JP3643590B2 - キメラ受容体遺伝子およびこれを用いて形質転換した細胞 - Google Patents
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Description
本発明はリンパ球に抗体型特異性を賦与するために適したキメラ受容体遺伝子、前記キメラ遺伝子から成る発現ベクターおよび前記発現ベクターを用いて形質転換したリンパ球に関する。種々の型のリンパ球細胞、例えば、細胞毒T細胞、ヘルパーT細胞、ナチュラルキラー(NK)細胞等が適当である。形質転換リンパ球は治療学的処置方法に有用である。
発明の背景
免疫系の細胞は、特異的分子との相互作用を認識する際に、種々の作用を行うように細胞を活性化させる受容体または受容体複合体の手段によって特異的分子を認識し、これと相互に作用することが知られている。このような受容体の1例は抗原特異的T細胞受容体複合体(TCR/CD3)である。
抗原に対するT細胞受容体(TCR)は主要組織適合性遺伝子複合体(MHC)と会合した抗原の認識に関与する。T細胞の表面に発現したTCRは不変構造、CD3と会合する。CD3はリガンドによってTCRの次の占有を細胞内で信号で知らせることに関与すると想定されている。
抗原−CD3複合体のためのT細胞受容体(TCR/CD3)は主要組織適合性遺伝子複合体(MHC)のタンパク質によって、それに与えられる抗原ペプチドを認識する。MHCとペプチドの複合体は細胞および他のT細胞標的を示す抗原表面に発現される。TCR/CD3複合体の刺激はT細胞および結果として生ずる抗原特異的免疫応答を活性化することになる。TCR/CD3複合体は免疫系のエフェクター作用および制御において中心的役割を演ずる。
抗原に対する2つの形態のT細胞受容体はT細胞表面に発現される。これらはα/βヘテロ二量体またはγ/δヘテロ二量体のいずれかを含む。T細胞はT細胞受容体のα、β、γおよびδ鎖を符号化する遺伝子を再配列することができる。T細胞受容体遺伝子の再配列はB細胞中に機能免疫グロブリンを生ずる再配列に似ており、ゲノム中の多数の変化し結合する領域は結合特異性の異種範囲をもつT細胞受容体を生成させる。各α/βまたはγ/δヘテロ二量体は4個の不変ペプチドと会合してT細胞表面に発現される。これらはCD3複合体とゼータ鎖のγ、δおよびεサブユニットである。CD3γ、δおよびεポリペプチドは3構成員の免疫グロブリンスーパージエンファミリーによって符号化され、ヒト染色体11またはネズミ染色体9のクラスターに見いだされる。ゼータ鎖遺伝子はマウスとヒトの両方において染色体1の他のTCRおよびCD3遺伝子から別々に見いだされる。CD3鎖およびゼータサブユニットは可変性を示さず、抗原認識において直接必要とされない。
T細胞受容体の全成分は膜タンパク質であり、リーダーシークエンス、外側に配置されたN末端細胞外ドメイン、単一膜スパンドメイン、および細胞質テールから成る。α、β、γおよびδ抗原結合ポリペプチドは糖タンパク質である。ゼータ鎖は9個のアミノ酸のみの比較的短い外部ドメインおよび約110個のアミノ酸の長い細胞質テールをもつ。大抵のT細胞受容体α/βヘテロ二量体はジスルフィド結合によって共有結合しているが、多くのγδ受容体は互いに非共有結合により会合している。ゼータ鎖は定量的にジスルフィド結合ζ−ηヘテロ二量体またはゼータ−ゼータホモ二量体を形成する。
免疫系の細胞の受容体の型の他の例はFc受容体である。免疫系の細胞との抗体−抗原複合体の相互作用は、抗体依存性細胞毒、マスト細胞脱顆粒反応、および食作用のようなエフェクター作用から、制御リンパ球増殖、食作用および標的細胞溶菌のような免疫モジュレーター信号までの範囲の広い応答配列となる。これら全相互作用は抗体または免疫複合体のFcドメインが造血細胞の特定の細胞表面受容体に結合して開始される。抗体と免疫複合体によって引き起こされる細胞応答の相違はFc受容体(FcRs)の構造上の不均質が原因であることは現在よく立証されている。
FcRsは免疫グロブリンイソタイプに対する特異性によって明確にされる。IgGに対するFc受容体はFcγRと呼ばれ、IgEに対してはFcεR、IgAに対しては、FcαR等と呼ばれる。構造的に異なる受容体は歴史的先例に基づきローマ数字によって識別される。我々は現在3群のFcγRsを確認し、FcγR I、FcγR II、およびFcγR IIIと名付けている。2群のFcεRは既に確認されており、これらはFcεR IおよびFcεR IIと呼ばれている。群内で構造的に関連するが別個の遺伝子がA、B、Cによって表示される。最後に、タンパク質サブユニットはギリシャ文字で例えばFcγR III Aα、FcγR III Aγで示される。
過去3年間でIgGおよびIgE Fc受容体(FcγR、FcεR)に対してそれらの分子クローニングによって不均質を確認することにかなりの前進があった。これらの研究はFc受容体が構造的に関連したリガンド結合ドメインを共有するが、恐らく細胞内信号化を仲介するであろうそれらのトランスメンブランおよび細胞外ドメインにおいて異なる。従って、異なる細胞の特異的FcγRsは免疫複合体と相互作用する際に異なる細胞応答を媒介する。FcγRsおよびFcεR Iの構造分析もこれらの若干の受容体の中で少なくとも1個の共通のサブユニットを示した。この共通のサブユニットはγサブユニットであり、TCR/CD3のζまたはη鎖に似ており、FcγR IIIおよびFcεR Iの信号形質導入に含まれる。
IgGに対する低親和性受容体(FcγR III A)は、γ鎖(FcγR III Aγ)と会合したリガンド結合CD16α(FcγR III Aα)ポリペプチドから成る。CD16ポリペプチドは多形核細胞において膜アンカー形態として、そしてNKにおいてトランスメンブラン形態(CD16TM)として出現する。FcγR III AはNK細胞に対してトリガー分子として働く。
免疫細胞受容体の他の型はIL−2受容体である。この受容体は3本の鎖、α鎖(p55)、β鎖(p75)およびγ鎖から成る。IL−2によって刺激すると、リンパ球は増殖および活性化を受ける。
抗原特異的エフェクターリンパ球、例えば腫瘍特異的T細胞(Tc)は極めて珍しく、各個特異的で、それらの認識スペクトルにおいて限定され、大抵の悪性腫瘍に対して得ることが困難である。他方、抗体は容易に入手でき、さらに容易に誘導され、さらに広いスペクトルを有し、各個特異的ではない。特定の抗体を癌免疫療法に応用する主な問題は充実性腫瘍内の大きい範囲に達するために充分な分量のモノクローナル抗体(mAbの無力にある。実際に、受身の抗腫瘍免疫療法に対する免疫系の体液性または細胞質アームを補充するため多くの臨床上の試みがなされたが期待を満たさなかった。抗腫瘍抗体を得ることはできたが、充実性腫瘍が充分な抗体(3)を得難いので、治療上の利用はそれだけ血液関連腫瘍(1、2)に限られていた。選択された充実性腫瘍に有効であるが養子免疫療法においてエフェクターリンパ球の使用は、他方では、(主にNK細胞であるリンホカイン活性化キラー細胞(LAK細胞)(4)の場合におけるような)特異性の不足、または腫瘍侵入リンパ球(TILs)を補充し大抵の悪性腫瘍(5)についてこのような特異的T細胞を広げる際の困難性を欠点としてもつ。今なお、TILsが黒色腫および腎細胞癌中に得られること、それが選ばれた患者に有効であること、および外来遺伝子がこれらの細胞(6)中で作用できることの観察は、これらの細胞に治療の可能性を示している。
最近開発された戦略(ヨーロッパ公告特許出願第0340793号、参照7−11)によれば、抗体の特異性の長所を、ホーミング、組織浸透、サイトカイン生成およびTリンパ球の標的細胞破壊と組合わせて、生体外の遺伝子操作によって、T細胞の抗腫瘍特異性の範囲を広げることができる。このアプローチでは、本発明者らの実験室は、抗体分子の変化しやすい領域ドメイン(Fv)および抗原結合TCR鎖、すなわちα/βまたはγ/δ鎖の一定領域ドメインから成るキメラT細胞受容体(cTCR)遺伝子をT細胞中に機能的に発現することに成功した。この遺伝子対アプローチでは、ゲノム発現ベクターは、αまたはβTCR鎖のC領域遺伝子断片のいずれか1つに接合した抗−2,4,6−トリニトロフェニル(TNP)抗体(Sp6)の重い(VH)および軽い(VL)鎖のV領域ドメインに対してコードする再配列遺伝子断片を含んで構築された。細胞障害性T細胞ハイブリドーマにトランスフェクションした後、機能TCRの発現を検出した。キメラTCRはSp6抗TNP抗体のイディオトープを示し、ハプテンTNPへの主要組織適合遺伝子複合体(MHC)の非制限応答をT細胞に賦与した。トランスフェクタントはTNP挙動(bearing)標的細胞を特異的に殺し、それに応答して菌株と種のバリアを越えてインターロイキン−2(IL−2)を生成した。さらに、このようなトランスフェクタントは、細胞処理と提示の必要性をバイパスして、固定化TNP−タンパク質共役体に応答した。キメラTCRsは抗体様特異性をもつT細胞を提供し、抗原に出会う際に、MHC非制限方法でT細胞の活性化、リンホカインの分泌および特異的標的細胞溶菌に対して信号を有効に伝達することができた。さらに、cTCR挙動細胞は固定化抗原によって刺激を受け、受容体仲介T細胞活性化が制限されず標的細胞(8、9)のMHC発現から独立することになる。新しい発現カセットはまた再配列VHおよびVLのmRNAとPCR増幅の逆転写に基づき開発され、任意のmAb生成ハイブリドーマからcTCR遺伝子を迅速に構築できるこれらの遺伝子の3'および5'共通配列(12)に基づくプライマーを用いる。キメラTCRアプローチの治療上の可能性を決めるため、我々は38C13ネズミBリンパ腫細胞系の表面上IgMに特異的な抗イディオタイプ抗体の結合部位から成るcTCR遺伝子を構築することに成功し機能的に発現させた。
cTCRアプローチの広範囲の応用はプライマリーT細胞中のcTCR遺伝子の十分な発現に依存する。それだけに、プロトプラスト融合法、リポフェクションまたは電気穿孔法を用いて、我々はT細胞ハイブリドーマ(8、9)、またはヒトT細胞腫瘍、例えばジャーカット中のcTCRを発現することに成功したが、他と同様に、非形質転換ネズミT細胞系においては限られた一過性の発現のみを達成した。レトロウルス性ベクターはヒトT細胞(13,14)においてトランスジーン発現に有効であることが示され、これは2個の遺伝子が機能性cTCR(CαVH+CβVLまたはCαVL+CβVH)を発現するために導入されなければならないこと、2個の独立したレトロウィルス性ベクターを用いた単一細胞の形質導入の有効性が非常に低いことが原因しているが、タンデム(15)中の2個の遺伝子の形質導入を可能にする新しいベクターを試みなければならなかった。
最近開発された別の戦略はCD4、CD8、IL−2受容体、またはCD16のような受容体の細胞外リガンド結合ドメインをγ/ζファミリイメンバー(26−28、38)のいずれかひとつの細胞質テールに結合する方法を用いる。このような細胞外ドメインをリガンドまたは抗体によって架橋することはT細胞活性化となることが示された。細胞障害性リンパ球に発現したキメラCD4またはCD16−γ/ζ分子は特異的細胞溶解を適当な標的細胞(26、38)に指示することができる。PCT WO92/15322では、適当に工作された抗体分子の細胞外部位に結合したT細胞/Fc受容体ζ、ηまたはγ鎖の細胞内部位からなるキメラの形成は免疫系細胞の標的認識ポテンシャルが細胞外抗体部位によって認識される抗原に特異的に再び指示するようにできるであろうことを示唆している。しかし、特定例がこのよな活性化はCD4受容体のような受容体の細胞外部位がこのようなζ、εまたはγ鎖に結合するとき可能であることを示しているが、抗体の一部分がこのような鎖に結合するとき、リンパ球における発現またはリンパ球における活性化を得ることができるという証拠を示していない。
発明の概要
本発明によれば、可撓性リンカーによってVHに結合したVLから成る特異的抗体の一本鎖Fvドメイン(scFv)遺伝子を、短い細胞外およびリンパ球活性化分子の全体のトランスメンブランおよび細胞質ドメインを符号化する遺伝子断片を用いて、融合することによって、抗体認識部位およびリンパ球信号化部位を1本の連続鎖に合わせるキメラ遺伝子が得られる。このようなキメラscFv−受容体(c−scFvR)遺伝子をリンパ球にトランスフェクションする際に機能受容体として細胞に発現され、抗体型の特異性をもつ細胞を賦与する。
本発明は従って抗体型の特異性をもつリンパ球細胞を賦与するために適しているキメラ遺伝子に関する。種々の型のリンパ球、例えばナチュラルキラー細胞、ヘルパーT細胞、サプレッサーT細胞、細胞障害性T細胞、リンホカイン活性化細胞、それらのサブタイプおよびキメラ受容体鎖を発現できるいずれかの他の細胞型が適当である。
キメラ遺伝子は、特異的抗体のscFvを符号化する第1の遺伝子断片、すなわち可撓性リンカーによって結合した特異的抗体の重および軽鎖(それぞれVHおよびVL)の可変領域を符号化するDNAシークエンス、および部分的にまたは全体的にトランスメンブランおよび細胞質を符号化するDNAシークエンス、そして任意に細胞外の、リンパ球受容体またはその1部に対応するリンパ球トリガー分子のドメインから成る第2の遺伝子断片からなる。
さらに本発明はキメラ遺伝子をもつ上記型のトランスフェクション細胞に適当なベクターに関する。
さらに本発明は、このようなキメラ遺伝子がその発現を得るように導入された上記型の細胞、およびまたこのような細胞を有効量含有する製薬予防および治療用組成物に関する。
一般的な用語では、本発明は本発明のキメラ遺伝子を含む発現ベクターを用いてトランスフェクションしたリンパ球の発生方法に関する。次に示すように、細胞障害性T細胞にトランスフェクションし、機能的に前記細胞内に発現させ、すなわち、MHC非制限方法で予め定められた標的抗原に対してリンパ球の細胞性応答を指示する発現ベクターから成るモデル系を構築した。
本発明の遺伝学的に巧みに処理されたリンパ球細胞は新しい治療学上の処理方法に使用することができる。例えば患者から単離したT細胞またはNK細胞は特異的抗原に向けられた抗体の可変領域を含むキメラ遺伝子を符号化するDNAを用いてトランスフェクションすることができ、次に患者に戻して、このような細胞によって発生した細胞性応答が引金となってMHC非制限方法で特異的抗原に向かうようにする。他の具体例では、患者の末梢血球を本発明に従って遺伝学的に巧みに処理し、次に患者に投与する。
自己MHCプラス抗原の相互認識によって加えられた制限のため、TCR遺伝子の移植による新しい特異性の獲得は交配された組合せに制限される。このような操作は実際には異系交配固体群では不可能である。しかしながら、本発明TCR成分だけでなく他のリンパ球信号鎖、例えばCD3のゼータ/イータ鎖、FcγRとFcεRのγ鎖、IL−2Rのα、βおよびγ鎖、または任意の他のリンホカイン受容体、CD16α−鎖、D2、CD28、その他を用いる抗体特異性を我々に与えることができる。従って、キメラ遺伝子を抗原特異的ではないNK細胞に移植することはそれらに抗体特異性を賦与するであろう。
図面の説明
図1はキメラscFVR発現ベクターの略図である。Rは任意の受容体鎖、例えばCD3のゼータサブユニット、FCγR IIIのガンマおよびCD16αサブユニット、TCRのCαおよびCβ、IL−2受容体のβ鎖または任意の他の鎖または、ここに記載されたものの一部を表す。Aは可撓性リンカー(ハッチボックス)によって連結した特異的抗体のVHとVLのscFvを符号化する遺伝子断片の調製を示す。Bはカッパ軽鎖リーダー(LK)を含むpRSV発現ベクターを示し、Cに記載されたリンパ球から調製された受容体遺伝子およびAの遺伝子断片を導入する。キメラ遺伝子の発現はラウス肉腫ウイルスの長末端リピート(LTR)プロモーターによって駆動される。
図2は図1の略図に従って得られたキメラpRSVscFvRγ発現ベクターを示す。左から右へのボックスはラウス肉腫ウィルスの長末端リピートプロモーター(LTR)、カッパー軽鎖リーダー(Lκ)および可変領域(Vκ)、リンカー(ハッチボックス)、重鎖可変領域(VH)、ヒトガンマ鎖、G418耐性遺伝子(neor)、および複製のサルウィルス40領域に対応するDNA断面を示す。図に示した制限部位はEcoR I(R I)、SanB I(Sn)、Nco I(N)、Xba I(Xb)、Sa II(S)、BstE II(Bs)、およびXho Iである。矢印の数字1ないし6は下方の表Iにそれぞれ示したオリゴヌクレオチドプライマー4、5、6、7、14および15を用いて増幅したフランキング領域を示す。
これらのプライマーはVHとVLの共通配列に合うように設計された。関連した制限部位は肉太の文字にある。
図3はMD.45ハイブリドーマおよびそのTCRα−MD45.27J変異体、それらの対応するscFvRγトランスフェクションSTAおよびSTBクローン、またはMD45.27JにscFvRζキメラ遺伝子をトランスフェクションすることになるSTZ細胞、を染色する免疫蛍光法の蛍光活性化細胞ソーター(FACS)分析を示す。実線は、抗Sp6イディオタイプ抗体20.5または抗CD3mAb145.2C11で染色した。破線はコントロール不適切抗体を示す。
図4は、抗Sp6イディオタイプmAb20.5(それぞれパネルAおよびC)およびウサギ抗ヒトガンマ鎖(それぞれパネルBおよびC)によって展開したscFvRγトランスフェクタントおよび親ハイブリドーマから調製された溶解物のイムノブロット分析を示す。電気泳動は4個の分離ゲルで行った。分子量スケールはBおよびDに関連させる;矢印はAおよびBまたはCおよびDにおいて同じバンドを示す。
図5はscFvRγ二量体の組成を示す。パネルA−STB(scFvRγトランスフェクタント細胞)から調製した抗Sp6沈澱物、およびそれらの親(MD45.27Jハイブリドーマ細胞)のイムノブロット分析。非還元条件下に電気泳動しブロットした後、ブロットを抗Sp6、抗ヒトガンマ、または抗マウスζ抗体と反応させた。パネルB−溶解物の免疫沈澱は表面ヨウ素化STB細胞(scFvRγトランスフェクタント細胞)およびそれらの親(MD45.27Jハイブリドーマ細胞)から作成した。
図6はscFvRを発現するトランスフェクタントを刺激して、TNP−A.20(パネルA)を用いて、または異なる濃度の可溶性TNP−FγG(パネルB)を用いずまたは用いてプラスティック固定化TNP−FγGで刺激した後、IL−2を作成することを示している。GTAc.20は先に述べたSp6二本鎖cTCRトランスフェクタント(9)である。scFvRゼータ発現STZは8:1の刺激剤対エフェクター(S/E)細胞比にてTNP−A.20を用いて相互培養した後、1mlにつき約200ユニット(U)のIL−2を生成した。トランスフェクタント対非修飾A.20またはFγGコントロールの応答は図には示していないが、完全にネガティブであり、まさにMD.45およびMD45.27J対TNP抗原のバックグランド応答に似ていた。
図7はscFvRを発現するトランスフェクタントを用いてインキュベーションした後のTNP−A.20細胞の特異的51Cr脱離を示す。エフェクター細胞は殺害アッセイの前に8時間プラスティック固定化TNP−FγGを用いてインキュベーションした。運動アッセイは、10:1のエフェクター対標的(E/T)にて行い(パネルA);投与量応答は9時間アッセイで決定した(パネルB)。同一の条件で同じエフェクター細胞を用いてインキュベーションしたコントロール非修飾A.20標的細胞は自然脱離(図には示していない)よりも51Crを多くは脱離しなかった。
図8はキメラscFvRγ/ζの表面発現を示す。N29抗HER2mAbの可変領域から成るscFvRγ(N29γ1、N29γ15)またはscFvRζ(N29ζM.1)キメラ遺伝子を用いてトランスフェクションしたT細胞ハイブリドーマは、抗N29イディオタイプ抗体またはコントロール血清(破線)を用いて染色しFACSによって分析した。
図9は洗剤可溶性scFvN29RγおよびscFvN29RζのNeu/HER2抗原への結合を示す。細胞溶解物中のキメラ受容体の存在はHER2X被覆ウェルおよび抗γ(A)または抗ζ(B)抗体を用いるELISAによって評価した。キメラトランス遺伝子を発現するハイブリドーマから誘導した機能分子は固定化抗原に結合し、γまたはζポリペプチドのいずれかに特異的な抗原決定基を発現することができた。
図10はHER2挙動刺激剤細胞(A)または固定化HER2Xタンパク質(B)によるキメラ受容体発現細胞の抗原特異的活性を示す。キメラscFvN29Rγ/ζ遺伝子を発現するT細胞ハイブリドーマは、異なる領域のHER2発現細胞またはプラスティック結合精製HER2/Neu受容体を用いて相互培養した後に、IL−2生成について抗原特異的であるがMHC非制限刺激を受けた。使用した刺激剤細胞はヒト胸癌細胞系SKBR3およびMDA468、ヒト卵巣癌細胞系SKOV3またはHER2、c−erbB−2トランスフェクト3T3−NIH繊維芽細胞(エイ・ウルリッチ博士が親切に用意してくれた)であった。Neu/HER2タンパク質はSKBR3、SKOV3およびHER2にオーバー発現するが、MDA468細胞は検出できない表面受容器をもつ。図に示したように、トランスフェクションしない親細胞MD45.27JはNeu/HER2発現細胞を用いてインキュベーションした後、IL−2を何も生成しなかった。Bにおいて[黒い四角]−MD45.27J、トランスフェクションしない細胞;O−N29γ1、トランスフェクタント発現scFvN29Rγ。
図11はキメラ受容体発現細胞がNeu/HER2標的細胞を溶解することを示す。トランスフェクションしないCTLハイブリドーマおよびscFvN29Rγ発現(N29γ1)またはscFvN29Rζ発現(MD45ζ1)トランスフェクタントは、Neu/HER2発現NIH−3T3ネズミ繊維芽細胞またはヒト結腸(N87)または胸(SKBR3)癌細胞系のいずれかのために、それらの細胞融解ポテンシャルについて研究した。同じE:Tで親細胞によって脱離された51Crのパーセントを引算した。
図12はキメラ受容体発現細胞がHER2標的細胞を特異的に融解することを示す。トランスフェクションしないCTLハイブリドーマおよびscFvN29Rγ発現(N29γ1)またはscFvN29Rζ発現(N29ζ18)トランスフェクタントは、Neu/HER2発現NIH−3T3ネズミ繊維芽細胞(黒い印)またはトランスフェクションしていないNIH−3TS細胞(白い印)のいずれかのために、それらの細胞融解ポテンシャルについて研究した。HER2標的細胞の実質上特異的な溶菌は全エフェクター対標的(E:T)の比でN29γ1によって示された。トランスフェクションしない繊維芽細胞と比較するとHER2の融解が弱いことが、N29ζ18について観察されたが、MD45およびMD45.27J、トランスフェクションしないハイブリドーマは何ら顕著な51Cr脱離を引き起こさなかった。[黒い三角]、[白い三角]、−29γ1[黒い丸印]、−29ζ18:[黒い四角]、[白い四角]−MD45.27J。
図13はpRSVneo−scFvRからpBJ1−neoベクターまでのscFvR遺伝子の移動を示す。scFvRはSnaB Iを用いてpRSVベクターから切り出し、pBJ1プラスミドのポリリンカーのEcoR V部位に導入し、SRαプロモーターからキメラ遺伝子の発現を駆使する。
図14は:A)抗IgE scFvCβキメラ遺伝子を発現するT細胞によるロゼット形成の図式表現を示す。ヒツジ赤血球(SRBC)はTNPで被覆し次にIgEクラスの抗TNPで被覆した。IgE−TNP−SRBC−複合体は抗IgE84−1c mAbのscFvから成るscFvRを用いてトランスフェクションしたT細胞でインキュベートして、ロゼット形成について顕微鏡下で観察した。B)scFvRトランスフェクトJRT.T3.5細胞のロゼット形成の結果。親JRT.T3.5細胞はネガティブコントロールとして、84.1cはポジティブコントロールとして使用した。結果はロゼットを形成する細胞のパーセントで示した。C)scFvRを発現するトランスフェクタントのロゼット形成の阻害。トランスフェクタントはIgE、抗Fcおよび抗MYC、IgG(ネガティブコントロールとして)を用い、次にSRBC共役体を用いてインキュベートして数えた。D)JSB.15トランスフェクタントのロゼット形成。E)scFvR.MD.45を発現するMD.45誘導トランスフェクタントのロゼット形成をネガティブコントロールとして使用した。
図15はA)scFvCβキメラ遺伝子を発現するトランスフェクタントを篩分けするために使用したELISAの図式表現を示す(RはCβである)。プレートをIgEで被覆し、トランスフェクタントの溶解物を添加し、次に抗ヒトα/βTCR抗体を添加し、ヒツジ抗マウスパーオキシターゼで展開させた。B)ELISA抗ヒトβTCR抗体中のscFvRを発現する若干のトランスフェクタントの結果。
図16はIL−2生成について固定化IgEまたは抗CD3を用いたトランスフェクタントの刺激を示す。プレートを2.5μg/mlのIgEまたは抗CD3精製抗体を用いて被覆し、トランスフェクタント細胞を、20−24時間、ホルボール12−ミリステート13−アセテート(PMA)(10ng/ml)の存在でインキュベートした。上澄み液を収集し、IL−2生成はIL−2依存細胞系CTLLを用いて決定した。トランスフェクションしないJRT.T3.5細胞はネガティブコントロールとして使用し、異なる媒体に対するコントロールもCTLLアッセイに含まれていた。
図17はIgEポジティブB細胞を用いるIL−2生成のための刺激を示す。SPE−7 IgE分泌型ハイブリドーマを10分間0℃で0.25%グルタルアルデヒドを用いて固定し、異なるエフェクター/刺激剤(E/S)比でトランスフェクタントと混合した。細胞を20−24時間インキュベートして、上澄み液を収集しIL−2生成についてアッセイした。
図18は抗IgE scFvRを発現する細胞障害性ハイブリドーマによるIgE生成の特異的阻害を示す。脾臓細胞を4日間20μg/mlのLPSと100U/mlのIL−4で刺激した。4日目に細胞を洗浄し、scFvを発現するMD.45細胞障害性ハイブリドーマを添加し、IgEとIgG濃度24、48および72時間後に測定した。84.1cハイブリドーマ細胞をコントロールしてMD.45と同様に含ませた。
図19はキメラscFv−CD16遺伝子の図式表現である。
図20はscFvCD16遺伝子を用いてトランスフェクションしたネズミ好塩基性白血病(RBL)細胞の表面染色を示す。免疫蛍光染色は抗Sp6イディオタイプmAb20.5およびネガティブコントロールとしての無関係のマウス抗体を用いて行った。FACS染色パターンにおける右側へのシフトはキメラ受容体発現細胞に依る。
図21はscFvRγまたはscFvRζキメラ遺伝子でトランスフェクションしたRBL細胞の表面染色を示す。免疫蛍光染色は抗Sp6イディオタイプmAb20.5およびネガティブコントロールとして無関係のマウス抗体を用いて行った。
図22はscFvCD16遺伝子を用いてトランスフェクションしたネズミ胸腺腫BW5147細胞の表面染色を示す。免疫蛍光染色は抗Sp6イディオタイプmAb20.5およびネガティブコントロールとして無関係のマウス抗体を用いて行った。
図23はTNP標識A.20標的細胞によってscFvCD16および通常のγ鎖を用いてコトランスフェクションしたBW5147細胞の刺激を示す。2個のBW−scFvCD16クローン、(A)および(B)、は異なる標的:刺激比でTNP修飾照射A.20細胞を用いて相互培養した。上澄み液に生成したIL−2は次の24時間MTTアッセイによって測定された。
図24は固定化TNP−トリγ−グロブリン(TNP−FγG)によってscFvCD16および通常のγ鎖を用いてコトランスフェクションしたBW5147細胞の刺激を示す。異なる濃度のTNP−FγGを異なるTNP:FγG比で使用してミクロ培養プレートのウェルを被覆した。IL−2は実験に使用したBW−scFcCD16クローン(A)または(B)の24時間培養の上澄み液で測定し、その結果を図23にグラフで示した。それ自身によって固定化したFγGを用いる細胞のいずれか1個のインキュベーション(黒い四角)は細胞を刺激しなかった。親BW細胞は同じ条件下でTNP−FγGに応答してIL−2を何も作らなかった(図には示していない)。
図25はscFvIL2R遺伝子でトランスフェクションしたRBL細胞の表面染色を示す。免疫蛍光染色は抗Sp6イディオタイプmAb20.5およびネガティブコントロールとして無関係のマウス抗体を用いて行った。
図26はscFvRを用いてトランスフェクションしたBW5147細胞が表面キメラ受容体を発現することを示す。Sp6−scFvRを用いてトランスフェクションしたBW5147細胞は20.5抗Sp6イディオタイプ抗体の腹水1:200の希釈物またはコントロールとして同じ希釈率の抗MOv18腹水と反応させ、次にFITC標識抗マウスIgによって反応させた。免疫蛍光はFACSによって検出した。BW.Sp6−CD16はscFvCD16およびγ鎖でコトランスフェクションした細胞である。scFvCD16のみでトランスフェクションした細胞はトランスフェクションしないBW細胞よりは染色しなかった。
図27はTNP−A.20細胞を用いたscFvR−BW5147トランスフェクタントの刺激を示す。異なるBW−scFvRトランスフェクタントは種々の分量のTNP−A.20細胞を用いて24時間インキュベートした。IL−2はMTT比色定量アッセイによって測定した。BWGはscFvRγトランスフェクタントであり、BWZはscFvRζトランスフェクタントである。
図28はscFvRトランスフェクトBW5147細胞が固定化TNPに応答することを示す。異なるBW−scFvRトランスフェクタントはTNP15−FγG被覆ウェルを用いて24時間インキュベートした。IL−2はMTT比色定量アッセイによって測定した。横座標はミクロ滴定プレートのウェルを被覆するために使用したTNP−FγGの濃度を示す。BWGはscFvRγトランスフェクタントでありBWZはscFvRζトランスフェクタントである。
発明の詳細な説明
遺伝子ペアアプローチ(“Tボディ”アプローチ)を含む従来法の問題点を解決するため、そしてその応用性を他の細胞および受容体分子に広げるため、新しい代替の設計を本発明に従って開発した。バクテリア中に抗体一本鎖Fvドメイン(scFv)(16、17)を発現することは、cTCRへの一本鎖アプローチおよび証明された能力に依存する。このようなscFvドメインは、抗体の重および軽可変(VHおよびLL)遺伝子断片を可撓性リンカーと結合し、天然Fab'断片と同じ特異性と親和性を示すことを証明した。従ってscFvのひとつの直接的応用はTCR一定ドメインのひとつに連結したscFvから成るキメラ分子を構築することである。
本発明によれば、キメラ分子は受容体サブユニットに連結したscFvから成るように構築され、scFvからの信号を形質導入し、T細胞ならびに他のリンパ球に抗体特異性を与える。この構築は好ましくは図1のAで示した方法で行われ、抗体形成細胞からDNAまたはRNAを単離する。cDNAはmRNAから調製され、PCRによる抗体軽および重可変領域(VHおよびVL)の増幅はVL−5'(Xba I)、VL−3(Sal I)、VH−5'(Sal I)およびVH−3'(BstE II)特異的プライマーを用いる。Bで示したように、pRSV2−neoプラスミドに対して38c.13カッパ鎖からのリーダーシークエンスをLTRプロモーターから下流に導入した。Cでは、Tリンパ球からのRNAを単離し、調製したcDNAから、TCRのα、β鎖、CD3のγ、ζサブユニット、FCγR IIIのCD16α、またはIL−2受容体(ここでは普通にRと示した)を、各鎖についてプライマーの特定の組を用いて増幅することができる。プライマー全体はそれらの5'末端でXbal、Xba IまたはBstE II部位の下流で数個の塩基を含む。3'末端で、全ての受容体鎖はSnaB I部位を含む。リーダーシークエンスのpRSV2neoプラスミドへの導入に続いて、受容体をpRSVneoLκベクター獲得pRSVneoLκ−RのXba I部位に導入する。増幅VL(XBa I−Sa IIで消化した)およびVH(SA II−BstE IIで消化した)領域は3片連結反応においてpRSVneoLκ−Rプラスミドを消化したXba I−BstE IIに導入される。得られたプラスミドpRSVscFvRは完全なキメラ一本鎖受容体を含む。図13−18に記載した受容体(R)遺伝子断片はヒトTCR Cβである。
従って、本発明による新しい戦略はscFvからの信号を形質導入し、T細胞ならびに他の免疫細胞に抗体特異性を与える助けとなる他の受容体分子を使用することができる。事実、T細胞およびナチュラルキラー(NK)細胞のような免疫細胞の受容体分子の経膜的細胞質ドメインから成るキメラ分子の抗体認識ユニットとしてscFvを発現することができる。このような受容体は天然には単一または複数の鎖であることができ、必ずしもIg遺伝子スーパーファミリーには属しない。
このアプローチのための候補分子は、T細胞およびNK活性化および/または増殖の引金となる受容体のような、受容体複合体の主成分として信号形質導入に貢献する受容体分子である。T細胞のトリガーの例はTCRのサブユニット、例えばTCRのα、β、γまたはδ鎖、または信号形質導入に含まれるCD3複合体を構成するポリペプチドのいずれか、例えばγ、δおよびεCD3鎖である。TCR/CD3のポリペプチドの中で(T細胞の主要トリガー受容体複合体)、特に有望なものはゼータおよびそのイータイソフォーム鎖であり、ホモまたはヘテロ−S−S−連結二量体のいずれかとして現れ、リガンドのTCR認識によって引金となる細胞活性化プログラムの少なくとも小部分で介在するために応答することができる。これらのポリペプチドはscFvの連結に役立つことができる非常に短い細胞外ドメインをもつ。
免疫細胞トリガー分子の追加の例はIL−2受容体(OL−2R)p55(α)またはp75(β)またはγ鎖のいずれかひとつであり、特にp75およびγサブユニットはT細胞およびNK増殖を表示するために応答することができる。
さらに本発明に従ってscFvキメラを生成するための候補となる受容体分子はFc受容体のサブユニット鎖を含む。
NK刺激受容体のグループにおいて、最も魅力のある候補はIgGに対し低い親和性の受容体、FcγR IIIのγおよびCD16αサブユニットである。FcγR IIIの占有または架橋は(抗CD16によってまたは免疫複合体によって)サイトカイン生成、表面分子の発現および細胞溶解活性のためのNK細胞を活性化する(20、21)。NK細胞、マクロファージ、およびBおよびT細胞において、FcγR IIIはジスルフィド連結γまたはゼータ鎖と会合したリガンド結合α鎖から成るヘテロオリゴマー複合体として現れる。FcγR III A信号ガンマ鎖(22)はまたFcεR I複合体の一部として役に立ち、ホモ二量体として現れ、CD3ゼータ鎖に非常に似ており、実際に若干の細胞溶解性Tリンパ球(CT)およびNK細胞においてそれと共にヘテロ二量体を形成することができる(23−35)。これらポリペプチドとCD4(26)、CD8(27)、IL−2受容体鎖(28)またはCD16細胞外ドメインとの間に最も最近調製されたキメラは、他のTCR/CD3成分がなくてもT細胞刺激を信号で知らせる際に活性化されることを証明した。
上記の受容体分子に加えて、リンパ球アクセサリィおよびCD2およびCD28のような接着分子があり、T細胞活性化に対して相互刺激信号を形質導入する。これらの相互刺激受容体はまた本発明に従って使用することができる。
ここで特定して述べた特異的受容体鎖の他に、信号鎖FvキメラをscFvドメインと、例えば顆粒球、Bリンパ球、マスト細胞、マクロファージ等の開示された分子に似ている機能をもつ任意の受容体またはコリセプター鎖を結合することによって作成することができる。望ましい免疫細胞トリガー分子の顕著な特徴は自主的に発現する能力(すなわち、一本鎖として)、得られたキメラが対応する遺伝子を遺伝学的に導入した免疫細胞の表面に発現するように細胞外ドメインに溶融する能力、および信号形質導入プログラムにおいて標的リガンドと出会うように二次的な役割を演じる能力を含む。
scFvドメインは、scFv部位がキメラを発現するとき細胞外であるような免疫細胞トリガー分子に結合されなければならない。これはトリガー分子の細胞質ドメインに向かい合ったトランスメンブラン部位の端部に対して、scFvを結合して、またはトリガー分子の内生的細胞外部位または他の起源からの部分のいずれであるスペーサーを用いることによって、達成される。本発明のキメラ分子はMHC非制限抗体型特異性を発現する免疫細胞上に与える能力をもつ。従って、抗原結合および信号形質導入の性質の連続ポリペプチドを、免疫細胞上の標的受容体として生成して利用することができる。生体内では、これらの遺伝学的に巧みに処理したキメラ受容体を発現する細胞はそれらの標的に向い、それによって他のエフェクター細胞を引きつけるように刺激され、そこで、それ自身によって、標的細胞の特異的破壊を取りつぐだろう。好適例では、標的細胞は腫瘍細胞であり、scFvドメインは腫瘍細胞上に発現したエピドープに特異的な抗体から誘導される。このような抗腫瘍細胞溶解がIL−2の外来性供給から独立することができ、従って養子免疫治療に対して特異的で安全な手段を与えることが期待される。
好適例では、免疫細胞はT細胞またはNK細胞である。本発明の抗体scFvR設計は従ってMHC非制限方法で生体内においてリンパ球を新しい標的に向けることを含む。このようにして、T細胞は生体内で腫瘍細胞、または抗体を高めることができるように選択する任意の他の標的に向けることができる。
“一本鎖Fvドメイン”の用語は、その全体の内容がここに参考のために組み込まれる参照文献16と17に記載されたような従来の一本鎖抗体だけでなく、一本鎖形態の抗体の結合ドメインを与える任意の構成、例えば超可変領域としても知られている抗体の1またはそれ以上の相補性決定部位(CDRs)を含むことができるような構成を含むことを意味する。
受容体分子のトランスメンブランおよび細胞質部分を符号化する遺伝子は天然遺伝子またはその天然アミノ酸シークエンス中のタンパク質を符号化するいずれかの遺伝子に正確に対応することができる。さらに、本発明は、変異体タンパク質分子が実質的にアミノ酸シークエンスおよび/または3D構造において似ており、天然タンパク質に類似した生物活性を有するように、分子のアミノ酸構造に対し一定の小さい改変を特徴とするmuteinsを含む。
本発明の形質転換細胞は多くの病気の治療に使用することができる。このような形質転換細胞を投与する最新の方法は、養子免疫治療または細胞移入治療を含む。これらの方法は血液流に形質転換免疫系細胞を戻すことができる。ローゼンベルグ・エス・エイ、Scientific Ame rican 62(1990年5月);ローゼンベルグら、The New England Journal of Medicine 323(9):570(1990)。
本発明の形質転換細胞は適当な製薬学的に許容できる賦形剤との製薬組成物の形態で投与することができる。このような組成物は、ヒトを含めて、本発明の形質転換細胞の有益な効果を経験できるいずれかの動物に投与することができる。
さらに当業者は本発明のscFv部分を作成するために使用される抗体は任意の抗体であり、その特異性が免疫細胞に伝達されることが望ましいものであることを理解するだろう。このような抗体は、腫瘍細胞、ウィルス抗原を発現する細胞、ある一定のB細胞およびT細胞を特異的に除去するための抗イディオタイプまたは抗クロノタイプ抗体、たまは免疫グロブリン決定基の一定領域に逆らう抗体に対抗することができる。従って、例えば、抗体がIgEの一定部位に特異的であるならば、アレルギー等を緩和するためにIgE生成物B細胞を除去するために役立つことができる。可能な抗体のこのリストは限定するものではなく、当業者は本発明に従って受容体と組み合わせる際に重要な効用が存在する多くの追加の抗体に気付くであろう。
本発明の遺伝子を当該分野で知られている任意の方法、例えば、リン酸カルシウムトランスフェクション、電気穿孔法、リポフェクション、レトロウィルスベクターによる形質導入、レトロウィルスベクターまたはウィルスベクター等で免疫細胞に導入することができる。
scFvR設計はcTCR設計よりも有利である。cTCRに対し必要な遺伝子ペアの代わりに1個の遺伝子のみを発現し、これによって一層簡単な構築とトランスフェクションを提供する必要がある。
さらに、scFvR設計は唯一の鎖から成る信号分子の大きいスペクトルに抗体特異性を与えるために使用することができる。そのうえ、scFvは一本鎖にVHとVLを共に維持し;従ってキメラと内因性鎖との混合ペアを作る際にも、分子の抗原結合性が保持される。最後にガンマとゼータがTCR/CD3、FcγR IIIおよびFCεR Iの信号鎖を構成するという事実は、他の造血細胞、例えばNK細胞、好塩基球、またはマスト細胞、T細胞を新しい目標に向けるため、キメラ受容体を利用する可能性を広げる。
本発明のキメラscFvRγまたは以下に記載するその簡単な変更は、連続一本鎖としての抗体の特異性、および細胞障害性T細胞およびNK細胞のエゲクター機能またはヘルパーT細胞の調節機能の有効性を合わせて、標的免疫治療学について重要な当然な発達を構成する。このアプローチは抗原認識ユニットとしてscFv、NK細胞およびT細胞の有力な細胞障害性応答、およびまたはT細胞の能力を活用し、標的部位での活性化の際にリンホカインおよびサイトカインを分泌し、従って免疫系の他の武器を補充し、調節し、増幅することになる。
キメラscFv受容体はリンパ球に次の機能を与える:任意の予め定められた抗原に対する抗体型特異性;それらの標的への特異的“ホーミング";特異的認識:活性化、および標的に出会う結果としてエフェクター機能の実行、および標的部位での特異的な制御された増殖。抗原からのFvをリンパ球に賦与することは、また可溶性ハプテンまたは抗イディオタイプ抗体のFab'を用いる前記機能の制御された選択的ブロッキングのために役立つことができる。
このアプローチを用いる抗体特異性を賦与される候補の免疫細胞は、NK細胞、リンホカイン活性化キラー細胞(LAK)、細胞障害性T細胞、ヘルパーT細胞、および上記の種々のサブタイプである。これらの細胞はその真正な自然のままの機能を実行することができ、さらに、遺伝子治療のために示された外来遺伝子のキャリヤーとして役立つことができ、キメラ受容体はこの場合には細胞をその標的に向けるために役立つだろう。このアプローチはまた、抗イディオタイプ抗体のFvから作られたキメラ受容体を発現するヘルパーT細胞を用いて、抗イディオタイプ予防接種に応用することができる。このような“デザイナーリンパ球”はイディオタイプベアリングB細胞に影響し合い刺激して、抗原特異的抗体を生成し、従って細胞障害性抗原を用いる能動免疫の必要性を回避する。
本発明をさらに次の限定されない実施例によって説明する。
実施例
実施例1:キメラScFvRγ/ζ鎖遺伝子の構築と発現
この実施例では次の物質と方法を用いた。
A.細胞系および抗体 MD.45はH−2bにアロスペシフィックなBALB/cマウスの細胞溶解T−リンパ球(CTL)ハイブリドーマである(29)。MD45.27JはMD.45のTCRα突然変異体である。A.20はBALB/c起源のBリンパ腫である(ATCC#T1B208)。10%ウシ胎児血清(FCS)を追加したダルベッコの修飾イーグル媒体(DMEM)で細胞を培養した。Sp6、抗TNPmAb、および20.5、抗Sp6イディオタイプmAbは、ジイ・ケーラーによって提供された(30)。抗ヒトFcεR Iγ鎖ポリクローナルおよびモノクローナル(4D8)(31)抗体は、それぞれ、ジェイ・ピイ・キネトおよびジェイ・コーチャンによって提供され、ネズミゼータ鎖へのウサギ抗体はエム・バニヤシュによって提供された。
B.キメラ遺伝子の構築 全部の組換えDNA操作はサムブルークら、(1989)Molecular Cloning:A Laboratory Manual、コールド・スプリング・ハーバー、ニューヨーク、およびアウスベルら、(1987)Current Protocols in Molecular Biology,John Willey & Sonsの最新版に記載されているように行った。Sp6抗TNP抗体のVHおよびVLを符号化する特異的遺伝子は、scFvの末端でXba IとBstE II制御部位を導入する免疫グロブリンV領域(33)の5'および3'共通アミノ酸配列に従って設計されたオリゴデオキシヌクレオチドプライマーを用いるPCR増幅によってcTCR(12、32)を調製するために記載されたゲノム構築物から誘導した。scFvを構築する際に、我々はコルチャーらによって記載されたリンカー212に似たリンカーシーケンスを含むVL−リンカー−VHを使用した(34)。従って、VL−3'およびVH−5'プライマーはリンカーの5'および3'部分から成るシークエンスを含み、それぞれ、それらの3'および5'末端でSal Iを導入する。表Iは異なる構築において使用されるオリゴヌクレオチドプライマーを記載する。実施例では、使用した特異的プライマーの数を参照させる。Xba IおよびSal I(VL)およびSal IおよびBstE II(VH)で精製PCR生成物を消化した後、断片を、抗35C.13cDNA cTCR遺伝子(12)の発現のために用意された、カッパ軽鎖(エス・レビイによって提供された)およびTCR一定領域β鎖(Cβ)のリーダーを含むpRSV2neoベース発現ベクターのXba IおよびBstE II部位に連結した。このプラスミドのCβを次に、ヒトcDNAクローン(35)から増幅したガンマ鎖またはジャーカットcDNAから増幅したゼータ鎖のいずれかと、5'および3'末端にBstE IIおよびXho Iを導入するプライマーを用いることによって置換した。最終のscFvRγ発現ベクターの概略図は図2に示される。キメラscFvRγおよびscFvRζの構築に使用するオリゴデオキシヌクレオチドのシークエンスは表Iに詳細に表される。
Claims (23)
- 予め定められた抗原に特異的な抗体の一本鎖Fvドメイン(scFv)を符号化する第1の遺伝子断片、および内因性タンパク質のトランスメンブランおよび細胞質そして任意に細胞外のドメインを部分的にまたは完全に符号化する第2の遺伝子断片から成り、前記内因性タンパク質が免疫系の細胞の表面で発現し前記細胞の活性化および/または増殖する引き金となり、キメラ遺伝子は、免疫系の前記細胞にトランスフェクションする際に、トランスフェクションした細胞の表面で前記scFvドメインと1本鎖における前記内因性タンパク質の前記ドメインの両方を発現し、トランスフェクションした細胞が活性化および/または増殖するように引き金となり、前記発現したscFvドメインがその抗原に結合するときMHC非制限抗体型特異性を持つようにするキメラ遺伝子。
- 第2の遺伝子断片がさらに部分的にまたは全体的に前記内因性タンパク質の細胞外ドメインを含む請求項1によるキメラ遺伝子。
- 第1の遺伝子断片が腫瘍細胞に特異的な抗体のscFvドメインを符号化する請求項1または2によるキメラ遺伝子。
- 第1の遺伝子断片がウイルス感染細胞に特異的な抗体のscFvドメインを符号化する請求項1または2によるキメラ遺伝子。
- ウイルスがHIVである請求項4によるキメラ遺伝子。
- 内因性タンパク質がリンパ球受容体鎖、TCR/CD3複合体のポリペプチド、またはFcまたはIL−2受容体のサブユニットである請求項1ないし5のいずれか1項によるキメラ遺伝子。
- 内因性タンパク質がリンパ球受容体鎖である請求項1ないし6のいずれか1項によるキメラ遺伝子。
- 内因性タンパク質がT細胞受容体の鎖である請求項7によるキメラ遺伝子。
- 内因性タンパク質が抗原特異的T細胞受容体のα、β、γまたはδ鎖を符号化する請求項8によるキメラ遺伝子。
- 内因性タンパク質がTCR/CD3複合体のポリペプチドである請求項1ないし6のいずれか1項によるキメラ遺伝子。
- 内因性タンパク質がゼータまたはイータイソフォーム鎖である請求項10によるキメラ遺伝子。
- 内因性タンパク質がFc受容体またはIL−2受容体のサブユニットである請求項1ないし6のいずれか1項によるキメラ遺伝子。
- 内因性タンパク質がIgEおよびIgG結合Fc受容体の共通サブユニットである請求項12によるキメラ遺伝子。
- 前記サブユニットがガンマサブユニットである請求項13によるキメラ遺伝子。
- 内因性タンパク質がFcγR IIIまたはFcγR IIのCD16α鎖である請求項12によるキメラ遺伝子。
- 第2の遺伝子セグメントがIL−2受容体のαまたはβサブユニットを符号化する請求項12によるキメラ遺伝子。
- 内因性タンパク質がCD2またはCD28である請求項1ないし5のいずれか1項によるキメラ遺伝子。
- 請求項1ないし17のいずれか1項によるキメラ遺伝子からなる発現ベクター。
- 請求項18による発現ベクターで形質転換した抗体特異性を賦与した免疫系の細胞。
- 請求項1ないし17のいずれか1項によるキメラ遺伝子からなる抗体特異性を賦与した免疫系の細胞。
- 正常キラー細胞、リンホカイン活性化細胞、細胞障害性T細胞、ヘルパーT細胞およびそのサブタイプから成る群から選択された請求項19または20による免疫系の細胞。
- 請求項1ないし3または6ないし17のいずれか1項によるキメラ遺伝子からなる発現ベクターで形質転換した患者のリンパ球細胞からなり、第1の遺伝子断片が腫瘍細胞に特異的な抗体のscFvドメインを符号化し、前記形質転換した細胞が腫瘍細胞を標的としてこれにより腫瘍の退行を引き起こさせる、抗癌免疫治療剤。
- 前記リンパ球細胞が末梢血球細胞である請求項22記載の治療剤。
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EP3049445A4 (en) | 2013-09-24 | 2017-10-25 | Medicenna Therapeutics, Inc. | Interleukin-2 fusion proteins and uses thereof |
US10801070B2 (en) | 2013-11-25 | 2020-10-13 | The Broad Institute, Inc. | Compositions and methods for diagnosing, evaluating and treating cancer |
US11725237B2 (en) | 2013-12-05 | 2023-08-15 | The Broad Institute Inc. | Polymorphic gene typing and somatic change detection using sequencing data |
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CN106456724A (zh) | 2013-12-20 | 2017-02-22 | 博德研究所 | 使用新抗原疫苗的联合疗法 |
EP3087101B1 (en) | 2013-12-20 | 2024-06-05 | Novartis AG | Regulatable chimeric antigen receptor |
WO2015112626A1 (en) | 2014-01-21 | 2015-07-30 | June Carl H | Enhanced antigen presenting ability of car t cells by co-introduction of costimulatory molecules |
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US10150802B2 (en) | 2014-04-24 | 2018-12-11 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Superagonists, partial agonists and antagonists of interleukin-2 |
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US20180080008A1 (en) | 2014-08-12 | 2018-03-22 | Anthrogenesis Corporation | Car-t lymphocytes engineered to home to lymph node b cell zone, skin, or gastrointestinal tract |
CN107108744B (zh) | 2014-08-19 | 2020-09-25 | 诺华股份有限公司 | 抗cd123嵌合抗原受体(car)用于癌症治疗 |
CA2961636A1 (en) | 2014-09-17 | 2016-03-24 | Boris ENGELS | Targeting cytotoxic cells with chimeric receptors for adoptive immunotherapy |
CN106973568B (zh) | 2014-10-08 | 2021-07-23 | 诺华股份有限公司 | 预测针对嵌合抗原受体疗法的治疗应答性的生物标志及其用途 |
MA41538A (fr) | 2014-10-17 | 2017-12-26 | Baylor College Medicine | Cellules immunitaires bipartites et tripartites de signalisation |
CA3008162A1 (en) | 2014-12-15 | 2016-06-23 | The Regents Of The University Of California | Bispecific or-gate chimeric antigen receptor responsive to cd19 and cd20 |
EP3234120A4 (en) | 2014-12-15 | 2018-05-16 | The Regents of the University of California | Cytotoxic molecules responsive to intracellular ligands for selective t cell mediated killing |
WO2016100975A1 (en) | 2014-12-19 | 2016-06-23 | Massachsetts Institute Ot Technology | Molecular biomarkers for cancer immunotherapy |
US10993997B2 (en) | 2014-12-19 | 2021-05-04 | The Broad Institute, Inc. | Methods for profiling the t cell repertoire |
SG11201705293WA (en) | 2014-12-29 | 2017-07-28 | Novartis Ag | Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells |
WO2016115482A1 (en) | 2015-01-16 | 2016-07-21 | Novartis Pharma Ag | Phosphoglycerate kinase 1 (pgk) promoters and methods of use for expressing chimeric antigen receptor |
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KR20170132793A (ko) | 2015-04-03 | 2017-12-04 | 유레카 쎄라퓨틱스, 인코포레이티드 | Afp 펩티드/mhc 복합체를 표적화하는 구축물 및 그의 용도 |
IL303972A (en) | 2015-04-08 | 2023-08-01 | Novartis Ag | CD20 treatments, CD22 treatments and combined treatments with CD19 chimeric antigen receptor expressing cell |
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PL3298033T5 (pl) * | 2015-05-18 | 2023-10-30 | TCR2 Therapeutics Inc. | Kompozycje i zastosowania medyczne do reprogramowania TCR z zastosowaniem białek fuzyjnych |
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WO2017069958A2 (en) | 2015-10-09 | 2017-04-27 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Modulation of novel immune checkpoint targets |
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EP3368689B1 (en) | 2015-10-28 | 2020-06-17 | The Broad Institute, Inc. | Composition for modulating immune responses by use of immune cell gene signature |
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WO2017075465A1 (en) | 2015-10-28 | 2017-05-04 | The Broad Institute Inc. | Compositions and methods for evaluating and modulating immune responses by detecting and targeting gata3 |
AU2016355178B9 (en) | 2015-11-19 | 2019-05-30 | Massachusetts Institute Of Technology | Lymphocyte antigen CD5-like (CD5L)-interleukin 12B (p40) heterodimers in immunity |
MA44140A (fr) | 2015-12-22 | 2021-05-19 | Dana Farber Cancer Inst Inc | Récepteur d'antigène chimérique (car) contre la mésothéline et anticorps contre l'inhibiteur de pd-l1 pour une utilisation combinée dans une thérapie anticancéreuse |
SG10201913805RA (en) | 2016-01-08 | 2020-03-30 | Univ California | Conditionally active heterodimeric polypeptides and methods of use thereof |
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WO2017173256A1 (en) | 2016-04-01 | 2017-10-05 | Kite Pharma, Inc. | Chimeric antigen and t cell receptors and methods of use |
SG10201912515XA (en) | 2016-04-01 | 2020-02-27 | Kite Pharma Inc | Bcma binding molecules and methods of use thereof |
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EP4180449A1 (en) | 2016-04-01 | 2023-05-17 | Kite Pharma, Inc. | Chimeric receptors and methods of use thereof |
US20190346442A1 (en) | 2016-04-18 | 2019-11-14 | The Broad Institute, Inc. | Improved hla epitope prediction |
US11382931B2 (en) | 2016-07-14 | 2022-07-12 | University Of Southern California | Methods and composition for producing and using immune cells and stem cells for cell-based therapies |
CA3032498A1 (en) | 2016-08-02 | 2018-02-08 | TCR2 Therapeutics Inc. | Compositions and methods for tcr reprogramming using fusion proteins |
US11630103B2 (en) | 2016-08-17 | 2023-04-18 | The Broad Institute, Inc. | Product and methods useful for modulating and evaluating immune responses |
CA3039136A1 (en) | 2016-09-02 | 2018-03-08 | The Regents Of The University Of California | Methods and compositions involving interleukin-6 receptor alpha-binding single chain variable fragments |
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TW201831517A (zh) | 2017-01-12 | 2018-09-01 | 美商優瑞科生物技術公司 | 靶向組織蛋白h3肽/mhc複合體之構築體及其用途 |
EP3574116A1 (en) | 2017-01-24 | 2019-12-04 | The Broad Institute, Inc. | Compositions and methods for detecting a mutant variant of a polynucleotide |
US11649288B2 (en) | 2017-02-07 | 2023-05-16 | Seattle Children's Hospital | Phospholipid ether (PLE) CAR T cell tumor targeting (CTCT) agents |
CN110809716B (zh) | 2017-02-12 | 2023-07-07 | 百欧恩泰美国公司 | 基于hla的方法和组合物及其用途 |
CN110582288A (zh) | 2017-02-28 | 2019-12-17 | 恩多塞特公司 | 用于car t细胞疗法的组合物和方法 |
SG11201907434RA (en) | 2017-03-22 | 2019-10-30 | Novartis Ag | Compositions and methods for immunooncology |
WO2018183908A1 (en) | 2017-03-31 | 2018-10-04 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Compositions and methods for treating ovarian tumors |
EP3606518A4 (en) | 2017-04-01 | 2021-04-07 | The Broad Institute, Inc. | METHODS AND COMPOSITIONS FOR DETECTION AND MODULATION OF IMMUNOTHERAPY RESISTANCE GENE SIGNATURE IN CANCER |
CN110494158A (zh) | 2017-04-03 | 2019-11-22 | 凯德药业股份有限公司 | 使用包含优化的多功能t细胞的嵌合受体t细胞进行治疗 |
US20200071773A1 (en) | 2017-04-12 | 2020-03-05 | Massachusetts Eye And Ear Infirmary | Tumor signature for metastasis, compositions of matter methods of use thereof |
MX2019012398A (es) | 2017-04-18 | 2020-09-25 | Broad Inst Inc | Composiciones para detectar secreciones y metodos de uso. |
CA3060443A1 (en) | 2017-04-19 | 2018-10-25 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Immune cells expressing engineered antigen receptors |
JOP20180040A1 (ar) | 2017-04-20 | 2019-01-30 | Gilead Sciences Inc | مثبطات pd-1/pd-l1 |
JOP20180042A1 (ar) | 2017-04-24 | 2019-01-30 | Kite Pharma Inc | نطاقات ربط مولد ضد متوافقة مع البشر وطرق الاستخدام |
IL310182A (en) | 2017-04-26 | 2024-03-01 | Eureka Therapeutics Inc ׂ A Delaware Corp | Structures of chimeric antibody/T-cell receptor and uses thereof |
US11166985B2 (en) | 2017-05-12 | 2021-11-09 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for engineering cells and uses thereof in immuno-oncology |
IL270415B1 (en) | 2017-05-12 | 2024-04-01 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for cell engineering and their uses in immuno-oncology |
US11897953B2 (en) | 2017-06-14 | 2024-02-13 | The Broad Institute, Inc. | Compositions and methods targeting complement component 3 for inhibiting tumor growth |
CA3067909A1 (en) | 2017-06-19 | 2018-12-27 | Medicenna Therapeutics Inc. | Uses and methods for il-2 superagonists, agonists, and fusions thereof |
WO2019006418A2 (en) | 2017-06-30 | 2019-01-03 | Intima Bioscience, Inc. | ADENO-ASSOCIATED VIRAL VECTORS FOR GENE THERAPY |
AU2018298884A1 (en) | 2017-07-14 | 2020-02-27 | Immatics Biotechnologies Gmbh | Improved dual specificity polypeptide molecule |
WO2019055896A1 (en) | 2017-09-15 | 2019-03-21 | Kite Pharma, Inc. | METHODS AND SYSTEMS FOR PERFORMING A PATIENT-CLEAN IMMUNOTHERAPY PROCEDURE WITH FOLLOW-UP OF BIOLOGICAL SAMPLE CHAIN OF CONTROL AND IDENTITY CHAIN |
JP2020535802A (ja) | 2017-09-21 | 2020-12-10 | ザ・ブロード・インスティテュート・インコーポレイテッド | 標的化核酸編集のための系、方法、及び組成物 |
US11999802B2 (en) | 2017-10-18 | 2024-06-04 | Novartis Ag | Compositions and methods for selective protein degradation |
BR112020007493A2 (pt) | 2017-10-18 | 2020-10-27 | Kite Pharma, Inc. | métodos de administrar imunoterapia com receptor de antígeno quimérico |
WO2019084055A1 (en) | 2017-10-23 | 2019-05-02 | Massachusetts Institute Of Technology | CLASSIFICATION OF GENETIC VARIATION FROM UNICELLULAR TRANSCRIPTOMS |
EP3710039A4 (en) | 2017-11-13 | 2021-08-04 | The Broad Institute, Inc. | METHODS AND COMPOSITIONS FOR CANCER TREATMENT BY TARGETING THE CLEC2D-KLRB1 PATH |
US11649294B2 (en) | 2017-11-14 | 2023-05-16 | GC Cell Corporation | Anti-HER2 antibody or antigen-binding fragment thereof, and chimeric antigen receptor comprising same |
WO2019099707A1 (en) | 2017-11-16 | 2019-05-23 | Kite Pharma, Inc | Modified chimeric antigen receptors and methods of use |
AU2018392213B2 (en) | 2017-12-20 | 2021-03-04 | Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. | 3'3' cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the STING adaptor protein |
JP7098748B2 (ja) | 2017-12-20 | 2022-07-11 | インスティチュート オブ オーガニック ケミストリー アンド バイオケミストリー エーエスシーアール,ヴイ.ヴイ.アイ. | Stingアダプタータンパク質を活性化するホスホン酸結合を有する2’3’環状ジヌクレオチド |
US11994512B2 (en) | 2018-01-04 | 2024-05-28 | Massachusetts Institute Of Technology | Single-cell genomic methods to generate ex vivo cell systems that recapitulate in vivo biology with improved fidelity |
KR20200110356A (ko) | 2018-01-15 | 2020-09-23 | 화이자 인코포레이티드 | 키메라 항원 수용체 면역요법을 4-1bb 효능제와 조합하여 투여하는 방법 |
BR112020014913A2 (pt) | 2018-01-22 | 2020-12-08 | Seattle Children's Hospital (dba Seattle Children's Research Institute) | Métodos para uso de células t car |
PL3752501T3 (pl) | 2018-02-13 | 2023-08-21 | Gilead Sciences, Inc. | Inhibitory pd-1/pd-l1 |
CA3090793A1 (en) | 2018-02-16 | 2019-08-22 | Kite Pharma, Inc. | Modified pluripotent stem cells and methods of making and use |
AU2019223076A1 (en) | 2018-02-21 | 2020-10-08 | Celgene Corporation | BCMA-binding antibodies and uses thereof |
TWI818007B (zh) | 2018-04-06 | 2023-10-11 | 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 | 2'3'-環二核苷酸 |
TWI833744B (zh) | 2018-04-06 | 2024-03-01 | 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 | 3'3'-環二核苷酸 |
TW202005654A (zh) | 2018-04-06 | 2020-02-01 | 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 | 2,2,─環二核苷酸 |
EA202092417A1 (ru) | 2018-04-10 | 2021-01-26 | Амген Инк. | Химерные рецепторы к dll3 и способы их применения |
IL277977B1 (en) | 2018-04-12 | 2024-03-01 | Kite Pharma Inc | Chimeric T cell receptor therapy using tumor microenvironmental characteristics |
EP3781556A1 (en) | 2018-04-19 | 2021-02-24 | Gilead Sciences, Inc. | Pd-1/pd-l1 inhibitors |
US11957695B2 (en) | 2018-04-26 | 2024-04-16 | The Broad Institute, Inc. | Methods and compositions targeting glucocorticoid signaling for modulating immune responses |
US20190359645A1 (en) | 2018-05-03 | 2019-11-28 | Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. | 2'3'-cyclic dinucleotides comprising carbocyclic nucleotide |
US20200063100A1 (en) | 2018-05-11 | 2020-02-27 | Crispr Therapeutics Ag | Methods and compositions for treating cancer |
UA125163C2 (uk) | 2018-05-14 | 2022-01-19 | Гіліад Сайєнсіз, Інк. | Інгібітори mcl-1 |
WO2019232523A1 (en) | 2018-06-01 | 2019-12-05 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Il-13/il-4 superkines: immune cell targeting constructs and methods of use thereof |
US20210371932A1 (en) | 2018-06-01 | 2021-12-02 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods and compositions for detecting and modulating microenvironment gene signatures from the csf of metastasis patients |
CA3100724A1 (en) | 2018-06-13 | 2019-12-19 | Novartis Ag | B-cell maturation antigen protein (bcma) chimeric antigen receptors and uses thereof |
WO2019241549A1 (en) | 2018-06-15 | 2019-12-19 | A2 Biotherapeutics, Inc. | Foxp3-expressing car-t regulatory cells |
WO2019245817A1 (en) | 2018-06-19 | 2019-12-26 | Armo Biosciences, Inc. | Compositions and methods of use of il-10 agents in conjunction with chimeric antigen receptor cell therapy |
PT3820572T (pt) | 2018-07-13 | 2023-11-10 | Gilead Sciences Inc | Inibidores pd-1/pd-l1 |
MA53167A (fr) | 2018-07-18 | 2021-05-26 | Amgen Inc | Récepteurs chimériques de steap1 et procédés d'utilisation associées |
CA3170491A1 (en) | 2018-08-02 | 2020-02-06 | Kite Pharma, Inc. | Chimeric antigen receptor therapy t cell expansion kinetics and uses thereof |
WO2020041384A1 (en) | 2018-08-20 | 2020-02-27 | The Broad Institute, Inc. | 3-phenyl-2-cyano-azetidine derivatives, inhibitors of rna-guided nuclease activity |
WO2020068304A2 (en) | 2018-08-20 | 2020-04-02 | The Broad Institute, Inc. | Inhibitors of rna-guided nuclease target binding and uses thereof |
WO2020041387A1 (en) | 2018-08-20 | 2020-02-27 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Degradation domain modifications for spatio-temporal control of rna-guided nucleases |
US20210382068A1 (en) | 2018-10-02 | 2021-12-09 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Hla single allele lines |
WO2020072656A1 (en) | 2018-10-03 | 2020-04-09 | Gilead Sciences, Inc. | Imidozopyrimidine derivatives |
WO2020081730A2 (en) | 2018-10-16 | 2020-04-23 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods and compositions for modulating microenvironment |
WO2020086635A1 (en) | 2018-10-23 | 2020-04-30 | Amgen Inc. | Automatic calibration and automatic maintenance of raman spectroscopic models for real-time predictions |
US11236085B2 (en) | 2018-10-24 | 2022-02-01 | Gilead Sciences, Inc. | PD-1/PD-L1 inhibitors |
US20210388084A1 (en) | 2018-10-25 | 2021-12-16 | Polpharma Biologics Utrecht B.V. | Anti-human cd89 antibodies and uses thereof |
WO2020092455A2 (en) | 2018-10-29 | 2020-05-07 | The Broad Institute, Inc. | Car t cell transcriptional atlas |
US20210388389A1 (en) | 2018-10-30 | 2021-12-16 | Yale University | Compositions and methods for rapid and modular generation of chimeric antigen receptor t cells |
CA3116347A1 (en) | 2018-10-31 | 2020-05-07 | Gilead Sciences, Inc. | Substituted 6-azabenzimidazole compounds having hpk1 inhibitory activity |
CN113227089A (zh) | 2018-10-31 | 2021-08-06 | 吉利德科学公司 | 作为hpk1抑制剂的取代的6-氮杂苯并咪唑化合物 |
CA3121268A1 (en) | 2018-12-10 | 2020-06-18 | Amgen Inc. | Mutated piggybac transposase |
MX2021006968A (es) | 2018-12-12 | 2021-10-13 | Kite Pharma Inc | Antígeno quimérico y receptores de las células t, y métodos de uso. |
WO2020131586A2 (en) | 2018-12-17 | 2020-06-25 | The Broad Institute, Inc. | Methods for identifying neoantigens |
MX2021007556A (es) | 2018-12-21 | 2021-09-10 | Biontech Us Inc | Método y sistemas de predicción de epítopos específicos de hla de clase ii y caracterización de células t cd4+. |
US11739156B2 (en) | 2019-01-06 | 2023-08-29 | The Broad Institute, Inc. Massachusetts Institute of Technology | Methods and compositions for overcoming immunosuppression |
TW202043253A (zh) | 2019-01-28 | 2020-12-01 | 美商安進公司 | 藉由將藥物物質和藥物產品過程整體化的生物製劑製造之連續製造過程 |
CN113543799A (zh) | 2019-03-01 | 2021-10-22 | 艾洛基治疗公司 | 靶向dll3的嵌合抗原受体和结合剂 |
US11766447B2 (en) | 2019-03-07 | 2023-09-26 | Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. | 3′3′-cyclic dinucleotide analogue comprising a cyclopentanyl modified nucleotide as sting modulator |
CN113574063A (zh) | 2019-03-07 | 2021-10-29 | 捷克共和国有机化学与生物化学研究所 | 3’3’-环二核苷酸及其前药 |
EP3934757B1 (en) | 2019-03-07 | 2023-02-22 | Institute of Organic Chemistry and Biochemistry ASCR, V.V.I. | 2'3'-cyclic dinucleotides and prodrugs thereof |
US20220154282A1 (en) | 2019-03-12 | 2022-05-19 | The Broad Institute, Inc. | Detection means, compositions and methods for modulating synovial sarcoma cells |
EP3942023A1 (en) | 2019-03-18 | 2022-01-26 | The Broad Institute, Inc. | Compositions and methods for modulating metabolic regulators of t cell pathogenicity |
EP3941928A1 (en) | 2019-03-19 | 2022-01-26 | Amgen Inc. | Alternate detergents for viral inactivation |
AU2020240339A1 (en) | 2019-03-21 | 2021-08-26 | Allogene Therapeutics, Inc. | Methods for enhancing TCRαβ+ cell depletion efficiency |
TWI751517B (zh) | 2019-04-17 | 2022-01-01 | 美商基利科學股份有限公司 | 類鐸受體調節劑之固體形式 |
TW202210480A (zh) | 2019-04-17 | 2022-03-16 | 美商基利科學股份有限公司 | 類鐸受體調節劑之固體形式 |
CA3132509A1 (en) | 2019-04-26 | 2020-10-29 | Allogene Therapeutics, Inc. | Methods of manufacturing allogeneic car t cells |
EP3959235B1 (en) | 2019-04-26 | 2023-07-26 | Allogene Therapeutics, Inc. | Rituximab-resistant chimeric antigen receptors and uses thereof |
EP3962535A1 (en) | 2019-04-30 | 2022-03-09 | CRISPR Therapeutics AG | Allogeneic cell therapy of b cell malignancies using genetically engineered t cells targeting cd19 |
CA3133333A1 (en) | 2019-04-30 | 2020-04-30 | Brian Scott GARRISON | Chimeric receptors and methods of use thereof |
CN114206346A (zh) | 2019-05-03 | 2022-03-18 | 凯德药业股份有限公司 | 施用嵌合抗原受体免疫疗法的方法 |
CN118184800A (zh) | 2019-05-07 | 2024-06-14 | 亘喜生物科技(上海)有限公司 | 靶向bcma的工程化免疫细胞及其用途 |
US20220235340A1 (en) | 2019-05-20 | 2022-07-28 | The Broad Institute, Inc. | Novel crispr-cas systems and uses thereof |
KR20220027855A (ko) | 2019-05-22 | 2022-03-08 | 매사추세츠 인스티튜트 오브 테크놀로지 | 원형 rna 조성물 및 방법 |
EP3972695A1 (en) | 2019-05-23 | 2022-03-30 | Gilead Sciences, Inc. | Substituted exo-methylene-oxindoles which are hpk1/map4k1 inhibitors |
US20220226464A1 (en) | 2019-05-28 | 2022-07-21 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods and compositions for modulating immune responses |
CA3143271A1 (en) | 2019-06-21 | 2020-12-24 | Kite Pharma, Inc. | Tgf-.beta. receptors and methods of use |
CR20210687A (es) | 2019-06-25 | 2022-03-03 | Gilead Sciences Inc | PROTEÍNAS DE FUSIÓN FLT3L-Fc Y MÉTODOS DE USO |
WO2021030627A1 (en) | 2019-08-13 | 2021-02-18 | The General Hospital Corporation | Methods for predicting outcomes of checkpoint inhibition and treatment thereof |
US20220298501A1 (en) | 2019-08-30 | 2022-09-22 | The Broad Institute, Inc. | Crispr-associated mu transposase systems |
US11981922B2 (en) | 2019-10-03 | 2024-05-14 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Methods and compositions for the modulation of cell interactions and signaling in the tumor microenvironment |
US11793787B2 (en) | 2019-10-07 | 2023-10-24 | The Broad Institute, Inc. | Methods and compositions for enhancing anti-tumor immunity by targeting steroidogenesis |
CN118178645A (zh) | 2019-10-18 | 2024-06-14 | 四十七公司 | 用于治疗骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病的联合疗法 |
US11844800B2 (en) | 2019-10-30 | 2023-12-19 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods and compositions for predicting and preventing relapse of acute lymphoblastic leukemia |
WO2021087064A1 (en) | 2019-10-31 | 2021-05-06 | Forty Seven, Inc. | Anti-cd47 and anti-cd20 based treatment of blood cancer |
TWI778443B (zh) | 2019-11-12 | 2022-09-21 | 美商基利科學股份有限公司 | Mcl1抑制劑 |
MX2022006365A (es) | 2019-11-26 | 2022-06-22 | Novartis Ag | Receptores de antigeno quimerico cd19 y cd22 y usos de los mismos. |
EP3920976B1 (en) | 2019-12-04 | 2023-07-19 | Orna Therapeutics, Inc. | Circular rna compositions and methods |
JP2023509881A (ja) | 2019-12-24 | 2023-03-10 | カルナバイオサイエンス株式会社 | ジアシルグリセロールキナーゼ調節化合物 |
EP4081541A1 (en) | 2019-12-24 | 2022-11-02 | Jjp Biologics Sp. Z O.O. | Anti-human hvem (tnfrsf14) antibodies and uses thereof |
IL294388A (en) | 2020-01-14 | 2022-08-01 | Synthekine Inc | il2 orthologs and methods of use |
US20230058276A1 (en) | 2020-01-24 | 2023-02-23 | Amgen Inc. | Methods for harvesting biomolecules |
KR20220144377A (ko) | 2020-01-30 | 2022-10-26 | 우모자 바이오파마 인코포레이티드 | 이중특이적 형질도입 촉진제 |
WO2021158469A1 (en) | 2020-02-03 | 2021-08-12 | Amgen Inc. | Multivariate bracketing approach for sterile filter validation |
EP4103285A2 (en) | 2020-02-14 | 2022-12-21 | Jounce Therapeutics, Inc. | Antibodies and fusion proteins that bind to ccr8 and uses thereof |
JP2023518295A (ja) | 2020-03-20 | 2023-04-28 | オルナ セラピューティクス インコーポレイテッド | 環状rna組成物及び方法 |
MX2022012990A (es) | 2020-04-15 | 2023-01-11 | Amgen Inc | Proceso para generar células t autólogas modificadas genéticamente. |
CN115698078A (zh) | 2020-04-21 | 2023-02-03 | Jjp佰优罗机克斯有限公司 | 人源化抗人cd89抗体及其用途 |
KR20230006891A (ko) | 2020-05-01 | 2023-01-11 | 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 | Cd73를 억제하는 2,4-다이옥소피리미딘 화합물 |
TW202214844A (zh) | 2020-06-17 | 2022-04-16 | 美商健生生物科技公司 | 用於製造多能幹細胞之材料及方法 |
KR102297396B1 (ko) | 2020-07-29 | 2021-09-06 | (주)티카로스 | 면역시냅스를 안정화시키는 키메라 항원 수용체(car) t 세포 |
EP4192852A2 (en) | 2020-08-05 | 2023-06-14 | Synthekine, Inc. | Il10ra binding molecules and methods of use |
WO2022031869A2 (en) | 2020-08-05 | 2022-02-10 | Synthekine, Inc. | Gp130 binding molecules and methods of use |
US20230272094A1 (en) | 2020-08-05 | 2023-08-31 | Synthekine, Inc. | Il2rb/il2rg synthetic cytokines |
JP2023538303A (ja) | 2020-08-13 | 2023-09-07 | イェール ユニバーシティー | 所望の表現型を有するcar t細胞の操作および選択のための組成物および方法 |
IL299911A (en) | 2020-08-14 | 2023-03-01 | Kite Pharma Inc | Improving immune cell function |
WO2022046760A2 (en) | 2020-08-25 | 2022-03-03 | Kite Pharma, Inc. | T cells with improved functionality |
CN116368239A (zh) | 2020-10-16 | 2023-06-30 | 美国安进公司 | 从生物分子组合物中检测和去除聚乙烯基磺酸盐 |
CN116528879A (zh) | 2020-10-28 | 2023-08-01 | 凯德药业股份有限公司 | 用于表征t细胞杂质的流式细胞术方法 |
TW202233660A (zh) | 2020-10-30 | 2022-09-01 | 美商安進公司 | 過表現胰島素樣生長因子受體突變體以調節igf補充 |
EP4240494A1 (en) | 2020-11-06 | 2023-09-13 | Novartis AG | Anti-cd19 agent and b cell targeting agent combination therapy for treating b cell malignancies |
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WO2022150788A2 (en) | 2021-01-11 | 2022-07-14 | Synthekine, Inc. | Compositions and methods related to receptor pairing |
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TW202245811A (zh) | 2021-02-03 | 2022-12-01 | 美商異基因治療有限公司 | 用於car t細胞藥物產品的調配物與製程 |
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AU2022234333A1 (en) | 2021-03-11 | 2023-09-28 | Kite Pharma, Inc. | Improving immune cell function |
TW202302145A (zh) | 2021-04-14 | 2023-01-16 | 美商基利科學股份有限公司 | CD47/SIRPα結合及NEDD8活化酶E1調節次單元之共抑制以用於治療癌症 |
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AU2022291365A1 (en) | 2021-06-08 | 2024-01-18 | Kite Pharma, Inc. | Gpc3 binding molecules |
IL308746A (en) | 2021-06-10 | 2024-03-01 | Orna Therapeutics Inc | Cyclic RNA compositions and methods |
US11945876B2 (en) | 2021-06-16 | 2024-04-02 | Instil Bio (Uk) Limited | Receptors providing targeted costimulation for adoptive cell therapy |
WO2022271650A1 (en) | 2021-06-23 | 2022-12-29 | Gilead Sciences, Inc. | Diacylglyercol kinase modulating compounds |
KR20240023629A (ko) | 2021-06-23 | 2024-02-22 | 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 | 디아실글리세롤 키나제 조절 화합물 |
WO2022269473A1 (en) | 2021-06-23 | 2022-12-29 | Janssen Biotech, Inc. | Materials and methods for hinge regions in functional exogenous receptors |
CR20230585A (es) | 2021-06-23 | 2024-02-19 | Gilead Sciences Inc | Compuestos Moduladores de Diacilglicerol Quinasa. |
WO2022271659A1 (en) | 2021-06-23 | 2022-12-29 | Gilead Sciences, Inc. | Diacylglyercol kinase modulating compounds |
EP4363558A1 (en) | 2021-07-01 | 2024-05-08 | Kite Pharma, Inc. | Closed-system and method for autologous and allogeneic cell therapy manufacturing |
EP4364151A1 (en) | 2021-07-02 | 2024-05-08 | Kite Pharma, Inc. | A method for identifying variants in gene products from gene constructs used in cell therapy applications |
EP4370213A1 (en) | 2021-07-16 | 2024-05-22 | Instil Bio (Uk) Limited | Chimeric molecules providing targeted costimulation for adoptive cell therapy |
WO2023009989A1 (en) | 2021-07-26 | 2023-02-02 | Kite Pharma, Inc. | Split chimeric antigen receptors and methods of use |
AU2022317827A1 (en) | 2021-07-30 | 2024-01-25 | Kite Pharma, Inc. | Monitoring and management of cell therapy-induced toxicities |
AU2022324456A1 (en) | 2021-08-05 | 2024-02-15 | Go Therapeutics, Inc. | Anti-glyco-muc4 antibodies and their uses |
WO2023034569A1 (en) | 2021-09-03 | 2023-03-09 | Go Therapeutics, Inc. | Anti-glyco-cmet antibodies and their uses |
CA3230933A1 (en) | 2021-09-03 | 2023-03-09 | Go Therapeutics, Inc. | Anti-glyco-lamp1 antibodies and their uses |
TW202328442A (zh) | 2021-09-10 | 2023-07-16 | 美商安進公司 | 平臺宿主對igf—培養基之適應 |
WO2023044461A2 (en) | 2021-09-17 | 2023-03-23 | Parker Institute For Cancer Immunotherapy | Switch receptors using il-9 signaling domains |
WO2023056033A1 (en) | 2021-09-30 | 2023-04-06 | Orna Therapeutics, Inc. | Lipid nanoparticle compositions for delivering circular polynucleotides |
TW202325736A (zh) | 2021-10-18 | 2023-07-01 | 美商凱特製藥公司 | 用於嵌合抗原受體之信號傳導域 |
CA3236194A1 (en) | 2021-10-27 | 2023-05-04 | Amgen Inc. | Deep learning-based prediction for monitoring of pharmaceuticals using spectroscopy |
WO2023076983A1 (en) | 2021-10-28 | 2023-05-04 | Gilead Sciences, Inc. | Pyridizin-3(2h)-one derivatives |
AU2022376954A1 (en) | 2021-10-29 | 2024-05-02 | Gilead Sciences, Inc. | Cd73 compounds |
CA3236235A1 (en) | 2021-11-08 | 2023-05-11 | Orna Therapeutics, Inc. | Lipid nanoparticle compositions for delivering circular polynucleotides |
WO2023122581A2 (en) | 2021-12-22 | 2023-06-29 | Gilead Sciences, Inc. | Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof |
CA3237577A1 (en) | 2021-12-22 | 2023-06-29 | Gilead Sciences, Inc. | Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof |
WO2023137471A1 (en) | 2022-01-14 | 2023-07-20 | Tune Therapeutics, Inc. | Compositions, systems, and methods for programming t cell phenotypes through targeted gene activation |
WO2023137472A2 (en) | 2022-01-14 | 2023-07-20 | Tune Therapeutics, Inc. | Compositions, systems, and methods for programming t cell phenotypes through targeted gene repression |
TW202340168A (zh) | 2022-01-28 | 2023-10-16 | 美商基利科學股份有限公司 | Parp7抑制劑 |
US20230296610A1 (en) | 2022-02-15 | 2023-09-21 | Kite Pharma, Inc. | Predicting adverse events from immunotherapy |
TW202340457A (zh) | 2022-02-28 | 2023-10-16 | 美商凱特製藥公司 | 同種異體治療細胞 |
WO2023173137A1 (en) | 2022-03-11 | 2023-09-14 | Yale University | Compositions and methods for efficient and stable genetic modification of eukaryotic cells |
TW202346277A (zh) | 2022-03-17 | 2023-12-01 | 美商基利科學股份有限公司 | Ikaros鋅指家族降解劑及其用途 |
WO2023183817A1 (en) | 2022-03-24 | 2023-09-28 | Gilead Sciences, Inc. | Combination therapy for treating trop-2 expressing cancers |
TW202345901A (zh) | 2022-04-05 | 2023-12-01 | 美商基利科學股份有限公司 | 用於治療結腸直腸癌之組合療法 |
TW202346359A (zh) | 2022-04-15 | 2023-12-01 | 美商凱維那醫療公司 | 用於治療自體免疫疾病之方法及組合物 |
WO2023205719A1 (en) | 2022-04-21 | 2023-10-26 | Gilead Sciences, Inc. | Kras g12d modulating compounds |
US20230407252A1 (en) | 2022-04-28 | 2023-12-21 | Allogene Therapeutics, Inc. | Methods for donor cell analysis |
WO2023220644A1 (en) | 2022-05-10 | 2023-11-16 | Yale University | Compositions and methods of synthetic ctla-4 tails for reprogramming of car-t cells and enhancement of anti-tumor efficacy |
US20240000844A1 (en) | 2022-05-27 | 2024-01-04 | Kite Pharma, Inc. | Non-viral delivery of cell therapy constructs |
WO2023230276A1 (en) | 2022-05-27 | 2023-11-30 | Kite Pharma, Inc. | Compositions and methods for preparing engineered lymphocytes for cell therapy |
WO2023240218A1 (en) | 2022-06-09 | 2023-12-14 | Allogene Therapeutics Inc. | Methods for detecting genomic abnormalities in cells |
US20240052049A1 (en) | 2022-06-24 | 2024-02-15 | Orna Therapeutics, Inc. | Circular rna encoding chimeric antigen receptors targeting bcma |
US20240116928A1 (en) | 2022-07-01 | 2024-04-11 | Gilead Sciences, Inc. | Cd73 compounds |
WO2024018426A1 (en) | 2022-07-22 | 2024-01-25 | Janssen Biotech, Inc. | Enhanced transfer of genetic instructions to effector immune cells |
US20240085403A1 (en) | 2022-08-16 | 2024-03-14 | Allogene Therapeutics, Inc. | Method for inhibiting adventitious viral infection |
US20240091261A1 (en) | 2022-08-26 | 2024-03-21 | Kite Pharma, Inc. | Immune cell function |
WO2024059235A2 (en) | 2022-09-16 | 2024-03-21 | Amgen Inc. | A method for harvesting products from perfusion cultures |
WO2024064642A2 (en) | 2022-09-19 | 2024-03-28 | Tune Therapeutics, Inc. | Compositions, systems, and methods for modulating t cell function |
WO2024064824A2 (en) | 2022-09-21 | 2024-03-28 | Yale University | Compositions and methods for identification of membrane targets for enhancement of nk cell therapy |
WO2024064668A1 (en) | 2022-09-21 | 2024-03-28 | Gilead Sciences, Inc. | FOCAL IONIZING RADIATION AND CD47/SIRPα DISRUPTION ANTICANCER COMBINATION THERAPY |
WO2024077256A1 (en) | 2022-10-07 | 2024-04-11 | The General Hospital Corporation | Methods and compositions for high-throughput discovery ofpeptide-mhc targeting binding proteins |
WO2024092227A1 (en) | 2022-10-28 | 2024-05-02 | Kite Pharma, Inc. | Factors for optimizing immunotherapy |
US20240148790A1 (en) | 2022-10-28 | 2024-05-09 | Kite Pharma, Inc. | Expedited administration of engineered lymphocytes |
WO2024092152A1 (en) | 2022-10-28 | 2024-05-02 | Kite Pharma, Inc. | Improving efficacy and durable response of immunotherapy |
WO2024098028A2 (en) | 2022-11-04 | 2024-05-10 | Umoja Biopharma, Inc. | Lentiviral particles displaying fusion molecules and uses thereof |
WO2024097992A2 (en) | 2022-11-04 | 2024-05-10 | Umoja Biopharma, Inc. | Particles displaying adhesion-molecule fusions |
WO2024102677A1 (en) | 2022-11-08 | 2024-05-16 | Orna Therapeutics, Inc. | Circular rna compositions |
WO2024102730A1 (en) | 2022-11-08 | 2024-05-16 | Orna Therapeutics, Inc. | Lipids and nanoparticle compositions for delivering polynucleotides |
WO2024102762A1 (en) | 2022-11-08 | 2024-05-16 | Orna Therapeutics, Inc. | Lipids and lipid nanoparticle compositions for delivering polynucleotides |
WO2024118593A1 (en) | 2022-11-28 | 2024-06-06 | Allogene Therapeutics Inc. | Claudin 18.2 targeting chimeric antigen receptors and binding agents and uses thereof |
WO2024124044A1 (en) | 2022-12-07 | 2024-06-13 | The Brigham And Women’S Hospital, Inc. | Compositions and methods targeting sat1 for enhancing anti¬ tumor immunity during tumor progression |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4873190A (en) | 1984-06-13 | 1989-10-10 | Massachusetts Institute Of Technology | Heterodimeric T lymphocyte receptor |
GB8422238D0 (en) | 1984-09-03 | 1984-10-10 | Neuberger M S | Chimeric proteins |
EP0623679B1 (en) * | 1987-05-21 | 2003-06-25 | Micromet AG | Targeted multifunctional proteins |
US5266478A (en) * | 1987-05-29 | 1993-11-30 | Tanox Biosystems, Inc. | Antibodies which target a neutralization site within the second variable region of human immunodeficiency virus type 1 gp120 |
JPH07115017B2 (ja) | 1987-07-21 | 1995-12-13 | 龍夫 岡崎 | 電解水生成用電解ユニツト |
IL86278A (en) * | 1988-05-04 | 2003-06-24 | Yeda Res & Dev | Endowing cells with antibody specificity using chimeric t cell receptor |
US5906936A (en) * | 1988-05-04 | 1999-05-25 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Endowing lymphocytes with antibody specificity |
US6407221B1 (en) * | 1990-12-14 | 2002-06-18 | Cell Genesys, Inc. | Chimeric chains for receptor-associated signal transduction pathways |
CA2074825C (en) * | 1990-12-14 | 2005-04-12 | Daniel J. Capon | Chimeric chains for receptor-associated signal transduction pathways |
NZ241855A (en) | 1991-03-07 | 1994-04-27 | Gen Hospital Corp | Use of therapeutic cells to obtain cellular response to infection, tumours or autoimmune-generated cells, cells with chimaeric receptors (with binding component and destruction signal), dna encoding the receptor, vectors and antibodies to receptor |
-
1993
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