KR0161235B1

KR0161235B1 - 포유류에서의 이인자형이식 거부를 억제하는 방법 및 조성물

Info

Publication number: KR0161235B1
Application number: KR1019930701248A
Authority: KR
Inventors: 하워드 엘. 웨이너; 대이비드 알렌 해플러; 찰스 비. 카펜터; 모하메드 새이에프; 젠지 쟝
Original assignee: 로버트 시. 비숍; 오토이뮨, 인코퍼레이티드
Priority date: 1990-10-31
Filing date: 1991-10-31
Publication date: 1998-12-01
Also published as: NO931536D0; NO931536L; JPH05508663A; US5681556A; BR9107055A; IL99864A; IL99864A0; HUT63957A; KR930701969A; JP2547162B2; AU662500B2; US5788968A; EP0555413A4; WO1992007581A1; AU8942691A; CA2093513C; HU9301252D0; CA2093513A1; EP0555413A1

Abstract

본 발명은 동종이식 수술을 할 예정이거나 동종이식 수술을 한 포유동물에게, 동종이식 수여자의 비장 조직, 비장 추출물, 동종이식 수여자의 배양시킨 임파구, 이 임파구의 추출물, MHC 항원, 이식거부 억제 단편 및 MHC 항원 유사체로 구성되는 군으로부터 선택되는 제제를 경구 또는 에어로졸 형태로 투여하는 것으로 이루어지는, 포유동물에서의 동종이식 거부를 억제시키는 방법에 관한 것이다. 또한 본 발명은 상기 방법에서 사용되기 위한 약학 조성물 및 투여 형태에 관한 것이다.

Description

[발명의 명칭]

포유류에서의 이인자형이식 거부를 억제하는 방법 및 조성물

[도면의 간단한 설명]

제1도는 혼합 임파구 반응(MLR)에서의 이인자형 비장세포 주입의 효과를 그래프로 나타낸 것이다.

제2도는 MLR에서의 이인자형 비장세포 용혈물 주입의 효과를 그래프로 나타낸 것이다.

제3도는 경구투여시 동종항원에 대한 내성의 동력학을 그래프로 나타낸 것이다.

제4도는 지연형 과민성(DTH) 반응에서의 동일인자형 비장세포 또는 이인자형 비장세포의 주입 효과를 그래프로 나타낸 것이다.

제5도는 임파구 조성에 대한 이인자형 비장세포의 주입 효과를 나타내는 일련의 면역형광분석 (히스토그램)이다.

제6도는 대조구 래트, 동일인자형 비장세포를 주입시킨 LEW 래트, 제3(WF)의 비장세포를 주입시킨 LEW 래트 또는 이인자형 비장세포를 주입시킨 LEW 래트에서의 심장 이인자형이식 후의 생존 결과를 그래프로 나타낸 것이다.

제7도는 피부 이식 수용체에 대한 비세포 주입의 효과를 피부 이식 대조구(비장세포를 주입하지 않음)와 비교하여 그래프로 나타낸 것이다.

[발명의 상세한 설명]

[발명의 분야]

본 발명은 동물에서의 면역반응을 억제하는 방법 및 조성물에 관한 것이다. 제한적인 의미는 아니나 더욱 특별하게는, 본 발명은 외래 조직의 도입에 대한 포유물의 면역반응을 억제 및 조절하기 위한 방법 및 약학 배합물에 관한 것이다. 또한 본 발명은 이식된 기간 및 조직의 생존을 연장시키는 방법도 포함한다.

[종래기술]

조직 및 기관의 이식수술의 성공은 이식된 수용체의 면역반응을 조절하기 위한 의사의 능력에 크게 의존한다. 그 조직이 살아있고 기능을 발휘하도록 하는 경우에는 특히 이식된 외래 조직에 지향되는 면역학적 반응은 조절되어야 한다. 현재, 피부, 신장, 간, 이자 및 심장에 주로 이인자형이식이 수행된다. 이식된 수용체에서의 정상적으로 기능을 발휘하는 면역계는 이식된 기관을 비자기(non self)조직으로 인식하고, 따라서 이식된 기관에 대한 면역반응이 일어나게 된다는 사실은 오랜전부터 알려져 있었다. 확인되지는 않았으나 이 면역반응은 궁극적으로 이식된 기관의 사멸 또는 생물학적 기능의 손실을 야기시키는 여러 종류의 세포 및 단백질을 생산할 것이다. 이식된 조직 또는 기관에 대한 수용체의 면역 반응을 억제하기 위한 노력이 일환으로, 일반적으로 조직이나 기관이 이식된 수용체를 하나 이상의 세포독성 제제로 처리한다. 예를 들면, 곰팡이의 일종인 Tolypoclaium inflatum Gams가 생산하는, 11아미노산 잔기로 구성되는 환형 폴리펩타이드인 사이클로스포린(사이클로스포린 A)이 이인자형 신장, 간, 이자 및 심장의 수용체에게(즉, 공여체와 수용체가 동일한 종의 포유동물인 경우) 투여되는 약물로 통상적으로 선택된다. 그러나 사이클로스포린의 투여는 고혈압 뿐 아니라 신장 및 간에 대한 독성을 야기시킬 수 있는 결점이 있다. 더욱이 사이클로스포린의 사용은 임파종과 같은 악성종양을 유도할 수 있으며, 수용체에게 이약제를 장기간 투여하는 경우 면역억제가 보편적으로 일어나게 되어 병원성 미생물에 대한 정상적인 방어적 면역기능이 낮게 조절되므로 이들 약제에 의해 야기되는 감염 위험을 증가시킨다.

예비결과에 의해 FK-506에 대한 연구가 초기단계가 머물러 있으므로, 이것은 일반적으로 사용될 수 없다. 따라서 이 제제의 사용은 제한적이다.

동종원적(allogenic)이식 또는 이인자형이식 거부를 억제하기 위해 통상적으로 (사이클로스포린과 함께 또는 단독으로)투여되는 기타 약제 및/또는 치료법도 역시 비-특이적인 면역억제 약제 또는 치료법이다. 프레드니손 및 메틸프레드니살론과 같은 스테로이드와 아자티오프렌 (6-멀캅포퓨린의 유도체)이 이식 수용체에서의 이식체의 생존을 연장시키기 위해 사용되는 비-특이적 면역억제용 약제 중의 하나이다.

T-세포의 CD3에 지향되는 OKT3 모노클론 항체 역시 이인자형이식 수용체에 사용되는 비-특이적인 면역억제용 약제이다. 그러나, OKT3 모노클론 항체는 쥐에서 유래된 것이므로 이 모노클론 항체가 사용되는 환자는 이 외래 단백질에 대하여 면역반응을 일으킨다. 따라서, 이러한 물질의 유용성은 제한된다. 위에서 언급한 약제 및 항체의 또다른 결점은 동종원적 이식거부를 억제하도록 무한히 투여하여야 하며, 외래 조직에 대한 내성이 개발되지 않는다는 점이다.

총 임파조사(total lymphoid irradiation ; TLI)로 아직 이인자형이식의 생존을 연장시키기 위한 임상적으로 및 실험적으로 사용되는 비-특이적인 면역억제 치료법이다. 이 방사선 노출 및 TLI를 위한 치료스케줄은 Hodgkin병의 치료를 위해 개발되었으며, 곧 면역억제 기능이 있음이 발견되었다. 비록 TLI가 위에서 언급한 전체적인 면역억제를 야기하므로 기타의 포괄적 면역억제 치료법과 같은 제한이 있긴 하지만, 이것은 동종원적 조직에 대한 특이적 내성을 유도하는, 현재 통상적으로 사용되는 면역억제 형태이다. 그러나, TLI는 개발의 초기 단계에 있고 투여하기 어려우므로 그 유용성은 제한된다.

항원을 경구 또는 에어로졸 투여하는 방법도 동물세포에서 이러한 항원에 대한 면역반응을 억제하기 위한 효과적인 방법으로 인식되었다. 항원을 경구투여하는 방법은 다음과 같은 이점을 가진다: 연구 또는 치료의 용이함에서 많은 방법이 제자리에서 (in-situ) 개발되었으므로 그 방법면에서의 편리함, 소화계통의 안전하고 비독성적인 효과 및 항원에 의해 제공되는 특이성.

몇몇 자기면역 질병의 모델에 관한 최근의 연구는 항원의 경구투여에 의해 최소한 자기향원에 지향되는 면역반응 부분이 억제될 수 있으며 치료대상인 동물에서 특이적인 자기면역 질병이 유도되는 것을 방지될 수 있음이 증명되었다. 예를 들면, 자기면역 질병과 같은 타입 1 당뇨병의 연구에 다양한 동물 모델을 이용할 수 있다. 이러한 동물 모델에는 BB레트(Nakbookda, A.F., et al., Diabetologic14: 199-207, 1978) 및 당뇨병이 자발적으로 진행되는 NOD(non-obese diabetic) (Prochazka et al. Science 237:286, 1987)이 포함된다. 병에 감염된 성인으로부터 새로 태어난 동물에서 임파구를 전달한다는 사실(J. Exp. Med. 166 : 823, 1987)에 의해 증명되듯이, 소도(islet) 세포에 특이적이고 CD-4 및 CE-8에 양성인 T-임파구가 소도베타 세포에 피해를 주는 제제임이 암시된다.

실험적 알레르기성 뇌척수염(experimental allergic encephalomy elitis(EAE)은, 사람의 질병인 다중경화증(Multiple Sclerosis ; MS)을 위한 동물 모델로 넓게 사용되는 마이엘린 기초 단백질(myelin basic protein ; MBP)에 지향되는 유도된 T세포가 매개하는 자기면역 질병이다.

프로인드 완전 보조액과 같은 강한 보조액과 MBP를 정맥내로 투여함에 의해 작은 포유류에서 EAE가 유도될 수 있다. Weiner 등은 미국특허출원(Method of treating or prevention type ldiabetes by oral administration of insulin, 1990년 10월 10일 출원)에서 타입 1 당뇨병의 특징을 가지는 자기면역 질병에 걸릴 위험이 있거나 그 질병으로 고통받는 포유동물의 치료에 유용한, 인슐린을 함유하는 경구 및 에어로졸 조성물 및 약학 배합물을 공개하였다. Weiner 등은 1987년 6월 24일에 출원된 미국특허출원 제065,734의 CIP출원인, 1990년 2월 21일에 출원된 미국특허출원 제460,852호(1988년 6월 24일에 출원된 PCT/US88/02139의 미국 국내단계 출원)에서 자기항원을 경구 투여함으로써 자기면역 질병을 치료하는 것을 일반적으로 공개하였다. Weiner 등은 1989년 12월 20일에 출원된 미국특허출원 제454, 486호에서 에어로졸 투여를 공개하였다.

Weiner 등은 1989년 7월 14일에 출원된 미국특허출원 제379,778호의 CIP 출원인, 1990년 7월 10일에 출원된 미국특허출원 제551, 632호에서 정제된 S 항원, 상호광수용체 유망막 결합단백질(Interphotoreceptor Retinoid Binding Protein ; IRBP) 항원 또는 질병을 억제하는 이들의 단편을 포유동물에게 경구투여함으로써 포도막망막염을 예방 또는 치료하는 방법을 공개하였다. Nagler-Anderson 등은 Proc. Nat. Acad. Sci. (USA) 83:7443-7446, 1986에서 마우스 모델에서 콜라겐에 의해 유도되는 관절염 억제를 위한 콜라겐의 경구투여를 공개하였다. 그러나 위에서 언급된 자료들은 이식 항원의 경구 투여의 원리가 이인자형이식 거부를 방지할 수 있다라는 사실을 제시하지 못하므로 포유동물의 이식거부 기작을 억제하기 위한 항원의 사용을 개시하지는 않는다.

본 발명은 외래 조직 이식에 대한 내성을 유도하기 위해 이식받은 포유동물은 수용체에게 동종항원을 경구 및 에어로졸 경로로 임상적으로 투여하는 것을 목적으로 한다. 본 발명은 일차적으로 골수를 포함하는 조직이식 분야에서 유용하다. 비록 이전의 연구가 자기 항원을 정맥내로 주사함에 의해 수용체에서의 신장 이식체가 더 오래 살아남는다는 것을 공개하고 있으나 (Transplatation 39 : 56, 1985; J. Immunol. 121 : 1480, 1978; J. EXP. Med. 149 : 1042, 1979), 본 발명에서 제시하는 바와같이 이러한 항체를 경구로 또는 에어로졸 형채로 사용한다는 것은 전혀 제시 또는 암시조차도 하지 않는다. 그러므로, 본 발명의 목적은 포유류에서의 외래(또는 비자기) 조직 및 기관의 이식(grafting 또는 transplantatien)에 대한 해로운 면역반응을 억제하기 위한 방법 및 제제를 제공하는 것이다. 본 발명의 또다른 목적은 외과적으로 이식된 조직을 거부하는 면역을 억제하기 위해 포유류에 투여될 수 있는 약학 배합물 또는 조제물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또다른 목적은 외과적으로 이식된 조직을 거부하는 면역을 억제하기 위해 포유류에 투여될 수 있는 약학 배합물 또는 조제물을 제공하는 것이다. 본 발명의 또다른 목적은 이식된 조직 또는 기관에 대한 포유류이 면역 반응을 억제하기 위하여 경구 또는 에어로졸 루트로 포유류에게 투여될 수 있는 합성 조성물 및 약학 배합물을 제공하는 것이다. 본 발명의 이러한 목적 및 기타 목적은 다음의 상세한 설명에 의해 이 분야의 통상의 전문가에게 자명해질 것이다.

[발명의 요약]

외과적으로 이식된 비-자기 기관 또는 조직에 대한 포유류의 면역반응을 억제하기 위하여 포유류에게 이인자형 비장 조직과 배양된 임파구와 특이적인 MHC 항원등 제한되지 않는 예를 포함하는 특이적인 항원성 제제를 함유하는 조성물을 경구 또는 에어로졸 루트로 투여할 수 있음을 뜻밖에 발견하게 되었다. 그 효과는 비장 세포의 표면에 존재하는, 공급체와 수용체에서 서로 다른 MHC 분자에 의존하므로, 이러한 항원을 단독으로 투여하는 것은 효과가 있을 것으로 기대된다. 경구투여된 이인자형 비세포(splenocyte)는 외과적으로 이식된 비-자기 조직에 대해 종종 이식 직후 항원에 특이적인 형태로 일어나는 숙주 포유류의 면역반응을 억제할 수 있다. 또한 이인자형 비장 조직 조제물을 경구로 섭취함에 의해 포유류에서 지연형 과민성 반응(delayed type hypersensitivity reaction)과 혼합 임파구 반응(mixed lymphocyte reaction)이 억제된다는 것을 알게 되었다. 이인자형 비세포의 경구투여용 조성물 및 약학 배합물은 천연상태의 이인자형 조직으로부터 제조될 수 있다. 사람에게 투여하기 위한 위의 조성물은 MHC 항원의 펩타이드 단편과 같은 항원의 합성 유도체를 함유한다.

본 발명에 따른 방법에서, 합성 항원 또는 천연 이인자형 비장 조직 또는 임파구 조직 또는 세포유도체를 함유하는 약학 배합물을 제조하고, 조직 또는 기관을 이식하기 전의 적당한 시간에 포유류 개체에게 경구투여된다. 추가로, 상기의 MHC 항원 또는 비세포 유도체의 투여량을 필수적으로 함유하면서 약리학적으로 알맞은 담체 또는 희석제를 함유하는 에어로졸 전달계를 제조할 수 있다. 에어로졸 배합물은 이식 수술전의 적당한 시간에 에어로졸 루트로 투여될 수 있다. 이하의 설명 및 특허청구범위, 도면을 통해 위에서 설명된 개선점 및 기타 개선점을 밝히고자 한다.

이 명세서에서 언급된 특허출원, 특허 및 참고문헌은 그 전체로써 참고자료로 간주된다. 본 발명은 예를 들면 이식수술 후와 같은 경우에 외래 조직 이식에 대한 면역 반응을 억제하는 기존의 방법에 대한 개선의 필요성을 기술한다. 또한, 본 발명의 방법은 이식된 조직 및 기관의 생존을 연장시키기 위한 치료가 필요한 포유류(즉, 동종 개체로부터의 이식)에게 그 생존의 연장을 제공한다. 따라서, 본 발명에 의해 조직 이인자형 이식에 대한 거부를 방지할 수 있으며, 따라서 이식된 조직 및 기관의 생존을 연장시킬 수 있다. 뜻밖에도, 이인자형 비세포구 또는 합성 MHC 항원(또는 그것의 면역 억제성 단편 또는 유사체)의 경구투여가 포유류 수용자의 이식후 이식거부 반응에 대한 모델 시스템인 실험관에 혼합 임파구반응을 억제하는데 효과가 있음을 알게되었다.

본 발명을 어떤 기작 및 작동에 관한 학설에 근거를 두려는 것은 아니나, 본 발명에 따른 이인자형 비세포구 또는 MHC 항원의 유도체의 경구투여는 이식 거부의 면역학적 기능에 영향을 준다. 즉, 특별한 억제가 T-세포가 유도되어 헬퍼 T세포를 감소시킨다. 아래에서 본 명세서에서 사용되는 용어를 정의한다. 경구투여는 경구투여 뿐 아니라 장내 투여(직접 위에 전달하는 것)도 의미한다. 포유류는 면역계를 가지고, 따라서 이인자형이식 거부가 일어날 수 있는 모든 유기체를 의미한다. 에어로졸은 분무기(nebulizer)와 같은 가압 시스템으로 만들 수 있는 미세하게 나누어진 고체 또는 액체 입자를 이미한다. 액체 또는 고체인 원료 물질은 이 명세서에서 정의되는 MHC 항원 및/또는 질병을 억제할 수 있는 그것의 단편 및 유사체를 포함한다. 투여에서 에어로졸 루트는 코 또는 경구 공기경로를 통해 에어로졸 배합제를 숙주에게 전달하는 것을 의미한다. MHC(Major histocompatibility complex)는 포유류 세포 표면 단백질의 일련의 복합체라고 정의된다. MHC는 조직양립성 (또는 이식)항원의 제공 및 관례적인 (외래) 항원에 대한 면역 반응의 조절 두 경우의 면역 모두에서 많은 측면에서 조절 역활을 한다.

MHC 단백질에는 클래스 I과 클래스 II의 두가지 형태가 있다. 클래스 I MHC 단백질은 실질적으로 모든 조직에서 존재하며, 클래스 II MHC 단백질은 활성화된 T-세포, 매크로파지 및 기타 면역계 세포의 표면에 존재한다. 사람이 MHC 유전자(HLA 유전자 좌)은 사람 염색체 6에 위치하며, 마우스 MHC 유전자는 마우스 염색체 H-2 유전자 좌에 위치하고, 유사한 레트 MHC 유전자는 RTI라고 부른다. 클래스 I MHC 항원은 핵을 가진 모든 세포의 표면에 존재하는 막 당단백질로 정의되며, CD8+ 세포독성 T-세포에 의한 항원 인지에서 중요한 역활을 수행한다. 클래스 II MHC 분자는 MHC는 일부를 이루는 막 당단백질이며 면역 반응의 개시에서 매우 중요하다. 주로 B-세포를 포함하는 면역계 세포, 매크로파지, 뇌의 성상세포, 표피 랑게르한스 세포, 수지상 세포, 흉선 상피 및 헬퍼 T-세포에서 발견된다. 클래스 II MHC 분자는 여러 현상에서 조직 이식 거부에서의 면역 반응 조절, 항체 생산 자극, 및 자기 (또는 제고장의) 항원의 인식에 관련되어 있다. MHC 항원은 클래스 I 및 /또는 클래스 II MHC 항원으로 정의된다. 본 발명의 MHC 항원은 클래스 I 및 클래스 II 모두를 포함하며, 각각의 단독으로 또는 조합으로 포함된다.

이인자형 조직 추출물은 이인자형 이식체 공급자로부터 얻어 아래에서와 같이 준비한 비세포, 비장조직 또는 배양시킨 임파구 추출물로 정의한다. 면역 억제 단편은 이인자형 이식된 조직 또는 기관에 대한 숙주의 면역 반응 억제를 유도를 할 수 있는 관련된 MHC 항원의 유사체 부분, 또는 부분적인 아미노산 서열은 함유하는 펩타이드 또는 폴리펩타이드는 어떠한 것이라도 포함한다. 그러한 단편이 MHC 분자 전체의 동종항원적 특성을 가질 필요는 없다. 면역 억제 단편의 유사체는 이식된 기관 또는 조직에 대한 포유류 숙주의 반응을 억제할 수 있는 생물학적 활성을 가지는, MHC 항원의 억제 단편과 구조적으로 관련된 화합물을 의미한다. 이 유사체에는 잠재적인 이식 수용자의 관련된 MHC 항원의 아미노산 잔기와 하나 이상의 아미노산 잔기가 다른 아미노산 서열을 가지는 펩타이드도 포함된다.

본 발명에서 사용된 질병 억제 단편 및 유사체는 잘 알려진 고체상 합성 기술에 의해 합성될 수 있다.(Merrifield, R.B. Fed Proc. Am Soc. Ex. Biol, 21 : 412, 1962 and J. Am. Chem. Soc. 85 : 2149, 1963: Mitchel, A.R. et al., J. Am. Chem. Soc. 98 : 7357, 1976; Tam, J. et al., J. Am. Chem. Soc. 105: 6442, 1983). 유사체는 대응하는 아미노산 서열을 알아내고 위의 펩타이드 합성 기술을 이용함으로써 만들 수 있다. 유사체는 Immunogenetics 29 : 231-234, 1989에 공개된 MHC 항원 아미노산 서열을 이용하여 제조할 수 있다. 질병 억제 유사체 및 단편을 공지된 제조합 DNA기술을 이용하여 제조할 수 있다. MHC 항원의 질병 억제 단편 및 그것의 유사체는 다음에 기재되는 실시예 1-4와 같은 적당한 생체내 시스템을 이용한 일상적인 실험에 의해 동정될 수 있다. T-임파구는 Transplantation 41 : 549, 1986 및 Transplantation 48 : 639, 1989에 공개된 방법에 의해 잠재적인 이식체 공급자로부터 얻을 수 있으며, 조직 또는 기관 이형자형 이식이 행해졌거나 행해질 포유류에게 투여될 수 있다. 비장조직 추출물 또는 배양시킨 임파구는 다음이 실시예 1에서와, 같은 공지의 방법에 의해 제조될 수 있다. 본 발명에 따라, 이 분야에서 공지되어 있으며 이식체 공급자와 수용자에 일상적으로 행해지고 있는 종래의 조직 타이핑은 공급자의 조직 또는 기관의 MHC 표현형을 결정하기 위해 잠재적인 이식체 공급자에게 행해질 수 있다. 합성 MHC 항원, 질병 억제 단편 또는 이들의 유사체는 위에 기재된 기술에 의해 제조될 수 있다. 이러한 항원 및/또는 단편은 포유류 특히 이식되는 수용자 또는 이미 비-자기 조직이 이식된 수용자인 사람에게 투여될 수 있다. 본 발명의 방법 및 조성물은 이미 비-자기 기관 또는 조직이 이식된 포유류 및 이인자형 이식거부 증상(열, 이식된 기관의 변화 또는 기능 손실 등)이 나타나기 시작하는 포유류의 치료에 이용될 수 있다.

본 발명의 방법 및 조성물은 그 조직 또는 기관의 보존과, 이식된 조직 또는 기관에 대한 수용자의 면역반응의 일부를 가라앉히는데 유용하다. 본 발명의 조성물 및 방법이 효과적이기 위해서는 전체적인 거부가 일어나기 전에 투여되어야 한다. 본 발명에 따른 MHC 항원 또는 이식 거부 억제 단편 또는 이들의 유사체는 0.1-10㎎/Kg 몸무게/일의 양으로 경구 또는 장내 경로를 통해 비-자기 기관 또는 조직 이식체를 이식받았거나 이식받을 포유류에게 섭취된다.

본 발명의 약학 조성물은 단일 투여로 또는 여러 회의 투여로 경구 또는 장내로 투여될 것이다. 바람직하게는, 1-5mg/Kg 몸무게/일로 투여된다. 투여될 정확한 양은 환자의 질병 상태 및 심각성, 생리적 상태에 따라 달라질 것이다. 비세포, 배양시킨 임파구 또는 이들의 추출물은 단일 투여 또는 여러 회이 투여에 의해 10⁶-10⁹세포/Kg 몸무게/일 양으로 투여될 수 있다. 이러한 치료의 시간대는, 가능하다면, 본 발명의 약학 배합물 또는 투여 형태물을 이식 7-14일 전에 투여하는 것이 좋다. 바람직하게는, 치료는 숙주(수용자)에게 조직 또는 기관이 이식된 후 최소한 6개월 동안 계속해서 투여되어야 하며, 필요하다면 무한히 계속 투여될 수 있다. 게다가,(본 발명의 조성물을 이미 투여받았거나 받지 않은) 이식 수용자가 거부 증상을 명백히 나타내기 시작하면, 본 발명의 약학 배합물의 양 및/또는 횟수를 늘려 투여할 수 있다.

또한 본 발명은 이식된 조직 또는 기관의 거부를 억제하거나 생존을 연장시키기 위하여 포유류에 투여하기 위한 약학 배합물 또는 경구 투여 형태에 관한 것이다. 본 발명의 치료에 따른 통계적으로 상당한 정도의 어떠한 이식체 생존이 연장이라도 본 발명의 범위에 속한다. 본 발명의 따른 경구용 약학 배합물은 이 분야에서 공지된 염, 약리학적으로 허용되는 담체, 희석제, 충진체, 가용제 또는 유화제를 포함하는 안정한 조성 성분도 포함한 것이다. 예를 들면, 이 분야에서 공지된 녹말 또는 벤토나이트 등의 고체 담체를 사용하는 통상적인 방법에 의해 정제 또는 환제를 제조할 수 있다.

고체 담체에는 벤토나이트, 실리카, 덱스트로즈 및 기타 통상적으로 사용되는 담체가 포함된다. 비제한적인 또다른 담체 또는 회석제의 예로는 식염수 및 인산 완충용액 식염수(pH 7-8)와 같은 생리적 식염수 및 물이 있다.

본 발명에 따른 캡슐은 젤라틴 또는 셀룰로오즈 유도체 등의 약리학적으로 허용되는 어떠한 물질로부터라도 제조될 수 있다. 본 발명에 따른 활성을 가진 생물학적 물질은 다음에서 공개된 것과 같은, 지속적인 전달을 위한 경구 전달 시스템 및/또는 장용성 피복된 경구 투여 형태의 형태로 투여될 수 있다 : 미국 특허 제4,704,292호(1987. 11. 3 사정), 미국 특허 제4,309,404호(1982. 1. 5. 사정) 미국 특허 제4,309,406호 (1982. 1. 5 사정).

이식 거부 억제하기 위한 필요한 정도의 유효량은 투여 단위를 여러번 투여함으로써 얻을 수 있으므로 각 투여 단위가 상기 유효량의 성분을 함유할 필요는 없다.

본 발명의 투여형태를 위한 바람직한 투여 경로는 경구 또는 장내 투여이다. 바람직한 경구 또는 장내용 약학 배합물 또는 투여 형태는 예를 들면, 70-500mg의 MHC 항원, 질병 억제 단편 또는 이들의 단편, 또는 10⁷-10¹⁰세포에 대등한 이인자형 세포 또는 이들의 추출물로 이루어질 수 있다.

본 발명의 한 실시예에서, 본 발명의 약학 배합물은 에어로졸 형태로 포유동물에게 투여된다. 에어로졸 형태로 투여하는 경우, 더 적은 양의 이인자형 조직 추출물 또는 MHC 항원, 질병 억제 단편 또는 그들의 유사체가 요구될 것으로 예상된다. 이것은 마이엘린 기초 단백질(MBP)로 실험적 알레르기성 뇌척수염 (EAE)을 치료하는 경우, 또는 미국출원번호 제454,486(1989. 12. 20 출원)에 공개된 바와 같이 콜라겐으로 보조액 관절염을 치료하는 경우에서 밝혀졌다. MHC 항원, 질병 억제 단편 또는 그들이 유사체의 양은 0.01mg-10mg/Kg 몸무게/일이며 에어로졸 루트를 통해 환자에게 투여될 것이다. 정확한 투여량은 환자의 질병 상태, 심각성, 환자의 면역반응활성 및 환자의 육체적 조건에 따라 달라진 것이다. 비세포, 배양시킨 임파구 또는 이들의 추출물은 단일 투여 또는 여러 회의 투여에 의해 10⁶-10⁹세포/Kg 몸무게/일 양으로 투여될 수 있다. 본 발명의 따른 경구용 약학 배합물은 이 분야에서 공지된 염, 약리학적으로 허용되는 담체, 희석제, 충진체, 가용제 또는 유화제를 포함하는 안정한 조성 성분도 포함할 것이다. 비제한적인 또다른 담체 또는 희석제의 예로는 식염수 및 인산 완충용액 식염수(pH 7-8)와 같은 생리적 식염수 및 물이 있다. 유용한 가용화 및 유화제의 예는 생리적으로 균형이 맞는 염용액, PBS 및 등장액 식염수이다.

본 발명에 따른 에어로졸 투여 형태의 제조에 사용될 수 있는 염은 약리학적으로 허용되는 나트륨 및 칼륨염이다. 본 발명의 선택적인 실시예에 따른 동종원성 비장세포, 배양시킨 임파구, 그들의 추출물 또는 MHC 항원 또는 질병 억제 단편 또는 그들의 유사물은 에어로졸 또는 흡입물 형태이다. 본 발명의 에어로졸 조성물은 건조 분말 또는 수용액으로 투여될 수 있다. 바람직한 에어로졸 약학 조성물은 예를 들면, 본 발명에 따른 조성물, 질병 억제 단편 또는 그들의 유사체를 약 7-700mg 함유하는, 생리학적으로 허용되는 완충용액 식염수로 이루어질 수 있다. 액체에 용해 또는 현탁되지 않는, 비장세포, MHC 항원 질병 억제 단편 또는 그의 유사체로부터의 조직 추출물의 미세한 고체 입자 형태의 건조 에어로졸 역시 본 발명의 실시에 유용하다. 본 발명의 조성물은 먼지 형태의 분말일 수 있으며 평균 입자크기가 1-5μ, 바람직하게는 2-3μ인 미세한 입자로 이루어질 수 있다. 미세한 입자는 이 분야에서 널리 알려진 분말화 및 스크린 여과에 의해 제조될 수 있다. 이 입자는 건조시킨 분무 분말 형태일 수 있으며 미리 정해진 양의 미세 분말은 흡입함에 의해 투여할 수 있다.

본 발명의 약학 배합물은 미국특허 제4,624,251(1986. 1. 25 사정), 미국특허 제3,703,173(1972. 11. 21 사정), 미국특허 제3,561,444(1971. 2. 9 사정), 미국특허 제4,635,627(1971. 1. 13 사정)에 공개된 바와 같이 분무기를 이용하여 에어로졸 루트로 투여할 수 있다. 에어로졸 물질은 치료하고자 하는 개체에 의해 흡입될 수 있다. Newman, S.P. in Aerosols and the Lung, Clarke, S. W. and Davia, D. eds, pp.197-224, Butter-worths, London, England, 1984에 공개된 것 같은 건조분말 흡입기와 가압된 측정된 투여량 흡입기(metered dose inhaler ; MDI)를 포함하는 다른 에어로졸 전달 시스템도 본 발명의 방법에 사용될 수 있다.

본 명세서에 공개된 에어로졸 전달 시스템은 Fisons Corporation(Bedford, MA), Schering Corp, (Kenilworth, NJ) 및 American Pharmoseal Co., (Valencia, CA).를 포함하는 많은 상업적인 공급원으로부터 가능하다.

본 발명에 따라 Lewis 래트에 대하여 동종원적 비장세포 경구투여의 효과를 알아보기 위한 실험을 수행하였으며, 이때 이식 수용체의 면역 반응에 대한 효과를 특히 주의깊게 관찰하였다. 시험관내 혼합 임파구 반응(MLR), 지연된 타입의 과민성(DTH) 반응 및 생체내 촉진된 심장 이인자형이식 거부 기술이 이용되었다. 각 경우에서 (비-자기 조직이 이식된 수용체에게) 공급자의 비장 세포구를 경구 투여한 결과 T-세포가 매개하는 면역 반응이 억제되었다. T-세포가 이인자형이식 거부의 중요 매개체라고 추측되어 왔으므로, 이 실험의 결과는 본 발명의 방법 및 약학 조성물이 실제적 유효성을 나타낸다. 아래에서 특별한 실시예를 통해 본 발명을 설명한 것이나, 이것은 본 발명의 범위를 제한하고자 하는 것을 아니다.

[1. 포유류 시험대상]

[실시예 1]

[재료 및 개체의 준비]

Harlan Sprague Dawley Inc., Indianapolis, IN로부터 얻은 Lewis(LEW), Wistar Furth (WF) 및 Brown Norway(BN) 변종인 수컷 래트로 시험대상군을 구성하였다. 아래 실험에서 사용된 래트는 생후 약 8-10주이며 주의 깊게 관찰하면서 양육하였다.

[2. 경구 투여용 비장세포구이 제조]

동인자형(같은 종, 같은개체(strain) 또는 이인자형(같은 종, 다른 개체) 동물로부터 경구 투여 직전에 신선한 비장조직을 얻었다. 신선한 비장을 표준 스테인레스 스틸 메쉬(2×2 인치)를 통과시켜 단세포 비장세포구(splenocyte) 현탁액을 준비하였다. 이 분야에서 공지된 방법에 따라, Tris-암모륨 클로라이드 완충액으로 적혈구를 특이적으로 응혈시키고 Hanks Balanced Salt Solution (HBSS)으로 2회 씻은 후, 사용하기 전에 아래와 같이 다양한 농도로 현탁시켰다.

[3. 비상세포구 용혈물의 제조]

위에서 제조된 비장세포구를 아래와 같이 냉동-해동 과정을 반복하여 응혈시켰다:

(a) 세포를 -70℃에서 30분간 급냉시켰다;

(b) 급냉시킨 비장세포를 37에서 해동시켰다;

(c) 이러한 냉동-해동 과정을 한번 더 반복하였다.

이 결과 얻은 것을 경구복용을 위해 사용하였다.

[실시예 2]

[제조된 비장세포구 현탁액의 경구투여]

실시예 1에서 제조한 세포현탁액 1ml을 끝이 볼(ball)형인 주입 바늘(Thomass Scientific, Swedesboro, NJ)를 사용하여 각 시험 래트에 경구 투여하였다.

다음의 실험실 차원의 면역학적 및 병원학적 실험은 시험 래트의 임파관에 대해 수행되었다.

[실시예 3]

[혼합 임파구 반응]

반응체(LEW)와 촉진체(WF 또는 BN)래트로부터 경부 임파절을 분리하였다. 제거한 임파절을 위의 실험에서와 같이 스테인레스 스틸 메쉬를 통과시키고 PBS에 현탁시켰다. 분리된 임파절 세포를 10% 소태아 혈정(FCS), 1% 페니실린 및 스트렙토마이신(Microbiological Associates, walrersville, MA) 2×10^-5M 2-멀캅토에탄올 및 5mM HEPES를 함유하는 RPMI 1640배지로 두번 씻고 그 배지에 6×10⁶세포/ml/로 현탁시켰다. 96-웰 평탄 바닥 배양 플레이트에 (Costar Cambridge, MA) 반응체 세포를 각 웰당 50㎛씩 넣고, 동일한 부피의 조사된 촉진체 세포(Sephard irradiator, Model 143-45와 Cesium-137 source를 사용하여 3000 Rads gamma irradiated)를 넣거나 또는 넣지 않았다. 처리된 세포를 5% CO₂, 37℃에서 4일간 배양한 후³H-티미딘(1μCi/well NEN Dupont, Boston MA에서 얻었음)으로 6시간 자극을 주었다. Beckman 액체 신틸레이션 계수기로³H-티미딘을 측정함에 의해 세포 증식을 측정하였다.

[억제자 분석]

준비한 임파절 세포를 감사선 조사 1000 Rads로 처리하고, 시험 MLR에 총 세포의 5-10%/웰 (실험웰)의 다양한 농도로 웰에 넣었다. 대조구 웰은 조절자(modulator)가 없도록 계획되었으며, 배경 웰은 반응체 세포만 가졌다. 이것을 37℃, 5% CO₂조건으로 96시간 배양시킨 후 마지막 6시간 동안 1μCi/웰의³H/티미딘으로 플레이트를 자극시킨 후 증식을 측정하였다. 위에서와 같이 플레이트를 회수하였다.

[지연된 형태의 과민성(DTH) 반응]

각 그룹의 래트를 감마선 조사된 (3000 RAD) 이인자형 비장세포구 10×10⁶로 피하 면역시켰다. 10일 후, 같은 투여량으로 귀볼에 또 주사하였다. 이 과정 전과 이 과정 후 48시간 경과된 때의 귀의 두께 변화에 의해 반응을 판단하였다.

[세포 타이핑]

추출된 임파구의 표현형으로 간접적인 면역형광 염색과 형광-활성화된 세포 계수기(fluorescence-activated cell sorter ; FACS)에 의해 실험된다. 임파 세포를 그 세포의 표면 마커인 CD4 또는 CD8 또는 면역글로불린(Organo Teknica, Westchester, PA)와 함께 1시간 배양하고, 0.02% 소디움 아자이드를 함유하는 PBS로 2회 씻었다. 이것을 15% 제 곳(autologous) 정상 래트 혈청 존재하에서 FITC와 결합된 염소-항-마우스 IgG (1:40)과 함께 어두운 곳에서 30분간 더 배양하였다. 시험하기 전에 세포를 완전히 씻고 1% 포름알데이드로 고정시켰다.

추가로, 다음 실시예와 같은 형태의 외과적 이식 방법이 수행되었다.

[실시예 4]

[심장 이인자형이식]

외과적 이식에 LEW 래트를 사용하였다. 가속화된 거부 모델을 사용하였으며, 이 경우 LEW 래트를 비장세포 조제물의 경구 투여와 함께 또는 경구투여 없이 심장 이인자형이식 7일 전에 BN의 총-두께 피부 이식으로 미리 과민화시켰다.

7일후, 미리 처리한 각각의 래트에 대해 (LEW×BN)F1 개체 테스트를 수행하였다. 심장 이식체는 신장 아래쪽 복부에 대동맥에 연결되었다. 거부는 수용체의 옆구리를 매일 청진하였을때 심장 박동이 완전히 멈춘 것으로 정의한다.

위의 방법은 다음 결과를 얻기 위해 사용되었다.

I. 이인자형 비장세포 조제물의 경구투여에 의한, 혼합 임파구 반응(MLR)의 억제

WF 래트로부터 신성한 비장세포를 준비하여 LEW래트에게 1-2주 동안 2,5 또는 10회 경구 투여하였다.

각 투여량은 50×10⁶세포/경구투여였다. 최종 경구투여 후, 7일째에 대조구 그룹과, MLR 연구를 위해 WF 또는 BN 촉진체를 이용하여 비장세포를 경구투여한 그룹으로부터 임파절을 분리하였다. 제1도에서와 같이, 이인자형 비장세포구를 투여한 LEW래트의 경우 WF의 임파구에 대한 반응이 상당히 감소하였다. 이러한 현상은 3종류의 주입(즉, 2, 5, 또는 10회)의 경우 모두에서 관찰되었으나 10회 주입된 그룹만이 제3자 대조구인 BN에 대한 억제를 나타내었다. 이러한 결과는 이인자형 비장세포 조제물의 제한된 섭취가 MLR의 항원 특이적 억제를 유도함을 나타낸다.

II. 이인자형 : 동일인자형 바장세포 조세물 경구투여에 의한 MLR 억제 비교

이인자형 세포 : 동일인자형 세포 주입의 효과를 알아보기 위해 투여 반응 연구를 계속하여 수행하였다. LEW 래트에서 LEW 또는 WF의 비장세포 1,2, 25 또는 50×10⁶개를 2회 주입하였다. 그 결과를 표 1에 표시하였다.

동일인자형 세포를 1×10개 주입했을 때는 억제가 유도되지 않았으며 그밖의 투여량에서는 동일인자형과 이인자형 세포에서 모두 다양한 정도로 억제가 나타난다.

III. MLR에서 이인자형 비장세포 용혈물의 조제물 섭취 효과.

MLR에서 응혈물 단독의 섭취는 경구투여에 의해 유도되는 내성을 위해 살아있는 비장세포가 필요한지의 여부를 결정하기 위한 실험이다. 래트에게 살아있는 비장세포와, 반복된 냉동-해동에 의해 응혈시킨 이에 대응하는 응혈물을 투여하고 그 결과를 비교하였다. 제2도는 세포 용혈물 만으로도 충분히 MLR에서의 억제를 유도할 수 있으며, 이것은 세포-매개 면역의 억제에 세포내 단편이 관련되어 있음을 나타낸다.

IV. 동종항원의 경구투여에 의한 MIR 억제의 키네틱스

동종항원에 대한 내성을 유도하는 경구투여의 카네틱스는 LEW래트의 분리된 그룹에서 MLR 수행 14, 7, 3, 1일 전에 비장세포를 2가지 투여량으로 경구투여함에 의해 연구되었다. 제3도에서 알 수 있듯이, MLR 수행 1 또는 3일전에 경구투여한 그룹은 억제를 유도하지 않았다. 최종 경구투여와 MLR사이에 7일 및 14일의 간격이 있는 그룹은 MLR에서 증식의 극적인 감소를 나타내었으며 이것은 동종항원에 대한 경구 비반응성의 유도에는 최소한 4일 이상이 필요함을 나타낸다.

V. 동종항원에 대한 DTH 반응의 억제

시험관내 MLR에 더하여, LEW래트에서의 생체내 DTH(delayed type hypersensitivity) 반응에 대한 동종원적 비장세포 섭취의 효과를 알아보았다. LEW 래트에서 동일인자형 또는 이인자형(WF) 동물의 비장 세포 50×10개를 10회 경구투여하였다. 마지막 경구투여 후, 발바닥에 피하 면역시킨 동물들에 대해 DTH를 위한 실험을 시작하였다. 10일 후에 같은 동물의 귓불에 다시 주사하였다. 주사 전과 주사 후 48시간 경과했을 때의 귀의 두께를 비교하여 DTH를 측정하였다. 결과를 표 4에 표시하였다.

WF 세포를 주입시킨 경우 WF에 대한 DTH 반응이 약 50% 감소되었으나 동일인자형 LEW 비장세포를 주입시킨 WF는 그렇지 않았다. BN에 대한 DTH 반응은 전처리에 의해 영향은 받지 않았으며, 이것은 DTH가 항원 특이적임을 나타낸다.

VI. 활성적인 억제는 MLR에서의 매개된 증식 감소에 관련이 있다.

주입된 동물에서의 MLR 증식 저해 기작을 연구하기 위하여 CD8+억제자 세포가 위에서 관찰된 효과의 매개에 관련이 있는지를 알아 보기 위하여 억제자 세포 분석을 수행하였다. 대조구 또는 미리 주입시킨 동물로부터 분리한 임파구를 감마선 1000 Rads로 조사한 후 초기 MLR에 조절자로 첨가하였다. LEWIS 래크(3/그룹)을 다양한 투여량(표에 기재되어 있음)의 WF 비장세포로 10회 경구투여하여 전처리하였다. 1주일 후, 경부 임파절을 분리하여 감마선으로 1000Rads로 조사한 후 그 세포를 조절자로 사용하였다. 위에서 기재한 바와같이 LEW 항-WF 및 LEW 항-BN MLR 및 Con-A 촉진 배양을 시작하였다. 1차 배양에 1/5의 비율로 조절자 세포를 첨가하였으며 그 결과를 표 2에 나타내었다.

표 2의 결과는 미리 주입시킨 동물에서 분리한 조절자를 20% 첨가하는 경우 초기 LEW-항-WF MLR을 억제하나 대조구에서 분리한 조절자를 첨가하는 경우에는 그렇지 않음을 나타낸다. 이것을 억제자 세포가 주입 후에 유도되며, 이것이 MLR 억제를 매개한다는 것을 제안한다.

VII. 비장세포를 섭취하는 세포에서 분리한 임파절의 표현형

대조구 또는 주입된 동물에서 분리한 경부 임파구를, 조사된 WF촉진자(stimulator)와 함께 5일간 배양시킨 후 간접적인 면역형광염색에 의해 CD4+ 또는 CD8+ 세포의 수를 세었다. 결과를 제5도에 표시하였으며, 이인자형 비장세포를 미리 주입시킨 래트의 경우 대조구에 비해 CD4+ 세포(헬퍼 T-세포) 수는 감소하였음을 알 수 있다.

VIII. 비상세포의 경구투여는 가속화된 심장 이인자형이식 거부를 예방한다.

이인장형이식 거부의 예방을 증명하기 위하여 위에서 기재된 바와 같이 가속화된 거부 이식 모델을 사용하였다. LEW 래트를 BN피부 이식체로 미리 과민화시킨지 7일 후에 BN 실험 심장 이인자형 이식을 실시하여 이식 생존 실험에서의 공급체의 이인자형 비장세포 주입의 효과를 알아보았다.

과민화시키지 않은 대조구는 6-8일째에 이인자형 심장 이식의 거부를 나타내었으며, 과민화시킨 모든 대조구는 이식 후 36시간 내에 매우 급성으로 이식 거부를 나타내었다. 피부 이식 7일전에 50×10개의 비장세포를 5-10회 주입시킨 동물들, 심지어는 피부 이식 당일에 주입한 동물들도 실험 심장 이인자형이식 생존이 7.62±0.5일정도 증가됨을 보여주었다. 이러한 결과는 이인자형 비장세포의 주입이 과민성을 예방하고 가속화된 거부를 급성 형태로 전환시킴을 나타낸다. 이 현상의 특이성을 아래와 같이 검사되었다.

심장 수용체인 LEW 래트에 LEW(동일인자형) 임파구를 주입하지 않거나 (n=10), 주입하거나(n=8), BN 비장세포(WF 심장의 이인자형 이식된 것, n=6)을 주입하거나, BN 비장세포(BN 심장의 이인자형이식된 것 n=8)을 주입하였다. 주입된 모든 동물들에게 50×10비장 세포를 5-10회 주입하였다. 결과를 제6도에 나타내었다. 제6도에서 알 수 있듯이, 이인자형 비장세포를 주입한 래트만이 심장의 이인자형 이식 후 3일 이상 생존하였다. 제3자(BN) 임파구를 주입한 후 WF가 이식된 LEW 래트는 심장의 이인자형 이식 후 생존기간을 늘려주지 못했으며, 이것은 이 반응의 특이성을 증명하는 것이나 이식 연장의 기작을 연구하기 위한 전단계로, 심장 이식 후 48시간 동안 대조구와 주입되어 과민화된 LEW 래트에서 분리한 경부 임파절의 MLR을 검사하였다. 결과를 제7도에 나타내었다. 대조구와 비교할 때, 주입된 동물에서 MLR의 억제가 관찰되었다.(제7도). 이 결과는 앞에서의 순응하는 동물 모델에서의 MLR 결과와 일치한다.

Claims

공급체인 포유류의 비-자기 조직의 존재에 대한 면역 반응을 억제할 필요가 있는 수용체 포유류에게, 상기 공급체 포유류의 MHC 항원, 이 항원의 단편 및 이들의 유사체로 구성되는 군으로부터 선택되며 상기 면역 반응을 억제시키는데 특이적인 제제의 면역 억제 유효량을 경구 또는 장내로 투여하는 것으로 이루어지는, 상기 공급체인 포유류에서 유래된 비-자기 조직의 존재에 대한 인간을 제외한 수용체 포유류의 면역 반응을 억제하는 방법.
이식된 기관 또는 조직의 공급체인 MHC 항원, 이 항원의 단편 및 이들의 유사체로 구성되는 군으로부터 선택되며 이식된 기관 또는 조직에 지향되는 포유류의 면역 반응을 특이적으로 억제시키는 제제로 이루어지며, 경구투여 형태인 이식 거부 억제용 약학 배합물.
제2항에 있어서, 상기 경구 투여 형태가 정제(tablet), 캡슐 및 캡릿(caplet)으로 구성되는 군으로부터 선택되며 고체 투여 형태인 것을 특징으로 하는 약학 배합물.
제2항에 있어서, 상기 경구 투여 형태가 수용성 현탁액 용액으로 이루어지는 약학 배합물.
제2항에 있어서, 상기 약학 배합물이 약리학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 함유하는 약학 배합물,
면역반응을 억제할 필요가 있는 수용체에게 상기 공급체의 MHC 항원, 이 항원의 단면 및 이들의 유사체로 구성되는 군으로부터 선택되는 제제의 면역 억제 유효량을 에어로졸 형태로 투여하는 것으로 이루어지는, 공급체로부터 유래된 외래조직의 도입에 대한 인간을 제외한 수용체의 면역반응을 억제하는 방법.
제2항에 있어서, 외과 이식에서의 공급체의 MHC 항원, 이 항원의 단면 및 이들의 유사체로 구성되는 군으로부터 선택되는 제제를 이식 억제 유효량 함유하는 에어로졸 형태로 이루어지는, 상기 공급체로부터 외과적 이식을 받았거나 받고자 하는 수용체 포유류에 투여되기 위한, 이식 거부 억제용 약학 배합물.
제7항에 있어서, 상기 에어로졸 투여 형태가 수용성 현탁액 용액으로 이루어지는 약학 배합물.
제7항에 있어서, 상기 약학 배합물이 약리학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 함유하는 약학 배합물.
제1항에 있어서, 이식 거부 억제가 필요한 포유류에서 이식 공급체 포유류위 MHC 항원, 이 항원의 단편 및 이들의 유사체로 구성되는 군으로부터 선택되며 상기 이식에 지향되는 상기 포유류의 면역 반응을 특이적으로 억제시키는 제제의 유효량을 경구투여하는 것으로 이루어지는, 인간을 제외한 포유류에서의 이식 거부를 억제하는 방법.
제2항에 있어서, 외과 이식에서의 공급체의 이식 MHC 항원 및 이항원의 단면 및 이들의 유사체로 구성되는 군으로부터 선택되는 제제를 이식거부 억제 유효량 함유하는 경구용 투여 형태로 이루어지는, 상기 공급체 포유류로부터 외과적 이식을 받았거나 받고자 하는 수용체 포유류에 투여되기 위한 약학 배합물.
제2항에 있어서, 이식된 기관 또는 조직의 공급체의 MHC 항원, 이 항원의 단편 및 이들의 유사체로 구성되는 군으로부터 선택되며 상기 이식된 기관 또는 조직에 지향되는 포유류의 면역 반응을 특이적으로 억제시키는 제제로 이루어지며, 구강으로 투여되는 이식 거부 억제용 약학 배합물.