JP6682522B2 - ２−（（４ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶形態 - Google Patents

Description

関連する出願
[0001]本出願は、２０１４年６月２０日に出願された米国特許仮出願６２／０１４，７８２の利益を主張するものであり、その全ての内容は、本明細書中に参考文献として援用される。

発明の技術分野
[0002]本明細書中で提供されるものは、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶形態Ａ、結晶形態を調製するための方法、結晶形態を含んでなる医薬組成物、及びブロモドメイン含有タンパク質が媒介する疾患を治療することにおける結晶形態及びその組成物の使用である。

[0003]細胞の核にヒトゲノムの３０億個のヌクレオチドを詰め込むことは、おびただしい圧縮を必要とする。この技巧を達成するために、染色体はヒストンと呼ばれるタンパク質のスプールの周りに巻き付けられて、遺伝子制御のためのテンプレートを定義するクロマチンとして知られる緻密な繰返しタンパク質／ＤＮＡのポリマーを形成する。単にパッケージング・モジュールとして役立つこととは別に、クロマチンのテンプレートは、エピジェネティック制御と呼ばれる新しく認識され、そして基本的に重要な遺伝子制御機構のセットの基礎を形成する。ヒストン及びＤＮＡに広い範囲の特異的な化学的修飾を与えることによって、エピジェネティック制御因子は、ゲノムの構造、機能、及び接触性を調節し、これによって、遺伝子発現に対しておびただしい影響を発揮する。数百のエピジェネティックエフェクターが最近同定され、これらの多くは、クロマチン結合タンパク質又はクロマチン修飾酵素である。有意には、増加する数のこれらのタンパク質は、各種の疾患、例えば神経変性疾患、代謝性疾患、炎症、及び癌に関連する。従って、この新興のクラスの遺伝子制御タンパク質に対して向けられた高度に選択的な治療剤は、ヒトの疾病の治療に対する新しい方法を約束する。

[0004]２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドは、一つ又はそれより多いブロモドメイン含有タンパク質の阻害剤であり、そして例えば、増殖性疾患、炎症性疾患、敗血症、自己免疫性疾患、及びウイルス性感染のようなブロモドメイン含有タンパク質が媒介する疾患の治療において有用である。非晶質の形態の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドは、米国特許出願２０１２／０１５７４２８中で化合物１４４として例示され、そしてこれは、本明細書中に参考文献として援用される。２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドは、以下の構造式：

によって表される。
[0005]非晶質の形態の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドに伴う治療的利点を考慮すれば、改良された特性を有するこの化合物の他の形態の開発は、一つ又はそれより多いブロモドメイン含有タンパク質の阻害のための向上された製剤を製造するための魅力ある分野である。

米国特許出願２０１２／０１５７４２８

[0006]本明細書中で提供されるものは、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの新規な結晶形態Ａであり、これは、改良された特性を有し、そして先に開示されている非晶質の形態より有利な特徴を示す。以下に詳細に記載するように、このような利点は、例えば、改良された相対湿度安定性、単離の容易さ、好ましい薬物動態学的パラメーター、及び２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドのプロセス再現性を含む。

[0007]更に本明細書中で提供されるものは、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの新規な水和された（例えば、一水和物）結晶形態Ａである。

[0008]本明細書中で更に提供されるものは、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶質の、そして水和された結晶形態Ａを含んでなる医薬組成物、その製造の方法、並びに例えば、増殖性疾患、炎症性疾患、敗血症、自己免疫性疾患、及びウイルス性感染のようなブロモドメイン含有タンパク質が媒介する疾患を治療するためのその使用である。

[0009]図１は、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の結晶形態ＡについてのＸ線粉末回折パターン（ＸＲＰＤ）を示す。 [0010]図２は、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の結晶形態Ａについての１３Ｃ−ＮＭＲ特性を示す。 [0011]図３は、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の結晶形態Ａについての熱重量分析（ＴＧＡ）のパターンを示す。 [0012]図４は、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の結晶形態Ａについての重量測定式水分吸脱着曲線（gravimetric moisture sorption curve）を示す。 [0013]図５は、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の結晶形態Ａについての示差走査熱量（ＤＳＣ）スペクトルを示す。 [0014]図６は、非晶質の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドに対する重量測定式水分吸脱着曲線を示す。 [0015]図７は、０．５％のＭＣ中の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の結晶形態Ａの１０及び６０ｍｇ／ｋｇの経口投与後の、オスのＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットにおける、時間に対する個別の血漿中濃度を示す。 [0016]図８は、０．５％のＭＣ中の非晶質の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの２ｍｇ／ｋｇの経口投与後の、オスのＢｅａｇｌｅ犬における、時間に対する個別の血漿中濃度を示す。 [0017]図９は、０．５％のＭＣ中の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の結晶形態Ａの２ｍｇ／ｋｇの経口投与後の、オスのＢｅａｇｌｅ犬における、時間に対する個別の血漿中濃度を示す。 [0018]図１０は、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の結晶形態ＡのＧＭＰ（優良医薬品製造基準）による規模拡大についてのＸ線粉末回折パターン（ＸＲＰＤ）を示す。 [0019]図１１は、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の結晶形態ＡのＧＭＰによる規模拡大についての示差走査熱量（ＤＳＣ）スペクトルを示す。 [0020]図１２は、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の結晶形態ＡのＧＭＰ規模拡大についての熱重量分析（ＴＧＡ）パターンを示す。

定義
[0021]単独で使用される場合、用語“形態Ａ”は、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶質多形の形態Ａを指す。用語“形態Ａ”、“２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの形態Ａ”、及び“２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶形態Ａ”は、互換的に使用される。用語“形態Ａ”、“２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの形態Ａ”、及び“２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶形態Ａ”は、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶質多形の形態Ａの水和及び溶媒和された形態、並びに無水の形態を含むことを意図する。このような形態は、例えば、ＸＲＰＤによって特徴づけられる。“無水の”は、本明細書中で使用する場合、結晶形態が、結晶格子内に実質的に水を含まない、例えば、カールフィッシャー分析によって決定されされた場合に１重量％より少ないことを意味する。

[0022]単独で使用される場合、用語“一水和物の形態Ａ”は、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の結晶質多形の形態Ａを指す。用語“一水和物の形態Ａ”、“一水和物の結晶形態Ａ”、及び“２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の結晶形態Ａ”は、互換的に使用される。一水和物の形態Ａは、例えば、カールフィッシャー滴定分析を伴うＸＲＰＤによって特徴づけられる。

[0023]用語“非晶質”は、非結晶の状態又は形態で存在する固体を意味する。非晶質の固体は、分子の無秩序な配置であり、そして従って、識別可能な結晶格子又は単位格子を保有せず、そして結果として、定義可能な長い範囲の秩序を持たない。固体の固体状態の秩序は、当技術において既知の標準的な技術、例えば、Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）又は示差走査熱量分析（ＤＳＣ）によって決定することができる。非晶質の固体は、更に、例えば偏光顕微鏡を使用する複屈折によって結晶質固体と区別することができる。

[0024]用語“医薬的に受容可能な担体、アジュバント、又はビヒクル”は、それと共に処方される化合物の医薬的活性に不都合に影響しない、そしてこれが更にヒトの使用のために安全である非毒性の担体、アジュバント、又はビヒクルを指す。本開示の組成物中で使用することができる医薬的に受容可能な担体、アジュバント又はビヒクルは、制約されるものではないが、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸マグネシウム、レシチン、血清タンパク質、例えばヒト血清アルブミン、緩衝物質、例えばリン酸塩、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩又は電解質、例えば硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース基剤物質（例えば、微結晶セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ラクトース一水和物、ラウリル硫酸ナトリウム、及びクロスカルメロースナトリウム）、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコール及び羊毛脂を含む。

例示的化合物の説明
[0025]一つの側面において、本発開示は、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶形態Ａを提供する。

[0026]一つの側面において、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶形態Ａは、４．７３°、１８．０９°、１８．４８°、１８．８０°、１９．７０°、及び２５．１７°から選択される２Θ角における少なくとも三つ、少なくとも四つ、少なくとも五つ、又は六つのＸ線粉末回折のピークによって特徴づけられる。別の方法として、結晶形態Ａは、２Θ角４．７３°、９．４２°、１２．９１°、１８．０９°、１８．４８°、１８．８０°、１９．７０°、２１．４２°、及び２５．１７°におけるＸ線粉末回折のピークによって特徴づけられる。もう一つの別の方法として、結晶形態Ａは、２Θ角４．７３°、８．１１°、９．４２°、１２．９１°、１４．１０°、１４．９７°、１８．０９°、１８．４８°、１８．８０°、１９．７０°、２１．４２°、及び２５．１７°、２６．０７°、並びに２６．５３°におけるＸ線粉末回折のピークによって特徴づけられる。

[0027]もう一つの側面において、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶形態Ａは、図１に示すＸＲＰＤパターンと実質的に同じであるＸＲＰＤパターンを有する。

[0028]もう一つの側面において、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶形態Ａは、図１０に示すＸＲＰＤパターンと実質的に同じであるＸＲＰＤパターンを有する。

[0029]もう一つの側面において、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶形態Ａは、表２中のピークを実質的に含むＸＲＰＤパターンを有する。

[0030]もう一つの側面において、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶形態Ａは、表３中のピークを実質的に含むＸＲＰＤパターンを有する。

[0031]もう一つの側面において、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶形態Ａは、０．０５％のテトラメチルシランを伴うＤＭＳＯ−ｄ_６中の１７１．３、１６８．６、１６７．４、１３９．３０、１３４．７、１３３．４、１３１．４、１３１．１、１３０．７、１３０．０、１２８．０、１２６．８、１２５．８、１１２．５５、５５．９、５３．５、３６．４、１８．５、及び１０．６における１３Ｃ−ＮＭＲピークによって特徴づけられる。あるいは、結晶形態Ａは、図２に示す１３Ｃ−ＮＭＲパターンと実質的に同じである１３Ｃ−ＮＭＲパターンによって特徴づけられる。

[0032]一つの側面において、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶形態Ａは、図３に示すＴＧＡパターンと実質的に同じであるＴＧＡパターンを有する。あるいは、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶形態Ａは、図１２に示すＴＧＡパターンと実質的に同じであるＴＧＡパターンを有する。

[0033]一つの側面において、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶形態Ａは、図５に示すＤＳＣパターンと実質的に同じであるＤＳＣパターンを有する。あるいは、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶形態Ａは、図１１に示すＤＳＣパターンと実質的に同じであるＤＳＣパターンを有する。

[0034]一つの側面において、先行する段落において引用した結晶形態は、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの水和された結晶形態Ａ（例えば、一水和物の形態Ａ）を表す。

[0035]一つの側面において、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの水和された結晶形態Ａは、４．７３°、１８．０９°、１８．４８°、１８．８０°、１９．７０°、及び２５．１７°から選択される２Θ角における少なくとも三つ、少なくとも四つ、少なくとも五つ、又は六つのＸ線粉末回折のピークによって；所望により先に引用したＴＧＡ及びＤＳＣパラメーターの一つ又は両方；並びに４ないし５％のカールフィッシャー滴定による水分組成の範囲と一緒に特徴づけられる。

[0036]一水和物の結晶形態Ａに対するＸ線粉末回折パターンの２−シータ値が、装置により、そして更に試料の調製中の変化及びバッチによる変化によって、僅かに変化し得ることは理解されるものである。例えば、理論によって束縛されることを望むものではないが、２−シータ値のある程度の変化は、例えば、水和された（例えば一水和物）及び無水の形態における結晶格子に含まれる水の量が寄与すると信じられる。従って、ＸＲＰＤパターン／結晶形態Ａに対する指定は、絶対値として解釈されるものではなく、そして±０．３度変化することができる結晶形態Ａの２Θ角８．１１°、１４．１０°、１４．９７°、２６．０７°、及び２６．５３°を除外して、±０．２度変化することができる。

[0037]本明細書中で意図するように、“図１に示すものと実質的に同じＸＲＰＤパターン”及び“図１０に示すものと実質的に同じＸＲＰＤパターン”は、比較の目的で、図１及び図１０に示すピークの少なくとも９０％が存在することを意味する。比較の目的で、±０．３度変化することができる結晶形態Ａの２Θ角８．１１°、１４．１０°、１４．９７°、２６．０７°、及び２６．５３°を除外して、図１及び図１０に示したものからのピーク強度のある程度の変化、例えば±０．２度は許容されることも、更に理解されることである。

[0038]一水和物の結晶形態ＡのＮＭＲパターンの化学シフトが、装置により、そして更に試料の調製中の変化及びバッチによる変化によって、僅かに変化し得ることも更に理解されるものである。従って、ＮＭＲの化学シフト、パターン、及び／又は一水和物の結晶形態Ａに対する指定は、絶対値と解釈されるされるべきではなく、そして±０．２ｐｐｍ変化することができる。

[0039]一つの側面において、本開示は、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶形態Ａを調製するための方法を提供する。このような方法は、例えば、非晶質の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド及び水を含んでなる溶液から結晶形態Ａを形成すること；又は非晶質の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド並びに水及び有機溶媒の組合せを含んでなる溶液から結晶形態Ａを形成することを含む。一つの側面において、結晶形態Ａは、非晶質の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド並びに水及び有機溶媒の組合せを含んでなる溶液から沈殿される。一つの側面において、先に記載した方法は、一水和物の結晶形態Ａの形成をもたらす。

[0040]前述の方法のために受容可能な溶媒混合物は、例えば、エタノール／水、イソプロパノール／水、テトラヒドロフラン／水、アセトン／水、メタノール／水、及びアセトニトリル／水を含む。一つの側面において、本明細書中に記載した方法は、エタノール／水の６０：４０混合物中の非晶質の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドからの一水和物の結晶形態Ａの形成を含んでなる。

[0041]結晶形態Ａを調製するための方法は、更に、非晶質２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド及び水を含んでなる溶液に、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶形態Ａを種結晶として添加すること；或いは非晶質２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド並びに水及び有機溶媒の組合せを含んでなる溶液に、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶形態Ａを種結晶として添加することを含む。一つの側面において、種結晶の添加は、結果として生じる一水和物の形態を調製するために、一水和物の結晶形態Ａで行われる。結晶形態Ａ及び特異的な一水和物の結晶形態Ａを調製するための方法は、更に、水中の非晶質の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドを、種結晶添加の非存在中で懸濁することによって達成することもできる。

[0042]更に、二つの先行する段落において記述された方法のための受容可能な溶媒混合物は、更に、例えば、エタノール／水、イソプロパノール／水、テトラヒドロフラン／水、アセトン／水、メタノール／水、及びアセトニトリル／水を含む。一つの側面において、本明細書中に記載される方法は、エタノール／水の６０：４０の混合物中の非晶質の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドに、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の結晶形態Ａを種結晶として添加することからの一水和物の結晶形態Ａの形成を含んでなる。

使用、処方及び投与
医薬的に受容可能な組成物
[0043]他の側面によれば、本開示は、本明細書中に記載される結晶形態Ａ及び医薬的に受容可能な担体、アジュバント、又はビヒクルを含んでなる組成物を使用してブロモドメイン含有タンパク質（例えば、ＢＥＴタンパク質、例えば、ＢＲＤ２、ＢＲＤ３、ＢＲＤ４、及び／又はＢＲＤＴ）を阻害する方法に関する。組成物中で提供される結晶形態の量は、生物学的試料又は患者中の一つ又はそれより多いブロモドメイン含有タンパク質（例えば、ＢＥＴタンパク質、例えば、ＢＲＤ２、ＢＲＤ３、ＢＲＤ４、及び／又はＢＲＤＴ）、又はその変異体を測定可能な程度に阻害するために有効であるようなものである。ある側面において、提供される組成物中の結晶形態の量は、生物学的試料又は患者中の一つ又はそれより多いブロモドメイン含有タンパク質（例えば、ＢＥＴタンパク質、例えば、ＢＲＤ２、ＢＲＤ３、ＢＲＤ４、及び／又はＢＲＤＴ）、又はその変異体を測定可能な程度に阻害するために有効であるようなものである。ある側面において、提供される組成物は、このような組成物を必要とする患者に投与するために処方される。幾つかの側面において、提供される組成物は、患者への経口投与のために処方される。

[0044]本明細書中に記載される組成物は、経口的、非経口的、吸入噴霧によって、局所的、直腸的、鼻腔的、頬側的、膣的に、又は移植されたリザバーによって投与することができる。用語“非経口”は、本明細書中で使用する場合、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑膜内、胸骨内、クモ膜下腔内、肝臓内、病巣内及び頭蓋内注射又は注入を含む。

[0045]投与の他の形態は、米国特許出願公開番号２０１２／０１５７４２８中に記載されているとおりである。経口投与の投与形態は、更に米国特許出願公開番号２０１２／０１５７４２８中に記載され、これの内容は、本明細書中に参考文献として援用される。

[0046]単一の剤形の組成物を製造するために担体物質と組合せることができる提供される結晶形態の量は、治療される患者及び投与の特定のモードによって変化するものである。提供される組成物は、０．００１−１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の間の投与量の阻害剤が、これらの組成物を受ける患者に投与することができるように処方することができる。

[0047]いずれもの特定の患者のための具体的な投与量及び治療計画は、年齢、体重、一般的健康状態、性別、食事、投与の時間、排出の速度、薬物の組合せ、治療する医師の判断、及び治療される特定の疾病の重篤度を含む各種の因子に依存するものであることも更に理解されるべきである。組成物中に提供される結晶形態の量は、更に、組成物中の特定の化合物にも依存するものである。

化合物及び医薬的に受容可能な組成物の使用
[0048]本明細書中に記載される２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶形態Ａ及び組成物は、一般的に、例えば、米国特許出願公開２０１２／０１５７４２８中に記載されているもののような、エピジェネティック制御に関係する一つ又はそれより多いタンパク質の活性の阻害のために有用である。従って、幾つかの側面において、本開示は、エピジェネティック制御に関係する一つ又はそれより多いタンパク質、例えば更にブロモドメイン（例えば、ＢＥＴタンパク質、例えば、ＢＲＤ２、ＢＲＤ３、ＢＲＤ４、及び／又はＢＲＤＴ）として知られるアセチル−リシン認識モチーフを含有するタンパク質を、提供される結晶形態又は組成物を投与することによって阻害する方法を提供する。

[0049]本開示は、更に、本明細書中に記載される一つ又はそれより多い化合物を投与することを含んでなる、ＭＹＣ依存性癌、炎症性疾病、及びウイルス性疾病（例えば、米国特許出願公開２０１２／０１５７４２８中に記載されているもの）を治療することに関する。

[0050]本明細書中で使用する場合、用語“治療”、“治療する”及び“治療すること”は、本明細書中に記載されるような疾病又は疾患の進行を、或いは一つ又はそれより多いその兆候を逆転、軽減、又は阻害することを指す。

[0051]本明細書中に記載される方法によって治療可能な疾病及び症状は、制約されるものではないが、癌及び他の増殖性疾患、炎症性疾患、敗血症、自己免疫性疾患、及びウイルス性感染を含む。従って、一つの側面は、疾病、疾患、又はその兆候を有する患者を治療する方法であり、この方法は、患者への本明細書中の結晶形態又は組成物の投与を含む。一つの側面において、ヒトの患者は、本明細書中に記載される結晶形態及び医薬的に受容可能な担体アジュバント、又はビヒクルで治療され、ここにおいて、前記の結晶形態は、患者中のブロモドメイン含有タンパク質（例えば、ＢＥＴタンパク質、例えば、ＢＲＤ２、ＢＲＤ３、ＢＲＤ４、及び／又はＢＲＤＴ）活性を測定可能な程度に阻害する量で存在する。

[0052]本開示は、更に、癌又は他の増殖性疾患を、本明細書中に記載されるような有効な量の結晶形態の、このような治療を必要とする哺乳動物、特にヒトへの投与によって治療又は寛解するための方法に関する。幾つかの側面において、治療される疾病は癌である。治療される癌の例は、制約されるものではないが、副腎癌、腺房細胞癌、聴神経腫瘍、末端黒子型黒色腫、先端汗腺腫、急性好酸球性白血病、急性赤血球性白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性巨核芽球性白血病、急性単球性白血病、急性前骨髄球性白血病、腺癌、腺様嚢胞癌、腺腫、腺様歯原性腫瘍、腺扁平上皮癌、脂肪組織腫瘍、副腎皮質癌、成人Ｔ細胞性白血病／リンパ腫、侵襲性ＮＫ細胞性白血病、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、胞巣型横紋筋肉腫、胞巣状軟部肉腫、エナメル上皮線維腫、未分化大細胞リンパ腫、組織非形成性甲状腺癌、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫、血管筋脂肪腫、血管肉腫、星状細胞腫、非定型奇形ラブドイド腫瘍、Ｂ細胞性慢性リンパ球性白血病、Ｂ細胞性前リンパ球性白血病、Ｂ細胞性リンパ腫、基底細胞癌、胆道癌、膀胱癌、芽細胞腫、骨癌、ブレンナー腫瘍、ブラウン腫瘍、バーキットリンパ腫、乳癌、大脳癌、細胞腫、上皮内癌、癌肉腫、軟骨腫瘍、セメント質腫、骨髄肉腫、軟骨腫、脊索腫、絨毛癌、脈絡叢乳頭腫、腎臓の淡明細胞肉腫、頭蓋咽頭腫、急性Ｔ細胞性リンパ腫、子宮頸癌、結腸直腸癌、デゴス病、線維形成性小円形細胞腫瘍、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、胚芽異形成性神経上皮腫瘍、未分化肺細胞腫、胚性癌腫、内分泌性腫瘍、内胚葉洞腫瘍、腸症関連Ｔ細胞リンパ腫、食道癌、胎児内胎児、線維腫、線維肉腫、濾胞性リンパ腫、濾胞性甲状腺癌、神経節性神経腫、胃腸癌、胚細胞性腫瘍、妊娠性絨毛癌、巨細胞繊維芽細胞腫、骨巨細胞腫、膠細胞腫瘍、多形性神経膠芽細胞腫、神経膠腫、大脳神経膠腫、グルカゴン産生腫瘍、性腺芽腫、顆粒膜細胞腫、男女性胚細胞腫、胆嚢癌、胃癌、ヘアリー細胞白血病、血管芽細胞腫、頭頸部癌、血管周皮腫、血液学的悪性疾患、胚芽腫、肝脾Ｔ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、侵襲性小葉癌、大腸癌、腎臓癌、咽頭癌、悪性黒子、致死性中性腺腫瘍、白血病、ライディッヒ細胞腫、脂肪肉腫、肺癌、リンパ管腫、リンパ管肉腫、リンパ上皮腫、リンパ腫、急性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、肝臓癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、ＭＡＬＴリンパ腫、悪性線維性組織球腫、悪性末梢神経鞘腫、悪性トリトン腫瘍、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、マスト細胞リンパ腫、縦隔胚細胞性腫瘍、乳房の髄様癌、髄様甲状腺癌、髄芽細胞腫、黒色腫、髄膜腫、メルケル細胞癌、中皮腫、転移性尿路上皮癌、混合ミュラー管腫瘍、粘液性腫瘍、多発性骨髄腫、筋組織腫瘍、筋状息肉腫、粘液性脂肪肉腫、粘液腫、粘液肉腫、上咽頭癌、神経鞘腫、神経芽細胞腫、神経線維腫、神経腫、結節性黒色腫、眼癌、乏突起星細胞腫、乏突起神経膠腫、膨大細胞腫、視神経鞘髄膜腫、視神経腫瘍、口腔癌、骨肉腫、卵巣癌、パンコースト腫瘍、乳頭様甲状腺癌、傍神経節腫、松果体芽腫、松果体細胞腫、下垂体細胞腫、下垂体腺腫、下垂体腫瘍、形質細胞腫、多胚形成、前駆Ｔリンパ芽球性リンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫、原発性浸出液リンパ腫、原発性腹膜癌、前立腺癌、膵臓癌、食道癌、腹膜偽粘膜腫、腎細胞癌、腎髄様癌、網膜芽細胞腫、横紋筋腫、横紋筋肉腫、リヒタートランスフォーメーション、直腸癌、肉腫、神経鞘腫症、精上皮腫、セルトリ細胞腫、性索間質性腫瘍、印環細胞癌、皮膚癌、小青色球形細胞腫、小細胞癌、軟部組織肉腫、ソマトスタチン産生腫瘍、煤煙性いぼ、脊椎腫瘍、脾縁辺体リンパ腫、有棘細胞癌、滑膜肉腫、セザリー病、小腸癌、扁平上皮癌、胃癌、Ｔ細胞リンパ腫、精巣癌、莢膜細胞腫、甲状腺癌、移行上皮癌、咽頭癌、尿膜管癌、非尿生殖器癌、尿路上皮癌、ブドウ膜黒色腫、子宮癌、いぼ状癌、視覚路神経膠腫、外陰癌、膣癌、ワルデンストレーム高ガンマグロブリン血症、ワルチン腫瘍、及びウイルムス腫瘍を含む。

[0053]幾つかの側面において、本開示は、良性増殖性疾患、感染性及び非感染性炎症性発症並びに自己免疫性及び他の炎症性疾病、全身性炎症性反応症候群、並びにウイルス性感染、例えば、米国特許出願公開２０１２／０１５７４２８に記載されているようなものを治療する方法を提供する。

[0054]本開示は、更に、上述の症状、病気、疾患又は疾病の一つに罹った患者、例えばヒトを治療する方法を提供する。この方法は、ブロモドメインを阻害することによって、そして一般的に、遺伝子発現を調節し、各種の細胞効果、特に遺伝子発現の誘発又は抑制を誘発し、細胞増殖を停止し、細胞分化を誘発し、及び／又はアポトーシスを誘発することによって機能する治療的に有効な量の結晶形態Ａを、このような治療を必要とする患者に投与することを含んでなる。

[0055]本開示は、更に、本明細書中に記述するような疾病、疾患、病気及び／又は症状の治療及び／又は寛解のために使用される、医薬組成物の製造のために提供される結晶形態の使用に関する。

[0056]本開示のもう一つの側面は、本明細書中の疾患又は疾病の治療において使用するための医薬の製造における、本明細書中に記載される結晶形態の使用である。本開示のもう一つの目的は、本明細書中の疾患又は疾病の治療において使用するための、本明細書中に記載されるような結晶形態の使用である。

[0057]治療される特定の症状、又は疾病によるが、その症状を治療するために通常投与される更なる治療剤は、更に本開示の組成物中に存在するか、又は投与計画の一部として別個に投与することができる。本明細書中で使用する場合、特定の疾病、又は症状を治療するために通常投与される更なる治療剤は、“治療される疾病、又は症状のために適当”として知られる。

[0058]開示される結晶形態は、更に、一つ又はそれより多い抗増殖性化合物又は例えば、その内容が本明細書中に参考文献として援用される米国特許出願公開２０１２／０１５７４２８中に記載されているような他の更なる化合物との組合せで使用することもできる。

[0059]本明細書中で使用される場合、用語“組合せ”、“組合せた”、及び関連する用語は、本開示による治療剤の同時又は連続投与を指す。例えば、提供される結晶形態は、もう一つの治療剤と、同時に又は連続して、別個の単位剤形で、或いは単一の単位剤形で一緒に投与することができる。従って、一つの側面は、提供される結晶形態、更なる治療剤、及び医薬的に受容可能な担体、アジュバント、又はビヒクルを含んでなる、本開示の方法において使用するための単一の単位剤形を提供する。

[0060]以下の実施例に示すように、ある例示的態様において、結晶形態Ａは、以下の一般的方法によって調製される。
[0061]ＸＲＰＤ分析は、４５ｋＶ、４０ｍＡのＣｕ照射源で操作されるＣｕｂｉＸ−ＰｒｏＸＲＤを使用して行った。試料を、Ｓｉの原点復帰試料保持器に入れ、そして分析を１０ｍｍの照射幅を使用して行った。走査パラメーターは、０．０２°のステップサイズ、ステップ当り１０秒及び２．５４°の有効長で、３．０から４５．０°までの範囲であった。ピークの決定は、Ｘ’Ｐｅｒｔ ＨｉｇｈＳｃｏｒｅ Ｐｌｕｓソフトウェアを、次のパラメーター：固定発散スリットサイズ、１．００°、１．５９ｍｍ及び交差ポイント、４４．３°オメガで使用して行った。

[0062]示差走査熱量分析を、“そのまま”の試料に対して、Ｍｅｔｔｌｅｒ ８２２^ｅで行った。試料をアルミニウムパンに秤量し、穴のあいた蓋で覆い、そして次いで圧着し、そして３０から３００℃で、１０℃／分の傾斜で分析した。

[0063]熱重量分析は、“そのまま”の試料に対して、Ｍｅｔｔｌｅｒ ８５１^ｅＳＤＴＡ／ＴＧＡで行った。試料をアルミニウム坩堝中に秤量し、そして３０から３００℃までを、１０℃／分で分析した。

[0064]核磁気共鳴は、５００ＭＨｚのＢｒｕｋｅｒ ＡＶＡＮＣＥで行った。試料を内部参照のための０．０５％のテトラメチルシランを含むＤＭＳＯ−ｄ_６中に溶解した。
[0065]水含有量の決定（カールフィッシャー分析）は、ＵＳＰ＜９２１＞、方法ＩＣ（電量滴定）のとおりに行った。試料をそのまま使用し、そしてハイドラナルクーロマットＡＤを滴定剤として使用した。

２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の結晶形態Ａの調製

[0066]カルボン酸（１）を、米国特許出願公開２０１２／０１５７４２８に記載された方法で調製した。例えば、米国特許出願公開２０１２／０１５７４２８のスキーム１、工程Ｌを参照されたい。米国特許出願公開２０１２／０１５７４２８に記載された方法によるその後のカップリング（例えば、スキーム１、工程Ｌの第２工程）は、非晶質の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドのみを製造することは注意すべきである。この非晶質の物質は、いずれものＸＲＰＤを使用する観察可能な回折をもたらさず、そして例えば、重量測定式水分吸脱着法（gravimetric moisture sorption）（図６）によって更に特徴づけられた。

[0067]結晶質の物質を製造するために、反応器に、７００ｇのカルボン酸（１）を、ＤＣＭ（４．６Ｌ）中の６５．８％の^１Ｈ ＮＭＲ能（potency）（４６０ｇ、１．３ｍｏｌ）と共に入れた。このバッチに、カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ、２６４ｇ、１．６ｍｏｌ、１．３当量）を固体添加系で四分割して入れた。添加の過程にわたって、バッチ温度は１５−１８℃であった。バッチを２０−２５℃で１−２時間撹拌し、この時点で、ＨＰＬＣ分析は出発物質が＜２％であることを示した。バッチを０−５℃に冷却した。このバッチに２８％水酸化アンモニウム水溶液（４３２ｍＬ、６．５ｍｏｌ、５当量）を、滴下漏斗によって２０分かけて、温度を０−５℃に維持しながら加えた。バッチを０−５℃で１時間撹拌し、この時点で、ＨＰＬＣ分析は、中間体のアシル−イミダゾールが＜２％であることを示した。バッチを２０−２５℃に温め、そしてＤＩ水（２．３Ｌ）を加えた。バッチを１５分間激しく撹拌した。撹拌を停止し、そして相を分離した。有機相を食塩水（２．３Ｌ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、活性炭（４６ｇ、Ｄａｒｃｏ Ｇ−６０）で処理し、濾過し、そしてＤＣＭ（１．５Ｌ）で洗浄した。混合した濾液及び洗液を回転蒸発によって、乾燥状態まで濃縮した。残渣を無水アルコール（２．３Ｌ）中に再溶解し、そして５０−５５℃に加熱した。バッチにＤＩ水（２．３Ｌ）を滴下漏斗によって、温度を５０−５５℃に維持しながら１時間かけて加えた。バッチを２時間の時間をかけて冷却し、そして固体ではなく油状物が形成されるのを観察した。バッチを５０−５５℃に再加熱し、そして１５−２５℃に１２−１６時間の時間をかけて徐々に冷却した。バッチを０−５℃に冷却し、そして１−２時間撹拌した。バッチを濾過し、そしてＤＩ水と無水アルコールの１：１の混合物（２３０ｍＬ）で洗浄した。

[0068]固体を高真空下で４０−４５℃で一晩乾燥して、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の結晶形態Ａ［３２０ｇ、７０％収率、ＨＰＬＣにより９５．１％（ＡＵＣ）］を得た。Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ Ｍｉｃｒｏｌｉｔは、パラジウムレベルが８４ｐｐｍであると分析した。ＸＲＰＤ、ＮＭＲ、ＴＧＡ、ＤＳＣ、及び光学顕微鏡写真を、図１−３及び５に示す。カールフィッシャー分析は、４．５重量％の平均水含有率を確認した。図１に示したＸＲＰＤピークのリストを、以下の表１に提供する。

[0069]表１

[0070]一水和物の結晶形態ＡのＧＭＰによる規模拡大は、次のように行った。３９５５ｇの粗製の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドを、事前に濾過したＥｔＯＨ（１５Ｌ、５．５体積）中に室温で溶解し、そしてジャケット加熱した１００Ｌの反応器に移した。バッチ温度を５５±５℃に設定し、そして純水（１５Ｌ、５．５体積）を、バッチ温度を５５±５℃に維持しながら、４２分の時間をかけて加えた。バッチ温度を４５±５℃に設定し、そして一水和物の形態Ａの種結晶（６．１ｇ）を加えた。バッチを２０±５℃に５時間の時間をかけて冷却し、そして更に５５分の時間をかけて０±５℃に冷却した。撹拌を０±５℃で更に１時間続けた。得られた固体を濾過し、そして濾過ケーキを事前濾過したエタノール（１．５Ｌ）及び純水（１．５Ｌ）の１：１の室温の混合物で洗浄した。固体をガラス皿に移し、そして４５±５℃の真空オーブンで窒素放出を伴って乾燥して、２．１５ｋｇ（７５％）の一水和物の結晶形態Ａを、オフホワイト色の固体として得た。ＸＲＰＤ、ＤＳＣ、及びＴＧＡを、図１３−１５に示す。カールフィッシャー分析は、４．３重量％の水含有率を確認した。図１０に示したＸＲＰＤピークのリストは、以下の表２に提供する。

[0071]表２

[0072]本明細書中に記載される結晶形態を含んでなる製剤の例は、以下のとおりである。
２ｍｇカプセル

１０ｍｇカプセル

２５ｍｇカプセル

[0073]微小化形態

非晶質２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドに対する一水和物の形態Ａのいくらかの利点
相対湿度安定性
[0074]図４の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の形態Ａに対する重量測定式水分吸脱着曲線によって示されるように、一水和物の化学量論（水含有率）の安定性は、一水和物の状態（概略５％、４．６％の理論的含有率）で、５ないし９５％の相対湿度の範囲にわたって効率よく一定のままである。多くの医薬的化合物に関して、そして特に水和された形態に関しては、典型的には殆どが低い閾値においてのみ安定であるために、この安定性のレベルは稀である。典型的には、更に制約された範囲、例えば３０ないし７０％間にわたって一水和物の化学量論の安定性を観察することが予想されるものである。３０％より低い相対湿度レベルにおいて、化合物はなお水を保持するが、化学量論的比は、真の一水和物のそれより少ないものである。同様に、高い相対湿度において、水と化合物の化学量論的比は、一水和物のそれを超えるものである。図４において証明されるように、これは、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の形態Ａでは観察されなかった。むしろ、水と一水和物の化学量論的比は、５ないし９５％の範囲の相対湿度にわたって安定なままであった。

[0075]このような広い湿度範囲にわたる一水和物の形態Ａのこの予期しない観察された安定性は、一水和物の形態Ａの水含有率が、賦形剤の水含有率に最小の影響を有するはずであり、そして同様に、賦形剤の水含有率が一水和物の形態Ａの水含有率に最小の影響を有するものであるために、医薬的製剤（例えば、錠剤及びカプセル）において有利であるものである。

[0076]開示される一水和物の形態Ａの水分蒸気特性とは異なり、微結晶セルロースの水分含有率は、２０％相対湿度における４重量％から９０％相対湿度における概略１８重量％まで変化する。ＡＰＩ（有効活性成分）を賦形剤、例えば微結晶セルロースと共に含んでなる医薬製剤ブレンド、又は圧縮錠剤において、ＡＰＩ及び賦形剤の水分含有率は、平衡するものである。開示される一水和物の形態Ａの水分含有率が５から９５％ＲＨまで非常に一定のままであるために、賦形剤（類）（例えば、微結晶セルロース）がＡＰＩに水を渡すかまたはその逆によりＡＰＩの安定性の変化又は貯蔵における脆弱性又は崩壊特性の変化に導きうることを懸念しなくてよいという、予期しない利益が達成される。

[0077]対照的に、図６は、非晶質の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドに対する重量測定式水分吸脱着曲線を示し、ここで、非晶質の形態の水分含有量が、０から概略９５％の相対湿度まで増加することが見いだされた。従って、そして開示される一水和物の形態Ａと対照的に、非晶質の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドは、広い相対湿度の範囲にわたる水の一定の化学量論的比を有効に示さず、そしてこのように、上述の懸念及び変化は現実化し得る。

相対的安定性
[0078]脱イオン水中で、一水和物の形態Ａは、４．５μｍ／ｍＬの溶解度で、安定であることが見いだされた。しかしながら、脱イオン水中で非晶質の形態の周囲温度で２４時間のスラリー化後、一水和物の形態Ａへの転換が観察された。

一水和物の形態Ａ及び非晶質の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの薬物動態学的比較
[0079]多くの活性な医薬的成分に対して、異なった形態が、異なった薬物動態学的特性を有することが示されている。非晶質の固体と比較して、結晶質の固体は、しばしば低い口腔生体利用率を有する（Ｑｉｕ Ｙ．，Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ，２００４，９３：５６３）。以下のデータは、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の形態Ａが、ラット及びイヌにおいて好ましい薬物動態学的特性を有し、そして非晶質の固体で観察されるものと類似であることを示す。結果は、形態Ａが疾病の治療のためにヒトにおいて使用するために適していることを示す。

[0080]２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の形態Ａは、カプセル中で粉末として投与された場合、次の好ましい、そして予期しない特性：メチルセルロース中の懸濁液として投与された場合の非晶質固体と類似の薬物動態学的特性；小さい個体間変化；受容可能な用量曝露比率；及びカプセル中の粉末として投与された場合の好ましい薬物動態学的特性を有することが見いだされた。

ラットにおける一水和物の形態Ａ及び非晶質の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの薬物動態
[0081]オスのＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットに、０．５％のメチルセルロース中の非晶質の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの懸濁液を使用して、６０ｍｇ／Ｋｇを経口的に１回投与した。個々の血漿中濃度を表３に報告し、そして計算した薬物動態学的パラメーターを表４に報告する。

[0082]表３：非晶質の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドのオスのＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットへの６０ｍｇ／Ｋｇの１回の経口投与後の血漿中濃度

[0083]表４：非晶質の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドのオスのＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットへの６０ｍｇ／Ｋｇの１回の経口投与後の計算された薬物動態学的パラメーター

[0084]オスのＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットに、０．５％のメチルセルロース中の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の形態Ａを使用して、６０ｍｇ／Ｋｇを１回経口投与した。個々の血漿中濃度を表５に報告し、そして計算された薬物動態学的パラメーターを表６に報告する。

[0085]表５：２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の形態ＡのオスのＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットへの６０ｍｇ／Ｋｇの１回の経口投与後の血漿中濃度。

[0086]表６：２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の形態ＡのオスのＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットへの６０ｍｇ／Ｋｇの１回の経口投与後の計算された薬物動態学的パラメーター。

[0087]６０ｍｇ／ＫｇにおけるオスのＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットにおけるこれらの二つの研究に基づいて、２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の形態Ａは、メチルセルロース中の懸濁液として投与された場合、非晶質の形態と類似の薬物動態学的特性を有する。これは、一水和物の結晶形態の好ましい、そして予期しなかった特性である。

オスのＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットにおける形態Ａによる投与量増大
[0088]０．５％のメチルセルロース中に懸濁された２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の形態Ａの懸濁液を、オスのＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットに、１０ｍｇ／Ｋｇ及び６０ｍｇ／Ｋｇで経口的に投与した。１０ｍｇ／Ｋｇ投与量及び６０ｍｇ／Ｋｇ投与量の個々の血漿中濃度をそれぞれ表７及び表５に報告する。それぞれの薬物動態学的パラメーター及び薬物動態学的特性を、表８及び図７に報告する。

[0089]表７：２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の形態Ａの、オスのＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットへの１０ｍｇ／Ｋｇの一回の経口投与後の血漿中濃度。

[0090]表８：２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の形態Ａの、オスのＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットへの１０及び６０ｍｇ／Ｋｇの一回の経口投与後の計算された薬物動態学的パラメーター。

[0091]２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の形態Ａを、メチルセルロース中の懸濁液としてオスのＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットに経口的に投与した場合、Ｃｍａｘ及びＡＵＣは、投与量が１０から６０ｍｇ／Ｋｇまで増加された場合の投与量との比例より僅かに多く増加する（例えば、図７を参照されたい）。低い個体間の差は、更に両方の投与量でも観察される。これらは、一水和物の結晶形態Ａの固体の好ましい、そして予期しなかった特性である。

イヌにおける一水和物形態Ａ及び非晶質の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの薬物動態
[0092]２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの非晶質及び一水和物の形態Ａを、２ｍｇ／Ｋｇでイヌに経口的に投与した。両方の形態（非晶質及び一水和物の形態Ａ）を、メチルセルロース中に懸濁（０．５％ＭＣ中の０．４ｍｇ／ｍＬ）した。目的は、非晶質及び一水和物の結晶形態Ａを、間に休薬期間をおいて同じイヌに連続的に投与する交差研究の設計を使用して、イヌにおける両方の形態の薬物動態学的特性を比較することであった。結果を以下に要約する。

[0093]表９：２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの非晶質の形態のオスのビーグル犬への２ｍｇ／Ｋｇの１回の経口投与後の血漿中濃度及び薬物動態学的パラメーター。

[0094]表１０：２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の形態Ａのオスのビーグル犬への２ｍｇ／Ｋｇの１回の経口投与後の血漿中濃度及び薬物動態学的パラメーター。

[0095]非晶質の固体及び一水和物の結晶形態Ａの両方は、類似の薬物動態学的特性及び低い個体間の変化を示す。これらは、一水和物の結晶形態Ａの好ましい、そして予期しなかった特性である。

[0096]これの多くの態様を記載してきたが、本出願人等の基本的な実施例は、本開示の化合物及び方法を使用する他の態様を提供するために変更することができることは明白である。従って、本開示の範囲が、実施例として提示された具体的な態様によるより、付属する特許請求の範囲によって定義されることは認識されるものである。

[0097]本出願を通して引用される全ての参考文献（参考文献、公開された特許、公開された特許出願、及び同時係争中の特許出願）の内容は、これによって本明細書中にその全てが参考文献として明確に援用される。他に定義しない限り、本明細書中に使用される全ての技術的及び科学的用語は、当業者によって共通に知られた意味に一致する。

Claims (12)

1. ２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミドの結晶形態Ａであって、前記結晶形態は、一水和物であり、４．７３°±０．２°、１８．０９°±０．２°、１８．８０°±０．２°、１９．７０°±０．２°、及び２５．１７°±０．２°から選択される２Θ角中の少なくとも三つのＸ線粉末回折ピークによって特徴づけられる、前記結晶形態Ａ。
2. 前記結晶形態が、４．７３°±０．２°、１８．０９°±０．２°、１８．８０°±０．２°、１９．７０°±０．２°、及び２５．１７°±０．２°から選択される２Θ角中の少なくとも四つのＸ線粉末回折ピークによって特徴づけられる、請求項１に記載の結晶形態Ａ。
3. 前記結晶形態が、４．７３°±０．２°、１８．０９°±０．２°、１８．８０°±０．２°、１９．７０°±０．２°、及び２５．１７°±０．２°の２Θ角におけるＸ線粉末回折ピークによって特徴づけられる、請求項１又は２に記載の結晶形態Ａ。
4. 前記結晶形態が、４．７３°、９．４２°、１２．９１°、１８．０９°、１８．４８°、１８．８０°、１９．７０°、２１．４２°、及び２５．１７°の２Θ角におけるＸ線粉末回折ピークによって特徴づけられる、請求項１〜３のいずれか１項に記載の結晶形態Ａ。
5. 前記結晶形態が、４．７３°、８．１１°、９．４２°、１２．９１°、１４．１０°、１４．９７°、１８．０９°、１８．４８°、１８．８０°、１９．７０°、２１．４２°、２５．１７°、２６．０７°、及び２６．５３°の２Θ角におけるＸ線粉末回折ピークによって特徴づけられる、請求項１〜４のいずれか１項に記載の結晶形態Ａ。
6. 請求項１〜５のいずれか１項に記載の結晶形態；及び医薬的に受容可能な担体又は希釈剤を含んでなる医薬組成物。
7. ブロモドメイン含有タンパク質が媒介する疾患の治療に使用するための医薬組成物であって、請求項１〜５のいずれか１項に記載の結晶形態を含んでなる、前記医薬組成物。
8. 前記疾患が、増殖性疾患、炎症性疾患、敗血症、自己免疫性疾患、又はウイルス性感染である、請求項７に記載の医薬組成物。
9. 請求項１〜５のいずれか１項に記載の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド一水和物の結晶形態Ａを調製するための方法であって：
   非晶質の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド及び水を含んでなる溶液から；又は非晶質の２−（（４Ｓ）−６−（４−クロロフェニル）−１−メチル−４Ｈ−ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５−ｅ］アゼピン−４−イル）アセトアミド、並びに水及び有機溶媒の組合せを含んでなる混合物から、一水和物の結晶形態Ａを形成することを含んでなる、前記方法。
10. 前記水及び有機溶媒の組合せが、エタノール／水、イソプロパノール／水、テトラヒドロフラン／水、アセトン／水、メタノール／水、及びアセトニトリル／水から選択される、請求項９に記載の方法。
11. 前記水及び有機溶媒の組合せが、エタノール／水である、請求項９又は１０に記載の方法。
12. 前記水及び有機溶媒の組合せが、エタノール／水の６０：４０の混合物である、請求項９〜１１のいずれか１項に記載の方法。

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