JP5439551B2

JP5439551B2 - ブロック共重合体の塗膜

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Publication number: JP5439551B2
Application number: JP2012172861A
Authority: JP
Inventors: 和敏原口; 和臣久保田; 哲生高田; 典子山東
Original assignee: Kawamura Institute of Chemical Research; DIC Corp
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Priority date: 2011-08-15
Filing date: 2012-08-03
Publication date: 2014-03-12
Anticipated expiration: 2032-08-03
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Description

本発明は、（メタ）アクリル酸エステル系モノマーの重合体と（メタ）アクリルアミド系モノマーの重合体からなるブロック共重合体に関する。

異なるポリマーセグメントからなるブロック共重合体は、各々のポリマーセグメントの性質が現れ、機能するため、接着剤や高分子界面活性剤、熱可塑性樹脂などとして有用である。例えば、炭素数４〜１２のアルキル基を有する（メタ）アクリル酸アルキルエステル系モノマーの重合体Ａと酢酸ビニル、アクリル酸メチル、メタクリル酸メチル、スチレン、及びアクリロニトリルから選ばれる少なくとも１種を主成分とする重合体ＢからなるＡ−Ｂ型ブロック共重合体からなる粘着剤組成物が平滑な基材に対して良好な粘着性および再剥離性を有し、再剥離時粘着剤が基材に残らないことが開示されている（特許文献１参照）。

また、ガラス転移温度が−６０〜−２０℃のビニル系重合体よりなるＡセグメントと、ガラス転移温度が５０〜１３０℃のビニル系重合体よりなるＢセグメントとから構成され粉状又は粒状のＡ−Ｂ型ブロック共重合体及び熱可塑性樹脂を含有するものが、流動性に優れ、得られる成形体の耐衝撃性及び外観に優れることが開示されている（特許文献２参照）。

更に、ポリ−Ｎ−イソプピルアクリルアミド−ポリ−Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミド−ポリ−Ｎ−イソプロピルアクリルアミドのＡ−Ｂ−Ａ型ブロック共重合体が、水中で相転移温度（約３２℃）以上に加熱することにより、Ａセグメントが親水性から疎水性へと転移し、共重合体が自己凝集することが報告されている（非特許文献１参照）。

上記に示すＡ−Ｂ−Ａ型ブロック共重合体は、相転移温度以下では親水性であり、基材との間に接着性を有していないが、相転移温度以上になると、Ａセグメントが疎水性へと転移し、高いタンパク吸着性を示すと思われる。
その他、Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミドやＮ−メチルアクリルアミドに由来する繰り返し単位からなるブロックと、ヒドロキシル基を有する（メタ）アクリル酸エステル系単量体またはヒドロキシル基を有するスチレン系単量体に由来する繰り返し単位からなるブロックとからなるアミド系ブロック共重合体が血小板を高い収率で透過する白血球除去フィルターコート剤として有効であることが報告されている（特許文献３参照）。

更に、メトキシエチル（メタ）アクリレートとＮ−イソプロピルアクリルアミドからなる星型ブロック共重合体が、相転移温度以下で水溶性であり、相転移温度以上で疎水性であることを利用して、該ブロック共重合体の低温の水溶液を医療器具に塗布し、その後相転移温度以上にすることにより該ブロック共重合体を医療器具に付着させる方法が報告されており、抗血栓性材料に利用されている（特許文献４参照）。

一方、生化学や医療分野分野においては、皮膜形成能に優れ、且つ基材との接着性にも優れ、且つタンパク質を吸着しない性質を持つ共重合体が求められている。しかしながら、上記のブロック共重合体に関する特許文献を含めても、このような特性を満足する共重合体は開示されていない。

特開平１０−２５１６０９特開２０１１−６５５５特開２００４−３３９１６５特開２００８−１９４３６３

ＭａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒＣｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＰｈｙｓｉｃｓ、２０９、１３８９-１４０３（２００８）

従って、本発明が解決しようとする課題は、皮膜形成能に優れ、且つ基材との接着性にも優れ、且つタンパク質を吸着しない性質を持つ共重合体、特にブロック共重合体を提供することにある。

本発明者等は、上記課題を解決すべく鋭意研究した結果、（メタ）アクリル酸エステル系モノマー（ａ）の重合体（Ａ）と（メタ）アクリルアミド系モノマーの重合体（Ｂ）からなるブロック共重合体が、皮膜形成能に優れ、且つ基材との接着性が良好であり、該ブロック共重合体からなる塗膜が、タンパク質を吸着しない性質を有することを見出し、本発明を完成するに至った。

即ち、本発明は、下記一般式（１）で表されるモノマー（ａ）を含むモノマーの重合体（Ａ）と、下記式（２）〜（７）で表されるモノマー（ｂ）からなる群より選択される１種以上のモノマーを含むモノマーの重合体（Ｂ）からなるブロック共重合体の塗膜を提供する。

（１）

（６）

（式（１）〜（７）中、Ｒ_０は炭素原子数１〜３のアルキル基、Ｒ_１は水素原子またはメチル基、Ｒ_２、Ｒ_７はそれぞれ独立に炭素原子数２〜３のアルキレン基、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６はそれぞれ独立に水素原子または炭素原子数１〜２のアルキル基、Ｘは−ＣＯ_２ ⁻、−ＳＯ_３ ⁻、−ＯＳＯ_３ ⁻、−ＯＳＯ_２ ⁻、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ_８）Ｏ⁻、−ＯＰ（＝Ｏ）（Ｒ_８）Ｏ⁻、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ_８）Ｏ⁻、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｒ_８）Ｏ⁻から選ばれる一価のアニオン、Ｒ_８は炭素原子数１〜３のアルキル基であり、ｎは１〜９の整数である。）

また、本発明は、前記ブロック共重合体の塗膜を提供する。
また、本発明は、前記塗膜表面を有するタンパク質吸着防止材を提供する。
また、本発明は、前記塗膜表面を有する細胞培養基材を提供する。

本発明のブロック共重合体は、重合体（Ａ）と重合体（Ｂ）の親／疎水バランスが良好で、溶剤に対する溶解性は勿論のこと、水に対しても良好な溶解性または分散性を示し、水溶液または均一性の高い水分散液を作製することが容易である。該共重合体の水溶液または水分散液は、沈殿や粘度変化、変色などの物性変化が小さく安定性が高い。また本発明のブロック共重合体は良好な皮膜形成能を有し、得られた皮膜は、高い透明性と、良好な弾性率と柔軟性、屈曲性を有する。また、本発明のブロック共重合体からなる塗膜は、大気中で安定して用いられるばかりでなく、水中でも膨潤せず優れた力学物性を示す特徴を有する。更に、本発明のブロック共重合体からなる塗膜は、特に低いタンパク吸着性に優れるため、細胞培養基材や、各種生化学・医療用具の表面改質剤として有用である。

本発明で用いるモノマー（ａ）としては、（ポリ）プロピレングリコールアルキルエーテル（メタ）アクリレートや（ポリ）エチレングリコールアルキルエーテル（メタ）アクリレートを使用する。好ましくは下記一般式（１）のモノマー（ａ）が用いられる。

（１）

（式中、Ｒ_０は炭素原子数１〜３のアルキル基、Ｒ_１は水素原子またはメチル基、Ｒ_２は炭素原子数２〜３のアルキレン基であり、ｎは１〜９の整数である。）
モノマー（ａ）の使用により、共重合体の皮膜形成能、並びに基材との接着性がよく、塗膜の厚み制御幅が広く、より平滑な塗膜が得られる。該塗膜表面はタンパク質の吸着性が低い性質を有する。

前記一般式（１）で表されるモノマー（ａ）の中でも、ｎが１〜３である化合物が好ましく、２−メトキシエチルアクリレート、２−エトキシエチルアクリレート、メチルカルビトールアクリレート、エチルカルビトールアクリレート、メトキシトリエチレングリコールアクリレート、エトキシトリエチレングリコールアクリレートがより好ましく、２−メトキシエチルアクリレート、２−エトキシエチルアクリレートが特に好ましい。
本発明における重合体（Ａ）は、前記モノマー（ａ）のみを重合させた重合体である。

モノマー（ａ）以外に使用できるモノマーとしては、下記式（２）〜（７）で表されるモノマー、水酸基やグリシジル基、イソシアナト基、カルボキシル基、アミノ基、スルホン酸基などの官能基を有する（メタ）アクリル系モノマーがある。

本発明で用いるモノマー（ｂ）としては、（メタ）アクリルアミド、および／またはこれらの誘導体（Ｎ−またはＮ，Ｎ置換（メタ）アクリルアミド）である。特に好ましくは下記式（２）〜（７）のアクリルアミド系モノマーが用いられる。

（２）

（４）

（５）

（６）

（７）

（式（２）〜（７）中、Ｒ_１は水素原子またはメチル基、Ｒ_２、Ｒ_７はそれぞれ独立に炭素原子数２〜３のアルキレン基、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６はそれぞれ独立に水素原子または炭素原子数１〜２のアルキル基、Ｘは−ＣＯ_２ ⁻、−ＳＯ_３ ⁻、−ＯＳＯ_３ ⁻、−ＯＳＯ_２ ⁻、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ_８）Ｏ⁻、−ＯＰ（＝Ｏ）（Ｒ_８）Ｏ⁻、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ_８）Ｏ⁻、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｒ_８）Ｏ⁻から選ばれる一価のアニオン、Ｒ_８は炭素原子数１〜３のアルキル基であり、ｎは１〜９の整数である。）

モノマー（ｂ）の使用により、得られるブロック共重合体の水に対する溶解または分散性が良好で安定性も高く、共重合体の皮膜形成能がよく、より平滑な塗膜が得られる。また、モノマー（ｂ）としてＮ，Ｎ−ジメチルアクリルアミドを用いた場合、得られる塗膜表面に対し、細胞が非常に低い接着性を示し、浮遊状態での細胞培養に適している。

重合体（Ｂ）はモノマー（ｂ）を含む重合体であり、重合体（Ｂ）としては前記一般式（２）〜（７）で表されるモノマー（ｂ）からなる重合体であるか、もしくは他のモノマーとの共重合体が含まれる。共重合体で用いられる他のモノマーとしては、モノマー（ａ）が好ましく用いられ、モノマー（ｂ）：モノマー（ａ）の比率（モル比）は、９９：１〜１０：９０、より好ましくは９５：５〜３０：７０、更に好ましくは９０：１０〜５０：５０、特に好ましくは９０：１０〜６０：４０である。かかるモノマー（ｂ）とモノマー（ａ）からなる共重合体はブロック共重合体をより容易に合成できる特徴も有する。

更に、重合体（Ｂ）または共重合体（Ｂ）において、前記一般式（１）〜（７）で表されるモノマーに加えて、ブロック共重合体の親／疎水性のバランスを調整したり、タンパク質との相互作用を更に低く抑えるための官能基を付与するために、必要に応じてその他の共重合モノマーを併用することができる。例えば、スルホン基やカルボキシル基のようなアニオン基を有するアクリル系モノマー、４級アンモニウム基のようなカチオン基を有するアクリル系モノマー、４級アンモニウム基と燐酸基とを持つ両性イオン基を有するアクリル系モノマー、カルボキシル基とアミノ基とをもつアミノ酸残基を有するアクリル系モノマー、糖残基を有するアクリル系モノマー、また、水酸基を有するアクリル系モノマー、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール鎖を有するアクリル系モノマー、更にポリエチレングリコールのような親水性鎖とノニルフェニル基のような疎水基を合わせ持つ両親媒性アクリル系モノマー、ポリエチレングリコールジアクリレート、Ｎ，Ｎ’−メチレンビスアクリルアミドなどを併用することができる。

本発明のブロック共重合体は、前記諸性質を示すものであれば、重合体（Ａ）と（Ｂ）の並び方は必ずしも限定されず、例えば、Ａ−Ｂ型、Ａ−Ｂ−Ａ型、Ｂ−Ａ−Ｂ型、［Ｂ−Ａ］_ｐで表される（ｐはＢの分岐数で、３〜１０である）が好適に使用されるが、この内、Ａ−Ｂ型、Ａ−Ｂ−Ａ型、［Ｂ−Ａ］_ｐ多分岐型がより好ましく、Ａ−Ｂ−Ａ型、［Ｂ−Ａ］_ｐ多分岐型が最も好ましい。ここでいう［Ｂ−Ａ］_ｐ多分岐型とは、下記構造例に示すものをいう。

［Ｂ−Ａ］_４型

本発明のブロック共重合体中のＡ成分とＢ成分のモル比（Ａ：Ｂ）が、１：６０〜６０：１の範囲が好ましく、１：２０〜２０：１の範囲がより好ましく、１：２０〜１：１の範囲が最も好ましい。ＡとＢのモル比がこの範囲であると、得られるブロック共重合体の水に対する溶解または分散性が良好で安定性も高く、共重合体の皮膜形成能がよく、より平滑な塗膜が得られる。また、塗膜表面のタンパク質に対する吸着性も低く、細胞培養性／剥離性が良好であり、好ましい。

また、Ａ−Ｂ−Ａ型ブロック共重合体において、Ａの重合度が３０〜３０００、Ｂの重合度が２０〜２００００の範囲が好ましく、Ａの重合度が１００〜１０００、Ｂの重合度が１００〜５０００の範囲がより好ましく、Ａの重合度が１００〜５００、Ｂの重合度が２００〜２０００の範囲が特に好ましい。この範囲であると、得られるブロック共重合体の水に対する溶解または分散性が良好で水性塗料の作製が容易であり、また、皮膜形成能がよく、得られる塗膜表面のタンパク質に対する吸着性も低く、細胞培養性／剥離性が良好であり、好ましい。

本発明のブロック共重合体は、モノマー（ａ）と（ｂ）がそれぞれ重合し、重合体（Ａ）と重合体（Ｂ）からなるブロック共重合体を合成できれば、製造方法は特に限定されない。例えば公知慣用の重合法として、第１の方法は、トリチオカーボネートのような連鎖移動剤（以下ＲＡＦＴ剤という）の存在下に、ラジカル重合開始剤としてアゾ化合物及び／又は有機過酸化物を用いて、先ずモノマー（ａ）をリビングラジカル重合させ、得られた重合体（Ａ）にモノマー（ｂ）をリビングラジカル重合させる方法、第２の方法は、有機ハロゲン化物と遷移金属錯体の存在下、モノマー（ｂ）をラジカル重合させ、次いで、モノマー（ａ）を添加し、ラジカル重合させるブロック共重合体の合成方法が挙げられる。

特に、ブロック共重合体の合成法としては、公知のリビングラジカル重合法のうち、次に挙げる（１−１）ないし（２−２）の方法が好ましい。
（１−１）第１の方法において、少量の重合開始剤の存在下、ＲＡＦＴ剤とモノマー（ａ）を重合させた後、単離精製して重合体（Ａ）のみからなるマクロＲＡＦＴ剤を合成し、該マクロＲＡＦＴ剤とモノマー（ｂ）を、少量の重合開始剤存在下重合させてブロック共重合体を得る方法。
（１−２）第２の方法において、有機ハロゲン化物と遷移金属錯体の存在下、モノマー（ｂ）を重合させた後、単離精製して重合体（Ｂ）のみからなる高分子末端ハロゲン化物を合成し、該高分子末端ハロゲン化物に遷移金属錯体の存在下、モノマー（ａ）を重合させてブロック共重合体を得る方法。
（２−１）第１の方法において、少量の重合開始剤の存在下、ＲＡＦＴ剤とモノマー（ａ）を重合させ、ついで単離することなくモノマー（ｂ）を追加し、ブロック共重合体を得る方法。
（２−２）第２の方法において、有機ハロゲン化物と遷移金属錯体の存在下、モノマー（ｂ）を重合させ、ついで単離することなくモノマー（ａ）を追加し、ブロック共重合体を得る方法。
（２−１）、（２−２）の方法の場合、最初のモノマーが完全に消費されるのを待って次のモノマーを添加する必要はなく、最初のモノマーの転化率が約６５％以上になった時点で次のモノマーを添加すればよい。この場合に得られる重合体は、完全なブロック共重合体ではなく、一部モノマー（ａ）とモノマー（ｂ）とが混在した、いわゆるＴａｐｅｒｅｄブロック共重合体となるが、モノマー（ａ）とモノマー（ｂ）の比率を適切に選べば、完全なブロック共重合体と同等の機能を有する共重合体が得られる。

本発明において、重合体（Ｂ）がモノマー（ａ）とモノマー（ｂ）の共重合体からなるブロック共重合体を得るためには、上記（２−１）、（２−２）の方法に加えて、モノマー（ａ）とモノマー（ｂ）の混合物を重合する方法を用いることができる。

本発明において、タンパク質吸着は、ＨＲＰ標識した免疫グロブリンＧをＴＭＢ発色剤にて発色させた時、４５０ｎｍでの吸光度が０．５以下であることが好ましく、０．２以下であるとより好ましい。

本発明では、細胞培養基材として多種の材質を用いることが出来る特徴を有する。例えば、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリウレタン（ＰＵ）などのほか、ポリプロピレン（ＰＰ）や、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）が用いられる。また、ガラス、金属などの素材も好適に用いられる。基材の形状としては板状、シート状、ストロー状、糸状、球状など任意の形状に塗膜を作製することができる。

本発明のブロック共重合体は、コーティング用塗料特に水性塗料として、細胞培養基材や、各種生化学・医療用具の表面改質剤として有用である。

以下、実施例により本発明を具体的に説明するが、本発明の範囲がこれらの実施例にのみ限定されるものではない。

（実施例１）
［ブロック共重合体の合成］
モノマー（ａ）として２−メトキシエチルアクリレート（東亞合成株式会社製）１．４６ｇ、ＲＡＦＴ剤として２−（Ｄｏｄｅｃｙｌｔｈｉｏｃａｒｂｏｎｏｔｈｉｏｙｌｔｈｉｏ）−２−ｍｅｔｈｙｌｐｒｏｐｉｏｎｉｃａｃｉｄ（シグマ−アルドリッチ社）０．０１６３ｇ、２，２’−アゾビスイソブチロニトリル０．０００７ｇ、１，４−ジオキサン１０ｍＬを窒素バブリングした後、７０℃、１３時間攪拌した。次いで、モノマー（ｂ）としてＮ，Ｎージメチルアクリルアミド（株式会社興人製）６．６６ｇ、１，４−ジオキサン１０ｍＬを添加し、更に７０℃、２４時間攪拌した。反応終了後、反応液をジエチルエーテルに投入し、更にジエチルエーテルで３回洗浄した後、真空乾燥させ、Ａ−Ｂ型ブロック共重合体を合成した。

［ポリマーの同定］
上記反応液を重クロロホルムに入れ、^１Ｈ−ＮＭＲ（日本電子（株）製ＪＮＭ−ＬＡ３００）測定を行った。その結果、モノマー（ａ）の転化率は１００％、モノマー（ｂ）の転化率は９６％であった。また、ブロック共重合体の構造は下記式（８）のように同定された。

（８）

上記転化率より、下記式（９）を用いて、重合体（Ａ）、重合体（Ｂ）及びブロック共重合体の理論分子量を算出した。その結果、Ａ−Ｂブロック共重合体における、重合体（Ａ）の理論分子量Ｍｎは約３２５００（２５０ｍｏｌ）、重合体（Ｂ）の理論分子量Ｍｎは約１４３０００（１４４０ｍｏｌ）、ブロック共重合体の理論分子量Ｍｎは約１７５５００であった。

（９）

［ブロック共重合体の塗膜作製］
上記得られたブロック共重合体０．５ｇを、９．５ｇの水に入れ、ポリマー水溶液１を得た。次いで、直径３５ｍｍのポリスチレン製シャーレ（ＣＯＲＮＩＮＧサスペンジョンカルチャデイッシュ４３０５８８）に薄く塗布した後乾燥させた。次いで、滅菌水によりシャーレを洗浄した後、乾燥させて、コートシャーレ１を得た。このコートシャーレ１を目視で観察したところ、塗布前と同等な透明度を有した。

［タンパク質吸着試験］
上記コートシャーレ１に、ＨＲＰ標識した免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）水溶液を１ｍＬ入れ、室温にて静置し、ＩｇＧの吸着を行った。次いでＰＢＳバッファーで３回リンスした後、ＴＭＢ発色剤（ＫＰＬ社製）を入れ、更に１Ｎの塩酸を入れた（シャーレ表面にタンパク質が残ると発色）。この溶液を、紫外可視分光光度計（日立株式会社製）を用いて、４５０ｎｍでの吸光度を測定して、タンパク質の吸着度合いを評価した。その結果、吸光度は０．１５７であった。一方、上記未コートポリスチレン製シャーレを用いて、同様なタンパク質吸着試験を行ったところ、吸光度は０．６２４であった。

［細胞接着試験］
上記得られたコートシャーレ１に、培地としてＨａｍ’ｓＦ１２／１０％ＦＣＳを適量入れ、ＣＨＯ−Ｋ１細胞（チャイニーズハムスター卵巣由来繊維芽細胞）を播種して（播種濃度は１×１０^４個／ｃｍ^２）５％二酸化炭素中、３７℃で３日間培養を行った。次いで、シャーレ中の培地及び浮遊している細胞を吸い取り、ＰＢＳバッファーで３回リンスした後、顕微鏡でシャーレ表面に細胞接着の有無を確認したところ、細胞は全くＰＢＳバッファーで洗い流され、シャーレ表面には接着した細胞は観察されなかった。
一方、上記未コートポリスチレン製シャーレを用いて、同様な培養試験を行ったところ、細胞がかなりの数でシャーレに接着していた。

以上の実施例より、上記ブロック共重合体が水に対し良好な溶解性を有し、容易に水性塗料を作製でき、得られた塗膜の透明度が高く、基材との接着性も良好であり、塗膜表面へのタンパク質の吸着が大きく抑制された。また、細胞の塗膜表面に対する細胞の接着性も低く、細胞を浮遊状態で培養できることが理解できる。

（実施例２）
［ＲＡＦＴ剤の合成］
非特許文献「Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ、３５、６７５４（２００２）」に従い、下記の手順でＲＡＦＴ剤「２−（１−Ｃａｒｂｏｘｙ−１−ｍｅｔｈｙｌｅｔｈｙｌｓｕｌｆａｎｙｌｔｈｉｏｃａｒｂｏｎｙｌｓｕｌｆａｎｙｌ）−２−ｍｅｔｈｙｌｐｒｏｐｉｏｎｉｃａｃｉｄ」を合成した。

アセトン２．６２ｇ、トリクロロメタン５．３８ｇ、テトラブチルアンモニウム硫酸水素塩０．１２ｇ、及び二硫化炭素１．３７ｇ、ヘキサン６ｍＬに５０％水酸化ナトリウムを１０．１ｇ入れ、５時間攪拌の後一晩静置したところ、反応液全体が固化した。水を４５ｍＬ加え固体を溶解した後、濃塩酸６ｍＬを入れ窒素バブリングすると、沈殿が生じた。この沈殿を濾別し、水洗した後、乾燥した。６０％のアセトン水溶液から再結晶して、淡黄色結晶９３４ｍｇを得た。

^１３Ｃ−ＮＭＲ（日本電子(株)製ＪＮＭ−ＬＡ３００）測定により、ＲＡＦＴ剤の構造は下記式（１０）のように同定された。

（１０）

［ブロック共重合体の合成］
モノマー（ａ）として２−メトキシエチルアクリレート（東亞合成株式会社製）２．９２ｇ、ＲＡＦＴ剤として上記合成した「２−（１−Ｃａｒｂｏｘｙ−１−ｍｅｔｈｙｌｅｔｈｙｌｓｕｌｆａｎｙｌｔｈｉｏｃａｒｂｏｎｙｌｓｕｌｆａｎｙｌ）−２−ｍｅｔｈｙｌｐｒｏｐｉｏｎｉｃａｃｉｄ」０．０１２７ｇ、２，２’−アゾビスイソブチロニトリル０．０００７ｇ、１，４−ジオキサン１０ｍＬを窒素バブリングした後、７０℃、１３時間攪拌した。次いで、モノマー（ｂ）としてＮ，Ｎージメチルアクリルアミド（株式会社興人製）６．６６ｇ、１，４−ジオキサン１０ｍＬを添加し、更に７０℃、２４時間攪拌した。反応終了後、反応液をジエチルエーテルに投入し、更にジエチルエーテルで３回洗浄した後、真空乾燥させ、Ａ−Ｂ−Ａ型ブロック共重合体を合成した。

［ポリマーの同定］
実施例１と同様にして、^１Ｈ−ＮＭＲ測定を行った。その結果、モノマー（ａ）の転化率は１００％、モノマー（ｂ）の転化率は９９．５％であった。また、ブロック共重合体の構造は下記式（１１）のように同定された。

（１１）

上記転化率より、前記式（９）を用いて、重合体（Ａ）、重合体（Ｂ）及びブロック共重合体の理論分子量を算出した。その結果、Ａ−Ｂ−Ａブロック共重合体における、重合体（Ａ）の理論分子量Ｍｎは約３２５００（２５０ｍｏｌ）、重合体（Ｂ）の理論分子量Ｍｎは約１４８０００（１４８０ｍｏｌ）、ブロック共重合体の理論分子量Ｍｎは約２１３０００であった。

［ブロック共重合体の塗膜作製］
上記得られたブロック共重合体を用いて、実施例１と同様にしてコートシャーレ２を作製した。このコートシャーレ２を目視で観察したところ、塗布前と同等な透明度を有した。

［タンパク質吸着試験］
上記コートシャーレ２を用いて、実施例１と同様にして、タンパク質吸着試験を行った。その結果、タンパク質吸着量（吸光度値）は０．０４４であった。また、基材をポリスチレンからガラス、ポリカーボネート、ＳＵＳに替えて同様の試験を実施したところ、塗膜と基材とは良好に密着し、タンパク質吸着量はそれぞれ０．０３９、０．０７３、０．０７６であった。

［細胞接着試験］
上記得られたコートシャーレ２を用いて、実施例１と同様にして、ＣＨＯ−Ｋ１細胞の培養試験を行った。その結果、コートシャーレ１と同様に、細胞がシャーレ表面に全く接着することなく浮遊状態で培養されていることが観察された。

以上の実施例より、上記ブロック共重合体が水に対し良好な溶解性を有し、容易に水性塗料を作製でき、得られた塗膜の透明度が高く、基材との接着性も良好であり、塗膜表面へのタンパク質の吸着が大きく抑制された。また、細胞の塗膜表面での接着性が低く、細胞を浮遊状態で培養できることが理解できた。

（実施例３）
［ブロック共重合体の合成］
モノマー（ｂ）の替わりにモノマー（ａ）の３．５０ｇとモノマー（ｂ）の４．００ｇの混合物を用いたこと以外は全て実施例２と同様にして、Ａ−Ｂ−Ａ型のブロック共重合体を合成した。反応終了後、反応液をジエチルエーテルに投入し、更にジエチルエーテルで３回洗浄した後、真空乾燥させ、Ａ−Ｂ−Ａ型ブロック共重合体を合成した。

［ポリマーの同定］
実施例１と同様にして、¹Ｈ−ＮＭＲ測定を行った。その結果、モノマー（ａ）の転化率は１００％、モノマー（ｂ）の転化率は９９．１％であった。
上記転化率より、前記式（９）を用いて、重合体（Ａ）、重合体（Ｂ）及びブロック共重合体の理論分子量を算出した。その結果、Ａ−Ｂ−Ａブロック共重合体における、重合体（Ａ）の理論分子量Ｍｎは約３２５００（２５０ｍｏｌ）、共重合体（Ｂ）の理論分子量Ｍｎは約１６６５００（１４９０ｍｏｌ）、ブロック共重合体の理論分子量Ｍｎは約２３１５００であった。

［ブロック共重合体の塗膜作製］
上記得られたブロック共重合体を用いて、実施例１と同様にしてコートシャーレ３を作製した。このコートシャーレ３を目視で観察したところ、塗布前と同等な透明度を有した。

［タンパク質吸着試験］
上記コートシャーレ３を用いて、実施例１と同様にして、タンパク質吸着試験を行った。その結果、タンパク質吸着量（吸光度値）は０．０４８であった。

［細胞接着試験］
上記得られたコートシャーレ３を用いて、実施例１と同様にして、CHO-K1細胞の培養試験を行った。その結果、コートシャーレ１と同様に、細胞がシャーレ表面に全く接着することなく浮遊状態で培養されていることが観察された。

以上の実施例より、上記ブロック共重合体が水に対し良好な溶解性を有し、容易に水性塗料を作製でき、得られた塗膜の透明度が高く、基材との接着性も良好であり、塗膜表面へのタンパク質の吸着が大きく抑制された。また、細胞の塗膜表面での接着性が低く、細胞を浮遊状態で培養できることが理解できる。

（実施例４）
［ブロック共重合体の合成］
モノマー（ａ）の重合時間を５時間としたこと以外は全て実施例２と同様にして、Ａ−Ｂ−Ａ型のブロック共重合体を合成した。モノマー（ａ）の重合時間５時間の時点でのモノマー（ａ）の転化率を^１Ｈ−ＮＭＲにて測定したところ、８１％であった。従って、重合体（Ｂ）部分には、モノマー（ｂ）に加えて、５時間の重合時間で反応しなかったモノマー（ａ）が含まれることが分かった。反応終了後、反応液をジエチルエーテルに投入し、更にジエチルエーテルで３回洗浄した後、真空乾燥させ、Ａ−Ｂ−Ａ型ブロック共重合体を合成した。

［ポリマーの同定］
実施例１と同様にして、^１Ｈ−ＮＭＲ測定を行った。その結果、モノマー（ａ）の転化率は約１００％、モノマー（ｂ）の転化率は約９９％であった。

上記転化率より、前記式（９）を用いて、重合体（Ａ）、重合体（Ｂ）及びブロック共重合体の理論分子量を算出した。その結果、Ａ−Ｂ−Ａブロック共重合体における、重合体（Ａ）の理論分子量Ｍｎは約３２５００（２００ｍｏｌ）、共重合体（Ｂ）の理論分子量Ｍｎは約１５９４００（１５８０ｍｏｌ）、ブロック共重合体の理論分子量Ｍｎは約２２４４００であった。

［ブロック共重合体の塗膜作製］
上記得られたブロック共重合体を用いて、実施例１と同様にしてコートシャーレ４を作製した。このコートシャーレ４を目視で観察したところ、塗布前と同等な透明度を有した。

［タンパク質吸着試験］
上記コートシャーレ４を用いて、実施例１と同様にして、タンパク質吸着試験を行った。その結果、タンパク質吸着量（吸光度値）は０．０４６であった。

［細胞接着試験］
上記得られたコートシャーレ４を用いて、実施例１と同様にして、ＣＨＯ−Ｋ１細胞の培養試験を行った。その結果、コートシャーレ１と同様に、細胞がシャーレ表面に全く接着することなく浮遊状態で培養されていることが観察された。

（実施例５）
［ブロック共重合体の合成］
モノマー（ａ）として２−メトキシエチルアクリレートの量が５．８３ｇ、モノマー（ｂ）としてＮ，Ｎージメチルアクリルアミドの量が２２．２１ｇであり、モノマー（ｂ）添加後の重合時間が４８時間で、溶媒の１，４−ジオキサンを合計６０ｍＬ使用したこと以外は実施例２と同様にして、重合体（Ａ）の重合度が５００、重合体（Ｂ）の重合度が５０００のＡ−Ｂ−Ａ型のブロック共重合体を合成した。

［ポリマーの同定］
実施例１と同様にして、^１Ｈ−ＮＭＲ測定を行った。その結果、モノマー（ａ）の転化率は１００％、モノマー（ｂ）の転化率は９７．０％であった。また、ブロック共重合体の構造は式（１１）のように同定された。

上記転化率より、前記式（９）を用いて、重合体（Ａ）、重合体（Ｂ）及びブロック共重合体の理論分子量を算出した。その結果、Ａ−Ｂ−Ａブロック共重合体における、重合体（Ａ）の理論分子量Ｍｎは約６５０００（５００ｍｏｌ）、重合体（Ｂ）の理論分子量Ｍｎは約４８００００（４８４０ｍｏｌ）、ブロック共重合体の理論分子量Ｍｎは約６１００００であった。

［ブロック共重合体の塗膜作製］
上記得られたブロック共重合体を用いて、実施例１と同様にしてコートシャーレ５を作製した。このコートシャーレ５を目視で観察したところ、塗布前と同等な透明度を有した。

［タンパク質吸着試験］
上記コートシャーレ５を用いて、実施例１と同様にして、タンパク質吸着試験を行った。その結果、タンパク質吸着量（吸光度値）は０．０６９であった。

［細胞接着試験］
上記得られたコートシャーレ５を用いて、実施例１と同様にして、ＣＨＯ−Ｋ１細胞の培養試験を行った。その結果、コートシャーレ１と同様に、細胞がシャーレ表面に全く接着することなく浮遊状態で培養されていることが観察された。

（実施例６）
［マクロＲＡＦＴ剤の合成］
モノマー（ａ）として２−メトキシエチルアクリレート（東亞合成株式会社製）５．８４ｇ、ＲＡＦＴ剤として上記合成した「２−（１−Ｃａｒｂｏｘｙ−１−ｍｅｔｈｙｌｅｔｈｙｌｓｕｌｆａｎｙｌｔｈｉｏｃａｒｂｏｎｙｌｓｕｌｆａｎｙｌ）−２−ｍｅｔｈｙｌｐｒｏｐｉｏｎｉｃａｃｉｄ」０．０２５４ｇ、２，２’−アゾビスイソブチロニトリル０．００１４ｇ、１，４−ジオキサン１０ｍＬを窒素バブリングした後、７０℃、１８時間攪拌し重合させた。反応終了後、反応液をジエチルエーテルに投入し、生成した黄色油状物を、更にジエチルエーテルで３回洗浄した後、真空乾燥させ、重合体（Ａ）のみからなるマクロＲＡＦＴ剤を合成した。
［マクロＲＡＦＴ剤を用いたブロック共重合体の合成］
Ｎ，Ｎージメチルアクリルアミド（株式会社興人製）６．６６ｇ、１段目で得られたマクロＲＡＦＴ剤２．６９ｇ、２，２’−アゾビスイソブチロニトリル０．０００７ｇ、１，４−ジオキサン１０ｍＬを窒素バブリングした後、７０℃、２４時間攪拌した。反応終了後、反応液をジエチルエーテルに投入し、更にジエチルエーテルで３回洗浄した後、真空乾燥させ、Ａ−Ｂ−Ａ型のブロック共重合体を合成した。

［ポリマーの同定］
実施例１と同様にして、^１Ｈ−ＮＭＲ測定を行った。その結果、モノマー（ａ）の転化率は９１．５％、モノマー（ｂ）の転化率は９４．８％であった。また、ブロック共重合体の構造は式（１１）のように同定された。

上記転化率より、前記式（９）を用いて、重合体（Ａ）、重合体（Ｂ）及びブロック共重合体の理論分子量を算出した。その結果、Ａ−Ｂ−Ａブロック共重合体における、重合体（Ａ）の理論分子量Ｍｎは約３００００（２３０ｍｏｌ）、重合体（Ｂ）の理論分子量Ｍｎは約１４１０００（１４２０ｍｏｌ）、ブロック共重合体の理論分子量Ｍｎは約２０１０００であった。

［ブロック共重合体の塗膜作製］
上記得られたブロック共重合体を用いて、実施例１と同様にしてコートシャーレ６を作製した。このコートシャーレ６を目視で観察したところ、塗布前と同等な透明度を有した。

［タンパク質吸着試験］
上記コートシャーレ６を用いて、実施例１と同様にして、タンパク質吸着試験を行った。その結果、タンパク質吸着量（吸光度値）は０．０５８であった。

［細胞接着試験］
上記得られたコートシャーレ６を用いて、実施例１と同様にして、ＣＨＯ−Ｋ１細胞の培養試験を行った。その結果、コートシャーレ１と同様に、細胞がシャーレ表面に全く接着することなく浮遊状態で培養されていることが観察された。

（実施例７）
［ブロック共重合体の合成］
モノマー（ａ）として２−メトキシエチルアクリレートの量が２．９２ｇ、モノマー（ｂ）としてＮ，Ｎージメチルアクリルアミド６．００ｇとＮ，Ｎ−ジメチルアミノプロピルアクリルアミド（株式会社興人製）１．０５ｇを添加すること以外は実施例２と同様にして、Ａ−Ｂ−Ａ型ブロック共重合体を合成した。引き続き、該ブロック共重合体１．０１７ｇをアセトニトリル１５ｍＬに溶解し、１，３−プロパンスルトン７４２ｍｇを加え、７日間室温に放置した。得られた溶液をジエチルエーテルに投入し、白色の沈殿を生成させた後、該沈殿を３回ジエチルエーテルにて洗浄した。ついで真空乾燥することにより、３−（Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）アンモニオ）プロピル基を有するブロック共重合体の白色粉末７４６ｍｇを合成した。

［ポリマーの同定］
実施例１と同様にして、上記Ａ−Ｂ−Ａ型ブロック共重合体の^１Ｈ−ＮＭＲ測定を行った。その結果、モノマー（ａ）の転化率は約１００％、モノマーＮ，Ｎージメチルアクリルアミドの転化率は約９５％、モノマーＮ，Ｎ−ジメチルアミノプロピルアクリルアミドの転化率は８５％であった。また、ブロック共重合体の構造は式（１２）のように同定された。

上記転化率より、前記式（９）を用いて、重合体（Ａ）、共重合体（Ｂ）及びブロック共重合体の理論分子量を算出した。その結果、Ａ−Ｂ−Ａブロック共重合体における、重合体（Ａ）の理論分子量Ｍｎは約３２５００（２５０ｍｏｌ）、共重合体（Ｂ）の理論分子量Ｍｎは約１６２０００（１４１０ｍｏｌ）、ブロック共重合体の理論分子量Ｍｎは約２２７０００であった。

［ブロック共重合体の塗膜作製］
上記得られたブロック共重合体を用いて、実施例１と同様にしてコートシャーレ７を作製した。このコートシャーレ７を目視で観察したところ、塗布前と同等な透明度を有した。

［タンパク質吸着試験］
上記コートシャーレ７を用いて、実施例１と同様にして、タンパク質吸着試験を行った。その結果、タンパク質吸着量（吸光度値）は０．０９０であった。

［細胞接着試験］
上記得られたコートシャーレ７を用いて、実施例１と同様にして、ＣＨＯ−Ｋ１細胞の培養試験を行った。その結果、コートシャーレ１と同様に、細胞がシャーレ表面に全く接着することなく浮遊状態で培養されていることが観察された。

（実施例８）
［ＲＡＦＴ剤の合成］
非特許文献「Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ、３６、１５０５（２００３）」に従い、下記の手順でＲＡＦＴ剤「テトラキス（３−１Ｓ−（１−メトキシカルボニル）エチルトリチオカルボニルプロピオン酸）ペンタエリスリトール」を合成した。

ジクロロメタン１０ｍＬ、ペンタエリスリトール（３−メルカプトプロピオネート）１．２２ｇ、二硫化炭素２．００ｇ、トリエチルアミン２．０４ｇを入れ、１時間攪拌した。ついで、２−ブロモプロピオン酸メチル１．９４ｇを入れ、更に５時間攪拌した後、５％ＫＨＳＯ_４水溶液で洗浄した。更に水洗の後、飽和食塩水で乾燥した。硫酸マグネシウム処理後、エバポレーターを用いてジクロロメタンを除いた。得られた橙色油状生成物を、ヘキサン／アセトンを溶離液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製してＲＡＦＴ剤「テトラキス（３−１Ｓ−（１−メトキシカルボニル）エチルトリチオカルボニルプロピオン酸）ペンタエリスリトール」を得た。^１Ｈ−ＮＭＲ測定により、該ＲＡＦＴ剤の構造は下記式（１３）のように同定された。

（１３）

［多分岐型ブロック共重合体の合成］
モノマー（ａ）として２−メトキシエチルアクリレートの量が２．９２ｇ、モノマー（ｂ）としてＮ，Ｎージメチルアクリルアミド６．６６ｇ、ＲＡＦＴ剤として式（１３）の化合物を０．０２５５ｇ使用すること以外は実施例２と同様にして、［Ｂ−Ａ］_４多分岐型ブロック共重合体を合成した。

［ポリマーの同定］
実施例１と同様にして、^１Ｈ−ＮＭＲ測定を行った。その結果、モノマー（ａ）の転化率は１００％、モノマー（ｂ）の転化率は９９．０％であった。また、ブロック共重合体の構造は式（１４）のように同定された。

上記転化率より、前記式（９）を用いて、重合体（Ａ）、重合体（Ｂ）及びブロック共重合体の理論分子量を算出した。その結果、[Ｂ−Ａ]_４多分岐型ブロック共重合体における、重合体（Ａ）の理論分子量Ｍｎは約３２５００（２５０ｍｏｌ）、重合体（Ｂ）の理論分子量Ｍｎは約７３３００（７４０ｍｏｌ）、ブロック共重合体の理論分子量Ｍｎは約４２３２００であった。

（１４）

［ブロック共重合体の塗膜作製］
上記得られたブロック共重合体０．５ｇを、９．５ｇの水に入れ、ポリマー水溶液８を得た。次いで、該水溶液８をポリプロピレン製１５ｍＬ遠沈管（アズワン製）に入れ、内面塗布後、乾燥させた。次いで洗浄後、乾燥させて、コート遠沈管８を得た。このコート遠沈管８を目視で観察したところ、塗布前と同等な透明度を有した。

［タンパク質吸着試験］
上記遠沈管８を用いて、実施例１と同様にして、タンパク質吸着試験を行った。その結果、吸光度は０．０５６であった。一方、上記未コートの遠沈管を用いて、同様なタンパク質吸着試験を行ったところ、吸光度は１．３７５であった。

以上の実施例より、上記多分岐型のブロック共重合体が水に対し良好な溶解性を有し、容易に水性塗料を作製でき、ポリプロピレン基材にも容易に塗布でき、基材との接着性も良好であり、塗膜表面へのタンパク質の吸着が大きく抑制されたことが理解できた。

（実施例９）

［多分岐型ブロック共重合体の合成］
モノマー（ａ）の重合時間を４時間とすること以外は実施例８と同様にして、[Ｂ-Ａ]_４多分岐型ブロック共重合体を合成した。モノマー（ａ）の重合時間４時間の時点でのモノマー（ａ）の転化率を¹Ｈ−ＮＭＲにて測定したところ、７５％であった。従って、重合体（Ｂ）部分には、モノマー（ｂ）に加えて、４時間の重合時間で反応しなかったモノマー（ａ）が含まれることが分かった。

［ポリマーの同定］
実施例１と同様にして、^１Ｈ−ＮＭＲ測定を行った。その結果、モノマー（ａ）の転化率は約１００％、モノマー（ｂ）の転化率は約９７．２％であった。

上記転化率より、前記式（９）を用いて、重合体（Ａ）、重合体（Ｂ）及びブロック共重合体の理論分子量を算出した。その結果、[Ｂ−Ａ]_４多分岐型ブロック共重合体における、重合体（Ａ）の理論分子量Ｍｎは約２４４００（１９０ｍｏｌ）、共重合体（Ｂ）の理論分子量Ｍｎは約８０１００（７９０ｍｏｌ）、ブロック共重合体の理論分子量Ｍｎは約４１８０００であった。

［ブロック共重合体の塗膜作製］
上記得られたブロック共重合体を用いて、実施例８と同様にしてコート遠沈管９を得た。このコート遠沈管９を目視で観察したところ、塗布前と同等な透明度を有した。

［タンパク質吸着試験］
上記遠沈管９を用いて、実施例１と同様にして、タンパク質吸着試験を行った。その結果、吸光度は０．０６０であった。

以上の実施例より、上記多分岐型ブロック共重合体が水に対し良好な溶解性を有し、容易に水性塗料を作製でき、ポリプロピレン基材にも容易に塗布でき、基材との接着性も良好であり、塗膜表面へのタンパク質の吸着が大きく抑制されたことが理解できた。

（実施例１０）
［ブロック共重合体の合成］
モノマー（ｂ）としてＮ，Ｎージメチルアクリルアミドの代わりに、アクリロイルモルホリンを９．４９ｇ使用すること以外は実施例２と同様にして、Ａ−Ｂ−Ａ型のブロック共重合体を合成した。

［ポリマーの同定］
実施例１と同様にして、^１Ｈ−ＮＭＲ測定を行った。その結果、モノマー（ａ）の転化率は１００％、モノマー（ｂ）の転化率は９８．５％であった。また、ブロック共重合体の構造は式（１５）のように同定された。

上記転化率より、前記式（９）を用いて、重合体（Ａ）、重合体（Ｂ）及びブロック共重合体の理論分子量を算出した。その結果、Ａ−Ｂ−Ａ型ブロック共重合体における、重合体（Ａ）の理論分子量Ｍｎは約３２５００（２５０ｍｏｌ）、重合体（Ｂ）の理論分子量Ｍｎは約２１００００（１４９０ｍｏｌ）、ブロック共重合体の理論分子量Ｍｎは約２７５０００であった。

（１５）

［ブロック共重合体の塗膜作製］
上記得られたブロック共重合体を用いて、実施例１と同様にしてコートシャーレ１０を作製した。このコートシャーレ１０を目視で観察したところ、塗布前と同等な透明度を有した。

［タンパク質吸着試験］
上記コートシャーレ１０を用いて、実施例１と同様にして、タンパク質吸着試験を行った。その結果、タンパク質吸着量（吸光度値）は０．１０２であった。

［細胞接着試験］
上記得られたコートシャーレ１０を用いて、実施例１と同様にして、ＣＨＯ−Ｋ１細胞の培養試験を行った。その結果、コートシャーレ１と同様に、細胞がシャーレ表面に全く接着することなく浮遊状態で培養されていることが観察された。

（実施例１１）
［ブロック共重合体の合成］
モノマー（ａ）として２−メトキシエチルアクリレートの量が２．９２ｇ、モノマー（ｂ）としてＮ，Ｎージメチルアクリルアミドの量が６６．６２ｇであり、モノマー（ｂ）添加後の重合時間が７２時間で、溶媒の１，４−ジオキサンを合計１００ｍＬ使用したこと以外は実施例２と同様にして、Ａ−Ｂ−Ａ型ブロック共重合体を合成した。

［ポリマーの同定］
実施例１と同様にして、^１Ｈ−ＮＭＲ測定を行った。その結果、モノマー（ａ）の転化率は１００％、モノマー（ｂ）の転化率は９３．０％であった。また、ブロック共重合体の構造は式（１１）のように同定された。

上記転化率より、前記式（９）を用いて、重合体（Ａ）、重合体（Ｂ）及びブロック共重合体の理論分子量を算出した。その結果、Ａ−Ｂ−Ａ型ブロック共重合体における、重合体（Ａ）の理論分子量Ｍｎは約３２５００（重合度２５０ｍｏｌ）、重合体（Ｂ）の理論分子量Ｍｎは約１３８１０００（重合度１３９４０ｍｏｌ）、ブロック共重合体の理論分子量Ｍｎは約１４４６０００であった。

［ブロック共重合体の塗膜作製］
上記得られたブロック共重合体を用いて、実施例１と同様にしてコートシャーレ１１を作製した。このコートシャーレ１１を目視で観察したところ、塗布前と同等な透明度を有した。

［タンパク質吸着試験］
上記コートシャーレ１１を用いて、実施例１と同様にして、室温でのタンパク質吸着試験を行った。その結果、タンパク質吸着量（吸光度値）は０．３２０であった。

［細胞接着試験］
上記得られたコートシャーレ１１を用いて、実施例１と同様にして、ＣＨＯ−Ｋ１細胞の培養試験を行った。その結果、細胞が殆どシャーレ表面に接着していないことが観察された。

以上の実施例より、重合体ＡとＢのモル比（Ａ：Ｂ）が１：２０を超えた場合、細胞の塗膜表面に対する接着性が低いレベルを維持していたが、タンパク質吸着量が増える傾向にあることが観察された。

（実施例１２）
［ＲＡＦＴ剤原料の合成］
非特許文献「Ｐｏｌｙｍｅｒ、４６、８４５８（２００５）」に従い、下記の手順でＲＡＦＴ剤原料「ＳｏｄｉｕｍＳ−ｄｏｄｅｃｙｌｔｒｉｔｈｉｏｃａｒｂｏｎａｔｅ」を合成した。

ジエチルエーテル７５ｍＬに、攪拌しながら６０％水素化ナトリウム１．１８ｇを投入した。氷冷下ドデシルメルカプタン５．４８ｇを加えた後二硫化炭素２．４２ｇを入れると、ただちに黄色のＲＡＦＴ剤原料が生成した。冷たいうちにろ過し、冷たいジエチルエーテルで３回洗浄し、真空乾燥し後黄色粉末６．１４ｇを得た。

［ＲＡＦＴ剤の合成］
１，４−ビスブロモメチルベンゼン２２６ｍｇをトルエン１０ｍＬに溶解し、上記ＲＡＦＴ剤原料６６２ｍｇを数回に分けて入れた。室温で４時間攪拌し、一晩放置後、ヘキサン５ｍＬを加えた後、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液で洗浄した。更に水洗の後、飽和食塩水で乾燥した。硫酸マグネシウム処理後、エバポレーターを用いてトルエンとヘキサンを除いた。得られた黄色粉末をヘキサンから再結晶して、ＲＡＦＴ剤「１，４−Ｂｉｓ（ｄｏｄｅｃｙｌｓｕｌｆａｎｙｌｔｈｉｏｃａｒｂｏｎｙｌｓｕｌｆａｎｙｌｍｅｔｈｙｌ）ｂｅｎｚｅｎｅ」を黄色結晶として得た（式１６）。

（１６）

［ブロック共重合体の合成］
モノマー（ｂ）としてＮ，Ｎージメチルアクリルアミド０．２２ｇ、ＲＡＦＴ剤として上記合成した「１，４−Ｂｉｓ（ｄｏｄｅｃｙｌｓｕｌｆａｎｙｌｔｈｉｏｃａｒｂｏｎｙｌｓｕｌｆａｎｙｌｍｅｔｈｙｌ）ｂｅｎｚｅｎｅ」０．０２９５ｇ、２，２’−アゾビスイソブチロニトリル０．０００７ｇ、１，４−ジオキサン１０ｍＬを窒素バブリングした後、７０℃、１３時間攪拌した。次いで、モノマー（ａ）として２−メトキシエチルアクリレート２．９２ｇ、１，４−ジオキサン１０ｍＬを添加し、更に７０℃、２４時間攪拌した。反応終了後、反応液をジエチルエーテルに投入し、更にジエチルエーテルで３回洗浄した後、真空乾燥させ、Ａ−Ｂ−Ａ型ブロック共重合体を合成した。

［ポリマーの同定］
実施例１と同様にして、^１Ｈ−ＮＭＲ測定を行った。その結果、モノマー（ａ）の転化率は１００％、モノマー（ｂ）の転化率は９７．０％であった。また、ブロック共重合体の構造は式（１７）のように同定された。

（１７）

上記転化率より、前記式（９）を用いて、重合体（Ａ）、重合体（Ｂ）及びブロック共重合体の理論分子量を算出した。その結果、Ａ−Ｂ−Ａ型ブロック共重合体における、重合体（Ａ）の理論分子量Ｍｎは約３２５００（重合度２５０ｍｏｌ）、重合体（Ｂ）の理論分子量Ｍｎは約４８００（重合度４８ｍｏｌ）、ブロック共重合体の理論分子量Ｍｎは約７００００であった。

［ブロック共重合体の塗膜作製］
上記得られたブロック共重合体を用いて、実施例１と同様にしてコートシャーレ１２を作製した。このコートシャーレ１２を目視で観察したところ、塗布前と同等な透明度を有した。

［タンパク質吸着試験］
上記コートシャーレ１２を用いて、実施例１と同様にして、室温でのタンパク質吸着試験を行った。その結果、タンパク質吸着量（吸光度値）は０．３１０であった。

［細胞接着試験］
上記得られたコートシャーレ１２を用いて、実施例１と同様にして、ＣＨＯ−Ｋ１細胞の培養試験を行った。その結果、少量の細胞がシャーレ表面に接着していることが観察された。

以上の実施例より、重合体ＡとＢのモル比（Ａ：Ｂ）が１：０．５未満の場合、タンパク質吸着量が増える傾向が見られ、細胞の塗膜表面に対する接着性も強くなる傾向が観察された。

（比較例１）
［ランダム共重合体の合成］
モノマー（ａ）として２−メトキシエチルアクリレート（東亞合成株式会社製）２．９２ｇ、モノマー（ｂ）としてＮ，Ｎージメチルアクリルアミド（株式会社興人製）６．６６ｇ、２，２’−アゾビスイソブチロニトリル０．０００７ｇ、１，４−ジオキサン１０ｍＬを窒素バブリングした後、７０℃、２４時間攪拌し、モノマー（ａ）と（ｂ）のランダム重合体を得た。反応終了後、反応液をジエチルエーテルに投入し、更にジエチルエーテルで３回洗浄した後、真空乾燥させ、（ａ）と（ｂ）のモノマー比率が（ａ）：（ｂ）＝５００：１５００である、ＡＢランダム共重合体を合成した。

［ポリマーの同定］
実施例１と同様にして、¹Ｈ−ＮＭＲ測定を行った。その結果、モノマー（ａ）の転化率は１００％、モノマー（ｂ）の転化率は９８．３％であった。

［ランダム共重合体の塗膜作製］
上記得られたランダム共重合体を用いて、実施例１と同様にしてコートシャーレ１’を作製した。このコートシャーレ１’を目視で観察したところ、塗布前と同等な透明度を有した。

［タンパク質吸着試験］
上記コートシャーレ１’を用いて、実施例１と同様にして、室温でのタンパク質吸着試験を行った。その結果、タンパク質吸着量（吸光度値）は０．５５０であった。

［細胞接着試験］
上記得られたコートシャーレ１’を用いて、実施例１と同様にして、正常ヒト真皮線維芽細胞の培養試験を行った。その結果、未コートシャーレと同等に、細胞がかなりの数でシャーレに接着していたことが観察された。

以上の比較例より、上記ＡＢランダム共重合体では、タンパク質吸着量が高く、細胞の塗膜表面に対する接着性も高いことが観察された。

次に、全ての実施例と比較例のタンパク質吸着の結果を示す。

Claims

下記一般式（１）で表されるモノマー（ａ）を含むモノマーの重合体（Ａ）と、下記一般式（２）〜（７）で表されるモノマー（ｂ）からなる群より選択される１種以上のモノマーを含むモノマーの重合体（Ｂ）からなるブロック共重合体の塗膜。

（式（１）〜（７）中、Ｒ_０は炭素原子数１〜３のアルキル基、Ｒ_１は水素原子またはメチル基、Ｒ_２、Ｒ_７はそれぞれ独立に炭素原子数２〜３のアルキレン基、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６はそれぞれ独立に水素原子または炭素原子数１〜２のアルキル基、Ｘは−ＣＯ_２ ⁻、−ＳＯ_３ ⁻、−ＯＳＯ_３ ⁻、−ＯＳＯ_２ ⁻、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ_８）Ｏ⁻、−ＯＰ（＝Ｏ）（Ｒ_８）Ｏ⁻、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ_８）Ｏ⁻、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｒ_８）Ｏ⁻から選ばれる一価のアニオン、Ｒ_８は炭素原子数１〜３のアルキル基であり、ｎは１〜９の整数である。）
前記重合体（Ａ）と前記重合体（Ｂ）のモル比（Ａ：Ｂ）が１：５０〜５０：１である請求項１に記載のブロック共重合体の塗膜。
ブロック共重合体がトリブロック型共重合体、ジブロック型共重合体、または多分岐型ブロック共重合体である請求項１又は２に記載のブロック共重合体の塗膜。
前記ブロック共重合体において、重合体（Ａ）の重合度が３０〜３０００、重合体（Ｂ）の重合度が２０〜２００００である請求項１〜３のいずれかに記載のブロック共重合体の塗膜。
請求項１〜４のいずれかに記載の塗膜を用いたタンパク質吸着防止材。
請求項１〜４のいずれかに記載の塗膜を用いた細胞培養基材。