JP6030447B2 - 緑茶抽出物を含有する組成物 - Google Patents
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Description
以下、本発明の好ましい実施例等を通じて本発明についてさらに詳述するが、以下の実施例等は、本発明の効果を例示的に確認するためのものであり、本発明のカテゴリがこれらにのみ限定されるものではない。
実施例1:緑茶抽出物の熱水抽出
実験に使用された初摘緑茶は、韓国産済州緑茶を使用した。初摘緑茶を、熱水抽出工程を経て分離・精製した。具体的な熱水抽出工程については、図1に示したとおりである。
実施例1による初摘緑茶抽出物に対する成分含量を確認する実験を行った。具体的には、第三者機関である「健康機能食品院」を通じて、カテキン、アミノ酸及びカフェインの含量を分析した。分析の結果については、下記表1、表2及び表3のとおりである。
[ステップ1]脂肪細胞の培養と分化誘導
マウスの未分化脂肪細胞3T3−L1脂肪細胞(3T3−L1 adipocyte、ATCCから購入)を、10%胎児血清(calf serum,Gibco co.米国)をDMEM(Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium,Lonza,12−604F,米国)に添加した培地において培養した。2日に1回ずつ培地を交換しながら、80%融合するまで、37℃の10%CO2培養器において培養した。その次に、10%のウシ胎児血清(fetal bovine serum,Gibco co.米国)、0.5mMの3−イソブチル−1−メチルキサンチン(3−isobutyl−1−methylxanthine,Sigma co.米国)、1μMのデキサメタゾン(dexamethasone,Sigma co.米国)及び167nMのインスリン(insulin,Sigma co.米国)を含む培地において48時間培養後、その培地を、10%のウシ胎児血清(fetal bovine serum)と167nMのインスリンを含むDMEM培地に交換し、さらに48時間培養した。最後に、10%のウシ胎児血清(fetal bovine serum)のみを含む培地で48時間さらに培養し、分化した脂肪細胞を得た。
完全分化を誘導した後、脂肪細胞から培養液を分離してPBSで洗浄した後、2%の遊離脂肪酸ウシ血清アルブミン(Free Fatty Acid Bovine Serum Albumin,Sigma co.米国)を低濃度のグルコースDMEM(With 1000mg/L D−glucose,Without L−glutamine,Without phenol−red,LM001−04,Welgene,韓国)に添加した培地に交換し、24時間、10%CO2培養器で培養した。低濃度グルコースDMEM培地に、陽性対照群には茶カテキン製品(70%,PFI co.Japan)を、陰性対照群には一般緑茶熱水抽出物(BTC,韓国)を、実験群には済州産緑茶から採った初摘緑茶熱水抽出物(Bioland,韓国)を、それぞれ50ppm,100ppm,200ppmで処理し、37℃の10%CO2培養器で培養した。
前記ステップ2で培養された細胞の培地をそれぞれ回収し、マイクロプレート(microplate)にそれぞれ50μlずつ分注した後、遊離脂肪酸測定キット(Roche,Cat♯.1−383−175,Germany)の反応混合物Aを、サンプルと同量の50μlずつを各セクションに分注し、25℃で10分間反応させた後、N−エチル−マレイミド溶液(N−ethyl−maleinimide solution)5μlを各セクションに分注し、初期吸光度546nmで測定した。反応混合物Bを各セクションに5μlずつ分注し、よく混ぜて与えた。その次に、25℃で15分間反応させた後、最終吸光度を測定した。ブランク(Blank)の吸光度を基準に最終値から初期値を差し引いた数を、各サンプルの差の値から除いた数値を最終遊離酸の濃度と決定した。結果は、図2に示した。
[ステップ1]試料の準備
動物実験に、対照的として使用された茶カテキン(70%,Pharmafood Inc.日本)200mpkは、毎日、経口投与前にHPLCグレードH2O(Sigma co.米国)に溶かして準備し、実験群に使用された初摘緑茶熱水抽出物(Bioland, 韓国)もまた、100mpk,200mpk,400mpkの濃度で、経口投与前にHPLCグレードH2Oに溶かして準備した。
本実験を行うために、7週齢のC57BL/6J雄マウスを対象に、1群当たり10匹ずつ準備し、1週間の適応期間を持たせた後、個別に檻に分離して、12時間の間隔で昼(7時〜17時)と夜の周期により管理した。群は、1)一般飼料群(一般飼料)、2)高脂肪食餌群(対照群)、3)高脂肪食餌及び茶カテキン200mpk摂取群(茶カテキン)、4)高脂肪食餌及び初摘緑茶熱水抽出物100mpk摂取群(初摘緑茶100mpk)、5)高脂肪食餌及び初摘緑茶熱水抽出物200mpk摂取群(初摘緑茶200mpk)、6)高脂肪食餌及び初摘緑茶熱水抽出物400mpk摂取群(初摘緑茶400mpk)の合計6つの群に分けられ、1日1回ずつ、8週間、一定の時間(午前10時)に経口投与し、対照群である高脂肪食餌群の10匹には、同量の水を投与した。
長期毒性実験は、茶カテキン及び初摘緑茶熱水抽出物を多様な濃度で8週間投与して、肥満予防及び治療等の試験に利用されたC57BL/6Jマウスを対象に実験した。
初摘緑茶抽出物100mg、大豆抽出物50mg、大豆油180mg、紅参抽出物50mg、パーム油2mg、パーム硬化油8mg、蜜蝋4mg及びレシチン6mgを混合し、通常の方法により、1カプセル当たり400mgずつ充填して軟質カプセルを製造した。
初摘緑茶抽出物100mg、大豆抽出物50mg、ブドウ糖100mg、紅参抽出物50mg、澱粉96mg及びステアリン酸マグネシウム4mgを混合し、30%エタノールを40mg添加して顆粒を形成した後、60℃で乾燥し、打錠機を利用して錠剤で打錠した。
初摘緑茶抽出物100mg、大豆抽出物50mg、ブドウ糖100mg、紅参抽出物50mg及び澱粉600mgを混合し、30%エタノールを100mg添加して顆粒を形成した後、60℃で乾燥し、顆粒を形成して包に充填した。内容物の最終的な重量は1gとした。
初摘緑茶抽出物100mg、大豆抽出物50mg、ブドウ糖10g、紅参抽出物50mg、クエン酸2g及び精製水187.8gを混合し、瓶に充填した。内容物の最終容量は200mlとした。
初摘緑茶抽出物 1000mg
ビタミン混合物
ビタミンAアセテート 70μg
ビタミンE 1.0mg
ビタミンB1 0.13mg
ビタミンB2 0.15mg
ビタミンB6 0.5mg
ビタミンB12 0.2μg
ビタミンC 10mg
ビオチン 10μg
ニコチン酸アミド 1.7mg
葉酸 50μg
パントテン酸カルシウム 0.5mg
ミネラル混合物
硫酸第一鉄 1.75mg
酸化亜鉛 0.82mg
炭酸マグネシウム 25.3mg
第一リン酸カリウム 15mg
第二リン酸カルシウム 55mg
クエン酸カリウム 90mg
炭酸カルシウム 100mg
塩化マグネシウム 24.8mg
前記ビタミン及びミネラル混合物の組成比は、比較的健康食品に適した成分を好ましい実施例として混合組成したが、その配合比を任意に変形実施してもよく、通常の健康食品の製造方法により前記成分を混合した後に顆粒を製造し、通常の方法により健康食品組成物の製造に使用することができる。
初摘緑茶抽出物 1000mg
クエン酸 1000mg
オリゴ糖 100g
梅濃縮液 2g
タウリン 1g
精製水を加えた全体 900ml
通常の健康飲料の製造方法により前記成分を混合した後、約1時間、85℃で攪拌加熱した後、作られた溶液を濾過し、滅菌された2l容器に取得して密封滅菌した後、冷蔵保管してから本発明の健康飲料組成物の製造に使用する。
Claims (7)
- 初摘緑茶抽出物を有効成分として含み、
前記初摘緑茶抽出物において、該初摘緑茶抽出物全体の乾燥重量を基準として、EGCG(Epigallocatechin gallate)の含量が7重量%〜20重量%であり、カフェインの含量が2.5重量%〜4.5重量%であり、総アミノ酸含量が4.5重量%〜10重量%であり、
前記初摘緑茶抽出物は、熱水抽出物であり、
前記アミノ酸には、前記初摘緑茶抽出物全体の乾燥重量を基準として2重量%〜5重量%のテアニンが含まれている、抗肥満用組成物。 - 初摘緑茶抽出物を有効成分として含み、
前記初摘緑茶抽出物において、該初摘緑茶抽出物全体の乾燥重量を基準として、EGCG(Epigallocatechin gallate)の含量が7重量%〜20重量%であり、カフェインの含量が2.5重量%〜4.5重量%であり、総アミノ酸含量が4.5重量%〜10重量%であり、
前記初摘緑茶抽出物は、熱水抽出物であり、
前記アミノ酸には、前記初摘緑茶抽出物全体の乾燥重量を基準として2重量%〜5重量%のテアニンが含まれている、糖尿病の治療又は予防用組成物。 - 初摘緑茶抽出物を有効成分として含み、
前記初摘緑茶抽出物において、該初摘緑茶抽出物全体の乾燥重量を基準として、EGCG(Epigallocatechin gallate)の含量が7重量%〜20重量%であり、カフェインの含量が2.5重量%〜4.5重量%であり、総アミノ酸含量が4.5重量%〜10重量%であり、
前記初摘緑茶抽出物は、熱水抽出物であり、
前記アミノ酸には、前記初摘緑茶抽出物全体の乾燥重量を基準として2重量%〜5重量%のテアニンが含まれている、脂質異常症の治療又は予防用組成物。 - 初摘緑茶抽出物を有効成分として含み、
前記初摘緑茶抽出物において、該初摘緑茶抽出物全体の乾燥重量を基準として、EGCG(Epigallocatechin gallate)の含量が7重量%〜20重量%であり、カフェインの含量が2.5重量%〜4.5重量%であり、総アミノ酸含量が4.5重量%〜10重量%であり、
前記初摘緑茶抽出物は、熱水抽出物であり、
前記アミノ酸には、前記初摘緑茶抽出物全体の乾燥重量を基準として2重量%〜5重量%のテアニンが含まれている、高血圧の治療又は予防用組成物。 - 初摘緑茶抽出物を有効成分として含み、
前記初摘緑茶抽出物において、該初摘緑茶抽出物全体の乾燥重量を基準として、EGCG(Epigallocatechin gallate)の含量が7重量%〜20重量%であり、カフェインの含量が2.5重量%〜4.5重量%であり、総アミノ酸含量が4.5重量%〜10重量%であり、
前記初摘緑茶抽出物は、熱水抽出物であり、
前記アミノ酸には、前記初摘緑茶抽出物全体の乾燥重量を基準として2重量%〜5重量%のテアニンが含まれている、動脈硬化の治療又は予防用組成物。 - 初摘緑茶抽出物を有効成分として含み、
前記初摘緑茶抽出物において、該初摘緑茶抽出物全体の乾燥重量を基準として、EGCG(Epigallocatechin gallate)の含量が7重量%〜20重量%であり、カフェインの含量が2.5重量%〜4.5重量%であり、総アミノ酸含量が4.5重量%〜10重量%であり、
前記初摘緑茶抽出物は、熱水抽出物であり、
前記アミノ酸には、前記初摘緑茶抽出物全体の乾燥重量を基準として2重量%〜5重量%のテアニンが含まれている、狭心症の治療又は予防用組成物。 - 初摘緑茶抽出物を有効成分として含み、
前記初摘緑茶抽出物において、該初摘緑茶抽出物全体の乾燥重量を基準として、EGCG(Epigallocatechin gallate)の含量が7重量%〜20重量%であり、カフェインの含量が2.5重量%〜4.5重量%であり、総アミノ酸含量が4.5重量%〜10重量%であり、
前記初摘緑茶抽出物は、熱水抽出物であり、
前記アミノ酸には、前記初摘緑茶抽出物全体の乾燥重量を基準として2重量%〜5重量%のテアニンが含まれている、心筋梗塞の治療又は予防用組成物。
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