JPH0395124A - 抗高血圧剤および飲食品 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［ａ業上の利用分野］ この発明は、グラム陽性細菌細胞壁由来の多糖−グリコ
ベプチド複合体（尚、ベプチドグリカンとも表記される
ことがある）を有効戊分とする抗高血圧剤および飲食品
に関するものである。

［従来の技術コ 近年、高血圧症の中でも原因が不明とされる本態性高血
圧症は全体の９０％を占め、残りの１０％が腎、副腎、
神経系の疾患に伴なう二次性高血圧症であるといわれて
いる。

高血圧症を放置すれは種々の循環器系疾岩、の誘因とな
りつることから、その予防および治療薬の開発は、種々
の研究機関における重要な研究課題となっている。

これまでに開発、上市されている抗高血圧剤は、その作
用機序から大別すると、 ■腎尿細管のナトリウム再吸収印制剤．サイアザイド等
の降圧利尿剤 ■ノルアドレナリン貯留曲制剤；ローウオルフイア・ア
ルカロイド等 ■末梢血管拡張剤；ヒドララジン等 ■アドレナリンリセブターの刺激剤，メチルドーバ等 ■交感神経末梢遮断剤、交感神経中枢抑制剤；グアネチ
ジン等およびクロニジン等 ■β一受容体遮断剤；ブロブラノロール等■アンジオテ
ンシン変換酵素阻害剤．カブトリル■その他 に分類されるが、現在も種々の薬剤の開発が活発に行な
われている。

［発明が解決しようとする課題コ これら抗高血圧剤は長期にわたり連続投与されるのが一
般的であるが、前記薬剤は、薬効において優れている反
面、５くの副作用を有していることから、より安全性の
高いものが要求されている。

他方、天然物として、植物や海藻、あるいは微生物の産
生ずる多糖、例えばベクチン酸塩（特開昭６３−１　１
　２５２０号）、アルギン酸（特開昭５９−１　４３５
５９号）、アルギン酸カリウム（特開昭５９〜３４８５
３号）、アルギン酸カルシウム（特開昭６０−１　３０
５２３号）、マンナン（特開昭６３−１０１３２７号）
、乳酸菌の生産する高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０　（
特開昭５９−１９０９２０号）等に血圧の上昇を抑制す
る作用のあることが知られている。

その他にも、ヘパリン．、カラギーナン、デキストラン
、セルロースあるいはポリデキストロース等にも血圧の
上昇を抑制する作用や血圧を降下させる作用があること
が学会等で報告されている。

しかしながら、経口投与によって降圧効果を現すには、
いずれも大量に摂取しなければならない等の問題があっ
た。

これらの現状に鑑み、本発明者らは、経口投与で、顕著
な抗高血圧作用を示すことを特徴とし、かつ安全性の高
い薬剤を開発すべく鋭意検討した。その結果、従来より
乳酸菌、ビフィズス菌、ストレブトコッカス等のグラム
染色陽性菌の１ｌｌ　胞壁構成戊分であることが知られ
ている多糖−グリコベブチド複合体に優れた抗高血圧作
用を見い出し、木発明を完成するに至った。

すなわち、本発明は、グラム染色陽性菌の細胞壁構戊威
分である多糖−グリコペプチド複合体を有効戊分とする
抗高血圧剤および飲食品に関するものであり、自然発症
高血圧ラットや腎性高血圧ラットに対して、経口的にｌ
ｍｇ／ｋｇの微量の単回没与で降圧効果を発揮する、極
めて強力て、かつ安全な抗高血圧剤および飲食品を提供
するものである。

［課題を解決するための手段］ 本発明に係る抗高血圧剤では、グラム陽性細菌細胞壁由
来の多糖−グリコペプチド複合体を有効成分とするもの
である。

また、本発明に係る飲食品では、グラム陽性細菌細膓璧
由来の多糖−グリコベブチト復合体を有効成分とするも
のである。

［作用］ 本発明に用いる多糖−グリコペブチト複合体は、グラム
染色陽性菌の多糖−グリコペプチド複合体であれば、い
ずれでも用いることができるが、乳酸菌あるいはビフイ
ズス菌の多糖−グリコペプチドが安全性の面でより好ま
しい。

乳酸菌の細胞壁の表層部には主としてベプチドグリカン
からなる層かあり、更に、その外側には、タイコ酸や多
糖などが存在する。ベプチ１・グリカンは、４個または
５個のアミノ酸からなるベプチド鎗て置換されたＮ−ア
セチルムラミン酸とＮアセチルグルコサミンとが結合し
た二糖単位を基本単位とし、これが、他のアミノ酸やベ
ブチトによって架橋されながら巨大分子化したものてあ
り、細胞壁中ては、上記タイコ酸や多糖とリン酸を介し
て結合している。その代表的なものを次に示す。

Ｒ−Ｌ．−Ａｌａ−Ｉ）−Ｇｌｎ−Ｌ−Ｌｙｓ−［１・
ＡｌａＲ−Ｌ−Ａｌａ−Ｄ−Ｇｉｎ−Ｌ−Ｌｙｓ−Ｄ−
Ａｌａ８・八ｓｎ Ｒ−Ｌ・＾Ｉａ−Ｄ−Ｇｌｎ−Ｌ−Ｌｙｓ−Ｄ・八ｌａ
Ｄ−Ａｓｎ Ｒ−Ｌ・八ｌａ−Ｄ−Ｇｌｎ−Ｌ・Ｌｙｓ−Ｄ・八ｌａ
但し、式中の略号はそれぞれ下記の単位を意味する。

Ｒ 多糖 星 Ｎｏ−Ｐ−Ｏ Ｉ ０ ０ １ Ｈ　−　Ｃ　−　Ｃ　１１　３ Ｃｌｌ０ Ｌ−八ｌａ：Ｌ−アラニン Ｄ−Ｇｉｎ：Ｄ−グルタミン Ｌ−Ｌｙｓ　　：　Ｌ−リジン Ｄ−八ｓｎ：Ｄ−アスパラギン 基本単位は上記構造式で示したものであるが、多糖−グ
リコペブチド複合体の調製方イ去（例えは、熱水抽出怯
、自己消化７去なと）によっては、Ｎ−アセチルグルコ
サミンが、さらに上記構造式Ｒ中のムラミン酸分子に結
合した形の複雑な化合物となる場合も有る。

すなわち、これら複雑な化合物のイ毘合物が、本発明の
抗高血圧剤および飲食品を構成する多糖グリコベブチド
複合体である。

一方、乳酸菌には従来多くの生埋活性を有することが報
告されている。すなわち、抗腫瘍作用（１．Ｋａｔｏ　
ｅｔ　ａｌ．，Ｇａｎｎ．７２．５１７（１９８１）．
Ｎ．Ｙａｓｕｔａｋｅｅｔ　ａｌ．，Ｍｅｄ．Ｍｉｃｒ
ｏｂｉｏ１．Ｉｍｍｕｎｏ１．，１７３，１１：ｌ（１
９８４））、抗感染作用（Ｋ．Ｎｏｍｏｔｏ　ｅｔ　ａ
ｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．ｌ．ａｂｒｍｍｕｎｏ１．，１７
，９１（１９８５））　．マクロファージ活性化（　１
．Ｋａｔｏ　ｅｔ　ａｌ．，Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．ｌｍ
ｍｕｎｏｌ．．２７　６１１（１９８３）），ナチュラ
ルキラー細胞活性化（　１．Ｋａｔｏｅｔ　ａｌ．，Ｍ
ｉｃｒｏｂｉｏ１．Ｉｎ＋Ｉｌｌｕｎｏ１．，２７，２
０９（１９８４））　、などが報告されている。またそ
の多糖一ベプチドグリカン複合体には抗腫瘍作用（特開
昭６３−１９６５２１号）、マクロファージ活性化作用
（ａ＠開昭６３−１　２６８２７号）等が報告されてい
る。

しかしながら、乳酸菌の多糖一グリコへブチ１・複合体
ひいては多糖−グリコベブチド複合体の血圧降下作用に
ついては全く知られていなかった。

次に、本発明の抗高血圧剤および飲食品を製造する方法
について説明する。本発明に用いる多糖グリコベブチド
複合体は種々のグラム染色陽性菌から自体公知の方（去
で採取することができる。

その糖組成およびアミノ酸配列は、乳酸菌の種類によっ
て若干異なるか、例えば乳酸菌では、ラクトハチルス属
に属する種々の菌株、例えば、ラクトバヂルス　カセイ
（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｃａｓｅｉ）　（以下
、　　ラクトバチルス”を”し”と記す）、Ｌ．アシト
フィルス（Ｌ．　ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）．　Ｌ．ア
リメンタリウス（Ｌ．ａｌｉｍｅｎｔａｒｉｕｓ）．　
Ｌ．アミロボラス（Ｌ．ａｍｙｌｏｖｏｒｕｓ）　，　
Ｌビフアーメンタンス（Ｌ．ｂｉｆｅｒ−ｍｅｎｔ．ａ
ｎｓ）、Ｌ．ブレビス（Ｌ．　ｂｒｅｖｉｓ）　，　Ｌ
．ブヒネリ（Ｌ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ）、しコリノイデス
（Ｌ．ｃｏｌｌｉｎｏｉｄｅｓ）、シ．コリネフ才ノレ
ミス（Ｌ．　ｃｏｒｙｎｅｆｏｒｍｉｓ）　、ｔ．．ク
リスパタス（Ｌ．ｃｒｉｓｐａｔｕｓ）　　Ｌ．カルバ
タス（Ｌ．ｃ　ｕ　ｒ　ｕ　ｖ　ａ　ｔ　ｕ　ｓ　）、
し，デルブレッキイ（Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ）し
．ヘルベティカス（Ｌ．　ｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ）　，
　Ｌ．ジエンセニ−（Ｌ．　ｊｅｎｓｅｎｉｉ）、し．
ラクチス（Ｌ．　ｌａｃｔｉｓ）、し．ムリナス（Ｌ．
ｍｕｒｉｎｕｓ）　　　Ｌ．サケ（Ｌ．ｓａｋｅ）、Ｌ
．サリバリウス（Ｌ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）等から得
られるものはすべて前記のアミノ酸配列のものであり、
かつ、本発明の抗高血圧剤および飲食品を構成する多糖
−グリコベプチド複合体として好ましい。

本発明の抗高血圧剤および飲食品の有効成分てある多糖
一グリコベブヂト複合体を乳酸菌から製造する方７去の
詳細は、次のとおりてある。

原才」とする乳酸菌は各々の蘭学的な性状に合わせた培
養条件で培養し、菌体を集めて培養菌体を得る。これら
は、乳酸菌の培養に通常使用される培地、例えばロゴサ
培地等を用いて培養することかできるが、より安価なコ
ーンスティーブリカーあるいはディスティラーズソリュ
ブル等を窒素源とする複合培地を使用しても良い。培養
方？去は通常乳酸菌で行なわれ゛る培養方法で良い。培
養菌体から多糖一グリコベプチド複合体を抽出するには
、熱水抽出法、自己消化７去、あるいは細胞壁熔解酵素
による酵素分解法等を用いることかてきる。

すなわち、熱水抽出７去によって、菌体からう糖−グリ
コペプチド複合体を抽出するには、５０℃から　１００
℃の熱水中に約１０〜８０ｍｇ／ｍｌの濃度の菌体を懸
濁させ、ｌＯ・〜６０分間程度抽出すれば良いが、好ま
しくは　１００℃、３０分間の抽出条件で行なうのが良
い。この際、ｐ｝Ｉは特に調整する必要はないが、通常
、６〜８が好ましい。また、菌体を自己消化させて、多
糖一グリコベプチド複合体を抽出するには、５０〜６０
℃の熱水中に、約１（１〜８０ｍｇ／　ｍｌの濃度の菌
体を懸濁甘さ、ｐｅｔａ〜８で１〜５時間程度自己消化
させたのち、　１００℃で５〜３０分間加熱処理する方
法で抽出することができるが、好ましくは、５５℃で２
時間自己消化させたのち、　１００℃で１０分間加熱抽
出するのが良い。さらに、菌体を酵素処理して、多糖一
グリコペブチド複合体を抽出するには、リゾチームを始
めとするＮ−アセチルムラミダーセやＮ−アセチルグル
コサミニダーゼ等を適宜な時間作用させ、細胞壁の基底
膜構造を切断して多糖一グリコベブチト複合体を抽出す
るのが良い。

このようにして抽出した多糖一グリコベプチド複合体は
、さらに、常（去に従って精製することができる。具体
的には、粗抽出液中に多量存在する蛋白は５＊の過塩素
酸あるいはトリクロロ酢酸等て除蛋白を行なう。次いで
、陰イオン交換樹脂カラムに通塔して蛋白および高分子
の核酸を除去する。さらに、残存する蛋白および核酸を
蛋白分角♀酵素と核酸分解酵素で分解したのち、使用し
た酪素を疎水クロマト用樹脂を充填したカラムにて除去
する。このようにして、ほぼ蛋白および高分子の核酸を
取り除いたサンプルを、分画分子量５万の透析膜を使用
し、蒸留水に対して透析する。さらに、高度に精製する
ときは、この透析内（夜を活性炭カラムに通したのち、
通過ｌ夜を凍結乾燥してもよい。

前記方法により、精製されたう糖一グリコベフチド複合
体は、必要が有れば、さらにゲルクロマトグラフィー等
で分画することもてきる。

［実施例］ ■，製造例 以下に、具体的な製造例を示す。

［製造例１］ コーンスティーブリカー培地（４９６グルコース、ｌ４
＊コーススティーブリカー、０．１％リン酸１カリウム
、０１％リン酸２カリウム）　　４０ｆ［にラクトバチ
ルス・カゼイ　ＹＩＴ９０１８を接種し、３５℃で２０
時間、水酸化ナトリウムでｐＨ６に制御培養し、培養終
了後、遠心分離（　１０，０００　ｒｐｍ．　　５　ｍ
ｉｎ）にて乾燥重量１．３　Ｊの洗浄菌体を得た。これ
を５５℃、ｐ＋＋７で２時間自己消化させてから、　１
００℃でｌＯ分間加熱抽出し、　２３４ｇの抽出物（Ｌ
Ｅｘ　）を得た。

この抽出物（ＬＥＸ）ｌｏｏｇに５ネの過塩素酸５℃を
添加し、沈殿蛋白等を遠心分離（　１４，ＯＯＯｒｐｍ
．１０分間）で除いた。沈殿物は蒸留水１℃に懸濁し、
２５＊アンモニア水にてｐＨ８．５に調整して溶解した
後、再度過塩素酸を最終５＊になるように添加して洗浄
した。その後、上清を集め、蒸留水に対して透析した。

この透析内波を陰イオン交換樹脂（Ｑーセファロース・
ファーストフロー）カラムに通し、核酸および蛋白質を
吸着させた後にエバボレーターで濃縮乾固した。これに
、０．１ｍＭの塩化亜鉛を含む０．１　Ｍの酢酸緩衝戒
（ｐ｝１５．１１）　２００ｍｌを添加して溶解した後
、ヌークレアーセＰｉ（ヤマサ醤油製、コード番号７８
０１）　１０ｍｇを添加し、５０℃て５時間、残存する
高分子核酸を分解した。次に、トリプシン（シグマ社製
、タイブＸｍ）　Ｌｏｍｇを添加し、３７℃で６時間残
存する蛋白を分解した。これを疎水クロマトグラフィー
（フェニルセファロースＣＬ−４Ｂ）カラムに通し、残
存蛋白および着色性成分を除去した。これを、分画分子
量５万の透析膜−（スベクトラ社製．スベクトラ／ボア
６）て筑留水に対して透析し、透析内液を凍結乾燥して
２、白色繊維状の多糖一グリコペブチト複合体（ＳＧ−
　１　）　３，３４０ｍｇを得た。

［製造例２］ ロゴサ培地（２亀グルコース、１堀トリブチケースペブ
トン、０．５％酵母エキス、０．３％トリブトス、０．
３％リン酸１カリウム、０．３％リン酸２カリウム、０
．１７％酢酸ソーダトリヒトレート、００２％し−シス
テイン塩酸塩、０．１％ツイーン８０、その他、微量金
属塩として硫酸マグネシウム、硫酸銖、硫酸マンガンを
含む）４℃にラクトハチルス・カゼイ　ＹＴＴ９０１８
を接種し、初発ｐＨ６．８　．　３５℃で２０時間培養
した後、遠心分１！ｉｉ　（１０，０００ｒｐｍ　，　
　５ｍｉｎ）にて乾燥重量換算で８ｇの洗浄菌体を得た
。

これをｐＨ７にて　１００℃で３０分間加熱抽出し、１
，３２０ｍｇの粗抽出物を得た。この粗抽出物に５９６
の過塩素酸　１００ｍｌを添加し、沈殿蛋白等を遠心分
離（１４，０００ｒｐｍ　，　１０分間）で除いた。ｌ
尤殴物は蒸留水５０ｍｌに懸濁し、２５ｔアンモニア水
にてｐＨ８．５に調整して溶解した後、再度過塩素酸を
最終５＊になるように添加して洗浄した。その後、上清
を集め、蒸留水に対して透析した。この透析内液を陰イ
オン交ｔｈ　樹脂（Ｑ−セファロース・ファーストフロ
ー）カラムに通塔し、核酸および蛋白質を吸着させた後
にエバボレーターで濃縮乾固した。これに、０．１ｍＭ
の塩化亜鉛を含む０．１　Ｍの酢酸緩衝液（ｐｆ１５．
４）５０ｍｌを添加して溶解した後、ヌークレアーゼｐ
ｉ（ヤマサ醤油製、コード番号７８０１）　１ｍｇを添
加し、５０℃で５時間、残存する高分子核酸を分解した
。次に、トリプシン（シグマ社製、タイブ■）ｌｏｇを
添加し、３７℃で６時間残存する蛋白を分解した。これ
を疎水クロマトグラフィー（フェニルセファロースＣＬ
−４Ｂ）カラムに通塔し、残存蛋白および着色製成分を
除去した。これを、分両分子ｆｆｉ５万の透析膜（スベ
クトラ社製スベクトラ／ボア６）で蒸留水に対して−透
析し、透析内液を凍結乾燥して、白色繊維状の多糖−グ
リコペプチド複合体４８ｍｇを得た。

＋＋　．物性 次に製造例ｌで得られた多糖一グリコベブチト複合体の
理化学的性質について説明する。

（１）分子量 セフアクリルＳ−３００によるゲルろ過クロマトグラフ
ィーを行なった結果を第１図に示した。

図に示す通り、カラムサイズ．　　ｌ．６ｘ　９０ｃｍ
．フラクションサイズ・１．８７ｍｌ／試験管，試料　
５１］ｍｇを負荷，展開剤・５　０ｍＭ炭酸アンモニウ
ム水溶液（ｐＨ無調整）の条件により、本物質を展開す
ると、ほぼボイドボリューム付近に溶出された。また、
種々の平均分子量を持った標準デキストランの熔出位置
から推定すると、該多糖−グリコペプチド複合体の平均
分子量は約１８万程度であることがわかった。

（２）分解点 本物質は　２６５℃付近で変色が始まり、　２７０℃〜
２７５℃で黒変した。

（３）紫外部吸収スペクトル 第２図は多糖一グリコペブチド複合体の紫外部吸収スペ
クトルである。

（４）赤外部吸収スペクトル 第３図は多糖−グリコベプチド複合体の赤外部吸収スベ
ク１・ルである。

（５）溶剤に対する溶解性 水に可溶、メタノール、エタノール、アセトン、エーテ
ルに不溶。

（６）呈色反応 ■モーリシュ反応　　　　　　　　　陽性■アンスロン
反応　　　　　　　　　陽性■オルシノール反応　　　
　　　　　陽性■フェノールー硫酸反応　　　　　　陽
性■エルソンーモルガン反応　　　　　陽性■カルバゾ
ールー硫酸反応　　　　　陰性■アニリンー塩酸反応　
　　　　　　陰性（７）塩基性、酸性、中性の別 本物質の０．１−０．５％水溶液のｐ＋＋は中性であっ
た。

（８）物質の色 本物質の凍結乾燥物は白色繊維状であった。

（９）構成糖の種類 該多糖一グリコベブチト複合体の構成糖は、５紮Ｓ　Ｅ
　−　５　２　Ｂｏｎｄｅｄ　（内径０．２５ｍｎｘ　
２５ｍ、キャピラリーカラム）を使用したＧＬＣによっ
て調へた。

条件：昇温１３０〜２６０℃（４℃／分）。試料は２Ｎ
トリフルオロ酢酸でブロックヒーター中１６時間加水分
解した後、減圧下に乾固した。これに、メタノール：無
水酢酸：ビリジン（　５００：　５０：　１０）を添加
し、２５℃で１５分間、アミノ糖をアセチル化した後、
ＴＭＳ化してＧＬＣ分析を行なった。

その結果、本物質の構成糖としてグルコース、ガラクト
ース、ラムノースが認められた。また、アミノ糖として
はＮ−アセチルグルコサミンが認められた。

（１０）構Ｆ＆糖の組成 試料のＧＬＣ分析の結果、該多糖−グリコペプチド複合
体１グラム中の糖含量は第１表に示す。

ミン、アラニンおよびリジンか認められた。

（ｌ２）構成アミノ酸の組成 アミノ酸分析の結果、多糖−グリコペプチド複合体１グ
ラム中に含まれるアミノ酸含量は第２表に示す。

第２表 （ｌ１）構成アミノ酸の種類 該多糖−グリコベプチド複合体の構成アミノ酸の分析は
以下の方法で行なった。

試料を４Ｎ塩酸で沸騰水中６時間分解し、エバポレータ
ーで濃縮乾固した後、蒸留水を添加して再度濃縮乾固す
る。これを３回繰り返した後、所定の濃度になるように
蒸留水を添加して、アミノ酸自動分析装置で分析定量し
た。その結果、本物質の構成ア主ノ酸として、アスパラ
ギン、グルタ（１３）構成ムラ尖ン酸の量 多糖−グリコベブチド複合体１グラム中のムラミン酸含
量をハッジジャ（Ｈａｄｚｉｊａ　）　ノ方で去（＾ｎ
ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，６０．５１２．１９７４）で
測定したところ３７８μｍｏｌであった。

（１４）Ｈ’−ＮＭＲスペク１〜ル（Ｄ２０中、ＴＳＰ
社準） 第４図は多糖−グリコペプチド複合体のＨＮＭＲスペク
トルである。

（１５）酵素による分解性 ５　０ｍＭ酢酸緩衝液に溶解した本物貿について各種Ｑ
ｌ素を作用させた。分解性はソモジーネルソン法による
還元糖の増加で判定した。

［使用酵素および反応条件コ ■α−アミラーゼ（ベーリンガー社）、ｐｌ１５．９　
．　３７℃．５時間 ■β−アミラーゼ（　同　）、 ｐ｝１４．８　．　３０℃，５＠間 ■アミログルコシダーセ（　同　）、 ｐＨｌｌ．８　．　３０℃．５時間 ■α−ガラクトシダーゼ（　同　）、 ｐＨ４．８　．　３０℃．５時間 ■β−ガラクシトダーゼ（　同　）、 ｐ｝１４．８　．　３０℃．５時間 上記条件下では■〜■のすべてにおいて、還元ｍ　＠の
増加は全く認められなかった。

（１６）　Ｌ　Ｄ　５０値 マウス（７週令、体重約２５グラムのＢａｌｂ／ｃ雄）
に対し、蒸留水で溶解した試料を各種投与量で１回経口
没与して、ｌＯ日間硯察し、ＬＤ，。値を求めた。その
結果、２ｇ／ｋｇ体重以上でもマウスは死なず、ＬＤｓ
ｏ値を求めることはてきなかった。

ＩＩ＋　．血圧降下作用 （実施例１．自然発症高血圧ラットにおける血圧降下作
用） （１）　　　方｝去 動物実験では、収縮期血圧（ＳＢＰ）が　ｌ　７　Ｄｍ
ｍ１１ｇ以上を示すｌ７週齢以上の自然発症話血圧ラッ
ト（ＳＨＲ．雅）を用いた。１群５匹のラッ１・に、そ
れぞれ多糖−グリコペプチド複合体１ｍｇ／Ｊ、ｔｏｍ
ｇ／　ｋｇ、および水道水０．５　ｍｌ／　１００ｇ　
（対［１累）をゾンデにて経口没与した。血圧の測定は
、無麻酔のラットを、あらかじめ３８℃にて数分間保温
し、フォトエレクトリックースフィンゴマノメーター（
理研開発社製ＰＳ−１．００）を用いて尾動脈のＳＢＰ
と心拍数（Ｈ　Ｒ）を測定する方法て行なった。測定時
間は試料投与前と投与後３，６１２．　２４時間目とし
た。

効果の判定は、試料投与前を基準にして投与後のＳＢＰ
，ＨＲ値の変化（△平均±Ｓ．Ｄ．）を求め、それを対
照群のものとスチューデント　ｔ−テストにより検定を
行ない、危険率ｎ以上を有意差ありとした。

（２）結果 第５図は多糖一グリコベプチド複合体をＳＨＲラットに
経口投与した結果を示す線図てあり、図に示す通り、多
糖一グリコベプチド複合体、ｌｍｇ／ｋｇ投与群では、
投与後６時間目に対照群の血圧の変化に比べ、有意な血
圧の低下が見られ、１２時間目まで血圧低下傾向が認め
られた。さらに、ｌＯｍｇ／　ｋｇ没与群ては６時間か
ら２４時間目まで持続的に、有意な血圧の低下が認めら
れた。なお、多糖一グリコベブチト複合体を経口投与す
ることによるＨＲへの影響は認められなかった。

（実施例２，腎性高血圧ラットにおける血圧降下作用） （１）方法 ６週齢のウィスターラット（Ｃｒｊ−ｃｄ，体重１６０
〜１９０，ｇ，雄）を用い、ベントバルビタ一ルーＮ　
ａ　（５０ｍｇ／　ｋｇ，　　ｉ　．　ｐ　．　）麻酔
下に左腎動脈を！ｌ　ＩＩし、スリット幅０　．　２　
２ｍｍ、幅１．５　ｍｍ、長さ３ｍｍ、厚さ１　ｍｍの
シルバークリップを装着して、腎動脈狭窄による高血圧
ラット（２Ｋ１クリップラット）を作製した。

術後４週以上経過した後、ＳＢＰが１７０ｍｍｌｌｇ以
上を示すラットを選び、それぞれ多糖−グリコペプチド
複合体、ｌｍｇ／ｋｇ投与群、ｌｏｎｇ／ｋｇ投与群、
および水道水、０　．　５　ｍ　Ｉ　／　ｌ　０　０　
ｇ，投与群（対１！ｑ群）の３群に分けた。

血圧測定は、無麻酔のラットを、あらかしめ３８℃にて
数分間保温し、フォトエレクトリックースフィンゴマノ
メーター（理研開発社性Ｐｓ−１００）を用いて、尾動
脈のＳＢＰと心拍数（ＨＲ）を測定する方法で行なった
。測定時間は試料投与前と投与後３，　　６，　１２．
　２４時間目とした。効果の判定は、試料投与前を基準
にして投与後のＳＢＰ｝｛Ｒ値の変化（△平均±Ｓ．Ｄ
．）を求め、それを対照群のものとスチューデント　七
−テス］・により検定を行ない、危険率５＊以上を有意
差ありとした。

（２）結果 第６図は多糖−グリコペプチド複合体を腎性高血圧ラッ
トに経口投与した結果を示す線図であり、図に示す通り
、う糖一グリコベプチド複合体、ｌｍｇ／ｋｇ投与群で
は、投与後３時間から１２時間目まで有意な血圧の低下
が誌められ、その傾向は２４時間目まで継続した。また
、１０ｍｇ／ｋｇ投与群ても同様な効果が得られた。な
お、多糖−グリコペブチド複合体を経口投与することに
よるＨＲへの影響は記められなかった。

本発明の多糖−グリコペプチド複合体を有効戒分とする
抗高血圧剤の投与方法としては、経口投与、腹腔内投与
、あるいは静脈内投与のいずれを用いても良いが、降圧
効果をより有効に発揮するには経口投与か好ましい。ま
た、投与量としては１回当り１〜５ｍｇ／Ｊで十分であ
り、約２〜３時間後からｌＯ〜３０ｍｍＪの血圧低下が
認められ、その効果は１２時間〜２４時間以上継続する
。また、連日投与すれば、さらに効果的であり、より少
ない投与量で降圧効果を発揮する。

このように本発明の抗高血圧剤は、■ヨーグルト製造に
使用する乳酸菌由来の抗高血圧剤てあること、■今まで
に知られている植物、海藻および微生物の産生ずる多糖
等に比へて、はるかに少ない投与量で血圧降下作用を発
揮する天然物質てあること、■水溶性であるため任意の
剤形への製剤が容易なこと、等の優れた特徴を有すると
ともに、安全性が極めて高く、長期にわたって連用つる
ことができるものである。

＋Ｖ　．飲食品 （１）飲料の製造 市販の１００％オレンジジュースに対し、製造例１で製
造した乳酸菌菌体の水抽出物（ＬＥｘ多糖−グリコペブ
チド複合体を含有する粗精製物質）（６ｇ／ｔｆＬ）及
び精製した多糖−グリコペプチド複合体（ＳＧ−１）（
２００ｍｇ／１氾）を各々添加した飲料を製造した。

（２）食品の製造 市販のビフィズス菌含有発酵乳に対し、製造例１で製造
したＬＥｘ　　（６ｇ／１立）及びＳＧ−１（２００ｍ
ｇ／１℃）を各々添加した食品を製造した。

（３）血圧降下作用 前記（１）及び（２）で製造した飲食品について、ＬＥ
ｘ及びＳＧ−１無添加のオレンジジュース及ひ発酪乳を
コントロールとして高血圧ラットに対する血圧降下作用
を調べた。結果を次の第３表に示す。

第３表より、ＬＥｘ或いはＳＧ−１を通常の飲食品に含
有させることにより、収縮期血圧を有意に低下させる飲
食品を得られることが判った。

（以下、余白）、 第３表 ［発明の効果コ 本発明の多糖−グリコペプチド複合体を有効成分とする
抗高血圧剤の投与方法としては、経口投与、０腔内没与
、あるいは静脈内投与のいずれを用いても良いが、降圧
効果をより有効に発揮するには経口投与が好ましい。ま
た、投与量としては１回当り１〜５ｍｇ／ｋｇで十分で
あり、約２〜３時間後から１０〜３０ｌＴｌｌｌｌｌＨ
ｇの血圧低下が認められ、その効果は１２時間〜２４時
間以上継続する。また、連日没与すれば、さらに効果的
であり、より少ない投与量で降圧効果を発揮する。

このように本発明の抗高血圧剤は、■ヨーグル１・製造
に使用する乳酸菌由来の抗高血圧剤であること、■今ま
でに知られている植物、海藻および微生物の産生ずる多
糖等に比べて、はるかに少ない投与量で血圧降下作用を
発揮する天然物質であること、■水溶性であるため任意
の剤形への製剤が容易なこと、等の優れた特徴を有する
とともに、安全性が極めて高く、長期にわたって連用す
ることができるものである。

また、本発明の多糖一グリコペブチド複合体を有効成分
とする飲食品では、前記抗高血圧剤と同様の効果を得る
ことができるものである。

アクリルＳ−３０ケルろ過クロマイトグラフィーを行な
った結果を示す線図、第２図は多糖−グリコベプヂト複
合体の紫外部吸収スペクトル、第３図は多糖一グリコベ
プチド複合体の赤外部吸収スペクトル、第４図は１！−
グリコベブチト複合体のＨ’−ＮＭＲスペクトル、第５
図は多糖一グリコペブチト複合体をＳＨＲラットに経口
投与した結果を示す線図、第６図は５糖−グリコベブチ
［・複合体を腎性高血圧ラットに経口没与した結果を示
す線図である。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）グラム陽性細菌細胞壁由来の多糖−グリコペプチ
   ド複合体を有効成分とする抗高血圧剤。
2. （２）グラム陽性細菌細胞壁由来の多糖−グリコペプチ
   ド複合体を含有する抗高血圧作用を有する飲食品。