JP6711825B2 - 培養容器輸送用セットおよび細胞・生体組織輸送ユニット - Google Patents

Description

本発明は、細胞や生体組織を培養状態を維持しながら輸送するための技術に関し、特に、研究分野では一般に用いられる培養容器を用いて輸送するための技術に関する。

細胞や生体組織の培養に際しては、例えばシャーレ（受皿）、ウェルプレート、プローブなどの培養容器が広く用いられている。これら培養容器は通気状態で培養を行うことを目的に設計されたものであり、蓋があっても載せるだけで密閉できなかった。培養容器を密閉するには、例えば容器の筒状壁の上縁部に粘着剤付きのフィルムを貼り付けることが一般に行われる。また、容器の筒状壁の上縁部をエラストマーシートで蓋をする手法が提案されている（例えば、特許文献１を参照）。

細胞を培養する際、培養細胞は、培養容器内において必要量の培地で覆われた状態で増殖する。培養細胞を輸送する場合、従来は凍結輸送が主流であった。凍結輸送の場合、培養容器から凍結保存用の専用容器に培養細胞を移し替えて凍結させた上で輸送、その後に解凍し再び必要量の培地を注入した培養容器に移す必要がある。容器を移し替えることによるコンタミネーションや細胞損失のリスクや、凍結・解凍など、細胞を利用できる状態にするために多くの時間と技術を要するという不都合があった。近年では、細胞を凍結させず培養に適した温度を保ちながら輸送することが定温輸送技術の進歩によって可能となっている。培養状態を維持しながら輸送することで届け先においてすぐに実験、研究等に利用できる。

培養容器の輸送に際し、上記した粘着剤付きのフィルムを用いて容器開口を閉塞する場合、培養容器を密閉できたとしても、培地が直接フィルムの粘着面に触れることになる。このため、粘着剤の溶出によるコンタミネーションの心配があった。また、粘着剤付きフィルムを剥がす際の反動で容器の内容物が溢れる虞れがあった。エラストマーシートで蓋をする手法においては、輸送時の液封性能に十分な信頼性がなかった。

特開２００２−１５９２８４号公報

本発明は、このような事情のもとで考え出されたものであって、培養状態を維持して輸送するのに適した培養容器輸送用セットを提供することを主たる課題とする。

上記の課題を解決するため、本発明では、次の技術的手段を採用した。

本発明の第１の側面よって提供される培養容器輸送用セットは、底壁、およびこの底壁から起立する筒状の側壁によって構成される容器部を少なくとも１つ有する培養容器と、上記容器部の上記側壁の上縁部を覆う、可撓性を有するカバーと、上記カバーの上に積載する硬質な押さえ部材と、上記培養容器、上記カバーおよび上記押さえ部材を重ね合わせたアセンブリ状態でこれらを上下から押圧しつつ一体的に保持するホルダと、備えることを特徴としている。

好ましい実施の形態においては、上記カバーは、上記各側壁の上記上縁部に密着し、相対的に厚肉な厚肉部と、上下方向視において上記厚肉部に囲まれ、相対的に薄肉でガス透過性を有する薄肉部と、を有する。

好ましい実施の形態においては、上記厚肉部は、注射針の突き刺し孔を塞ぐ再シール性を有し、上記アセンブリ状態において上記押さえ部材の下面に密着する。

好ましい実施の形態においては、上記カバーは、上記側壁の内側に収まり、上記底壁に向かって突き出る突出部を有する。

好ましい実施の形態においては、上記カバーは、ガス透過性を有するフィルムにより構成される。

好ましい実施の形態においては、上記カバーは、ガス透過性を有さないシート材により構成される。

好ましい実施の形態においては、上記押さえ部材は、上記側壁の内側に収まり、上記底壁に向かって垂れ下がる筒状部を有する。

好ましい実施の形態においては、上記押さえ部材には、上下方向視において上記各側壁の内側に位置し、上下に貫通する貫通孔が形成されている。

好ましい実施の形態においては、上記押さえ部材の上面には、当該押さえ部材の周縁から上記各貫通孔まで通じる溝部が設けられている。

好ましい実施の形態においては、上記ホルダは、平坦な底板と、この底板に平行な天井板と、各々の両端が上記底板および上記側板につながる一対の側板と、により構成された環状をなす。

好ましい実施の形態においては、上記ホルダは、平坦な底板を有する底部材と、この底部材に着脱可能であり、上記底板に平行な天井板を有する蓋部材と、上記底部材および上記蓋部材を締結する締結手段と、を含む。

好ましい実施の形態においては、上記アセンブリ状態において上記培養容器、上記カバー、および上記押さえ部材のいずれかと重なり、形状復元性を有する弾性シート部材をさらに備える。

好ましい実施の形態においては、上記アセンブリ状態において、上記培養容器における上記底壁の側面全体と上記弾性シート部材の側面の一部とを覆う側面覆い部をさらに有する。

本発明の第２の側面よって提供される細胞・生体組織輸送用ユニットは、本発明の第１の側面に係る培養容器輸送用セットと、当該培養容器輸送用セットにおける上記容器部に収容された、細胞あるいは生体組織および培地と、を備えることを特徴としている。

本発明に係る培養容器輸送用セットの第１実施形態を示す斜視図である。 図１に示す培養容器輸送用セットの分解斜視図である。 図１に示す培養容器輸送用セットの平面図である。 図３のＩＶ−ＩＶ線に沿う断面図である。 図３のＶ−Ｖ線に沿う断面図であり、容器部に内容物を収容した状態を示す。 図４の部分拡大図である。 容器部に培地を収容する手順を説明するための断面図である。 容器部に培地を収容する手順を説明するための断面図である。 図１に示す培養容器輸送用セットの変化例を示す斜視図である。 図９のＸ−Ｘ線に沿う断面図である。 図１に示す培養容器輸送用セットの他の変化例を示す斜視図である。 ホルダを示す斜視図である。 図１２に示すホルダの正面図である。 本発明に係る培養容器輸送用セットの第２実施形態を示す斜視図である。 図１４に示す培養容器輸送用セットの分解斜視図である。 図１４に示す培養容器輸送用セットの平面図である。 図１６のＸＶＩＩ−ＸＶＩＩ線に沿う断面図である。 図１６のＸＶＩＩＩ−ＸＶＩＩＩ線に沿う断面図であり、容器部に内容物を収容した状態を示す。 本発明に係る培養容器輸送用セットの第３実施形態を示す斜視図である。 図１９に示す培養容器輸送用セットの分解斜視図である。 図１９に示す培養容器輸送用セットの平面図である。 図２１のＸＸＩＩ−ＸＸＩＩ線に沿う断面図である。 図１９に示す培養容器輸送用セットの変化例を示す分解斜視図である。 図２３に示す培養容器輸送用セットの図２２と同様の断面図である。 図１９に示す培養容器輸送用セットにおけるカバーの変形例を示す斜視図である。 図２５のＸＸＶＩ−ＸＸＶＩ線に沿う断面図である。 容器部に培地を収容する手順を説明するための断面図である。 カバーおよび押さえ部材の他の構成例を示す断面図である。

以下、本発明の好ましい実施の形態を図面を参照しつつ具体的に説明する。

図１〜図５は、本発明に係る培養容器輸送用セットの第１実施形態を示している。本実施形態の培養容器輸送用セットＡ１は、培養容器１と、カバー２と、押さえ部材３と、蓋４と、ホルダ５とを備えている。詳細は後述するが、図１、図３〜図５は、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、蓋４を重ね合わせたアセンブリ状態を示す。図２は、培養容器輸送用セットＡ１の構成部材を分解した状態の斜視図である。

本実施形態において、培養容器１は、シャーレ（受皿）に相当するものであり、底壁１１と、この底壁１１の周縁から起立する円筒状の側壁１２によって構成された１つの容器部１３を有する。この容器部１３（培養容器１）は、培養細胞や培地を収容するためのものである。培養容器１は、例えば透明プラスチック材料により形成されている。透明プラスチック材料としては、例えば医療用プラスチックとして一般的なポリスチレンやメチルペンテンのほか、シクロオレフィンポリマー、シクロオレフィンコポリマーなどの、好適には透明性を有する材料が用いられるが、これらに限定されない。なお、容器部１３において接着性細胞を培養する場合を考慮して、細胞を付着させる培養面（底壁１１の上面）に例えばコロナ放電やプラズマ放電による親水化処理を施してあってもよい。

カバー２は、容器部１３の上から被せて当該容器部１３の開口を塞ぐものである。カバー２は、可撓性、弾力性を有する素材によって構成されている。また、カバー２は、好ましくは自己粘着性を有する。カバー２を構成する素材としては、例えば、シリコーンゴム、天然ゴム、ウレタンゴム、エラストマー樹脂などが挙げられ、シリコーンゴムが好ましい。カバー２と培養容器１の内容物（培養細胞や培地）との接触を考慮すると、カバー２の素材としては、細胞毒性が無く、かつ生体適合性を有する医療用シリコーンゴムがより好ましい。また、カバー２の硬さについては、例えばゴム硬度が２０度〜４０度程度であるのが好ましい。

カバー２は、例えばゴム成形品であり、図２、図４、図５に示すように、平板状の環状部２１と、環状部２１の外周縁から垂れ下がる外側円筒部２２と、環状部２１の内周縁から垂れ下がる内側円筒部２３と、内側円筒部２３の下端を塞ぐ底部２４とを有する。

環状部２１は、側壁１２の上縁部１２１に密着しており、側壁１２の径方向外側から径方向内側に跨るように配される。環状部２１は、適度な厚さを有し、上下方向の荷重に対して適度な弾性復元力を有する。環状部２１の厚さは、例えば１〜３ｍｍ程度である。環状部２１は、本発明で言う厚肉部に相当する。環状部２１が適度な厚さを有し、また弾性復元力を有することにより、環状部２１は、注射針の突き刺し孔を塞ぐ再シール性を有する。

図４、図５に示すように、内側円筒部２３および底部２４は、容器部１３における側壁１２の内側に収まっており、上下方向において容器部１３の底壁１１に向かって突き出ている。これら内側円筒部２３および底部２４は、本発明で言う突出部に相当する。

図４、図５に示すように、本実施形態において、底部２４の中央には薄肉部２４１が設けられている。図６によく表れているように、薄肉部２４１は、他の部位に比べて厚さが薄くされた部分であり、フィルム状である。薄肉部２４１の厚さは、例えば０．２〜０．３ｍｍ程度である。この薄肉部２４１は、ガス透過性を有する。薄肉部２４１は、上下方向視において環状部２１に囲まれている。

図４、図５に示すように、押さえ部材３は、カバー２の上に積載されており、例えばポリ塩化ビニル、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリスチレンなどの硬質な合成樹脂材料からなる。本実施形態において、押さえ部材３は、外径寸法が大きい大径部３１の上に外径寸法が小さい小径部３２が接合された形態を有する。押さえ部材３の径方向中央には、厚さ方向（上下方向）に貫通孔する貫通孔３３が形成されている。この貫通孔３３は、上下方向視において側壁１２の内側に位置し、カバー２の薄肉部２４１に通じている。

図４、図５によく表れているように、押さえ部材３（大径部３１）の下面３１１は平面とされている。アセンブリ状態において、カバー２の環状部２１は押さえ部材３の下面３１１に密着している。

図２、図４、図５に示すように、押さえ部材３の上面には、溝部３４が設けられている。本実施形態においては、小径部３２は周方向において所定に間隔を隔てて配された３つの個片によって構成されており、これら個片の隣接相互の隙間が溝部３４に相当する。かかる構成により、溝部３４は、押さえ部材３の周縁から貫通孔３３まで通じている。

なお、押さえ部材３は、本実施形態のような大径部３１と小径部３２を接合した構成に代えて、例えば樹脂成形により一体形成してもよい。

蓋４は、押さえ部材３の上に積載されている。蓋４は、円板部４１と、この円板部４１の周縁から下方に延びるスカート部４２とを有する。蓋４は、例えば樹脂成形により一体形成される。培養容器１がシャーレの場合、蓋４については当該シャーレにセットされている蓋をそのまま使用することができる。

ホルダ５は、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４を重ね合わせた状態（アセンブリ状態）でこれらを保持するものである。図２、図４に示すように、ホルダ５は、平坦な底板５１と、この底板５１に平行な天井板５２と、一対の側板５３を有し、これら板材により環状をなしている。一対の側板５３は、各々の両端が底板５１および天井板５２につながっている。

底板５１の上面から天井板５２の下面までの距離は、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４を自然に積み重ねたときのこれらの高さ寸法よりも僅かに小さくされている。これら培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４をまとめて上下から押圧しつつ挟み持つと、主に環状部２１が圧縮されて上記高さ寸法が小さくなり、これらをホルダの底板５１および天井板５２の間に差し込むことができる。そして、手を離すと環状部２１の弾性復元力により上記高さ寸法が増大しようとするが、底板５１および天井板５２によって上記高さ寸法が増大する方向への動きが規制される。このとき、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４は、互いが積層されたアセンブリ状態で底板５１および天井板５２によって上下から押圧されており、ホルダ５によって一体的に保持される。

次に、培養容器輸送用セットＡ１の使用方法および作用について説明する。

培養容器輸送用セットＡ１は、培養細胞あるいは生体組織や培地を培養容器１（容器部１３）に収容し、培養状態を維持しながら輸送（培養状態維持輸送）するのに使用される。容器部１３に収容される培養細胞、生体組織や培地については、特に限定されるものではない。

培養細胞として例えばｉＰＳ細胞などの接着性細胞が用いられる場合、当該接着性細胞は、必要量の培地で覆われた培養面（底壁１１の上面）に付着した状態で増殖する。接着性細胞を培養状態維持輸送する際、培地が波打つことによって底壁１１に付着した細胞が剥がれるのを防止するため、容器部１３内全体に培地を満たして培地の動きを抑える必要がある。

容器部１３に培地を収容する手順の一例について図７、図８を参照して説明する。まず、図７に示すように、容器部１３に適当量の培地Ｍ１を入れ、カバー２を被せる。ここで、培地は、カバー２の突出部（内側円筒部２３および底部２４）によって押し退けられ、培地Ｍ１の液面は側壁１２の上端より少し下方に位置する。そして、容器部１３においてカバー２に覆われた収容空間には、僅かな空隙部が残る。次に、図８に示すように、注射器Ｓ１を用いて上記収容空間に培地Ｍ１を注入する。培地Ｍ１の注入は、環状部２１に注射針Ｎ１を突き刺して行う。

その後、押さえ部材３、蓋４を被せ、アセンブリ状態の培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４を、ホルダ５によって保持させる。これにより、培養状態維持輸送の際、図５に示すように容器部１３が培地Ｍ１で満たされる。内側円筒部２３および底部２４は、側壁１２の内側において底壁１１に向かって突き出ている。このような構成によれば、容器部１３における培地等の収容空間が減じられている。したがって、培養状態維持輸送に際し、培地Ｍ１の使用量の削減を図ることができる。

培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４は、アセンブリ状態でホルダ５により上下から押圧保持されている。これにより、容器部１３に収容された内容物（培養細胞や培地）は、カバー２によって液封されている。したがって、培養状態維持輸送の際、振動等によって内容物が溢れることはない。

また、上記したように、カバー２の環状部２１は、注射針Ｎ１の突き刺し孔を塞ぐ再シール性を有する。また、アセンブリ状態において、環状部２１は押さえ部材３（大径部３１）の下面３１１に密着している。これにより、培養容器輸送用セットＡ１の輸送時において、上記突き刺し孔から内容物（培地等）が漏洩することはない。

カバーの環状部２１は側壁１２の上縁部１２１に密着している。また、カバー２は、ガス透過性を有する薄肉部２４１を有する。上記薄肉部２４１は、上下方向視において環状部２１に囲まれている。このため、容器部１３の内容物について、当該容器部１３の外部との通気状態が維持される。したがって、本実施形態によれば、輸送時において、容器部１３の内容物について通気状態での培養を行うことができる。

押さえ部材３には、上下方向視において側壁１２の内側に位置する貫通孔３３が設けられている。このような構成によれば、カバー２の上に積載する押さえ部材３によって薄肉部２４１が塞がれることはなく、容器部１３について外部との通気状態を確保するのに適する。

押さえ部材３の上面には、当該押さえ部材３の周縁から貫通孔３３まで通じる溝部３４が設けられている。このような構成によれば、貫通孔３３が蓋４やホルダ５によって塞がれることはなく、容器部１３について外部との通気状態を確保するのに適する。

ホルダ５は、平坦な底板５１と、この底板５１に平行な天井板５２と、各々の両端が底板５１および天井板５２につながる一対の側板５３と、により構成された環状をなす。このような構成によれば、底板５１と天井板５２との間の距離を設定値に固定することができる。したがって、アセンブリ状態の培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４にホルダ５を装着することで、これら培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４が当該ホルダ５によって一定の押圧力で保持されることとなり、ホルダ５による押圧状態が安定する。

培養容器輸送用セットＡ１を輸送した後、ホルダ５からアセンブリ状態の培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４を抜き出すと、これら培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４を容易に分解することができる。即ち、アセンブリ状態の培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４は互いに重なり合っているだけであるので、上から順に蓋４、押さえ部材３、カバー２をスムーズに外すことが可能である。したがって、培養容器１からカバー２を外す際、培養容器１（容器部１３）の内容物が溢れるといった不都合は防止される。

図９、図１０は、上記した培養容器輸送用セットＡ１の変形例を示している。同図に示した培養容器輸送用セットＡ１’は、ホルダの構成のみが上記した培養容器輸送用セットＡ１と異なっている。

培養容器輸送用セットＡ１’において、ホルダ５’は、底部材５Ａと、この底部材５Ａに着脱可能な蓋部材５Ｂとを備える。底部材５Ａは、平坦な底板５１と、この底板５１の両端から起立する一対の側板５３と、各側板の上端から水平に延びる一対のフランジ５４とを有する。蓋部材５Ｂは、底板５１に平行な天井板５２を有する。図１０によく表れているように、フランジ５４には複数のネジ孔５４１が形成されており、各ネジ孔５４１には締付ボルト５５が螺合される。天井板５２と一対のフランジ５４とは、複数の締付ボルト５５により締結される。例えば締付ボルト５５の頭部には溝やローレットが形成されており、当該頭部を手で摘んで回すことが可能とされている。同図から理解されるように、これら締付ボルト５５によって、底板５１と天井板５２との離間寸法を調整可能である。複数の締付ボルト５５は、本発明で言う締結手段を担う。

図９、図１０に示した培養容器輸送用セットＡ１’においては、上述の培養容器輸送用セットＡ１と同様の効果を奏することができる。また、ホルダ５'において、底板５１と天井板５２との離間寸法を調整可能である。したがって、アッセンブリ状態の培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４に対してのホルダ５’による押圧状態を、所望に調整することができる。

図１１は、上記した培養容器輸送用セットＡ１の他の変形例を示している。同図に示した培養容器輸送用セットＡ１”は、ホルダの構成のみが上記した培養容器輸送用セットＡ１と異なっている。

培養容器輸送用セットＡ１”において、ホルダ５”は、底部材５Ａと、この底部材５Ａに着脱可能な蓋部材５Ｂとを備える。底部材５Ａは、平坦な底板５１と、この底板５１の両端から起立する一対の側板５３と、各側板の上端から水平に延びる一対のフランジ５４とを有する。蓋部材５Ｂは、底板５１に平行な天井板５２と、天井板５２の両端部に設けられた一対のヒンジ部５６とを有する。底部材５Ａおよび蓋部材５Ｂの間には、弾性体が介在している。図１１、図１２に示すように、本変形例では、天井板５２の下面に形成された溝に弾性体としてのゴムパッキン５７が装着されている。図１１、図１２に示すように、ヒンジ部５６は、所定の回動軸Ｏ１回りに回動可能である。図１２によく表れているように、ヒンジ部５６をフランジに係止させた状態において、ゴムパッキン５７の弾性復元力によって蓋部材５Ｂ（天井板）が上方に付勢される。このとき、底板５１の上面と天井板５２の下面との間の距離は、一定値となる。このように、図１１〜図１３に示す構成によれば、ヒンジ部５６を用いて底部材５Ａおよび蓋部材５Ｂを締結可能であり、締結時には底板５１と天井板５２との離間寸法が固定される。一対のヒンジ部５６は、本発明で言う締結手段を担う。

図１１に示した、培養容器輸送用セットＡ１”においては、上述の培養容器輸送用セットＡ１と同様の効果を奏することができる。また、ホルダ５"においては、底部材５Ａおよび蓋部材５Ｂを互いに分離可能としつつ、ホルダ５"の装着時には、アセンブリ状態の培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４が当該ホルダ５”によって一定の押圧力で保持される。したがって、同図に示す本変形例の構成によれば、ホルダ５"による押圧保持力を比較的に大きく設定する場合においても、ホルダ５"の装着ないし取り外しを容易に行うことができる。

図１４〜図１８は、本発明に係る培養容器輸送用セットの第２実施形態を示している。なお、図１４以降の図においては、上記実施形態と同一または類似の要素には、上記実施形態と同一の符号を付しており、適宜説明を省略する。

図１４、図１５に示した培養容器輸送用セットＡ２は、培養容器１と、カバー２と、押さえ部材３と、蓋４と、ホルダ５とを備えている。図１４、図１６〜図１８は、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、蓋４を重ね合わせたアセンブリ状態を示す。図１５は、培養容器輸送用セットＡ２の構成部材を分解した状態の斜視図である。本実施形態において、培養容器１は、いわゆるウェルプレートに相当するものであり、複数（本実施形態では６つ）の容器部１３としてのウェルを有する。複数の容器部１３は、各々、共通の長矩形状の底壁１１と、この底壁１１の適所から起立する円筒状の側壁１２によって構成されている。

カバー２は、例えばゴム成形品であり、図１５、図１７、図１８に示すように、概略長矩形状の平板部２１’と、平板部２１’の外周縁から垂れ下がる外側筒部２２’と、複数ずつの内側円筒部２３および底部２４とを有する。

平板部２１’は、側壁１２の上縁部１２１に密着しており、側壁１２の径方向外側から径方向内側に跨るように配される。平板部２１’は、適度な厚さを有し、上下方向の荷重に対して適度な弾性復元力を有する。平板部２１’の厚さは、例えば１〜３ｍｍ程度である。平板部２１’は、本発明でいう厚肉部に相当する。平板部２１’が適度な厚さを有し、また弾性復元力を有することにより、平板部２１’は、注射針の突き刺し孔を塞ぐ再シール性を有する。

図１７、図１８に示すように、内側円筒部２３および底部２４は、各容器部１３における側壁１２の内側に収まっており、上下方向において容器部１３の底壁１１に向かって突き出ている。これら内側円筒部２３および底部２４は、本発明でいう突出部に相当する。

図１７、図１８に示すように、本実施形態において、底部２４の中央には薄肉部２４１が設けられている。薄肉部２４１は、フィルム状であり、ガス透過性を有する。各薄肉部２４１は、上下方向視において平板部２１’に囲まれている。

図１７、図１８に示すように、押さえ部材３は、カバー２の上に積載されている。本実施形態において、押さえ部材３は、外形サイズが大小異なる２つの板材が接合された形態を有する。押さえ部材３の適所には、厚さ方向（上下方向）に貫通孔する複数の貫通孔３３が形成されている。これら貫通孔３３は、各々、上下方向視において側壁１２の内側に位置し、カバー２の薄肉部２４１に通じている。

図１７、図１８によく表れているように、押さえ部材３の下面３０１は平面とされている。アセンブリ状態において、カバー２の平板部２１’は押さえ部材３の下面３０１に密着している。

図１５、図１７、図１８に示すように、押さえ部材３の上面の適所には、溝部３４が設けられている。本実施形態においては、溝部３４は、隣接する貫通孔３３に相互に通じるように設けられ、押さえ部材３の周縁から各貫通孔３３に通じている。なお、押さえ部材３は、本実施形態のような２つの板材を接合した構成に代えて、例えば樹脂成形により一体形成してもよい。

蓋４は、押さえ部材３の上に積載されている。蓋４は、長矩形状の平板部４１’と、この平板部４１’の周縁から下方に延びるスカート部４２とを有する。蓋４は、例えば樹脂成形により一体形成される。培養容器１がウェルプレートの場合、蓋４については当該ウェルプレートにセットされている蓋をそのまま使用することができる。

ホルダ５は、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４を重ね合わせた状態（アセンブリ状態）でこれらを保持するものである。図１５に示すように、ホルダ５は、平坦な底板５１と、この底板５１に平行な天井板５２と、一対の側板５３を有し、これら板材により環状をなしている。一対の側板５３は、各々の両端が底板５１および天井板５２につながっている。本実施形態の培養容器輸送用セットＡ２は、２つのホルダ５を具備している。

底板５１の上面から天井板５２の下面までの距離は、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４を自然に積み重ねたときのこれらの高さ寸法よりも僅かに小さくされている。これら培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４をまとめて上下から押圧しつつ挟み持つと、主に平板部２１’が圧縮されて上記高さ寸法が小さくなり、これらをホルダの底板５１および天井板５２の間に差し込むことができる。そして、手を離すと平板部２１’の弾性復元力により上記高さ寸法が増大しようとするが、底板５１および天井板５２によって上記高さ寸法が増大する方向への動きが規制される。このとき、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４は、互いが積層されたアセンブリ状態で底板５１および天井板５２によって上下から押圧されており、ホルダ５によって一体的に保持される。

次に、培養容器輸送用セットＡ２の使用方法および作用について説明する。

培養容器輸送用セットＡ２は、培養細胞あるいは生体組織や培地を培養容器１（容器部１３）に収容し、培養状態を維持しながら輸送（培養状態維持輸送）するのに使用される。容器部１３に収容される培養細胞、生体組織や培地については、特に限定されるものではない。

培養細胞として例えばｉＰＳ細胞などの接着性細胞が用いられる場合、当該接着性細胞は、必要量の培地で覆われた培養面（底壁１１の上面）に付着した状態で増殖する。接着性細胞を培養状態維持輸送する際、培地が波打つことによって底壁１１に付着した細胞が剥がれるのを防止するため、容器部１３内全体に培地を満たして培地の動きを抑える必要がある。

容器部１３に培地を収容する手順は、上記実施形態の培養容器輸送用セットＡ１に関して図７、図８を参照して説明したのと同様の方法で行うことができる。即ち、適当量の培地を入れた各容器部１３にカバー２を被せた後、各容器部１３においてカバー２に覆われた収容空間に注射器を用いて培地を注入する。培地の注入は、平板部２１’に注射針を突き刺して行う。

次いで、押さえ部材３、蓋４を被せ、アセンブリ状態の培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４を、ホルダ５によって保持させる。これにより、培養状態維持輸送の際、図１８に示すように各容器部１３が培地で満たされる。内側円筒部２３および底部２４は、側壁１２の内側において底壁１１に向かって突き出ている。このような構成によれば、容器部１３における培地等の収容空間が減じられている。したがって、培養状態維持輸送に際し、培地Ｍ１の使用量の削減を図ることができる。

培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４は、アセンブリ状態でホルダ５により上下から押圧保持されている。これにより、容器部１３に収容された内容物（培養細胞や培地）は、カバー２によって液封されている。したがって、培養状態維持輸送の際、振動等によって内容物が溢れることはない。

また、上記したように、カバー２の平板部２１’は、注射針の突き刺し孔を塞ぐ再シール性を有する。また、アセンブリ状態において、平板部２１’は押さえ部材３の下面３０１に密着している。これにより、培養容器輸送用セットＡ２の輸送時において、上記突き刺し孔から内容物（培地等）が漏洩することはない。

カバー２の平板部２１’は側壁１２の上縁部１２１に密着している。また、カバー２は、ガス透過性を有する薄肉部２４１を有する。上記薄肉部２４１は、上下方向視において平板部２１’に囲まれている。このため、各容器部１３の内容物について、当該容器部１３の外部との通気状態が維持される。したがって、本実施形態によれば、輸送時において、各容器部１３の内容物について通気状態での培養を行うことができる。

押さえ部材３には、上下方向視において各側壁１２の内側に位置する貫通孔３３が設けられている。このような構成によれば、カバー２の上に積載する押さえ部材３によって薄肉部２４１が塞がれることはなく、容器部１３について外部との通気状態を確保するのに適する。

押さえ部材３の上面には、当該押さえ部材３の周縁から各貫通孔３３まで通じる溝部３４が設けられている。このような構成によれば、各貫通孔３３が蓋４やホルダ５によって塞がれることはなく、容器部１３について外部との通気状態を確保するのに適する。

ホルダ５は、平坦な底板５１と、この底板５１に平行な天井板５２と、各々の両端が底板５１および天井板５２につながる一対の側板５３と、により構成された環状をなす。このような構成によれば、底板５１と天井板５２との間の距離を設定値に固定することができる。したがって、アセンブリ状態の培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４にホルダ５を装着することで、これら培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４が当該ホルダ５によって一定の押圧力で保持されることとなり、ホルダ５による押圧状態が安定する。

培養容器輸送用セットＡ２を輸送した後、ホルダ５からアセンブリ状態の培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４を抜き出すと、これら培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４を容易に分解することができる。即ち、アセンブリ状態の培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４は互いに重なり合っているだけであるので、上から順に蓋４、押さえ部材３、カバー２をスムーズに外すことが可能である。したがって、培養容器１からカバー２を外す際、培養容器１（容器部１３）の内容物が溢れるといった不都合は防止される。

図１９〜図２２は、本発明に係る培養容器輸送用セットの第３実施形態を示している。図１９、図２０に示した培養容器輸送用セットＡ３は、培養容器１と、カバー２と、押さえ部材３と、蓋４と、シート部材６と、ホルダ５とを備えている。図１９、図２１、図２２は、シート部材６、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、蓋４を重ね合わせたアセンブリ状態を示す。図２０は、培養容器輸送用セットＡ３の構成部材を分解した状態の斜視図である。

本実施形態において、培養容器１は、いわゆるプローブと呼ばれるものであり、矩形薄板状の底壁１１と、この底壁の中央において起立する円筒状の側壁１２によって構成された１つの容器部１３を有する。底壁１１および側壁１２は、例えばガラスなどの非導電性材料からなる、詳細な図示説明は省略するが、底壁１１の適所には、測定用の電極や接続用の端子等が設けられている。

カバー２は、一定厚さの可撓性を有する素材によって構成されている。また、カバー２は、好ましくは自己粘着性を有する。カバー２を構成する素材としては、例えば、シリコーンゴム、天然ゴム、ウレタンゴム、エラストマー樹脂などが挙げられ、シリコーンゴムが好ましい。カバー２と培養容器１の内容物（培養細胞や培地）との接触を考慮すると、カバー２の素材としては、細胞毒性が無く、かつ生体適合性を有する医療用シリコーンゴムがより好ましい。また、カバー２の硬さについては、例えばゴム硬度が２０度〜４０度程度であるのが好ましい。カバー２は、例えばフィルム状であり、ガス透過性を有する。カバー２の厚さは、例えば０．２〜０．３ｍｍ程度である。

図２２に示すように、押さえ部材３は、カバー２の上に積載されている。本実施形態において、押さえ部材３は、概略円板状とされている。押さえ部材３の適所には、厚さ方向（上下方向）に貫通孔する貫通孔３３が形成されている。この貫通孔３３は、上下方向視において側壁１２の内側に位置し、カバー２に通じている。押さえ部材３の下面３０１は平面とされている。アセンブリ状態において、カバー２の下面は、側壁の上縁部１２１に密着している。

図２０、図２２に示すように、押さえ部材３の上面の適所には、溝部３４が設けられている。本実施形態においては、溝部３４は、押さえ部材３の径方向に沿って複数設けられており、各々、押さえ部材３の周縁から貫通孔３３に通じている。

蓋４は、押さえ部材３の上に積載されている。蓋４は、矩形状の平板部４１"と、この平板部４１”の周縁から下方に延びるスカート部４２”とを有する。蓋４は、例えば樹脂成形により一体形成される。また、図２２によく表れているように、アセンブリ状態において、スカート部４２”は、培養容器１における底壁１１の側面全体とシート部材６の側面の一部とを覆っている。スカート部４２"は、本発明で言う側面覆い部に相当する。

図２２によく表れているように、本実施形態では、アセンブリ状態においてシート部材６は最も下位にあり、このシート部材６の上に培養容器１が積載されている。シート部材６は、一定厚さの弾力性を有する素材によって構成されている。シート部材６を構成する素材としては、例えば、発泡ポリエチレン、発泡ウレタン、発泡シリコーンなどの発泡系材料が挙げられる。シート部材６は、適度な厚さを有し、上下方向の荷重に対して形状復元性を有する。シート部材６の厚さは、例えば５〜２０ｍｍ程度である。

ホルダ５は、シート部材６、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４を重ね合わせた状態（アセンブリ状態）でこれらを保持するものである。図２０に示すように、ホルダ５は、平坦な底板５１と、この底板５１に平行な天井板５２と、一対の側板５３を有し、これら板材により環状をなしている。一対の側板５３は、各々の両端が底板５１および天井板５２につながっている。

底板５１の上面から天井板５２の下面までの距離は、シート部材６、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４を自然に積み重ねたときのこれらの高さ寸法よりも僅かに小さくされている。これらシート部材６、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４をまとめて上下から押圧しつつ挟み持つと、主にシート部材６が圧縮されて上記高さ寸法が小さくなり、これらをホルダの底板５１および天井板５２の間に差し込むことができる。そして、手を離すとシート部材６の弾性復元力により上記高さ寸法が増大しようとするが、底板５１および天井板５２によって上記高さ寸法が増大する方向への動きが規制される。このとき、シート部材６、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４は、互いが積層されたアセンブリ状態で底板５１および天井板５２によって上下から押圧されており、ホルダ５によって一体的に保持される。

次に、培養容器輸送用セットＡ３の作用について説明する。

培養容器輸送用セットＡ３は、培養細胞あるいは生体組織や培地を培養容器１（容器部１３）に収容し、培養状態を維持しながら輸送（培養状態維持輸送）するのに使用される。容器部１３に収容される培養細胞、生体組織や培地については、特に限定されるものではない。

シート部材６、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４は、アセンブリ状態でホルダ５により上下から押圧保持されている。これにより、容器部１３に収容された内容物（培養細胞や培地）は、カバー２によって液封されている。したがって、培養状態維持輸送の際、振動等によって内容物が溢れることはない。

カバー２は側壁１２の上縁部１２１に密着している。また、カバー２は、ガス透過性を有する。このため、容器部１３の内容物について、当該容器部１３の外部との通気状態が維持される。したがって、本実施形態によれば、輸送時において、容器部１３の内容物について通気状態での培養を行うことができる。

押さえ部材３には、上下方向視において側壁１２の内側に位置する貫通孔３３が設けられている。このような構成によれば、カバー２の上に積載する押さえ部材３によってカバー２の通気部が塞がれることはなく、容器部１３について外部との通気状態を確保するのに適する。

押さえ部材３の上面には、当該押さえ部材３の周縁から貫通孔３３まで通じる溝部３４が設けられている。このような構成によれば、貫通孔３３が蓋４やホルダ５によって塞がれることはなく、容器部１３について外部との通気状態を確保するのに適する。

ホルダ５は、平坦な底板５１と、この底板５１に平行な天井板５２と、各々の両端が底板５１および天井板５２につながる一対の側板５３と、により構成された環状をなす。このような構成によれば、底板５１と天井板５２との間の距離を設定値に固定することができる。したがって、アセンブリ状態のシート部材６、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４にホルダ５を装着することで、これらシート部材６、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４が当該ホルダ５によって一定の押圧力で保持されることとなり、ホルダ５による押圧状態が安定する。

また、シート部材６、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４がアセンブリ状態にあるとき、蓋４のスカート部４２”は、培養容器１における底壁１１の側面全体とシート部材６の側面の一部とを覆っている。このような構成によれば、アセンブリ状態における取り扱いは、シート部材６、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４が積層した状態で蓋４（スカート部４２”）およびシート部材６の側面を掴むことにより行うことができる。したがって、ガラス製である、培養容器１の底壁１１を直接手で触れることなく取り扱い可能であり、安全面においても好ましい。

培養容器輸送用セットＡ３を輸送した後、ホルダ５からアセンブリ状態のシート部材６、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４を抜き出すと、これらシート部材６、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４を容易に分解することができる。即ち、アセンブリ状態のシート部材６、培養容器１、カバー２、押さえ部材３、および蓋４は互いに重なり合っているだけであるので、上から順に蓋４、押さえ部材３、カバー２をスムーズに外すことが可能である。したがって、培養容器１からカバー２を外す際、培養容器１（容器部１３）の内容物が溢れるといった不都合は防止される。

図２３、図２４は、上記した培養容器輸送用セットＡ３の変形例を示している。同図に示した培養容器輸送用セットＡ３’は、上記した培養容器輸送用セットＡ３における押さえ部材３および蓋４に代えて、これらが一体となった構成の押さえ部材３’を具備している。かかる点のみが上記した培養容器輸送用セットＡ３と異なっている。

培養容器輸送用セットＡ３’において、押さえ部材３’は、矩形状の平板部３５と、この平板部３５の周縁から下方に延びるスカート部３６とを有する。押さえ部材３'は、例えば樹脂成形により一体形成される。また、図２４によく表れているように、アセンブリ状態において、スカート部３６は、培養容器１における底壁１１の側面全体とシート部材６の側面の一部とを覆っている。スカート部３６は、本発明で言う側面覆い部に相当する。

図２３、図２４に示した培養容器輸送用セットＡ３’においては、上述の培養容器輸送用セットＡ３と同様の効果を奏することができる。また、アセンブリ状態における取り扱いは、シート部材６、培養容器１、カバー２、および押さえ部材３’が積層した状態でスカート部３６およびシート部材６の側面を掴むことにより行うことができる。したがって、ガラス製である、培養容器１の底壁１１を直接手で触れることなく取り扱い可能であり、安全面においても好ましい。

図２５、図２６は、上記した培養容器輸送用セットＡ３において、カバーの変形例を示している。同図に示したカバー２'は、上記した培養容器輸送用セットＡ３におけるフィルム状のカバー２に代えて、例えばゴム成形品として構成されたものである。

カバー２'は、平板状の環状部２１と、環状部２１の外周縁から垂れ下がる外側円筒部２２と、環状部２１の内周縁から垂れ下がる内側円筒部２３と、内側円筒部２３の下端を塞ぐ薄肉底部２５とを有する。環状部２１は、側壁１２の上縁部１２１に密着しており、側壁１２の径方向外側から径方向内側に跨るように配される。環状部２１は、適度な厚さを有し、上下方向の荷重に対して適度な弾性復元力を有する。環状部２１の厚さは、例えば１〜３ｍｍ程度である。環状部２１は、本発明で言う厚肉部に相当する。環状部２１が適度な厚さを有し、また弾性復元力を有することにより、環状部２１は、注射針の突き刺し孔を塞ぐ再シール性を有する。

図２５、図２６に示したカバー２'において、内側円筒部２３および薄肉底部２５は、容器部１３における側壁１２の内側に収まっており、上下方向において容器部１３の底壁１１に向かって突き出ている。これら内側円筒部２３および薄肉底部２５は、本発明で言う突出部に相当する。また、カバー２’においては、環状部２１の一部が径方向内方に張り出しており、張出し部２１１とされている。

図２６によく表れているように、薄肉底部２５は、他の部位に比べて厚さが薄くされた部分であり、フィルム状である。薄肉底部２５の厚さは、例えば０．２〜０．３ｍｍ程度である。この薄肉底部２５は、ガス透過性を有する。薄肉底部２５は、上下方向視において環状部２１に囲まれている。

培養細胞として例えばｉＰＳ細胞などの接着性細胞が用いられる場合、当該接着性細胞は、必要量の培地で覆われた培養面（底壁１１の上面）に付着した状態で増殖する。接着性細胞を培養状態維持輸送する際、培地が波打つことによって底壁１１に付着した細胞が剥がれるのを防止するため、容器部１３内全体に培地を満たして培地の動きを抑える必要がある。

容器部１３に培地を収容する手順は、上記実施形態の培養容器輸送用セットＡ１に関して図７、図８を参照して説明したのと同様の方法で行うことができる。即ち、適当量の培地を入れた容器部１３にカバー２を被せた後、図２７に示すように、容器部１３においてカバー２に覆われた収容空間に注射器Ｓ１を用いて培地Ｍ１を注入する。培地Ｍ１の注入は、張出し部２１１に注射針Ｎ１を突き刺して行う。これにより、培養状態維持輸送の際、容器部１３が培地Ｍ１で満たされる。内側円筒部２３および薄肉底部２５は、側壁１２の内側において底壁１１に向かって突き出ている。このような構成によれば、容器部１３における培地等の収容空間が減じられている。したがって、カバー２'を具備する構成によれば、培養状態維持輸送に際し、培地Ｍ１の使用量の削減を図ることができる。

以上、本発明の実施形態を説明したが、本発明の範囲は上記した実施形態に限定されるものではなく、各請求項に記載した事項の範囲内でのあらゆる変更は、すべて本発明の範囲に包摂される。

上記実施形態においては、カバーがゴムやエラストマー樹脂により構成される場合について説明したが、これに限定されない。カバー２は、例えば樹脂フィルムにより構成してもよい。当該樹脂フィルムは、例えば、不定形でガス透過性を有し、オレフィン配合ポリメチルペンテンやポリ塩化ビニリデンにより構成することができる。カバーを不定形な樹脂フィルムにより構成する場合、図２８に示すように、押さえ部材３は、筒状部３７を有する構成としてもよい。筒状部３７は、側壁１２の内側に収まり、底壁１１に向かって垂れ下がっている。このような構成によれば、カバー２の上に押さえ部材３を積載すると、カバー２は筒状部３７によって底壁１１側に突き出た状態となる。したがって、容器部１３における培地等の収容空間が減じられ、培養状態維持輸送に際して培地の使用量の削減を図ることができる。

また、カバーは、比較的に厚さが大きい一定厚さのシート材によって構成してもよい。当該シート材はガス透過性を有さないが、比較的に短時間の輸送の場合、ホルダによる押圧状態の付与と培養容器１の液封とを安価なシート材によって担うことが可能である。しがって、コスト削減および構造の簡素化を図ることができる。

なお、本発明の培養容器輸送用セットを利用して行う培養状態維持輸送の際、培養容器の容器部には内容物（培養細胞あるいは生体組織や培地）を収容する。当該内容物を収容した状態の培養容器輸送用セットからなるユニット（細胞・生体組織輸送用ユニット）についても、本発明の範囲である。

Claims (11)

1. 底壁、およびこの底壁から起立する筒状の側壁によって構成される容器部を少なくとも１つ有する培養容器と、
   上記容器部の上記側壁の上縁部を覆う、可撓性を有する素材からなるカバーと、
   上記カバーの上に積載する硬質な押さえ部材と、
   上記培養容器、上記カバーおよび上記押さえ部材を重ね合わせたアセンブリ状態でこれらを上下から押圧しつつ一体的に保持するホルダと、を備え、
   上記カバーは、上下方向視において上記各側壁の内側領域のすべてを覆っており、
   上記カバーは、上下方向視において上記各側壁の内側に位置するとともにガス透過性を有する部分、を含み、
   上記カバーは、上記側壁の内側に収まり、上記底壁に向かって突き出る突出部を有する、培養容器輸送用セット。
2. 上記カバーは、上記各側壁の上記上縁部に密着し、相対的に厚肉な厚肉部と、上下方向視において上記厚肉部に囲まれ、相対的に薄肉でガス透過性を有する薄肉部と、を有する、請求項１に記載の培養容器輸送用セット。
3. 上記厚肉部は、注射針の突き刺し孔を塞ぐ再シール性を有し、上記アセンブリ状態において上記押さえ部材の下面に密着する、請求項２に記載の培養容器輸送用セット。
4. 上記押さえ部材は、上記側壁の内側に収まり、上記底壁に向かって垂れ下がる筒状部を有する、請求項１ない３のいずれかに記載の培養容器輸送用セット。
5. 上記押さえ部材には、上下方向視において上記各側壁の内側に位置し、上下に貫通する貫通孔が形成されている、請求項１ないし４のいずれかに記載の培養容器輸送用セット。
6. 上記押さえ部材の上面には、当該押さえ部材の周縁から上記各貫通孔まで通じる溝部が設けられている、請求項５に記載の培養容器輸送用セット。
7. 上記ホルダは、平坦な底板と、この底板に平行な天井板と、各々の両端が上記底板および上記天井板につながる一対の側板と、により構成された環状をなす、請求項１ないし６のいずれかに記載の培養容器輸送用セット。
8. 上記ホルダは、平坦な底板を有する底部材と、この底部材に着脱可能であり、上記底板に平行な天井板を有する蓋部材と、上記底部材および上記蓋部材を締結する締結手段と、を含む、請求項１ないし６のいずれかに記載の培養容器輸送用セット。
9. 上記アセンブリ状態において上記培養容器、上記カバー、および上記押さえ部材のいずれかと重なり、形状復元性を有する弾性シート部材をさらに備える、請求項１ないし８のいずれかに記載の培養容器輸送用セット。
10. 上記アセンブリ状態において、上記培養容器における上記底壁の側面全体と上記弾性シート部材の側面の一部とを覆う側面覆い部をさらに有する、請求項９に記載の培養容器輸送用セット。
11. 請求項１ないし１０のいずれかに記載の培養容器輸送用セットと、当該培養容器輸送用セットにおける上記容器部に収容された、細胞あるいは生体組織および培地と、を備える、細胞・生体組織輸送用ユニット。

Images