JP2894610B2 - アシル化ウリジンおよびシチジンならびにその使用 - Google Patents

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【発明の詳細な説明】 本発明は、1987年10月28日の出願に係わる係属中の米
国特許出願第115,929号の一部継続出願であり、その開
示を参考として本明細書に導入する。

発明の分野 本発明は一般的に、シチジンおよびウリジンのアシル
誘導体、およびそれらの誘導体の、外因性リボヌクレオ
シドを動物組織に送達させるための使用に関する。さら
に詳しくは、本発明は、シチジンおよびウリジンのアシ
ル誘導体、ならびにこれらのリボヌクレオシドを動物組
織に送達させ細胞代謝機能に支持するための上記新規誘
導体の使用に関する。さらに特定すれば、本発明は、肝
疾患または肝傷害、脳血管障害、呼吸窮迫症候群、心障
害、および他の臨床状態の処置を含む各種の生理学的お
よび病理学的状態の治療または予防のための新規アシル
誘導体の使用に関する。

発明の背景 外因性リボヌクレオシドの供給が有用な治療的応用に
なる動物組織の生理学的および病理的状態は多い。多く
の生理学的および病理学的状態において、動物へのRNA,
ヌクレオチドまたは各ヌクレオシドもしくはその混合物
の投与は、冒された細胞の自然の修復過程を改善するこ
とが知られている。

通常は機能的に飽和していて、基質または補因子の利
用性によって限定されている多くの重要な代謝反応があ
る。このような律速的化合物は栄養的に必須であるか、
または生体内で新たに合成される。組織外傷、感染また
は生理学的要求に対する適応状態下には、とくに細胞の
修復または再生過程が活性化されているときは、このよ
うな修復を促進するために至適な栄養的、生化学的また
ホルモン的環境は、正常な細胞または組織機能の要求と
は著しく異なつている。このような場合に、適当な条件
必須栄養素、たとえばリボヌクレオシドまたは代謝物を
供給することによつて治療的利益が引き出される。これ
らは通常の食餌から得られない量が要求される。傷害ま
たは罹患組織の代謝機能を直接支持するこの戦略の治療
的可能性は現代の医学実務では認識されていなかつた。

生物体の細胞レベルにおいて、外傷に対する特異的な
代謝応答があり、それらには各種の組織、組織の修復、
再生または変化した機能的要求に対する適応が関与す
る。組織の傷害および修復の大部分の過程は、グルコー
ス代謝のヘキソース−リン酸経路の活性の増大を伴つて
いる。

ヘキソース−リン酸経路はペントース糖たとえばリボ
ースの生成経路であつて、これらはヌクレオチドおよび
核酸合成に必要である。リボースの利用性は、大部分の
生理学的または病理学的状態にあつて、ヌクレオチド合
成の律速段階である。核酸およびヌクレオチド誘導補因
子〔たとえばシチジンジホスホコリン（CDPコリン）ま
たはウリジンジホスホグリコース（UDPG）の合成のため
のヌクレオチドの急速な合成は、組織修復および細胞増
殖の過程に必須である。ヌクレオチドはより単純な栄養
素から新たに合成されるとしても、直接のヌクレオチド
前駆体に対する絶対的な食餌要求性がないために、多く
の組織はとくに組織修復または細胞増殖時にはヌクレオ
チド合成の至適な能力をもつていない。

予め生成したリボヌクレオシドを組織に直接提供する
ことにより限られたヘキソース−リン酸経路の能力を副
側路を設けることは可能である。組織でリボヌクレオシ
ドは、ヌクレオチド合成の「サルベージ」経路を介して
ヌクレオチドプール中に導入される。ピリミジンリボヌ
クレオシドは、ヌクレオチド合成の支持には無関係な機
構を介して治療的効力を発揮することも可能である。

ピリミジンヌクレオシド、とくにウリジンおよびシチ
ジン投与の、実験動物における各種生理学的および病理
学的状態、単離組織、およびある程度、ヒトに対する効
果は、広範囲に研究されてきた。これらを以下にまとめ
る。

（１）心臓 低血流虚血に付した単離ラツト心臓において、ウリジ
ンによる再還流は、心筋ATPレベル、総アデニンヌクレ
オチド含量、ウリジンヌクレオチドレベル、およびグリ
コーゲン含量の回復を誘発した。虚血は、クレアチニン
リン酸、ATP,ウリジンヌクレオチドおよびグリコーゲン
の分解を生じることが報告された（Aussedat,J.:Cardio
vasc.Res.,17:145〜151,1983） 関連した研究では、単離ラツト心臓をウリジンで還流
すると、心筋ウラシルヌクレオチド含量が濃度依存性に
上昇した。低血流虚血後に、ウリジンの導入の速度は２
倍に上昇した（Aussedat,J.ら:Mol.Physiol.,6:247〜25
6,1984） 別の研究では、心グリコーゲン貯蔵を枯渇させ、心筋
UTPおよびUDP−グルコースレベルを低下させるイソプロ
テレノールをラツトに投与した。心筋UTPレベルは自然
に回復したにもかかわらず、UDP−グルコースの濃度は
ウリジンまたはリボースを投与しない限り低下したまま
であった。リボースまたはウリジンを長時間静脈内に注
入すると心筋グリコーゲンの回復を生じた。したがつ
て、心臓には、ピリミジン合成のサルベージまたは新た
な経路により別個に供給されるプールをもつウリジンヌ
クレオチドの区画形成性があるものと考えられる（Auss
edat,J.ら:J.Physiol.,78:331〜336,1982） 単離イヌ心臓の急性左室不全に対するヌクレオチドの
効果はBuckley,N.M.らによつて研究された（Circ.Res.,
7:847〜867,1959）。左室不全は単離イヌ心臓において
大動脈圧を上昇させることによつて誘発した。このモデ
ルでは、グアノシン、イノシン、ウリジンおよびチミジ
ンが陽性変力剤であり、一方、シチジンおよびアデノシ
ンは陰性変力剤であることが明らかにされた。

ウリジン−リン酸ナトリウム（UMP）およびオロト酸
カリウムは、その酸のアドレナリン誘発心筋壊死に対す
る動物の抵抗性を増大することが見出された。これらの
化合物は、ECGの解釈、生化学的所見および心臓重量比
によつて評価した心筋機能の改善し、死亡率を低下させ
た。UMPの静脈内投与はオロト酸カリウムよりも著明な
予防効果を発揮した（Kuznetsova,L.V.ら:Farmakol.−T
oksikol.,2:170〜173,1981）。

単離ウサギ心臓における低酸素の影響に関する研究で
は、心筋能率が低下し、一方、グルコースの取り込みと
ともに解糖、グリコーゲン分解、およびアデノシンヌク
レオチドの分解の増大が報告されている。ウリジンの投
与は、心筋能率、グルコースの取り込みと解糖を上昇さ
せ、また低酸素心臓からのグリコーゲンおよびアデノシ
ンヌクレオチドの消失を減弱した。ウリジンはまた、グ
ルコースの取り込み、解糖、ATPとグリコーゲンのレベ
ルおよび心筋能率を、プロプラノロール処置心臓で上昇
させた（Kypson,J.ら:J.Mol.Cell.Cardiol.,10:545〜56
5,1978）。

単離ラツト心臓における外因性シチジンからのピリミ
ジンヌクレオチドの合成の研究では、シチジンの30分間
供給で心筋シトシンヌクレオチドレベルは有意に上昇し
た。大部分のシチジンはシトシンヌクレオチドおよびウ
ラシルヌクレオチドの部分として回収された。取り込ま
れたシチジンのウリジンヌクレオチドへの変換はほとん
どなかつた。これらの結果は、シチジンの取り込みが心
筋シトシンヌクレオチド代謝に重要な役割を果たすこと
を示唆している（Lortet,S.ら:Basic Res.Cardiol.,81:
303〜310,1986）。

他の研究では、下行大動脈の反復、短時間結紮によつ
て心筋疲労が生じた。このような結紮を５回行つたのち
にウリジンとイノシンの混合物を静脈内に投与すると、
心筋における疲労の発現は一過性に停止した。量は公表
されていないがウリジンの前処置により、大動脈狭窄２
時間後に認められる大動脈結紮に際しての最高血圧の低
下は防止された（Meerson,F.C.:Tr.Vseross.S′ezda Te
r.,Myasnikov,A.L.編,Meditsina社刊,Moscow,pp27〜32,
1966）。

他の研究では、心筋梗塞後の心臓の非虚血部分におけ
る収縮性と伸張性の障害のコントロールのために、グル
コースおよびウリジンの使用が検討された。収縮性と伸
張性の欠陥は持続的な交感神経活動によると報告されて
いる。in vitroにおけるグルコースまたはウリジンの添
加は、単離動脈組織の収縮性と伸張性を回復させた（Me
erson,F.Z.ら:Kardiologiya,25:91〜93,1985）。

単離心臓またはin situ臓器プレパレーションで認め
られた上述の結果にもかかわらず、無傷動物（すなわ
ち、生存した自由に活動している動物）にウリジンを投
与しても効力は認められなかつた。また一方、Eliseev,
V.V.ら（Khim−Farm.Zh.,19:694〜696,1985:CA,103:826
03k）は、ウリジン−５′−リン酸がアドレナリン誘発
心筋ジストロフイーラツトに保護効果を示すが、ウリジ
ンは比較的に無効であることを明らかにした。さらにWi
lliams,J.F.ら（Aust.N.Z.J.Med.,6:Supp.2,60〜71,197
6）は心臓肥大は発症したラツトで、ウリジン処置した
ラツトと対照の間には差がなかつたことを報告してい
る。すなわち、ウリジンの連続注入を受けたラツト（Au
ssedat ら：前出）を除いて、ウリジン投与の心臓に関
連した病状に対する有利な影響を認められていない。

（２）筋肉 単離骨格筋および心筋において、ウリジンへの曝露は
グルコースの取り込みとグリコーゲンの合成を増大させ
ることも見出された（Kypson,J.ら:Biochem.Pharmaco
l.,26:1585〜1591,1977）。ウリジンとイノシンは単離
ラツト横隔膜筋肉においてグルコースの取り込みを刺激
することが明らかにされた。しかしながら、ウリジンの
みがグリコーゲン合成を増大させた。両ヌクレオシドが
脂肪組織での脂肪分解を阻害した（Kypson,J.ら:J.Phar
m.Exp.Ther.,199:565〜574,1976）。

（３）肝臓 ジチジンおよびウリジンの投与が、四塩化炭素急性中
毒のラツト肝臓の再生の増進に有効であることも報告さ
れている（Bushma,M.I.ら:Bull.Exp.Biol.Med.,88:1480
〜1483,1980）。

ヌクレオチドおよびRNAの治療的投与に関しては多く
の報告がある。RNAまたはヌクレオチドの有益な効果は
多分、個々のヌクレオシドへのホスフアターゼによる分
解に起因するものと思われる。たとえば、ラツト肝臓か
らの細胞質内RNAを、CCl₄による慢性中毒時のマウスに
注射すると動物の死亡率を低下させた。さらに、壊死巣
の数が低下し、肝の小葉間結合織線維が増加した。肝細
胞の分裂活性の上昇も認められた（Chernukh,A.M.ら:Bu
ll.Exp.Biol.Med.,70:1112〜1114,1970）。

RNA,混合ヌクレオチドまたはヒドロコーチゾンそれぞ
れの単独または様々な組合せでの投与では、ラツト肝の
チロシン−α−ケトグルタレート活性の上昇がみられ
た。RNAまたはヌクレオチドの投与では、ヒドロコーチ
ゾン単独投与後に得られたよりも酵素活性が高いレベル
に上昇した。この著者は、RNAまたはヌクレオチドは２
つの機構、すなわち副腎ステロイドの放出の刺激による
第一の非特異的ストレス効果、または第二にRNA合成の
制限基質の供給を介して作用するものと推論している
（Diamondstone,T.I.ら:Biochim.Biophys.Acta,57:583
〜587,1962）。肝硬変のヒト患者での研究では、ジチジ
ンおよびウリジンの投与は肝硬変患者のインシユリン感
受性を改善するが、肝疾患をもたない患者のインシユリ
ン感受性には影響しなかつた（Ehrlich,H.ら:Metabolis
m,11:46〜45,1962）。

肝の機械的外傷後の修復の研究では、実験的に誘発し
た外傷の境界で、細胞のRNA含量の急速かつ持続的な上
昇が認められた。外傷領域でのDNA濃度は傷害後３日目
に上昇を開始し、この上昇は11日目まで続いた。これに
対し、糖尿病ラツトの肝でのRNAおよびDNA含量は低かつ
た。外傷部位周辺の組織中のRNAおよびDNAの上昇は、非
糖尿病ラツトの肝臓に比べて遅く、著しく低かつた。糖
尿病肝臓での創傷治癒の劣化を生じるRNA合成の不全
は、糖尿病に認められるグルコース代謝のヘキソース−
リン酸経路の活性低下によるものであつた（Shah,R.V.
らJ.Anim.Morphol.Physiol.,21:132〜139,1974）。

他の研究では、ある種の状態での肝グリコーゲン合成
には、UDPGの利用性が律速因子であることが見出され
た。腎養肝細胞をウリジンとインキユベートすると、グ
ルコースのグリコーゲンへの導入が増大し、組織ウリジ
ンヌクレオチドプールが拡大した。インキユベーシヨン
混合物からウリジンを除くと、１時間のインキユベーシ
ヨンの間にUTPおよびUDPGのレベルは著明に低下した（S
ongu,E.ら:Metabolism,30:119〜122,1981）。アルコー
ル性肝炎の患者での研究においては、ウリジン−ジホス
ホグルコースを筋肉内または静脈内に投与すると、生化
学的指数ならびに生理学的および精神的症状に有益な効
果が見出された。すなわち、ピリミジンヌクレオシドは
ある形の肝病態の治療に有効であつた。

（４）糖尿病 ヌクレオシドは糖尿病の治療にも有用である。実験的
糖尿病では、多くの組織でRNAの合成が低下する。リボ
核酸ナトリウムの経口投与は、糖尿病ラツトの組織にお
いてRNA生合成速度を増大させることが明らかにされた
（Germanyuk,Y.L.ら:Farmakol.Taksikol.,5〜52,197
9）。この効果は多分、投与されたRNAが加水分解され、
個々のリボヌクレオチドおよび／またはリボヌクレオシ
ドを支えた結果と思われる。糖尿病ラツト肝でのRNA合
成不全は、糖尿病におけるグルコース代謝のヘキソース
−リン酸経路の活性の低下に帰せられた（Shah,R.V.ら:
J.Anim.Morphol.Physiol.,25:193〜200,1978）。

（５）リン脂質の生合成 シチジンヌクレオチドはリン脂質の生合成に関連づけ
られてきた。たとえばTrovarelli,G.ら（Neuro Chem.Re
s.,9:73〜79,1984）は、ラツト脳へのシチジンの脳室内
投与はすべてのヌクレオチド、CDP−コリン、CDP−エタ
ノールアミンおよびCMPの濃度に見るべき上昇をもたら
すことを明らかにしている。著者らは、神経組織におけ
る遊離シチジンヌクレオチドの低濃度がリン脂質生合成
の速度を限定するように思われると述べている。

（６）脳 シチジンおよびウリジンの投与が動物の各種神経学的
状態の治療に有効なことも報告されている。たとえば、
Dwivediら（Toxicol.Appl.Pharmacol.,31:452,1978）
は、マウスに腹腔内注射によつて投与されたウリジンが
抗けいれん剤として有効で、実験的に誘発されるけいれ
んに対して強力な保護効果を示すことを報告している。

Geigerら（J.Neurochem.,1:93,1956）は、生理食塩水
中に懸濁した洗浄ウシ赤血球で還流した循環−摘出ネコ
脳の機能状態は約１時間しか正常に維持されないことを
開示している。還流回路に動物の肝臓を包含させるかま
たは還流液にシチジンもしくはウリジンを添加した場合
には、脳の機能状態は少なくとも４〜５時間、良好に維
持された。シチジンおよびウリジンは脳の炭水化物およ
びリン脂質代謝を正常化する傾向を示した。著者らは、
シチジンとウリジンの一定した供給に依存し、これらが
多分肝臓によつて正常に供給されることを示唆してい
る。

Sepe（Minerva Medica,61:5934,1970）は、大部分、
脳血管障害を有する神経疾患患者に毎日、シチジンおよ
びウリジンを筋肉注射した場合の効果を開示している。
とくに、運動機能の回復、および頭部外傷後の回復の改
善に有益な結果が得られた。望ましくない副作用は認め
られなかつた。

Jannら（Minerva Medica,60:2092,1969）は各種の神
経疾患を有する患者に、毎日シチジンおよびウリジンを
筋肉内注射した研究を報告している。ときに、運動機能
と知的能率が関与する脳血管障害に有益な効果が認めら
れた。望ましくない副作用はみられなかつた。

Monticoneら（Minerva Mgdica,57:4348,1966）は、各
種の脳症を有する患者に、毎日シチジンおよびウリジン
を筋肉内注射した研究を報告している。大部分の患者、
とくに脳血管障害または多発性硬化症の患者に有益な効
果が認められた。望ましくない副作用はみられなかつ
た。

患者にシチジン均等物を導入するために実際にこれま
で用いられてきた一方法は、シチジン−ジホスホコリン
（CDP−コリン）の投与である。シチジン−ジホスホコ
リンはホスフアチジルコリン（レシチン）生合成の中間
体で、ヨーロツパおよび日本では（Somazina,Nicholin
およびCiticholineといつた名称で）、各種疾患に治療
的に使用されている。中枢神経系の病態で治療効果が示
されてきたものには、脳浮腫、頭部外傷、脳虚血、慢性
脳血管障害およびパーキンソン病がある。この化合物の
薬理作用の基底にある機構には、リン脂質合成の維持、
脳の生化学的「エネルギー充電」の回復、または神経伝
達物質（とくにドーパミン）機能に対する効果の可能が
考えられている。

CDP−コリンの動物またはヒトへの投与後の運命の試
験では、この化合物はきわめて急速に分解し、シチジ
ン、コリンおよびリン酸を生成することが示されてい
る。経口投与では完全なCDP−コリンは循環に入らない
が、血漿シチジンおよびコリン濃度は上昇する。静脈内
注射では、シチジンとコリンへの分解は約30分以内に起
こる。したがつて、外因性CDP−コリンの治療効果をこ
の化合物が直接、細胞内代謝に入ることに帰することは
困難である。

CDP−コリンで得られるのと類似の脳病態への治療効
果が、ヒトおよび実験動物へのシチジンおよびウリジン
投与後にも得られている。したがつて、CDP−コリンは
シチジンの単なる、不完全な、高価な「プロドラツグ」
として働くにすぎないように思われる。その使用は、シ
チジンの自体の投与に比べて、標的臓器へのシチジンの
輸送を増強しているというよりも妨害していると思われ
る。コリン単独の投与では、シチジンまたはCDP−コリ
ンのいずれかの投与後に得られる治療効果は生じない。
したがつて、CDP−コリンまたはシチジン自体の投与に
比べてより安価におよび／またはより効果的に脳へシチ
ジンを送達させる方法を開発することが有利と考えられ
る。

ウリジン−ジホスホグルコース、ウリジン−ジホスホ
グルクロン酸およびウリジンニリン酸も肝疾患のある局
面を改善することが明らかにされている。このようなリ
ン酸化合物ならびにCDP−コリンは一般に細胞内に入る
前に脱リン酸化されねばならないから、ウリジンまたは
ウリジン誘導体の投与は、有効性と経済性の意味で、リ
ン酸化ピリミジン誘導体の使用に対して実質的な改善が
求められねばならない。

（７）免疫系 シチジンおよびウリジンは免疫系の機能にも重要な影
響を与える。Kocherginaら（Immunologiya0（５）:34〜
37,1986）は、シチジン−５′−−リン酸またはウリジ
ン−５′−−リン酸を抗原（ヒツジ赤血球）と同時にマ
ウスに投与すると、以後のその抗原によるチヤレンジに
対する液体性免疫が著しく増強されること（抗原のみで
処置した動物の応答に比べて）を開示している。この現
象の基底にはＴ−ヘルパ−リンパ球の応答の増強が報告
されている。すなわち、シチジンまたはウリジンは、ワ
クチンの効果の改善、免疫妥協患者における免疫系の応
答の改善、または実験動物における免疫応答の修飾のた
めのアジユバントとして有用である。Van Burenら（Tra
ns plantation,40:694〜697,1985）は、正常なＴリンパ
球機能には食餌からのヌクレオチドが必須であることを
報告している。しかしながら、正常を超える量の食餌中
または非経口的に投与されるヌクレオチドまたはヌクレ
オシドの影響については評価していない。

in vivoでは、外因性のウリジン自体は、大部分異化
され、取り込まれ、ヌクレオチドの合成に利用される部
分は少ない。Gasser,T.ら（Science,213:777〜778,198
1）は、摘出、灌流ラツト肝は、灌流されたウリジンを
１回の通過で90％以上分解してしまうことを開示してい
る。肝臓によつて門脈に放出されるウリジンの多くは肝
ヌクレオチドの分解によつて新たに合成されたもので、
動脈から入つてきたウリジンは少ない。これは投与され
たウリジンの末梢組織での利用性は低いことを説明する
ものである。

たとえば、Klubes,P.ら（Cancer chemother.,Pharmac
ol.,17:236〜250,1986）は350mg/kgのウリジンをマウス
に経口投与したが、ウリジンの血漿濃度は変動しなかつ
たと報告している。これらに対し、ウリジンの異化物、
ウラシルの血漿レベルは50マイクロのピークに達し、以
後低下して４時間後に正常に復した。血漿ラリジンレベ
ルの上昇は高用量（3500mg/kg）のウリジンの経口投与
後にのみ観察された。しかしながら、この用量は、ヒト
成人では１回約200gに相当し、著しく高すぎる。

経口または非経口投与後のシチジンまたはウリジンの
生物学的利用性を改善するための新しい戦略は、これら
のヌクレオシドの薬動力学的または他の医薬的性質（た
とえば生体膜の透過性）を改善する特殊な置換基を有す
るシチジンまたはウリジンの誘導体を投与することであ
る。適当に選択された置換基は（その中でアシル置換基
が最善である）、投与後に酵素的または化学的に変換さ
れ、シチジンまたはウリジンに戻る。

ある種のアシル化ウリジンおよびシチジン誘導体はそ
れ自体公知である。Honjoら（英国特許第1,297,398号）
は、N⁴，O²′，O³′，O⁵′−テトラアシルシチジンおよ
びその製造方法を記載している。アシル置換基は３〜18
個の炭素原子を有する脂肪酸から誘導される置換基であ
る。

Beranekら（Collection Czechslovak Chem.Comun.,4
2:366〜369,1977）は、シチジンから酢酸中でのアセチ
ルクロリドとの反応による２′,3′,5′−トリ−Ｏ−ア
セチルシチジン塩酸塩の製造を報告している。

Sasakiら（Chem,Pharm.Bull,15:1967）は、シチジン
の無水酢酸でのアセチル化によるN⁴−アセチルシチジ
ン、５′−Ｏ−アセチルシチジンおよびN⁴,5′−Ｏ−ジ
アセチルシチジンおよび他の化合物の生成を報告してい
る。

米国特許第4,022,963号（Deutsch）には、ウリジンを
含めた一部のヌクレオシドの糖部分における全ヒドロキ
シル基を、過剰の無水酢酸の添加を含めた過程によつて
アシル化する方法が記載されている。

Samoilevaら（Bull.Acad.Sci.USSR Div.Chem.Sci.30:
1306〜1310,1981）は不溶性重合Ｎ−ヒドロキシスクシ
ンイミドを用いるシチジンまたはシチジン−リン酸のア
ミノアシルまたはペプチジル誘導体の合成方法を開示し
ている。N⁴−Boc−アラニルシチジンが製造された。シ
チジンのアミノアシル誘導体はヌクレアーゼの機能を研
究するためのプローブとして合成された。

日本特許出願公告第51019779号および81035196号（As
ahi Chemical Ind KK）には、シチジンを５〜46個の炭
素原子を含有する脂肪酸から誘導される酸無水物と反応
させるN⁴−アシル−シチジンの製造方法が記載されてい
る。この生成物は、親油性の紫外線吸収剤と述べられ、
また抗癌剤の製造の出発化合物としても有用であるとい
う。

Watanabeら（Angew.Chem.,78:589,1986）は、溶媒と
してメタノール、アシル化剤として酸無水物を用いるシ
チジンのN⁴−アミノ基の選択的アシル化方法を記載して
いる。製造された化合物は、N⁴−アセチル，N⁴−ベンゾ
イルおよびN⁴−ブチリル−シチジンである。

Reesら（Tetrahedron Letters,29:2459〜2465,1965）
により、リボヌクレオシドのリボース残基上の２′位の
選択的アシル化方法が開示されている。２′−Ｏ−アセ
チルウリジン、２′−Ｏ−ベンジルウリジンおよび
２′,5′−ジ−Ｏ−アセチルウリジンを含めたウリジン
誘導体ならびに他の誘導体が製造された。これらの化合
物はオリゴ−リボヌクレオシド合成の中間体として製造
された。

発明の目的 ウリジンおよびシチジンのある種のアシル誘導体は公
知であり、一方、上に要約した研究は、ウリジンおよび
シチジンの存在が様々の生理学的および病理学的状態の
緩和に重要であること、またウリジンおよびシチジンの
動物組織への送達を増大させる方法がこれらのヌクレオ
シドの重要な供給源を与えると考えられることを示して
いるが、動物の組織に、高度な信頼できる治療効果を生
じるのに十分なウリジンおよびシチジンを導入する方法
の提供にはこれまで成功した例がない。

したがつて本発明の第一の目的は、医薬的に有効な量
のウリジンおよび／もしくはシチジンまたはそれらの各
誘導体を動物組織に送達させるために効果的に使用でき
る医薬的に許容される化合物を確認することである。

本発明のさらに他の目的は、経口的または非経口的に
効果的な投与が可能で、毒性は低い一群のウリジンおよ
びシチジン誘導体を提供することである。

本発明のさらに他の関連する目的は、ウリジンおよび
シチジンの一群の誘導体であつて、動物、好ましくはヒ
トに投与した場合に、それらのヌクレオシドの胃腸管、
血液脳関門および他の生体膜の透過性を増大させること
によつてシチジンおよびウリジンの生物学的利用性を実
質的に改善し、これらのヌクレオシドの動物組織への高
レベルの持続的送達を可能にする誘導体を提供すること
にある。

本発明のさらに他の、さらに特定的な目的は、心臓、
筋肉、血漿、肝臓、骨、糖尿病性および神経学的状態を
含む様々な障害の治療のための一群のシチジンおよびウ
リジン誘導体を提供することにある。

本発明のこれらの目的および他の目的は、ウリジンお
よびシチジンの新規なアシル誘導体の投与によつて達成
される。

広議には、ウリジンのアシル誘導体は、式（Ｉ） （式中、R₁、R₂、R₃およびR₄は同種または異種であつて
それぞれ水素または代謝物のアシル基である。ただし、
上記Ｒ置換基の少なくとも１つは水素ではない）を有す
る化合物からなる。

一態様においては、ウリジンのアシル誘導体は、式
（II） （式中、R₁、R₂およびR₃は同種または異種であり、それ
ぞれ水素または（ａ）炭素原子５〜22個を有する直鎖脂
肪酸、（ｂ）グリシンならびにＬ型のアラニン、バリ
ン、ロイシン、イソロイシン、チロシン、プロリン、ヒ
ドロキシプロリン、セリン、スレオニン、シスチン、シ
ステイン、アスパラギン酸、グルタミン酸、アルギニ
ン、リジン、ヒスチジン、カルニチンおよびオルニチン
からなる群より選ばれるアミノ酸、（ｃ）炭素原子３〜
22個を有するジカルボン酸、もしくは（ｄ）グリコール
酸、ピルビン酸、乳酸、エノールピルビン酸、リポ酸、
パントテン酸、アセト酢酸、ｐ−アミノ安息香酸、β−
ヒドロキシ酪酸、オロト酸およびクレアチンからなる群
の１種もしくは２種以上から選ばれるカルボン酸のアシ
ル基である。ただし、上記R₁，R₂およびR₃の少なくとも
１つは水素ではなく、また上記置換基R₁，R₂およびR₃の
どれかが水素であり他の置換基が直鎖脂肪酸である場合
にはその直鎖脂肪酸は８〜22個の炭素原子を有する）を
有する誘導体、またはその医薬的に許容される塩であ
る。とくに好ましいジカルボン酸にはコハク酸、フマー
ル酸およびアジピン酸が包含される。他の態様において
は、本発明の目的は、上記式（Ｉ）においてR₄が水素で
はない化合物であるウリジンのアシル誘導体によつても
達成される。

本発明の目的はまた、式（III） （式中、R₁、R₂、R₃およびR₄は同種または異種であつ
て、それぞれ水素または代謝物のアシル基である。ただ
し、上記Ｒ置換基の少なくとも１つは水素ではない）を
有する化合物からなるシチジンのアシル誘導体の投与に
よつて達成される。

シチジン誘導体は式（III）において、Ｒ置換基が同
種または異種であつてそれぞれ水素またはグリコール
酸、ピリビン酸、乳酸、エノールピルビン酸、アミノ
酸、炭素原子２〜22個を有する脂肪酸、ジカルボン酸、
リポ酸、パントテン酸、アセト酢酸、ｐ−アミノ安息香
酸、β−ヒドロキシ酪酸、オロト酸およびクレアチンか
らなる群の１種または２種以上から選択さばれるカルボ
ン酸から誘導されるアシル基である誘導体、またはその
医薬的に許容される塩であることが好ましい。好ましい
ジカルボン酸にはコハク酸、フマール酸およびアジピン
酸が包含される。

本発明はまた、上述の新規なアシル化リボヌクレオシ
ドの１種または２種以上を医薬的に許容される担体とか
らなる医薬組成物も包含する。これらの組成物は、錠
剤、糖衣錠、注射用溶液または他の剤型とすることがで
きる。

本発明の新規な医薬組成物中には、ウリジンのある種
の公知アシル誘導体と医薬的に許容される担体とからな
る組成物も包含される。この種の組成物は、式（Ｉ）ま
たは（II）において置換基R₁，R₂，R₃およびR₄が先に定
義したとおりであるウリジンのアシル誘導体、またはそ
の医薬的に許容される塩を包含する。ウリジンの好まし
いアシル誘導体には、２′,3′,5′−トリ−Ｏ−アセチ
ルウリジン,2′,3′,5′−トリ−Ｏ−プロピオニルウリ
ジンまたは２′,3′,5′−トリ−Ｏ−ブチリルウリジン
が包含される。

本発明はまた、ある種のシチジンのアシル誘導体と医
薬的に許容される担体とを一緒に含有する医薬組成物を
包含する。このようなアシル誘導体は、式（III）にお
いてR₁，R₂，R₃およびR₄が上述の定義のとおりである誘
導体またはその医薬的に許容される塩を包含する。シチ
ジンの好ましいアシル誘導体には、２′,3′,5′−トリ
−Ｏ−アセチルシチジン,2′,3′,5′−トリ−Ｏ−プロ
ピオニルシチジンまたは２′,3′,5′−トリ−Ｏ−ブチ
リルシチジンが包含される。

外因性ウリジンまたはシチジンの動物組織への送達
は、上述のアシル誘導体の１種または２種以上の有効量
を動物に投与することによつて有利に達成された。さら
に、動物組織の生理学的または病理学的状態は、上述の
アシル誘導体の有効量を動物に投与することによりその
組織へのウリジンまたはシチジンの生物学的利用性を上
昇させ、その代謝機能を支持することによつて有利に治
療できることが明らかにされた。

本発明は、これらのアシル誘導体の、心機能不全およ
び心筋梗塞の治療、肝疾患または傷害の治療、筋能率、
肺疾患、糖尿病、中枢神経系疾患たとえば脳血管障害、
パーキンソン病および老人痴呆の治療を含めた生理学的
および病理学的な各種状態の処置に対する使用を意図す
る。本発明の化合物は、シチジンおよびウリジンの胃腸
管および他の生体膜の透過性を増強し、その早期分解を
防止することにより、上述のヌクレオシドの生物学的利
用性を改善する。

本発明のアシル誘導体の有利な使用は、これらのアシ
ル誘導体１種または２種以上の有効量と医薬的に許容さ
れる担体からなる上述の組成物を投与することによつて
行われる。

シチジンおよびウリジンのアシル誘導体の投与は、非
誘導化合物の投与に比し、ある種の利点を提供する。ア
シル置換基は、ヌクレオシドの親油性を増大させるよう
に選択することが可能で、その胃腸管からの血流中への
輸送を改善する。このアシル化誘導体は経口的に投与し
て有効である。これらのアシル誘導体は、腸、肝臓、他
の臓器および血流中のヌクレオシドデアミナ−ゼおよび
ヌクレオシドホスホリラ−ゼによる異化に抵抗性を示
す。したがつて、本発明のアシル化誘導体の経口的また
は非経口的投与は、これらのリボヌクレオシドの動物組
織への高レベルでの持続的送達を可能にする。

図面の説明 第１図：この図は、非傷害（食塩水のみ投与）ラツ
ト、実験心筋傷害、非処置（食塩水のみ投与）ラツトお
よびトリアセチルウリジン（TAU）とトリアセチルシチ
ジン（TAC）を実験的心筋傷害後に投与されたラツトの
基礎心臓作業拍出量を示す。

第２図：この図は、対照ラツト、非処置ラツトおよび
実験的心筋傷害後にTAUおよびTACを投与されたラツトの
基礎左室収縮期圧を示す。

第３図：この図は、対照ラツト、非処置ラツトおよび
実験的心筋傷害後にTAUおよびTACを投与されたラツトの
基礎左室最大収縮率を示す。

第４図：この図は、対照ラツト、非処置ラツトおよび
実験的心筋傷害後にTAUおよびTACを投与されたラツトの
基礎左室最大拡張率を示す。

第５図：この図は、対照ラツト、非処置ラツトおよび
実験的心筋傷害後にTAUおよびTACを投与されたラツトの
基礎心拍数を示す。

第６図：この図は、対照ラツト、非処置ラツトおよび
実験的心筋傷害後にTAUおよびTACならびにノルエピネフ
リンを投与されたラツトの最大心臓作業拍出量を示す。

第７図：この図は、対照ラツト、非処置ラツトおよび
実験的心筋傷害後にTAUおよびTACならびにノルエピネフ
リンを投与されたラツトの最大左室収縮期圧を示す。

第８図：この図は、対照ラツト、非処置ラツトおよび
実験的心筋傷害後にTAUおよびTACならびにノルエピネフ
リンを投与されたラツトの最大左室収縮率（最大）を示
す。

第９図：この図は、対照ラツト、非処置ラツトおよび
実験的心筋傷害後にTAUおよびTACならびにノルエピネフ
リンを投与されたラツトの最大左室拡張率（最大）を示
す。

第10図：この図は、対照ラツト、非処置ラツトおよび
実験的心筋傷害後にTAUおよびTACならびにノルエピネフ
リンを投与されたラツトの心拍数（最大）を示す。

第11図：この図は、肝傷害ラツトをTAUおよびTACまた
は水（対照）で投与した場合の血漿BSPクリアランスを
示す。

好ましい態様の説明 用語の定義 「代謝物」の語は、代謝反応によつて生成するかまた
はそれに関与する化合物を意味する。本出願との関係で
は、代謝物は、ヒト体内で合成されることが知られてい
るカルボン酸のみでなく、他の動物または植物源に由来
する天然のカルボン酸（ただし、抽出されるよりも合成
される場合の方が多い）をも包含する。限定基準は、そ
の化合物が実質的に非毒性、生物適合性でなければなら
ないこと、in vivoにおいて容易に代謝経路内に入つ
て、提案される用量での長期間の使用時にも実質的に毒
性を生じないことである。この化合物は、カルボン酸の
腎内濃度が望ましくない著しい酸性を招来しないよう
に、そのまま（または解毒反応によつて抱合されて）排
泄されるよりも、代謝されもるのであることが好まし
い。したがつて、通常または容易に、中間的、異化的ま
たは同化的代謝系に参画するカルボン酸が好ましい置換
期である。これらのカルボン酸は分子量1000ダルトン未
満が好ましい。

「医薬的に許容される塩」の語は、本発明のヌクレオ
シド誘導体の医薬的に許容される酸の付加塩を意味す
る。許容される酸には、硫酸、塩酸またはリン酸が包含
されるが、これらに限定されるものではない。

「共投与」の語は、アシルヌクレオチド誘導体の少な
くとも２種類が、それぞれの薬理活性発現期が重複する
ような時間内に投与されることを意味する。

「アシル誘導体」は、シチジンまたはウリジンのリボ
ース残基の１個もしくは２個以上の遊離ヒドロキル基に
カルボン酸から誘導される実質的に非毒性の有機アシル
置換基がエステル結合でおよび／またはシチジンもしく
はウリジンのピリミジン環の一級もしくは二級アミンに
上述のような置換基がアミド結合で結合したシチジンま
たはウリジンの誘導体を意味する。このようなアシル置
換基は酢酸、脂肪酸、アミノ酸、リポ酸、グリコール
酸、乳酸、エノールピルビン酸、ピルビン酸、オロト
酸、アセト酢酸、β−ヒドロキシ酪酸、クレアチン酸、
コハク酸、酒石酸、フマール酸、アジピン酸およびｐ−
アミノ安息香酸から誘導される置換基があるが、これら
に限定されるものではない。好ましいアシル置換基は通
常、生体内に食餌成分または中間的代謝物として存在す
るカルボン酸に由来し、in vivoでリボヌクレオシドか
ら切断されても非毒性である基が好ましい。

「脂肪酸」は炭素原子２〜22個を有する脂肪族カルボ
ン酸である。このような脂肪酸は飽和、部分飽和または
多不飽和脂肪酸であつてもよい。

「アミノ酸」には、グリシン、ならびにＬ型のアラニ
ン、バリン、ロイシン、イソロイシン、フエニルアラニ
ン、チロシン、ブロリン、ヒドロキシプロリン、セリ
ン、スレオニン，システイン、シスチン、メチオニン、
トリプトフアン、アスパラギン酸、グルタミン酸、アル
ギニン、リジン、ヒスチジン、オイルニチン、およびヒ
ドロキシリジンが包含されるがこれらに限定されるもの
ではない。本発明はこれによつて限定されるものではな
く、本発明の他の天然のアミノ酸を包含することを意図
するものである。

ウリジンおよびシチジンの親油性アシル誘導体は、ヌ
クレオシドの動物胃腸管の透過性を増強させるのに有用
である。この場合の動物としてはヒトが最も重要であ
る。しかしながら、本発明はヒトに限定されるものでは
なく、本発明のアシル誘導体による処置で有益ある効果
が得られるすべての動物を包含することを意図してい
る。

本発明は作用機構によつて拘束されるものではない
が、本発明の化合物は、シチジンおよびウリジンの生物
学的利用性を増大させることにより、組織の再生、修
復、機能性、傷害に対する抵抗性および生理学的要求に
対する適応性が改善され、有益な効果を発揮するものと
考えられる。本発明の化合物には同時に、ヌクレオシド
同化体たとえばヌクレオチドまたはヌクレオチド誘導補
因子の生物学的利用性を増大させる働きも考えられる。
ヌクレオシド自体の投与もその生物学的利用性を上昇さ
せるが、急速な異化により、ヌクレオチドレベルの有意
な上昇は生じ得ない。すなわち、必ずしも血漿レベルの
増大を達成する必要はない。何故なら、ヌクレオシドレ
ベルは低くても細胞によつて急速に取り込まれ、一方高
レベルでは飽和して、過剰分は分解されてしまう。本発
明は低レベルのヌクレオシドを持続的に供給することに
より有効であるものと考えられる。

生体膜透過性を増大させるシチジンまたはウリジンの
好ましいアシル誘導体は、母体のヌクレオシドよりも親
油性の高い誘導体である。一般に、親油性アシル誘導体
は、非極性の（カルボキシレート基は除いて）アシル置
換基を有する。このようなアシル置換基は酢酸、リポ酸
および脂肪酸を含む酸から誘導されるが、これらに限定
されるものではない。本発明の技術分野の熟練者であれ
ば、特定のアシル誘導体が非誘導ヌクレオシドよりも親
油性であるか否かを、標準的技術、すなわち水−オクタ
ノール混合物中で測定される分配係数の比較によつて測
定することができる。アシル化ヌクレオシド誘導体は胃
腸管を透過して血流に入つたのちまたは他の生体膜を通
過したのち、アシル置換基が血漿および組織エステラー
ゼ（またはアミダーゼ）で切断されて遊離のヌクレオシ
ドを与える。

in vivoにおけるアシル置換基の除去速度は、血漿お
よび組織の脱アシル化酵素（最初はエステラーゼまはた
アミダーゼ）の特異性の函数である。シチジンまたはウ
リジンのピリミジン環のアミノ基にアミド結合によつて
結合したアシル置換基はリボースのヒドロキシル基にエ
ステル結合で結合したアシル基よりも徐々に切断され
る。

極性および非極性の両アシル基を含有するアシルヌク
レオシド誘導体を製造することも可能である。極性アシ
ル置換基は胃腸管からのヌクレオシド誘導体の通過を遅
延させ、１回投与後の化合物の血流中へのさらに持続的
な送達を可能にする。極性基は腸管内に存在するエステ
ラーゼ、アミダーゼまたはペプチダーゼによつて切断さ
れ、非極性アシル基をもつヌクレオシドを与え、これが
ついで効率的に循環内に入る。非極性アシル置換基より
速やかに切断される極性アシル置換基は、本技術分野の
熟練者によれば、繁雑な実験を行わないでも容易に選択
できるものである。

アシル誘導体はまた、血漿および非標的組織内の酵素
によるヌクレオシド残基の分解を受けにくく、腎臓を介
する血流からの消失も受けにくい。非経口投与のために
は、極性アシル置換体をもつアシル誘導体、したがつて
水溶性であるが初期の分解または消失に抵抗性である誘
導の使用が有利である。このような適応に好ましいアシ
ル誘導体にはグリコレートおよびラクテートならびに極
性側鎖を有するアミノ酸から誘導される誘導体が好まし
い。

治療的使用 シチジンのアシル誘導体の投与は、小児呼吸窮迫性症
候群（IRDS）を含めた肺疾患、および肺機能に影響する
代謝性疾患の治療に有用である。アシル誘導体は肺にお
いてリン脂質の生合成および界面活性剤生成を支持しま
た増強するように思われる。界面活性剤の主成分、ホス
フアチジルコリンはシチジンジホスホコリンから誘導さ
れる。したがつて、シチジンのアシル化型の投与は、肺
細胞のリン脂質の合成および界面活性剤生成能を支持し
増強するのであろう。シチジンアシル誘導体の有益な効
果は、ウリジンアシル誘導体の共投与で増大する。

さらに、シチジンのアシル誘導体の投与は神経障害の
治療に有用である。このアシル誘導体は、脳低酸素また
は卒中時またはその後に、脳のリン脂質組成を回復させ
または維持することによりその活性を発揮する。シチジ
ンのアシル誘導体の投与はまた、変性疾患の発症または
進行を遅延させるのに有用である。脳血管障害、パーキ
ンソン病、および脳失調のような障害はリン脂質レベル
と関連づけられてきた。ウリジンのアシル誘導体は、シ
チジンのアシル誘導体と共投与してその効果を増強し有
利である。

シチジンおよびウリジンのアシル誘導体の投与は、脳
血管性痴呆およびパーキンソン病の治療に有効である。
脳血管性痴呆およびパーキンソン病は、徐々に、一般的
に対称性の、仮借なく進行するニユーロンの脱落を生じ
る。小脳失調は主としてプルキンエ細胞に影響する神経
細胞の欠落によつて特徴づけられている。

したがつて、シチジンおよびウリジンのアシル誘導体
の投与は、リン脂質の生合成を増大させ、脳血管性障
害、パーキンソン病および小脳失調の進行を緩和して、
その活性を発揮する。

本発明はまた、生体の核酸合成能力が最適以下の生理
学的また病理学的状態の治療に関する。これらの状態に
は、糖尿病、老化、および副腎不全が包含される。シチ
ジンおよびウリジンのアシル誘導体の投与は、高レベル
のシチジンおよびウリジンの持続的送達を与えることに
より、細胞の自己再生に重要な酵素の生合成に必要なヌ
クレオチドの十分なプールを与える。

本発明は何らかの作用様式によつて限定されるもので
はないが、本発明の組成物はそれ自体でまたはそれによ
つて、新たな合成がヌクレオチドおよび核酸の合成の至
適速度の維持に不十分な状態において、ヌクレオチドお
よび核酸合成ならびにタンパク合成を増大することによ
つて作用するものと考えられる。すなわち、本発明の化
合物は、心不全、心筋梗塞、肝硬変を含めた肝疾患の治
療に、また核酸合成したがつてタンパク合成を促進する
ことにより糖尿病の病態を改善することにより、有用性
が見出される。

ウリジンおよびシチジンのアシル誘導体は心筋梗塞後
の心室機能の改善に、また心不全治療または予防のため
に投与することができる。本発明はアシルヌクレオシド
誘導体は、カルシウム封鎖に関与する細胞機構を支持
し、それによつて細胞のATP再生を維持もしくは支持
し、心筋傷害のある種の有害な作用を防止し、治療する
のに重要な治療的価値を有する。

本発明の組成物は、心不全に治療に使用される薬剤、
たとえばジギタリス、利尿剤およびカテコールアミンと
共投与することができる。

カルシウム封鎖およびRNA生合成に関与する生化学的
過程を支持する物質を心臓に提供することにより、負荷
誘発心筋傷害の緩和および安定な機能亢進を促進するこ
とが可能である。ウリジンおよびシチジンはこの関係で
有用な化合物である。ウリジンは心筋機能亢進の支持に
in vivoでは比較的に無効と報告されてきたが、これは
ウリジンが血漿および組織酵素によつて急速に分解さ
れ、その結果、心臓による利用が妨げられるためであ
る。本発明は一部、徐々に長時間にわたつて血流中に遊
離のウリジンを放出するアシル誘導体の投与により、心
臓へのウリジンの送達を改善できることの発見に基づく
ものである。

ウリジンのアシル誘導体は低酵素または無酸素の処置
のために投与することができる。これらのアシル誘導体
は、グリコーゲン合成に必要な中間体、ウリジンジホス
ホグルコースの生合成を増大することによつて作用し、
組織の低酸素または無酸素に対する抵抗性を改善し、組
織とくに心臓の機能を保持するものと考えられる。ウリ
ジンアシル誘導体は、低酵素、無酸素、虚血、過剰のカ
テコールアミン作動性刺激、およびジゴキシン中毒の処
置に使用できる。

本発明の化合物はまた、糖尿病のある種の持続する合
併症の阻止のための有用性が見出されている。この合併
症には、神経障害、動脈障害、冠動脈硬化症および心筋
梗塞の両者の危険の増大、失明等が包含される。糖尿病
では新たなヌクレオチド合成が抑制されているので、外
因性のヌクレオチドのアシル誘導体は糖尿病の処置に治
療的価値を有する。さらに誘導型のヌクレオシドは、細
胞の自己再生に重要な酵素の生合成に必要なヌクレオシ
ドの十分なプールを与えるために投与できる。したがつ
て、本発明はまた、たとえば糖尿病性肝または血管疾患
の、本発明のアシルヌクレオシド誘導体の投与による治
療に関する。アシルヌクレオシド誘導体はまた、要求の
増大に応じた筋過栄養または機能亢進の支持または増大
に有用である。このような要求は持続的な活動の後に生
じる。

好ましいアシル置換基にはアセチル、プロピオニルお
よびブチリル基が包含される。好ましいアシルヌクレオ
シド誘導体には、２′,3′,5′−トリ−Ｏ−アセチルシ
チジン、２′,3′,5′−トリ−Ｏ−アセチルウリジン、
２′,3′,5′−トリ−Ｏ−プロピオニルウリジン、
２′,3′,5′−トリ−Ｏ−プロピオニルシチジン、
２′,3′,5′−トリ−Ｏ−ブチリルシチジンおよび
２′,3′,5′−トリ−Ｏ−ブチリルウリジンが包含され
る。シチジンおよびウリジンの両アシル誘導体を共投与
することも有利である。

代表的な投与剤型は、シチジンおよび／またはウリジ
ン10〜3000mg相当量をそのアシル誘導体またはその医薬
的に許容される塩の形で含有し、１日に１〜３回投与さ
れる。これは、たとえば２′,3′,5′−トリ−Ｏ−アセ
チルシチジンおよび２′,3′,5′−トリ−Ｏ−アセチル
ウリジン15〜4500mgに相当する。

心不全、心筋梗塞およびその結果としての高血圧の治
療に際しては、ウリジンのアシル誘導体25〜100モル％
をシチジンのアシル誘導体75〜０モル％と共投与でき
る。ただし、シチジンとウリジンのアシル誘導体の量は
100モル％を越えない。たとえば、２′,3′,5′−トリ
−Ｏ−アセチルウリジン1125〜4500mgを２′,3′,5′−
トリ−Ｏ−アセチルシチジン０〜3475mgとともに投与す
る。

脳血管障害、糖尿病、肝傷害および肝疾患の治療に
は、また筋の機能性を増大させるためには、ウリジンの
アシル誘導体25〜75モル％をシジチンのアシル誘導体75
〜25モル％と共投与できる。ただしウリジンとシチジン
のアシル誘導体の量は100モル％を越えない。たとえ
ば、２′,3′,5′−トリ−Ｏ−アセチルウリジン1125〜
3375mgが２′,3′,5′−トリ−Ｏ−アセチルシチジン11
25〜3375mgと共投与される。

呼吸窮迫症候群の治療のためには、シチジンのアシル
誘導体25〜100モル％をウリジンのアシル誘導体75〜０
モル％と共投与できる。ただし、ウリジンとシチジンの
アシル誘導体の量は100モル％を越えない。たとえば
２′,3′,5′−トリ−Ｏ−アセチルシチジン1125〜4500
mgを２′,3′,5′−トリ−Ｏ−アセチルウリジン０〜33
75mgと共投与される。

治療的投与例 心不全 シチジンおよびウリジンのアシル誘導体は数種の心不
全の治療に有用である。これらの誘導体は、高血圧によ
る心臓への負荷の増大の場合の持続性の補償的機能亢進
の維持に、またたとえばとくに心筋梗塞後の心臓の生存
部分の機能の支持に有効である。後者の場合は、梗塞の
発症後できるだけ速やかにシチジンとウリジンのアシル
誘導体の混合物を与え、以後、これらのヌクレオシドの
アシル誘導体の適当な処方を、それぞれ１日約0.5〜3.0
gの用量で慢性的に経口投与する。これらの化合物は、
心筋梗塞の慣用の治療と併用して有利に使用できる。ヌ
クレオシド誘導体は、負荷、低酸素またはカテコールア
ミンに対する二次的な傷害に対し、心臓の機能を低下さ
せないで心臓を保護するという独特な利点を有する。そ
れはこれらの化合物が心筋の代謝的統合性を増大させ、
とくにカルシウム処理を改善させることによつて作用す
るからである。ヌクレオシド誘導体は心筋梗塞または心
不全の危険がある患者に予防的に投与することもでき
る。

うつ血性心不全を招く慢性的心不全症の治療には、シ
チジンおよびウリジンのアシル誘導体を、各ヌクレオシ
ド１日0.5〜3gの範囲の用量で経口投与する。ヌクレオ
シドは他の薬剤たとえばジギタリス誘導体または利尿剤
と併用して使用することができる。心筋機能の直接的に
改善に加えて、ヌクレオシド誘導体はジギタリス中毒を
その臨床効果を損うことなく軽減させる。

糖尿病 糖尿病患者の多くの組織で、細胞のピリミジンヌクレ
オチドレベルは低下している。これは、動脈病、神経障
害、および心筋の機械的または生化学的ストレスに対す
る抵抗性の低下を含めた持続する糖尿病合併症の一部に
よるものである。これらの合併症は、ピリミジンヌクレ
オチドが重要な役割を果たしている組織カルシウム処理
の機能異常が関係している。毎日シチジンおよびウリジ
ンを筋肉内注射すると糖尿病患者の末梢神経伝導速度の
低下が回復するとの報告がある（C.Serra:Rif.Med.,85:
1544,1971）。シチジンおよびウリジンのアシル誘導体
を適当な剤型で経口的に投与することが好ましい。シチ
ジンおよびウリジン0.5〜3gに相当する用量を毎日、慣
用の抗糖尿病治療と併用する。ヌクレオシド誘導体はと
くに非インシユリン依存型糖尿病に有用である。

神経障害 脳血管障害の帰結、たとえば卒中および慢性または急
性の脳血管不全症には、シチジンおよびウリジンのアシ
ル誘導体、とくに経口投与後に血液脳関門を通過するよ
うに処方された誘導体を、１日に各ヌクレオシド0.5〜
3.0gの範囲の経口的用量で、少なくとも数カ月間投与す
る。

パーキンソン病では、アシルシチジン誘導体がとくに
有用で、慣用の第一選択剤Ｌ−ドーパと併用投与する。
１日に0.5〜3.0gの経口的用量のシチジン誘導体の投与
は満足できる臨床的維持を可能し、またＬ−ドーパの投
与量を減量できる。これはＬ−ドーバが望ましくない副
作用をもつことから有利である。

化合物の製造方法 本発明のアシル誘導体は以下の一般的方法で製造でき
る。アシル置換基がアシル化反応を妨害する基たとえば
ヒドロキシルまたはアミノ基を有する場合には、これら
の基を保護基たとえばそれぞれｔ−ブチルジメチルシリ
ルエステルまたはｔ−BOC基で遮断してから無水物を製
造する。たとえば、乳酸はｔ−ブチルジメチルクロロシ
ランで２−（ｔ−ブチルジメチルシロキシ）プロピオン
酸に変換し、ついで塩基水溶液で生成したシリルエステ
ルを加水分解する。無水物は、保護された酸をDCCと反
応させて生成させる。

アミノ酸の場合は、標準方法を用いてＮ−ｔ−BOC誘
導体を製造し、ついでDCCで無水物に変換する。

２個以上のカルボキシレート基を有するアシル置換基
（たとえばコハク酸、フマール酸またはアジピン酸）を
含む誘導体は、所望のジカルボン酸の無水物をピリジン
中で２′−デオキシリボヌクレオシドと反応させること
によつて製造される。

たとえば、ウリジンの２′,3′,5′−トリ−Ｏ−アシ
ル誘導体は、Nishizawaら（Biochem.Pharmacol.14:160
5,1965）によつて開示された方法の改良法によつて製造
できる。ピリジン中１当量のウリジンに3.1当量の酸無
水物（無水酢酸、無水酪酸等）を加え、混合物を80〜85
℃に加熱する。ついで標準方法を用いてトリアシル誘導
体を単離する。別法としてウリジンをピリジン中室温で
3.1当量の所望の酸クロリド（アセチルクロリド、パル
ミトイルクロリド等）と処理してもよい（例Ｖ参照）。

ウリジンの５′−アシル誘導体は、Nishizawaらに従
い、ウリジンをピリジン中室温で所望のアシル化合物の
酸無水物１当量と反応させることによつて製造できる。
ついで反応混合物を２時間80〜85℃に加熱し、冷却し、
標準方法によつて５′−アシル誘導体を単離し、クロマ
トグラフイーで精製する。別法として、ウリジンの５′
−アシル誘導体は、ウリジンをピリジンおよびDMF中０
℃で、所望のアシル化合物から誘導された酸クロリド１
当量で処理することによつても製造できる。ウリジンの
５′−アシル誘導体はついで標準方法によつて単離し、
クロマトグラフイーで精製する（例VI参照）。

ウリジンの２′,3′−ジアシル誘導体はBakerら（J.M
ed.Chem.,22:273,1979）から適用した操作によつて製造
できる。５′−ヒドロキシル基は、イミダゾールを含有
するDMF中室温で1.2当量のｔ−ブチルジメチルシリルク
ロリドを用いて選択的に保護する。ウリジンの５′−ｔ
−ブチルジメチルシリル誘導体は標準方法によつて単離
し、ついでピリジン中０〜５℃で所望のアシル化合物の
酸無水物2.1当量によつて処理する。生成した５′−ｔ
−ブチルジメチルシロキシ−２′,3′−ジアシルウリジ
ンをついでテトラブチルアンモニウムフルオリドで処理
し、ウリジンの２′,3′−ジアシル誘導体を標準方法に
よつて単離する（例VII参照）。

２′,3′,5′−トリ−Ｏ−アシルウリジンの二級アミ
ンをついでFujiら（米国特許第4,425,335号）に従つて
アシル化できる。この場合には１〜５当量の有機塩基た
とえば、ピリジンのような芳香族アミン、トリアルキル
アミンまたはN,N−ジアルキルアニリンを含有する非プ
ロトン性溶媒中、1.1当量の酸クロリドで処理する。こ
の操作を用いて、２′,3′および５′のヒドロキシ基の
アシル置換基とは異なる、アミノ基上のアシル置換基を
有するウリジンのテトラアシル誘導体を製造できる（例
VIII参照）。

シチジンの２′,3′,5′−トリ−Ｏ−アシル誘導体
は、Gishら（J.Med.Chem.,14:1159,1971）の方法に従つ
て製造した。たとえば、シチジン塩酸塩をDMF中、所望
の酸クロリド3.1当量で処理する。２′,3′,5′−トリ
−Ｏ−アシル誘導体はついで標準方法によつて単離され
る（例IX参照）。

シチジンの５′−アシル誘導体はGishら（前出）に従
つて、シチジン塩酸塩をDMF中で酸クロリド1.1当量と反
応させ、ついで標準方法によつて５′−アシルシチジン
を単離する（例Ｘ参照）。

シチジンのN⁴−アミンの選択的アシル化はSasakiら
（Chem.Pharm.Bull.,15:894,1967）によつて開示された
操作に従つて行つた。これはシチジンをピリジンおよび
DMF中、酸無水物1.5当量で処理するものである。ついで
シチジンのN⁴−アシル誘導体を標準方法で単離する（例
XI参照）。

別法として、シチジンのN⁴−アシル誘導体は、シチジ
ンをピリジンまたはピリジンとDMFの混合物中でアシル
無水物と処理して製造される。N⁴−アシルシチジンの選
択的製造の別法には、Akiyamaら（Chem.Pharm.Bull.,2
6:981,1978）に従つて水−水混和性溶媒中で酸無水物に
より選択的にアシル化する方法がある。

アシル基がすべて同種のテトラアシルシチジン誘導体
は、ピリジン中室温で少なくとも４モル当量の酸無水物
でシチジンを処理することによつて製造できる。つい
で、テトラアシルシチジンを標準方法によつて単離する
（例XII参照）。

N⁴アミノ基のアシル置換基がリボース環のヒドロキシ
ル基上のアシル置換基とは異なる化合物（たとえばN⁴−
パルミトイル−２′,3′,5′−トリ−Ｏ−アセチルシチ
ジン）の製造には、上述のようにしてN⁴−アミノ基に選
択的に所望のアシル基を結合させ、ついでヒドロキシル
基を所望の置換基でアシル化する。別法として、リボー
ス残基上の置換基をN⁴アミノ基のアシル基を結合させ、
ついでヒドロキシル基を所望の置換基の結合前に結合さ
せ、ついで再び上述の方法を使用することもできる。

本発明の範囲に含まれる組成物は、その各成分が初期
の目的を達成するのに有効な量含まれているすべての組
成物を包含する。すなわち、本発明の組成物はウリジン
またはシチジンのアシルヌクレオシド誘導体１種または
２種以上を、投与した場合、血漿または組織のシチジン
またはウリジンおよびそのアシル誘導体のレベルを所望
の効果を生じるように上昇させるのに十分な量、含有す
るものである。

薬理学的に活性な化合物に加えて、新規な医薬製剤に
は、医薬的に使用される製剤中への活性化合物の処理を
容易にするための賦形剤および補助剤からなる適当な医
薬的に許容される担体を含有する。この製剤はとくに経
口的に投与できるものが好ましく、好ましい投与形態た
とえば錠剤、糖衣錠およびカプセルとして使用できる。
これらの製剤は坐剤のような経直腸的に投与できる製剤
また、注射でまたは経口的に投与できる適当な溶液であ
つてもよい。これらの製剤は活性化合物約0.1〜99％好
ましくは約10〜90％を賦形剤とともに含有する。

本発明の医薬製剤は、それ自体公知の方法により、た
とえば慣用の混合、顆粒化、糖衣がけ、溶解または凍結
乾燥工程によつて製造される。すなわち、経口的に使用
される医薬製剤は、活性化合物を固体賦形剤と混合し、
所望により得られた混合物を粉砕し、混合物を顆粒に加
工し、適当な補助剤を所望によりまたは必要に応じて添
加して、錠剤または糖衣錠中心錠を得ることができる。

適当な賦形剤はとくに、糖たとえば乳糖もしくは庶
糖、マニトールもしくはソルビトール、セルロース製品
および／またはリン酸カルシウムのような充填剤、なら
びにたとえばトーモロコシデンプン、小麦デンプン、米
デンプン、馬鈴薯デンプンを用いたデンプンペースト、
ゼラチン、トラガントゴム、メチルセルロース、ヒドロ
キシプロピルメチルセルロース、ナトリウムカルボキシ
メチルセルロースおよび／またはポリビニルピロリドン
のような結合剤である。所望により、崩壊剤たとえば上
述のデンプン、またカリボキシメチルデンプン、架橋ポ
リビニルピロリドン、アガール、またはアルギン酸もし
くはその塩たとえばアルギン酸ナトリウムを添加するこ
ともできる。補助剤としてはとくに、流動性調節剤およ
び滑沢剤、たとえばシリカ、タルク、ステアリン酸もし
くはその塩たとえばステアリン酸マグネシウムもしくは
ステアリン酸カルシウム、および／またはポリエチレン
グリコールがある。糖衣錠中心錠には適当なコーテイン
グ、所望により胃液に抵抗性のコーテイングを施すこと
ができる。この目的では、所望により、アラビアゴム、
タルク、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコー
ルおよび／または二酸化チタン、ラツカー溶液ならびに
適当な有機溶媒または溶媒混合物を含有する濃厚溶液を
使用できる。胃液に抵抗性を示すコーテイングを生成さ
せるためには、適当なセルロース製品たとえばアセチル
セルロースフタレートまたはヒドロキシプロピルメチル
セルロースフタレートの溶液が使用できる。錠剤または
糖衣錠のコーテイングには染料または色素を、たとえば
識別または化合物の用量の異なる組合せを表すために添
加することもできる。

経口的に使用できる他の医薬製剤には、ゼラチンで作
られた押し込み方式カプセル、ならびにゼラチンとグリ
セロースまたはソルビトールのような可塑剤で作られた
軟質シールカプセルがある。押し込み式カプセルは、１
種または２種以上の活性化合物を、乳糖のような充填
剤、デンプンのような結合剤および／またはタルクもし
くはステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤、また所
望により安定剤との混合物であつてもよい顆粒の剤型と
して含有する。軟カプセルでは、活性化合物は、脂肪
油、液体パラフインまたはポリエチレングリコールのよ
うな適当な液体中に好ましくは溶解または懸濁されてい
る。さらに安定剤を添加してもよい。

経直腸的に使用できる医薬製剤には、たとえば、活性
化合物と坐薬基剤との混合物からなる坐剤が包含され
る。適当な坐薬基剤は、たとえば、天然または合成のト
リグリセライド、パラフイン炭化水素、ポリエチレング
リコールまたは高級アルカノールがある。さらに、活性
化合物と基剤の混合物からなるゼラチン直腸カプセルの
使用も可能である。使用可能な基剤原料にはたとえば、
液体トリグリセライド、ポリエチレングリコールまたは
パラフイン炭化水素が包含される。

非経口投与に適当な組成物は、水溶性型の活性化合物
たとえば水溶性塩の水性溶液が包含される。さらに、適
当な油状注射用懸濁液とした活性化合物の懸濁液を投与
することもできる。適当な親油性溶媒またはビークルに
は、脂肪油たとえば胡麻油、または合成脂肪酸エステル
たとえばオレイン酸エチルもしくはトリグリセライドが
包含される。水性注射用懸濁液には、懸濁液の粘度を上
昇させる物質を添加することができる。これらの物質と
しては、たとえばナトリウムカルボキシメチルセルロー
ス、ソルビトールおよび／またはデキストランがある。
所望により、懸濁液には安定剤を加えることができる。

以下の実施例は本発明の方法および組成物を例示する
ものであつて、本発明の限定するものではない。本技術
分野の熟練者には自明の他の適当な修飾ならびに通常、
臨床的治療に際して遭遇する様々の状態およびパラメー
ターへの適応は、本発明の精神および範囲に包含される
ものである。

例 例I:ウリジンとアシルウリジンのラツトにおける生物学
的利用性の比較 麻酔した雄性F344ラツト（Retired Breeders,450〜50
0g）の右頸動脈にシリコン製のカテーテルを植え込ん
だ。３日後からは、動物を妨げることなく血液サンプル
が採取された。基礎血液サンプルを採取したのち、動物
を各４匹のラツトからなる４群に分けた。各群には、以
下の化合物、ウリジン、２′,3′,5′−トリ−Ｏ−アセ
チルウリジン、シチジンまたは２′,3′,5′−トリ−Ｏ
−アセチルシチジンのそれぞれの異なる１種を投与し
た。化合物は等モル用量（0.28モル/kg）と挿管法によ
り胃内に投与した。投与0.5,1,2,3および４時間後に、
血液サンプル（0.3ml）を採取し、処理し、ついでシチ
ジンまたはウリジン含量をHPLCで検定した。ラツトで
は、血漿ウリジンレベルはトリ−Ｏ−アセチルウリジン
の摂取後少なくとも４時間までは、等モル量のウリジン
の摂取後に比べ、有意に高かつた（５〜10倍）。

例II:ウリジンおよびアシルウリジンのヒトにおける生
物学的利用性の比較 ヒト被験者を一夜絶食させたのち、基礎静脈血サンプ
ルを採取し、ついで0.76モル/kg（28mg/kg,70kgの被験
者で2g）のトリ−Ｏ−アセチルウリジンを100mlの水と
ともに摂取された。化合物の摂取後1,2,3および４時間
目に血液サンプル（0.5ml）を採取し、処理して、血漿
ウリジン含量をHPLCで測定した。別の目に、等モル用量
のウリジン（18mg/kg,70kgの被験者で1.3g）をアシル誘
導体に代えて摂取させたほかは、全く同じ実験を行つ
た。ウリジンの血漿レベルは、トリ−Ｏ−アセチルウリ
ジンを摂取した場合の方がウリジンの等モル用量と摂取
した場合より実質的に高かつた。トリ−Ｏ−アセチルウ
リジンの経口投与後少なくとも４時間は、ウリジンレベ
ルは有用な治療範囲（10マイクロモル以上）に維持され
た。経口的にウリジンを投与した後には、ヌクレオシド
の血漿レベルはわずか１点で（２時間後）10マイクロモ
ルを越えたのみであつた。

例III:アシル化ピリミジンリボヌクレオシドによる心筋
機能低下の回復 本例に記載した実験は、外因性にトリアセチルウリジ
ンおよびトリアセチルシチジンを与えると、実験的に心
室機能を低下させたのちの心室心筋のポンプ機能の回復
を補助できるか否かを決定するために設計されたもので
ある。

実験的心筋傷害は、麻酔した（ネンブタール,50mg/kg
i.p.）雄性F344ラツト（250g）の腹部大動脈を内径0.67
mmに収縮させ、ついで、イソプロテレノール塩酸塩（5m
g,s.c.）を１回注射して誘発した。動脈収縮およびイソ
プロテレノール投与後、および１時間後と20時間に再
度、トリアセチルシチジンとトリアセチルウリジンの混
合物（各590mg/kg）を投与した。一部の動物にはアセチ
ル化ヌクレオシドの代わりに食塩水を注射し（非処
置）、１群の動物には同じく食塩水を投与したが、大動
脈収縮もイソプロテレノール投与も行わなかつた（対
照）。心室機能は大動脈収縮24時間後に測定した。動物
をナトリウムペントバルビタール（50mg/kg,i.p.）で麻
酔し、カテーテルをノルエピネフリン投与用に右頸静脈
に植え込んだ。第二のカテーテルは右頸動脈を経て心臓
の左室内に挿入した（Intramedic PE−50）。左室収縮
期圧（LVSP）、左室収縮および拡張の最大速度（それぞ
れ＋dP/dTおよび−dP/dT）および心拍数（HR）を直接カ
テーテルを介し、Stoelting Physioscribe IIポリグラ
フに接続したStatham型圧トランスジューサーを用いて
測定した。これらのパラメーターの値は0.1mlのノルエ
ピネフリン重酒石酸塩の濃度10^-6，10^-5および10^-4での
i.v.投与の前後に記録した。この装置により、前肢の皮
下に挿入したステンレス針電極を用いて心電図も記録し
た。心臓作業拍出量は左室収縮期圧と心拍数の積として
計算した。

大動脈収縮とイソプロテレノールの同時投与により、
心筋機能は無傷動物に比べ明らかに低下した。左室収縮
期圧、＋dP/dT,−dP/dTおよび心臓作業拍出量はすべて
有意に低下した（第１表、第１図〜第４図）。大動脈収
縮およびイソプロテレノール投与後にアセチル化ピリミ
ジンヌクレオシドを投与された動物では、イソプロテレ
ノールのみを投与された動物に比べ、すべてのパラメー
ターが正常方向に有意に回復した（第１図〜第４図）。
実験的心筋傷害後には心拍数も低下した（第５図）。

心筋機能のパラメーターは0.1mlの10^-4Ｍノルエピネ
フリン重酒石酸塩の投与後にも測定した。これらの値は
心臓の最大機能を示す。測定値は第２表および第６図〜
第10図に示す。

考察 本発明のアシルヌクレオシド誘導体を投与して心筋に
外因性ヌクレオシドを供給すると、通常は心臓の過機能
および過栄養を伴い、ついで心臓に対する負荷が持続的
に増大する心臓機能の障害が防止されまた緩和される。
このような作業負荷の増大は重篤な心筋梗塞後の心臓の
生存部分に起こる。したがつて、ピリミジンヌクレオシ
ドまたはアシル化誘導体は、心筋梗塞後の心不全の治療
また予防用の薬剤として有用である。現在のところ、心
筋のエネルギー代謝の基になる生化学的機構と持続的な
仕事負荷の増大への適合能を支持することによつて働
く、臨床的な実際に同時に適合した薬剤はない。これら
の結果は本発明のアプローチが重要な機能的利益をもた
らすことを示している。

例IV:アシル化ピリミジンヌクレオシドによる肝傷害治
療 化学的に誘発された肝傷害に対するトリアセチルシチ
ジンおよびトリアセチルウリジンの経口投与の効果を評
価した。四塩化炭素によるネズミの慢性的処置は、最終
的には肝硬変に至る肝障害を誘発する標準モデルとなつ
ている。

20匹の雄性F344ラツト（200g）に四塩化炭素（コーン
油中50％CCl₄0.2mg/kg）を１週に２回、８週間注射し
た。四塩化炭素による最初の２週間の処置後に、半数の
動物には残りの６週間、トリアセチルウリジン（TAU）
とトリアセチルシチジン（TAC）の混合物（各50mg/kgを
1mlの水に加えて投与、１日２回）を経口的に投与した
（摂食）。他の半数の動物（対照）には等容の水を摂取
させた。四塩化炭素処置の８週が終了したのち、循環か
ら、ブロモスルフタレイン（BSP）を除去する能力によ
つて肝機能を評価した（肝機能の標準試験法）。ラツト
を麻酔し（ケタミン80mg/kgおよびキシラジン13mg/k
g）、BSPの投与と血液採取のために頸動脈にカテーテル
を挿入した。BSP（50mg/kg,0.5ml食塩水中）は一度に投
与した。周期的に血液サンプル（0.2ml）を採取し、20
μｌの血漿に0.1M NaOH1mlを添加して575nmのUV吸収を
記録して血漿BSP濃度を測定した。

第11図に示すように、四塩化炭素処置時にTACおよびT
AUを投与された動物は、対照動物に比べて、循環からの
有意に良好なBSP除去能を示した。これはTACおよびTAU
が四塩化炭素による傷害から肝を有意に保護することを
示している。

例V:2′,3′,5′−トリ−Ｏ−アシルウリジンの製造 酸無水物から 1gのウリジンを無水ピリジン（予め水酸化カリウム上
で乾燥）20mlに溶かし、これに室温で、所望のアシル化
合物の酸無水物（たとえば無水酢酸、無水乳酸、無水酪
酸等）3.1モル当量を加える。反応混合物をついで２時
間80〜85℃に加熱し、冷却し、氷水中に注ぎ、等容量の
クロロホルムで３回抽出してエステルを回収する。クロ
ロホルムをついで氷冷0.01N硫酸、１％炭酸水素ナトリ
ウム水溶液、および最後に水で洗浄する。硫酸ナトリウ
ムで乾燥したのちクロロホルムを蒸発させ、残つた油状
物または結晶をクロマトグラフイーに付す（Nishizawa
ら:Biochem.Pharmacol.,14:1605,1965から適用）。

酸クロリドから ウリジン1gを20mlの無水ピリジンに取り、これに５℃
で所望のアシル化合物の酸クロリド（たとえばパルミト
イルクロイド，アセチルクロリド等）3.1モル当量を加
える。混合物を室温に一夜保持したのち、氷水に加え、
上述の場合と同様に後処理する（Nishizawaら:Biochem.
Pharmacol.,14:1604,1965から適用）。

例VI:5−アシルウリジンの製造 無水ピリジン20mlにウリジン1gを溶解し、これに室温
で所望のアシル化合物の酸無水物1.0モル当量を加え
る。反応混合物をついで80〜85℃に２時間加熱し、冷却
し、氷水中に注ぎ、等容のクロロホルムで３回抽出して
エステルを回収する。次にクロロホルムを0.01N硫酸、
１％炭酸水素ナトリウム、最後に水で洗浄する。硫酸ナ
トリウムで乾燥したのち、クロロホムルを蒸発させ、残
つた油状物または結晶をクロマトグラフイーに付す。ク
ロマトグラフイーで単離される主生成物は５′−置換エ
ステルである（Nishizawaら:Biochem.Pharmacol.,14:16
05,1965から適用）。

別法として、ウリジンの選択形５′−アシル化は、1g
のウリジンを氷浴中で０℃に冷却した1:1ピリジン:N,N
−ジメチルホルムアミド30mlに懸濁して実施する。所望
のアシル化合物の酸クロリド1.0モル当量を混合物に滴
加し、０℃で12〜24時間攪拌する。水3mlを加え、つい
で溶媒を真空中、50℃で蒸発させる。残留物をメタノー
ルに溶解し、約3gのシリカゲル上に吸着させ、過剰の溶
媒を留去する。トルエンを固体塊から３回蒸発させ、す
べてを、クロロホルム中シリカゲルの３×15cmスラリー
充填カラム上に負荷し、クロロホルム（200ml）から20:
80メタノール：クロロホルム（200ml）の直線勾配で溶
出させる。適当な分画をTLCで確認して集め、溶媒を蒸
発させると所望の生成物が得られ、これを再結晶するか
または真空中でガラス状に乾燥する（Bakerら:J.Med.Ch
em.,21:1218,1978から適用）。

例VII:2′,3′−ジアシルウリジンの製造 ウリジン1gを乾燥N,N−ジメチルホルムアミド20mlに
懸濁し、攪拌しながら、これに2.4モル当量のイミダゾ
ール、ついて1.2モル当量のｔ−ブチルジメチルクロロ
シランを加える。混合物を、湿気から保護して室温で20
時間攪拌し、ついで真空中50℃で溶媒を除去する。残留
物を酢酸エチル15mlに溶解し、この溶液を水10mlで洗浄
し、抽出液を硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させると
シロツプが得られる。10mlの熱クロロホルム溶液に白懸
点までヘキサンを加え、ついで徐々に室温まで冷却させ
ると、５′−（ｔ−ブチルジメチルシリル）ウリジンが
得られる。

５′−（ｔ−ブチルジメチルシリル）ウリジン1gを０
℃に冷却した乾燥ピリジン15mlに懸濁し、攪拌しながら
所望のアシル化合物の適当な酸無水物2.1モル当量を加
え、混合物を湿気からの保護下に０〜５℃で20時間攪拌
する。ついで数mlの水を加えて反応を終結させる。溶媒
を蒸発させ、残留物をクロロホルム15mlに溶解し、２×
15mlの飽和炭酸水素ナトリウム、ついで水で洗浄し、乾
燥し（硫酸マグネシウム）、蒸発させると濃厚、澄明な
シロツプが得られる。これを真空中、250℃で乾燥す
る。

上記アシル化生成物の乾燥テトラヒドロフラン30ml中
溶液を攪拌しながら、これに氷酢酸2ml、ついでテトラ
ブチルアンモニウムフルオリド1.5〜2.3gを加え、反応
はTLCでモニターする（9:1クロロホルム：メタノー
ル）。アシル化ウリジン誘導体の５′ヒドロキシル基か
らｔ−ブチルジメチルシリル基が完全に除去されたら
ば、混合物を30gのシリカゲル層を通して濾過してフル
オリドを除き、生成物はテトラヒドロフランで溶出す
る。溶媒を蒸発させて得られた粗生成物をアセトンから
再結晶すると、所望の２′,3′−ジアシルウリジン誘導
体が得られる（Bakerら:J.Med.Chem.,22:273,1979から
適用）。

例VIII:N³,2′,3′,5′−テトラアシルウリジンの製造 ピリシジン環の３位置の２級アミンのアシル化は、
２′,3′,5′−トリ−Ｏ−アシルウリジンを、非プロト
ン性溶媒（たとえばエーテル、ジオキサン、クロロホル
ム、酢酸エチル、アセトニトリル、ピリジン、ジメチル
ホルムアミド等）中、１〜５モル当量の有機塩基（とく
にピリジンのような芳香族アミン、トリアルキルアミ
ン、またはN,N−ジアルキルアニリン）の存在下、所望
のアシル置換基のクロリド1,1モル当量と反応させるこ
とによつて達成される（Fujiiら：米国特許第4,425,335
号から適用）。二級アミン上のアシル置換基はリボース
残基のヒドロキシル基上の置換基と同種でも異種でもよ
い。

例IX:2′,3′,5′−Ｏ−アシルシチジンの製造 シチジン塩酸塩1gをN,N−ジメチルホルムアミド10ml
に溶解する。酸クロリド3.1モル当量を加え、混合物を
室温で一夜攪拌する。反応混合物を真空中で油状に濃縮
し、1:1酢酸エチル：ジエチルエーテルと磨砕する。つ
いで油状物を1N炭酸水素ナトリウムと磨砕する。結晶性
の固体を集め、水洗し、乾燥し、再結晶する（Gishら:
J.Med.Chem.,14:1159,1971から適用）。

例X:5′−アシルシチジンの製造 シチジン塩酸塩1gをN,N−ジメチルホルムアミド10ml
に溶解する。所望のアシル置換基の酸クロリド1.1モル
当量を加え、混合物を室温で一夜攪拌する。反応混合物
を真空中で油状に濃縮し、1:1酢酸エチル：ジエチルエ
ーテルと磨砕する。ついで油状物を1N炭酸水素ナトリウ
ムを磨砕する。結晶性の固体を集め、水洗し、乾燥し、
再結晶する（Gishら:J.Med.Chem.,14:1159,1971から適
用） 例XI:N⁴−アシルシチジンの製造 シチジンのN⁴−アミノ基は、シチジンのアミノおよび
ヒドロキシル官能基中で最も求核性である。選択的なN⁴
−アシル化は、シチジンをピリジンまたはピリジンとN,
N−ジメチルホルムアミド中適当な酸無水物で処理する
ことによつて達成できる。たとえば、シチジン1gを80ml
の乾燥ピリジンに懸濁し、所望の酸無水物1.5モル当量
を加え、混合物を２時間還流する。溶媒を真空中で除去
し、得られた白色の固体をエタノールから再結晶する。

別法として、シチジン（1g）を7:30のピリジン:N,N−
ジメチルホルムアミドの混合物に溶解し、所望のアシル
置換基の酸無水物1.5モル当量を加え、混合物を室温で
一夜攪拌し、ついで氷水中に注ぎ、攪拌する。溶媒を真
空中で蒸発させると白色の固体が残り、これをジエチル
エーテルで抽出する。残留物をエタノールから再結晶す
る（Sasakiら:Chem.Pharm.Bull.,15:894,1967から適
用）。

別の操作では、シチジンを水と水混和性溶媒（たとえ
ば、ジオキサン、アセトン、アセトニトリル、N,N−ジ
メチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、テトラヒ
ドロフラン等）の混合物に溶解し、この溶液を約２倍過
剰の適当な酸無水物で処理する。たとえば、シチジン1g
を水5mlに溶解し、ジオキサン15〜100mlと混合する（親
油性置換基ほど多量のジオキサンが必要）。そして所望
のアシル置換基の酸無水物２モル当量を加える。混合物
を80℃で５時間（または室温で48時間）攪拌し、ついで
溶媒を真空中で除去する残留物をヘキサンまたはベンゼ
ンで洗浄し、エタノールまたは酢酸エチルから再結晶す
る（Akiyamaら:Chem.Pharm.Bull.,26:981,1978から適
用）。

例XII:N⁴,2′,3′,5′−テトラアシルシチジンの製造 シチジンのN⁴アミノ基およびリボース環のヒドロキシ
ル基のアシル置換基が同一の化合物（たとえばテトラア
セチルシチジン）は、シチジンを乾燥ピリジンに溶解ま
たは懸濁し、所望の置換基の酸クロリドまたは酸無水物
少なくとも４モル当量を加え、混合物を一夜室温で攪拌
する。溶媒を真空中で除去し、残留物を洗浄し、再結晶
する。

以上、本発明を詳細に説明したが、本技術分野の熟練
者によれば、本発明またはその任意の実施態様から逸脱
することなく、本発明を、組成物、状態、投与方法につ
いて広範囲の均等なパラメーターの中で実施できるもの
である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 バマット，マイクル ケビン アメリカ合衆国20815 メリーランド州, シェビイ チェイス，ウエスタン アベ ニュー 6516 (56)参考文献 特開 昭58−140098（ＪＰ，Ａ) 米国特許3585188（ＵＳ，Ａ)

Claims (10)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】低下した心筋機能を回復させるための医薬
   組成物であって、 式（II） （式中、R₁、R₂およびR₃は同種または異種であって、そ
   れぞれ水素または、炭素原子２〜５個を有する直鎖脂肪
   酸のアシル基である、ただし、上記置換基R₁、R₂および
   R₃の少なくとも１つは水素ではない）を有するウリジン
   のアシル誘導体、またはその医薬的に許容される塩と、
   医薬的に許容される担体とを含有する、医薬組成物。
2. 【請求項２】低下した心筋機能を回復させるための医薬
   組成物であって、 式（Ｉ） （式中、R₁、R₂およびR₃は同種または異種であって、そ
   れぞれ水素または代謝物のアシル基であり、そしてR₄は
   代謝物のアシル基であり、該代謝物のアシル基は、炭素
   原子２〜５個を有する脂肪酸のアシル基である）を有す
   るウリジンのアシル誘導体、またはその医薬的に許容さ
   れる塩と、医薬的に許容される担体とを含有する、医薬
   組成物。
3. 【請求項３】肝傷害を処置するための医薬組成物であっ
   て、 式（II） （式中、R₁、R₂およびR₃は同種または異種であって、そ
   れぞれ水素または、炭素原子２〜５個を有する直鎖脂肪
   酸のアシル基である、ただし、上記置換基R₁、R₂および
   R₃の少なくとも１つは水素ではない）を有するウリジン
   のアシル誘導体、またはその医薬的に許容される塩と、
   医薬的に許容される担体とを含有する、医薬組成物。
4. 【請求項４】肝傷害を処置するための医薬組成物であっ
   て、 式（Ｉ） （式中、R₁、R₂およびR₃は同種または異種であって、そ
   れぞれ水素または代謝物のアシル基であり、そしてR₄は
   代謝物のアシル基であり、該代謝物のアシル基は、炭素
   原子２〜５個を有する脂肪酸のアシル基である）を有す
   るウリジンのアシル誘導体、またはその医薬的に許容さ
   れる塩と、医薬的に許容される担体とを含有する、医薬
   組成物。
5. 【請求項５】ウリジン10−3000mgに相当する量のアシル
   誘導体を含有する、請求項１〜４のいずれか一つに記載
   の組成物の単位用量剤型。
6. 【請求項６】低下した心筋機能を回復させるための医薬
   組成物であって、活性成分として、式（Ｉ） （式中、R₁、R₂、R₃およびR₄は同種または異種であっ
   て、それぞれ水素または代謝物のアシル基であり、該代
   謝物のアシル基は、炭素原子２〜５個を有する脂肪酸の
   アシル基である、ただし、R₁、R₂、R₃およびR₄の少なく
   とも１つは水素ではない）を有する、少なくとも１種の
   ウリジンのアシル誘導体、またはその医薬的に許容され
   る塩を含有する、医薬組成物。
7. 【請求項７】肝傷害を処置するための医薬組成物であっ
   て、活性成分として、式（Ｉ） （式中、R₁、R₂、R₃およびR₄は同種または異種であっ
   て、それぞれ水素または代謝物のアシル基であり、該代
   謝物のアシル基は、炭素原子２〜５個を有する脂肪酸の
   アシル基である、ただし、R₁、R₂、R₃およびR₄の少なく
   とも１つは水素ではない）を有する、少なくとも１種の
   ウリジンのアシル誘導体、またはその医薬的に許容され
   る塩を含有する、医薬組成成物。
8. 【請求項８】ウリジンのアシル誘導体が、２′,3′,5′
   −トリ−Ｏ−アセチルウリジン、２′,3′,5′−トリ−
   Ｏ−プロピオニルウリジンまたは２′,3′,5′−トリ−
   Ｏ−ブチリルウリジンである、請求項６または７に記載
   の組成物。
9. 【請求項９】ウリジン10−3000mgに相当する量のアシル
   誘導体を含有する、請求項６または７に記載の組成物の
   単位用量剤型。
10. 【請求項１０】R₁、R₂およびR₃は水素またはアセチルで
    あり、ただしR₁、R₂およびR₃の少なくとも１つは水素で
    はない、請求項１または３に記載の組成物。