した。つまり、ヘパリン処理した血液試料から単核リンパ球を同種 リンパ球勾配（Ｇａｌｌａｒｄ−５ｃｈｌｅｓｉｎ４ｅｒ、　Ｃａｒｌｅ　Ｐｌ ａｃｅ、　ＮＶ）によって分離し、そしてＨＥ　Ｐ　Ｅ　Ｓ　（ＧＩＢＣＯ，Ｇ ｒａｎｄ　ｌ５ｌａｎｄ、　ＮＹ）　、グルタミ／（２ｍＭ）、ベニ／リン（１ ００単位／ｍｌ）、ストレプトマイ７ノ（１００ｕ　ｇ　／　ｍ　Ｉ　）および 加熱不活性化ヒ）ＡＢ血清を含むＲＰＭ１１６４０培地で培養した。単一ドナー から得た２０％血清をナノヲナル・アイ・イ／スティチュート（Ｎａｔｉｏｎａ ｌεｙｅ　Ｉｎ３０ｊｕｔｓ、　Ｂｅ１ｂｅｓｄａ、υＳ＾）での培養で用い、 東京では１０％の商業的に入手した血清（ｌｏｔ　Ｎｏ、１４ＳＯ，Ｐｅｌ　Ｆ ｒｅｅｚ、　Ｂｒｏｗｎ　Ｄｅｅｒ、　Ｗｌ）を用いて実施した。

細胞は２つの方法によって培養した。すなわち、箪−の方法では、平底９６穴（ ウェル）プレートで２ＸＩＯ’細胞／ウエルとなるようにして５日間培養した（ ＮｕｓｓｅｎｂｌａＬｔ　ｅｔ　ｉｆ、、　Ａｍ、　Ｊ、　０ｐｈｔｈａｓｏ１ ．８９：　１７３．１９８０）　６　箪二の方法では、細胞間の相互作用を増大 させることによって応答を増大させるような環境において、５ＸＩＯ’細胞／ウ エルとなるようにして丸底９６穴（ウェル）プレートでもって７日間培養した（ Ｂｉｒｏｓｅ、　Ｓ、　ａｔ　ａｌ、、　Ｃｕｒｔ、　Ｅｙｅ　Ｒｅｓ、　’Ｌ ：　３９３．１９８Ｓ）　。

すべての培養は、全容量が２００ｍ１で、刺激物を加えてものと、加えないもの とをそれぞれ３つ一組として用意した。抗原の１ｌｌＩ度は、４．２０．５０ま たあ１００μｇ　／　ｍ　ｌである。培養は、特定時間、３７℃、１００％湿度 および５％ＣＯコ空気中一度でもって実施し、最後の１６時間はｓＨ−チミジン （”Ｈ−Ｔ　ｄ　Ｒ、Ｎｅｗ　Ｅｎｇｌａｎｄ　Ｎｕｃｌｅａｒ、Ｂｏｓｔｏｎ 、ＭＡ；　２　Ｃｉ／５ｅａ１．　Ｇ、Ｓ　μｃｉ／１ｏａｆ／ウェル）でパル ス化した。そして、７７ンユＩ＋ハーベスタ−を用いてガラス繊維フィルター上 に回収した。乾燥後、フィルターパ・７ドをバイアル瓶に入れて３ｍｌのンンチ レー／ツノカクテル（トルエンベースフルオール）を加工てぺ１クマンＬ３８０ １液体シンチレーンフインカウンターでもってカウントした。同時にいくつかの ペプチドを試験することができたが、それぞれの患者においてすべてのペプチド について試験することはできなかった。正常対照群からの細胞は、−Å以上の患 者の細胞と同時に試験した。

統計学的分析 測定値７分（ＣＰＭ）で表わされる３つ一組の培養系の平均値ｌｉ、それぞれの ３つ一組の培養系についてめた。刺激の度合い（ｓ＋ｔｓｕｌａ＋ｉｏｎ　１ｎ ｄｅｘ；　Ｓ、１．）は、それぞれの抗原刺激培養の平均値を抗原を加えていな い対照群培養の値の平均値によって割ることによってめた。それぞれの試験セン ターおよびそれぞれの抗原に関して、平均刺激度合い士標準偏差を対照個体につ いて計算した。患者におけるＢｆな応答は、ある与又られたペプチドまた決定因 子（ｄｅｔｅｒ■１ｎａｎｔ）の刺激度合いが、２標準偏差による対照群の平均 よりも高い場合に存在した。

それぞれの試験された抗原に関する刺激度合いは、診断カテゴリーによって、対 照群と比較して、もし統計的な顕著な違いが存在するかどうかについて調べた。

有意差は、ステ、−プント検定（Ｓｔａｎｄａｒｄ　ｎｏｎ　ｐｓｌｒｅｄ　５ ｔｕｄｅｎ１ｓ　Ｉ　ｔｅｓｔ）によって評価した。統計学的有意差のための試 験は、Ｃｈｉスクアード（ｇｑａａｒｅｄ）を用いて行なった。結果は、平均刺 激度合い士標準誤差によって表わした。

患者 ３０人の対照群と、８２人の患者を試験した。このうち、４７人の患者は米国出 身で、３５人は日本出身である。米国の患者と日本の咀者の特徴は第３表にまと めた。

（以下、余白） 第３表 第３表から明らかなように、患者の平均年齢は、米国の患者の場合４１＠　（１ ０−７０歳までの範囲）、日本の場合は４３歳（２０−７０歳までの範囲）であ った。フォローアフプの継続は、２つのグループとも類似していた。すなわち、 米国では４４ケ月間（９２−１０８）で１日本では５７ケ月間（２−２４７）で あって。平均すると、患者は、６３ケ月間（２−２４７）ブドウ膜炎と診断され ていた。日本のすべての患者は、遺伝的に日本人そのものであるが、一方、米国 の患者は、４７人中４１人がコーカス人、５人がブラアクアメリカン、そして１ 人が東洋出身者であった。臨床的に活性疾患である患者の数は、いろいろなカテ ゴリー（第３表）および国によって変化している。全体ｔｆ′１には、半分の患 者が活性眼疾患であった。サルフィド患者間で大きな不一致が認めりれ、そこで は多くの日本人患者が活性を示した。すべてのグループにおいて、ハード７ち、 トレチノコロイドバンイがもつとも活性の度合いが低かった。そして、日本では 非常にまれな疾患であり、誰も試験されなかった。活性生者の比率は、バーチエ ツト病の患者の中でもっとも高かった。

Ｓ−抗原ポリペプチドまたはＩＲＩ３Ｐイリベブチｔ′に対する患者の細胞の反 応は下記第４表に示した。

（以下、余白） いろいろな疾患が、第４図に示したように、ブドウ膜網膜炎抗原に対して翼なる 応答を示した。しかし、Ｓ−抗原ポリペプチドと、内在光受容体レチノイド結合 タンパク質において同様の応答様式Ｗ８が認められた。網膜に係わる疾患を有す る患者は、はとんど同様に顕著な増殖応答を与えた。米国の患者では、Ｓ−抗原 （２０μｇ／ｍ　Ｉ　）に対する平均増殖応答は、バーチエツト病で顕著であっ て、２．８±１．０．（！ｌ＝０．０５）およびバード７１１トレチノコロイド パンイ２．７±０．２であった。内在光受容体レチノイド結合タンパク質（２０ μｇ／ｍ＋）では、増殖応答は低い傾向にあり、有意差は、対照群（ｐ、９土０ ．１）と比較してバーチエツト病１．５±０．４　（ｐ＝０．０４）、バード／ Ｉ＋ブトレチノコロイドバノイｌ　４±０゜３　（ｐ＝ｏ、０４）、そしてバー スビアニチスで１４±Ｑ、０２　（ｐ＝ｏ、０４）であった。

同様の応答パター７は、日本の患者にも認めれ、もっとも数の多い応答者はべ一 チェアト病で認められた。試験されたオキュラーサルコイド患者は、たいへんわ ずかな陽性応答者を与えた。しかし、かれらのフイトヘマグルチニ／および精製 タンパク質誘導体に対する応答は強く、応答がないことが非応答性（ｕｎｒｅｓ ｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ）が生ずることによるものではないことを示しているが 、しかしたぶん牛Ｓ−抗原または牛内在光受容体しチノイド結合タノバク質を認 識することが不可能であることを反映しているのだろう。細胞を丸梨底ウェル内 で７日間培養すると、いくつかのグループ（しかし全てではない）では顕著な応 答の数が増える。

＠度の増大は、主にボーズ・コヤナギ・ハラダ症候群の患者に見られる。内在先 受容体レチノイド結合タンパク質とＳ−抗原とに対する顕著な応答者の数の増大 が認められる。米国のボーズ・コヤナギ・ハラダ症候群患者から得たリンパ球に 対するＳ〜抗原への平均応答は、対照群（１，８±０．１）と比較して２．８± １．４であった。ごれは統計学的に膏意な差（ｐ＝０．０３）である。

牛内在光受容体しチノイド結合タノバク質と、Ｓ−抗原ポリペプチドに対するイ ンビトロでの応答を調べるために、これらの抗原のそれぞれのポリペプチドフラ グメントに対する応答を決定した。その結果を第４図に示す。

第４表 第４表をみれば明らかなように、培養５日目における本発明のひとつ以上のポリ ペプチドフラグメントに対する顕著な増殖応答と、内在先受容体レチノイド結合 タンパク質またはＳ−抗原ポリペプチドに対する増殖応答強度との間には相関関 係がある。もし、Ｓ−抗原ポリペプチドに対する統計学的に顕著な応答者を考慮 した場合、９人の米国患者のうち７人が試験されたひとつ以上のペプチドフラグ メントに対する顕著な応答を示す。７日目の培養では、Ｓ−抗原ポリペプチドに 反応した日本人患者の５人のうち３人がＭまたはＮフラグメントのどちらか一方 、またはその両方に反応した。内在光受容体レチノイド結合タンパク質に反応し た米国患者９人のうち６人が、Ｒ−４またはＲ−１４のどちらか一方、またはそ の両方に反応した。内在光受容体レチノイド結合タンパク質に対する日本人応答 者内でのそのような相互関係は見られなかった。

何人かのも者のリンパ球は、ポリペプチドフラグメントに対して増殖応答を示す が、しかし親抗原によ゛っては認識されない。５日目の培養において濃度が２０ または１００μｇ　／　ｍ　Ｉであるひとつ以上のＳ−抗原ポリペプチドに対し て応答する米国患者２２人中１２人（５４％）において、全分子に対する交差反 応は認められなかった。同様の環境下では、内在先受容体レチノイド結合タンパ 君質フラグメントに対する応答は、米国患者２０人中１６人（８４％）が交差反 応を示さなかった。Ｓ−抗原ポリペプチドフラグメントに対する日本人応答者は 、Ｓ−抗原をたった１９ケース中６ケースのみが認識したく細胞は７日間培養し た）。

バーチエツト病患者は、両方の抗原のフラグメントに対する応答を示すが、しか しこの応答はフラグメントまたは２０μｇ　／　ｍ　ｌのＳ−抗原ポリペプチド Ｍペプチドに関してもっとも強く、平均刺激度合いが患者５．３±１．０、対照 群１゜３±０．２　＜ｐ＝０．０００１）であるもつとも高い応答を示した。Ｎ ペプチドに対する応答もまた、平均刺激度合いが対照群よりも３倍高い患者にお いて顕著であった。バードンヲγトレチノコロイドパ／イ徹者は両フラグメント に対して同様の応答を示す。患者における平均刺激度合いは、両フラグメントの それよりも２倍高かった。

何人か患者は、それぞれの抗原の少なくともひとつの決定因子（ｄｅｔｅｒｓｉ ｎａｎｔ）に対する増殖応答を同時に与える能力を示した。試験した８２人の患 者のうち、３２人の患者（３９％）、すなわち米国患者１８人、日本人患者１４ 人がそのような応答を示した。かれらはすべての診断カテゴリーに該当するが、 ベーチェフト病およびバードシ璽アトレチノコロイドパシイでより多く認められ る。同様のケース分布が２国間て見られる。米国の患者のうち１１人が、１８人 中６人の非応答者（９−０，０２）と比較して両方の抗原に対する応答を与える 場合に、活性を示す。しかし、たった一種類の抗原Ｃｐ＝Ｏ−０５）に応答する 活性患者の数（７／Ｉ　１患者）と少しの違いがある。活性疾患と顕著なリンパ 球増殖応答との相互関係は、日本人患者には認められない。

内在光受容体レチノイド結合タンパク質へＳ−抗原ポリペプチドを含ませる場合 、Ｓ−抗原ｌリペプチド配列は、より顕著に活性疾患（ｐ−０，００３）と相互 に関係する。しかし、第５表に示すように、それぞれの疾患の様相は、２種類の 抗原に関しては類似している。増殖応答と治療との間に相互的関係を見出そうと したが、どのような相互関係も不可能であり、活性疾患を持つ患者は、シクロス ポリンまたはプレドニノン（Ｐｒｅｄｎｌｓｏｎ）によって治療されよう。

（以下、余白） 第５表 抗原投与 ＦＩＧ、　３Ｅｌ ＴヘルパーとＴモデュレーターとの比 ＴヘルパーとＴモデュレーターとの比 ＩＧ　４Ｂ ＴヘルパーとＴモデュレーターとの比 ＴヘルパーとＴモデコレーターとの比 ＦＩ６．６ ＥＡＵの臨床的発病 ＦＩＧ、　７ ＾　Ｏ。

ω 手続補正書く方式） −、事件の表示 ＰＣＴ／ＵＳ９０１０３９８９ 平成２年特許願第５１１０５０号 ２、発明の名称 自己免疫性ブドウ膜網膜炎の治療または予防のための方法３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 オートイミュー７　インク　（ほか２名）４、代理人 東京都中央区八重洲２丁目１番５号　東京駅前ビル６階平成４年１０月２０日　 （発送日） ７、補正の内容 （＋）別紙のとおり国内書面を提出します。

（２）別紙のとおり図面の翻訳文の浄書（内容に変更なし）を提出します。

（３）別紙のとおり法人証明書および訳文を提出します。

（４）別紙のとおり委任状および訳文を提出します。

国際調査報告

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．哺乳類動物におけるブドウ膜網膜炎の臨床的発現を治療または予防するため の方法であって、該方法は前記疾患の治療が必要とされる前記哺乳類動物に、自 己抗原；前記自己抗原のフラグメント、該フラグメントは経口的に投与された場 合に、前記フラグメントまたは前記自己抗原による免疫によるブドウ膜網膜炎誘 導を抑制する；そして、前記抑制活性を有する前記自己抗原または前記フラグメ ントの類似体からなる群から少なくともひとつ選択される成分の有効量を経口的 または陽から投与することを含むことを特徴とする哺乳類動物におけるブドウ膜 網膜炎の臨床的発現を治療または予防するための方法。 ２．請求の範囲第１項記載の方法であって、Ｓ−抗原を含む自己抗原の有効量を 投与することを含むことを特徴とする哺乳類動物におけるブドウ膜網膜炎の臨床 的発現を治療または予防するための方法。 ３．請求の範囲第２項記載の方法であって、さらに前記Ｓ−抗原のフラグメント を投与することを含むことを特徴とする哺乳類動物におけるブドウ膜網膜炎の臨 床的発現を冶療または予防するための方法。 ４．請求の範囲第２項記載の方法であって、前記Ｓ−抗原は、約４８キロダルト ンからなる見かけの分子量を有するポリペプチドを含むものであることを特徴と する哺乳類動物におけろブドウ膜網膜炎の臨床的発現を治療または予防するため の方法。 ５．請求の範囲第１項記載の方法であって、前記有効量は約０．１から約１５ｍ ｇ／ｋｇ／日からなることを特徴とする哺乳類動物におけるブドウ膜網膜炎の臨 床的発現を治療または予防するための方法。 ６．請求の範囲第４項記載の方法であって、前記有効量は約４から約８．５ｍｇ ／ｋｇ／日からなることを特徴とする哺乳類動物におけるブドウ膜網膜炎の臨床 的発現を治療または予防するための方法。 ７．哺乳類動物におけるブドウ膜網膜炎の臨床的発現を治療するための製剤であ って、該製剤は、ブドウ膜網膜炎に特異的な自己抗原；前記自己抗原のフラグメ ント、該フラグメントは経口的に投与された場合に、前記フラグメントまたは前 記自己抗原による免疫によるブドウ膜網膜炎の臨床的症状を抑制する；そして、 前記同様の症状抑制活性を有する前記自己抗原または前記フラグメントの類似体 からなる群から少なくともひとつ選択される成分の有効量を含むことを特徴とす る製剤。 ８．請求の範囲第６項記載にもとづく製剤であって、前記自己抗原は、Ｓ−抗原 を含むことを４特徴とする製剤。 ９．請求の範囲第７項記載にもとづく製剤であって、前記Ｓ−抗原は、約４８キ ロダルトンからなる見かけの分子量を有するポリベブテドを含むものであること を特徴とする製剤。 １０．請求の範囲第７項記載にもとづく製剤であって、薬学的に許容される担体 また希釈体を含むことを特徴とする製剤。 １１．請求の範囲第７項記載にもとづく製剤であって、前記Ｓ−抗原のフラグメ ントを含むことを特徴とする製剤。 １２．哺乳類動物におけるブドウ膜網膜炎の臨床的発現を治療または予防するた めの方法であって、該方法は前記疾患の治療が必要とされる前記哺乳類動物に、 【配列があります】，【配列があります】， 【配列があります】， 【配列があります】， 【配列があります】， 【配列があります】， 【配列があります】， 【配列があります】， 【配列があります】， 【配列があります】， そして【配列があります】 からなる群から少なくともひとつ選択されるポリペプチドの有効量を前記哺乳類 動物に投与すること含むことを特徴とする哺乳類動物におけるブドウ膜網膜炎の 臨床的発現を治療または予防するための方法。 １３．請求の範囲第１２項記載の方法であって、前記有効量は前記哺乳類動物の 体重あたり、約０．１から約１５ｍｇ／ｋｇの範囲であることを特徴とする哺乳 類動物におけるブドウ膜網膜炎の臨床的発現を治療または予防するための方法。 ４．哺乳類動物におけるブドウ膜網膜炎の治療のための薬剤学的製剤であって、 該製剤は、 【配列があります】， 【配列があります】，【配列があります】　，【配列があります】，【配列があ ります】，【配列があります】，【配列があります】，【配列があります】，【 配列があります】，【配列があります】，【配列があります】，【配列がありま す】，【配列があります】，【配列があります】，【配列があります】 そして、 それらの混合物から選択される少なくとも一つのポリペプチドを前記治療に有効 な療含むことを特徴とする薬剤学的製剤。 １５．請求の範囲第１４項記載の薬剤学的製剤であって、前記有効量は、前記哺 乳類動物の体重あたり、約０．１から約１５ｍｇ／ｋｇの範囲であることを特徴 とする薬剤学的製剤。 １６．請求の範囲第１４項記載の薬剤学的製剤であって、薬学的に許容される担 体また希釈体を含むことを特徴とする薬学的製剤。