JP2018515085A5

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Publication number: JP2018515085A5
Application number: JP2017557310A
Authority: JP
Filing date: 2016-05-04
Publication date: 2019-06-06
Anticipated expiration: 2036-05-04

Description

本明細書において開示する融合ポリペプチドの「サブユニット」は、当該ポリペプチドのうちの一続きのアミノ酸であって、その一続きが、該ポリペプチドのユニークな機能単位を規定しているもの、例えば標的に対する結合モチーフを与えるものと定義される。
[本発明1001]
CD137にもHer2にも結合する能力を有する融合ポリペプチドであって、少なくとも2つのサブユニットを任意の順序で含み、第1サブユニットは完全長免疫グロブリンまたはその抗原結合ドメインを含み、この第1結合ドメインはHER2に対する結合特異性を有し、かつ第2サブユニットはCD137に対する結合特異性を有するリポカリンムテインを含む、融合ポリペプチド。
[本発明1002]
融合ポリペプチドに含まれるCD137に特異的なリポカリンムテインと融合ポリペプチドとを本質的に実施例3に記載するようにELISAアッセイにおいて測定した場合に、融合ポリペプチドに含まれるCD137に特異的なリポカリンムテインのEC50値と、少なくともほぼ同じかそれより優れたEC50値で、CD137に結合する能力を有する、本発明1001の融合ポリペプチド。
[本発明1003]
本質的に実施例3に記載するようにELISAアッセイにおいて測定した場合に、少なくとも約1nMのEC50値でCD137に結合する能力を有する、本発明1001の融合ポリペプチド。
[本発明1004]
融合ポリペプチドに含まれるHER2/neuに特異的な免疫グロブリンと融合ポリペプチドとを本質的に実施例2に記載するようにELISAアッセイにおいて測定した場合に、当該融合ポリペプチドに含まれるHER2/neuに特異的な免疫グロブリンのEC50値に匹敵するEC50値で、HER2/neuに結合する能力を有する、本発明1001の融合ポリペプチド。
[本発明1005]
本質的に実施例2に記載するようにELISAアッセイにおいて測定した場合に、少なくとも約1nMのEC50値でHER2/neuに結合する能力を有する、本発明1001の融合ポリペプチド。
[本発明1006]
本質的に実施例4に記載するELISAアッセイにおいて測定した場合に、CD137およびHER2/neuに同時に結合する能力を有する、本発明1001の融合ポリペプチド。
[本発明1007]
本質的に実施例4に記載するELISAアッセイにおいて測定した場合に、少なくとも約4nMのEC50値でCD137およびHER2/neuに同時に結合する能力を有する、本発明1001の融合ポリペプチド。
[本発明1008]
本質的に実施例5に記載する機能的T細胞活性化アッセイにおいてT細胞応答を共刺激する能力を有する、本発明1001の融合ポリペプチド。
[本発明1009]
本質的に実施例5に記載する機能的T細胞活性化アッセイにおいて、IL-2分泌およびT細胞増殖を誘発することができる、本発明1001の融合ポリペプチド。
[本発明1010]
本質的に実施例5に記載する機能的T細胞活性化アッセイにおいて、T細胞活性化の成功をもたらす、本発明1001の融合ポリペプチド。
[本発明1011]
前記ムテインが、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（SEQ ID NO:18）の配列位置5、26〜31、33〜34、42、46、52、56、58、60〜61、65、71、85、94、101、104〜106、108、111、114、121、133、148、150および153に少なくとも1つの変異アミノ酸残基を含む、本発明1001〜1010のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1012]
前記ムテインのアミノ酸配列が、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（SEQ ID NO:18）との比較において以下の変異アミノ酸残基:

のうちの少なくとも1つを含む、本発明1011の融合ポリペプチド。
[本発明1013]
前記ムテインのアミノ酸配列が以下の組のアミノ酸置換:

のうちの1つを含む、本発明1011〜1012のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1014]
前記ムテインのアミノ酸配列が、SEQ ID NO:32〜38からなる群またはそのフラグメントもしくは変異体からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、本発明1011〜1013のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1015]
前記ムテインのアミノ酸配列が、SEQ ID NO:32〜38からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも85％の配列同一性を有する、本発明1011〜1013のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1016]
前記ムテインが、成熟hNGALの直鎖ポリペプチド配列（SEQ ID NO:17）の配列位置28、36、40〜41、49、52、65、68、70、72〜73、77、79、81、83、87、94、96、100、103、106、125、127、132および134に少なくとも1つの変異アミノ酸残基を含む、本発明1001〜1010のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1017]
前記ムテインのアミノ酸配列が、成熟hNGALの直鎖ポリペプチド配列（SEQ ID NO:17）との比較において、以下の変異アミノ酸残基:

のうちの少なくとも1つを含む、本発明1016の融合ポリペプチド。
[本発明1018]
前記ムテインのアミノ酸配列が、以下の組のアミノ酸置換:

のうちの1つを含む、本発明1016〜1017のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1019]
前記ムテインのアミノ酸配列が、SEQ ID NO:2および39〜46からなる群またはそのフラグメントもしくは変異体からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、本発明1016〜1018のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1020]
前記ムテインのアミノ酸配列が、SEQ ID NO:2および39〜46からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも85％の配列同一性を有する、本発明1016〜1018のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1021]
1つのサブユニットが、本質的に図1に記載するように、ペプチド結合を介して別のサブユニットに連結されうる、本発明1001〜1020のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1022]
第1サブユニットと第2結合ドメインとが、第2サブユニットのリポカリンムテインのN末と第1サブユニットの免疫グロブリンの重鎖定常領域（CH）のC末との間のペプチド結合を介して連結されている、本発明1001〜1020のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1023]
第3サブユニットが、第3サブユニットのリポカリンムテインのN末と第1サブユニットの免疫グロブリンの軽鎖定常領域（CL）のC末との間でペプチド結合を介して第1サブユニットに連結されている、本発明1001〜1020のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1024]
ペプチド結合が、構造化されていない（G4S）3リンカーである、本発明1021〜1023のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1025]
SEQ ID NO:19に示すアミノ酸を含む、本発明1001〜1024のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1026]
リポカリンムテインがSEQ ID NO:2に示すアミノ酸を含む、本発明1001〜1025のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1027]
免疫グロブリンがモノクローナル抗体である、本発明1001〜1025のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1028]
モノクローナル抗体がトラスツズマブまたはペルツズマブである、本発明1001〜1025のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1029]
モノクローナル抗体がSEQ ID NO:3および4によって与えられる重鎖および軽鎖を有する、本発明1001〜1025のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1030]
モノクローナル抗体がIgG4バックボーンを有する、本発明1001〜1025のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1031]
IgG4バックボーンが、S228P、N297A、F234A、およびL235Aからなる群より選択される突然変異のうちのいずれか1つを有する、本発明1030の融合ポリペプチド。
[本発明1032]
SEQ ID NO:5および6に示すアミノ酸、SEQ ID NO:7および8に示すアミノ酸、またはSEQ ID NO:9および10に示すアミノ酸、またはSEQ ID NO:11および12に示すアミノ酸、またはSEQ ID NO:13および14に示すアミノ酸、またはSEQ ID NO:15および16に示すアミノ酸を含む、本発明1001〜1010のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1033]
本発明1001〜1032のいずれかのポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
[本発明1034]
核酸分子の発現を可能にする制御配列に機能的に連結されている、本発明1033の核酸分子。
[本発明1035]
ベクター中またはファージミドベクター中に含まれている、本発明1033または1034の核酸分子。
[本発明1036]
本発明1034〜1035のいずれかの核酸分子を含有する宿主細胞。
[本発明1037]
本発明1001〜1232のいずれかの融合ポリペプチドを生産する方法であって、融合ポリペプチドが、ムテインをコードする核酸から出発して、遺伝子工学的方法を使って生産される、方法。
[本発明1038]
融合ポリペプチドが細菌宿主細胞または真核宿主細胞中で生産され、かつ、この宿主生物またはその培養物から単離される、本発明1037の方法。
[本発明1039]
CD137の下流シグナリング経路を活性化し、同時にHER2/neu陽性腫瘍細胞に会合（engage）するための、本発明1001〜1032のいずれかの融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物の使用。
[本発明1040]
CD137の下流シグナリング経路を活性化し、同時にHER2/neu陽性腫瘍細胞に会合するための、本発明1001〜1032のいずれかの融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物の使用。
[本発明1041]
CD137の下流シグナリング経路を活性化し、同時にHER2/neu陽性腫瘍細胞に会合する方法であって、本発明1001〜1032のいずれかの融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物を適用する工程を含む、方法。
[本発明1042]
T細胞を共刺激し、同時にHER2/neu陽性腫瘍細胞に会合する方法であって、本発明1001〜1032のいずれかの融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物を適用する工程を含む、方法。
[本発明1043]
Tリンパ球増殖を誘発し、同時にHER2/neu陽性腫瘍細胞に会合する方法であって、本発明1001〜1032のいずれかの融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物を適用する工程を含む、方法。
[本発明1044]
T細胞でのCD137クラスター化および活性化をHER2/neu陽性腫瘍細胞へ方向づける方法であって、本発明1001〜1032のいずれかの融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物を適用する工程を含む、方法。
[本発明1045]
HER2/neu陽性腫瘍細胞の近傍において局所的T細胞応答を誘発する方法であって、本発明1001〜1032のいずれかの融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物を適用する工程を含む、方法。
[本発明1046]
HER2/neu陽性腫瘍細胞の近傍において局所的NK細胞応答を誘発する方法であって、本発明1001〜1032のいずれかの融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物を適用する工程を含む、方法。
[本発明1047]
HER2/neu陽性腫瘍細胞の近傍においてT細胞によるIL-2および/またはIFNガンマの生産を誘発する方法であって、本発明1001〜1032のいずれかの融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物を適用する工程を含む、方法。

Claims

CD137にもHer2/neuにも結合する能力を有する融合ポリペプチドであって、少なくとも2つのサブユニットを任意の順序で含み、第1サブユニットは完全長免疫グロブリンまたはその抗原結合ドメインを含み、この第1結合ドメインはHER2/neuに対する結合特異性を有し、かつ第2サブユニットはCD137に対する結合特異性を有するリポカリンムテインを含む、融合ポリペプチド。
約4nM以下のEC50値でCD137およびHER2/neuに同時に結合する能力を有する、請求項1記載の融合ポリペプチド。
T細胞応答を共刺激する能力を有し、かつ/またはT細胞増殖を誘発する能力を有する、請求項1または2記載の融合ポリペプチド。
前記ムテインが、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（SEQ ID NO:18）の配列位置5、26〜31、33〜34、42、46、52、56、58、60〜61、65、71、85、94、101、104〜106、108、111、114、121、133、148、150および153に少なくとも1つの変異アミノ酸残基を含む、請求項1〜3のいずれか一項記載の融合ポリペプチド。
前記リポカリンムテインのアミノ酸配列が、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（SEQ ID NO:18）との比較において以下の変異アミノ酸残基:
Ala 5 → ValまたはThr, Arg 26 → Glu, Glu 27 → Gly, Phe 28 → Cys, Pro 29 → Arg, Glu 30 → Pro, Met 31 → Trp, Leu 33 → Ile, Glu 34 → Phe, Thr 42 → Ser, Gly 46 → Asp, Lys 52 → Glu, Leu 56 → Ala, Ser 58 → Asp, Arg 60 → Pro, Cys 61 → Ala, Lys 65 → ArgまたはAsn, Thr 71 → Ala, Val 85 → Asp, Lys 94 → ArgまたはGlu, Cys 101 → Ser, Glu 104 → Val, Leu 105 → Cys, His 106 → Asp, Lys 108 → Ser, Arg 111 → Pro, Lys 114 → Trp, Lys 121 → Glu, Ala 133 → Thr, Arg 148 → Ser, Ser 150 → IleおよびCys 153 → Ser
のうちの少なくとも1つを含む、請求項4記載の融合ポリペプチド。
前記ムテインのアミノ酸配列が、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（SEQ ID NO:18）との比較において、以下の変異アミノ酸残基の組:
(a)Arg 26 → Glu, Glu 27 → Gly, Phe 28 → Cys, Pro 29 → Arg, Glu 30 → Pro, Met 31 → Trp, Leu 33 → Ile, Glu 34 → Phe, Leu 56 → Ala, Ser 58 → Asp, Arg 60 → Pro, Cys 61 → Ala, Cys 101 → Ser, Glu 104 → Val, Leu 105 → Cys, His 106 → Asp, Lys 108 → Ser, Arg 111 → Pro, Lys 114 → Trpおよび Cys 153 → Ser;
(b)Ala 5 → Thr, Arg 26 → Glu, Glu 27 → Gly, Phe 28 → Cys, Pro 29 → Arg, Glu 30 → Pro, Met 31 → Trp, Leu 33 → Ile, Glu 34 → Phe, Leu 56 → Ala, Ser 58 → Asp, Arg 60 → Pro, Cys 61 → Ala, Lys 65 → Arg, Val 85 → Asp, Cys 101 → Ser, Glu 104 → Val, Leu 105 → Cys, His 106 → Asp, Lys 108 → Ser, Arg 111 → Pro, Lys 114 → Trp, Lys 121 → Glu, Ala 133 → ThrおよびCys 153 → Ser;
(c)Arg 26 → Glu, Glu 27 → Gly, Phe 28 → Cys, Pro 29 → Arg, Glu 30 → Pro, Met 31 → Trp, Leu 33 → Ile, Glu 34 → Phe, Leu 56 → Ala, Ser 58 → Asp, Arg 60 → Pro, Cys 61 → Ala, Lys 65 → Asn, Lys 94 → Arg, Cys 101 → Ser, Glu 104 → Val, Leu 105 → Cys, His 106 → Asp, Lys 108 → Ser, Arg 111 → Pro, Lys 114 → Trp, Lys 121 → Glu, Ala 133 → Thrおよび Cys 153 → Ser;
(d)Ala 5 → Val, Arg 26 → Glu, Glu 27 → Gly, Phe 28 → Cys, Pro 29 → Arg, Glu 30 → Pro, Met 31 → Trp, Leu 33 → Ile, Glu 34 → Phe, Leu 56 → Ala, Ser 58 → Asp, Arg 60 → Pro, Cys 61 → Ala, Lys 65 → Arg, Lys 94 → Glu, Cys 101 → Ser, Glu 104 → Val, Leu 105 → Cys, His 106 → Asp, Lys 108 → Ser, Arg 111 → Pro, Lys 114 → Trp, Lys 121 → Glu, Ala 133 → ThrおよびCys 153 → Ser;
(e)Arg 26 → Glu, Glu 27 → Gly, Phe 28 → Cys, Pro 29 → Arg, Glu 30 → Pro, Met 31 → Trp, Leu 33 → Ile, Glu 34 → Phe, Thr 42 → Ser, Leu 56 → Ala, Ser 58 → Asp, Arg 60 → Pro, Cys 61 → Ala, Cys 101 → Ser, Glu 104 → Val, Leu 105 → Cys, His 106 → Asp, Lys 108 → Ser, Arg 111 → Pro, Lys 114 → Trp, Ser 150 → IleおよびCys 153 → Ser;
(f)Arg 26 → Glu, Glu 27 → Gly, Phe 28 → Cys, Pro 29 → Arg, Glu 30 → Pro, Met 31 → Trp, Leu 33 → Ile, Glu 34 → Phe, Lys 52 → Glu, Leu 56 → Ala, Ser 58 → Asp, Arg 60 → Pro, Cys 61 → Ala, Thr 71 → Ala, Cys 101 → Ser, Glu 104 → Val, Leu 105 → Cys, His 106 → Asp, Lys 108 → Ser, Arg 111 → Pro, Lys 114 → Trp, Ala 133 → Thr, Arg 148 → Ser, Ser 150 → IleおよびCys 153 → Ser; または
(g)Ala 5 → Thr, Arg 26 → Glu, Glu 27 → Gly, Phe 28 → Cys, Pro 29 → Arg, Glu 30 → Pro, Met 31 → Trp, Leu 33 → Ile, Glu 34 → Phe, Gly 46 → Asp, Leu 56 → Ala, Ser 58 → Asp, Arg 60 → Pro, Cys 61 → Ala, Thr 71 → Ala, Cys 101 → Ser, Glu 104 → Val, Leu 105 → Cys, His 106 → Asp, Lys 108 → Ser, Arg 111 → Pro, Lys 114 → Trp, Ser 150 → IleおよびCys 153 → Ser
のうちの1つを含む、請求項4または5記載の融合ポリペプチド。
前記リポカリンムテインのアミノ酸配列が、SEQ ID NO:32〜38からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも85％の配列同一性を有するか、または
SEQ ID NO:32〜38からなる群またはそのフラグメントもしくは変異体からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、
請求項4〜6のいずれか一項記載の融合ポリペプチド。
前記リポカリンムテインが、成熟ヒトリポカリン2(hNGAL)の直鎖ポリペプチド配列（SEQ ID NO:17）の配列位置28、36、40〜41、49、52、65、68、70、72〜73、77、79、81、83、87、94、96、100、103、106、125、127、132および134に少なくとも1つの変異アミノ酸残基を含む、請求項1〜3のいずれか一項記載の融合ポリペプチド。
前記リポカリンムテインのアミノ酸配列が、成熟hNGALの直鎖ポリペプチド配列（SEQ ID NO:17）との比較において、以下の変異アミノ酸残基:
Gln 28 → His, Leu 36 → Gln, Ala 40 → Ile, Ile 41 → ArgまたはLys, Gln 49 → Val, Ile, His, SerまたはAsn, Tyr 52 → Met, Asn 65 → Asp, Ser 68 → Met, AlaまたはGly, Leu 70 → Ala, Lys, SerまたはThr, Arg 72 → Asp, Lys 73 → Asp, Asp 77 → Met, Arg, ThrまたはAsn, Trp 79 → AlaまたはAsp, Arg 81 → Met, TrpまたはSer, Phe 83 → Leu, Cys 87 → Ser, Leu 94 → Phe, Asn 96 → Lys, Tyr 100 → Phe, Leu 103 → His, Tyr 106 → Ser, Lys 125 → Phe, Ser 127 → Phe, Tyr 132 → GluおよびLys 134 → Tyr
のうちの少なくとも1つを含む、請求項8記載の融合ポリペプチド。
前記リポカリンムテインのアミノ酸配列が、成熟hNGALの直鎖ポリペプチド配列（SEQ ID NO:17）との比較において、以下の変異アミノ酸残基の組:
(a)Gln 28 → His, Leu 36 → Gln, Ala 40 → Ile, Ile 41 → Lys, Gln 49 → Asn, Tyr 52 → Met, Ser 68 → Gly, Leu 70 → Thr, Arg 72 → Asp, Lys 73 → Asp, Asp 77 → Thr, Trp 79 → Ala, Arg 81 → Ser, Cys 87 → Ser, Asn 96 → Lys, Tyr 100 → Phe, Leu 103 → His, Tyr 106 → Ser, Lys 125 → Phe, Ser 127 → Phe, Tyr 132 → GluおよびLys 134 → Tyr;
(b)Gln 28 → His, Leu 36 → Gln, Ala 40 → Ile, Ile 41 → Arg, Gln 49 → Ile, Tyr 52 → Met, Asn 65 → Asp, Ser 68 → Met, Leu 70 → Lys, Arg 72 → Asp, Lys 73 → Asp, Asp 77 → Met, Trp 79 → Asp, Arg 81 → Trp, Cys 87 → Ser, Asn 96 → Lys, Tyr 100 → Phe, Leu 103 → His, Tyr 106 → Ser, Lys 125 → Phe, Ser 127 → Phe, Tyr 132 → GluおよびLys 134 → Tyr;
(c)Gln 28 → His, Leu 36 → Gln, Ala 40 → Ile, Ile 41 → Arg, Gln 49 → Asn, Tyr 52 → Met, Asn 65 → Asp, Ser 68 → Ala, Leu 70 → Ala, Arg 72 → Asp, Lys 73 → Asp, Asp 77 → Thr, Trp 79 → Asp, Arg 81 → Trp, Cys 87 → Ser, Asn 96 → Lys, Tyr 100 → Phe, Leu 103 → His, Tyr 106 → Ser, Lys 125 → Phe, Ser 127 → Phe, Tyr 132 → GluおよびLys 134 → Tyr;
(d)Gln 28 → His, Leu 36 → Gln, Ala 40 → Ile, Ile 41 → Lys, Gln 49 → Asn, Tyr 52 → Met, Asn 65 → Asp, Ser 68 → Ala, Leu 70 → Ala, Arg 72 → Asp, Lys 73 → Asp, Asp 77 → Thr, Trp 79 → Asp, Arg 81 → Trp, Cys 87 → Ser, Asn 96 → Lys, Tyr 100 → Phe, Leu 103 → His, Tyr 106 → Ser, Lys 125 → Phe, Ser 127 → Phe, Tyr 132 → GluおよびLys 134 → Tyr;
(e)Gln 28 → His, Leu 36 → Gln, Ala 40 → Ile, Ile 41 → Lys, Gln 49 → Ser, Tyr 52 → Met, Asn 65 → Asp, Ser 68 → Gly, Leu 70 → Ser, Arg 72 → Asp, Lys 73 → Asp, Asp 77 → Thr, Trp 79 → Ala, Arg 81 → Met, Cys 87 → Ser, Asn 96 → Lys, Tyr 100 → Phe, Leu 103 → His, Tyr 106 → Ser, Lys 125 → Phe, Ser 127 → Phe, Tyr 132 → GluおよびLys 134 → Tyr;
(f)Gln 28 → His, Leu 36 → Gln, Ala 40 → Ile, Ile 41 → Lys, Gln 49 → Val, Tyr 52 → Met, Asn 65 → Asp, Ser 68 → Gly, Leu 70 → Thr, Arg 72 → Asp, Lys 73 → Asp, Asp 77 → Arg, Trp 79 → Asp, Arg 81 → Ser, Cys 87 → Ser, Leu 94 → Phe, Asn 96 → Lys, Tyr 100 → Phe, Leu 103 → His, Tyr 106 → Ser, Lys 125 → Phe, Ser 127 → Phe, Tyr 132 → GluおよびLys 134 → Tyr;
(g)Gln 28 → His, Leu 36 → Gln, Ala 40 → Ile, Ile 41 → Arg, Gln 49 → His, Tyr 52 → Met, Asn 65 → Asp, Ser 68 → Gly, Leu 70 → Thr, Arg 72 → Asp, Lys 73 → Asp, Asp 77 → Thr, Trp 79 → Ala, Arg 81 → Ser, Cys 87 → Ser, Asn 96 → Lys, Tyr 100 → Phe, Leu 103 → His, Tyr 106 → Ser, Lys 125 → Phe, Ser 127 → Phe, Tyr 132 → GluおよびLys 134 → Tyr;
(h)Gln 28 → His, Leu 36 → Gln, Ala 40 → Ile, Ile 41 → Lys, Gln 49 → Asn, Tyr 52 → Met, Asn 65 → Asp, Ser 68 → Gly, Leu 70 → Thr, Arg 72 → Asp, Lys 73 → Asp, Asp 77 → Thr, Trp 79 → Ala, Arg 81 → Ser, Phe 83 → Leu, Cys 87 → Ser, Leu 94 → Phe, Asn 96 → Lys, Tyr 100 → Phe, Leu 103 → His, Tyr 106 → Ser, Lys 125 → Phe, Ser 127 → Phe, Tyr 132 → GluおよびLys 134 → Tyr;または
(i)Gln 28 → His, Leu 36 → Gln, Ala 40 → Ile, Ile 41 → Arg, Gln 49 → Ser, Tyr 52 → Met, Asn 65 → Asp, Ser 68 → Ala, Leu 70 → Thr, Arg 72 → Asp, Lys 73 → Asp, Asp 77 → Asn, Trp 79 → Ala, Arg 81 → Ser, Cys 87 → Ser, Asn 96 → Lys, Tyr 100 → Phe, Leu 103 → His, Tyr 106 → Ser, Lys 125 → Phe, Ser 127 → Phe, Tyr 132 → GluおよびLys 134 → Tyr
のうちの1つを含む、請求項8または9記載の融合ポリペプチド。
前記ムテインのアミノ酸配列が、SEQ ID NO:2および39〜46からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも85％の配列同一性を有するか、または
SEQ ID NO:2および39〜46からなる群またはそのフラグメントもしくは変異体からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、
請求項8〜10のいずれか一項記載の融合ポリペプチド。
第1サブユニットと第2サブユニットとが、第2サブユニットのリポカリンムテインのN末と第1サブユニットの免疫グロブリンの重鎖定常領域（CH）のC末との間のペプチドリンカーを介して連結されている、請求項1〜11のいずれか一項記載の融合ポリペプチド。
第3サブユニットが、第3サブユニットのリポカリンムテインのN末と第1サブユニットの免疫グロブリンの軽鎖定常領域（CL）のC末との間でペプチドリンカーを介して第1サブユニットに連結されている、請求項1〜12のいずれか一項記載の融合ポリペプチド。
SEQ ID NO:19に示すアミノ酸を含む、請求項1〜13のいずれか一項記載の融合ポリペプチド。
リポカリンムテインがSEQ ID NO:2に示すアミノ酸を含む、請求項1〜14のいずれか一項記載の融合ポリペプチド。
免疫グロブリンがトラスツズマブまたはペルツズマブである、請求項1〜14のいずれか一項記載の融合ポリペプチド。
免疫グロブリンがSEQ ID NO:3および4によって与えられる重鎖および軽鎖を有する、請求項1〜14のいずれか一項記載の融合ポリペプチド。
免疫グロブリンがIgG4バックボーンを有する、請求項1〜14のいずれか一項記載の融合ポリペプチド。
IgG4バックボーンが、S228P、N297A、F234A、およびL235Aからなる群より選択される突然変異のうちのいずれか1つを有する、請求項18記載の融合ポリペプチド。
SEQ ID NO:5および6に示すアミノ酸、SEQ ID NO:7および8に示すアミノ酸、またはSEQ ID NO:9および10に示すアミノ酸、またはSEQ ID NO:11および12に示すアミノ酸、またはSEQ ID NO:13および14に示すアミノ酸、またはSEQ ID NO:15および16に示すアミノ酸を含む、請求項1〜3のいずれか一項記載の融合ポリペプチド。
請求項1〜20のいずれか一項記載のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
請求項1〜20のいずれか一項記載の融合ポリペプチドを生産する方法であって、融合ポリペプチドが、ムテインをコードする核酸から出発して生産される、方法。
CD137の下流シグナリング経路を活性化し、同時にHER2/neu陽性腫瘍細胞に会合（engage）するのに使用するための、請求項1〜20のいずれか一項記載の融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物。
T細胞を共刺激し、同時にHER2/neu陽性腫瘍細胞に会合するのに使用するための、請求項1〜20のいずれか一項記載の融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物。
Tリンパ球増殖を誘発し、同時にHER2/neu陽性腫瘍細胞に会合するのに使用するための、請求項1〜20のいずれか一項記載の融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物。
CD137クラスター化誘発性の活性化T細胞をHER2/neu陽性腫瘍細胞へ方向づけるのに使用するための、請求項1〜20のいずれか一項記載の融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物。
HER2/neu陽性腫瘍細胞の近傍において局所的T細胞応答を誘発するのに使用するための、請求項1〜20のいずれか一項記載の融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物。
HER2/neu陽性腫瘍細胞の近傍において局所的NK細胞応答を誘発するのに使用するための、請求項1〜20のいずれか一項記載の融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物。
HER2/neu陽性腫瘍細胞の近傍においてT細胞によるIL-2および/またはIFNガンマの生産を誘発するのに使用するための、請求項1〜20のいずれか一項記載の融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物。
HER2/ner陽性がんの防止、回復、または治療に使用するための、請求項1〜20のいずれか一項記載の融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物。